KR20210150221A - 암 전이 및 재발 진단용 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질 또는 이를 코딩하는 유전자를 포함하는 바이오마커에 관한 것으로서, CD110 및 CDCP1의 발현 수준을 비침습적인 방법으로 측정하여 암의 전이 또는 재발 여부를 판단할 수 있다. 따라서, 상기 CD110 및 CDCP1은 암 전이 또는 재발 진단용 바이오마커로서 유용하게 활용될 수 있다.

Description

암 전이 및 재발 진단용 조성물{A COMPOSITION FOR DIAGNOSING CANCER METASTASIS AND CANCER RECURRENCE}
본 발명은 CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질 또는 이를 코딩하는 유전자를 포함하는 바이오마커와 CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 포함하는 암 전이 또는 재발 진단용 조성물, 키트 및 암 전이 또는 재발 진단을 위한 정보제공방법에 관한 것이다.
암 전이는 암세포가 초기 발생 부위에서 다른 부위로 전달되어 그 다른 부위에서 암세포의 상호작용을 통해 다시 성장하는 것을 말한다. 대부분의 암세포는 암이 처음 발생한 부위인 원발 부위로부터 이탈한 후에는 주변 세포나 조직으로부터 더 이상 생존 신호를 받지 못하게 되어 스스로 사멸하게 되지만 일부 암세포는 원발 부위를 이탈한 이후에도 생존하여 궁극적으로 전이를 일으키게 된다. 특히, 대장암은 이른 시기에 발견되면 완치를 기대해 볼 수 있으나, 발견 시기가 늦어질수록 폐, 간, 림프절이나 복막 등 절제하기 어려운 곳으로의 전이가 일어난다. 대장암은 초기에는 대부분 아무런 증상이 없으며, 증상이 나타난 경우에는 이미 상당히 진행된 경우가 많다. 따라서, 이를 조기 진단하는 것이 중요하나, 특별한 이상 징후가 없는 경우가 많기 때문에, 대장암 전이의 진단에 어려움이 있다(KR 10-2006999 B1).
또한, 화학적 또는 외과적 항암치료를 마친 후에도 재발의 위험은 상존하기 때문에 재발 여부를 조기에 진단하는 것이 중요하다.
암을 진단하는 방법으로는 침습적인 조직검사가 주로 활용되고 있으나, 병변 부위에서 암조직을 채취하기 위해서는 외과적인 수술이 요구되기 때문에, 환자에게 고통이 수반되고, 암 전이 유무에 따라 조직 획득이 어려우며, 반복적으로 조직검사가 필요할 수 있어 환자에게 부담이 크다. 이에, 암을 진단하는 방법으로 비침습적인 방법인 혈액 시료를 활용하는 방법이 시도되고 있으나, 정확도가 낮아 참고적 검사로만 활용이 가능한 실정이다.
KR 10-2006999 B1
이에, 본 발명자들은 비침습적이고 조기 진단이 가능하며, 정확도가 높은 암 전이 또는 재발 진단용 바이오마커를 개발하기 위해 연구한 결과, 종래 혈액에서 검출된다고 보고된 적 없는 CD110 및 CDCP1이 암 전이 또는 재발 시에 혈액 시료에서 발현 수준이 증가한다는 점을 처음으로 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 비침습적인 방법으로 암 전이 또는 재발을 진단하기 위한 바이오마커와 암 전이 또는 재발 진단용 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 상기 바이오마커를 이용한 암의 전이 또는 재발을 진단하기 위한 정보제공방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위해, 본 발명의 일 측면은, CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 포함하는, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은 암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은 종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은 ABCA1 및 IDOL로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 포함하는 암 전이 또는 재발 진단용 조성물을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은 암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1 및 IDOL로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 ABCA1 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 전이 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법을 제공한다.
본 발명의 다른 측면은 종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1 및 IDOL로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 ABCA1 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 재발 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법을 제공한다.
본 발명에 따른 CD110 및 CDCP1을 포함한 암 전이 또는 재발 진단용 바이오마커는 비침습적인 방법으로 정확하게 암 전이 또는 재발을 진단할 수 있으므로 침습적인 방법보다 안전하고 쉽게 암 전이 또는 재발을 진단할 수 있다.
도 1은 비부착성 플레이트를 이용한 콜레스테롤의 처리 또는 스쿠알렌 에폭시다아제(squalene epoxidase, SQLE)의 발현 저해 정도에 따른 대장암 세포주(HT29 및 HCT116)의 증식 정도를 광학 현미경 및 MTT 분석법을 이용하여 확인한 결과이다.
도 2는 비부착성 플레이트를 이용한 콜레스테롤의 처리에 따른 대장암 세포주(HCT116 및 HT29)에서 암세포 마커(CD110 및 CDCP1), 콜레스테롤 유입 관련 단백질(IDOL) 및 콜레스테롤 방출 관련 단백질(ABCA1)의 유전자 발현 정도를 Quantitative PCR을 이용하여 확인한 결과이다.
도 3a는 콜레스테롤의 처리에 따른 대장암 세포주(HCT116)에서 CD45, 암줄기세포 마커(EpCAM), 암세포 마커(CD110 및 CDCP1) 및 SQLE의 발현 정도를 유세포 분석(flow cytometry analysis)을 이용하여 확인한 결과이고, 도 3b는 콜레스테롤의 처리에 따른 대장암 세포주(HT29)에서 CD45, 암줄기세포 마커(EpCAM), 암세포 마커(CD110 및 CDCP1) 및 SQLE의 발현 정도를 유세포 분석(flow cytometry analysis)을 이용하여 확인한 결과이다.
도 4a는 암 전이 동물모델의 제조 방법을 모식도로 나타낸 것이다.
도 4b는 암 전이 동물모델 마우스(HCT116 p53-/-, HT29 또는 HCT116)에 대해 식이를 조절하여 사육을 시작한 날로부터 5주, 9주 및 25주 내지 26주차의 혈청내 콜레스테롤을 측정한 결과를 나타낸 것이다.
도 4c 및 도 4d는 암 전이 동물모델 마우스(HT29)를 30일, 60일, 90일 및 120일간 사육하면서 in-vivo bioluminescence imaging(BLi)을 이용하여 콜레스테롤의 처리 및 SQLE의 발현 저해 정도에 따른 암 전이 정도를 촬영(도 4c) 및 수치화(도 4d)한 결과이다.
도 4e 및 도 4f는 암 전이 동물모델 마우스(HCT116)를 30일, 60일, 90일 및 120일간 사육하면서 in-vivo bioluminescence imaging(BLi)을 이용하여 콜레스테롤의 처리 및 SQLE의 발현 저해 정도에 따른 암 전이 정도를 촬영(도 4e) 및 수치화(도 4f)한 결과이다.
도 5a는 암 전이 마우스 모델(HT29)에서 콜레스테롤의 처리 및 SQLE의 발현 저해 정도에 따른 폐조직 내에서의 대장암 세포 마커(CDCP1)의 수준을 공초점형광현미경을 이용하여 분석한 결과이다.
도 5b는 암 전이 마우스 모델(HCT116)에서 콜레스테롤의 처리 및 SQLE의 발현 저해 정도에 따른 폐조직 내에서의 대장암 세포 마커(CDCP1)의 수준을 공초점형광현미경을 이용하여 분석한 결과이다.
도 6a 및 도 6c는 암 전이 동물모델 마우스(HT29)의 혈액 시료에서 콜레스테롤의 처리 및 SQLE의 발현 저해 정도에 따른 암줄기세포 마커(EpCAM), 암세포 마커(CD110 및 CDCP1) 및 SQLE의 수준을 유세포 분석을 이용하여 분석(도 6a)하고 수치화한 결과(도 6c)이다.
도 6b 및 도 6d는 암 전이 동물모델 마우스(HCT116)의 혈액 시료에서 콜레스테롤의 처리 및 SQLE의 발현 저해 정도에 따른 암줄기세포 마커(EpCAM), 암세포 마커(CD110 및 CDCP1) 및 SQLE의 수준을 유세포 분석을 이용하여 분석(도 6b)하고 수치화한 결과(도 6d)이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 일 측면은, CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 포함하는, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물을 제공한다.
본 명세서에서 사용한 용어, "CD110"은 Cluster of Differentiation 110의 약자로서, 트롬보포이에틴 수용체(thrombopoietin receptor) 또는 myeloproliferative leukemia protein으로 알려져 있다.
상기 CD110은 서열번호 1의 아미노산 서열일 수 있고, 상기 서열과 97% 이상, 구체적으로는 98% 이상, 보다 구체적으로는 99% 이상의 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
이러한 상동성으로 이루어진 서열로서 실질적으로 상기 각 단백질과 동일하거나 상응하는 효능을 나타내는 단백질을 나타내는 아미노산 서열이라면 제한없이 포함된다. 또한, 이러한 상동성으로 이루어진 아미노산 서열이라면, 일부 서열이 결실, 변형, 치환 또는 부가된 아미노산 서열도 본 발명의 범위 내에 포함됨은 자명하다.
본 명세서에서 사용한 용어, "CDCP1"은 CUB domain-containing protein 1의 약자로서, 2 개의 CUB 도메인을 포함하는 큰 세포외 도메인(extracellular domain, ECD) 및 더 작은 세포내 도메인(intracellular domain, ICD)로 이루어진 140 kD의 분자량로 이루어진 막관통 당단백질일 수 있다. 생체 내에서 상기 CDCP1은 정상적인 생리학적 환경에서는 절단되지 않지만, 종양 생성 또는 조직 손상 동안에는 절단이 유도될 수 있다.
상기 CDCP1은 서열번호 2의 아미노산 서열일 수 있고, 상기 서열과 97% 이상, 구체적으로는 98% 이상, 보다 구체적으로는 99% 이상의 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 진단용 조성물은 ABCA1, IDOL, EpCAM, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 추가로 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용한 용어, "ABCA1"은 ATP-binding cassette transporter 1의 약자로서, cholesterol efflux regulatory protein(CERP)으로도 불리며, 세포 콜레스테롤 및 인지질 항상성의 주요 조절제로 알려져 있다.
상기 ABCA1는 서열번호 3의 아미노산 서열일 수 있고, 상기 서열과 97% 이상, 구체적으로는 98% 이상, 보다 구체적으로는 99% 이상의 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용한 용어, "IDOL"은 Increased Degradation of LDL Receptor Protein의 약자로서, LDL 수용체에 유비퀴네이션을 시키는 유비퀴틴 리가제로 알려져 있다.
상기 IDOL은 서열번호 4의 아미노산 서열일 수 있고, 상기 서열과 97% 이상, 구체적으로는 98% 이상, 보다 구체적으로는 99% 이상의 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용한 용어, "EpCAM"은 Epithelial cell adhesion molecule의 약자로서, 상피에서의 Ca2+-독립적 동형 세포-세포 접착을 중재하는 막관통 당단백질로 알려져 있다.
