KR20210082189A - Glp-2 융합 폴리펩티드 및 위장 병태를 치료 및 예방하기 위한 용도 - Google Patents

Glp-2 융합 폴리펩티드 및 위장 병태를 치료 및 예방하기 위한 용도 Download PDF

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KR20210082189A KR1020217014801A KR20217014801A KR20210082189A KR 20210082189 A KR20210082189 A KR 20210082189A KR 1020217014801 A KR1020217014801 A KR 1020217014801A KR 20217014801 A KR20217014801 A KR 20217014801A KR 20210082189 A KR20210082189 A KR 20210082189A
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베티나 스트랙-로그
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샤이어-엔피에스 파마슈티칼즈, 인크.
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Abstract

이뮤노글로불린의 Fc 영역과 GLP-2의 융합 단백질이 기재되어 있다. 이러한 GLP-2 및 Fc 영역은 아미노산으로 구성된 링커에 의해 분리된다. 상기 융합 단백질을 사용하여 장피부 누공, 위장관에 대한 방사선 손상, 폐쇄성 황달, 및 단장 증후군을 치료하고 예방하는 방법이 개시되어 있다.

Description

GLP-2 융합 폴리펩티드 및 위장 병태를 치료 및 예방하기 위한 용도
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2018년 10월 24일에 출원된 미국 가출원 번호 62/750,001을 우선권 주장하며, 이의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
기술 분야
포유동물 GLP-2 융합 폴리펩티드 및 단백질 및 치료제로서의 그의 용도가 개시된다.
프로글루카곤의 번역후 프로세싱은 33개 아미노산 장 영양 펩티드 호르몬인 글루카곤-유사 펩티드-2 (GLP-2)를 생성한다. GLP-2는 위 배출을 지연시키고, 위 분비물을 감소시키며, 장 혈류를 증가시키는 작용을 한다. GLP-2는 또한 점막 상피의 표면적을 증가시키기 위해 적어도 음와 세포 증식과 융모 길이를 증강시킴으로써 대장 및 소장의 성장을 자극한다.
이러한 효과는 GLP-2가 다양한 위장 병태를 치료하는데 사용될 수 있다는 것을 시사한다. 소장에서의 GLP-2의 구체적이고 유익한 효과가 입증되어, 장 질환 또는 손상의 치료에 GLP-2를 사용하는 것에 관한 많은 관심을 불러 일으켰다 (Sinclair and Drucker, Physiology 2005: 357-65). 더욱이 GLP-2는 화학요법에 의해 유발된 점막염, 허혈-재관류 손상, 덱스트란 술페이트-유발 결장염을 포함한 장 손상의 다수의 전임상 모델 및 염증성 장 질환의 유전적 모델에서 점막 상피 손상을 예방하거나 감소시키는 것으로 제시된 바 있다 (Sinclair and Drucker, Physiology 2005:357-65).
그러나, GLP-2를 인간 환자에게 단독으로 투여하는 것은 가능성을 보여주지 못하였다. 디펩티딜 펩티다제 IV (DPP-IV)에 의한 GLP-2의 신속한 생체내 절단이 본질적으로 불활성인 펩티드를 산출하기 때문에, GLP-2는 치료제로서의 그의 사용을 제한하는 짧은 반감기를 갖는다. GLP-2 치료제인 테두글루티드는 알라닌-2가 글리신으로 치환되었기 때문에 반감기가 상당히 연장되었다. 그러나, 테두글루티드는 건강한 환자에서 대략 2시간의 반감기를 갖고 SBS 환자에서는 1.3시간의 반감기를 가지므로, 매일 투여하는 것이 필요하다.
테두글루티드는 통상적으로 크론병, 장간막 경색증, 장염전, 외상, 선천성 기형, 및 유착 또는 방사선으로 인한 다중 협착과 같은 병태에 대해 소장의 일부 또는 대부분을 외과적 절제함으로써 발생하는 단장 증후군 (SBS)을 치료하는데 있어서 치료 가능성을 보여주었다. 외과적 절제는 또한 결장의 전부 또는 일부를 절제하는 것을 포함할 수 있다. SBS 환자는 영양 실조, 탈수 및 체중 감소로 이어질 수 있는 다양한 영양소 (예를 들어, 폴리펩티드, 탄수화물, 지방산, 비타민, 미네랄 및 수분)의 흡수 장애로 고통받고 있다. 일부 환자는 과식증을 통해 단백질과 에너지 균형을 유지할 수 있지만, 환자가 유체 및 전해질 필요 요건을 지속시켜 비경구적 유체로부터 독립적으로 될 수 있는 경우는 더욱 드물다.
GLP-2는 위 분비물이 누공을 통해 소장을 우회하여 피부로 가는 병태인 장피부 누공 (ECF) 환자를 치료할 가능성을 보여줄 수 있다 (Arebi, N. et al., Clin. Colon Rectal Surg., May 2004, 17(2):89-98). ECF는 크론병 및 복강내 암으로부터 자발적으로 발생할 수 있거나, 또는 크론병 또는 방사선 요법으로부터의 합병증으로서 발생할 수 있다. ECF는 적어도 감염, 유체 손실 및 영양 실조로 인해 높은 이환율과 사망률을 보인다.
DDP-IV 내성 GLP-2 유사체는 방사선-유발 아폽토시스를 감소시키는데 있어서의 가능성을 보여주었다 (Gu, J. et al., J. Controlled Release, 2017). 아폽토시스는 방사선-유발 소장 점막 손상에서 발생한다. 마우스에서, GLP-2는 또한 방사선 후 CCD-18Co 세포 생존을 촉진시키고, 방사선-유발 GI 독성으로부터 보호하며, 방사선-유발 염증 반응을 하향-조절하고, 방사선 후 장에 대한 구조적 손상을 감소시켰다.
GLP-2는 또한 장 장벽 기능이 손상된 병태인 폐쇄성 황달을 가진 환자를 치료할 가능성을 보여줄 수 있다 (Chen, J. et al., World J. Gastroenterol., January 2015, 21(2):484-490). 래트에서, GLP-2는 혈청 빌리루빈의 수준을 감소시키고 장 점막에 대한 구조적 손상을 예방하였다.
SBS, ECF, 및 방사선 손상 또는 폐쇄성 황달로 인한 병리상태를 포함한 위장 병태를 치료하기 위해 개선된 형태의 GLP-2를 개발할 필요가 있다. 이러한 개선된 형태는 체내에서 더 오랜 기간 동안 활성 상태를 유지하므로 덜 빈번한 투여가 필요하다.
GLP-2 펩티바디가 본원에 기재된다. 이러한 펩티바디는 일반적으로 GLP-2와 Fc 영역 사이의 융합 단백질이다. GLP-2 펩티바디는 GLP-2 또는 심지어 테두글루티드 또는 GATTEX보다 체내에 더 오래 지속될 수 있다.
한 측면에서, 하기로부터 선택된 글루카곤-유사 펩티드 (GLP-2) 펩티바디, 또는 그의 제약상 허용되는 염이 제공된다:
a) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDGSAGSAAGSGEFDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호(SEQ ID NO): 1)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디,
b) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAPAPAPAPAPAPAPAPAPAPDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 4)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디,
c) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 7)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디, 및
d) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDRGGGGSGGGGSGGGGSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 10)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디.
일부 실시양태에서, 상기 서열 (서열식별번호: 1, 4, 7, 및 10) 중 임의의 것은 C-말단에 리신 (K)을 추가로 포함할 수 있다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 GLP-2와 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4 중 임의의 것의 Fc 영역 사이의 링커를 사용하여, GLP-2와 직접 연결된 신호 펩티드를 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드로부터 프로세싱된다. 폴리펩티드 상의 신호 펩티드는 GLP-2 펩티바디를 생산하기 위해 사용된 포유동물 숙주 세포로부터 GLP-2 펩티바디의 분비를 촉진할 수 있으며, 이러한 신호 펩티드는 분비 후 GLP-2 펩티바디로부터 절단된다. 임의의 수의 신호 펩티드가 사용될 수 있다. 신호 펩티드는 하기 서열을 가질 수 있다: METPAQLLFLLLLWLPDTTG (서열식별번호: 13).
일부 실시양태에서, 신호 펩티드를 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드는 하기로부터 선택된다:
a) METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDGSAGSAAGSGEFDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 2)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드,
b) METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAPAPAPAPAPAPAPAPAPAPDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 5)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드,
c) METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 8)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드,
d) METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDRGGGGSGGGGSGGGGSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 11)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드;
또는 그의 제약상 허용되는 염.
상기 GLP-2 전구체 폴리펩티드 서열 (서열식별번호: 2, 5, 8, 및 11) 중 임의의 것은 C-말단에 리신 (K)을 추가로 포함할 수 있다.
Fc 영역은 LALA 돌연변이를 갖는 IgG1일 수 있다. 신호 펩티드를 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드는 하기 식을 가질 수 있다:
신호 펩티드-GLP-2[A2G]-링커-IgG1(LALA)
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 제약 조성물은 담체 또는 제약상 허용되는 부형제를 추가로 포함한다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 주사 또는 주입에 의한 투여에 적합한 액상물로서 제형화된다. 일부 실시양태에서, 제약 조성물은 GLP-2 펩티바디, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디의 지속 방출, 연장 방출, 지연 방출 또는 저속 방출을 위해 제형화된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도로 투여된다.
또 다른 측면에서, 본원에 기재된 GLP-2 펩티바디를 코딩하는 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 이러한 서열은 서열식별번호: 3, 6, 9, 또는 12에 제시된 것일 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디 전구체를 코딩하는 서열을 포함한다. GLP-2 펩티바디를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열식별번호: 3의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 5의 서열을 포함한다. GLP-2 펩티바디를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열식별번호: 6의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 8의 서열을 포함한다. GLP-2 펩티바디를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열식별번호: 9의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 폴리뉴클레오티드는 서열식별번호: 11의 서열을 포함한다. GLP-2 펩티바디를 코딩하는 뉴클레오티드 서열은 서열식별번호: 12의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본원에 개시된 폴리뉴클레오티드 중 임의의 것을 포함하는 벡터가 제공된다. 이러한 벡터에서, 폴리뉴클레오티드는 프로모터에 작동가능하게 연결될 수 있다.
또 다른 측면에서, 상기 폴리뉴클레오티드를 포함하는 숙주 세포가 제공된다. 일부 실시양태에서, 숙주 세포는 차이니즈 햄스터 난소 세포이다. 일부 실시양태에서, 숙주 세포는 유가식 세포 배양 규모에 충분한 수준으로 GLP-2 펩티바디를 발현한다.
또 다른 측면에서, 장피부 누공 (ECF)의 폐쇄, 치유, 및/또는 복구를 촉진하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여, GLP-2 펩티바디, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디로 ECF를 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법이 제공된다. GLP-2 펩티바디, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 피하로 또는 정맥내로 투여될 수 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자에 의한 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 영양소, 예를 들어, 폴리펩티드, 탄수화물, 지방산, 비타민, 미네랄 및 수분의 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자에서 위 분비물의 용적을 감소시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있다. 대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 7-14일마다 1회 0.2 내지 2.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 매주 1회 0.3 내지 2.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있다.
또 다른 측면에서, 폐쇄성 황달을 치료하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여, GLP-2 펩티바디, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디로 폐쇄성 황달을 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 혈청 빌리루빈의 수준은 상기 치료 전의 혈청 빌리루빈의 수준과 비교 시 감소된다. 일부 실시양태에서, 혈청 빌리루빈의 수준은 상기 치료 전의 혈청 빌리루빈의 수준과 비교 시 감소된다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자에 의한 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 영양소, 예를 들어, 폴리펩티드, 탄수화물, 지방산, 비타민, 미네랄 및 수분의 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자에서 위 분비물의 용적을 감소시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자에서 장 장벽 기능을 개선시키고 상기 환자의 소장에 걸친 박테리아 전좌율을 감소시키는데 유효하다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있다. 대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 GLP-2 펩티바디, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디를 투여하는 것을 포함하는, 위장관에 대한 방사선 손상, 및/또는 그의 효과를 치료하거나, 개선시키거나 또는 그로부터 보호하는 방법을 제공한다. 이러한 투약 레지멘은 환자의 위장관에 대한 방사선 손상을 치료 또는 예방하는데 유효하다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 방사선 손상은 소장 내에 있다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 위장관의 세포에서의 아폽토시스를 감소시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 환자를 방사선 또는 방사선 요법으로 치료하기 전, 치료하는 동안, 또는 치료 후에 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 상기 방법은 위장관의 세포에서의 아폽토시스를 감소시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자에서 장 장벽 기능을 개선시키는데 유효하다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있다. 대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 GLP-2 펩티바디, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디를 투여하는 것을 포함하는, 위장관에 대한 방사선-유발 장염, 및/또는 그의 효과를 치료하거나, 개선시키거나 또는 예방하는 방법을 제공한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 위장관의 세포에서의 아폽토시스를 감소시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자에서 장 장벽 기능을 개선시키는데 유효하다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있다. 대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다.
또 다른 측면에서, 단장 증후군을 치료하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여, GLP-2 펩티바디, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디로 잔존 소장과 연속성인 결장을 제시하는 단장 증후군을 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 포함한다. 일부 실시양태에서, 잔존 소장은 적어도 25 cm의 길이를 갖는다. 일부 실시양태에서, 잔존 소장은 적어도 50 cm의 길이를 갖는다. 일부 실시양태에서, 잔존 소장은 적어도 75 cm의 길이를 갖는다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 잔존 소장과의 적어도 약 25% 결장 연속성을 제시하는 단장 증후군 환자에서 장 흡수를 증강시키기 위한 의약으로서 투여된다.
일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자에서 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 영양소, 예를 들어, 폴리펩티드, 아미노산, 탄수화물, 지방산, 비타민, 미네랄 및 수분의 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 상기 환자에서 장 장벽 기능을 개선시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 분변 습윤 중량을 감소시키고/거나, 소변 습윤 중량을 증가시키고/거나, 소장에 걸친 에너지 흡수를 증가시키고/거나 소장에 걸친 수분 흡수를 증가시키는데 유효하다. 에너지 흡수는 폴리펩티드, 아미노산, 탄수화물 및 지방산 중 하나 이상의 증가된 흡수를 포함할 수 있다. 일부 실시양태에서, 환자는 비경구 영양에 의존적이다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하고, GLP-2 펩티바디는 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있다. 대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여된다. 일부 실시양태에서, 이와 같이 투여된 GLP-2 펩티바디는 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있다.
본원에 기재된 측면 및 실시양태 중 임의의 것에서, GLP-2 펩티바디, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 피하로 또는 정맥내로 투여될 수 있다. 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 2-14일마다, 5-8일마다, 또는 매주 (QW) 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함함)는 매주 (QW) 또는 2주마다 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 유지 목적으로 5-8일마다, 또는 매주 (QW) 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다. 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 10 내지 200 mg/mL, 10 내지 180 mg/mL, 20 내지 160 mg/mL, 25 내지 150 mg/mL, 30 내지 125 mg/mL, 50 내지 100 mg/mL, 60 내지 90 mg/mL, 약 75 mg/mL, 75 mg/mL, 10 내지 20 mg/mL, 15 내지 25 mg/mL, 12 내지 18 mg/mL, 13-17 mg/mL, 14-16 mg/mL, 약 15 mg/mL 또는 15 mg/mL의 농도로 투여될 수 있다.
도 1A는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열을 제시한다. 도 1B는 서열식별번호: 1의 아미노산 서열의 5'에 신호 서열을 포함하는 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 제시한다. GLP-2[A2G] 서열에 밑줄이 그어져 있고 링커는 볼드체이다. 링커 서열 및 IgG1 Fc 서열이 GLP-2 서열에 뒤따른다.
도 2는 서열식별번호: 2의 아미노산 서열을 코딩하는 서열식별번호: 3의 뉴클레오티드 서열을 제시한다.
도 3A는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열을 제시한다. 도 3B는 서열식별번호: 4의 아미노산 서열의 5'에 신호 서열을 포함하는 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 제시한다. GLP-2[A2G] 서열에 밑줄이 그어져 있고 링커는 볼드체이다. 링커 서열 및 IgG1 Fc 서열이 GLP-2 서열에 뒤따른다.
도 4는 서열식별번호: 5의 아미노산 서열을 코딩하는 서열식별번호: 6의 뉴클레오티드 서열을 제시한다.
도 5A는 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 제시한다. 도 5B는 서열식별번호: 7의 아미노산 서열의 5'에 신호 서열을 포함하는 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 제시한다. GLP-2[A2G] 서열에 밑줄이 그어져 있고 링커는 볼드체이다. 링커 서열 및 IgG1 Fc 서열이 GLP-2 서열에 뒤따른다.
도 6은 서열식별번호: 8의 아미노산 서열을 코딩하는 서열식별번호: 9의 뉴클레오티드 서열을 제시한다.
도 7A는 서열식별번호: 10의 아미노산 서열을 제시한다. 도 7B는 서열식별번호: 10의 아미노산 서열의 5'에 신호 서열을 포함하는 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 제시한다. C-말단에 부가의 아르기닌 잔기를 갖는 GLP-2[A2G] 서열에 밑줄이 그어져 있고 링커는 볼드체이다. 링커 서열 및 IgG1 Fc 서열이 GLP-2 서열에 뒤따른다.
도 8은 서열식별번호: 11의 아미노산 서열을 코딩하는 서열식별번호: 12의 뉴클레오티드 서열을 제시한다.
정의
달리 정의되지 않는 한, 본원에 사용되는 기술적 및 과학적 용어는 본 발명이 속하는 기술분야의 통상의 기술자에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. 하기 용어 및 다른 용어에 대한 부가의 정의가 명세서 전반에 걸쳐 제시된다.
단수 형태는 수량의 제한을 의미하는 것이 아니라, 참조된 항목의 "적어도 하나"의 존재를 의미한다.
본 출원에 사용된 바와 같은, 용어 "약" 및 "대략"은 등가물로서 사용된다. 본 출원에서 약/대략과 함께 사용되거나 사용되지 않는 임의의 숫자는 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 인식되는 임의의 정상적인 변동을 포괄하는 것을 의미한다. 본원에 사용된 바와 같은, 하나 이상의 관심 값에 적용되는 바와 같은 용어 "대략" 또는 "약"은 언급된 참조 값과 유사한 값을 지칭한다. 특정 실시양태에서, 용어 "대략" 또는 "약"은 달리 언급되지 않거나 또는 문맥상 달리 명백하지 않는 한 언급된 참조 값의 어느 한 방향 (초과 또는 미만)으로 (이러한 숫자가 가능한 값의 100%를 초과하는 경우는 제외됨) 25%, 20%, 19%, 18%, 17%, 16%, 15%, 14%, 13%, 12%, 11%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 또는 그 미만 내에 속하는 값의 범위를 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "담체" 및 "희석제"는 제약 제형의 제조에 유용한 제약상 허용되는 (예를 들어, 인간에게 투여하기에 안전하고 비독성인) 담체 또는 희석 물질을 지칭한다. 예시적인 희석제는 멸균 수, 주사용 정균수 (BWFI), pH 완충 용액 (예를 들어, 인산염 완충 염수), 멸균 염수, 링거 용액 또는 덱스트로스 용액을 포함한다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "융합 단백질" 및 "키메라 단백질"은 2개 이상의 원래 별도의 단백질 또는 그의 일부분의 연결을 통해 창출된 단백질을 지칭한다. 일부 실시양태에서, 링커 또는 스페이서는 각각의 단백질 사이에 존재할 것이다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "반감기"는 특정 수량, 예컨대 단백질 농도 또는 활성이 특정 기간의 시작에 측정된 바와 같은 그의 값의 절반으로 떨어지는데 필요한 시간이다.
