KR20220010491A - Hmox1 유도제 - Google Patents

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KR20220010491A
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아서 클루게
스지타 사스말
바라트 라구
신위안 우
타카시 오기야마
에릭 벨
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미토브리지, 인크.
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Abstract

본 발명은 헴 옥시게나아제 1(HMOX 1) 유도제로서의 구조 (I)의 화합물에 관한 것이다:
Figure pct00159
(I).
본 발명은 또한 포유류 대상에서 헴 옥시게나아제 1의 활성 또는 양, 또는 활성과 양 둘 모두를 제어하는 방법에 관한 것이다. 변수의 정의는 본원에 제공되어 있다.

Description

HMOX1 유도제
관련 출원의 교차 참조
본 출원은 2019년 4월 12일자 출원된 미국 가출원 제62/833,031호 및 2019년 11월 8일자 출원된 미국 가출원 제62/932,629호를 우선권 주장한다. 상기 언급된 출원의 전체 교시내용은 본원에 참조로서 인용된다.
기술분야
본 출원은 HMOX1(헴 옥시게나아제 1(heme oxygenase 1)) 유도제, 및 포유류 대상에서 헴 옥시게나아제의 활성 또는 양, 또는 활성과 양 둘 모두를 제어하는 것과 같은 이의 사용 방법에 관한 것이다.
산화스트레스(oxidative stress)는 활성산소종(ROS: reactive oxygen species) 생성과, ROS 종의 분해 및 내인성 항산화 분자의 생성과 같은 ROS에 대한 세포 반응 사이의 불균형을 나타낸다.
ROS는 중요한 세포 신호전달 요구를 충족시키지만, 과도하게 생성되거나 억제되지 않은 채로 두게 되면 유해한 영향을 미칠 수 있다. 세포 내 증가된 ROS 수준은 지질, 단백질, 다당류 및 DNA와 같은 구성요소에 손상을 야기할 수 있다. 장기적인 산화스트레스는 또한 거의 모든 주요 기관계에 영향을 미치는 만성 질환과 관련이 있다. 예를 들어, 장기적인 산화스트레스는 신경변성질환, 폐질환, 심혈관질환, 신장질환, 당뇨병, 염증성 통증 및 암과 같은 질환 상태의 발병 또는 진행과 관련이 있다. 따라서, 산화스트레스를 완화시키는 전략은 다수의 치료 환경에서 바람직하다.
정상적인 생리학적 조건 하에서, ROS의 생성은 ROS로 인한 손상에 반응하고, 이를 제한하고, 이를 복구하는 잘 정의되고 보존된 일련의 세포 경로에 의해 균형을 이룬다. 이러한 적응 유전자 세트는 II상 시스템으로 불린다. 이들은, ROS를 직접적으로 분해시킬뿐 아니라 글루타티온(glutathione)과 빌리루빈(bilirubin)을 포함하는 세포의 내인성 항산화 분자의 수준을 증가시키는 효소를 인코딩한다.
II상 효소 시스템 중에서, 효소 헴 옥시게나아제 1을 인코딩하는 인간 유전자인 HMOX1이 핵심 구성요소인 것으로 밝혀졌다. HMOX1의 역할은 2단계 과정을 통해 헴을 빌리루빈, 일산화탄소 및 유리 철로 대사시키는 것이다. 첫 번째 단계인 속도 결정 단계는 HMOX1에 의해 헴으로부터 빌리베르딘(biliverdin)과 일산화탄소를 생성하는 단계이다. 두 번째 단계는 빌리베르딘 리덕타아제에 의해 빌리베르딘으로부터 빌리루빈을 생성하는 단계이다. 빌리루빈과 일산화탄소는 모두 ROS를 소거하고, 강력한 항산화 및 항염증 활성을 나타내는 것으로 알려져 있다.
HMOX1의 생성을 유도하는 작용제는 당뇨병, 심혈관질환, 고혈압 및 폐 기능의 모델에서 유익한 활성을 나타내는 것으로 알려져 있다. 헴, 중금속 이온(예를 들어, 아비산염(arsenite), 카드뮴, 철, 납, 크롬 및 수은) 및 친전자체(예를 들어, 설포라판(sulforaphane) 및 커큐민(curcumin)과 같은 천연 생성물)는 모두 HMOX1의 생성을 유도할 수 있다. HMOX1 및 다른 II상 유전자의 유도는 중금속, 헴 및 친전자체에 대해 반응성이 있는 다수의 전사인자에 의해 제어된다. 전사인자 Nrf2, Bach1 및 소형 Maf 단백질이 이러한 과정에서 특히 중요하다. 예를 들어, II상 효소의 각 유전자의 프로모터에는 항산화 반응 요소(ARE: antioxidant responsive element)로 불리는 공통 서열이 존재하며, 이의 발현은 전사인자 Nrf2(NF-E2 관련 인자 2)에 의해 유도된다.
HMOX1은 또한 열충격, 산화스트레스 및 사이토카인(예컨대, 인터류킨-1(IL-1), 종양괴사인자 및 인터류킨-6(IL-6))과 같은 자극에 대한 일반화된 스트레스 반응의 일부로서 유도된다.이러한 스트레스 반응은 여러 자극으로부터 취약한 세포를 보호한다는 점에서 유익한 것으로 볼 수 있다.
HMOX1은 전사인자 Bach1에 결합하는 소분자에 의해 유도될 수 있다고 보고되어 있다. Bach1에 결합하는 헴은 Bach1의 DNA 결합 활성을 감소시키고, 유전자 전사를 유도하는 것으로 알려져 있다. 문헌[Ogawa K et al. EMBO J (2001) 20:2835-284] 참조. 또한, 소분자는 Bach1에의 결합을 통해 HMOX1을 유도하는 것으로 보고되어 있다. 문헌[Attucks OC et al. PLOS ONE (2014) 9(7): e101044], WO2011/103018 및 WO2012/094580 참조.
이와 같이, 상기 언급된 치료 적응증을 위한 신규한 HMOX1 유도제 및/또는 Bach 1 결합제/저해제가 필요하다.
본 출원인은 효과적인 HMOX1 유도제인 신규한 화합물을 발견하였다(실시예 1 내지 142 참조). 특히, 본 발명의 특정 화합물이 HMOX1의 생성을 효과적으로 유도한다는 것이 입증되었다(실시예 143 참조). 또한, 본 발명의 특정 화합물은, 강력한 HMOX1 유도 활성(실시예 143), 특정 비교 화합물에 비해 유의하게 감소된 hERG 저해(실시예 145 참조), 양호한 용해도(실시예 144) 및 생체내 HMOX1 단백질 발현에 대한 강력한 영향(실시예 151)을 포함하는 바람직한 특성의 조합을 갖는다. 나아가, 본 출원인은 또한 본원에 개시된 화합물이 Bach 1에 결합한다는 것을 발견하였다(실시예 146 참조).
하나의 구현예에서, 하기 구조식 (I)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염(여기서 각 변수의 정의는 하기에 제공되는 바와 같음)이 본원에 제공된다:
Figure pct00001
(I).
본 발명의 화합물의 약학적 조성물이 또한 본원에 개시된다. 특정 구현예는 약학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제와, 하나 이상의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함한다.
화학식 (I)의 화합물 및 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 HMOX1의 생성을 유도하고/하거나 이의 활성을 증가시키는 작용제로서 유용하기 때문에, 비제한적으로, 섬유증성 질환, 신경변성질환, 심혈관질환, 신장질환, 염증성질환, 간질환, 안질환, 갑상선질환, 바이러스성 감염, 골다공증, 임신성 장애, 자궁내막증, 당뇨병, 암, 피부질환, 미토콘드리아질환, 혈액학적 장애 및 근육질환을 포함하는, 산화스트레스와 적어도 부분적으로 관련이 있는 다양한 만성 질환을 치료하는 데 유용할 수 있다.
본 발명의 또 다른 구현예는 유효량의 하나 이상의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 본원에 개시된 화합물(들)을 포함하는 약학적 조성물을 대상에게 투여하여, 대상에서 상기 언급된 질환 또는 병태를 치료하는 것을 포함한다.
또한, 상기 언급된 질환 또는 병태의 치료를 위한 약제의 제조를 위한, 하나 이상의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 하나 이상의 본 발명의 화합물을 포함하는 약학적 조성물의 용도가 본원에 제공된다.
또 다른 구현예에서, 상기 언급된 질환 또는 병태를 치료하는 데 사용하기 위한, 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 본원에 개시된 화합물 중 하나 이상을 포함하는 약학적 조성물이 본원에 제공된다.
도 1a 및 도 1b는, 실시예 17의 화합물 또는 Nrf2 활성제 DMF로 처리된 HepG2 세포에서 유전자 특이적 mRNA의 유의한 배수 변화를 보여주는 그래프를 도시한 것이다. 도 1a는, 실시예 17의 화합물이 DMF보다 훨씬 더 강력하게 HMOX1 발현을 유도함을 도시한 것이다. 도 1b는, 실시예 17의 화합물과 DMF가 비슷한 배수 증가로 FTH1 발현을 유도함을 도시한 것이다.
도 2는, 실시예 17의 화합물 투여가 Townes-SS 낫적혈구 마우스에서 미세혈관 정체(stasis)를 반응성으로 저해함을 보여주는 그래프를 도시한 것이다. Townes-SS 마우스에게 8일 동안 비히클 또는 실시예 17의 화합물을 1일 1회 위관영양법으로 투여하였다. 마지막 위관영양법 후, 마우스에게 등쪽 피부 접힘 챔버(dorsal skin-fold chamber)를 이식하고, 20개 내지 22개의 흐르는 세정맥을 선택하고, 생체내 현미경법을 사용하여 피하 피부에 맵핑하였다. 이어서, 마우스에게 판헤마틴(Panhematin)(체중 1 kg당 3.2 μmol의 헴)을 꼬리 정맥을 통해 주입하였다. 주입 1시간 후, 각각의 세정맥을 미세혈관 정체(흐름 없음)에 대해 재검사하고, 데이터를 정체율(%)로 표시하였다. 정체율 값은 평균 + SD이다. 비히클에 대한 던넷 다중비교(Dunnett's Multiple comparison)를 이용한 일원분산분석(one-Way ANOVA) ****P<0.0001
도 3은, 실시예 17의 화합물로 처리된 Townes-SS 마우스에서의 F-세포 증가율(%)을 보여주는 그래프를 도시한 것이다. F-세포 염색을 위해 헤파린 처리된 전혈을 사용하여 혈액 도말을 만들었다. 염색된 F-세포와 총 적혈구를 혈액 도말 상의 4개의 영역에서 계수하였다; 평균 = 영역당 77개의 적혈구. F-세포를 총 적혈구 중의 백분율로 표시하였다. 값은 평균 + SD이다. 비히클에 대한 던넷 다중비교를 이용한 일원분산분석 **p ≤ 0.01, ***p ≤ 0.001, ****p ≤ 0.0001
도 4는, 1차 인간 내피세포에서의 글루타티온(GSH) 수준을 보여주는 그래프를 도시한 것이다. DMSO와 비교한 양방향 독립표본 t 검정(Two-Tailed Unpaired t test) #### p ≤ 0.0001, 헤민(Hemin)에 대한 던넷 다중비교를 이용한 일원분산분석(GSH 그래프) ****p ≤ 0.0001
도 5는, 1차 인간 내피세포에서의 유전자 발현의 배수 변화를 보여주는 그래프를 도시한 것이다. #### p ≤ 0.0001, TNFa에 대한 던넷 다중비교를 이용한 일원분산분석(VCAM 그래프) ****p ≤ 0.0001
상승된 활성산소종(ROS) 수준에 대한 반응으로, 세포는 ROS를 분해하거나 세포의 내인성 항산화 분자 수준을 증가시키는 단백질을 인코딩하는 유전자와 같은 산화스트레스 반응 유전자(oxidative stress-responsive gene)의 발현을 유도한다. 하나의 이러한 유전자는 HMOX1이다. HMOX1과 다른 산화스트레스 반응 유전자의 발현 유도는 전사인자 Nrf2에 의해 부분적으로 조절된다. 기본 조건 하에서, 어댑터 단백질(adaptor protein) Keap1은 Nrf2와 이종이량체를 형성하여, 단백질분해를 위해 Nrf2를 표적으로 하고 Nrf2 매개 전사를 억제한다. ROS를 상승시키는 화학적 친전자체 또는 작용제에 세포가 노출되면, Keap1과 Nrf2의 상호작용이 약화되고 세포 내 Nrf2 수준이 증가하여, 결국 핵 내 Nrf2 수준이 증가하고 산화스트레스 반응 유전자가 유도된다. Nrf2 활성은 또한 산화스트레스 반응 유전자의 프로모터 영역에의 Nrf2의 결합을 차단하는 전사 억제인자 Bach1에 의해 조절된다.
예를 들어, 질환 환경의 세포에서 산화스트레스의 영향을 완화시키기 위해서는, 산화스트레스 반응 유전자의 발현 유도를 촉진시키는 화합물, 예를 들어 Nrf2와 Keap1의 상호작용 또는 Bach1과 Maf 인식 요소(MARE: Maf recognition element)의 상호작용을 조절하여 세포보호 유전자 전사를 증가시키는 화합물을 식별하는 것이 바람직하다. 하지만, 이러한 화합물이 친전자체로서 작용하지 않거나 그렇지 않으면 세포에서 스트레스 반응을 일으키지 않는 것이 또한 바람직하다.
본 발명의 화합물
화학식 (I)의 일반 구조를 갖는 화합물의 구현예가 본원에 개시된다.
제1 구현예에서, 본 발명은 하기 구조식 (I)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00002
(I)
[식 중,
고리 A는 5원 내지 7원 모노시클릭 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 5원 또는 6원 헤테로아릴, 또는 페닐이고;
X는 -S-, -O- 또는 -NRb-이고;
X가 -S-이고 고리 A가 페닐인 경우, R은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴이고;
X가 -S-이고 고리 A가 5원 내지 7원 모노시클릭 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴인 경우; 또는 X가 -O- 또는 -NRb-인 경우; R은 -H, -(C1-C4)알킬 또는 -(CH2)i3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴이고, 여기서 R로 표시되는 -(C1-C4)알킬 또는 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시, -SO2Ra 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
각각의 R1은 독립적으로 -H, 할로겐, -(CH2)kCOOH, -(CH2)kCO(C1-C4)알킬, -(CH2)kCOO(C1-C4)알킬, -(CH2)pC(=O)NRaR3, -CH(CF3)NRaR3, -C(=NOH)CF3 또는 -CH(CF3)OR3이고, 여기서 R1로 표시되는 기에서의 (C1-C4)알킬은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
각각의 R2는 독립적으로 -H, 할로, CN, -(C1-C4)알킬, -OH, -(C1-C4)알콕시, -COOH, -C(=O)(C1-C4)알킬, -C(=O)O(C1-C4)알킬, -C(=O)NRa(C1-C4)알킬, -NRaRa, 3원 내지 6원 모노시클릭 시클로알킬, -O(CH2)i3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, 여기서 R2로 표시되거나 R2로 표시되는 기에서의 -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)알콕시, 헤테로시클릴 또는 헤테로아릴은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)할로알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
각각의 R3은 독립적으로 H, (C1-C4)알킬, (C1-C4)알콕시, -(CH2)p13원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, -(CH2)p1NH3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 5원 또는 6원 헤테로아릴, -O(CH2)p2NRaC(=O)(C1-C4)알킬, -(CH2)p2O(CH2)p2O(C=O)(C1-C4)알킬 또는 (CH2)p2NRaC(=O)(C1-C4)알킬이고, 여기서 R3으로 표시되거나 R3으로 표시되는 기에서의 알킬, 알콕시, 헤테로아릴 또는 헤테로시클릴은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시, -(C1-C4)카르복시알콕시, -S(O)2(C1-C4)알킬, -(C1-C4)히드록시알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
각각의 Ra는 독립적으로 -H 또는 -(C1-C4)알킬이고;
각각의 Rb는 독립적으로 -H 또는 -(C1-C4)알킬이고; 여기서 Rb로 표시되는 -(C1-C4)알킬은 할로, -CN, -OH, -(C3-C6)시클로알킬, 페닐, 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 및 5원 또는 6원 헤테로아릴에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
i는 0 또는 1이고;
k는 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
m은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
p는 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
p1은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
p2는 2, 3 또는 4임].
제2 구현예에서, 본 발명은, 앞선 구현예에 있어서, 하기 구조식 (II)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00003
(II)
(식 중, 나머지 변수는 제1 구현예에 정의된 바와 같음).
제3 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예에 있어서, 구조식 (II')로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00004
(II')
(식 중, 나머지 변수는 제1 구현예에 정의된 바와 같음).
제4 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예 또는 제2 구현예에 있어서, 구조식 (II-A)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00005
(II-A)
(식 중, 나머지 변수는 제1 구현예에 정의된 바와 같음).
제5 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예 또는 제2 구현예에 있어서, 구조식 (II-B)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00006
(II-B)
(식 중, 나머지 변수는 제1 구현예에 정의된 바와 같음).
제6 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예 또는 제2 구현예에 있어서, 구조식 (II-C)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00007
(II-C)
(식 중, 나머지 변수는 제1 구현예에 정의된 바와 같음).
제7 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예 또는 제3 구현예에 있어서, 구조식 (II'-A)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00008
(II'-A)
(식 중, 나머지 변수는 제1 구현예에 정의된 바와 같음).
제8 구현예에서, 본 발명은, 제6 구현예에 있어서, Rb가 -H 또는 -(C1-C4)알킬이고, 여기서 Rb로 표시되는 -(C1-C4)알킬은 할로, -CN 및 -OH에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되며, 나머지 변수는 제1 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다. 바람직한 구현예에서, Rb는 -H이다.
제9 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예 및 제8 구현예에 있어서, R이 -(C1-C4)알콕시로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알킬; 또는 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 -(CH2)i3원 내지 6원 모노시클릭 헤테로시클릴이고, 나머지 변수는 제1 구현예 또는 제8 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제10 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제4 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예 또는 제8 구현예에 있어서, R이 아제티디닐, 아제파닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 옥세타닐, 테트라히드로푸라닐 또는 테트라히드로피라닐이고, 이들은 각각 할로, -OH, -(C1-C4)알킬 및 -NH2로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되며, 나머지 변수는 제1 구현예 또는 제8 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제11 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제4 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예 또는 제10 구현예에 있어서, R1이 -(CH2)kCOOH, 할로로 선택적으로 치환된 -(CH2)kCO(C1-C4)알킬, -(CH2)pC(=O)NRaR3, -C(=NOH)CF3 또는 -CH(CF3)NRaR3이고, 나머지 변수는 제1 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예 또는 제10 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제12 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제4 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예 또는 제11 구현예에 있어서, R2가 H; 할로겐; CN; 할로로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알킬; 할로, 히드록시, 메톡시 또는 에톡시로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알콕시; -C(=O)(C1-C4)알킬; 3원 또는 4원 모노시클릭 시클로알킬; -O(CH2)i3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, 여기서 R2로 표시되거나 R2로 표시되는 기에서의 헤테로시클릴 또는 헤테로아릴은 할로, 히드록시 또는 -(C1-C4)알콕시로 선택적으로 치환되며, 나머지 변수는 제1 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예 또는 제11 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다. 바람직한 구현예에서, R2는 H 또는 -OCF3이다.
제13 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제11 구현예 또는 제12 구현예에 있어서, R이 메톡시 또는 -SO2CH3로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알킬; -(CH2)테트라히드로푸라닐; 히드록시로 선택적으로 치환된 -(CH2)옥세타닐; 피롤리디닐; 피페리디닐; 또는 테트라히드로피라닐이고; 여기서 피롤리디닐 또는 피페리디닐은 -(C1-C4)알킬로 선택적으로 치환되며, 나머지 변수는 제1 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예 또는 제12 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다. 바람직한 구현예에서, 피롤리디닐 또는 피페리디닐은 -CH3로 선택적으로 치환된다.
제14 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제4 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예 또는 제13 구현예에 있어서, R1이 -COOH, -C(=O)CF3, -CH(CF3)(NH2), -C(=NOH)CF3 또는 -C(=O)NHR3이고, 나머지 변수는 제1 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예 또는 제13 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제15 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제4 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예 또는 제14 구현예에 있어서, R3이 (C1-C4)알킬, (C1-C4)알콕시, (CH2)p13원 내지 6원 모노시클릭 헤테로시클릴, 또는 (CH2)p2NHC(=O)(C1-C4)알킬이고, 여기서 R3으로 표시되거나 R3으로 표시되는 기에서의 알킬, 알콕시 또는 헤테로시클릴은 할로, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시, -S(O)2(C1-C4)알킬, -(C1-C4)히드록시알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되며, 나머지 변수는 제1 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예 또는 제14 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제16 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제4 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예, 제14 구현예 또는 제15 구현예에 있어서, R2가 H; 할로겐; CN; 할로로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알킬; 할로, 히드록시, 메톡시 또는 에톡시로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알콕시; -C(=O)(C1-C4)알킬; 시클로프로필; O-테트라히드로피라닐; N-피롤리디닐; 또는 티아졸릴이고, 나머지 변수는 제1 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예, 제14 구현예 또는 제15 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제17 구현예에서, 본 발명은, 제5 구현예에 있어서, 구조식 (III-B)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다:
Figure pct00009
(III-B)
(식 중, 나머지 변수는 제1 구현예에 정의된 바와 같음).
제18 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제4 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예, 제14 구현예, 제15 구현예, 제16 구현예 또는 제17 구현예에 있어서, R1이 -COOH 또는 -C(=O)NHR3이고; R3이 -(C1-C4)알킬, -히드록시(C1-C4)알킬, -메톡시(C1-C4)알킬, -아미노(C1-C4)알킬, -(C1-C4)히드록시알콕시(C1-C4)알킬 또는 -(CH2)p2NHC(=O)(디메틸아미노(C1-C4)알킬)이고, 나머지 변수는 제1 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예, 제14 구현예, 제15 구현예, 제16 구현예 또는 제17 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제19 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제4 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예, 제14 구현예, 제15 구현예, 제16 구현예, 제17 구현예 또는 제18 구현예에 있어서, R2가 H, 할로, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)할로알콕시, 메톡시로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알콕시, 또는 -N-피롤리디닐이고, 나머지 변수는 제1 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예, 제14 구현예, 제15 구현예, 제16 구현예, 제17 구현예 또는 제18 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다. 바람직한 구현예에서, R2는 H, F, CF3, OCHF2, OCF3, OCH2CH2OCH3 또는 -N-피롤리디닐이다.
제20 구현예에서, 본 발명은, 제1 구현예, 제2 구현예, 제3 구현예, 제4 구현예, 제5 구현예, 제6 구현예, 제7 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예, 제14 구현예, 제15 구현예, 제16 구현예, 제17 구현예, 제18 구현예 또는 제19 구현예에 있어서,
R2가 H이고, R1이 -OH, NH2, 옥세타닐 또는 -(C1-C4)히드록시알콕시로 선택적으로 치환된 -C(=O)NH(C1-C4)알킬; 또는 -C(=O)NH(CH2)p2NHC(=O)(디메틸아미노(C1-C4)알킬)이거나;
R2가 F이고, R1이 -C(=O)NH(메톡시(C1-C4)알킬)이거나;
R2가 -N-피롤리디닐이고, R1이 -C(=O)NH((C1-C4)히드록시알콕시(C1-C4)알킬)이거나;
R2가 CF3, OCHF2 또는 OCF3이고, R1이 -COOH이거나; 또는
R2가 OCH2CH2OCH3이고, R1이 -C(=O)NH((C1-C4)히드록시알콕시(C1-C4)알킬), -C(=O)NH(히드록시(C1-C4)알킬), -C(=O)NH(메톡시(C1-C4)알킬) 또는 -C(=O)NH(히드록시(C1-C4)알콕시)이고;
나머지 변수는 제1 구현예, 제8 구현예, 제9 구현예, 제10 구현예, 제11 구현예, 제12 구현예, 제13 구현예, 제14 구현예, 제15 구현예, 제16 구현예, 제17 구현예, 제18 구현예 또는 제19 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제21 구현예에서, 본 발명은, 제17 구현예에 있어서,
R1이 -OH, NH2, -(C1-C4)알콕시 또는 -(C1-C4)히드록시알콕시로 선택적으로 치환된 -C(=O)NH(C1-C4)알킬이고,
R2가 H 또는 OCH2CH2OCH3인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제22 구현예에서, 본 발명은, 제21 구현예에 있어서,
R2가 H이고,
나머지 변수는 제21 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제23 구현예에서, 본 발명은, 제22 구현예에 있어서,
R1이 -(C1-C4)히드록시알콕시로 치환된 -C(=O)NH(C1-C4)알킬이고,
나머지 변수는 제22 구현예에 정의된 바와 같은 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
제24 구현예에서, 본 발명은, 제21 구현예에 있어서,
R1이 -(C1-C4)알콕시로 치환된 -C(=O)NH(C1-C4)알킬이고,
R2가 OCH2CH2OCH3인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
하나의 구현예에서, 상기 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 실시예 및 표 1에 개시된 화합물에서 선택된다.
정의
"약학적으로 허용 가능한 염"이라는 용어는, 건전한 의학적 판단의 범위 내에서, 과도한 독성, 자극 및 알레르기 반응 없이 인간 및 하등동물의 조직에 접촉시켜 사용하기에 적합하고, 합리적인 유익/위험 비율에 상응하는 약학적 염을 나타낸다. 약학적으로 허용 가능한 염은 당업계에 널리 공지되어 있다. 예를 들어, 문헌[S. M. Berge et al. J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19]에는 약리학적으로 허용 가능한 염이 기재되어 있다.
본 교시내용에는 본원에 개시된 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염이 포함된다. 염기성 기를 갖는 화합물은 약학적으로 허용 가능한 산(들)을 이용하여 약학적으로 허용 가능한 염을 형성할 수 있다. 본원에 기재된 화합물의 적합한 약학적으로 허용 가능한 산 부가 염에는, 무기산(예컨대, 염산, 브롬화수소산, 인산, 메타인산, 질산 및 황산)의 염과 유기산(예컨대, 아세트산, 벤젠설폰산, 벤조산, 에탄설폰산, 메탄설폰산 및 숙신산)의 염이 포함된다. 카르복실산과 같은 산성 기를 갖는 본 교시내용의 화합물은 약학적으로 허용 가능한 염기(들)을 이용하여 약학적으로 허용 가능한 염을 형성할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용 가능한 염기성 염에는, 암모늄 염, 알칼리 금속 염(예컨대, 나트륨 및 칼륨 염) 및 알칼리 토금속 염(예컨대, 마그네슘 및 칼슘 염)이 포함된다.
본원에 사용된 "할로"라는 용어는, 할로겐을 의미하며, 클로로, 플루오로, 브로모 및 요오도를 포함한다.
단독으로, 또는 "알콕시" 또는 "할로알킬" 등과 같은 더 큰 모이어티의 일부로 사용되는 "알킬"이라는 용어는, 포화 지방족 직쇄 또는 분지쇄 1가 탄화수소 라디칼을 의미한다. 달리 명시되지 않는 한, 알킬기는 전형적으로 1개 내지 5개의 탄소 원자를 가지며, 즉 (C1-C5)알킬이다. 본원에 사용된 "(C1-C4)알킬" 기는, 선형 또는 분지형 배열로 1개 내지 4개의 탄소 원자를 갖는 라디칼을 의미한다. 예에는, 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필 등이 포함된다.
"알콕시"라는 용어는, -O-알킬로 표시되는, 산소 연결 원자를 통해 부착된 알킬 라디칼을 의미한다. 예를 들어, "(C1-C4)알콕시"에는 메톡시, 에톡시, 프로폭시 및 부톡시가 포함된다.
"할로알킬" 및 "할로알콕시"라는 용어는, 경우에 따라, 하나 이상의 할로겐 원자로 치환될 수 있는, 알킬 또는 알콕시를 의미한다.
"시클로알킬"라는 용어는, 모노시클릭 포화 탄화수소 고리 시스템을 나타낸다. 달리 명시되지 않는 한, 시클로알킬은 3개 내지 7개의 탄소 원자를 갖는다. 예를 들어, C3-C6 시클로알킬에는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸 및 시클로헥실이 포함된다. 달리 기재되지 않는 한, "시클로알킬"은 3개 내지 6개의 탄소 원자를 갖는다.
단독으로, 또는 "헤테로아르알킬" 또는 "헤테로아릴알콕시"와 같은 더 큰 모이어티의 일부로 사용되는 "헤테로아릴", "헤테로방향족", "헤테로아릴 고리", "헤테로아릴기", "헤테로방향족 고리" 또는 "헤테로방향족기"라는 용어는, 탄소와 적어도 하나(전형적으로 1개 내지 4개, 보다 전형적으로 1개 또는 2개)의 헤테로원자(예를 들어, 산소, 질소 또는 황)에서 선택되는 5개 또는 6개의 고리 원자를 갖는(즉, "5원 또는 6원") 모노시클릭 방향족 고리기를 나타낸다.
모노시클릭 헤테로아릴기의 예에는, 푸라닐(예를 들어, 2-푸라닐, 3-푸라닐), 이미다졸릴(예를 들어, N-이미다졸릴, 2-이미다졸릴, 4-이미다졸릴, 5-이미다졸릴), 이속사졸릴(예를 들어, 3-이속사졸릴, 4-이속사졸릴, 5-이속사졸릴), 옥사디아졸릴(예를 들어, 2-옥사디아졸릴, 5-옥사디아졸릴), 옥사졸릴(예를 들어, 2-옥사졸릴, 4-옥사졸릴, 5-옥사졸릴), 피라졸릴(예를 들어, 3-피라졸릴, 4-피라졸릴), 피롤릴(예를 들어, 1-피롤릴, 2-피롤릴, 3-피롤릴), 피리딜(예를 들어, 2-피리딜, 3-피리딜, 4-피리딜), 피리미디닐(예를 들어, 2-피리미디닐, 4-피리미디닐, 5-피리미디닐), 피리다지닐(예를 들어, 3-피리다지닐), 티아졸릴(예를 들어, 2-티아졸릴, 4-티아졸릴, 5-티아졸릴), 트리아졸릴(예를 들어, 2-트리아졸릴, 5-트리아졸릴), 테트라졸릴(예를 들어, 테트라졸릴), 티에닐(예를 들어, 2-티에닐, 3-티에닐), 피리미디닐, 피리디닐 및 피리다지닐이 포함된다.
"헤테로시클릴"이라는 용어는, 탄소 원자와 1개 또는 2개의 헤테로원자에서 선택되는 3개 내지 7개의 고리 원자를 함유하는(즉, "3원 내지 7원") 모노시클릭 비(非)방향족 고리 라디칼을 나타낸다. 각각의 헤테로원자는 독립적으로 질소, 4차 질소, 산화된 질소(예를 들어, NO); 산소; 및 황(설폭시드 및 설폰 포함)에서 선택된다. 대표적인 헤테로시클릴기에는, 모르폴리닐, 티오모르폴리닐, 피롤리디노닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 히단토이닐, 발레로락타밀, 옥시라닐, 옥세타닐, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로피라닐, 테트라히드로피리디닐, 테트라히드로피리미디닐, 테트라히드로티오페닐, 테트라히드로티오피라닐 등이 포함된다. "치환된 헤테로시클릴기"는, 수소에 결합된 고리 탄소 또는 고리 질소 원자인, 임의의 하나 이상의 치환 가능한 고리 원자에서 치환된다.
본원에 사용된 다수의 모이어티(예를 들어, 알킬, 알킬렌, 시클로알킬, 시클로알킬렌, 아릴, 아릴렌, 헤테로아릴, 헤테로아릴렌, 헤테로시클릴 또는 헤테로시클릴렌)는, "치환된" 또는 "선택적으로 치환된" 것으로 언급된다. 모이어티가 이러한 용어 중 하나로 변형되는 경우, 달리 언급되지 않는 한, 이는, 하나 이상의 치환기를 포함하는 치환에 이용 가능한 것으로 당업자에게 공지된 모이어티의 임의의 부분이 치환될 수 있음을 나타낸다. 하나 초과의 치환기가 존재하는 경우, 각각의 치환기는 독립적으로 선택될 수 있다. 이러한 치환 수단은 당업계에 널리 공지되어 있고/있거나 본 개시내용을 통해 교시된다. 선택적 치환기는 모이어티에 부착시키기에 적합한 임의의 치환기일 수 있다.
적합한 치환기는 HMOX1을 유도하는 화합물의 능력에 유의한 부정적인 영향을 미치지 않는 것들이다. 적합한 치환기가 구체적으로 열거되지 않은 경우, 예시적인 치환기에는, 비제한적으로, (C1-C5)알킬, (C1-C5)히드록시알킬, (C1-C5)할로알킬, (C1-C5)알콕시, (C1-C5)할로알콕시, 할로겐, 히드록실, -CN, -NH2, -NO2, -ORc1, -NRa1Rb1, -S(O)iiRa1, -NRa1S(O)iiRb1, -S(O)iiNRa1Rb1, -C(=O)ORa1, -OC(=O)ORa1, -C(=S)ORa1, -O(C=S)Ra1, -C(=O)NRa1Rb1, -NRa1C(=O)Rb1, -C(=S)NRa1Rb1, -NRa1C(=S)Rb1, -NRa1(C=O)ORb1, -O(C=O)NRa1Rb1, -NRa1(C=S)ORb1, -O(C=S)NRa1Rb1, -NRa1(C=O)NRa1Rb1, -NRa1(C=S)NRa1Rb1, -C(=S)Ra1, -C(=O)Ra1, 페닐, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이 포함된다. 각각의 Ra1과 각각의 Rb1은 독립적으로 -H, 및 히드록실 또는 (C1-C3)알콕시로 선택적으로 치환된 (C1-C5)알킬에서 선택되고; Rc1은 -H, (C1-C5)할로알킬 또는 (C1-C5)알킬에서 선택되고, 여기서 (C1-C5)알킬은 히드록실 또는 (C1-C3)알콕시로 선택적으로 치환되고; ii는 1 또는 2이다.
약학적 조성물
본원에 개시된 화합물은 HMOX1 유도제이다. 본 발명의 약학적 조성물은 하나 이상의 HMOX1 유도제 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과, 약학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제를 포함한다.
"약학적으로 허용 가능한 담체" 및 "약학적으로 허용 가능한 희석제"는, 대상에 대한 활성제의 제형화 및/또는 투여, 및/또는 대상에 의한 흡수를 돕고, 대상에게 유의한 부정적인 독물학적 영향을 유발하지 않으면서 본 개시내용의 조성물에 포함될 수 있는 물질을 나타낸다. 약학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 희석제의 비제한적인 예에는, 물, NaCl, 생리 식염수, 젖산 링거액, 노르말 자당, 노르말 포도당, 결합제, 충전제, 붕해제, 윤활제, 코팅제, 감미제, 향미제, 염 용액(예컨대, 링거액), 알코올, 오일, 젤라틴, 탄수화물(예컨대, 락토오스, 아밀로오스 또는 전분), 히드록시메틸셀룰로오스, 지방산 에스테르, 폴리비닐피롤리돈 및 착색제 등이 포함된다. 이러한 제제는 멸균될 수 있으며, 목적하는 경우, 본원에 제공된 화합물과 유해하게 반응하지 않거나 이의 활성을 방해하지 않는, 윤활제, 보존제, 안정화제, 습윤화제, 유화제, 삼투압에 영향을 미치는 염, 완충액, 착색제 및/또는 방향족 물질 등과 같은 보조제와 혼합될 수 있다. 당업자는, 다른 약학적 부형제가 본원에 개시된 화합물과 함께 사용하는 데 적합하다는 것을 인식할 것이다.
본 발명의 약학적 조성물은 선택적으로 락토오스, 전분, 셀룰로오스 및 덱스트로오스와 같은 이를 위한 하나 이상 약학적으로 허용 가능한 담체 및/또는 희석제를 포함한다. 향미제, 감미제 및 보존제(예컨대, 메틸, 에틸, 프로필 및 부틸 파라벤)와 같은 다른 부형제가 또한 포함될 수 있다. 적합한 부형제의 보다 완전한 목록은 문헌[Handbook of Pharmaceutical Excipients (5th Ed., Pharmaceutical Press (2005))]에서 확인할 수 있다. 당업자는 다양한 유형의 투여 경로에 적합한 제형을 제조하는 방법을 알고 있을 것이다. 적합한 제형의 선택 및 제조를 위한 통상적인 절차 및 성분은, 예를 들어 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences (2003 - 20th edition)] 및 문헌[The United States Pharmacopeia: The National Formulary (USP 24 NF19), 1999년 출판]에 기재되어 있다. 담체, 희석제 및/또는 부형제는 약학적 조성물의 다른 성분과 상용 가능하고, 이의 수용체에게 유해하지 않다는 의미에서 "허용 가능한" 것이다.
치료 방법
특정 구현예에서, 본 발명은 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 유효량의 이의 약학적 조성물을 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 인간 대상에서 HMOX1의 활성 또는 양을 증가시키는 방법을 제공한다.
특정 구현예에서, 본 발명은 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 유효량의 이의 약학적 조성물을 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 인간 대상에서 전사인자 Nrf2를 활성화시키는 방법을 제공한다.
특정 구현예에서, 본 발명은 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 유효량의 이의 약학적 조성물을 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 인간 대상에서 ROS의 양을 감소시키는 방법을 제공한다.
특정 구현예에서, 본 발명은 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 유효량의 이의 약학적 조성물을 사용하는 방법을 제공한다. 본 발명의 화합물 및 이의 약학적 조성물은, 예를 들어 섬유증성 질환, 신경변성질환, 심혈관질환, 신장질환, 염증성질환, 간질환, 안질환, 갑상선질환, 바이러스성 감염, 골다공증, 임신성 장애, 자궁내막증, 당뇨병, 암, 피부질환, 미토콘드리아질환, 혈액학적 장애 및 근육질환을 포함하는 매우 다양한 질환 및 장애를 치료 및/또는 감소시키는 것을 포함하는, 다양한 치료적 적용에 유용할 수 있다. 상기 방법은 약학적 유효량의 하나 이상의 본 발명의 화합물, 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및/또는 이의 약학적 조성물을 이를 필요로 하는 대상에게 투여하는 것을 포함한다.
