KR20210139273A - Fcmr 결합 분자 및 그 용도 - Google Patents

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KR20210139273A
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마크 알. 브레이
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유니버시티 헬스 네트워크
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Abstract

본 발명은 신규한 항-FCMR 항체, 이러한 항체를 포함하는 약제학적 조성물 및 암 또는 자가면역 질환과 같은 질환의 치료를 위해 이러한 항체 및 약제학적 조성물을 사용하는 치료 방법을 제공한다.

Description

FCMR 결합 분자 및 그 용도
관련 출원의 교차 참조
본 출원은 2019년 2월 15일자로 제출된 미국 가출원 62/806,237에 대한 우선권을 주장하며, 이의 내용은 본원에 모든 목적으로 전문이 명시적으로 통합된다.
본 발명은 FCMR, 예로 인간 FCMR (hFCMR)에 특이적으로 결합하는 항체 및 이러한 FCMR 결합 항체를 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다. 염증성 질환, 자가면역 질환 및 암을 비롯한 다양한 질환의 치료에서 인간 FCMR을 검출하거나, 인간 FCMR 활성을 조절하는데 본 발명의 항체를 사용하는 방법이 또한 본 발명에 포함된다.
IgM FCMR에 대한 Fc 수용체는 Toso 또는 FAIM3 (Fas 아폽토시스 저해성 분자 3)으로도 불리고, 면역글로불린 유전자 슈퍼패밀리에 속하는 제 I형 막통과 수용체이다. 인간에서 FCMR의 자연적 돌연변이는 확인되지 않았다. 처음에 FCMR은 CD95 (Fas/Apo1) 및 종양 괴사인자 수용체 (TNFR)에 의존적인 T 아폽토시스의 조절과 관련이 있었다. 후속의 연구에서 FCMR을 가용성 IgM에 대한 Fc 수용체로서 확인하였다.
인간에서, FCMR의 조절되지 않는 발현이 다양한 B 세포 악성 종양에 걸린 환자, 구체적으로 만성 림프구성 백혈병 (CLL)에 걸린 환자에서 관찰되어 왔다. FCMR 결핍 마우스는 실험적 자가면역 뇌척수염 (EAE) 발병에 저항성이 있고, 병원성 T 세포 반응의 감소를 나타내었다. 이후의 연구에서는 FCMR 결핍 T 세포가 자극에 이어서 EAE에 대한 중요한 구동 사이토카인인 IL-17을 생성하지 못하는 것을 보여주었다. 또한, FCMR 감염에 대한 염증 반응 동안 역할을 담당하는 것으로 보고되었다. FCMR 결핍 마우스에 관한 연구는 리스테리아 감염 모델에서 그리고 림프구성 맥락수막염 바이러스 (LCMV) 감염 동안 FCMR의 강력한 면역보호 기능을 밝혀내었다.
종합적으로, 이러한 연구 결과는 FMCR로부터의 신호전달을 조절하는데 유용한 제제의 개발이 염증성 질환, 자가면역 질환 및 암을 비롯한 면역계의 조절장애와 관련된 질환에 크게 유익할 것임을 시사한다.
일 양태에서, 본 발명은 신규한 항-FCMR 항체에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 13을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 14를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 15를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 16을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 17을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 18을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 19를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 20을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 21을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 22를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 23을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 24를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 25를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 26을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 27을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 28을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 29를 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 30을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 31을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 32를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 33을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 34를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 35를 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 36을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 37을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 38을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 39를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 40을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 41을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 42를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 43을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 44를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 45를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 46을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 47을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 48를 포함하는 vlCDR3을 포함한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 항-FCMR 항체는 인간 FCMR에 결합한다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 항-FCMR 항체는 인간 IgG와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4로부터 선택된다. 일부 구현예에서, IgG는 IgG1이다. 일부 구현예에서, IgG는 IgG2이다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 항-FCMR 항체 중 임의의 하나를 인코딩하는 핵산 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 핵산 조성물 중 임의의 하나를 포함하는 발현 벡터 조성물에 관한 것이다. 일부 구현예에서, 제 1 핵산은 제 1 발현 벡터에 포함되고, 제 2 핵산은 제 2 발현 벡터에 포함된다. 일부 다른 구현예에서, 제 1 핵산 및 제 2 핵산은 단일 발현 벡터에 포함된다.
본 발명의 또 다른 양태는 본원에 기재된 발현 벡터 중 임의의 하나를 포함하는 숙주 세포에 관한 것이다. 또한, 항-FCMR 항체를 제조하는 방법이 제시되며, 상기 방법은 숙주 세포를 항체가 발현되는 조건 하에 배양하는 단계 및 항체를 회수하는 단계를 포함한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 본원에 기재된 항-FCMR 항체 중 임의의 하나, 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 조성물에 관한 것이다.
또한, 대상체에서 면역 반응을 조절하는 방법이 기재되며, 상기 방법은 본원에 기재된 항-FCMR 항체 중 임의의 하나, 또는 본원에 기재된 조성물 중 임의의 하나의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 대상체에서 면역 반응을 억제하고, FCMR 길항제로서 작용하는 항-FCMR 항체 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 상기 방법은 대상체에서 면역 반응을 자극하고, FCMR 작동제로서 작용하는 항-FCMR 항체 또는 이의 약제학적 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 방법은 대상체에서 면역 반응을 억압하고, 항-FCMR 항체의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
일부 구현예에서, 상기 방법은 대상체에서 면역 반응을 자극하고, 항-FCMR 항체의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 대상체에서 암을 치료하는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 본원에 기재된 항-FCMR 항체 또는 이의 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 상응하는 비-암성 조직과 비교하여 FCMR을 상향조절한다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 B 세포 악성 종양일 수 있다. 일부 구현예에서, B 세포 악성 종양은 만성 림프구성 백혈병이다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 하나 이상의 추가적인 항암 치료제와 조합하여 사용된다. 일부 구현예에서, 이러한 항암 치료제는 PD-1 저해제, PD-L1 저해제, CTLA-4 저해제, TIM-3 저해제 및 LAG-3 저해제와 같은 다른 면역 체크포인트 저해제이다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 대상체에서 자가면역 질환을 치료하는 방법에 관한 것이고, 상기 방법은 본원에 기재된 항-FCMR 항체 또는 이의 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 하나 이상의 추가적인 항-염증 치료제와 조합하여 사용된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 대상체에서 세균성 감염을 치료하는 방법에 관한 것이고, 상기 방법은 본원에 기재된 항-FCMR 항체 또는 이의 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 하나 이상의 추가적인 항생 치료제와 조합하여 사용된다.
또 다른 양태에서, 본 발명은 대상체에서 바이러스성 감염을 치료하는 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 본원에 기재된 항-FCMR 항체 또는 이의 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 하나 이상의 추가적인 항-바이러스 치료제와 조합하여 사용된다.
본 발명은 첨부된 도면과 연결하여 읽을 때 다음의 상세한 설명으로부터 가장 잘 이해될 수 있다. 도면에는 다음의 그림이 포함된다.
도 1은 유세포 계측법을 사용하여 다양한 조혈 하위집합 상의 FCMR 표면 발현을 나타낸다.
도 2는 일차 혼합 림프구 반응 (MLR)에서 림프구의 반응성에 미치는 FCMR 항체 또는 FCMR-Fc 단백질의 효과를 나타낸다.
도 3은 일차 MLR에서 림프구의 반응성에 미치는 FCMR 2A5 항체의 효과를 나타낸다.
도 4는 T 세포 자극에 반응하여 PBMC에 의한 사이토카인 생산에 미치는 FCMR 2A5 항체의 효과를 나타낸다.
도 5는 FCMR 2A5 항체가 자극되지 않은 전혈로부터 사이토카인의 유의한 방출을 유도하지 않음을 나타낸다.
도 6은 표면 플라스몬 공명에 의해 결정된 FCMR-Fc 단백질에 대한 FCMR 항체 2A5 및 2H2의 친화도를 나타낸다.
본 발명은 신규한 항-FCMR 항체를 제공한다. 본원에 기재된 항-FCMR 항체는 인간 FCMR에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 높은 친화도로 인간 FCMR에 결합한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 면역 반응을 자극한다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 면역 반응을 억압한다. 또한, 본 발명에서는 이러한 항체를 사용하여 대상체에서 면역 반응을 조절하고, 예를 들어 암, 자가면역 질환, 세균성 감염 또는 바이러스성 감염을 치료하는 방법이 제공된다.
본 발명의 이해를 용이하게 하기 위해, 다수의 용어 및 구문이 하기에 정의된다.
본원에 사용된 바, 다음의 용어 각각은 본 섹션에서 이와 관련된 의미를 갖는다.
본원에 사용된 바, 용어 "FCMR", "Toso", "FAIM3" 또는 "Fas 아폽토시스 저해성 분자 3"은 진뱅크 기탁번호. NP_001 135945 (인간 이소형 b), NP_001 180267 (인간 이소형 c), NP_005440 (인간 이소형 a), NP_081252 (마우스) 또는 NP_001014843 (래트)의 임의의 및 모든 버전을 포함하여, 임의의 예시적인 Toso 서열과 실질적으로 동일한 아미노산 서열을 갖는 단백질을 말한다. Toso를 인코딩하는 적합한 cDNA는 진뱅크 기탁번호 NM_00l 142473, NM_00l 193338, NM_005449, NM_026976 및 NM_001014843에서 제공된다.
본원에 사용된 바, 용어 "FCMR의 생물학적 활성" 또는 "FCMR 활성"은 전장의 천연 FCMR 단백질과 관련된 임의의 생물학적 활성을 말한다. 일부 구현예에서, FCMR의 생물학적 활성은 IgM 항체에 대한 결합을 말한다. 추가의 구현예에서, FCMR의 생물학적 활성은 CD11b 또는 CD18 활성을 억제하는 것을 말한다. 추가의 구현예에서, FCMR의 생물학적 활성은 과립구의 활성화 역치를 증가시키는 것을 말한다. 활성화 역치는 골수로부터의 활성화된 과립구의 수로 측정할 수 있다. 추가의 구현예에서, FCMR의 생물학적 활성은 수지상 세포의 활성화 및 T 세포에 항원을 제시하는 능력을 포함한다. 추가의 구현예에서, FCMR의 생물학적 활성은 아폽토시스의 억제 또는 TNF 신호전달의 증진을 포함한다. 일부 구현예에서, FCMR 생물학적 활성은 이들 기탁번호의 임의의 및 모든 버전을 포함하여 진뱅크 기탁번호 NP_001 135945, NP_001 180267, NP_005440, NP_081252 또는 NP_001014843로 나타내는 아미노산 서열을 갖는 단백질의 활성과 동등하다.
본원에서 단수 영문 관사 "a" 및 "an"은 관사의 문법적 대상 중 하나 또는 하나 초과 (즉, 적어도 하나)를 말하는데 사용된다. 예로서, 단수 "요소"는 하나의 요소 또는 하나 이상의 요소를 의미한다.
본원에 사용된 바 양, 일시적 기간 등과 같은 측정가능한 값을 언급할 때 "약"은 명시된 값으로부터 ± 20% 또는 ± 10%, 더욱 바람직하게 ± 5%, 더욱 더 바람직하게 ± 1%, 훨씬 더 바람직하게 ± 0.1%의 변화를 포함하도록 의미하고, 이러한 변화는 개시된 방법을 수행하는데 적절하기 때문이다.
본원에서 "절제"는 활성의 감소 또는 제거를 의미한다. 따라서, 예를 들어, "FcγR 결합의 절제"는 Fc 영역 아미노산 변이체가 이러한 특이적 변이체를 포함하지 않는 Fc 영역과 비교하여 50% 미만의 출발 결합을 갖는 것을 의미하며, 이 때 70%, 80%, 90%, 95%, 98% 미만의 활성 손실이 바람직하고, 일반적으로 상기 활성은 비아코아 (Biacore) 검정법에서 검출가능한 결합 수준 미만이다.
본원에 사용된 바, "ADCC" 또는 "항체 의존적 세포매개된 세포독성"은 FcγR을 발현하는 비-특이적 세포독성 세포가 표적 세포 상의 결합된 항체를 인식하고, 후속으로 표적 세포의 용해를 유발하는 세포 매개 반응을 의미한다. ADCC는 FcγRⅢa에 대한 결합과 상관관계가 있고, FcγRⅢa에 대한 결합 증가는 ADCC 활성을 증가시킨다. 본원에 논의된 바와 같이, 본 발명의 다수의 구현예는 ADCC 활성을 완전히 제거한다.
본원에 사용된 바 "ADCP" 또는 항체 의존적 세포 매개 포식작용은 FcγR을 발현하는 비-특이적 세포독성 세포가 표적 세포 상의 결합된 항체를 인식하고, 후속으로 표적 세포의 포식작용을 유발하는 세포 매개 반응을 의미한다.
본원에서 "항원 결합 도메인" 또는 "ABD"는 본원에 논의된 바와 같이 폴리펩티드 서열의 일부로서 존재할 때 표적 항원에 특이적으로 결합하는 6개의 상보성 결정 영역 (CDR)의 세트를 의미한다. 따라서, "항원 결합 도메인"은 본원에 개략된 바와 같이 표적 항원에 결합한다. 당업계에 공지된 바와 같이, 이들 CDR은 일반적으로 제 1 세트의 가변 중쇄 CDR (vhCDR 또는 VHCDR 또는 CDR-HC) 및 제 2 세트의 가변 경쇄 CDR (vlCDR 또는 VLCDR 또는 CDR-LC)로서 존재하며, 각각은 3개의 CDR, 중쇄의 경우 vhCDR1, vhCDR2, vhCDR3, 및 경쇄의 경우 vlCDR1, vlCDR2 및 vlCDR3를 포함한다. CDR은 가변 중쇄 및 가변 경쇄 도메인에 각각 존재하고, Fv 영역을 다함께 형성한다. 따라서, 일부 경우에, 항원 결합 도메인의 6개 CDR은 가변 중쇄 및 가변 경쇄에 의해 제공된다. "Fab" 형식에서, 6개 CDR의 세트는 가변 중쇄 도메인 (vh 또는 VH; vhCDR1, vhCDR2 및 vhCDR3을 포함함) 및 가변 경쇄 도메인 (vl 또는 VL; vlCDR1, vlCDR2 및 vlCDR3을 포함함)인 2개의 상이한 폴리펩티드 서열에 의해 제공되며, vh 도메인의 C-말단은 중쇄의 CH1 도메인의 N-말단에 부착되고, vl 도메인의 C-말단은 불변 경쇄 도메인의 N-말단에 부착된다 (이에 따라 경쇄를 형성함). scFv 형식에서, VH 도메인과 VL 도메인은 일반적으로 본원에 개략된 바와 같은 링커의 사용을 통해 단일 폴리펩티드 서열 내에 공유 결합되고, 이는 (N-말단으로부터 시작하여) vh-링커-vl 또는 vl-링커-vh일 수 있으며, 일반적으로 전자가 바람직하다 (사용된 형식에 따라 각 측면에 선택적 도메인 링커를 포함함). 당업계에서 이해되는 바와 같이, CDR은 가변 중쇄 및 가변 경쇄 도메인 각각에서 구조틀 영역에 의해 분리되며: 경쇄 가변 영역의 경우 이들은 FRl-vlCDR1-FR2-vlCDR2-FR3-vlCDR3-FR4이고, 중쇄 가변 영역의 경우 이들은 FRl-vhCDR1-FR2-vhCDR2-FR3-vhCDR3-FR4이며, 구조틀 영역은 인간 생식계열 서열과 높은 동일성을 나타낸다. 본 발명의 항원 결합 도메인은 Fab, Fv 및 scFv를 포함한다.
