KR20210090208A - 조성물 및 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원의 적어도 1종의 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함하는 바이러스 벡터에 관한 것이며, 여기서 상기 바이러스 벡터는 아데노바이러스 벡터이다. 본 발명은 또한 의학적 치료에서 사용하기 위한 용도, 조성물, 그리고 의학적 치료 방법에 관한 것이다.

Description

조성물 및 방법

본 발명은 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV: Varicella-Zoster Virus)에 대하여 면역 반응을 유도하는데 유용한 조성물에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 VZV Gly E 단백질로부터의 에피토프(들)를 포함하는 바이러스 벡터, 예컨대 그를 포함하는 아데노바이러스 벡터에 관한 것이다.

바리셀라-조스터 바이러스 (VZV 또는 "조스터 바이러스")는 주로 소아에서 수두를 야기한다. 그러나, 더 중요한 것은 동일한 바이러스가 보통 1차 수두 감염 수십년 후에 성인에서 재출현하여 심각한 질환인 대상포진을 야기할 수 있다는 것이다.

헤르페스 조스터(herpes zoster)로도 알려져 있는 대상포진은 신경 및 그 주변 피부의 감염이다. NHS (영국 국립 보건성)에 따르면, 대략 4명의 사람마다 1명 정도로 그의 생애 동안 대상포진의 적어도 1회의 에피소드를 겪게 되는 것으로 추정된다.

대상포진의 주요 증상은 통증과 그에 이어지는 외관상 수두와 유사한 가려운 수포로 발달하는 발진이다. 1주일에 이르는 동안 새로운 수포가 출현할 수 있으나, 출현 수일 후 그것은 색상이 황색이 되고, 편평해지며, 마른다. 이후 수포가 존재하였던 딱지가 형성되는데, 그것은 다소 사소한 흉터형성 및 피부 색소의 상실로 이어질 수 있다. 통증은 일정한 둔통 또는 작열감일 수 있으며, 그 강도는 경증에서 중증까지 가변적일 수 있다. 환자는 때로는 예리한 자통을 느낄 수 있으며, 영향을 받는 피부 영역은 보통 얼얼해지게 된다. 일부 경우에서, 대상포진은 통증성 발진이 처음 출현하기 수일 전에 발달하는 일부 초기 증상들, 예컨대 두통, 작열감, 저림, 영향을 받은 영역에서의 피부의 무감각 또는 가려움, 일반적으로 편치 않은 느낌, 및/또는 높은 체온 (열)을 야기할 수 있다.

대상포진의 에피소드는 전형적으로 2 내지 4주 가량 지속된다. 그것은 보통 신체 일측 상의 특정 영역에만 영향을 준다. 그것은 보통 신체의 중심선을 넘지 않는다. 안면 및 안구를 포함하여 인간 신체의 어떠한 부분도 영향을 받을 수 있지만, 흉부 및 복부가 가장 흔한 영역이다.

영국에서의 수명 기대치가 현재 연령 80세를 넘기 때문에, 장기간의 건강 유지는 현대 건강관리의 핵심 목표이다. 특히 대상포진과 같이 더 고령인 성인에서 더 빈번하게 발생하는 영향력 있는 질병을 표적으로 하는 의학적 발달은 질환 및 연관 건강관리 수요의 부담을 낮추는데 중요한 역할을 하게 된다.

90%를 초과하는 성인이 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV)에 감염된 적이 있으며, 그에 따라 대상포진 (헤르페스 조스터)을 발병할 위험성이 있다. 대상포진이 더 고령인 성인 (> 50세의 연령)에서 가장 빈번하기는 하지만, 어떠한 연령에서도, 그리고 특히 면역-손상된 (약화된 면역계를 가지고 있는) 사람들에서 그것이 발생할 수 있다. 보통, 면역계가 바이러스를 제어할 수 있지만, 생애 후반기에는 VZV가 재활성화되어 대상포진을 초래할 수 있다. 왜 이러한 일이 일어날 수 있는지는 분명하지 않지만, 면역노쇠 (노화에 의해 야기되는 면역계의 점차적인 저하)에 그것이 연관될 수 있다. 더 고령인 성인을 표적으로 하는 질병으로부터 특이적으로 보호하는 백신의 개발이 핵심적인 건강관리의 시작이다.

증상의 중증도 및/또는 합병증이 발병할 위험성을 감소시키는 것이 바람직하다. 대상포진의 합병증에는 수막염 또는 뇌염이 포함될 수 있으며; 대상포진이 안구(들)에 영향을 주는 경우, 빠르게 이상이 치료되지 않으면 영구적인 시력 문제를 발병할 위험성이 있다.

EP3210631은 헤르페스 조스터의 예방 및 치료를 위한 DNA 백신 조성물, 그리고 그것을 사용하여 VZV 항원에 대하여 T 세포를 활성화시키기 위한 방법에 대해 개시하고 있다. 상기 문헌은 하기를 함유하는 헤르페스 조스터 예방 및 치료용 DNA 백신 조성물을 기재하고 있다: VZV 단백질을 코딩하는 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV)-유래 유전자의 삽입 부위를 포함하는 적어도 1종의 유형의 플라스미드; 및 기타 제약상 허용되는 성분들. 상기 문헌에 바이러스 벡터에 대한 언급은 존재하지 않는다.

WO2014/043189는 조건부 복제 결핍 헤르페스 바이러스, 및 백신에서의 그의 용도에 대해 개시하고 있다. 바이러스 복제에 필수적인 1종 이상의 유전자 상에의 1종 이상의 탈안정화 도메인의 도입 또는 융합에 의해 조건부 복제 결핍이 된 변이 또는 돌연변이화 헤르페스 바이러스 및 함유 숙주 세포의 제조가 기재되어 있다. 상기 문헌에 바이러스 벡터에 대한 언급은 존재하지 않는다.

EP1721981은 BAC (이. 콜라이 (E. coli ) 인공 염색체)를 사용하여 제조된 재조합 바리셀라-조스터 바이러스, 및 그와 같은 바이러스를 포함하는 제약 조성물에 대해 개시하고 있다. 상기 문헌의 초점은 VZV 비-필수 영역의 식별에 있는데, 구체적으로 여기서 비-필수 영역은 유전자 11의 ORF를 플랭킹하는 영역, 또는 유전자 12의 ORF를 플랭킹하는 영역이다. 상기 문헌에 VZV 항원(들)을 보유하는 바이러스 벡터에 대한 언급은 존재하지 않는다.

WO2009/012486은 바리셀라 조스터 바이러스-바이러스 유사 입자 (VLPS) 및 항원에 대해 개시하고 있다. 구체적으로, 상기 문헌은 VZV gE 단백질을 포함하는 바리셀라 조스터 바이러스 (VZV)로부터의 정제된 바이러스 유사 입자 (VLP)를 기재하고 있으나, VZV 핵산 또는 효모 Ty 단백질은 포함하고 있지 않다. 상기 문헌의 초점은 감염원으로부터의 적어도 1종의 추가적인 단백질을 추가로 포함하는 VLP에 있다. 상기 문헌에서의 바이러스 벡터에 대한 유일한 언급은 일반적인 발현 벡터로서의 단락 0048-0049에 존재한다.

이와 같은 바이러스에 대한 선행 기술 백신에는 조스타박스(Zostavax)™ (머크(Merck)에 의해 제조됨)가 포함된다. 조스타박스™에서의 보호는 주로 항체 반응을 통한다. 유럽 의약국 (EMA) 문서 WC500053460이 조스타박스에 대해 논의하고 있는데, gpELISA 측정에 의해서는 면역 반응과 헤르페스 조스터 (HZ)로부터의 보호 사이의 상관관계가 관찰된 반면, VZV IFN-γ ELISPOT 테스트의 결과는 보호에 대하여 덜 분명한 상관관계를 나타낸 것으로 관련 기술분야에 주장되어 있다. 조스타박스™는 전형적으로 영국에서 70세에 모든 성인에게 제공되고 있다. 그러나, 백신이 완전히 효과적인 것은 아니어서, 대상포진의 대한 그의 유용성은 (연령 50-59세 사이 성인에서의 69.8%로부터 연령 ≥70세인 성인에서의 37.6%까지) 연령에 따라 감소한다. 이에 따라, 효능은 매우 저조한 30-40%이다. 이는 관련 기술분야에서 문제가 된다. 또한, 조스타박스™에 의해 제공되는 보호는 전형적으로 문제가 될 만큼 짧은 5년 이하이다.

또한, 대상포진을 발병할 위험성이 증가되어 있는 약화된 면역계를 갖는 사람들 (예컨대 HIV를 보유하는 환자)에 대해서는 백신이 권장되지 않고 있다. 이에 따라, 모든 연령에 걸쳐, 그러나 특히 고령 및 면역손상된 군집에서 향상된 보호를 제공하는 백신에 대한 충족되지 않은 요구가 존재한다.

조스타박스™는 살아있는 약독화 바이러스이다. 따라서, 인간에게 제공되었을 때, 그것은 대상포진 질환은 야기하지 않으면서 인간에서의 면역 반응을 부스팅하는 제한된 감염을 야기한다. 이와 같은 조제물은 마우스에서는 복제되지 않으며, 그에 따라 마우스에 제공되었을 때 그것은 복제 결핍 바이러스를 제공하는 것과 더 유사하다는 것을 알아야 한다.

싱그릭스(SHINGRIX)™는 연령 50세 이상 성인에서의 헤르페스 조스터 (대상포진) 예방용으로 지시되어 있는 백신이다. 싱그릭스™는 벨기에 릭센사르트 소재 글락소스미스클라인 바이올로지칼스(GlaxoSmithKline Biologicals)에 의해 제조된다. 싱그릭스™는 동결건조된 바리셀라 조스터 바이러스 당단백질 E (gE) 항원 구성요소를 동봉된 AS01B 아주반트 현탁액 구성요소와 재구성하는 것에 의해 제조된다. 따라서, 싱그릭스™는 Gly E 항원을 기반으로 하는 단백질 백신이다. 이것이 효과적이 되기 위해서는, 2회 투여로 제공되어야 한다. 각 투여는 AS01 아주반트와 같은 아주반트와 함께 제공되어야 한다. 그와 같은 아주반트는 반응원성이며, 이는 환자에게 불편할 수 있어서 - 수용자의 85%가 주사 시 통증을 보고하고 있다. 발생할 수 있는 싱그릭스™의 부작용에는 발적, 가려움, 부기, 온감, 타박상 또는 주사 부위 통증이 포함된다. 두통, 근육통, 피로 또는 열이 발생할 수도 있다. 또한, 반응원성이 이차적인 순응도 문제를 야기할 수 있다. 이는 백신을 투여한 후 겪는 반응이 환자를 그의 이차 투약을 위한 복귀를 꺼리게 만드는 경향이 있으며, 그럼에도 불구하고 권장 요법 및 연관 보호 수준을 완성하기 위해서는 이차 투약이 필요하기 때문이다. 이는 관련 기술분야에서 문제가 된다.

싱그릭스™ 백신과 같은 선행 기술 접근법의 추가 결점은 그것이 저장되고 투여 시점에 혼합되어야 할 2개의 재료 바이알을 필요로 한다는 것인데 - 싱그릭스™의 경우, 그것은 투여 시점에 단일 혼합물로 제제화되는 아주반트 바이알 및 항원 바이알이다.

미국에서, 조스타박스의 표시 가격은 민간 부문에서 용량당 $196.91, 그리고 CDC 백신 약정의 경우 용량당 $117.12이다. 보전 면에서, 조스타박스는 (일부 플랜이 환자의 공동-지불을 요구할 수 있기는 하지만) 미국 대부분의 민간 건강 보험회사 (98%)에서 연령 ≥60세 성인에 대하여 보장되고 있다. 상기 백신은 또한 비록 그것이 파트 D 하의 것이 되기는 하지만 (거기에 종종 공동-지불 요건 및 자부담 비용이 있음), 연령 ≥65세 성인을 위한 메디케어(Medicare)에 의해서도 보장된다. 또한, 평론가들은 싱그릭스의 2-용량 투여 및 그의 허용성 프로파일이 잠재적인 약점인 것으로 인식하고 있다. 이에 따라, 선행 기술 접근법들과 관련한 지속적인 문제점들이 존재한다.

본 발명은 선행 기술과 관련한 문제점(들)을 극복하고자 하는 것이다.

바리셀라-조스터 바이러스 (VZV)에 대한 적정한 세포-매개 면역 (CMI)의 결여는 대상포진 및 연관 통증을 발병할 더 높은 위험성과 연관되어 있다.

본 발명은 아데노바이러스 - Gly E 조스터 바이러스 백신에 대해 기재한다. 그것은 T-세포 반응을 유도하는 것으로 보인다. 상기 벡터는 프라임 부스트 백신접종 요법에 사용될 수 있다. 본 출원에서 제공되는 데이터에 의하면, 강한 T-세포 반응이 입증된다. 이에 따라, 본 발명은 유익하며 강하고 지속적인 T-세포 반응을 제공한다.

바리셀라 조스터 바이러스 (VZV)는 수두 및 조스터 (대상포진)를 야기한다. 수두는 바리셀라 조스터 바이러스 (VZV)에 의한 최초 감염에 의해 야기되는 고도 접촉전염성 질환이다. 수두는 가장 흔한 소아기 질환 중 1종으로서, 수포-유사 발진 및 열을 특징으로 하며, 생애의 첫 20년 동안 90%를 초과하는 인구가 노출되고 있다. 수두가 일반적으로 경증의 자가-제한 질병이기는 하지만, 면역손상된 대상체 및 성인에서는 그것이 더 심각할 수 있다. 조스터 또는 대상포진은 후방 감각 신경절에 잠복 형태로 존속하는 VZV의 재활성화에 의해 야기된다. 백신접종을 통한 수두의 예방이 바람직한 의학적 개입이다.

본원에서 기재되는 조성물 및/또는 백신은 치료제가 아니라는 것, 즉 그것이 바이러스를 제거/박멸하는 것으로 교시되는 것은 아니라는 것을 알아야 한다. 그것은 VZV 감염(들)의 제어를 유지하는데, 및/또는 대상포진을 야기하는 복제성 VZV 감염의 재출현을 예방하는데 사용하기 위한 백신 조성물로서 교시된다. 다른 말로 하면, 상기 조성물은 바이러스 자체에 직접 작용하는 작용제로서가 아니라 숙주 생물체로부터의 면역 반응의 유도에 사용하기 위한 백신 조성물로서 교시된다. 상기 조성물은 수두에서처럼 최초 감염으로부터 보호를 유도하는데, 및/또는 대상포진에서처럼 잠복성 바이러스 (때로는 '휴면 바이러스'로 지칭됨)의 재활성으로부터 보호를 유도하는데 유용하다.