HMOX1의 수준 또는 활성을 증가시키는 화합물은, 비제한적으로, 섬유증성 질환, 신경변성질환, 심혈관질환, 신장질환, 염증성질환, 간질환, 안질환, 갑상선질환, 바이러스성 감염, 골다공증, 임신성 장애, 자궁내막증, 당뇨병, 암, 피부질환, 미토콘드리아질환, 혈액학적 장애 및 근육질환과 같은, 산화스트레스와 적어도 부분적으로 관련이 있을 수 있는 질환 또는 병태를 치료하는 데 잠재적으로 유용하다. 본원에 사용된 산화스트레스와 관련이 있는 질환 또는 병태에는, 또한 본원에 기재된 질환 또는 병태로 인한 산화스트레스의 지속적 또는 장기간 증가와 관련된 만성적인 영향(예를 들어, 조직 손상, 만성 염증)이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 섬유증성 질환에는, 비제한적으로, 만성폐쇄성폐질환(COPD), 특발성 폐섬유증 및 사르코이드증과 같은 폐의 섬유증성 질환; 알코올성 간경변증, 지방증, 쓸개즙정체, 약물 부작용 및 바이러스성 감염에 의해 유발된 것들을 포함하는 간의 섬유증성 질환; 및 피부경화증 및 건선과 같은 자가면역질환을 포함하는 피부의 섬유증성 질환이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 신경변성질환에는, 비제한적으로, 프리드리히 운동실조증(Friedreich's ataxia), 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 파킨슨병(Parkinson's disease), 근위축측삭경화증, 다발경화증, 뇌신경 퇴행성 질환 및 샤르코-마리-투스 증후군(Charcot-Marie-Tooth syndrome)이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 심혈관질환에는, 비제한적으로, 고혈압, 심부전, 고콜레스테롤혈증, 죽상동맥경화증, 동맥경화증, 혈전증, 급성 관상동맥 혈전증, 심부정맥 혈전증, 말초혈관질환, 울혈성 심부전, 급성 관상동맥 증후군, 투석용 동맥루 기능부전, 허혈 재관류 손상, 원발성 폐고혈압, 원발성 폐동맥 고혈압 및 속발성 폐동맥 고혈압이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 신장질환에는, 비제한적으로, 급성 신손상, 다낭성 신장질환, 알포트 증후군(Alport syndrome), 당뇨병성 신장병증, 사구체신염, 루푸스신장염, 낫적혈구 신장병증 및 급성 세뇨관괴사가 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 염증성질환에는, 비제한적으로, 천식, 만성폐쇄성폐질환, 특발성 폐섬유증, 염증성 장증후군, 크론병(Crohn's disease), 셀리악병(celiac disease), 궤양성 대장염, 만성 염증성 장질환, 피부경화증, 피부염, 전신홍반루푸스, 식도염, 혈관염, 췌장염, 건염, 골관절염, 류마티스관절염, 강직척추염 및 뇌의 만성 염증이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 간질환에는, 비제한적으로, 약물 유도성 간독성, 비알코올성 지방간염 및 간염(예를 들어, B형 간염 감염 및 C형 간염 감염)이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 안 질환 및 병태에는, 비제한적으로, 결막염, 녹내장, 포도막염, 상처 치유(예를 들어, 라식(LASIK)과 같은 수술 후), 안외상, 각막이식, 푹스각막내피이영양증(Fuchs' endothelial corneal dystrophy), 황반변성, 백내장, 일광망막병증, 색소망막염, 당뇨망막병증 및 미숙아 망막병증뿐 아니라, 이러한 질환들과 관련이 있는 염증 및 조직 손상이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 갑상선질환에는, 비제한적으로, 그레이브스병(Graves' disease), 소포샘종, 및 유두상 및 여포상 암종이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 폐질환에는, 비제한적으로, 기관지염, 천식, 만성폐쇄성폐질환, 특발성 폐섬유증, 폐기관지염, 기관지확장증, 폐부종 및 폐기종이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 피부질환에는, 비제한적으로, 피부염, 피부경화증 및 건선이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 바이러스성 감염에는, 비제한적으로, 인간면역결핍바이러스, B형 간염, C형 간염 및 헤르페스바이러스를 포함하는 바이러스에 대한 만성 바이러스성 감염으로 인해 발생한 산화스트레스로 인한 조직 손상(예를 들어, 섬유증)뿐 아니라, 바이러스의 바이러스성 복제가 모두 포함된다.
당뇨병성 병태에는, 비제한적으로, 제1형 진성 당뇨병, 제2형 진성 당뇨병, 임신당뇨병, 당뇨병전기, 고혈당증 및 대사증후군뿐 아니라, 당뇨병성 병태로 인해 발생한 2차 병태(예를 들어, 울혈성 심부전 및 신장병증)가 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 미토콘드리아질환에는, 비제한적으로, 미토콘드리아 근병증, 레버씨 선천성 시신경병증(LHON: Leber's hereditary optic neuropathy), 불균일적색근섬유 동반 근간대성 간질(MERFF: myoclonic epilepsy with ragged red fiber), 미토콘드리아 뇌근병증, 젖산산증, 및 뇌졸중 유사증상(MELAS: stroke-like episode) 또는 리 증후군(Leigh's Syndrome)이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 혈액학적 장애에는, 비제한적으로, 다이아몬드 블랙판 빈혈(Diamond Blackfan anemia), 골수이형성증후군, 낫적혈구병 및 베타 지중해빈혈이 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 근육질환에는, 비제한적으로, 뒤시엔느 근위축증(Duchenne muscular dystrophy), 지대 근디스트로피(limb girdle muscular dystrophy), 베커 근디스트로피(Becker muscular dystrophy), 근긴장디스트로피 및 횡문근융해가 포함된다.
산화스트레스와 관련이 있는 암에는, 비제한적으로, 유방암, 결장직장암, 폐암, 난소암, 자궁암, 전립선암, 백혈병, 림프종, 뇌암(다형성교모세포종 및 신경모세포종 포함), 두경부암, 췌장암, 흑색종, 간세포암종, 신장암 및 연조직 육종이 포함된다. 하나의 구현예에서, 상기 암은 유방암, 결장암 및 난소암이다. 하나의 구현예에서, 상기 암은 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 유방암, 뇌암, 결장암, 결장직장암, 두경부암, 간세포암종, 폐 선암종, 전이성 흑색종, 췌장암, 전립선암, 난소암 및 신장암에서 선택된다. 하나의 구현예에서, 상기 암은 폐암, 결장암, 뇌암, 신경모세포종, 전립선암, 흑색종, 다형성교모세포종 또는 난소암이다. 또 다른 구현예에서, 상기 암은 폐암, 유방암, 결장암, 뇌암, 신경모세포종, 전립선암, 흑색종, 다형성교모세포종 또는 난소암이다. 또 다른 구현예에서, 상기 암은 유방암, 결장암 및 폐암이다. 또 다른 구현예에서, 상기 암은 유방암이다. 또 다른 구현예에서, 상기 암은 기저 아형 유방암(basal sub-type breast cancer) 또는 루미날 B 아형 유방암(luminal B sub-type breast cancer)이다. 또 다른 구현예에서, 상기 암은 기저 아형 유방암이다. 또 다른 구현예에서, 기저 아형 유방암은 ER(에스트로겐 수용체), HER2 및 PR(프로게스테론 수용체) 음성 유방암이다. 또 다른 구현예에서, 상기 암은 연조직암이다. "연조직암"은 신체의 임의의 연조직에서 유래된 종양을 포함하는 당업계에서 인정되는 용어이다. 이러한 연조직은, 비제한적으로, 평활근, 골격근, 힘줄, 섬유성조직, 지방조직, 혈관 및 림프관, 혈관주위조직, 신경, 중간엽세포 및 윤활조직을 포함하는 신체의 다양한 구조 및 기관을 연결하거나, 지지하거나 둘러싸고 있다. 따라서, 연조직암은 지방조직, 근육조직, 신경조직, 관절조직, 혈관, 림프관 및 섬유성조직의 암일 수 있다. 연조직암은 양성 또는 악성일 수 있다. 일반적으로, 악성 연조직암은 육종 또는 연조직 육종으로 지칭된다. 지방종, 지방모세포종, 동면종, 지방육종, 평활근종, 평활근육종, 횡문근종, 횡문근육종, 신경섬유종, 슈반세포종(신경집종), 신경종, 악성 슈반세포종, 신경섬유육종, 신경성 육종, 결절성 건초염, 윤활막육종, 혈관종, 사구종양, 혈관주위세포종, 혈관내피종, 혈관육종, 카포시육종(Kaposi sarcoma), 림프관종, 섬유종, 탄력섬유종, 표재성 섬유종증, 섬유성 조직구종, 섬유육종, 섬유종증, 융기성 피부섬유육종(DFSP: dermatofibrosarcoma protuberans), 악성 섬유성 조직구종(MFH: malignant fibrous histiocytoma), 점액종, 과립세포종양, 악성 중간엽종, 포상연부육종, 상피모양육종, 투명세포육종 및 결합조직형성 소세포종양을 포함하는 다수의 유형의 연조직 종양이 존재한다. 특정 구현예에서, 연조직암은 섬유육종, 위장관육종, 평활근육종, 역분화 지방육종, 다형성지방육종, 악성 섬유성 조직구종, 원형세포육종 및 윤활막육종으로 이루어지는 군에서 선택되는 육종이다.
따라서, 본 발명은 상기 열거된 질환 또는 병태 중 적어도 하나를 치료하기 위해, 화학식 (I)의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 대상에게 투여하는 것을 포함하는 치료 방법을 제공한다.
"대상"은, 포유류, 바람직하게는 인간이지만, 수의학적 치료를 필요로 하는 동물, 예를 들어 반려 동물(예를 들어, 개, 고양이 등), 농장 동물(예를 들어, 소, 양, 돼지, 말 등) 및 실험실 동물(예를 들어, 래트, 마우스, 기니피그 등)일 수도 있다.
투여 방법 및 투여 형태
대상에게 "유효량"을 제공하기 위해 투여되는 화합물의 정확한 양은, 투여 방식, 질환 또는 병태의 유형 및 중증도, 및 대상의 특징(예컨대, 일반 건강, 연령, 성별, 체중 및 약물에 대한 내성)에 따라 달라질 것이다. 당업자는 이러한 및 다른 인자에 따라 적절한 투여량을 결정할 수 있을 것이다. 다른 치료제와 병용 투여되는 경우, 예를 들어 항암제와 병용 투여되는 경우, 임의의 부가적인 치료제(들)의 "유효량"은 사용되는 약물의 유형에 따라 달라질 것이다. 적합한 투여량은 승인된 치료제의 경우 공지되어 있으며, 대상의 병태, 치료하고자 하는 병태(들)의 유형 및 사용되는 본 발명의 화합물의 양에 따라, 예를 들어 문헌에 보고되어 있고 문헌[Physician's Desk Reference (57th Ed., 2003)]에서 권장되는 투여량에 따라 당업자에 의해 조정될 수 있다.
"유효량"이라는 용어는, 대상에게 투여될 때, 예를 들어 대조군과 비교하여 대상에서 치료하고자 하는 병태의 증상을 저해, 억제 또는 감소시키는 임상 결과를 포함하는, 유익하거나 목적하는 결과를 유도하는 양을 의미한다. 예를 들어, 치료적 유효량은 단위 투여 형태(예를 들어, 1일 0.1 mg 내지 약 50 g, 대안적으로 1일 1 mg 내지 약 5 g; 및 또 다른 대안에서, 1일 10 mg 내지 1 g)로 제공될 수 있다.
본원에 사용된 "투여하다", "투여하는", "투여" 등의 용어는, 목적하는 생물학적 작용 부위로의 조성물의 전달을 가능하게 하는 데 사용될 수 있는 방법을 나타낸다. 이러한 방법에는, 비제한적으로, 관절내(관절 내), 정맥내, 근육내, 종양내, 피내, 복강내, 피하, 경구, 국소, 척수강내, 흡입, 경피, 직장 등이 포함된다. 본원에 기재된 작용제 및 방법과 함께 이용될 수 있는 투여 기술은, 예를 들어 문헌[Goodman and Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, current ed.; Pergamon]; 및 문헌[Remington's, Pharmaceutical Sciences (최신판), Mack Publishing Co., Easton, Pa]에서 확인할 수 있다.
또한, 본원에 개시된 HMOX1 유도제는 다른 치료제와 병용 투여될 수 있다. 본원에 사용된 "병용 투여", "병용 투여되는" 및 이의 문법적 등가 표현은, 단일 대상에게의 둘 이상의 치료제의 투여를 포함하며, 작용제들이 동일하거나 상이한 투여 경로를 통해, 또는 동일하거나 상이한 시간에 투여되는 치료 요법을 포함하는 것으로 의도된다. 일부 구현예에서, 하나 이상의 본원에 기재된 화합물은 다른 작용제와 병용 투여될 것이다. 이러한 용어는 두 가지 작용제 및/또는 이의 대사물이 모두 동시에 대상에 존재하도록, 대상에게 둘 이상의 작용제를 투여하는 것을 포함한다. 이에는, 별개의 조성물의 동시 투여, 별개의 조성물의 상이한 시간에의 투여 및/또는 두 가지 작용제가 모두 존재하는 조성물로의 투여가 포함된다. 따라서, 일부 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 및 다른 작용제(들)은 단일 조성물로 투여된다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 화합물 및 다른 작용제(들)은 조성물에 혼합되어 있다.
특정 투여 방식 및 투여 요법은 사례의 세부사항(예를 들어, 대상, 질환, 관련된 질환 상태, 특정 치료)을 고려하여, 담당 임상의에 의해 선택될 것이다. 치료는 수일 내지 수개월 또는 심지어 수년의 기간에 걸쳐 매일 또는 수일마다 또는 매일 보다 적은 횟수로(예컨대, 1주마다 또는 1개월마다 등) 투여되는 것을 포함할 수 있다. 하지만, 당업자는 지침에 따라 본원에 개시된 HMOX1 유도제를 사용하여 질환을 치료하도록 승인된 투여량을 고려하여 적절하고/하거나 동등한 용량을 즉시 인식할 수 있다.
본원에 교시된 화합물 또는 상응하는 약학적 조성물은, 당업자가 이해하는 바와 같이, 선택된 투여 경로에 따라 다양한 형태로 환자에게 투여될 수 있다. 본 교시내용의 화합물 및 이에 따라 제형화된 약학적 조성물은, 예를 들어 경구, 비경구, 협측, 설하, 비강, 직장, 패치, 펌프 또는 경피 투여로 투여될 수 있다. 비경구 투여에는, 정맥내, 복강내, 피하, 근육내, 경상피(transepithelial), 비강, 폐내, 경막내, 직장 및 국소 투여 방식이 포함된다. 비경구 투여는 선택된 기간에 걸쳐 연속 주입으로 이루어질 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 의도된 투여 경로에 적합하도록 제형화된다. 일 구현예에서, 상기 조성물은 통상의 절차에 따라 인간에게의 정맥내, 피하, 근육내, 경구, 비강내 또는 국소 투여에 적합한 약학적 조성물로 제형화된다. 바람직한 구현예에서, 약학적 조성물은 정맥내 투여용으로 제형화된다.
전형적으로, 경구 치료 투여의 경우, 본 교시내용의 화합물은 부형제와 통합되어, 섭취 가능한 정제, 구강정(buccal tablet), 트로키제, 캡슐, 엘릭시르, 현탁액, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 사용될 수 있다.
전형적으로, 비경구 투여의 경우, 본 교시내용의 화합물의 용액은 일반적으로 히드록시프로필셀룰로오스와 같은 계면활성제와 적합하게 혼합된 물 중에서 제조될 수 있다. 분산액은 또한 알코올의 존재 또는 부재 하의 글리세롤, 액체 폴리에틸렌 글리콜, DMSO 및 이들의 혼합물 중에서, 및 오일 중에서 제조될 수 있다. 통상의 저장 및 사용 조건 하에서, 이러한 제제는 미생물의 성장을 방지하기 위해 보존제를 함유한다.
전형적으로, 주사용의 경우에는, 멸균 주사 용액 또는 분산액의 즉석 제조를 위한, 본원에 개시된 화합물의 멸균 수용액 또는 분산액, 및 이의 멸균 분말이 적절하다.
예시
전체 명세서 사용된 약어는 이의 특정 의미와 함께 하기에 요약될 수 있다:
ACN - 아세토니트릴;
AcOH - 아세트산;
Ac2O - 아세트산 무수물;
AlCl3 - 염화알루미늄;
anh. - 무수;
Aq. - 수성(수용액);
BOC - tert-부틸옥시카르보닐;
bs - 넓은 단일항;
Conc. - 농축(된);
℃ - 섭씨 온도;
CDI - 카르보닐디이미다졸;
CH3MgBr - 브롬화메틸마그네슘;
CS2 - 이황화탄소;
d - 이중항;
δ - 델타;
DCM - 디클로로메탄;
DIPEA - N,N-디이소프로필에틸아민;
DMFA - N,N-디메틸포름아미드;
DMSO - 디메틸설폭시드;
DMSO-d6 - 중수소로 치환된 디메틸설폭시드;
D2O - 중수소로 치환된 물;
DPPA - 디페닐포스포릴 아지드;
EDC.HCl - 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 히드로클로라이드;
EtOH - 에탄올;
EtOAc - 에틸 아세테이트;
g - 그램;
h - 시간;
1H - 양성자;
H2 - 수소;
HATU - N-[(디메틸아미노)-1H-1,2,3-트리아졸로-[4,5-b]피리딘-1-일메틸렌]-N-메틸메탄아미늄 헥사플루오로포스페이트 N-옥시드;
HBTU - N,N,N',N'-테트라메틸-O-(1H-벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로포스페이트;
1HNMR - 양성자 핵 자기 공명;
HNO3 - 질산;
H2O - 물;
HCl - 염산;
Hz - 헤르츠;
H2SO4 - 황산;
J - 커플링 상수;
K2CO3 - 탄산칼륨;
KOH - 수산화칼륨;
K3PO4 - 인산칼륨;
LC - 액체 크로마토그래피;
LiOH. H2O - 수산화리튬 1수화물;
M+ - 분자 이온;
m - 다중항;
M - 몰 농도;
m-CPBA -메타-클로로퍼벤조산;
MeI - 요오드화메틸;
MeOH - 메탄올;
mg - 밀리그램;
min - 분;
MHz - 메가 헤르츠(주파수);
mL - 밀리리터;
mM - 밀리몰 농도;
mmol - 밀리몰;
MS - 질량분석법;
m/z - 질량-대-전하 비;
N - 노르말 농도;
NaBH4 - 수소화붕소나트륨;
NaH - 수소화나트륨;
NaHCO3 - 탄산수소나트륨;
NaNO2 - 아질산나트륨;
NaNO3 - 질산나트륨;
NaOEt - 나트륨에톡시드;
NaOH - 수산화나트륨;
NaOMe - 나트륨메톡시드;
NBS - N-브로모숙신이미드;
Pd/C - 탄소상 팔라듐;
Pd(OAc)2 - 아세트산팔라듐(II);
POCl3 - 옥시염화인;
P2S5 - 오황화인;
PtO2 - 이산화백금;
% - 백분율;
pH - 수소의 포텐셜(potential);
psi - 평방 인치당 파운드;
q - 사중항;
RT - 실온;
s - 단일항;
SOCl2 - 염화티오닐;
t - 삼중항;
TBAF - 테트라-n-부틸암모늄 플루오라이드;
TBDMSCl - tert-부틸디메틸클로로실란;
TEA - 트리에틸아민;
TFA - 트리플루오로아세트산;
THF - 테트라히드로푸란;
TLC - 박막 크로마토그래피.
실시예 1h 및 1i. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성:
Figure pct00010
Figure pct00011
단계-a: 벤조[ d ]옥사졸-2-티올 (1a)의 합성
실온에서, 에탄올(80 mL) 중 2-아미노페놀(4.0 g, 36.7 mmol)의 용액에, 분말화된 수산화칼륨(3.59 g, 64.2 mmol)과 이황화탄소(20 mL, 330.3 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, 물(100 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(4.0 g, 72%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.85 (bs, 1H), 7.51-7.49 (m, 1H), 7.32-7.23 (m, 3H); LC-MS: m/z 152.0 (M+1)+.
단계-b: 2-(메틸티오)벤조[ d ]옥사졸 (1b)의 합성
0℃에서, 아세토니트릴(50 mL) 중 벤조[d]옥사졸-2-티올(3.0 g, 19.9 mmol)의 용액에, 탄산칼륨(3.01 g, 21.9 mmol)과 요오드화메틸(1.36 mL, 21.9 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(60 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 생성물을 수득하고, 이를 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(2.5 g, 76%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.65-7.62 (m, 2H), 7.34-7.30 (m, 2H), 2.76 (s, 3H); LC-MS: m/z 166.0 (M+1)+.
단계-c: 2-(메틸설포닐)벤조[ d ]옥사졸 (1c)의 합성
0℃에서, DCM(20 mL) 중 2-(메틸티오)벤조[d]옥사졸(500 mg, 3.0 mmol)의 용액에, 메타-클로로퍼벤조산(938 mg, 9.1 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(40 mL)로 희석하고, 수성층을 DCM(2X100 mL)으로 추출하였다. 조합한 유기층을 탄산수소나트륨 포화 용액(6 X 150 mL), 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 생성물을 수득하고, 이를 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 사용하였다(300 mg); LC-MS: m/z 198.0 (M+1)+.
단계-d: 에틸 4-(메틸아미노)-3-니트로벤조에이트 (1d)의 합성
실온에서, DMFA(100 mL) 중 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트(30.0 g, 131 mmol)의 용액에, 메틸아민(26.8 mL(40% 수용액), 262 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(1000 mL)로 희석하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 생성물을 황색 고체로 수득하였다(26.0 g, 89%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.59 (bs, 1H), 7.99 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.29 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.01 (d, J = 5.2 Hz, 3H), 1.31 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 225.0 (M+1)+.
단계-e: 에틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트 (1e)의 합성
메탄올(180 mL) 중 에틸 4-(메틸아미노)-3-니트로벤조에이트(13.0 g, 58 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C의 슬러리(에탄올 10 mL 중 1.3 g)를 첨가하였다. 플라스크를 수소 압력 하(60 psi) 실온에서 Parr 진탕기 내에서 5시간 동안 보관하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(10.0 g, 88%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.23 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz 1H), 7.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.39 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.38-5.37 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.18 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.77 (d, J = 5.2 Hz, 3H), 1.26 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 195.1 (M+1)+.
단계-f: 에틸 2-아미노-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트 (1f)의 합성
실온에서, THF(23 mL) 및 물(56 mL) 중 에틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트(5.6 g, 28.8 mmol)의 용액에, 브롬화시안(cyanogen bromide)(3.7 g, 34.6 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)과 에틸 아세테이트(50 mL)로 희석하였다. 수성층을 탄산수소나트륨 포화 용액을 이용하여 염기성화시키고, EtOAc(2 X 250 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(100 mL), 염수(100 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 생성물을 제공하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(5.2 g, 82%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.70 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.64 (s, 2H), 4.27 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.53 (s, 3H), 1.32 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
단계-g: 에틸 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸- 1H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트 (1g)의 합성
실온에서, 1,4-디옥산(4 mL) 중 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(150 mg, 0.68 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(96 mg, 2.4 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 2-(메틸설포닐)벤조[d]옥사졸(202 mg, 1.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하고, 농축시키고, 물(20 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다(pH 약 6). 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시키고, 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시(combiflash) 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(50 mg, 22%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.53-7.43 (m, 3H), 7.22 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 337.0 (M+1)+.
단계-h: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산 (1h)의 합성
THF(1 mL), 에탄올(1 mL) 및 물(0.5 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(50 mg, 0.15 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(19 mg, 0.45 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켜 고체를 수득하고, 이를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(35 mg, 76%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.60 (bs, 2H), 8.20 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.51-7.48 (m, 2H), 7.44 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.23-7.20 (m, 1H), 7.15-7.11 (m, 1H), 3.64 (s, 3H); LC-MS: m/z 308.6 (M+1)+.
단계-i: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 (1i)의 합성
0℃에서, DMFA(1.0 mL) 중 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(30 mg, 0.1 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.02 mL, 0.1 mmol)과 디페닐포스포릴 아지드(0.02 mL, 0.1 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 2-메톡시에틸아민(8 mg, 0.1 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(15 mL)로 희석하고, 15분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 디에틸 에테르로 세정하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다(22 mg, 53%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 1H), 8.45 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.76 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.44-7.39 (m, 2H), 7.25-7.19 (m, 1H), 7.13-7.10 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.48-3.44 (m, 4H), 3.29 (s, 3H); LC-MS: m/z 364.0 (M-1).
실시예 2d 및 2e. 1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성:
Figure pct00012
Figure pct00013
단계-a: 에틸 3-니트로-4-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)아미노)벤조에이트 (2a)의 합성
DMSO(10 mL) 중 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트(1.0 g, 4.4 mmol)의 교반된 용액에, 실온에서 탄산칼륨(1.2 g, 8.7 mmol)과 테트라히드로-2H-피란-4-아민(0.53 g, 5.2 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 70℃까지 가열하고, 16시간 동안 교반한 후, 실온까지 냉각시켰다. 반응 혼합물을 냉수로 희석하고, 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.1 g, 86%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 1.9 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.29 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 3.96-3.94 (m, 1H), 3.90-3.83 (m, 2H), 3.51-3.45 (m, 2H), 1.96-1.93 (m, 2H), 1.66-1.61 (m, 2H), 1.31 (t, J = 7.3 Hz, 3H); LC-MS: m/z 294.8 (M+1)+.
단계-b: 에틸 3-아미노-4-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)아미노)벤조에이트 (2b)의 합성
중간체 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-니트로-4-((테트라히드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.19 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.52 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.99 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.18 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 3.89-3.87 (m, 2H), 3.57-3.53 (m, 1H), 3.45-3.40 (m, 2H), 1.92-1.89 (m, 2H), 1.48-1.38 (m, 2H), 1.25 (t, J = 7.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 264.8 (M+1)+.
단계-c: 에틸 1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트 (2c)의 합성
DMFA(55 mL) 중 2-아미노-6-(트리플루오로메톡시)벤조티아졸(177 mg, 0.76 mmol)의 교반된 용액에, 1,1'-티오카르보닐디이미다졸(270 mg, 1.5 mmol)을 첨가하고, 용액을 100℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켰다. EDC.HCl(291 mg, 1.5 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 10분 동안 가열한 후, 에틸 3-아미노-4-((테트라히드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트(200 mg, 0.76 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이를 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(120 mg, 31%); LC-MS: m/z 505.0 (M-1).
단계-d: 1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산 (2d)의 합성
중간체 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 53%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.91 (bs, 1H), 12.57 (bs, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.02-7.64 (m, 4H), 7.37 (s, 1H), 4.96-4.94 (m, 1H), 4.20-4.05 (m, 2H), 3.59-3.52 (m, 2H), 2.60-2.44 (m, 2H), 1.79-1.76 (m, 2H); LC-MS: m/z 477.0 (M-1).
단계-e: N -(2-메톡시에틸)-1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 (2e)의 합성
중간체 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 18%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.25 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.71-7.64 (m, 2H), 7.33 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.16-7.13 (m, 1H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.23-5.17 (m, 1H), 4.11-4.10 (m, 2H), 3.65 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 3.35-3.32 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 2.66-2.60 (m, 2H), 1.92-1.90 (m, 2H); LC-MS: m/z 536.0 (M+1)+.
실시예 3d 및 3e. 1-(1-메틸피페리딘-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00014
단계-a: 에틸 4-((1-메틸피페리딘-4-일)아미노)-3-니트로벤조에이트 (3a)의 합성
DMFA(5 mL) 중 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트(500 mg, 2.2 mmol)의 교반된 용액에, 1-메틸피페리딘-4-아민(0.30 mL, 2.6 mmol)과 N-에틸디이소프로필아민(0.8 mL, 5.0 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃까지 가열하고, 동일한 온도에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(620 mg, 92%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62 (s, 1H), 8.25 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.30 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.71 (bs, 1H), 2.69-2.66 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 2.16-2.13 (m, 2H), 1.96-1.93 (m, 2H), 1.67-1.58 (m, 2H), 1.33 (t, J = 7.6 Hz, 3H); LC-MS: m/z 307.7 (M+1)+.
단계-b: 에틸 3-아미노-4-((1-메틸피페리딘-4-일)아미노)벤조에이트 (3b)의 합성
중간체 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-((1-메틸피페리딘-4-일)아미노)-3-니트로벤조에이트를 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.19-7.16 (m, 2H), 6.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.96 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.78 (bs, 2H), 4.18 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.37-3.31 (m, 1H), 2.86-2.83 (m, 2H), 2.25 (s, 3H), 2.19-2.13 (m, 2H), 1.94-1.91 (m, 2H), 1.54-1.45 (m, 2H), 1.26 (t, J = 6.8 Hz, 3H);
LC-MS: m/z 278.2 (M+1)+.
단계-c: 에틸 1-(1-메틸피페리딘-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트 (3c)의 합성
중간체 2c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-((1-메틸피페리딘-4-일)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 15%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.6 (bs, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.35 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.74-4.68 (m 1H), 4.34 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.01-2.98 (m, 2H), 2.67-2.56 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.20-2.15 (m, 2H), 1.79-1.76 (m, 2H), 1.35 (t, J = 6.9 Hz, 3H); LC-MS: m/z 520.1 (M+1)+.
단계-d: 1-(1-메틸피페리딘-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산 (3d)의 합성
중간체 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-(1-메틸피페리딘-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 56%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.58 (bs, 1H), 7.34 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 4.79-4.68 (m 1H), 3.02-2.99 (m, 2H), 2.57-2.54 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.21-2.15 (m, 2H), 1.79-1.77 (m, 2H); LC-MS: m/z 491.6 (M+1)+.
단계-e: N -(2-메톡시에틸)-1-(1-메틸피페리딘-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 (3e)의 합성
중간체 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(1-메틸피페리딘-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 40%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.70-7.58 (m, 3H), 7.35 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.75-4.65 (m, 1H), 3.50-3.43 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 3.02-2.99 (m, 2H), 2.60-2.54 (m, 2H), 2.31 (s, 3H), 2.20-2.15 (m, 2H), 1.79-1.76 (m, 2H); LC-MS: m/z 549.2 (M+1)+.
실시예 4d 및 4e. 1-(1-메틸피롤리딘-3-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-(1-메틸피롤리딘-3-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성:
Figure pct00015
단계-a: 에틸 4-((1-메틸피롤리딘-3-일)아미노)-3-니트로벤조에이트 (4a)의 합성
중간체 3a에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트와 1-메틸피롤리딘-3-아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 79%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 8.39 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.98 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.32-4.36 (m, 3H), 2.80-2.75 (m, 1H), 2.70-2.59 (m, 2H), 2.42-2.30 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 1.73-1.65 (m, 1H), 1.31 (t, J = 7.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 294.1 (M+1)+.
단계-b: 에틸 3-아미노-4-((1-메틸피롤리딘-3-일)아미노)벤조에이트 (4b)의 합성
중간체 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-((1-메틸피롤리딘-3-일)아미노)-3-니트로벤조에이트를 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 78%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.19-7.15 (m, 2H), 6.38 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 4.81 (s, 2H), 4.18 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 3.95 (bs, 1H), 2.74-2.70 (m, 1H), 2.44-2.34 (m, 2H), 2.28-2.22 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 1.67-1.63 (m, 1H), 1.25 (t, J = 7.3 Hz, 3H); LC-MS: m/z 264.1 (M+1)+.
단계-c: 에틸 1-(1-메틸피롤리딘-3-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트 (4c)의 합성
중간체 2c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-((1-메틸피롤리딘-3-일)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 수득한 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; LC-MS: m/z 506.1 (M+1)+.
단계-d: 1-(1-메틸피롤리딘-3-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산 (4d)의 합성
중간체 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-(1-메틸피롤리딘-3-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고, THF, MeOH 및 물(2:2:1)을 용매로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 13%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6+D2O): δ 8.03 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.59-7.54 (m, 2H), 7.32 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.50 (bs, 1H), 3.86-3.75 (m, 2H), 3.35 (bs, 1H), 3.07-3.05 (m, 1H), 2.91 (s, 3H), 2.28-2.0 (m, 2H); LC-MS: m/z 478.1 (M+1)+.
단계-e: N -(2-메톡시에틸)-1-(1-메틸피롤리딘-3-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 (4e)의 합성
중간체 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(1-메틸피롤리딘-3-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 30%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.10 (bs, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.76 (bs, 1H), 7.68 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62 (bs, 1H), 7.30 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.50 (bs, 1H), 3.52-3.44 (m, 4H), 3.30 (s, 3H), 2.76-2.65 (m, 2H), 2.50 (s, 3H, DMSO 피크와 병합됨), 2.31-2.30 (m, 2H), 2.15-2.13 (m, 2H); LC-MS: m/z 535.0 (M+1)+.
실시예 5. N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성:
Figure pct00016
단계-a: 메틸 1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트 (5a)의 합성
DMFA(5 mL) 중 4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-아민(216 mg, 1.4 mmol)의 교반된 용액에, 1,1'-티오카르보닐디이미다졸(494 mg, 2.8 mmol)을 첨가하고, 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켰다. EDC.HCl(533 mg, 2.8 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 10분 동안 가열한 후, 메틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트(250 mg, 1.4 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이를 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(110 mg, 23%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.01 (bs, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.73 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 2.50 (bs, 4H, DMSO 피크와 병합됨), 1.78 (bs, 4H); LC-MS: m/z 341.0 (M-1).
단계-b: 1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산 (5b)의 합성
중간체 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 메틸 1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고, THF, MeOH 및 물(2:2:1)을 용매로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 83%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.73 (dd, J = 0.8 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.61 (s, 3H), 2.50 (bs, 4H, DMSO 피크와 병합됨), 1.78 (bs, 4H); LC-MS: m/z 327.0 (M-1).
단계-c: N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 (5c)의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 30%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.0 (bs, 1H), 8.34 (bs, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.48-3.42 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 2.50 (bs, 4H, DMSO 피크와 병합됨), 1.78 (bs, 4H); LC-MS: m/z 384.0 (M-1).
실시예 6. 2-((6,6-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)- N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00017
단계-a: ((4,4-디메틸시클로헥스-1-엔-1-일)옥시)트리메틸실란의 합성
0℃에서, DCM(180 mL) 중 4,4-디메틸시클로헥산-1-온(3.0 g, 23.8 mmol)의 용액에, 트리에틸아민(9.95 mL, 71.42 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 5분 동안 교반한 후, 트리메틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트(6.5 g, DCM 54 mL 중 29.28 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 탄산수소나트륨 포화 용액(30 mL)과 물(100 mL)로 켄칭하였다. 유기층을 분리하고, 물(2 X 50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하고(3.8 g, 81%), 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.74 (t, J = 4.0 Hz, 1H), 1.99-1.97 (m, 2H), 1.80 (d, J = 2.0 Hz, 2H), 1.39 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.16 (s, 6H), 0.15 (s, 9H).
단계-b: 6,6-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-아민의 합성
실온에서, THF(40 mL) 및 물(40 mL) 중 ((4,4-디메틸시클로헥스-1-엔-1-일)옥시)트리메틸실란(3.8 g, 19.16 mmol)의 용액에, N-브로모숙신이미드(4.09 g, 23.0 mmol)와 아세트산나트륨(0.22 g, 2.7 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 2시간 동안 교반하였다. 티오우레아(1.43 g, 18.8 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 교반 하에서 80℃에서 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온까지 냉각시키고, 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응 혼합물을 물(30 mL)로 켄칭하고, DCM(2 X 50 mL)으로 추출하였다. 수성층을 2 M 수산화나트륨을 이용하여 염기성화시키고(pH 약 9), 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하고(1.3 g, 37%), 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.55 (bs, 2H), 2.35 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.26 (s, 2H), 1.46 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 0.95 (s, 6H); LC-MS: m/z 183.1 (M+1)+.
단계-c: 에틸 2-((6,6-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
DMFA(10 mL) 중 6,6-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-아민(809 mg, 4.44 mmol)의 교반된 용액에, 1,1'-티오카르보닐디이미다졸(1.58 g, 8.88 mmol)을 첨가하고, 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, EDC.HCl(1.70 g, 8.88 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 10분 동안 가열한 후, 에틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트(800 mg, 4.44 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 이를 100℃에서 16시간 동안 가열하고, 실온까지 냉각시켰다. 반응 혼합물을 물(50 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(500 mg, 32%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.10 (bs, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.30 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.61 (s, 3H), 2.50 (DMSO 피크와 병합된 2H), 2.33 (s, 2H), 1.56 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.33 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.00 (s, 6H); LC-MS: m/z 385.1 (M+1)+.
단계-d: 2-((6,6-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
THF(4 mL), 에탄올(4 mL) 및 물(2 mL)의 혼합물 중 에틸 2-((6,6-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(500 mg, 1.30 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(136 mg, 3.25 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 가열한 후, 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켜 고체를 수득하고, 이를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(300 mg, 65%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.00 (s, 1H), 7.86 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 2.50 (DMSO 피크와 병합된 2H), 2.38 (s, 2H), 1.58 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.01 (s, 6H); LC-MS: m/z 357.1 (M+1)+.
단계-e: 2-((6,6-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)- N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, DMFA(2 mL) 중 2-((6,6-디메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(100 mg, 0.28 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.04 mL, 0.28 mmol)과 HBTU(106 mg, 0.28 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올(0.02 mL, 0.28 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(20 mL)로 희석하고, 15분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켰다. 잔류물을 용리액으로 DCM 중 2% MeOH을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(50 mg, 40%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.0 (bs, 1H), 8.34 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.60 (bs, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.56-3.42 (m, 8H), 2.50 (DMSO 피크와 병합된 2H), 2.32 (m, 2H), 1.55 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 1.00 (s, 6H); LC-MS: m/z 444.1 (M+1)+.