본원에서 "링커"는 scFv 및/또는 다른 항체 구조에 사용되는 링커를 의미한다. 일반적으로, 재조합 기법에 의해 생성되는, 통상적인 펩티드 결합을 포함하는 사용될 수 있는 다수의 적합한 scFv 링커가 존재한다. 링커 펩티드는 주로 Gly, Ser, Ala 또는 Thr의 아미노산 잔기를 포함한다. 링커 펩티드는 원하는 활성을 보유하도록 서로에 대해 정확한 입체구조를 취하는 방식으로 2개의 분자를 연결하는데 적절한 길이를 가져야 한다. 일 구현예에서, 링커는 약 1개 내지 50개 아미노산 길이이고, 바람직하게 약 1개 내지 30개 아미노산 길이이다. 일 구현예에서, 1개 내지 20개 아미노산 길이의 링커가 사용될 수 있으며, 일부 구현예에서 약 5개 내지 약 10개 아미노산이 용도를 찾는다. 유용한 링커에는, 예를 들어 (GS)n, (GSGGS)n, (GGGGS)n 및 (GGGS)n, 여기서 n이 적어도 1의 정수 (일반적으로 3 내지 4)인 것을 포함하는 글리신-세린 중합체, 글리신-알라닌 중합체, 알라닌-세린 중합체 및 기타 가요성 링커가 포함된다. 대안적으로, 다양한 비-단백질성 중합체는 이에 한정되지 않지만 폴리에틸렌 글리콜(PEG), 폴리프로필렌 글리콜, 폴리옥시알킬렌 또는 폴리에틸렌 글리콜과 폴리프로필렌 글리콜의 공중합체를 포함하여 링커로서 사용될 수 있으며, 즉 링커로서 용도를 찾을 수 있다. 다른 링커 서열은 CL/CH1 도메인의 모든 잔기가 아닌 임의의 길이의 CL/CH1 도메인의 임의의 서열, 예를 들어 CL/CH1 도메인의 처음 5개 내지 12개의 아미노산 잔기를 포함할 수 있다. 링커는 면역글로불린 경쇄, 예를 들어 Cκ 또는 Cλ로부터 유래할 수 있다. 링커는 예를 들어 Cγl, Cγ2, Cγ3, Cγ4, Cαl, Cα2, Cδ, Cε 및 Cμ를 포함하는 임의의 이소형의 면역글로불린 중쇄로부터 유래할 수 있다. 링커 서열은 또한 다른 단백질, 예컨대 Ig-유사 단백질 (예를 들어, TCR, FcR, KIR), 힌지 영역 유래 서열 및 다른 단백질로부터의 기타 천연 서열로부터 유래할 수 있다. 일부 구현예에서, 링커는 본원에 개괄된 바와 같이 임의의 2개의 도메인을 함께 연결하는데 사용되는 "도메인 링커"이다. 임의의 적합한 링커가 사용될 수 있을 때, 많은 구현예는 예를 들어 (GS)n, (GSGGS)n, (GGGGS)n 및 (GGGS)n, 여기서 n이 적어도 1의 정수 (일반적으로 3부터 4 내지 5까지)인 것을 포함하는 글리신-세린 중합체, 뿐만 아니라 각각의 도메인이 이의 생물학적 기능을 보유하기에 충분한 길이 및 가요성을 갖는 2개 도메인의 재조합 부착을 허용하는 임의의 펩티드 서열을 이용한다.
용어 "항체"는 가장 넓은 의미로 사용되며, 예를 들어 온전한 면역글로불린 또는 항원 결합 부분을 포함한다. 항원 결합 부분은 재조합 DNA 기법에 의해 또는 온전한 항체의 효소적 또는 화학적 절단에 의해 생성될 수 있다. 따라서, 용어 항체는 2개의 중쇄 및 2개의 경쇄의 전통적인 사량체 항체, 뿐만 아니라 Fv, Fab 및 scFv와 같은 항원 결합 단편을 포함한다. 일부 경우에, 본 발명은 본원에 개략된 바와 같이 적어도 하나의 항원 결합 도메인을 포함하는 이중특이적 항체를 제공한다.
본원에서 "변형"은 폴리펩티드 서열에서 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실 또는 단백질에 화학적으로 연결된 모이어티에 대한 변경을 의미한다. 예를 들어, 변형은 단백질에 부착된 변경된 탄수화물 또는 PEG 구조일 수 있다. 본원에서 "아미노산 변형"은, 폴리펩티드 서열에서의 아미노산 치환, 삽입 및/또는 결실을 의미한다. 명확하게, 달리 언급되지 않는 한, 아미노산 변형은 항상 DNA에 의해 코딩된 아미노산, 예를 들어 DNA 및 RNA에서 코돈을 갖는 20개의 아미노산에 대한 것이다.
본원에서 "아미노산 치환" 또는 "치환"은 모체 폴리펩티드 서열 내의 특정한 위치에서 상이한 아미노산으로 아미노산의 치환을 의미한다. 구체적으로, 일부 구현예에서, 치환은 특정한 위치에서 자연적으로 발생하지 않거나, 유기체 내에서 또는 임의의 유기체에서 자연적으로 발생하지 않는 아미노산에 대한 것이다. 예를 들어, 치환 M252Y는 변이체 폴리펩티드를 말하고, 이러한 경우 252번 위치의 글루탐산이 타이로신으로 대체된 Fc 변이체이다. 명확하게, 핵산 코딩 서열은 변경하지만, 출발 아미노산은 변경하지 않도록 조작된 단백질 (예를 들어, CGG (아르기닌을 인코딩함)를 CGA (여전히 아르기닌을 인코딩함)로 교환하여 숙주 유기체 발현 수준을 증가시킴)은 "아미노산 치환"이 아니며, 즉 동일한 단백질을 인코딩하는 새로운 유전자의 생성에도 불구하고, 단백질이 시작된 특정한 위치에서 동일한 아미노산을 갖는 경우, 이것는 아미노산 치환이 아니다.
본원에서 사용된 바 "변이 단백질", "단백질 변이체" 또는 "변이체"는 적어도 하나의 아미노산 변형에 의해 모체 단백질과 상이한 단백질을 의미한다. 단백질 변이체는 단백질 자체, 단백질을 포함하는 조성물, 또는 이를 인코딩하는 아미노산 서열을 말할 수 있다. 바람직하게, 단백질 변이체는 모체 단백질과 비교하여 적어도 하나의 아미노산 변형, 예를 들어 모체 단백질과 비교하여 약 1개 내지 약 70개의 아미노산 변형, 바람직하게 약 1개 내지 약 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 하기에 기재되는 바와 같이, 일부 구현예에서, 모체 폴리펩티드, 예를 들어 Fc 모체 폴리펩티드는 IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4로부터의 Fc 영역과 같은 인간 야생형 서열이다. 본원에서 단백질 변이체 서열은 바람직하게 모체 단백질 서열과 적어도 약 80%의 동일성, 가장 바람직하게 적어도 약 90%의 동일성, 더욱 바람직하게 적어도 약 95%, 98%, 99%의 동일성을 보유할 것이다. 변이 단백질은 변이 단백질 자체, 단백질 변이체를 포함하는 조성물, 또는 이를 인코딩하는 DNA 서열을 말할 수 있다.
따라서, 본원에 사용된 바 "항체 변이체" 또는 "변이 항체"는 하나 이상의 아미노산 변형으로 인해 모체 항체와 상이한 항체를 의미한다. 본원에 사용된 바 "IgG 변이체" 또는 "변이 IgG"는 적어도 하나의 아미노산 변형에 의해 모체 IgG (다시 말해서, 다수의 경우에, 인간 IgG 서열)와 상이한 항체를 의미하고, 본원에 사용된 바 "면역글로불린 변이체" 또는 "변이 면역글로불린"은 적어도 하나의 아미노산 변형에 의해 모체 면역글로불린 서열과 상이한 면역글로불린 서열을 의미한다. 본원에서 사용된 바 "Fc 변이체" 또는 "변이 Fc"는, Fc 도메인에 아미노산 변형을 포함하는 단백질을 의미한다. 본 발명의 Fc 변이체는 이들을 구성하는 아미노산 변형에 따라 정의된다. 항체와 관련된 본 발명에서 논의된 모든 위치의 경우, 달리 언급되지 않는 한, 아미노산 위치 번호매김은 가변 영역 번호매김에 대해 카밧에 따르고, Fc 영역을 포함한 불변 영역에 대해서 EU 인덱스에 따른다. EU 인덱스 또는 카밧 또는 EU 번호매김 방식에서와 같은 EU 인덱스는 EU 항체의 번호매김을 말한다 (Edelman et al., 1969, Proc Natl Acad Sci USA 63: 78-85, 본원에 의의 전문이 참고문헌으로 통합됨). 변형은 첨가, 결실 또는 치환일 수 있다. 치환은 자연 발생 아미노산, 및 일부 경우에 합성 아미노산을 포함할 수 있다.
본원에 사용된 바, "단백질"은 단백질, 폴리펩티드, 올리고 펩티드 및 펩티드를 포함하는 적어도 2개의 공유 결합된 아미노산을 의미한다. 펩티딜 기는 자연 발생 아미노산 및 펩티드 결합을 포함할 수 있다.
본원에서 사용된 바, "Fab" 또는 "Fab 영역"은 VH, CH1, VL 및 CL 면역글로불린 도메인을 포함하는 폴리펩티드를 의미한다. Fab은 단리된 이러한 영역, 또는 전장의 항체, 항체 단편 또는 Fab 융합 단백질의 맥락에서 이러한 영역을 의미할 수 있다.
본원에 사용된 바, "Fv" 또는 "Fv 단편" 또는 "Fv 영역"은 단일 항원 결합 도메인 (ADB)의 VL 도메인 및 VH 도메인을 포함하는 폴리펩티드를 의미한다. 당업자라면 이해할 바와 같이, 이들은 일반적으로 2개의 사슬로 구성되거나, 조합되어 (일반적으로 본원에 논의된 바와 같은 링커와 함께) scFv를 형성할 수 있다.
본원에서 사용된 바 "아미노산" 및 "아미노산 동일성"은 DNA 및 RNA에 의해 코딩되는 20개의 자연 발생 아미노산 중 하나를 의미한다.
본원에 사용된 바 "효과기 기능"은 항체 Fc 영역과 Fc 수용체 또는 리간드의 상호작용으로부터 유도되는 생화학적 과정을 의미한다. 효과기 기능은 이에 한정되지 않지만 ADCC, ADCP 및 CDC를 포함한다.
본원에 사용된 바 "Fc 감마 수용체", "FcγR" 또는 "Fc감마R"은 IgG 항체 Fc 영역에 결합하고, FcγR 유전자에 의해 인코딩되는 단백질 패밀리의 임의의 구성원을 의미한다. 인간에서 이 패밀리는 이소형 FcγRIa, FcγRIb 및 FcγRIc를 포함하는 FcγRI (CD64); 이소형 FcγRⅡa (동종이형 H131 및 R131을 포함함), FcγRⅡb (FcγRⅡb-1 및 FcγRⅡb-2를 포함함) 및 FcγRⅡc를 포함하는 FcγRⅡ (CD32); 및 이소형 FcγRⅢa (동종이형 V158 및 F158를 포함함) 및 FcγRⅢb (동종이형 FcγRⅡb-NA1 및 FcγRⅡb-NA2를 포함함)을 포함하는 FcγRⅢ (CD16) (Jefferis et al., 2002, Immunol Lett 82: 57- 65, 본원에 이의 전문이 참고문헌으로 통합됨), 뿐만 아니라 임의의 발견되지 않은 인간 FcγR 또는 FcγR 이소형 또는 동종이형을 포함하나 이에 한정되지는 않는다. 일부 경우에, 본원에 개략된 바와 같이, FcγR 수용체 중 하나 이상에 대한 결합은 감소되거나 제거된다. 예를 들어, FcγRⅢa에 대한 결합을 감소시키면 ADCC가 감소하고, 일부 경우에는 FcγRⅢa 및 FcγRⅡb에 대한 결합을 감소시키는 것이 바람직하다.
본원에 사용된 바 "FcRn" 또는 "신생아 Fc 수용체"는 IgG 항체 Fc 영역에 결합하고, 적어도 부분적으로 FcRn 유전자에 의해 인코딩되는 단백질을 의미한다. FcRn은 인간, 마우스, 래트, 토끼 및 원숭이를 포함하나 이에 한정되지 않는 임의의 유기체로부터 유래할 수 있다. 당업계에 공지된 바와 같이, 기능적 FcRn 단백질은 종종 중쇄 및 경쇄로서 지칭되는 2개의 폴리펩티드를 포함한다. 상기 경쇄는 베타-2-마이크로글로불린이고, 중쇄는 FcRn 유전자에 의해 인코딩된다. 본원에서 달리 언급되지 않는 한, FcRn 또는 FcRn 단백질은 FcRn 중쇄와 베타-2-마이크로글로불린의 복합체를 말한다.
본원에서 사용된 바 "모체 폴리펩티드"는 변이체를 생성하기 위해 후속적으로 변형되는 출발 폴리펩티드를 의미한다. 모체 폴리펩티드는 자연 발생 폴리펩티드, 또는 자연 발생 폴리펩티드의 변이체 또는 조작된 버전일 수 있다. 모체 폴리펩티드는 폴리펩티드 자체, 모체 폴리펩티드를 포함하는 조성물, 또는 이를 인코딩하는 아미노산 서열을 말할 수 있다. 따라서, 본원에 사용된 바 "모체 면역글로불린"은 변이체를 생성하기 위해 변형되는 변형되지 않은 면역글로불린 폴리펩티드를 의미하고, 본원에 사용된 바 "모체 항체"는 변이 항체를 생성하기 위해 변형되는 변형되지 않은 항체를 의미한다. "모체 항체"는 하기에 개략된 바와 같이 공지된 시판되는 재조합으로 생산된 항체를 포함함을 주목해야 한다.
본원에서 "중쇄 불변 영역"은 일반적으로 인간 IgG1, IgG2 또는 IgG4로부터의 항체의 CH1-힌지-CH2-CH3 부분을 의미한다.
본원에서 사용된 바 "표적 항원"은 주어진 항체의 가변 영역에 의해 특이적으로 결합되는 분자를 의미한다. 본 경우에, 표적 항원은 BTLA 단백질이다.
본원에서 사용된 바, "표적 세포"는 표적 항원을 발현하는 세포를 의미한다.
본원에서 사용된 바, "가변 영역"은 카파, 람다 및 중쇄 면역글로불린 유전자 좌위를 각각 만드는 임의의 V카파, V람다 및/또는 VH 유전자에 의해 실질적으로 인코딩되는 하나 이상의 Ig 도메인을 포함하는 면역글로불린의 영역을 의미한다.
본원에서 "야생형 또는 WT"는 대립유전자 변이를 포함하여 자연에서 발견되는 아미노산 서열 또는 뉴클레오티드 서열을 의미한다. WT 단백질은 의도적으로 변형되지 않은 아미노산 서열 또는 뉴클레오티드 서열을 갖는다.
본원에 사용된 바, "위치"는 단백질 서열 내의 위치를 의미한다. 위치는 순차적으로, 또는 확립된 형식, 예를 들어 항체 번호매김에 대한 EU 인덱스에 따라 번호매김될 수 있다.
본원에서 사용된 바, "잔기"는 단백질 및 이의 관련 아미노산 동일성의 위치를 의미한다. 예를 들어, 아스파라긴 297번 (Asn297 또는 N297로도 지칭됨)은 인간 항체 IgG1에서 297번 위치의 잔기이다.
본 발명의 항체는 일반적으로 재조합이다. "재조합"은 항체가 외래 숙주 세포에서 재조합 핵산 기법을 사용하여 생성되는 것을 의미한다.
단백질 서열과 관련하여 "아미노산 서열 동일성 백분율 (%)"은 서열을 정렬하고, 필요한 경우 갭을 도입하여 최대 서열 동일성 백분율을 달성한 이후에 임의의 보존적 치환을 서열 동일성의 일부로서 고려하지 않고, 특이적 (모체) 서열의 아미노산 잔기와 동일한 후보 서열 내의 아미노산 잔기의 백분율 (%)로서 정의된다. 아미노산 서열 동일성 백분율을 결정하려는 목적의 정렬은, 예를 들어 BLAST, BLAST-2, ALIGN 또는 메가얼라인 (DNASTAR) 소프트웨어와 같은 공개적으로 입수가능한 컴퓨터 소프트웨어를 사용하여 당업계의 기술에 속하는 다양한 방식으로 달성될 수 있다. 당업자라면 비교되는 전장의 서열과 대비하여 최대 정렬을 달성하는데 필요한 임의의 알고리즘을 포함하여, 정렬을 측정하는 적절한 매개변수를 결정할 수 있다. 구체적인 프로그램 하나는 본원에 참조문헌으로 통합되어 있는 미국 특허출원 20160244525의 단락 [0279] 내지 [0280]에 개략된 ALIGN-2 프로그램이다. 핵산 서열에 대한 또 다른 대략적인 정렬은 스미스 및 워터만의 로칼 상동성 알고리즘 (Smith and Waterman, Advances in Applied Mathematics, 2: 482-489, 1981)에 의해 제공된다. 이러한 알고리즘은 데이오프에 의해 개발된 점수 부여 매트릭스를 사용함으로써 아미노산 서열에 적용되고 (Dayhoff, Atlas of Protein Sequences and Structure, M.O. Dayhoff ed., 5 suppl. 3: 353-358, National Biomedical Research Foundation, Washington, D.C., USA), 그립스코프에 의해 정규화될 수 있다 (Gribskov, Nucl. Acids Res. 14(6): 6745-6763, 1986).