상기 EpCAM은 서열번호 5의 아미노산 서열일 수 있고, 상기 서열과 97% 이상, 구체적으로는 98% 이상, 보다 구체적으로는 99% 이상의 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용한 용어, "SQLE"은 squalene epoxidase의 약자로서, squalene monooxygenase로도 불린다. 산소와 NADPH를 사용하여 스쿠알렌(squalene)을 2,3-옥시도스쿠알렌(2,3-oxidosqualene)으로 산화시키는 효소로 알려져 있다. 또한, 상기 효소는 스테롤(sterol) 생합성에서 속도를 제한하는 효소 중 하나로서 스테롤 생합성 경로의 산소화 단계를 촉매하는 것으로 알려져 있다.
상기 SQLE는 서열번호 9의 아미노산 서열일 수 있고, 상기 서열과 97% 이상, 구체적으로는 98% 이상, 보다 구체적으로는 99% 이상의 상동성을 갖는 아미노산 서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 상기 각 단백질을 코딩하는 유전자는 각 서열번호로 기재한 아미노산을 코딩하는 염기서열이고, 상기 서열과 97% 이상, 구체적으로는 98% 이상, 보다 구체적으로는 99% 이상의 상동성을 갖는 염기서열을 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 암은 고형암알 수 있고, 상기 고형암은 대장암, 폐암, 유방암, 췌장암, 신장암, 간암, 위암, 자궁암 및 전립선암으로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 바람직하게는, 상기 암은 대장암일 수 있다.
본 명세서에서 사용한 용어 "단백질의 수준을 측정하는 물질"이란, 시료에 포함된 표적 단백질의 수준을 측정하는 방법에 사용되는 물질을 의미할 수 있다.
상기 단백질의 수준을 측정하는 물질은 상기 단백질에 특이적으로 결합하는 항체일 수 있다. 구체적으로 상기 물질은 웨스턴 블럿(western blotting), ELISA(enzyme linked immunosorbent assay), 방사선면역분석(RIA: Radioimmunoassay), 방사 면역 확산법(radioimmunodiffusion), 오우크테로니(Ouchterlony) 면역 확산법, 로케트 면역전기영동(rocket immunoelectrophoresis), 면역조직화학염색법(immunohistochemical staining), 면역침전 분석법(Immunoprecipitation Assay), 보체 고정 분석법(Complement Fixation Assay), 면역형광법(immunofluorescence), 면역크로마토그래피법(immunochromatography), FACS(fluorescenceactivated cell sorter analysis) 및 단백질 칩 분석법(protein chip technology assay) 등의 방법에 사용되는 항체를 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
상기 "항체"는 단백질 또는 펩티드 분자의 항원성 부위에 특이적으로 결합할 수 있는 단백질성 분자를 의미한다. 상기 항체의 형태는 특별히 제한되지 않으며 폴리클로날 항체, 모노클로날 항체 또는 항원 결합성로 이루어진 것이면 그것의 일부도 본 발명의 항체에 포함되고 모든 면역 글로불린 항체가 포함될 수 있다. 뿐만 아니라, 인간화 항체 등의 특수 항체를 포함할 수도 있다. 아울러, 상기 항체는 2개의 전체 길이의 경쇄 및 2개의 전체 길이의 중쇄를 가지는 완전한 형태뿐만 아니라 항체 분자의 기능적인 단편을 포함한다. 항체 분자의 기능적인 단편이란 적어도 항원 결합 기능을 보유하고 있는 단편을 의미하며 Fab, F(ab'), F(ab')2 및 Fv 등이 될 수 있다.
본 명세서에서 사용한 용어, "유전자의 발현 수준을 측정하는 물질"이란, 시료에 포함된 표적 유전자의 발현여부를 확인하기 위하여, 상기 표적 유전자로부터 전사된 mRNA의 수준을 측정하는 방법에 사용되는 물질을 의미할 수 있다. 구체적으로 상기 물질은 PCR, RT-PCR, 정량 실시간 PCR(quantified real time PCR), 경쟁적 RT-PCR(Competitive RT-PCR), 실시간 RT-PCR(real time quantitative RT-PCR), RNase 보호 분석법(RPA; RNase protection assay), 노던 블럿팅(Northern blotting), DNA 칩 분석법 등의 방법에 사용되는 표적 유전자 또는 이의 유전자 발현물에 특이적으로 결합할 수 있는 프라이머 또는 프로브를 포함할 수 있으나, 특별히 이에 제한되지는 않는다. 또한, 상기 유전자 발현물은 mRNA일 수 있다.
상기 "프라이머"는 표적 핵산 서열로 상보적인 템플레이트(template)와 염기쌍(base pair)을 형성할 수 있고 템플레이트 가닥 복사를 위한 시작 지점으로 기능을 하는 짧은 핵산 서열을 의미한다. 프라이머는 짧은 자유 3말단 수화기(free 3' hydroxyl group)를 가질 수 있다. 프라이머는 적절한 완충용액 및 온도에서 중합반응(즉, DNA 폴리머레이즈 또는 역전사효소)을 위한 시약 및 상이한 4가지 뉴클레오사이드 트리포스페이트의 존재하에서 DNA 합성이 개시될 수 있다. 또한, 상기 프라이머는 15 내지 35개의 뉴클레오타이드로 구성될 수 있으며, 20 내지 25개의 뉴클레오타이드로 구성될 수 있다.
상기 "프로브"는 CD110, CDCP1, ABCA1, IDOL, EpCAM, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 하나의 유전자와 상보적으로 결합할 수 있는 프로브가 될 수 있고, 상기 각 유전자와 상보적으로 결합할 수 있는 한, 상기 프로브의 뉴클레오티드 서열은 제한되지 않는다. 상기 프로브는 15 내지 35개의 뉴클레오타이드로 구성될 수 있으며, 20 내지 25개의 뉴클레오타이드로 구성될 수 있다.
본 발명의 다른 측면은, 상기 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물을 포함하는, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 키트를 제공한다.
상기 키트는 PCR(polymerase chain reaction) 키트, RT-PCR(Reverse transcription polymerase chain reaction) 키트, DNA 칩 키트, ELISA(Enzyme-linked immunosorbent assay) 키트, 단백질 칩 키트, 래피드(rapid) 키트 또는 MRM(Multiple reaction monitoring) 키트일 수 있다. 구체적으로, 유전자의 mRNA 발현 수준을 측정하기 위한 키트는 RT-PCR을 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함하는 키트일 수 있다. RT-PCR 키트는, CD110, CDCP1, ABCA1, IDOL, EpCAM 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질을 코딩하는 유전자에 대한 특이적인 각각의 프라이머 쌍 외에도 테스트 튜브 또는 다른 적절한 컨테이너, 반응 완충액(pH 및 마그네슘 농도는 다양), 데옥시뉴클레오타이드(dNTPs), Taq-폴리머라아제 및 역전사효소와 같은 효소, DNase, RNAse 억제제, DEPC-수(DEPC-water), 멸균수 등을 포함할 수 있다. 또한, 정량 대조군으로 사용되는 유전자에 특이적인 프라이머 쌍을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 키트는 DNA 칩 분석법을 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함할 수 있다. DNA 칩 분석용 키트는, 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA가 프로브로 부착되어 있는 기판, 및 형광표식 프로브를 제작하기 위한 시약, 제제, 효소 등을 포함할 수 있다. 또한, 기판은 정량 대조군 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA를 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 키트는 CD110, CDCP1, ABCA1, IDOL, EpCAM, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질을 코딩하는 유전자로부터 발현되는 단백질의 수준을 측정하기 위한 단백질 칩 분석용 키트가 될 수 있는데, 상기 키트는 특별히 이에 제한되지 않으나, 항체의 면역학적 검출을 위하여 기재, 적당한 완충용액, 발색 효소 또는 형광물질로 표지된 2차 항체, 발색 기질 등을 포함할 수 있다. 상기 기재는 특별히 이에 제한되지 않으나 니트로셀룰로오스 막, 폴리비닐 수지로 합성된 96 웰 플레이트, 폴리스티렌 수지로 합성된 96 웰 플레이트 및 유리로 된 슬라이드글라스 등이 이용될 수 있고, 발색효소는 특별히 이에 제한되지 않으나 퍼옥시다아제(peroxidase), 알칼라인 포스파타아제(Alkaline Phosphatase)가 사용될 수 있으며, 형광물질은 특별히 이에 제한되지 않으나 FITC, RITC 등이 될 수 있고, 발색 기질액은 특별히 이에 제한되지 않으나 ABTS(2,2'-아지노-비스(3-에틸벤조티아졸린-6-설폰산)) 또는 OPD(o-페닐렌디아민), TMB(테트라메틸 벤지딘)가 될 수 있다.
본 발명의 다른 측면은, 암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법을 제공한다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 암 전이 진단을 위한 정보제공방법은 암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1, IDOL, EpCAM, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 암 전이 진단을 위한 정보제공방법은 상기 측정된 ABCA1 및 SQLE로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 전이 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 및 EpCAM으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용한 용어, "암 전이"란, 암의 종양세포가 원래의 발생 장소로부터 이동하여 다른 장소에 정착하여 증식하는 것을 의미한다. 본 발명에서 상기 암은 고형암일 수 있고, 상기 고형암은 대장암, 폐암, 유방암, 췌장암, 신장암, 간암, 위암, 자궁암 및 전립선암으로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있으며, 구체적으로는 대장암일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 구체적으로, 대장암 세포는 정상세포와 달리 주위조직을 침범하면서 성장하기 때문에 혈관이나 림프관 등 튜브 형태의 구조물을 만나면 혈액이나 림프액 등을 타고 다른 곳으로 이동할 수 있다. 이렇게 이동하던 대장암 세포가 다른 장기나 조직에 자리를 잡으면 또 다시 세포분열을 하면서 성장하게 되는데 이것을 대장암의 전이라고 한다.