실시예 7. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00018
단계-a: 트리메틸((4-메틸시클로헥스-1-엔-1-일)옥시)실란의 합성
0℃에서, DCM(50 mL) 중 4-메틸시클로헥산-1-온(2.0 g, 17.8 mmol)의 용액에, 트리에틸아민(7.5 mL, 53.4 mmol)을 첨가하고, 5분 동안 교반한 후, 트리메틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트(4.95 g, DCM 30 mL 중 22.3 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 1.5시간 동안 교반한 후, 탄산수소나트륨 포화 용액(20 mL)과 물(100 mL)로 켄칭하였다. 유기층을 분리하고, 물(2 X 100 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(3.4 g, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 4.74-4.71 (m, 1H), 2.66-2.49 (m, 1H), 2.16-1.99 (m, 2H), 1.89-1.88 (m, 1H), 1.62-1.57 (m, 2H), 1.25-1.22 (m, 1H), 0.89 (d, J = 2.4 Hz, 3H), 0.27 (s, 9H).
단계-b: 6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-아민의 합성
실온에서, THF(25 mL) 및 물(25 mL) 중 트리메틸((4-메틸시클로헥스-1-엔-1-일)옥시)실란(3.3 g, 17.9 mmol)의 용액에, N-브로모숙신이미드(3.83 g, 21.5 mmol)와 아세트산나트륨(0.20 g, 2.5 mmol)을 첨가한 후, 2시간 동안 교반하였다. 티오우레아(1.43 g, 18.8 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 교반 하에서 80℃에서 6시간 동안 가열하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응 혼합물을 물(30 mL)로 켄칭하고, DCM(2 X 100 mL)으로 추출하였다. 수성층을 2 M 수산화나트륨을 이용하여 염기성화시키고(pH 약 9), DCM(3 X 100 mL)으로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.9 g, 63%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.55 (bs, 2H), 2.57-2.51 (m, 1H), 2.40-2.36 (m, 2H), 2.12-2.05 (m, 1H), 1.79-1.74 (m, 2H), 1.35-1.34 (m, 1H), 1.00 (d, J = 6.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 169.2 (M+1)+.
단계-c: 에틸 1-메틸-2-((6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
DMFA(10 mL) 중 6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-아민(400 mg, 2.38 mmol)의 교반된 용액에, 1,1'-티오카르보닐디이미다졸(848 mg, 4.76 mmol)을 첨가하고, 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, EDC.HCl(914 mg, 4.76 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 10분 동안 가열한 후, 에틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트(462 mg, 2.38 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이를 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(400 mg, 45%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.03 (bs, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.73 (dd, J = 1.0 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.30 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.62 (s, 3H), 2.67-2.60 (m, 1H), 2.50 (DMSO 피크와 병합된 2H), 2.18-2.11 (m, 1H), 1.87-1.84 (m, 2H), 1.46-1.42 (m, 1H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 6.3 Hz, 3H); LC-MS: m/z 371.05 (M+1)+.
단계-d: 1-메틸-2-((6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.01 (bs, 1H), 12.83 (bs, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H), 2.67-2.66 (m, 1H), 2.52 (DMSO 피크와 병합된 2H), 2.33-2.21 (m, 1H), 1.91-1.86 (m, 2H), 1.48-1.43 (m, 1H), 1.06 (d, J = 6.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 343.05 (M+1)+.
단계-e: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 48%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.99 (bs, 1H), 8.35 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.62 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.55-3.50 (m, 4H), 3.47-3.42 (m, 4H), 2.67-2.66 (m, 1H), 2.52 (DMSO 피크와 병합된 2H), 2.17-2.16 (m, 1H), 1.90-1.88 (m, 2H), 1.45-1.40 (m, 1H), 1.05 (d, J = 6.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 430.10 (M+1)+.
실시예 8. 2-((5,6-디히드로-4 H -시클로펜타[ d ]티아졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00019
Figure pct00020
단계-a: 5,6-디히드로-4 H -시클로펜타[ d ]티아졸-2-아민의 합성
시클로펜타논(1.0 g, 11.9 mmol), 티오우레아(1.8 g, 23.8 mmol) 및 요오드(3.0 g, 11.9 mmol)의 혼합물을 밀봉된 튜브 내에서 110℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 온수(30 mL)를 첨가하고, 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 디에틸 에테르(2 X 20 mL)로 추출하고, 수성층을 고체 탄산수소나트륨을 이용하여 염기성화시키고(pH 약 8), DCM(3 X 30 mL)으로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 생성된 잔류물을 용리액으로 DCM 중 10% 메탄올과 0.1% 암모니아 수용액을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(160 mg, 10%); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.77 (bs, 2H), 2.79-2.74 (m, 2H), 2.68-2.64 (m, 2H), 2.41-2.34 (m, 2H); LC-MS: m/z 141.1 (M+1)+.
단계-b: 에틸 2-((5,6-디히드로-4 H -시클로펜타[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 5a에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트와 5,6-디히드로-4H-시클로펜타[d]티아졸-2-아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 23%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.0 (bs, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.30 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.56 (s, 3H), 2.80-2.72 (m, 4H), 2.36-2.33 (m, 2H), 1.33 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 343.0 (M+1)+.
단계-c: 2-((5,6-디히드로-4 H -시클로펜타[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((5,6-디히드로-4H-시클로펜타[d]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 55%); LC-MS: m/z 315.1 (M+1)+.
단계-d: 2-((5,6-디히드로-4 H -시클로펜타[ d ]티아졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((5,6-디히드로-4H-시클로펜타[d]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 13%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.0 (bs, 1H), 8.36 (bs, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.67 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.47-3.42 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 2.77-2.67 (m, 4H), 2.36-2.33 (m, 2H); LC-MS: m/z 372.0 (M+1)+.
실시예 9. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4- c ]피리딘-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 히드로클로라이드의 합성
Figure pct00021
Figure pct00022
단계-a: tert-부틸 2-아미노-6,7-디히드로티아졸로[5,4- c ]피리딘-5(4 H )-카르복실레이트의 합성
실온에서, THF(70 mL) 중 tert-부틸 4-옥소피페리딘-1-카르복실레이트(3.0 g, 15.07 mmol)의 교반된 용액에, 피롤리돈 히드로브로마이드(7.47 g, 15.07 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 10분 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 여과하여 침전된 고체를 제거하고, 여과액을 농축시켰다. 수득한 잔류물을 에탄올(80 mL)에 용해시킨 후, 티오우레아(1.53 g, 20.14 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 DCM 중 5% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(450 mg, 12%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.80 (s, 2H), 4.29 (s, 2H), 3.56 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.43 (bs, 2H), 1.41 (s, 9H); LC-MS: m/z 256.2 (M+1)+.
단계-b: tert -부틸 2-((5-(에톡시카르보닐)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-6,7-디히드로티아졸로[5,4- c ]피리딘-5(4 H )-카르복실레이트의 합성
DMFA(6 mL) 중 tert-부틸 2-아미노-6,7-디히드로티아졸로[5,4-c]피리딘-5(4H)-카르복실레이트(424 mg, 1.66 mmol)의 교반된 용액에, 1,1'-티오카르보닐디이미다졸(593 mg, 3.33 mmol)을 첨가하고, 용액을 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, EDC.HCl(639 mg, 3.33 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 10분 동안 가열한 후, 에틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트(300 mg, 1.66 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 이를 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 DCM 중 0.4% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(130 mg, 18%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.10 (bs, 1H), 8.03 (bs, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.39 (bs, 2H), 4.30 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.67-3.59 (m, 5H), 2.50 (DMSO 피크와 병합된 2H), 1.43 (s, 9H), 1.34 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 458.2 (M+1)+.
단계-c: 2-((5-( tert -부톡시카르보닐)-4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4- c ]피리딘-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, tert-부틸 2-((5-(에톡시카르보닐)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-6,7-디히드로티아졸로[5,4-c]피리딘-5(4H)-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고, THF, 메탄올, 물(2:2:1)을 용매로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 70%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.50 (bs, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.66 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.60 (s, 3H), 2.66-2.63 (m, 2H), 1.43 (s, 9H); LC-MS: m/z 430.1 (M+1)+.
단계-d: tert -부틸 2-((5-((2-(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에틸)카르바모일)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-6,7-디히드로티아졸로[5,4- c ]피리딘-5(4 H )-카르복실레이트의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((5-(tert-부톡시카르보닐)-4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에탄-1-아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 40%); LC-MS: m/z 631.2 (M+1)+.
단계-e: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로티아졸로-[5,4- c ]피리딘-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 히드로클로라이드의 합성
0℃에서, 1,4-디옥산(0.8 mL) 중 tert-부틸 2-((5-((2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에틸)카르바모일)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-6,7-디히드로티아졸로[5,4-c]피리딘-5(4H)-카르복실레이트(50 mg, 0.08 mmol)의 교반된 용액에, 1,4-디옥산 중 4 M HCl(0.3 mL)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 디에틸 에테르를 이용하여 분쇄하고, 용매를 디캔팅하였다. 수득한 고체를 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(12 mg, 33%); 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.01 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.35 (s, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.71-3.53 (m, 10H), 3.05 (t, J = 6.0 Hz, 2H); LC-MS: m/z 417.1 (M+1)+.
실시예 10. 2-((5-아세틸-4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4- c ]피리딘-2-일)아미노)- N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00023
단계-a: 1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4- c ]피리딘-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산 트리플루오로아세트산 염의 합성
0℃에서, DCM(5 mL) 중 2-((5-(tert-부톡시카르보닐)-4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(170 mg, 0.39 mmol)의 교반된 용액에, TFA(0.1 mL, 1.19 mmol)를 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 수득한 잔류물을 디에틸 에테르를 이용하여 분쇄하고, 용매를 디캔팅하였다. 잔류물을 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(180 mg, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.22 (s, 2H), 8.04 (s, 1H), 7.81 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.23 (s, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.48-3.46 (m, 2H), 2.89 (bs, 2H); LC-MS: m/z 330.1(M+1)+.
단계-b: 2-((5-아세틸-4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4- c ]피리딘-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
0℃에서, 피리딘(2 mL) 중 1-메틸-2-((4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산 트리플루오로아세트산 염(180 mg, 0.55 mmol)의 교반된 용액에, 아세트산 무수물(0.06 mL, 0.6 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(15 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 1 N HCl(30 mL), 물(20 mL), 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시키고, 수득한 잔류물을 디에틸 에테르를 이용하여 분쇄하고, 용매를 디캔팅하였다. 수득한 고체를 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(70 mg, 46%); LC-MS: m/z 372.1 (M+1)+.
단계-c: 2-((5-아세틸-4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4- c ]피리딘-2-일)아미노)- N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((5-아세틸-4,5,6,7-테트라히드로티아졸로[5,4-c]피리딘-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 29%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.0 (bs, 1H), 8.38 (s, 1H), 7.96 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.62-4.49 (m, 3H), 3.78-3.73 (m, 2H), 3.60-3.41 (m, 10H), 3.30 (DMSO 수분 피크와 병합된 2H), 2.09 (s, 3H); LC-MS: m/z 459.1 (M+1)+.
실시예 11. 2-((6,7-디히드로-4 H -피라노[4,3- d ]티아졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00024
단계-a: 메틸 2-((6,7-디히드로-4 H -피라노[4,3- d ]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 5a에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 메틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트와 6,7-디히드로-4H-피라노[4,3-d]티아졸-2-아민을 출발 물질로 사용하고 16시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 20%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.93 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.60 (s, 3H), 2.50 (2H, DMSO 피크와 병합됨); LC-MS: m/z 343.0 (M-1).
단계-b: 2-((6,7-디히드로-4 H -피라노[4,3- d ]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 메틸 2-((6,7-디히드로-4H-피라노[4,3-d]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고, THF, 메탄올 및 물(2:2:1)을 용매로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 52%); δ 12.40 (bs, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.92 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.59 (s, 3H), 2.50 (2H, DMSO 피크와 병합됨); LC-MS: m/z 330.7 (M+1)+.
단계-c: 2-((6,7-디히드로-4 H -피라노[4,3- d ]티아졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6,7-디히드로-4H-피라노[4,3-d]티아졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 1.2% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하였다(수율: 34%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.40 (bs, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.66 (bs, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.58 (bs, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.58 (s, 3H), 3.48-3.42 (m, 4H), 3.27 (s, 3H), 2.50 (2H, DMSO 피크와 병합됨); LC-MS: m/z 387.6 (M+1)+.
실시예 12. 2-((1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성:
Figure pct00025
단계-a: N -(1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)-1 H -이미다졸-1-카르보티오아미드의 합성
실온에서, 아세토니트릴(10 mL) 중 1H-벤조[d]이미다졸-2-아민(1.0 g, 7.5 mmol)의 용액에, 1,1'-티오카르보닐디이미다졸(1.34 g, 7.5 mmol)을 첨가하고, 이를 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 수득한 고체를 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.1 g, 60%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.18 (bs, 2H), 8.55 (s, 1H), 7.93 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.63-7.59 (m, 2H), 7.36-7.32 (m, 2H), 6.99 (d, J = 1.2 Hz, 1H).
단계-b: 메틸 2-((1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
DMFA(5 mL) 중 N-(1H-벤조[d]이미다졸-2-일)-1H-이미다졸-1-카르보티오아미드(188 mg, 0.77 mmol)의 교반된 용액에, EDC.HCl(297 mg, 1.5 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 60℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시킨 후, 메틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트(150 mg, 0.77 mmol)를 첨가하고, 이를 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 DCM 중 2% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(40 mg, 16%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.12 (bs, 2H), 8.05 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37-7.34 (m, 3H), 7.12-7.08 (m, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.65 (s, 3H); LC-MS: m/z 322.0 (M+1)+.
단계-c: 2-((1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
중간체 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 메틸 2-((1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고, 메탄올, THF 및 물을 용매로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 92%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.0 (bs, 3H), 7.92 (s, 1H), 7.89 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45-7.41 (m, 2H), 7.29-7.26 (m, 2H), 3.68 (s, 3H); LC-MS: m/z 308.1 (M+1)+.
단계-d: 2-((1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 14%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.10 (bs, 2H), 8.33 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.35-7.30 (m, 3H), 7.11-7.07 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.50-3.42 (m, 4H), 3.29 (s, 3H); LC-MS: m/z 365.0 (M+1)+.
실시예 13 및 14. 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성:
Figure pct00026
단계-a: 4-(트리플루오로메톡시)벤젠-1,2-디아민의 합성
메탄올(40 mL) 중 메틸 2-니트로-5-(트리플루오로메톡시)아닐린(2.0 g, 9.0 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C(1.0 g)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 수소 가스 하에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.6 g, 93%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.29 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 4.80 (s, 2H), 4.58 (s, 2H); LC-MS: m/z 193.0 (M+1)+.
단계-b: 에틸 2-(1 H -이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실온에서, 아세토니트릴(10 mL) 중 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(500 mg, 2.28 mmol)의 용액에, 1,1'-티오카르보닐디이미다졸(529 mg, 2.97 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 이를 실온까지 냉각시키고, 30분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(500 mg, 66%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.40 (bs, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.40 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.99 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.35 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.79 (s, 3H), 1.36 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 328.2 (M-1).
단계-c: 에틸 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 12 단계-b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-(1H-이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 4-(트리플루오로메톡시)벤젠-1,2-디아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 27%); 1H NMR-VT 90℃에서(400 MHz, DMSO-d6): δ 12.0 (bs, 2H), 8.09 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.28 (s, 1H), 7.0 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.35 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.63 (s, 3H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 420.0 (M+1)+.
단계-d: 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
중간체 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 77%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.60 (bs, 3H), 8.05 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.09 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H); LC-MS: m/z 392.0 (M+1)+.
단계-e: N-(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 43%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 2H), 8.37 (bs, 1H), 8.0 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.68 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.01 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.59-3.43 (m, 4H), 3.29 (s, 3H); LC-MS: m/z 449.0 (M+1)+.
실시예 15. 1-메틸-2-((1-메틸-5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
Figure pct00027
단계-a: N -메틸-2-니트로-4-(트리플루오로메톡시)아닐린의 합성
0℃에서, DMFA(20 mL) 중 2-니트로-4-(트리플루오로메톡시)아닐린(2.0 mg, 9.0 mmol)의 교반된 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(0.4 g, 10.0 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 요오드화메틸(0.56 mL, 9.0 mmol)을 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 5% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.8 g, 85%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.28 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 2.4 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 7.10 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 2.98 (d, J = 5.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 237.0 (M+1)+.
단계-b: N 1 -메틸-4-(트리플루오로메톡시)벤젠-1,2-디아민의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, N-메틸-2-니트로-4-(트리플루오로메톡시)아닐린을 출발 물질로 사용하고 6시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 92%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.44 (s, 1H), 6.42 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.84 (bs, 2H), 2.70 (s, 3H); LC-MS: m/z 207.0 (M+1)+.
단계-c: 에틸 1-메틸-2-((1-메틸-5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 12 단계-b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-(1H-이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 N1-메틸-4-(트리플루오로메톡시)벤젠-1,2-디아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 37%); LC-MS: m/z 434.2 (M+1)+.
단계-d: 1-메틸-2-((1-메틸-5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((1-메틸-5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 53%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.5 (bs, 2H), 8.10 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.41-7.37 (m, 2H), 7.08 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.68 (s, 3H); LC-MS: m/z 406.1 (M+1)+.
실시예 16. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00028
0℃에서, DMFA(1.0 mL) 중 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(50 mg, 0.16 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.03 mL, 0.16 mmol)과 HBTU(62 mg, 0.16 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 2-아미노에탄-1-올(10 mg, 0.16 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(20 mL)로 희석하고, 15분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 디에틸 에테르로 세정하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다(25 mg, 44%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.36 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.78-7.76 (m, 1H), 7.48 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 4.72 (bs, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.54 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.37-3.34 (m, 2H); LC-MS: m/z 352.2 (M+1)+.
실시예 17. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00029
단계-a: 에틸 4-(메틸아미노)-3-니트로벤조에이트의 합성
실온에서, DMFA(100 mL) 중 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트(30.0 g, 131 mmol)의 용액에, 메틸아민(26.8 mL(40% 수용액), 262 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(1000 mL)로 희석하고, 1시간 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 생성물을 황색 고체로 수득하였다(28.0 g, 96%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.59 (bs, 1H), 7.99 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.29 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.01 (d, J = 5.2 Hz, 3H), 1.31 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 225.0 (M+1)+.
단계-b: 에틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트의 합성
메탄올(300 mL) 중 에틸 4-(메틸아미노)-3-니트로벤조에이트(27.0 g, 120 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C의 슬러리(에탄올 15 mL 중 2.8 g)를 첨가하였다. 플라스크를 수소 하(60 psi) 실온에서 Parr 진탕기 내에서 3시간 동안 보관하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(19.0 g, 82%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.23 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz 1H), 7.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.39 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.38-5.37 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.18 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.77 (d, J = 5.2 Hz, 3H), 1.26 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 195.1 (M+1)+.
단계-c: 에틸 2-아미노-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실온에서, THF(68 mL) 및 물(170 mL) 중 에틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트(17.0 g, 87.6 mmol)의 용액에, 브롬화시안(11.13 g, 105.2 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 탄산수소나트륨 포화 용액을 이용하여 염기성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(18.0 g, 94%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.70 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.64 (s, 2H), 4.27 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.53 (s, 3H), 1.32 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 220.1 (M+1)+.
단계-d: 에틸 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
0℃에서, 1,4-디옥산(40 mL) 중 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(4.0 g, 18.3 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(1.09 g, 27.4 mmol)을 분할하여 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 2-클로로벤조[d]옥사졸(2.79 g, 18.3 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수(100 mL) 위에 붓고, 실온에서 5분 내지 10분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시키고, 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(4.0 g, 60%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.53-7.43 (m, 3H), 7.22 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 337.0 (M+1)+.
단계-e: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
THF(20 mL), 에탄올(20 mL) 및 물(10 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(4.0 g, 11.90 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(1.25 g, 29.76 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반 하에서 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물(60 mL)에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켜 고체를 수득하고, 이를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(3.4 g, 93%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.60 (bs, 2H), 8.20 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.51-7.48 (m, 2H), 7.44 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.23-7.20 (m, 1H), 7.15-7.11 (m, 1H), 3.64 (s, 3H); LC-MS: m/z 309.1 (M+1)+.
단계-f: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, DMFA(30 mL) 중 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(3.0 g, 9.74 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(4.36 mL, 24.25 mmol)과 HBTU(4.06 g, 10.71 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올(1.02 g, 9.74 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(300 mL)로 희석하고, 30분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시키고, 용리액으로 DCM 중 5% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다(2.9 g, 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.43 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 4.60 (bs, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.57-3.42 (m, 8H); LC-MS: m/z 396.2 (M+1)+.
실시예 18. N -(2-아미노에틸)-2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 히드로클로라이드의 합성
Figure pct00030
단계-a: tert -부틸 (2-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에틸)카르바메이트의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 tert-부틸 (2-아미노에틸)카르바메이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 51%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.41 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.23-7.19 (m, 1H), 7.14- 7.09 (m, 1H), 6.92 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.34-3.33 (m, DMSO 수분 피크와 병합된 2H), 3.15-3.10 (m, 2H), 1.38 (s, 9H); LC-MS: m/z 451.55 (M+1)+.
단계-b: N -(2-아미노에틸)-2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 히드로클로라이드의 합성
0℃에서, THF(2 mL) 중 tert-부틸 (2-(2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미도)에틸)카르바메이트(50 mg, 0.11 mmol)의 용액에, 1,4-디옥산 중 4 N HCl(0.5 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 회전식 증발기 상에서 농축시키고, 디에틸 에테르(10 mL) 중에서 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(35 mg, 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.96 (bs, 3H), 7.86 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.25 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.17 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.55 (q, J = 5.7 Hz, 2H), 3.03-2.99 (m, 2H); LC-MS: m/z 351.10 (M+1)+.
실시예 19. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(2-(디메틸아미노)아세트아미도)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00031
단계-a: tert -부틸 (2-(2-(디메틸아미노)아세트아미도)에틸)카르바메이트의 합성
0℃에서, DMFA(10 mL) 중 디메틸글리신(1.0 g, 9.71 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(1.69 mL, 9.71 mmol)과 HBTU(3.68 g, 9.71 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, tert-부틸 (2-아미노에틸)카르바메이트(1.55 g, 9.71 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(50 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(3 X 30 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 수득한 고체를 디에틸 에테르(20 mL) 중에서 5분 동안 교반하고, 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(600 mg, 25%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.77 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 6.83 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.11 (q, J = 6.2 Hz, 2H), 2.99 (q, J = 6.1 Hz, 2H), 2.82 (s, 2H), 2.18 (s, 6H), 1.37 (s, 9H); LC-MS: m/z 246.15 (M+1)+.
단계-b: N -(2-아미노에틸)-2-(디메틸아미노)아세트아미드 트리플루오로아세테이트의 합성
0℃에서, DCM(15 mL) 중 tert-부틸 (2-(2-(디메틸아미노)아세트아미도)에틸)카르바메이트(600 mg, 2.45 mmol)의 용액에, TFA(0.56 mL, 7.34 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 회전식 증발기 상에서 농축시키고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(600 mg, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.75 (bs, 1H), 8.75 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.90 (bs, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.38 (q, J = 6.2 Hz, 2H), 2.91 (q, J = 5.9 Hz, 2H), 2.82 (s, 6H); LC-MS: m/z 146.20 (M+1)+.
단계-c: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(2-(디메틸아미노)아세트아미도)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, DMFA(4 mL) 중 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(100 mg, 0.32 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.17 mL, 0.97 mmol)과 HBTU(123 mg, 0.32 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, N-(2-아미노에틸)-2-(디메틸아미노)아세트아미드 트리플루오로아세테이트(145 mg, 0.39 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(15 mL)로 희석하였다. 수득한 고체를 여과하고, 디에틸 에테르로 세정하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다(40 mg, 28%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.44 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.92 (bs, 1H), 7.74 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.49-7.47 (m, 2H), 7.43 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.37 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.35 (DMSO 수분 피크와 병합된 2H), 2.86 (s, 2H), 2.19 (s, 6H); LC-MS: m/z 436.0 (M+1)+.
실시예 20. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸- N -(2-모르폴리노에틸)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-모르폴리노에탄-1-아민과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.21 (bs, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.21 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.58 (t, J = 3.6 Hz, 4H), 3.41 (q, J = 6.4 Hz, 2H), 3.30 (DMSO 수분 피크와 병합된 2H), 2.43 (bs, 4H); LC-MS: m/z 421.2 (M+1)+.
실시예 21. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(디메틸아미노)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, N,N-디메틸에탄-1,2-디아민과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.21 (bs, 1H), 8.29 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48-7.42 (m, 3H), 7.21 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.39-3.35 (m, 2H), 2.50-2.42 (m, 2H), 2.19 (s, 6H); LC-MS: m/z 379.2 (M+1)+.
실시예 22. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-((4,5-디히드로-1 H -이미다졸-2-일)아미노)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, N 1-(4,5-디히드로-1H-이미다졸-2-일)에탄-1,2-디아민과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 2H), 8.52 (bs, 1H), 8.20 (bs, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.52-7.43 (m, 3H), 7.21 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 3.45-3.43 (m, 2H), 3.36-3.34 (m, 4H); LC-MS: m/z 417.05 (M-1)-.
실시예 23. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-히드록시프로필)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-아미노프로판-2-올과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.36 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.52-7.36 (m, 3H), 7.21-7.19 (m, 1H), 7.14-7.09 (m, 1H), 4.87-4.78 (m, 1H), 3.81 (q, J = 6.0 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.24-3.20 (m, 2H), 1.14 (d, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 366.2 (M+1)+.
실시예 24. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2,3-디히드록시프로필)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 3-아미노프로판-1,2-디올과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.31 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.77 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49-7.42 (m, 3H), 7.21 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.82 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.58 (bs, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.45-3.37 (m, 3H), 3.26-3.19 (m, 2H); LC-MS: m/z 382.1 (M+1)+.
실시예 25. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(2-히드록시프로폭시)에틸)-1,6-디메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(2-아미노에톡시)프로판-2-올과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.42 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.75 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49-7.42 (m, 3H), 7.21 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.57 (bs, 1H), 3.75 (q, J = 5.6 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.57-3.54 (m, 2H), 3.46-3.43 (m, 2H), 3.29-3.23 (m, 2H), 1.03 (d, J = 6.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 410.2 (M+1)+.
실시예 26. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 3-(아미노메틸)옥세탄-3-올과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.55 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 -7.42 (m, 3H), 7.21 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.14 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 5.90 (s, 1H), 4.52 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.41 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.59 (d, J = 6.0 Hz, 2H); LC-MS: m/z 394.2 (M+1)+.
실시예 27. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(2-히드록시-2-메틸프로폭시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(2-아미노에톡시)-2-메틸프로판-2-올과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.43 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 -7.42 (m, 3H), 7.21 (dd, J = 1.2 Hz, J = 7.6 Hz, 1H), 7.12 (dd, J = 1.2 Hz, J = 7.6 Hz, 1H), 4.34 (bs, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.57 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.47-3.43 (m, 2H), 3.20 (s, 2H), 1.09 (s, 6H); LC-MS: m/z 424.2 (M+1)+.
실시예 28. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸- N -(2-(피롤리딘-1-일)에틸)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(피롤리딘-1-일)에탄-1-아민과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.24 (bs, 1H), 8.38 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49-7.42 (m, 3H), 7.21 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 7.11 (t, J = 7.2 Hz, 1H) 3.69 (s, 3H), 3.48-3.37 (m, 2H), 2.64-2.57 (m, 2H), 2.50 (DMSO 피크에 병합된 4H), 1.66 (bs, 4H); LC-MS: m/z 405.2 (M+1)+.
실시예 29. 2-(2-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)아세트산의 합성
Figure pct00032
단계-a: 에틸 2-(2-(( tert -부톡시카르보닐)아미노)에톡시)아세테이트의 합성
0℃에서, THF(10 mL) 중 tert-부틸 (2-히드록시에틸)카르바메이트(1.0 g, 6.21 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(397 mg, 9.93 mmol)을 분할하여 첨가한 후, 요오드화칼륨(164 mg, 0.99 mmol)과 에틸브로모 아세테이트(2.07 g, 12.42 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수(60 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 X 60 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 디클로로메탄 중 1% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.0 g, 65%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.74 (bs, 1H), 4.14-4.08 (m, 4H), 3.45 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.08 (q, J = 6.2 Hz, 2H), 1.37 (s, 9H), 1.19 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 148.1 (M-Boc)+.
단계-b: 에틸 2-(2-아미노에톡시)아세테이트 트리플루오로아세트산 염의 합성
실온에서, DCM(5 mL) 중 에틸 2-(2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)에톡시)아세테이트(1.0 g, 4.05 mmol)의 교반된 용액에, 트리플루오로아세트산(1 mL)을 첨가하고, 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하고(1.1 g, 100%), 이를 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.88 (bs, 3H), 4.17 (s, 2H), 4.14 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.68 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 3.01 (q, J = 5.2 Hz, 2H), 1.21 (t, J = 7.0 Hz, 3H); LC-MS: m/z 148.2 (M+1)+.
단계-c: 에틸 2-(2-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)아세테이트의 합성
0℃에서, DMFA(2 mL) 중 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(150 mg, 0.48 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.26 mL, 1.46 mmol)과 HBTU(184 mg, 0.48 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 에틸 2-(2-아미노에톡시)아세테이트 트리플루오로아세테이트(129 mg, 0.53 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(6 mL)로 희석하고, 5분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(125 mg, 59%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.46 (bs, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49-7.47 (m, 2H), 7.43 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.14 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.15 (s, 2H), 4.12 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.65-3.62 (m, 5H), 3.47 (q, J = 5.8 Hz, 2H), 1.19 (t, J = 7.0 Hz, 3H); LC-MS: m/z 438.1 (M+1)+.
단계-d: 2-(2-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)아세트산의 합성
THF(1 mL), 에탄올(1 mL) 및 물(0.5 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 2-(2-(2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)아세테이트(110 mg, 0.25 mmol)의 용액에, 수산화리튬 1수화물(26 mg, 0.63 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 물(5 mL)에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켜 고체를 수득하고, 이를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(80 mg, 78%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.60 (bs, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50-7.43 (m, 3H), 7.22 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.13 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.64 (bs, 5H), 3.45 (q, J = 5.2 Hz, 2H); LC-MS: m/z 410.4 (M+1)+.
실시예 30. 2-(2-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)에틸 DL-발리네이트 히드로클로라이드
Figure pct00033
단계-a: ( tert -부톡시카르보닐)-DL-발린의 합성
실온에서, THF(25 mL) 및 물(20 mL) 중 DL-발린(2.0 g, 17.07 mmol)의 교반된 용액에, 수산화나트륨(0.82 g, 20.5 mmol)과 디-tert-부틸 디카르보네이트(4.09 g, 18.77 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시키고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 미정제 생성물(1.8 g)을 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계-b: 2-(2-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)에틸 ( tert -부톡시카르보닐)-DL-발리네이트의 합성
0℃에서, DMFA(5 mL) 중 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-N-(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미드(70 mg, 0.18 mmol)와 (tert-부톡시카르보닐)-DL-발린(42 mg, 0.19 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.04 mL, 0.21 mmol)과 HATU(80 mg, 0.21 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 X 30 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(20 mL), 염수 용액(20 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 디클로로메탄 중 4.1% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(40 mg, 38%); LC-MS: m/z 595.7 (M+1)+.
단계-c: 2-(2-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)에틸 DL-발리네이트 히드로클로라이드의 합성
10℃에서, 1,4-디옥산(5 mL) 중 2-(2-(2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)에틸 (tert-부톡시카르보닐)-DL-발리네이트(40 mg, 0.07 mmol)의 교반된 용액에, 1,4-디옥산 중 4 N HCl(0.03 mL, 0.13 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 18시간 동안 동결건조시켜 표제 화합물을 히드로클로라이드 염으로 수득하였다(19 mg, 53%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.50 (s, 1H), 8.52 (bs, 1H), 8.40 (bs, 3H), 8.09 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.25 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.17 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.43-4.40 (m, 2H), 4.28-4.25 (m, 2H), 3.95 (bs, 1H), 3.70-3.67 (s, 3H), 3.61-3.57 (m, 2H), 3.45-3.44 (m, 2H), 2.15-2.11 (m, 1H), 0.97 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 0.92 (d, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 495.1 (M+1)+.
실시예 31 및 32. 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00034
Figure pct00035
단계-a: 2-니트로-5-(트리플루오로메틸)페놀의 합성
아세트산(50 mL) 중 3-(트리플루오로메틸)페놀(5.0 g, 30.86 mmol)의 용액에, 60% 질산 수용액(3.5 mL)을 0℃에서 적가하였다. 이어서, 혼합물을 상기 온도에서 1.5시간 동안 교반하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 혼합물을 얼음물(80 mL)에 붓고, EtOAc(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 5% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.0 g, 16%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.75 (bs, 1H), 8.06 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 1.4 Hz, J = 8.3 Hz, 1H); LC-MS: m/z 206.0 (M-1)-.
단계-b: 2-아미노-5-(트리플루오로메틸)페놀의 합성
메탄올(15 mL) 중 2-니트로-5-(트리플루오로메틸)페놀(1.0 g, 4.83 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C(100 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 풍선 하에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 여과액을 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(850 mg, 99%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.58 (bs, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.66 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.18 (s, 2H); LC-MS: m/z 178.0 (M+1)+.
단계-c: 6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실온에서, 에탄올(10 mL) 중 2-아미노-5-(트리플루오로메틸)페놀(850 mg, 4.8 mmol)의 용액에, 칼륨 에틸 잔테이트(1.69 g, 10.56 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 냉수(50 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.0 g, 95%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.2 (bs, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 7.8 Hz, 1H); LC-MS: m/z 217.9 (M-1)-.
단계-d: 2-클로로-6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸의 합성
실온에서, 염화티오닐(4 mL) 중 6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-티올(500 mg, 2.28 mmol)의 용액에, 디메틸 포름아미드(촉매량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, 냉수(30 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 30 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(20 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(290 mg, 57%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.31 (s, 1H), 7.97 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.3 Hz, 1H).
단계-e: 에틸 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
0℃에서, 1,4-디옥산(8 mL) 중 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(240 mg, 1.09 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(109 mg, 2.74 mmol)을 첨가한 후, 2-클로로-6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸(290 mg, 1.31 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 냉수(15 mL)로 희석하고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시키고, 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(150 mg, 34%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.25 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.61-7.51 (m, 3H), 4.33 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 1.36 (t, J = 6.9 Hz, 3H); LC-MS: m/z 405.30 (M+1)+.
단계-f: 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산 (실시예 31)의 합성
THF(0.5 mL), 에탄올(0.5 mL) 및 물(0.25 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(80 mg, 0.20 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(20 mg, 0.50 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켜 고체를 수득하고, 이를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(55 mg, 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.80 (bs, 1H), 12.40 (bs, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.89 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.63-7.53 (m, 3H), 3.67 (s, 3H); LC-MS: m/z 377.05 (M+1)+.
단계-g: N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 (실시예 32)의 합성
0℃에서, DMFA(1.5 mL) 중 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(50 mg, 0.13 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.02 mL, 0.13 mmol)과 디페닐포스포릴 아지드(0.02 mL, 0.13 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 2-메톡시에틸아민(0.01 mL, 0.13 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(15 mL)로 희석하고, 15분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 디에틸 에테르로 세정하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(28 mg, 49%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.61-7.51 (m, 3H), 3.67 (s, 3H), 3.48-3.44 (m, 4H), 3.30 (s, 3H); LC-MS: m/z 434.1 (M+1)+.
실시예 33. N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00036
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 34%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.39 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.61-7.51 (m, 3H), 4.72 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.54-3.51 (m, 2H), 3.37-3.34 (m, 2H); LC-MS: m/z 420.0 (M+1)+.
실시예 34. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00037
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 50%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.46 (bs, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62-7.52 (m, 3H), 4.60 (bs, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.58-3.44 (m, 8H); LC-MS: m/z 464.20 (M+1)+.
실시예 35. N -(2-히드록시프로필)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-아미노프로판-2-올과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.35 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.82-7.79 (m, 2H), 7.61-7.51 (m, 3H), 4.76 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 3.84-3.80 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.26-3.21 (m, 2H), 1.09 (d, J = 6.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 434.2 (M+1)+.
실시예 36. 1-메틸- N -(2-(피롤리딘-1-일)에틸)-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(피롤리딘-1-일)에탄-1-아민과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.39 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.61-7.51 (m, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.43-3.38 (m, 2H), 2.61 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.5 (m, DMSO 피크에 병합된 4H), 1.69 (bs, 4H); LC-MS: m/z 473.1 (M+1)+.
실시예 37. 1-메틸- N -(2-(피페리딘-1-일)에틸)-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(피페리딘-1-일)에탄-1-아민과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.32 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.61-7.51 (m, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.41-3.36 (m, 2H), 2.43-2.32 (m, 6H), 1.53-1.38 (m, 6H); LC-MS: m/z 487.15 (M+1)+.
실시예 38. N -(2-(2-히드록시프로폭시)에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(2-아미노에톡시)프로판-2-올과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.46 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62-7.52 (m, 3H), 4.58 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 3.77-3.73 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.56 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.45 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.29-2.23 (m, 2H), 1.04 (d, J = 6.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 478.2 (M+1)+.
실시예 39. N -(2,3-디히드록시프로필)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 3-아미노프로판-1,2-디올과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.39 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.62-7.53 (m, 3H), 4.87 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 4.62 (bs, 1H), 3.67 (s, 4H), 3.45-3.40 (m, 1H), 3.30 (DMSO 수분 피크와 병합된 2H), 3.25-3.19 (m, 1H); LC-MS: m/z 450.15 (M+1)+.
