KR20220008875A

KR20220008875A - 계절성 인플루엔자 백신과 아데노바이러스 기반 호흡기 세포융합 바이러스 백신의 공동투여

Info

Publication number: KR20220008875A
Application number: KR1020217040639A
Authority: KR
Inventors: 베노아 크리스토프 스테판 깔렁드레; 제랄드 씨. 사도프; 엘스 데 파에페
Original assignee: 얀센 백신스 앤드 프리벤션 비.브이.
Priority date: 2019-05-15
Filing date: 2020-05-14
Publication date: 2022-01-21
Also published as: WO2020229577A1; AU2020275455A1; EP3969044A1; CN113924113A; CA3140230A1; US20220273787A1; JP2022532723A; BR112021022087A2

Abstract

인간 대상체에서 중증의 이상반응을 유도하는 일 없이, 호흡기 세포융합 바이러스(RSV)에 대한 그리고 인플루엔자 바이러스에 대한 보호 면역 반응을 유도하는 방법이 기재된다. 상기 방법은 유효량의 인플루엔자 백신과 함께, 융합 전 입체구조에서 안정화되는 재조합 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는, 유효량의 아데노바이러스 벡터를 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

Description

계절성 인플루엔자 백신과 아데노바이러스 기반 호흡기 세포융합 바이러스 백신의 공동투여

본 발명은 의학 분야에 관한 것이다. 특히, 본 발명의 실시형태는 호흡기 세포융합 바이러스(Respiratory Syncytial Virus: RSV) 및 인플루엔자 바이러스 감염의 예방적 치료를 위해 인플루엔자 백신과 병용하는 아데노바이러스-기반 백신 및 이의 용도에 관한 것이다.

호흡기 세포융합 바이러스(RSV)는 영아 및 5세 미만의 아동에서 심각한 급성 호흡기 질병의 가장 중요한 원인인 것으로 간주된다(문헌[Hall, et al., N Engl J Med. 2009:360;588-598]; 문헌[Shay et al., JAMA. 1999:282;1440-1446]; 문헌[Stockman et al., Pediatr Infect Dis J. 2012:31;5-9]). 전세계적으로, RSV는 연간 3백 4십만건으로 추정되는 입원을 초래한다. 미국에서, 5세 미만의 아동에서의 RSV 감염은 매년 57,000 내지 175,000건의 입원, 500,000건의 응급실 방문 및 대략 500건의 사망의 원인이다(문헌[Paramore et al., Pharmacoeconomics. 2004:22;275-284]; 문헌[Shay et al., JAMA. 1999:282;1440-1446]; 문헌[Stockman et al., Pediatr Infect Dis J. 2012:31;5-9]). 미국에서, 60%의 영아는 RSV에 대한 초기 노출 시에 감염되고(문헌[Glezen et al., Am J Dis Child. 1986:140;543-546]), 거의 모든 아동이 2 내지 3세까지 바이러스로 감염될 것이다. RSV에 대한 면역은 일시적이며, 반복된 감염이 생애 내내 발생된다(문헌[Hall et al., J Infect Dis. 1991:163;693-698]). 1세 미만의 아동에서, RSV는 세기관지염의 가장 중요한 원인이며, RSV 입원은 6개월령 미만의 아동에서 가장 높다(미국 질병통제예방센터(Centers for Disease Control and Prevention: CDC). 호흡기 세포융합 바이러스 감염(RSV) - 감염 및 발생률. http://www.cdc.gov/rsv/about/infection.html에서 이용 가능(2016년 6월 2일에 마지막으로 액서스됨); 문헌[Hall, et al., N Engl J Med. 2009:360;588-598]). 5세 미만의 아동에서의 거의 모든 RSV-관련 사망(99%)은 개발도상국에서 일어난다(Nair et al., Lancet. 2010:375;1545-1555). 그럼에도 불구하고, 개발도상국에서의 RSV로 인한 질환 부담은 상당하며, 아동기 동안의 RSV 감염은 천명, 기도 과민성 및 천식의 발병과 연관된다(문헌[Peebles et al., J Allergy Clin Immunol. 2004:113; S15-18]; 문헌[Regnier and Huels, Pediatr Infect Dis J. 2013:32;820-826]; 문헌[Sigurs et al., Am J Respir Crit Care Med. 2005:171;137-141]; 문헌[Simoes et al., J Allergy Clin Immunol. 2010:126;256-262]; 문헌[Simoes et al., J Pediatr. 2007:151;34-42, 42 e31]).

아동에 추가로, RSV는 노인, 면역저하자 및 기저 만성 심폐 질환이 있는 사람에서의 호흡기 감염의 중요한 원인이다(문헌[Falsey et al., N Engl J Med. 2005:352;1749-1759]). 장기 요양 시설에서, RSV는 매년 거주자의 5 내지 10%를 감염시키는 것으로 추정되며, 상당한 비율의 폐렴(10 내지 20%) 및 사망(2 내지 5%)이 있다(문헌[Falsey et al., Clin Microbiol Rev. 2000:13;371-384]). RSV 부담의 하나의 역학 연구에서, 미국에서 매년 11,000명의 노인이 RSV로 사망하는 것으로 추정되었다(문헌[Thompson et al., JAMA. 2003:289;179-186]). 이들 데이터는 특정 성인 집단에 대한 유효한 백신을 개발하는 것의 중요성을 뒷받침한다.

RSV 융합(F) 당단백질(Synagis® [팔리비주맙])에 대한 중화 단클론성 항체에 의한 수동 면역화를 통한 예방이 가능하지만, 미숙아(29주 미만의 제태기간), 중증 심폐 질환이 있는 아동 또는 심각한 면역저하자에 대해서만 지시된다(문헌[American Academy of Pediatrics Committee on Infectious Diseases, American Academy of Pediatrics Bronchiolitis Guidelines Committee. Updated guidance for palivizumab prophylaxis among infants and young children at increased risk of hospitalization for respiratory syncytial virus infection. Pediatrics. 2014:134;415-420]). Synagis는 입원 위험을 55%만큼 감소시키는 것으로 나타났다(문헌[Prevention. Prevention of respiratory syncytial virus infections: indications for the use of palivizumab and update on the use of RSV-IGIV. American Academy of Pediatrics Committee on Infectious Diseases and Committee of Fetus and Newborn. Pediatrics. 1998:102;1211-1216]).

높은 질환 부담 및 RSV 백신 개발에 대한 강한 관심에도 불구하고, RSV에 대해 이용 가능한 허가된 백신은 없다. 1960년대 후반에, 명반에 의해 면역증강된(adjuvanted) 포르말린-비활성화 RSV 백신(FI-RSV)을 평가하기 위한 일련의 연구가 개시되었고, 이들 연구 결과는 RSV 백신 분야에 큰 영향을 미쳤다. 근육내 주사에 의해 전달되는 FI-RSV 백신을 이용하여 상이한 연령 그룹의 아동에서 4건의 연구를 병행하여 수행하였다(문헌[Chin et al., Am J Epidemiol. 1969:89;449-463; Fulginiti et al., Am J Epidemiol. 1969:89;435-448]; 문헌[Kapikian et al., Am J Epidemiol. 1969:89;405-421]; 문헌[Kim et al., Am J Epidemiol. 1969:89;422-434]). RSV-감염 FI-RSV 수용자의 80%는 입원이 필요하였고, 다음 겨울철 동안 2명의 아동이 사망하였다(문헌[Chin et al., Am J Epidemiol. 1969:89;449-463]). RSV-감염 대조군에서 아동의 5%만이 입원이 필요하였다. 재감염 시 FI-RSV 수용자에서 관찰된 호흡기 질환 악화(enhanced respiratory disease: ERD)의 메커니즘이 연구되었고, 이는 해당 연령 그룹에 존재하는 세기관지에 대한 비정상적 면역 반응의 결과인 것으로 여겨진다. 환자 샘플 및 동물 모델 분석으로부터 얻은 데이터는 FI-RSV ERD가 낮은 중화 항체 역가, 기도에서 면역 복합체 침착을 촉진시키는 낮은 결합활성(avidity) 비-중화 항체의 존재, 바이러스 클리어런스에 중요한 것으로 나타난 감소된 세포독성 CD8+ T-세포 프라이밍 및 호산구 증가증의 증거와 함께 향상된 CD4+ T 헬퍼 2형(Th2)-편향(skewed) 반응을 특징으로 한다는 것을 시사한다(문헌[Beeler et al., Microb Pathog. 2013:55;9-15]; 문헌[Connors et al., J Virol. 1992:66;7444-7451]; 문헌[De Swart et al., J Virol. 2002:76;11561-11569]; 문헌[Graham et al., J Immunol. 1993:151;2032-2040]; 문헌[Kim et al., Pediatr Res. 1976:10;75-78]; 문헌[Murphy et al., J Clin Microbiol. 1986:24;197-202]; 문헌[Murphy et al., J Clin Microbiol. 1988:26;1595-1597]; 문헌[Polack et al., J Exp Med. 2002:196;859-865]). 포르말린과 RSV 단백질 항원의 화학적 상호작용은 후속적 RSV 감염 시 FI-RSV 백신이 ERD를 촉진시키는 메커니즘 중 하나 일 수 있는 것으로 여겨진다(문헌[Moghaddam et al., Nat Med. 2006:12;905-907]). 이런 이유로, RSV 백신 개발에서 포르말린은 더 이상 사용되고 있지 않다.

FI-RSV 백신에 더하여, 동물 모델 및 인간 연구에서 몇 가지 생-약독 및 서브유닛 RSV 백신이 시험되었지만, 다수는 안전성 및 면역원성/효능의 정확한 균형을 달성하지 못함으로 인해 금지되었다. 생-약독 백신은 영아에서의 과잉 약독 및 약독 부족과 관련된 어려움에 의해 특히 어려움이 있었다(문헌[Belshe et al., J Infect Dis. 2004:190;2096-2103]; 문헌[Karron et al., J Infect Dis. 2005:191;1093-1104]; 문헌[Luongo et al., Vaccine. 2009:27;5667-5676]). 서브유닛 백신과 관련하여, RSV 융합(F)과 당단백질(G) 단백질은 둘 다 막 단백질이며, 중화 항체를 유도하는 유일한 RSV 단백질이다(문헌[Shay et al., JAMA. 1999:282;1440-1446]). RSV G 단백질과 달리, F 단백질은 RSV 균주 간에 보존된다. 다양한 RSV F-서브유닛 백신은 문헌[Graham, Immunol Rev. 2011:239;149-166]에 기반하여 개발되었다. 현재 이용 가능한 항-F 단백질 중화 단클론성 항체 예방에 의해 제공된 개념 증명(proof-of-concept)은 고수준의 장기 지속성 중화 항체를 유도하는 백신이 RSV 질환을 예방할 수 있다는 생각에 대한 근거를 제공한다(문헌[Feltes et al., Pediatr Res. 2011:70;186-191]; 문헌[Groothuis et al., J Infect Dis. 1998:177;467-469]; 문헌[Groothuis et al., N Engl J Med. 1993:329;1524-1530]). 몇 가지 연구는 노인에서 RSV에 대한 감소된 보호가 말초 혈액 단핵 세포(PBMC)에 의한 인터페론 감마(IFNγ) 생성의 연령-관련 감소, CD8+ 대 CD4+ T 세포의 감소된 비, 및 순환 RSV-특이적 CD8+ 기억 T 세포의 감소된 수에 기인할 수 있다는 것을 시사하였다(문헌[De Bree et al., J Infect Dis. 2005:191;1710-1718]; 문헌[Lee et al., Mech Ageing Dev. 2005:126;1223-1229]; 문헌[Looney et al., J Infect Dis. 2002:185;682-685]). 고수준의 혈청 중화 항체는 노인에서의 덜 중증인 감염과 관련된다(문헌[Walsh and Falsey, J Infect Dis. 2004:190;373-378]). 또한 성인에서 RSV 감염 후, 혈청 항체 역가가 빠르게 상승하지만, 이어서, 16 내지 20개월 후 감염 전 수준으로 서서히 복귀된다는 것이 입증되었다(문헌[Falsey et al., J Med Virol. 2006:78;1493-1497]). 1960년대에 FI-RSV 백신 연구에서 이미 관찰된 ERD를 고려하여, 장래의 백신은 강한 항원-특이적 CD8+ T-세포 반응을 촉진시켜야 하고, 편향된 Th2-형 CD4+ T 세포 반응을 피한다(문헌[Graham, Immunol Rev. 2011:239;149-166).

RSV F 단백질은 불안정한 융합-전 입체구조로부터 안정한 융합-후 입체구조로의 비가역적 단백질 재폴딩에 의해 바이러스와 숙주-세포막을 융합한다. 입체구조 둘 다의 구조가 RSV F에 대해(문헌[McLellan et al., Science 2013:342, 592-598]; 문헌[McLellan et al., Nat Struct Mol Biol 2010:17, 248-250]; 문헌[McLellan et al., Science 340, 2013:1113-1117]; 문헌[Swanson et al., Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 2011:108, 9619-9624]), 그리고 관련된 파라믹소바이러스로부터의 융합 단백질에 대해 결정되어 있어, 이 복합체 융합 기구의 메커니즘에 대한 통찰을 제공한다. 다른 I형 융합 단백질과 마찬가지로, 비활성 전구체 RSV F0는 세포내 성숙 중에 퓨린(furin)-유사 프로테아제에 의한 절단을 필요로 한다. RSV F0는 (예를 들어, GenBank 수탁 번호 ACO83301에 의한 RSV F0의 아미노산 잔기 109/110와 136/137 사이에) 2개의 퓨린 부위를 포함하는데, 이는 3가지의 폴리펩티드: F2, p27 및 F1을 야기하고, 후자는 이의 N-말단에 소수성 융합 펩티드(FP)를 함유한다. 융합-전 입체구조로부터 융합-후 입체구조로의 재폴딩을 위해, (예를 들어, FP 및 헵타드 반복부 A(heptad repeat A: HRA)를 포함하는 잔기 137 내지 216 사이의) 재폴딩 영역 1(RR1)이 나선, 루프 및 가닥의 조립체로부터 긴 연속적 나선으로 변환되어야 한다. RR1의 N-말단 세그먼트에 위치한 FP가 다음에 바이러스 막으로부터 연장되고 표적 세포의 근위 막에 삽입될 수 있다. 다음에, 융합 전 F 스파이크에서 C-말단 줄기를 형성하고 헵타드 반복부 B(HRB)를 포함하는 재폴딩 영역 2(RR2)가 RSV F 헤드의 다른 쪽으로 이동하고 HRA 또꼬인 나선(coiled-coil) 삼량체를 HRB 도메인에 결합시켜 6-나선 다발을 형성한다. 6-나선 다발을 완성하기 위한 RR1 또꼬인 나선의 형성 및 RR2의 이동은 재폴딩 과정 중에 일어나는 가장 극적인 구조적 변화이다.