서열의 동일성 백분율을 결정하는 이러한 알고리즘의 구현 예는 "베스트핏" 유틸리티 애플리케이션의 유전학 컴퓨터 그룹 (위스콘신 매디슨)에 의해 제공된다. 상기 방법에 대한 기본 매개변수는 위스콘신 서열 분석 패키지 프로그램 매뉴얼, 버전 8 (1995)(위스콘신 매디슨, 유전학 컴퓨터 그룹으로부터 입수가능함)에 기술되어 있다. 본 발명의 맥락에서 동일성 백분율을 확립하는 또 다른 방법은 콜린스 및 스투록 (John F. Collins 및 Shane S. Sturrok)이 개발하고, 인텔리제네틱스사 (마운틴뷰, 캘리포니아)가 배포하며, 에딘버러 대학이 저작권을 갖는 프로그램의 MPSRCH 패키지를 사용하는 것이다. 이 패키지 모음으로부터, 기본 매개변수가 점수 부여 표에 사용되는 스미스-워터만 알고리즘을 사용할 수 있다 (예를 들어, 갭 개방 패널티 12점, 갭 확장 패널티 1점, 갭 6점). 생성된 데이터로부터, "매칭" 값은 "서열 동일성"을 반영한다. 서열 간의 동일성 또는 유사성 백분율을 계산하는데 적합한 다른 프로그램은 일반적으로 당업계에 공지되어 있으며, 예를 들어 또 다른 정렬 프로그램은 기본 매개변수와 함께 사용되는 BLAST이다. 예를 들어, BLASTN 및 BLASTP는 다음의 기본 매개변수를 사용하여 사용될 수 있다: 유전자 코드= 표준; 필터 = 없음; 가닥 = 둘 다; 컷오프 = 60; 기대 = 10; 매트릭스 = BLOSUM62; 설명= 50개 서열; 선별 기준 = 높은 점수; 데이터베이스 = 비중복, 진뱅크 + EMBL + DDBJ + PDB + 진뱅크 CDS 번역 + 스위스 단백질 + Sp 업데이트 + PIR. 이들 프로그램의 세부사항은 blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi 앞에 http://를 입력하여 나오는 인터넷 주소에서 찾을 수 있다.
본 발명의 아미노산 서열 ("본 발명의 서열")과 모체 아미노산 서열 사이의 동일성 정도는, 2가지 서열의 정렬에서 정확한 매칭의 수를 "본 발명의 서열"의 길이 또는 모체 서열의 길이 중 가장 짧은 것으로 나눈 값으로서 계산된다. 결과는 동일성 백분율로 표현된다.
일부 구현예에서, 2개 이상의 아미노산 서열은 적어도 50%, 60%, 70%, 80% 또는 90% 동일하다. 일부 구현예에서, 2개 이상의 아미노산 서열은 적어도 95%, 97%, 98%, 99% 또는 심지어 100% 동일하다.
특정한 항원 또는 에피토프에 대해 "특이적 결합" 또는 "특이적으로 결합하다" 또는 "특이적"은, 비-특이적 상호작용과는 측정가능하게 상이한 결합을 의미한다. 특이적 결합은, 예를 들어 일반적으로 결합 활성을 갖지 않는 유사한 구조의 분자인 대조군 분자의 결합과 비교하여 분자의 결합을 결정함으로써 측정될 수 있다. 예를 들어, 특이적 결합은 표적과 유사한 대조군 분자와의 경쟁에 의해 측정될 수 있다.
본원에서 사용된 바, 용어 "Kassoc"또는 "Ka"는 특정한 항체-항원 상호작용의 회합 속도를 말하려고 의도되는 반면, 본원에서 사용된 바 용어 "Kdis"또는 "Kd"는 특정한 항체-항원 상호작용의 해리 속도를 말하려고 의도된다. 본원에 사용된 바, 용어 "KD"는 Kd 대 Ka의 비율 (즉, Kd/Ka)로부터 획득되고, 몰 농도 (M)로서 표현되는 해리 상수를 말하려고 의도된다. 항체에 대한 KD 값은 당업계에 잘 확립된 방법을 사용하여 결정될 수 있다. 일부 구현예에서, 항체의 KD를 결정하는 방법은 표면 플라즈몬 공명을 사용하고, 예를 들어 비아코아®시스템과 같은 바이오센서 시스템을 사용하는 것에 의한다. 일부 구현예에서, 항체의 KD는 생체층 간섭측정법에 의해 결정된다. 일부 구현예에서, KD 값은 고정화되어 측정된다. 다른 구현예에서, KD 값은 고정화된 항체 (예를 들어, 모체 마우스 항체, 키메라 항체 또는 인간화 항체 변이체)로 측정된다. 특정 구현예에서, KD 값은 2가 결합 방식으로 측정된다. 다른 구현예에서,KD 값은 1가 결합 방식으로 측정된다.
"질환"은 인간을 포함한 동물의 건강 상태를 포함하며, 여기서 동물은 항상성을 유지할 수 없고, 질환이 개선되지 않으면 동물의 건강이 계속 악화된다.
대조적으로, 인간을 포함한 동물의 "장애"는 동물이 항상성을 유지할 수 있는 건강 상태를 포함하지만, 동물의 건강 상태가 장애가 없는 경우보다 덜 유리한 상태를 포함한다. 치료하지 않고 방치하면 장애가 반드시 동물의 건강 상태를 추가로 감소시키는 것은 아니다.
용어 "치료", "치료하는", "치료하다" 등은, 원하는 약리학적 및/또는 생리학적 효과를 획득하는 것을 말한다. 효과는 질환 또는 이의 증상을 완전히 또는 부분적으로 예방하거나, 질환 또는 이의 증상의 가능성을 감소시키는 측면에서 예방적일 수 있고/있거나, 질환에 대한 부분적 또는 완전한 치유 및/또는 질환에 기인하는 부작용 측면에서 치료적일 수 있다. 본원에 사용된 바, "치료"는 포유동물, 구체적으로 인간에서의 질환의 임의의 치료를 포괄하며, (a) 질환에 걸리기 쉬울 수 있지만 아직 걸린 것으로 진단되지 않은 대상체에서 질환이 발생하지 않도록 예방하는 것; (b) 질환을 억제하고, 즉 이의 발생 또는 진행을 정지시키는 것; 및 (c) 질환을 완화시키고, 예를 들어, 질환의 퇴행을 유도하고/거나 하나 이상의 질환 증상을 완화시키는 것을 포함한다. "치료"는 또한 심지어 질환 또는 병태의 부재 시에도 약리학적 효과를 제공하기 위하여 제제의 전달을 포괄하도록 의미된다. 예를 들어, "치료"는 면역 반응을 유도하거나, 예로 백신의 경우 질환 병태의 부재 시 면역력을 부여할 수 있는 조성물의 전달을 포괄한다.
본원에 사용된 바, 용어 "포유동물"은 마우스 및 햄스터와 같은 로덴티아 목의 포유동물 및 토끼와 같은 로고모르파 목의 포유동물를 포함하나 이에 한정되지 않는 임의의 포유동물를 말한다. 일부 구현예에서, 포유동물은 고양이 (고양이) 및 개 (개)를 포함하는 카니보라 목으로부터 유래한다. 일부 구현예에서, 포유동물은 소 (소) 및 돼지 (돼지)를 포함하는 아르티오닥틸라 목 또는 말 (말)을 포함하는 페르소닥틸라 목으로부터 유래한다. 포유동물은 영장류, 세보이드, 시모이드 (원숭이) 목 또는 유인원 (인간과 유인원) 목에 속하는 것이 가장 바람직하다. 일부 구현예에서, 포유동물은 인간이다. 일부 구현예에서, 포유동물은 시노몰구스 원숭이이다.
본원에 사용된 바, 용어 "퇴행" 및 이로부터 파생된 단어는 반드시 100% 또는 완전한 퇴행을 의미하지는 않는다. 오히려, 당업자가 잠재적인 이점 또는 치료 효과를 갖는 것으로서 인식하는 퇴행의 다양한 정도가 존재한다. 이와 관련하여, 개시된 방법은 포유동물에서 암의 퇴행의 임의 수준 또는 임의의 양을 제공할 수 있다. 또한, 본 발명의 방법에 의해 제공되는 퇴행은 질환, 예로 암의 하나 이상의 병태 또는 증상의 퇴행을 포함할 수 있다. 또한, 본원의 목적으로, "퇴행"은 질환의 발병 지연, 증상의 발병 지연 및/또는 이의 병태의 발병 지연을 포괄할 수 있다. 진행성 질환 및 장애와 관련하여, "퇴행"은 질환 또는 장애의 진행을 늦추고/거나, 질환 또는 장애의 증상 진행을 늦추고/거나, 이의 병태의 진행을 늦추는 것을 포괄할 수 있다.
조성물의 "유효량" 또는 "치료적 유효량"은 조성물이 투여되는 대상체에게 유익한 효과를 제공하기에 충분한 조성물의 해당 양을 포함한다. 전달 비히클의 "유효량"은 조성물을 효과적으로 결합하거나 전달하기에 충분한 해당 양을 포함한다.
"개인" 또는 "숙주" 또는 "대상체" 또는 "환자"는 진단, 치료 또는 요법이 필요한 임의의 포유동물 대상체, 특히 인간을 의미한다. 다른 대상체는 시노몰구스 원숭이, 소, 개, 고양이, 기니피그, 토끼, 래트, 마우스, 말 등을 포함한다.
본원에 사용된 바, 용어 "조합하여"는 예를 들어, 제 1 요법이 제 2 요법의 전체 투여 과정 동안 투여되는 경우; 제 1 요법이 제 2 요법의 투여와 중첩되는 기간 동안 투여되는 경우, 예를 들어 제 1 요법의 투여가 제 2 요법의 투여 이전에 시작되고 제 1 요법의 투여가 제 2 요법의 투여 이전에 종료되는 경우; 제 2 요법의 투여는 제 1 요법의 투여 이전에 시작되고, 제 2 요법의 투여는 제 1 요법의 투여가 종료되기 이전에 종료되는 경우; 제 1 요법의 투여는 제 2 요법의 투여가 시작되기 이전에 시작되고, 제 2 요법의 투여는 제 1 요법의 투여가 종료되기 이전에 종료되는 경우; 제 2 요법의 투여는 제 1 요법의 투여가 시작되기 이전에 시작되고, 제 1 요법의 투여는 제 2 요법의 투여가 종료되기 이전에 종료되는 경우의 사용을 말한다. 이와 같이, "조합하여"는 또한 2개 이상의 요법의 투여가 관여하는 섭생을 말할 수 있다. 본원에 사용된 바. "조합하여"는 또한 동일하거나 상이한 제형물로, 동일하거나 상이한 경로에 의해 그리고 동일하거나 상이한 용량 형태 유형으로 투여될 수 있는 둘 이상의 요법의 투여를 말한다.
용어 "인코딩"은 뉴클레오티드의 정의된 서열 (즉, rRNA, tRNA 및 mRNA) 또는 아미노산의 정의된 서열 및 이로부터 생성된 생물학적 성질을 갖는 생물학적 공정에서의 다른 중합체 및 거대분자의 합성을 위한 주형으로서 작용하도록 폴리뉴클레오티드, 예컨대 유전자, cDNA, 또는 mRNA에서 뉴클레오티드의 특이적 서열의 고유한 성질을 포함한다. 따라서, 유전자는, 예를 들어 해당 유전자에 상응하는 mRNA의 전사 및 번역이 세포 또는 다른 생물학적 시스템에서 단백질을 생성하는 경우, 상기 단백질을 인코딩한다. 뉴클레오티드 서열이 mRNA 서열과 동일하고, 보통 서열 목록에 제공되는 코딩 가닥, 및 유전자 또는 cDNA의 전사를 위한 주형으로서 사용되는 비-코딩 가닥 둘 다는 해당 유전자 또는 cDNA의 단백질 또는 다른 산물을 인코딩하는 것으로서 지칭될 수 있다.
용어 "핵산"은 단일 가닥, 이중 가닥, 올리고뉴클레오티드 또는 폴리뉴클레오티드를 포함하는 임의의 형태로 하나 이상의 뉴클레오티드를 갖는 RNA 또는 DNA 분자를 포함한다. 용어 "뉴클레오티드 서열"은 올리고뉴클레오티드의 뉴클레오티드 또는 단일 가닥 형태의 핵산의 폴리뉴클레오티드의 순서를 포함한다.
"핵산 구조물"은 자연에서 함께 발견되지 않는 하나 이상의 기능적 단위를 포함하도록 제작된 핵산 서열을 의미한다. 예로는 원형, 선형, 이중 가닥, 염색체외 DNA 분자 (플라스미드), 코스미드 (람다 파지로부터의 COS 서열을 포함하는 플라스미드), 비-천연 핵산 서열을 포함하는 바이러스 게놈 등을 포함한다.
본원에 사용된 바, 용어 "작동가능하게 연결된"은 제 2 폴리뉴클레오티드와 기능적 관계에 있는 폴리뉴클레오티드, 예로 2개의 폴리뉴클레오티드 중 적어도 하나가 나머지에 대해 특징이 되는 생리학적 효과를 발휘할 수 있는 방식으로 핵산 모이어티 내에 배열된 2개의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 단일 가닥 또는 이중 가닥 핵산 모이어티를 포함한다. 예로서, 유전자의 코딩 영역에 작동가능하게 연결된 프로모터는 코딩 영역의 전사를 촉진할 수 있다. 작동가능한 연결을 나타낼 때 지정된 순서는 중요하지 않다. 예를 들어, 문구 "프로모터가 뉴클레오티드 서열에 작동가능하게 연결되다" 및 "뉴클레오티드 서열이 프로모터에 작동가능하게 연결되다"는 본원에서 상호교환가능하게 사용되며, 동등한 것으로 간주된다. 일부 경우에, 원하는 단백질을 인코딩하는 핵산이 프로모터/조절 서열을 추가로 포함할 때, 프로모터/조절 서열은 원하는 단백질 코딩 서열의 5' 말단에 위치하여 세포에서 원하는 단백질의 발현을 유도한다.
본원에서 상호교환가능하게 사용되는 용어 "올리고뉴클레오티드", "폴리뉴클레오티드" 및 "핵산 분자"는 리보뉴클레오티드 또는 데옥시리보뉴클레오티드 중 어느 하나인 임의의 길이의 뉴클레오티드의 중합체 형태를 말한다. 따라서, 이 용어는 단일-, 이중- 또는 다중-가닥 DNA 또는 RNA, 게놈 DNA, cDNA, DNA-RNA 하이브리드, 또는 기타 퓨린과 피리미딘 염기, 또는 천연, 화학적으로 또는 생화학적으로 변형된, 비-천연 또는 유도체화된 뉴클레오티드 염기를 포함하는 중합체를 포함하나 이에 한정되지는 않는다. 폴리뉴클레오티드의 골격은 당 및 포스페이트 기 (전형적으로 RNA 또는 DNA에서 발견될 수 있음), 또는 변형된 또는 치환된 당 또는 포스페이트 기를 포함할 수 있다.
폴리뉴클레오티드에 적용되는 용어 "재조합"은 폴리뉴클레오티드가 클로닝, 제한효소 처리 또는 라이게이션 단계, 및 자연에서 발견되는 폴리뉴클레오티드와 구별되고/거나 상이한 구조물을 생성하는 기타 절차의 다양한 조합의 산물인 것을 의미한다. 이 용어는 각각 고유의 폴리뉴클레오티드 구조물의 복제물 및 고유의 바이러스 구조물의 자손을 포함한다.
본원에 사용된 바, 용어 "프로모터"는 원하는 분자를 인코딩하는 핵산 서열과 같은 전사될 핵산 서열에 작동가능하게 연결된 DNA 서열을 포함한다. 프로모터는 일반적으로 전사될 핵산 서열의 상류에 위치하며, RNA 중합효소 및 기타 전사인자에 의한 특이적 결합 부위를 제공한다.
