KR20210071944A - 인플라마솜 관련 질환 또는 상태 치료용 조성물 및 방법 - Google Patents

인플라마솜 관련 질환 또는 상태 치료용 조성물 및 방법 Download PDF

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로버트 더블유. 킨
더블유. 달톤 디트리치
리베로 바카리 후안 파블로 데
헬렌 엠. 브람레트
로버타 브람빌라
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더 유니버시티 오브 마이애미
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Abstract

본 출원에서 기재된 조성물 및 방법은 단독으로 또는 세포외 소포 흡수 억제제(들)와 조합하여 사용되는 인플라마솜 성분에 대해 지시되는 항체와 같은 포유 동물에서 인플라마솜 신호 전달을 억제하는 제제를 포함한다. 인플라마솜 관련 질환 또는 병태를 치료하기 위한 조성물 및 이의 사용 방법도 또한 본 출원에서 기재된다.

Description

인플라마솜 관련 질환 또는 상태 치료용 조성물 및 방법
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 모든 목적을 위해 그 전문이 본 출원에 참조로 포함되는 2018년 7월 3일자로 출원된 미국 출원 일련 번호 16/026,482에 대한 우선권을 주장한다.
연방 정부 후원 연구에 관한 진술
본 발명은 미국 국립 신경 질환 및 뇌졸중 연구소 (National Institute of Neurological Disorders and Stroke: NINDS)에 의해 수여되는 승인 번호 4R42BS086274-02 뿐만 아니라 미국 국립 보건원 (National Institute of Health)에 의해 수여되는 승인 번호 5R42NS086274-03에 따라 미국 정부 지원으로 이루어졌다. 미국 정부는 본 발명의 특정 권리들을 갖는다.
전자적으로 제출된 텍스트 파일의 설명
본 출원과 함께 전자적으로 제출된 텍스트 파일의 내용은 그 전체가 본 출원에 참조로 포함된다: 서열 목록의 컴퓨터 판독 가능한 형식 사본 (파일명: UNMI_010_02WO_SeqList_ST25.txt, 기록 일자: 2019년 7월 3일, 파일 크기 약 19.5 킬로바이트).
기술분야
본 발명은 일반적으로 면역학 및 의학 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 중추 신경계 (Central Nervous System: CNS) 및/또는 폐에서 염증을 발생시키는 손상 또는 병태에 대응하여 염증을 감소시키기 위한 치료제로서 포유 동물의 CNS 및/또는 폐에서 카스파아제 활성화 동원 도메인 (Caspase Activating Recruitment Domain: CARD)을 함유하는 아폽토시스 관련 Speck 유사 단백질) (Apoptosis-associated Speck-like protein containing a CARD: ASC) 활성 및 앱센트 인 멜라노마 2 (Absent in Melanoma 2: AIM2) 인플라마솜 활성을 조절하기 위한 조성물 및 방법에 관한 것이다. 본 발명은 또한 ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 단편에 관한 것이다.
중증 외상성 뇌 손상 (Traumatic Brain Injury: TBI)은 주요한 공중 보건 관심사이며, 전세계적으로 사망률 및 이환율의 가장 중요 원인이다 (문헌 [Summers, C.R. et al., (2009). Traumatic brain injury in the United States: an epidemiologic overview. Mt Sinai J Med 76, 105-110]). 뇌에 대한 직접 손상에 추가하여, TBI는 폐와 같은 다른 장기에 합병증을 초래할 수 있다. 급성 폐 손상 (Acute Lung Injury: ALI; 2)은 외상 후 흔한 심폐 문제이며, 40%에 이르는 병원 사망률과 관련되어 있다 (문헌 [Rincon F. et al., (2012). Impact of acute lung injury and acute respiratory distress syndrome after traumatic brain injury in the United States. Neurosurgery 71, 795-803]). 특히, TBI 환자는 ALI를 발병하기 쉬우며, 일부 연구는 30% 만큼 높은 발병률을 보고하였다 (문헌 [Nicolls, M.R. et al., (2014). Traumatic brain injury: lungs in a RAGE. Sci Transl Med 6, 252fs234]). 최근 연구는 전신 염증성 인자가 TBI 후 폐 기능 장애 및 폐 손상을 초래할 수 있지만 (문헌 [Rincon F. et al., (2012). Impact of acute lung injury and acute respiratory distress syndrome after traumatic brain injury in the United States. Neurosurgery 71, 795-803]), TBI 유도성 폐 손상의 기저를 이루는 정확한 분자 기전은 여전히 충분하게 정의되지 않고 있다는 것을 나타냈다.