인간 혈청에서 대부분의 중화 항체는 융합-전 입체구조에 대하여 지시되지만, 그 불안정성으로 인해 융합-전 입체구조는 용액 및 비리온의 표면 둘 다에서 융합-후 입체구조로 일찍 재폴딩되는 경향을 갖는다. 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드는 기재되어 있다. 예를 들어, WO2014/174018, WO2014/202570 및 WO 2017/174564 참조. 그러나, 인간에서 이러한 폴리펩티드의 안전성, 효능/면역원성에 대한 보고는 없다.

인플루엔자 바이러스는 중증도가 준임상적 감염으로부터 사망을 야기할 수 있는 원발성 바이러스성 폐렴까지의 범위인 호흡기 질환(통상 "인플루엔자" 또는 "독감"으로 지칭)을 야기하는 주요 인간 병원체이다. 감염의 임상 효과는 인플루엔자 균주의 독력 및 숙주의 노출, 병력, 연령 및 면역 상태에 따라 달라진다. 매년 전 세계적으로 대략 10억 명의 사람들이 인플루엔자 바이러스로 감염을 겪어, 3백만 내지 5백만의 사례에서 중증의 병이 야기되고, 300,000 내지 500,000건의 인플루엔자 관련 사망이 발생하는 것으로 추정된다.

인간 및 동물에 있어서 감염성 병리를 초래하는 인플루엔자 바이러스는 3가지 속(A, B 및 C 형)이 있다. A형 및 B 형 바이러스는 인간에서 관찰되는 인플루엔자 계절성 유행병(A형 및 B형) 및 전세계적 유행병(A형)을 초래하는 제제이다.

인플루엔자 A 바이러스는 바이러스 부착 및 세포 방출에 각각 필요한 표면 당단백질 혈구응집소(HA) 및 뉴라미니다제(NA)를 암호화하는 두 유전자의 항원 영역에서의 변이에 기반하여 인플루엔자 바이러스 아형으로 분류될 수 있다. 현재, HA의 16가지 아형(H1 내지 H16) 및 9가지 NA(N1 내지 N9) 항원 변이체가 인플루엔자 A 바이러스로 알려져 있다. 인플루엔자 A 아형(즉, H1N1, H1N2 및 H3N2) 중 일부만이 사람에서 순환하지만, 16가지 HA와 9가지 NA 아형의 모든 조합이 동물에서, 특히 조류 종에서 확인되었다.

인플루엔자 B형 바이러스 균주는 엄격하게는 인간형이다. 인플루엔자 B형 바이러스 균주에서의 HA의 항원 변이는 A형 균주에서 관찰되는 것보다 더 작다. B/Yamagata/16/88(B/Yamagata로도 지칭) 및 B/Victoria/2/87(B/Victoria) 계통에 의해 나타나는 바와 같이, 인플루엔자 B 바이러스의 2가지 유전자적으로 그리고 항원적으로 별개의 계통이 인간에서 유행한다(문헌[Ferguson et al., Nature. 2003 Mar 27;422(6930):428-33.]). 인플루엔자 B 바이러스에 의해 야기되는 질환의 범주는 일반적으로 인플루엔자 A 바이러스에 의해 야기되는 것보다 더 경증이지만, 입원을 필요로 하는 중증의 병이 인플루엔자 B 감염에서 여전히 빈번하게 관찰된다.

인플루엔자 항원의 고도로 가변적이고 돌연변이 가능한 특성으로 인해, 백신의 개발을 어려운 것으로 증명되었다. 그러나, 백신접종은 질환 및 이의 심각한 합병증에 대해 보호하는 가장 증명된 방법이다. 백신은 각 독감철에 집단에서 만연할 것으로 예측되는 바이러스 혈청형을 예상하여 매년 제형화하고 재투여하여야 하며, 따라서 "계절성" 백신으로 간주된다. 전형적으로, 가장 통상적인 인간 백신은 A(H1N1), A(H3N2) 및 B를 포함하여, 1977년 이후로 매년 전세계적 인플루엔자 발병을 우세하게 초래하는 주요 바이러스 유형 각각으로부터의 한 가지 대표적인 균주의 조합물이다. 6개월령 이상의 개체에 대한 근육내(IM) 주사로 주어지는 3가 비활성화 백신(TIV), 및 건강한, 2 내지 49세의 임신하지 않은 사람에서 비강내로 투여되는 생 약독 인플루엔자 바이러스 백신(LAIV)을 포함하는 2가지 부류의 인플루엔자 백신이 있다.

RSV 감염에 감수성이 있는 집단은 종종 인플루엔자 바이러스 감염에 감수성이 있다. 따라서, RSV에 대한 백신 및 인플루엔자 바이러스에 대한 백신을 이러한 투여가 필요한 대상체에 공동 투여하기 위한 안전하고 유효한 방법에 대한 필요가 있다.

한 가지 일반적 양상에서, 본 출원은 보호 면역 반응(protective immune response)이 필요한 인간 대상체에서 호흡기 세포융합 바이러스(RSV) 감염과 인플루엔자 바이러스 감염에 대한 보호 면역 반응을 둘 다 유도하는 방법을 기재하며, (a) 유효량의 약제학적 조성물, 바람직하게는 백신으로서, 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터를 포함하되, 유효량의 약제학적 조성물은 용량당 약 1×10¹⁰ 내지 약 1×10¹²개의 바이러스 입자의 아데노바이러스 벡터를 포함하는, 약제학적 조성물, 및 (b) 유효량의 인플루엔자 백신을 대상체에게 근육내로 투여하는 단계를 포함하되, (a)와 (b)는 공동투여된다.

특정 실시형태에서, (a)의 약제학적 조성물과 (b)의 백신은 동시에 투여된다.

특정 실시형태에서, 아데노바이러스 벡터는 복제-불능(replication-incompetent)이며, 아데노바이러스 초기 영역 1(E1 영역) 및 초기 영역 3(E3 영역) 중 적어도 하나에서 결실을 가진다.

특정 실시형태에서, 아데노바이러스 벡터는 E1 영역 및 E3 영역이 결실된 복제-불능 Ad26 아데노바이러스 벡터이다.

특정 실시형태에서, 아데노바이러스 벡터는 E1 영역 및 E3 영역이 결실된 복제-불능 Ad35 아데노바이러스 벡터이다.

특정 실시형태에서, 아데노바이러스 벡터에 의해 암호화된 재조합 RSV F 폴리펩디드는 서열번호 4 또는 서열번호 5의 아미노산 서열을 가진다.

특정 실시형태에서, RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산은 서열번호 6 또는 서열번호 7의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함한다.

특정 실시형태에서, 유효량의 약제학적 조성물은 용량당 약 1×10¹¹개 바이러스 입자의 아데노바이러스 벡터를 포함한다.

특정 실시형태에서, 인플루엔자 백신은 계절성 인플루엔자 백신이다.

특정 실시형태에서, 대상체는 RSV 감염에 감수성이다.

특정 실시형태에서, 대상체는 인플루엔자 바이러스 감염에 감수성이다.

특정 실시형태에서, 보호 면역 반응은 RSV에 노출 시 대상체에서의 RSV 임상 증상이 존재하지 않거나 감소된 것을 특징으로 한다.

특정 실시형태에서, 보호 면역 반응은 인플루엔자 바이러스에 노출 시 대상체에서의 인플루엔자 바이러스 임상 증상이 존재하지 않거나 감소된 것을 특징으로 한다.

특정 실시형태에서, 보호 면역 반응은 RSV에 대한 중화 항체 및/또는 RSV에 대한 보호 면역을 특징으로 한다.

특정 실시형태에서, 보호 면역 반응은 인플루엔자 바이러스에 대한 중화 항체 및/또는 인플루엔자 바이러스에 대한 보호 면역을 특징으로 한다.

특정 실시형태에서, 투여는 임의의 중증의 이상반응(adverse event)을 유도하지 않는다.

한 가지 일반적 양상에서, 본 출원은 (a) 약제학적 조성물, 바람직하게는 백신으로서, 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터를 포함하되, 유효량의 약제학적 조성물은 용량당 약 1×10¹⁰ 내지 약 1×10¹²개 바이러스 입자의 아데노바이러스 벡터를 포함하는, 약제학적 조성물, 및 (b) 인플루엔자 백신, 바람직하게는, 계절성 인플루엔자 백신을 포함하는 조합물, 예컨대, 키트를 기재한다. 조합물은 보호 면역 반응이 필요한 인간 대상체에서의 호흡기 세포융합 바이러스(RSV) 감염에 대한 보호 면역 반응과 인플루엔자 바이러스 감염에 대한 보호 면역 반응을 둘 다 유도하는 데 사용될 수 있다.

전술한 발명의 내용과, 다음의 본 출원의 바람직한 실시형태의 상세한 설명은 첨부된 도면과 함께 읽을 때 더 잘 이해될 것이다. 그러나, 본 출원은 도면에 나타낸 정확한 실시형태로 제한되지 않음이 이해되어야 한다.
도 1은 프로토콜당 인플루엔자 면역원성 집단에 대한 백신접종 후 제28일에 적혈구 응집반응 저해(HI) 항체 반응(HAI)의 기하평균비의 숲 도표(Forest plot)를 나타낸다;
도 2는 프로토콜당 인플루엔자 면역원성 집단에 대한 HI 항체 반응(HAI)의 시간에 따른 평균(95% CI) 실제 값의 도표를 나타낸다;
도 3은 프로토콜당 인플루엔자 면역원성 집단에 대한 백신접종 후 제28일에 HI 항체 반응(HAI)에 대한 혈청전환 차이의 숲 도표를 나타낸다;
도 4는 프로토콜당 인플루엔자 면역원성 집단에 대한 백신접종 후 제28일에 HI 항체 반응(HAI)에 대한 혈청보호 차이의 숲 도표를 나타낸다;
도 5는 프로토콜당 RSV 면역원성 집단에 대한 시간에 따른 RSV A2 균주에 대한 중화 항체 역가의 도표를 나타내며, 95% CI의 기하평균을 도면에 나타내고, N은 기준선에서 데이터에 따른 대상체의 수이다;
도 6은 프로토콜당 RSV 면역원성 집단에 대해 시간에 따라, ELISA에 의해 측정된 바와 같은 pre-F 단백질 RSV에 의한 항체 반응의 도표를 나타내며, 95% CI의 기하평균을 도면에 나타내고, N은 기준선에서 데이터에 따른 대상체의 수이다;
도 7은 프로토콜당 RSV 면역원성 집단에 대해 시간에 따라, ELISA에 의해 측정된 바와 같은 RSV post-F 단백질에 의한 항체 반응의 도표를 나타내며, 95% CI의 기하평균을 도면에 나타내고, N은 기준선에서 데이터에 따른 대상체의 수이다; 그리고
도 8은 프로토콜당 RSV 면역원성 집단에 대한 시간에 따른 IFN-γ ELISpot 분석에 의해 측정된 바와 같은 RSV-F 특이적 T 세포 반응의 박스 도표를 나타낸다.

다양한 간행물, 논문 및 특허가 배경기술에, 그리고 명세서 전체에 걸쳐 인용되거나 기재되며; 이들 참고문헌 각각은 그 전문이 본 명세서에 참고로 포함된다. 본 명세서에 포함된 문헌, 작용, 물질, 장치, 규약 등의 논의는 본 발명의 맥락을 제공하는 목적을 위한 것이다. 이러한 논의는 개시되거나 청구되는 임의의 발명에 대해 임의의 또는 모든 이들 대상이 선행 기술의 일부를 형성한다고 용인하는 것이 아니다.

달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에서 사용되는 모든 기술 및 과학 용어는 본 발명과 관련된 분야의 당업자가 통상적으로 이해하는 것과 동일한 의미를 갖는다. 그 외에는, 본 명세서에서 사용되는 특정 용어는 명세서에 제시되는 의미를 갖는다.

본 명세서에서 그리고 첨부된 청구범위에서 사용되는 단수 형태는 문맥상 명확히 달리 지시되지 않는 한 복수의 언급 대상을 포함한다는 것이 주목되어야 한다.

달리 기재되지 않는 한, 본 명세서에 기재되는 농도 또는 농도 범위와 같은 임의의 수치는 모든 경우에 "약"이라는 용어로 수식되는 것으로 이해될 것이다. 따라서, 수치는 전형적으로 열거된 값의 ±10%를 포함한다. 예를 들어, 1 ㎎/㎖의 농도는 0.9 ㎎/㎖ 내지 1.1 ㎎/㎖를 포함한다. 마찬가지로, 1% 내지 10%(w/v)의 농도 범위는 0.9%(w/v) 내지 11%(w/v)를 포함한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 수치 범위의 사용은 문맥상 명백히 달리 지시되지 않는 한, 이러한 범위 내의 정수 및 소수값을 포함하는, 그 범위 내의 모든 가능한 하위범위, 모든 개별 수치를 명확히 포함한다.

달리 나타내지 않으면, 구성요소 시리즈에 선행하는 용어 "적어도"는 그 시리즈 내의 모든 구성요소를 지칭하는 것으로 이해될 것이다. 당업자는 단지 일상적인 실험을 이용하여 본 명세서에 기재된 발명의 구체적 실시형태에 대한 많은 등가물을 인식하거나 확인할 수 있을 것이다. 이러한 등가물은 본 발명에 의해 포함되는 것으로 의도된다.

본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "포함하다(comprises)", "포함하는(comprising)", "포함하다(includes)", "포함하는(including)", "갖다", "갖는", "함유하다" 또는 "함유하는", 또는 이의 임의의 다른 변형은 언급된 정수 또는 정수들의 그룹을 포함하지만, 임의의 다른 정수 또는 정수들의 그룹을 배제하는 것을 의미하지는 않으며, 비-배타적이거나 개방형인 것으로 의도됨이 이해될 것이다. 예를 들어, 구성요소들의 목록을 포함하는 조성물, 혼합물, 공정, 방법, 물품, 또는 장치는 반드시 그 구성요소에만 한정될 필요는 없으며, 명백히 열거되지 않거나 그러한 조성물, 혼합물, 공정, 방법, 물품 또는 장치에 내재하는 것이 아닌 다른 구성요소를 포함할 수 있다. 또한, 명백히 반대로 기재되지 않는 한, "또는"은 포괄적인 또는을 지칭하며 배타적인 또는을 지칭하는 것이 아니다. 예를 들어, 조건 A 또는 B는 다음 중 어느 하나에 의해 충족된다: A는 참이고(또는 존재하고) B는 거짓임(또는 존재하지 않음), A는 거짓이고(또는 존재하지 않고) B는 참임(또는 존재함), 및 A 및 B 둘 다가 참임(또는 존재함).