"벡터"는 유전자 서열을 표적 세포로 전달할 수 있다. 전형적으로, "벡터 구조물", "발현 벡터" 및 "유전자 전달 벡터"는 관심있는 유전자의 발현을 안내할 수 있고, 유전자 서열을 표적 세포로 전달할 수 있는 임의의 핵산 구조물을 의미하며, 이는 벡터의 전부 또는 일부의 게놈 혼입, 또는 염색체외 요소로서 벡터의 일시적 또는 유전가능한 유지에 의해 달성될 수 있다. 따라서, 이 용어는 클로닝, 발현 비히클, 뿐만 아니라 혼입 벡터를 포함한다.
본원에 사용된 바, 용어 "조절 (regulatory) 요소"는 핵산 서열의 일부 양태의 발현을 조절하는 뉴클레오티드 서열을 포함한다. 조절 요소의 예로는 예시적으로 인핸서, 내부 리보좀 진입 부위 (IRES), 인트론, 복제 원점, 폴리아데닐화 신호 (pA), 프로모터, 인핸서, 전사 종결 서열, 및 상류 조절 도메인을 포함하고, 이는 핵산 서열의 복제, 전사 및/또는 전사후 프로세싱에 기여한다. 경우에 따라, 조절 요소는 시스 조절 DNA 요소, 뿐만 아니라 전이가능한 요소 (TE)도 포함할 수 있다. 당업자라면 일상적인 실험만으로 발현 구조물에서 이들 및 다른 조절 요소를 선택하여 사용할 수 있다. 발현 구조물은 유전자 재조합 접근법을 사용하거나 잘 알려진 방법을 사용하여 합성적으로 생성될 수 있다.
"조절 요소" 또는 "조절 서열"은 폴리뉴클레오티드의 복제, 증식, 전사, 스플라이싱, 번역 또는 분해를 포함하여 폴리뉴클레오티드의 기능적 조절에 기여하는 분자의 상호작용에 관여하는 뉴클레오티드 서열이다. 조절은 공정의 빈도, 속도 또는 특이성에 영향을 줄 수 있으며, 본질적으로 증진되거나 억제될 수 있다. 당업계에 공지된 조절 요소는, 예를 들어 프로모터 및 인핸서와 같은 전사 조절 서열을 포함한다. 프로모터는 특정 조건 하에 RNA 중합효소에 결합하고 보통 프로모터로부터 하류 (3' 방향)에 위치한 코딩 영역의 전사를 개시할 수 있는 DNA 영역이다.
본원에 사용되는 아미노산 잔기가 "인산화"되는 진술은 아미노산 잔기의 측쇄에 인산기가 에스테르 결합되는 것을 의미한다. 인산화될 수 있는 전형적인 아미노산 잔기는 세린 (Ser), 트레오닌 (Thr) 및 타이로신 (Tyr)을 포함한다.
본원에 사용된 바, 용어 "약제학적 조성물"은 조성물을생체내 또는 생체외에서 진단 또는 치료 용도에 특히 적합하게 하는 활성 제제와 불활성 또는 활성 담체의 조합을 말한다.
본원에 사용된 바, 용어 "약제학적으로 허용가능한 담체"는 포스페이트 완충 식염수 용액, 물, 에멀젼 (예로, 오일/물 또는 물/오일 에멀젼과 같음) 및 다양한 유형의 습윤제와 같은 임의의 표준 약제학적 담체를 말한다. 조성물은 또한 안정화제 및 방부제를 포함할 수 있다. 예를 들어, 담체, 안정화제 및 아쥬반트의 경우, 예로 Martin, Remington's Pharmaceutical Sciences, 제 15판, Mack Publ. Co., Easton, PA [1975] 참조.
상세한 설명 전반에 걸쳐, 조성물이 특이적 구성성분을 갖거나 포함하거나 포함하는 것으로서 기술되는 경우, 또는 공정 및 방법이 특이적 단계를 갖거나 포함하거나 포함하는 것으로 기술되는 경우에, 추가적으로 인용된 구성성분으로 필수적으로 구성되거나 이로 구성되는 본 발명의 구성성분이 존재하고, 인용된 프로세싱 단계로 필수적으로 구성되거나 이로 구성된 본 발명에 따른 공정 및 방법이 존재하는 것으로 고려된다.
일반적으로, 백분율을 지정하는 조성물은 달리 지정되지 않는 한 중량 기준이다. 또한, 변수에 정의가 수반되지 않으면 변수의 이전의 정의가 통제한다.
본 발명의 다양한 양태는 하기 섹션에 설명된다. 그러나, 하나의 특정한 섹션에서 설명된 본 발명의 양태는 임의의 특정한 섹션에 한정되지 않는다.
I . 항체
본 발명은 신규한 항-FCMR 항체를 제공한다. 이러한 항체는 인간 FCMR에 결합한다. 표 1은 인간 FCMR에 표 1에 나타낸 바와 같은 조합으로 결합할 수 있는 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역의 펩티드 서열을 나열한다. 일부 구현예에서, 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 Fab 형식으로 배열된다. 일부 구현예에서, 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역은 다함께 융합되어 scFv를 형성한다.
인간 FCMR에게로 유도되는 마우스 항체는 통상적인 마우스 단일클론 항체 기법을 사용하여 생성되었다. 간략하게, 마우스 (균주 SJL/J)에 재조합 인간 FCMR-Fc를 접종하였다. 추가접종 이후, 항체 역가는 관련되지 않은 His6 태그화 단백질을 대조군으로서 사용하여 ELISA에 의해 결정되었다. 융합을 위해 선별된 마우스를 희생시키고, 융합 파트너로서 P3X63Ag8.653 마우스 골수종 세포주를 사용하여 하이브리도마 융합을 수행하였다. 클론은 제한 희석에 의해 단리하고, 하이브리도마 상청액의 ELISA에 의해 선별하였다. 재조합 인간 FCMR-Fc를 ELISA 검정법의 기질로서 사용하였다.
하이브리도마 mRNA는 cDNA로 전사되고, cDNA 말단의 5'-급속 증폭 (RACE)에 의해 증폭되었다. PCR 산물을 적절한 시퀀싱 벡터에 클로닝하고, 디데옥시 생거 방법에 의해 서열결정하였다. 각 클론의 클론성을 검증하기 위해 다수의 사본을 서열결정하였다. 번역된 단백질 서열을 NCBI IgBLAST 검색 도구 (Ye, J., et al., 2013, Nucleic Acids Res. 41, W34-40)에 입력하여 CDR을 식별하였다.
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
Figure pct00004
일부 구현예에서, 본 발명의 항-FCMR 항체는 서열번호 1과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 2와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 13을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 14를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 15를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 16을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 17을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 18을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가의 구현예에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-FCMR 항체는 인간 FCMR에 대한 결합을 유지한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항-FCMR 항체는 서열번호 3과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 4와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 19를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 20을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 21을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 22를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 23을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 24를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 추가의 구현예에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-FCMR 항체는 인간 FCMR에 대한 결합을 유지한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항-FCMR 항체는 서열번호 5와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 6과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 25를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 26을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 27을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 28을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 29를 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 30을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가의 구현예에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-FCMR 항체는 인간 FCMR에 대한 결합을 유지한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항-FCMR 항체는 서열번호 7과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 8과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 31을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 32를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 33을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 34를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 35를 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 36을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가의 구현예에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-FCMR 항체는 인간 FCMR에 대한 결합을 유지한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항-FCMR 항체는 서열번호 9와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 10과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 37을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 38을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 39를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 40을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 41을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 42를 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가의 구현예에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-FCMR 항체는 인간 FCMR에 대한 결합을 유지한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항-FCMR 항체는 서열번호 11과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 12와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 갖는 경쇄 가변 영역을 포함한다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 서열번호 43을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 44를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 45를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 46을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 47을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 48을 포함하는 vlCDR3을 포함한다. 일부 구현예에서, 이러한 6개의 CDR 중 하나 이상은 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 아미노산 변형을 갖는다. 추가의 구현예에서, 단일 CDR은 1개 또는 2개의 아미노산 치환을 포함하고, 변형된 항-FCMR 항체는 인간 FCMR에 대한 결합을 유지한다.
중쇄 및 경쇄 가변 영역 및/또는 CDR에서 본원에 기재된 서열 변이체에 추가하여, 중쇄 및/또는 경쇄 가변 영역(들)의 구조틀 영역(들)에서 변경도 만들어질 수 있다. 일부 구현예에서, 구조틀 영역 (예로, CDR를 배제함)의 변이체는 생식계열 서열에 대해 적어도 약 80%, 85%, 90% 또는 95%의 동일성을 보유한다. 변이체는 경쇄 V-유전자, 경쇄 J-유전지, 중쇄 V-유전자, 중쇄 J-유전자 및 중쇄 D-유전자 대립 유전자 중 어느 하나에 대해 적어도 약 80%, 85%, 90% 또는 95%의 동일성을 보유하도록 만들어질 수 있다.
일부 구현예에서, 6개의 CDR이 변경되지 않게 유지하면서 생식계열 유전자 서열에 대해 적어도 80%, 85%, 90% 또는 95%의 동일성을 보유하는 구조틀 영역에서 변이가 만들어진다.
일부 구현예에서, 생식계열 유전자 서열 및 6개의 CDR에 대해 적어도 80%, 85%, 90% 또는 95%의 동일성을 보유하는 구조틀 영역 둘 다에서 변이가 만들어진다. CDR은 아미노산 변형 (예를 들어, CDR의 세트에서 1개, 2개, 3개, 4개 또는 5개의 아미노산 변형)을 갖을 수 있다 (즉, 6개 CDR의 세트에서 변경의 총 수가 6개 미만의 아미노산 변형인 한 CDR이 임의의 CDR 조합이 변경되면서 변형될 수 있고; 예를 들어 vlCDR1에서 1개의 변경, vhCDR2에서 2개의 변경, vhCDR3에서의 변경 없음 등이 존재할 수 있음).
본원에 기술된 서열로부터 CDR 및/또는 중쇄 및 경쇄의 가변 영역의 아미노산 서열을 선택하고, 적절한 경우 이들을 항체의 중쇄 및 경쇄의 구조틀 영역 및/또는 불변 영역의 아미노산 서열과 조합함으로써, 당업자라면 본 발명에 따른 항-FCMR 항체를 설계할 수 있을 것이다. 본 발명에 기재된 항체 구조틀 영역 및/또는 불변 영역 (Fc 도메인)은 인간, 토끼, 개, 고양이, 마우스, 말 또는 원숭이와 같은 임의의 종의 항체로부터 유래할 수 있다.
일부 구현예에서, 불변 영역은 인간으로부터 유래하고, IgG, IgA, IgM, IgE 및 IgD 아형 또는 이들의 변이체로부터 유래한 중쇄 불변 영역, 및 카파 또는 람다 아형 또는 이들의 변이체로부터 유래한 경쇄 불변 영역을 포함한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역은 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4를 포함하는 인간 IgG로부터 유래한다. 일부 구현예에서, 중쇄 불변 영역의 아미노산 서열은 인간 IgG1, IgG2, IgG3, 또는 IgG4 불변 영역과 적어도 80%, 85%, 90%, 또는 95% 동일하다. 일부 다른 구현예에서, 불변 영역의 아미노산 서열은 토끼, 개, 고양이, 마우스, 말 또는 원숭이와 같은 또 다른 포유동물로부터의 항체 불변 영역과 적어도 80%, 85%, 90% 또는 95% 동일하다. 일부 구현예에서, 항체 불변 영역은 힌지, CH2 도메인, CH3 도메인 및 선택적으로 CH1 도메인을 포함한다.
일부 구현예에서, 본원에 기술된 항체는 상이한 종으로부터의 혼합물로부터 유래할 수 있고, 예로 키메라 항체 및/또는 인간화 항체를 형성한다. 일반적으로, "키메라 항체" 및 "인간화 항체" 모두는 하나 이상의 종으로부터의 영역을 조합하는 항체를 말한다. 예를 들어, "키메라 항체"는 통상적으로 마우스 (또는 일부 경우에 래트)로부터의 가변 영역(들) 및 인간으로부터의 불변 영역(들)을 포함한다. "인간화 항체"는 일반적으로 가변 도메인 구조틀 영역을 인간 항체에서 발견되는 서열로 교체한 비-인간 항체를 말한다. 일반적으로, 인간화 항체에서, CDR을 제외한 전체 항체는 인간 기원의 폴리뉴클레오티드에 의해 인코딩되거나, 이의 CDR 내부를 제외하고는 이러한 항체와 동일하다. 비-인간 유기체에서 기원하는 핵산에 의해 일부 또는 전부가 인코딩되는 CDR은 인간 항체 가변 영역의 베타-시트 구조틀 내에 이식되어 항체를 생성하며, 이의 특이성은 이식된 CDR에 의해 결정된다. 이러한 항체의 생성은 예를 들어 국제특허출원 WO 92/11018; Jones, 1986, Nature 321: 522-525; Verhoeyen et al., 1988, Science 239: 1534-1536에 기재되어 있으며, 이들 모두는 전문이 참고문헌으로 통합된다. 선택된 수여체 구조틀 잔기의 상응하는 공여체 잔기로의 "역돌연변이"는 초기 이식된 구조물에서 손실된 친화성을 회복하도록 종종 요구된다 (미국 특허 US 5530101; US 5585089; US 5693761; US 5693762; US 6180370; US 5859205; US 5821337; US 6054297; US 6407213, 모두가 전문이 참고문헌으로 통합됨). 인간화 항체는 또한 최적으로 면역글로불린의 불변 영역의 적어도 일부, 전형적으로 인간 면역글로불린의 일부를 포함할 것이고, 따라서 전형적으로 인간 Fc 영역을 포함할 것이다. 인간화 항체는 또한 예를 들어 본원에 전문이 참고문헌으로 통합되는 Roque et al., 2004, Biotechnol. Prog.20: 639-654에 기재된 바와 같이, 유전적으로 조작된 면역계를 갖는 마우스를 사용하여 생성될 수 있다. 비-인간 항체를 인간화하고 재성형하기 위한 다양한 기법 및 방법이 당업계에 널리 공지되어 있다 (Tsurushita & Vasquez, 2004, Humanization of Monoclonal Antibodies, Molecular Biology of B Cells, 533-545, Elsevier Science (USA)) 및 이에 인용된 참고문헌, 모두가 전문이 참고문헌으로 통합됨). 인간화 방법은 모두가 본원에 참고문헌으로 통합되는 Jones et al., 1986, Nature 321: 522-525; Riechmann et al.,1988; Nature 332: 323-329; Verhoeyen et al., 1988, Science, 239: 1534-1536; Queen et al., 1989, Proc. Natl. Acad. Sci., USA 86: 10029-33; He et al., 1998, J. Immunol. 160: 1029-1035; Carter et al., 1992, Proc. Natl. Acad. Sci., USA 89: 4285-9; Presta et al., 1997, Cancer Res. 57(20): 4593-9; Gorman et al., 1991, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 88: 4181-4185; O'Connor et al., 1998, Protein Eng. 11: 321-8에 기재된 방법을 포함하나, 이에 한정되지 않는다. 비-인간 항체 가변 영역의 면역원성을 감소시키는 인간화 또는 기타 방법은, 예를 들어 본원에 전문이 참고문헌으로 통합되는 Roguska et al., 1994, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 91: 969-973에 기재된 바와 같은 재표면화 방법을 포함할 수 있다. 다른 인간화 방법은 CDR의 일부만의 이식이 관여할 수 있으며, 이에는 본원에 전문이 참고문헌으로 통합되는 Tan et al., 2002, J. Immunol. 169: 1119-1125; De Pascalis et al., 2002, J. Immunol. 169: 3076-3084에 기재된 방법이 포함되나, 이에 한정되지 않는다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항체는 특정 인간 생식계열 중쇄 면역글로불린 유전자로부터 유래한 중쇄 가변 영역 및/또는 특정 인간 생식계열 경쇄 면역글로불린 유전자로부터 유래한 경쇄 가변 영역을 포함한다. 이러한 항체는 예를 들어 자연 발생 체세포 돌연변이 또는 부위 유도된 돌연변이의 고의적인 도입으로 인해 인간 생식계열 서열과 비교하여 아미노산 차이를 포함할 수 있다. 그러나, 인간화 항체는 전형적으로 아미노산 서열에서 인간 생식계열 면역글로불린 유전자에 의해 인코딩된 아미노산 서열과 적어도 80% 동일하며, 다른 종의 생식계열 면역글로불린 아미노산 서열 (예로, 마우스 생식계열 서열)과 비교할 때 항체를 인간 서열에서 유래한 것으로서 식별하는 아미노산 잔기를 포함한다. 특정 경우에, 인간화 항체는 아미노산 서열에서 인간 생식계열 면역글로불린 유전자에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%, 또는 심지어 적어도 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일할 수 있다. 전형적으로, 특정한 인간 생식계열 서열로부터 유래한 인간화 항체는 인간 생식계열 면역글로불린 유전자에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 10개 내지 20개 이하의 아미노산 차이를 나타낼 것이다. 특정 경우에서, 인간화 항체는 생식계열 면역글로불린 유전자에 의해 인코딩되는 아미노산 서열과 5개 이하 또는 심지어 4개, 3개, 2개 또는 1개 이하의 아미노산 차이를 나타낼 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 항체는 당업계에 공지된 바와 같이, 인간화되고, 친화도 성숙된다. 구조 기반의 방법은 예를 들어 미국 특허 7,657,380에 기재된 바와 같이, 인간화 및 친화도 성숙을 위해 채용될 수 있다. 선택 기반의 방법은 항체 가변 영역을 인간화하고/거나 친화도 성숙시키도록 채용될 수 있고, 본원에서 모두 전문이 참고문헌으로 통합되는 Wu et al., 1999, J. Mol. Biol. 294: 151-162; Baca et al., 1997, J. Biol. Chem. 272(16): 10678-10684; Rosok et al., 1996, J. Biol. Chem. 271(37): 22611-22618; Rader et al., 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 95: 8910-8915; Krauss et al., 2003, Protein Engineering 16(10): 753-759에 기술된 방법을 포함하나 이에 한정되지는 않는다.
