KR20220019090A - 형광 이미지 분석 장치 - Google Patents

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Abstract

개시된 본 발명에 따른 형광 이미지 분석 장치는, 바닥벽과 복수의 측벽으로 둘러쌓인 챔버를 구비하며, 바닥벽에 피검사 생체 샘플이 놓여지는 본체(10)와, 상기 본체의 측벽의 적어도 한 군데에 지지되게 설치되어, 상기 피검사 생체 샘플에 광을 조사하는 제1광원(20)과, 상기 챔버의 바닥벽 하부에 설치되어, 상기 바닥벽에 놓여진 피검사 생체 샘플로 광을 조사하는 제2광원(20)과, 상기 본체의 상부에 설치되어, 상기 생체 샘플에서 반사된 광과 투과된 광 중 특정 파장을 통과시키는 복수의 필터를 구비하는 광학 필터부(40)와, 상기 광학 필터부를 통과한 이미지를 촬영하여 영상을 획득하되, 피검사 생체 샘플의 백색 배경의 실물 이미지와 복수의 형광 이미지들을 획득하는 카메라(50)와, 상기 피검사 생체 샘플에 따라 제1광원과 제2광원을 선택적으로 구동하도록 하고, 생체 샘플에 사용되는 형광 시약에 따라 상기 광원들과 광학 필터부의 필터를 매칭시키도록 하며, 또한 백색 배경의 실물 이미지와 형광 이미지를 획득하도록 카메라를 제어하는 제어부(60), 및 상기 카메라로부터 획득된 피검사 생체 샘플의 백색 배경의 실물 이미지와 복수의 형광 이미지들을 합성한 형광 합성 이미지를 생성하는 이미지 처리 및 분석부(70)를 포함한다.