바람직한 발명의 구성요소의 치수 또는 특성을 언급할 때 본 명세서에서 사용되는 용어 "약", "대략적으로", "일반적으로", "실질적으로" 등의 용어는 기술된 치수/특성이 엄격한 경계 또는 파라미터가 아니며 기능적으로 동일하거나 유사한 이로부터의 사소한 변화를 배제하는 것이 아님이 또한 이해되어야 하는데, 이는 당업자에 의해 이해되는 바와 같다. 최소한, 수치 파라미터를 포함하는 그러한 언급은, 본 기술분야에서 용인되는 수학적 및 공업적 원리(예를 들어, 반올림, 측정 오차 또는 기타 계통 오차, 제조 공차 등)를 이용할 경우 최하위 유효 숫자를 변화시키지 않는 변화를 포함한다.

본 발명은 (a) 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화한 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터를 포함하는, 유효량의 약제학적 조성물, 바람직하게는 백신, 및 (b) 유효량의 인플루엔자 백신을 대상체에게 근육내로 투여하는 단계를 포함하는, 보호 면역 반응이 필요한 인간 대상체에서 호흡기 세포융합 바이러스(RSV) 감염에 대한 보호 면역 반응과 인플루엔자 바이러스에 대한 보호에 대한 보호 면역 반응을 둘 다 유도하는 방법을 제공한다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "RSV 융합 단백질", "RSV F 단백질", "RSV 융합 폴리펩티드" 또는 "RSV F 폴리펩티드"는 호흡기 세포융합 바이러스(RSV)의 임의의 그룹, 하위그룹, 단리물, 유형 또는 균주의 융합(F) 단백질에 관한 것이다. RSV는 2가지 항원성 하위그룹인 A 및 B를 갖는 단일 혈청형으로서 존재한다. RSV F 단백질의 예는 RSV A로부터의 RSV F, 예를 들어, RSV A1 F 단백질 및 RSV A2 F 단백질, 및 RSV B로부터의 RSV F, 예를 들어, RSV B1 F 단백질 및 RSV B2 F 단백질을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "RSV F 단백질"은 돌연변이, 예를 들어, 전장 야생형 RSV F 단백질의 점 돌연변이, 단편, 삽입, 결실 및 스플라이스 변이체를 포함하는 단백질을 포함한다.

특정 실시형태에 따르면, 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드는 RSV A 균주로부터 유래된다. 특정 실시형태에서 RSV F 폴리펩티드는 RSV A2 균주로부터 유래된다. 본 발명에서 유용한 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드는 야생형 RSV F 단백질에 비해, 특히, 서열번호 1의 아미노산 서열을 갖는 RSV F 단백질에 비해 적어도 하나의 돌연변이를 갖는 RSV F 단백질이다. 특정 실시형태에 따르면, 본 발명에서 유용한 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드는 K66E, N67I, I76V, S215P, K394R, S398L, D486N, D489N 및 D489Y로 이루어진 군으로부터 선택된 적어도 하나의 돌연변이를 포함한다.

특정 실시형태에 따르면, 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드는 융합 전 특이적 단클론성 항체, 예를 들어, CR9501에 의해 인식되는 적어도 하나의 에피토프를 포함한다. CR9501은 융합 전 입체구조의 RSV F 단백질에 특이적으로 결합하고 융합 후 입체구조에는 특이적으로 결합하지 않는, WO2011/020079 및 WO2012/006596에서 58C5로서 지칭되는 항체의 결합 영역을 포함한다.

특정 실시형태에서, RSV F 폴리펩티드는 WO2014/174018 및 WO2014/202570에 기재된 바와 같이, 절단된 F1 도메인에 연결된 이종성 삼량체화 도메인을 추가로 포함한다. 본 명세서에서 사용된 바와 같은 "절단된" F1 도메인은 전장 F1 도메인이 아닌 F1 도메인을 지칭하되, 즉, N-말단 또는 C-말단에서 하나 이상의 아미노산 잔기가 결실된다. 특정 실시형태에 따르면, 적어도 막관통 도메인 및 세포질 꼬리는 결실되어 가용성 엑토도메인으로서의 발현이 허용된다. 특정 실시형태에서, 삼량체화 도메인은 서열번호 2를 포함하고, 직접적으로 또는 연결기를 통해, RSV F1 도메인의 아미노산 잔기 513에 연결된다. 특정 실시형태에서, 연결기는 아미노산 서열 SAIG를 포함한다(서열번호 3).

융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 단백질의 예는 WO2014/174018, WO2014/202570 및 WO 2017/174564에 기재된 것을 포함하지만, 이들로 제한되지 않으며, 이들의 내용은 본 명세서에 참조에 의해 원용된다.

특정 실시형태에 따르면, RSV F 단백질은 서열번호 4 또는 서열번호 5의 아미노산 서열, 또는 서열번호 4 또는 서열번호 5의 아미노산 서열에 대해 적어도 75%, 80%, 95%, 90% 또는 95% 동일한 아미노산 서열을 포함한다.

융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 단백질을 암호화하는 핵산의 예는 서열번호 6 및 서열번호 7을 포함한다. 유전자 코드의 축중(degeneracy)의 결과로 다수의 상이한 핵산 분자가 동일한 폴리펩티드를 암호화할 수 있다는 것이 당업자에 의해 이해된다. 당업자는 폴리펩티드가 발현될 임의의 특정한 숙주 유기체의 코돈사용빈도를 반영하기 위해 일상적인 기법을 이용하여 일상적인 법에 기재된 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화된 폴리펩티드 서열에 영향을 주지 않는 뉴클레오티드 치환을 생성할 수 있다는 것도 알고 있다. 따라서, 달리 명시되지 않는 한, "아미노산 서열을 암호화하는 핵산 분자"는 서로의 축중 형태이면서 동일한 아미노산 서열을 암호화하는 모든 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 단백질 및 RNA를 암호화하는 뉴클레오티드 서열은 인트론을 포함할 수 있다. 본 설명에서 서열은 당업계의 관례로서, 5'에서 3'의 방향으로 제공된다.

인플루엔자 바이러스는 인플루엔자 바이러스 유형인 A, B 및 C 속으로 분류된다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "인플루엔자 바이러스"는 임의의 인플루엔자 바이러스 A, B 또는 C형, 및 이의 임의의 하위유형을 지칭한다. 인플루엔자 A 바이러스 변이체는 혈구응집소(H)와 뉴라미다제(N) 바이러스 표면 단백질의 조합에 의해 하위유형으로 추가로 특성규명된다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 인간 인플루엔자 바이러스 균주 또는 단리물에 대한 명명법은 바이러스의 유형(속), 즉, A, B 또는 C 및 제1 단리의 지리학적 위치, 예를 들어, A/미시간, A/홍콩, B/브리즈번, B/푸켓 등을 포함한다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "백신"은 특정 병원균 또는 질환에 대하여 대상에서 특정한 정도의 면역성을 유도하는 데 효과적인 활성 성분을 포함하는 조성물을 말하는데, 이는 질환 또는 병원균에 의한 감염과 관련된 증상의 중증도, 지속기간 또는 다른 징후의 적어도 감소 및 완전한 부재까지를 야기할 것이다. 본 발명에서, 백신은 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스를 포함한다. 본 출원의 실시형태에 따르면, 백신은 입원으로 이어지는 중증의 하부 호흡기도 질환을 예방하고 대상체에서 RSV 감염 및 복제로 인한 폐렴 및 세기관지염과 같은 합병증의 빈도를 저하시키기 위해 사용될 수 있다. 특정 실시형태에서, 백신은, 예를 들어, RSV의 다른 단백질 및/또는 다른 감염성 작용제에 대한 보호 면역 반응을 유도하는 다른 성분을 더 포함하는 조합 백신일 수 있다. 추가 활성 성분의 투여는, 예를 들어, 별개의 투여에 의하거나 본 발명의 백신과 추가 활성 성분의 조합 제품을 투여하는 것에 의해 행해질 수 있다.

특정 실시형태에서, 인플루엔자 백신은 계절성 인플루엔자 백신이며, 이는 독감철에 계절성 발생 인플루엔자 바이러스에 대한 백신으로서 정의된다. 계절성 인플루엔자 백신의 예는 3가 A/H1N1-A/H3N2 B 백신을 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 특정 실시형태에서, 계절성 인플루엔자 백신은 임의의 상업적으로 입수 가능한 계절성 인플루엔자 백신일 수 있다. 상업적으로 입수 가능한 계절성 인플루엔자 백신의 예는, 예를 들어, 분할 백신 BEGRIVAC™(Wyath), FLUARIX™(GSK), FLUZONE™(Sanofi), 및 FLUSHIELD™(Jamieson); 서브유닛 백신 FLUVIRIN™(Seqirus), AGRIPPAL™(Novartis) 및 INFLUVAC™(Abbott), 및 생약독 인플루엔자 바이러스 백신 Flumist™(Medimmune Inc.)을 포함한다.

본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "보호 면역성" 또는 "보호 면역 반응"은 백신접종된 대상이 백신접종이 행해진 병원체의 감염을 제어할 수 있음을 의미한다. 보통, "보호 면역 반응"이 생긴 대상은 단지 경도 내지 중등도 임상 증상을 나타내거나 전혀 증상을 나타내지 않는다. 보통, 특정 제제에 대한 "보호 면역 반응" 또는 "보호 면역성"을 갖는 대상체는 제제에 의한 감염 결과로서 사망하지 않을 것이다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "유도하다" 및 이의 변형은 세포 활성에서의 임의의 측정 가능한 증가를 지칭한다. 보호 면역 반응의 유도는, 예를 들어, 면역 세포 집단의 활성화, 증식 또는 성숙, 사이토카인 생성의 증가, 및/또는 증가된 면역 기능의 다른 지표를 포함할 수 있다. 특정 실시형태에서, 면역 반응의 유도는 B 세포 증식의 증가, 항원-특이적 항체의 생성, 항원-특이적 T 세포 증식의 증가, 수지상 세포 항원 제시의 개선 및/또는 특정 사이토카인 발현의 증가, 케모카인 및 공자극 마커를 포함할 수 있다.

RSV F 단백질에 대한 그리고/또는 인플루엔자 바이러스에 대한 보호 면역 반응을 유도하는 능력은 당업계의 표준인 다양한 분석을 이용하여 시험관내 또는 생체내에서 평가될 수 있다. 면역 반응의 개시 및 활성화를 평가하는 데 이용 가능한 기법의 일반적 설명을 위해, 예를 들어, 문헌[Coligan et al. (1992 and 1994, Current Protocols in Immunology; ed. J Wiley & Sons Inc, National Institute of Health)]을 참조한다. 세포 면역의 측정은 당업계에 용이하게 공지된 방법에 의해, 예를 들어, CD4+ 및 CD8+ T-세포로부터 유래된 것을 포함하는 활성화된 효과기 세포에 의해 분비된 사이토카인 프로파일의 측정(예를 들어, ELISPOT에 의한 IL-4 또는 IFN 감마-생성 세포의 정량화)에 의해, PBMC 증식의 측정에 의해, NK 세포 활성의 측정에 의해, 면역 효과기 세포의 활성화 상태 결정화(예를 들어, 고전적 [3H] 티미딘 흡수에 의한 T-세포 증식 분석)에 의해, 민감화된 대상체에서의 항원-특이적 T 림프구에 대한 분석(예를 들어, 세포독성 분석에서의 펩티드-특이적 용해 등)에 의해 수행될 수 있다. 추가적으로, 내장, 폐 및 비강 조직에 대한 수송을 표시할 수 있는 국소 부위에 대한 귀소(homing) 마커를 갖는 IgG 및 IgA 항체 분비 세포는 국소 면역의 표시로서 면역화 후 다양한 시점에 혈액에서 측정될 수 있고, 비강 분비에서의 IgG 및 IgA 항체가 측정될 수 있으며; 항체의 Fc 기능, 및 PMN, 대식세포 및 NK 세포와 같은 세포와의 또는 보체 시스템과의 항체 상호작용의 측정이 특성규명될 수 있고; 단세포 RNA 서열분석을 사용하여 B 세포 및 T 세포 레퍼토리를 분석할 수 있다.

RSV F 단백질에 대한 그리고/또는 인플루엔자 바이러스에 대한 보호 면역 반응을 유도하는 능력은 조성물로 투여되는 RSV F 단백질(들)로 향하는 항체, 예를 들어, IgG 또는 IgM 항체, 예를 들어, RSV A2에 대한 바이러스 중화 항체(VNA A2), VNA RSV A Memphis 37b, RSV B, pre-F 항체, post-F 항체, RSV Ga 항체, RSV Gb 항체(예를 들어, 문헌[Harlow, 1989, Antibodies, Cold Spring Harbor Press] 참조), 또는, 예를 들어, 인플루엔자 바이러스 백신으로 투여되는 인플루엔자 바이러스 단백질(들)에 관한 IgG 또는 IgM 항체, 예를 들어, 적혈구 응집반응-저해(HI) 또는 마이크로중화(microneutralization: MN) 항체의 존재에 대해 대상체로부터의 생물학적 샘플(예를 들어, 비강 세척, 혈액, 혈장, 혈청, PBMC, 소변, 타액, 분변, 뇌척수액, 기관지 폐포 세척 또는 림프액)을 시험함으로써 결정될 수 있다. 예를 들어, 면역원을 제공하는 조성물 투여에 반응하여 생성된 항체의 역가는 보체 증강 또는 항체-의존적 세포의 식세포작용(ADCP) 분석 유무와 상관없이, 효소-결합 면역흡착 분석(ELISA), 다른 ELISA-기반 분석(예를 들어, MSD-Meso Scale Discovery), 도트 블롯, SDS-PAGE 겔, ELISPOT, Fc와 보체의 상호작용 측정, PMN, 대식세포 및 NK 세포에 의해 측정될 수 있다. 예시적인 방법은 실시예 1에 기재된다. 특정 실시형태에 따르면, 유도된 면역 반응은 RSV에 대한 중화 항체 및/또는 RSV에 대한 보호 면역을 특징으로 한다. 특정 실시형태에 따르면, 유도된 면역 반응은 인플루엔자 바이러스에 대한 중화 항체 및/또는 인플루엔자 바이러스에 대한 보호 면역을 특징으로 한다.