Ⅱ. 항체의 특징
일부 구현예에서, 본원에 기재된 항-FCMR 항체는 인간 FCMR에 결합한다. 일부 구현예에서, 인간 FCMR에 대한 항-FCMR 항체의 결합은 실시예 1에 기재된 예시적인 검정법과 같은 유세포 계측법에 의해 측정된다.
일부 구현예에서, 본원에 기재된 항-FCMR 항체는 높은 친화도로 인간 FCMR에 결합한다. 추가의 구현예에서, 높은 친화도를 갖는 항체는 나노몰 또는 피코몰 범위의 친화도를 갖는 항체이다. 일부 구현예에서, 본원에 기재된 항-FCMR 항체는 FCMR-Fc 단백질에 대해 높은 결합 친화도를 갖는다 (도 6 참조). KD 값은 고정화된 항원 또는 고정화된 항체로 측정할 수 있다. 도 6은 일부 항체 클론의 예시적인 KD를 나열한다. 일부 구현예에서, 항체 및 인간 FCMR 사이의 KD 값은 2.57 × 10-8 M 내지 7.21 × 10-9 M 범위이다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 인간 대상체에 투여될 때 낮은 면역원성을 나타낸다. 이들 항체는 인간 IgG1, 인간 IgG2 또는 인간 IgG3에서 유래한 Fc 도메인을 포함할 수 있다. 일부 구현예에서, 이들 항체는 인간 면역글로불린으로부터 유래한 구조틀 영역을 사용하여 인간화된다.
사이토카인 방출에 미치는 항-FCMR 항체의 효과는 예를 들어 실시예 4 및 5에 설명된 방법을 포함하여 당업계에 공지되고 본원에 기재된 다양한 방법을 사용하여 검정될 수 있다. 따라서, 항-FCMR 항체는 FCMR 길항제 또는 FCMR 작동제로서 작용할 수 있다.
일부 구현예에서, 기재된 항-FCMR 항체는 FCMR 길항제로서 작용하고, T 세포 기능을 억제한다. 결과적으로, 이러한 항-FCMR 항체는 면역 반응을 억압한다. 이러한 항-FCMR 항체의 예는 서열번호 9와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 10과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및/또는 서열번호 37을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 38을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 39를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 40을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 41을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 42를 포함하는 vlCDR3을 포함하는 항체를 포함한다.
일부 다른 구현예에서, 본원에 기재된 항-FCMR 항체는 FCMR 작동제로서 작용하고, 전염증성 T 세포 기능을 비롯한 면역 세포 기능을 자극한다. 결과적으로, 이러한 항-FCMR 항체는 면역 반응을 자극한다. 예를 들어, 이러한 항-FCMR 항체는 서열번호 1과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 2와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및/또는 서열번호 13을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 14를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 15를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 16을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 17을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 18을 포함하는 vlCDR3을 포함하는 항체를 포함할 수 있다.
Ⅲ. 본 발명의 핵산
본원에 기재된 항-FCMR 항체를 인코딩하는 핵산, 뿐만 아니라 이러한 핵산을 포함하는 발현 벡터 및 이러한 핵산 및/또는 발현 벡터로 형질전환된 숙주 세포가 또한 제공된다. 당업자라면 이해될 바와 같이, 본원에 도시된 단백질 서열은 유전자 코드의 중복로 인해 임의의 수의 가능한 핵산 서열에 의해 인코딩될 수 있다.
당업자라면 이해될 바와 같이, 항원 결합 도메인의 경우, 핵산 조성물은 일반적으로 중쇄 가변 영역을 인코딩하는 제 1 핵산 및 경쇄 가변 영역을 인코딩하는 제 2 핵산을 포함한다. scFv의 경우, 본원에 기재된 링커에 의해 분리된 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 인코딩하는 단일 핵산이 제조될 수 있다. 통상적인 항체의 경우, 핵산 조성물은 일반적으로 중쇄를 인코딩하는 제 1 핵산 및 경쇄를 인코딩하는 제 2 핵산을 포함하며, 이는 세포에서 발현될 때 자발적으로 2개 중쇄 및 2개 경쇄로 된 "통상적인" 사량체 형식으로 조립될 것이다.
당업계에 공지된 바와 같이, 본 발명의 구성성분을 인코딩하는 핵산은 발현 벡터 내로 혼입되고, 숙주 세포에 따라 본 발명의 항체를 생산하는데 사용될 수 있다. 이들 2개의 핵산은 단일 발현 벡터 내로 또는 2개의 상이한 발현 벡터 내로 도입될 수 있다. 일반적으로, 핵산은 발현 벡터에서 임의의 수의 조절 요소 (프로모터, 복제 원점, 선별가능한 마커, 리보좀 결합 부위, 유도인자 등)에 작동가능하게 연결된다. 발현 벡터는 염색체외 벡터 또는 혼입 벡터일 수 있다.
본 발명의 핵산 및/또는 발현 벡터는 포유동물, 세균, 효모, 곤충 및 진균 세포를 포함하여 당업계에 잘 알려진 임의의 유형의 숙주 세포에 도입될 수 있다. 형질감염 이후, 단일 세포 클론이 제한 희석, ELISA, FACS, 현미경 관찰법 또는 클론픽스와 같은 당업계에 공지된 방법을 사용하여 세포 은행 생성을 위해 단리될 수 있다. 클론은 생물반응기 규모 확장 및 항체의 발현 유지에 적합한 조건 하에 배양될 수 있다. 항체는 원심분리, 심층 여과, 세포 용해, 균질화, 냉동-해동, 친화 정제, 젤 여과, 이온 교환 크로마토그래피, 소수성 상호작용 교환 크로마토그래피 및 혼합 방식의 크로마토그래피를 포함하는 당업계에 공지된 방법을 사용하여 단리되고, 정제될 수 있다.
Ⅳ. 치료 응용
본 발명은 대상체에서 면역 반응을 조절하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 대상체에게 본원에 기재된 항 FCMR 항체, 또는 항-FCMR 항체를 함유하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명에 포괄되는 면역 반응을 조절하는 방법은 대상체에서 면역 반응을 억제하는 것을 포함하고, 추가의 구현예에서 이러한 방법은 대상체에게 항-FCMR 항체의 유효량을 투여하거나, 항-FCMR 항체를 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명에 포괄되는 면역 반응을 조절하는 방법은 대상체에서 면역 반응을 자극하는 것을 포함하고, 추가의 구현예에서 이러한 방법은 대상체에게 항-FCMR 항체의 유효량을 투여하거나, 항-FCMR 항체를 포함하는 약제학적 조성물을 투여하는 것을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명에 포괄되는 방법은 대상체에서 면역 반응을, 예를 들어 서열번호 1과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 2와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및/또는 서열번호 13을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 14를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 15를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 16을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 17을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 18을 포함하는 vlCDR3을 포함하는 항-FCMR 항체를 투여함으로써 조절하는 방법을 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명에 기술된 방법은 대상체에서 면역 반응을, 예를 들어 서열번호 3과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 4와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및/또는 서열번호 19를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 20을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 21을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 22를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 23을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 24를 포함하는 vlCDR3을 포함하는 항-FCMR 항체를 투여함으로써 조절한다.
일부 구현예에서, 본 발명에 기술된 방법은 대상체에서 면역 반응을, 예를 들어 서열번호 5와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 6과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및/또는 서열번호 25를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 26을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 27을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 28을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 29를 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 30을 포함하는 vlCDR3을 포함하는 항-FCMR 항체를 투여함으로써 조절한다.
일부 구현예에서, 본 발명에 기술된 방법은 대상체에서 면역 반응을, 예를 들어 서열번호 7과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 8과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및/또는 서열번호 31을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 32를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 33을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 34를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 35를 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 36을 포함하는 vlCDR3을 포함하는 항-FCMR 항체를 투여함으로써 조절한다.
일부 구현예에서, 본 발명에 기술된 방법은 대상체에서 면역 반응을, 예를 들어 서열번호 9와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 10과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및/또는 서열번호 37을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 38을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 39를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 40을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 41을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 42를 포함하는 vlCDR3을 포함하는 항-FCMR 항체를 투여함으로써 조절한다.
일부 구현예에서, 본 발명에 기술된 방법은 대상체에서 면역 반응을, 예를 들어 서열번호 11과 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역, 및 서열번호 12와 적어도 80% (예로, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%) 동일한 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 및/또는 서열번호 43을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 44를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 45를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 46을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 47을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 48을 포함하는 vlCDR3을 포함하는 항-FCMR 항체를 투여함으로써 조절한다.
또한, 본 발명은 대상체에서 암을 치료하는 방법을 제공하며, 이러한 방법은 항-FCMR 항체, 또는 이러한 항-FCMR 항체를 함유하는 약제학적 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 암 세포 표면 상에서 FCMR을 발현시킨다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 상응하는 비-암성 조직과 비교하여 FCMR을 상향조절한다. 일부 구현예에서, 치료될 암은 CTLA-4, PD-1 또는 PD-L1과 같은 다른 면역 체크포인트를 표적하는 기존의 면역 조절 항체에 반응하지 않는다.
일부 구현예에서, 암은 B 세포 만성 림프구성 백혈병, 호지킨 림프종, B 세포 비-호지킨 림프종 또는 T 세포 -호지킨 림프종이다. 일부 구현예에서, 암은 위암, 결장직장암, 간세포 암종, 흑색종 또는 식도 편평세포 암종과 같은 고형 종양이다.
일부 다른 구현예에서, 암은 뇌암, 방광암, 유방암, 자궁경부암, 자궁내막암, 식도암, 백혈병, 폐암, 간암, 흑색종, 난소암, 췌장암, 전립샘암, 직장암, 신장암, 고환암 또는 자궁암이다. 또 다른 구현예에서, 암은 혈관성 종양, 편평세포 암종, 샘암종, 소세포 암종, 신경모세포종, 육종 (예로, 혈관육종 또는 연골육종), 후두암, 이하선암, 담도암, 갑상샘암, 말단흑색점 흑색종, 광선 각화증, 급성 림프구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 선양 낭성 암종, 샘종, 샘육종, 샘편평 암종, 항문관암, 항문암, 항문직장암, 성상세포 종양, 바르톨린샘 암종, 기저세포 암종, 담도암, 골암, 골수암, 기관지암, 기관지샘 암종, 유암종, 담관암종, 연골육종, 맥락총 유두종/암종, 만성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병, 투명세포 암종, 결합조직암, 낭샘종, 소화계암, 십이지장암, 내분비계암, 내배엽동 종양, 자궁내막 증식증, 자궁내막 간질육종, 자궁내막양 샘암종, 내피세포암, 뇌실막암, 상피세포암, 어윙 육종, 눈 및 안와암, 여성 생식기암, 국소결절 과증식, 담낭암, 위전정부암, 위기저부암, 가스트린종, 교모세포종, 글루카곤종, 심장암, 혈관모세포종, 혈관내피종, 혈관종, 간 샘종, 간 샘종증, 간담도암, 간세포 암종, 호지킨 병, 회장암, 인슐린종, 상피내 종양, 상피간 편평세포 종양, 간내 담도암, 침습성 편평세포 암종, 공장암, 관절암, 카포시 육종, 골반암, 거대세포 암종, 대장암, 평활근육종, 악성 흑색점 흑색종, 림프종, 남성 생식기암, 악성 흑색종, 악성 중피 종양, 수질모세포종, 수질상피종, 수막암, 중피암, 전이성 암종, 구강암, 점막표피양 암종, 다발성 골수종, 근육암, 비강암, 신경계암, 신경상피 샘암종 결절 흑색종, 비-상피성 피부암, 귀리세포 암종, 희소돌기아교세포암, 구강암, 골육종, 유두장액 샘암종, 음경암, 인두암, 뇌하수체 종양, 형질세포종, 유사육종, 폐모세포종, 직장암, 신장세포 암종, 호흡계암, 망막모세포종, 횡문근육종, 육종, 장액 암종, 부비동암, 피부암, 소세포 암종, 소장암, 평활근암, 연조직암, 소마토스타틴 분비 종양, 척추암, 편평세포 암종, 횡문근암, 중피하암, 표재성 전이 흑색종, T 세포 백혈병, 설암, 미분화 암종, 요관암, 요도암, 방광암, 비뇨계암, 자궁경부암, 자궁체암, 포도막 흑색종, 질암, 사마귀 암종, 비포마, 외음부암, 잘 분화된 암종, 또는 윌름 종양이다.
일부 다른 구현예에서, 치료될 암은 B 세포 림프종 또는 T 세포 림프종과 같은 비-호지킨 림프종이다. 특정 구현예에서, 비-호지킨 림프종은 확산성 거대 B 세포 림프종, 원발성 종격 B 세포 림프종, 난포성 림프종, 소림프구성 림프종, 외투세포 림프종, 변연부 B 세포 림프종, 결정외 변연부 B 세포 림프종, 결절 변연부 B 세포 림프종, 비장 변연부 B 세포 림프종, 버킷 림프종, 림프형질구성 림프종, 털세포 백혈병 또는 원발성 중추신경계 (CNS) 림프종과 같은 B 세포 림프종이다. 다른 특정 구현예에서, 비-호지킨 림프종은 전구 T 림프모구성 림프종, 말초 T 세포 림프종, 피부 T 세포 림프종, 혈관면역모구성 T 세포 림프종, 결절외 자연 살해/T 세포 림프종, 장병증 유형 T 세포 림프종, 피하지방층염 유사 T 세포 림프종, 역형성 거대세포 림프종 또는 말초 T 세포 림프종과 같은 T 세포 림프종이다.
또한, 본 발명은 대상체에서 자가면역 또는 염증성 장애를 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 항-FCMR 항체, 또는 이러한 항-FCMR 항체를 함유하는 약제학적 조성물의 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함한다. 항-FCMR 항체를 투여하면 자가면역 또는 염증성 장애로 고생하는 대상체에서 자가반응성 면역 반응을 억제할 수 있다.
일부 구현예에서, 치료될 자가면역 또는 염증성 장애는 다발성 경화증, 애디슨병, 근위축성 측삭 경화증, 크론병, 쿠싱 증후군, 제 1형 당뇨병, 이식편 대 숙주병, 그레이브스병, 길랭-바레 증후군, 홍반 루푸스, 건선, 건선성 관절염, 류마티스성 관절염, 사르코이드증, 경피증, 전신성 홍반 루푸스, 이식 거부 또는 혈관염이다.