적합하게는, '기존 감염'이라는 언급은 '잠복성 감염' 또는 '정적 감염', 즉 생애주기의 용원기에 있는 바이러스, 즉 휴면 VZV 감염 (더 이상 활성 감염을 야기하지 않는 것으로 정의됨)을 의미한다.

적합하게는, '감염'이라는 언급은 관련 기술분야에서의 그의 정상적인 의미, 즉 수두 또는 대상포진, 가장 적합하게는 대상포진과 같은 질환을 야기하는 활성 감염 또는 증식성 바이러스 감염의 의미를 갖는다. '감염'은 보통 (상기에서 논의된 바와 같은 잠복성 감염보다는) 연관 바이러스혈증, 즉 활성 감염을 동반하게 된다.

적합하게는, 본원에서 기재되는 조성물은 재출현 VZV 감염의 예방, 적합하게는 복제성 VZV 감염의 예방, 적합하게는 잠복성 VZV 감염의 재활성화에 의해 야기되는 질환(들)의 예방에 사용하기 위한 것이다.

이론에 얽매이고자 하는 것은 아니나, 본 발명자들은 대상포진을 야기하는 성인에서의 바이러스 재출현이 혈중 바이러스에 대한 감쇠하는 T-세포 반응/감쇠하는 T-세포 수 때문일 수 있다고 여기고 있다. 이와 같은 이유로, 본 발명자들은 기존의 접근법 (주로 항체 반응을 기반으로 함)이 목적에 맞지 않을 수 있다고 처음으로 교시한다. 이러한 이유로, 본 발명자들은 강한 세포성 면역 반응, 예를 들어 T-세포 반응을 유도하며 그에 의해 수용자를 보호한다는 이점을 갖는 청구범위에서 제시되는 바와 같은 바이러스 벡터화된 구축물을 교시하는 바이다.

광범위한 측면에서, 본 발명은 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원의 적어도 1종의 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함하는 바이러스 벡터에 관한 것이다. 적합하게는, 상기 바이러스 벡터 및 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원은 이종으로서, 즉 적합하게는 상기 바이러스 벡터는 VZV가 아니거나 또는 그로부터 유래하지 않는다.

적합하게는, 본 발명은 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원의 적어도 1종의 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함하는 바이러스 벡터에 관한 것이며, 여기서 상기 바이러스 벡터는 아데노바이러스 벡터이다.

한 측면에서, 본 발명은 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원의 적어도 1종의 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함하는 바이러스 벡터를 포함하는 조성물에 관한 것이며, 여기서 상기 바이러스 벡터는 아데노바이러스 벡터이다.

적합하게는, 상기 적어도 1종의 에피토프는 적어도 1종의 CD4 T 세포 에피토프 및 적어도 1종의 CD8 T 세포 에피토프를 포함한다.

적합하게는, 상기 아데노바이러스 벡터는 인간 또는 유인원 기원의 것이다.

적합하게는, 상기 아데노바이러스 벡터는 ChAdOx 1 또는 ChAdOx 2이다.

적합하게는, 상기 조성물은 아주반트-무함유이다.

적합하게는, 상기 Gly E 항원은 서열식별번호(SEQ ID NO): 1 또는 서열식별번호: 2, 적합하게는 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 갖는다.

적합하게는, 상기 폴리뉴클레오티드 서열은 서열식별번호: 3 또는 서열식별번호: 4, 적합하게는 서열식별번호: 4의 서열을 포함한다.

적합하게는, 상기 폴리뉴클레오티드 서열은 bgh 폴리아데닐화 신호 서열식별번호: 6의 서열을 추가로 포함한다.

적합하게는, 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원의 적어도 1종의 에피토프를 코딩하는 상기 폴리뉴클레오티드 서열은 긴 CMV 프로모터에 작동가능하게 연결되며, 적합하게는 상기 긴 CMV 프로모터는 서열식별번호: 7의 뉴클레오티드 서열을 갖는다.

적합하게는, 상기 바이러스 벡터 서열은 ECACC 수탁 번호 12052403 (ChAdOx1)에서의 것과 같다.

적합하게는, 상기 바이러스 벡터 서열은 서열식별번호: 5 (ChAdOx2)에서의 것과 같다.

적합하게는, 포유동물 대상체에 대한 상기 조성물의 단일 용량 투여가 상기 대상체에서 보호 면역을 유도한다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 포유동물 대상체에 대한 상기 조성물의 단일 용량 투여가 상기 대상체에서 보호 면역을 유도하도록 제제화된다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV에 대한 면역 반응의 유도를 위한 것이다.

적합하게는, 상기 면역 반응은 세포성 면역 반응이다. 적합하게는, 상기 세포성 면역 반응은 NK 세포 반응 및/또는 T 세포 반응을 포함한다. 적합하게는, 상기 세포성 면역 반응은 T 세포 반응을 포함한다. 적합하게는, 상기 T 세포 반응은 CD8+ T 세포 반응을 포함한다. 적합하게는, 상기 T 세포 반응은 CD4+ T 세포 반응을 포함한다. 보다 적합하게는, 상기 T 세포 반응은 CD8+ 및 CD4+ T 세포 반응을 포함한다. 가장 적합하게는, 상기 T 세포 반응은 CD4+ T 세포 반응을 포함한다. 적합하게는, 상기 T 세포 반응은 삼중 분비 CD4+ T 세포 반응을 포함한다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV에 대한 면역 반응의 유도를 위한 것으로서, 상기 조성물의 단일 용량이 투여된다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV에 대한 면역 반응의 유도를 위한 것으로서, 상기 조성물은 1회 투여된다.

본 발명은 유리하게는 1회만 투여되었을 때 효과적이라는 이점을 갖는 조성물을 제공한다. 그러나, 한 실시양태에서, 대상체에서의 면역 반응이 시간이 지나면서 감쇠하는 경우라면, 적합하게는 상기 조성물이 상기 대상체에게 투여 (재투여)될 수 있다. 예를 들어, 상기 조성물은 5년마다, 보다 적합하게는 매년 1회 투여될 수 있다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV에 대한 면역 반응의 유도를 위한 것으로서, 상기 조성물은 5년마다 1회, 보다 적합하게는 매년 1회 투여된다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV 감염을 예방하기 위한 것이다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 대상포진의 예방을 위한 것이다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV 감염의 예방 또는 대상포진의 예방을 위한 것으로서, 상기 조성물의 단일 용량이 투여된다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV 감염의 예방 또는 대상포진의 예방을 위한 것으로서, 상기 조성물은 1회 투여된다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV 감염을 예방하는데 사용하기 위한 것이다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 대상포진의 예방에 사용하기 위한 것이다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV 감염의 예방 또는 대상포진의 예방에 사용하기 위한 것으로서, 상기 조성물의 단일 용량이 투여된다.

적합하게는, 상기 기재된 바와 같은 조성물은 VZV 감염의 예방 또는 대상포진의 예방에 사용하기 위한 것으로서, 상기 조성물은 1회 투여된다.

한 측면에서, 본 발명은 의약에서의 상기 기재된 바와 같은 조성물의 용도에 관한 것이다.

한 측면에서, 본 발명은 VZV 감염의 예방을 위한 약제의 제조에서의 상기 기재된 바와 같은 조성물의 용도에 관한 것이다.

한 측면에서, 본 발명은 대상포진의 예방을 위한 약제의 제조에서의 상기 기재된 바와 같은 조성물의 용도에 관한 것이다.

한 측면에서, 본 발명은 대상체에서 Gly E 항원에 대한 CD4+ 및 CD8+ T 세포 반응 둘 다의 유도를 위한 또는 둘 다를 유도하는 약제의 제조에서의 상기 기재된 바와 같은 조성물의 용도에 관한 것이다. 적합하게는, 상기 약제는 상기 대상체에서 Gly E 항원에 대한 항체를 추가로 유도한다.

한 측면에서, 본 발명은 포유동물 대상체에서의 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV)에 대한 면역 반응의 유도 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 상기 기재된 바와 같은 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.

한 측면에서, 본 발명은 포유동물 대상체에서의 대상포진의 예방 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 상기 기재된 바와 같은 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.

적합하게는, 상기 조성물의 단일 용량이 상기 대상체에게 투여된다.

적합하게는, 상기 조성물은 1회 투여된다.

적합하게는, 상기 조성물은 5년마다 1회, 보다 적합하게는 매년 1회 투여된다.

적합하게는, 상기 조성물은 피하, 피내 및 근육내로 이루어진 군으로부터 선택된 투여 경로에 의해 투여된다. 적합하게는, 상기 투여는 근육내이다.

한 실시양태에서, 적합하게는 상기 기재된 바와 같은 조성물은 수두의 치료 또는 예방을 위한 것이다.

본 발명자들은 감염성 질환으로부터 보호하는데 혁신적인 기술인 바이러스 벡터화된 백신을 사용하였다. 본 발명자들은 바이러스 벡터화된 백본에 다른 바이러스 (표적 질환을 야기하는 것)의 작은 부분을 삽입하는 것에 의해 바이러스를 '재창출'하는 고유 접근법을 사용한다. 이러한 '재조합된' 바이러스 백신은 복제될 수 없기 때문에, 질환은 야기하지 않으나 - 삽입되거나 외래의 것인 바이러스 세그먼트에 대하여 강한 면역 반응을 유도할 수는 있게 된다. 본 발명자들은 - 둘 다가 대상포진을 발병할 위험성이 있는 핵심 군집인 - 더 고령의 성인 및 면역-손상된 개체 (HIV 감염자)에서 바이러스 벡터화된 백신이 안전하며 면역 반응을 효과적으로 유도할 수 있다는 것을 입증하였다.

본원에서, 본 발명자들은 VZV (대상포진의 기본적인 원인물질)에 대한 바이러스 벡터화된 백신을 교시하며, 해당 백신을 테스트하여 적절한 모델에서 그것이 면역 반응을 유도할 수 있다는 것을 제시한다.

관련 기술분야에서, 최근 데이터는 대상포진에 대하여 새롭게 개발된 백신 (싱그릭스™ - 아주반트 첨가된 단백질)이 반복적인 백신접종으로 제공되는 경우 대상포진에 대하여 보호 효능을 유도할 수 있다는 것을 시사하고 있다. 불행히도, 아주반트의 주된 사용 (즉 강한 면역 반응을 유도하기 위한 것)은 결과적으로 부작용을 유도할 수 있으며, 관련 기술분야에서 이는 문제가 된다. 유리하게도, 본 발명의 바이러스 벡터화된 백신은 마찬가지로 강한 면역 반응을 유도할 수 있으면서도, 백신접종-후 제한되거나 최소한인 부작용을 나타낸다.

본 발명자들은 VZV에 대하여 바이러스 벡터화된 백신을 생성시키고, 해당 백신이 적절한 모델에서 면역 반응을 유도할 수 있는지 테스트하였다.

본 발명자들은 VZV에 대하여 강하며 오래-지속되는 면역을 유도하기 위한 다양한 백신접종 요법을 교시한다.

본 발명자들은 VZV-백신을 생성시키고, 백신접종 연구로서 관련 기술분야에 알려져 있는 현재 인가되어 있는 백신을 사용하여 달성되는 것에 비해 더 강한 세포-매개 면역 (CMI)을 입증하였다.

본원에서 사용될 때, '약'이라는 용어는 주어지는 값의 +/- 1%를 의미한다.

본 발명은 척추동물 대상체 (적합하게는 포유동물, 보다 적합하게는 영장류, 가장 적합하게는 인간)에서 바리셀라 조스터 바이러스 (VZV)에 대하여 면역 반응, 적합하게는 T 세포 매개 면역 반응을 유도하는데 적합한 벡터 (적합하게는 바이러스 벡터, 가장 적합하게는 아데노바이러스 벡터), 조성물 및 제제 (예컨대 제약 조성물, 예컨대 약제, 예컨대 백신)를 제공한다.

적합하게는, 상기 면역 반응은 세포 매개 반응을 포함한다.

적합하게는, 면역 반응은 세포 매개 면역 (CMI)을 포함한다.

적합하게는, 면역 반응은 CD4+ T 세포의 유도를 포함한다.

적합하게는, 면역 반응은 CD4+ 세포독성 T 세포 (CTL) 반응의 유도를 포함한다.

한 실시양태에서, 면역 반응은 체액성 반응 및 세포 매개 반응 둘 다를 포함한다.

적합하게는, 면역 반응은 보호 면역을 포함한다.

적합하게는, 본 발명의 벡터(들)는 대상 항원의 1종 이상의 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함한다. 한 실시양태에서, 적합하게는 본 발명의 벡터(들)는 대상 항원의 1종 이상의 에피토프를 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 상보체인 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함한다.

적합하게는, 상기 1종 이상의 에피토프(들)는 T 세포 에피토프(들)이다. 적합하게는, 상기 1종 이상의 에피토프(들)는 CD4+ T 세포 에피토프(들)이다. 적합하게는, 상기 1종 이상의 에피토프(들)는 CD8+ T 세포 에피토프(들)이다. 적합하게는, 상기 1종 이상의 에피토프(들)는 적어도 1종의 CD4+ T 세포 에피토프 및 적어도 1종의 CD8+ T 세포 에피토프를 포함한다.

적합하게는, 본 발명의 벡터(들)는 GlyE의 CD4 T 세포 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함한다.

적합하게는, 본 발명의 벡터(들)는 GlyE의 CD8 T 세포 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함한다.

적합하게는, 본 발명의 벡터(들)는 GlyE의 CD4 및 CD8 T 세포 에피토프 둘 다를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함한다.

적합하게는, 상기 벡터는 (특히 인간에서) GlyE에 대한 CD4 및 CD8 T 세포 반응 둘 다를 유도하는데; 가장 적합하게는 항체에 더하여 (특히 인간에서) GlyE에 대한 CD4 및 CD8 T 세포 반응 둘 다를 유도하는데 사용된다.

이는 싱그릭스와 같은 선행 기술로부터 본 발명의 ChAd 백신을 추가로 구별한다. 또한, 이는 선행 기술에 비해 차별적이며 개선된 본 발명의 또 다른 특성을 제시한다.

아데노바이러스 벡터는 DNA 게놈을 갖는다. 따라서, 상기 핵산은 적합하게는 DNA, 가장 적합하게는 dsDNA이다.

적합하게는, 상기 아데노바이러스 벡터는 유인원 또는 인간 기원의 것이며; 적합하게는, 아데노바이러스 벡터는 침팬지 또는 인간 기원의 것이고; 적합하게는, 아데노바이러스 벡터는 침팬지 기원의 것이다.