"GLP-2 펩티바디", "GLP-2 펩티바디 부분" 또는 "GLP-2 펩티바디 단편" 및/또는 "GLP-2 펩티바디 변이체" 등은 적어도 하나의 GLP-2 펩티드의 적어도 하나의 생물학적 활성, 예컨대 시험관내, 계내 및/또는 바람직하게 생체내 리간드 결합이지만, 이에 제한되지는 않는 생물학적 활성을 갖거나, 이를 모방하거나 또는 모의할 수 있다. 예를 들어, 적합한 GLP-2 펩티바디, 지정된 부분 또는 변이체는 또한 적어도 하나의 GLP-2 수용체 신호전달 또는 다른 측정가능하거나 검출가능한 활성을 조정, 증가, 변형, 활성화시킬 수 있다. GLP-2 펩티바디는 단백질 리간드, 예를 들어, GLP-2 수용체에 대한 적합한 친화성 결합을 가질 수 있으며, 임의로 낮은 독성을 가질 수 있다. GLP-2 펩티바디는 우수한 내지 탁월한 증상 완화와 낮은 독성을 나타내면서 장기간 환자를 치료하는데 사용될 수 있다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "개선시키다", "증가시키다" 또는 "감소시키다" 또는 문법적 등가물은 기준선 측정, 예컨대 본원에 기재된 치료를 시작하기 전에 동일한 개체에서의 측정, 또는 본원에 기재된 치료의 부재 하에 대조군 대상체 (또는 다수의 대조군 대상체)에서의 측정과 비교한 값을 나타낸다. "대조군 대상체"는 치료받는 대상체와 동일한 형태의 질환을 앓고 있고, 치료받는 대상체와 거의 동일한 연령의 대상체이다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "시험관내"는 다세포 유기체 내보다는 인공 환경, 예를 들어, 시험 관 또는 반응 용기, 세포 배양물 등에서 발생하는 사건을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "생체내"는 다세포 유기체, 예컨대 인간 및 비-인간 동물 내에서 발생하는 사건을 지칭한다. 세포 기반 시스템의 맥락에서, 이러한 용어는 살아있는 세포 내에서 발생하는 사건을 지칭하는데 사용될 수 있다 (예를 들어, 시험관내 시스템과 반대임).
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "링커"는 융합 단백질에서, 자연 단백질 내의 특별한 위치에 나타나는 것 이외의 아미노산 서열을 지칭하며, 일반적으로 가요성이 되도록 설계되거나 또는 2개의 단백질 모이어티 사이에 α-나선과 같은 구조를 삽입하도록 설계된다. 링커는 스페이서로서 지칭되기도 한다. 링커 또는 스페이서는 전형적으로 그 자체로는 생물학적 기능이 없다.
본원에 사용된 바와 같은, 어구 "제약상 허용되는"은 일반적으로 생리학상 허용되는 것으로 간주되는 분자 실체 및 조성물을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같은 용어 "폴리펩티드"는 펩티드 결합을 통해 함께 연결된 아미노산의 순차적 쇄를 지칭한다. 이러한 용어는 임의의 길이의 아미노산 쇄를 지칭하는데 사용되지만, 관련 기술분야의 통상의 기술자는 상기 용어가 너무 긴 쇄로 제한되지 않고 펩티드 결합을 통해 함께 연결된 2개의 아미노산을 포함하는 최소 쇄를 지칭할 수 있다는 것을 이해할 것이다. 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 바와 같이, 폴리펩티드는 프로세싱되고/거나 변형될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "폴리펩티드" 및 "펩티드"는 상호 교환적으로 사용된다. 용어 "폴리펩티드"는 또한 단백질을 지칭할 수 있다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "예방하다" 및 "예방"은 질환, 장애, 및/또는 병태의 발생과 연계해서 사용될 때, 이러한 질환, 장애 및/또는 병태가 발생할 위험을 감소시키는 것을 지칭한다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "대상체"는 인간 또는 임의의 비-인간 동물 (예를 들어, 마우스, 래트, 토끼, 개, 고양이, 소, 돼지, 양, 말 또는 영장류)을 지칭한다. 인간은 출생 전 및 출생 후 형태를 포함한다. 많은 실시양태에서, 대상체는 인간이다. 대상체는 질환의 진단 또는 치료를 위해 의료 제공자에게 제시하는 인간을 지칭하는 환자일 수 있다. 용어 "대상체"는 본원에서 "개체" 또는 "환자"와 상호 교환적으로 사용된다. 대상체는 질환 또는 장애를 앓고 있거나 또는 이에 취약할 수 있지만, 질환 또는 장애의 증상을 나타낼 수 있거나 나타내지 않을 수 있다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "실질적으로"는 관심 특징 또는 특성의 전체 또는 거의 전체 범위 또는 정도를 나타내는 정성적 조건을 지칭한다. 통상의 기술자는 생물학적 및 화학적 현상이 거의 완료되지 않고/거나 완전성으로 진행하거나 절대적인 결과를 달성하거나 회피하는 경우가 거의 없음을 이해할 것이다. 따라서 용어 "실질적으로"는 많은 생물학적 및 화학적 현상에 내재된 잠재적인 완전성의 결여를 포착하기 위해 본원에 사용된다.
본원에 사용된 바와 같은, 치료제의 "치료상 유효량"은 질환, 장애, 및/또는 병태를 앓고 있거나 또는 이에 취약한 대상체에게 투여될 때, 이러한 질환, 장애, 및/또는 병태의 증상(들)의 발병을 치료, 진단, 예방 및/또는 지연시키기에 충분한 양을 의미한다. 치료상 유효량은 전형적으로 적어도 하나의 단위 용량을 포함하는 투약 레지멘을 통해 투여된다는 것이 관련 기술분야의 통상의 기술자에 의해 인식될 것이다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "치료하다", "치료" 및 "치료하는"은 특별한 질환, 장애, 및/또는 병태의 한 가지 이상의 증상 또는 특색을 부분적으로 또는 완전히 완화, 개선, 구제, 억제, 예방, 발병 지연, 중증도 감소 및/또는 발생 감소를 위해 사용되는 임의의 방법을 지칭한다. 치료는 질환과 연관된 병리상태가 발생할 위험을 감소시키기 위한 목적으로 질환의 징후를 나타내지 않고/거나 질환의 초기 징후만을 나타내는 대상체에게 투여될 수 있다.
본 발명의 다양한 측면이 하기 섹션에서 상세하게 기재된다. 섹션의 사용이 본 발명을 제한하는 것을 의미하지 않는다. 각각의 섹션은 본 발명의 임의의 측면에 적용될 수 있다.
본원에 기재된 다양한 GLP-2 펩티바디는 GLP-2 서열과 Fc 또는 Fc 변이체 서열 사이에 링커를 포함한다. 대안적으로, 알부민 서열이 Fc 또는 Fc 변이체 서열 대신에 사용될 수 있다. 링커는 펩티바디가 대체 방향 및 결합 특성을 가질 수 있도록 함으로써 구조적 가요성을 제공한다. 링커는 바람직하게 펩티드 결합에 의해 함께 연결된 아미노산으로 구성된다. 이들 아미노산 중 일부는 관련 기술분야에 널리 이해되는 바와 같이 글리코실화될 수 있다. 아미노산은 글리신, 알라닌, 세린, 프롤린, 아스파라긴, 글루타민, 및 리신으로부터 선택될 수 있다. 훨씬 더 바람직하게, 링커는 입체적으로 방해받지 않는 대부분의 아미노산, 예컨대 글리신, 세린 및 알라닌으로 구성된다.
GLP-2 서열은 Fc 도메인 또는 알부민 도메인에 직접 또는 간접적으로 연결될 수 있다. 한 실시양태에서, 링커는, 예를 들어, 서열식별번호: 1의 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디 내의 서열 GSAGSAAGSGEF (서열식별번호: 14)를 갖는다. 또 다른 실시양태에서, 링커는, 예를 들어, 서열식별번호: 4의 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디 내의 서열 APAPAPAPAPAPAPAPAPAP (서열식별번호: 15)를 갖는다. 또 다른 실시양태에서, 링커는, 예를 들어, 서열식별번호: 7의 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디 내의 서열 AEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKA (서열식별번호: 16)를 갖는다. 또 다른 실시양태에서, 링커는, 예를 들어, 서열식별번호: 10의 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디 내의 서열 GGGGSGGGGSGGGGS (서열식별번호: 17)를 갖는다.
적합한 링커 또는 스페이서는 또한 상기 예시적인 링커와 적어도 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 그 초과로 상동이거나 동일한 아미노산 서열을 갖는 것을 포함한다. 일부 실시양태와 함께 사용하기에 적합한 부가의 링커는 2012년 3월 2일에 출원된 US2012/0232021에서 찾을 수 있으며, 그의 개시내용은 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
다양한 실시양태에서, GLP-2[A2G] 서열이 GLP-2에 사용된다. 이러한 GLP-2[A2G] 서열에서는, 위치 2에 알라닌 대신 글리신이 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2[A2G]는 C-말단에 아르기닌을 포함한다.
한 측면에서, 하기로부터 선택된 글루카곤-유사 펩티드 (GLP-2) 펩티바디가 제공된다:
a) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDGSAGSAAGSGEFDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 1)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디,
b) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAPAPAPAPAPAPAPAPAPAPDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 4)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디,
c) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 7)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디, 및
d) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDRGGGGSGGGGSGGGGSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 10)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDGSAGSAAGSGEFDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 1)의 아미노산 서열, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAPAPAPAPAPAPAPAPAPAPDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 4)의 아미노산 서열, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 7)의 아미노산 서열, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다.
일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDRGGGGSGGGGSGGGGSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 10)의 아미노산 서열, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함한다.
Fc 도메인과 FcRn 수용체 사이의 개선된 결합이 혈청 반감기를 연장시키는 것으로 고려된다. 따라서, 일부 실시양태에서, 적합한 Fc 도메인은 FcRn에 대한 개선된 결합을 초래하는 하나 이상의 아미노산 돌연변이를 포함한다. FcRn에 대한 개선된 결합에 영향을 미치는 Fc 도메인 내의 다양한 돌연변이는 관련 기술분야에 공지되어 있으며 본 발명을 실시하기 위해 적응될 수 있다. 일부 실시양태에서, 적합한 Fc 도메인은 인간 IgG1의 Thr 250, Met 252, Ser 254, Thr 256, Thr 307, Glu 380, Met 428, His 433, 및/또는 Asn 434에 상응하는 하나 이상의 위치에 하나 이상의 돌연변이를 포함한다.
본 발명의 GLP-2 펩티바디는 공지된 단백질과 비교 시 적어도 하나의 적합한 특성, 예컨대 증가된 반감기, 증가된 활성, 보다 특이적 활성, 증가된 결합력, 증가 또는 감소된 오프 레이트, 선택되거나 또는 보다 적합한 활성 서브세트, 더 적은 면역원성, 적어도 하나의 원하는 치료 효과의 증가된 품질 또는 지속 기간, 더 적은 부작용 등 중 적어도 하나이나, 이에 제한되지는 않는 특성을 제공할 수 있다.
전형적으로, 적합한 GLP-2 펩티바디, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 약 2시간, 3시간, 4시간, 6시간, 8시간, 10시간, 12시간, 14시간, 16시간, 18시간, 20시간, 22시간, 24시간, 26시간, 28시간, 30시간, 32시간, 34시간, 36시간, 38시간, 40시간, 42시간, 44시간, 46시간, 또는 48시간 또는 그 초과의 생체내 반감기를 갖는다. 일부 실시양태에서, 재조합 GLP-2 펩티바디는 2 내지 48시간, 2 내지 44시간, 2 내지 40시간, 3 내지 36시간, 3 내지 32시간, 3 내지 28시간, 4 내지 24시간, 4 내지 20시간, 6 내지 18시간, 6 내지 15시간, 및 6 내지 12시간의 생체내 반감기를 갖는다.
GLP-2 펩티바디 또는 그의 지정된 부분 또는 변이체는 적어도 하나의 세포주, 혼합된 세포주, 불멸화된 세포 또는 불멸화되고/거나 배양된 세포의 클로날 집단에 의해 생산될 수 있다. 불멸화된 단백질 생산 세포는 적합한 방법을 사용하여 생산될 수 있다. 바람직하게, 적어도 하나의 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체는 기능적으로 재배열되거나 또는 기능적 재배열을 겪을 수 있고 본원에 기재된 바와 같은 펩티바디 구조를 추가로 포함하는 적어도 하나의 인간 이뮤노글로불린 유전자좌로부터 유래되거나 또는 이와 실질적으로 유사한 서열을 갖는 DNA를 포함하는 핵산 또는 벡터를 제공함으로써 생성된다.
GLP-2 펩티바디는 광범위한 친화도 (KD)로 인간 단백질 리간드와 결합할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 본 발명의 적어도 하나의 인간 GLP-2 펩티바디는 높은 친화도로 적어도 하나의 단백질 리간드와 임의로 결합할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 적어도 하나의 GLP-2 펩티바디는 약 10-7 M 이하의 KD 또는, 보다 바람직하게, 약 0.1-9.9 (또는 그 안에 있는 임의의 범위 또는 값)x10-7, 10-8, 10-9, 10-10, 10-11, 10-12, 또는 10-13 M 이하, 또는 그 안에 있는 임의의 범위 또는 값의 KD로 적어도 하나의 단백질 리간드와 결합할 수 있다.
적어도 하나의 단백질 리간드에 대한 GLP-2 펩티바디의 친화도 또는 결합력은, 예를 들어, 항체-항원 결합 친화도 또는 결합력을 결정하기 위해 사용된 바와 같은 임의의 적합한 방법을 사용하여 실험적으로 결정될 수 있다. (예를 들어, 문헌 [Kuby, Janis Immunology, W. H. Freeman and Company: New York, N.Y. (1992)] 참조). 특별한 GLP-2 펩티바디-리간드 상호작용의 측정된 친화도는 상이한 조건, 예를 들어, 염 농도 및 pH 하에 측정되는 경우에 달라질 수 있다. 따라서, 친화도 및 다른 리간드-결합 파라미터 (예를 들어, KD, Ka, Kd)의 측정은 바람직하게 GLP-2 펩티바디 및 리간드의 표준화된 용액, 및 표준화된 완충액, 예컨대 본원에 기재되거나 관련 기술분야에 공지된 완충액으로 수행된다.
C-말단에 리신 (K)이 있을 수 있거나 없을 수 있다. 서열식별번호: 1, 4, 7, 및 10의 폴리펩티드 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 C-말단 리신이 결여되어있다. 동시에, 본원에 기재된 실시양태 또는 측면 중 임의의 것에서, 리신이 C-말단에 부가될 수 있다.
본원에 기재된 임의의 실시양태 또는 측면에서, GLP-2 펩티바디는 GLP-2와 IgG1, IgG2, IgG3 및 IgG4 중 임의의 것의 Fc 영역 사이의 링커를 사용하여, GLP-2와 직접 연결된 신호 펩티드를 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드로부터 프로세싱된다. Fc 영역은 LALA 돌연변이가 있는 IgG1일 수 있다. GLP-2 전구체 폴리펩티드는 하기 식을 가질 수 있다:
신호 펩티드-GLP-2[A2G]-링커-IgG1(LALA)
LALA는 항체에서의 L234A 및 L235A (EU 넘버링) 돌연변이를 지칭한다. LALA 돌연변이는 본원에 개시된 하기 폴리펩티드 서열, 예를 들어 서열식별번호: 1, 4, 7, 및 10에 존재한다. LALA 돌연변이는 Fc 감마-R에 대한 결합을 크게 감소시키고 결국 GLP-2 펩티바디가 원치 않는 항체 이펙터 기능을 야기하는 것을 방지할 수 있다. 문헌 [Leabman, M.K. et al., "Effects of altered Fc gammaR binding on antibody pharmacokinetics in cynomolgus monkeys" mAbs 5(6):2013]을 참조한다.
적어도 하나의 GLP-2 생물학적 활성을 부분적으로 또는 바람직하게 실질적으로 제공하는 GLP-2 펩티바디, 또는 그의 지정된 부분 또는 변이체는 GLP-2 리간드와 결합할 수 있으며, 그에 의해 적어도 하나의 리간드, 예컨대 GLP-2 수용체에 대한 GLP-2의 결합을 통해, 또는 다른 단백질 의존적 또는 매개된 메커니즘을 통해 달리 매개되는 적어도 하나의 활성을 제공할 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "GLP-2 펩티바디 활성"은 적어도 하나의 GLP-2 의존적 활성을 검정에 따라, 야생형 GLP-2 펩티드 또는 GLP-2[A2G] 펩티드와 비교 시 약 20-10,000%만큼 조정 또는 야기시킬 수 있고, 바람직하게 야생형 GLP-2 펩티드 또는 GLP-2[A2G] 펩티드와 비교 시 적어도 약 60, 70, 80, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 250, 300, 350, 400, 450, 500, 550, 600, 700, 800, 900, 1000, 2000, 3000, 4000, 5000, 6000, 7000, 8000, 9000% 또는 그 초과만큼 조정 또는 야기시킬 수 있는 GLP-2 펩티바디를 지칭한다.
적어도 하나의 단백질-의존적 활성을 제공할 수 있는 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체의 능력은 바람직하게 본원에 기재된 바와 같고/거나 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 적어도 하나의 적합한 단백질 생물학적 검정에 의해 평가된다. 본 발명의 인간 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체는 임의의 부류 (IgG, IgA, IgM 등) 또는 이소타입과 유사할 수 있으며 카파 또는 람다 경쇄의 적어도 일부분을 포함할 수 있다. 한 실시양태에서, 인간 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체는 서브클래스, 예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3 또는 IgG4 중 적어도 하나의 IgG 중쇄 CH2 및 CH3을 포함한다.