또한, 본 발명의 다른 측면은, 종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법을 제공한다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 암 재발 진단을 위한 정보제공방법은 종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1, IDOL, EpCAM, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 암 재발 진단을 위한 정보제공방법은 상기 측정된 ABCA1 및 SQLE로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 재발 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 및 EpCAM으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명에서 사용한 용어, "암 재발"은 종양 치료 후에 동일형의 종양이 다시 같은 부위에 발현되거나 다른 기관에 발생하는 경우를 의미한다. 본 발명에서 상기 암은 고형암일 수 있고, 상기 고형암은 대장암, 폐암, 유방암, 췌장암, 신장암, 간암, 위암, 자궁암 및 전립선암으로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있으며, 구체적으로는 대장암일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 구체예에서 상기 대장암 전이 또는 재발은 콜레스테롤에 의한 것일 수 있고, SQLE의 발현 저해에 의한 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 상기 SQLE의 발현 저해는 단백질의 수준 또는 유전자의 발현 수준을 저해시키는 물질에 의해 유도될 수 있으며, 구체적으로는 SQLE의 short hairpin RNA(shSQLE) 및 small interfering RNA(siSQLE) 등이 사용될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 명세서에서 사용한 용어, "진단"은 병리 상태의 존재 또는 특징을 확인하는 것을 의미한다. 본 발명의 목적상, 진단은 암의 전이 여부 또는 전이 가능성 여부와 암의 재발 여부 또는 암의 재발 가능성 여부를 확인하는 것이다.
본 명세서에서 사용한 용어, "개체"란, 암이 발병되었음을 전제로 암이 전이되었거나 전이될 가능성이 있는 인간을 포함한 모든 동물을 의미할 수 있다. 상기 동물은 인간뿐만 아니라 이와 유사한 증상의 치료를 필요로 하는 소, 말, 양, 돼지, 염소, 낙타, 영양, 개, 고양이 등의 포유동물일 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 암이 발생한 개체로부터 분리된 "혈액 시료"는 비침습적 방법에 의해 얻을 수 있는 시료를 대표하여 기재한 것이므로, 비침습적 방법에 의해 얻을 수 있는 시료라면 제한 없이 활용될 수 있다. 구체적으로, 상기 혈액 시료는 혈액 내 종양순환세포(CTC; Circulating Tumor Cell)를 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 측면은, ABCA1 및 IDOL로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 포함하는 암 전이 또는 재발 진단용 조성물을 제공한다.
상기 암 전이 또는 재발 진단용 조성물은 EpCAM, CD110, CDCP1, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질 또는 이를 코딩하는 유전자를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 측면은 상기 암 전이 또는 재발 진단용 조성물을 포함하는 암 전이 또는 재발 진단용 키트를 제공한다.
본 발명의 다른 측면은, 암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1 및 IDOL로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 ABCA1 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 전이 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법을 제공한다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 암 전이 진단을 위한 정보제공방법은 암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 EpCAM, CD110, CDCP1, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 SQLE 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 전이 상태로 판정하고, 상기 측정된 EpCAM, CD110, CDCP1 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 다른 측면은, 종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1 및 IDOL로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 ABCA1 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 재발 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법을 제공한다.
본 발명의 일 구체예에서, 상기 암 재발 진단을 위한 정보제공방법은 종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 EpCAM, CD110, CDCP1, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및 상기 측정된 SQLE 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 재발 상태로 판정하고, 상기 측정된 EpCAM, CD110, CDCP1 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
본 명세서에서 사용한 용어, "시료"는 암이 발병된 환자로부터 분리되어 CD110, CDCP1, ABCA1, IDOL, EpCAM, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질을 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 직접적인 대상을 의미하며, 구체적으로 상기 시료는 혈액, 암세포 또는 암조직일 수 있고, 구체적으로는 혈액 내 순환종양세포일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 명세서에서 사용한 용어, "순환종양세포"는 악성 종양 환자의 말초혈액에서 발견되는 종양세포로, 원발 종양 및 전이가 발생한 조직 모두로부터 기원될 수 있는 것으로 알려져 있다.
본 발명의 일 실시예에서, 대장암 세포주(HCT116 및 HT29)에 콜레스테롤 처리하면 순환종양세포와 같이 암줄기세포 마커(EpCAM) 및 암세포 마커(CD110 및 CDCP1)의 발현이 증가하고, SQLE의 발현이 감소한다는 점을 확인하였다(도 3a 및 도 3b 참조).
본 발명의 다른 실시예에서, 고콜레스테롤 식이 암 전이 동물모델 및/또는 SQLE의 발현이 억제된 암 전이 동물모델의 혈액 시료에서 암줄기세포 마커(EpCAM) 및 암세포 마커(CD110 및 CDCP1)의 발현이 증가하고, SQLE의 발현이 감소한다는 점을 확인하였다(도 6a 내지 도 6d 참조).
이와 같은 실험 결과는 암 전이 동물모델의혈액 중에 SQLE, EpCAM, CD110 및 CDCP1 마커를 갖는 순환 종양 세포가 존재함을 의미하며, 이는, 상기 SQLE, EpCAM, CD110 및 CDCP1로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질 또는 이를 코딩하는 유전자가 암 전이 진단에 활용될 수 있음을 시사한다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
실험예 1. 콜레스테롤 처리 또는 스쿠알렌 에폭시다아제(SQLE) 발현 저해에 의한 대장암 세포주의 생존 증가 확인
실험예 1.1. SQLE 발현 저해 물질의 제조
SQLE 유전자의 발현 억제에 의한 세포내 기능을 조사하기 위하여 SQLE 유전자의 염기서열 중에서 25개의 뉴클레오티드로 이루어진 siRNA(siSQLE)를 제작하였다. 대조 실험을 위한 siRNA로 siCont를 제작하였다.
SQLE의 염기 서열 및 아미노산 서열은 각각 서열번호 6 및 서열번호 9로 표시하였고, siCont 및 siSQLE의 뉴클레오티드 서열은 각각 서열번호 7 및 서열번호 8로 표시하였다.
실험예 1.2. 세포의 배양
콜레스테롤의 처리 또는 SQLE의 발현 저해에 의한 대장암 세포주의 생존력을 확인하기 위해 대장암 세포주인 HCT116 및 HT29 세포주를 배양하였다. 상기 세포주들을 각각 10% 우태아 혈청, 100 mg/ml 스트렙토마이신, 그리고 100 IU/ml 엠피실린을 함유한 배지를 이용하여 비부착성 플레이트(ultra-low attachment plates, Corning, USA)에서 72시간 동안 배양하였고, 배양 기간 동안 매일 콜레스테롤과 siRNA를 20 μM씩 세포주 시료에 처리하였다.
실험예 1.3. 세포 생존력 측정
배양이 종료된 세포주 시료를 40배 배율로 광학현미경으로 관찰하였고, 그 현미경 사진을 도 1에 도시하였다.
또한, 콜레스테롤의 처리 또는 SQLE의 발현 저해에 의한 대장암 세포주의 생존 증가를 통계적으로 확인하기 위해 MTT법을 기반으로 다음의 방법으로 수행하였다. 상기 실험예 1.2.에서 배양한 세포주를 96웰 플레이트로 옮기고 2 mg/ml MTT를 처리하여 2시간 동안 37℃에서 반응시킨 후 DMSO로 반응을 중단시켰다. Microplate reader(570 nm)로 흡광도를 읽은 후 퍼센트로 환산하여 세포의 사멸/생존을 측정하였다. 또한, 대조군인 콜레스테롤 미처리군과 20 μM siCont 처리군에 대해서도 동일한 방법으로 대장암 세포의 사멸/생존을 확인하였다. 그 결과, 콜레스테롤 및 siSQLE를 처리한 대장암 세포주에서는 대조군 대비 세포 생존율이 모두 유의하게 증가하였다(도 1).
도 1의 현미경 사진을 참조하면, 비부착성 플레이트에서 배양된 대장암 세포주에서는 세포 생존을 나타내는 세포 응집체 형성이 증가된 것이 관찰되었는데, 이는 콜레스테롤 및 siSQLE를 처리한 대장암 세포주에서 아노이키스(anoikis)가 잘 이루어지지 않았음을 의미한다.
아노이키스는 세포사멸의 한 형태로 세포가 세포기질에 부착되지 않거나 본래의 위치가 아닌 곳에 부착되었을 경우에 발생하는 세포 죽음을 의미하는데, 아노이키스에 대한 저항성을 획득한 세포는 부유 상태에서 생존 가능하거나 본래의 위치가 아닌 곳에서 생장이 가능하게 되어, 결과적으로, 암의 전이가 유도될 수 있다.
실험예 2. 콜레스테롤 처리에 따른 대장암 세포주에서 암세포 마커 및 콜레스테롤 유입 또는 방출 관련 단백질의 발현 확인
대장암 세포주(HCT116 및 HT29)를 비부착성 플레이트에서 20 μM의 콜레스테롤을 매일 처리하면서 72시간 동안 배양하였다. 배양이 종료된 후에, 정량적 중합효소 연쇄반응(Quantitative PCR) 분석을 이용하여 암세포 마커(CD110 및 CDCP1), 콜레스테롤 유입 관련 단백질(IDOL) 및 콜레스테롤 방출 관련 단백질(ABCA1)의 유전자 발현 정도를 확인하였고, 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2를 참조하면, 콜레스테롤을 처리한 HCT116 대장암 세포주에서는 콜레스테롤 미처리 대조군 대비 SQLE 및 ABCA1의 발현량이 유의하게 감소하였고, CD110 및 IDOL의 발현량은 유의하게 증가하였다. 또한, 콜레스테롤을 처리한 HT29 대장암 세포주에서는 콜레스테롤 미처리 대조군 대비 SQLE 및 ABCA1의 발현량이 유의하게 감소하였고, CDCP1 및 IDOL의 발현량은 유의하게 증가하였다.
실험예 3. 콜레스테롤 처리에 따른 대장암 세포주에서 암줄기세포 마커, 암세포 마커 및 SQLE의 발현 정도 확인
대장암 세포주(HCT116 또는 HT29)를 비부착성 플레이트에서 20 μM의 콜레스테롤을 매일 처리하면서 72시간 동안 배양한 후에 FACS 염색버퍼(PBS 완충액 중 0.05% BSA)로 3회 세척하였다. 세포를 수집하여 BD Cytofix Fixation 용액에 15분 동안 고정시키고, FACS 염색버퍼로 1회 세척하였다. 세척한 세포 펠렛을 BD Permeabilization 버퍼에 희석하여 5분 동안 반응시켰다. FACS 염색버퍼로 3회동안 세척한 후, 대조군(CD45), 암줄기세포 마커(EpCAM), 암세포 마커(CD110 및 CDCP1) 및 SQLE의 항체를 처리하여 60분 동안 반응시키고, 반응이 끝난 후에 FACS 염색버퍼로 세척한 후 유세포분석기(BD Biosciences)를 이용하여 EpCAM, CD110, CDCP1 및 SQLE의 발현 정도를 분석하였고, 대장암 세포주(HCT116 및 HT29)에서의 결과를 각각 도 3a 및 도 3b에 나타내었다. 사용된 항체는 표 1과 같다.