적합하게는, 상기 뉴클레오티드 서열은 DNA 서열이다.

한 실시양태에서, 본 발명자들은 ChAdOx1 바이러스 벡터 백본에 클로닝된, 주요 VZV 표면 항원 중 1종인 당단백질 E를 제공한다. 발현은 긴 CMV 프로모터에 의해 구동된다. VZV gpE에 대한 면역 반응을 증강하기 위한 침팬지-유래 바이러스 벡터화된 백신의 사용은 본 발명자들이 아는 최대한으로는 지금까지 시도된 바 없다. 결정적으로, 본 발명자들은 - 둘 다가 대상포진을 발병할 위험성이 있는 핵심 군집인 - 더 고령의 성인 및 면역-손상된 개체 (HIV 감염자)에서 바이러스 벡터화된 백신이 안전하며 면역 반응을 효과적으로 유도할 수 있다는 것도 입증하였다.

대상포진 (헤르페스 조스터) 및 수두 (바리셀라)

상기에서 주지된 바와 같이, 대상포진 (때로는 '헤르페스 조스터'로 지칭됨)은 수두를 야기하는 동일 바이러스인 바리셀라 조스터 바이러스 (VZV)에 의해 야기된다. 대부분의 사람들이 소아기에 수두에 걸리는데, 질병이 해결된 후, 바리셀라-조스터 바이러스는 신경 시스템 중에서 불활성 (휴면)으로 유지된다. 면역계가 바이러스를 억제 상태로 유지하지만, VZV는 생애 후반기에 재활성화되어 대상포진을 야기할 수 있다.

이론에 얽매이고자 하는 것은 아니며, 대상포진 바이러스가 왜 생애 후반기 단계에 재활성화되는지는 잘 알려져 있지 않지만, 대부분의 경우 저하된 면역을 갖는 것에 의해 야기되는 것으로 생각된다.

더 상세하게 말하자면, 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV)인 알파 헤르페스 바이러스에 의한 감염은 2종의 개별 질환인 바리셀라 및 헤르페스 조스터와 연관되어 있다. 1차 감염은 보통 소아기 또는 청소년기에 걸리며 거의 모든 개체에 영향을 주는 일반적으로 경증의 자가-제한성 질병인 수두 (바리셀라)를 초래한다. VZV에 의한 최초 1차 감염 후, 바이러스는 후방 뿌리 신경절에서 잠복성으로 유지된다. 잠복성 바이러스는 빈번하게 준임상으로 재활성화 및 복제될 수 있는 것으로 추정된다. 이러한 일시적인 준임상적 바이러스혈증의 에피소드는 질환의 임상적 발현이 없는 반복되는 항원성 면역 자극으로 이어진다. 그러나, 일부 개체에서, 잠복성 바이러스의 재활성화 및 복제는 종종 대상포진으로 지칭되는 헤르페스 조스터 (HZ)의 임상적 발현을 초래한다. HZ은 일반적으로 단일 척추 또는 두개 감각 신경절에 의해 신경지배된 피부 영역에 상당하는 피부종 분포를 동반하는 편측 소포성 발진을 특징으로 한다. 전형적으로, 소포는 7 내지 10일에 걸쳐 딱지가 되지만, 치유하는데 한달까지 걸릴 수 있다. HZ의 가장 중대한 임상 발현들 중 1종은 통증으로서, VZV 유도 신경 파괴 및 염증에 기인하는 것으로 생각된다. HZ-관련 통증은 하기 3회의 기간 동안 발생할 수 있다: - 피부 발진의 개시 전 (전구 통증, 전형적으로 피부 병변 출현 3 내지 5일 전에 시작됨); - 급성 발진 (급성 신경염) 및 이어지는 급성 피부 병변 치유 기간 동안; - 피부 치유 이후 장기간의 시간 동안 (포진후 신경통, PHN). HZ의 가장 중증 후유증인 PHN은 HZ 환자의 10-20%에서 발생하며, 대부분의 환자가 하기의 패턴을 겪는 특징적인 통증 패턴으로 기재된다: - 작열통, 박동통 또는 동통으로 기재되는 일정한 통증; - 간헐적인 예리하고 찌르는 듯하며 전격적이고 베이는 듯한 통증; - 보통 자극 기간을 훨씬 넘어 지속되는 이질통으로서의 자극-유발 통증. PHN 환자의 적어도 90%에 존재하는 이질통이 전형적으로 가장 고통스럽고 쇠약하게 하는 HZ의 구성요소로 기재되고 있다.

HZ로 이어지는 메커니즘은 잘 알려져 있지 않지만, 면역적격인 사람에서의 HZ 발병의 한 가지 소인이 되는 인자는 나이를 먹는 것이다. HZ의 발병률 및 중증도는 연령 20-50세 성인에서의 연간 - 1000 사람당 2.5명에서 연령 >60세 연령 사람에서의 연간 - 1000 사람당 7.8명으로 증가한다. 또한, 다른 것은 건강한 소아 및 더 젊은 성인에서는 상대적으로 덜 빈번한 PHN과 같은 합병증이 더 고령인 개체 중에서는 거의 절반에서 발생한다. 다른 것은 건강한 고령 대상체에서의 HZ 위험성의 연령-관련 증가는 면역노쇠에 기인하며 감소된 세포-매개 면역 (CMI)와는 상관되어 있지만 혈중 VZV 특이적 혈청 항체의 농도와는 상관되어 있지 않을 것으로 가정된다. 그러나, 면역손상된 환자에서 수행된 연구들은 낮거나 부재하는 CMI가 HZ 발생의 필요 조건 역할을 하기는 하지만, 충분 조건은 아님을 지시하고 있다.

바이러스 벡터

적합하게는, 바이러스 벡터 (때로는 '벡터'로 지칭됨)는 아데노바이러스 벡터이다.

적합하게는, 상기 코딩 서열은 아데노바이러스 기반 벡터에 존재한다. 다른 말로 하면, 적합하게는 상기 코딩 서열은 아데노바이러스 벡터에 존재한다.

어떠한 적합한 아데노-기반 바이러스 벡터도 사용될 수 있다.

본 발명의 아데노바이러스 벡터는 인간에서 사용하기에 적합한 임의의 아데노바이러스 벡터일 수 있다.

더 상세하게 말하자면, 바람직하게는 비-인간 아데노바이러스로부터 유래하는 인간 용도의 임의의 복제-결핍 바이러스 벡터가 사용될 수 있다. 수의학 용도로는, Ad5가 사용될 수 있다.

적합하게는, 벡터는 ChAdOx1일 수 있다.

적합하게는, 벡터는 ChAdOx2일 수 있다.

ChAdOx1

ChAdOx1에 대해서는 특허 출원 번호 WO2012/172277에 기재되어 있다. 간단하게 말하자면, ChAdOx1은 "Y25" 침팬지 아데노바이러스 단리물로부터 유래한다. Y25로부터 유래하는 복제 결핍 벡터를 수득하여, E1 및 E3 유전자를 결실시켰다. 수율을 향상시키기 위하여, E4의 일부 ORF를 더 우수한 수율로 이어지는 인간 아데노바이러스 5로부터의 상응하는 ORF로 대체하였다 (3개의 해당 ORF가 대체되었음). E4는 바이러스 복제와 연관되어 있으며, 면역원성/안전성에는 영향을 주지 않는 것으로 여겨지고 있다.

더 상세하게 말하자면, ChAdOx1에 대해서는 문헌 [Dicks MDJ, Spencer AJ, Edwards NJ, Wadell G, Bojang K, et al. (2012) A Novel Chimpanzee Adenovirus Vector with Low Human Seroprevalence: Improved Systems for Vector Derivation and Comparative Immunogenicity. PLoS ONE 7(7): e40385] 및 WO2012/172277에 기재되어 있다. 상기 문헌 둘 다는 특히 그의 구축 및 제조를 포함한 ChAdOx1 벡터에 대한 구체적인 교시를 위하여 본원에 참조로 포함된다.

더하여, GFP를 포함하는 ChAdOx1의 클론이 ECACC에 기탁되어 있는데: 클로닝된 AdChOX1의 게놈을 포함하는 세균 인공 염색체 (BAC)를 포함하는 이. 콜라이 균주 SW1029 (DH10B의 파생물)의 샘플(pBACe3.6 AdChOx1 (E4 변형) TIPeGFP, 세포주명 "AdChOx1 (E4 변형) TIPeGFP")이 부다페스트 조약 하에 영국 살리스베리 SP4 0JG 포르턴 다운 소재 건강 보호국의 건강 보호국 보존 센터 중 유럽 세포 보존 센터 (ECACC)에 2012년 5월 24일자로 이시스 이노베이션 리미티드(Isis Innovation Limited)에 의해 기탁되어, 임시 수탁 번호 12052403으로 지정되어 있다. 이시스 이노베이션 리미티드는 본 특허/출원 소유자/출원인의 구 명칭이다.

ChAdOx2

ChAdOx2에 대해서는 특허 출원 WO2017/221031에 기재되어 있다. ChAdOx1과 유사하게, ChAdOx2는 침팬지 아데노바이러스의 C68 단리물로부터 유래한다. 역시 복제 결핍 바이러스를 수득하여, E1 및 E3 유전자를 결실시켰다. ChAdOx1에서 수행된 것과 같은 3개 E4 ORF의 대체는 ChAdOx2에서 실행될 경우 난제를 부여한다. 이에 따라, ChAdOx2의 전체 E4 영역을 조작된 ChAdOx1 (상기 기재된 바와 같음) E4 영역으로 대체하였다.

더 상세하게 말하자면, ChAdOx2 벡터의 뉴클레오티드 서열 (E1 로커스에 게이트웨이(Gateway)™ 카세트를 포함함)은 서열식별번호: 5에 제시되어 있다. 이것은 침팬지 아데노바이러스 C68을 기반으로 하는 바이러스 벡터이다 (이것은 WO2017/221031의 우선권 출원인 - GB 특허 출원 번호 1610967.0의 서열식별번호: 10의 서열임).

더하여, GFP를 포함하는 ChAdOx2의 클론이 ECACC에 기탁되어 있는데: 기탁 수탁 번호 16061301이 부다페스트 조약 하에 영국 살리스베리 SP4 0JG 포르턴 다운 소재 건강 보호국의 건강 보호국 보존 센터 중 유럽 세포 보존 센터 (ECACC)에 2016년 6월 13일자로 이시스 이노베이션 리미티드에 의해 기탁되어 있다. 이시스 이노베이션 리미티드는 본 특허/출원 소유자/출원인의 구 명칭이다.

따라서, ChAdOx1와 ChAdOx2는 어느 정도 상이하므로, 그들이 함께 이종 프라임 부스트 요법에 사용될 수 있다 (예컨대 ChAdOx1 프라임 후 이어지는 ChAdOx2 부스트 또는 ChAdOx2 프라임 후 이어지는 ChAdOx1 부스트). 물론, 이들 벡터 중 어느 하나가 통상적인 이종 프라임 부스트 요법, 예를 들어 아데노바이러스 프라임 후 이어지는 폭스 바이러스 부스트 또는 폭스 바이러스 프라임 후 이어지는 아데노바이러스 부스트에 사용될 수도 있다.

ChAdOx1/ChAdOx2로부터의 백신 용량의 제조는 동일하다. 따라서, ChAdOx 벡터의 조작/증폭/제조에 대하여 본원에서 기재되는 기술들은 ChAdOx1 및/또는 ChAdOx2에 동일하게 적용될 수 있다. 일반적인 제조 원리가 동일하기는 하지만, 비리온에 있어서의 약간의 서로 다른 전하로 인하여 하류 처리의 정확한 조건에 약간의 미미한 차이가 존재하게 된다. 이는 충분히 바이러스 제조 기술분야 통상 기술자의 일상적인 변화에 속한다.

간단하게 말하자면, 본 발명의 조성물을 위한 바이러스 벡터의 제조/수확/정제는 적합하게는 GMP (우수 제조 기준 (Good Manufacturing Practice)) 조건 하에서 수행된다. 본 발명의 바이러스 벡터는 바이러스 복제에 요구되는 임의의 결실된 유전자의 상보체를 포함하는 조작된 세포주에서 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 아데노바이러스 벡터는 적합하게는 본 발명에 따라 아데노바이러스 벡터에서 기능상 결실된 유전자를 발현하는 HEK293과 같은 형질전환된 세포주에서의 벡터 성장 및 수율을 최적화하여 설계된 1종 이상의 변형을 추가로 포함한다. 아데노바이러스 벡터의 제조에 대해서는 관련 기술분야에 잘 알려져 있다. 구체적으로, ChAdOx1 및 ChAdOx2 벡터와 같은 아데노바이러스 벡터의 제조를 위한 정밀한 조건들은 WO2012/172277 또는 WO2017/221031과 같은 선행 기술에 기재되어 있다.

제제

임상용 생성물에 사용되는 바와 같은 제제 완충제는 하기이다:

제제 완충제 구성요소

1. 10 mM 히스티딘

2. 7.5% 수크로스

3. 35 mM 소듐 클로라이드

4. 1 mM 마그네슘 클로라이드

5. 0.1% 폴리소르베이트 80

6. 0.1 mM EDTA

7. 0.5% 에탄올

8. 염산 (~pH 6.6까지의 pH 조정용)

유럽 약전 주사용수 중에 제제화함.

다른 제제, 예를 들어 대안적인 완충제 예컨대 머크(Merck) 제제화 완충제 A195 (10 mM 트리스(Tris), 10 mM 히스티딘, 5% 수크로스, 75 mM NaCl, 1 mM MgCl₂, 0.02% PS-80, 0.1 mM EDTA, 0.5% EtOH, pH 7.4)가 사용될 수도 있다.

에어로졸과 같은 다른 투여 경로용 제제는 숙련된 작업자에 의해 적절하게 조정되게 된다.

적합하게는, 조성물 및/또는 제제는 아주반트를 포함하지 않는다. 적합하게는, 아주반트는 본 발명의 조성물 및/또는 제제에서 생략된다.

항원 삽입

Gly E 항원을 코딩하는 뉴클레오티드 서열의 삽입에는, 적합하게는 hCMV IE 프로모터와 함께 적합하게는 E1 부위가 사용될 수 있다. E1 부위에의 삽입은 충분히 숙련된 독자의 영역에 속하는 바; 소정의 지침이 필요한 경우, ChAdOx1 및 ChAdOx2 벡터에 대한 설명 (상기 참조), 및/또는 WO2012/172277 또는 WO2017/221031을 참조한다. 적합하게는, hCMV IE 프로모터의 짧거나 긴 버전; 가장 적합하게는 프로모터, 특히 긴 프로모터의 교시를 위하여 구체적으로 본원에 참조로 포함되는 WO2008/122811에 기재되어 있는 바와 같은 긴 버전이 사용될 수 있다.