실시예 40. N -(2-(2-(디메틸아미노)아세트아미도)에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 19 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, N-(2-아미노에틸)-2-(디메틸아미노)아세트아미드 트리플루오로아세테이트와 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.47 (bs, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.92 (bs, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.61-7.52 (m, 3H), 3.66 (s, 3H), 3.38-3.35 (m, 4H), 2.86 (s, 2H), 2.19 (s, 6H); LC-MS: m/z 504.2 (M+1)+.
실시예 41. 2-(2-(1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)아세트산의 합성
Figure pct00038
단계-a: 에틸 2-(2-(1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)아세테이트의 합성
실시예 29 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 에틸 2-(2-아미노에톡시)아세테이트 트리플루오로아세테이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 65%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.38 (bs, 1H), 8.49 (bs, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.79 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.61-7.52 (m, 3H), 4.15-4.09 (m, 4H), 3.66-3.62 (m, 5H), 3.48-3.46 (m, 2H), 1.19 (t, J = 7.0 Hz, 3H); LC-MS: m/z 506.1 (M+1)+.
단계-b: 2-(2-(1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)아세트산의 합성
실시예 29 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-(2-(1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미도)에톡시)아세테이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.70 (bs, 1H), 12.30 (bs, 1H), 8.49 (bs, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.82-7.78 (m, 2H), 7.61-7.51 (m, 3H), 4.06 (s, 2H), 3.66-3.62 (m, 5H), 3.48-3.41 (m, 2H); LC-MS: m/z 478.2 (M+1)+.
실시예 42. N -(2-(2-히드록시-2-메틸프로폭시)에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(2-아미노에톡시)-2-메틸프로판-2-올과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.58-7.52 (m, 3H), 4.32 (bs, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.58-3.56 (m, 2H), 3.46-3.44 (m, 2H), 3.21 (s, 2H), 1.08 (s, 6H); LC-MS: m/z 492.1 (M+1)+.
실시예 43. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00039
단계-a: 2-니트로-4-(트리플루오로메틸)페놀의 합성
실온에서, DMSO(100 mL) 중 1-클로로-2-니트로-4-(트리플루오로메틸)벤젠(10.0 g, 44.3 mmol)의 용액에, 수산화나트륨(4.44 g, 110.7 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(250 mL)로 희석하고, EtOAc(200 mL)로 추출하였다. 수성층을 3 N HCl을 이용하여 pH 약 1까지 산성화시키고, EtOAc(2 X 250 mL)로 추출하고, 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(7.0 g, 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.99 (bs, 1H), 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.8 Hz, 1H).
단계-b: 2-아미노-4-(트리플루오로메틸)페놀의 합성
메탄올(50 mL) 중 2-니트로-4-(트리플루오로메틸)페놀(5.0 g, 24.15 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C(2.5 g)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 풍선 하에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 여과액을 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(3.0 g, 70%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.85 (bs, 1H), 6.87 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.77-6.70 (m, 2H), 5.0 (bs, 2H); LC-MS: m/z 178.1 (M+1)+.
단계-c: 5-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실온에서, 에탄올(45 mL) 중 2-아미노-4-(트리플루오로메틸)페놀(3.0 g, 16.9 mmol)의 용액에, 칼륨 에틸 잔테이트(6.78 g, 42.4 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 냉수(100 mL)로 희석하고, 3 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(3.0 g, 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.2 (bs, 1H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H); LC-MS: m/z 220.0 (M+1)+.
단계-d: 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸의 합성
실온에서, 염화티오닐(10 mL) 중 5-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-티올(2.0 g, 9.1 mmol)의 용액에, N,N-디메틸 포름아미드(촉매량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, 냉수(60 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.3 g, 65%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.23 (s, 1H), 8.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.8 Hz, 1H).
단계-e: 에틸 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
0℃에서, 1,4-디옥산(10 mL) 중 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(200 mg, 0.91 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(91 mg, 2.27 mmol)을 첨가하고, 15분 동안 교반한 후, 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸(222 mg, 1.0 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 냉수(50 mL)로 희석하고, 3 N HCl을 이용하여 산성화시키고, 에틸 아세테이트(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 100% 디클로로메탄을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(150 mg, 40%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.41 (bs, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.90 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.67-7.64 (m, 2H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 405.00 (M+1)+.
단계-f: 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
THF(2 mL), 메탄올(2 mL) 및 물(2 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(150 mg, 0.37 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(78 mg, 1.85 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물(30 mL)에 용해시키고, 3 N HCl을 이용하여 pH 약 2까지 산성화시키고, 1시간 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(140 mg, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.85 (bs, 1H), 12.40 (bs, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H); LC-MS: m/z 377.1 (M+1)+.
단계-g: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, DMFA(5 mL) 중 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(80 mg, 0.21 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.04 mL, 0.21 mmol)과 HBTU(81 mg, 0.21 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 15분 동안 교반한 후, 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올(22 mg, 0.21 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(30 mL)로 희석하고, 1시간 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켰다. 고체를 디에틸 에테르(15 mL) 중에서 교반하고, 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(80 mg, 85%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.33 (bs, 1H), 8.46 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.60 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.58-3.43 (m, 8H); LC-MS: m/z 464.2 (M+1)+.
실시예 44 및 45. 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성:
Figure pct00040
단계-a: 2-니트로-5-(트리플루오로메톡시)페놀의 합성
아세트산(10 mL) 중 3-(트리플루오로메톡시)페놀(1 g, 5.6 mmol)의 용액에, 10℃ 내지 15℃에서 60% 질산 수용액(1 mL)을 적가하였다. 혼합물을 상기 온도에서 1.5시간 동안 교반하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 혼합물을 얼음물(20 mL)에 붓고, EtOAc(2 X 25 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(25 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 핵산 중 5% EtOAc를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(300 mg, 24%); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 10.73 (s, 1H), 8.18 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.83 (d, J = 9.2 Hz, 1H); LC-MS: m/z 222.0 (M-1).
단계-b: 2-아미노-5-(트리플루오로메톡시)페놀의 합성
메탄올(6 mL) 중 2-니트로-5-(트리플루오로메톡시)페놀(300 mg, 1.35 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C(60 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 가스 하에서 5시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(250 mg, 96%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.60 (s, 1H), 6.59-6.57 (m, 2H), 6.53-6.50 (m, 1H), 4.68 (bs, 2H); LC-MS: m/z 194.0 (M+1) +.
단계-c: 6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실온에서, 에탄올(5 mL) 중 2-아미노-5-(트리플루오로메톡시)페놀(250 mg, 1.3 mmol)의 용액에, 분말화된 수산화칼륨(127 mg, 2.3 mmol)과 이황화탄소(1 mL, 17.0 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 6시간 동안 환류시켰다. 실온까지 냉각시킨 후, 혼합물을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 냉수(100 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(200 mg, 66%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.10 (bs, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.32 (s, 2H); LC-MS: m/z 235.9 (M+1)+.
단계-d: 2-(메틸티오)-6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하고 실온에서 16시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 94%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.85 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.37-7.34 (m, 1H), 2.77 (s, 3H); LC-MS: m/z 250.1 (M+1)+.
단계-e: 2-(메틸설포닐)-6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(메틸티오)-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하고 실온에서 6시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 94%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.22 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H).
단계-f: 에틸 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실온에서, 1,4-디옥산(2 mL) 중 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(100 mg, 0.46 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(64 mg, 1.6 mmol)을 첨가한 후, 2-(메틸설포닐)-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸(167 mg, 0.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 이를 농축시키고, 냉수(15 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시키고, 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(30 mg, 16%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.89 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.58-7.50 (m, 3H), 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.65 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 421.0 (M+1)+.
단계-g: 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 72%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.80 (bs, 1H), 12.30 (bs, 1H), 8.20 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H); LC-MS: m/z 393.0 (M+1)+.
단계-h: N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 23%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.47 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.52-7.49 (m, 2H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.48-3.44 (m, 4H), 3.28 (s, 3H); LC-MS: m/z 450.0 (M+1)+.
실시예 46. 1-메틸- N -(1 H --4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1H-피라졸-4-아민과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.65 (bs, 1H), 12.30 (bs, 1H), 10.40 (s, 1H), 8.17 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.02 (bs, 1H), 7.89 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.69 (bs, 1H), 7.58-7.49 (m, 3H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H); LC-MS: m/z 458.0 (M+1)+.
실시예 47. N -(1,3-디히드록시-2-(히드록시메틸)프로판-2-일)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-2-(히드록시메틸)프로판-1,3-디올과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.50 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 7.26 (s, 1H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.83 (bs, 3H), 3.71 (bs, 6H), 3.65 (s, 3H); LC-MS: m/z 496.3 (M+1)+.
실시예 48. N -(1,3-디히드록시프로판-2-일)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노프로판-1,3-디올과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.88 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.21 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.66 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 4.00-3.95 (m, 1H), 3.65 (s, 3H), 3.54 (t, J = 6.0 Hz, 4H); LC-MS: m/z 466.0 (M+1)+.
실시예 49. N -(2-(2-(디메틸아미노)아세트아미도)에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 19 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, N-(2-아미노에틸)-2-(디메틸아미노)아세트아미드 트리플루오로아세테이트와 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.0 (bs, 1H), 8.45 (t, J = 4.4 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.91 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.36 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.30 (DMSO 수분 피크와 병합된 2H), 2.85 (s, 2H), 2.18 (s, 6H); LC-MS: m/z 520.5 (M+1)+.
실시예 50. 1-메틸- N -(1-메틸-1 H -피라졸-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-1H-피라졸-4-아민과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 10.40 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58-7.51 (m, 4H), 7.22 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.66 (s, 3H); LC-MS: m/z 472.0 (M+1)+.
실시예 51. 1-메틸- N -(옥세탄-3-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 옥세탄-3-아민과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 9.07 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.85(d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.52 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.05-5.00 (m, 1H), 4.78 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.62 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.65 (s, 3H); LC-MS: m/z 448.0 (M+1)+.
실시예 52. N -((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 3-(아미노메틸)옥세탄-3-올과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.54 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.80 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.53-7.49 (m, 2H), 7.21 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.52 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.41 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.59 (d, J = 6.0 Hz, 2H); LC-MS: m/z 478.2 (M+1)+.
실시예 53. N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노에탄-1-올과 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.38 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.52-7.49 (m, 2H), 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.72 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.54 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 3.37-3.30 (m, 2H); LC-MS: m/z 436.0 (M+1)+.
실시예 54. 1-메틸- N -(2-(메틸설포닐)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(메틸설포닐)에탄-1-아민 히드로클로라이드와 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.68 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.53-7.50 (m, 2H), 7.27-7.20 (m, 1H), 3.70 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.40 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.05 (s, 3H); LC-MS: m/z 497.9 (M+1)+.
실시예 55 및 56. 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00041
Figure pct00042
Figure pct00043
단계-a: 5-(2-메톡시에톡시)-2-니트로페놀의 합성
0℃에서, 교반된 2-메톡시에탄-1-올(50 mL)에 나트륨 금속(2.29 g, 95.46 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 후, 5-플루오로-2-니트로페놀(5.0 g, 31.82 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 16시간 동안 100℃까지 가열하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 0℃까지 냉각시키고, 냉수(200 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 황색 고체로 수득하였다(4.0 g, 59%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.93 (s, 1H), 7.96 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 6.64-6.58 (m, 2H), 4.19-4.17 (m, 2H), 3.67-3.65 (m, 2H), 3.30 (s, 3H).
단계-b: 2-아미노-5-(2-메톡시에톡시)페놀의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 5-(2-메톡시에톡시)-2-니트로페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 96%); LC-MS: m/z 184.1 (M+1)+.
단계-c: 6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-(2-메톡시에톡시)페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 76%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.78 (s, 1H), 7.29 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.18-4.16 (m, 2H), 3.73-3.71 (m, 2H), 3.36 (s, 3H); LC-MS: m/z 226.0 (M+1)+.
단계-d: 2-클로로-6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-(2-메톡시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 69%); LC-MS: m/z 228.05 (M+1)+.
단계-e: 에틸 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e의 화합물에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-(2-메톡시에톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 24%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.21 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.83 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.12 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.67 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.32 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.1 Hz, 3H); LC-MS: m/z 411.0 (M+1)+.
단계-f: 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 77%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.15 (bs, 2H), 8.17 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 4.12 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.67 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.32 (s, 3H); LC-MS: m/z 383.0 (M+1)+.
단계-g: 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 29%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.15 (bs, 1H), 8.44 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 1.4 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 4.12-4.10 (m, 2H), 3.68-3.66 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.49-3.43 (m, 4H), 3.32 (s, 3H), 3.28 (s, 3H); LC-MS: m/z 440.60 (M+1)+.
실시예 57. N -(2-히드록시에틸)-2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00044
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 27%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.16 (bs, 1H), 8.35 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.81 (dd, J = 2.5 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.72 (bs, 1H), 4.11 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.67 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.53 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 3.35 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.32 (s, 3H); LC-MS: m/z 426.45 (M+1)+.
실시예 58. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00045
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 61%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.15 (bs, 1H), 8.41 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.60 (bs, 1H), 4.13 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.67 (t, J = 4.6 Hz, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.57-3.42 (m, 8H), 3.32 (s, 3H); LC-MS: m/z 470.25 (M+1)+.
실시예 59 및 60. 2-((6-이소프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-((6-이소프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00046
단계-a: 5-이소프로필-2-니트로페놀의 합성
DCM(30 mL) 및 3 M 황산(25 mL) 중 3-이소프로필페놀(2.0 g, 14.7 mmol)의 용액에, 실온에서 질산나트륨(1.37 g, 16.18 mmol)과 아질산나트륨(10 mg, 0.14 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 혼합물을 24시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음물(100 mL)에 붓고, DCM(2 X 50 mL)으로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 핵산 중 5% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(500 mg, 19%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.76 (s, 1H), 7.86 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.89 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 2.92-2.89 (m, 1H), 1.19 (d, J = 6.9 Hz, 6H); LC-MS: m/z 180.0 (M-1).
단계-b: 2-아미노-5-이소프로필페놀의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 5-이소프로필-2-니트로페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 86%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.88 (bs, 1H), 6.50 (dd, J = 1.9 Hz, J = 10.7 Hz, 1H), 6.41 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.39 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 4.25 (s, 2H), 2.68-2.61 (m, 1H), 1.10 (d, J = 6.8 Hz, 6H); LC-MS: m/z 152.15 (M+1)+.
단계-c: 6-이소프로필벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-이소프로필페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 68%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.74 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.20-7.13 (m, 2H), 3.0-2.93 (m, 1H), 1.21 (d, J = 6.9 Hz, 6H); LC-MS: m/z 194.15 (M+1)+.
단계-d: 2-클로로-6-이소프로필벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-이소프로필벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 85%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.17 (s, 1H), 7.02-6.97 (m, 2H), 2.96-2.86 (m, 1H), 1.19 (d, J = 6.8 Hz, 6H); LC-MS: m/z 196.0 (M+1)+.
단계-e: 에틸 2-((6-이소프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-이소프로필벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 77%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.15 (bs, 1H), 8.22 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.0 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.11 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.01-2.95 (m, 1H), 1.35 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 6.8 Hz, 6H); LC-MS: m/z 379.1 (M+1)+.
단계-f: 2-((6-이소프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((6-이소프로필벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고 60℃에서 5시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 92%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 2H), 8.18 (s, 1H), 7.86 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.10 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 2.98-2.97 (m, 1H), 1.25 (d, J = 6.8 Hz, 6H); LC-MS: m/z 351.20 (M+1)+.
단계-g: 2-((6-이소프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-이소프로필벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 69%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.15 (bs, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.09 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.48-3.44 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 2.98-2.97 (m, 1H), 1.25 (d, J = 6.8 Hz, 6H); LC-MS: m/z 408.0 (M+1)+.
실시예 61. N -(2-히드록시에틸)-2-((6-이소프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성.
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-이소프로필벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.50 (bs, 1H), 8.43 (bs, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m, 2H), 7.16 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.54 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.36 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 3.02-2.99 (m, 1H), 1.25 (d, J = 7.2 Hz, 6H); LC-MS: m/z 394.0 (M+1)+.
실시예 62. 2-((6-(디플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
Figure pct00047
Figure pct00048
단계-a: 2-(벤질옥시)-4-플루오로-1-니트로벤젠의 합성
실온에서, DMFA(100 mL) 중 5-플루오로-2-니트로페놀(10 g, 63.7 mmol)의 교반된 용액에, 탄산칼륨(10.54 g, 76.43 mmol)과 브롬화벤질(7.56 mL, 63.7 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 물(300 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 냉수(2 X 200 mL), 염수 용액(100 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 5% EtOAc를 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(12.0 g, 76%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.04 (dd, J = 5.8 Hz, J = 9.3 Hz, 1H), 7.48-7.34 (m, 6H), 7.02-6.97 (m, 1H), 5.33 (s, 2H).
단계-b: 3-(벤질옥시)-4-니트로페놀의 합성
실온에서, 물(70 mL) 중 KOH(7.93 g, 141.7 mmol)의 교반된 용액에, 2-(벤질옥시)-4-플루오로-1-니트로벤젠(7.0 g, 28.3 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 30시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(100 mL)로 희석하고, 3 N HCl을 이용하여 산성화시키고, 에틸 아세테이트(3 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 20% EtOAc를 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(2.0 g, 29%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.88 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.47 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 7.41-7.39 (m, 2H), 7.36-7.32 (m, 1H), 6.69 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.49 (dd, J = 2.4 Hz, J = 9.3 Hz, 1H), 5.25 (s, 2H); LC-MS: m/z 244.0 (M-1).
단계-c: 2-(벤질옥시)-4-(디플루오로메톡시)-1-니트로벤젠의 합성
0℃에서, 아세토니트릴(6 mL) 중 3-(벤질옥시)-4-니트로페놀(1.1 g, 4.49 mmol)의 교반된 용액에, 물(6 mL) 중 수산화칼륨(5.02 g, 89.79 mmol)과 디에틸 (브로모디플루오로메틸)포스포네이트(1.58 mL, 8.98 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 물(100 mL)로 희석하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(3 X 60 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 10% EtOAc를 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.2 g, 91%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.04 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.64-7.27 (m, 6H), 7.26 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.93 (dd, J = 2.5 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 5.34 (s, 2H).
단계-d: 2-아미노-5-(디플루오로메톡시)페놀의 합성
메탄올(20 mL) 중 2-(벤질옥시)-4-(디플루오로메톡시)-1-니트로벤젠(1.2 g, 4.07 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C(300 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 풍선 하에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(600 mg, 84%); LC-MS: m/z 176.0 (M+1)+.
단계-e: 6-(디플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-(디플루오로메톡시)페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.96 (bs, 1H), 7.49 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 73.2 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H); LC-MS: m/z 218.0 (M+1)+.
단계-f: 2-클로로-6-(디플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-(디플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 82%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.80 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.29-7.27 (m, 2H).
단계-g: 에틸 2-((6-(디플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-(디플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 27%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.23 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.38-7.37 (m, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.07-7.00 (m, 1H), 4.33 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.1 Hz, 3H); LC-MS: m/z 403.0 (M+1)+.
단계-h: 2-((6-(디플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((6-(디플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 93%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.80 (bs, 1H), 12.40 (bs, 1H), 8.19 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 1.4 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.52-7.46 (m, 2H), 7.38-7.00 (m, 3H), 3.64 (s, 3H); LC-MS: m/z 375.0 (M+1)+.
실시예 63. 2-((6-(디플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(디플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에탄-1-아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.25 (bs, 1H), 8.45 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49-7.45 (m, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.06-7.00 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.48-3.44 (m, 4H), 3.28 (s, 3H); LC-MS: m/z 432.0 (M+1)+.
실시예 64. 2-((6-(디플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(디플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.38 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.38-7.00 (m, 3H), 3.64 (s, 3H), 3.53 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.35 (q, J = 6.0 Hz, 2H); LC-MS: m/z 418.0 (M+1)+.
실시예 65. N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((5-메틸벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00049
단계-a: 2-아미노-4-메틸페놀의 합성
메탄올(15 mL) 중 4-메틸-2-니트로페놀(1.75 g, 11.4 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C의 슬러리(메탄올 5 mL 중 500 mg)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 수소 가스 풍선 하에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.3 g, 93%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62 (bs, 1H), 6.49 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.38 (s, 1H), 6.17 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.36 (bs, 2H), 2.07 (s, 3H); LC-MS: m/z 124.2 (M+1)+.
단계-b: 5-메틸벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실온에서, 에탄올(15 mL) 중 2-아미노-4-메틸페놀(1.3 g, 10.5 mmol)의 용액에, 칼륨 에틸 잔테이트(3.7 g, 22.2 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 냉수(30 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.3 g, 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.78 (s, 1H), 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.07-7.05 (m, 2H), 2.36 (s, 3H); LC-MS: m/z 166.1 (M+1)+.
단계-c: 5-메틸-2-(메틸티오)벤조[ d ]옥사졸의 합성
0℃에서, 아세토니트릴(15 mL) 중 5-메틸벤조[d]옥사졸-2-티올(1.3 g, 7.9 mmol)의 용액에, 탄산칼륨(1.3 g, 9.4 mmol)과 요오드화메틸(0.53 mL, 8.7 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 물(30 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.4 g, 99%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.50 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.40 (s, 3H); LC-MS: m/z 180.1 (M+1)+.
단계-d: 5-메틸-2-(메틸설포닐)벤조[ d ]옥사졸의 합성
0℃에서, DCM(10 mL) 중 5-메틸-2-(메틸티오)벤조[d]옥사졸(350 mg, 1.95 mmol)의 용액에, 메타-클로로퍼벤조산(2.14 g, 6.8 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(100 mL)으로 희석하고, 탄산수소나트륨 포화 용액(2 X 30 mL), 1 N 수산화나트륨 수용액(30 mL), 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 생성물을 수득하고, 이를 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 사용하였다(340 mg); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.84-7.79 (m, 2H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H), 2.48 (s, 3H).
단계-e: 4-클로로-3-니트로벤조일 클로라이드의 합성
10℃에서, DCM(150 mL) 중 4-클로로-3-니트로벤조산(15.0 g, 74.6 mmol)의 용액에, 염화티오닐(15.9 mL, 223.8 mmol)과 DMFA(1 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시켜 생성물을 수득하고, 이를 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 바로 사용하였다(15.0 g).
단계-f: 4-클로로- N -(2-메톡시에틸)-3-니트로벤즈아미드의 합성
0℃에서, DCM(60 mL) 중 2-메톡시에탄-1-아민(5.1 g, 68.2 mmol)의 용액에, 트리에틸아민(20 mL, 138.6 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물에 DCM(50 mL) 중 4-클로로-3-니트로벤조일 클로라이드(15.0 g, 68.2 mmol)의 용액을 첨가하고, 내용물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(150 mL)과 물(100 mL)로 희석하였다. 유기층을 분리하고, 물(150 mL), 염수(100 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(18.5 g, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.88 (bs, 1H), 8.51 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.14 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.49-3.42 (m, 4H), 3.30 (s, 3H).
단계-g: N -(2-메톡시에틸)-4-(메틸아미노)-3-니트로벤즈아미드의 합성
0℃에서, DMFA(180 mL) 중4-클로로-N-(2-메톡시에틸)-3-니트로벤즈아미드(18.0 g, 69.8 mmol)의 용액에, DIPEA(12.5 mL, 69.8 mmol)와 THF 중 2 M 메틸아민(70 mL, 139.3 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(200 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 250 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(100 mL), 염수(100 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 생성물을 제공하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(17.0 g, 96%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.54 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.42 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 8.02 (dd, J = 1.6 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.46-3.40 (m, 4H), 2.98 (d, J = 3.2 Hz, 3H), 3.26 (s, 3H); LC-MS: m/z 254.1 (M+1)+.
단계-h: 3-아미노- N -(2-메톡시에틸)-4-(메틸아미노)벤즈아미드의 합성
메탄올(100 mL) 중 N-(2-메톡시에틸)-4-(메틸아미노)-3-니트로벤즈아미드(6.0 g, 23.7 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C의 슬러리(메탄올 20 mL 중 1.2 g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 가스 풍선 하에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(4.0 g, 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.88 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 7.11-7.06 (m, 2H), 6.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.07 (bs, 1H), 4.54 (bs, 2H), 3.42-3.34 (m, 4H) 3.27 (s, 3H), 2.75 (d, J = 2.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 224.2 (M+1)+.
단계-i: 2-아미노- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실온에서, THF(10 mL) 및 물(20 mL) 중 3-아미노-N-(2-메톡시에틸)-4-(메틸아미노)벤즈아미드(2.0 g, 8.92 mmol)의 용액에, 브롬화시안(1.04 g, 9.82 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 50℃ 내지 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 탄산수소나트륨 포화 용액을 이용하여 염기성화시키고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하고, 이를 용리액으로 DCM 중 5% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.3 g, 59%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.26 (bs, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.48 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.52 (bs, 2H), 3.51 (s, 3H), 3.45-3.41 (m, 4H), 3.26 (s, 3H); LC-MS: m/z 249.2 (M+1)+.
단계-j: N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((5-메틸벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
10℃에서, 1,4-디옥산(5 mL) 중 2-아미노-N-(2-메톡시에틸)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미드(300 mg, 1.2 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(96 mg, 2.4 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 교반한 후, 5-메틸-2-(메틸설포닐)벤조[d]옥사졸(306 mg, 1.45 mmol)을 첨가하고, 이를 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수(20 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하고, 이를 용리액으로 DCM 중 2% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(6 mg, 1%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 1H), 8.45 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 6.93 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.50-3.42 (m, 4H), 3.29 (s, 3H), 2.49 (s, 3H); LC-MS: m/z 380.2 (M+1)+.
실시예 66 및 67. 2-((5-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-((5-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00050
단계-a: 2-아미노-4-플루오로페놀의 합성
실시예 32 단계-b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 4-플루오로-2-니트로페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 91%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.88 (bs, 1H), 6.56-6.53 (m, 1H), 6.35 (dd, J = 2.0 Hz, J = 10.4 Hz, 1H), 6.13-6.08 (m, 1H), 4.78 (bs, 2H); LC-MS: m/z 128.1 (M+1)+.
단계-b: 5-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-4-플루오로페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 86%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.01 (bs, 1H), 7.55-7.51 (m, 1H), 7.15-7.08 (m, 2H); LC-MS: m/z 170.0 (M+1)+.
단계-c: 5-플루오로-2-(메틸티오)벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 5-플루오로벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하여(16시간 동안 교반함) 표제 화합물을 합성하였다(수율: 92%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.69-7.65 (m, 1H), 7.53 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.19-7.11 (m, 1H), 2.76 (s, 3H); LC-MS: m/z 184.1 (M+1)+.
단계-d: 5-플루오로-2-(메틸설포닐)벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 5-플루오로-2-(메틸티오)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여(4시간 동안 교반함) 표제 화합물을 합성하였다(수율: 99%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.05-8.01 (m, 1H), 7.94 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.57-7.54 (m, 1H), 3.67 (s, 3H); LC-MS: m/z 216.0 (M+1)+.
단계-e: 에틸 2-((5-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1g에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 5-플루오로-2-(메틸설포닐)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 26%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.34 (bs, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.88 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.46-7.42 (m, 1H), 7.23 (dd, J = 2.4 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 6.97-6.91 (m, 1H), 4.34 (q, J = 6.4 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 1.36 (t, J = 4.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 355.2 (M+1)+.
단계-f: 2-((5-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((5-플루오로벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 58%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.45-7.42 (m, 1H), 7.24 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 6.96-6.91 (m, 1H), 3.64 (s, 3H); LC-MS: m/z 327.2 (M+1)+.
단계-g: 2-((5-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((5-플루오로벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 62%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40-7.37 (m, 1H), 7.20 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.89 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.50-3.45 (m, 4H), 3.09 (s, 3H); LC-MS: m/z 384.2 (M+1)+.
실시예 68 및 69. 2-((6-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-((6-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00051
단계-a: 2-아미노-5-플루오로페놀의 합성
실시예 32 단계-b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 5-플루오로-2-니트로페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 92%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.5 (bs, 1H), 6.54-6.51 (m, 1H), 6.46 (dd, J = 2.8 Hz, J = 10.0 Hz, 1H), 6.37-6.32 (m, 1H); LC-MS: m/z 128.2 (M+1)+.
단계-b: 6-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-플루오로페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 89%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.94 (bs, 1H), 7.57 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.25-7.22 (m, 1H), 7.19-7.14 (m, 1H); LC-MS: m/z 170.0 (M+1)+.
단계-c: 6-플루오로-2-(메틸티오)벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-플루오로벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하여(5시간 동안 교반함) 표제 화합물을 합성하였다(수율: 99%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.67-7.63 (m, 2H), 7.24-7.18 (m, 1H), 2.75 (s, 3H); LC-MS: m/z 184.0 (M+1)+.
단계-d: 6-플루오로-2-(메틸설포닐)벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-플루오로-2-(메틸티오)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여(4시간 동안 교반함) 표제 화합물을 합성하였다(수율: 95%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.08-8.02 (m, 1H), 8.01-7.99 (m, 1H), 7.56-7.46 (m, 1H), 3.67 (s, 3H).
단계-e: 에틸 2-((6-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1g에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 6-플루오로-2-(메틸설포닐)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 28%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.23 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45-7.41 (m, 2H), 7.10-7.04 (m, 1H), 4.33 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 1.35(t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 355.1 (M+1)+.
단계-f: 2-((6-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
THF(1 mL), 에탄올(1 mL) 및 물(0.5 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 2-((6-플루오로벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(45 mg, 0.13 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(10 mg, 0.25 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반 하에서 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물(15 mL)에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켜 고체를 수득하고, 이를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(30 mg, 72%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H) 8.19 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.46-7.41 (m, 2H), 7.09-7.03 (m, 1H), 3.63 (s, 3H); LC-MS: m/z 327.05 (M+1)+.
단계-g: 2-((6-플루오로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, DMFA(2 mL) 중 2-((6-플루오로벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(30 mg, 0.09 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.03 mL, 0.18 mmol)과 디페닐포스포릴 아지드(0.02 mL, 0.09 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 2-메톡시에틸아민(6 mg, 0.09 mmol)을 첨가하고, 이어서 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(6 mL)로 희석하고, 15분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 디에틸 에테르로 세정하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다(20 mg, 58%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 1H), 8.45 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.49-7.40 (m, 3H), 7.08-7.03 (m, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.50-3.43 (m, 4H), 3.39 (s, 3H); LC-MS: m/z 384.1 (M+1)+.
실시예 70 및 71. 6-플루오로-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 6-플루오로- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00052
Figure pct00053
단계-a: 메틸 2-아미노-6-플루오로-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1f에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 메틸 5-아미노-2-플루오로-4-(메틸아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하고 16시간 동안 60℃까지 가열하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 89%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.54 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 6.69 (bs, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.51 (s, 3H); LC-MS: m/z 224.1 (M+1)+.
단계-b: 메틸 6-플루오로-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1g에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 메틸 2-아미노-6-플루오로-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-(메틸설포닐)-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 18%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.10 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.95-7.51 (m, 3H), 7.22 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.61 (s, 3H); LC-MS: m/z 425.1 (M+1)+.
단계-c: 6-플루오로-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 메틸 6-플루오로-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고, THF, 메탄올 및 물(2:2:1)을 용매로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 66%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.0 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.08 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.53-7.49 (m, 2H), 7.22 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.61 (s, 3H); LC-MS: m/z 411.1 (M+1)+.
단계-d: 6-플루오로- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)-벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-플루오로-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 48%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.18 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.52-7.49 (m, 2H), 7.21 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.61 (s, 3H), 3.47-3.44 (m, 4H), 3.29 (s, 3H); LC-MS: m/z 468.1 (M+1)+.
실시예 72. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-6-플루오로- N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00054
단계-a: 메틸 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-6-플루오로-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 메틸 2-아미노-6-플루오로-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 66%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.25 (bs, 1H), 8.09 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.55-7.44 (m, 3H), 7.24-7.22 (m, 1H), 7.17-7.12 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.60 (s, 3H); LC-MS: m/z 341.0 (M+1)+.
단계-b: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-6-플루오로-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 메틸 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-6-플루오로-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고, 메탄올, THF 및 물(2:2:1)을 용매로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.80 (bs, 2H), 8.07 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.50-7.44 (m, 3H), 7.22 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 7.15-7.11 (m, 1H), 3.60 (s, 3H); LC-MS: m/z 327.0 (M+1)+.
단계-c: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-6-플루오로- N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-6-플루오로-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 49%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.15 (bs, 1H), 7.86 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.50-7.47 (m, 2H), 7.43 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.23-7.19 (m, 1H), 7.14-7.10 (m, 1H), 4.60 (bs, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.57-3.51 (m, 4H), 3.48-3.31 (m, 4H); LC-MS: m/z 414.05 (M+1)+.
실시예 73. 2-((5-플루오로-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
Figure pct00055
단계-a: 에틸 2-(1 H -이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실온에서, 아세토니트릴(20 mL) 중 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(1.0 g, 4.5 mmol)의 용액에, 1,1'-티오카르보닐디이미다졸(1.06 g, 5.9 mmol)을 첨가하고, 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 30분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(1.1 g, 73%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.4 (bs, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.41 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.99 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.35 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.79 (s, 3H), 1.36 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
단계-b: 에틸 2-((5-플루오로-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
DMFA(15 mL) 중 에틸 2-(1H-이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(900 mg, 2.74 mmol)의 교반된 용액에, EDC.HCl(1.05 g, 5.47 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 60℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시킨 후, 4-플루오로벤젠-1,2-디아민(345 mg, 2.74 mmol)을 첨가하고, 이를 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(30 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 잔류물을 수득하고, 이를 용리액으로 DCM 중 0.5% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(200 mg, 21%); LC-MS: m/z 354.2 (M+1)+.
단계-c: 2-((5-플루오로-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
THF(5 mL), 메탄올(5 mL) 및 물(5 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 2-((5-플루오로-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(200 mg, 0.57 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(119 mg, 2.83 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반 하에서 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물(15 mL)에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켜 고체를 수득하고, 이를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(150 mg, 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 2H), 8.04 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.32-7.26 (m, 2H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.88 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.62 (s, 3H); LC-MS: m/z 326.05 (M+1)+.
실시예 74. 1-(2-(디메틸아미노)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
Figure pct00056
단계-a: 에틸 4-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)-3-니트로벤조에이트의 합성
실온에서, DMFA(40 mL) 중 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트(5.0 g, 21.8 mmol)의 용액에, DIPEA(9.5 mL, 54.4 mmol)와 N 1,N 1-디메틸에탄-1,2-디아민(2.87 g, 32.7 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(250 mL)로 희석하고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(4.8 g, 92%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.65 (t, J = 4.4 Hz, 1H), 8.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.79 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.32-4.26 (m, 2H), 3.47-3.43 (m, 2H), 2.57-2.52 (m, 2H), 2.22 (s, 6H), 1.33-1.28 (m, 3H); LC-MS: m/z 282.2 (M+1)+.
단계-b: 에틸 3-아미노-4-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)벤조에이트의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)-3-니트로벤조에이트를 출발 물질로 사용하고 16시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 67%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.23 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.09 (bs, 1H), 4.68 (s, 2H), 4.18 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.19-3.15 (m, 2H), 2.49-2.46 (m, 2H), 2.18 (s, 6H), 1.26 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 252.2 (M+1)+.
단계-c: 에틸 2-아미노-1-(2-(디메틸아미노)에틸)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1f에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-((2-(디메틸아미노)에틸)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하고 16시간 동안 60℃까지 가열하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 26%); LC-MS: m/z 277.2 (M+1)+.
단계-d: 에틸 1-(2-(디메틸아미노)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1g에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-(2-(디메틸아미노)에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-(메틸설포닐)-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 26%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.4 (bs, 1H), 8.25 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59-7.57 (m, 2H), 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.36-4.26 (m, 4H), 2.68 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 2.22 (s, 6H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 478.1 (M+1)+.
단계-e: 1-(2-(디메틸아미노)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-(2-(디메틸아미노)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 18%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.20 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59-7.51 (m, 3H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.27 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.79-2.66 (m, 2H), 2.21 (s, 6H); LC-MS: m/z 450.1 (M+1)+.
실시예 75 및 76. 1-(2-메톡시에틸)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N ,1-비스(2-메톡시에틸)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00057
Figure pct00058
단계-a: 에틸 4-((2-메톡시에틸)아미노)-3-니트로벤조에이트의 합성
실온에서, DMSO(100 mL) 중 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트(10 g, 43.7 mmol)의 용액에, 2-메톡시에탄-1-아민(7.5 mL g, 87.3 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(250 mL)로 희석하고, 1시간 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(12 g, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.61 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.54 (s, 1H), 7.97 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.29 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.60 (bs, 4H), 3.31 (s, 3H), 1.31 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 269.1 (M+1)+.
단계-b: 에틸 3-아미노-4-((2-메톡시에틸)아미노)벤조에이트의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-((2-메톡시에틸)아미노)-3-니트로벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.22-7.17 (m, 2H), 6.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.20 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.74 (bs, 2H), 4.18 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.53 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.30-3.26 (m, 5H), 1.26 (t, J = 7.6 Hz, 3H); LC-MS: m/z 239.1 (M+1)+.
단계-c: 에틸 2-아미노-1-(2-메톡시에틸)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1f에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-((2-메톡시에틸)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하고 16시간 동안 60℃까지 가열하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 73%); LC-MS: m/z 264.1 (M+1)+.
단계-d: 에틸 2-(1 H -이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-(2-메톡시에틸)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 12a에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-(2-메톡시에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 1,1'-티오카르보닐디이미다졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 60%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.5 (bs, 1H), 8.66 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.01-7.97 (m, 2H), 7.78 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 4.54 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.35 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.74 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.20 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
단계-e: 에틸 1-(2-메톡시에틸)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 12b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-(1H-이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-(2-메톡시에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 4-(트리플루오로메톡시)벤젠-1,2-디아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 38%); LC-MS: m/z 464.0 (M+1)+.
단계-f: 1-(2-메톡시에틸)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-(2-메톡시에틸)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고, THF, 메탄올 및 물을 용매로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 65%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 3H), 8.08 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.36-7.31 (m, 2H), 7.02 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.32 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.71 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.25 (s, 3H); LC-MS: m/z 436.0 (M+1)+.