본 발명의 적어도 하나의 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체는 적어도 하나의 리간드, 서브유닛, 단편, 부분 또는 그의 임의의 조합과 결합한다. 본 발명의 적어도 하나의 GLP-2 펩티바디, 지정된 부분 또는 변이체의 적어도 하나의 GLP-2 펩티드, 변이체 또는 유도체는 리간드의 적어도 하나의 지정된 에피토프와 임의로 결합할 수 있다. 결합 에피토프는 단백질 리간드, 예컨대 GLP-2 수용체 또는 그의 일부분의 서열의 인접 아미노산의 전체 지정된 부분에 대한 적어도 1-3개 아미노산의 적어도 하나의 아미노산 서열의 임의의 조합을 포함할 수 있다.
본 발명은 또한 본원에 기재된 아미노산 서열과 실질적으로 동일한 서열 내의 아미노산을 포함하는 펩티바디, 리간드-결합 단편 및 이뮤노글로불린 쇄에 관한 것이다. 바람직하게, 이러한 펩티바디 또는 그의 리간드-결합 단편은 높은 친화도 (예를 들어, 약 10-7 M 이하의 KD)로 인간 GLP-2 리간드, 예컨대 수용체와 결합할 수 있다. 본원에 기재된 서열과 실질적으로 동일한 아미노산 서열은 보존적 아미노산 치환뿐만 아니라 아미노산 결실 및/또는 삽입을 포함하는 서열을 포함한다. 보존적 아미노산 치환은 제1 아미노산을, 이러한 제1 아미노산과 유사한 화학적 및/또는 물리적 특성 (예를 들어, 전하, 구조, 극성, 소수성/친수성)을 갖는 제2 아미노산으로 대체하는 것을 지칭한다. 보존적 치환은 하기 군 내에 있는 하나의 아미노산을 또 다른 아미노산으로 교체하는 것을 포함한다: 리신 (K), 아르기닌 (R) 및 히스티딘 (H); 아스파르테이트 (D) 및 글루타메이트 (E); 아스파라긴 (N), 글루타민 (Q), 세린 (S), 트레오닌 (T), 티로신 (Y), K, R, H, D 및 E; 알라닌 (A), 발린 (V), 류신 (L), 이소류신 (I), 프롤린 (P), 페닐알라닌 (F), 트립토판 (W), 메티오닌 (M), 시스테인 (C) 및 글리신 (G); F, W 및 Y; C, S 및 T.
통상의 기술자가 인지하는 바와 같이, 본 발명은 적어도 하나의 생물학적으로 활성인 본 발명의 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체를 포함한다. 일부 실시양태에서, 생물학적으로 활성인 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체는 천연 (비-합성), 내인성 또는 관련된 및 공지된 삽입 또는 융합된 단백질 또는 지정된 부분 또는 변이체의 특이적 활성의 적어도 2%, 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 12%, 또는 15%인 특이적 활성을 갖는다.
핵산
또 다른 측면에서, 본원에 기재된 GLP-2 펩티바디를 코딩하는 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드가 제공된다. 이러한 서열은 서열식별번호: 3, 6, 9, 또는 12 중 임의의 것과의 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 동일성을 가질 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 폴리뉴클레오티드는 추가의 비코딩 서열을 포함할 수 있다. 상기 폴리뉴클레오티드는 지정된 단편, 변이체 또는 그의 컨센서스 서열, 또는 이들 서열 중 적어도 하나를 포함하는 기탁된 벡터를 추가로 포함할 수 있다. 핵산 분자는 RNA, 예컨대 mRNA, hnRNA, tRNA의 형태 또는 임의의 다른 형태일 수 있거나, 또는 클로닝에 의해 수득되거나 또는 합성적으로 생산되는 게놈 DNA 및 cDNA를 포함하나 이에 제한되지는 않는 DNA의 형태일 수 있거나, 또는 그의 임의의 조합일 수 있다. DNA는 삼중 가닥, 이중 가닥 또는 단일 가닥, 또는 그의 임의의 조합일 수 있다. DNA 또는 RNA의 적어도 하나의 가닥의 임의의 부분은 센스 가닥으로서 또한 공지된 코딩 가닥일 수 있거나, 또는 안티센스 가닥으로서 또한 지칭된 비코딩 가닥일 수 있다.
일부 실시양태에서, 트랜스진을 코딩하는 핵산은 코딩된 GLP-2 펩티바디의 증가된 발현을 제공하도록 변형될 수 있으며, 이는 코돈 최적화로서 지칭되기도 한다. 예를 들어, 트랜스진을 코딩하는 핵산은 코딩 서열에 대한 오픈 리딩 프레임을 변경함으로써 변형될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "오픈 리딩 프레임"은 "ORF"와 동의어이며 잠재적으로 단백질 또는 단백질의 일부분을 코딩할 수 있는 임의의 뉴클레오티드 서열을 의미한다. 오픈 리딩 프레임은 통상적으로 출발 코돈 (예를 들어, RNA 분자의 경우에는 AUG로서 표시되고 표준 코드의 DNA 분자에서는 ATG로서 표시됨)으로 시작하고 프레임이 정지 코돈 (예를 들어, RNA 분자의 경우에는 UAA, UGA 또는 UAG로서 표시되고 표준 코드의 DNA 분자에서는 TAA, TGA 또는 TAG로서 표시됨)으로 끝날 때까지 코돈-삼중항에서 판독된다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "코돈"은 단백질 합성 동안 특별한 아미노산을 지정하는 핵산 분자 내의 3개의 뉴클레오티드의 서열을 의미하고; 삼중항 또는 코돈-삼중항이라고도 한다. 예를 들어, 표준 유전자 코드 내의 64개의 가능한 코돈 중, GAA와 GAG라는 2개의 코돈은 아미노산 글루타민을 코딩하는 반면, 코돈 AAA와 AAG는 아미노산 리신을 지정한다. 표준 유전자 코드에서 3개의 코돈은 아미노산을 지정하지 않는 정지 코돈이다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "동의어 코돈"은 단일 아미노산을 코딩하는 임의의 및 모든 코돈을 의미한다. 메티오닌과 트립토판을 제외하고, 아미노산은 2개 내지 6개의 동의어 코돈에 의해 코딩된다. 예를 들어, 표준 유전자 코드에서 아미노산 알라닌을 코딩하는 4개의 동의어 코돈은 GCA, GCC, GCG 및 GCU이고, 글루타민을 지정하는 2개의 동의어 코돈은 GAA 및 GAG이며, 리신을 코딩하는 2개의 동의어 코돈은 AAA 및 AAG이다.
GLP-2 펩티바디의 오픈 리딩 프레임을 코딩하는 핵산은 표준 코돈 최적화 방법을 사용하여 변형될 수 있다. 코돈 최적화를 위한 다양한 상업적 알고리즘이 이용가능하며 본 발명을 실행하는데 사용될 수 있다. 전형적으로, 코돈 최적화는 코딩된 아미노산 서열을 변경하지 않는다.
뉴클레오티드 변화는 GLP-2 펩티바디를 발현하도록 선택된 특별한 이종 세포에서 발견되는 내인성 코돈 사용빈도에 동의하기 위해 오픈 리딩 프레임 내에 있는 동의어 코돈을 변경할 수 있다. 대안적으로, 또는 부가적으로, 뉴클레오티드 변화는 이종 숙주 세포에 존재하는 내인성 핵산 서열에서 발견되는 오픈 리딩 프레임의 평균 G+C 함량과 더 잘 매칭되도록 오픈 리딩 프레임 내의 G+C 함량을 변경할 수 있다. 뉴클레오티드 변화는 또한 GLP-2 펩티바디 서열 내에서 발견되는 내부 조절 또는 구조적 부위 또는 폴리모노뉴클레오티드 영역을 변경할 수 있다. 따라서, 원핵 세포, 효모 세포, 곤충 세포 및 포유동물 세포에서의 GLP-2 펩티바디의 증가된 발현을 제공하는 핵산 서열을 포함하나 이에 제한되지 않는 다양한 변형 또는 최적화된 뉴클레오티드 서열이 구상된다.
본원에 표시된 바와 같이, 폴리뉴클레오티드는 부가의 서열, 예컨대 스플라이싱 및 폴리아데닐화 신호를 포함한, 전사, mRNA 프로세싱에서 일정 역할을 하는 전사된 비-번역 서열 (예를 들어, 리보솜 결합 및 안정성의 mRNA)과 같은 비-코딩 5' 및 3' 서열을 포함하나 이에 제한되지는 않는 부가의 비-코딩 서열과 함께, 전술한 부가의 코딩 서열, 예컨대 적어도 하나의 인트론이 있거나 또는 없는, 적어도 하나의 신호 리더 또는 융합 펩티드의 코딩 서열; 부가의 기능성을 제공하는 것과 같은 부가의 아미노산을 코딩하는 부가의 코딩 서열을 추가로 포함할 수 있다. 따라서, GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체를 코딩하는 서열은 GLP-2 펩티바디 단편 또는 부분을 포함하는 융합된 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체의 정제를 용이하게 하는 펩티드를 코딩하는 서열과 같은 마커 서열과 융합될 수 있다.
핵산은 본 발명의 폴리뉴클레오티드 이외에 서열을 추가로 포함할 수 있다. 예를 들어, 하나 이상의 엔도뉴클레아제 제한 부위를 포함하는 다중 클로닝 부위는 폴리뉴클레오티드의 단리를 돕기 위해 핵산 내로 삽입될 수 있다. 또한, 번역가능한 서열은 본 발명의 번역된 폴리뉴클레오티드의 단리를 돕기 위해 삽입될 수 있다. 예를 들어, 헥사-히스티딘 마커 서열은 본 발명의 단백질을 정제하는 편리한 수단을 제공한다. 코딩 서열을 제외한 본 발명의 핵산은 임의로 본 발명의 폴리뉴클레오티드의 클로닝 및/또는 발현을 위한 벡터, 어댑터 또는 링커이다.
트랜스진의 코딩 영역은 특별한 세포 유형에 대한 코돈 사용빈도를 최적화하기 위해 하나 이상의 침묵 돌연변이를 포함할 수 있다. 예를 들어, GLP-2 펩티바디의 코돈은 척추 동물 세포에서의 발현을 위해 최적화될 수 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디의 코돈은 포유동물 세포에서의 발현을 위해 최적화될 수 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디의 코돈은 인간 세포에서의 발현을 위해 최적화될 수 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디의 코돈은 CHO 세포에서의 발현을 위해 최적화될 수 있다.
본 출원에 기재된 바와 같은 GLP-2 펩티바디를 코딩하는 핵산 서열은 숙주 세포에서의 증식 또는 발현을 위해 적합한 벡터로 분자적으로 클로닝 (삽입)될 수 있다. 예를 들어, 숙주 세포로부터 GLP-2 펩티바디를 분비하는데 유효한 신호 펩티드를 포함하는 GLP-2 펩티바디 서열은 서열식별번호: 2, 5, 8, 및 11로부터 선택된 서열과 같은 적합한 벡터에 삽입된다. 원핵 발현 벡터; 효모 발현 벡터; 곤충 발현 벡터 및 포유동물 발현 벡터를 포함하나 이에 제한되지 않는 광범위한 발현 벡터가 본 발명을 실행하는데 사용될 수 있다. 본 발명에 적합한 예시적인 벡터는 바이러스 기반 벡터 (예를 들어, AAV 기반 벡터, 레트로바이러스 기반 벡터, 플라스미드 기반 벡터)를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디를 코딩하는 핵산 서열은 적합한 벡터 내로 삽입될 수 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디를 코딩하는 핵산 서열은 적합한 벡터 내로 삽입될 수 있다. 전형적으로, GLP-2 펩티바디를 코딩하는 핵산은 다양한 조절 서열 또는 요소에 작동가능하게 연결된다.
다양한 조절 서열 또는 요소가 본 발명에 적합한 발현 벡터에 혼입될 수 있다. 예시적인 조절 서열 또는 요소는 프로모터, 인핸서, 리프레서 또는 억제인자, 5' 비번역 (또는 비-코딩) 서열, 인트론, 3' 비번역 (또는 비-코딩) 서열을 포함하나 이에 제한되지는 않는다.
본원에 사용된 바와 같은, "프로모터" 또는 "프로모터 서열"은 세포에서 RNA 폴리머라제와 결합할 수 있고 (예를 들어, 직접적으로 또는 다른 프로모터 결합된 단백질 또는 물질을 통함), 코딩 서열의 전사를 개시할 수 있는 DNA 조절 영역이다. 프로모터 서열은 일반적으로, 전사 개시 부위에 의해 그의 3' 말단에 결합되고, 임의의 수준에서 전사를 개시하는데 필요한 최소 수의 염기 또는 요소를 포함하도록 상류 (5' 방향)로 연장된다. 프로모터는 인핸서 및 리프레서 서열을 포함한 발현 제어 서열 또는 발현될 핵산과 작동가능하게 연합되거나 또는 이에 작동가능하게 연결될 수 있다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 유도성일 수 있다. 일부 실시양태에서, 유도성 프로모터는 단방향 또는 양방향일 수 있다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 구성적 프로모터일 수 있다. 일부 실시양태에서, 프로모터는 하이브리드 프로모터일 수 있으며, 여기서 전사 조절 영역을 함유하는 서열은 하나의 공급원으로부터 수득되고 전사 개시 영역을 함유하는 서열은 제2 공급원으로부터 수득된다. 제어 요소를 트랜스진 내의 코딩 서열에 연결하기 위한 시스템은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다 (일반 분자 생물학적 및 재조합 DNA 기술은 문헌 [Sambrook, Fritsch, and Maniatis, Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N. Y., 1989]에 기재되어 있으며, 상기 문헌은 본원에 참조로 포함됨). 다양한 성장 및 유도 조건 하에서 다양한 숙주 세포에서의 발현을 위해 트랜스진을 삽입하기에 적합한 상업적 벡터가 또한 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다.
일부 실시양태에서, 포유동물 숙주 세포에서의 트랜스진의 발현을 제어하기 위한 특이적 프로모터, 예컨대 SRa-프로모터 (문헌 [Takebe et al., Molec. and Cell. Bio. 8:466-472 (1988)]), 인간 CMV 극초기 프로모터 (문헌 [Boshart et al., Cell 41:521-530 (1985); Foecking et al., Gene 45:101-105 (1986)]), 인간 CMV 프로모터, 인간 CMV5 프로모터, 뮤린 CMV 극초기 프로모터, EF1-α-프로모터, 간 특이적 발현을 위한 하이브리드 CMV 프로모터 (예를 들어, 인간 α-1-항트립신 (HAT) 또는 알부민 (HAL) 프로모터 중 하나의 전사 프로모터 요소를 CMV 극초기 프로모터와 접합시킴으로써 제조됨), 또는 간암 특이적 발현을 위한 프로모터 [예를 들어, 여기서 인간 알부민 (HAL; 약 1000 bp) 또는 인간 α-1-항트립신 (HAT, 약 2000 bp) 중 하나의 전사 프로모터 요소가 인간 α-1-마이크로글로불린 및 비쿠닌 전구체 유전자 (AMBP)의 145개 길이의 인핸서 요소와 조합된다; HAL-AMBP 및 HAT-AMBP]; SV40 조기 프로모터 영역 (문헌 [Benoist et al., Nature 290:304-310 (1981)]), 오르기이아 슈도트수가타(Orgyia pseudotsugata) 극초기 프로모터, 헤르페스 티미딘 키나제 프로모터 (문헌 [Wagner et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 78:1441-1445 (1981)]); 또는 메탈로티오네인 유전자의 조절 서열 (문헌 [Brinster et al., Nature 296:39-42 (1982)])이나, 이에 제한되지는 않는 프로모터가 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 포유동물 프로모터는 구성적 프로모터, 예컨대 히포크산틴 포스포리보실 트랜스퍼라제 (HPTR) 프로모터, 아데노신 데아미나제 프로모터, 피루베이트 키나제 프로모터, 베타-액틴 프로모터이나, 이에 제한되지는 않는 프로모터뿐만 아니라 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 다른 구성적 프로모터이다.
일부 실시양태에서, 원핵 숙주 세포에서의 트랜스진의 발현을 제어하기 위한 특이적 프로모터, 예컨대 β-락타마제 프로모터 (문헌 [Villa-Komaroff et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 75:3727-3731 (1978)]); tac 프로모터 (문헌 [DeBoer et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 80:21-25 (1983)]); T7 프로모터, T3 프로모터, M13 프로모터 또는 M16 프로모터이나, 이에 제한되지는 않는 프로모터; 효모 숙주 세포에서의 트랜스진의 발현을 제어하기 위한 특이적 프로모터, 예컨대 GAL1, GAL4 또는 GAL10 프로모터, ADH (알콜 데히드로게나제) 프로모터, PGK (포스포글리세롤 키나제) 프로모터, 알칼리성 포스파타제 프로모터, 글리세르알데히드-3-포스페이트 데히드로게나제 III (TDH3) 프로모터, 글리세르알데히드-3-포스페이트 데히드로게나제 II (TDH2) 프로모터, 글리세르알데히드-3-포스페이트 데히드로게나제 I (TDH1) 프로모터, 피루베이트 키나제 (PYK), 에놀라제 (ENO), 또는 트리오스 포스페이트 이소머라제 (TPI)이나, 이에 제한되지는 않는 프로모터가 사용될 수 있다.
일부 실시양태에서, 프로모터는 바이러스 프로모터일 수 있으며, 이들 중 다수는 포유동물 세포를 포함한 여러 숙주 세포 유형에서의 트랜스진의 발현을 조절할 수 있다. 진핵 세포에서 코딩 서열의 구성적 발현을 구동하는 것으로 밝혀진 바이러스 프로모터는, 예를 들어, 원숭이 바이러스 프로모터, 단순 포진 바이러스 프로모터, 유두종 바이러스 프로모터, 아데노바이러스 프로모터, 인간 면역 결핍 바이러스 (HIV) 프로모터, 라우스 육종 바이러스 프로모터, 시토메갈로바이러스 (CMV) 프로모터, 몰로니 뮤린 백혈병 바이러스 및 다른 레트로바이러스의 긴 말단 반복부 (LTR), 단순 포진 바이러스의 티미딘 키나제 프로모터뿐만 아니라 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 다른 바이러스 프로모터를 포함한다.