원할 경우, E3 부위에, 또는 역전 말단 반복 서열 가까이에 항원을 삽입하는 것 또한 가능하다.

항원 발현

항원은 바이러스 벡터로부터 구성적으로 발현될 수 있다. 실제로, 본 발명자들은 구성적으로 항원을 발현하는 본원에서 기재되는 바이러스 벡터가 수많은 계대에 걸쳐 안정하다는 것을 보였다. 이는 본 발명의 이점이다. 그러나, 원할 경우, 항원의 발현은 제조 동안 억제될 수 있으며, 이는 더 우수한 수율로 이어질 수 있고/거나 항원 독성에 의한 문제를 방지할 수 있다. 이는 작업자 선택의 문제이다.

본원에서 제시되는 데이터에는 T-세포 반응을 제시하는 ELISPOT 데이터가 포함된다. 이는 조스터 바이러스 백신이 주로 항체 반응에 초점을 맞추어 왔던 선행 기술 접근법에서 벗어나는 것이다.

바리셀라-조스터 바이러스 (VZV)

또 다른 측면에서, 본 발명은 VZV 감염의 치료를 위한 본원에서 기재되는 바와 같은 벡터, 조성물 또는 약제에 관한 것이다. '치료'는 예를 들어 휴면 바이러스 (영장류 예컨대 인간과 같은 포유동물에서 때로는 '내인성 바이러스'로 지칭됨)로부터의 재출현의 제어 또는 예방을 의미한다.

적합하게는 본 발명의 벡터, 조성물 또는 약제는 VZV의 재활성화를 제어하기 위한 것이다.

적합하게는 상기 벡터, 조성물 또는 약제는 VZV 감염의 재출현을 예방하기 위한 것이다.

적합하게는 상기 벡터, 조성물 또는 약제는 대상포진을 제어하기 위한 것이다.

적합하게는 상기 벡터, 조성물 또는 약제는 대상포진을 예방하기 위한 것이다.

이점

싱그릭스™ 백신과 같은 선행 기술 접근법의 결점은 그것이 저장되고 투여 시점에 혼합되어야 할 2개의 재료 바이알을 필요로 한다는 것인데 - 싱그릭스™의 경우, 그것은 투여 시점에 단일 혼합물로 제제화되는 아주반트 바이알 및 항원 바이알이다. 반면, 본 발명은 유리하게도 저장/수송/조작되어야 할 단일 재료 바이알만을 필요로 한다.

또한, 조스타박스 또는 싱그릭스™ 선행 기술 백신 중 어느 하나에 비해 우월한 면역원성이 전달된다는 것이 본 발명의 이점이다.

단일 용량만을 필요로 한다는 것이 본 발명의 이점이다.

면역 반응을 유도하는데 단일 용량만을 필요로 한다는 것이 본 발명의 이점이다.

벡터가 면역 손상된 대상체에서 안전하다는 것이 본 발명의 이점이다.

선행 기술 접근법에 비해 더 우수한 반응이 관찰된다는 것이 본 발명의 이점이다.

T-세포 반응, 특히 CD4+ T-세포 반응이 생성된다는 것이 본 발명의 이점이다.

일부 실시양태에서는, CD8+ T-세포 반응이 또한 생성된다는 것이 본 발명의 이점이며; 일부 실시양태에서는, 강한 항체 반응이 또한 생성된다는 것이 본 발명의 이점인데; 가장 중요하게는, 본 발명은 CD4+ T-세포 반응의 생성/강화라는 이점을 제공한다.

강한 CD8+ T 세포 반응이 생성된다는 것이 본 발명의 이점이다.

'우수한' 단일 샷 Ad 백신접종은 100대에서 반응을 제공할 것이며; 부스트는 일반적으로 1,000 초과의 SFU를 제공하는데 요구된다. 따라서, '강한'은 적합하게는 단일 샷 (단일 투여) 후의 >800 SFU를 의미한다. 물론, 숙련된 독자라면, 그것이 용량 의존성일 수 있으며 - 해당 언급이 본원에서 제공되는 바람직한 용량 맥락에서의 것이라는 것 -을 알고 있을 것이다.

예를 들어, ChAdOx1-VZV GpE의 1회 샷 2주 후에도 생성되는 비장세포 10⁶개당 1361 (s.e.m. 145 n=5) SFU의 평균 반응으로서 (N.B. ELISpot가 CD4+ 및 CD8+ T 세포 반응을 측정하게 됨) 강한 T 세포 반응이 측정된다는 것이 본 발명의 이점이다. 이러한 바이러스 벡터를 사용한 이전의 연구는 변이 항원 삽입물에 대한 1회-샷 면역화 후 더 낮은 면역 반응을 나타내었는데, 예를 들어 전임상 모델에서의 1가 EBOV를 사용한 1회 샷 백신접종은 200-500 SFU만을 유도함으로써 - 본 발명이 선행 기술에 비해 훨씬 더 강한 반응을 생성시킨다는 것을 제시한다. 또한, 선행 기술 문헌 [Dicks et al. 2015 (Vaccine 33 (2015) pages 1121-1128 "The relative magnitude of transgene-specific adaptive immune responses induced by human and chimpanzee adenovirus vectors differs between laboratory animals and a target species")]의 도 1 및 도 2는 훨씬 더 낮은 면역원성을 보여줌으로써, 역시 본 발명에 따른 반응의 놀라운 강도를 입증하고 있다.

지속되는 T 세포 반응이 생성된다는 것이 본 발명의 이점이다. 문맥상 달리 명백하지 않는 한, '지속되는'은 적어도 16주를 의미한다.

동일한 벡터들이 환자를 재백신접종 (즉 부스트)하는데 사용될 수 있다는 것이 본 발명의 이점이다. 이는 ChAdOx1을 사용한 프라임 및 ChAdOx2를 사용한 부스트, 또는 ChAdOx2를 사용한 프라임 및 ChAdOx1을 사용한 부스트에 의해 수득될 수 있다. 또한, 부스트가 프라임으로부터 적어도 6개월의 간격으로 수행되는 경우, 프라임에 사용되는 것과 동일한 벡터가 부스트에 사용될 수 있다. 이는 "동종 프라임-부스트"로 지칭될 수 있다.

아주반트를 필요로 하지 않는다는 것이 본 발명의 이점이다. 이는 인간에의 투여에서 아주반트를 사용할 경우 겪게 되는 통증/반응원성이라는 단점을 방지한다.

조성물이 아주반트 첨가된 백신에 비해 더 저렴하다는 것이 본 발명의 이점이다. 아주반트는 복잡한 조제물로서, 투여당 20USD와 같이 고가일 수 있다. 본 발명의 조성물은 단일 구성요소 (즉 기재되는 바와 같은 항원을 포함하는 바이러스 벡터)만을 필요로 하며, 그에 따라 더 간단하고 더 저렴한데, 이는 본 발명의 이점이다.

살아있는 복제 결핍 바이러스 벡터가 사용되며 그에 따라 본 발명이 조스타박스™와 같은 선행 기술에 비해 더 안전하다는 것이 본 발명의 이점이다.

단일 용량만을 필요로 하며, 그에 따라 싱그릭스™와 같은 다중-용량 선행 기술에 비해 본 발명이 더 우수하다는 것이 본 발명의 이점이다.

단일 조성물/단일 바이알만을 필요로 하며, 그에 따라 항원의 것 및 아주반트의 것인 2개의 바이알이 수송 및 저장된 다음 주사 직전에 혼합될 필요가 있는 싱그릭스™와 같은 아주반트 첨가된 선행 기술에 비해 본 발명이 더 우수하다는 것이 본 발명의 이점이다.

조스타박스™ 또는 싱그릭스™와 같은 선행 기술에 비해 면역원성이 우월하다는 것이 본 발명의 이점이다.

Gly E 항원

"Gly E 항원" (때로는 "gE"로 지칭됨)은 VZV의 "표준" gE 항원 서열을 의미한다.

더 상세하게 말하자면, 본 발명의 조성물을 제조하는데 사용되는 원래의 VZV 서열 (및 균주)은 적합하게는 하기와 같은 서열을 코딩하는 것으로 공적으로 개시되어 있다:

정의 인간 헤르페스바이러스 3 단리물 1140VZV 당단백질 E 유전자, 완전 cds

수탁 ( 진뱅크 ( GenBank )) AY253715

버전 AY253715.1:

그것은 하기의 가장 흔하게 알려져 있는 VZV 균주인 인간 헤르페스바이러스 3 균주 Oka 백신 균주와 동일한 코딩 서열이다.

적합하게는, GlyE는 범용 유전자 코드를 사용하여 상기-언급된 코딩 서열 (cds)을 번역하는 것에 의해 생성되는 아미노산 서열, 즉 공적으로 하기로 개시되어 있기도 한 아미노산 서열을 갖는다.

진뱅크 : AY253715.1:

예시적인 Gly E 아미노산 서열은 진뱅크 수탁 번호 AAP32865.1 - 서열식별번호: 1이다. 가장 적합한 GlyE 아미노산 서열은 서열식별번호: 2이다.

적합하게는, 상기 Gly E 항원은 서열식별번호: 1 또는 서열식별번호: 2를 포함한다.

적합하게는, 상기 Gly E 항원은 서열식별번호: 1 또는 서열식별번호: 2로 이루어진다.

적합하게는, 상기 Gly E 항원은 서열식별번호: 1 또는 서열식별번호: 2에 제시된 바와 같은 전체 길이 Gly E 항원을 포함하거나 또는 그로 이루어진다.

적합하게는, 상기 Gly E 항원은 서열식별번호: 1 또는 서열식별번호: 2에 제시된 서열에 비해 임의의 말단절단/돌연변이/태그/링커/융합을 포함하지 않는다.

bgh 폴리아데틸화 신호

소 성장 호르몬 폴리아데닐화 (bgh-폴리A) 신호는 진핵 세포에서의 단백질 발현용으로 특화된 종결 서열이다. 이와 같은 DNA 서열이 임의적으로 GlyE 항원을 코딩하는 핵산 서열에 첨가된다.

예시적인 bgh 폴리아데날화 신호는 서열식별번호: 6에 제시된 서열을 갖는다.

적합하게는, 항원의 발현은 '긴 CMV' 프로모터와 같은 표준 프로모터에 의해 제어된다. '긴 CMV' 프로모터의 예시적인 서열은 서열식별번호: 7에 제시되어 있다.

용도

적합하게는, 상기 방법은 면역화 방법이다.

한 측면에서, 본 발명은 아데노바이러스 벡터를 포함하는 조성물에 관한 것이며, 상기 아데노바이러스 벡터는 GlyE를 포함한다.

적합하게는, 상기 조성물은 아주반트를 포함하지 않는다. 아주반트는 특히 인간과 같은 영장류에서 반응원성을 야기할 수 있다. 이에 따라, 본 발명의 조성물이 아주반트 없이도 효과적이라는 것은 이점이 된다. 적합하게는, 아주반트는 생략된다. 적합하게는, 조성물은 아주반트가 아닌 다른 요소들로 이루어진다. 적합하게는, 아주반트는 본 발명의 조성물로부터 구체적으로 배제된다. 적합하게는, 조성물은 아주반트-무함유 조성물이다.

본 발명은 소아 및 기타 감수성 개체에서 수두를 야기하는 1차 VZV 감염의 예방에 사용될 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 의약에서의 상기 기재된 바와 같은 조성물의 용도에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 VZV 감염용 약제의 제조에서의 상기 기재된 바와 같은 조성물의 용도에 관한 것이다. 적합하게는, 상기 약제는 VZV 감염을 제어하기 위한 것이다. 적합하게는, 상기 약제는 VZV 감염의 재출현을 예방하기 위한 것이다. 적합하게는, 상기 약제는 대상포진을 제어하기 위한 것이다. 적합하게는, 상기 약제는 대상포진을 예방하기 위한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 대상체에서의 면역 반응의 유도 방법에 관한 것이며, 상기 방법은 상기 기재된 바와 같은 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.

적합하게는, 상기 면역 반응은 세포 매개 면역을 포함한다. 적합하게는, 면역 반응은 T-세포 반응을 포함한다. 적합하게는, 상기 T-세포 반응은 CD4+ T-세포 반응을 포함한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 아데노바이러스 기반 벡터를 포함하는 제1 조성물 및 아데노바이러스 기반 벡터를 포함하는 제2 조성물을 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 제1 아데노바이러스 기반 벡터를 포함하는 제1 조성물 및 제2 아데노바이러스 기반 벡터를 포함하는 제2 조성물을 투여하는 것을 포함하는 방법에 관한 것이다.

적합하게는, 상기 조성물과 상기 제2 조성물은 상이하다.

가장 적합하게는, 상기 제1 아데노바이러스 기반 벡터와 상기 제2 아데노바이러스 기반 벡터는 상이하다.

적합하게는, 상기 대상체는 포유동물이다.

적합하게는, 상기 대상체는 영장류이다.

적합하게는, 상기 대상체는 인간이다.

본 발명은 또한 본원에서 기재되는 바와 같은 벡터, 조성물 또는 약제의, VZV 감염의 치료를 위한 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 본원에서 기재되는 바와 같은 벡터, 조성물 또는 약제의, VZV 감염의 제어를 위한 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 본원에서 기재되는 바와 같은 벡터, 조성물 또는 약제의, 휴면 VZV 감염의 제어를 위한 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 본원에서 기재되는 바와 같은 벡터, 조성물 또는 약제의, VZV 감염의 예방을 위한 용도에 관한 것이다.

본 발명은 또한 본원에서 기재되는 바와 같은 벡터, 조성물 또는 약제의, VZV 감염 재출현의 예방을 위한 용도에 관한 것이다.

조성물

적합하게는, 상기 조성물은 항원성 조성물이다.

적합하게는, 조성물은 면역원성 조성물이다.

적합하게는, 조성물은 백신 조성물이다.

적합하게는, 조성물은 제약 조성물이다.

적합하게는, 조성물은 포유동물, 적합하게는 영장류, 가장 적합하게는 인간에의 투여용으로 제제화된다.

적합하게는, 조성물은 그의 투여 경로를 고려하여 제제화된다. 적합하게는, 조성물은 특정되는 투여 경로에 적합하게 되도록 제제화된다. 적합하게는, 조성물은 작업자 또는 의사에 의해 선택된 투여 경로에 적합하게 되도록 제제화된다.