손상된 세포에 의해 방출되는 사이토카인, 케모카인 및 손상 관련 분자 패턴 (damage-associated molecular pattern: DAMP)을 비롯한 분비된 염증성 매개체의 폭주는 뇌 염증에 기여하며, 폐와 같은 원위 장기에 영향을 미친다 (문헌 [Nicolls, M.R. et al., (2014). Traumatic brain injury: lungs in a RAGE. Sci Transl Med 6, 252fs234]). 가장 널리 연구된 DAMP 중 하나는 고 이동성 그룹 박스-1 (high mobility group box-1: HMGB1)이며, 이는 TBI를 비롯한 다양한 병원성 상태에서 염증의 조기 매개체의 역할을 할 수 있다 (문헌 [Andersson U. et al., (2011). Introduction: HMGB1 in inflammation and innate immunity. J Intern Med 270, 296-300]). 보다 최근 연구는 HMGB1이 TBI 유도성 폐 기능 장애의 기전에 관여할 수 있다는 것을 나타냈다 (문헌 [Weber et al., (2014). The HMGB1-RAGE axis mediates traumatic brain injury-induced pulmonary dysfunction in lung transplantation. Sci Transl Med 6, 252ra124]). HMGB1 방출은 TBI 후 카스파제-1의 활성화 및 IL-1β 및 IL-18의 가공에 관여하는 다중 단백질 복합체인 인플라마솜에 의해 조절될 수 있다 (문헌 [Lu et al. (2012). Novel role of PKR in inflammasome activation and HMGB1 release. Nature 488, 670-674]).
모세혈관 누출을 초래하는 혈관 투과성의 증가 및 단백질성 잔해물의 침윤을 비롯한 TBI 후 폐 합병증의 병리 기전을 설명하는 다양한 설명이 제시되었다 (문헌 [Ware et al., (2000). The Acute Respiratory Distress Syndrome. New England Journal of Medicine 342, 1334-1349]). 세포외 소포 (extracellular vesicle: EV)는 세포 대 세포 소통에서 역할을 하는 막 함유 소포이며 (문헌 [Yanez-Mo, M. et al., (2015). Biological properties of extracellular vesicles and their physiological functions. J Extracell Vesicles 4, 27066]), LPS 유도성 쥐과 동물 모델에서 ALI의 발병에 역할을 하는 것으로 연루되어 있었다. 또한, EV는 IL-1β 및 인플라마솜 단백질과 같은 생물 활성 사이토카인을 운반할 수 있고 (문헌 [Qu, Y. et al., (2007). Nonclassical IL-1 beta secretion stimulated by P2X7 receptors is dependent on inflammasome activation and correlated with exosome release in murine macrophages. J Immunol 179, 1913-1925] 및 [de Rivero Vaccari, J.P. et al., (2015). Exosome-mediated inflammasome signaling after central nervous system injury. J Neurochem]), 면역 반응을 촉발시키키고 인접 및 주위 세포에 이의 카고 (cargo)를 통해 염증을 증폭시킬 수 있는 것으로 나타났다. 그러나, EV 매개성 인플라마솜 신호 전달이 TBI 유도성 ALI의 병리 기전에 기여할 수 있는지는 공지되어 있지 않다. 또한, TBI 유도성 ALI의 병리 기전이 폐 염증을 발생시키는 다른 병태에 의해 공유되는지도 또한 공지되어 있지 않다. 추가로, 미국 연방 의약국 (Federal Drug Administration: FDA)의 폐 염증 치료용 약물 승인은 드물다.
따라서, TBI에 기인하는 폐 염증 및 다른 병태의 병리 기전 규명 뿐만 아니라 폐 염증을 치료 및/또는 예방하기 위한 치료학적 조성물 및 이의 용도의 개발에 대한 긴급한 필요성이 있다.
개요
하나의 양태에서, 카스파아제 활성화 동원 도메인을 함유하는 아폽토시스 관련 Spec 유사 단백질 (ASC)에 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 항체 단편은 ASC의 에피토프에 특이적으로 결합하고, 상기 에피토프는 서열 번호 5의 아미노산 서열 또는 서열 번호 5의 5~10, 10~15 또는 15~20개의 아미노산을 포함하거나 이들로 이루어진다.