일부 다른 구현예에서, 치료될 자가면역 염증성 장애는 급성 전파성 뇌골수염 (ADEM), 무감마글로불린혈증, 원형 탈모증, 강직성 척추염, 항인지질 증후군, 항합성효소 증후군, 아토피 알레르기, 아토피 피부염, 자가면역 재생불량성 빈혈, 자가면역 심근병증, 자가면역 장병증, 자가면역 용혈성 빈혈, 자가면역 간염, 자가면역 내이 질환, 자가면역 림프증식 증후군, 자가면역 췌장염, 자가면역 말단신경병증, 자가면역 다중내분비 증후군, 자가면역 프로게스테론 피부염, 자가면역 혈소판감소 자반병, 자가면역 두드러기, 자가면역 포도막염, 발로병/발로 동심 경화증, 베체트병, 버거병, 비커스스타프 뇌염, 블라우 증후군, 수포성 천포창, 암, 캐슬만병, 셀리악병, 샤가스병, 만성 염증성 탈수초 다발신경병증, 만성 폐쇄성 폐질환, 만성 재발성 다초점 골수염, 처그-스트라우스간 증후군, 흉터 유사천포창, 코간 증후군, 한랭 응집소병, 보체성분 2 결핍, 접촉성 피부염, 두개 동맥염, CREST 증후군, 피부 백혈구파괴성 혈관염, 데고병, 더쿰병, 포진성 피부염, 피부근염, 확산성 전신피부 경화증, 원판 홍반성 루푸스, 드레슬러 증후군, 약물 유도성 루푸스, 습진, 자궁내막증, 호산구성 근막염, 호산구성 위창자염, 호산구성 폐렴, 후천 수포성 표피박리증, 결절성 홍반, 태아 적혈구모세포혈증, 진성 혼합 저온글로불린혈증, 에반스병, 진행성 골 섬유이형성, 섬유화 폐포염 (또는 특발성 폐섬유증), 위염, 위창자 천포창, 사구체신염, 굿파스처 증후군, 하시모토 뇌병증, 하시모토 갑상샘염, 헤노흐-쇤라인 자반병, 임신 헤르페스 일명 임신성 천포창, 화농성 땀샘염, 휴그-소토빈 증후군, 저감마글로불린혈증, 특발성 염증 탈수초화 질환, 특발성 폐섬유증, 특발성 혈소판감소 자반병, IgA 신병증, 봉입체 근염, 간질성 방광염, 소아 특발성 관절염 일명 소아 류마티스성 관절염, 가와사키병, 람버트-이튼 근무력 증후군, 백혈구파괴성 혈관염, 편평 태선, 경화 태선, 선형 IgA 질환, 루푸스 간염 일명 자가면역 간염, 마지드 증후군, 현미경적 대장염, 현미경적 다발혈관염, 밀러-피셔 증후군, 혼합 결합조직 질환, 국소피부경화증, 무하-하버만병 일명 태선 잔비늘증 및 급성 유사천연두, 다발성 경화증, 중증 근무력증, 근염, 메니에르병, 기면증, 시신경척수염, 신경근긴장증, 안구 흉터 천포창, 안간대 근경련 증후군, 오르드 갑생샘염, 팰린드롬 류마티스, PANDAS (스트렙토코커스와 관련된 소아 자가면역 신경정신 장애), 종양성 소뇌 변성, 발작성 야간 혈색소뇨증 (PNH), 패리 롬버그 증후군, 파스 평면염, 파소나지-터너 증후군, 보통 천포창, 혈관주변 뇌척수염, 악성 빈혈, POEMS 증후군, 결정성 다발관절염, 다발성 류마티스 근육통, 다발성 근염, 원발성 담즙 간경변증, 원발성 경화 담관염, 진행성 염증 신경병증, 순수 적혈구 무형성, 괴저성 농피증, 라스무센 뇌염, 레이노 현상, 라이터 증후군, 재발성 다발연골염, 하지불안 증후군, 후복막 섬유증, 류마티스열, 정신분열병, 슈미트 증후군, 슈니츨러 증후군, 공막염, 혈청병, 스조렌 증후군, 척추관절병증, 경직 증후군, 스틸병, 아급성 세균 심내막염 (SBE), 수삭 증후군, 스위트 증후군, 시드넘 무도병, 교감성 안염, 타카야수 동맥염, 측두 동맥염, 혈소판 감소증, 톨로사-헌트 증후군, 요도 척수염, 궤양성 장염, 미분화 척추관절병증, 두드러기 혈관염, 백반증, 베게너 육아종증을 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.
본 발명은 또한 대상체에서 세균성 감염을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 대상체에게 FCMR 효능제로서 작용하는 항 FCMR 항체 또는 이러한 항-FCMR 항체를 함유하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 항-FCMR 항체를 투여하면 염증성 면역 반응을 자극하여 세균성 감염의 제거를 증가시킬 수 있다.
일부 구현예에서, 치료될 세균성 감염은 기도 감염, 급성 세균성 중이염, 세균성 폐렴, 요로 감염, 감염 합병증, 합병증이 없는 감염, 신우신염, 복강내 감염, 심부 농양, 세균성 패혈증, 피부 및 피부 구조 감염, 연조직 감염, 뼈 및 관절 감염, 중추신경계 감염, 세균혈증, 상처 감염, 복막염, 수막염, 화상후 감염, 비뇨생식기 감염, 위창자 감염, 골반 염증성 질환, 심내염 및 기타 혈관내 감염을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본 발명은 또한 대상체에서 바이러스성 감염을 치료하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 대상체에게 FCMR 길항제로서 작용하는 항-FCMR 항체 또는 이러한 항 FCMR 항체를 함유하는 약제학적 조성물의 유효량을 투여하는 것을 포함한다. 항-FCMR 항체를 투여하면 염증성 면역 반응을 자극하여 바이러스성 감염의 제거를 증가시킬 수 있다.
V. 조합 요법
본원에 기재된 항-FCMR 항체는 추가적인 치료제와 조합하여 암 또는 자가면역 장애를 치료하는데 사용될 수 있다.
조합 요법의 일부로서 암을 치료하는데 사용될 수 있는 예시적인 치료제는 예를 들어 방사선, 미토마이신, 트레티노인, 리보무스틴, 젬시타빈, 빈크리스틴, 에토포시드, 클라드리빈, 미토브로니톨, 메토트렉세이트, 독소루비신, 카보쿠온, 펜토스타틴, 니트라크린, 지노스타틴, 세트로렐릭스, 레트로졸, 랄티트렉세드, 다우노루비신, 파드로졸, 포테무스틴, 티말파신, 소부족산, 네다플라틴, 시타라빈, 비칼루타미드, 비노렐빈, 베스나린온, 아미노글루테티미드, 암사크린, 프로글루미드, 엘립티늄 아세테이트, 케탄세린, 독시플루리딘, 에트레티네이트, 이소트레티노인, 스트렙토조신, 니무스틴, 빈데신, 플루타미드, 드로게닐, 부토신, 카르모푸르, 라족산, 시조필란, 카보플라틴, 미톨락톨, 테가푸르, 이포스파미드, 프레드니무스틴, 피시바닐, 레바미솔, 테니포시드, 임프로설판, 에노시타빈, 리수리드, 옥시메톨론, 타목시펜, 프로게스테론, 메피티오스탄, 에피티오스탄올, 포메스탄, 인터페론-알파, 인터페론-2 알파, 인터페론-베타, 인터페론-감마, 콜로니 자극인자-1, 콜로니 자극인자-2, 데닐류킨 디프티톡스, 인터루킨-2, 황체 형성호르몬 방출인자 그리고 이의 동족 수용체에 대해 차별적 결합 및 혈청 반감기의 증가 또는 감소를 나타낼 수 있는 전술한 제제의 변형을 포함한다.
조합 요법의 일부로서 암의 치료에 사용될 수 있는 추가적인 부류의 제제는 면역 체크포인트 저해제이다. 예시적인 면역 체크포인트 저해제는 (i) 세포독성 T 림프구 관련 항원 4 (CTLA4), (ii) 프로그램된 세포 사멸 단백질 1 (PD1), (iii) PDL1, (iv) LAG3, (v) B7-H3, (vi) B7-H4, 및 (vii) TIM-3 중 하나 이상을 억제하는 제제, 예컨대 이필리무맙, 니볼루맙, 펨브롤리주맙, 아벨루맙, 더발루맙 및 아테졸리주맙을 포함한다.
조합 요법의 일부로서 암을 치료하는데 사용될 수 있은 또 다른 제제는 비-체크포인트 표적 (예로, 허셉틴) 및 비-세포독성 제제 (예로, 타이로신-키나제 저해제)를 표적하는 단일클론 항체 제제이다.
또 다른 항암제의 카테고리는 예를 들어, (i) ALK 저해제, ATR 저해제, A2A 길항제, 염기 절제 복구 저해제, Bcr-Abl 타이로신 키나제 저해제, 브루톤 타이로신 키나제 저해제, CDC7 저해제, CHK1 저해제, 사이클린-의존적 키나제 저해제, DNA-PK 저해제, DNA-PK 및 mTOR 둘 다의 저해제, DNMT1 저해제, DNMT1 저해제 + 2-클로로-데옥시아데노신, HDAC 저해제, 헤지호그 신호전달 경로 저해제, IDO 저해제, JAK 저해제, mTOR 저해제, MEK 저해제, MELK 저해제, MTH1 저해제, PARP 저해제, 포스포이노시티드 3-키나제 저해제, PARP1 및 DHODH 둘 다의 저해제, 프로테아좀 저해제, 토포이소머라제-II 저해제, 타이로신 키나제 저해제, VEGFR 저해제 및 WEE1 저해제; (ii) OX40, CD137, CD40, GITR, CD27, HVEM, TNFRSF25 또는 ICOS의 작동제; 및 (iii) IL-12, IL-15, GM-CSF 및 G-CSF로부터 선택된 사이토카인을 포함한다.
본 발명의 항체는 또한 원발성 병변으로부터 암을 외과적으로 제거하기 위한 부가물로서 사용될 수 있다.
항-FCMR 항체와의 조합 요법의 일부로서 자가면역 또는 염증성 장애의 증상을 치료하거나, 진행을 지연시키거나, 재발을 방지하거나, 완화하는데 사용될 수 있는 예시적인 치료제는 예를 들어 임의의 다양한 알려진 항-염증 및/또는 면역억제 요법을 포함한다. 일부 구현예에서, 항-염증 및/또는 면역억제 요법은 메토트렉세이트, 사이클로스포린 A (예를 들어, 사이클로스포린 미세에멀젼을 포함함), 타크롤리무스, 코티코스테로이드, 스타틴, 인터페론 베타, 비-스테로이드성 항-염증제 및 6-MP (머캅토퓨린, 6-머캅토퓨린 또는 퓨리네톨으로도 불림)를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체와 조합하기 위한 항-염증 및/또는 면역억제 요법은 TOPK 억제제 (예로, OTS964((R)-9-(4-(1-(디메틸아미노)프로판-2-일)페닐)-8-히드록시-6-메틸티에노[2,3-c]퀴놀린-4(5H)-온)(종양치료법 과학)), 타이로신 키나제 억제제 (예로, 악시티닙, 다사티닙, 이코티닙), 토포이소머라제 저해제 (예로, 토포테칸), 스핑고신-1-포스페이트 수용체 작동제 (예로, 핀골리모드, KRP-203), 항-T 세포 면역글로불린 (예로, AtGam), 항-IL-2 수용체 항체 (예로, 다클리주맙), 아미드 (CTX), 이포스파미드 (IFO), 아드리아마이신 (ADM), 다우노루비신 (DNR), 빈크리스틴 (VCR), 빈블라스틴 (VBL), 에토포시드 (VP16), 베르미르 (부몬), 카보플라틴 (CBP), 타크롤리무스, 시롤리무스, 에베롤리무스, 아자티오프린, 브레퀴나르, 레플루노미드, LEA-29Y, 항-CD3 항체 (예로, OKT3), 아스피린, B7-CD28 차단 분자 (예로, 벨라타셉트, 아바타셉트), CD40-CD154 차단 분자 (항-CD40 항체), 아세트아미노펜, 이부프로펜, 나프록센, 피록시캄 및 항-염증 스테로이드 (예로, 프레드니솔론 또는 덱사메타손)를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체와 조합하기 위한 항-염증 및/또는 면역억제 요법은, 예를 들어 TNF-알파, CFA, 인터루킨-1 (IL-1), 프로테아좀 저해제, NFκB 저해제, 항-염증 약물, 조직 플라스미노겐 활성인자 (TPA), 지질다당류, 자외선 및 TNF-알파 신호전달 경로의 세포내 매개인자의 투여에 의한 자가면역 세포의 절제를 포함한다. 이러한 제제는 TNF-알파 수용체 신호전달로부터의 하류 경로를 방해함으로써 자가반응성 림프구의 아폽토시스를 유도하거나, TNF-알파 수용체 결합의 하류에 작용한다. (Baldwin et al., Ann. Rev. Immunol. (1996) 12: 141; Baltimore, Cell (1996) 87: 13).
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 자가면역 질환을 치료하거나 달리 완화시키는 외과적 방법과 조합하여 사용된다.
조합 요법의 일부로서 자가면역 질환을 치료하는데 사용될 수 있는 예시적인 치료제는 다음과 같다. 일부 구현예에서, 항-FCMR 항체와 조합하기 위한 항-염증 및/또는 면역억제 요법은 TOPK 억제제 (예로, OTS964((R)-9-(4-(1-(디메틸아미노)프로판-2-일)페닐)-8-히드록시-6-메틸티에노[2,3-c]퀴놀린-4(5H)-온)(종양치료법 과학)), 타이로신 키나제 억제제 (예로, 악시티닙, 다사티닙, 이코티닙), 토포이소머라제 저해제 (예로, 토포테칸), 스핑고신-1-포스페이트 수용체 작동제 (예로, 핀골리모드, KRP-203), 항-T 세포 면역글로불린 (예로, AtGam), 항-IL-2 수용체 항체 (예로, 다클리주맙), 아미드 (CTX), 이포스파미드 (IFO), 아드리아마이신 (ADM), 다우노루비신 (DNR), 빈크리스틴 (VCR), 빈블라스틴 (VBL), 에토포시드 (VP16), 베르미르 (부몬), 카보플라틴 (CBP), 타크롤리무스, 시롤리무스, 에베롤리무스, 아자티오프린, 브레퀴나르, 레플루노미드, LEA-29Y, 항-CD3 항체 (예로, OKT3), 아스피린, B7-CD28 차단 분자 (예로, 벨라타셉트, 아바타셉트), CD40-CD154 차단 분자 (항-CD40 항체), 아세트아미노펜, 이부프로펜, 나프록센, 피록시캄 및 항-염증 스테로이드 (예로, 프레드니솔론 또는 덱사메타손)를 포함하나, 이에 한정되지는 않는다. 이의 동족 수용체에 대해 차별적 결합 및 혈청 반감기의 증가 또는 감소를 나타낼 수 있는 전술한 제제의 변형이 또한 사용될 수 있다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체와 조합하기 위한 항-염증 및/또는 면역억제 요법은, 예를 들어 TNF-알파, CFA, 인터루킨-1 (IL-1), 프로테아좀 저해제, NFKB 저해제, 항-염증 약물, 조직 플라스미노겐 활성인자 (TPA), 지질다당류, 자외선 및 TNF-알파 신호전달 경로의 세포내 매개인자의 투여에 의한 자가면역 세포의 절제를 포함한다. 이러한 제제는 TNF-알파 수용체 신호전달로부터의 하류 경로를 방해함으로써 자가반응성 림프구의 아폽토시스를 유도하거나, TNF-알파 수용체 결합의 하류에 작용한다. (Baldwin et al., Ann. Rev. Immunol. (1996) 12: 141; Baltimore, Cell (1996) 87: 13).
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체는 자가면역 질환을 치료하거나 달리 완화시키는 외과적 방법과 조합하여 사용된다.
예를 들어, 다발성 경화증을 치료하거나, 이의 진행을 지연시키거나, 이의 재발을 예방하거나, 이의 증상을 완화시키기 위해, FCMR 길항제로 작용하는 항-FCMR 항체는 다발성 경화증에 대한 임의의 기존 치료법, 예를 들어 코르티코스테로이드 (예로, 경구 프레드니손 및 정맥내 메틸프레드니솔론), 혈장교환술, 옥렐리주맙, 베타-인터페론, 글라티라머 아세테이트, 디메틸 푸마레이트, 핑골리모드, 페리플루노미드, 나탈리주맙, 알렘투주맙 및/또는 미톡산트론과 조합될 수 있다.
항-FCMR 항체와의 조합 요법의 일부로서 세균성 감염의 증상을 치료하거나, 진행을 지연시키거나, 재발을 방지하거나, 완화하는데 사용될 수 있는 예시적인 치료제는 예를 들어 임의의 다양한 알려진 항생물질 치료제를 포함한다.