특정 실시형태에 따르면, 보호 면역 반응은, 바람직하게는 약제학적 조성물의 투여 후 검출 가능한 8 내지 35일, 예컨대, 약제학적 조성물의 투여 후 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34 또는 35일에 RSV에 대한 중화 항체 및/또는 RSV에 대한 보호 면역의 존재를 특징으로 한다. 더 바람직하게는, RSV에 대한 중화 항체는 면역원성 성분의 투여 후 약 6개월 내지 5년, 예컨대, 면역원성 성분의 투여 후 6개월, 1년, 2년, 3년, 4년 또는 5년에 검출된다.

특정 실시형태에 따르면, 보호 면역 반응은, 바람직하게는 약제학적 조성물의 투여 후 검출 가능한 8 내지 35일, 예컨대, 약제학적 조성물의 투여 후 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34 또는 35일에 인플루엔자 바이러스에 대한 중화 항체 및/또는 인플루엔자 바이러스에 대한 보호 면역의 존재를 특징으로 한다. 더 바람직하게는, 인플루엔자에 대한 중화 항체는 면역원성 성분의 투여 후 약 6개월 내지 5년, 예컨대, 면역원성 성분의 투여 후 6개월, 1년, 2년, 3년, 4년 또는 5년에 검출된다.

특정 실시형태에 따르면, (a)와 (b)의 공동 투여 시 RSV에 대해 유도된 보호 면역 반응은 (a) 단독의 투여 시 RSV에 대해 유도된 보호 면역 반응에 대한 비-열성(non-inferiority)을 특징으로 한다. 특정 실시형태에 따르면, (a)와 (b)의 공동 투여 시 인플루엔자 바이러스에 대해 유도된 보호 면역 반응은 (b) 단독의 투여 시 인플루엔자 바이러스에 대해 유도된 보호 면역 반응에 대한 비-열성을 특징으로 한다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 비-열성은 RSV-특이적 항체 또는 인플루엔자 바이러스-특이적 항체의 기하평균 역가(geometric mean titer: GMT)에 대해 마진(margin) 2를 이용하여 결정된다. 예시적인 방법은 실시예 1에 기재된다.

특정 실시형태에 따르면, 보호 면역 반응은 RSV에 노출 시 대상체에서의 RSV 임상 증상이 존재하지 않거나 감소된 것을 특징으로 한다. 특정 실시형태에 따르면, 보호 면역 반응은 인플루엔자 바이러스에 노출 시 대상체에서의 인플루엔자 바이러스 임상 증상이 존재하지 않거나 감소된 것을 특징으로 한다. RSV 및 인플루엔자 임상 증상은, 예를 들어, 상기도 증상(예를 들어, 콧물, 비한, 재채기, 인두통, 귓병을 포함함); 하기도 증상(예를 들어, 기침, 숨이참, 가슴 답답함, 천명, 객담을 포함함); 및 전신 증상(예를 들어, 권태, 두통, 근육 및/또는 관절통, 한기/발열)을 포함한다.

본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "이상반응"(AE)은 약제학적 제품을 투여한 환자에서의 임의의 뜻밖의 의학적 발생을 지칭하며, 이는 반드시 치료와 인과관계가 있는 것은 아니다. 본 발명의 실시형태에 따르며, AE는 다음의 정의를 이용하여 증가된 중증도의 4-점 척도로 등급화된다: 경증(1등급): 활동에 방해가 되지 않음; 중등증(2등급): 활동을 약간 방해하지만, 의학적 개입은 필요하지 않음; 중증(3등급): 일상 활동을 막으며, 의학적 개입이 필요함; 잠재적으로 생명을 위협(4등급): 기본적인 자기 관리 기능을 수행하는 것의 불능을 야기하는 증상 또는 영구적 손상, 지속적 장애를 예방하기 위해 지시된 의학적 또는 수술적 개입. "중증의 이상반응(severe adverse event)", "중증의 AE", "SAE"는 임의의 다음의 결과를 초래하는 임의의 용량에서 생기는 임의의 AE일 수 있다: 사망, 여기서 사망은 결과이며, 사건이 아님; 생명의 위협, 사건 당시 환자가 사망 위험에 있는 사건을 지칭함; 더 중증이었다면 사망을 야기할 수도 있었던 사건을 지칭하지는 않음; 입원 환자 입원 기간, 즉, 계획되지 않은, 야간 입원 또는 기존 입원의 연장; 정상적인 생활 기능을 수행하는 능력의 지속적인 또는 상당한 무능력 또는 실질적인 붕괴; 선천적 기형/선천적 결함; 환자를 위태롭게 할 수 있거나 또는 상기 열거한 다른 결과 중 하나를 예방하기 위한 의학적 또는 수술적 개입이 필요할 수 있는 (연구자가 생각한 바와 같은) 중요한 의학적 사건(예를 들어, 알레르기성 기관지경련 또는 혈액 질환 또는 입원을 야기하지 않는 경련에 대해 응급실 또는 가정에서의 집중 치료). 입원은 병원에 공식적으로 들어가는 것이다. 입원, 또는 입원기간의 연장은 AE가 심각하다는 기준을 구성하지만; 그러나, 그 자체가 SAE로 간주되지는 않는다. AE가 존재하지 않을 때, 입원, 또는 입원기간의 연장은 SAE로 간주되지 않는다. 이는 다음 상황의 경우일 수 있다: 프로토콜에 의해 필요한 절차에 입원, 또는 입원기간의 연장이 필요하거나; 또는 입원, 또는 입원기간의 연장이 센터에서 뒤따르는 일상적 절차(예를 들어, 수술 후 스텐트 제거)의 부분임. 연구 동안 악화되지 않은 이미 존재하는 병태의 선택 치료를 위한 입원은 AE로 간주되지 않는다. 입원 동안 발생되는 합병증은 AE이다. 합병증이 입원을 연장시키거나, 임의의 다른 SAE 기준을 충족시킨다면, 사건은 SAE이다.

본 명세서에서 사용되는 바와 같은 용어 "유효량"은 대상체에서 원하는 생물학적 또는 의학적 반응을 유발하는 활성 성분 또는 구성성분의 양을 지칭한다. 특정 유효 용량의 선택은 치료 또는 예방할 질환, 관련된 증상, 환자의 체질량, 환자의 면역 상태 및 당업자에게 공지된 기타 요인을 비롯한 여러 요인을 고려하여 당업자에 의해 결정될 수 있다(예를 들어, 임상 시험을 통해). 제형에서 사용될 정확한 용량은 투여 방식, 투여 경로, 표적 부위, 환자의 생리적 상태, 투여되는 다른 의약 및 질환의 중증도에 따라 다를 것이다. 예를 들어, 유효량의 약제학적 조성물은 또한 아쥬반트가 또한 투여되는지의 여부에 따라 다르며, 아쥬반트가 존재하지 않을 때 보다 높은 투약량이 필요하다.

본 출원의 실시형태에 따르면, 유효량의 약제학적 조성물은 중증의 이상반응을 유도하는 일 없이 RSV F 단백질에 대한 보호 면역 반응을 유도하는 데 충분한 약제학적 조성물의 양을 포함한다. 특정 실시형태에서, 유효량의 약제학적 조성물은 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터의 용량당 약 1×10¹⁰ 내지 약 1×10¹²개의 바이러스 입자, 바람직하게는 용량당 약 1×10¹¹개의 바이러스 입자를 포함한다.

본 출원의 실시형태에 따르면, 유효량의 약제학적 조성물은 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터의 용량당 약 1×10¹⁰ 내지 약 1×10¹²개의 바이러스 입자, 예컨대, 용량당 약 1×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 2×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 3×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 4×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 5×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 6×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 7×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 8×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 9×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 1×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 2×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 3×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 4×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 5×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 6×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 7×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 8×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 9×10¹¹개의 바이러스 입자 또는 용량당 약 1×10¹²개의 바이러스 입자를 포함한다. 바람직하게는, 재조합 RSV F 폴리펩티드는 서열번호 4 또는 서열번호 5의 아미노산 서열을 갖고, 아데노바이러스 벡터는 혈청형 26, 예컨대, 재조합체 Ad26을 가진다.

본 출원의 실시형태에 따르면, 유효량의 인플루엔자 바이러스 백신은 중증의 이상반응을 유도하는 일 없이 인플루엔자 바이러스 단백질에 대한 보호 면역 반응을 유도하는 데 충분한 인플루엔자 바이러스 백신의 양을 포함한다. 특정 실시형태에서, 유효량의 인플루엔자 바이러스 백신은 상업적으로 입수 가능한 계절성 인플루엔자 바이러스 백신의 1회 용량을 포함한다.

특정 실시형태에 따르면, 인간 대상체는 RSV 감염에 감수성이다. 특정 실시형태에서, RSV 감염에 감수성인 인간 대상체는 노인 대상체, 예를 들어, 50세 이상, 60세 이상, 바람직하게는 65세 이상의 인간 대상체; 젊은 인간 대상체, 예를 들어, 5세 이하, 1세 이하의 인간 대상체; 및/또는 입원한 인간 대상체 또는 항바이러스 화합물로 치료되었지만 부적절한 항바이러스 반응을 나타낸 인간 대상체를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.

특정 실시형태에 따르면, 인간 대상체는 인플루엔자 바이러스 감염에 감수성이다. 특정 실시형태에서, 인플루엔자 바이러스 감염에 감수성인 인간 대상체는 노인 대상체, 예를 들어, 50세 이상, 60세 이상, 바람직하게는 65세 이상의 인간 대상체; 젊은 인간 대상체, 예를 들어, 5세 이하, 1세 이하의 인간 대상체; 및/또는 입원한 인간 대상체 또는 항바이러스 화합물로 치료되었지만 부적절한 항바이러스 반응을 나타낸 인간 대상체를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 특정 실시형태에서, RSV 감염에 감수성인 인간 대상체는 만성 심장병, 만성 폐질환 및/또는 면역결핍증을 갖는 인간 대상체를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다.

특정 실시형태에 따르면, 치료가 필요한 인간 대상체는 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산 분자를 포함하는 아데노바이러스를 포함하는 약제학적 조성물 및 인플루엔자 백신이 투여된다.

특정 실시형태에서, 아데노바이러스는 인간 재조합 아데노바이러스이고, 재조합 아데노바이러스 벡터로도 지칭된다. 재조합 아데노바이러스 벡터의 제조는 당업계에 잘 공지되어 있다. 본 명세서에서 사용되는 바와 같은 아데노바이러스에 대한 '재조합'이라는 용어는 아데노바이러스가 인간의 손에 의해 변형되었고, 예컨대, 아데노바이러스가 그 안에 활발하게 클로닝된 변경된 말단부를 갖고/갖거나 이종성 유전자를 포함하고, 즉, 자연 발생적인 야생형 아데노바이러스가 아님을 내포한다.

특정 실시형태에서, 본 발명에 따른 아데노바이러스 벡터는 바이러스 복제에 요구되는 아데노바이러스 게놈의 El 영역, 예컨대, Ela 영역 및/또는 Elb 영역의 적어도 하나의 필수적인 유전자 기능이 결핍되어 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명에 따른 아데노바이러스 벡터는 필수적이지 않은 E3 영역의 적어도 일부가 결핍되어 있다. 특정 실시형태에서, 벡터는 El 영역의 적어도 하나의 필수 유전자 기능 및 필수적이지 않은 E3 영역의 적어도 일부가 결핍되어 있다. 아데노바이러스 벡터는 "다중적으로 결핍"될 수 있는데, 이는 아데노바이러스 벡터가 아데노바이러스 게놈의 둘 이상의 영역들 각각에서 하나 이상의 필수적인 유전자 기능이 결핍되어 있음을 의미한다. 예를 들어, 상기 El-결핍된 또는 E1-, E3-결핍된 아데노바이러스 벡터는 E4 영역의 적어도 하나의 필수적인 유전자 및/또는 E2 영역(예를 들어, E2A 영역 및/또는 E2B 영역)의 적어도 하나의 필수적인 유전자가 더 결핍되어 있을 수 있다.

아데노바이러스 벡터, 이의 작제 방법 및 이의 증식 방법은 당업계에 잘 공지되어 있고, 예를 들어, 미국 특허 제5,559,099호, 제5,837,511호, 제5,846,782호, 5,851,806호, 제5,994,106호, 제5,994,128호, 제5,965,541호, 제5,981,225호, 제6,040,174호, 6,020,191호, 및 제6,113,913호, 및 문헌[Thomas Shenk, "Adenoviridae and their Replication", M. S. Horwitz, "Adenoviruses", 각각 67 및 68장, Virology, B. N. Fields et al., eds., 3d ed., Raven Press, Ltd., New York (1996)], 및 본 명세서에 언급된 다른 참고문헌에 기재되어 있다. 전형적으로, 아데노바이러스 벡터의 작제는 표준 분자 생물학 기법, 예컨대 문헌[ambrook et al., Molecular Cloning, a Laboratory Manual, 2d ed., Cold Spring Harbor Press, Cold Spring Harbor, N.Y. (1989)], 문헌[Watson et al., Recombinant DNA, 2d ed., Scientific American Books (1992)], 및 문헌[Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Wiley Interscience Publishers, NY (1995)], 및 본 명세서에 언급된 다른 참고문헌에 기재된 것의 사용을 포함한다.

특정 실시형태에서, 아데노바이러스는 혈청형 26 또는 35의 인간 아데노바이러스이다.

rAd26 벡터의 제조는, 예를 들어, WO 2007/104792 및 문헌[Abbink et al., Virol. 2007:81(9): 4654-63]에 기재되어 있다. Ad26의 예시적인 게놈 서열은 젠뱅크 수탁 번호 EF 153474 및 국제 공개 제2007/104792호의 서열번호 l에서 발견된다. rAd35 벡터의 제조는, 예를 들어, 미국 특허 제7,270,811호, WO 00/70071, 및 문헌[Vogels et al, J Virol. 2003:77(15): 8263-71]에 기재되어 있다. Ad35의 예시적 게놈 서열은 젠뱅크 수탁번호 AC 000019 및 WO 00/70071호의 도 6에서 발견된다.