또 다른 양태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22, 또는 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 ASC는 사람 ASC 단백질이다. 일부 경우에서, 상기 항체 단편은 Fab, F(ab')2, Fab', scFv, 단일 도메인 항체, 디아바디 또는 단일 쇄 카멜리드 (camelid) 항체 또는 샤크 항체 (shark antibody)이다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 사람, 사람화 또는 키메라 형태이다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 인코딩하는 단리된 핵산 분자가 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 상기 핵산 분자를 포함하는 발현 벡터가 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 상기 핵산 분자는 숙주 세포에서 핵산 분절의 발현에 적합한 조절 서열에 작동적으로 연결되어 있다. 일부 경우에서, 상기 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포가 본 출원에서 제공된다. 또 다른 양태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 생산하는 방법이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 방법은 상기 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포를, 핵산 분자가 발현되는 조건하에 배양하여 ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 생산하는 단계를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편와 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 대상체에서 염증을 치료하는 방법이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 방법은 치료학적 유효량의 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 염증을 치료하는 단계를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시킨다. 일부 경우에서, 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증이다. 일부 경우에서, 상기 인플라마솜 관련 염증은 중추 신경계 (CNS) 손상, 자가 면역, 자가 염증성, 대사성 또는 신경 퇴행성 질환과 관련된다. 일부 경우에서, 상기 CNS 손상은 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (spinal cord injury: SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 경우에서, 상기 자가 면역 또는 신경 퇴행성 질환은 근위축성 측삭 경화증 (amyotrophic lateral sclerosis: ALS), 알츠하이머병, 파킨슨병, 근위축증 (muscular dystrophy: MD), 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염) 또는 다발성 경화증 (multiple sclerosis: MS)이다. 일부 경우에서, 상기 인플라마솜 관련 염증은 대사성 질환 또는 장애와 관련되어 있다. 일부 경우에서, 상기 대사성 질환은 대사성 증후군, 비만, 진성 당뇨병, 당뇨병성 신병증 또는 당뇨병성 신장 질환 (diabetic kidney disease: DKD), 인슐린 저항성, 죽상 동맥 경화증, 지질 저장 장애, 글리코겐 저장 질환, 중쇄 아실-코엔자임 A 데하이드로게나아제 결핍, 비알코올성 지방간 질환 (예를 들어, 비알코올성 지방 간염 (nonalcoholic steatohepatitis: NASH)) 및 통풍이다. 일부 경우에서, 상기 자가 염증성 질환은 크리오피린 관련 주기적 증후군 (cryopyrin-associated periodic syndrome: CAPS)이다. CAPS는 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (familial cold autoinflammatory syndrome: FCAS), 머클-웰스 증후군 (Muckle-Wells syndrome: MWS) 및 신생아 발현 다발성 염증 질환 (neonatal-onset multisystem inflammatory disease: NOMID)을 포괄할 수 있다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 대조군은 치료되지 않은 대상체이다. 일부 경우에서, 상기 투여는 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어진다. 일부 경우에서, 대상체에서 다발성 경화증 (MS)을 치료하는 방법이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 방법은 치료학적 유효량의 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 MS를 치료하는 단계를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시킨다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 대조군은 치료되지 않은 대상체이다. 일부 경우에서, 상기 투여는 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어진다.