단계-g: N ,1-비스(2-메톡시에틸)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(2-메톡시에틸)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 2%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.23 (bs, 1H), 8.26-8.23 (m, 1H), 7.58-7.53 (m, 1H), 7.43-7.38 (m, 1H), 7.30-6.37 (m, 5H), 4.50-4.48 (m, 2H), 3.86-3.80 (m, 2H), 3.32 (s, 3H), 3.27-3.25 (m, 4H), 3.16 (s, 3H); LC-MS: m/z 493.1 (M+1)+.
실시예 77 및 78. 1-(2-메톡시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N ,1-비스(2-메톡시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00059
단계-a: 1-(2-메톡시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
0℃에서, 1,4-디옥산(10 mL) 중 에틸 2-아미노-1-(2-메톡시에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(200 mg, 0.76 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(107 mg, 2.66 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 2-클로로-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸(270 mg, 1.14 mmol)을 첨가하고, 90℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시켰다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 냉수(20 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 DCM 중 2% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(70 mg, 21%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.20 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58-7.52 (m, 3H), 7.22 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.36 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.74 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.24 (s, 3H); LC-MS: m/z 437.05 (M+1)+.
단계-b: N ,1-비스(2-메톡시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(2-메톡시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 2%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.45 (bs, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.53-7.50 (m, 2H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.35 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.73 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.48-3.43 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 3.24 (s, 3H); LC-MS: m/z 494.15 (M+1)+.
실시예 79 및 80. 1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00060
단계-a: 에틸 2-아미노-1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1f에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-((테트라히드로-2H-피란-4-일)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하고 60℃까지 가열하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 92%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.71 (s, 1H), 7.55 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.65 (bs, 2H), 4.50-4.48 (m, 1H), 4.28 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.05-4.01 (m, 2H), 3.47 (t, J = 11.2 Hz, 2H), 2.36-2.32 (m, 2H), 1.72 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 1.31 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 290.1 (M+1)+.
단계-b: 에틸 1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)-벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실온에서, 1,4-디옥산(2 mL) 중 에틸 2-아미노-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(100 mg, 0.35 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(34 mg, 0.86 mmol)을 첨가하고, 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물에 2-클로로-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸(99 g, 0.41 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 냉수(30 mL)로 희석하고, 실온에서 5분 내지 10분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시키고, 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(60 mg, 35%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.29 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.97-4.93 (m, 1H), 4.33 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 4.07-4.03 (m, 2H), 3.56 (t, J = 9.2 Hz, 2H), 2.63-2.55 (m, 2H), 1.79 (d, J = 9.2 Hz, 2H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 491.1 (M+1)+.
단계-e: 1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 71%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.50 (bs, 1H), 8.24 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 5.01-4.92 (m, 1H), 4.05 (dd, J = 4.0 Hz, J = 11.2 Hz, 2H), 3.58-3.53 (m, 2H), 2.67-2.57 (m, 2H), 1.78 (d, J = 10.0 Hz, 2H); LC-MS: m/z 463.1 (M+1)+.
단계-f: N -(2-메톡시에틸)-1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성 화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 76%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.48 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.98-4.92 (m, 1H), 4.07-4.04 (m, 2H), 3.56 (t, J = 1.2 Hz, 2H), 3.49-3.44 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 2.67-2.58 (m, 2H), 1.78 (d, J = 9.6 Hz, 2H); LC-MS: m/z 520.2 (M+1)+.
실시예 81. N -(2-메톡시에틸)-1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00061
단계-a: 에틸 2-(1 H -이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 12a에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 1,1'-티오카르보닐디이미다졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 72%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.50 (bs, 1H), 8.64 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.98 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.96-7.94 (m, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.72 (bs, 1H), 5.05-5.00 (m, 1H), 4.36-4.26 (m, 2H), 4.06-4.02 (m, 2H), 3.60 (t, J = 11.6 Hz, 2H), 2.54-2.50 (m, 2H), 1.86 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 1.37-1.33 (m, 3H).
단계-b: 에틸 1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 12b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-(1H-이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 4-(트리플루오로메톡시)벤젠-1,2-디아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 46%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.12 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.74 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37-7.32 (m, 2H), 7.06 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.97-4.90 (m, 1H), 4.32 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 4.08-4.05 (m, 2H), 3.51 (t, J = 11.6 Hz, 2H), 2.67-2.55 (m, 2H), 1.75 (d, J = 9.6 Hz, 2H), 1.07 (t, J = 8.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 490.0 (M+1)+.
단계-c: 1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 55%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.7 (bs, 3H), 8.04 (s, 1H), 7.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.42-7.35 (m, 2H), 7.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.93 (bs, 1H), 4.08-4.05 (m, 2H), 3.54-3.48 (m, 2H), 2.61-2.58 (m, 2H), 1.77 (d, J = 10.0 Hz, 2H); LC-MS: m/z 462.15 (M+1)+.
단계-d: N -(2-메톡시에틸)-1-(테트라히드로-2 H -피란-4-일)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(테트라히드로-2H-피란-4-일)-2-((5-(트리플루오로메톡시)-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 42%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 2H), 8.37 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.53-7.30 (m, 2H), 7.03 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.98-4.89 (m, 1H), 4.08-4.05 (m, 2H), 3.51-3.43 (m, 6H), 3.28 (s, 3H), 2.67-2.58 (m, 2H), 1.75-1.73 (m, 2H); LC-MS: m/z 519.1 (M+1)+.
실시예 82 및 83. 2-((5-클로로-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-((5-클로로-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00062
단계-a: 에틸 2-((5-클로로-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 12b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-(1H-이미다졸-1-카르보티오아미도)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 4-클로로벤젠-1,2-디아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 24%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 2H), 8.10 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40-7.29 (m, 3H), 7.09 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.31 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 370.05 (M+1)+.
단계-b: 2-((5-클로로-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((5-클로로-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 84%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 3H), 8.07 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.37-7.29 (m, 3H), 7.07 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H); LC-MS: m/z 342.0 (M+1)+.
단계-c: 2-((5-클로로-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((5-클로로-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 49%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 2H), 8.36 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.66 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.30-7.28 (m, 2H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.48-3.43 (m, 4H), 3.17 (s, 3H); LC-MS: m/z 399.1 (M+1)+.
실시예 84 및 85. 1-에틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 1-에틸- N -(2-메톡시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00063
단계-a: 에틸 4-(에틸아미노)-3-니트로벤조에이트의 합성
실온에서, DMFA(100 mL) 중 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트(4.0 g, 17.5 mmol)의 용액에, 에틸아민(2.24 mL(70% 수용액), 34.9 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(200 mL)로 희석하고, 15분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 생성물을 수득하였다(3.0 g, 63%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.51 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 7.97 (dd, J = 2.0 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.29 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.49-3.42 (m, 2H), 1.33 (t, J = 5.2 Hz, 3H), 1.23 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 239.0 (M+1)+.
단계-b: 에틸 3-아미노-4-(에틸아미노)벤조에이트의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-(에틸아미노)-3-니트로벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하고(수율: 79%), 미정제 화합물을 임의의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계-c: 에틸 2-아미노-1-에틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1f에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-(에틸아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 74%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.70 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.66 (bs, 2H), 4.27 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.05 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 1.31 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 1.20 (t, J = 7.6 Hz, 3H); LC-MS: m/z 234.1 (M+1)+.
단계-d: 에틸 1-에틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1g에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-에틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 54%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.25 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.60-7.57 (m, 2H), 7.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.22 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 1.37-1.31 (m, 6H); LC-MS: m/z 435.05 (M+1)+.
단계-e: 1-에틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-에틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.58-7.57 (m, 2H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.22 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 1.33 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 407.0 (M+1)+.
단계-f: 1-에틸- N -(2-메톡시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-에틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 58%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56-7.50 (m, 3H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.22 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.48-3.44 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 1.32 (t, J = 7.6 Hz, 3H); LC-MS: m/z 464.1 (M+1)+.
실시예 86. 1-에틸- N -(2-히드록시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00064
0℃에서, DMFA(1 mL) 중 1-에틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(60 mg, 0.14 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.02 mL, 0.14 mmol)과 HBTU(52 mg, 0.14 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 2-아미노에탄-1-올(8 mg, 0.14 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(15 mL)로 희석하고, 15분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 디에틸 에테르로 세정하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 백색 고체로 수득하였다(20 mg, 30%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.37 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56-7.49 (m, 3H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.72 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.22 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.53 (q, J = 5.2 Hz, 2H), 3.39-3.37 (m, 2H), 1.32 (t, J = 8.0 Hz, 3H); LC-MS: m/z 450.1 (M+1)+.
실시예 87 및 88. 1-((테트라히드로푸란-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)-벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-((테트라히드로푸란-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00065
단계-a: 에틸 3-니트로-4-(((테트라히드로푸란-3-일)메틸)아미노)벤조에이트의 합성
실온에서, THF(40 mL) 중 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트(2.0 g, 8.7 mmol)의 용액에, DIPEA(4.6 mL, 26.1 mmol)와 (테트라히드로푸란-3-일)메탄아민(1.06 g, 10.5 mmol)을 첨가한 후, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(200 mL)로 희석하고, 1시간 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(2.4 g, 94%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62-8.59 (m, 2H), 7.97 (dd, J = 2.0 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.29 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.82-3.77 (m, 1H), 3.73-3.69 (m, 1H), 3.66-3.60 (m, 1H), 3.53-3.50 (m, 1H), 3.45-3.40 (m, 2H), 2.67-2.58 (m, 1H), 2.03-1.95 (m, 1H), 1.69-1.63 (m, 1H), 1.31 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 295.0 (M+1)+.
단계-b: 에틸 3-아미노-4-(((테트라히드로푸란-3-일)메틸)아미노)벤조에이트의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-니트로-4-(((테트라히드로푸란-3-일)메틸)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 86%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.20 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.26 (bs, 1H), 4.75 (s, 2H), 4.18 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.77-3.73 (m, 2H), 3.64-3.62 (m, 1H), 3.49-3.47 (m, 1H), 3.07 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.50-2.49 (m, 1H), 2.11-1.98 (m, 1H), 1.63-1.48 (m, 1H), 1.26 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 265.1 (M+1)+.
단계-c: 에틸 2-아미노-1-((테트라히드로푸란-3-일)메틸)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1f에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-(((테트라히드로푸란-3-일)메틸)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 79%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.70 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.27 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.71 (s, 2H), 4.27 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 4.03 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.78-3.71 (m, 1H), 3.63-3.59 (m, 2H), 3.48-3.41 (m, 1H), 2.72-2.68 (m, 1H), 1.85-1.79 (m, 1H), 1.65-1.58 (m, 1H), 1.31 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 290.1 (M+1)+.
단계-d: 에틸 1-((테트라히드로푸란-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-에틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 44%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.4 (bs, 1H), 8.26 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.20-4.18 (m, 2H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.70-3.56 (m, 3H), 3.80-3.78 (m, 1H), 1.94-1.91 (m, 1H), 1.73-1.71 (m, 1H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 491.15 (M+1)+.
단계-e: 1-((테트라히드로푸란-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)-벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-((테트라히드로푸란-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 76%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.62-7.58 (m, 2H), 7.53 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.19 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 3.89-3.84 (m, 1H), 3.70-3.58 (m, 3H), 2.89-2.85 (m, 1H), 1.98-1.90 (m, 1H), 1.76-1.68 (m, 1H); LC-MS: m/z 463.1 (M+1)+.
단계-f: N -(2-메톡시에틸)-1-((테트라히드로푸란-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-((테트라히드로푸란-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 18%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.77 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.60-7.50 (m, 3H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.18 (bs, 2H), 3.87 (bs, 1H), 3.67-3.57 (m, 3H), 3.47 (bs, 4H), 3.28 (s, 3H), 2.88 (bs, 1H), 1.92 (bs, 1H), 1.73 (bs, 1H); LC-MS: m/z 520.15 (M+1)+.
실시예 89 및 90. 1-(2-(메틸설포닐)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-(2-(메틸설포닐)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00066
단계-a: 에틸 4-((2-(메틸설포닐)에틸)아미노)-3-니트로벤조에이트의 합성
화합물 3a에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트와 2-(메틸설포닐)에탄-1-아민 히드로클로라이드를 출발 물질로 사용하고 60℃까지 가열하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 89%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.69 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.63 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.02 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 4.30 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.89 (q, J = 5.6 Hz, 2H), 3.52 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.08 (s, 3H), 1.30 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 317.0 (M+1)+.
단계-b: 에틸 3-아미노-4-((2-(메틸설포닐)에틸)아미노)벤조에이트의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-((2-(메틸설포닐)에틸)아미노)-3-니트로벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 86%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.24-7.20 (m, 2H), 6.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.45 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.72 (s, 2H), 4.19 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.58 (q, J = 6.4 Hz, 2H), 3.38 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.03 (s, 3H), 1.26 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 287.0 (M+1)+.
단계-c: 에틸 2-아미노-1-(2-(메틸설포닐)에틸)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1f에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-((2-(메틸설포닐)에틸)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 86%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.71 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.75 (s, 2H), 4.47-4.40 (m, 2H), 4.30 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.55 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.03 (s, 3H), 1.31 (t, J = 6.8 Hz, 3H).
단계-d: 에틸 1-(2-(메틸설포닐)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1g에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-(2-(메틸설포닐)에틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 24%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.4 (bs, 1H), 8.25 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.63-7.61 (m, 2H), 7.54 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.56-7.51 (m, 1H), 4.61 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 4.34 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.73 (d), J = 6.8 Hz, 2H), 3.14 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.6 Hz, 3H); LC-MS: m/z 513.05 (M+1)+.
단계-e: 1-(2-(메틸설포닐)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-(2-(메틸설포닐)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 17%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.4 (bs, 1H), 8.20 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.61-7.59 (m, 2H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.61 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.72 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.14 (s, 3H); LC-MS: m/z 484.9 (M+1)+.
단계-f: N -(2-메톡시에틸)-1-(2-(메틸설포닐)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(2-(메틸설포닐)에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 32%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.48 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.67-7.54 (m, 3H), 7.21 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.60 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.74 (t, J = 10.8은 커플링 상수 Hz를 확인시켜 줌, 2H), 3.48-3.44 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 3.14 (s, 3H); LC-MS: m/z 542.0 (M+1)+.
실시예 91. 2-((6-브로모벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
Figure pct00067
단계-a: 2-아미노-5-브로모페놀의 합성
실온에서, 에탄올(60 mL) 중 5-브로모-2-니트로페놀(4.0 g, 18.35 mmol)의 용액에, SnCl2.2H2O(20.6 g, 91.74 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물(20 mL)로 희석하고, 탄산수소나트륨 포화 용액을 이용하여 염기성화시키고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(2.4 g, 70%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.44 (bs, 1H), 6.75 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.65 (bs, 2H); LC-MS: m/z 190.0 (M+1)+.
단계-b: 6-브로모벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-브로모페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 98%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.0 (bs, 1H), 7.84 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.47 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H); LC-MS: m/z 227.9 (M-1)-.
단계-c: 6-브로모-2-클로로벤조[ d ]옥사졸의 합성
실온에서, 염화티오닐(20 mL) 중 6-브로모벤조[d]옥사졸-2-티올(2.89 g, 12.56 mmol)의 용액에, N,N-디메틸포름아미드(0.2 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 농축시키고, 냉수(50 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 탄산수소나트륨 포화 용액(50 mL), 염수 용액(40 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(2.8 g, 96%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.14 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H).
단계-d: 에틸 2-((6-브로모벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 6-브로모-2-클로로벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 20%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.56 (bs, 1H), 8.23 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.38-7.36 (m, 2H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 416.9 (M+1)+.
단계-e: 2-((6-브로모벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((6-브로모벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.42-7.35 (m, 2H), 3.64 (s, 3H); LC-MS: m/z 388.9 (M+1)+.
실시예 92. N -(2-히드록시에틸)-2-((6-메톡시벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00068
단계-a: 5-메톡시-2-니트로페놀의 합성
실온에서, 메탄올(50 mL) 중 나트륨메톡시드(0.86 g, 18.35 mmol)의 교반된 현탁액에, 메탄올(40 mL) 중 5-플루오로-2-니트로페놀(3.0 g, 19.1 mmol)의 용액을 시린지를 통해 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 40시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(50 mL)로 켄칭하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시키고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 3% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(2.0 g, 62%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.94 (s, 1H), 7.97 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.59 (dd, J = 3.0 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H); LC-MS: m/z 167.95 (M -1)-.
단계-b: 2-아미노-5-메톡시페놀의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 5-메톡시-2-니트로페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 96%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.8 (bs, 1H), 6.49 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 6.18-6.14 (m, 1H), 3.58 (s, 3H); LC-MS: m/z 140.15 (M+1)+.
단계-c: 6-메톡시벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-메톡시페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 72%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.7 (s, 1H), 7.21 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.88 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H); LC-MS: m/z 182.0 (M+1)+.
단계-d: 2-클로로-6-메톡시벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-메톡시벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 91%); LC-MS: m/z 184.0 (M+1)+.
단계-e: 에틸 2-((6-메톡시벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-메톡시벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 18%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.21 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.83 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 367.0 (M+1)+.
단계-f: 2-((6-메톡시벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((6-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 79%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.5 (bs, 2H), 8.17 (s, 1H), 7.85 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.62 (s, 3H); LC-MS: m/z 339.0 (M+1)+.
단계-g: N -(2-히드록시에틸)-2-((6-메톡시벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 59%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.18 (bs, 1H), 8.35 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.81 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.72 (bs, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.53 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.35-3.30 (m, 2H); LC-MS: m/z 382.0 (M+1)+.
실시예 93 및 94. 1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)- N -(2-메톡시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00069
단계-a: 3-(니트로메틸)옥세탄-3-올의 합성
0℃에서, 니트로메탄(25 mL) 중 옥세탄-3-온(10.0 g, 138.9 mmol)의 용액에, 트리에틸아민(5 mL, 347.2 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 40% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 담황색 액체로 수득하였다(14.0 g, 77%); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 4.82 (s, 2H), 4.71 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.61 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.53 (s, 1H).
단계-b: 3-(아미노메틸)옥세탄-3-올의 합성
메탄올(80 mL) 중 3-(니트로메틸)옥세탄-3-올(5.0 g, 37.6 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C의 슬러리(메탄올 20 mL 중 2.0 g)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 수소 가스 풍선 하에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(3.8 g, 98%); LC-MS: m/z 104.2 (M+1)+.
단계-c: 에틸 4-(((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)아미노)-3-니트로벤조에이트의 합성
화합물 3a에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-클로로-3-니트로벤조에이트와 3-(아미노메틸)옥세탄-3-올을 출발 물질로 사용하고 60℃까지 가열하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 54%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.53 (bs, 1H), 7.99 (dd, J = 2.0 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.35 (s, 1H), 4.51 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.44 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.29 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.75 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 1.31 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 297.1(M+1)+.
단계-d: 에틸 3-아미노-4-(((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)아미노)벤조에이트의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 4-(((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)아미노)-3-니트로벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 95%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.23-7.20 (m, 2H), 6.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.96 (bs, 1H), 5.04 (bs, 1H), 4.75 (s, 2H), 4.46-4.43 (m, 4H), 4.19 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.40 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 1.26 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 267.1 (M+1)+.
단계-e: 에틸 2-아미노-1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1f에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-(((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)아미노)벤조에이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 70%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.72 (s, 1H), 7.59 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 2H), 6.45 (s, 1H), 4.55 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.43 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.34 (s, 2H), 4.28 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 1.32 (t, J = 5.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 292.1 (M+1)+.
단계-f: 에틸 1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 18%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.4 (bs, 1H), 8.24 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60-7.58 (m, 2H), 7.53 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 4.79 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.50 (bs, 2H), 4.46 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.33 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 1.35 (t, J = 7.6 Hz, 3H); LC-MS: m/z 493.0 (M+1)+.
단계-g: 1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 49%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.19 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H),7.60-7.52 (m, 3H), 7.22 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 4.79 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.46 (d, J = 6.4 Hz, 2H); LC-MS: m/z 465.1 (M+1)+.
단계-h: 1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)- N -(2-메톡시에틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 2% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(수율: 28%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.43 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.21 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.17 (s, 1H), 4.79 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.50 (s, 2H), 4.46 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.49-3.43 (m, 4H), 3.28 (s, 3H); LC-MS: m/z 522.0 (M+1)+.
실시예 95. N -(2-히드록시에틸)-1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00070
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-((3-히드록시옥세탄-3-일)메틸)-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 3% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(수율: 15%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.35 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.07(d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.58-7.51 (m, 2H), 7.22 (dd, J = 1.2 Hz, J = 10.0 Hz, 1H), 6.17 (s, 1H), 4.80 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 4.71 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.51 (s, 2H), 4.46 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.55-3.51 (m, 2H), 3.37-27 (m, 2H); LC-MS: m/z 508.45 (M+1)+.
실시예 96 및 97. 2-((6-클로로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-((6-클로로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00071
단계-a: 6-클로로벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-클로로페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 69%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.0 (bs, 1H), 7.73 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.8 Hz, 1H); LC-MS: m/z 184.0 (M-1)-.
단계-b: 2,6-디클로로벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-클로로벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 69%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.01 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H).
단계-c: 에틸 2-((6-클로로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2,6-디클로로벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 24%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.23 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.64 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 369.0 (M-1)-.
단계-d: 2-((6-클로로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((6-클로로벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.19 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.24 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H); LC-MS: m/z 342.9 (M+1)+.
단계-e: 2-((6-클로로벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-클로로벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 53%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.37 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.24 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.72 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.64 (s, 3H), 3.55-3.51 (m, 2H), 3.37-3.33 (m, 2H); LC-MS: m/z 386.1 (M+1)+.
실시예 98 및 99. 1-메틸-2-((6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00072
단계-a: 2-(벤질옥시)-4-플루오로-1-니트로벤젠의 합성
0℃에서, DMFA(80 mL) 중 5-플루오로-2-니트로페놀(8.0 g, 50.9 mmol)의 교반된 용액에, 탄산칼륨(14.0 g, 101.8 mmol)과 브롬화벤질(5.4 mL, 45.8 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(200 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 X 200 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(2 X 200 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 10% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(8.0 g, 64%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.06-8.02 (m, 1H), 7.47-7.36 (m, 6H), 7.05-6.95 (m, 1H), 5.33 (s, 2H).
단계-b: 2-(벤질옥시)-1-니트로-4-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤젠의 합성
0℃에서, THF(10 mL) 중 트리플루오로에탄올(0.23 mL, 3.24 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(194 mg, 4.86 mmol)을 분할하여 첨가하고, 1시간 동안 교반하였다. 이이서, 반응 혼합물에 2-(벤질옥시)-4-플루오로-1-니트로벤젠(400 mg, 1.62 mmol)의 용액을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고, 냉수(20 mL)로 희석하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(350 mg, 66%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.01 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.48-7.33 (m, 5H), 7. 11(d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 5.32 (s, 2H), 4.94 (q, J = 8.8 Hz, 2H).
단계-c: 2-아미노-5-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페놀의 합성
메탄올(10 mL) 중 2-(벤질옥시)-1-니트로-4-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤젠(350 mg, 1.07 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C(50 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 가스 풍선 하에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(210 mg, 95%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.28 (dd, J = 2.8 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.48 (q, J = 8.8 Hz, 2H); LC-MS: m/z 208.0 (M+1)+.
단계-d: 6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-(2,2,2-트리플루오로에톡시)페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 79%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.8 (bs, 1H), 7.38 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.01 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.79 (q, J = 8.8 Hz, 2H); LC-MS: m/z 250.0 (M+1)+.
단계-e: 2-클로로-6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 87%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.69 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.85 (q, J = 8.8 Hz, 2H).
단계-f: 에틸 1-메틸-2-((6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 21%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.94 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.77 (q, J = 8.8 Hz, 2H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.63 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 435.35 (M+1)+.
단계-g: 1-메틸-2-((6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 62%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.5 (bs, 2H), 8.18 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.93 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.77 (q, J = 9.2 Hz, 2H), 3.62 (s, 3H); LC-MS: m/z 407.0 (M+1)+.
단계-h: N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-((6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 70%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 1H), 8.4 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.93 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.77 (q, J = 8.8 Hz, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.48-3.43 (m, 4H), 3.28 (s, 3H); LC-MS: m/z 464.0 (M+1)+.
실시예 100. N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-2-((6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00073
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(2,2,2-트리플루오로에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 63%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.5 (bs, 1H), 8.42 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.32 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.98 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.80 (q, J = 8.8 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.54 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.36 (q, J = 6.0 Hz, 2H); LC-MS: m/z 450.0 (M+1)+.
실시예 101 및 102. 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00074
단계-a: 3-(벤질옥시)-4-니트로페놀의 합성
실온에서, 물(70 mL) 중 2-(벤질옥시)-4-플루오로-1-니트로벤젠(4.0 g, 16.2 mmol)의 교반된 현탁액에, 수산화칼륨(4.53 g, 80.9 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 30시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시키고, 에틸 아세테이트(3 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 잔류물을 수득하고, 이를 용리액으로 헥산 중 20% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.5 g, 38%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.88 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.49-7.47 (m, 2H), 7.43-7.40 (m, 2H), 7.35 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.49 (dd, J = 2.4 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 5.25 (s, 2H).
단계-b: (2-(3-(벤질옥시)-4-니트로페녹시)에톡시)( tert -부틸)디메틸실란의 합성
실온에서, 밀봉된 튜브 내 DMFA(15 mL) 중 3-(벤질옥시)-4-니트로페놀(1.5 g, 6.1 mmol)의 교반된 용액에, 탄산칼륨(2.1 g, 15.3 mmol)과 (2-브로모에톡시)(tert-부틸)디메틸실란(1.75 g, 7.3 mmol)을 첨가하고, 130℃에서 4시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(2 X 500 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 잔류물을 수득하고, 이를 용리액으로 헥산 중 5% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(8.0 g, 64%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.96 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.49-7.47 (m, 2H), 7.43-7.39 (m, 2H), 7.36-7.34 (m, 1H), 6.89 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 2.4 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 5.32 (s, 2H), 4.17 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.92 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 0.86 (s, 9H), 0.02 (s, 6H).
단계-c: 2-아미노-5-(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)페놀의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, (2-(3-(벤질옥시)-4-니트로페녹시)에톡시)(tert-부틸)디메틸실란을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 87%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.47 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 3.84-3.80 (m, 4H), 0.87 (s, 9H), 0.02 (s, 6H); LC-MS: m/z 284.1 (M+1)+.
단계-d: 6-(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 77%). 미정제 화합물을 임의의 분석 데이터 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계-e: 6-(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)-2-(메틸티오)벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하고 16시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 80%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.50 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.91 (dd, J = 2.8 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.06 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.92 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.27 (s, 3H), 0.86 (s, 9H), 0.2 (s, 6H); LC-MS: m/z 340.0 (M+1)+.
단계-f: 6-(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)-2-(메틸설포닐)-벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)-2-(메틸티오)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하고 4시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.90-7.89 (m, 1H), 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.99-6.97 (m, 1H), 4.10 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.95 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.62 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.2 (s, 6H).
단계-g: 에틸 2-((6-(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1g에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 6-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)-2-(메틸설포닐)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 17%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 1H), 8.21 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.81 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 4.32 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 4.06-4.04 (m, 2H), 3.94-3.92 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.2 (s, 6H); LC-MS: m/z 511.1 (M+1)+.
단계-h: 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
THF(2 mL), 에탄올(2 mL) 및 물(1 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 2-((6-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(80 mg, 0.15 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(32 mg, 0.78 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반 하에서 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물(20 mL)에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(50 mg, 87%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.3 (bs, 1H), 8.16 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.85 (bs, 1H), 4.01 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.75-3.73 (m, 2H), 3.66 (s, 3H); LC-MS: m/z 369.0 (M+1)+.
단계-i: 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 4% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하였다(수율: 17%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 1H), 8.43 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.75 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 2.8 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.11 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.66 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.49-3.41 (m, 4H), 3.28 (bs, 1H), 3.24 (s, 3H); LC-MS: m/z 426.4 (M+1)+.
실시예 103. 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00075
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 6% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(수율: 18%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.05 (bs, 1H), 8.35 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.82 (dd, J = 2.8 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.85 (bs, 1H), 4.72 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 4.01 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.72 (q, J = 4.4 Hz, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.53 (q, J = 5.6 Hz, 2H), 3.37-3.33 (m, 2H); LC-MS: m/z 412.0 (M+1)+.
실시예 104. 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00076
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 10% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(수율: 18%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.05 (bs, 1H), 8.41 (bs, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.11(s, 1H), 6.82 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.61 (bs, 2H), 4.01 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.72 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.57-3.43 (m, 8H); LC-MS: m/z 456.3 (M+1)+.
실시예 105. N -(2-아미노에틸)-2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 히드로클로라이드의 합성
Figure pct00077
단계-a: tert-부틸 (2-(2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미도)에틸)카르바메이트의 합성
0℃에서, DMFA(2 mL) 중 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(100 mg, 0.27 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.09 mL, 0.54 mmol)과 HBTU(102 mg, 0.27 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, tert-부틸 (2-아미노에틸)카르바메이트(48 mg, 0.30 mmol)를 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응이 완결되면, 반응 혼합물을 물(15 mL)로 희석하고, 15분 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 미정제 생성물을 수득하고, 이를 DCM 중 3% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(70 mg, 50%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.39 (bs, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.91 (bs, 1H), 6.82 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.85 (bs, 1H), 4.01 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.72 (bs, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.30 (DMSO 수분 피크와 병합된 2H), 3.12 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 1.38 (s, 9H); LC-MS: m/z 511.3 (M+1)+.
단계-b: N -(2-아미노에틸)-2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드 히드로클로라이드의 합성
0℃에서, 1,4-디옥산(3 mL) 중 tert-부틸 (2-(2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미도)에틸)카르바메이트(70 mg, 0.14 mmol)의 교반된 용액에, 1,4-디옥산 중 4 M HCl(1 mL)을 첨가하고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 디에틸 에테르를 이용하여 분쇄하고, 용매를 디캔팅하였다. 수득한 고체를 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(35 mg, 57%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.5 (bs, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.12-8.07 (m, 4H), 7.90 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.88 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.02 (bs, 2H), 3.73 (bs, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.56 (q, J = 5.2 Hz, 2H), 3.02 (q, J = 5.6 Hz, 2H); LC-MS: m/z 411.2 (M+1)+.
실시예 106. N -(2-((4,5-디히드로-1 H -이미다졸-2-일)아미노)에틸)-2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00078
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 N1-(4,5-디히드로-1H-이미다졸-2-일)에탄-1,2-디아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 58%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.73 (bs, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.79 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 4.86 (bs, 1H), 4.00 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.72 (bs, 2H), 3.60-3.55 (m, 7H), 3.43 (bs, 2H), 3.30 (DMSO 수분 피크와 병합된 2H); LC-MS: m/z 479.2 (M+1)+.
실시예 107 및 108. 2-((5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-((5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00079
단계-a: 4-플루오로-2-니트로-5-(트리플루오로메틸)페놀의 합성
아세트산(20 mL) 중 4-플루오로-3-(트리플루오로메틸)페놀(1 g, 5.6 mmol)의 용액에, 10℃ 내지 15℃에서 아세트산(5 mL) 중 60% 질산 수용액(3 mL)을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 이어서, 혼합물을 얼음물(50 mL)에 붓고, EtOAc(3 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(2 X 50 mL), 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하고, 이를 용리액으로 헥산 중 5% EtOAc를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(700 mg, 22%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.71 (bs, 1H), 8.14 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 5.6 Hz, 1H); LC-MS: m/z 224.0 (M-1)-.
단계-b: 2-아미노-4-플루오로-5-(트리플루오로메틸)페놀의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 4-플루오로-2-니트로-5-(트리플루오로메틸)페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 82%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.54 (s, 1H), 6.78 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 5.5 (bs, 2H).
단계-c: 5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-4-플루오로-5-(트리플루오로메틸)페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 82%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.4 (bs, 1H), 8.10 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 9.6 Hz, 1H); LC-MS: m/z 236.0 (M-1)-.
단계-d: 2-클로로-5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 99%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.74 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 10.0 Hz, 1H).
단계-e: 에틸 2-((5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 52%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.43 (bs, 1H), 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 423.0 (M+1)+.
단계-f: 2-((5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 86%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.4 (bs, 2H), 8.20 (s, 1H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H); LC-MS: m/z 395.1 (M+1)+.
단계-g: 2-((5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 72%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.35 (bs, 1H), 8.40 (bs, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.84-7.79 (m, 2H), 7.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 4.50 (bs, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.54 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 3.38-3.33 (m, 2H); LC-MS: m/z 438.0 (M+1)+.
실시예 109. N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-(옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00080
단계-a: 3-아미노피리딘-2-올의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 3-니트로피리딘-2-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 85%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.3 (bs, 1H), 6.59 (dd, J = 2.0 Hz, J = 6.8 Hz, 1H), 6.43 (dd, J = 2.4 Hz, J = 6.8 Hz, 1H), 5.98 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.97 (bs, 2H); LC-MS: m/z 111.25 (M+1)+.
단계-b: 옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-티올의 합성
실온에서, THF(15 mL) 중 3-아미노피리딘-2-올(500 mg, 4.5 mmol)의 용액에, 티오포스겐(0.41 mL, 5.4 mmol)을 15분의 기간에 걸쳐 서서히 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염화암모늄 포화 수용액(9 mL)으로 켄칭하고, 농축시켰다. 수성층을 10 N 수산화나트륨 용액(5 mL)을 이용하여 염기성화시키고, 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 추출하고, 수성층을 1 N HCl을 이용하여 산성화시키고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 잔류물을 수득하고, 이를 용리액으로 DCM 중 2% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(200 mg, 29%); LC-MS: m/z 153.15 (M+1)+.
단계-c: 2-클로로옥사졸로[5,4- b ]피리딘의 합성
실온에서, 염화티오닐(5 mL) 중 옥사졸로[5,4-b]피리딘-2-티올(200 mg, 1.31 mmol)의 용액에, N,N-디메틸포름아미드(1방울)를 첨가하고, 반응 혼합물을 2시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 미정제 화합물을 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(220 mg); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.40 (dd, J = 1.6 Hz, J = 4.8 Hz, 1H), 8.26 (dd, J = 1.2 Hz, J = 7.6 Hz, 1H), 7.56-7.53 (m, 1H); LC-MS: m/z 155.1 (M+1)+.
단계-d: 에틸 1-메틸-2-(옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로옥사졸로[5,4-b]피리딘을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 20%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.24 (s, 1H), 8.02 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.67 (s, 3H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 338.15 (M+1)+.
단계-e: 1-메틸-2-(옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-(옥사졸로[5,4-b]피리딘-2-일아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 54%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.4 (bs, 1H), 8.20 (s, 1H), 8.01 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.28-7.25 (m, 1H), 3.67 (s, 3H); LC-MS: m/z 310.1(M+1)+.
단계-f: N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-(옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-(옥사졸로[5,4-b]피리딘-2-일아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 38%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.38 (bs, 1H), 8.47 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.0 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.79-7.77 (m, 2H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.27-7.24 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.48-3.44 (m, 4H), 3.28 (s, 3H); LC-MS: m/z 367.2 (M+1)+.
실시예 110. N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-2-(옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00081
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-(옥사졸로[5,4-b]피리딘-2-일아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 51%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.38 (bs, 1H), 8.09 (s, 1H), 8.01 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.80-7.76 (m, 2H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.25 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 4.72 (bs, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.53 (bs, 2H), 3.35 (q, J = 6.0 Hz, 2H); LC-MS: m/z 353.0 (M+1)+.
실시예 111 및 112. 1-메틸-2-(옥사졸로[4,5- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-(옥사졸로[4,5- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00082
단계-a: 옥사졸로[4,5- b ]피리딘-2-티올의 합성
실온에서 에탄올(40 mL) 중 2-아미노피리딘-3-올(2.2 g, 20 mmol)의 용액에, 수산화칼륨(1.68 g, 30 mmol)과 이황화탄소(15 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 12시간 동안 환류시키고, 실온까지 냉각시키고, 물(75 mL)로 희석하고, 빙초산을 이용하여 중화시켰다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.8 g, 59%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.5 (s, 1H), 8.23 (dd, J = 1.2 Hz, J = 5.2 Hz, 1H), 7.88 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H); LC-MS: m/z 153.1 (M+1)+.
단계-b: 2-클로로옥사졸로[4,5- b ]피리딘의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 옥사졸로[4,5-b]피리딘-2-티올을 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 가열하여 표제 화합물을 합성하였다. (수율: 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.01 (dd, J = 1.6 Hz, J = 5.6 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.10-7.06 (m, 1H); LC-MS: m/z 155.01 (M+1)+.
단계-c: 에틸 1-메틸-2-(옥사졸로[4,5- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로옥사졸로[4,5-b]피리딘을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 32%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.98 (s, 1H), 7.94 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.21-7.18 (m, 1H), 6.77-6.74 (m, 1H), 4.32-4.26 (m, 2H), 3.57 (s, 3H), 1.38 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 338.15 (M+1)+.
단계-d: 1-메틸-2-(옥사졸로[4,5- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-(옥사졸로[4,5-b]피리딘-2-일아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 73%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.83 (bs, 1H), 12.44 (bs, 1H), 8.26-8.23 (m, 2H), 7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.12-7.09 (m, 1H), 3.72 (s, 3H); LC-MS: m/z 310.15 (M+1)+.
단계-e: N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-2-(옥사졸로[4,5- b ]피리딘-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-(옥사졸로[4,5-b]피리딘-2-일아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 53%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.4 (bs, 1H), 8.48 (bs, 1H), 8.23 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.79-7.75 (s, 2H), 7.53 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.11-7.08 (m, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.48-3.44 (m, 4H), 3.29 (s, 3H); LC-MS: m/z 367.2 (M+1)+.