일부 구현예에서, 항-FCMR 항체와 조합하여 세균성 감염을 치료하기 위한 항생물질 치료제는 베타-락탐 예컨대 페니실린 (예로, 페니실린 G, 페니실린 V, 메티실린, 옥사실린, 클록사실린, 디클록사실린, 나프실린, 앰피실린, 아목시실린, 카르베니실린, 티카르실린, 메즐로실린, 피페라실린, 아즐로실린 및 테모실린), 세팔로스포린 (예로, 세팔로틴, 세파피린, 세프라딘, 세팔로리딘, 세파졸린, 세파만돌, 세푸록심, 세팔렉신, 세프프로질, 세파클로, 로라카르베프, 세폭시틴, 세프마토졸, 세포탁심, 세프티족심, 세프트리악손, 세포페라존, 세프타지딤, 세픽심, 세프포독심, 세프티부텐, 세프디니르, 세프피롬, 세페핌), 카르바페남 (예로, 이미페넴, 에르타페넴 및 메로페넴), 및 모노박탐 (예로, 아스트레오남); 베타-락타마제 저해제 (예로, 클라불라네이트, 설박탐 및 타조박탐); 아미노글리코시드 (예로, 스트렙토마이신, 네오마이신, 카나마이신, 파로마이신, 젠타마이신, 토브라마이신, 아미카신, 네틸미신, 스펙티노마이신, 시소미신, 디베칼린 및 이세파미신); 테트라사이클린류 (예로, 테트라사이클린, 클로르테트라사이클린, 데메클로사이클린, 미노사이클린, 옥시테트라사이클린, 메타사이클린 및 독시사이클린); 매크로리드 (예로, 에리트로마이신, 아지트로마이신 및 클라리트로마이신); 케톨리드 (예로, 텔리트로마이신); 린코사미드 (예로, 린코마이신 및 클린다마이신); 글리코펩티드 (예로, 반코마이신, 오리타반신, 달바반신 및 테이코플라닌); 스트렙토그라민 (예로, 퀴누프리스틴 및 달포프리스틴); 설폰아미드 (예로, 설파닐아미드, 파라-아미노벤조산, 설파디아진, 설피속사졸, 설파메톡사졸 및 설파탈리딘); 옥사졸리디논 (예로, 리네졸리드); 퀴놀론 (예로, 날리딕식산, 옥솔린산, 노르플록사신, 퍼플록사신, 에녹사신, 오플록사신, 시프로플록사신, 테마플록사신, 로메플록사신, 플레록사신, 그레파플록사신, 스파플록사신, 트로바플록사신, 클리나플록사신, 가티플록사신, 목시플록사신, 제미플록사신 및 시타플록사신); 메트로니다졸; 답토마이신; 가레녹사신; 라모플라닌; 파로페넴; 폴리믹신; 티게사이클린; 및 트리메토프림을 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
항-FCMR 항체와의 조합 요법의 일부로서 바이러스성 감염의 증상을 치료하거나, 진행을 지연시키거나, 재발을 방지하거나, 완화하는데 사용될 수 있는 예시적인 치료제는 예를 들어 임의의 다양한 알려진 항-바이러스 치료제를 포함한다.
일부 구현예에서, 본 발명의 방법과 함께 사용될 수 있는 항-바이러스 치료제는 아시클로비르, 아사이클로비르, 아데포비르, 아만타딘, 앰프레나비르, 앰플리젠, 아르비돌, 아타자나비르, 아트리플라, 발라비르, 시도포비르, 콤비비르, 다루나비르, 도코사놀, 에독수딘, 엔테카비르, 에콜리에버, 팜시클로비르, 포미비르센, 포스카네트, 포스포네트, 갱시클로비르, 이바시타빈, 이뮤노비르, 이독수리딘, 이미퀴모드, 이노신, 제 III형 인터페론, 제 II형 인터페론, 제 I형 인터페론, 인터페론, 로피나비르, 로비리드, 모록시딘, 메티사존, 넥사비르, 니타족사니드, 노비르, 페그인터페론 알파-2a, 펜시클로비르, 페라미비르, 플레코나릴, 포도필로톡신, 리바비린, 리만타딘, 피라미딘, 소포스부비르, 텔라프레비르, 트리플루리딘, 트리지비르, 트로만타딘, 트루바다, 발라시클로비르, 발갱시클로비르, 비크리비록, 비다라빈, 비라미딘, 잘시타빈, 자나미비르를 포함하나, 이에 한정되지 않는다.
본원에 개시된 임의의 약물 또는 약물의 조합은 질환을 치료하기 위해 대상체에게 투여될 수 있다. 본원에서의 약물은 종종 당업계에 공지된 다양한 제형물에 따라 또는 본원에 개시되거나 언급된 바와 같이 임의의 수의 방식으로 제형화될 수 있다.
항체 및 추가적인 치료제의 양 및 상대적인 투여 시기는 원하는 조합된 치료 효과를 달성하기 위해 선택될 수 있다. 예를 들어, 이러한 투여를 필요로 하는 환자에게 조합 요법을 투여할 때, 조합되는 치료제 또는 치료제를 포함하는 약제학적 조성물 또는 조성물은 임의의 순서, 예를 들어 순차적으로, 동시적으로, 다함께, 동시에 등으로 투여될 수 있다. 또한, 예를 들어 다중특이적 결합 단백질은 추가적인 치료제(들)가 이의 예방 또는 치료 효과를 발휘하는 시간 동안 또는 이의 역으로 투여될 수 있다.
Ⅵ. 약제학적 조성물 및 투여
본 발명은 또한 본원에 기재된 항-FCMR 항체의 치료적 유효량을 함유하는 약제학적 조성물/제형물를 특징으로 한다. 조성물은 다양한 약물 전달 시스템에서 사용하기 위해 제형화될 수 있다. 하나 이상의 생리학적으로 허용가능한 부형제 또는 담체가 또한 적절한 제형화를 위해 조성물에 포함될 수 있다. 본 발명에 사용하기에 적합한 제형물은 Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Philadelphia, Pa., 제 17판, 1985에서 찾는다. 약물 전달 방법에 대한 간략한 리뷰를 위해, 예로 랭거 (Langer, Science 249: 1527-1533, 1990) 참조.
본 발명의 항체는 동결건조된 제형물 또는 액체 수성 약제학적 제형물로 존재할 수 있다. 본원에서 관심있는 수성 담체는 약제학적으로 허용가능하고, (인간에게 투여하기에 안전하고 독성 없음) 액체 제형물의 제조에 유용한 것이다. 예시적인 담체는 주사용 멸균수 (SWFI), 주사용 정균수 (BWFI), pH 완충 용액 (예로, 포스페이트 완충 식염수), 멸균 식염수 용액, 링거 용액 또는 덱스트로스 용액을 포함한다.
본 발명의 항체는 단백질 및 동결보호제를 포함하는 동결건조된 제형물에 존재할 수 있다. 동결보호제는 당, 예로 이당류일 수 있다. 특정 구현예에서, 동결보호제는 슈크로스 또는 말토스이다. 동결건조된 제형물은 또한 완충제, 계면활성제, 증량제 및/또는 보존제 중 하나 이상을 포함할 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물에서 활성 성분의 실제 용량 수준은 특정한 환자, 조성물 및 투여 방식에 대해 원하는 치료 반응을 환자에게 독성이 없이 달성하는데 효과적인 활성 성분의 양을 획득하도록 달라질 수 있다. 이것은 성인의 경우 투여 당 활성 항체 0.1 mg 내지 1 g, 바람직하게 0.5 mg 내지 500 mg 범위로 투여될 수 있다. 대안적으로, 환자의 용량은 환자의 대략적인 체중 또는 표면적에 맞춰질 수 있다. 적절한 용량을 결정하는 기타 요인에는 치료 또는 예방될 질환 또는 병태, 질환의 중증도, 투여 경로, 및 환자의 연령, 성별 및 의학적 병태가 포함될 수 있다. 치료를 위한 적절한 용량을 결정하는 데 필요한 계산의 추가 개선은 특히 본원에 개시된 용량 정보 및 검정법에 비추어 당업자에 의해 일상적으로 시행된다. 용량은 또한 적절한 투약-반응 데이터와 연결하여 사용되는 용량을 결정하기 위한 공지된 검정법의 사용을 통해 결정될 수 있다. 질환의 진행 상황을 모니터링하면서 개별 환자의 용량을 조정할 수 있다. 환자에서 표적가능한 구조물 또는 복합체의 혈중 농도를 측정하여 유효 농도에 도달하거나 이를 유지하도록 용량이 조정되어야 하는지 여부를 확인할 수 있다. 약물게놈학은 어떤 표적가능한 구성물 및/또는 복합체 및 이의 용량이 주어진 개인에게 가장 효과적일 수 있는지를 결정하는데 사용될 수 있다 (Schmitz et al., Clinica Chimica Acta 308: 43-53, 2001; Steimer et al., Clinica Chimica Acta 308: 33-41, 2001).
용량은 매일, 매주, 매월 또는 매년 1회 이상, 또는 심지어 2년 내지 20년마다 1회 제공될 수 있다. 당업자라면 체액 또는 조직에서 표적가능한 구조물 또는 복합체의 측정된 체류 시간 및 농도를 기초로 하여 투약의 반복 횟수를 용이하게 추정할 수 있다. 본 발명의 투여는 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 피하, 흉막내, 경막내, 강내, 카테터를 통한 관류 또는 직접적 병변내 주사일 수 있다. 이것은 매일 1회 이상, 매주 1회 이상, 매월 1회 이상, 및 매년 1회 이상 투여될 수 있다.
실시예
이제부터 일반적으로 설명되는 본 발명은 하기 실시예를 참조하여 더 쉽게 이해될 것이며, 이는 단지 본 발명의 특정 양태 및 구현예의 예시의 목적으로 포함되며 본 발명을 제한하려고 의도되지 않는다.
실시예 1 - 다양한 조혈 하위집합 상의 FCMR 표면 발현
히스토그램으로 불리는 1차원 유세포 계측법 (FCM) 표현의 형태로 다양한 조혈 하위집합 상의 FCMR 표면 발현. 건강한 인간 공여자로부터의 신선한 전혈을 FCMR 2A5 항체 (도 1, 왼쪽 패널) 또는 FCMR 3F9 항체 (도 1, 오른쪽 패널), 뿐만 아니라 지시된 세포 하위집합에 특이적인 항체로 염색하였다. 플롯은 게이트된 CD19+ B 세포, CD3+ CD4+ T 세포 또는 CD3+ CD8+ T 세포에 의한 FCMR 발현을 도시한다. FCMR+ 세포의 FCMR 염색의 평균 형광 강도는 각 히스토그램으로 도시한다. 형광 마이너스 1 (FMO) 대조군 및 이소형 매칭된 항체를 대조군으로서 사용하였다. FCMR 발현은 CD19+ B 세포에서 입증되고, 낮은 FCMR 발현은 CD4+ 또는 CD8+ T 세포에서 입증된다. 데이터는 상이한 인간 혈액 시료를 사용하는 여러 독립적인 실험을 나타낸다.
실시예 2 - 원발성 혼합 림프구 반응 (MLR)에서 림프구의 반응성에 미치는 FCMR 항체 또는 FCMR-Fc 단백질의 효과
건강한 인간 공여자로부터의 말초 혈액 단핵 세포 (PBMC) [2 × 105개 세포, 효과기 (E) 집단] 및 방사선 조사된 (IR) 동종이형 PBMC [1 × 105개 세포, 자극인자 (S) 집단]을 지시된 양의 IgG1 이소형 대조군 항체, FCMR 항체, Fc 단백질 또는 Fc-FCMR 단백질의 존재 또는 부재 하에 공동-배양하였다. 4일 후, 세포를 3H-티미딘으로 추가 18시간 동안 표지하여 림프구 증식을 측정하였다. FCMR 2A5 항체는 림프구 증식을 자극하는 것으로 나타났고, FCMR 1G4 항체 또는 FCMR Fe 단백질은 림프구 증식을 억제하는 것으로 나타났다 (도 2). 데이터를 3벌의 웰에서 분당 평균 계수 (cpm) ± 표준 오차로서 보고한다.
실시예 3 - 원발성 MLR에서 림프구의 반응성에 미치는 FCMR 2A5 항체의 효과
5명의 다른 건강한 인간 공여자로부터의 PBMC [2 × 105개 세포, 효과기 (E) 집단] 및 건강한 인간 공여자로부터의 방사선 조사된 (IR) 동종이형 PBMC [1 × 105개 세포, 자극인자 (S) 집단]는 지시된 양의 IgG2b 이소형 대조군 항체 또는 FCMR 2A5 항체의 존재 또는 부재 하에 공동-배양하였다. 4일 후, 세포를 3H-티미딘으로 추가 18시간 동안 표지하여 림프구 증식을 측정하였다. FCMR 2A5 항체는 5개의 효과기 PBMC 시료 중 3개에서 림프구 증식을 자극하는 것으로 나타났다 (도 3). 데이터를 2벌의 웰에서 분당 평균 계수 (cpm) ± 표준 오차로서 보고한다.
실시예 4 - T 세포 자극에 대한 반응으로 PBMC에 의한 사이토카인 생성에 미치는 FCMR 2A5 항체의 효과
5명의 다른 건강한 인간 공여자로부터의 PBMC [2 × 105개 세포, 효과기 (E) 집단] 및 건강한 인간 공여자로부터의 방사선 조사된 (IR) 동종이형 PBMC [1 × 105개 세포, 자극인자 (S) 집단]는 IgG2b 이소형 대조군 항체 또는 FCMR 2A5 항체 (50 ㎍/mL)의 존재 또는 부재 하에 공동-배양하였다. 4.5일 후, 배양 상청액의 사이토카인 수준을 바이오레전드사 레전드플렉스 인간 Th 사이토카인 패널에 의해 제조업체의 지침에 따라 결정하였다. 2A5의 존재 하에, IFNγ, IL-6, IL-17 및 IL-21을 포함하는 특정 사이토카인의 수준이 증가되어, 2A5가 편향된 Th1-유사 면역 반응을 유발함을 시사한다 (도 4). 데이터를 2벌의 웰의 이소형 대조군 항체와 비교하여 7C5의 배수 변화로서 보고한다.
실시예 5 - FCMR 2A5 항체는 자극되지 않은 전혈로부터 사이토카인의 유의한 방출을 유발하지 않는다
건강한 인간 공여자 (n = 4)로부터의 신선한 혈액을 RPMI 1640 배지로 4 : 1로 희석하고, FCMR 2A5 항체 또는 IgG2b 이소형 대조군 항체 (50 μg/mL)의 존재 하에 4시간 동안 배양했다. LPS (1 μg/mL)를 양성 대조군으로서 사용하였다. 혈청 시료의 사이토카인 수준을 바이오레전드사 레전드플렉스 인간 Th 사이토카인 패널에 의해 제조업체의 지침에 따라 결정하였다. FCMR 2A5 항체는 T 세포 수용체 자극의 부재 하에 유의한 자극 효과가 없는 것으로 나타났다 (도 5). 데이터를 여러 독립적인 실험을 대표하며, 2벌의 웰의 이소형 대조군 항체와 비교하여 2A5의 평균 배수 변화로서 보고한다.
실시예 6 - 표면 플라즈몬 공명에 의해 결정된 FCMR 항체 2A5 및 2H2의 FCMR-Fc 단백질에 대한 친화도
FCMR-Fc 단백질에 대한 FCMR 항체 2A5 및 2H2의 친화도를 10 mM HEPES 완충액 (pH 7.4), 150 mM NaCl, 3 mM EDTA, 0.05% 폴리소르베이트 20으로 25℃에서 표면 플라즈몬 공명 (비아코아)에 의해 결정하였다 (도 6). 항체를 40 RU의 목표 수준으로 고정화하였다. 고정화된 인간 IgG를 참조 차감을 위한 공시료 표면으로서 사용하였다. 역가 측정은 500, 250, 125, 62.5, 31.25 및 0 nM FCMR-Fc 단백질을 사용하여 수행하였다. 평형 해리 상수 (KD)를 관찰된 ka 및 kd로부터 계산하였다.
참고문헌에 의한 통합
본원에 언급된 각 특허 문서 및 과학 문헌의 전체 개시내용은 모든 목적으로 참조문헌으로 통합된다.