Description

형광 이미지 분석 장치{Apparatus for analysis of fluorescence image}
본 발명은 형광 이미지 분석 장치에 관한 것으로써, 보다 상세하게는 형광(Fluorescence) 단백질 또는 물질이 표지된 실험대상의 이미지를 촬영하여 보존하고, 상기 형광 이미지를 처리 및 분석하는 장치에 관한 것이다.
바이오이미징(Bioimaging)은 질병의 진단 혹은 치료 기술 개발을 목적으로 꾸준히 꾸준히 연구되고 있는 기술분야로 지난 수십 년간의 기술적 진보를 거쳐 이미 임상 응용에서 광범위하게 활용되고 있다.
바이오이미징 기술 중 형광 이미지는 표적 세포, 조직, 또는 기관 내에서 여기광에 노출된 형광 물질이 방출하는 형광 신호(시그널)을 검출하여 영상화를 구현하는 기술이며, 주로 생쥐와 같은 실험 대상의 인비보(IN VIVO) 실험 분석에 널리 사용된다.
이러한 형광 이미지 분석 장치를 이용하여 종양 이미징(Tumor imaging), 줄기세포 또는 면역세포의 추적(Cell tracking), 식물 이미징(Plant imaging), 약물 이동 경로 파악(Drug delivery system) 등을 할 수 있다.
그런데, 종래의 형광 이미지 분석 장치는 부피가 크고 이동이 어려워 특정 실험장소나 연구실에만 설치되므로, 형광 이미지 분석을 위해서는 분석 장치가 설치된 특정 장소로 이동해야 하는 문제가 있다. 또한, 자가형광과 반사광으로 인해 형 이미지의 품질이 좋지 않아 분석에 어려은 문제점이 있다.
등록특허공보 제10-1699857호(2017.01.19. 등록)
본 발명은 상기와 같은 점을 감안하여 안출된 것으로써, 컴팩트한 구조를 가지며, 또한 좋은 품질의 형광 이미지를 제공할 수 있도록 하는 형광 이미지 분석 장치를 제공하는데 그 목적이 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명에 따른 형광 이미지 분석 장치는, 바닥벽과 복수의 측벽으로 둘러쌓인 챔버를 구비하며, 바닥벽에 피검사 생체 샘플이 놓여지는 본체; 상기 본체의 측벽의 적어도 한 군데에 지지되게 설치되어, 상기 피검사 생체 샘플에 광을 조사하는 제1광원; 상기 챔버의 바닥벽 하부에 설치되어,상기 바닥벽에 놓여진 피검사 생체 샘플로 광을 조사하는 제2광원; 상기 본체의 상부에 설치되어, 상기 생체 샘플에서 반사된 광과 투과된 광 중 특정 파장을 통과시키는 복수의 필터를 구비하는 광학 필터부; 상기 광학 필터부를 통과한 이미지를 촬영하여 영상을 획득하되, 피검사 생체 샘플의 백색 배경의 실물 이미지와 복수의 형광 이미지들을 획득하는 카메라; 상기 피검사 생체 샘플에 따라 제1광원과 제2광원을 선택적으로 구동하도록 하고, 생체 샘플에 사용되는 형광 시약에 따라 상기 광원들과 광학 필터부의 필터를 매칭시키도록 하며, 또한 백색 배경의 실물 이미지와 형광 이미지를 획득하도록 카메라를 제어하는 제어부; 및, 상기 카메라로부터 획득된 피검사 생체 샘플의 백색 배경의 실물 이미지와 복수의 형광 이미지들을 합성한 형광 합성 이미지를 생성하는 이미지 처리 및 분석부;를 포함한다.
상기 이미지 처리 및 분석부는, 상기 형광 이미지에서 아래의 수학식과 같이 형광의 보색(補色)을 만들고, 보색 적용된 형광 이미지와 백색 배경의 실물 이미지를 합성하여 상기 형광 합성 이미지를 생성한다.
[수학식]
Red = green - red + blue
Green = red - green + blue
Blue = red - blue + green
본 발명에 의하면 컴팩트한 사이즈와 간편한 구조를 통해 작은 공간에서도 설치되어 사용할 수 있으므며 휴대용으로도 사용될 수 있는 효과가 있다.
또한, 본 발명에 의하면 피검사 생체 샘플 하부에 별도의 투과 광원을 설치함으로써, 카메라가 보다 선명하고 정확한 형광 시그널을 얻을 수 있다. 또한, 백색 배경의 실물 이미지와 형광 이미지를 합성 시, 형광 이미지에서 형광의 보색을 만들고 이를 일반 사진과 합성함을써 보다 선명하고 자연스러운 형광 합성 이미지를 생성할 수 있는 효과가 있다.
도 1은 본 발명의 실시예에 따른 형광 이미지 분석 장치의 외관 구조를 나타낸 도면,
도 2는 본 발명의 실시예에 따른 형광 이미지 분석 장치의 블럭 구성도를 나타낸 도면,
도 3은 종래 기술에 의한 형광 합성 이미지를 나타낸 도면,
도 4는 본 발명에 의한 형광 합성 이미지를 나타낸 도면이다.
본 발명의 상기와 같은 목적, 특징 및 다른 장점들은 첨부도면을 참조하여 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명함으로써 더욱 명백해질 것이다. 이하 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 실시예에 따른 형광 이미지 분석 장치에 대해 상세히 설명하기로 한다.
도 1 은 본 발명의 실시예에 따른 형광 이미지 분석 장치의 외관 도면이고, 도 2는 본 발명의 실시예에 따른 형광 이미지 분석 장치의 블럭 구성도이다.
본 발명의 형광 이미지 분석 장치는 형광(Fluorescence) 단백질 또는 물질이 표지된 실험대상(이하 '피검사 생체 샘플')의 이미지를 촬영하여 보존하고, 이미지 분석 프로그램을 이용하여 이미지를 처리 및 분석하여 그 결과물을 출력한다.
도 1은 참조하면, 본체(10)는 바닥벽과 측벽으로 둘러쌓인 챔버를 구비하며, 또한 바닥벽에 피검사 생체 샘플(1)이 놓여진다. 즉 챔버는 바닥벽과 측벽으로 둘러싼 공간을 의미할 수 있으며, 챔버 내부에는 피검사 생체 샘플(1)이 높여지게 된다. 네 측벽 중 하나는 개폐할 수 있는 도어로 구현될 수 있다. 그리고, 피검사 생체 샘플(1)에는 형광단백질 또는 형광물질(2)이 표지된다.