항체 Catalog No. 회사
CD45 555482 BD Pharminogen
EpCAM 347199 BD Biosciences
CD110 562199 BD Pharminogen
CDCP1 324006 Biolegend
SQLE sc-21791 Santa Cruz
그 결과, 도 3a 및 도 3b를 참조하면, 콜레스테롤을 처리한 대장암 세포주(HCT116 및 HT29)에서 EpCAM, CD110 및 CDCP1의 발현이 증가하고, SQLE의 발현이 감소하였다.
실험예 4. in vivo 루시퍼라제법을 이용한 마우스 동물모델에서 콜레스테롤 처리 및 SQLE 발현 정도에 따른 암 전이 정도 확인
실험예 4.1. 암 전이 동물모델의 제조
암 전이 동물모델의 제조방법의 모식도를 도 4a에 나타내었다. 구체적으로, 마우스(SCID, Immune-deficient mice, 5주령)에 2% 고 콜레스테롤 식이를 30일간 매일 제공하여 마우스 혈청 내 콜레스테롤 수치가 높게 유지되도록 사육하였다. 대조군 마우스에는 일반 식이를 동일하게 제공하여 사육하였다.
한편, 정상 수준의 SQLE 유전자를 갖는 암 세포주(siCont)와 SQLE 유전자가 녹-아웃(knock-out)된 암 세포주(siSQLE)를 제조하였다. 상기 SQLE 유전자가 녹-아웃(knock-out)된 암 세포주는 HT29 또는 HCT116 세포주에 SQLE의 Mission shRNA 렌티바이러스 형질도입 입자(Sigma: TRCN0000046155, TRCN0000046157)를 감염시켜 수득하였다. 상기 암 세포주(5 x 106 cells/ml) 100 ㎕를 마우스(SCID, 5주령)에 등쪽으로 피하 주사하고, 종양 크기가 최대 직경 0.5 x 102 mm3에 도달하면 종양을 절제하였다. 한편, 종양 절제 후에 마우스를 120일 내지 130일간 더 사육하고 상태를 모니터링하였다.
상기 절제된 종양을 단일 세포 현탁액으로 분해한 다음, 세포 현탁액을 멸균 거즈와 70 ㎛ 세포 스트레이너(Corning, 352350)를 사용하여 연속적으로 여과하였다. 그 후, 유세포분석기를 통해 CDCP1 및 CD110이 풍부한 세포를 분류하고 세포의 밀도를 5 X 105 cells/ml로 농축하였다.
상기 농축한 CDCP1 및 CD110이 풍부한 세포 시료(5 X 105 cells/ml) 25 ㎕를 1% FBS(fetal bovine serum; Corning, 35-015-CV)를 포함하는 PBS(phosphate-buffered saline)에 현탁하여 상기 30일간 사육한 마우스에 개복 수술을 통해 대장에 주입함으로써 암 전이 동물모델 마우스를 제조하였다. 자발적(orthotopic) 전이 검정을 위해 마우스를 120일 내지 130일간 더 사육하고 상태를 모니터링 하였다.
상기 암 전이 동물모델 마우스는 (i) 콜레스테롤 미처리/siSQLE 군, (ii) 2% 콜레스테롤/siCont 군 및 (iii) 2% 콜레스테롤/siSQLE 군으로 나누어 실험군을 구성하였고, (iv) 콜레스테롤 미처리/siCont 군을 대조군으로 하였다.
모든 동물 실험은 KRIBB 생명윤리위원회의 승인을 받았다.
실험예 4.2. 암 전이 동물모델에서 혈청내 콜레스테롤 분석
상기 실험예 4.1.에서 제조된 암 전이 동물모델 마우스에 대해 2% 고 콜레스테롤 식이 또는 일반 식이를 제공하여 사육하면서 혈청내 콜레스테롤을 측정하였다(도 4b). 구체적으로, 도 4b에서 (1)은 5주간 일반 식이를 처리한 마우스의 혈청내 콜레스테롤을 측정한 것이고, (2)는 고 콜레스테롤 식이 또는 일반 식이를 제공한 마우스에 대해 상기 실험예 4.1.의 개복 수술 직전(약 9주)에 혈청 내 콜레스테롤을 측정한 것이며, (3)은 고 콜레스테롤 식이 또는 일반 식이를 제공한 마우스에 대해 연구가 완료된 시점(약 25주 내지 26주차)의 혈청 내 콜레스테롤을 측정한 것이다.
그 결과, 2% 콜레스테롤 식이를 공급한 마우스에서 9주차 이후 혈청 내 콜레스테롤 수치가 높음을 확인하였다.
실험예 4.3. 암 전이 동물모델에서 암 전이 정도 확인
상기 실험예 4.1.에서 제조된 암 전이 동물모델 마우스에 대해 암 세포를 주입한 후 30일, 60일, 90일 및 120일째에, ivis(In Vivo Imaging Systems; Perkin elemer)를 이용하여 암세포의 이동을 확인하였다(도 4c 내지 도 4f).
그 결과, 대조군에 비하여 2% 콜레스테롤 식이를 공급한 마우스 암 전이 정도가 유의하게 증가함을 확인하였다. 또한, 일반 식이를 제공하면서 SQLE의 발현을 억제한 마우스에서도 암 전이 정도가 유의하게 증가함을 확인하였다.
실험예 5. in vivo 에서 콜레스테롤의 처리 및 SQLE의 발현 저해 정도에 따른 폐조직 내에서의 암세포 마커(CDCP1)의 수준 확인
상기 실험예 4.3.의 암 전이가 이루어진 암전이 마우스 모델(각 실험군 및 대조군에서 5마리씩)에서 폐조직을 채취하여 암세포 마커(CDCP1) 항체로 염색한 후 공초점형광현미경을 이용하여 이미지를 얻고, 이미지 제이 프로그램(Image J program)을 이용하여 양적 계산을 수행함으로써 폐조직으로의 암 전이 정도를 측정하였다. DAPI 항체(파란색)로 핵을 염색하였다. HT29를 이식한 암 전이 마우스 모델에 대한 결과를 도 5a에, HCT116를 이식한 암 전이 동물모델에 대한 결과를 도 5b에 나타내었다. 사용된 항체는 표 2와 같다.
항체 Catalog No. 회사
DAPI RUO-564907 BD Biosciences
도 5a 및 도 5b를 참조하면, 대조군 대비 실험군에서 폐조직내 CDCP1의 발현이 현저하게 증가하였음을 확인하였다. 상기 CDCP1은 대장 유래 세포에 대한 마커이므로, CDCP1의 발현이 현저하게 증가된 폐조직은 대장암으로부터 전이가 이루어진 것임을 의미한다.
실험예 6. 암 전이 동물모델의 혈액 중에서 암줄기세포 마커 및 암세포 마커의 수준 확인
상기 실험예 4.1.에서 제조된 암 전이 동물모델의 혈액 시료에서 콜레스테롤의 처리 및 SQLE의 발현 저해 정도에 따른 암줄기세포 마커(EpCAM) 및 암세포 마커(CD110 및 CDCP1)의 수준을 확인하였다.
구체적으로, 상기 암 전이 동물모델의 실험군 및 대조군을 각각 2% 고 콜레스테롤 식이 및 일반 식이를 제공하여 사육하였다. 암 전이 동물모델에서 혈액을 채취하고, 채취한 혈액 시료에 혈액세포 마커(CD45), 암줄기세포 마커(EpCAM), 암세포 마커(CD110 및 CDCP1) 및 SQLE에 특이적인 항체를 처리하였다. 그 후 유세포분석기를 이용하여 EpCAM, CD110, CDCP1 및 SQLE의 발현 정도를 분석하였고(도 6a 및 도 6c), 이를 수치화하여 도 6b 및 도 6d에 나타내었다(*, p<0.05; **, p<0.01; ***, p<0.001). 사용된 항체는 상기 표 1과 같다.
그 결과, 도 6a 내지 도 6d를 참조하면, HT29를 이식한 암 전이 동물모델 실험군 및 HCT116를 이식한 암 전이 동물모델 실험군 모두에서 대조군 대비 EpCAM, CD110 및 CDCP1의 발현 수준이 증가하였고, SQLE의 발현 수준이 감소하였다.
이와 같은 실험 결과는 암 전이 동물모델의 혈액 중에 EpCAM, CD110 및 CDCP1 마커를 갖는 순환 종양 세포가 존재함을 의미한다.