일부 실시양태에서, 발현 벡터의 유전자 제어 요소는 또한, 전사 및 번역 각각의 개시와 관련된 5' 비-전사 및 5' 비-번역 서열, 예컨대 TATA 박스, 캡핑 서열, CAAT 서열, 코작(Kozak) 서열 등을 포함할 수 있다. 인핸서 요소는 발현될 폴리펩티드 또는 단백질의 발현 수준을 증가시키기 위해 임의로 사용될 수 있다. 포유동물 세포에서 기능하는 것으로 밝혀진 인핸서 요소의 예는 문헌 [Dijkema et al., EMBO J. (1985) 4: 761]에 기재된 바와 같은 SV40 조기 유전자 인핸서, 및 문헌 [Gorman et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1982b) 79:6777]에 기재된 바와 같은 라우스 육종 바이러스 (RSV) 및 문헌 [Boshart et al., Cell (1985) 41:521]에 기재된 바와 같은 인간 시토메갈로바이러스의 긴 말단 반복부 (LTR)로부터 유래된 인핸서/프로모터를 포함한다. 발현 벡터의 유전적 제어 요소는 또한, 전사 및 번역 각각의 종결과 관련된 3' 비-전사 및 3' 비-번역 서열, 예컨대 프로모터로부터 전사된 mRNA의 3' 말단의 안정화 및 프로세싱을 위한 폴리아데닐화 (폴리A) 신호를 포함할 것이다. 예시적인 폴리A 신호는, 예를 들어, 토끼 베타 글로빈 폴리A 신호, 소 성장 호르몬 폴리A 신호, 닭 베타 글로빈 종결인자/폴리A 신호, 및 SV40 후기 폴리A 영역을 포함한다.
발현 벡터는 바람직하지만 임의로, 적어도 하나의 선택가능한 마커를 포함할 것이다. 일부 실시양태에서, 선택가능한 마커는 세포독성 화학물질 및/또는 약물의 존재하에 성장할 때 생육력을 유지할 수 있는 능력을 숙주 세포에 부여하기 위해 하나 이상의 유전적 조절 요소에 작동가능하게 연결된 내성 유전자를 코딩하는 핵산 서열이다. 일부 실시양태에서, 숙주 세포 내에서의 발현 벡터의 보유를 유지하기 위해 선택가능한 작용제를 사용할 수 있다. 일부 실시양태에서, 선택가능한 작용제는 발현 벡터 내에서의 트랜스진 서열의 변형 (즉, 메틸화) 및/또는 침묵을 방지하기 위해 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 숙주 세포 내에서의 벡터의 에피솜 발현을 유지하기 위해 선택가능한 작용제가 사용된다. 일부 실시양태에서, 선택가능한 작용제는 숙주 세포 게놈으로의 트랜스진 서열의 안정한 통합을 촉진하기 위해 사용된다. 일부 실시양태에서, 작용제 및/또는 내성 유전자는 진핵 숙주 세포의 경우에는 메토트렉세이트 (MTX), 디히드로폴레이트 리덕타제 (DHFR, 미국 특허 번호 4,399,216; 4,634,665; 4,656,134; 4,956,288; 5,149,636; 5,179,017), 암피실린, 네오마이신 (G418), 제오마이신, 미코페놀산, 또는 글루타민 신테타제 (GS, 미국 특허 번호 5,122,464; 5,770,359; 5,827,739); 원핵 숙주 세포의 경우에는 테트라시클린, 암피실린, 카나마이신 또는 클로람페니콜; 및 효모 숙주 세포의 경우에는 URA3, LEU2, HIS3, LYS2, HIS4, ADE8, CUP1 또는 TRP1을 포함할 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.
발현 벡터는 숙주 세포로 형질감염, 형질전환 또는 형질도입될 수 있다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "형질감염", "형질전환" 및 "형질도입"은 모두 외인성 핵산 서열을 숙주 세포 내로 도입하는 것을 지칭한다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디를 코딩하는 핵산 서열을 함유하는 발현 벡터는 동시에 숙주 세포 내로 형질감염, 형질전환 또는 형질도입된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디를 코딩하는 핵산 서열을 함유하는 발현 벡터는 순차적으로 숙주 세포로 형질감염, 형질전환 또는 형질도입된다.
관련 기술분야에 널리 공지된 형질전환, 형질감염 및 형질도입 방법의 예는 리포솜 전달, 즉 문헌 [Hawley-Nelson, Focus 15:73 (1193)]의 리포펙타민(Lipofectamine)™ [깁코(Gibco) BRL] 방법, 전기천공, 문헌 [Graham and van der Erb, Virology, 52:456-457 (1978)]의 CaPO4 전달 방법, DEAE-덱스트란 매개된 전달, 미세주입, 바이오리스틱(biolistic) 입자 전달, 폴리브렌 매개된 전달, 양이온성 매개된 지질 전달, 형질도입, 및 바이러스성 감염, 예컨대, 예를 들어, 레트로바이러스, 렌티바이러스, 아데노바이러스, 아데노 관련 바이러스 및 바쿨로바이러스 (곤충 세포)를 포함한다.
일단 세포 내부에 도입되면, 발현 벡터가 게놈에 안정적으로 통합되거나 염색체 외 구축물로서 존재할 수 있다. 벡터는 또한 증폭될 수 있고 다중 카피가 존재하거나 또는 게놈에 통합될 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 세포는 GLP-2 펩티바디를 코딩하는 핵산의 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20개 또는 그 초과의 카피를 함유할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 세포는 GLP-2 펩티바디를 코딩하는 핵산의 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20개 또는 그 초과의 카피를 함유할 수 있다.
숙주 세포
또 다른 측면에서, 본원에 기재된 폴리뉴클레오티드, 예를 들어, 숙주 세포에서의 GLP-2 펩티바디의 발현을 허용하는 것을 포함하는 숙주 세포가 제공된다. 숙주 세포는 차이니즈 햄스터 난소 세포일 수 있다. 대안적으로, 숙주 세포는 포유동물 세포일 수 있으며, 비-제한적인 예는 BALB/c 마우스 골수종 라인 (NSO/l, ECACC 번호: 85110503); 인간 망막모세포 [PER.C6, 크루셀 (CruCell; 네덜란드 라이덴)]; SV40에 의해 형질전환된 원숭이 신장 CV1 라인 (COS-7, ATCC CRL 1651); 인간 배아 신장 라인 (현탁 배양에서의 성장을 위해 서브클로닝된 HEK293 또는 293 세포, 문헌 [Graham et al., J. Gen Virol., 36:59, 1977]); 인간 섬유육종 세포주 (예를 들어, HT1080); 어린 햄스터 신장 세포 (BHK21, ATCC CCL 10); CHO EBNA (문헌 [Daramola O. et al., Biotechnol. Prog., 2014, 30(1):132-41]) 및 CHO GS (문헌 [Fan L. et al., Biotechnol. Bioeng. 2012, 109(4):1007-15])을 포함한 차이니즈 햄스터 난소 세포 (CHO, 문헌 [Urlaub and Chasin, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77:4216, 1980]); 마우스 세르톨리 세포 (TM4, 문헌 [Mather, Biol. Reprod., 23:243-251, 1980]); 원숭이 신장 세포 (CV1 ATCC CCL 70); 아프리카 그린 원숭이 신장 세포 (VERO-76, ATCC CRL-1 587); 인간 자궁경부 암종 세포 (HeLa, ATCC CCL 2); 개 신장 세포 (MDCK, ATCC CCL 34); 버팔로 래트 간 세포 (BRL 3A, ATCC CRL 1442); 인간 폐 세포 (W138, ATCC CCL 75); 인간 간 세포 (Hep G2, HB 8065); 마우스 유방 종양 (MMT 060562, ATCC CCL51); TRI 세포 (문헌 [Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci., 383:44-68, 1982]); MRC 5 세포; FS4 세포; 및 인간 간암 라인 (Hep G2)을 포함한다.
폴리뉴클레오티드는 발현 플라스미드 내에 있을 수 있다. 발현 플라스미드는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 임의의 수의 복제 기점을 가질 수 있다. 폴리뉴클레오티드 또는 발현 플라스미드는 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 공지된 임의의 수의 방식에 의해 숙주 세포 내로 도입될 수 있다. 예를 들어, 유동 전기천공 시스템, 예컨대 맥스사이트(MaxCyte) GT®, 맥스사이트 VLX® 또는 맥스사이트 STX® 형질감염 시스템을 사용하여 폴리뉴클레오티드 또는 발현 플라스미드를 숙주 세포 내로 도입할 수 있다.
다양한 실시양태에서, 숙주 세포는 폴리뉴클레오티드를 발현한다. 숙주 세포는 유가식 세포 배양 규모 또는 다른 대규모에 충분한 수준으로 GLP-2 펩티바디를 발현할 수 있다. 대규모로 재조합 GLP-2 펩티바디를 생산하는 대체 방법은 롤러 병 배양 및 바이오리액터 배치 배양을 포함한다. 일부 실시양태에서, 재조합 GLP-2 펩티바디 단백질은 현탁 배양된 세포에 의해 생산된다. 일부 실시양태에서, 재조합 GLP-2 펩티바디 단백질은 부착 세포에 의해 생산된다.
생산
재조합 GLP-2 펩티바디는 임의의 이용가능한 수단에 의해 생산될 수 있다. 예를 들어, 재조합 GLP-2 펩티바디는 재조합 GLP-2 펩티바디-코딩 핵산을 발현하도록 조작된 숙주 세포 시스템을 활용함으로써 재조합적으로 생산될 수 있다. 대안적으로, 또는 부가적으로, 재조합 GLP-2 펩티바디는 내인성 유전자를 활성화함으로써 생산될 수 있다. 대안적으로, 또는 부가적으로, 재조합 GLP-2 펩티바디는 화학적 합성에 의해 부분적으로 또는 완전히 제조될 수 있다. 대안적으로, 재조합 GLP-2 펩티바디는 mRNA 치료제에 의해 생체내에서 생산될 수 있다.
일부 실시양태에서, 재조합 GLP-2 펩티바디는 포유동물 세포에서 생산된다. 본 발명에 따라 사용될 수 있는 포유동물 세포의 비-제한적인 예는 BALB/c 마우스 골수종 라인 (NSO/1, ECACC 번호: 85110503); 인간 망막모세포 [PER.C6, 크루셀 (네덜란드 라이덴)]; SV40에 의해 형질전환된 원숭이 신장 CV1 라인 (COS-7, ATCC CRL 1651); 인간 배아 신장 라인 (현탁 배양에서의 성장을 위해 서브클로닝된 HEK293 또는 293 세포, 문헌 [Graham et al., J. Gen Virol., 36:59, 1977]); 인간 섬유육종 세포주 (예를 들어, HT1080); 어린 햄스터 신장 세포 (BHK21, ATCC CCL 10); CHO EBNA (문헌 [Daramola O. et al., Biotechnol. Prog., 2014, 30(1):132-41]) 및 CHO GS (문헌 [Fan L. et al., Biotechnol. Bioeng. 2012, 109(4):1007-15])을 포함한 차이니즈 햄스터 난소 세포 +/-DHFR (CHO, 문헌 [Urlaub and Chasin, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 77:4216, 1980]); 마우스 세르톨리 세포 (TM4, 문헌 [Mather, Biol. Reprod., 23:243-251, 1980]); 원숭이 신장 세포 (CV1 ATCC CCL 70); 아프리카 그린 원숭이 신장 세포 (VERO-76, ATCC CRL-1 587); 인간 자궁경부 암종 세포 (HeLa, ATCC CCL 2); 개 신장 세포 (MDCK, ATCC CCL 34); 버팔로 래트 간 세포 (BRL 3A, ATCC CRL 1442); 인간 폐 세포 (W138, ATCC CCL 75); 인간 간 세포 (Hep G2, HB 8065); 마우스 유방 종양 (MMT 060562, ATCC CCL51); TRI 세포 (문헌 [Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci., 383:44-68, 1982]); MRC 5 세포; FS4 세포; 및 인간 간암 라인 (Hep G2)을 포함한다.
일부 실시양태에서, 재조합 GLP-2 펩티바디는 인간 세포로부터 생산된다. 일부 실시양태에서, 재조합 GLP-2 펩티바디는 CHO 세포 또는 HT1080 세포로부터 생산된다.
특정 실시양태에서, 숙주 세포는 세포 배양을 위해 선택된 특별한 조건 하에서 특정의 바람직한 속성 또는 성장에 기초하여 세포주를 생성하기 위해 선택된다. 이러한 속성은 확립된 라인 (즉, 특징규명된 상업적으로 입수가능한 세포주)의 공지된 특징 및/또는 형질에 기초하여 또는 경험적 평가를 통해 확인될 수 있다는 것을 관련 기술분야의 통상의 기술자는 인지할 것이다. 일부 실시양태에서, 세포의 피더 층에서 성장할 수 있는 능력에 대해 세포주를 선택할 수 있다. 일부 실시양태에서, 현탁액에서 성장할 수 있는 능력에 대해 세포주를 선택할 수 있다. 일부 실시양태에서, 세포의 부착성 단일 층으로서 성장할 수 있는 능력에 대해 세포주를 선택할 수 있다. 일부 실시양태에서, 이러한 세포는 임의의 조직 배양 용기 또는 적합한 접착 기질로 처리된 임의의 용기와 함께 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 적합한 접착 기질은 콜라겐 (예를 들어, 콜라겐 I, II, II 또는 IV), 젤라틴, 피브로넥틴, 라미닌, 비트로넥틴, 피브리노겐, BD 매트리겔(BD Matrigel)™, 기저막 매트릭스, 데르마탄 술페이트 프로테오글리칸, 폴리-D-리신 및/또는 그의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 일부 실시양태에서, 부착성 숙주 세포는 현탁액에서 성장하도록 특이적 성장 조건 하에서 선택 및 변형될 수 있다. 부착 성 세포를 변형시켜 현탁액에서 성장시키는 이러한 방법은 관련 기술분야에 공지되어 있다. 예를 들어, 세포는 시간이 지남에 따라 성장 배지로부터 동물 혈청을 점차적으로 제거함으로써 현탁 배양에서 성장하도록 조정될 수 있다.
전형적으로, 재조합 GLP-2 펩티바디를 발현하도록 조작되는 세포는 본원에 기재된 재조합 GLP-2 펩티바디를 코딩하는 트랜스진을 포함할 수 있다. 재조합 GLP-2 펩티바디를 코딩하는 핵산은 조절 서열, 유전자 제어 서열, 프로모터, 비-코딩 서열 및/또는 재조합 GLP-2 펩티바디를 발현하기 위한 다른 적절한 서열을 함유할 수 있다는 것을 인식해야 한다. 전형적으로, 코딩 영역은 이들 핵산 성분 중 하나 이상과 작동가능하게 연결된다.
일부 실시양태에서, 재조합 GLP-2 펩티바디는 mRNA 치료제에 의해 생체내에서 생산된다. GLP-2 펩티바디를 코딩하는 mRNA를 제조하여 GLP-2 펩티바디를 필요로하는 환자에게 투여한다. mRNA는 서열식별번호: 3, 6, 9, 및 12의 DNA 서열에 상응하는 서열을 포함할 수 있다. 다양한 투여 경로, 예컨대 주사, 폐에서의 분무 및 피부 아래 전기천공이 사용될 수 있다. mRNA는 바이러스 벡터 또는 비-바이러스 벡터에 캡슐화될 수 있다. 예시적인 비-바이러스 벡터는 리포솜, 양이온성 중합체 및 큐보솜을 포함한다.
회수 및 정제
세포로부터 GLP-2 펩티바디를 정제하기 위한 다양한 수단이 사용될 수 있다. 본원에 기재된 다양한 방법에 따라 생산된 GLP-2 펩티바디를 정제 또는 단리하기 위해 다양한 방법이 사용될 수 있다. 일부 실시양태에서, 발현된 효소는 배지로 분비되므로, 예를 들어 정제 프로세스의 첫 번째 단계로서 원심분리 또는 여과에 의해 세포 및 다른 고형물이 제거될 수 있다. 대안적으로, 또는 부가적으로, 발현된 효소는 숙주 세포의 표면과 결합된다. 이러한 실시양태에서, 폴리펩티드 또는 단백질을 발현하는 숙주 세포는 정제를 위해 용해된다. 포유동물 숙주 세포의 용해는 유리 비드에 의한 물리적 파괴 및 높은 pH 조건에 대한 노출을 포함하여 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 널리 공지된 임의의 수의 수단에 의해 달성될 수 있다.
GLP-2 펩티바디는 크로마토그래피 (예를 들어, 이온 교환, 친화성, 크기 배제 및 히드록시아파타이트 크로마토그래피), 겔 여과, 원심분리 또는 차등 용해도, 에탄올 침전을 포함하나 이에 제한되지는 않는 표준 방법에 의해 또는 단백질의 정제를 위한 임의의 다른 이용가능한 기술에 의해 단리 및 정제될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Scopes, Protein Purification Principles and Practice 2nd Edition, Springer-Verlag, New York, 1987; Higgins, S. J. and Hames, B. D. (eds.), Protein Expression: A Practical Approach, Oxford Univ Press, 1999; and Deutscher, M. P., Simon, M. I., Abelson, J. N. (eds.), Guide to Protein Purification: Methods in Enzymology (Methods in Enzymology Series, Vol 182), Academic Press, 1997]을 참조하며, 이들 모두는 본원에 참조로 포함된다. 특히 면역 친 화성 크로마토그래피의 경우, 단백질에 대항하여 생성되고 고정 지지체에 부착된 항체를 포함하는 친화성 컬럼과 결합함으로써 단백질을 단리할 수 있다. 대안적으로, 친화성 태그, 예컨대 인플루엔자 코트 서열, 폴리-히스티딘 또는 글루타티온-S-트랜스퍼라제는 적절한 친화성 컬럼을 통과하여 쉽게 정제할 수 있도록 표준 재조합 기술에 의해 단백질에 부착될 수 있다. 프로테아제 억제제, 예컨대 페닐 메틸 술포닐 플루오라이드 (PMSF), 류펩틴, 펩스타틴 또는 아프로티닌은 정제 프로세스 동안 폴리펩티드 또는 단백질의 분해를 감소시키거나 제거하기 위해 임의의 또는 모든 단계에서 부가될 수 있다. 프로테아제 억제제는 발현된 폴리펩티드 또는 단백질을 단리하고 정제하기 위해 세포를 용해시켜야만 하는 경우에 특히 바람직하다.
GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체는 단백질 A 정제, 황산 암모늄 또는 에탄올 침전, 산 추출, 음이온 또는 양이온 교환 크로마토그래피, 포스포셀룰로스 크로마토그래피, 소수성 상호작용 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피, 혼합 모드 크로마토그래피 [예를 들어, MEP 하이퍼셀(Hypercel)™], 히드록실아파타이트 크로마토그래피 및 렉틴 크로마토그래피를 포함하나 이에 제한되지는 않는 널리 공지된 방법에 의해 재조합 세포 배양물로부터 회수 및 정제될 수 있다. 고 성능 액체 크로마토그래피 ("HPLC")가 또한 정제를 위해 이용될 수 있. 예를 들어, 문헌 [Colligan, Current Protocols in Immunology, or Current Protocols in Protein Science, John Wiley & Sons, NY, N.Y. (1997-2003)]을 참조한다.
본 발명의 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체는 자연적으로 정제된 산물, 화학적 합성 절차의 산물, 및 예를 들어, 효모, 고등 식물, 곤충 및 포유동물 세포를 포함한 진핵 숙주로부터 재조합 기술에 의해 생산된 산물을 포함한다. 재조합 생산 절차에 이용된 숙주에 따라, 본 발명의 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체는 글리코실화될 수 있거나 또는 비-글리코실화될 수 있으며, 글리코실화되는 것이 바람직하다.