조성물이 아주반트를 필요로 하지 않는다는 것이 본 발명의 이점이다. 적합하게는, 투여를 위한 본 발명의 조성물은 유리하게는 아주반트를 포함하지 않는다. 적합하게는, 본 발명의 조성물에서 아주반트는 생략된다. 가장 적합하게는, 본 발명의 조성물에서 아주반트는 배제된다. 가장 적합하게는, 본 발명의 조성물은 아주반트-무함유이다.

투여

원칙적으로, 어떠한 적합한 투여 경로도 사용될 수 있다.

적합하게는, 상기 조성물은 비내, 경구, 에어로졸, 피하, 피내 및 근육내로 이루어진 군으로부터 선택된 투여 경로에 의해 투여된다.

보다 적합하게는, 상기 조성물은 피하, 피내 및 근육내로 이루어진 군으로부터 선택된 투여 경로에 의해 투여된다.

가장 적합하게는, 상기 투여는 근육내이다.

적합하게는, 본 발명의 조성물은 근육내로 투여된다.

적합하게는, 본 발명의 조성물은 근육내 투여용으로 제제화된다.

적합하게는, 본 발명의 조성물은 단일 용량으로 제공된다.

용량

아데노바이러스 벡터의 용량을 기재하는 대안적인 방식들이 존재한다는 것을 주지해야 한다.

바이러스 입자 - vp/mL. 이는 투여되는 총 바이러스 입자의 계수를 지칭한다.

감염 단위 - i.u./mL. 이는 투여되는 감염 단위의 수를 지칭하며, 면역원성과 더 정밀하게 상관될 수 있다.

관례상, 영국에서의 임상 시험은 바이러스 입자 기준으로 용량을 제공하는 경향이 있다.

전형적인 범위는 1x10⁷개 vp 내지 1x10¹¹개 vp, 또는 1x10⁸개 vp 내지 5x10¹¹개 vp이게 된다. 보다 적합하게는, 성인 인간에 대하여, 단일 용량은 투여당 5x10⁸ 내지 5x10¹⁰개 바이러스 입자의 범위; 보다 적합하게는 투여당 5x10⁹ 내지 5x10¹⁰개 바이러스 입자의 범위; 보다 적합하게는 투여당 2.5x10¹⁰ 내지 5x10¹⁰개 바이러스 입자의 범위이다.

가장 적합하게는, 용량은 성인 인간에 대하여 투여당 2.5x10¹⁰개 바이러스 입자이거나, 또는 대략 그것이다.

소아 용량은 적합하게는 성인 용량에 대하여 본원에서 제공되는 지침을 참조하여 의사에 의해 결정된다. 예시적인 소아 용량 = 1/2 성인 용량, 또는 1x10¹⁰개 vp/소아이다.

관련 기술분야에 알려져 있는 바와 같이, 감염 단위는 소정의 해당 제조에서의 P:I 비 (바이러스 게놈:감염성 입자 비)에 따라 달라지게 된다.

적합하게는, 아주반트는 본 발명의 바이러스 벡터와 함께 투여되지 않는다.

적합하게는, 본 발명의 바이러스 벡터는 간단한 완충제를 사용하여 제제화된다. 예시적인 완충제는 '제제'라는 표제 하에 하기에 제시된 바와 같을 수 있다.

적합하게는, 조성물은 단일 용량으로 투여된다.

본원에서 사용될 때, '성인'은 적어도 연령 18세의 대상체를 의미한다.

본원에서 사용될 때, '소아'는 연령 18세 미만의 대상체를 의미한다.

적합하게는, 본 발명의 조성물은 2세 이상, 적합하게는 18세 이상, 적합하게는 60세 이상, 적합하게는 70세 이상, 적합하게는 79세 이상 연령의 대상체에게 투여될 수 있다.

용량은 전형적으로 연령, 체중, 성 또는 기타 관련 고려사항들과 같은 인자들을 고려하여 의사에 의해 결정된다. 본원에서 제시되는 용량은 예시적인 용량이다. 달리 지시되지 않는 한, 모든 용량은 '성인' 대상체를 위한 것이며 - 소아 용량은 그로부터 결정될 수 있는데, 예를 들어 소아 용량은 성인 용량의 50%일 수 있거나, 또는 보다 적합하게는 소아 용량은 본원에서 기재되는 바와 같다.

데이터베이스 공개

데이터베이스에 기탁되어 있는 서열은 시간이 지나면서 변화될 수 있다. 적합하게는, 현재 버전의 서열 데이터베이스(들)를 참조한다. 대안적으로, 출원일의 유효 공개를 참조한다.

통상의 기술자라면 알고 있을 바와 같이, 수탁 번호는 버전/일자 수탁 번호일 수 있다. 현재 데이터베이스 수탁의 언급가능한 수탁 번호는 상기한 바와 동일하나, 소수점 및 임의의 이후 숫자가 빠져있다.

진뱅크(GenBank)는 모든 공적으로 가용한 DNA 서열들의 주해된 모음 (미국 20894 메릴랜드 베테스다 8600 록빌 파이크 소재 미국 국립 의학 도서관의 국립 생물공학 정보 센터; 문헌 [Nucleic Acids Research, 2013 Jan;41(D1):D36-42])인 NIH 유전자 서열 데이터베이스로서, 달리 명백하지 않는 한 제공되는 수탁 번호들은 이와 관련된다. 적합하게는, 언급되는 진뱅크 데이터베이스 공개는 2017년 12월 15일 NCBI-진뱅크 공개 223.0이다.

유니프롯(UniProt: Universal Protein Resource)은 단백질에 대한 정보의 포괄적인 카탈로그이다 (문헌 ['UniProt: a hub for protein information' Nucleic Acids Res. 43: D204-D212 (2015)]). 의심을 방지하기 위하여, 유니프롯 공개 2015_11를 참조한다.

더 상세하게 말하자면, 유니프롯 컨소시움 유럽 생물정보공학 연구소 (EBI), 생물정보공학 및 단백질 정보 자원 (PIR)의 SIB 스위스 연구소의 유니프롯 자료 (UniProtKB) 공개 2018_01, (31-Jan-2018)를 참조한다.

적용분야

본 발명의 조성물은 가장 적합하게는 소아에서 수두 백신으로 사용될 수 있다. 이에 따라, 본 발명은 상기 기재된 바와 같은 조성물의, 수두를 예방하기 위한 용도에 관한 것이다. 이와 같은 측면에서, 조성물은 적어도 1회 용량으로 유아 및/또는 소아 및/또는 성인에게 투여되며; 적합하게는 상기 투여는 보호 면역 반응을 생성시키는 노출 전의 것이다.

본 발명의 조성물은 면역-손상된 소아에서 백신으로 사용될 수 있다. 선행 기술에서는, 소아에게 성인에 비해 더 낮은 용량의 조스타박스™가 제공된다.

관련 기술분야에서, 때로는 아데노바이러스가 프라임으로 사용된 후 이어서 폭스 바이러스가 부스트로 사용될 수 있다는 것이 개시된 바 있다. 그러나, 본 발명에 따르면, 이전에 VZV에 노출되었던 사람에게 백신을 적용하는 것은 그것이 기존 반응 (예컨대 VZV에 대한 기존 면역 반응)을 나타낼 수 있다는 것을 의미한다는 것이 관찰될 수 있다. "기존 반응"은 적합하게는 개체가 이전에 VZV에 사전-노출된 적이 있음을 의미하는데; 이는 전형적으로 VZV 표면 항원에 대한 혈청전환을 측정하는 것에 의해 평가되게 된다.

영국 국립 보건성 (NHS)는 그것을 하기와 같이 기재하고 있다: '당신은 이전에 당신이 수두에 걸렸었음을 판독하는, 당신이 질환에 대한 항체를 가지고 있는지를 점검하는 혈액 테스트를 받을 수 있습니다' https://www.nhs.uk/conditions/vaccinations/when-is-chickenpox-vaccine-needed/#how-to-check-if-youve-had-chickenpox-before.

따라서, 환자가 이전에 VZV에 노출된 적이 있는 경우, 본 발명에 따른 백신의 투여는 부스트로서 간주될 수 있다. 이에 따라, 본질적으로 본 발명은 폭스 바이러스 벡터가 부스트에 최상이라고 교시하는 선행 기술에서 벗어나는, 부스트로서의 아데노바이러스 벡터의 용도를 교시하는 것으로 간주될 수 있다.

초기 감염 (예컨대 소아로서 수두에 걸리는 것)으로부터의 VZV는 신경 시스템과 같은 환자의 신체에서 휴면 상태로 유지될 수 있으며, 생애 후반기에 대상포진으로 재출현할 수 있다. '휴면' VZV 감염은 더 이상 활성 감염은 야기하지 않는 것으로 정의될 수 있다.

한 실시양태에서, 본 발명은 상기 기재된 바와 같은 아데노바이러스 벡터를 포함하는 포유동물에의 투여를 위한 조성물에 관한 것이다.

추가 적용분야

한 측면에서, 본 발명은 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원의 적어도 1종의 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함하는 바이러스 벡터에 관한 것이며, 여기서 상기 바이러스 벡터는 인간 또는 유인원 기원의 아데노바이러스 벡터이다.

한 측면에서, 본 발명은 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원의 적어도 1종의 CD4 T 세포 및 적어도 1종의 CD8 T 세포 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함하는 바이러스 벡터에 관한 것이며, 여기서 상기 바이러스 벡터는 인간 또는 유인원 기원의 아데노바이러스 벡터이다.

한 측면에서, 본 발명은 백신접종된 대상체에서 Gly E 항원에 대한 CD4+ 및 CD8+ T 세포 반응 둘 다를 유도하는 약제의 제조에서의 상기 기재된 바와 같은 조성물의 용도에 관한 것이다.

한 측면에서, 본 발명은 백신접종된 대상체에서 Gly E 항원에 대한 CD4+ 및 CD8+ T 세포 반응 둘 다를 유도하는 약제의 제조에서의 상기 기재된 바와 같은 조성물의 용도에 관한 것이며, 여기서 상기 대상체는 인간이다.

한 측면에서, 본 발명은 백신접종된 대상체에서 Gly E 항원에 대한 CD4+ 및 CD8+ T 세포 반응 둘 다, 및 항체를 유도하는 약제의 제조에서의 상기 기재된 바와 같은 조성물의 용도에 관한 것이며, 여기서 상기 대상체는 인간이다.

추가 이점

본 발명의 한 가지 초점은 ChAdOx 벡터와 같은 아데노 벡터 맥락에서의 gE 항원의 제공에 있다.

본원에서, 본 발명자들은 ChAdOx-gE 구축물의 효과성을 제시하는 데이터를 제시한다. 그것을 기존의 조스타박스™와 비교하였으며, 본 발명자들은 본 발명의 구축물이 우월하다는 것을 입증하였다.

이러한 우월한 결과는 ChAdOx 벡터의 알려져 있는 특성 및/또는 관련 기술분야에서의 gE 항원에 대한 정보를 기반으로 (이러한 조합은 관련 기술분야에서 결코 개시된 바 없음) 예상할 수 있었던 것에 비해 더 우수한 것이다.

구체적으로, 본 발명자들은 본 발명자들의 구축물이 놀랍도록 효과적이라는 것, 및/또는 이와 같은 구축물을 사용하여 관련 기술분야의 선입견이 반박 교시되게 되었다는 것, 및/또는 해당 구축물이 잘 알려져 있지 않으며/불가해하고/특별하다는 것을 제시한다.

아데노바이러스 벡터는 전형적으로 관련 기술분야에서 프라임 면역화에 사용되는 반면, 폭스 바이러스 벡터는 전형적으로 부스팅 적용에 사용된다. 대부분의 사람들이 이미 조스터 바이러스 (VZV)에 의한 과거 감염으로부터의 약간의 기존 T 세포 반응을 보유하고 있기 때문에, 본 발명자들은 사실상 본 발명에서 부스팅에서의 아데노바이러스 벡터의 사용을 교시하고 있는 것으로 볼 수 있다. 이는 이전에는 조스터 바이러스 (VZV)에 대하여 수행된 바 없다. 이에 따라, 한 실시양태에서, 본 발명은 해당 포유동물에게 상기 기재된 바와 같은 조성물을 투여하는 것에 의한, 포유동물에서의 VZV에 대한 기존 면역 반응(들)의 부스팅 방법에 관한 것이다. 한 실시양태에서, 본 발명은 포유동물에서 VZV에 대한 기존 면역 반응(들)을 부스팅하는데 사용하기 위한 상기 기재된 바와 같은 조성물에 관한 것이다. 포유동물이 VZV에 대한 기존 면역 반응(들)을 보유하는지 여부는 상기 기재된 바와 같이 VZV 표면 항원에 대한 혈청전환을 평가하는 것에 의해 결정될 수 있다.

본 발명에 의해 달성되는 개선의 핵심적인 입증은 본원에서 제시된 효능 데이터와 같은 데이터를 기반으로 한다.

이와 관련하여, 본 발명자들은 본 발명의 벡터를 사용하여 탁월한 T 세포 반응을 산출하고 있다. 기존의 조스타박스™ 백신은 항체 반응에 초점을 맞추고 있었다. 이에 따르면, 본 발명은 상기 기술에 비해 측정가능한 개선이다.

본원에서 기재되는 바와 같은 단일 용량의 아데노바이러스가 단백질 및 아주반트만큼 강한 체액성 반응을 제공한다는 (예상하지 않았던) 추가 이점이 존재한다. 이는 상기 기술에 비해 측정가능한 개선이다.

도면의 간단한 설명

도 1은 플롯을 제시한다.

도 2는 막대 차트를 제시한다.

도 3은 그래프를 제시한다.

도 4는 플롯을 제시한다.

도 5는 서열 정렬을 제시한다. "삽입물"은 서열식별번호: 4 (즉 항원 카세트를 코딩하는 예시적인 뉴클레오티드 서열)를 의미한다. "AY253715.1"은 서열식별번호: 3 (즉 GlyE 항원을 코딩하는 야생형 뉴클레오티드 서열)을 의미한다.

도 6은 서열 정렬 (클러스탈(CLUSTAL) O(1.2.4) 다중 서열 정렬)을 제시한다. "백신"은 서열식별번호: 2 (즉 예시적인 VZV GlyE 아미노산 서열 항원 카세트)를 의미한다. "AY253715.1"은 서열식별번호: 1 (즉 야생형 VZV GlyE 아미노산 서열)을 의미한다.

도 7은 사진을 제시한다.

도 8은 플롯 및 그래프를 제시한다.

도 9는 4개의 그래프를 제시한다.

도 10은 그래프를 제시한다.

도 11은 그래프 및 2개의 플롯을 제시한다.

도 12는 막대 차트를 제시한다.

도 13은 막대 차트를 제시한다.