더 또 다른 양태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 항체 단편은 경쇄 가변 (VL) 영역 및 중쇄 가변 (VH) 영역을 포함하고, 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 29, 30 또는 31, 또는 서열 번호 28, 29, 30 또는 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 ASC는 사람 ASC 단백질이다. 일부 경우에서, 상기 항체 단편은 Fab, F(ab')2, Fab', scFv, 단일 도메인 항체, 디아바디 또는 단일 쇄 카멜리드 항체이다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 사람, 사람화 또는 키메라 형태이다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 인코딩하는 단리된 핵산 분자가 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 상기 핵산 분자를 포함하는 발현 벡터가 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 상기 핵산 분자는 숙주 세포에서 핵산 분절의 발현에 적합한 조절 서열에 작동적으로 연결되어 있다. 일부 경우에서, 상기 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포가 본 출원에서 제공된다. 또 다른 양태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 생산하는 방법이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 방법은 상기 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포를, 핵산 분자가 발현되는 조건하에 배양하여 ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 생산하는 단계를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편와 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 대상체에서 염증을 치료하는 방법이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 방법은 치료학적 유효량의 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 염증을 치료하는 단계를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시킨다. 일부 경우에서, 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증이다. 일부 경우에서, 상기 인플라마솜 관련 염증은 중추 신경계 (CNS) 손상, 자가 면역, 자가 염증성, 대사성 또는 신경 퇴행성 질환과 관련된다. 일부 경우에서, 상기 CNS 손상은 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 경우에서, 상기 자가 면역 또는 신경 퇴행성 질환은 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 알츠하이머병, 파킨슨병, 근위축증 (MD), 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염) 또는 다발성 경화증 (MS)이다. 일부 경우에서, 상기 인플라마솜 관련 염증은 대사성 질환 또는 장애와 관련되어 있다. 일부 경우에서, 상기 대사성 질환은 대사성 증후군, 비만, 진성 당뇨병, 당뇨병성 신병증 또는 당뇨병성 신장 질환 (DKD), 인슐린 저항성, 죽상 동맥 경화증, 지질 저장 장애, 글리코겐 저장 질환, 중쇄 아실-코엔자임 A 데하이드로게나아제 결핍, 비알코올성 지방간 질환 (예를 들어, 비알코올성 지방 간염 (NASH)) 및 통풍이다. 일부 경우에서, 상기 자가 염증성 질환은 크리오피린 관련 주기적 증후군 (CAPS)이다. CAPS는 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (FCAS), 머클-웰스 증후군 (MWS) 및 신생아 발현 다발성 염증 질환 (NOMID)을 포괄할 수 있다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 대조군은 치료되지 않은 대상체이다. 일부 경우에서, 상기 투여는 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어진다. 일부 경우에서, 대상체에서 다발성 경화증 (MS)을 치료하는 방법이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 방법은 치료학적 유효량의 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 MS를 치료하는 단계를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시킨다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 대조군은 치료되지 않은 대상체이다. 일부 경우에서, 상기 투여는 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어진다.
더 또 다른 양태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22, 또는 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 29, 30 또는 31, 또는 서열 번호 28, 29, 30 또는 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 ASC는 사람 ASC 단백질이다. 일부 경우에서, 상기 항체 단편은 Fab, F(ab')2, Fab', scFv, 단일 도메인 항체, 디아바디 또는 단일 쇄 카멜리드 항체이다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 사람, 사람화 또는 키메라 형태이다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 인코딩하는 단리된 핵산 분자가 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 상기 핵산 분자를 포함하는 발현 벡터가 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 상기 핵산 분자는 숙주 세포에서 핵산 분절의 발현에 적합한 조절 서열에 작동적으로 연결되어 있다. 일부 경우에서, 상기 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포가 본 출원에서 제공된다. 또 다른 양태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 생산하는 방법이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 방법은 상기 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포를, 핵산 분자가 발현되는 조건하에 배양하여 ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 생산하는 단계를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편와 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물이 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 대상체에서 염증을 치료하는 방법이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 방법은 치료학적 유효량의 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 염증을 치료하는 단계를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시킨다. 일부 경우에서, 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증이다. 일부 경우에서, 상기 인플라마솜 관련 염증은 중추 신경계 (CNS) 손상, 자가 면역, 자가 염증성, 대사성 또는 신경 퇴행성 질환과 관련된다. 일부 경우에서, 상기 CNS 손상은 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 일부 경우에서, 상기 자가 면역 또는 신경 퇴행성 질환은 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 알츠하이머병, 파킨슨병, 근위축증 (MD), 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염) 또는 다발성 경화증 (MS)이다. 일부 경우에서, 상기 인플라마솜 관련 염증은 대사성 질환 또는 장애와 관련되어 있다. 일부 경우에서, 상기 대사성 질환은 대사성 증후군, 비만, 진성 당뇨병, 당뇨병성 신병증 또는 당뇨병성 신장 질환 (DKD), 인슐린 저항성, 죽상 동맥 경화증, 지질 저장 장애, 글리코겐 저장 질환, 중쇄 아실-코엔자임 A 데하이드로게나아제 결핍, 비알코올성 지방간 질환 (예를 들어, 비알코올성 지방 간염 (NASH)) 및 통풍이다. 일부 경우에서, 상기 자가 염증성 질환은 크리오피린 관련 주기적 증후군 (CAPS)이다. CCAPS는 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (FCAS), 머클-웰스 증후군 (MWS) 및 신생아 발현 다발성 염증 질환 (NOMID)을 포괄할 수 있다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 대조군은 치료되지 않은 대상체이다. 일부 경우에서, 상기 투여는 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어진다. 일부 경우에서, 대상체에서 다발성 경화증 (MS)을 치료하는 방법이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 방법은 치료학적 유효량의 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 MS를 치료하는 단계를 포함한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시킨다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여는 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래한다. 일부 경우에서, 상기 대조군은 치료되지 않은 대상체이다. 일부 경우에서, 상기 투여는 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어진다.