<110> Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology <120> A COMPOSITION FOR DIAGNOSING CANCER METASTASIS AND CANCER RECURRENCE <130> FPD/201910-0037 <160> 9 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 635 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CD110 protein <400> 1 Met Pro Ser Trp Ala Leu Phe Met Val Thr Ser Cys Leu Leu Leu Ala 1 5 10 15 Pro Gln Asn Leu Ala Gln Val Ser Ser Gln Asp Val Ser Leu Leu Ala 20 25 30 Ser Asp Ser Glu Pro Leu Lys Cys Phe Ser Arg Thr Phe Glu Asp Leu 35 40 45 Thr Cys Phe Trp Asp Glu Glu Glu Ala Ala Pro Ser Gly Thr Tyr Gln 50 55 60 Leu Leu Tyr Ala Tyr Pro Arg Glu Lys Pro Arg Ala Cys Pro Leu Ser 65 70 75 80 Ser Gln Ser Met Pro His Phe Gly Thr Arg Tyr Val Cys Gln Phe Pro 85 90 95 Asp Gln Glu Glu Val Arg Leu Phe Phe Pro Leu His Leu Trp Val Lys 100 105 110 Asn Val Phe Leu Asn Gln Thr Arg Thr Gln Arg Val Leu Phe Val Asp 115 120 125 Ser Val Gly Leu Pro Ala Pro Pro Ser Ile Ile Lys Ala Met Gly Gly 130 135 140 Ser Gln Pro Gly Glu Leu Gln Ile Ser Trp Glu Glu Pro Ala Pro Glu 145 150 155 160 Ile Ser Asp Phe Leu Arg Tyr Glu Leu Arg Tyr Gly Pro Arg Asp Pro 165 170 175 Lys Asn Ser Thr Gly Pro Thr Val Ile Gln Leu Ile Ala Thr Glu Thr 180 185 190 Cys Cys Pro Ala Leu Gln Arg Pro His Ser Ala Ser Ala Leu Asp Gln 195 200 205 Ser Pro Cys Ala Gln Pro Thr Met Pro Trp Gln Asp Gly Pro Lys Gln 210 215 220 Thr Ser Pro Ser Arg Glu Ala Ser Ala Leu Thr Ala Glu Gly Gly Ser 225 230 235 240 Cys Leu Ile Ser Gly Leu Gln Pro Gly Asn Ser Tyr Trp Leu Gln Leu 245 250 255 Arg Ser Glu Pro Asp Gly Ile Ser Leu Gly Gly Ser Trp Gly Ser Trp 260 265 270 Ser Leu Pro Val Thr Val Asp Leu Pro Gly Asp Ala Val Ala Leu Gly 275 280 285 Leu Gln Cys Phe Thr Leu Asp Leu Lys Asn Val Thr Cys Gln Trp Gln 290 295 300 Gln Gln Asp His Ala Ser Ser Gln Gly Phe Phe Tyr His Ser Arg Ala 305 310 315 320 Arg Cys Cys Pro Arg Asp Arg Tyr Pro Ile Trp Glu Asn Cys Glu Glu 325 330 335 Glu Glu Lys Thr Asn Pro Gly Leu Gln Thr Pro Gln Phe Ser Arg Cys 340 345 350 His Phe Lys Ser Arg Asn Asp Ser Ile Ile His Ile Leu Val Glu Val 355 360 365 Thr Thr Ala Pro Gly Thr Val His Ser Tyr Leu Gly Ser Pro Phe Trp 370 375 380 Ile His Gln Ala Val Arg Leu Pro Thr Pro Asn Leu His Trp Arg Glu 385 390 395 400 Ile Ser Ser Gly His Leu Glu Leu Glu Trp Gln His Pro Ser Ser Trp 405 410 415 Ala Ala Gln Glu Thr Cys Tyr Gln Leu Arg Tyr Thr Gly Glu Gly His 420 425 430 Gln Asp Trp Lys Val Leu Glu Pro Pro Leu Gly Ala Arg Gly Gly Thr 435 440 445 Leu Glu Leu Arg Pro Arg Ser Arg Tyr Arg Leu Gln Leu Arg Ala Arg 450 455 460 Leu Asn Gly Pro Thr Tyr Gln Gly Pro Trp Ser Ser Trp Ser Asp Pro 465 470 475 480 Thr Arg Val Glu Thr Ala Thr Glu Thr Ala Trp Ile Ser Leu Val Thr 485 490 495 Ala Leu His Leu Val Leu Gly Leu Ser Ala Val Leu Gly Leu Leu Leu 500 505 510 Leu Arg Trp Gln Phe Pro Ala His Tyr Arg Arg Leu Arg His Ala Leu 515 520 525 Trp Pro Ser Leu Pro Asp Leu His Arg Val Leu Gly Gln Tyr Leu Arg 530 535 540 Asp Thr Ala Ala Leu Ser Pro Pro Lys Ala Thr Val Ser Asp Thr Cys 545 550 555 560 Glu Glu Val Glu Pro Ser Leu Leu Glu Ile Leu Pro Lys Ser Ser Glu 565 570 575 Arg Thr Pro Leu Pro Leu Cys Ser Ser Gln Ala Gln Met Asp Tyr Arg 580 585 590 Arg Leu Gln Pro Ser Cys Leu Gly Thr Met Pro Leu Ser Val Cys Pro 595 600 605 Pro Met Ala Glu Ser Gly Ser Cys Cys Thr Thr His Ile Ala Asn His 610 615 620 Ser Tyr Leu Pro Leu Ser Tyr Trp Gln Gln Pro 625 630 635 <210> 2 <211> 836 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> CDCP1 protein <400> 2 Met Ala Gly Leu Asn Cys Gly Val Ser Ile Ala Leu Leu Gly Val Leu 1 5 10 15 Leu Leu Gly Ala Ala Arg Leu Pro Arg Gly Ala Glu Ala Phe Glu Ile 20 25 30 Ala Leu Pro Arg Glu Ser Asn Ile Thr Val Leu Ile Lys Leu Gly Thr 35 40 45 Pro Thr Leu Leu Ala Lys Pro Cys Tyr Ile Val Ile Ser Lys Arg His 50 55 60 Ile Thr Met Leu Ser Ile Lys Ser Gly Glu Arg Ile Val Phe Thr Phe 65 70 75 80 Ser Cys Gln Ser Pro Glu Asn His Phe Val Ile Glu Ile Gln Lys Asn 85 90 95 Ile Asp Cys Met Ser Gly Pro Cys Pro Phe Gly Glu Val Gln Leu Gln 100 105 110 Pro Ser Thr Ser Leu Leu Pro Thr Leu Asn Arg Thr Phe Ile Trp Asp 115 120 125 Val Lys Ala His Lys Ser Ile Gly Leu Glu Leu Gln Phe Ser Ile Pro 130 135 140 Arg Leu Arg Gln Ile Gly Pro Gly Glu Ser Cys Pro Asp Gly Val Thr 145 150 155 160 His Ser Ile Ser Gly Arg Ile Asp Ala Thr Val Val Arg Ile Gly Thr 165 170 175 Phe Cys Ser Asn Gly Thr Val Ser Arg Ile Lys Met Gln Glu Gly Val 180 185 190 Lys Met Ala Leu His Leu Pro Trp Phe His Pro Arg Asn Val Ser Gly 195 200 205 Phe Ser Ile Ala Asn Arg Ser Ser Ile Lys Arg Leu Cys Ile Ile Glu 210 215 220 Ser Val Phe Glu Gly Glu Gly Ser Ala Thr Leu Met Ser Ala Asn Tyr 225 230 235 240 Pro Glu Gly Phe Pro Glu Asp Glu Leu Met Thr Trp Gln Phe Val Val 245 250 255 Pro Ala His Leu Arg Ala Ser Val Ser Phe Leu Asn Phe Asn Leu Ser 260 265 270 Asn Cys Glu Arg Lys Glu Glu Arg Val Glu Tyr Tyr Ile Pro Gly Ser 275 280 285 Thr Thr Asn Pro Glu Val Phe Lys Leu Glu Asp Lys Gln Pro Gly Asn 290 295 300 Met Ala Gly Asn Phe Asn Leu Ser Leu Gln Gly Cys Asp Gln Asp Ala 305 310 315 320 Gln Ser Pro Gly Ile Leu Arg Leu Gln Phe Gln Val Leu Val Gln His 325 330 335 Pro Gln Asn Glu Ser Asn Lys Ile Tyr Val Val Asp Leu Ser Asn Glu 340 345 350 Arg Ala Met Ser Leu Thr Ile Glu Pro Arg Pro Val Lys Gln Ser Arg 355 360 365 Lys Phe Val Pro Gly Cys Phe Val Cys Leu Glu Ser Arg Thr Cys Ser 370 375 380 Ser Asn Leu Thr Leu Thr Ser Gly Ser Lys His Lys Ile Ser Phe Leu 385 390 395 400 Cys Asp Asp Leu Thr Arg Leu Trp Met Asn Val Glu Lys Thr Ile Ser 405 410 415 Cys Thr Asp His Arg Tyr Cys Gln Arg Lys Ser Tyr Ser Leu Gln Val 420 425 430 Pro Ser Asp Ile Leu His Leu Pro Val Glu Leu His Asp Phe Ser Trp 435 440 445 Lys Leu Leu Val Pro Lys Asp Arg Leu Ser Leu Val Leu Val Pro Ala 450 455 460 Gln Lys Leu Gln Gln His Thr His Glu Lys Pro Cys Asn Thr Ser Phe 465 470 475 480 Ser Tyr Leu Val Ala Ser Ala Ile Pro Ser Gln Asp Leu Tyr Phe Gly 485 490 495 Ser Phe Cys Pro Gly Gly Ser Ile Lys Gln Ile Gln Val Lys Gln Asn 500 505 510 Ile Ser Val Thr Leu Arg Thr Phe Ala Pro Ser Phe Gln Gln Glu Ala 515 520 525 Ser Arg Gln Gly Leu Thr Val Ser Phe Ile Pro Tyr Phe Lys Glu Glu 530 535 540 Gly Val Phe Thr Val Thr Pro Asp Thr Lys Ser Lys Val Tyr Leu Arg 545 550 555 560 Thr Pro Asn Trp Asp Arg Gly Leu Pro Ser Leu Thr Ser Val Ser Trp 565 570 575 Asn Ile Ser Val Pro Arg Asp Gln Val Ala Cys Leu Thr Phe Phe Lys 580 585 590 Glu Arg Ser Gly Val Val Cys Gln Thr Gly Arg Ala Phe Met Ile Ile 595 600 605 Gln Glu Gln Arg Thr Arg Ala Glu Glu Ile Phe Ser Leu Asp Glu Asp 610 615 620 Val Leu Pro Lys Pro Ser Phe His His His Ser Phe Trp Val Asn Ile 625 630 635 640 Ser Asn Cys Ser Pro Thr Ser Gly Lys Gln Leu Asp Leu Leu Phe Ser 645 650 655 Val Thr Leu Thr Pro Arg Thr Val Asp Leu Thr Val Ile Leu Ile Ala 660 665 670 Ala Val Gly Gly Gly Val Leu Leu Leu Ser Ala Leu Gly Leu Ile Ile 675 680 685 Cys Cys Val Lys Lys Lys Lys Lys Lys Thr Asn Lys Gly Pro Ala Val 690 695 700 Gly Ile Tyr Asn Asp Asn Ile Asn Thr Glu Met Pro Arg Gln Pro Lys 705 710 715 720 Lys Phe Gln Lys Gly Arg Lys Asp Asn Asp Ser His Val Tyr Ala Val 725 730 735 Ile Glu Asp Thr Met Val Tyr Gly His Leu Leu Gln Asp Ser Ser Gly 740 745 750 Ser Phe Leu Gln Pro Glu Val Asp Thr Tyr Arg Pro Phe Gln Gly Thr 755 760 765 Met Gly Val Cys Pro Pro Ser Pro Pro Thr Ile Cys Ser Arg Ala Pro 770 775 780 Thr Ala Lys Leu Ala Thr Glu Glu Pro Pro Pro Arg Ser Pro Pro Glu 785 790 795 800 Ser Glu Ser Glu Pro Tyr Thr Phe Ser His Pro Asn Asn Gly Asp Val 805 810 815 Ser Ser Lys Asp Thr Asp Ile Pro Leu