제1광원(20)은 상기 측벽의 적어도 한 군데에 지지되게 설치되어, 상기 피검사 생체 샘플(1)에 광을 조사한다. 본 발명의 바람직한 실시예에 의하면 제1광원(20)은 양측벽에 각각 하나씩 설치될 수 있다. 제1광원(20)은 반사 조명일 수 있으며, 피검사 생체 샘플(1)에서 반사되어 나오는 형광 시그널을 촬영하기 위해 사용된다. 제1광원(20)은 도시된 바와 같이 측벽의 상부에 설치되어 사선 방향으로 위에서부터 아래로 피검사 생체 샘플(1)를 향해 광을 조사한다.
제2광원(30)은 바닥벽 하부에 설치되어, 상기 바닥벽에 놓여진 피검사 생체 샘플(1)로 광을 조사한다. 제2광원(30)은 투과 조명일 수 있다. 종래에는 상기 제1광원(20)만 설치되었는데, 이렇게 제1광원(20)에 의해서만 광을 조사하는 경우, 피검사 생체 샘플(1)에 조사된 광(여기광)이 카메라(50)로 반사되어 형광 시그날 영상을 취득하는데 방해를 준다. 따라서, 제2광원(30)에 의하여 광이 조사되는 경우, 광이 피검사 생체 샘플(1)을 투과하여 조사되므로 제1광원(20)과 같이 반사되는 빛이 없기 때문에 형광 시그날 영상을 취득하는데 방해가 되지 않아, 더욱 선명하고 정확한 형광 시그널을 얻을 수 있다. 광 세기는 광원과 샘플과의 거리의 제곱에 반비례 하므로, 도시된 바와 같이 제2광원(30)을 바닥벽 바로 하부에 설치하도록 하여 제2광원(30)과 피검사 생체 샘플(1)과의 거리를 최소화하도록 하는 것이 바람직하다.
제1광원(20)과 제2광원(30)은 제어부의 제어에 의해 선택적으로 조사될 수 있으며, 또한 제1광원(20)과 제2광원(30)은 적색(RED) LED, 녹색(GREEN) LED, 청색(BLUE) LED, 근적외선(NIR) LED 및 백색(WHITE) LED를 포함한다.
광학 필터부(40)는 상기 피검사 생체 샘플(1)에서 반사된 광과 투과된 광 중 특정 파장을 통과시키는 복수의 필터를 구비하며, 이 필터를 통과한 광이 카메라(50)에 의해 촬영되게 된다. 광학 필터부(40)는 도시되지 않았으나 복수의 필터가 일정 각도로 배치되며 모터의 구동에 의해 회전될 수 있다.
카메라(50)는 광학 필터부(40)의 필터를 통과한 이미지를 촬영하여 영상을 획득한다. 구체적으로 상기 카메라(50)는 피검사 생체 샘플의 백색 배경의 실물 이미지와 복수의 형광 이미지들을 획득하게 된다.
제어부(60)는 상기 피검사 생체 샘플(1)의 백색 배경의 실물 이미지와 형광 이미지들이 촬영되도록 상기 제1광원와 제2광원, 광학 필터부 및 카메라의 구동을 제어한다. 즉 제어부(60)는 목적에 따라 제1광원과 제2광원을 선택적으로 또는 같이 구동하도록 하고, 피검사 생체 샘플(1)에 사용되는 형광 시약의 중류에 따라 상기 광원들과 광학 필터부(40)의 필터를 매칭시키도록 하며, 또한 실물 이미지와 형광 이미지를 획득하도록 카메라를 제어한다.
이미지 처리 및 분석부(70)는 상기 카메라(50)로부터 획득된 백색 배경의 실물 이미지와 복수의 형광 이미지들을 합성하여 형광 합성 이미지를 생성하도록 처리하고, 상기 생성된 형광 합성 이미지를 디스플레이부로 송출하도록 한다. 상기 이미지 처리 및 분석부(70)는 상기 본체 내부에 설치될 수 있으나, 본체의 소형화를 위해 별도의 외부 기기(컴퓨터)에 탑재되는 프로그램으로 구현될 수 있다.
이미지 처리 및 분석부(70)가 외부 기기에 탑재되는 프로그램으로 구현되는 경우, 상기 제어부(60)와 이미지 처리 및 분석부(70)는 본체에 설치된 인터페이스(예를 들어 USB 단자 등)를 통해 유선으로 연결될 수 있다.
생체 영상 분석을 위해서는 상기 백색 배경의 실물 이미지와 형광 이미지가 합쳐진 형광 합성 이미지를 이용해야 하며, 따라서 이미지 처리 및 분석부(70)는 상기 형광 합성 이미지를 생성하게 되고, 사용자는 이러한 형광 합성 이미지를 보면서 어느 조직에서 어느 정도의 형광 시그널이 있는지 분석이 가능하게 된다.
그런데, 형광 이미지의 형광 시그널이 일정 세기 이상인 부분(픽셀)을 잘라서 백색 배경의 실물 이미지에 합성하는 경우 도 3과 같이 부자연스럽고 부정확한 이미지로 나타나게 된다.
본 발명에 의하면 상기 이미지 처리 및 분석부(70)는 형광 이미지에서 아래의 수학식 1과 같이 형광의 보색(補色)을 만들고, 보색 적용된 형광 이미지와 일반 사진을 합성하여 형광 합성 이미지를 생성한다.
Figure pat00001
Figure pat00002
Figure pat00003
도 4는 본 발명의 이미지 처리 및 분석부(70)에 의해 처리된 형광 합성 이미지를 나타낸 것인데, 도시된 바와 같이 선명하고 자연스러운 형광 합성 이미지가 생성됨을 알 수 있다.
이상에서 설명한 본 발명에 따른 형광 이미지 분석 장치는 아래와 같은 이점이 있다.
피검사 생체 샘플 하부에 별도의 투과 광원을 설치함으로써, 카메라가 보다 선명하고 정확한 형광 시그널을 얻을 수 있다. 또한, 백색 배경의 실물 이미지와 형광 이미지를 합성 시, 형광 이미지에서 형광의 보색을 만들고 이를 일반 사진과 합성함으로써 보다 선명하고 자연스러운 형광 합성 이미지를 생성할 수 있게 된다.
그리고, 컴팩트한 사이즈와 간편한 구조를 통해 작은 공간에서도 설치되어 사용할 수 있으며 휴대용으로도 사용될 수 있게 된다. 따라서 본 발명은 샘플의 크기가 작거나 소형인 것이 적용될 수 있다.
이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 설명하였으나 본 발명은 상술한 특정의 실시예에 한정되지 아니한다. 즉, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가지는 자라면 첨부된 특허청구범위의 사상 및 범주를 일탈함이 없이 본 발명에 대한 다수의 변경 및 수정이 가능하며, 그러한 모든 적절한 변경 및 수정의 균등물들도 본 발명의 범위에 속하는 것으로 간주되어야 할 것이다.
10. 본체 20. 제1광원
30. 제2광원 40. 광학 필터부
50. 카메라 60. 제어부
70. 이미지 처리 및 분석부