제형
일부 실시양태에서, 본원에 기재된 제약 조성물은 담체를 추가로 포함한다. 적합한 허용되는 담체는 물, 염 용액 (예를 들어, NaCl), 염수, 완충 염수, 알콜, 글리세롤, 에탄올, 아라비아 검, 식물성 오일, 벤질 알콜, 폴리에틸렌 글리콜, 젤라틴, 탄수화물, 예컨대 락토스, 아밀로스 또는 전분, 당, 예컨대 만니톨, 수크로스 등, 덱스트로스, 스테아르산마그네슘, 활석, 규산, 점성 파라핀, 향유, 지방산 에스테르, 히드록시메틸셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈 등, 및 그의 조합을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 제약 제제는 원하는 경우, 활성 화합물과 유해하게 반응하지 않거나 또는 그의 활성을 방해하지 않는 보조제 (예를 들어, 희석제, 완충제, 친유성 용매, 보존제, 아주반트, 윤활제, 보존제, 안정화제, 습윤제, 유화제, 삼투압에 영향을 주기 위한 염, 완충제, 착색제, 향미제 및/또는 방향족 물질 등)와 혼합될 수 있다. 일부 실시양태에서, 정맥내 투여에 적합한 수용성 담체가 사용된다.
제약상 허용되는 보조제가 바람직하다. 이러한 멸균 용액의 비-제한적인 예 및 제조 방법은 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다 (예컨대, 문헌 [Gennaro, Ed., Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Co. (Easton, Pa.) 1990]에 공지되지만, 이에 제한되지 않음). 관련 기술분야에 널리 공지된 바와 같거나 본원에 기재된 바와 같은 GLP-2 펩티바디 조성물의 투여 방식, 용해도 및/또는 안정성에 적합한 제약상 허용되는 담체가 일상적으로 선택될 수 있다. 예를 들어, 약산성 또는 생리적 pH의 멸균 염수 및 인산염 완충 염수를 사용할 수 있다. pH 완충제는 인산염, 시트레이트, 아세테이트, 트리스(히드록시메틸)아미노메탄 (TRIS), N-트리스(히드록시메틸)메틸-3-아미노프로판술폰산 (TAPS), 중탄산암모늄, 디에탄올아민, 히스티딘 (바람직한 완충제임), 아르기닌, 리신 또는 아세테이트 또는 그의 혼합물일 수 있다. 바람직한 완충제 범위는 pH 4-8, pH 6.5-8, 보다 바람직하게 pH 7-7.5이다. 보존제, 예컨대 파라, 메타 및 오르토-크레졸, 메틸- 및 프로필-파라벤, 페놀, 벤질 알콜, 벤조산 나트륨, 벤조산, 벤질-벤조에이트, 소르브산, 프로판산, p-히드록시벤조산의 에스테르가 제약 조성물에 제공될 수 있다. 산화, 탈아미드화, 이성질화, 라세미화, 고리화, 펩티드 가수분해를 방지하는 안정화제, 예컨대, 예를 들어, 아스코르브산, 메티오닌, 트립토판, EDTA, 아스파라긴, 리신, 아르기닌, 글루타민 및 글리신이 제약 조성물에 제공될 수 있다. 응집, 세동 및 침전을 방지하는 안정화제, 예컨대 소듐 도데실 술페이트, 폴리에틸렌 글리콜, 카르복시메틸 셀룰로스, 시클로덱스트린이 제약 조성물에 제공될 수 있다. 가용화 또는 응집 방지를 위한 유기 개질제, 예컨대 에탄올, 아세트산 또는 아세테이트 및 그의 염이 제약 조성물에 제공될 수 있다. 등장성 메이커, 예컨대 염, 예를 들어, 염화나트륨 또는 가장 바람직한 탄수화물, 예를 들어, 덱스트로스, 만니톨, 락토스, 트레할로스, 수크로스 또는 그의 혼합물이 제약 조성물에 제공될 수 있다.
본 조성물에 유용한 제약 부형제 및 첨가제는 단백질, 펩티드, 아미노산, 지질 및 탄수화물 (예를 들어, 모노사카라이드, 디-, 트리-, 테트라 및 올리고사카라이드를 포함한 당; 유도체화된 당, 예컨대 알디톨, 알돈산, 에스테르화된 당 등; 및 폴리사카라이드 또는 당 중합체)를 포함하나 이에 제한되지 않으며, 이들은 단독으로 존재하거나 또는 조합하여 존재할 수 있으며, 단독으로 또는 조합하여 1-99.99 중량% 또는 용적%로 포함된다. 예시적인 단백질 부형제는 혈청 알부민, 예컨대 인간 혈청 알부민 (HSA), 재조합 인간 알부민 (rHA), 젤라틴, 카제인 등을 포함한다. 완충 능력에서도 기능할 수 있는 대표적인 아미노산/GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체 성분은 알라닌, 글리신, 아르기닌, 베타인, 히스티딘, 글루탐산, 아스파르트산, 시스테인, 리신, 류신, 이소류신, 발린, 메티오닌, 페닐알라닌, 아스파르탐 등을 포함한다. 하나의 바람직한 아미노산이 글리신이다.
탄수화물 부형제, 예를 들어, 모노사카라이드, 예컨대 프룩토스, 말토스, 갈락토스, 글루코스, D-만노스, 소르보스 등; 디사카라이드, 예컨대 락토스, 수크로스, 트레할로스, 셀로비오스 등; 폴리사카라이드, 예컨대 라피노스, 멜레지토스, 말토덱스트린, 덱스트란, 전분 등; 및 알디톨, 예컨대 만니톨, 자일리톨, 말티톨, 락티톨, 자일리톨, 소르비톨 (글루시톨), 미오이노시톨 등이 사용될 수 있다.
GLP-2 펩티바디 조성물은 또한 완충제 또는 pH 조정제를 포함할 수 있으며; 전형적으로, 완충제는 유기 산 또는 염기로부터 제조된 염이다. 예시적인 완충제는 유기 산 염, 예컨대 시트르산, 아스코르브산, 글루콘산, 탄산, 타르타르산, 숙신산, 아세트산 또는 프탈산의 염; 트리스, 트로메타민 염산염 또는 인산염 완충제를 포함한다.
부가적으로, 본 발명의 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체 조성물은 중합체성 부형제/첨가제, 예컨대 폴리비닐피롤리돈, 피콜 (중합체성 당), 덱스트레이트 (예를 들어, 시클로덱스트린, 예컨대 2-히드록시프로필-β-시클로덱스트린), 폴리에틸렌 글리콜, 향미제, 항미생물제, 감미료, 항산화제, 정전기 방지제, 계면 활성제 (예를 들어, 폴리소르베이트, 예컨대 "트윈(TWEEN) 20" 및 "트윈 80"), 지질 (예를 들어, 인지질, 지방산), 스테로이드 (예를 들어, 콜레스테롤), 및 킬레이트제 (예를 들어, EDTA)를 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 GLP-2 펩티바디 조성물에 사용하기 적합한 이들 및 부가의 공지된 제약 부형제 및/또는 첨가제는, 예를 들어, 문헌 ["Remington: The Science & Practice of Pharmacy", 21st ed., Williams & Williams, (2005), 및 "Physician's Desk Reference", 71st ed., Medical Economics, Montvale, N.J. (2017)] (그의 개시내용은 전적으로 본원에 참조로 포함됨)에 열거된 바와 같이, 관련 기술분야에 공지되어 있다. 바람직한 담체 또는 부형제 물질은 탄수화물 (예를 들어, 사카라이드 및 알디톨) 및 완충제 (예를 들어, 시트레이트) 또는 중합체성 작용제이다.
제약 조성물은 정맥내 또는 피하 주사 또는 주입에 의한 투여에 적합한 액상물로서 제형화될 수 있다. 이러한 액상물은 하나 이상의 용매를 포함할 수 있다. 예시적인 용매는 물; 알콜, 예컨대 에탄올 및 이소프로필 알콜; 식물성 오일; 폴리에틸렌 글리콜; 프로필렌 글리콜; 및 글리세린 또는 그의 혼합 및 조합을 포함하나 이에 제한되지는 않는다. 정맥내 투여에 적합한 수용성 담체를 사용할 수 있다. 예를 들어, 일부 실시양태에서, 정맥내 투여용 조성물은 전형적으로 멸균 등장성 수성 완충액 중의 용액이다. 필요한 경우, 조성물은 또한 주사 부위에서의 통증을 완화하기 위해 가용화제 및 국소 마취제를 포함할 수 있다. 일반적으로, 성분은 활성제의 수량을 표시하는 앰플 또는 사체트와 같은 밀폐된 용기에, 예를 들어, 건조 동결건조된 분말 또는 물이 없는 농축물로서의 단위 투여 형태로 별도로 공급되거나 함께 혼합된다. 조성물이 주입에 의해 투여되어야 하는 경우, 이는 멸균 제약 등급의 물, 염수 또는 덱스트로스/물을 함유하는 주입 병으로 투여될 수 있다. 조성물이 주사에 의해 투여되는 경우, 주사용 멸균 수 또는 염수의 앰플이 제공되어 투여 전에 성분이 혼합될 수 있다.
상기 언급된 바와 같이, 제형은 바람직하게, 염수 또는 선택된 염을 포함하는 적합한 완충액뿐만 아니라 보존제를 함유하는 임의적 보존된 용액 및 제형뿐만 아니라 제약상 허용되는 제형 중에 적어도 하나의 GLP-2 펩티바디 또는 지정된 부분 또는 변이체를 포함하는, 제약 또는 수의학 용도에 적합한 다용도의 보존된 제형을 포함할 수 있다. 보존된 제형은 적어도 하나의 공지된 보존제를 함유하거나, 또는 적어도 하나의 페놀, m-크레졸, p-크레졸, o-크레졸, 클로로크레졸, 벤질 알콜, 아질산페닐제2수은, 페녹시에탄올, 포름알데히드, 클로로부탄올, 염화마그네슘 (예를 들어, 6수화물), 알킬파라벤 (메틸, 에틸, 프로필, 부틸 등), 벤즈알코늄 클로라이드, 벤제토늄 클로라이드, 소듐 데히드로아세테이트 및 티메로살, 또는 수성 희석제 중의 그의 혼합물로 이루어진 군으로부터 임의로 선택된 보존제를 함유한다. 관련 기술분야에 공지된 바와 같은 임의의 적합한 농도 또는 혼합물, 예컨대 0.001-5%, 또는 그 안에 있는 임의의 범위 또는 값, 예컨대 0.001, 0.003, 0.005, 0.009, 0.01, 0.02, 0.03, 0.05, 0.09, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.8, 0.9, 1.0, 1.1, 1.2, 1.3, 1.4, 1.5, 1.6, 1.7, 1.8, 1.9, 2.0, 2.1, 2.2, 2.3, 2.4, 2.5, 2.6, 2.7, 2.8, 2.9, 3.0, 3.1, 3.2, 3.3, 3.4, 3.5, 3.6, 3.7, 3.8, 3.9, 4.0, 4.3, 4.5, 4.6, 4.7, 4.8, 4.9, 또는 그 안에 있는 임의의 범위 또는 값이나, 이에 제한되지 않는 것이 사용될 수 있다. 비-제한적인 예는 보존제가 없는 경우, 및 0.1-2% m-크레졸 (예를 들어, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.9, 1.0%), 0.1-3% 벤질 알콜 (예를 들어, 0.5, 0.9, 1.1, 1.5, 1.9, 2.0, 2.5%), 0.001-0.5% 티메로살 (예를 들어, 0.005, 0.01), 0.001-2.0% 페놀 (예를 들어, 0.05, 0.25, 0.28, 0.5, 0.9, 1.0%), 0.0005-1.0% 알킬파라벤(들) (예를 들어, 0.00075, 0.0009, 0.001, 0.002, 0.005, 0.0075, 0.009, 0.01, 0.02, 0.05, 0.075, 0.09, 0.1, 0.2, 0.3, 0.5, 0.75, 0.9, 1.0%) 등을 포함한다.
GLP-2 펩티바디는 비경구 투여용으로 제형화될 수 있으며 통상의 부형제로서 멸균 수 또는 염수, 폴리알킬렌 글리콜, 예컨대 폴리에틸렌 글리콜, 식물성 기원의 오일, 수소화된 나프탈렌 등을 함유할 수 있다. 주사용 수성 또는 유성 현탁액은 공지된 방법에 따라 적절한 유화제 또는 가습제 및 현탁제를 사용함으로써 제조될 수 있다. 주사용 작용제는 수용액 또는 용매 중의 멸균 주사용 용액 또는 현탁액과 같은 비-독성, 비경구 투여가능한 희석제일 수 있다. 사용가능한 비히클 또는 용매로서, 물, 링거 용액, 등장 염수 등이 허용되고; 통상적인 용매 또는 현탁 용매로서, 멸균 비휘발성 오일이 사용될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 자연 또는 합성 또는 반합성 지방 오일 또는 지방산; 자연 또는 합성 또는 반합성 모노- 또는 디- 또는 트리-글리세리드를 포함한, 임의의 종류의 비휘발성 오일 및 지방산이 사용될 수 있다. 비경구 투여가 관련 기술분야에 공지되어 있으며, 이는 통상적인 주사 수단, 미국 특허 번호 5,851,198에 기재된 바와 같은 가스 압력 무바늘 주사 장치, 및 미국 특허 번호 5,839,446에 기재된 바와 같은 레이저 천공기 장치를 포함하나, 이에 제한되지는 않는다.
제약 조성물은 연장 방출 제형일 수 있다. 제약 조성물은 또한, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7, 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디의 지속 방출, 연장 방출, 지연 방출 또는 저속 방출을 위해 제형화될 수 있다. 제어 방출 및 지속 방출로서 또한 공지된 연장 방출이 주사가능한 제형에 제공될 수 있다. 마이크로스피어, 나노스피어, 임플란트, 데포 및 중합체는 연장 방출 프로파일을 제공하기 위해 본원에 기재된 화합물, 방법 및 제형 중 임의의 것과 조합하여 사용될 수 있다.
예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7, 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 10 내지 100 mg/mL의 농도로 제형화될 수 있다. 농도는 약 10 mg/mL, 약 11 mg/mL, 약 12 mg/mL, 약 13 mg/mL, 약 14 mg/mL, 약 15 mg/mL, 약 16 mg/mL, 약 17 mg/mL, 약 18 mg/mL, 약 19 mg/mL, 약 20 mg/mL, 약 21 mg/mL, 약 22 mg/mL, 약 23 mg/mL, 약 24 mg/mL, 약 25 mg/mL, 약 26 mg/mL, 약 28 mg/mL, 약 30 mg/mL, 약 32 mg/mL, 약 34 mg/mL, 약 36 mg/mL, 약 38 mg/mL, 약 40 mg/mL, 약 42 mg/mL, 약 44 mg/mL, 약 46 mg/mL, 약 48 mg/mL, 약 50 mg/mL, 약 55 mg/mL, 약 60 mg/mL, 약 65 mg/mL, 약 70 mg/mL, 약 75 mg/mL, 약 80 mg/mL, 약 85 mg/mL, 약 90 mg/mL, 약 95 mg/mL, 약 99 mg/mL일 수 있으며, "약"은 언급된 값의 0.5 mg/mL 미만 내지 0.5 mg/mL 초과를 의미한다. 농도는 10 내지 15 mg/mL, 11 내지 16 mg/mL, 12 내지 17 mg/mL, 13 내지 18 mg/mL, 14 내지 19 mg/mL, 15 내지 20 mg/mL, 16 내지 21 mg/mL, 17 내지 22 mg/mL, 18 내지 23 mg/mL, 19 내지 24 mg/mL, 20 내지 25 mg/mL, 25 내지 30 mg/mL, 30 내지 35 mg/mL, 35 내지 40 mg/mL, 40 내지 45 mg/mL, 45 내지 50 mg/mL, 50 내지 55 mg/mL, 55 내지 60 mg/mL, 60 내지 65 mg/mL, 65 내지 70 mg/mL, 70 내지 75 mg/mL, 75 내지 80 mg/mL, 80 내지 85 mg/mL, 85 내지 90 mg/mL, 또는 90 내지 100 mg/mL일 수 있다. 농도는 12 내지 18 mg/mL, 13 내지 17 mg/mL, 14 내지 16 mg/mL 또는 14.5 내지 15.5 mg/mL, 또는 15 mg/mL일 수 있다.
GLP-2 펩티바디를 포함하는 제형 및 조성물은 임의로, 당뇨병 또는 인슐린 대사 관련 약물, 항감염 약물, 심혈관 (CV) 계 약물, 중추 신경계 (CNS) 약물, 자율 신경계 (ANS) 약물, 호흡기 약물, 위장 (GI) 관 약물, 호르몬 약물, 유체 또는 전해질 균형을 위한 약물, 혈액 약물, 항신생물제, 면역조정 약물, 안과, 귀 또는 비강 약물, 국소 약물, 영양 약물 등 중 적어도 하나로부터 선택된 적어도 하나의 화합물 또는 단백질의 유효량을 추가로 포함할 수 있다. 이러한 약물은 본원에 제시된 각각에 대한 제형, 적응증, 투여량 및 투여를 포함하여 관련 기술분야에 널리 공지되어 있다 (예를 들어, 문헌 [Nursing 2001 Handbook of Drugs, 21st edition, Springhouse Corp., Springhouse, Pa., 2001; Health Professional's Drug Guide 2001, ed., Shannon, Wilson, Stang, Prentice-Hall, Inc, Upper Saddle River, NJ; Pharmacotherapy Handbook, Wells et al., ed., Appleton & Lange, Stamford, CT] 참조; 각각 전체적으로 본원에 참조로 포함됨).
GLP-2 펩티바디는 또한 GLP-2 펩티바디의 연장 또는 지속 투여를 위한 저속 방출 이식 장치로서 제형화될 수 있다. 이러한 지속 방출 제형은 신체 외부에 위치하는 패치의 형태일 수 있다. 지속 방출 제형의 예는 생체 적합성 중합체, 예컨대 폴리(락트산), 폴리(락트산-코-글리콜산), 메틸셀룰로스, 히알루론산, 시알산, 실리케이트, 콜라겐, 리포솜 등의 복합체를 포함한다. GLP-2 펩티바디의 높은 국소 농도를 제공하는 것이 바람직한 경우에는, 지속 방출 제형이 특히 중요할 수 있다.