Leu Asn Thr Gln Glu Pro Met 820 825 830 Glu Pro Ala Glu 835 <210> 3 <211> 2261 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> ABCA1 protein <400> 3 Met Ala Cys Trp Pro Gln Leu Arg Leu Leu Leu Trp Lys Asn Leu Thr 1 5 10 15 Phe Arg Arg Arg Gln Thr Cys Gln Leu Leu Leu Glu Val Ala Trp Pro 20 25 30 Leu Phe Ile Phe Leu Ile Leu Ile Ser Val Arg Leu Ser Tyr Pro Pro 35 40 45 Tyr Glu Gln His Glu Cys His Phe Pro Asn Lys Ala Met Pro Ser Ala 50 55 60 Gly Thr Leu Pro Trp Val Gln Gly Ile Ile Cys Asn Ala Asn Asn Pro 65 70 75 80 Cys Phe Arg Tyr Pro Thr Pro Gly Glu Ala Pro Gly Val Val Gly Asn 85 90 95 Phe Asn Lys Ser Ile Val Ala Arg Leu Phe Ser Asp Ala Arg Arg Leu 100 105 110 Leu Leu Tyr Ser Gln Lys Asp Thr Ser Met Lys Asp Met Arg Lys Val 115 120 125 Leu Arg Thr Leu Gln Gln Ile Lys Lys Ser Ser Ser Asn Leu Lys Leu 130 135 140 Gln Asp Phe Leu Val Asp Asn Glu Thr Phe Ser Gly Phe Leu Tyr His 145 150 155 160 Asn Leu Ser Leu Pro Lys Ser Thr Val Asp Lys Met Leu Arg Ala Asp 165 170 175 Val Ile Leu His Lys Val Phe Leu Gln Gly Tyr Gln Leu His Leu Thr 180 185 190 Ser Leu Cys Asn Gly Ser Lys Ser Glu Glu Met Ile Gln Leu Gly Asp 195 200 205 Gln Glu Val Ser Glu Leu Cys Gly Leu Pro Arg Glu Lys Leu Ala Ala 210 215 220 Ala Glu Arg Val Leu Arg Ser Asn Met Asp Ile Leu Lys Pro Ile Leu 225 230 235 240 Arg Thr Leu Asn Ser Thr Ser Pro Phe Pro Ser Lys Glu Leu Ala Glu 245 250 255 Ala Thr Lys Thr Leu Leu His Ser Leu Gly Thr Leu Ala Gln Glu Leu 260 265 270 Phe Ser Met Arg Ser Trp Ser Asp Met Arg Gln Glu Val Met Phe Leu 275 280 285 Thr Asn Val Asn Ser Ser Ser Ser Ser Thr Gln Ile Tyr Gln Ala Val 290 295 300 Ser Arg Ile Val Cys Gly His Pro Glu Gly Gly Gly Leu Lys Ile Lys 305 310 315 320 Ser Leu Asn Trp Tyr Glu Asp Asn Asn Tyr Lys Ala Leu Phe Gly Gly 325 330 335 Asn Gly Thr Glu Glu Asp Ala Glu Thr Phe Tyr Asp Asn Ser Thr Thr 340 345 350 Pro Tyr Cys Asn Asp Leu Met Lys Asn Leu Glu Ser Ser Pro Leu Ser 355 360 365 Arg Ile Ile Trp Lys Ala Leu Lys Pro Leu Leu Val Gly Lys Ile Leu 370 375 380 Tyr Thr Pro Asp Thr Pro Ala Thr Arg Gln Val Met Ala Glu Val Asn 385 390 395 400 Lys Thr Phe Gln Glu Leu Ala Val Phe His Asp Leu Glu Gly Met Trp 405 410 415 Glu Glu Leu Ser Pro Lys Ile Trp Thr Phe Met Glu Asn Ser Gln Glu 420 425 430 Met Asp Leu Val Arg Met Leu Leu Asp Ser Arg Asp Asn Asp His Phe 435 440 445 Trp Glu Gln Gln Leu Asp Gly Leu Asp Trp Thr Ala Gln Asp Ile Val 450 455 460 Ala Phe Leu Ala Lys His Pro Glu Asp Val Gln Ser Ser Asn Gly Ser 465 470 475 480 Val Tyr Thr Trp Arg Glu Ala Phe Asn Glu Thr Asn Gln Ala Ile Arg 485 490 495 Thr Ile Ser Arg Phe Met Glu Cys Val Asn Leu Asn Lys Leu Glu Pro 500 505 510 Ile Ala Thr Glu Val Trp Leu Ile Asn Lys Ser Met Glu Leu Leu Asp 515 520 525 Glu 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Tyr Leu 1140 1145 1150 Lys Lys Glu Asp Ser Val Ser Gln Ser Ser Ser Asp Ala Gly Leu Gly 1155 1160 1165 Ser Asp His Glu Ser Asp Thr Leu Thr Ile Asp Val Ser Ala Ile Ser 1170 1175 1180 Asn Leu Ile Arg Lys His Val Ser Glu Ala Arg Leu Val Glu Asp Ile 1185 1190 1195 1200 Gly His Glu Leu Thr Tyr Val Leu Pro Tyr Glu Ala Ala Lys Glu Gly 1205 1210 1215 Ala Phe Val Glu Leu Phe His Glu Ile Asp Asp Arg Leu Ser Asp Leu 1220 1225 1230 Gly Ile Ser Ser Tyr Gly Ile Ser Glu Thr Thr Leu Glu Glu Ile Phe 1235 1240 1245 Leu Lys Val Ala Glu Glu Ser Gly Val Asp Ala Glu Thr Ser Asp Gly 1250 1255 1260 Thr Leu Pro Ala Arg Arg Asn Arg Arg Ala Phe Gly Asp Lys Gln Ser 1265 1270 1275 1280 Cys Leu Arg Pro Phe Thr Glu Asp Asp Ala Ala Asp Pro Asn Asp Ser 1285 1290 1295 Asp Ile Asp Pro Glu Ser Arg Glu Thr Asp Leu Leu Ser Gly Met Asp 1300 1305 1310 Gly Lys Gly Ser Tyr Gln Val Lys Gly Trp Lys Leu Thr Gln Gln Gln 1315 1320 1325 Phe Val Ala Leu Leu Trp Lys Arg Leu Leu Ile Ala Arg Arg Ser Arg 1330 1335 1340 Lys Gly Phe Phe Ala Gln Ile Val Leu Pro Ala Val Phe Val Cys Ile 1345 1350 1355 1360 Ala Leu Val Phe Ser Leu Ile Val Pro Pro Phe Gly Lys Tyr Pro Ser 1365 1370 1375 Leu Glu Leu Gln Pro Trp Met Tyr Asn Glu Gln Tyr Thr Phe Val Ser 1380 1385 1390 Asn Asp Ala Pro Glu Asp Thr Gly Thr Leu Glu Leu Leu Asn Ala Leu 1395 1400 1405 Thr Lys Asp Pro Gly Phe Gly Thr Arg Cys Met Glu Gly Asn Pro Ile 1410 1415 1420 Pro Asp Thr Pro Cys Gln Ala Gly Glu Glu Glu Trp Thr Thr Ala Pro 1425 1430 1435 1440 Val Pro Gln Thr Ile Met Asp Leu Phe Gln Asn Gly Asn Trp Thr Met 1445 1450 1455 Gln Asn Pro Ser Pro Ala Cys Gln Cys Ser Ser Asp Lys Ile Lys Lys 1460 1465 1470 Met Leu Pro Val Cys Pro Pro Gly Ala Gly Gly Leu Pro Pro Pro Gln 1475 1480 1485 Arg Lys Gln Asn Thr Ala Asp Ile Leu Gln Asp Leu Thr Gly Arg Asn 1490 1495 1500 Ile Ser Asp Tyr Leu Val Lys Thr Tyr Val Gln Ile Ile Ala Lys Ser 1505 1510 1515 1520 Leu Lys Asn Lys Ile Trp Val Asn Glu Phe Arg Tyr Gly Gly Phe Ser 1525 1530 1535 Leu Gly Val Ser Asn Thr Gln Ala Leu Pro Pro Ser Gln Glu Val Asn 1540 1545 1550 Asp Ala Ile Lys Gln Met Lys Lys His Leu Lys Leu Ala Lys Asp Ser 1555 1560 1565 Ser Ala Asp Arg Phe Leu Asn Ser Leu Gly Arg Phe Met Thr Gly Leu 1570 1575 1580 Asp Thr Lys Asn Asn Val Lys Val Trp Phe Asn Asn Lys Gly Trp His 1585 1590 1595 1600 Ala Ile Ser Ser Phe Leu Asn Val Ile Asn Asn Ala Ile Leu Arg Ala 1605 1610 1615 Asn Leu Gln Lys Gly Glu Asn Pro Ser His Tyr Gly Ile Thr Ala Phe 1620 1625 1630 Asn His Pro Leu Asn Leu Thr Lys Gln Gln Leu Ser Glu Val Ala Leu 1635 1640 1645 Met Thr Thr Ser Val Asp Val Leu Val Ser Ile Cys Val Ile Phe Ala 1650 1655 1660 Met Ser Phe Val Pro Ala Ser Phe Val Val Phe Leu Ile Gln Glu Arg 1665 1670 1675 1680 Val Ser Lys Ala Lys His Leu Gln Phe Ile Ser Gly Val Lys Pro Val 1685 1690 1695 Ile Tyr Trp Leu Ser Asn Phe Val Trp Asp Met Cys Asn Tyr Val Val 1700 1705 1710 Pro Ala Thr Leu Val Ile Ile Ile Phe Ile Cys Phe Gln Gln Lys Ser 1715 1720 1725 Tyr Val Ser Ser Thr Asn Leu Pro Val Leu Ala Leu Leu Leu Leu Leu 1730 1735 1740 Tyr Gly Trp Ser Ile Thr Pro Leu Met Tyr Pro Ala Ser Phe Val Phe 1745 1750 1755 1760 Lys Ile Pro Ser Thr Ala Tyr Val Val Leu Thr Ser Val Asn Leu Phe 1765 1770 1775 Ile Gly Ile Asn Gly Ser Val Ala Thr Phe Val Leu Glu Leu Phe Thr 1780 1785 1790 Asp Asn Lys Leu Asn Asn Ile Asn Asp Ile Leu Lys Ser Val Phe Leu 1795 1800 1805 Ile Phe Pro His Phe Cys Leu Gly Arg Gly Leu Ile Asp Met Val Lys 1810 1815 1820 Asn Gln Ala Met Ala Asp Ala Leu Glu Arg Phe Gly Glu Asn Arg Phe 1825 1830 1835 1840 Val Ser Pro Leu Ser Trp Asp Leu Val Gly Arg Asn Leu Phe Ala Met 1845 1850 1855 Ala Val Glu Gly Val Val Phe Phe Leu Ile Thr Val Leu Ile Gln Tyr 1860 1865 1870 Arg Phe Phe Ile Arg Pro Arg Pro Val Asn Ala Lys Leu Ser Pro Leu 1875 1880 1885 Asn Asp Glu Asp Glu Asp Val Arg Arg Glu Arg Gln Arg Ile Leu Asp 1890 1895 1900 Gly Gly Gly Gln Asn Asp Ile Leu Glu Ile Lys Glu Leu Thr Lys Ile 1905 1910 1915 1920 Tyr Arg Arg Lys Arg Lys Pro Ala Val Asp Arg Ile Cys Val Gly Ile 1925 1930 1935 Pro Pro Gly Glu Cys Phe Gly Leu Leu Gly Val Asn Gly Ala Gly Lys 1940 1945 1950 Ser Ser Thr Phe Lys Met Leu Thr Gly Asp Thr Thr Val Thr Arg Gly 1955 1960 1965 Asp Ala Phe Leu Asn Lys Asn Ser Ile Leu Ser Asn Ile His Glu Val 1970 1975 1980 His Gln Asn Met Gly Tyr Cys Pro Gln Phe Asp Ala Ile Thr Glu Leu 1985 1990 1995 2000 Leu Thr Gly Arg Glu His Val Glu Phe Phe Ala Leu Leu Arg Gly Val 2005 2010 2015 Pro Glu Lys Glu Val Gly Lys Val Gly Glu Trp Ala Ile Arg Lys Leu 2020 2025 2030 Gly Leu Val Lys Tyr Gly Glu Lys Tyr Ala Gly Asn Tyr Ser Gly Gly 2035 2040 2045 Asn Lys Arg Lys Leu Ser Thr Ala Met Ala Leu Ile Gly Gly Pro Pro 2050 2055 2060 Val Val Phe Leu Asp Glu Pro Thr Thr Gly Met Asp Pro