Claims (3)

  1. 바닥벽과 복수의 측벽으로 둘러쌓인 챔버를 구비하며, 바닥벽에 피검사 생체 샘플이 놓여지는 본체;
    상기 본체의 측벽의 적어도 한 군데에 지지되게 설치되어, 상기 피검사 생체 샘플에 광을 조사하는 제1광원;
    상기 챔버의 바닥벽 하부에 설치되어,상기 바닥벽에 놓여진 피검사 생체 샘플로 광을 조사하는 제2광원;
    상기 본체의 상부에 설치되어, 상기 생체 샘플에서 반사된 광과 투과된 광 중 특정 파장을 통과시키는 복수의 필터를 구비하는 광학 필터부;
    상기 광학 필터부를 통과한 이미지를 촬영하여 영상을 획득하되, 피검사 생체 샘플의 백색 배경의 실물 이미지와 복수의 형광 이미지들을 획득하는 카메라; 및,
    상기 피검사 생체 샘플에 따라 제1광원과 제2광원을 선택적으로 구동하도록 하고, 생체 샘플에 사용되는 형광 시약에 따라 상기 광원들과 광학 필터부의 필터를 매칭시키도록 하며, 또한 백색 배경의 실물 이미지와 형광 이미지를 획득하도록 카메라를 제어하는 제어부; 및,
    상기 카메라로부터 획득된 피검사 생체 샘플의 백색 배경의 실물 이미지와 복수의 형광 이미지들을 합성한 형광 합성 이미지를 생성하는 이미지 처리 및 분석부;를 포함하는 것을 특징으로 하는 형광 이미지 분석 장치.
  2. 제 1 항에 있어서,
    상기 이미지 처리 및 분석부는, 상기 형광 이미지에서 아래의 수학식과 같이 형광의 보색(補色)을 만들고, 보색 적용된 형광 이미지와 백색 배경의 실물 이미지를 합성하여 상기 형광 합성 이미지를 생성하는 것을 특징으로 하는 형광 이미지 분석 장치.
    [수학식 ]
    Red = green - red + blue
    Green = red - green + blue
    Blue = red - blue + green
  3. 제 1 항에 있어서,
    상기 본체의 복수의 측벽 중 하나는 개폐 가능한 도어로 구비될 수 있으며, 상기 도어가 폐쇄시 상기 본체의 챔버는 밀폐된 구조를 가지며,
    상기 이미지 처리 및 분석부는 상기 본체 이외의 외부 기기에 설치되며 상기 제어부와 유선 연결되는 것을 특징으로 하는 형광 이미지 분석 장치.
KR1020210096060A 2020-08-08 2021-07-21 형광 이미지 분석 장치 KR20220019090A (ko)

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* Cited by examiner, † Cited by third party
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