도 1a~1n은 TBI 후 C57/BL6 마우스 피질 및 폐 조직의 인플라마솜 활성화를 예시한 것이다. 도 1a는 TBI 후 활성 카스파아제-1, ASC, IL-18, IL-β, HMGB1 및 AIM2의 대표적인 면역 블롯을 도시한 것이다. 활성 카스파아제-1 (도 1b), ASC (도 1c), IL-18 (도 1d), HMGB1 (도 1e), AIM2 (도 1f) 및 IL-β (도 1g)는 TBI 후 4 및 24 시간에 피질 조직에서 유의하게 상승한다. 데이터는 평균+/-SEM으로서 표시되었다; 가성 (sham)과 비교하여 ****p<0.001, ***p<0.01, **p<0.01, *p<0.05. 그룹 당 N= 4~5. 도 1h는 폐 조직에서 활성 카스파아제-1, ASC, IL-18, IL-β, HMGB1 및 AIM2의 대표적인 면역 블롯을 도시한 것이다. i, j, k, l, m, n) 활성 카스파아제-1 (도 1i), ASC (도 1j), IL-18 (도 1k), HMGB1 (도 1l), AIM2 (도 1m) 및 IL-β (도 1n)는 TBI 후 4 및 24 시간에 폐 조직에서 유의하게 상승한다. 데이터는 평균+/-SEM으로서 표시되었다. 그룹 당 N= 4~5, 가성과 비교하여 ****p<0.001, ***p<0.01, **p<0.01, *p<0.05.
도 2a~2c는 II형 폐포 상피 세포에서 인플라마솜 단백질의 발현을 예시한 것이다. 도 2a는 AIM2를 도시한 것이고, 도 2b는 활성 카스파아제-1을 도시한 것이고, 도 2c는 마우스와 비교될 때 CCI 후 (4, 24 시간) 폐 조직에서 ASC 면역 반응성 증가를 도시한 것이다. AIM2, 카스파아제-1 및 ASC (녹색) 및 II형 상피 세포 (계면 활성제 단백질 C, 적색)의 공초점 이미지.
도 3a~3e는 TBI가 마우스 폐에서 핵 및 세포질 HMGB1 발현을 증가시킨다는 것을 예시한 것이다. 도 3a는 TBI 후 핵 HMGB1의 대표적인 면역 블롯을 도시한 것이다. 도 3b는 핵 HMGB1이 가성과 비교하여 4 시간 손상된 동물에서 유의하게 상승하는 것을 도시한 것이다. 도 3c는 TBI 후 세포질 HMGB1의 대표적인 면역 블롯을 도시한 것이다. 도 3d는 세포질 HMGB1이 가성과 비교하여 4 시간 손상된 동물에서 유의하게 상승하는 것을 도시한 것이다. 데이터는 평균+/-SEM으로 표시되었다; 가성과 비교하여 *p<0.05. 그룹 당 N= 4~5. 도 3e는 HMGB1 면역 반응성이 가성 마우스와 비교될 때 CCI 후 폐 조직에서 증가하였다는 것을 도시한 것이다. HMGB1 및 II형 상피 세포 (계면 활성제 단백질 C, 적색)의 공초점 이미지.