실시예 113. N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00083
단계-a: 3-니트로-6-(트리플루오로메틸)피리딘-2-올의 합성
실온에서, 에탄올(25 mL) 중 2-니트로아세트아미드(5.0 g, 47.8 mmol)의 용액에, 에틸 (E)-5,5,5-트리플루오로-4-옥소펜트-2-에노에이트(11.24 g, 57.3 mmol)와 에탄올 중 25% 나트륨에톡시드(25.9 mL, 95.3 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 90℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시키고, EtOAc(2 X 150 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 잔류물을 수득하고, 이를 용리액으로 헥산 중 50% EtOAc를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.5 g); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.84 (bs, 1H), 7.51 (d, J = 7.6 Hz, 1H).
단계-b: 3-아미노-6-(트리플루오로메틸)피리딘-2-올의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 3-니트로-6-(트리플루오로메틸)피리딘-2-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 82%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.7 (bs, 1H), 6.88 (bs, 1H), 6.69 (bs, 1H), 5.60 (s, 2H); LC-MS: m/z 179.1 (M+1)+.
단계-c: 5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-티올의 합성
실시예 109 단계-b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 3-아미노-6-(트리플루오로메틸)피리딘-2-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 65%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.81-7.75 (m, 2H); LC-MS: m/z 219.0 (M-1).
단계-d: 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4- b ]피리딘의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4-b]피리딘-2-티올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 74%). 미정제 화합물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계-e: 에틸 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4-b]피리딘을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 43%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.5 (bs, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.93-7.89 (m, 2H), 7.75 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.34 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.71 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 406.1 (M+1)+.
단계-f: 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4-b]피리딘-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.20 (bs, 1H), 7.74-7.70 (m, 2H), 7.55 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.62 (s, 3H); LC-MS: m/z 378.1 (M+1)+.
단계-g: N -(2-히드록시에틸)-1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4- b ]피리딘-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((5-(트리플루오로메틸)옥사졸로[5,4-b]피리딘-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-아미노에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 28%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.22 (bs, 1H), 7.78 (bs, 1H), 7.60 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.51 (bs, 1H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.70 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.50 (q, J = 5.2 Hz, 2H), 3.36 (q, J = 6.0 Hz, 2H); LC-MS: m/z 421.1 (M+1)+.
실시예 114. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-(티아졸로[4,5- b ]피라진-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00084
단계-a: 114a의 합성
실온에서, 1,4-디옥산(20 mL) 중 피라진-2-아민(2.0 mg, 21.0 mmol)의 교반된 용액에, O-에틸 카본이소티오시아나티데이트(O-ethyl carbonisothiocyanatidate)(3.03 g, 23.1 mmol)를 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물에, 에틸 아세테이트를 첨가하고, 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(2.0 g, 42%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.07 (s, 1H), 11.76 (s, 1H), 9.67 (s, 1H), 8.50 (s, 2H), 4.24 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.27 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 227.0 (M+1)+.
단계-b: 에틸 티아졸로[4,5- b ]피라진-2-일카르바메이트의 합성
1,4-디옥산(9 mL) 중 114a(1.8 g, 7.96 mmol)의 교반된 용액에, 6 M HCl(18 mL)을 첨가하고, 50℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.5 g, 84%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.60 (bs, 1H), 8.58 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 8.44 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.29 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 1.30 (t, J = 7.6 Hz, 3H); LC-MS: m/z 225.0 (M+1)+.
단계-c: 티아졸로[4,5- b ]피라진-2-아민의 합성
물(5 mL) 중 에틸 티아졸로[4,5-b]피라진-2-일카르바메이트(500 mg, 2.23 mmol)의 용액에, 수산화나트륨(267 mg, 6.69 mmol)을 첨가하고, 120℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(300 mg, 88%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.42 (s, 2H), 8.23 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 2.8 Hz, 1H); LC-MS: m/z 153.1 (M+1)+.
단계-d: 에틸 1-메틸-2-(티아졸로[4,5- b ]피라진-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 2c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 3-아미노-4-(메틸아미노)벤조에이트와 티아졸로[4,5-b]피라진-2-아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 9%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.63 (bs, 1H), 8.44 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.23 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.91 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.67 (s, 3H), 1.35 (d, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 355.0 (M+1)+.
단계-e: 1-메틸-2-(티아졸로[4,5- b ]피라진-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
THF(1 mL), 에탄올(1 mL) 및 물(0.5 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 1-메틸-2-(티아졸로[4,5-b]피라진-2-일아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(60 mg, 0.17 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(35 mg, 0.85 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반 하에서 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 미정제 물질을 바로 다음 단계에 사용하였다(40 mg); LC-MS: m/z 326.95 (M+1)+.
단계-f: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-(티아졸로[4,5- b ]피라진-2-일아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-(티아졸로[4,5-b]피라진-2-일아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 59%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.60 (bs, 1H), 8.46-8.41 (m, 2H), 8.20-8.14 (m, 2H), 7.78 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 4.60 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 3.59-3.43 (m, 8H); LC-MS: m/z 414.05 (M+1)+.
실시예 115 및 116. 2-((6-시클로프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성 및 2-((6-시클로프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00085
단계-a: 5-시클로프로필-2-니트로페놀의 합성
톨루엔(40 mL) 중 5-브로모-2-니트로페놀(2.0 g, 9.17 mmol)과 시클로프로필보론산(1.02 g, 11.92 mmol)의 교반된 용액에, 인산칼륨(6.81 g, 32.1 mmol), 트리시클로헥실포스핀(0.25 g, 0.91 mmol) 및 물(2 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소 가스로 10분 동안 퍼징한 후, 반응 혼합물에 팔라듐 디아세테이트(0.1 g, 0.45 mmol)를 첨가하고, 이를 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 셀라이트층을 통해 여과하고, 에틸 아세테이트(150 mL)로 세정하였다. 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 잔류물을 수득하고, 이를 용리액으로 100% 헥산을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(0.9 g, 55%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.72 (bs, 1H), 7.82 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.68 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 1.99-1.94 (m, 1H), 1.08-1.03 (m, 2H), 0.78-0.74 (m, 2H).
단계-b: 2-아미노-5-시클로프로필페놀의 합성
에탄올(4 mL) 및 THF(4 mL) 중 5-시클로프로필-2-니트로페놀(1.75 g, 11.4 mmol)의 용액에, PtO2(12 mg)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 가스 풍선 하에서 4시간 동안 교반하였다. 이를 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(250 mg, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.99 (bs, 1H), 6.61-6.59 (m, 1H), 6.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.43-6.34 (m, 1H), 5.35 (bs, 2H), 1.74-1.65 (m, 1H), 0.80-0.75 (m, 2H), 0.48-0.44 (m, 2H).
단계-c: 6-시클로프로필벤조[ d ]옥사졸-2-티올의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-시클로프로필페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 90%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.72 (bs, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.11-7.04 (m, 2H), 2.02-1.98 (m, 1H), 0.98-0.94 (m, 2H), 0.71-0.67 (m, 2H); LC-MS: m/z 190.05 (M-1).
단계-d: 2-클로로-6-시클로프로필벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-시클로프로필벤조[d]옥사졸-2-티올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 98%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.59 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 2.09-2.01 (m, 1H), 1.02-0.99 (m, 2H), 0.75-0.74 (m, 2H); LC-MS: m/z 194.0 (M+1)+.
단계-e: 에틸 2-((6-시클로프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-시클로프로필벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 27%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.97 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.35-4.27 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 2.02-1.98 (m, 1H), 1.36-1.30 (m, 3H), 0.97-0.92 (m, 2H), 0.71-0.67 (m, 2H); LC-MS: m/z 377.2 (M+1)+.
단계-f: 2-((6-시클로프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((6-시클로프로필벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.5-11.2 (bs, 2H), 8.18 (s, 1H), 7.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H), 2.06-2.02 (m, 1H), 1.00-0.95 (m, 2H), 0.72-0.68 (m, 2H); LC-MS: m/z 349.0 (M+1)+.
단계-g: 2-((6-시클로프로필벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-시클로프로필벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-메톡시에틸아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 46%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 1H), 8.44 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.96 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.48-3.43 (m, 4H), 3.28 (s, 3H), 2.02-1.98 (m, 1H), 0.96-0.92 (m, 2H), 0.70-0.66 (m, 2H); LC-MS: m/z 406.2 (M+1)+.
실시예 117. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((7-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00086
단계-a: 2-니트로-6-(트리플루오로메틸)페놀의 합성
실온에서, 3 M 황산(25 mL)에 질산나트륨(1.73 g, 20.37 mmol)과 아질산나트륨(100 mg)을 교반 하에서 첨가한 후, DCM(40 mL) 중 2-(트리플루오로메틸)페놀(3.0 g, 18.52 mmol)을 첨가하고, 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음물(50 mL)에 붓고, DCM(2 X 100 mL)으로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 5% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.3 g, 40%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.34 (bs, 1H), 8.27 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 8.00 (dd, J = 1.2 Hz, J = 7.6 Hz, 1H), 7.21-7.17 (m, 1H).
단계-b: 2-아미노-6-(트리플루오로메틸)페놀의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-니트로-6-(트리플루오로메틸)페놀을 출발 물질로 사용하고 4시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 90%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.88-6.84 (m, 1H), 6.75-6.70 (m, 2H), 6.50 (bs, 2H); LC-MS: m/z 178.05 (M+1)+.
단계-c: 7-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-티온의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-6-(트리플루오로메틸)페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 65%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.28 (bs, 1H), 7.59-7.53 (m, 2H), 7.49-7.45 (m, 1H); LC-MS: m/z 218.1 (M-1)-.
단계-d: 2-클로로-7-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 7-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2(3H)-티온을 출발 물질로 사용하고 2시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 84%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.11 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.64 (t, J = 7.2 Hz, 1H).
단계-e: 에틸 1-메틸-2-((7-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-7-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 36%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.41 (s, 1H), 8.26 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.90 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.44-7.38 (m, 2H), 4.33 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.67 (s, 3H), 1.35 (d, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 405.0 (M+1)+.
단계-f: 1-메틸-2-((7-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((7-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.83 (bs, 1H), 12.40 (bs, 1H), 8.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.43-7.37 (m, 2H), 3.67 (s, 3H); LC-MS: m/z 377.0 (M+1)+.
단계-g: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((7-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((7-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 61%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.46 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.80-7.73 (m, 2H), 7.53 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.42-7.38 (m, 2H), 4.60 (bs, 1H), 3.67 (s, 3H), 3.58-3.43 (m, 8H); LC-MS: m/z 464.1 (M+1)+.
실시예 118. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-2-((1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)벤조[ d ]옥사졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00087
단계-a: N -메틸-2-니트로아닐린의 합성
실온에서, DMFA(3 mL) 중 1-플루오로-2-니트로벤젠(1.0 g, 7.08 mmol)의 용액에, 메틸아민(1 mL, 40% 수용액, 35.4 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(50 mL)로 희석하고, 2시간 동안 교반하였다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 생성물을 황색 고체로 수득하였다(700 mg, 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.14 (bs, 1H), 8.06 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 7.57-7.53 (m, 1H), 6.98 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.69-6.66 (m, 1H), 2.96 (d, J = 4.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 153.0 (M+1)+.
단계-b: N 1 -메틸벤젠-1,2-디아민의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, N-메틸-2-니트로아닐린을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 98%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 6.52-6.48 (m, 2H), 6.41-6.34 (m, 2H), 4.45 (bs, 2H), 2.68 (s, 3H); LC-MS: m/z 123.2 (M+1)+.
단계-c: 1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-아민의 합성
화합물 1f에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, N 1-메틸벤젠-1,2-디아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 83%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.11-7.09 (m, 2H), 6.94-6.87 (m, 2H), 6.37 (s, 2H), 3.78 (s, 3H).
단계-d: 에틸 2-((1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)벤조[ d ]옥사졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2-아민과 에틸 2-클로로벤조[d]옥사졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 31%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 7.99 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.76-7.74 (m, 1H), 7.64-7.62 (m, 1H), 7.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.45-7.43 (m, 1H), 7.26-7.23 (m, 2H), 4.32 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.63 (s, 3H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 336.95 (M+1)+.
단계-e: 2-((1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)벤조[ d ]옥사졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)벤조[d]옥사졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 78%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.80 (bs, 1H), 12.22 (bs, 1H), 7.98 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.67-7.63 (m, 1H), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.47-7.45 (m, 1H), 7.28-7.21 (m, 2H), 3.68 (s, 3H); LC-MS: m/z 309.1 (M+1)+.
단계-f: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-2-((1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)아미노)벤조[ d ]옥사졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)아미노)벤조[d]옥사졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 9% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하였다(수율: 64%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.48 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.65-7.62 (m, 2H), 7.48-7.45 (m, 2H), 7.28-7.22 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.57-3.35 (m, 8H); LC-MS: m/z 396.2 (M+1)+.
실시예 119. 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-메톡시에톡시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00088
단계-a: 2-(2-메톡시에톡시)이소인돌린-1,3-디온의 합성
실온에서, DMFA(15 mL) 중 N-히드록시프탈이미드(4.6 g, 28.2 mmol)의 교반된 용액에, 트리에틸아민(8.0 mL, 56.4 mmol)과 1-브로모-2-메톡시에탄(4.0 mL, 42.3 mmol)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 냉수(2 X 200 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(2.8 g, 45%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.86 (s, 4H), 4.26 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.65-3.63 (m, 2H), 3.25 (s, 3H); LC-MS: m/z 222.20 (M+1)+.
단계-b: O -(2-메톡시에틸)히드록실아민의 합성
실온에서, 메탄올(75 mL) 중 2-(2-메톡시에톡시)이소인돌린-1,3-디온(2.8 g, 12.6 mmol)의 교반된 용액에, 히드라진 수화물(0.95 g, 19.0 mmol)을 첨가하고, 4시간 동안 환류시켰다. 이어서, 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 여과하고, 여과액을 농축시켰다. 수득한 잔류물을 디에틸 에테르(30 mL) 중에서 교반하고, 여과하였다. 여과액을 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(550 mg, 48%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 5.50 (s, 2H), 3.84-3.82 (m, 2H), 3.58-3.56 (m, 2H), 3.39 (s, 3H).
단계-c: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-메톡시에톡시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 O-(2-메톡시에틸)히드록실아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 20%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.28 (s, 1H), 11.73 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.64 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 7.44 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.22 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.04 (t, J = 4.2 Hz, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.59 (t, J = 4.2 Hz, 2H), 3.31 (s, 3H); LC-MS: m/z 382.0 (M+1)+.
실시예 120. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-히드록시프로폭시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00089
단계-a: 2-(2-히드록시프로폭시)이소인돌린-1,3-디온의 합성
실온에서, 톨루엔(50 mL) 중 2-히드록시이소인돌린-1,3-디온(5.0 g, 30.65 mmol) 및 2-메틸옥시란(4.1 mL, 61.3 mmol)의 교반된 용액에, DIPEA(0.6 mL, 3.1 mmol)와 테트라부틸암모늄 브로마이드(0.99 g, 3.1 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 5시간 동안 환류시켰다. 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시키고, EtOAc(2 X 100 mL)와 물(50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 100% 디클로로메탄을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(4.0 g, 59%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.85 (s, 4H), 4.80 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.03-4.00 (m, 1H), 3.96-3.93 (m, 2H), 1.14 (d, J = 6.0 Hz, 3H); LC-MS: m/z 222.1 (M+1)+.
단계-b: 1-(아미노옥시)프로판-2-올 히드로클로라이드의 합성
6 N 염산 수용액(15 mL) 중 2-(2-히드록시프로폭시)이소인돌린-1,3-디온(2.0 g, 9.0 mmol)의 용액을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 여과하여 반응 혼합물 중 침전된 고체를 제거하고, 여과액을 감압 하에서 농축시켜 표제 화합물을 히드로클로라이드 염으로 수득하고(1.0 g), 미정제 화합물을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계-c: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-히드록시프로폭시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, DMFA(5 mL) 중 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(100 mg, 0.32 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.06 mL, 0.32 mmol)과 HBTU(122 mg, 0.32 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 1-(아미노옥시)프로판-2-올 히드로클로라이드(41 mg, 0.32 mmol)를 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(20 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 분취용 HPLC 방법으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(35 mg, 28%).
분취용 HPLC 정제 방법 세부사항:
희석 : THF:ACN:물
이동상 A: 100% 물
이동상 B: 100% 아세토니트릴
구배 : 0/10, 6/20, 10/80
유량 : 15 ml/분
컬럼 : Luna (250 x 21.1 x 5 μm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 11.7 (bs, 1H), 8.01 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.90 (bs, 1H), 3.92-3.89 (m, 1H), 3.78-3.74 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 1.10 (d, J = 6.4 Hz, 3H); LC-MS: m/z 382.05 (M+1)+.
실시예 121. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(2-(디메틸아미노)아세트아미도)에톡시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00090
단계-a: tert -부틸 (2-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)옥시)에틸)카르바메이트의 합성
0℃에서, THF(150 mL) 중 2-히드록시이소인돌린-1,3-디온(5.0 g, 30.67 mmol)의 교반된 용액에, tert-부틸 (2-히드록시에틸)카르바메이트(4.93 g, 30.67 mmol)와 트리페닐포스핀(8.03 g, 30.67 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반한 후, 디이소프로필 아조디카르복실레이트(6.19 g, 30.67 mmol)를 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응 혼합물을 물(50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 10% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하고(12.0 g, 순수하지 않음(semi pure)), 이를 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.86 (s, 4H), 6.82 (bs, 1H), 4.13 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.28-3.27 (m, 2H), 1.37 (s, 9H); LC-MS: m/z 207.0 (M-Boc)+.
단계-b: 2-(2-아미노에톡시)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세트산 염의 합성
0℃에서, DCM(150 mL) 중 tert-부틸 (2-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)옥시)에틸)카르바메이트(12.0 g, 39.08 mmol)의 교반된 용액에, 트리플루오로아세트산(20 mL)을 첨가하고, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 잔류물을 디에틸 에테르(50 mL) 중에서 교반하고, 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(3.8 g, 32%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.05 (bs, 3H), 7.90 (s, 4H), 4.34 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.38 (q, J = 7.2 Hz, 2H).
단계-c: 2-(디메틸아미노)- N -(2-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)옥시)에틸)아세트아미드의 합성
0℃에서, DMFA(15 mL) 중 2-(2-아미노에톡시)이소인돌린-1,3-디온 트리플루오로아세테이트(1.0 g, 4.85 mmol)의 교반된 용액에, 디메틸글리신(499 mg, 4.85 mmol), N-에틸디이소프로필아민(1.69 mL, 9.7 mmol) 및 HATU(2.02 g, 5.34 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 물(50 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 디클로로메탄 중 2% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(280 mg, 29%); LC-MS: m/z 292.1 (M+1)+.
단계-d: N -(2-(아미노옥시)에틸)-2-(디메틸아미노)아세트아미드의 합성
실온에서, 메탄올(5 mL) 중 2-(디메틸아미노)-N-(2-((1,3-디옥소이소인돌린-2-일)옥시)에틸)아세트아미드(280 mg, 0.96 mmol)의 교반된 용액에, 히드라진 수화물(0.3 mL)을 첨가하고, 4시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 회전식 증발기 상에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 디에틸 에테르(30 mL) 중에서 교반하고, 여과하였다. 여과액을 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(120 mg, 77%); 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 7.39 (bs, 1H), 5.50 (bs, 2H), 3.73 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.57-3.47 (m, 2H), 2.96 (s, 2H), 2.29 (s, 6H).
단계-e: 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(2-(디메틸아미노)아세트아미도)에톡시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, DMFA(2 mL) 중 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(80 mg, 0.26 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.04 mL, 0.26 mmol)과 HBTU(98 mg, 0.26 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, N-(2-(아미노옥시)에틸)-2-(디메틸아미노)아세트아미드(41 mg, 0.26 mmol)를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(15 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 X 20 mL)로 추출하였다. 수성층을 진공 하에서 농축시켰다. 수득한 잔류물을 분취용 HPLC 방법으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(10 mg, 9%).
분취용 HPLC 정제 방법 세부사항:
희석 : THF:ACN:물
이동상 A: 10 mM 아세트산암모늄 수용액
이동상 B: 100% 아세토니트릴
구배 : T/%B: 0/10, 10/50, 17/65, 19/90
유량 : 15 ml/분
컬럼 : Phenomenex Luna (250 x 21.2 x 5 μm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 11.60 (bs, 1H), 8.01 (bs, 2H), 7.64 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.49-7.42 (m, 3H), 7.20 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 3.90 (s, 2H), 3.63 (s, 3H), 3.41 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.89 (s, 2H), 2.32 (s, 6H); LC-MS: m/z 452.2 (M+1)+.
실시예 122. N -(2-(디메틸아미노)에톡시)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00091
단계-a: 2-(2-(디메틸아미노)에톡시)이소인돌린-1,3-디온의 합성
실시예 119 단계-a에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, N-히드록시프탈이미드와 1-클로로-2-디메틸아미노에탄 히드로클로라이드를 출발 물질로 사용하고, 4당량의 트리에틸아민을 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 17%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.86 (s, 4H), 4.21 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.61 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.18 (s, 6H); LC-MS: m/z 235.1 (M+1)+.
단계-b: 2-(아미노옥시)- N , N -디메틸에탄-1-아민의 합성
실시예 119 단계-b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(2-(디메틸아미노)에톡시)이소인돌린-1,3-디온을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 34%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 5.88 (bs, 2H), 3.58 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.38 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 2.13 (s, 6H); LC-MS: m/z 105.20 (M+1)+.
단계-c: N -(2-(디메틸아미노)에톡시)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(아미노옥시)-N,N-디메틸에탄-1-아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 15%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.82 (s, 1H), 7.66 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.61-7.51 (m, 2H), 3.99 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 2.55 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 2.22 (s, 6H); LC-MS: m/z 463.50 (M+1)+.
실시예 123. 2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)- N -(2-(디메틸아미노)에톡시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(아미노옥시)-N,N-디메틸에탄-1-아민과 2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.21 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.12 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.99 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.56 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 2.32 (s, 6H); LC-MS: m/z 395.1 (M+1)+.
실시예 124. N -(2-메톡시에톡시)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00092
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 O-(2-메톡시에틸)히드록실아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 28%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.39 (bs, 1H), 11.72 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.67 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.57-7.52 (m, 2H), 4.04 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.59 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.30 (s, DMSO에 병합된 3H); LC-MS: m/z 450.15 (M+1)+.
실시예 125. N -(2-히드록시에톡시)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00093
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(아미노옥시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 51%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.39 (bs, 1H), 11.73 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.57-7.53 (m, 2H), 4.78 (s, 1H), 3.94 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 3.67 (s, 3H), 3.66-3.63 (m, 2H); LC-MS: m/z 436.15 (M+1)+.
실시예 126. N -(2-히드록시에톡시)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00094
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(아미노옥시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 58%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 11.72 (s, 1H), 8.02 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.53-7.51 (m, 2H), 7.22 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.78 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 3.94 (t, J = 4.7 Hz, 2H), 3.64-3.62 (m, 5H); LC-MS: m/z 451.9 (M+1)+.
실시예 127. N -(2-메톡시에톡시)-1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00095
화합물 1i에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(트리플루오로메톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 O-(2-메톡시에틸)히드록실아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 28%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 11.70 (s, 1H), 8.01 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.65 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.53-7.49 (m, 2H), 7.22 (dd, J = 1.5 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 4.05-4.02 (m, 2H), 3.64 (s, 3H), 3.61-3.58 (m, 2H), 3.31 (s, 3H); LC-MS: m/z 466.0 (M+1)+.
실시예 128. N -(2-히드록시에톡시)-2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(아미노옥시)에탄-1-올과 2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 11.68 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.63 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.11 (bs, 2H), 3.93 (bs, 2H), 3.67-3.61 (m, 7H), 3.32 (s, DMSO 수분 피크와 병합된 3H); LC-MS: m/z 442.2 (M+1)+.
실시예 129. N -(2-히드록시에톡시)-2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00096
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-(2-히드록시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(아미노옥시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 10% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(수율: 14%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.15 (bs, 1H), 11.67 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.63 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.11(s, 1H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.83 (bs, 1H), 4.77 (bs, 1H), 4.01 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.93 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.72 (bs, 2H), 3.61 (bs, 5H); LC-MS: m/z 428.2 (M+1)+.
실시예 130. 2-((5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-히드록시에톡시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00097
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((5-플루오로-6-(트리플루오로메틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(아미노옥시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 61%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.45 (bs, 1H), 11.74 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.85 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.50 (bs, 1H), 3.94 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.64-3.63 (m, 2H); LC-MS: m/z 454.1 (M+1)+.
실시예 131. N -(2-히드록시에톡시)-1-메틸-2-((6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[ d ]티아졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00098
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-메틸-4,5,6,7-테트라히드로벤조[d]티아졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(아미노옥시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 43%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.05 (bs, 1H), 11.56 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.55 (dd, J = 1.0 Hz, J = 8.3 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.78 (bs, 1H), 3.92 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 3.63-3.61 (m, 5H), 2.67-2.59 (m, 1H), 2.50 (DMSO 피크와 병합된 2H), 2.18-2.11 (m, 1H), 1.87-1.84 (m, 2H), 1.46-1.43 (m, 1H), 1.05 (d, J = 6.3 Hz, 3H); LC-MS: m/z 402.2 (M+1)+.
실시예 132. 2-((6-아세틸벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에톡시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00099
단계-a: 1-(4-아미노-3-히드록시페닐)에탄-1-온의 합성
10% 수산화나트륨 수용액(50 mL) 중 6-아세틸벤조[d]옥사졸-2(3H)-온(5.0 g, 28.2 mmol)의 혼합물을 4시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 3 N HCl을 이용하여 산성화시킨 후, 탄산수소나트륨 포화 용액을 이용하여 pH 약 8까지 염기성화시켰다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(4.1 g, 98%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.34 (s, 1H), 7.28 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.22 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.44 (s, 2H), 2.36 (s, 3H).
단계-b: 1-(2-메르캅토벤조[ d ]옥사졸-6-일)에탄-1-온의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(4-아미노-3-히드록시페닐)에탄-1-온을 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 14.2 (bs, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.94 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.60 (s, 3H); LC-MS: m/z 192.02 (M-1)-.
단계-c: 1-(2-(메틸티오)벤조[ d ]옥사졸-6-일)에탄-1-온의 합성
화합물 1b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-(2-메르캅토벤조[d]옥사졸-6-일)에탄-1-온을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 78%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.22 (s, 1H), 7.98 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.80 (s, 3H), 2.67 (s, 3H).
단계-d: 1-(2-(메틸티오)벤조[ d ]옥사졸-6-일)에탄-1-올의 합성
0℃에서, 메탄올(80 mL) 중 1-(2-(메틸티오)벤조[d]옥사졸-6-일)에탄-1-온(4.1 g, 19.8 mmol)의 교반된 용액에, 수소화붕소나트륨(1.12 g, 29.7 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수(100 mL)로 켄칭하고, EtOAc(2 X 150 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(4.1 g, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.57-7.53 (m, 2H), 7.31 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.85-4.80 (m, 1H), 2.74 (s, 3H), 1.35 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
단계-e: 6-(1-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-2-(메틸티오)벤조[ d ]옥사졸의 합성
0℃에서, DCM(80 mL) 중 1-(2-(메틸티오)벤조[d]옥사졸-6-일)에탄-1-올(4.1 g, 19.6 mmol)의 교반된 용액에, 이미다졸(2.0 g, 29.4 mmol)을 첨가하고, 5분 동안 교반한 후, TBDMSCl(3.5 g, 23.5 mmol)을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)로 희석하고, DCM(2 X 150 mL)으로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(6.6 g, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.63-7.61 (m, 2H), 7.36 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.08 (q, J = 6.4 Hz, 1H), 2.80 (s, 3H), 1.42 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.91 (s, 9H), 0.2 (s, 6H); LC-MS: m/z 324.1 (M+1)+.
단계-f: 6-(1-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-2-(메틸설포닐)-벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-2-(메틸티오)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하고 4시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.96-7.49 (m, 3H), 5.14-5.11 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 1.40 (d, J = 6.0 Hz, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.2 (s, 3H), -0.2 (s, 3H).
단계-g: 에틸 2-((6-(1-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1g에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 6-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-2-(메틸설포닐)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 31%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.23 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.42-7.39 (m, 2H), 7.20 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.0 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 4.32 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.63 (s, 3H), 1.40-1.33 (m, 6H), 0.87 (s, 9H), 0.001 (s, 3H), -0.036 (s, 3H).
단계-h: 에틸 2-((6-(1-히드록시에틸)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
0℃에서, THF(30 mL) 중 에틸 2-((6-(1-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(1.4 g, 2.8 mmol)의 교반된 용액에, THF 중 1 M TBAF(5.7 mL, 5.7 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염화암모늄 포화 용액(50 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 펜탄 중에서 15분 동안 교반하고, 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.1 g, 100%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41-7.39 (m, 2H), 7.19 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 5.16 (bs, 1H), 4.80 (bs, 1H), 4.33 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.63 (s, 3H), 1.40-1.35 (m, 6H); LC-MS: m/z 381.15 (M+1)+.
단계-i: 에틸 2-((6-아세틸벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
0℃에서, DCM(30 mL) 중 에틸 2-((6-(1-히드록시에틸)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(1.1 g, 2.9 mmol)의 교반된 용액에, 데스-마틴 페리오디난(Dess-martin periodinane)(1.47 g, 3.5 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM(100 mL), 물(50 mL)로 희석하였다. 유기층을 탄산수소나트륨 포화 용액(2 X 50 mL), 물(50), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(540 mg, 49%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.4 (bs, 1H), 8.26 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.91-7.89 (m, 2H), 7.58-7.51 (m, 2H), 4.34 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.66 (s, 3H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 379.15 (M+1)+.
단계-j: 2-((6-아세틸벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]-이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-((6-아세틸벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 68%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.8 (bs, 1H), 12.4 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.82-7.79 (m, 2H), 7.59-7.52 (m, 2H), 3.67 (s, 3H), 2.66 (s, 3H); LC-MS: m/z 351.1 (M+1)+.
단계-k: 2-((6-아세틸벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-메톡시에톡시)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-아세틸벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 O-(2-메톡시에틸)히드록실아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 42%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.4 (bs, 1H), 11.7 (s, 1H), 8.02-7.99 (s, 2H), 7.99 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.68-7.63 (m, 1H), 7.54-7.51 (m, 2H), 4.04 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.60 (t, J = 4.4 Hz, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.60 (s, 3H); LC-MS: m/z 424.15 (M+1)+.
실시예 133. N -(2-히드록시에틸)-2-((6-(2-히드록시프로판-2-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00100
단계-a: 2-((6-아세틸벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)- N -(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-((6-아세틸벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에탄-1-아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 48%); LC-MS: m/z 508.25 (M+1)+.
단계-b: N -(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-2-((6-(2-히드록시프로판-2-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, THF(5 mL) 중 2-((6-아세틸벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-N-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미드(200 mg, 0.39 mmol)의 교반된 용액에, 디에틸 에테르 중 3 M 브롬화메틸마그네슘(0.13 mL, 0.39 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염화암모늄 포화 수용액(20 mL)으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(100 mg, 미정제); LC-MS: m/z 524.3 (M+1)+.
단계-c: N -(2-히드록시에틸)-2-((6-(2-히드록시프로판-2-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 132 단계-h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, N-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에틸)-2-((6-(2-히드록시프로판-2-일)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미드를 출발 물질로 사용하고 4시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 분취용 HPLC 방법으로 정제하였다(수율: 6%).
분취용 HPLC 정제 방법 세부사항:
희석 : ACN:물
이동상 A: 물 중 0.1% 포름산
이동상 B: 100% 아세토니트릴
구배 : 0/10, 2/10, 6/100, 10/100, 11/10, 12/10
유량 : 1.0 ml/분
컬럼 : Kinetex C-18 (250 x 21.1 x 5 μm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.23 (bs, 1H), 8.35 (bs, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.76 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.03 (bs, 1H), 4.73 (bs, 1H), 3.62 (s, 3H), 3.53 (bs, 2H), 3.35-3.34 (m, 2H), 1.47 (s, 6H); LC-MS: m/z 410.2 (M+1)+.
실시예 134. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-(티아졸-4-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00101
단계-a: 6-(2-브로모아세틸)벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-온의 합성
AlCl3(34.5 g, 259.3 mmol)에 DMFA(5.75 mL, 74 mmol)를 적가하고, 혼합물을 45℃에서 30분 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물에 벤조[d]옥사졸-2(3H)-온(5.0 g, 37 mmol)과 2-브로모아세틸 클로라이드(4.6 mL, 55.5 mmol)를 첨가하고, 75℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 얼음 위에 붓고, 10분 동안 교반하였다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(4.0 g, 42%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.13 (bs, 1H), 7.90-7.87 (m, 2H), 7.23 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.89 (s, 2H); LC-MS: m/z 253.9 (M-1)-.
단계-b: 6-(티아졸-4-일)벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-온의 합성
실온에서, 1,4-디옥산(100 mL) 중 포름아미드(5.49 mL, 137.7 mmol)의 교반된 용액에, 오황화인(6.1 g, 27.5 mmol)을 첨가하고, 100℃에서 2시간 동안 가열하였다. 여과하여 침전된 고체를 제거하고, 여과액을 6-(2-브로모아세틸)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온(13.5, 13.7 mmol)에 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하고, 회전식 증발기 상에서 농축시켜 1,4-디옥산을 제거하였다. 잔류물을 에틸 아세테이트(150 mL), 물(100 mL)로 희석하고, 추출하였다. 유기층을 물(50 mL), 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 헥산 중 30% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.2 g, 40%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.72 (s, 1H), 9.18 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.88 (s, 1H), 7.83 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.0 Hz, 1H); LC-MS: m/z 219.0 (M+1)+.
단계-c: 2-아미노-5-(티아졸-4-일)페놀의 합성
실온에서, 물(6 mL) 중 6-(티아졸-4-일)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온(600 mg, 2.75 mmol)의 교반된 용액에, 수산화나트륨(1.09 g, 27.5 mmol)을 첨가하고, 100℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 염화암모늄 포화 용액으로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(100 mL)로 추출하였다. 유기층을 물, 염수(50 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(400 mg, 76%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.13 (bs, 1H), 9.06 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.71 (bs, 2H); LC-MS: m/z 193.0 (M+1)+.
단계-d: 6-(티아졸-4-일)벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-티온의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-(티아졸-4-일)페놀을 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 92%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.99 (s, 1H), 9.22 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.23 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.99 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.4 Hz, 1H); LC-MS: m/z 234.95 (M+1)+.
단계-e: 2-(메틸티오)-6-(티아졸-4-일)벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1b에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-(티아졸-4-일)벤조[d]옥사졸-2(3H)-티온을 출발 물질로 사용하고 4시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 84%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.21 (bs, 1H), 8.24-8.23 (m, 2H), 8.01 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 2.78 (s, 3H); LC-MS: m/z 249.0 (M+1)+.
단계-f: 2-(메틸설포닐)-6-(티아졸-4-일)벤조[ d ]옥사졸의 합성
화합물 1c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(메틸티오)-6-(티아졸-4-일)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하고 4시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 화합물을 임의의 분석 데이터 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계-g: 에틸 1-메틸-2-((6-(티아졸-4-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
화합물 1g에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-(메틸설포닐)-6-(티아졸-4-일)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 26%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.4 (bs, 1H), 9.20 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.92-7.87 (m, 2H), 7.54-7.50 (m, 2H), 4.33 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 420.05 (M+1)+.
단계-h: 1-메틸-2-((6-(티아졸-4-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((6-(티아졸-4-일)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하고 5시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 71%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.16 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.77 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.59 (s, 3H); LC-MS: m/z 392.1 (M+1)+.
단계-i: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-(티아졸-4-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-(티아졸-4-일)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 20% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하였다(수율: 28%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.3 (bs, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.45 (bs, 1H), 8.13-8.04 (m, 3H), 7.91 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.56-3.44 (m, 8H); LC-MS: m/z 479.05 (M+1)+.
실시예 135. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-(3-메틸-2-옥소옥사졸리딘-5-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00102
단계-a: 6-(2-브로모-1-히드록시에틸)벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-온의 합성
0℃에서, 메탄올(50 mL) 중 6-(2-브로모아세틸)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온(4.0 g, 15.62 mmol)의 교반된 용액에, 수소화붕소나트륨(587 mg, 15.62 mmol)을 분할하여 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)로 켄칭하고, 감압 하에서 농축시켜 메탄올을 제거하였다. 수성층을 EtOAc(3 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(4.0 g, 99%); LC-MS: m/z 257.9 (M+1)+.
단계-b: 6-(1-히드록시-2-(메틸아미노)에틸)벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-온의 합성
40% 메틸아민 수용액(20 mL) 중 6-(2-브로모-1-히드록시에틸)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온(4.0 g, 15.5 mmol)의 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 잔류물을 용리액으로 DCM 중 5% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.8 g, 56%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.8 (bs, 1H), 8.9 (bs, 1H), 7.47 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.68 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 4.29 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 3.81-3.74 (m, 2H), 1.24 (s, 3H); LC-MS: m/z 209.05 (M+1)+.
단계-c: 6-(3-메틸-2-옥소옥사졸리딘-5-일)벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-온의 합성
실온에서, DMFA(20 mL) 중 6-(1-히드록시-2-(메틸아미노)에틸)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온(1.8 g, 8.65 mmol)의 교반된 용액에, 1,1'-카르보닐디이미다졸(1.54 g, 9.52 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반 하에서 16시간 동안 100℃까지 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 물(100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(3 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 DCM 중 1% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(500 mg, 25%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.22 (s, 1H), 7.09 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.57-3.54 (m, 1H), 3.45-3.41 (m, 1H), 3.34-3.30 (m, 1H), 2.16 (s, 3H).