본 발명에 따른 재조합 아데노바이러스는 복제-적격성(replication-competent) 또는 복제-결함성(replication-deficient)일 수 있다. 특정 실시형태에서 아데노바이러스는, 예를 들어, 게놈의 El 영역에서의 결실을 포함하기 때문에, 복제 결함성이다. 당업자에게 알려진 바와 같이, 아데노바이러스 게놈으로부터의 필수 영역의 결실의 경우, 이들 영역에 의해 암호화되는 기능은 바람직하게는 생산자 세포에 의해 도중에 제공되어야 하며, 즉, El, E2 및/또는 E4 영역의 일부 또는 전체가 아데노바이러스로부터 결실될 때, 이들은 생산자 세포에 존재해야 하거나, 예를 들어, 이의 게놈에 통합되어야 하거나, 또는 소위 헬퍼 아데노바이러스 또는 헬퍼 플라스미드의 형태로 존재하여야 한다. 아데노바이러스는 또한 복제에 불필요한 E3 영역에서의 결실을 가질 수 있고, 따라서 이러한 결실은 보완될 필요가 없다.

특정 실시형태에서, 아데노바이러스는 복제-불능 아데노바이러스이다. 특정 실시형태에 따르면, 아데노바이러스는 복제-불능 Ad26 아데노바이러스이다. 특정 실시형태에 따르면, 아데노바이러스는 복제-불능 Ad35 아데노바이러스이다.

이용될 수 있는 생산자 세포(때때로 본 기술분야 및 본 명세서에서 '패키징 세포(packaging cell)' 또는 '보완성 세포' 또는 '숙주 세포'로도 지칭됨)는 원하는 아데노바이러스가 증식될 수 있는 임의의 생산자 세포일 수 있다. 예를 들어, 재조합 아데노바이러스 벡터의 증식은 아데노바이러스의 결함을 보완하는 생산자 세포에서 행해진다. 이러한 생산자 세포는 바람직하게는 이들의 게놈에 적어도 아데노바이러스 El 서열을 가지며, 이에 의해 El 영역에서 결실을 갖는 재조합 아데노바이러스를 보완할 수 있다. El에 의하여 불멸화된 인간 망막 세포, 예컨대, 911 또는 PER.C6 세포(미국 특허 번호 제5,994,128호 참조), El-형질전환된 양막세포들(유럽 특허 번호 제1230354호 참조), El-형질전환된 A549 세포(예컨대, WO 98/39411, 미국 특허 번호 제5,891,690호 참조), GH329:HeLa(Gao et al., Human Gene Therapy 2000:11 : 213-219), 293 등과 같은 임의의 El-보완성 생산자 세포가 이용될 수 있다. 특정 실시형태에서, 생산자 세포는, 예를 들어, HEK293 세포, 또는 PER.C6 세포, 또는 911 세포, 또는 IT293SF 세포 등이다.

Ad35(하위그룹 B) 또는 Ad26(하위그룹 D)과 같은 비-하위그룹 C El-결핍 아데노바이러스의 경우, 이들 비-하위그룹 C 아데노바이러스의 E4-orf6 암호화 서열을 Ad5와 같은 하위그룹 C의 아데노바이러스의 E4-orf6으로 교환하는 것이 바람직하다. 이것은 Ad5의 El 유전자를 발현하는 잘 알려진 보완 세포주, 예를 들어, 293 세포 또는 PER.C6 세포에서의 그러한 아데노바이러스의 증식을 허용한다(예를 들어, 본 명세서에 전문이 참조에 의해 원용되는 문헌[Havenga et al., J. Gen. Virol. 2006:87: 2135-2143], WO 03/104467 참조). 특정 실시형태에서, 이용될 수 있는 아데노바이러스는 RSV F 단백질 항원을 암호화하는 핵산이 클로닝된 El 영역에 결실이 있고 Ad5의 E4 orf6 영역이 있는 혈청형 35의 인간 아데노바이러스이다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 백신 조성물의 아데노바이러스는 RSV F 단백질 항원을 암호화하는 핵산이 클로닝된 El 영역에 결실이 있고, Ad5의 E4 orf6 영역이 있는, 혈청형 26의 인간 아데노바이러스이다.

대안적인 실시형태에 있어서, 아데노바이러스 벡터 내에서 이종 E4orf6 영역(예컨대, Ad5)의 위치를 지정할 필요는 없지만, 대신에, El-결핍 비-하위그룹 C 벡터는 El 및 양립가능한 E4orf6 양쪽 모두를 발현시키는 세포주, 예컨대, Ad5로부터 El 및 E4orf6 양쪽 모두를 발현시키는 293-ORF6 세포주에서 증식된다(예를 들어, 293-ORF6 세포의 생성을 기재하는 문헌[Brough et al, J Virol. 1996:70: 6497-501]; 이러한 세포주를 이용하여 El 결실 비하위그룹 C 아데노바이러스 벡터의 생성을 각각 기재하고 있는 문헌[Abrahamsen et al, J Virol. 1997:71 : 8946-51] 및 문헌[Nan et al, Gene Therapy 2003:10: 326-36] 참조).

대안적으로, 증식 대상이 되는 혈청형으로부터 El을 발현시키는 보완성 세포가 이용될 수 있다(예를 들어, WO 00/70071, WO 02/40665 참조).

El 영역에서의 결실을 갖는 Ad35와 같은 하위그룹 B 아데노바이러스에 있어서, 아데노바이러스에서 E1B 55K 오픈 리딩 프레임(open reading frame)의 3' 말단, 예를 들어, pIX 오픈 리딩 프레임의 바로 상류의 166 bp 또는 이를 포함하는 단편, 예컨대 pIX 개시 코돈(Ad35 게놈에서 5' 말단에 Bsu36l 제한효소 부위에 의해 표시됨)의 바로 상류의 243 bp 단편을 보유하는 것이 바람직한데, 이는 pIX 유전자의 프로모터가 부분적으로 이 영역 내에 있음으로 인해 아데노바이러스의 안정성을 증가시키기 때문이다(예를 들어, 문헌[Havenga et al, 2006, J. Gen. Virol. 87: 2135-2143]; WO 2004/001032 참조).

재조합 아데노바이러스는 아데노바이러스로 감염된 숙주 세포의 세포 배양물을 수반하는 잘 공지된 방법에 따라, 숙주 세포 내에서 제조되고 증식될 수 있다. 세포 배양물은, 유착성 세포 배양물, 예를 들어, 배양 용기의 표면 또는 마이크로캐리어에 부착된 세포뿐만 아니라 현탁 배양물을 포함하는 임의 유형의 세포 배양물일 수 있다.

특정 실시형태에 따르면, 본 발명에 유용한 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 추가로 포함한다. 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "약제학적으로 허용 가능한"은 담체 또는 부형제가 이용되는 투여량 및 농도에서 이들이 투여되는 대상체에게 원하지 않거나 유해한 효과를 전혀 야기하지 않을 것임을 의미한다. 이러한 약제학적으로 허용되는 담체 및 부형제는 당업계에 널리 공지되어 있다(문헌[Remington's Pharmaceutical Science (15th ed.), Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1980]). 약제학적 조성물의 바람직한 제형은 의도된 투여 방식 및 치료 적용분야에 따라 다르다. 조성물은 약제학적 조성물을 동물 또는 인간 투여용으로 제형화하기 위해 통상적으로 사용되는 비히클로서 정의되는 약제학적으로-허용 가능한, 비독성의 담체 또는 희석제를 포함할 수 있다. 희석제는 조합물의 생물학적 활성에 영향을 미치지 않도록 선택된다. 이러한 희석제의 예는 증류수, 생리적 인산염-완충 식염수, 링거액, 덱스트로스 용액 및 행크스 용액이다. 또한, 약제학적 조성물 또는 제형은 또한 다른 담체, 아쥬반트 또는 비-독성, 비-치료적, 비-면역원성 안정제 등을 포함할 수 있다. 담체, 부형제 또는 희석제의 특징은 특정 적용을 위한 투여 경로에 따라 다를 것임이 이해될 것이다.

일부 실시형태에서, 약제학적으로 허용 가능한 담체는 한 가지 이상의 염, 예컨대, 염화나트륨, 염화칼륨, 염화마그네슘, 한 가지 이상의 아미노산, 예컨대, 아르기닌, 글리신, 히스티딘 및/또는 메티오닌, 한 가지 이상의 탄수화물, 예컨대, 락토스, 말토스, 수크로스, 한 가지 이상의 계면활성제, 예컨대, 폴리소르베이트 20, 폴리소르베이트 80, 한 가지 이상의 킬레이트제, 예컨대, 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA), 및 에틸렌디아민-N,N'-디석신산(EDDS), 및 한 가지 이상의 알코올, 예컨대, 에탄올 및 메탄올을 포함한다. 바람직하게는, 약제학적 조성물은 5 내지 8의 pH, 예컨대, 5.0, 5.1, 5.2, 5.3, 5.4, 5.5, 5.6, 5.7, 5.8, 5.9, 6.0, 6.1, 6.2, 6.3, 6.4, 6.5, 6.6, 6.7, 6.8, 6.9, 7.0, 7.1, 7.2, 7.3, 7.4, 7.5, 7.6, 7.7, 7.8, 7.9, 8.0, 또는 이 사이의 임의의 값의 pH를 가진다.

일부 실시형태에서, 본 발명에서 사용하기 위한 약제학적 조성물은 염화나트륨, 염화칼륨 및/또는 염화마그네슘을 1 mM 내지 100 mM, 25 mM 내지 100 mM, 50 mM 내지 100 mM, 또는 75 mM 내지 100 mM의 농도로 포함한다. 예를 들어, 염화나트륨, 염화칼륨, 및/또는 염화마그네슘의 농도는 1 mM, 5 mM, 10 mM, 15 mM, 20 mM, 25 mM, 30 mM, 35 mM, 40 mM, 45 mM, 50 mM, 55 mM, 60 mM, 65 mM, 70 mM, 75 mM, 80 mM, 85 mM, 90 mM, 95 mM, 100 mM, 또는 그 사이의 임의의 농도일 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 발명에서 사용하기 위한 약제학적 조성물은 히스티딘, 아르기닌, 및/또는 글리신을 1 mM 내지 50 mM, 5 mM 내지 50 mM, 5 mM 내지 30 mM, 5 mM 내지 20 mM 또는 10 mM 내지 20 mM의 농도로 포함한다. 예를 들어, 히스티딘, 아르기닌 및/또는 글리신의 농도는 1 mM, 2 mM 3 mM, 4 mM, 5 mM, 6 mM, 7 mM, 8 mM, 9 mM, 10 mM, 11 mM, 12 mM, 13 mM, 14 mM, 15 mM, 16 mM, 17 mM, 18 mM, 19 mM, 20 mM, 21 mM, 22 mM, 23 mM, 24 mM, 25 mM, 26 mM, 27 mM, 28 mM, 29 mM, 30 mM, 31 mM, 32 mM, 33 mM, 34 mM, 35 mM, 36 mM, 37 mM, 38 mM, 39 mM, 40 mM, 41 mM, 42 mM, 43 mM, 44 mM, 45 mM, 46 mM, 47 mM, 48 mM, 49 mM 또는 50 mM, 또는 그 사이의 임의의 농도일 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 발명에서 사용하기 위한 약제학적 조성물은 수크로스, 락토스 및/또는 말토스를 1% 내지 10% 중량/용적(w/v) 또는 5% 내지 10%(w/v)의 농도로 포함한다. 예를 들어, 수크로스, 락토스 및/또는 말토스의 농도는 1%(w/v), 1.5%(w/v), 2%(w/v), 2.5%(w/v), 3%(w/v), 3.5%(w/v), 4%(w/v), 4.5%(w/v), 5%(w/v), 5.5%(w/v), 6%(w/v), 6.5%(w/v), 7%(w/v), 7.5%(w/v), 8%(w/v), 8.5%(w/v), 9%(w/v), 9.5%(w/v) 또는 10%(w/v) 또는 그 사이의 임의의 농도일 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 발명에서 사용하기 위한 약제학적 조성물은 폴리소르베이트 20(PS20) 및/또는 폴리소르베이트 80(PS80)을 0.01%(w/v) 내지 0.1%(w/v), 0.01%(w/v) 내지 0.08%(w/v), 또는 0.02%(w/v) 내지 0.05%(w/v)의 농도로 포함한다. 예를 들어, 폴리소르베이트 20 및/또는 폴리소르베이트 80의 농도는 0.01%, 0.02%, 0.03%, 0.04%, 0.05%, 0.06%, 0.07%, 0.08%, 0.09% 또는 0.1%(w/v), 또는 그 사이의 임의의 농도일 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 발명에서 사용하기 위한 약제학적 조성물은 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA) 및/또는 에틸렌디아민-N,N'-디석신산(EDDS)을 0.1 mM 내지 5 mM, 0.1 mM 내지 2.5 mM, 또는 0.1 내지 1 mM의 농도로 포함한다. 예를 들어, EDTA 및/또는 EDDS의 농도는 0.1 mM, 0.2 mM, 0.3 mM, 0.4 mM, 0.5 mM, 0.6 mM, 0.7 mM, 0.8 mM, 0.9 mM, 1 mM, 1.5 mM, 2 mM, 2.5 mM, 3 mM, 3.5 mM, 4 mM, 4.5 mM, 또는 5 mM, 또는 그 사이의 임의의 농도일 수 있다.

일부 실시형태에서, 본 발명에서 사용하기 위한 약제학적 조성물은 에탄올 및/또는 메탄올을 0.1% 내지 5% 중량/용적(w/v) 또는 0.5% 내지 5%(w/v)의 농도로 포함한다. 예를 들어, 에탄올 및/또는 메탄올의 농도는 0.1%(w/v), 0.2%(w/v), 0.3%(w/v), 0.4%(w/v), 0.5%(w/v), 0.6%(w/v), 0.7%(w/v), 0.8%(w/v), 0.9%(w/v), 1%(w/v), 1.5%(w/v), 2%(w/v), 2.5%(w/v), 3%(w/v), 3.5%(w/v), 4%(w/v), 4.5%(w/v) 또는 5%(w/v), 또는 그 사이의 임의의 농도일 수 있다.