도 4a~4c는 TBI 후 4 시간에 마우스 폐에서 파이롭토솜 (pyroptosome) 형성을 예시한 것이다. 도 4a는 TBI가 폐 조직에서 ASC의 래더링 (laddering)을 유도하는 것을 도시한 것인데, 이는 카스파아제-1의 활성화 및 파이롭토시스를 초래하는 ASC 이량체의 올리고머화인 파이롭토솜 형성을 나타낸다. 도 4b는 대표적인 면역 블롯을 도시한 것이고, 도 4c는 가스더민의 정량화를 도시한 것이다. 가스더민 D는 TBI 후 폐 조직에서 유의하게 상승한다. 데이터는 평균+/-SEM으로서 표시되었다. 그룹 당 N= 4~5, 가성과 비교하여 **p<0.01.
도 5a~5b는 TBI가 마우스에서 폐포 형태학적 변화 및 급성 폐 손상을 유도하는 것을 도시한 것이다. 도 5a는 4 시간 및 24 시간에 가성 및 손상된 동물로부터의 폐 절편의 H&E 염색을 도시한 것이다. 절편은 호중구 침윤 (화살표 머리), 폐포 모세혈관 막의 형태 변화 (별표, *), 간질성 부종 (짧은 화살표)의 증거, 및 간질 및 폐포 중격의 비후 (파운드, #)의 증거를 도시한 것이다. 도 5b는 급성 폐 손상 점수가 4 시간 및 24 시간에 가성과 비교될 때 손상된 동물에서 유의하게 증가하는 것을 도시한 것이다. 데이터는 평균+/-SEM으로서 표시되었다. 그룹 당 N= 4~5, 가성과 비교하여 *p<0.05.
도 6은 대조군 및 TBI 손상된 마우스로부터의 혈청 유래 EV에서 CD81의 발현을 예시한 것이다. 가성 대조군 및 TBI 손상된 마우스로부터의 혈청 유래 EV에서 CD81의 대표적인 면역 블롯.
도 7a~7g는 TBI 동물로부터의 EV의 입양 전이가 손상되지 않은 마우스의 폐에서 카스파아제-1 및 ASC를 유도하는 것을 예시한 것이다. 도 7a는 가성 동물로부터의 EV와 비교될 때 카스파아제-1 (도 7b), ASC (도 7c), IL-18 (도 7d), AIM2 (도 7e), HMGB1 (도 7f)이 TBI 마우스로부터 단리된 EV를 투여받은 동물의 폐에서 상승하는 것을 도시하는 대표적인 면역 블롯을 예시한 것이다. 데이터는 평균+/-SEM으로 표시되었다; 가성과 비교하여 *p<.0.05. 그룹 당 N= 3. BI 마우스로부터의 EV는 H&E 염색에 의해 결정될 때 폐포 형태학적 변화 (폐포 크기 감소) 및 염증성 세포의 침윤을 유도하였다 (도 7g). ALI 점수는 손상되지 않은 마우스와 비교하여 손상된 마우스로부터 전달된 EV에서 유의하게 증가한다 (도 7g). 데이터는 평균+/-SEM으로 표시되었다; 손상되지 않은 그룹과 비교하여 **p<0.01., *p<.0.05.
도 8a~8f는 에녹사파린 (3 mg/kg) 및 IC 100 (5 mg/kg)에 의한 처리가 손상된 마우스로부터 EV를 전달받은 동물의 폐에서 인플라마솜 발현을 감소시킨다는 것을 예시한 것이다. 도 8a는 미처리 양성 대조군 동물과 비교될 때 카스파아제-1 (도 8b), ASC (도 8c), IL-1β (도 8d), AIM2 (도 8e), HMGB1 (도 8f)가 에녹사파린 및 IC 100으로 처리된 동물의 폐에서 감소하는 것을 도시하는 대표적인 면역 블롯을 예시한 것이다. 데이터는 평균+/-SEM으로서 표시되었다; 가성 (sham)과 비교하여 ****p<0.001, ***p<0.01, **p<0.01, *p<0.05. 그룹 당 N= 4.
도 9a~9e는 에녹사파린 (3 mg/kg) 및 IC 100 (5 mg/kg)에 의한 처리가 손상된 마우스로부터 EV를 전달받은 동물의 폐에서 ALI 점수를 감소시킨다는 것을 예시한 것이다. 도 9a~9d는 손상된 동물로부터 EV를 전달받은 염수 (도 9a), 미처리 (도 9b), 에녹사파린 (도 9c) 및 IC 100 (항-ASC; 도 9d) 처리된 마우스 폐로부터의 폐 절편의 H&E 염색을 예시한 것이다. 절편은 호중구 침윤, 폐포 모세혈관 막의 형태 변화, 간질성 부종의 증거, 및 간질 및 폐포 중격의 비후의 증거를 도시한 것이다. 도 9e는 급성 폐 손상 점수가 미처리 동물과 비교될 때 에녹사파린, IC 100으로 처리된 동물에서 유의하게 감소된 것을 예시한 것이다. 데이터는 평균+/-SEM으로서 표시되었다. 그룹 당 N= 4, ****p<0.01, *p<0.05.