도 14는 플롯을 제시한다.

도 15는 플롯을 제시한다.

실시예

실시예 1 - VZV에 대한 바이러스 벡터화된 백신

본 발명자들은 VZV에 대하여 바이러스 벡터화된 백신을 생성시켰다.

데이터는 본 발명의 백신이 CMI 전-임상으로 평가하였을 때 현재 인가되어 있는 선행 기술 조스터 백신을 능가한다는 것을 시사하고 있다 (도 1).

다른 백신 양태와 비교하였을 때 바이러스 벡터화된 백신에서 일상적으로 달성되는 더 높은 CMI는 더 높은 효능으로 해석될 가능성이 있으며, 그와 동시에 유리하게도 공지 아주반트-중-단백질 백신의 반복 투여와는 달리 바이러스 벡터화된 백신의 단일 샷만이 효능에 요구될 수 있다.

도 1을 참조한다.

Balb/c 마우스의 군 (n=5)에 근육내로 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE 또는 1x10⁷ IU의 ChAdOx2-VZVgpE 또는 1.3x10³ pfu의 조스탁스(Zostax)를 백신접종하였다. 최종 백신접종 2주 후 비장세포를 수집하고, ELISpot 분석에 의해 전체 당단백질-E 범위의 펩티드들에 대한 세포성 면역 반응을 측정하였다.

ChAdOx1-VZV-gE 후 반응이 조스타박스 후의 것에 비해 상당히 더 높았다.

이와 같은 테스트는 저령 마우스에서의 것이다. 연령은 대략 >8주령이었다.

선행 기술 조스타박스 백신은 인간에서 복제될 수 있으며, 이론에 얽매이고자 하는 것은 아니나, 부분적인 면역원성이 이로부터 비롯되는 것으로 주장될 수 있을 것으로 생각된다. 그러나, 비-복제성 조스타박스 백신이 측정되는 면역원성과 관련하여 인간에서 복제성 조스타박스에 필적하며 유사한 면역 반응을 유도할 수 있다는 것이 밝혀져 있다.

어떠한 경우에도, 이는 공평 테스트로서, 사용된 백신 중 아무것도 마우스에서 복제되지 않기 때문이다.

이에 따라, 본 발명이 선행 기술 조스타박스를 능가한다는 것이 입증된다.

도 2를 참조한다.

8wk+령 또는 노령 엑스-브리더 암컷 Balb/c 마우스에 근육내로 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE를 백신접종하였다. 대략 2주 후에 마우스를 선별하고, 전체 VZV gE 삽입물 범위의 펩티드를 사용하여 비장 ELISpot를 수행하였다.

ChAdOx1-VZV-gE 후의 반응은 유의하게 상이하지 않았다.

이와 같은 테스트는 노령 마우스에서의 것이다.

도 3을 참조한다.

8wk+령 암컷 Balb/c 마우스에 근육내로 하기를 백신접종하였다:

ChAdOX1-VZV-gE - 군 1. 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE 다음 4주 후에 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE로 부스팅

ChAdOX2-VZV-gE - 군 2. 1.00E+07 iu의 ChAdOX2-VZV-gE 다음 4주 후에 1.00E+07 iu의 ChAdOX2-VZV-gE로 부스팅.

조스타박스 군 3. 1.29E+03 VZV 조스타박스 다음 4주 후에 1.29E+03 VZV 조스타박스로 부스팅. 지시된 시점에 혈청을 수집하고, 항-VZV-gpE 특이적 항체에 대하여 검정하였다.

본 발명자들은 크루스칼-왈리스(Kruskal-Wallis) 분석이 던의 다중 비교 테스트와 함께 부스트 2wk 후에 군 2와 3 사이에서는 유의성 있는 반응 차이를 제시하나, 군 1과 군 3 사이에서는 그렇지 않다는 것에 주목한다. 이는 벡터가 ChAdOx1인 본 특정 실시양태의 추가 이점을 나타낼 수 있는데, 다시 말하자면 본 발명자들은 조스타박스에 필적하는 항체 반응을 보리라고는 예상할 수 없었으나 (군 2 - ChAdOx2에 의해 입증되는 바와 같음), 놀랍게도 군 1 (ChAdOx1 실시양태)이 우수한 항체 반응은 물론 우수한 T 세포 반응도 생성시킨다.

본 발명자들은 2주 또는 16주로서의 1회 샷 항체 반응 후 도 4에서 유의성 있는 반응 차이가 없음에 주목한다.

도 4를 참조하면, 8wk+령 암컷 Balb/c 마우스에 근육내로 하기를 백신접종하였다:

레인 1. 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE 다음 1주 후에 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE로 부스팅. (채워진 박스)

레인 1. 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE 다음 1주 후에 1.00E+07 iu의 ChAdOX2-VZV-gE로 부스팅. (채워진 원)

레인 2. 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE 다음 4주 후에 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE로 부스팅 (채워진 박스)

레인 2. 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE 다음 4주 후에 1.00E+07 iu의 ChAdOX2-VZV-gE로 부스팅. (채워진 원)

레인 3 (부스트 없음). 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE (빈 원)

대략 2주 후에 마우스를 선별하고, 전체 VZV gE 삽입물 범위의 펩티드들을 사용하여 비장 ELISpot를 수행하였다.

이렇게 하여, 레인 3 (부스트 없음)은 "1회-샷" 체계를 나타내며; 레인 2 및 3 '채워진 박스'는 '동종 프라임-부스트' 체계를 나타내고; 레인 2 및 3 '채워진 원'은 '이종 프라임-부스트' 체계를 나타낸다. 이종 제2 샷은 증강을 나타내지 않는 것으로 주장될 수 있으나 - 더 이후의 시점에 증대가 나타날 것으로 예상될 수 있는데 - 이는 반응-곡선 효과에 기인하는 것으로 생각된다.

ChAdOx1-VZV-gE 후의 반응은 단일-투여 적용에서 저령 또는 노령 동물에 걸쳐 유의하게 상이하지 않았다.

프라임과 부스트 (프라임-부스트 적용 시; 전체적으로 단일-투여 실시양태가 바람직함) 사이의 바람직한 간격은 4주이며; 프라임 및 부스트 둘 다가 Ad 벡터인 경우, 간격은 예를 들어 2, 4, 6 또는 8주일 수 있다.

마우스 모델 시스템

이러한 백신을 테스트하기 위한 마우스 모델 시스템과 관련하여서는, 인간에서 비-복제성 조스터 바이러스가 복제성 조스터 바이러스와 동일한 반응을 산출할 수 있다는 것을 주지해야 한다. 따라서, 본원에서 제시되는 마우스 데이터는 실제로는 공평 비교를 나타내는데, 선행 기술 조스타박스™가 인간에서 제한된 감염을 유도하고 그것이 면역 반응을 부스팅하는데 중요하기는 하지만, 본 발명의 아데노바이러스 벡터 구축물은 물론 조스타박스 선행 기술 비교자 어느 것도 마우스에서 복제될 수 없으며 그에 따라 마우스에서 제제에 그것을 비교하는 적용에서 제공되는 데이터는 사실상 공평해서 본 발명에 따른 벡터의 우월한 특성을 나타내기 때문이다.

실시예 2: 본 발명의 벡터가 효율적으로 발현됨

본 발명자들은 VZVgpE의 바이러스 벡터 발현에 대한 웨스턴 블롯 분석을 제시한다. 전면생장 미만의 HEK293T (ChAdOx 1)를 지시된 MOI의 바이러스로 감염시켰다. 18시간 후에 세포를 수확하여, 용해시키고, 단백질 상청액 용해물을 바이오라드(Biorad) 4-12% 구배 겔 상에서 전개한 후, 0.05% PBST 중 압캠(abcam) 52549 VZV의 1:1000 희석물을 사용하여 프로빙하고, ECL 시약을 사용하여 발현을 검출하였다.

결과는 도 7에 제시되어 있으며; 레인들은 하기와 같다:

0 - 분자 마커

1 - HEK293T에서의 ChAdOx1 VZVgpE MOI 1

2 - HEK293T에서의 ChAdOx1 VZVgpE MOI 5

3 - HEK293T에서의 ChAdOx2 VZVgpE MOI 1

4 - HEK293T에서의 ChAdOx2 VZVgpE MOI 5

5 - VZV +ve 대조 ~100 ng

6 - VZV +ve 대조 ~500 ng

이렇게 하여, 본 발명의 조성물이 인간 세포에서 항원의 발현을 산출한다는 것을 입증하였다.

실시예 3: 바리셀라 조스터 바이러스 당단백질 E를 코딩하는 바이러스 벡터의 면역원성

본 발명자들은 VZV에 대한 1회-샷 백신접종 후 세포성 면역원성을 입증하였다.

도 8A를 참조한다. Balb/c 마우스의 군 (n=5)에 근육내로 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE 또는 1x10⁷ IU의 ChAdOx2-VZVgpE 또는 1.3x10³ pfu의 조스탁스를 백신접종하였다. 최종 백신접종 2주 후 비장세포를 수집하고, ELISpot 분석에 의해 전체 당단백질-E 범위의 펩티드들에 대한 세포성 면역 반응을 측정하였다.

도 8B를 참조한다. Balb/c 마우스의 군 (n=5, 달리 지시되지 않는 한 전형적으로 8-10주 연령)에 근육내로 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE ('노령 마우스'는 엑스-브리더이며 전형적으로 >24wk 연령임) 또는 1.3x10³ pfu의 조스탁스를 백신접종하였다. 최종 백신접종 후 지시된 시점에 비장세포를 수집하고, ELISpot 분석에 의해 전체 당단백질-E 범위의 펩티드들에 대한 세포성 면역 반응을 측정하였다.

이러한 ELISpot 데이터는 T 세포 반응에 의해 측정하였을 때의 세포성 면역 반응이 본 발명에 따라 유도된다는 것을 제시한다. 반응은 2주에 분명하였다. 반응은 단일 투여에 의해 유도된다. 반응은 단일 용량에 의해 유도된다. 16주 시점의 데이터에서 제시된 바와 같이, 반응은 지속 반응이다.

도 9를 참조한다. 도 8에서와 동일한 Balb/c 마우스 군의 세포성 면역 반응을 세포내 시토카인 염색 (ICS)에 의해 평가하였다. 이전 (n=5, 달리 지시되지 않는 한 전형적으로 8-10주 연령)에서와 같이, 근육내로 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE ('노령 마우스'는 엑스-브리더이며 전형적으로 >24wk 연령임) 또는 1.3x10³ pfu의 조스탁스를 백신접종하였다. 최종 백신접종 후 지시된 시점에 비장세포를 수집하고, ICS 분석에 의해 전체 당단백질-E 범위의 에피토프들에 대한 세포성 면역 반응을 측정하였다.

도 9A는 VZVgpE 펩티드를 사용한 자극 및 배경 분비 농도에 대한 조정 후의 IFN-γ를 분비하는 CD8+ T 세포의 백분율을 제시한다.

도 9B는 VZVgpE 펩티드를 사용한 자극 및 배경 분비 농도에 대한 조정 후의 IFN-γ를 분비하는 CD4+ T 세포의 백분율을 제시한다.

도 9C는 VZVgpE 펩티드를 사용한 자극 및 배경 분비 농도에 대한 조정 후의 TNFα 및/또는 IL2를 분비하는 IFN-γ+ CD8+ T 세포의 백분율을 제시한다.

도 9D는 VZVgpE 펩티드를 사용한 자극 및 배경 분비 농도에 대한 조정 후의 TNFα 및/또는 IL2를 분비하는 IFN-γ+ CD4+ T 세포의 백분율을 제시한다.

이렇게 하여, 전체적인 이러한 FACS 분류 실험은 본 발명에 따라 삼중 분비 CD4+ T 세포 (이론에 얽매이고자 하는 것은 아니나 그것이 가장 보호성인 것으로 간주되기 때문에, 이는 매우 우수함)가 유도된다는 것을 제시한다. 데이터는 또한 역시 매우 유익한 CD8+ T 세포의 유도를 제시한다.

VZV에 대한 1회-샷 백신접종 후의 체액성 면역을 제시하는 도 10을 참조한다. Balb/c 마우스의 군 (n=5, 달리 지시되지 않는 한 8-10주 연령)에 근육내로 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE ('노령 마우스'는 엑스-브리더이며 전형적으로 >24wk 연령임) 또는 1.3x10³ pfu의 조스탁스를 백신접종하였다. 최종 백신접종 후 지시된 시점에 혈청을 수집하고, ELISA에 의해 바리셀라 조스터 바이러스 (균주 엘렌(Ellen))의 친화성 정제된 당단백질에 대한 체액성 면역 반응을 측정하였다.

명료성을 위하여, 도 8B, 9 및 10이 동일 실험으로부터의 데이터를 제시한다는 것을 주지한다.

1회-샷 투여임에도 불구하고, 본 발명에 따른 면역화가 항체 역가를 상승시키는/유도하는데에도 효과적이라는 것은 놀라운 이점이다. 본 발명이 항체 반응의 유도에 있어서 조스타박스와 같은 선행 기술 조성물만큼 우수하다는 것은 놀라운 이점이다.

실시예 4: 프라임-부스트 연구

본 발명자들은 VZV에 대한 프라임-부스트 백신접종 후의 면역원성을 입증한다.

도 11A를 참조한다.

8wk+령 암컷 Balb/c 마우스에 근육내로 하기를 백신접종하였다:

ChAdOX1-VZV-gE - 군 1. 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE 다음 4주 후에 1.00E+07 iu의 ChAdOX1-VZV-gE로 부스팅

ChAdOX2-VZV-gE - 군 2. 1.00E+07 iu의 ChAdOX2-VZV-gE 다음 4주 후에 1.00E+07 iu의 ChAdOX2-VZV-gE로 부스팅.

조스타박스 - 군 3. 1.29E+03 VZV 조스타박스 다음 4주 후에 1.29E+03 VZV 조스타박스로 부스팅. 지시된 시점에 혈청을 수집하고, 항-VZV-gpE 특이적 항체에 대하여 검정하였다.

도 11B & 도 11C를 참조하면, Balb/c 마우스의 군 (n=5, 달리 지시되지 않는 한 8-10주 연령)에 근육내로 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE를 백신접종하고, 부스팅되지 않거나 (부스트 없음), 또는 1 또는 4주 후에 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE (동종 부스트) 또는 1x10⁷ IU의 ChAdOx2-VZVgpE (이종 부스트)로 부스팅하였다. a . 최종 백신접종 2주 후에 비장세포를 수집하고, ELISpot 분석에 의해 전체 당단백질-E 범위의 펩티드들에 대한 세포성 면역 반응을 측정하였다. b . 최종 백신접종 2주 후에 혈청을 수집하고, ELISA에 의해 바리셀라 조스터 바이러스 (균주 엘렌)의 친화성 정제된 당단백질에 대한 체액성 면역 반응을 측정하였다.