본 발명에서 사용하기 위한 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산 분자를 포함하는 아데노바이러스를 포함하는 약제학적 조성물은 본 개시내용을 고려해서 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해 제조될 수 있다. 예를 들어, 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산 분자를 포함하는 아데노바이러스는 1종 이상의 약제학적으로 허용 가능한 담체와 혼합되어 용액을 얻을 수 있다. 용액은 대상체에게 투여될 때까지 적절한 바이알에서 -55℃ ± 10℃ 내지 -85℃ ± 10℃ 범위의 제어된 온도에서 냉동 액체로서 저장될 수 있다.

특정 실시형태에서, 본 발명에 따른 약제학적 조성물은 1종 이상의 아쥬반트를 추가로 포함한다. 아쥬반트는 적용되는 항원 결정소(antigenic determinant)에 대한 면역 반응을 더욱 증가시키는 것으로 당업계에 공지되어 있다. 용어 "아쥬반트" 및 "면역 자극제"는 본 명세서에서 상호 호환가능하게 사용되고, 면역계의 자극을 야기하는 한 가지 이상의 물질로서 정의된다. 이와 관련하여, 아쥬반트는 본 발명의 약제학적 조성물의 RSV F 폴리펩티드에 대한 보호 면역 반응을 향상시키는 데 사용된다. 적합한 아쥬반트의 예는 수산화알루미늄 및/또는 인산알루미늄과 같은 알루미늄 염; MF59와 같은 스쿠알렌-물 에멀션을 포함하는 오일-에멀션 조성물(또는 수중유 조성물)(예를 들어, WO 90/14837 참조); 예를 들어, QS21 및 면역자극 복합체(ISCOMS)와 같은 사포닌 제형(예를 들어, 미국 특허 제5,057,540호; WO 90/03184, WO 96/11711, WO 2004/004762, WO 2005/002620 참조); 박테리아 또는 미생물 유도체(이의 예로는 모노포스포릴 지질 A(MPL), 3-O-탈아실화 MPL(3dMPL), CpG-모티프 함유 올리고뉴클레오티드, ADP-리보실화 박테리아 독소 또는 이의 돌연변이체, 예를 들어, 대장균(E. coli) 열 불안정 장독소 LT, 콜레라 독소 CT 등이 있음); 진핵 단백질(예를 들어, 항체 또는 이의 단편(예를 들어, 항원 자체 또는 CD1a, CD3, CD7, CD80에 대하여 유도됨) 및 수용 세포와의 상호작용시 면역 반응을 자극하는 수용체에 대한 리간드(예를 들어, CD40L, GMCSF, GCSF 등)를 포함한다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 약제학적 조성물은 아쥬반트로서 알루미늄을, 예를 들어, 수산화알루미늄, 인산알루미늄, 인산알루미늄칼륨, 또는 이의 조합물의 형태로, 용량당 0.05 내지 5 ㎎, 예를 들어, 0.075 내지 1.0 ㎎의 알루미늄 함량의 농도로 포함한다.

특정 실시형태에 따르면, 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터를 포함하는 약제학적 조성물은 인플루엔자 백신, 예컨대, 계절성 인플루엔자 백신과 병용하여 사용된다. 바람직하게는, 약제학적 조성물과 인플루엔자 백신은 공동 투여된다.

본 명세서에서 사용되는 바와 같이, 대상체에게 2가지 이상의 요법 투여와 관련하여, "병용하여"라는 용어는 1가지 초과의 요법의 사용을 지칭한다. "병용하여"라는 용어의 사용은 요법을 대상체에게 투여하는 순서를 제한하지 않는다. 예를 들어, 제1 요법(예를 들어, 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물)은 대상체에 제2 요법의 투여 전에 (예를 들어, 1분, 2분, 3분, 4분, 5분, 10분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 16시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주 또는 12주 전에), 투여와 동시에, 또는 투여에 후속하여(예를 들어, 1분, 2분, 3분, 4분, 5분, 10분, 15분, 30분, 45분, 1시간, 2시간, 4시간, 6시간, 12시간, 16시간, 24시간, 48시간, 72시간, 96시간, 1주, 2주, 3주, 4주, 5주, 6주, 8주, 또는 12주 후에) 투여될 수 있다.

대상체에 2가지 이상의 요법의 투여와 관련하여 본 명세서에 사용된 바와 같은 용어 "공동 투여되는"은 2가지 이상의 요법을 병용하여 사용하는 것을 지칭하며, 2가지 이상의 요법은 24시간의 기간 이내에 대상체에게 투여된다. 특정 실시형태에서, "공동 투여되는" 요법은 사전 혼합되고, 동시에 함께 대상체에게 투여된다. 다른 실시형태에서, "공동 투여되는" 요법은 24시간 이내에, 예컨대, 12시간, 10시간, 8시간, 6시간, 4시간, 2시간, 1시간 또는 더 적은 시간 이내에 별개의 조성물로 대상체에게 투여된다. 바람직하게는, "공동 투여되는" 요법은 60분 이내에, 예컨대, 30분, 20분, 10분, 5분 또는 더 적은 시간 이내에 별개의 조성물로 대상체에 투여된다. "공동 투여되는" 요법은 동시에 별개의 조성물로 대상체에게 투여된다.

투여 시기는 1일에 1회 내지 1년에 1회, 10년에 1회로 상당히 다를 수 있다. 전형적인 요법은 면역화 다음에 시간 간격, 예컨대, 1 내지 24주 간격을 둔 부스터 주사로 이루어진다. 다른 요법은 면역화 다음에 1, 2, 4, 6, 8, 10 및 12개월 이후 부스터 주사로 이루어진다. 다른 요법은 생애 동안 2개월마다 주사를 수반한다. 다른 요법은 매년 또는 2, 3, 4 또는 5년마다 주사를 수반한다. 대안적으로, 부스터 주사는 면역 반응의 모니터링에 의해 나타나는 바와 같이 불규칙적일 수 있다.

프라이밍 및 부스팅 투여를 위한 요법이 투여 후 측정된 면역 반응에 기반하여 조절될 수 있다는 것은 당업자에 의해 용이하게 인식된다. 예를 들어, 부스팅 조성물을 일반적으로 프라이밍 조성물의 투여 후 몇 주 또는 몇 개월에, 예를 들어, 프라이밍 조성물의 투여 후 약 1주 또는 2 내지 3주 또는 4주, 또는 8주, 또는 16주, 또는 20주, 또는 24주, 또는 28주, 또는 32주, 또는 36주, 또는 40주, 또는 44주, 또는 48주, 또는 52주, 또는 56주, 또는 60주, 또는 64주, 또는 68주, 또는 72주, 또는 76주, 또는 1 내지 2년에 투여된다.

특정 양상에 따르면, 한 가지 이상의 부스팅 면역화가 투여될 수 있다. 각 프라이밍 및 부스팅 조성물에서 항원은, 다수의 부스팅 조성물이 사용되더라도 동일할 필요는 없지만, 항원 결정소를 공유하여야 하거나 서로 실질적으로 유사하여야 한다.

본 발명의 약제학적 조성물은 본 개시내용을 고려하여 당업계에 공지된 방법에 따라 제형화될 수 있다.

약제학적 조성물은 예방적 및/또는 치료적 치료를 위한 적합한 수단에 의해 투여될 수 있다. 비-제한적 실시형태는 비경구 투여, 예를 들어, 피부내, 근육내, 피하, 경피, 또는 점막 투여, 예를 들어, 비강내 투여, 경구 투여 등을 포함한다. 일 실시형태에서 조성물은 근육내 주사에 의해 투여된다. 당업자는 약제학적 조성물에서 항원(들)에 대한 면역 반응을 유도하기 위해 약제학적 조성물을 투여하기 위한 다양한 가능성을 알고 있다. 특정 실시형태에서, 본 발명의 조성물은 근육내로 투여된다.

본 발명은 또한 백신접종이 필요한 인간 대상체에서 중증의 이상반응을 유도하는 일 없이 RSV 감염과 인플루엔자 바이러스 감염 둘 다에 대해 대상체를 백신접종하는 방법을 제공한다. 특정 실시형태에서, 상기 방법은 (a) 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터를 포함하는, 유효량의 약제학적 조성물, 바람직하게는 백신, 및 (b) 유효량의 인플루엔자 백신을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.

본 출원의 실시형태에 따르면, 유효량의 약제학적 조성물은 중증의 이상반응을 유도하는 일 없이 RSV 감염에 대해 대상체를 백신접종하는 데 충분한 약제학적 조성물의 양을 포함한다. 특정 실시형태에서, 유효량의 약제학적 조성물은 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터의, 용량당 약 1×10¹⁰ 내지 약 1×10¹²개의 바이러스 입자, 바람직하게는 용량당 약 1×10¹¹개의 바이러스 입자를 포함한다.

본 출원의 실시형태에 따르면, 유효량의 약제학적 조성물은 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터의, 용량당 약 1×10¹⁰ 내지 약 1×10¹²개의 바이러스 입자, 예컨대, 용량당 약 1×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 2×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 3×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 4×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 5×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 6×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 7×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 8×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 9×10¹⁰개의 바이러스 입자, 용량당 약 1×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 2×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 3×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 4×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 5×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 6×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 7×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 8×10¹¹개의 바이러스 입자, 용량당 약 9×10¹¹개의 바이러스 입자 또는 용량당 약 1×10¹²개의 바이러스 입자를 포함한다. 바람직하게는, 재조합 RSV F 폴리펩티드는 서열번호 4 또는 서열번호 5의 아미노산 서열을 갖고, 아데노바이러스 벡터는 혈청형 26, 예컨대, 재조합체 Ad26을 가진다.

실시예

본 발명의 하기 실시예는 본 발명의 성질을 추가로 예시하기 위한 것이다. 하기 실시예는 본 발명을 제한하는 것이 아니며, 본 발명의 범주는 첨부된 청구범위에 의해 결정됨이 이해되어야 한다.

실시예 1: 2a상 인간 연구

60세 이상의 건강한 성인에서 공동 투여 유무와 상관없이, 계절성 인플루엔자 백신 및 RSV A2 균주의 융합 전 입체구조-안정화된 F 단백질(pre-F)를 암호화하는 DNA 이식유전자를 포함하는 복제-불능 Ad26인 Ad26.RSV.preF의 안전성 및 면역원성을 평가하기 위해 2a상, 무작위화, 이중맹검, 위약-통제 연구를 수행하였다.

연구 설계/개요 -

2개 그룹 중 하나에 대해 1:1 비로 동시에 무작위화한 안정한 건강 상태의 대략 180명의 60세 이상의 성인 남성 및 여성 대상체에서 단일 기관, 무작위화, 위약-통제, 이중 맹검 2a상 연구를 수행하였다:

- 그룹 1(공동 투여("CoAd"))은 제1일에 상업적으로 입수 가능한 계절성 인플루엔자 백신(fluarix)과 동시에 투여된 1×10¹¹개 바이러스 입자(vp)의 Ad26.RSV.preF, 및 제29일에 위약을 받았다.

- 그룹 2(대조군)는 제1일에 위약을 받았고, 제29일에 상업적으로 입수 가능한 계절성 인플루엔자 백신(fluarix) 및 1×10¹¹개의 vp Ad26.RSV.preF를 동시에 투여받았다.

모든 연구 백신을 근육내로 제공하고, 연구 설계 및 그룹의 개략적 개요를 이하의 표 1에 도시한다:

백신접종 스케줄/연구 지속기간: 연구 지속기간은 참가자당 약 30주였고, 연구는 제1일 및 제29일의 백신접종, 이어서, 각 백신접종 후 28일의 추적 관찰 기간, 및 제2 백신접종 후 6개월까지의 추적 관찰로 이루어졌다. 요청된(solicited) 이상반응(AE)은 각 백신접종 후 7일에 기록하였다. 요청되지 않은 AE을 각 백신접종 후 제28일까지 동의서로부터 수집하고, 연구 내내 SAE를 평가하였다. 제1일, 제29일 및 제57일에 면역 반응을 평가하였다.

1차 효능 종점: 연구의 1차 목적은 (1) GMT 비(대조군/공동투여군)에 대해 비-열성 마진 2를 이용하여, 인플루엔자 백신 투여 후 제28일에 모두 4가지 인플루엔자 백신 균주에 대한 적혈구 응집반응 저해(HI) 항체의 기하평균 역가(GMT)로 표현한 체액성 면역 반응에 관해 Ad26.RSV.preF와 계절성 인플루엔자 백신의 공동 투여 대 계절성 인플루엔자 백신 단독의 투여의 비-열성을 평가하는 것, 및 (2) 계절성 인플루엔자 백신과 별도로 또는 동시에 60세 이상의 대상체에게 근육내로 투여되는 1×10¹¹ vp Ad26.RSV.preF의 단일 용량의 안전성 및 내약성을 평가하는 것이었다.

통계학적 방법: 제28일 역가를 종속변수로 하고 요법을 공변량으로 하는 일원분산분석(ANOVA) 모델을 이용하여, 대조군(그룹 2)과 CoAd(그룹 1) 그룹 간의 4가지 계절성 인플루엔자 백신 각각에 대한 log-변환 HI 항체 역가의 차이에 대해 95% 단측 신뢰 상한을 계산함으로써 1차 면역원성 목적을 평가하였다. Welch-Satterthwaite t-간격 방법을 이용하여 신뢰한계를 계산하여 요법당 개별 분산 추정을 가능하게 하였다. 신뢰한계는 (지수화에 의해) GMT 비로 다시 변환하고, 비-열성 한계 2와 비교하였다.

결과-

총 180명의 대상체를 무작위화하고, 그룹당 90명의 대상체를 백신접종하였다. CoAd 그룹(그룹 1)의 2명의 대상체는 제2 용량을 받기 전에 연구를 중단하였다(이유: 추가 연구 치료를 거부함(1명의 대상체), 및 AE(귀 감염)(1명의 대상체)로 인해 중단함). 또한, 2명 이상의 대상체(각 그룹에서 1명)는 용량을 둘 다 받은 후에 연구를 중단하였다(이유: 후속조치를 놓침).

제57일(즉, 제2 용량 후 28일)에 모든 대상체가 안전성 및 면역원성 평가를 완료한 후에 1차 분석을 수행하였다. 제57일까지의 모든 데이터를 분석에 포함시켰다.

1. 1차 면역원성 분석:

면역원성 분석은 프로토콜당 인플루엔자 면역원성(PPII) 집단에 기반하였고, 이는 면역원성 결과에 영향을 미칠 것으로 예상되는 주요 프로토콜 편차가 있는 대상체를 제외하고, 무작위화되고, 면역원성 데이터를 이용 가능한 제1 백신 접종을 받은 모든 대상체로서 정의한다. 천연 인플루엔자 감염 후 취한 샘플은 계절성 인플루엔자 백신의 면역원성 평가에 포함시키지 않았다.