도 10a~10f는 TBI 환자로부터의 혈청 유래 EV의 전달이 폐 내피 세포에서 증가된 인플라마솜 단백질 발현을 초래하는 것을 예시한 것이다. 도 10a는 4 시간 동안 TBI-EV 및 대조군-EV에 의한 인큐베이션 후 PMVEC에서 카스파아제-1, ASC, AIM2, HMGB1의 웨스턴 블롯 재현을 도시한 것이다. 도 10b~10e는 웨스턴 블롯의 정량화를 도시한 것이다, 그룹 당 n=3 필터, n=6 환자, t 검정, ****p<0.001, ***p<0.01, **p<0.01, *p<0.05. 도 10f는 Ella 간단 플렉스 분석 (Ella simple plex assay)을 사용하는 IL-1β 발현의 유의한 증가의 면역 분석 결과를 도시한 것이다, 그룹 당 n=3 필터, n=6 환자, t 검정, ****p<0.001, ***p<0.01, **p<0.01, *p<0.05.
도 11a~11c는 폐 내피 세포에 대한 TBI-EV의 전달이 활성 카스파아제-1의 면역 반응성 및 세포 사멸을 증가시키는 것을 예시한 것이다. 도 11a는 4 시간 동안 TBI-EV로 인큐베이션된 카스파아제-1 FLICA 및 PI 염색 및 PMVEC의 공동 국소화를 도시한 것이다. 도 11b는 4 시간 동안 대조군-EV로 인큐베이션된 PMVEC에서 카스파아제-1 FLICA 및 PI 염색을 도시한 것이다. 도 11c는 4 시간 동안 TBI 및 대조군-EV로 인큐베이션된 PMVEC의 형광성 플레이트 판독기 분석을 도시한 것이다. n=6, ***p<0.05.
도 12a~12e는 사람화 항-ASC 단클론 항체 (즉, IC 100)에 의한 처리가 EAE에서 기능적 결과를 개선시키는 것을 예시한 것이다. 도 12a는 비히클 또는 증가 용량의 IC 100으로 처리된 C57BL/6 마우스에서 MOG35-55 유도된 EAE의 임상 경과를 도시한 것이다. IC 100 (4일마다 10, 30 및 45 mg/Kg i.p.)의 투여는 마우스가 마비 징후를 나타내기 8일 전에 개시되었다. 결과는 9~10 마리 마우스/그룹의 일일 평균 임상 점수 ± SEM으로 표현된다. 30 및 45 mg/Kg 곡선은 비히클 곡선과 유의하게 상이하다; **p≤0.001 맨-휘트니 검정. 도 12b는 그룹 간 최고 임상 점수 (마우스가 도달한 최고 질병 점수)의 비교를 도시한 것이다; *p≤0.05, 스튜던트 t 검정. 도 12c는 그룹 간 누적 질병 지수 (Cumulative Disease Index: CDI)의 비교를 도시한 것이다. CDI는 각 동물에 대한 발병일부터 모든 점수의 합계와 같으며 EAE 중증도의 척도이다; *p≤0.05, 스튜던트 t 검정. 도 12d는 그룹 간 발병일의 비교를 도시한 것이다. 발병일은 마우스가 첫 번째 EAE 증상을 보이는 날로 간주된다. 도 12e는 그룹 간 최고 질병일의 비교를 도시한 것이다. 최고 질병일은 마우스가 최고 질병 점수에 도달한 날이다. 발병일은 마우스가 첫 번째 EAE 증상을 보이는 날로 간주된다.
도 13a~13b는 IC 100 처리가 EAE 후 척수 또는 비장으로의 말초 면역 세포 침윤을 감소시키는 것을 예시한 것이다. EAE 후 35 dpi에서 척수 (도 13a)로 침윤되거나 비장 (도 13b)에 존재하는 백혈구 집단의 유세포 계측 정량화. 결과는 5 마리 마우스/그룹의 평균 ± SEM, p<0.05, **p<0.001, 스튜던트 t 검정으로 표현된다.