GLP-2 펩티바디 조성물 및 제형은 청정한 용액으로서 환자에게 제공될 수 있거나, 또는 수성 희석제를 함유하는 제2 바이알과 함께 재구성되는 동결 건조된 적어도 하나의 GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함) 또는 지정된 부분 또는 변이체의 바이알을 포함하는 이중 바이알로서 환자에게 제공될 수 있다. 단일 용액 바이알 또는 재구성이 필요한 이중 바이알은 여러 번 재사용할 수 있으며, 단일 또는 여러 주기의 환자 치료에 충분할 수 있으므로, 현재 이용가능한 것보다 더 편리한 치료 레지멘을 제공한다.
GLP-2 펩티바디 조성물 및 제형은 약국, 클리닉 또는 다른 이러한 기관 및 시설에 청정한 용액, 또는 수성 희석제를 함유하는 제2 바이알과 함께 재구성되는 동결 건조된 적어도 하나의 GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함) 또는 지정된 부분 또는 변이체의 바이알을 포함하는 이중 바이알을 제공함으로써 환자에게 간접적으로 제공될 수 있다. 이러한 경우 청정한 용액은 최대 1 리터 또는 그 보다 훨씬 더 큰 크기일 수 있으며, 이는 큰 저장소를 제공하여 그로부터 GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함) 또는 지정된 부분 또는 변이체 용액의 더 작은 부분을 한 번 또는 여러 번 회수하여 더 작은 바이알로 옮기고 약국 또는 클리닉에서 고객 및/또는 환자에게 제공할 수 있다. 이러한 제품은 패키징 재료를 포함할 수 있다. 패키징 재료는 규제 기관에서 요구하는 정보 외에도, 제품을 사용할 수 있는 조건을 제공할 수 있다. 패키징 재료는 환자에게 GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함) 또는 지정된 부분 또는 변이체를 수성 희석제에서 재구성하여 용액을 형성하고 이러한 용액을 2개의 바이알, 습식/건식 제품에 대해 2 내지 24시간 이상의 기간에 걸쳐 사용하는 것에 대한 지침을 제공할 수 있다.
치료
또 다른 측면에서, 장피부 누공 (ECF)의 폐쇄, 치유, 및/또는 복구를 촉진시키는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디로 ECF를 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법이 제공된다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 GLP-2 펩티바디를 투여하는 것을 포함하는, ECF를 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 ECF의 폐쇄, 치유, 및/또는 복구를 촉진시키는데 유효한 투약 레지멘에 따라 투여된다. 또 다른 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 ECF를 치료하기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 것이다. GLP-2 펩티바디는 GLP-2 또는 테두글루티드보다 반감기가 더 길기 때문에 ECF을 치료하는데 특히 유효할 수 있다. 반감기가 더 길수록 투여 빈도가 줄어들고 최고점-대-최저점 비율이 낮아진다.
ECF로부터 높은 사망률과 이환율이 발생한다. 추가로, ECF는 복강내 시술을 통해 발생할 수 있다. 장 벽의 손상은 ECF의 가장 큰 위험을 수반한다. 문헌 [Galie, K.L. et al., "Postoperative Enterocutaneous Fistula: When to Reoperate and How to Succeed" Clin. Colon Rectal Surg., 2006, 19:237-246; Arebi, N. et al., "High-Output Fistula" Clinics in Colon and Rectal Surgery, 2004, 17(2):89-98]을 참조한다. 이론에 얽매이고자 한 것은 아니지만, ECF는 위장관과 피부 사이의 개구부이다. 상당량의 유체, 영양소 및 위장액이 소장에 의한 적절한 흡수 없이 위장관을 떠날 수 있다. 위 분비물 감소 및 영양소의 흡수 개선이 ECF의 예후를 개선시킬 수 있다.
일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자에 의한 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 영양소, 예를 들어, 폴리펩티드, 탄수화물, 지방산, 비타민, 미네랄 및 수분의 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 위 분비물의 용적을 감소시키는데 유효하다. GLP-2 펩티바디는 누공을 통해 이동하는 것과 같이 피부에 도달하는 위장 분비물의 양을 감소시키는데 유효할 수 있다. 더 긴 기간 동안 GLP-2를 활성화시키면, 위 분비물과 누공을 통한 유체 배출을 감소시킬 수 있고, 그에 의해 회복을 더 신속하게 촉진시키고 누공을 더 신속하게 치유할 수 있다. 또한, 테두글루티드 치료 후 증가된 콜라겐 발현 및 감소된 메탈로프로테아제 발현이 관찰되었다. 문헌 [Costa, B.P. et al., "Teduglutide effects on gene regulation of fibrogenesis on an animal model of intestinal anastomosis" Journal of Surgical Research, August 2017 (216): 87-98]을 참조한다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다.
예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 피하로 또는 정맥내로 투여될 수 있다. 다양한 실시양태에서, 투약 레지멘에 따라 다수의 투여가 수행된다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "Q2D"는 2일마다 투여하는 것을 의미하고, "Q3D"는 3일마다 투여하는 것을 의미한다. "QW"는 매주 투여하는 것을 의미한다. "BID"는 하루에 2회 투여하는 것을 의미한다. 투여는, 예를 들어, BID, 1일에 1회 (QD), Q2D, Q3D, Q4D, Q5D, Q6D, QW, 8일마다 1회, 9일마다 1회, 10일마다 1회, 11일마다 1회, 12일마다 1회, 13일마다 1회, 2주마다 1회, 15일마다 1회, 16일마다 1회, 또는 17일마다 1회, 3주마다 1회 또는 1개월에 1회으로 이루어질 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 2-14일마다, 5-8일마다, 또는 매주 (QW) 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 3주마다 또는 1개월에 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
대안으로서, GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 유지 목적으로 5-8일마다, 또는 매주 (QW) 0.02 내지 1.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다. 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 10 내지 100 mg/mL, 10 내지 90 mg/mL, 20 내지 80 mg/mL, 25 내지 75 mg/mL, 30 내지 70 mg/mL, 50 내지 100 mg/mL, 60 내지 90 mg/mL, 약 75 mg/mL, 75 mg/mL, 10 내지 20 mg/mL, 15 내지 25 mg/mL, 12 내지 18 mg/mL, 13-17 mg/mL, 14-16 mg/mL, 약 15 mg/mL 또는 15 mg/mL의 농도로 투여될 수 있다.
상기 투약 레지멘은 ECF를 치료하기 위해 6개월에서 1년에 걸쳐 시행될 수 있다. GLP-2 펩티바디는 유지 및 재발 방지를 위해 초기 투약량 레지멘 후 1개월에 1회 투여될 수 있다.
본원에 사용된 바와 같은, 용어 "피하 조직"은 피부 바로 아래에 있는 느슨하고 불규칙한 결합 조직의 층으로서 정의된다. 예를 들어, 피하 투여는 대퇴 부위, 복부 부위, 둔부 부위 또는 견갑골 부위를 포함하나 이에 제한되지는 않는 부위에 조성물을 주사함으로써 수행될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 제형은 주사기를 사용하여 주사될 수 있다. 그러나, 제형의 투여를 위한 다른 장치, 예컨대 주사 장치 (예를 들어, 인젝트-이즈(Inject-ease)™ 및 젠젝트(Genject)™ 장치); 주입기 펜 (예컨대 젠펜(GenPen)™); 무바늘 장치 (예를 들어, 메디젝터(MediJector)™ 및 바이오젝터(BioJector)™); 및 피하 패치 전달 시스템이 이용가능하다. 일부 실시양태에서, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디, 또는 이를 함유하는 제약 조성물이 정맥내로 투여된다.
다양한 실시양태에서, ECF를 치료하는 상기 방법은 ECF를 치료하는 공지된 방법과 연계해서 사용된다. 예시적인 공지된 방법은 비경구 영양, 패혈증 예방을위한 항생제 투여, 누공의 외부 개구부에 부착된 장루 기구, 섬프 배수, 누공 용해, 비타민 보충, 미네랄 보충, 산을 억제하기 위한 H2 차단제 또는 양성자 펌프 억제제의 사용, 히스토아크릴 접착제의 투여 및 섬유소 접착제의 투여를 포함한다.
또 다른 측면에서, 폐쇄성 황달을 치료하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디로 폐쇄성 황달을 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법이 제공된다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 GLP-2 펩티바디를 투여하는 것을 포함하는, 폐쇄성 황달을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 폐쇄성 황달을 치료하는데 유효한 투약 레지멘에 따라 투여된다. 또 다른 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 폐쇄성 황달을 치료하기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 것이다. 폐쇄성 황달은 장으로의 담즙 흐름이 차단되고 혈류에 남아있을 때 발생한다. 담석은 폐쇄성 황달을 유발할 수 있다. 폐쇄성 황달을 가진 환자에서 장 장벽 기능이 손상되거나 감소될 수 있으며, 이로 인해 소장에 걸친 박테리아 전좌가 발생할 수 있다. 본원에 기재된 GLP-2 펩티바디는 폐쇄성 황달의 에피소드 동안 장 장벽 기능에 대한 손상을 예방할 수 있다.
폐쇄성 황달을 치료하는데 유효한 투약 레지멘을 사용할 수 있다. 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 피하로 또는 정맥내로 투여될 수 있다. 다양한 실시양태에서, 투약 레지멘에 따라 다수의 투여가 수행된다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "Q2D"는 2일마다 투여하는 것을 의미하고, "Q3D"는 3일마다 투여하는 것을 의미한다. "QW"는 매주 투여하는 것을 의미한다. "BID"는 하루에 2회 투여하는 것을 의미한다. 투여는, 예를 들어, BID, 1일에 1회 (QD), Q2D, Q3D, Q4D, Q5D, Q6D, QW, 8일마다 1회, 9일마다 1회, 10일마다 1회, 11일마다 1회, 12일마다 1회, 13일마다 1회, 2주마다 1회, 15일마다 1회, 16일마다 1회, 또는 17일마다 1회, 3주마다 1회 또는 1개월에 1회으로 이루어질 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 2-14일마다, 5-8일마다, 또는 매주 (QW) 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 유지 목적으로 5-8일마다 또는 매주 (QW) 0.02 내지 1.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 10 내지 100 mg/mL, 10 내지 90 mg/mL, 20 내지 80 mg/mL, 25 내지 75 mg/mL, 30 내지 70 mg/mL, 50 내지 100 mg/mL, 60 내지 90 mg/mL, 약 75 mg/mL, 75 mg/mL, 10 내지 20 mg/mL, 15 내지 25 mg/mL, 12 내지 18 mg/mL, 13-17 mg/mL, 14-16 mg/mL, 약 15 mg/mL 또는 15 mg/mL의 농도로 투여될 수 있다.
예를 들어, 피하 투여는 대퇴 부위, 복부 부위, 둔부 부위 또는 견갑골 부위를 포함하나 이에 제한되지는 않는 부위에 조성물을 주사함으로써 수행될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 제형은 주사기를 사용하여 주사될 수 있다. 그러나, 제형의 투여를 위한 다른 장치, 예컨대 주사 장치 (예를 들어, 인젝트-이즈™ 및 젠젝트™ 장치); 주입기 펜 (예컨대 젠펜™); 무바늘 장치 (예를 들어, 메디젝터™ 및 바이오젝터™); 및 피하 패치 전달 시스템이 이용가능하다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함), 또는 이를 함유하는 제약 조성물이 정맥내로 투여된다.
일부 실시양태에서, 혈청 빌리루빈의 수준은 상기 치료 전의 혈청 빌리루빈의 수준과 비교 시 감소된다. 혈청 빌리루빈은 황달의 정도를 반영하며 폐쇄성 황달을 가진 환자에서 볼 수 있는 피부와 눈의 황색의 원인이다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 영양소, 예를 들어, 폴리펩티드, 탄수화물, 지방산, 비타민, 미네랄 및 수분의 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 장 장벽 기능을 개선시키고 환자의 소장에 걸친 박테리아 전좌율을 감소시키는데 유효하다.
또 다른 측면에서, 본 발명은, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디를 투여하는 것을 포함하는, 위장관에 대한 방사선 손상, 및/또는 그의 효과를 치료하거나, 개선시키거나 또는 그로부터 보호하는 방법을 제공한다. 환자의 위장관에 대한 방사선 손상을 치료하거나 예방하는데 유효한 투약 레지멘이 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 GLP-2 펩티바디를 투여하는 것을 포함하는, 위장관에 대한 방사선 손상을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 위장관에 대한 방사선 손상을 치료하는데 유효한 투약 레지멘에 따라 투여된다. 또 다른 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 위장관에 대한 방사선 손상을 치료하기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 것이다. 방사선 손상은 소장에서 이루어질 수 있다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 위장관의 세포에서의 아폽토시스를 감소시키는데 유효하다.
소장에 대한 방사선 손상은 하기 효과 중 하나 이상을 유발하기에 충분한 세포 손상을 초래할 수 있다: 장 장벽 기능 감소, 소장에 의한 수분 및 다른 영양소의 흡수 감소, 비경구 영양에 대한 의존성 증가. GLP-2 또는 테두글루티드보다 실질적으로 더 큰 반감기를 갖는 GLP-2 펩티바디는 이러한 효과를 역전시킬 수 있다. 이론에 얽매이고자 한 것은 아니지만, GLP-2는 이러한 세포, 예를 들어, CCD-18Co 세포에서 Akt 인산화를 촉진함으로써 소장 내의 세포가 아폽토시스를 겪는 것을 방지할 수 있다. 대안적으로, GLP-2 펩티바디는 그의 GLP-2 활성을 통해, 카스파제-3 수준을 감소시킬 수 있다. 카스파제 3은 방사선에 의해 촉발되는 인자이다. GLP-2 펩티바디는 또한 방사선에 의해 촉발되기도 하는 Bcl-2 분해를 억제할 수 있다.
GLP-2 펩티바디는 환자가 방사선 또는 방사선 요법으로 치료되기 전 또는 치료받는 동안 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디는 환자가 방사선 또는 방사선 요법으로 치료받은 후에 투여될 수 있다. 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 피하로 또는 정맥내로 투여될 수 있다. 다양한 실시양태에서, 투약 레지멘에 따라 다수의 투여가 수행된다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "Q2D"는 2일마다 투여하는 것을 의미하고, "Q3D"는 3일마다 투여하는 것을 의미한다. "QW"는 매주 투여하는 것을 의미한다. "BID"는 하루에 2회 투여하는 것을 의미한다. 투여는, 예를 들어, BID, 1일에 1회 (QD), Q2D, Q3D, Q4D, Q5D, Q6D, QW, 8일마다 1회, 9일마다 1회, 10일마다 1회, 11일마다 1회, 12일마다 1회, 13일마다 1회, 2주마다 1회, 15일마다 1회, 16일마다 1회, 또는 17일마다 1회, 3주마다 1회 또는 1개월에 1회으로 이루어질 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 2-10일마다, 5-8일마다, 또는 매주 (QW) 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 3주마다 또는 1개월에 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 유지 목적으로 5-8일마다 또는 매주 (QW) 0.02 내지 1.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다. 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 10 내지 100 mg/mL, 10 내지 90 mg/mL, 20 내지 80 mg/mL, 25 내지 75 mg/mL, 30 내지 70 mg/mL, 50 내지 100 mg/mL, 60 내지 90 mg/mL, 약 75 mg/mL, 75 mg/mL, 10 내지 20 mg/mL, 15 내지 25 mg/mL, 12 내지 18 mg/mL, 13-17 mg/mL, 14-16 mg/mL, 약 15 mg/mL 또는 15 mg/mL의 농도로 투여될 수 있다.
상기 투약 레지멘은 6개월에서 1년에 걸쳐 시행될 수 있다. GLP-2 펩티바디는 유지를 위해 초기 투약량 레지멘 후 1개월에 1회 투여될 수 있다.
예를 들어, 피하 투여는 대퇴 부위, 복부 부위, 둔부 부위 또는 견갑골 부위를 포함하나 이에 제한되지는 않는 부위에 조성물을 주사함으로써 수행될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 제형은 주사기를 사용하여 주사될 수 있다. 그러나, 제형의 투여를 위한 다른 장치, 예컨대 주사 장치 (예를 들어, 인젝트-이즈™ 및 젠젝트™ 장치); 주입기 펜 (예컨대 젠펜™); 무바늘 장치 (예를 들어, 메디젝터™ 및 바이오젝터™); 및 피하 패치 전달 시스템이 이용가능하다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함), 또는 이를 함유하는 제약 조성물이 정맥내로 투여된다.
일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 영양소, 예를 들어, 폴리펩티드, 탄수화물, 지방산, 비타민, 미네랄 및 수분의 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 장 장벽 기능을 개선시키는데 유효하다. 이러한 효과 모두는 소장과 장에서 발생하는 어떠한 방사선 유발 세포 손상도 보상할 수 있다.
또 다른 측면에서, 본 발명은, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디를 투여하는 것을 포함하는, 위장관에 대한 방사선-유발 장염, 및/또는 그의 효과를 치료하거나, 개선시키거나 또는 예방하는 방법을 제공한다. 환자에서 방사선-유발 장염을 치료하거나 예방하는데 유효한 투약 레지멘이 사용될 수 있다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 GLP-2 펩티바디를 투여하는 것을 포함하는, 방사선-유발 장염을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 방사선-유발 장염을 치료하는데 유효한 투약 레지멘에 따라 투여된다. 또 다른 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 방사선-유발 장염을 치료하기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 것이다.
방사선-유발 장염은 위장관에 대한 방사선-유발 손상과 관련하여 상기 논의된 것과 유사한 이유로 GLP-2 펩티바디에 의해 역전될 수 있다.
예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 피하로 또는 정맥내로 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 2-14일마다, 5-8일마다, 또는 매주 (QW) 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 3주마다 또는 1개월에 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 유지 목적으로 5-8일마다 또는 매주 (QW) 0.02 내지 1.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 10 내지 100 mg/mL, 10 내지 90 mg/mL, 20 내지 80 mg/mL, 25 내지 75 mg/mL, 30 내지 70 mg/mL, 50 내지 100 mg/mL, 60 내지 90 mg/mL, 약 75 mg/mL, 75 mg/mL, 10 내지 20 mg/mL, 15 내지 25 mg/mL, 12 내지 18 mg/mL, 13-17 mg/mL, 14-16 mg/mL, 약 15 mg/mL 또는 15 mg/mL의 농도로 투여될 수 있다.
예를 들어, 피하 투여는 대퇴 부위, 복부 부위, 둔부 부위 또는 견갑골 부위를 포함하나 이에 제한되지는 않는 부위에 조성물을 주사함으로써 수행될 수 있다. 이러한 목적을 위해, 제형은 주사기를 사용하여 주사될 수 있다. 그러나, 제형의 투여를 위한 다른 장치, 예컨대 주사 장치 (예를 들어, 인젝트-이즈™ 및 젠젝트™ 장치); 주입기 펜 (예컨대 젠펜™); 무바늘 장치 (예를 들어, 메디젝터™ 및 바이오젝터™); 및 피하 패치 전달 시스템이 이용가능하다. 일부 실시양태에서, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디, 또는 이를 함유하는 제약 조성물이 정맥내로 투여된다.