Fluarix에 의한 백신접종 후 제28일에 기하평균 적혈구 응집반응 저해(HI) 항체 역가(GMT), 공동 투여 그룹(Fluarix + Ad26.RSV.preF)에 대한 대조군(Fluarix + 위약)의 기하평균 비(GMR), 및 4가지 인플루엔자 균주 각각에 대한 이들의 대응하는 CI를 표 2 및 도 1에 나타낸다. 모두 4가지 GMR(대조군/CoAd 그룹)의 신뢰상한은 비열성 마진 2 미만이었다. 따라서, Ad26.RSV.preF + Fluarix의 공동 투여 대 대조군(Fluarix + 위약)의 비-열성을 결론 내렸다.

일단 상기 모델에서 기준 HI 수준에 대해 조절하고 일단 FA 세트에 대해 모델을 실행함으로써 상기 비-열성 분석의 민감도 분석을 수행하였다. 민감도 분석 결과는 상기 결과와 일치되었다.

도 2는 프로토콜당 인플루엔자 면역원성 집단에 대한 HI 항체 반응(HAI)의 시간에 따른 평균(95% CI) 실제 값의 도표를 나타낸다.

도 3은 프로토콜당 인플루엔자 면역원성 집단에 대한 백신접종 후 제28일에 HI 항체 반응(HAI)에 대한 혈청전환 차이의 숲 도표를 나타낸다. 4가지 인플루엔자 백신 균주에 대한 혈청전환율을 <1:10의 백신접종 전 역가를 갖는 대상체에서 백신접종 후 ≥1:40 역가, 또는 ≥1:10의 백신 접종 전 역가를 갖는 대상체에서 ≥4-배 역가 증가로서 정의하였다. 그룹과 90% 양측 CI 사이에 혈청전환된 대상체의 비율 차이(대조군 - CoAd)를 Wilson 스코어 방법에 기반하여 계산하였다.

도 4는 프로토콜당 인플루엔자 면역원성 집단에 대한 백신접종 후 제28일에 HI 항체 반응(HAI)에 대한 혈청보호 차이의 숲 도표를 나타낸다. 4가지 인플루엔자 백신 균주에 대한 혈청보호율을 ≥1:40의 백신접종 후 역가를 갖는 대상체의 백분율로서 정의하였다. 그룹과 90% 양측 CI 사이에 혈청보호된 대상체의 비율 차이(대조군 - CoAd)를 Wilson 스코어 방법에 기반하여 계산하였다.

2. 2차 면역원성 분석:

체액성 면역원성 분석은 프로토콜당 RSV 면역원성(PPRI) 집단에 기반하며, 이는 면역원성 결과에 영향을 미치는 것으로 예상되는 주요 프로토콜 편차를 갖는 대상체를 제외하고, 면역원성 데이터를 이용 가능한 모든 무작위화된 대상체 및 완전히 백신접종된 대상체(모두 3가지의 백신접종, 즉, 계절성 인플루엔자, Ad26.RSV.preF 및 위약)로서 정의한다. 천연 RSV 감염 후 취한 샘플은 Ad26.RSV.preF의 면역원성 평가에 포함시키지 않았다.

RSV A2(VNA A2) 수준에 대한 바이러스 중화 항체에 대한 Ad26.RSV.preF와 Fluarix의 공동 투여 효과를 평가하기 위해, Ad26.RSV.preF 단독 대 공동 투여의 투약 후 제28일에 VNA A2 수준의 GMT 비를 계산하였다. 대응하는 90% CI를 갖는 이 비는 1.2(1.00; 1.45)였다. Ad26.RSV.preF 백신접종 후 제28일에 기하평균 VNA A2 역가(GMT), 공동 투여 그룹(Fluarix + Ad26.RSV.preF)에 대한 대조군(Ad26.RSV.preF)의 기하평균 비(GMR), 및 대응하는 CI를 표 3에 나타낸다.

도 5는 프로토콜당 RSV 면역원성 집단에 대해 시간에 따른 RSV A2 균주에 대한 중화 항체 역가의 도표를 나타낸다. 배수 상승의 기하평균 및 VNA A2의 95% CI는 Fluarix + Ad26.RSV.preF 아암(arm) 및 Ad26.RSV.preF 단독 아암 각각에 대해 2.8 (2.5; 3.2) 및 3.1(2.7; 3.6)이었다.

도 6은 프로토콜당 RSV 면역원성 집단에 대해 시간에 따라, ELISA에 의해 측정된 바와 같은 RSV pre-F 단백질에 의한 항체 반응의 도표를 나타내며, 95% CI의 기하평균을 도면에 나타내고, N은 기준선에서 데이터에 따른 대상체의 수이다. 배수 상승의 기하평균 및 pre-F ELISA의 95% CI는 Fluarix + Ad26.RSV.preF 아암 및 Ad26.RSV.preF 단독 아암 각각에 대해 2.3(2.1; 2.7) 및 2.6(2.3; 3.0)였다.

도 7은 프로토콜당 RSV 면역원성 집단에 대해 시간에 따라, ELISA에 의해 측정된 바와 같은 RSV post-F 단백질에 의한 항체 반응의 도표를 나타내며, 95% CI의 기하평균을 도면에 나타내고, N은 기준선에서 데이터에 따른 대상체의 수이다. 배수 상승의 기하평균 및 post-F ELISA의 95% CI는 Fluarix + Ad26.RSV.preF 아암 및 Ad26.RSV.preF 단독 아암 각각에 대해 2.0(1.8; 2.2) 및 2.1(1.9; 2.3)이었다.

도 8은 프로토콜당 RSV 면역원성 집단에 대해 시간에 따른 IFN-γ ELISpot 분석에 의해 측정된 바와 같은 RSV-F 특이적 T 세포 반응의 박스 도표를 나타낸다. 2명의 대상체에 대해, 제29일 ELISpot 샘플을 조화/합병(reconciliation/merging) 문제로 인해 제외하였다는 것을 주목한다.

3. 안전성:

안전성 분석은 프로토콜 편차의 발생 및 백신 유형과 상관없이, 무작위화하고 적어도 1 용량의 연구 백신을 받은 모든 대상체로서 정의하는 완전 분석(full analysis: FA) 집단에 기반하였다.

그룹 1(CoAd)의 1명의 대상체(1.1%)는 위약 투약 후 3가지의 SAE를 보고하였다. SAE는 4등급 고혈압성 긴급증, 4등급 느린맥 및 3등급 신장외상이었다. 이들 AE는 백신접종과 관련되지 않은 것으로 간주하였다. 다른 SAE는 보고되지 않았다. 치명적 결과를 갖는 AE는 없었다.

그룹 1(CoAd)의 1명의 대상체(1.1%)는 Fluarix + Ad26.RSV.preF 투여 후 중단을 야기하는 AE를 경험하였다. 이 AE는 2등급 귀 감염이었고, 백신접종과 관련되지 않은 것으로 간주하였다.

가장 빈번하게 보고된 요청된 국소 사건은 통증/압통이었고, 동시 Fluarix 투약 유무와 상관없이 각각 Ad26.RSV.preF 투약 후 대상체의 78.9% 또는 76.7%로 Ad26.RSV.preF 아암에서 보고되었다. Fluarix 아암에서, 이는 동시 Ad26.RSV.preF 투약 유무와 상관없이 각각 Fluarix 투약 후 대상체의 46.7% 및 38.9%에서 보고되었다. 위약 아암에서, 20% 미만에서 통증/압통이 보고되었다. 통증/압통에 대한 발병까지의 중위 시간은 1일이었고, 중위 지속기간은 Fluarix와 공동투여될 때 또는 공동투여되지 않을 때 Ad26.RSV.preF 아암에서 2일 또는 4일이었고, 중위 지속기간은 위약 또는 Fluarix 아암에서 1일 또는 2일이었다.

Fluarix 공동투여 유무와 상관없이 Ad26.RSV.preF 투약 후 대상체의 30% 초과에서 보고된 요청된 전신 AE는 관절통, 오한, 피로, 두통 및 근육통이었다. Fluarix 단독 투여 또는 위약 후 대상체의 20% 미만에서 이들 AE가 보고되었다. (Fluarix 유무와 상관없이) Ad26.RSV.preF 백신접종을 한 그룹에서, 발병까지의 중위 시간은 전형적으로 1 내지 2일이었고, 중위 지속기간은 일반적으로 1 내지 2일이었다.

투약 후 대상체의 5% 초과에서 보고된 요청된 AE는 기도 감염 및 혈압 상승이었다. Fluarix + 위약 투약 후 대상체의 12.2%에서, Fluarix + Ad26.RSV.preF 공동 투여 후 대상체의 11.1%에서, Ad26.RSV.preF 단독 투약 후 대상체의 5.6%에서, 그리고 위약 투약 후 대상체의 8.0%에서 기도 감염이 보고되었다.

광범위한 본 발명의 개념으로부터 벗어나는 일 없이 상기 실시형태에 대한 변화가 이루어질 수 있다는 것이 당업자에 의해 인식될 것이다. 따라서, 본 발명은 개시된 특정 실시형태로 제한되지 않고, 첨부된 청구범위에 의해 정의되는 본 발명의 사상 및 범주 내에서의 변형을 포함하고자 하는 것으로 이해된다.