이러한 데이터는 본 발명의 단일-샷 또는 단일-투여 실시양태가 프라임-부스트 요법만큼 우수한 반응을 제공한다는 것을 제시한다. 이에 따라, 단일 샷 또는 단일 용량 (단일 투여)만을 필요로 한다는 것은 본 발명의 이점이 된다.

실시예 5: 비교 연구

본 발명자들은 3회 용량에 걸쳐, 그리고 1회 샷 후에, 선행 기술 싱그릭스™에 본 발명의 조성물을 비교하였다.

VZV에 대한 1회-샷 백신접종 후 체액성 면역을 테스트하였다. CD1 마우스의 군 (n=7/8)에 근육내로 지시된 용량 (3회 용량)의 ChAdOx1-VZVgpE 또는 싱그릭스™ 중 어느 하나를 백신접종하였다. 백신접종 후 지시된 4주에 혈청을 수집하고, ELISA에 의해 바리셀라 조스터 바이러스 (균주 엘렌)의 친화성 정제된 당단백질에 대한 체액성 면역 반응을 측정하였다. 도 12를 참조한다. s.e.m.를 동반한 평균을 도시하였다.

VZV에 대한 1회 샷 백신접종 후 세포성 면역원성을 테스트하였다. CD1 마우스의 군 (n=7/8)에 근육내로 지시된 용량 (3회 용량)의 ChAdOx1-VZVgpE 또는 싱그릭스™ 중 어느 하나를 백신접종하였다. 최종 백신접종 4주 후 비장세포를 수집하고, ELISpot 분석에 의해 전체 당단백질-E 범위의 펩티드들에 대한 세포성 면역 반응을 측정하였다. 도 13을 참조한다. s.e.m.를 동반한 평균을 도시하였다.

실시예 6: 비교 연구

비근교계 CD-1 마우스의 군 (n=8)에 근육내로 하기를 백신접종하였다:

군 1: ASO1B 아주반트를 동반하는 싱그릭스 1 ug를 백신접종하고, 4주 후 동물에 ASO1B 아주반트를 동반하는 싱그릭스 1 ug을 부스팅하였음 또는

군 2: 프라임없이 4주 후 동물에 1.3x10³ pfu의 조스타박스를 백신접종하였음 또는

군 3: 1.3x10³ pfu의 조스타박스를 백신접종하고, 4주 후 동물에 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE를 부스팅하였음 또는

군 4: 프라임없이 4주 후 동물에 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE를 백신접종하였음 또는

군 5: 나이브 동물.

도 14를 참조한다. 평균 및 평균의 표준 오차를 도시하였다.

최종 백신접종 대략 3주 후 혈청을 수집하고, 항-VZVgpE 항체에 대하여 분석하였다.

던의 다중 비교 테스트를 동반한 크루스칼-왈리스 분석은 군 2: 조스타박스의 1회 샷 또는 군 4: ChAdOx1-VZVgpE의 1회 샷과 비교하였을 때, 군 1: 아주반트를 동반한 단백질의 2회 샷이 상당히 더 높은 항체 역가를 유도한다는 것을 입증하고 있는데, 이와 같은 결과는 예상대로였다. 그러나, 군 1과 군 3 사이에서는, 측정된 항체 농도의 차이가 존재하지 않았다. 조스타박스 후의 ChAdOx1이 아주반트 첨가된 단백질 2회 샷에 필적하는 수준까지 체액성 면역 반응을 증가시킬 것으로는 예상할 수 없었기 때문에, 이는 예상치 못한 것이다. 현재 70세 이상 연령의 영국 성인은 조스타박스 백신접종을 투여받도록 권장되고 있기 때문에, 이는 이점으로서, 본 발명자들은 본원에서 ChAdOx1-VZV-gpE의 부스트 백신접종이 91% 이상의 효능과 연관되는 요법인 2종 단백질 및 아주반트 백신접종 후 측정되는 수준까지 항체 역가를 증대시킬 수 있다는 것을 입증한 것이다.

실시예 7: 비교 연구

C57BL6 마우스의 군 (n=5)에 근육내로 하기를 백신접종하였다:

군 1: ASO1B 아주반트를 동반하는 싱그릭스 1 ug를 백신접종하고, 4주 후 동물에 ASO1B 아주반트를 동반하는 싱그릭스 1 ug을 부스팅하였음 또는

군 2: 프라임없이 4주 후 동물에 1.3x10³ pfu의 조스타박스를 백신접종하였음 또는

군 3: 1.3x10³ pfu의 조스타박스를 백신접종하고, 4주 후 동물에 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE를 부스팅하였음 또는

군 4: 프라임없이 4주 후 동물에 1x10⁷ IU의 ChAdOx1-VZVgpE를 백신접종하였음.

도 15를 참조한다. 평균 및 평균의 표준 오차를 도시하였다.

최종 백신접종 대략 4주 후 비장세포를 수집하고, NK 성숙도 및 시토카인 분비에 대하여 분석하였다. 던의 다중 비교 테스트를 동반한 크루스칼-왈리스 분석은 싱그릭스 백신접종 (군 1)과 비교하였을 때, 1.3x10³ pfu 조스탁스 후 이어지는 1x10⁷ IU ChAdOx1-VZVgpE의 프라임-부스트 백신접종 후의 NK 세포가 더 많은 IFN-g를 분비한다는 것 (군 3)을 입증하고 있다.

이는 예상치 못한 것으로서, 이점을 제공하는데, NK 세포 활성화는 이미 적응성 면역 반응을 증대시키는 것으로 입증되어 있어서, 조스타박스 프라임 후 ChAdOx1-VZVgpE에 의한 이와 같은 강한 선천 면역 반응의 유도는 예상치 못한 것이다. 더하여, NK 세포는 VZV 감염에 대한 면역을 매개하는데 결정적으로 중요한 것으로 입증되어 있다 (PMID; 2543925, 30565241).

서열 표

'Gly E'는 당단백질 E를 의미하며 때로는 'gE'로 지칭된다는 것에 유의한다.

한 실시양태에서는, 항원 삽입물 서열식별번호: 1과 50% 이하의 유사성을 갖는 Gly E 서열이 사용될 수 있다. 한 실시양태에서는, 항원 삽입물 서열식별번호: 1과 50% 이상, 적합하게는 60% 이상, 적합하게는 70% 이상, 적합하게는 80% 이상, 적합하게는 90% 이상, 적합하게는 95% 이상의 유사성을 갖는 Gly E 서열이 사용될 수 있다.

서열 목록

서열식별번호: 1: 예시적인 Gly E 서열 - 진뱅크 수탁 번호 AAP32865.1 - (>AAP32865.1 당단백질 E [인간 알파헤르페스바이러스 3])(진뱅크 뉴클레오티드 수탁 번호 AY253715.1에 의해 코딩되는 아미노산 서열로도 알려져 있음):

서열식별번호: 2 - 예시적인 VZV GlyE 카세트 아미노산 서열 (때로는 "삽입물-단백질"로 지칭됨):

서열식별번호: 3 - VZV GlyE를 코딩하는 야생형 뉴클레오티드 서열 (진뱅크 수탁 번호 AY253715.1; 이것은 수탁 번호 AAP32865.1 - 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 코딩하는 뉴클레오티드 서열임: (AAP32865.1 당단백질 E [인간 알파헤르페스바이러스 3])):

서열식별번호: 4 - VZV GlyE 항원 카세트/발현 카세트를 코딩하는 예시적인 뉴클레오티드 서열 (때로는 ">삽입물-백신"으로 지칭됨):