동등물
본 발명은 이의 사상 또는 본질적인 특성에서 벗어나지 않고도, 다른 특이적 형태로 구현될 수 있다. 따라서, 전술한 구현예는 본원에 설명된 발명을 제한하는 것이 아니라 모든 양태에서 예시적인 것으로 간주되어야 한다. 따라서, 본 발명의 범주는 전술한 상세한 설명이 아니라 첨부된 청구범위로 나타나며, 청구범위의 의미와 균등 범위에 속하는 모든 변경은 본원에 포함되도록 의도된다.
SEQUENCE LISTING <110> University Health Network Brokx, Richard Mason, Jacqueline M. Bray, Mark R. <120> FCMR-BINDING MOLECULES AND USES THEREOF <130> 08945066WO <150> US 62/806,237 <151> 2019-02-15 <160> 48 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 145 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region (IgG2b) <400> 1 Met Asn Phe Gly Leu Ser Leu Ile Phe Leu Ala Leu Ile Leu Lys Gly 1 5 10 15 Val Gln Cys Glu Val Gln Leu Val Glu Ser Gly Gly Asp Leu Val Lys 20 25 30 Pro Gly Gly Ser Leu Lys Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe 35 40 45 Ser Ser Tyr Gly Met Ser Trp Val Arg Gln Thr Pro Asp Lys Arg Leu 50 55 60 Glu Trp Val Ala Thr Ile Asn Ser Gly Gly Ser Ser Ile Tyr Tyr Pro 65 70 75 80 Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn 85 90 95 Thr Leu Tyr Leu Gln Met Ser Ser Leu Lys Ser Glu Asp Thr Ala Met 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg His Asn Tyr Asp Ser Ser Tyr Arg Tyr Ala Met 115 120 125 Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr 130 135 140 Thr 145 <210> 2 <211> 131 <212> PRT <213> Artificial Sequence 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Asp 180 185 190 Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr Trp Pro 195 200 205 Ser Gln Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Lys 210 215 220 Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys Ile 225 230 235 240 Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys Pro 245 250 255 Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val 260 265 270 Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Gln Gly 275 280 <210> 8 <211> 230 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region (IgG1) <400> 8 Met Glu Ser Gln Thr Gln Val Leu Ile Ser Leu Leu Phe Trp Val Ser 1 5 10 15 Gly Thr Cys Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser 20 25 30 Val Ser Ala Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser 35 40 45 Leu Leu Lys Ser Gly Lys Gln Glu Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln 50 55 60 Lys Pro Gly Leu Pro Pro Lys Val Leu Ile Tyr Gly Ala Ser Thr Arg 65 70 75 80 Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 85 90 95 Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr 100 105 110 Tyr Cys Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr 115 120 125 Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe 130 135 140 Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys 145 150 155 160 Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile 165 170 175 Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln 180 185 190 Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr 195 200 205 Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His 210 215 220 Lys Thr Ser Thr Ser Pro 225 230 <210> 9 <211> 282 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region (IgG1) <400> 9 Met Gly Trp Ser Cys Ile Ile Leu Phe Leu Val Ala Thr Ala Thr Gly 1 5 10 15 Val His Ser Gln Val Gln Leu Gln Gln Pro Gly Ala Glu Leu Val Arg 20 25 30 Pro Gly Ser Ser Val Lys Leu Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Asn His Trp Leu His Trp Val Lys Gln Arg Pro Ile Gln Gly Leu 50 55 60 Glu Trp Ile Gly Tyr Ile Asp Pro Ser Asp Ser Leu Thr His Tyr Asn 65 70 75 80 Gln Asn Phe Lys Asp Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Gln Leu Ser Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Phe Ser Phe Ala Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 115 120 125 Val Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu 130 135 140 Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr Leu Gly Cys 145 150 155 160 Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr Trp Asn Ser 165 170 175 Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 180 185 190 Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr Trp 195 200 205 Pro Ser Gln Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr 210 215 220 Lys Val Asp Lys Lys Ile Val Pro Arg Asp Cys Gly Cys Lys Pro Cys 225 230 235 240 Ile Cys Thr Val Pro Glu Val Ser Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Lys 245 250 255 Pro Lys Asp Val Leu Thr Ile Thr Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val 260 265 270 Val Val Asp Ile Ser Lys Asp Asp Gln Gly 275 280 <210> 10 <211> 228 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region (IgG1) <400> 10 Met Met Ser Pro Ala Gln Phe Leu Phe Leu Leu Val Leu Trp Ile Arg 1 5 10 15 Glu Thr Asn Gly Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Thr Leu Ser 20 25 30 Val Thr Ile Gly Gln Pro Ala Ser Ile Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser 35 40 45 Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr Leu Asn Trp Leu Leu Gln Arg 50 55 60 Pro Gly Gln Ser Pro Lys Arg Leu Ile Tyr Leu Val Ser Lys Leu Asp 65 70 75 80 Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe 85 90 95 Thr Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Tyr 100 105 110 Cys Trp Gln Gly Thr His Leu Trp Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu 115 120 125 Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro Pro 130 135 140 Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe Leu 145 150 155 160 Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp Gly 165 170 175 Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp Ser 180 185 190 Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys Asp 195 200 205 Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys Thr 210 215 220 Ser Thr Ser Pro 225 <210> 11 <211> 293 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region (IgG2b) <400> 11 Met Gly Trp Ser Trp Ile Phe Leu Phe Leu Leu Ser Gly Thr Ala Gly 1 5 10 15 Val Leu Ser Glu Val Gln Leu Gln Gln Ser Gly Pro Glu Leu Val Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe 35 40 45 Thr Asp Tyr Tyr Ile Asn Trp Val Lys Gln Ser His Gly Lys Ser Leu 50 55 60 Glu Trp Ile Gly Asp Ile Tyr Pro Asn Asn Gly Gly Thr Asn Tyr Asn 65 70 75 80 Gln Lys Phe Lys Gly Lys Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Ser Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met Glu Leu Arg Ser Leu Thr Ser Glu Asp Ser Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Ala Arg Gln Leu Thr Tyr Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val 115 120 125 Thr Val Ser Ala Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val Tyr Pro Leu Ala 130 135 140 Pro Gly Cys Gly Asp Thr Thr Gly Ser Ser Val Thr Leu Gly Cys Leu 145 150 155 160 Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Ser Val Thr Val Thr Trp Asn Ser Gly 165 170 175 Ser Leu Ser Ser Ser Val His Thr Phe Pro Ala Leu Leu Gln Ser Gly 180 185 190 Leu Tyr Thr Met Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser Ser Thr Trp Pro 195 200 205 Ser Gln Thr Val Thr Cys Ser Val Ala His Pro Ala Ser Ser Thr Thr 210 215 220 Val Asp Lys Lys Leu Glu Pro Ser Gly Pro Ile Ser Thr Ile Asn Pro 225 230 235 240 Cys Pro Pro Cys Lys Glu Cys His Lys Cys Pro Ala Pro Asn Leu Glu 245 250 255 Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Asn Ile Lys Asp Val Leu 260 265 270 Met Ile Ser Leu Thr Pro Lys Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 275 280 285 Glu Asp Asp Gln Gly 290 <210> 12 <211> 230 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region (IgG2b) <400> 12 Met Glu Ser Gln Thr Gln Val Leu Ile Ser Leu Leu Phe Trp Val Ser 1 5 10 15 Gly Thr Cys Gly Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser 20 25 30 Val Ser Val Gly Glu Lys Val Thr Met Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser 35 40 45 Leu Leu Asn Ser Gly His Gln Glu Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln 50 55 60 Lys Pro Gly Gln Pro Pro Lys Val Leu Ile Tyr Gly Ala Val Thr Arg 65 70 75 80 Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 85 90 95 Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr 100 105 110 Tyr Cys Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr 115 120 125 Lys Leu Glu Leu Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe 130 135 140 Pro Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys 145 150 155 160 Phe Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile 165 170 175 Asp Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln 180 185 190 Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr 195 200 205 Lys Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His 210 215 220 Lys Thr Ser Thr Ser Pro 225 230 <210> 13 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR1 (IgG2b) <400> 13 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly 1 5 <210> 14 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR2 (IgG2b) <400> 14 Ile Asn Ser Gly Gly Ser Ser Ile 1 5 <210> 15 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR3 (IgG2b) <400> 15 Ala Arg His Asn Tyr Asp Ser Ser Tyr Arg Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 15 <210> 16 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region CDR1 (IgG2b) <400> 16 Gln Asp Ile Asn Asn Phe 1 5 <210> 17 <400> 17 000 <210> 18 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region CDR3 (IgG2b) <400> 18 Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Pro Thr 1 5 <210> 19 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR1 (IgG1) <400> 19 Gly Phe Ser Phe Ser Ser Tyr Gly 1 5 <210> 20 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR2 (IgG1) <400> 20 Ser Ser Gly Gly Ser Asn Ile 1 5 <210> 21 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR3 (IgG1) <400> 21 Val Arg His Asp Asp Gly Ser Ser Tyr Gln Tyr Ala Met Asp Tyr 1 5 10 15 <210> 22 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region CDR1 (IgG1) <400> 22 Gln Asp Ile Asn Ser Tyr 1 5 <210> 23 <400> 23 000 <210> 24 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region CDR3 (IgG1) <400> 24 Leu Gln Tyr Asp Glu Phe Pro Leu Thr 1 5 <210> 25 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR1 (IgG1) <400> 25 Gly Phe Thr Phe Ser Ser Tyr Gly 1 5 <210> 26 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR2 (IgG1) <400> 26 Ile Ser Ser Gly Gly Thr Tyr Asn 1 5 <210> 27 <211> 15 <212> PRT 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<220> <223> FCMR Light chain variable region CDR1 (IgG1) <400> 34 Gln Ser Leu Leu Lys Ser Gly Lys Gln Glu Asn Tyr 1 5 10 <210> 35 <400> 35 000 <210> 36 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region CDR3 (IgG1) <400> 36 Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Leu Thr 1 5 <210> 37 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR1 (IgG1) <400> 37 Gly Tyr Thr Phe Thr Asn His Trp 1 5 <210> 38 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR2 (IgG1) <400> 38 Ile Asp Pro Ser Asp Ser Leu Thr 1 5 <210> 39 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR3 (IgG1) <400> 39 Ala Arg Phe Ser Phe Ala Tyr 1 5 <210> 40 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region CDR1 (IgG1) <400> 40 Gln Ser Leu Leu Asp Ser Asp Gly Lys Thr Tyr 1 5 10 <210> 41 <400> 41 000 <210> 42 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region CDR3 (IgG1) <400> 42 Trp Gln Gly Thr His Leu Trp Thr Phe 1 5 <210> 43 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR1 (IgG2b) <400> 43 Gly Tyr Thr Phe Thr Asp Tyr Tyr 1 5 <210> 44 <211> 8 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR2 (IgG2b) <400> 44 Ile Tyr Pro Asn Asn Gly Gly Thr 1 5 <210> 45 <211> 6 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Heavy chain variable region CDR3 (IgG2b) <400> 45 Ala Arg Gln Leu Thr Tyr 1 5 <210> 46 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region CDR1 (IgG2b) <400> 46 Gln Ser Leu Leu Asn Ser Gly His Gln Glu Asn Tyr 1 5 10 <210> 47 <400> 47 000 <210> 48 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> FCMR Light chain variable region CDR3 (IgG2b) <400> 48 Gln Asn Asp His Ser Tyr Pro Leu Thr 1 5

Claims (31)

  1. 다음을 포함하는 항체:
    a) 서열번호 1의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 2의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
    b) 서열번호 3의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 4의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
    c) 서열번호 5의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 6의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
    d) 서열번호 7의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 8의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역;
    e) 서열번호 9의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 10의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역; 또는
    f) 서열번호 11의 아미노산 서열을 포함하는 중쇄 가변 영역 및 서열번호 12의 아미노산 서열을 포함하는 경쇄 가변 영역.
  2. 다음을 포함하는 항체:
    a) 서열번호 13을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 14를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 15를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 16을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 17을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 18을 포함하는 vlCDR3;
    b) 서열번호 19를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 20을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 21을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 22를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 23을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 24를 포함하는 vlCDR3;
    c) 서열번호 25를 포함하는 vhCDR1, 서열번호 26을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 27을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 28을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 29를 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 30을 포함하는 vlCDR3;
    d) 서열번호 31을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 32를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 33을 포함하는 vhCDR3, 서열번호 34를 포함하는 vlCDR1, 서열번호 35를 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 36을 포함하는 vlCDR3;
    e) 서열번호 37을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 38을 포함하는 vhCDR2, 서열번호 39를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 40을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 41을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 42를 포함하는 vlCDR3; 또는
    f) 서열번호 43을 포함하는 vhCDR1, 서열번호 44를 포함하는 vhCDR2, 서열번호 45를 포함하는 vhCDR3, 서열번호 46을 포함하는 vlCDR1, 서열번호 47을 포함하는 vlCDR2 및 서열번호 48을 포함하는 vlCDR3.
  3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서,
    상기 항체는 인간 FCMR에 결합하는, 항체.
  4. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체는 인간 IgG와 적어도 90% 동일한 아미노산 서열을 갖는 불변 영역을 포함하는, 항체.
  5. 제 4항에 있어서,
    상기 인간 IgG는 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4로 이루어진 군으로부터 선택되는, 항체.
  6. 제 5항에 있어서,
    상기 IgG는 IgG2인, 항체.
  7. 제 5항에 있어서,
    상기 IgG는 IgG1인, 항체.
  8. 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체를 인코딩하는 핵산 조성물.
  9. 제 8항에 따른 핵산 조성물을 포함하는 발현 벡터 조성물로서, 제 1 핵산은 제 1 발현 벡터에 포함되고, 제 2 핵산은 제 2 발현 벡터에 포함되는, 발현 벡터 조성물.
  10. 제 8항에 따른 핵산 조성물을 포함하는 발현 벡터 조성물로서, 제 1 핵산 및 제 2 핵산은 단일 발현 벡터에 포함되는, 발현 벡터 조성물.
  11. 제 9항 또는 제 10항의 발현 벡터 조성물을 포함하는 숙주 세포.
  12. 항체를 제조하는 방법으로서, 제 11항의 숙주 세포를 상기 항체가 발현되는 조건 하에 배양하는 단계, 및 상기 항체를 회수하는 단계를 포함하는, 방법.
  13. 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체 및 약제학적으로 허용가능한 담체 또는 희석제를 포함하는 조성물.
  14. 대상체에서 면역 반응을 조절하는 방법으로서, 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제 8항에 따른 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  15. 제 13항에 있어서,
    상기 방법은 대상체에서 면역 반응을 자극하고, 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제 8항에 따른 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  16. 제 13항에 있어서,
    상기 방법은 대상체에서 면역 반응을 억제하고, 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제 8항에 따른 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  17. 암을 필요가 있는 대상체에서 치료하는 방법으로서, 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제 8항에 따른 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  18. 제 17항에 있어서,
    상기 암은 B 세포 악성 종양인, 방법.
  19. 제 17항 또는 제 18항에 있어서,
    상기 암은 만성 림프구성 백혈병인, 방법.
  20. 제 17항 내지 제 19항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 항체는 하나 이상의 추가적인 암 치료제와 조합되는, 방법.
  21. 제 20항에 있어서,
    상기 추가적인 암 치료제는 면역 체크포인트 저해제인, 방법.
  22. 제 21항에 있어서,
    상기 면역 체크포인트 저해제는 PD-1 저해제, PD-L1 저해제, CTLA-4 저해제, TIM-3 저해제 및 LAG-3 저해제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
  23. 자가면역 질환을 필요가 있는 대상체에서 치료하는 방법으로서, 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제 8항에 따른 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  24. 제 23항에 있어서,
    상기 항체는 하나 이상의 추가적인 항-염증 치료제와 조합되는, 방법.
  25. 세균성 감염을 필요가 있는 대상체에서 치료하는 방법으로서, 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제 8항에 따른 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  26. 제 25항에 있어서,
    상기 항체는 하나 이상의 항생물질 치료제와 조합되는, 방법.
  27. 바이러스성 감염을 필요가 있는 대상체에서 치료하는 방법으로서, 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제 8항에 따른 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  28. 제 27항에 있어서,
    상기 항체는 하나 이상의 항-바이러스 치료제와 조합되는, 방법.
  29. 대상체에서 FCMR을 조절하는 방법으로서, 제 1항 내지 제 7항 중 어느 한 항에 따른 항체 또는 제 8항에 따른 조성물의 유효량을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
  30. 제 29항에 있어서,
    FCMR을 조절하는 것은 FCMR 활성을 억제하는, 방법.
  31. 제 29항에 있어서,
    FCMR을 조절하는 것은 FCMR 활성을 촉진하는, 방법.
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