일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 영양소, 예를 들어, 폴리펩티드, 탄수화물, 지방산, 비타민, 미네랄 및 수분의 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 장 장벽 기능을 개선시키는데 유효하다.
또 다른 측면에서, 단장 증후군을 치료하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디로 잔존 소장과 연속성인 결장을 제시하는 단장 증후군을 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법이 제공된다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 잔존 소장과의 적어도 약 25% 결장 연속성을 제시하는 단장 증후군 환자에서 장 흡수를 증강시키기 위한 의약으로서 투여된다. 일부 실시양태에서, 잔존 소장은 적어도 25 cm, 적어도 50 cm, 적어도 75 cm, 적어도 100 cm, 또는 적어도 125 cm의 길이를 갖는다. 한 실시양태에서, 본원에 기재된 조성물은 단장 증후군을 치료하는데 유효한 투약 레지멘에 따라 GLP-2 펩티바디를 투여하는 것을 포함하는, 잔존 소장과 연속성인 결장을 제시하는 단장 증후군을 치료하는 방법에 사용하기 위한 것이다. 또 다른 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 잔존 소장과 연속성인 결장을 제시하는 단장 증후군을 치료하기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 것이다.
일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자에서 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 영양소, 예를 들어, 폴리펩티드, 탄수화물, 지방산, 비타민, 미네랄 및 수분의 장 흡수를 증강시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 상기 방법은 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효하다. 일부 실시양태에서, 환자는 비경구 영양에 의존적이다. 상기 방법은 분변 습윤 중량을 감소시키거나, 소변 습윤 중량을 증가시키거나, 소장에 걸친 에너지 흡수 (폴리펩티드, 탄수화물, 지방산 중 하나 이상의 흡수)를 증가시키거나, 소장에 걸친 수분 흡수를 증가시키거나, 비경구 영양 지원을 감소시키거나, 또는 비경구 영양에 대한 필요성을 제거하는데 유효할 수 있다.
결장 연속성을 가진 단장 증후군을 치료하는데 유효한 투약 레지멘이 사용될 수 있다. 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디는 피하로 또는 정맥내로 투여될 수 있다. 다양한 실시양태에서, 투약 레지멘에 따라 다수의 투여가 수행된다. 본원에 사용된 바와 같은, 용어 "Q2D"는 2일마다 투여하는 것을 의미하고, "Q3D"는 3일마다 투여하는 것을 의미한다. "QW"는 매주 투여하는 것을 의미한다. "BID"는 하루에 2회 투여하는 것을 의미한다. 투여는, 예를 들어, BID, 1일에 1회 (QD), Q2D, Q3D, Q4D, Q5D, Q6D, QW, 8일마다 1회, 9일마다 1회, 10일마다 1회, 11일마다 1회, 12일마다 1회, 13일마다 1회, 2주마다 1회, 15일마다 1회, 16일마다 1회, 또는 17일마다 1회, 3주마다 1회 또는 1개월에 1회으로 이루어질 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 2-14일마다, 5-8일마다, 또는 매주 (QW) 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
대안적으로, GLP-2 펩티바디는 유지 목적으로 3주마다 또는 1개월에 1회 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 3주마다 또는 1개월에 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg, 0.7 내지 1.3 mg/kg, 0.8 내지 1.5 mg/kg, 1.0 내지 2.0 mg/kg, 1.2 내지 2.2 mg/kg, 1.5 내지 2.5 mg/kg, 1.7 내지 2.7 mg/kg, 2.0 내지 3.0 mg/kg, 2.5 내지 3.5 mg/kg, 3.0 내지 4.0 mg/kg, 3.5 내지 4.5 mg/kg, 또는 4.0 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다.
GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함)는 유지 목적으로 5-8일마다 또는 매주 (QW) 0.02 내지 1.0 mg/kg, 0.02 내지 0.05 mg/kg, 0.04 내지 0.08 mg/kg, 0.05 내지 0.10 mg/kg, 0.07 내지 0.15 mg/kg, 0.10 내지 0.25 mg/kg, 0.2 내지 0.5 mg/kg, 0.3 내지 0.7 mg/kg, 0.4 내지 0.8 mg/kg, 0.5 내지 1.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여될 수 있다. GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1 또는 서열식별번호: 7의 아미노산 서열을 포함함)는 10 내지 100 mg/mL, 10 내지 90 mg/mL, 20 내지 80 mg/mL, 25 내지 75 mg/mL, 30 내지 70 mg/mL, 50 내지 100 mg/mL, 60 내지 90 mg/mL, 약 75 mg/mL, 75 mg/mL, 10 내지 20 mg/mL, 15 내지 25 mg/mL, 12 내지 18 mg/mL, 13-17 mg/mL, 14-16 mg/mL, 약 15 mg/mL 또는 15 mg/mL의 농도로 투여될 수 있다.
일부 실시양태에서, 예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디, 또는 이를 함유하는 제약 조성물은 피하로 투여된다. 예를 들어, 피하 투여는 대퇴 부위, 복부 부위, 둔부 부위 또는 견갑골 부위를 포함하나 이에 제한되지는 않는 부위에 조성물을 주사함으로써 수행될 수 있다. 일부 실시양태에서, GLP-2 펩티바디 (예를 들어, 서열식별번호: 1, 4, 7 또는 10의 아미노산 서열을 포함함), 또는 이를 함유하는 제약 조성물은 정맥내로 투여된다.
상기와 유사하게, GLP-2 펩티바디는 본원에 기재된 바와 같은 GLP-2 유사체 또는 그의 염의 유효량을 투여함으로써 식도의 상부 위장관을 포함한 위장 장애를 앓고 있는 개체를 치료하는데 사용될 수 있다. 위 및 장 관련 장애는 임의의 병인의 궤양 (예를 들어, 소화성 궤양, 약물 유발 궤양, 감염 또는 다른 병원체와 관련된 궤양), 소화 장애, 흡수 장애 증후군, 단장 증후군, 맹낭 증후군, 염증성 장 질환, 셀리악 스프루 (예를 들어, 글루텐 유발 장병증 또는 셀리악병으로부터 발생), 열대 스프루, 저감마글로불린혈증 스프루, 장염, 궤양성 결장염, 소장 손상 및 화학요법 유발성 설사/점막염 (CID)을 포함한다. 증가된 소장 질량 및 그 결과로 일어나고/거나 정상적인 소장 점막 구조 및 기능의 유지로부터 혜택을 얻을 수 있는 개체가 GLP-2 펩티바디로 치료할 후보이다. GLP-2 펩티바디로 치료될 수 있는 특별한 병태는 열에 의한 알파-글리아딘에 대한 독성 반응으로 인해 발생하고, 글루텐-유발 장병증 또는 셀리악병의 결과일 수 있으며, 소장의 빌라의 상당한 손실로써 표시되는 셀리악 스프루; 감염으로 인해 발생하며 상기 빌라의 부분적 편평화로써 표시되는 열대 스프루; 통상의 가변적 면역결핍증 또는 저감마글로불린혈증 환자에서 흔히 관찰되고 융모 높이에 있어서의 상당한 감소로써 표시되는 저감마글로불린혈증 스프루를 포함한 다양한 형태의 스프루를 포함한다. GLP-2 펩티바디 치료의 치료 효능은 융모 형태를 조사하기 위한 장 생검에 의해, 영양소 흡수의 생화학적 평가에 의해, 환자 체중 증가에 의해, 또는 이들 병태와 연관된 증상의 개선에 의해 모니터링될 수 있다.
GLP-2 펩티바디는 또한 화학요법 동안 위장관에 대한 손상을 예방하거나 치료하기 위해 투여될 수 있다. 화학요법으로 인한 소장 점막에 대한 손상은 임상 적으로 종종 위장 점막염으로서 지칭되며, 소장의 흡수 및 장벽 손상을 특징으로 한다. 암 화학요법 후 위장 점막염은 점차적으로 완화되긴 하지만, 일단 확립되면 근본적으로 치료할 수 없는 증가하는 문제이다. 통상적으로 사용되고 있는 세포 증식 억제성 암 약물인 5-FU 및 이리노테칸으로 시행된 연구 결과, 이러한 약물을 사용하는 유효한 화학요법이 소장의 구조적 무결성과 기능에 주로 영향을 미치는 것으로 입증되었다. GLP-2 펩티바디의 투여는 소장에 대한 손상을 역전시키고 그의 구조적 무결성과 기능을 보존할 수 있다.
상기 치료 방법의 다양한 실시양태에서, 투여될 특별한 용량 또는 양은, 예를 들어, 원하는 결과의 성질 및/또는 정도, 특별한 투여 경로 및/또는 시기, 및/또는 하나 이상의 특징 (예를 들어, 체중, 연령, 개인 이력, 유전적 특징, 생활 습관 파라미터, 심장 결함의 중증도 및/또는 심장 결함의 위험 수준 등, 또는 그의 조합)에 따라 다양할 수 있다. 이러한 용량 또는 양은 통상의 기술자에 의해 결정될 수 있다. 일부 실시양태에서, 적절한 용량 또는 양은 표준 임상 기술에 따라 결정된다. 대안적으로, 또는 부가적으로, 일부 실시양태에서, 적절한 용량 또는 양은 투여될 바람직하거나 최적의 투여량 범위 또는 양을 확인하는데 도움이되도록 하나 이상의 시험관내 또는 생체내 검정을 사용하여 결정된다.
상기 치료 방법의 다양한 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 치료상 유효량으로 투여된다. 일반적으로, 치료상 유효량은 대상체에 대한 의미있는 혜택 (예를 들어, 기저 질환 또는 병태의 예방, 치료, 조정, 치유, 예방 및/또는 개선)을 달성하기에 충분하다. 일반적으로, 치료제 (예를 들어, GLP-2 펩티바디)를 필요로 하는 대상체에게 투여되는 상기 치료제의 양은 대상체의 특징에 따라 달라질 것이다. 이러한 특징은 대상체의 병태, 질환 중증도, 일반적인 건강, 연령, 성별 및 체중을 포함한다. 관련 기술분야의 통상의 기술자는 이들 및 다른 관련 요인에 따라 적절한 투여량을 쉽게 결정할 수 있을 것이다. 또한, 객관적 검정과 주관적 검정 둘 다가 임의로, 최적의 투여량 범위를 확인하기 위해 이용될 수 있다. 일부 특별한 실시양태에서, 투여될 적절한 용량 또는 양은 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유래된 용량-반응 곡선으로부터 외삽될 수 있다.
상기 치료 방법의 다양한 실시양태에서, 치료상 유효량은 통상적으로 다수의 단위 용량을 포함할 수 있는 투약 레지멘으로 투여된다. 임의의 특별한 치료용 단백질의 경우, 치료상 유효량 (및/또는 유효한 투약 레지멘 이내의 적절한 단위 용량)은, 예를 들어, 다른 제약 작용제와 조합하여, 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. 또한, 임의의 특별한 환자에 대한 구체적인 치료상 유효량 (및/또는 단위 용량)은 치료되는 장애 및 장애의 중증도; 이용된 특이적 제약 작용제의 활성; 이용된 특이적 조성물; 환자의 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별 및 식이; 이용된 특이적 융합 단백질의 투여 시간, 투여 경로 및/또는 배설 또는 대사 속도; 치료의 지속 기간; 및 의학 분야에서 널리 공지된 바와 같은 유사 요인을 포함한 다양한 요인에 따라 달라질 수 있다.
상기 치료 방법의 다양한 실시양태에서, GLP-2 펩티바디는 하나 이상의 공지된 치료제와 조합하여 투여된다. 일부 실시양태에서, 공지된 치료제(들)는 표준 또는 승인된 투약 레지멘 및/또는 스케줄에 따라 투여된다. 일부 실시양태에서, 공지된 치료제(들)는 표준 또는 승인된 투약 레지멘 및/또는 스케줄과 비교 시 변경되는 레지멘에 따라 투여된다. 일부 실시양태에서, 이러한 변경된 레지멘은 하나 이상의 단위 용량이 그 양에 있어서 변경 (예를 들어, 감소 또는 증가)된다는 점에서, 및/또는 투여가 그 빈도에 있어서 변경된다는 점에서 (예를 들어, 단위 용량 사이의 하나 이상의 간격이 확장되어 그 빈도가 더 낮아지거나, 또는 상기 간격이 감소되어 그 빈도가 더 높아진다는 점에서) 표준 또는 승인된 투약 레지멘과 상이하다.
ECF의 경우, GLP-2 펩티바디와 조합하여 투여될 수 있는 예시적인 치료제는 코르티코스테로이드, 항생제 및 제산제를 포함한다. 폐쇄성 황달의 경우, GLP-2 펩티바디와 조합하여 투여될 수 있는 예시적인 치료제는 코르티코스테로이드 및 항생제를 포함한다.
상기 치료 방법의 다양한 실시양태에서, 다수의 상이한 GLP-2 펩티바디가 함께 투여될 수 있다. 추가로, GLP-2 펩티바디는 GATTEX, 테두글루티드 또는 GLP-2 펩티드와 공동으로 투여될 수 있다.
실시예
본 발명은 또한 하기 실시예에 의해 기재되고 입증된다. 그러나, 본 명세서의 어디에서나 이들 및 다른 예의 사용은 단지 예시적일 뿐이며 본 발명 또는 임의의 예시된 항목의 범위 및 의미를 제한하지 않는다. 마찬가지로, 본 발명은 여기에 기재된 임의의 특별한 바람직한 실시양태로 제한되지 않는다. 실제로, 본 명세서의 판독 시 본 발명의 많은 변형 및 변동이 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 수 있고, 그러한 변동은 요지 또는 범위에 있어서 본 발명을 벗어나지 않고서도 만들어질 수 있다. 따라서 본 발명은 첨부된 청구범위의 항목과 청구범위가 그에 대해 권리가 있는 등가물의 전체 범위에 의해서만 제한되어야 한다.
실시예 1: 단백질 안정성 분석
각각의 GLP-2 펩티바디는 나노시차 스캐닝 형광 측정법 (NanoDSF)으로 용융 온도를 결정함으로써 시험된다. NanoDSF는 온도 램프를 이용하여 일정 범위의 온도에 걸쳐 단백질 안정성을 측정한다. 트립토판의 안정성은 350 nm에서의 형광 대 330 nm에서의 형광의 비율로 반영된 바와 같이, 형광에 의해 측정된다. 이러한 검정으로부터, 하나 이상의 용융 온도가 결정된다. 특정 상태의 단백질은 용융 온도를 갖는 것으로 이해되기 때문에, 관찰된 용융 온도의 수는 상이한 상태의 수를 반영한다.
SEC-MALS 검정을 수행하여 1차 상태 (주요 피크) 및 그의 분자량을 결정하였다. 그 결과가 하기 표 1에 제시되어 있다. GLP-2 펩티바디 A는 서열식별번호: 1에 제시된 아미노산 서열을 갖는다. GLP-2 펩티바디 B는 서열식별번호: 4에 제시된 아미노산 서열을 갖는다. GLP-2 펩티바디 C는 서열식별번호: 7에 제시된 아미노산 서열을 갖는다. GLP-2 펩티바디 D는 서열식별번호: 10에 제시된 아미노산 서열을 갖는다.
표 1
Figure pct00001
실시예 2: GLP-2 펩티바디의 시험관내 효능
GLP-2 펩티바디의 EC50은 디스커버X(DiscoverX)로부터의 cAMP 헌터 익스프레스(헌터™ 익스프레스(Hunter™ eXpress)) GLP2R CHO-K1 GPCR 검정을 사용하여 시험관내에서 검정되었다. cAMP 헌터™ 검정은 효소 단편 상보성 (EFC)을 기반으로 한다. EFC 검정에서는, 효소 공여자가 cAMP와 융합된다. GLP-2R 활성화로 인해 증가된 세포내 cAMP는 항체를 놓고 ED-cAMP와 경쟁한다. 결합되지 않은 ED-cAMP는 효소 수용체를 보완하여 활성 베타 갈락토시다제를 형성하며, 이는 이후에 발광 신호를 생산한다.
사용된 CHO-K1 세포주는 인간 GLP-2R [젠뱅크(Genbank) 수탁 번호 NM004246.1]을 과다발현한다. 세포를 표 2에 열거된 GLP-2 펩티바디의 다양한 희석액으로 처리하였다. 세포 용해 후, GLP-2 펩티바디의 효능제 활성은 cAMP의 농도 측정을 통해 검정되었다. 하기 표 2에 제시된 바와 같이, EC50 값에 도달하기 위해 S자 곡선 피팅이 수행되었다.
표 2
Figure pct00002
본 발명은 본원에 기재된 구체적 실시양태에 의해 그 범위가 제한되지 않아야 한다. 실제로, 본원에 기재된 것 이외에 본 발명의 다양한 변형은 전술한 설명 및 첨부 도면으로부터 관련 기술분야의 통상의 기술자에게 명백할 것이다. 그러한 변형은 첨부된 청구범위 내에 속하도록 의도된다. 모든 값은 대략적인 것이며 설명을 위해 제공된 것임을 추가로 이해해야 한다.
특허, 특허 출원, 간행물, 제품 설명 및 프로토콜이 본 출원 전반에 걸쳐 인용되며, 그의 개시내용은 모든 목적을 위해 그 전문이 본원에 참조로 포함된다.