단계-d: 5-(2-클로로벤조[ d ]옥사졸-6-일)-3-메틸옥사졸리딘-2-온의 합성
50 mL 둥근바닥 플라스크에, 6-(3-메틸-2-옥소옥사졸리딘-5-일)벤조[d]옥사졸-2(3H)-온(500 mg, 2.14 mmol)과 POCl3(0.98 mL, 10.68 mmol)을 충전하고, 0℃에서 트리에틸아민(1.51 mL, 10.68 mmol)을 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 5시간 동안 가열하여 환류시켰다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 얼음 위에 붓고, 에틸 아세테이트(2 x 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 탄산수소나트륨 포화 용액(2 x 50 mL), 물(50 mL), 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 핵산 중 50% EtOAc를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(120 mg, 22%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.58 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.0 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.64 (bs, 1H), 4.23-4.19 (m, 1H), 4.16-4.11 (m, 1H), 2.46 (s, 3H).
단계-e: 에틸 2-(비스((벤질옥시)카르보닐)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
0℃에서, 아세톤(10 mL) 및 물(10 mL) 중 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(1.0 g, 3.24 mmol)의 교반된 용액에, 탄산수소나트륨(722 mg, 6.88 mmol)과 벤질 클로로포르메이트(1.2 mL, 4.22 mmol, 톨루엔 중 50%)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 미정제 화합물을 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(2.2 g, 99%); LC-MS: m/z 488.2 (M+1)+.
단계-f: 2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
THF(15 mL), 에탄올(15 mL) 및 물(10 mL)의 용매 혼합물 중 에틸 2-(비스((벤질옥시)카르보닐)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(2.2 g, 4.52 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(948 mg, 22.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 교반 하에서 80℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물(30 mL)에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시키고, 에틸 아세테이트(2 X 150 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 미정제 화합물을 수득하고, 이를 임의의 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(1.4 g, 95%); LC-MS: m/z 326.1 (M+1)+.
단계-g: 벤질 (5-((2-(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에틸)카르바모일)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)카르바메이트의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-(((벤질옥시)카르보닐)아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에탄-1-아민을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 66%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.42 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41-7.33 (m, 6H), 5.08 (s, 2H), 3.66 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.54-3.38 (m, 9H), 0.81 (s, 9H), 0.03 (s, 6H); LC-MS: m/z 527.25 (M+1)+.
단계-h: 2-아미노- N -(2-(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
메탄올(8 mL) 중 벤질 (5-((2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에틸)카르바모일)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-2-일)카르바메이트(320 mg, 0.61 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C(40 mg)을 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 수소 가스 풍선 하에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하였다(170 mg, 71%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.22 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H)), 7.45 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.52 (s, 2H), 3.69 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 3.55-3.46 (m, 7H), 3.41-3.37 (m, 2H), 0.84 (s, 9H), 0.01 (s, 6H); LC-MS: m/z 393.65 (M+1)+.
단계-i: N -(2-(2-(( tert -부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-(3-메틸-2-옥소옥사졸리딘-5-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-N-(2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에틸)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미드와 5-(2-클로로벤조[d]옥사졸-6-일)-3-메틸옥사졸리딘-2-온을 출발 물질로 사용하고 3시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 74%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.74 (bs, 1H), 8.43 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.25 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.87 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.35 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.82-3.76 (m, 5H), 3.68 (t, J = 5.2 Hz, 2H), 3.54-3.52 (m, 2H), 3.48-3.31 (m, 2H), 2.62 (s, 3H), 0.84 (s, 9H), -0.01 (s, 3H), -0.02 (s, 3H); LC-MS: m/z 609.3 (M+1)+.
단계-j: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-(3-메틸-2-옥소옥사졸리딘-5-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, THF(2 mL) 중 N-(2-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-(3-메틸-2-옥소옥사졸리딘-5-일)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미드(30 mg, 0.05 mmol)의 교반된 용액에, THF 중 1 M TBAF(0.1 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 염화암모늄 포화 용액(10 mL)으로 켄칭하고, EtOAc(2 X 30 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(20 mL), 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 잔류물을 수득하고, 이를 용리액으로 DCM 중 5% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(14 mg, 58%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.8 (bs, 1H), 8.43 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.78 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.21 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.87 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 4.35 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.82 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.56-3.41 (m, 8H), 2.63 (s, 3H); LC-MS: m/z 495.2 (M+1)+.
실시예 136. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-모르폴리노벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00103
단계-a: 5-모르폴리노-2-니트로페놀의 합성
실온에서, 아세토니트릴(50 mL) 중 5-플루오로-2-니트로페놀(5.0 g, 31.84 mmol)의 교반된 용액에, 모르폴린(8.31 g, 95.54 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(300 mL)로 희석하고, 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(5.0 g, 70%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.9 (bs, 1H), 7.88 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.65 (dd, J = 2.4 Hz, J = 9.6 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 3.70 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 3.41 (t, J = 4.8 Hz, 4H); LC-MS: m/z 225.1 (M+1)+.
단계-b: 2-아미노-5-모르폴리노페놀의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 5-모르폴리노-2-니트로페놀을 출발 물질로 사용하고 3시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.8 (bs, 1H), 6.48 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.19 (dd, J = 2.8 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 3.68 (t, J = 5.2 Hz, 4H), 2.84 (t, J = 4.8 Hz, 4H); LC-MS: m/z 195.1 (M+1)+.
단계-c: 6-모르폴리노벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-티온의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-모르폴리노페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.6 (s, 1H), 7.14 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.91 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 3.73 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.10 (t, J = 4.8 Hz, 4H); LC-MS: m/z 237.1 (M+1)+.
단계-d: 2-클로로-6-모르폴리노벤조[ d ]옥사졸의 합성
실온에서, DCM(10 mL) 중 6-모르폴리노벤조[d]옥사졸-2(3H)-티온(500 mg, 1.12 mmol)의 용액에, 염화티오닐(0.79 mL, 10.6 mmol)과 디메틸포름아미드(0.2 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수(50 mL) 위에 붓고, 탄산수소나트륨 포화 용액을 이용하여 염기성화시키고, DCM(2 X 50 mL)으로 추출하였다. 조합한 유기층을 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 핵산 중 30% EtOAc를 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(300 mg, 60%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.56 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.09 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 3.75 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.16 (t, J = 4.8 Hz, 4H); LC-MS: m/z 239.0 (M+1)+.
단계-e: 에틸 1-메틸-2-((6-모르폴리노벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-모르폴리노벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 37%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.2 (bs, 1H), 8.20 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.87 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.32 (q, J = 8.4 Hz, 2H), 3.76 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.61 (s, 3H), 3.09 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H); LC-MS: m/z 422.1 (M+1)+.
단계-f: 1-메틸-2-((6-모르폴리노벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((6-모르폴리노벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 71%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.5 (bs, 1H), 8.16 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.86 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 3.76 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.61 (s, 3H), 3.09 (t, J = 4.4 Hz, 4H); LC-MS: m/z 394.0 (M+1)+.
단계-g: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-모르폴리노벤조[ d ]-옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-모르폴리노벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 98%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.4 (bs, 1H), 8.49 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.94 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.86 (bs, 4H), 3.64 (s, 3H), 3.56-3.54 (m, 4H), 3.47-3.45 (m, 4H), 3.14 (bs, 4H); LC-MS: m/z 481.2 (M+1)+.
실시예 137. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-(피롤리딘-1-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00104
단계-a: 2-니트로-5-(피롤리딘-1-일)페놀의 합성
실온에서, 아세토니트릴(20 mL) 중 5-플루오로-2-니트로페놀(2.0 g, 12.73 mmol)의 용액에, 피롤리딘(3.15 mL, 38.21 mmol)을 첨가하고, 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 잔류물을 용리액으로 헥산 중 30% 에틸 아세테이트를 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(1.5 g, 57%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.85 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.28 (dd, J = 2.4 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 6.02 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.39-3.36 (m, 4H), 1.98-1.94 (m, 4H).
단계-b: 2-아미노-5-(피롤리딘-1-일)페놀의 합성
메탄올(300 mL) 중 2-니트로-5-(피롤리딘-1-일)페놀(1.5 g, 7.20 mmol)의 용액에, 질소 분위기 하에서 10% Pd/C(300 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 수소 풍선 하에서 4시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라이트층을 통해 여과하고, 여과액을 진공 하에서 농축시켜 미정제 화합물을 수득하고(1.3 g), 이를 분석 기술에 의한 임의의 추가 정제 및 구조 확인 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계-c: 6-(피롤리딘-1-일)벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-티온의 합성
실온에서, 에탄올(13 mL) 중 2-아미노-5-(피롤리딘-1-일)페놀(1.3 g, 7.30 mmol)의 용액에, 칼륨 에틸 잔테이트(2.3 g, 14.6 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 16시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 진공 하에서 농축시키고, 냉수(50 mL)로 희석하고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켰다. 수득한 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하고(0.8 g, 50%), 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.50 (bs, 1H), 7.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.65 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.46 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 3.22-3.19 (m, 4H), 1.97-1.94 (m, 4H); LC-MS: m/z 220.9 (M+1)+.
단계-d: 2-클로로-6-(피롤리딘-1-일)벤조[ d ]옥사졸의 합성
0℃에서, DCM(10 mL) 중 6-(피롤리딘-1-일)벤조[d]옥사졸-2(3H)-티온(400 mg, 1.82 mmol)의 용액에, 염화티오닐(0.66 mL, 9.09 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(20 mL)로 켄칭하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 탄산수소나트륨 포화 용액(30 mL), 염수 용액(30 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하고(300 mg, 74%), 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 6.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.42 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 3.21-3.16 (m, 4H), 1.96-1.91 (m, 4H).
단계-e: 에틸 1-메틸-2-((6-(피롤리딘-1-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
0℃에서, 1,4-디옥산(5 mL) 중 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(200 mg, 0.91 mmol)의 교반된 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(73 mg, 1.82 mmol)을 첨가하고, 30분 동안 교반한 후, 2-클로로-6-(피롤리딘-1-일)벤조[d]옥사졸(243 mg, 1.09 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반한 후, 냉수(20 mL)로 켄칭하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 DCM 중 3% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(150 mg, 40%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.10 (bs, 1H), 8.18 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.46 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.32 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 3.60 (s, 3H), 3.26-3.23 (m, 4H), 1.99-1.95 (m, 4H), 1.35 (t, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 406.2 (M+1)+.
단계-f: 1-메틸-2-((6-(피롤리딘-1-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
[THF(2 mL), 에탄올(2 mL) 및 물(1 mL)]의 용매 혼합물 중 에틸 1-메틸-2-((6-(피롤리딘-1-일)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트(150 mg, 0.37 mmol)의 교반된 용액에, 수산화리튬 1수화물(77 mg, 1.85 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 감압 하에서 농축시켰다. 잔류물을 물에 용해시키고, 1 N HCl을 이용하여 산성화시켜 고체를 수득하고, 이를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(120 mg, 86%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.87 (s, 1H), 7.61 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.50 (s, 1H), 6.31 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.25-3.21 (m, 4H), 1.97-1.93 (m, 4H); LC-MS: m/z 376.0 (M-1).
단계-g: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-(피롤리딘-1-일)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
0℃에서, DMFA(5 mL) 중 1-메틸-2-((6-(피롤리딘-1-일)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산(120 mg, 0.32 mmol)의 교반된 용액에, N-에틸디이소프로필아민(0.08 mL, 0.48 mmol)과 HBTU(180 mg, 0.48 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30분 동안 교반한 후, 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올(80 mg, 0.48 mmol)을 첨가하고, 실온에서 16시간 동안 교반을 지속하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 냉수(20 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(25 mL), 염수(25 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 분취용 HPLC 정제 방법으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(15 mg, 10%).
분취용 HPLC 정제 방법 세부사항:
희석 : THF + 아세토니트릴:물(50:50)
이동상 A: 물 중 0.1% 포름산
이동상 B: 아세토니트릴(100%)
구배 : T/%B: 0/15, 10/35
유량 : 15 mL/분
컬럼 : Agilent ZORBAX XDB C18 (150 x 21.2 x 5 μm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.0 (bs, 1H), 8.40 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.63 (bs, 1H), 6.46 (bs, 1H), 4.63 (s, 1H), 3.59 (s, 3H), 3.57-3.39 (m, 8H), 3.24 (bs, 4H), 1.97 (bs, 4H); LC-MS: m/z 465.20 (M+1)+.
실시예 138. N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)옥시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
Figure pct00105
단계-a: 2-니트로-5-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)옥시)페놀의 합성
10℃에서, DMFA(15 mL) 중 테트라히드로-2H-피란-4-올(2.27 mL, 22.29 mmol)의 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(1.27 g, 31.84 mmol)을 첨가하고, 5분 동안 교반한 후, 반응 혼합물에 5-플루오로-2-니트로페놀(1.0 g, 6.37 mmol)을 첨가하고, 이를 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 냉수(100 mL)로 켄칭하고, 1 N HCl을 이용하여 중화시켰다. 침전된 고체를 여과하고, 진공 하에서 건조시켜 표제 화합물을 수득하였다(1.0 g, 33%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 10.90 (bs, 1H), 7.95 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.63 (dd, J = 2.4 Hz, J = 9.2 Hz, 1H), 4.71-4.68 (m, 1H), 3.86-3.82 (m, 2H), 3.52-3.49 (m, 2H), 1.99-1.97 (m, 2H), 1.64-1.56 (m, 2H).
단계-b: 2-아미노-5-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)옥시)페놀의 합성
화합물 1e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-니트로-5-((테트라히드로-2H-피란-4-일)옥시)페놀을 출발 물질로 사용하고 6시간 동안 교반하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 87%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.0 (bs, 1H), 6.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.32 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 6.21 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.22-4.17 (m, 1H), 3.83-3.78 (m, 2H), 3.44-3.40 (m, 2H), 1.89-1.85 (m, 2H), 1.54-1.45 (m, 2H); LC-MS: m/z 209.95 (M+1)+.
단계-c: 6-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)옥시)벤조[ d ]옥사졸-2(3 H )-티온의 합성
실시예 32 단계-c에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 2-아미노-5-((테트라히드로-2H-피란-4-일)옥시)페놀을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 75%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.74 (bs, 1H), 7.30 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.92 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 4.59-4.53 (m, 1H), 3.87-3.82 (m, 2H), 3.47-3.40 (m, 2H), 1.98-1.93 (m, 2H), 1.61-1.52 (m, 2H); LC-MS: m/z 252.1 (M+1)+.
단계-d: 2-클로로-6-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)옥시)벤조[ d ]옥사졸의 합성
실시예 32 단계-d에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 6-((테트라히드로-2H-피란-4-일)옥시)벤조[d]옥사졸-2(3H)-티온을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 25%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.59 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.02 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.62-4.59 (m, 1H), 3.85-3.77 (m, 2H), 3.49-3.43 (m, 2H), 1.97-1.94 (m, 2H), 1.61-1.52 (m, 2H); LC-MS: m/z 254.1 (M+1)+.
단계-e: 에틸 1-메틸-2-((6-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)옥시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실레이트의 합성
실시예 32 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트와 2-클로로-6-((테트라히드로-2H-피란-4-일)옥시)벤조[d]옥사졸을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 23%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 8.21 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.85 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.85 (dd, J = 2.0 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.56-4.54 (m, 1H), 4.32 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.88-3.85 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.51-3.44 (m, 2H), 2.00-1.98 (m, 2H), 1.61-1.58 (m, 2H), 1.35 (q, J = 6.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 437.2 (M+1)+.
단계-f: 1-메틸-2-((6-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)옥시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복실산의 합성
화합물 1h에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 에틸 1-메틸-2-((6-((테트라히드로-2H-피란-4-일)옥시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실레이트를 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다(수율: 67%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.40 (bs, 1H), 8.17 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.86 (dd, J = 1.2 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.86 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.57-4.53 (m, 1H), 3.88-3.84 (m, 2H), 3.62 (s, 3H), 3.51-3.44 (m, 2H), 2.00-1.95 (m, 2H), 1.61-1.58 (m, 2H); LC-MS: m/z 409.1 (M+1)+.
단계-g: N -(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-2-((6-((테트라히드로-2 H -피란-4-일)옥시)벤조[ d ]옥사졸-2-일)아미노)-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-카르복사미드의 합성
실시예 6 단계-e에 대해 수행된 바와 동일한 절차에 따라, 1-메틸-2-((6-((테트라히드로-2H-피란-4-일)옥시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복실산과 2-(2-아미노에톡시)에탄-1-올을 출발 물질로 사용하여 표제 화합물을 합성하였다. 미정제 생성물을 용리액으로 DCM 중 4% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 크로마토그래피로 정제하였다(수율: 40%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.17 (bs, 1H), 8.44 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 1.6 Hz, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.84 (dd, J = 2.4 Hz, J = 8.8 Hz, 1H), 4.62 (bs, 1H), 4.57-4.51 (m, 1H), 3.89-3.84 (m, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.55-3.33 (m, 10H), 1.98-1.95 (m, 2H), 1.61-1.57 (m, 2H); LC-MS: m/z 496.2 (M+1)+
실시예 139, 140 및 141. 1-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온의 합성, ( Z )-1-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온 옥심의 합성 및 N- (5-(1-아미노-2,2,2-트리플루오로에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)벤조[ d ]옥사졸-2-아민의 합성
Figure pct00106
단계-a: 2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-니트로페닐)에탄-1-온의 합성
0℃에서, 농축 황산(12 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로페닐)에탄-1-온(3.0 g, 15.62 mmol)의 용액에, 발연질산(0.9 mL)을 첨가하고, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수(100 mL)로 켄칭하고, 에틸 아세테이트(200 mL)로 추출하였다. 유기층을 냉수(2 X 50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하고(3.5 g, 94%) 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.80 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.54 (t, J = 9.4 Hz, 1H).
단계-b: 2,2,2-트리플루오로-1-(4-(메틸아미노)-3-니트로페닐)에탄-1-온의 합성
0℃에서, DMFA(17.5 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(4-플루오로-3-니트로페닐)에탄-1-온(3.5 g, 14.7 mmol)의 교반된 용액에, 40% 메틸아민 수용액(3.5 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수(100 mL)로 희석하고, 에틸 아세테이트(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(2 X 50 mL), 염수 용액(50 mL)으로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하고(3.3 g, 89%), 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.99 (bs, 1H), 8.69 (s, 1H), 8.05 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.06 (d, J = 4.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 247.1 (M-1).
단계-c: 1-(3-아미노-4-(메틸아미노)페닐)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온의 합성
0℃에서, 메탄올(20 mL) 중 2,2,2-트리플루오로-1-(4-(메틸아미노)-3-니트로페닐)에탄-1-온(2.0 g, 8.1 mmol)의 교반된 용액에, 철(2.25 g, 40.3 mmol)과 농축 염산(5.0 mL, 40.3 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 후, 교반 하에서 60℃에서 추가 1시간 동안 가열하였다. 반응 혼합물을 실온까지 냉각시키고, 메탄올(30 mL)로 희석하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 여과액을 농축시키고, 물(50 mL)로 희석하고, 탄산수소나트륨 포화 용액을 이용하여 염기성화시키고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하고(1.5 g, 84%), 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.35 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 6.50 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.30 (bs, 1H), 4.96 (s, 2H), 2.85 (d, J = 4.8 Hz, 3H); LC-MS: m/z 218.90 (M+1)+.
단계-d: 1-(2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온의 합성
실온에서, THF(10 mL) 및 물(10 mL) 중 1-(3-아미노-4-(메틸아미노)페닐)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온(1.0 g, 4.6 mmol)의 교반된 용액에, 브롬화시안(0.58 g, 5.5 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 잔류물을 물(50 mL)로 희석하고, 탄산수소나트륨 포화 용액을 이용하여 염기성화시키고, EtOAc(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(500 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켜 표제 화합물을 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다(900 mg, 81%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 7.75 (s, 1H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.96 (s, 2H), 3.58 (s, 3H); LC-MS: m/z 244.1 (M+1)+.
단계-e: 1-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온의 합성
0℃에서, 1,4-디옥산(20 mL) 중 1-(2-아미노-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온(900 mg, 3.70 mmol)의 교반된 용액에, 수소화나트륨(미네랄 오일 중 60% 분산액)(518 mg, 12.96 mmol)을 첨가하고, 15분 동안 교반한 후, 2-클로로벤즈옥사졸(567 mg, 3.70 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 이어서, 반응 혼합물을 냉수(30 mL)로 켄칭하고, EtOAc(2 X 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(30 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 100% DCM을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(700 mg, 52%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.50 (bs, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.97 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.52-7.46 (m, 2H), 7.25 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.16 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 3.67 (s, 3H); LC-MS: m/z 361.1 (M+1)+.
단계-f: ( Z )-1-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온 옥심의 합성
실온에서, 에탄올(20 mL) 중 1-(2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온(700 mg, 1.94 mmol)의 교반된 용액에, 히드록실아민 히드로클로라이드(405 mg, 5.83 mmol)와 아세트산칼륨(572 mg, 5.83 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 감압 하에서 농축시키고, 물(50 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 100 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(50 mL), 염수(30 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 DCM 중 2% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(500 mg, 68%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 13.05 (bs, 1H), 12.40 (bs, 1H), 7.81-7.76 (m, 1H), 7.59-7.53 (m, 1H), 7.48-7.46 (m, 2H), 7.41-7.37 (m, 1H), 7.24 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.65 (s, 3H); LC-MS: m/z 376.1 (M+1)+.
단계-g: N -(5-(1-아미노-2,2,2-트리플루오로에틸)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-2-일)벤조[ d ]옥사졸-2-아민의 합성
10℃에서, THF(5 mL) 중 (Z)-1-(2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온 옥심(300 mg, 0.80 mmol)의 교반된 용액에, 1 M 수소화알루미늄리튬 용액(1.6 mL, 1.60 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 10℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응이 완결되면(TLC로 모니터링함), 반응 혼합물을 1 N 수산화나트륨 용액(5 mL)으로 켄칭하고, 물(10 mL)로 희석하고, EtOAc(2 X 30 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(20 mL), 염수(20 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 분취용 HPLC 방법으로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(100 mg, 35%).
분취용 HPLC 정제 방법 세부사항:
희석 : THF + ACN:물(50:50)
이동상 A: 물 중 0.1% 포름산
이동상 B: 100% 아세토니트릴
구배 : T/%B: 0/15, 10/40
유량 : 15 mL/분
컬럼 : Kinetex C-18 (250 x 21.1 x 5 μm)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.46-7.36 (m, 4H), 7.20 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.59-4.57 (m, 1H), 3.61 (s, 3H); LC-MS: m/z 362.3 (M+1)+.
상기 화합물의 2가지 이성질체를 키랄 HPLC 정제를 통해 분리하였다.
키랄 HPLC 정제 방법 세부사항:
희석 : IPA:DCM(90:10)
이동상 A: 헥산 중 0.1 % DEA
이동상 B: IPA:DCM(90:10) %
등용매 : A:B(40:60)
유량 : 15 mL/분
피크-1 분석 데이터:
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.46-7.36 (m, 4H), 7.20 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.59-4.57 (m, 1H), 3.61 (s, 3H); LC-MS: m/z 362.05 (M+1)+.
피크-2 분석 데이터:
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.20 (bs, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.46-7.36 (m, 4H), 7.20 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.60-4.58 (m, 1H), 3.61 (s, 3H); LC-MS: m/z 362.05 (M+1)+.
실시예 142. 1-(2-(벤조[ d ]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1 H -벤조[ d ]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-올의 합성
Figure pct00107
0℃에서, 메탄올(3 mL) 중 1-(2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-일)-2,2,2-트리플루오로에탄-1-온(50 mg, 0.14 mmol)의 교반된 용액에, 수소화붕소나트륨(6 mg, 0.15 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 냉수(10 mL)로 켄칭하고, EtOAc(2 X 20 mL)로 추출하였다. 조합한 유기층을 물(15 mL), 염수(15 mL)로 세정하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 진공 하에서 농축시켰다. 잔류물을 용리액으로 DCM 중 2% 메탄올을 사용하는 콤비플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물을 수득하였다(40 mg, 80%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.30 (bs, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.46-7.34 (m, 4H), 7.20 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.10 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.90 (bs, 1H), 5.24-5.22 (m, 1H), 3.62 (s, 3H); LC-MS: m/z 363.30 (M+1)+.
실시예 143. HepG2 용해물 중 인간 헴 옥시게나아제-1(HMOX-1)의 측정을 위한 ELISA 검정
시약 및 기술 참고사항:
ELISA 포획 항체, 표준물 HO-1, 검출 항체 및 스트렙타비딘 HRP는 R&D systems의 DuoSet IC Human total HO-1 ELISA(DYC3776-2)로 공급받았다. 기질 칵테일은 KPL LumiGLO reserve 화학발광 기질(54-71-00)이었다. PBS는 Corning Cellgro 세포 배양 배지(21-040-CV)였다. 10x PBS+0.05% tween20(PBST)은 KPL에서 입수하였다.
플레이트의 모든 인큐베이션은 폐쇄된 서랍에서 실온에서(20℃) 이루어졌다.
ELISA 플레이트는 수동으로 처리하였다. 모든 로딩은 다채널 피펫을 이용하여 수행하였다. 싱크대 안쪽으로 흔들고 종이 타월에 두드려 남아있는 시약을 제거하는 방식으로 플레이트를 비웠다. 물뿌리개를 사용하여 모든 웰에 PBS+0.05% tween20(PBST)을 로딩하고, 흔들어 PBST를 제거하고, 종이 타월에 두드리는 방식으로 플레이트 세척을 수행하였다.
ELISA 플레이트 준비:
1. 항-HO-1 포획 항체는 PBS 중에의 재구성 후 1440 μg/ml였다. 이러한 항체를 PBS 중에 8 μg/ml로 희석하고, 384 웰 greiner "lumitrac 200" 플레이트에 웰당 50 μl로 첨가하였다. 밤새 인큐베이션하였다.
2. 플레이트를 비우고, 모든 웰에 100 μl PBS+1% BSA를 첨가하였다. 실온에서 90분 동안 인큐베이션하였다.
HepG2 용해물 준비:
1. 세포를 96웰 조직 배양 플레이트에서 배양하고, PBS로 세척한 후, 플레이트를 -70℃에서 밤새 동결시켰다. 플레이트를 얼음 양동이 내에서 얼음 온도까지 가온시켰다. 각각의 웰에 PBS 20 μl, 0.5% Triton X100, 1 mM EDTA와 1x HALTTM 프로테아제 저해제를 첨가하고, 플레이트를 얼음 위에서 1시간 동안 인큐베이션하였다.
2. 용해물을 -20℃에서 밤새 동결시켰다.
HMOX1("HO-1") 측정
1. 폴리프로필렌 384 웰 플레이트에서, 인간 HO-1(PBS+0.5% Triton+1 mM EDTA 중에 재구성 후)을 PBS+0.5% triton-X100, 1 mM EDTA로 20 ng/ml에서 2배로 연속 희석하여 12점 표준 곡선(0점 포함)을 생성하였다.
2. 폴리프로필렌 96 웰 플레이트에서, HepG2 용해물을 DUOSET 키트의 Diluent # 4로 1에서 20까지 희석하고, 이때 검정 표준물 또한 희석하였다.
3. ELISA 플레이트에서 PBS+1% BSA를 비우고, 모든 샘플과 표준물을 30 μl 첨가하였다(중복 권장). 플레이트를 90분 동안 인큐베이션하였다.
4. 플레이트를 비우고, PBST로 4회 세척하였다.
5. HO-1 검출 항체를 PBS+1%BSA 중에 200 ng/ml로 희석하고, 모든 웰에 30 μl 첨가하였다. 90분 동안 인큐베이션하였다.
6. 플레이트를 비우고, PBST로 4회 세척하였다.
7. 모든 웰에 PBS+1%BSA 중 1/200로 스트렙타비딘 HRP 30 μl를 첨가하였다(스톡 스트렙타비딘 농도는 지정되지 않음). 30분 동안 인큐베이션하였다.
8. 플레이트를 비우고, PBST로 4회 세척하였다.
9. Lumiglo reserve 시약을 완충제 2부 대 lumiglo 기질 1부로 희석하였다. 모든 웰에 30 μl 첨가하였다. 5분 동안 인큐베이션하였다.
10. Spectramax M5에서 150 ms 적분을 사용하여 화학발광을 측정하였다.
하기 표 1에는, 대표적인 화합물로 처리 시, DMSO 대조군과 비교한 인간 HMOX1 단백질 수준의 EC50 및 배수 변화가 열거되어 있다.
실시예 144. 동적 용해도
10 mM DMSO 스톡 용액 10 μL를, 1.2 mL 96웰 플레이트에 이중으로, DMSO 용액 490 μL에 분취하고, 별도로 둘베코 인산염 완충 염수(Dulbecco's phosphate buffer saline, DPBS)(pH 7.4 용액) 490 μL에 분취하였다. 시험 화합물의 최종 농도는 200 μM이었다. 샘플을 진탕 하에서 25℃에서 200 rpm으로 16시간 동안 인큐베이션하였다. 샘플을 25℃에서 3500 rpm으로 20분 동안 원심분리하고, HPLC 분석을 위해 상청액을 취하였다.
하기 방정식을 사용하여 동적 용해도를 측정하였다:
Figure pct00108
본 발명의 대표적인 화합물의 동적 용해도 데이터는 하기 표 1에 제공되어 있다.
Figure pct00109
Figure pct00110
Figure pct00111
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Figure pct00113
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Figure pct00138
Figure pct00139
실시예 145. hERG 검정
세포주 및 세포 배양
hERG 채널을 안정적으로 발현하는 HEK 293 세포주(Cat# K1236)는 Invitrogen에서 구입하였다. 세포를 85% DMEM, 10% 투석된 FBS, 0.1 mM NEAA, 25 mM HEPES, 100 U/mL 페니실린-스트렙토마이신(Penicillin-Streptomycin) 및 5 μg/mL 블라스티시딘(Blasticidin) 및 400 μg/mL 제네티신(Geneticin) 중에서 배양하였다.
일주일에 약 3회 TrypLE™ Express를 사용하여 세포를 분할하고, 약 40% 내지 약 80% 컨플루언스(confluence)로 유지시켰다. 검정 전, 세포를 6 cm 세포 배양 디쉬당 5 × 105개의 세포로 커버슬립 위에 옮기고, 48시간 동안 독시시클린 1 μg/mL을 이용하여 유도하였다.
용액 준비
1) 외부 용액(단위: mM): 132 NaCl, 4 KCl, 3 CaCl2, 0.5 MgCl2, 11.1 포도당 및 10 HEPES (NaOH를 이용하여 pH를 7.35로 조정함)
2) 내부 용액(단위: mM): 140 KCl, 2 MgCl2, 10 EGTA, 10 HEPES 및 5 MgATP (KOH를 이용하여 pH를 7.35로 조정함)
3) hERG 전류를 최종 농도 0.1% DMSO로 10 μM 화합물 농도의 존재 하에서 시험하였다.
실험 절차
1) 세포 배양 디쉬에서 커버슬립을 제거하고, 배쓰 챔버 내 현미경 스테이지에 위치시켰다.
2) 10x 대물렌즈를 사용하여 목적하는 세포를 찾아내었다. 세포의 평면 위에 초점을 맞추는 방식으로, 10x 대물렌즈를 사용하여 현미경으로 전극의 팁을 찾아내었다. 팁에 초점이 맞추어지면, 조작기의 조제어장치(coarse control)를 사용하여 전극을 세포쪽으로 아래로 전진시키고, 동시에 팁에 초점이 유지되도록 대물렌즈를 이동시켰다.
3) 세포 바로 위에 오게 되면, 40x 대물렌즈로 전환하고, 조작기의 미세제어장치(fine control)를 사용하여 조금씩 단계적으로 세포의 표면에 접근하였다.
4) 전극 홀더의 측면 포트를 통해 온건한 흡입을 적용하여 기가옴 씰(gigaohm seal)을 형성하였다.
5) Cfast를 사용하여 전압 단계와 일치했던 용량 전류를 제거하였다. 멤브레인 패치가 파괴될 때까지, 반복적이고 짧고 강력한 흡입을 적용하여 전체 세포 구성을 얻었다.
6) 이 시점에서 멤브레인 전위를 -60 mV로 설정하여, hERG 채널이 개방되지 않도록 하였다. 이어서, 증폭기의 Cslow를 사용하여 용량 전류의 스파이크를 취소해야 한다.
7) 고정 전위를 500 ms 동안 -90 mV로 설정하고; 50 kHz에서 전류를 기록하고, 10 kHz에서 필터링하였다. 누설 전류는 -80 mV에서 500 ms 동안 시험하였다.
8) +30 mV에서 4.8초 동안 탈분극시켜 hERG 전류를 유도한 후, 전압을 5.2초 동안 다시 -50 mV로 되돌려 비활성화를 제거하고, 불활성 후부 전류를 관찰하였다. 후부 전류 크기의 최대량을 사용하여 hERG 전류 진폭을 결정하였다.
9) 120초 동안 전류를 기록하여 전류 안정성을 평가하였다. 기록 파라미터가 역치 초과인 안정한 세포만 화합물 투여에 적용하였다.
10) 먼저, 비히클 대조군을 세포에 적용하여 기준선을 확립하였다. hERG 전류가 5분 동안 안정화된 것으로 확인되면, 시험 화합물을 적용하였다. 정상 상태에 도달할 때까지 대략 5분 동안 시험 화합물의 존재 하에서 hERG 전류를 기록한 후, 5개의 스위프(sweep)를 캡쳐하였다. 배양된 세포 및 작업의 양호한 성능을 보장하기 위해, 5 용량 농도의 양성 대조군 도페틸리드(Dofetilide)도 동일한 세포 배치를 시험하는 데 사용하였다.
데이터 분석
데이터 수용 가능성을 결정하기 위해 하기 기준을 사용하였다.
1) 초기 씰 저항 > 1 GΩ;
2) 누설 전류 < 임의의 시간에서의 대조군 피크 후부 전류의 50%;
3) 피크 후부 진폭 > 250 pA;
4) 멤브레인 저항 Rm > 500 MΩ;
5) 접근 저항(Ra) < 10 MΩ;
6) 피크 전류의 겉보기 중단 < 분당 2.5%.
hERG 전류 품질에 대한 상기 기준을 충족시키는 데이터를 하기 단계로 추가 분석하였다.
1) 하기 방정식을 사용하여 hERG 전류 억제율을 계산하였다.
참고: PatchMaster 또는 Clampfit 소프트웨어를 사용하여 원본 데이터에서 피크 전류를 추출하였음.
Figure pct00140
2) Graphpad Prism 6.0을 사용하여 시험 화합물의 농도에 대한 hERG 전류 억제율로 시험 화합물의 용량 반응 곡선을 플롯팅하고, 가변 기울기를 갖는 S자형 용량 반응 곡선으로 핏팅하였다.
수동 패치 클램프 검정에서 선택된 화합물의 hERG 데이터는 하기 표 2에 제공되어 있다. 특히, >5 μM의 용해도를 나타내었던 화합물만 hERG 값을 측정하였다. 용해도가 5 μM 미만인 화합물은 hERG 활성의 정확한 측정이 불가능하였다.
Figure pct00141
Figure pct00142
Figure pct00143
실시예 146. 마이크로스케일 열영동(Microscale Thermophoresis, MST) 검정/Bach 1 결합 검정
단백질 발현/생산 개요
인간 BACH1(구조체-ID: 10xHIS-GP-BACH1(aa179-736)-트롬빈-FLAG)을 Sf9 곤충세포에서 발현시켰다. 친화성 크로마토그래피, 이어서 크기 배제 크로마토그래피를 사용하여 단백질 정제를 수행하였다. SDS-PAGE 분석을 사용하여 생성된 단백질의 품질을 판단하였다.
검정 원리
MST 기술은 온도 구배에 따른 단백질 이동 측정을 기반으로 한다. 따라서, 형광 표지된 단백질을 모세관에 로딩하며, 여기서 적외선 레이저로 소량을 가열한다. 가열 전 및 가열 동안, 조사 부위에서 형광 강도를 측정하고, IR 레이저 초점에서의 형광 손실을 정량화한다.
2가지 주요 요인이 형광 신호 변화에 기여한다. 먼저, 소위 TRIC(온도 관련 강도 변화(Temperature Related Intensity Change)) 효과가 형광단 양자 수율의 온도 의존성으로 인해 발생한다. 여기서, 온도 의존성의 정도는 화학적 환경에 따라 달라지며, 이는 표적에의 리간드(예를 들어, 화합물, 펩타이드)의 결합에 의해 변경될 수 있다. 나아가, 리간드와 표적 사이의 Kd 값은 온도에 따라 달라질 수 있다. 두 번째로, 온도 구배에 따른 형광 분자의 이동으로 정의되는 열영동이, 형광 변화의 주요 기여인자이다. 이에 따라, 구배에 따른 단백질 이동은 유체역학적 반경, 전하 및 수화 껍질(hydration shell)에 따라 달라진다. 이러한 특성은, 표지된 단백질과 또 다른 종, 예를 들어 화합물이 회합할 때 변경될 수 있다. 따라서, MST는 리간드 농도 증가에 따른 단백질 이동의 차이를 감지하며; 이로부터, 리간드 결합된 단백질의 분율과 Kd 값을 결정할 수 있다.
MST 검정 프로토콜
BACH1에 결합하는 화합물의 Kd 결정을 위해, 하기 프로토콜을 적용하였다: 10xHIS-GP-BACH1(aa179-736)-트롬빈-FLAG(Proteros에서 발현 및 정제된 것)를 이의 리신-잔기(2세대 NHS-NT.647 염료)를 통해 형광으로 표지하였다.
실험 장치 Monolith NT.115 Pico(NanoTemper Technologies)를 사용하여, 25℃의 반응 온도에서 MST 전력을 중간으로 설정하고, 여기 전력을 2 %로 설정하여 실험을 수행하였다.
10 nM 형광 표지된 BACH1을 Monolith NT.115 Premium Capillaries를 사용하여, 50 mM HEPES pH 8.0, 100 mM NaCl, 5 % 글리세롤, 0.05% Tween20 및 1 mM DTT가 함유된 반응 완충액에 8 μL 반응 부피로 적용하였다. 화합물을 15개의 후속 인자 2 희석물과 함께 103μM의 최대 농도로 적용하였다.
MST 검정에서 선택된 화합물의 Kd 데이터는 하기 표 3에 제공되어 있다.