Lys Ala Arg 2065 2070 2075 2080 Arg Phe Leu Trp Asn Cys Ala Leu Ser Val Val Lys Glu Gly Arg Ser 2085 2090 2095 Val Val Leu Thr Ser His Ser Met Glu Glu Cys Glu Ala Leu Cys Thr 2100 2105 2110 Arg Met Ala Ile Met Val Asn Gly Arg Phe Arg Cys Leu Gly Ser Val 2115 2120 2125 Gln His Leu Lys Asn Arg Phe Gly Asp Gly Tyr Thr Ile Val Val Arg 2130 2135 2140 Ile Ala Gly Ser Asn Pro Asp Leu Lys Pro Val Gln Asp Phe Phe Gly 2145 2150 2155 2160 Leu Ala Phe Pro Gly Ser Val Leu Lys Glu Lys His Arg Asn Met Leu 2165 2170 2175 Gln Tyr Gln Leu Pro Ser Ser Leu Ser Ser Leu Ala Arg Ile Phe Ser 2180 2185 2190 Ile Leu Ser Gln Ser Lys Lys Arg Leu His Ile Glu Asp Tyr Ser Val 2195 2200 2205 Ser Gln Thr Thr Leu Asp Gln Val Phe Val Asn Phe Ala Lys Asp Gln 2210 2215 2220 Ser Asp Asp Asp His Leu Lys Asp Leu Ser Leu His Lys Asn Gln Thr 2225 2230 2235 2240 Val Val Asp Val Ala Val Leu Thr Ser Phe Leu Gln Asp Glu Lys Val 2245 2250 2255 Lys Glu Ser Tyr Val 2260 <210> 4 <211> 445 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> IDOL protein <400> 4 Met Leu Cys Tyr Val Thr Arg Pro Asp Ala Val Leu Met Glu Val Glu 1 5 10 15 Val Glu Ala Lys Ala Asn Gly Glu Asp Cys Leu Asn Gln Val Cys Arg 20 25 30 Arg Leu Gly Ile Ile Glu Val Asp Tyr Phe Gly Leu Gln Phe Thr Gly 35 40 45 Ser Lys Gly Glu Ser Leu Trp Leu Asn Leu Arg Asn Arg Ile Ser Gln 50 55 60 Gln Met Asp Gly Leu Ala Pro Tyr Arg Leu Lys Leu Arg Val Lys Phe 65 70 75 80 Phe Val Glu Pro His Leu Ile Leu Gln Glu Gln Thr Arg His Ile Phe 85 90 95 Phe Leu His Ile Lys Glu Ala Leu Leu Ala Gly His Leu Leu Cys Ser 100 105 110 Pro Glu Gln Ala Val Glu Leu Ser Ala Leu Leu Ala Gln Thr Lys Phe 115 120 125 Gly Asp Tyr Asn Gln Asn Thr Ala Lys Tyr Asn Tyr Glu Glu Leu Cys 130 135 140 Ala Lys Glu Leu Ser Ser Ala Thr Leu Asn Ser Ile Val Ala Lys His 145 150 155 160 Lys Glu Leu Glu Gly Thr Ser Gln Ala Ser Ala Glu Tyr Gln Val Leu 165 170 175 Gln Ile Val Ser Ala Met Glu Asn Tyr Gly Ile Glu Trp His Ser Val 180 185 190 Arg Asp Ser Glu Gly Gln Lys Leu Leu Ile Gly Val Gly Pro Glu Gly 195 200 205 Ile Ser Ile Cys Lys Asp Asp Phe Ser Pro Ile Asn Arg Ile Ala Tyr 210 215 220 Pro Val Val Gln Met Ala Thr Gln Ser Gly Lys Asn Val Tyr Leu Thr 225 230 235 240 Val Thr Lys Glu Ser Gly Asn Ser Ile Val Leu Leu Phe Lys Met Ile 245 250 255 Ser Thr Arg Ala Ala Ser Gly Leu Tyr Arg Ala Ile Thr Glu Thr His 260 265 270 Ala Phe Tyr Arg Cys Asp Thr Val Thr Ser Ala Val Met Met Gln Tyr 275 280 285 Ser Arg Asp Leu Lys Gly His Leu Ala Ser Leu Phe Leu Asn Glu Asn 290 295 300 Ile Asn Leu Gly Lys Lys Tyr Val Phe Asp Ile Lys Arg Thr Ser Lys 305 310 315 320 Glu Val Tyr Asp His Ala Arg Arg Ala Leu Tyr Asn Ala Gly Val Val 325 330 335 Asp Leu Val Ser Arg Asn Asn Gln Ser Pro Ser His Ser Pro Leu Lys 340 345 350 Ser Ser Glu Ser Ser Met Asn Cys Ser Ser Cys Glu Gly Leu Ser Cys 355 360 365 Gln Gln Thr Arg Val Leu Gln Glu Lys Leu Arg Lys Leu Lys Glu Ala 370 375 380 Met Leu Cys Met Val Cys Cys Glu Glu Glu Ile Asn Ser Thr Phe Cys 385 390 395 400 Pro Cys Gly His Thr Val Cys Cys Glu Ser Cys Ala Ala Gln Leu Gln 405 410 415 Ser Cys Pro Val Cys Arg Ser Arg Val Glu His Val Gln His Val Tyr 420 425 430 Leu Pro Thr His Thr Ser Leu Leu Asn Leu Thr Val Ile 435 440 445 <210> 5 <211> 314 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> EpCAM protein <400> 5 Met Ala Pro Pro Gln Val Leu Ala Phe Gly Leu Leu Leu Ala Ala Ala 1 5 10 15 Thr Ala Thr Phe Ala Ala Ala Gln Glu Glu Cys Val Cys Glu Asn Tyr 20 25 30 Lys Leu Ala Val Asn Cys Phe Val Asn Asn Asn Arg Gln Cys Gln Cys 35 40 45 Thr Ser Val Gly Ala Gln Asn Thr Val Ile Cys Ser Lys Leu Ala Ala 50 55 60 Lys Cys Leu Val Met Lys Ala Glu Met Asn Gly Ser Lys Leu Gly Arg 65 70 75 80 Arg Ala Lys Pro Glu Gly Ala Leu Gln Asn Asn Asp Gly Leu Tyr Asp 85 90 95 Pro Asp Cys Asp Glu Ser Gly Leu Phe Lys Ala Lys Gln Cys Asn Gly 100 105 110 Thr Ser Met Cys Trp Cys Val Asn Thr Ala Gly Val Arg Arg Thr Asp 115 120 125 Lys Asp Thr Glu Ile Thr Cys Ser Glu Arg Val Arg Thr Tyr Trp Ile 130 135 140 Ile Ile Glu Leu Lys His Lys Ala Arg Glu Lys Pro Tyr Asp Ser Lys 145 150 155 160 Ser Leu Arg Thr Ala Leu Gln Lys Glu Ile Thr Thr Arg Tyr Gln Leu 165 170 175 Asp Pro Lys Phe Ile Thr Ser Ile Leu Tyr Glu Asn Asn Val Ile Thr 180 185 190 Ile Asp Leu Val Gln Asn Ser Ser Gln Lys Thr Gln Asn Asp Val Asp 195 200 205 Ile Ala Asp Val Ala Tyr Tyr Phe Glu Lys Asp Val Lys Gly Glu Ser 210 215 220 Leu Phe His Ser Lys Lys Met Asp Leu Thr Val Asn Gly Glu Gln Leu 225 230 235 240 Asp Leu Asp Pro Gly Gln Thr Leu Ile Tyr Tyr Val Asp Glu Lys Ala 245 250 255 Pro Glu Phe Ser Met Gln Gly Leu Lys Ala Gly Val Ile Ala Val Ile 260 265 270 Val Val Val Val Ile Ala Val Val Ala Gly Ile Val Val Leu Val Ile 275 280 285 Ser Arg Lys Lys Arg Met Ala Lys Tyr Glu Lys Ala Glu Ile Lys Glu 290 295 300 Met Gly Glu Met His Arg Glu Leu Asn Ala 305 310 <210> 6 <211> 1725 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Squalene Epoxidase - Homo sapiens <400> 6 atgtggactt ttctgggcat tgccactttc acctattttt ataagaagtt cggggacttc 60 atcactttgg ccaacaggga ggtcctgttg tgcgtgctgg tgttcctctc gctgggcctg 120 gtgctctcct accgctgtcg ccaccgaaac gggggtctcc tcgggcgcca gcagagcggc 180 tcccagttcg ccctcttctc ggatattctc tcaggcctgc ctttcattgg cttcttctgg 240 gccaaatccc cccctgaatc agaaaataag gagcagctcg aggccaggag gcgcagaaaa 300 ggaaccaata tttcagaaac aagcttaata ggaacagctg cctgtacatc aacatcttct 360 cagaatgacc cagaagttat catcgtggga gctggcgtgc ttggctctgc tttggcagct 420 gtgctttcca gagatggaag aaaggtgaca gtcattgaga gagacttaaa agagcctgac 480 agaatagttg gagaattcct gcagccgggt ggttatcatg ttctcaaaga ccttggtctt 540 ggagatacag tggaaggtct tgatgcccag gttgtaaatg gttacatgat tcatgatcag 600 gaaagcaaat cagaggttca gattccttac cctctgtcag aaaacaatca agtgcagagt 660 ggaagagctt tccatcacgg aagattcatc atgagtctcc ggaaagcagc tatggcagag 720 cccaatgcaa agtttattga aggtgttgtg ttacagttat tagaggaaga tgatgttgtg 780 atgggagttc agtacaagga taaagagact ggagatatca aggaactcca tgctccactg 840 actgttgttg cagatgggct tttctccaag ttcaggaaaa gcctggtctc caataaagtt 900 tctgtatcat ctcattttgt tggctttctt atgaagaatg caccacagtt taaagcaaat 960 catgctgaac ttattttagc taacccgagt ccagttctca tctaccagat ttcatccagt 1020 gaaactcgag tacttgttga cattagagga gaaatgccaa ggaatttaag agaatacatg 1080 gttgaaaaaa tttacccaca aatacctgat cacctgaaag aaccattctt agaagccact 1140 gacaattctc atctgaggtc catgccagca agcttccttc ctccttcatc agtgaagaaa 1200 cgaggtgttc ttcttttggg agacgcatat aatatgaggc atccacttac tggtggagga 1260 atgactgttg cttttaaaga tataaaacta tggagaaaac tgctaaaggg tatccctgac 1320 ctttatgatg atgcagctat tttcgaggcc aaaaaatcat tttactgggc aagaaaaaca 1380 tctcattcct ttgtcgtgaa tatccttgct caggctcttt atgaattatt ttctgccaca 1440 gatgattccc tgcatcaact aagaaaagcc tgttttcttt atttcaaact tggtggcgaa 1500 tgtgttgcgg gtcctgttgg gctgctttct gtattgtctc ctaaccctct agttttaatt 1560 ggacacttct ttgctgttgc aatctatgcc gtgtattttt gctttaagtc agaaccttgg 1620 attacaaaac ctcgagccct tctcagtagt ggtgctgtat tgtacaaagc gtgttctgta 1680 atatttcctc taatttactc agaaatgaag tatatggttc attaa 1725 <210> 7 <211> 21 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siCont <400> 7 augaacguga auugcucaat t 21 <210> 8 <211> 25 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> siSQLE <400> 8 gcagagccca atgcaaagtt tdtdt 25 <210> 9 <211> 574 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> SQLE protein <400> 9 Met Trp Thr Phe Leu Gly Ile Ala Thr Phe Thr Tyr Phe Tyr Lys Lys 1 5 10 15 Phe Gly Asp Phe Ile Thr Leu Ala Asn Arg Glu Val Leu Leu Cys Val 20 25 30 Leu Val Phe Leu Ser Leu