서열식별번호: 5

서열식별번호: 6 - bgh 폴리아데닐화 신호

서열식별번호: 7: 긴 CMV 프로모터

SEQUENCE LISTING <110> Oxford University Innovation Limited <120> COMPOSITIONS AND METHODS <130> |P10479GBWO| <140> PCT/GB2019/053131 <141> 2019-11-05 <160> 9 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 623 <212> PRT <213> Varicella zoster <400> 1 Met Gly Thr Val Asn Lys Pro Val Val Gly Val Leu Met Gly Phe Gly 1 5 10 15 Ile Ile Thr Gly Thr Leu Arg Ile Thr Asn Pro Val Arg Ala Ser Val 20 25 30 Leu Arg Tyr Asp Asp Phe His Ile Asp Glu Asp Lys Leu Asp Thr Asn 35 40 45 Ser Val Tyr Glu Pro Tyr Tyr His Ser Asp His Ala Glu Ser Ser Trp 50 55 60 Val Asn Arg Gly Glu Ser Ser Arg Lys Ala Tyr Asp His Asn Ser Pro 65 70 75 80 Tyr Ile Trp Pro Arg Asn Asp Tyr Asp Gly Phe Leu Glu Asn Ala His 85 90 95 Glu His His Gly Val Tyr Asn Gln Gly Arg Gly Ile Asp Ser Gly Glu 100 105 110 Arg Leu Met Gln Pro Thr Gln Met Ser Ala Gln Glu Asp Leu Gly Asp 115 120 125 Asp Thr Gly Ile His Val Ile Pro Thr Leu Asn Gly Asp Asp Arg His 130 135 140 Lys Ile Val Asn Val Asp Gln Arg Gln Tyr Gly Asp Val Phe Lys Gly 145 150 155 160 Asp Leu Asn Pro Lys Pro Gln Gly Gln Arg Leu Ile Glu Val Ser Val 165 170 175 Glu Glu Asn His Pro Phe Thr Leu Arg Ala Pro Ile Gln Arg Ile Tyr 180 185 190 Gly Val Arg Tyr Thr Glu Thr Trp Ser Phe Leu Pro Ser Leu Thr Cys 195 200 205 Thr Gly Asp Ala Ala Pro Ala Ile Gln His Ile Cys Leu Lys His Thr 210 215 220 Thr Cys Phe Gln Asp Val Val Val Asp Val Asp Cys Ala Glu Asn Thr 225 230 235 240 Lys Glu Asp Gln Leu Ala Glu Ile Ser Tyr Arg Phe Gln Gly Lys Lys 245 250 255 Glu Ala Asp Gln Pro Trp Ile Val Val Asn Thr Ser Thr Leu Phe Asp 260 265 270 Glu Leu Glu Leu Asp Pro Pro Glu Ile Glu Pro Gly Val Leu Lys Val 275 280 285 Leu Arg Thr Glu Lys Gln Tyr Leu Gly Val Tyr Ile Trp Asn Met Arg 290 295 300 Gly Ser Asp Gly Thr Ser Thr Tyr Ala Thr Phe Leu Val Thr Trp Lys 305 310 315 320 Gly Asp Glu Lys Thr Arg Asn Pro Thr Pro Ala Val Thr Pro Gln Pro 325 330 335 Arg Gly Ala Glu Phe His Met Trp Asn Tyr His Ser His Val Phe Ser 340 345 350 Val Gly Asp Thr Phe Ser Leu Ala Met His Leu Gln Tyr Lys Ile His 355 360 365 Glu Ala Pro Phe Asp Leu Leu Leu Glu Trp Leu Tyr Val Pro Ile Asp 370 375 380 Pro Thr Cys Gln Pro Met Arg Leu Tyr Ser Thr Cys Leu Tyr His Pro 385 390 395 400 Asn Ala Pro Gln Cys Leu Ser His Met Asn Ser Gly Cys Thr Phe Thr 405 410 415 Ser Pro His Leu Ala Gln Arg Val Ala Ser Thr Val Tyr Gln Asn Cys 420 425 430 Glu His Ala Asp Asn Tyr Thr Ala Tyr Cys Leu Gly Ile Ser His Met 435 440 445 Glu Pro Ser Phe Gly Leu Ile Leu His Asp Gly Gly Thr Thr Leu Lys 450 455 460 Phe Val Asp Thr Pro Glu Ser Leu Ser Gly Leu Tyr Val Phe Val Val 465 470 475 480 Tyr Phe Asn Gly His Val Glu Ala Val Ala Tyr Thr Val Val Ser Thr 485 490 495 Val Asp His Phe Val Asn Ala Ile Glu Glu Arg Gly Phe Pro Pro Thr 500 505 510 Ala Gly Gln Pro Pro Ala Thr Thr Lys Pro Lys Glu Ile Thr Pro Val 515 520 525 Asn Pro Gly Thr Ser Pro Leu Leu Arg Tyr Ala Ala Trp Thr Gly Gly 530 535 540 Leu Ala Ala Val Val Leu Leu Cys Leu Val Ile Phe Leu Ile Cys Thr 545 550 555 560 Ala Lys Arg Met Arg Val Lys Ala Tyr Arg Val Asp Lys Ser Pro Tyr 565 570 575 Asn Gln Ser Met Tyr Tyr Ala Gly Leu Pro Val Asp Asp Phe Glu Asp 580 585 590 Ser Glu Ser Thr Asp Thr Glu Glu Glu Phe Gly Asn Ala Ile Gly Gly 595 600 605 Ser His Gly Gly Ser Ser Tyr Thr Val Tyr Ile Asp Lys Thr Arg 610 615 620 <210> 2 <211> 623 <212> PRT <213> Varicella zoster <400> 2 Met Gly Thr Val Asn Lys Pro Val Val Gly Val Leu Met Gly Phe Gly 1 5 10 15 Ile Ile Thr Gly Thr Leu Arg Ile Thr Asn Pro Val Arg Ala Ser Val 20 25 30 Leu Arg Tyr Asp Asp Phe His Ile Asp Glu Asp Lys Leu Asp Thr Asn 35 40 45 Ser Val Tyr Glu Pro Tyr Tyr His Ser Asp His Ala Glu Ser Ser Trp 50 55 60 Val Asn Arg Gly Glu Ser Ser Arg Lys Ala Tyr Asp His Asn Ser Pro 65 70 75 80 Tyr Ile Trp Pro Arg Asn Asp Tyr Asp Gly Phe Leu Glu Asn Ala His 85 90 95 Glu His His Gly Val Tyr Asn Gln Gly Arg Gly Ile Asp Ser Gly Glu 100 105 110 Arg Leu Met Gln Pro Thr Gln Met Ser Ala Gln Glu Asp Leu Gly Asp 115 120 125 Asp Thr Gly Ile His Val Ile Pro Thr Leu Asn Gly Asp Asp Arg His 130 135 140 Lys Ile Val Asn Val Asp Gln Arg Gln Tyr Gly Asp Val Phe Lys Gly 145 150 155 160 Asp Leu Asn Pro Lys Pro Gln Gly Gln Arg Leu Ile Glu Val Ser Val 165 170 175 Glu Glu Asn His Pro Phe Thr Leu Arg Ala Pro Ile Gln Arg Ile Tyr 180 185 190 Gly Val Arg Tyr Thr Glu Thr Trp Ser Phe Leu Pro Ser Leu Thr Cys 195 200 205 Thr Gly Asp Ala Ala Pro Ala Ile Gln His Ile Cys Leu Lys His Thr 210 215 220 Thr Cys Phe Gln Asp Val Val Val Asp Val Asp Cys Ala Glu Asn Thr 225 230 235 240 Lys Glu Asp Gln Leu Ala Glu Ile Ser Tyr Arg Phe Gln Gly Lys Lys 245 250 255 Glu Ala Asp Gln Pro Trp Ile Val Val Asn Thr Ser Thr Leu Phe Asp 260 265 270 Glu Leu Glu Leu Asp Pro Pro Glu Ile Glu Pro Gly Val Leu Lys Val 275 280 285 Leu Arg Thr Glu Lys Gln Tyr Leu Gly Val Tyr Ile Trp Asn Met Arg 290 295 300 Gly Ser Asp Gly Thr Ser Thr Tyr Ala Thr Phe Leu Val Thr Trp Lys 305 310 315 320 Gly Asp Glu Lys Thr Arg Asn Pro Thr Pro Ala Val Thr Pro Gln Pro 325 330 335 Arg Gly Ala Glu Phe His Met Trp Asn Tyr His Ser His Val Phe Ser 340 345 350 Val Gly Asp Thr Phe Ser Leu Ala Met His Leu Gln Tyr Lys Ile His 355 360 365 Glu Ala Pro Phe Asp Leu Leu Leu Glu Trp Leu Tyr Val Pro Ile Asp 370 375 380 Pro Thr Cys Gln Pro Met Arg Leu Tyr Ser Thr Cys Leu Tyr His Pro 385 390 395 400 Asn Ala Pro Gln Cys Leu Ser His Met Asn Ser Gly Cys Thr Phe Thr 405 410 415 Ser Pro His Leu Ala Gln Arg Val Ala Ser Thr Val Tyr Gln Asn Cys 420 425 430 Glu His Ala Asp Asn Tyr Thr Ala Tyr Cys Leu Gly Ile Ser His Met 435 440 445 Glu Pro Ser Phe Gly Leu Ile Leu His Asp Gly Gly Thr Thr Leu Lys 450 455 460 Phe Val Asp Thr Pro Glu Ser Leu Ser Gly Leu Tyr Val Phe Val Val 465 470 475 480 Tyr Phe Asn Gly His Val Glu Ala Val Ala Tyr Thr Val Val Ser Thr 485 490 495 Val Asp His Phe Val Asn Ala Ile Glu Glu Arg Gly Phe Pro Pro Thr 500 505 510 Ala Gly Gln Pro Pro Ala Thr Thr Lys Pro Lys Glu Ile Thr Pro Val 515 520 525 Asn Pro Gly Thr Ser Pro Leu Leu Arg Tyr Ala Ala Trp Thr Gly Gly 530 535 540 Leu Ala Ala Val Val Leu Leu Cys Leu Val Ile Phe Leu Ile Cys Thr 545 550 555 560 Ala Lys Arg Met Arg Val Lys Ala Tyr Arg Val Asp Lys Ser Pro Tyr 565 570 575 Asn Gln Ser Met Tyr Tyr Ala Gly Leu Pro Val Asp Asp Phe Glu Asp 580 585 590 Ser Glu Ser Thr Asp Thr Glu Glu Glu Phe Gly Asn Ala Ile Gly Gly 595 600 605 Ser His Gly Gly Ser Ser Tyr Thr Val Tyr Ile Asp Lys Thr Arg 610 615 620 <210> 3 <211> 1872 <212> DNA <213> Varicella zoster <400> 3 atggggacag ttaataaacc tgtggtgggg gtattgatgg ggttcggaat tatcacggga 60 acgttgcgta taacgaatcc ggtcagagca tccgtcttgc gatacgatga ttttcacatc 120 gatgaagaca aactggatac aaactccgta tatgagcctt actaccattc agatcatgcg 180 gagtcttcat gggtaaatcg gggagagtct tcgcgaaaag cgtacgatca taactcacct 240 tatatatggc cacgtaatga ttatgatgga tttttagaga acgcacacga acaccatggg 300 gtgtataatc agggccgtgg tatcgatagc ggggaacggt taatgcaacc cacacaaatg 360 tctgcacagg aggatcttgg ggacgatacg ggcatccacg ttatccctac gttaaacggc 420 gatgacagac ataaaattgt aaatgtggac caacgtcaat acggtgacgt gtttaaagga 480 gatcttaatc caaaacccca aggccaaaga ctcattgagg tgtcagtgga agaaaatcac 540 ccgtttactt tacgcgcacc gattcagcgg atttatggag tccggtacac cgagacttgg 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<211> 623 <212> PRT <213> Varicella zoster <400> 9 Met Gly Thr Val Asn Lys Pro Val Val Gly Val Leu Met Gly Phe Gly 1 5 10 15 Ile Ile Thr Gly Thr Leu Arg Ile Thr Asn Pro Val Arg Ala Ser Val 20 25 30 Leu Arg Tyr Asp Asp Phe His Ile Asp Glu Asp Lys Leu Asp Thr Asn 35 40 45 Ser Val Tyr Glu Pro Tyr Tyr His Ser Asp His Ala Glu Ser Ser Trp 50 55 60 Val Asn Arg Gly Glu Ser Ser Arg Lys Ala Tyr Asp His Asn Ser Pro 65 70 75 80 Tyr Ile Trp Pro Arg Asn Asp Tyr Asp Gly Phe Leu Glu Asn Ala His 85 90 95 Glu His His Gly Val Tyr Asn Gln Gly Arg Gly Ile Asp Ser Gly Glu 100 105 110 Arg Leu Met Gln Pro Thr Gln Met Ser Ala Gln Glu Asp Leu Gly Asp 115 120 125 Asp Thr Gly Ile His Val Ile Pro Thr Leu Asn Gly Asp Asp Arg His 130 135 140 Lys Ile Val Asn Val Asp Gln Arg Gln Tyr Gly Asp Val Phe Lys Gly 145 150 155 160 Asp Leu Asn Pro Lys Pro Gln Gly Gln Arg Leu Ile Glu Val Ser Val 165 170 175 Glu Glu Asn His Pro Phe Thr Leu Arg Ala Pro Ile Gln Arg Ile Tyr 180 185 190 Gly Val Arg Tyr Thr Glu Thr Trp Ser Phe Leu Pro Ser Leu Thr Cys 195 200 205 Thr Gly Asp Ala Ala Pro Ala Ile Gln His Ile Cys Leu Lys His Thr 210 215 220 Thr Cys Phe Gln Asp Val Val Val Asp Val Asp Cys Ala Glu Asn Thr 225 230 235 240 Lys Glu Asp Gln Leu Ala Glu Ile Ser Tyr Arg Phe Gln Gly Lys Lys 245 250 255 Glu Ala Asp Gln Pro Trp Ile Val Val Asn Thr Ser Thr Leu Phe Asp 260 265 270 Glu Leu Glu Leu Asp Pro Pro Glu Ile Glu Pro Gly Val Leu Lys Val 275 280 285 Leu Arg Thr Glu Lys Gln Tyr Leu Gly Val Tyr Ile Trp Asn Met Arg 290 295 300 Gly Ser Asp Gly Thr Ser Thr Tyr Ala Thr Phe Leu Val Thr Trp Lys 305 310 315 320 Gly Asp Glu Lys Thr Arg Asn Pro Thr Pro Ala Val Thr Pro Gln Pro 325 330 335 Arg Gly Ala Glu Phe His Met Trp Asn Tyr His Ser His Val Phe Ser 340 345 350 Val Gly Asp Thr Phe Ser Leu Ala Met His Leu Gln Tyr Lys Ile His 355 360 365 Glu Ala Pro Phe Asp Leu Leu Leu Glu Trp Leu Tyr Val Pro Ile Asp 370 375 380 Pro Thr Cys Gln Pro Met Arg Leu Tyr Ser Thr Cys Leu Tyr His Pro 385 390 395 400 Asn Ala Pro Gln Cys Leu Ser His Met Asn Ser Gly Cys Thr Phe Thr 405 410 415 Ser Pro His Leu Ala Gln Arg Val Ala Ser Thr Val Tyr Gln Asn Cys 420 425 430 Glu His Ala Asp Asn Tyr Thr Ala Tyr Cys Leu Gly Ile Ser His Met 435 440 445 Glu Pro Ser Phe Gly Leu Ile Leu His Asp Gly Gly Thr Thr Leu Lys 450 455 460 Phe Val Asp Thr Pro Glu Ser Leu Ser Gly Leu Tyr Val Phe Val Val 465 470 475 480 Tyr Phe Asn Gly His Val Glu Ala Val Ala Tyr Thr Val Val Ser Thr 485 490 495 Val Asp His Phe Val Asn Ala Ile Glu Glu Arg Gly Phe Pro Pro Thr 500 505 510 Ala Gly Gln Pro Pro Ala Thr Thr Lys Pro Lys Glu Ile Thr Pro Val 515 520 525 Asn Pro Gly Thr Ser Pro Leu Leu Arg Tyr Ala Ala Trp Thr Gly Gly 530 535 540 Leu Ala Ala Val Val Leu Leu Cys Leu Val Ile Phe Leu Ile Cys Thr 545 550 555 560 Ala Lys Arg Met Arg Val Lys Ala Tyr Arg Val Asp Lys Ser Pro Tyr 565 570 575 Asn Gln Ser Met Tyr Tyr Ala Gly Leu Pro Val Asp Asp Phe Glu Asp 580 585 590 Ser Glu Ser Thr Asp Thr Glu Glu Glu Phe Gly Asn Ala Ile Gly Gly 595 600 605 Ser His Gly Gly Ser Ser Tyr Thr Val Tyr Ile Asp Lys Thr Arg 610 615 620

Claims (34)

1. 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원의 적어도 1종의 에피토프를 코딩하는 폴리뉴클레오티드 서열을 갖는 핵산을 포함하는 바이러스 벡터를 포함하며, 여기서 상기 바이러스 벡터는 아데노바이러스 벡터인 조성물.
2. 제1항에 있어서, 상기 적어도 1종의 에피토프가 적어도 1종의 CD4 T 세포 에피토프 및 적어도 1종의 CD8 T 세포 에피토프를 포함하는 것인 조성물.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 아데노바이러스 벡터가 인간 또는 유인원 기원의 것인 조성물.
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 아데노바이러스 벡터가 ChAdOx 1 또는 ChAdOx 2인 조성물.
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 아주반트-무함유인 조성물.
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 Gly E 항원이 서열식별번호: 1 또는 서열식별번호: 2, 적합하게는 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 갖는 것인 조성물.
7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드 서열이 서열식별번호: 3 또는 서열식별번호: 4, 적합하게는 서열식별번호: 4의 서열을 포함하는 것인 조성물.
8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 폴리뉴클레오티드 서열이 bgh 폴리아데닐화 신호 서열식별번호: 6의 서열을 추가로 포함하는 것인 조성물.
9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV) Gly E 항원의 적어도 1종의 에피토프를 코딩하는 상기 폴리뉴클레오티드 서열이 긴 CMV 프로모터에 작동가능하게 연결되며, 적합하게는 상기 긴 CMV 프로모터가 서열식별번호: 7의 뉴클레오티드 서열을 갖는 것인 조성물.
10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 바이러스 벡터 서열이 ECACC 수탁 번호 12052403 (ChAdOx1)에서의 것과 같은 것인 조성물.
11. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 바이러스 벡터 서열이 서열식별번호: 5 (ChAdOx2)에서의 것과 같은 것인 조성물.
12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 포유동물 대상체에 대한 상기 조성물의 단일 용량 투여가 상기 대상체에서 보호 면역을 유도하는 것인 조성물.
13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, VZV에 대한 면역 반응의 유도를 위한 조성물.
14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물의 단일 용량이 투여되는 것인, VZV에 대한 면역 반응의 유도를 위한 조성물.
15. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 1회 투여되는 것인, VZV에 대한 면역 반응의 유도를 위한 것인 조성물.
16. 제1항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 5년마다 1회, 보다 적합하게는 매년 1회 투여되는 것인, VZV에 대한 면역 반응의 유도를 위한 것인 조성물.
17. 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, VZV 감염을 예방하는데 사용하기 위한 조성물.
18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 대상포진의 예방에 사용하기 위한 조성물.
19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물의 단일 용량이 투여되는 것인, VZV 감염을 예방하는데 사용하기 위한 또는 대상포진의 예방에 사용하기 위한 조성물.
20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 1회 투여되는 것인, VZV 감염을 예방하는데 사용하기 위한 또는 대상포진의 예방에 사용하기 위한 조성물.
21. 의약에서의 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 용도.
22. VZV 감염의 예방을 위한 약제의 제조에서의 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 용도.
23. 대상포진의 예방을 위한 약제의 제조에서의 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 용도.
24. 대상체에서 Gly E 항원에 대한 CD4+ 및 CD8+ T 세포 반응 둘 다의 유도를 위한 또는 둘 다를 유도하는 약제의 제조에서의 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 조성물의 용도.
25. 제24항에 있어서, 상기 약제가 상기 대상체에서 Gly E 항원에 대한 항체를 추가로 유도하는 것인 용도.
26. 포유동물 대상체에서 바리셀라-조스터 바이러스 (VZV)에 대한 면역 반응을 유도하는 방법으로서, 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
27. 포유동물 대상체에서 대상포진을 예방하는 방법으로서, 제1항 내지 제20항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 상기 대상체에게 투여하는 것을 포함하는 방법.
28. 제26항 또는 제27항에 있어서, 상기 조성물의 단일 용량이 상기 대상체에게 투여되는 것인 방법.
29. 제26항 또는 제27항에 있어서, 상기 조성물이 1회 투여되는 것인 방법.
30. 제26항 또는 제27항에 있어서, 상기 조성물이 5년마다 1회, 보다 적합하게는 매년 1회 투여되는 것인 방법.
31. 제26항 내지 제30항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 조성물이 피하, 피내 및 근육내로 이루어진 군으로부터 선택된 투여 경로에 의해 투여되는 것인 방법.
32. 제31항에 있어서, 상기 투여가 근육내인 방법.
33. 제22항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대상체가 인간인 용도 또는 방법.
34. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 수두의 치료 또는 예방에 사용하기 위한 조성물.

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