Figure pct00144
상기 표 3에 제공된 데이터를 통해, 본 발명의 화합물이 또한 Bach1에 결합한다는 것을 유추할 수 있다.
실시예 147. HMOX1의 시험관내 발현을 강력하게 증가시키는 본 발명의 HMOX1 유도제
RNA 단리 및 유전자 발현의 정량화
HMOX1 발현을 유도하면, 낫적혈구병(SCD) 마우스에서 혈관폐색위기(vaso-occlusive crisis, VOC), 특히 헴 유도성 혈관폐색이 감소하는 것으로 나타났다(문헌[Belcher JD, et al. Antioxid Redox Signal 2017, 26:748-762]; 문헌[Krishnamoorthy S, et al. JCI Insight 2017, 2:e96409]). HepG2 세포를 대략 24시간 동안 콜라겐(콜라겐 I, 래트 꼬리(박판 코팅); ENZO Life Sciences) 코팅된 12웰 조직 배양 플레이트 내에 웰당 250k개로 씨딩하였다. 이어서, 씨딩된 세포를 배지 교체를 통해 실시예 17의 화합물 또는 디메틸 푸마레이트(DMF)(Nrf2 활성제; Fisher Scientific)의 용량 적정으로 처리하였고, 이때 각 처리에 대해 생물학적 삼중으로 수행하였다. 처리 약 24시간 후, 화합물 처리로 인해 독성이 발생하지 않았음을 확인하기 위해 세포를 육안으로 검사하였다. 처리된 세포를 PBS로 세정하고, 흡인하고, 파라필름으로 밀봉하고, RNA 단리 전 -80℃에서 동결시켰다. Machery-Nagel 단리 키트(NucleoSpin® RNA: 카탈로그 740955.250)를 사용하여 RNA를 단리하고, ThermoFisher Nanodrop을 사용하여 정량화하였다.
Nanostring 유전자 발현 분석을 위해 RNA를 희석하였다. 희석된 RNA를 200 ng RNA의 입력으로, nCounter® SPRINT 프로파일러 시스템 및 nSolver4.0 소프트웨어, nCounter® SPRINT 카트리지, nCounter® SPRINT 시약 팩 및 nCounter® SPRINT 혼성화 완충액이 장착되어 있는 Nanostring 장비에서 실행시켰다. nSolver4.0 소프트웨어에서 얻은 미가공 데이터를 사용하여 수동으로 분석을 수행하였다. 정규화를 위해 CLTC, POLR2A, RPL27 및 TBP를 참조 유전자로 사용하였다. 데이터를 DMSO 처리와 비교한 배수 변화로 그래프화하였다.
실시예 17의 화합물 또는 DMF로 처리된 HepG2 세포에서의 HMOX1 유전자의 상대적인 mRNA 수준을 상기 기재된 방법에 따라 측정하였다. 실시예 17의 화합물과 DMF 사이의 유전자 발현 비교 분석을 위해, HepG2 세포를 시험 화합물로 24시간 동안 처리하였다는 점에 유의해야 한다(결과는 도 1에 도시되어 있음).
실시예 17 화합물이 또 다른 Nrf2 활성제인 DMF보다 훨씬 더 강력하게 HMOX1 발현을 유도했음을 확인하였다(도 1a). 예를 들어, 실시예 17 화합물 30 μM은 DMF 250 μM보다 4배 더 높은 HMOX1 발현을 유도하였다.
몇 가지 다른 Bach1 반응 유전자에 대한 상대적인 mRNA 수준을 또한 실시예 17의 화합물과 Nrf2 활성제 DMF로 처리된 HepG2세포에서 비교하였다. 또한, 실시예 17의 화합물과 DMF는 유사한 배수 증가로 FTH1 발현을 유도하였다(도 1b).
실시예 148. SCD 마우스에서 혈관폐색을 감소시키고 SCD 마우스에서 태아 헤모글로빈(HbF)을 증가시키는 본 발명의 HMOX 유도제
HbSS Townes 낫적혈구 마우스에의 HMOX 유도제 투여 계획
HbSS Townes 낫적혈구 마우스에게 8일 동안 하기 열거된 비히클 또는 실시예 17의 화합물을 1일 1회 경구 위관영양법으로 투여하였다. 실험적 불일치를 최소화하기 위해, 매일 새로운 제형을 준비하고, 각 투여를 위해 시험 물품을 시린지로 인출하기 전 볼텍싱하고, 투여는 하루종일 동일한 개체에 대해 수행하였다. 마지막날 용량을 하기 기재된 헴 주입 4시간 전 경구 위관영양법으로 투여하였다.
1. 비히클(0.45% w/v 메틸 셀룰로오스 중 0.5% w/v Tween 80)
2. 실시예 17의 화합물(10 mg/kg PO 투여)
3. 실시예 17의 화합물(25 mg/kg PO 투여)
4. 실시예 17의 화합물(50 mg/kg PO 투여)
혈관폐색(정체)의 측정
수술 전, 대략 12주령의 수컷 및 암컷 낫적혈구 마우스의 체중을 측정하였다. 동물을 케타민(106 mg/kg)과 자일라진(7.2 mg/kg)의 혼합물로 마취시키고, 등쪽 피부 접힘 챔버(DSFC)를 외과적으로 이식하였다. 같은 날, 마우스를 특수 생체내 현미경 스테이지에 배치하고, DSFC 범위에서 20개 내지 22개의 흐르는 세정맥을 선택하고, 맵핑하였다. 세정맥 선택 및 맵핑 후, 헤민 클로라이드(2.677 mM; Frontier Scientific)를 탄산나트륨(11.36 mM; Sigma-Aldrich) 및 D-소르비톨(9.59 mM; Sigma-Aldrich) 함유 멸균 식염수 중에 용해시키고, 여과하고(0.22 μm), 멸균 식염수 중에 1:10로 희석하고(267.7 μM 헤민, 최종), 마우스의 꼬리 정맥에 주입하였다(.012 ml/g, 체중 1 kg당 3.2 μmol의 헴). 헤민 주입 1시간 후, 선택된 세정맥을 모두 재검사하고, 정적(흐름 없음) 세정맥의 수를 계수하고, 정체율(percent stasis)로 표시하였다. 헤민 주입 4시간 후, 마우스를 CO2 분위기에서 안락사시키고, 간, 비장 및 신장을 제거하여, 급속 동결시키고, -85℃에서 보관하였다.
F-세포 측정
헤민 주입 4시간 후, 비히클 또는 실시예 17의 화합물이 투여된 HbSS Townes 마우스의 하대정맥에서 헤파린 처리된 전혈을 채취하였다. 태아세포 염색 키트(Simmler)를 사용하여 제조업자의 지침에 따라 Kleihauer-Betke 방법으로 전혈 도말에 F-세포를 염색하였다. F-세포와 총 적혈구를 각 마우스에 대해 100X 배율로 4개의 별개의 현미경 영역에서 계수하였다. F-세포를 총 적혈구(즉, 적혈구 세포) 중의 백분율로 표시하였다. 인간 태아 제대혈을 양성 대조군으로 사용하였다.
혈관폐색은 SCD의 특징이다. 본원에 개시된 화합물이 혈관폐색을 효과적으로 감소시킬 수 있는 지를 평가하기 위해, 상기 기재된 방법에 따라 이식된 등쪽 피부 접힘 챔버(DSFC)를 이용하여 HbSS-Townes 낫적혈구 마우스의 피하 세정맥에서 헴 유도성 혈관폐색(정체)을 측정하였다. 도 2에 도시된 바와 같이, 미세혈관 정체는 헴 주입 1시간 후 실시예 17의 화합물이 투여된 HbSS-Townes 마우스에서 비히클이 투여된 마우스에 비해 유의하게 감소하였다. 나아가, 실시예 17의 화합물은 미세혈관 정체를 반응성으로 저해하였다(도 2). 실시예 17의 화합물의 경우, 정체율은 10 mg/kg 투여량에서 약 17%, 25 mg/kg 투여량에서 약 12% 및 50 mg/kg 투여량에서 약 5%로 감소하였다.
충분히 높은 농도에서, HbF는 헤모글로빈 S(HbS) 중합, 및 후속적인 용혈 및 혈관폐색을 저해할 수 있다(문헌[Krishnamoorthy S, et al. JCI Insight 2017, 2: e96409]). 본 발명의 HMOX 유도제가 HbF를 효과적으로 증가시킬 수 있는 지를 평가하기 위해, F-세포(즉, HbF-함유 적혈구 세포)를 상기 기재된 방법에 따라 총 적혈구 세포 중의 백분율로 측정하였다. 도 3에 도시된 바와 같이, F-세포 %는 실시예 17의 화합물이 투여된 HbSS-Townes 마우스에서 비히클이 투여된 마우스에 비해 유의하게 증가하였다. 구체적으로, F-세포 %는 실시예 17의 화합물의 경우 모든 시험된 용량에서 약 55% 내지 70%로 증가했으며, 이는 비히클이 투여된 마우스보다 2배 이상 증가한 것이었다. F-세포 %의 증가는 용량 반응성으로 보이지 않았다.
상기 제시된 결과는, 본 발명의 화합물이 HMOX 유도제 및 Bach 1 결합제/저해제로서, 적어도 Bach 1에의 결합, HMOX1 활성 증가, HbF 증가 및 혈관폐색 감소를 통해 SCD를 치료하는 데 사용될 수 있음을 입증한다.
실시예 149. 1차 인간 내피세포에서의 글루타티온(GSH) 수준
내피세포 성장 배지-2(EGM2 배지, Lonza # CC-3162)에서 배양시킨 1차 인간 폐동맥 내피세포(HPAEC)(Lonza # CC-2530)를 백색 96웰 플레이트(Corning® # 3610)에 웰당 12.5k개의 세포로 씨딩하고, 37℃ 및 5% CO2에 위치시켰다. 씨딩 18시간 내지 24시간 후, 배지 교환을 통해 세포를 실시예 17의 화합물로 처리하였다. 화합물 처리 24시간 후, 세포를 새로 제조된 헴 스톡(0.1 N NaOH 중 Sigma-Aldrich #51280) 단독으로 또는 실시예 17의 화합물과 함께 처리하였다. 헤민 자극 30분 후, 세포를 독성에 대해 육안으로 검사하고, 독성이 없음을 확인하였다. 배지를 흡인하여 제거하고, GSH-Glo™ 글루타티온 검정(Promega # V6911)을 제조업체의 프로토콜에 따라 수행하였다. 판독 동안 백색 바닥 플레이트 씰(PerkinElmer #6005199)을 사용하였다. Softmax Pro를 사용하여 분석을 수행하였다.
결과는 도 4에 도시되어 있다. 헴은 1차 인간 폐동맥 내피세포에서 산화스트레스를 유도하여 GSH 수준을 감소시키지만, HMOX 유도제/Bach 1 저해제(예를 들어, 실시예 17의 화합물)와 함께 예비 인큐베이션시키면 세포를 헤민 매개 산화스트레스로부터 보호할 수 있다.
실시예 150. 1차 인간 내피세포에서의 유전자 발현
내피세포의 염증성 병태는 NF-kB 신호전달을 통해 VCAM-1, ICAM-1 및 E-셀렉틴과 같은 부착 분자의 발현을 증가시킨다. HMOX1 -/- 내피세포는, HMOX +/+ 내피세포와 비교하여, TNF 자극에 대한 반응으로 VCAM-1의 발현을 증가시키는 것으로 나타났다. 문헌[Seldon et al., J Immunol December 1, 2007, 179 (11) 7840-7851] 참조.
1차 인간 폐동맥 내피세포(HPAEC)(Lonza # CC-2530)를 12웰 플레이트(TrueLine #TR5001)에 웰당 200k개의 세포로 씨딩하고, 37℃ 및 5% CO2에 위치시켰다. 씨딩 18시간 내지 24시간 후, 배지 교환을 통해 세포를 실시예 17의 화합물로 처리하였다. 화합물 처리 24시간 후, 세포를 10 ng/mL TNFα(H2O 중 Invitrogen #PHC3015) 단독으로 또는 실시예 17의 화합물과 함께 처리하였다. 처리 4시간 후, 세포를 독성에 대해 육안으로 검사하고, 독성이 없음을 확인하였다. 배지를 흡인하여 제거하고, 세포를 1x PBS(Corning #21-040-CV)로 1회 세정하고, 흡인하여 건조시키고, 파라필름으로 밀봉하고, RNA 단리 전까지 -80℃에 위치시켰다. NucleoSpin® 키트(MACHEREY-NAGEL # 740955.250, USA)를 이용하여 키트 프로토콜에 따라 RNA를 단리하였다. RNA를 고용량 cDNA 역전사 키트(ThermoFisher #4368814, USA)에 20 μL 반응액으로 사용하여 cDNA를 생성하였다. 역전사가 완결된 후, cDNA를 물을 이용하여 1:10로 희석하였다. 20 ng cDNA를 물, iQTM SYBR® Green Supermix(BioRad # 170-8886) 및 300 nM 프라이머(IDT #NM_001078)와 혼합하여 총 10 ul 반응액을 만들고, 384웰 백색 qPCR 플레이트에 로딩하고, 이어서 BioRad CFX384를 사용하여 분석하였다. 미가공 데이터를 소프트웨어(Biorad CFX Manager, USA)에서 엑스포트하여, 스프레드시트(Microsoft Excel, USA)에 임포트하였다. 배수 변화를 계산하기 위해, 샘플당 ΔCt를 Ct (관심 유전자) - Ct (참조 유전자의 평균)로 계산하였다. 이어서, ΔΔCt를 ΔCt (실험 샘플) - 평균 ΔCt (대조군)로 계산하였다. 배수 변화는 2-ΔΔCT로 계산하였다.
결과는 도 5에 도시되어 있다. 구체적으로, 인간 1차 내피세포를 TNF-α 자극을 사용하여 활성화시켰다. 예를 들어, TNF-α는 1차 인간 폐동맥 내피세포에서 혈관세포 부착 분자(VCAM)의 발현을 유도한다. 하지만, HMOX 유도제/Bach 1 저해제(예를 들어, 실시예 17의 화합물)로의 전처리는, 부착 분자 VCAM-1의 발현 감소로 입증된 바와 같이, 이러한 TNF-α 매개 내피세포 활성화를 감소시켰다.
실시예 151. PK 연구
9주령 내지 10주령의 수컷 C57BL/6 마우스에게 5% w/v tween 80 및 0.5% 메틸 셀룰로오스 중에 제형화된 시험 화합물 50 mg/kg을 경구 투여하였다. 투여 0.5시간 및 4시간 후, 전혈을 채취하고, 동물을 희생시켜 뇌조직을 채취하였다. 혈액 샘플을 즉시 얼음 위에 두고, 4℃에서 14000 rpm으로 3분 동안 원심분리하여, 60분 이내에 혈장을 수득하였다. 혈장을 피펫을 이용하여 사전 표지된 Eppendorf 튜브로 옮기고, 분석 시까지 -80℃에서 보관하였다.
뇌조직 샘플을 수집하고, 새로 제조된 얼음 냉각된 0.9% NaCl 용액으로 헹구고, 신속하게 건조시킨 후, 드라이아이스/액체 질소 상에서 동결시키고, 분석 시까지 -70℃ ± 10℃에서 보관하였다. 인산염 완충 염수를 사용하여 균질화시키고, 분석에 사용하였다. LC-MS/MS(API 4000)를 사용하여 생분석(bioanalysis)을 수행하였다.
시험 결과는 하기 표 4에 제공되어 있다. 실시예 56 화합물은 양호한 뇌 침투를 나타냈다.
Figure pct00145
실시예 152. PD 연구
9주령 내지 10주령의 수컷 C57BL/6 마우스에게 5% w/v tween 80 및 0.5% 메틸 셀룰로오스 중에 제형화된 비히클 또는 화합물 50 mg/kg을 경구 투여하였다. 표시된 시점(하기 결과에 제시된 바와 같이, 투여 3시간 및 6시간 후 또는 4시간 및 8시간 후)에서, 전혈을 채취하고, 동물을 희생시키고, 간을 채취하였다. 혈액 샘플을 10% w/v EDTA 4 μL가 함유된 바이알로 옮기고, 10℃ 미만에서 6000 rpm으로 8 동안 원심분리하여 혈장을 수득하였다. 샘플을 동결시키고, 이후에 하기 표시된 바와 같이 HMOX1 단백질 수준에 대해 처리하였다:
HMOX 1 단백질 수준: 마우스 간
균질화/용해 완충액의 제조
표 A에 따라 균질화 완충액을 제조하였다.
Figure pct00146
사용 직전, DTT(ThermoScientific #R0861)를 최종 농도 5 mM로 첨가하고, 100X Halt 프로테아제 및 프로파타아제 저해제 칵테일(ThermoScientific #78440)을 최종 농도 1X로 첨가하였다.
마우스 간 샘플 준비
동결 조건 하에서 막자사발을 이용하여 간 샘플을 분쇄하였다. 분쇄된 조직을 사전 냉각된 비드 파쇄기 OMNI 튜브(OMNI International, Cat#19-628)로 옮겼다. 균질화 완충액(+DTT 및 HALT) 1 mL를 분쇄된 조직에 첨가하고, 튜브를 얼음 위에 두었다. 샘플을 2회의 20초 사이클 동안(사이클 사이에 10초 유지) 5.64 m/s의 속도로 비드 파쇄기에 로딩 및 통과시키고, 샘플을 다시 즉시 얼음 위에 두었다. 모든 물질을 새로운 냉각된 2 mL Eppendorf 튜브로 옮겼다. 샘플을 4℃에서 2,000 rpm으로 5분 동안 원심분리하였다. 상청액을 새로운 냉각된 1.7 mL Eppendorf 튜브로 옮겼다. 샘플을 4℃에서 2,000 rpm으로 5분 동안 원심분리하였다. 시토졸과 마이크로솜으로 이루어진 상청액을 새로운 냉각된 1.7 mL Eppendorf 튜브로 옮겼다. 샘플을 -80℃에서 보관하였다. 마이크로솜 샘플을 125 g/mL 내지 2000 ug/mL 범위로 사전 냉각된 BSA 표준물(ThermoFisher Cat#23208)과 함께 Pierce 660 검정(ThermoFisher Cat#22660)을 사용하여 정량화하였다. 각각의 샘플을 50 ul 중 0.5 ug의 ELISA 입력을 위해 10 ng/ul로 희석하였다.
검정 시약 준비
모든 검정 시약은 헴 옥시게나아제 1(HO1) 마우스 SimpleStep ELISA 키트(Abcam #ab204524)에 제공되어 있었다. 사용 전, 모든 시약을 실온으로 평형화시켰다. 10X 세척 완충액(Wash Buffer) PT를 탈이온수를 이용하여 1:10으로 희석하여 1X 세척 완충액 PT를 준비하였다. 10X 포획 항체와 10X 검출 항체를 항체 희석제 5BI 중에 1X로 희석하여 항체 칵테일을 준비하였다. 마우스 헴 옥시게나아제 1 단백질 표준물을 균질화 완충액(표 A) 500 ul를 사용하여 재구성하고, 혼합하고, 희석 전 실온에서 10분 동안 유지시켰다. 10,000 pg/mL 내지 156.3 pg/mL 범위의 표준 곡선을 위해 스톡 표준물을 1:2로 희석하여 8점 표준 곡선을 생성하였다.
헴 옥시게나아제 1(HO1) 마우스 SimpleStep ELISA
모든 샘플 및 표준물 50 ul를 적절한 웰에 이중으로 첨가하였다. 1X 항체 칵테일 50 ul를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 제공된 씰을 이용하여 밀봉하고, 실온에서 플레이트 진탕기 상에서 400rpm으로 인큐베이션하였다. 1시간 인큐베이션 후, 항체 칵테일을 흡인하고, 각 단계 사이에 완전하게 흡인하면서 1X 세척 완충액 PT 350 ul로 웰을 3회 세척하였다. 마지막 세척액을 흡인하여 건조시킨 후, TMB 기질 100 ul를 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 암실에서 실온에서 플레이트 진탕기 상에서 400rpm으로 10분 동안 인큐베이션하였다. 10분 인큐베이션 후, 정지 용액(Stop Solution) 100 ul를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 400rpm으로 1분 동안 진탕시켜 혼합하였다. Softmax Pro 7.0.3을 사용하여 450 nm에서의 OD를 판독하고, 분석하였다.
마우스 혈장 내 헴 옥시게나아제 1 단백질 수준
검정 시약 준비
모든 검정 시약은 헴 옥시게나아제 1(HO1) 마우스 SimpleStep ELISA 키트(Abcam #ab204524)에 제공되어 있었다. 10X 세척 완충액 PT를 탈이온수를 이용하여 1:10으로 희석하여 1X 세척 완충액 PT를 준비하였다. 10X 포획 항체와 10X 검출 항체를 항체 희석제 5BI 중에 1X로 희석하여 항체 칵테일을 준비하였다. 마우스 헴 옥시게나아제 1 단백질 표준물을 샘플 희석제 NS 500 ul를 사용하여 재구성하고, 혼합하고, 희석 전 실온에서 10분 동안 유지시켰다. 5,000 pg/mL 내지 78.1 pg/mL 범위의 표준 곡선을 위해 스톡 표준물을 1:2로 희석하여 8점 표준 곡선을 생성하였다.
혈장 샘플 준비
ELISA 전, 동결된 혈장을 얼음 위에서 해동시켰다. 혈장의 최종 농도 10%를 위해 혈장 샘플을 샘플 희석제 NS 중에 1:10으로 희석하였다.
헴 옥시게나아제 1(HO1) 마우스 SimpleStep ELISA
샘플 및 표준물 50 ul를 적절한 웰에 이중으로 첨가하였다. 1X 항체 칵테일 50 ul를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 제공된 씰을 이용하여 밀봉하고, 실온에서 플레이트 진탕기 상에서 400rpm으로 인큐베이션하였다. 1시간 인큐베이션 후, 항체 칵테일을 흡인하고, 각 단계 사이에 완전하게 흡인하면서 1X 세척 완충액 PT 350 ul로 웰을 3회 세척하였다. 마지막 세척액을 흡인하여 건조시킨 후, TMB 기질 100 ul를 각 웰에 첨가하고, 플레이트를 암실에서 실온에서 플레이트 진탕기 상에서 400rpm으로 10분 동안 인큐베이션하였다. 10분 인큐베이션 후, 정지 용액 100 ul를 각 웰에 첨가하였다. 플레이트를 400rpm으로 1분 동안 진탕시켜 혼합하였다. Softmax Pro 7.0.3을 사용하여 450 nm에서의 OD를 판독하고, 분석하였다.
본 발명의 대표적인 화합물을 시험하였고, 결과는 하기 표 5에 제공되어 있다. 마우스 HMOX1 ELISA 검정(키트)로 평가한 혈장 및 간 단백질 수준을 시간 일치 비히클 대조군 마우스와 비교하여 배수 유도를 제공하였다. 카르복실산은 농도가 EC50보다 훨씬 높았지만(30배 내지 100배), HMOX1 단백질에서 그다지 크지 않은 증가를 나타냈다.
Figure pct00147

Claims (36)

  1. 구조식 (I)로 표시되는 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00148
    (I)
    [식 중,
    고리 A는 5원 내지 7원 모노시클릭 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 5원 또는 6원 헤테로아릴, 또는 페닐이고;
    X는 -S-, -O- 또는 -NRb-이고;
    X가 -S-이고 고리 A가 페닐인 경우, R은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴이고;
    X가 -S-이고 고리 A가 5원 내지 7원 모노시클릭 시클로알킬, 5원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴인 경우; 또는 X가 -O- 또는 -NRb-인 경우; R은 -H, -(C1-C4)알킬 또는 -(CH2)i3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴이고, 여기서 R로 표시되는 -(C1-C4)알킬 또는 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시, -SO2Ra 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
    각각의 R1은 독립적으로 -H, 할로겐, -(CH2)kCOOH, -(CH2)kCO(C1-C4)알킬, -(CH2)kCOO(C1-C4)알킬, -(CH2)pC(=O)NRaR3, -CH(CF3)NRaR3, -C(=NOH)CF3 또는 -CH(CF3)OR3이고, 여기서 R1로 표시되는 기에서의 (C1-C4)알킬은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
    각각의 R2는 독립적으로 -H, 할로, CN, -(C1-C4)알킬, -OH, -(C1-C4)알콕시, -COOH, -C(=O)(C1-C4)알킬, -C(=O)O(C1-C4)알킬, -C(=O)NRa(C1-C4)알킬, -NRaRa, 3원 내지 6원 모노시클릭 시클로알킬, -O(CH2)i3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, 여기서 R2로 표시되거나 R2로 표시되는 기에서의 -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)알콕시, 헤테로시클릴 또는 헤테로아릴은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)할로알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
    각각의 R3은 독립적으로 H, (C1-C4)알킬, (C1-C4)알콕시, -(CH2)p13원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, -(CH2)p1NH3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 5원 또는 6원 헤테로아릴, -O(CH2)p2NRaC(=O)(C1-C4)알킬, -(CH2)p2O(CH2)p2O(C=O)(C1-C4)알킬 또는 (CH2)p2NRaC(=O)(C1-C4)알킬이고, 여기서 R3으로 표시되거나 R3으로 표시되는 기에서의 알킬, 알콕시, 헤테로아릴 또는 헤테로시클릴은 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)할로알콕시, -(C1-C4)카르복시알콕시, -S(O)2(C1-C4)알킬, -(C1-C4)히드록시알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
    각각의 Ra는 독립적으로 -H 또는 -(C1-C4)알킬이고;
    각각의 Rb는 독립적으로 -H 또는 -(C1-C4)알킬이고; 여기서 Rb로 표시되는 -(C1-C4)알킬은 할로, -CN, -OH, -(C3-C6)시클로알킬, 페닐, 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 및 5원 또는 6원 헤테로아릴에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되고;
    i는 0 또는 1이고;
    k는 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    m은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    n은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    p는 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    p1은 0, 1, 2, 3 또는 4이고;
    p2는 2, 3 또는 4임].
  2. 제1항에 있어서, 구조식 (II)로 표시되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00149
    (II).
  3. 제1항에 있어서, 구조식 (II')로 표시되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00150
    (II').
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 구조식 (II-A)로 표시되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00151
    (II-A).
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 구조식 (II-B)로 표시되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00152
    (II-B).
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 구조식 (II-C)로 표시되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00153
    (II-C).
  7. 제1항 또는 제3항에 있어서, 구조식 (II'-A)로 표시되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00154
    (II'-A).
  8. 제6항에 있어서, Rb가 -H 또는 -(C1-C4)알킬이고, 여기서 Rb로 표시되는 -(C1-C4)알킬은 할로, -CN 및 -OH에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  9. 제1항 내지 제3항 또는 제5항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, R이 -(C1-C4)알콕시로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알킬; 또는 할로, -CN, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환된 -(CH2)i3원 내지 6원 모노시클릭 헤테로시클릴인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  10. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, R이 아제티디닐, 아제파닐, 모르폴리닐, 피롤리디닐, 피페리디닐, 피페라지닐, 옥세타닐, 테트라히드로푸라닐 또는 테트라히드로피라닐이고, 이들은 각각 할로, -OH, -(C1-C4)알킬 및 -NH2로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, R1이 -(CH2)kCOOH, 할로로 선택적으로 치환된 -(CH2)kCO(C1-C4)알킬, -(CH2)pC(=O)NRaR3, -C(=NOH)CF3 또는 -CH(CF3)NRaR3인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 H; 할로겐; CN; 할로로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알킬; 할로, 히드록시, 메톡시 또는 에톡시로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알콕시; -C(=O)(C1-C4)알킬; 3원 또는 4원 모노시클릭 시클로알킬; -O(CH2)i3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 3원 내지 7원 모노시클릭 헤테로시클릴, 또는 5원 또는 6원 헤테로아릴이고, 여기서 R2로 표시되거나 R2로 표시되는 기에서의 헤테로시클릴 또는 헤테로아릴은 할로, 히드록시 또는 -(C1-C4)알콕시로 선택적으로 치환되는 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  13. 제1항 내지 제3항, 제5항 내지 제9항, 제11항 또는 제12항 중 어느 한 항에 있어서, R이 메톡시 또는 -SO2CH3로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알킬; -(CH2)테트라히드로푸라닐; 히드록시로 선택적으로 치환된 -(CH2)옥세타닐; 피롤리디닐; 피페리디닐; 또는 테트라히드로피라닐이고; 여기서 피롤리디닐 또는 피페리디닐은 -(C1-C4)알킬로 선택적으로 치환되는 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, R1이 -COOH, -C(=O)CF3, -CH(CF3)(NH2), -C(=NOH)CF3 또는 -C(=O)NHR3인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, R3이 (C1-C4)알킬, (C1-C4)알콕시, (CH2)p13원 내지 6원 모노시클릭 헤테로시클릴 또는 (CH2)p2NHC(=O)(C1-C4)알킬이고, 여기서 R3으로 표시되거나 R3으로 표시되는 기에서의 알킬, 알콕시 또는 헤테로시클릴은 할로, -OH, -(C1-C4)알킬, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)히드록시알킬, -(C1-C4)알콕시, -(C1-C4)할로알콕시, -S(O)2(C1-C4)알킬, -(C1-C4)히드록시알콕시 및 -NRaRa로 이루어지는 군에서 선택되는 하나 이상의 기로 선택적으로 치환되는 것인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 H; 할로겐; CN; 할로로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알킬; 할로, 히드록시, 메톡시 또는 에톡시로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알콕시; -C(=O)(C1-C4)알킬; 시클로프로필; O-테트라히드로피라닐; N-피롤리디닐; 또는 티아졸릴인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  17. 제5항에 있어서, 구조식 (III-B)로 표시되는, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염:
    Figure pct00155
    (III-B).
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서,
    R1이 -COOH 또는 -C(=O)NHR3이고,
    R3이 -(C1-C4)알킬, -히드록시(C1-C4)알킬, -메톡시(C1-C4)알킬, -아미노(C1-C4)알킬, -(C1-C4)히드록시알콕시(C1-C4)알킬 또는 -(CH2)p2NHC(=O)(디메틸아미노(C1-C4)알킬)인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 H, 할로, -(C1-C4)할로알킬, -(C1-C4)할로알콕시, 메톡시로 선택적으로 치환된 -(C1-C4)알콕시, 또는 -N-피롤리디닐인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, R2가 H, F, CF3, OCHF2, OCF3, OCH2CH2OCH3 또는 -N-피롤리디닐인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  21. 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 있어서,
    R2가 H이고, R1이 -OH, NH2, 옥세타닐 또는 -(C1-C4)히드록시알콕시로 선택적으로 치환된 -C(=O)NH(C1-C4)알킬; 또는 -C(=O)NH(CH2)p2NHC(=O)(디메틸아미노(C1-C4)알킬)이거나;
    R2가 F이고, R1이 -C(=O)NH(메톡시(C1-C4)알킬)이거나;
    R2가 -N-피롤리디닐이고, R1이 -C(=O)NH((C1-C4)히드록시알콕시(C1-C4)알킬)이거나;
    R2가 CF3, OCHF2 또는 OCF3이고, R1이 -COOH이거나; 또는
    R2가 OCH2CH2OCH3이고, R1이 -C(=O)NH((C1-C4)히드록시알콕시(C1-C4)알킬), -C(=O)NH(히드록시(C1-C4)알킬), -C(=O)NH(메톡시(C1-C4)알킬) 또는 -C(=O)NH(히드록시(C1-C4)알콕시)인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  22. 제17항에 있어서,
    R1이 -OH, NH2, -(C1-C4)알콕시 또는 -(C1-C4)히드록시알콕시로 선택적으로 치환된 -C(=O)NH(C1-C4)알킬이고,
    R2가 H 또는 OCH2CH2OCH3인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  23. 제22항에 있어서,
    R2가 H인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  24. 제23항에 있어서,
    R1이 -(C1-C4)히드록시알콕시로 치환된 -C(=O)NH(C1-C4)알킬인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  25. 제24항에 있어서,
    2-(벤조[d]옥사졸-2-일아미노)-N-(2-(2-히드록시에톡시)에틸)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미드인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  26. 제22항에 있어서,
    R1이 -(C1-C4)알콕시로 치환된 -C(=O)NH(C1-C4)알킬이고,
    R2가 OCH2CH2OCH3인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  27. 제26항에 있어서,
    2-((6-(2-메톡시에톡시)벤조[d]옥사졸-2-일)아미노)-N-(2-메톡시에틸)-1-메틸-1H-벤조[d]이미다졸-5-카르복사미드인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  28. 제1항에 있어서,
    Figure pct00156
    ,
    Figure pct00157
    또는
    Figure pct00158
    인, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  29. 약학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제와, 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학적 조성물.
  30. 유효량의 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 유효량의 제29항의 약학적 조성물을 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 인간 대상에서 HMOX-1의 활성 또는 양을 증가시키는 방법.
  31. 유효량의 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 유효량의 제29항의 약학적 조성물을 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 인간 대상에서 전사인자 Nrf2를 활성화시키는 방법.
  32. 유효량의 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 유효량의 제29항의 약학적 조성물을 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 인간 대상에서 ROS의 양을 감소시키는 방법.
  33. 유효량의 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 유효량의 제29항의 약학적 조성물을 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 하기와 같은 질환, 장애 또는 병태를 치료하는 방법: (i) 만성폐쇄성폐질환(COPD), 특발성 폐섬유증, 사르코이드증과 같은 폐의 섬유증성 질환, 알코올성 간경변증, 지방증, 쓸개즙정체, 약물 부작용 및 바이러스성 감염에 의해 유발된 것들을 포함하는 간의 섬유증성 질환, 및 피부경화증 또는 건선과 같은 피부의 섬유증성 질환을 포함하는 섬유증성 질환; (ii) 프리드리히 운동실조증(Friedreich's ataxia), 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 파킨슨병(Parkinson's disease), 근위축측삭경화증, 다발경화증, 뇌신경 퇴행성 질환 또는 샤르코-마리-투스 증후군(Charcot-Marie-Tooth syndrome)을 포함하는 신경변성질환; (iii) 고혈압, 고콜레스테롤혈증, 죽상동맥경화증, 동맥경화증, 혈전증, 급성 관상동맥 혈전증, 심부정맥 혈전증, 말초혈관질환, 울혈성 심부전, 급성 관상동맥 증후군, 투석용 동맥루 기능부전, 허혈 재관류 손상, 원발성 폐고혈압, 원발성 폐동맥 고혈압 또는 속발성 폐동맥 고혈압을 포함하는 심혈관질환; (iv) 급성 신손상, 다낭성 신장질환, 알포트 증후군(Alport syndrome), 당뇨병성 신장병증, 사구체신염, 루푸스신장염, 낫적혈구 신장병증 및 급성 세뇨관괴사를 포함하는 신장질환; (v) 천식, 만성폐쇄성폐질환, 특발성 폐섬유증, 염증성 장증후군, 크론병(Crohn's disease), 셀리악병(celiac disease), 궤양성 대장염, 만성 염증성 장질환, 피부경화증, 피부염, 전신홍반루푸스, 식도염, 혈관염, 췌장염, 건염, 골관절염, 류마티스관절염, 강직척추염 또는 뇌의 만성 염증을 포함하는 염증성질환; (vi) 약물 유도성 간독성, 비알코올성 지방간염, B형 간염 감염 또는 C형 간염 감염을 포함하는 간질환; (vii) 결막염, 녹내장, 포도막염, 눈 상처, 안외상, 각막이식, 푹스각막내피이영양증(Fuchs' endothelial corneal dystrophy), 황반변성, 백내장, 일광망막병증, 색소망막염, 당뇨망막병증 및 미숙아 망막병증을 포함하는 안질환; (viii) 그레이브스병(Graves' disease), 소포샘종, 또는 유두상 및 여포상 암종을 포함하는 갑상선질환; (ix) 인간면역결핍바이러스, B형 간염, C형 간염 또는 헤르페스바이러스에 의한 감염을 포함하는 바이러스성 감염; (x) 골다공증; (xi) 임신성 장애; (xii) 자궁내막증; (xiii) 제1형 진성 당뇨병, 제2형 진성 당뇨병, 임신당뇨병, 당뇨병전기, 고혈당증, 대사증후군 또는 당뇨병성 병태로 인해 발생한 2차 병태를 포함하는 당뇨병; (xiv) 암; (xv) 피부염, 피부경화증 또는 건선을 포함하는 피부질환; (xvi) 미토콘드리아 근병증, 레버씨 선천성 시신경병증(LHON: Leber's hereditary optic neuropathy), 불균일적색근섬유 동반 근간대성 간질(MERFF: myoclonic epilepsy with ragged red fibers), 미토콘드리아 뇌근병증, 젖산산증 및 뇌졸중 유사증상(MELAS: stroke-like episodes) 또는 리 증후군(Leigh's Syndrome)과 같은 미토콘드리아질환; (xvii) 다이아몬드 블랙판 빈혈(Diamond Blackfan anemia), 골수이형성증후군, 낫적혈구병 및 베타 지중해빈혈과 같은 혈액학적 장애; 또는 (xviii) 뒤시엔느 근위축증(Duchenne muscular dystrophy), 지대 근디스트로피(limb girdle muscular dystrophy), 베커 근디스트로피(Becker muscular dystrophy), 근긴장디스트로피 및 횡문근융해와 같은 근육질환.
  34. 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항에 있어서, 제33항의 질환, 장애 또는 병태의 치료를 필요로 하는 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는 인간 대상에서의 상기 질환, 장애 또는 병태의 치료를 위한, 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 약학적 조성물.
  35. 제33항의 질환, 장애 또는 병태의 치료를 필요로 하는 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는 인간 대상에서의 상기 질환, 장애 또는 병태의 치료를 위한 약제의 제조를 위한, 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제29항의 약학적 조성물의 용도.
  36. 제33항의 질환, 장애 또는 병태의 치료를 필요로 하는 인간 대상에게 투여하는 것을 포함하는 인간 대상에서의 상기 질환, 장애 또는 병태의 치료를 위한, 제1항 내지 제28항 중 어느 한 항의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제29항의 약학적 조성물의 용도.
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