Gly Leu Val Leu Ser Tyr Arg Cys Arg His 35 40 45 Arg Asn Gly Gly Leu Leu Gly Arg Gln Gln Ser Gly Ser Gln Phe Ala 50 55 60 Leu Phe Ser Asp Ile Leu Ser Gly Leu Pro Phe Ile Gly Phe Phe Trp 65 70 75 80 Ala Lys Ser Pro Pro Glu Ser Glu Asn Lys Glu Gln Leu Glu Ala Arg 85 90 95 Arg Arg Arg Lys Gly Thr Asn Ile Ser Glu Thr Ser Leu Ile Gly Thr 100 105 110 Ala Ala Cys Thr Ser Thr Ser Ser Gln Asn Asp Pro Glu Val Ile Ile 115 120 125 Val Gly Ala Gly Val Leu Gly Ser Ala Leu Ala Ala Val Leu Ser Arg 130 135 140 Asp Gly Arg Lys Val Thr Val Ile Glu Arg Asp Leu Lys Glu Pro Asp 145 150 155 160 Arg Ile Val Gly Glu Phe Leu Gln Pro Gly Gly Tyr His Val Leu Lys 165 170 175 Asp Leu Gly Leu Gly Asp Thr Val Glu Gly Leu Asp Ala Gln Val Val 180 185 190 Asn Gly Tyr Met Ile His Asp Gln Glu Ser Lys Ser Glu Val Gln Ile 195 200 205 Pro Tyr Pro Leu Ser Glu Asn Asn Gln Val Gln Ser Gly Arg Ala Phe 210 215 220 His His Gly Arg Phe Ile Met Ser Leu Arg Lys Ala Ala Met Ala Glu 225 230 235 240 Pro Asn Ala Lys Phe Ile Glu Gly Val Val Leu Gln Leu Leu Glu Glu 245 250 255 Asp Asp Val Val Met Gly Val Gln Tyr Lys Asp Lys Glu Thr Gly Asp 260 265 270 Ile Lys Glu Leu His Ala Pro Leu Thr Val Val Ala Asp Gly Leu Phe 275 280 285 Ser Lys Phe Arg Lys Ser Leu Val Ser Asn Lys Val Ser Val Ser Ser 290 295 300 His Phe Val Gly Phe Leu Met Lys Asn Ala Pro Gln Phe Lys Ala Asn 305 310 315 320 His Ala Glu Leu Ile Leu Ala Asn Pro Ser Pro Val Leu Ile Tyr Gln 325 330 335 Ile Ser Ser Ser Glu Thr Arg Val Leu Val Asp Ile Arg Gly Glu Met 340 345 350 Pro Arg Asn Leu Arg Glu Tyr Met Val Glu Lys Ile Tyr Pro Gln Ile 355 360 365 Pro Asp His Leu Lys Glu Pro Phe Leu Glu Ala Thr Asp Asn Ser His 370 375 380 Leu Arg Ser Met Pro Ala Ser Phe Leu Pro Pro Ser Ser Val Lys Lys 385 390 395 400 Arg Gly Val Leu Leu Leu Gly Asp Ala Tyr Asn Met Arg His Pro Leu 405 410 415 Thr Gly Gly Gly Met Thr Val Ala Phe Lys Asp Ile Lys Leu Trp Arg 420 425 430 Lys Leu Leu Lys Gly Ile Pro Asp Leu Tyr Asp Asp Ala Ala Ile Phe 435 440 445 Glu Ala Lys Lys Ser Phe Tyr Trp Ala Arg Lys Thr Ser His Ser Phe 450 455 460 Val Val Asn Ile Leu Ala Gln Ala Leu Tyr Glu Leu Phe Ser Ala Thr 465 470 475 480 Asp Asp Ser Leu His Gln Leu Arg Lys Ala Cys Phe Leu Tyr Phe Lys 485 490 495 Leu Gly Gly Glu Cys Val Ala Gly Pro Val Gly Leu Leu Ser Val Leu 500 505 510 Ser Pro Asn Pro Leu Val Leu Ile Gly His Phe Phe Ala Val Ala Ile 515 520 525 Tyr Ala Val Tyr Phe Cys Phe Lys Ser Glu Pro Trp Ile Thr Lys Pro 530 535 540 Arg Ala Leu Leu Ser Ser Gly Ala Val Leu Tyr Lys Ala Cys Ser Val 545 550 555 560 Ile Phe Pro Leu Ile Tyr Ser Glu Met Lys Tyr Met Val His 565 570

Claims (27)

  1. CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 포함하는, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 CD110은 서열번호 1의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩타이드이고,
    상기 CDCP1은 서열번호 2의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩타이드인, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    ABCA1, IDOL, EpCAM, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 추가로 포함하는, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 ABCA1은 서열번호 3의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩타이드이고,
    상기 IDOL은 서열번호 4의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩타이드이고,
    상기 EpCAM은 서열번호 5의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩타이드이고,
    상기 SQLE는 서열번호 9의 아미노산 서열로 이루어진 폴리펩타이드인, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 암은 고형암인, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 고형암은 대장암, 폐암, 유방암, 췌장암, 신장암, 간암, 위암, 자궁암 및 전립선암으로 이루어진 군에서 선택되는 것인, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  7. 제1항에 있어서,
    상기 단백질의 수준을 측정하는 물질은 상기 단백질에 특이적으로 결합하는 항체인, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질은 상기 유전자 또는 그의 유전자 발현물에 특이적으로 결합하는 프라이머 또는 프로브인, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  9. 제8항에 있어서,
    상기 유전자 발현물은 mRNA인, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  10. 제1항에 있어서,
    상기 혈액 시료는 혈액 내 순환 종양 세포를 포함하는, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 키트.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 키트는 PCR 키트, RT-PCR 키트, DNA 칩 키트, ELISA 키트, 단백질 칩 키트, 래피드 키트 또는 MRM 키트인, 개체로부터 채취한 혈액 시료를 이용한 암 전이 또는 재발 진단용 키트.
  13. 암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
    상기 측정된 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법.
  14. 제13항에 있어서,
    암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1, IDOL, EpCAM, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 추가로 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법.
  15. 제14항에 있어서,
    상기 측정된 ABCA1 및 SQLE로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 전이 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 및 EpCAM으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 추가로 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법.
  16. 제13항에 있어서,
    상기 혈액 시료는 혈액 내 순환종양세포를 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법.
  17. 종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 CD110 및 CDCP1으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
    상기 측정된 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법.
  18. 제17항에 있어서,
    종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1, IDOL, EpCAM, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 추가로 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법.
  19. 제18항에 있어서,
    상기 측정된 ABCA1 및 SQLE로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 재발 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 및 EpCAM으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 추가로 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법.
  20. 제17항에 있어서,
    상기 혈액 시료는 혈액 내 순환종양세포를 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법.
  21. ABCA1 및 IDOL로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 포함하는 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  22. 제21항에 있어서,
    EpCAM, CD110, CDCP1, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 물질을 추가로 포함하는, 암 전이 또는 재발 진단용 조성물.
  23. 제21항 또는 제22항의 조성물을 포함하는, 암 전이 또는 재발 진단용 키트
  24. 암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1 및 IDOL로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
    상기 측정된 ABCA1 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 전이 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법.
  25. 제24항에 있어서,
    암이 발생한 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 EpCAM, CD110, CDCP1, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
    상기 측정된 SQLE 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 전이 상태로 판정하고, 상기 측정된 EpCAM, CD110, CDCP1 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 전이되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 전이 상태로 판정하는 단계를 추가로 포함하는, 암 전이 진단을 위한 정보제공방법.
  26. 종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 ABCA1 및 IDOL로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
    상기 측정된 ABCA1 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 재발 상태로 판정하고, 상기 측정된 IDOL 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법.
  27. 제26항에 있어서,
    종양 치료를 받은 개체로부터 분리된 혈액 시료에서 EpCAM, CD110, CDCP1, SQLE 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계; 및
    상기 측정된 SQLE 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 낮은 경우를 암 재발 상태로 판정하고, 상기 측정된 EpCAM, CD110, CDCP1 및 이의 조합으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 단백질의 수준 또는 이를 코딩하는 유전자의 발현 수준이 암이 재발되지 않은 개체와 비교하여 높은 경우를 암 재발 상태로 판정하는 단계를 추가로 포함하는, 암 재발 진단을 위한 정보제공방법.
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