SEQUENCE LISTING <110> Janssen Vaccines & Prevention B.V. <120> Co-administration of Seasonal Influenza Vaccine and an Adenovirus based Respiratory Syncytial Virus Vaccine <130> CRU6013WOPCT1 <140> PCT/EP2020/063406 <141> 2020-05-14 <150> 62/848036 <151> 2019-05-15 <160> 7 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 574 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> RSV F protein A2 full length sequence <400> 1 Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr 1 5 10 15 Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe 20 25 30 Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu 35 40 45 Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile 50 55 60 Lys Lys Asn Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Ile Lys Leu Ile Lys 65 70 75 80 Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu 85 90 95 Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro 100 105 110 Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr 115 120 125 Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val 130 135 140 Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu 145 150 155 160 Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys 165 170 175 Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val 180 185 190 Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn 195 200 205 Lys Gln Ser Cys Ser Ile Ser Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln 210 215 220 Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn 225 230 235 240 Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu 245 250 255 Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys 260 265 270 Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile 275 280 285 Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro 290 295 300 Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro 305 310 315 320 Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg 325 330 335 Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe 340 345 350 Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp 355 360 365 Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val 370 375 380 Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr 385 390 395 400 Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys 405 410 415 Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile 420 425 430 Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp 435 440 445 Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly 450 455 460 Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro 465 470 475 480 Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn 485 490 495 Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu 500 505 510 Leu His Asn Val Asn Ala Val Lys Ser Thr Thr Asn Ile Met Ile Thr 515 520 525 Thr Ile Ile Ile Val Ile Ile Val Ile Leu Leu Ser Leu Ile Ala Val 530 535 540 Gly Leu Leu Leu Tyr Cys Lys Ala Arg Ser Thr Pro Val Thr Leu Ser 545 550 555 560 Lys Asp Gln Leu Ser Gly Ile Asn Asn Ile Ala Phe Ser Asn 565 570 <210> 2 <211> 27 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Trimerization domain <400> 2 Gly Tyr Ile Pro Glu Ala Pro Arg Asp Gly Gln Ala Tyr Val Arg Lys 1 5 10 15 Asp Gly Glu Trp Val Leu Leu Ser Thr Phe Leu 20 25 <210> 3 <211> 4 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Linker <400> 3 Ser Ala Ile Gly 1 <210> 4 <211> 574 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> RSV preF2.1 <400> 4 Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr 1 5 10 15 Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe 20 25 30 Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Gly Ala Leu 35 40 45 Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile 50 55 60 Lys Glu Ile Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys 65 70 75 80 Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu 85 90 95 Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro 100 105 110 Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr 115 120 125 Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val 130 135 140 Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu 145 150 155 160 Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys 165 170 175 Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val 180 185 190 Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn 195 200 205 Lys Gln Ser Cys Ser Ile Pro Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln 210 215 220 Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn 225 230 235 240 Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu 245 250 255 Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys 260 265 270 Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile 275 280 285 Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro 290 295 300 Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro 305 310 315 320 Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg 325 330 335 Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe 340 345 350 Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp 355 360 365 Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val 370 375 380 Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr 385 390 395 400 Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys 405 410 415 Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile 420 425 430 Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp 435 440 445 Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly 450 455 460 Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro 465 470 475 480 Leu Val Phe Pro Ser Asp Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn 485 490 495 Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu 500 505 510 Leu His Asn Val Asn Ala Val Lys Ser Thr Thr Asn Ile Met Ile Thr 515 520 525 Thr Ile Ile Ile Val Ile Ile Val Ile Leu Leu Ser Leu Ile Ala Val 530 535 540 Gly Leu Leu Leu Tyr Cys Lys Ala Arg Ser Thr Pro Val Thr Leu Ser 545 550 555 560 Lys Asp Gln Leu Ser Gly Ile Asn Asn Ile Ala Phe Ser Asn 565 570 <210> 5 <211> 574 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> RSV preF2.2 <400> 5 Met Glu Leu Leu Ile Leu Lys Ala Asn Ala Ile Thr Thr Ile Leu Thr 1 5 10 15 Ala Val Thr Phe Cys Phe Ala Ser Gly Gln Asn Ile Thr Glu Glu Phe 20 25 30 Tyr Gln Ser Thr Cys Ser Ala Val Ser Lys Gly Tyr Leu Ser Ala Leu 35 40 45 Arg Thr Gly Trp Tyr Thr Ser Val Ile Thr Ile Glu Leu Ser Asn Ile 50 55 60 Lys Glu Ile Lys Cys Asn Gly Thr Asp Ala Lys Val Lys Leu Ile Lys 65 70 75 80 Gln Glu Leu Asp Lys Tyr Lys Asn Ala Val Thr Glu Leu Gln Leu Leu 85 90 95 Met Gln Ser Thr Pro Ala Thr Asn Asn Arg Ala Arg Arg Glu Leu Pro 100 105 110 Arg Phe Met Asn Tyr Thr Leu Asn Asn Ala Lys Lys Thr Asn Val Thr 115 120 125 Leu Ser Lys Lys Arg Lys Arg Arg Phe Leu Gly Phe Leu Leu Gly Val 130 135 140 Gly Ser Ala Ile Ala Ser Gly Val Ala Val Ser Lys Val Leu His Leu 145 150 155 160 Glu Gly Glu Val Asn Lys Ile Lys Ser Ala Leu Leu Ser Thr Asn Lys 165 170 175 Ala Val Val Ser Leu Ser Asn Gly Val Ser Val Leu Thr Ser Lys Val 180 185 190 Leu Asp Leu Lys Asn Tyr Ile Asp Lys Gln Leu Leu Pro Ile Val Asn 195 200 205 Lys Gln Ser Cys Ser Ile Pro Asn Ile Glu Thr Val Ile Glu Phe Gln 210 215 220 Gln Lys Asn Asn Arg Leu Leu Glu Ile Thr Arg Glu Phe Ser Val Asn 225 230 235 240 Ala Gly Val Thr Thr Pro Val Ser Thr Tyr Met Leu Thr Asn Ser Glu 245 250 255 Leu Leu Ser Leu Ile Asn Asp Met Pro Ile Thr Asn Asp Gln Lys Lys 260 265 270 Leu Met Ser Asn Asn Val Gln Ile Val Arg Gln Gln Ser Tyr Ser Ile 275 280 285 Met Ser Ile Ile Lys Glu Glu Val Leu Ala Tyr Val Val Gln Leu Pro 290 295 300 Leu Tyr Gly Val Ile Asp Thr Pro Cys Trp Lys Leu His Thr Ser Pro 305 310 315 320 Leu Cys Thr Thr Asn Thr Lys Glu Gly Ser Asn Ile Cys Leu Thr Arg 325 330 335 Thr Asp Arg Gly Trp Tyr Cys Asp Asn Ala Gly Ser Val Ser Phe Phe 340 345 350 Pro Gln Ala Glu Thr Cys Lys Val Gln Ser Asn Arg Val Phe Cys Asp 355 360 365 Thr Met Asn Ser Leu Thr Leu Pro Ser Glu Val Asn Leu Cys Asn Val 370 375 380 Asp Ile Phe Asn Pro Lys Tyr Asp Cys Lys Ile Met Thr Ser Lys Thr 385 390 395 400 Asp Val Ser Ser Ser Val Ile Thr Ser Leu Gly Ala Ile Val Ser Cys 405 410 415 Tyr Gly Lys Thr Lys Cys Thr Ala Ser Asn Lys Asn Arg Gly Ile Ile 420 425 430 Lys Thr Phe Ser Asn Gly Cys Asp Tyr Val Ser Asn Lys Gly Val Asp 435 440 445 Thr Val Ser Val Gly Asn Thr Leu Tyr Tyr Val Asn Lys Gln Glu Gly 450 455 460 Lys Ser Leu Tyr Val Lys Gly Glu Pro Ile Ile Asn Phe Tyr Asp Pro 465 470 475 480 Leu Val Phe Pro Ser Asn Glu Phe Asp Ala Ser Ile Ser Gln Val Asn 485 490 495 Glu Lys Ile Asn Gln Ser Leu Ala Phe Ile Arg Lys Ser Asp Glu Leu 500 505 510 Leu His Asn Val Asn Ala Val Lys Ser Thr Thr Asn Ile Met Ile Thr 515 520 525 Thr Ile Ile Ile Val Ile Ile Val Ile Leu Leu Ser Leu Ile Ala Val 530 535 540 Gly Leu Leu Leu Tyr Cys Lys Ala Arg Ser Thr Pro Val Thr Leu Ser 545 550 555 560 Lys Asp Gln Leu Ser Gly Ile Asn Asn Ile Ala Phe Ser Asn 565 570 <210> 6 <211> 1725 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> RSV F pre-F2.1 <400> 6 atggagctgc tgatcctgaa ggccaacgcc atcaccacca tcctgaccgc cgtgaccttc 60 tgcttcgcca gcggccagaa catcaccgag gagttctacc agagcacctg cagcgccgtg 120 agcaagggct acctgggcgc cctgagaacc ggctggtaca ccagcgtgat caccatcgag 180 ctgagcaaca tcaaggagat caagtgcaac ggcaccgacg ccaaggtgaa gctgatcaag 240 caggagctgg acaagtacaa gaacgccgtg accgagctgc agctgctgat gcagagcacc 300 cccgccacca acaacagagc cagaagagag ctgcccagat tcatgaacta caccctgaac 360 aacgccaaga agaccaacgt gaccctgagc aagaagagaa agagaagatt cctgggcttc 420 ctgctgggcg tgggcagcgc catcgccagc ggcgtggccg tgagcaaggt gctgcacctg 480 gagggcgagg tgaacaagat caagagcgcc ctgctgagca ccaacaaggc cgtggtgagc 540 ctgagcaacg gcgtgagcgt gctgaccagc aaggtgctgg acctgaagaa ctacatcgac 600 aagcagctgc tgcccatcgt gaacaagcag agctgcagca tccccaacat cgagaccgtg 660 atcgagttcc agcagaagaa caacagactg ctggagatca ccagagagtt cagcgtgaac 720 gccggcgtga ccacccccgt gagcacctac atgctgacca acagcgagct gctgagcctg 780 atcaacgaca tgcccatcac caacgaccag aagaagctga tgagcaacaa cgtgcagatc 840 gtgagacagc agagctacag catcatgagc atcatcaagg aggaggtgct ggcctacgtg 900 gtgcagctgc ccctgtacgg cgtgatcgac accccctgct ggaagctgca caccagcccc 960 ctgtgcacca ccaacaccaa ggagggcagc aacatctgcc tgaccagaac cgacagaggc 1020 tggtactgcg acaacgccgg cagcgtgagc ttcttccccc aggccgagac ctgcaaggtg 1080 cagagcaaca gagtgttctg cgacaccatg aacagcctga ccctgcccag cgaggtgaac 1140 ctgtgcaacg tggacatctt caaccccaag tacgactgca agatcatgac cagcaagacc 1200 gacgtgagca gcagcgtgat caccagcctg ggcgccatcg tgagctgcta cggcaagacc 1260 aagtgcaccg ccagcaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgcgac 1320 tacgtgagca acaagggcgt ggacaccgtg agcgtgggca acaccctgta ctacgtgaac 1380 aagcaggagg gcaagagcct gtacgtgaag ggcgagccca tcatcaactt ctacgacccc 1440 ctggtgttcc ccagcgacga gttcgacgcc agcatcagcc aggtgaacga gaagatcaac 1500 cagagcctgg ccttcatcag aaagagcgac gagctgctgc acaacgtgaa cgccgtgaag 1560 agcaccacca acatcatgat caccaccatc atcatcgtga tcatcgtgat cctgctgagc 1620 ctgatcgccg tgggcctgct gctgtactgc aaggccagaa gcacccccgt gaccctgagc 1680 aaggaccagc tgagcggcat caacaacatc gccttcagca actga 1725 <210> 7 <211> 1725 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> RSV F pre-F2.2 <400> 7 atggagctgc tgatcctgaa ggccaacgcc atcaccacca tcctgaccgc cgtgaccttc 60 tgcttcgcca gcggccagaa catcaccgag gagttctacc agagcacctg cagcgccgtg 120 agcaagggct acctgagcgc cctgagaacc ggctggtaca ccagcgtgat caccatcgag 180 ctgagcaaca tcaaggagat caagtgcaac ggcaccgacg ccaaggtgaa gctgatcaag 240 caggagctgg acaagtacaa gaacgccgtg accgagctgc agctgctgat gcagagcacc 300 cccgccacca acaacagagc cagaagagag ctgcccagat tcatgaacta caccctgaac 360 aacgccaaga agaccaacgt gaccctgagc aagaagagaa agagaagatt cctgggcttc 420 ctgctgggcg tgggcagcgc catcgccagc ggcgtggccg tgagcaaggt gctgcacctg 480 gagggcgagg tgaacaagat caagagcgcc ctgctgagca ccaacaaggc cgtggtgagc 540 ctgagcaacg gcgtgagcgt gctgaccagc aaggtgctgg acctgaagaa ctacatcgac 600 aagcagctgc tgcccatcgt gaacaagcag agctgcagca tccccaacat cgagaccgtg 660 atcgagttcc agcagaagaa caacagactg ctggagatca ccagagagtt cagcgtgaac 720 gccggcgtga ccacccccgt gagcacctac atgctgacca acagcgagct gctgagcctg 780 atcaacgaca tgcccatcac caacgaccag aagaagctga tgagcaacaa cgtgcagatc 840 gtgagacagc agagctacag catcatgagc atcatcaagg aggaggtgct ggcctacgtg 900 gtgcagctgc ccctgtacgg cgtgatcgac accccctgct ggaagctgca caccagcccc 960 ctgtgcacca ccaacaccaa ggagggcagc aacatctgcc tgaccagaac cgacagaggc 1020 tggtactgcg acaacgccgg cagcgtgagc ttcttccccc aggccgagac ctgcaaggtg 1080 cagagcaaca gagtgttctg cgacaccatg aacagcctga ccctgcccag cgaggtgaac 1140 ctgtgcaacg tggacatctt caaccccaag tacgactgca agatcatgac cagcaagacc 1200 gacgtgagca gcagcgtgat caccagcctg ggcgccatcg tgagctgcta cggcaagacc 1260 aagtgcaccg ccagcaacaa gaacagaggc atcatcaaga ccttcagcaa cggctgcgac 1320 tacgtgagca acaagggcgt ggacaccgtg agcgtgggca acaccctgta ctacgtgaac 1380 aagcaggagg gcaagagcct gtacgtgaag ggcgagccca tcatcaactt ctacgacccc 1440 ctggtgttcc ccagcaacga gttcgacgcc agcatcagcc aggtgaacga gaagatcaac 1500 cagagcctgg ccttcatcag aaagagcgac gagctgctgc acaacgtgaa cgccgtgaag 1560 agcaccacca acatcatgat caccaccatc atcatcgtga tcatcgtgat cctgctgagc 1620 ctgatcgccg tgggcctgct gctgtactgc aaggccagaa gcacccccgt gaccctgagc 1680 aaggaccagc tgagcggcat caacaacatc gccttcagca actga 1725

Claims

보호 면역 반응(protective immune response)이 필요한 인간 대상체에서의 호흡기 세포융합 바이러스(respiratory syncytial virus: RSV) 감염에 대한 보호 면역 반응과 인플루엔자 바이러스 감염에 대한 보호 면역 반응을 둘 다 유도하는 방법으로서, 상기 대상체에게,
(a) 유효량의 약제학적 조성물, 바람직하게는 백신으로서, 융합 전 입체구조에서 안정화되는 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터를 포함하되, 상기 유효량의 상기 약제학적 조성물은 용량당 약 1×10¹⁰ 내지 약 1×10¹²개 바이러스 입자의 상기 아데노바이러스 벡터를 포함하는, 약제학적 조성물; 및
(b) 유효량의 인플루엔자 백신, 바람직하게는 계절성 인플루엔자 백신
을 근육내로 투여하는 단계를 포함하되,
(a)와 (b)는 공동투여되는, 방법.
제1항에 있어서, (a)의 상기 약제학적 조성물과 (b)의 상기 백신은 동시에 투여되는, 방법.
제1항에 있어서, 상기 아데노바이러스 벡터는 복제-불능(replication-incompetent)이며, 아데노바이러스 초기 영역 1(E1 영역) 및 초기 영역 3(E3 영역) 중 적어도 하나에서 결실을 갖는, 방법.
제2항에 있어서, 상기 아데노바이러스 벡터는 상기 E1 영역 및 상기 E3 영역이 결실된 복제-불능 Ad26 아데노바이러스 벡터인, 방법.
제2항에 있어서, 상기 아데노바이러스 벡터는 상기 E1 영역 및 상기 E3 영역이 결실된 복제-불능 Ad35 아데노바이러스 벡터인, 방법.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아데노바이러스 벡터에 의해 암호화된 상기 재조합 RSV F 폴리펩디드는 서열번호 4 또는 서열번호 5의 아미노산 서열을 갖는, 방법.
제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 RSV F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산은 서열번호 6 또는 서열번호 7의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는, 방법.
제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 유효량의 상기 약제학적 조성물은 용량당 약 1×10¹¹개 바이러스 입자의 상기 아데노바이러스 벡터를 포함하는, 방법.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 상기 RSV 감염에 감수성인, 방법.
제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체는 상기 인플루엔자 바이러스 감염에 감수성인, 방법.
제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 보호 면역 반응은 RSV에 노출 시 상기 대상체에서의 RSV 임상 증상이 존재하지 않거나 감소된 것을 특징으로 하는, 방법.
제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 보호 면역 반응은 인플루엔자 바이러스에 노출 시 상기 대상체에서의 인플루엔자 바이러스 임상 증상이 존재하지 않거나 감소된 것을 특징으로 하는, 방법.
제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 보호 면역 반응은, 바람직하게는 상기 약제학적 조성물 및 상기 백신의 투여 후 제8일 내지 제35일에 검출 가능한 RSV에 대한 중화 항체 및/또는 RSV에 대한 보호 면역의 존재를 특징으로 하는, 방법.
제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 보호 면역 반응은, 바람직하게는 상기 약제학적 조성물 및 상기 백신의 투여 후 제8일 내지 제35일에 검출 가능한 인플루엔자 바이러스에 대한 중화 항체 및/또는 인플루엔자 바이러스에 대한 보호 면역의 존재를 특징으로 하는, 방법.
제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 투여는 임의의 중증의 이상반응(adverse event)을 유도하지 않는, 방법.
조합물로서,
(a) 유효량의 약제학적 조성물, 바람직하게는 백신으로서, 융합 전 입체구조에서 안정화되는 호흡기 세포융합 바이러스(RSV) F 폴리펩티드를 암호화하는 핵산을 포함하는 아데노바이러스 벡터를 포함하되, 상기 유효량의 약제학적 조성물은 용량당 약 1×10¹⁰ 내지 약 1×10¹²개 바이러스 입자의 상기 아데노바이러스 벡터를 포함하는, 약제학적 조성물; 및
(b) 유효량의 인플루엔자 백신, 바람직하게는 계절성 인플루엔자 백신
을 포함하되,
보호 면역 반응이 필요한 인간 대상체에서의 RSV 감염에 대한 보호 면역 반응과 인플루엔자 바이러스 감염에 대한 보호 면역 반응을 둘 다 유도하기 위해 상기 인간 대상체에 대한 근육내 투여에서 사용하기 위해, (a)와 (b)는 공동투여되는, 조합물.