SEQUENCE LISTING <110> SHIRE-NPS PHARMACEUTICALS, INC. <120> GLP-2 FUSION POLYPEPTIDES AND USES FOR TREATING AND PREVENTING GASTROINTESTINAL CONDITIONS <130> 250501.000155 <150> US 62/750,001 <151> 2018-10-24 <160> 17 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 271 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Homo sapiens <400> 1 His Gly Asp Gly Ser Phe Ser Asp Glu Met Asn Thr Ile Leu Asp Asn 1 5 10 15 Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Asn Trp Leu Ile Gln Thr Lys Ile Thr 20 25 30 Asp Gly Ser Ala Gly Ser Ala Ala Gly Ser Gly Glu Phe Asp Lys Thr 35 40 45 His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser 50 55 60 Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg 65 70 75 80 Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro 85 90 95 Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala 100 105 110 Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val 115 120 125 Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr 130 135 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Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala 65 70 75 80 Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 85 90 95 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 100 105 110 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 115 120 125 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 130 135 140 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 145 150 155 160 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 165 170 175 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 180 185 190 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val 195 200 205 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 210 215 220 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 225 230 235 240 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 245 250 255 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 260 265 270 Met His Glu 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gggagtccaa cggccaaccc 720 gagaacaact acaagaccac gccccctgtg ctggacagcg acgggtcatt cttcctgtac 780 tcgaagctca ccgtggataa gagccggtgg cagcagggaa acgtgttctc ctgctccgtg 840 atgcacgaag cactgcacaa ccactacacc cagaaaagcc tgtccctctc gccggga 897 <210> 7 <211> 295 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Homo sapiens <400> 7 His Gly Asp Gly Ser Phe Ser Asp Glu Met Asn Thr Ile Leu Asp Asn 1 5 10 15 Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Asn Trp Leu Ile Gln Thr Lys Ile Thr 20 25 30 Asp Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala 35 40 45 Lys Ala Leu Glu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu 50 55 60 Ala Ala Ala Lys Ala Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 65 70 75 80 Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 85 90 95 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 100 105 110 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 115 120 125 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 130 135 140 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 145 150 155 160 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 165 170 175 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 180 185 190 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 195 200 205 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 210 215 220 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 225 230 235 240 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 245 250 255 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 260 265 270 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 275 280 285 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 290 295 <210> 8 <211> 315 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Homo sapiens <400> 8 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly His Gly Asp Gly Ser Phe Ser Asp Glu Met Asn Thr 20 25 30 Ile Leu Asp Asn Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Asn Trp Leu Ile Gln 35 40 45 Thr Lys Ile Thr Asp Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 50 55 60 Glu Ala Ala Ala Lys Ala Leu Glu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala 65 70 75 80 Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Ala Asp Lys Thr His Thr Cys Pro 85 90 95 Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 100 105 110 Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 115 120 125 Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe 130 135 140 Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 145 150 155 160 Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 165 170 175 Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 180 185 190 Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala 195 200 205 Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg 210 215 220 Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 225 230 235 240 Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 245 250 255 Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 260 265 270 Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln 275 280 285 Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 290 295 300 Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 305 310 315 <210> 9 <211> 945 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Homo sapiens <400> 9 atggagactc ccgcccaact gcttttcctg ctcctcctgt ggttgcccga caccaccgga 60 cacggcgacg gttccttctc cgacgagatg aacactattc tggataacct cgccgcgcgc 120 gactttatca actggctgat ccagaccaaa atcaccgatg ccgaagcggc ggcaaaggaa 180 gctgccgcga aggaagccgc tgcgaaggcc ttggaagccg aagccgcagc caaggaagcg 240 gccgccaaag aggccgctgc taaggccgac aagacccata cgtgtccgcc ttgcccggct 300 cctgaagccg caggaggacc tagcgtgttc ctgttcccgc caaagccgaa ggataccctg 360 atgattagcc ggactcccga agtcacttgc gtggtggtgg acgtgtccca tgaggaccct 420 gaagtcaaat tcaattggta cgtcgacggc gtggaggtcc acaatgcaaa gaccaagcca 480 agagaggaac agtacaactc cacctaccgc gtcgtgtccg tccttaccgt gctgcatcag 540 gactggctga acggaaagga gtacaagtgc aaagtgtcaa acaaggccct tcccgcccct 600 attgaaaaga ccatcagcaa ggccaaggga cagccccgcg aaccacaggt ctatactctt 660 ccgccttccc gggatgagct gaccaagaac caagtgtccc tgacctgtct cgtgaagggg 720 ttctacccgt cggatattgc cgtggagtgg gagtccaacg gccaacccga gaacaactac 780 aagaccacgc cccctgtgct ggacagcgac gggtcattct tcctgtactc gaagctcacc 840 gtggataaga gccggtggca gcagggaaac gtgttctcct gctccgtgat gcacgaagca 900 ctgcacaacc actacaccca gaaaagcctg tccctctcgc cggga 945 <210> 10 <211> 275 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Homo sapiens <400> 10 His Gly Asp Gly Ser Phe Ser Asp Glu Met Asn Thr Ile Leu Asp Asn 1 5 10 15 Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Asn Trp Leu Ile Gln Thr Lys Ile Thr 20 25 30 Asp Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly 35 40 45 Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu Ala Ala 50 55 60 Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu 65 70 75 80 Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser 85 90 95 His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu 100 105 110 Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Tyr Asn Ser Thr 115 120 125 Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn 130 135 140 Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro 145 150 155 160 Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln 165 170 175 Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val 180 185 190 Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val 195 200 205 Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro 210 215 220 Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr 225 230 235 240 Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val 245 250 255 Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu 260 265 270 Ser Pro Gly 275 <210> 11 <211> 295 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Homo sapiens <400> 11 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly His Gly Asp Gly Ser Phe Ser Asp Glu Met Asn Thr 20 25 30 Ile Leu Asp Asn Leu Ala Ala Arg Asp Phe Ile Asn Trp Leu Ile Gln 35 40 45 Thr Lys Ile Thr Asp Arg Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 50 55 60 Gly Gly Gly Gly Ser Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala 65 70 75 80 Pro Glu Ala Ala Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro 85 90 95 Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val 100 105 110 Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp Tyr Val 115 120 125 Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln 130 135 140 Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln 145 150 155 160 Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala 165 170 175 Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro 180 185 190 Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr 195 200 205 Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser 210 215 220 Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr 225 230 235 240 Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr 245 250 255 Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe 260 265 270 Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys 275 280 285 Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly 290 295 <210> 12 <211> 885 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Homo sapiens <400> 12 atggagactc ccgcccaact gcttttcctg ctcctcctgt ggttgcccga caccaccgga 60 cacggcgacg gttccttctc cgacgagatg aacactattc tggataacct cgccgcgcgc 120 gactttatca actggctgat ccagaccaaa atcaccgatc ggggaggcgg tggatctggt 180 ggcggaggta gtggaggcgg tggatctgac aagacccata cgtgtccgcc ttgcccggct 240 cctgaagccg caggaggacc tagcgtgttc ctgttcccgc caaagccgaa ggataccctg 300 atgattagcc ggactcccga agtcacttgc gtggtggtgg acgtgtccca tgaggaccct 360 gaagtcaaat tcaattggta cgtcgacggc gtggaggtcc acaatgcaaa gaccaagcca 420 agagaggaac agtacaactc cacctaccgc gtcgtgtccg tccttaccgt gctgcatcag 480 gactggctga acggaaagga gtacaagtgc aaagtgtcaa acaaggccct tcccgcccct 540 attgaaaaga ccatcagcaa ggccaaggga cagccccgcg aaccacaggt ctatactctt 600 ccgccttccc gggatgagct gaccaagaac caagtgtccc tgacctgtct cgtgaagggg 660 ttctacccgt cggatattgc cgtggagtgg gagtccaacg gccaacccga gaacaactac 720 aagaccacgc cccctgtgct ggacagcgac gggtcattct tcctgtactc gaagctcacc 780 gtggataaga gccggtggca gcagggaaac gtgttctcct gctccgtgat gcacgaagca 840 ctgcacaacc actacaccca gaaaagcctg tccctctcgc cggga 885 <210> 13 <211> 20 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 13 Met Glu Thr Pro Ala Gln Leu Leu Phe Leu Leu Leu Leu Trp Leu Pro 1 5 10 15 Asp Thr Thr Gly 20 <210> 14 <211> 12 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Peptide linker sequence <400> 14 Gly Ser Ala Gly Ser Ala Ala Gly Ser Gly Glu Phe 1 5 10 <210> 15 <211> 20 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Peptide linker sequence <400> 15 Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro Ala Pro 1 5 10 15 Ala Pro Ala Pro 20 <210> 16 <211> 36 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Peptide linker sequence <400> 16 Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys 1 5 10 15 Ala Leu Glu Ala Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala Ala Ala Lys Glu Ala 20 25 30 Ala Ala Lys Ala 35 <210> 17 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial sequence <220> <223> Peptide linker sequence <400> 17 Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser Gly Gly Gly Gly Ser 1 5 10 15

Claims (87)

  1. 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 글루카곤-유사 펩티드 (GLP-2) 펩티바디:
    a) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDGSAGSAAGSGEFDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 1)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디,
    b) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAPAPAPAPAPAPAPAPAPAPDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 4)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디,
    c) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 7)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디,
    d) HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDRGGGGSGGGGSGGGGSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 10)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디;
    또는 그의 제약상 허용되는 염.
  2. 제1항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDGSAGSAAGSGEFDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 1)의 아미노산 서열, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 GLP-2 펩티바디.
  3. 제1항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAPAPAPAPAPAPAPAPAPAPDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 4)의 아미노산 서열, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 GLP-2 펩티바디.
  4. 제1항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 7)의 아미노산 서열, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 GLP-2 펩티바디.
  5. 제1항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 HGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDRGGGGSGGGGSGGGGSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 10)의 아미노산 서열, 또는 그의 제약상 허용되는 염을 포함하는 것인 GLP-2 펩티바디.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항의 GLP-2 펩티바디 및 담체 또는 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 제약 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 주사 또는 주입에 의한 투여에 적합한 액상물로서 제형화되는 제약 조성물.
  8. 제6항에 있어서, GLP-2 펩티바디의 지속 방출, 연장 방출, 지연 방출 또는 저속 방출을 위해 제형화되는 제약 조성물.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 1000 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 제약 조성물.
  10. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 제약 조성물.
  11. 하기로 이루어진 군으로부터 선택된 GLP-2 전구체 폴리펩티드를 코딩하는 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드:
    a) METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDGSAGSAAGSGEFDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 2)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 펩티바디,
    b) METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAPAPAPAPAPAPAPAPAPAPDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 5)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드,
    c) METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 8)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드, 및
    d) METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDRGGGGSGGGGSGGGGSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 11)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드.
  12. METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDGSAGSAAGSGEFDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 2)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드를 코딩하는 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드.
  13. 제12항에 있어서, GLP-2 펩티바디를 코딩하는 서열이 서열식별번호: 3의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 폴리뉴클레오티드.
  14. METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAPAPAPAPAPAPAPAPAPAPDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 5)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드를 코딩하는 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드.
  15. 제14항에 있어서, GLP-2 펩티바디를 코딩하는 서열이 서열식별번호: 6의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 폴리뉴클레오티드.
  16. METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDAEAAAKEAAAKEAAAKALEAEAAAKEAAAKEAAAKADKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 8)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드를 코딩하는 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드.
  17. 제16항에 있어서, GLP-2 펩티바디를 코딩하는 서열이 서열식별번호: 9의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 폴리뉴클레오티드.
  18. METPAQLLFLLLLWLPDTTGHGDGSFSDEMNTILDNLAARDFINWLIQTKITDRGGGGSGGGGSGGGGSDKTHTCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPG (서열식별번호: 11)의 아미노산 서열을 포함하는 GLP-2 전구체 폴리펩티드를 코딩하는 서열을 포함하는 폴리뉴클레오티드.
  19. 제18항에 있어서, GLP-2 펩티바디를 코딩하는 서열이 서열식별번호: 12의 폴리뉴클레오티드 서열을 포함하는 것인 폴리뉴클레오티드.
  20. 제11항 내지 제19항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 벡터.
  21. 제11항 내지 제19항 중 어느 한 항의 폴리뉴클레오티드를 포함하는 숙주 세포.
  22. 제21항에 있어서, 숙주 세포가 차이니즈 햄스터 난소 세포인 숙주 세포.
  23. 제22항에 있어서, 숙주 세포가 유가식 세포 배양 규모에 충분한 수준으로 제1항의 GLP-2 펩티바디를 발현하는 것인 숙주 세포.
  24. 단장 증후군을 치료하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제1항의 GLP-2 펩티바디로 잔존 소장과 연속성인 결장을 제시하는 단장 증후군을 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법.
  25. 단장 증후군을 치료하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항의 GLP-2 펩티바디로 잔존 소장과 연속성인 결장을 제시하는 단장 증후군을 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법.
  26. 제24항 또는 제25항에 있어서, 상기 잔존 소장이 적어도 25 cm, 적어도 50 cm, 또는 적어도 75 cm의 길이를 갖는 것인 방법.
  27. 제24항 또는 제25항에 있어서, 방법이 상기 환자에서 장 흡수를 증강시키는데 유효한 것인 방법.
  28. 제24항 또는 제25항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  29. 제24항 또는 제25항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  30. 제24항 또는 제25항에 있어서, 방법이 분변 습윤 중량을 감소시키거나, 소변 습윤 중량을 증가시키거나, 소장에 걸친 에너지 흡수를 증가시키거나, 또는 소장에 걸친 수분 흡수를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  31. 제24항 또는 제25항에 있어서, 상기 환자가 비경구 영양에 의존적인 것인 방법.
  32. 제24항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 피하로 투여되는 것인 방법.
  33. 제32항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여되는 것인 방법.
  34. 제32항 또는 제33항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 방법.
  35. 제24항 내지 제31항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 정맥내로 투여되는 것인 방법.
  36. 제35항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여되는 것인 방법.
  37. 제35항 또는 제36항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 방법.
  38. 장피부 누공 (ECF)의 폐쇄, 치유, 및/또는 복구를 촉진하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제1항의 GLP-2 펩티바디로 ECF를 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법.
  39. 장피부 누공 (ECF)의 폐쇄, 치유, 및/또는 복구를 촉진하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항의 GLP-2 펩티바디로 ECF를 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법.
  40. 제38항 또는 제39항에 있어서, 방법이 상기 환자에 의한 장 흡수를 증강시키는데 유효한 것인 방법.
  41. 제38항 또는 제39항에 있어서, 방법이 상기 환자에서 위 분비물의 용적을 감소시키는데 유효한 것인 방법.
  42. 제38항 또는 제39항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  43. 제38항 또는 제39항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  44. 제38항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 피하로 투여되는 것인 방법.
  45. 제38항 내지 제43항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여되는 것인 방법.
  46. 제45항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 방법.
  47. 폐쇄성 황달을 치료하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제1항의 GLP-2 펩티바디로 폐쇄성 황달을 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법.
  48. 폐쇄성 황달을 치료하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항의 GLP-2 펩티바디로 폐쇄성 황달을 가진 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자를 치료하는 방법.
  49. 제47항 또는 제48항에 있어서, 혈청 빌리루빈의 수준이 상기 치료 전의 혈청 빌리루빈의 수준과 비교 시 감소되는 것인 방법.
  50. 제47항 또는 제48항에 있어서, 방법이 상기 환자에서 장 흡수를 증강시키는데 유효한 것인 방법.
  51. 제47항 또는 제48항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  52. 제47항 또는 제48항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  53. 제47항 또는 제48항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  54. 제47항 또는 제48항에 있어서, 방법이 상기 환자에서 장 장벽 기능을 개선시키고 상기 환자의 소장에 걸친 박테리아 전좌율을 감소시키는데 유효한 것인 방법.
  55. 제47항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 피하로 투여되는 것인 방법.
  56. 제55항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여되는 것인 방법.
  57. 제55항 또는 제56항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 방법.
  58. 제47항 내지 제54항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 정맥내로 투여되는 것인 방법.
  59. 제58항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여되는 것인 방법.
  60. 제58항 또는 제59항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 방법.
  61. 환자의 위장관에 대한 방사선 손상을 치료 또는 예방하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제1항의 GLP-2 펩티바디로 상기 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자의 위장관에 대한 방사선 손상을 치료 또는 예방하는 방법.
  62. 환자의 위장관에 대한 방사선 손상을 치료 또는 예방하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항의 GLP-2 펩티바디로 상기 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자의 위장관에 대한 방사선 손상을 치료 또는 예방하는 방법.
  63. 제61항 또는 제62항에 있어서, 방사선 손상이 소장 내에 있는 것인 방법.
  64. 제61항 또는 제62항에 있어서, 방법이 위장관의 세포에서의 아폽토시스를 감소시키는데 유효한 것인 방법.
  65. 제61항 또는 제62항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  66. 제61항 또는 제62항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  67. 제61항 또는 제62항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  68. 제61항 또는 제62항에 있어서, 방법이 상기 환자에서 장 장벽 기능을 개선시키는데 유효한 것인 방법.
  69. 제61항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 피하로 투여되는 것인 방법.
  70. 제69항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여되는 것인 방법.
  71. 제69항 또는 제70항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 방법.
  72. 제61항 내지 제68항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 정맥내로 투여되는 것인 방법.
  73. 제72항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여되는 것인 방법.
  74. 제72항 또는 제73항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 방법.
  75. 환자에서 방사선-유발 장염을 치료 또는 예방하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제1항의 GLP-2 펩티바디로 상기 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 방사선-유발 장염을 치료 또는 예방하는 방법.
  76. 환자의 위장관에 대한 방사선 손상을 치료 또는 예방하는데 유효한 투약 레지멘을 사용하여 제2항 내지 제5항 중 어느 한 항의 GLP-2 펩티바디로 상기 환자를 치료하는 것을 포함하는, 상기 환자에서 방사선-유발 장염을 치료 또는 예방하는 방법.
  77. 제75항 또는 제76항에 있어서, 방법이 위장관의 세포에서의 아폽토시스를 감소시키는데 유효한 것인 방법.
  78. 제75항 또는 제76항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 융모 높이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  79. 제75항 또는 제76항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 음와 깊이를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  80. 제75항 또는 제76항에 있어서, 방법이 상기 환자의 소장에서 음와 조직화를 증가시키는데 유효한 것인 방법.
  81. 제75항 또는 제76항에 있어서, 방법이 상기 환자에서 장 장벽 기능을 개선시키는데 유효한 것인 방법.
  82. 제75항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 피하로 투여되는 것인 방법.
  83. 제82항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 피하로 투여되는 것인 방법.
  84. 제82항 또는 제83항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 방법.
  85. 제75항 내지 제81항 중 어느 한 항에 있어서, 제2항 또는 제3항의 GLP-2 펩티바디가 정맥내로 투여되는 것인 방법.
  86. 제85항에 있어서, GLP-2 펩티바디가 2-14일마다 1회 0.02 내지 5.0 mg/kg의 투약량 레지멘에 따라 정맥내로 투여되는 것인 방법.
  87. 제85항 또는 제86항에 있어서, 투여된 GLP-2 펩티바디가 10 내지 200 mg/mL의 농도 내에 있는 것인 방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070161087A1 (en) * 2003-05-29 2007-07-12 Wolfgang Glaesner Glp-1 fusion proteins
AU2006321743A1 (en) * 2005-10-24 2007-06-14 Centocor, Inc. GLP-2 mimetibodies, polypeptides, compositions, methods and uses
KR101895047B1 (ko) * 2011-12-30 2018-09-06 한미사이언스 주식회사 면역글로불린 단편을 이용한 위치 특이적 글루카곤 유사 펩타이드-2 약물 결합체
KR101825048B1 (ko) * 2014-12-31 2018-02-05 주식회사 제넥신 GLP 및 면역글로불린 하이브리드 Fc 융합 폴리펩타이드 및 이의 용도
CN107987170B (zh) * 2016-10-27 2018-12-18 浙江道尔生物科技有限公司 一种用于治疗肠道疾病的融合蛋白
US20200199192A1 (en) * 2017-08-22 2020-06-25 Shire-Nps Pharmaceuticals, Inc. Glp-2 fusion polypeptides and uses for treating and preventing gastrointestinal conditions
MX2020004620A (es) * 2017-11-06 2020-10-12 Shire Nps Pharmaceuticals Inc Analogos y pepticuerpos de peptido 2 similar a glucagon (glp-2) para administracion antes, durante o despues de cirugia.

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