도 14는 IC 100 처리가 EAE 후 척수에서 미세 아교 세포를 감소시키는 것을 예시한 것이다. EAE 후 35 dpi에서 척수내 총 미세 아교 세포 및 MHCII+ 활성화 미세 아교 세포의 유세포 계측 정량화. 결과는 5 마리 마우스/그룹의 평균 ± SEM, p<0.05, 스튜던트 t 검정으로 표현된다.
도 15는 조직내 IC 100 농도를 예시한 것이다. EAE 후 35 dpi에서 10, 30 및 45 mg/kg의 IC 100으로 처리된 마우스 및 대조군 마우스의 뇌, 척수, 간 및 비장내 IC 100의 농도 (pg/ml). 평균 ± SEM으로 나타낸 데이터. N = 2~10/그룹 당 마우스.
도 16은 IC 100이 비자극 THP-1 세포에서 ASC speck 내로 흡수되고 흡수가 인플라마솜 활성화에 의해 증가되는 것을 예시한 것이다.
도 17은 IC 100이 THP-1 세포로부터 IL1- 베타 방출을 방지한 것을 예시한 것이다.
도 18은 항-ASC 항체 (IC 100)가 척수 뉴런을 관통하는 것을 예시하는 척수 뉴런의 공초점 이미지를 도시한 것이다.
도 19는 사람 ASC 대 상이한 종에 대한 3개의 상이한 항체의 항체 결합의 비교를 예시한 것이다.
도 20은 사람 속질핵 세포에서 니코틴 (500 nM)에 의한 인플라마솜 유도 및 사람 ASC에 대한 3개의 상이한 항체 (H1, H2, H3)와 마우스 ASC에 대한 2개의 상이한 항체 (M1, M2)에 의한 처리를 예시한 것이다. H1은 IL-1 베타 방출/인플라마솜 활성화를 예방하는데 가장 효과적이었다.
도 21은 항-ASC 단클론 항체에 대한 미가공 BLI 동력학 분석 데이터를 예시한 것이다.
도 22는 사람 ASC에 대한 3개의 상이한 항체의 동력학 비교를 예시한 것이다.
정의
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본 개시 내용 전체에 걸쳐, 본 출원에서 제공된 방법 및 조성물의 다양한 양태는 범위 형식으로 제시될 수 있다. 범위 형식의 기재는 단지 편의성과 간결성을 기하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위에 대한 융통성 없는 한정으로 해석되어서는 안된다는 것을 이해해야 한다. 따라서, 범위에 대한 기재는 가능한 모든 하위 범위 뿐만 아니라 해당 범위 내의 개별 수치를 구체적으로 개시한 것으로 간주되어야 한다. 예를 들어, 1 내지 6과 같은 범위에 대한 기재는 1 내지 3, 1 내지 4, 1 내지 5, 2 내지 4, 2 내지 6, 3 내지 6 등과 같은 하위 범위 뿐만 아니라 해당 범위 내의 개별 수치, 예를 들어, 1, 2, 3, 4, 5 및 6을 구체적으로 개시한 것으로 간주되어야 한다. 이것은 범위의 폭에 관계없이 적용된다.
본 출원에서 사용되는 "단백질" 및 "폴리펩타이드"라는 용어는 길이 또는 번역후 변형, 예를 들어, 글리코실화 또는 인산화에 관계없이 아미노산의 임의의 펩타이드 연결 쇄를 의미하기 위해 동의어로 사용된다.
본 출원에서 사용되는 "항체"라는 용어는 일반적으로 광범위하게 면역글로불린 (Ig) 분자 및 면역글로불린 분자의 면역학적 활성 부분 또는 단편, 즉, 항원에 특이적으로 결합하는 (항원과 면역 반응하는) 항원 결합 부위를 포함하는 분자 (예를 들어, ASC, NLRP1, AIM2 등)를 지칭한다. 본 출원에서 제공된 항체는 다클론 항체, 단클론 항체 (mAb), 키메라 항체, 사람화 항체, 가용성 또는 결합 형태로 라벨링될 수 있는 항체에 대한 항-이디오타입 (항-Id) 항체 뿐만 아니라 이의 활성 단편, 영역 또는 유도체일 수 있다. 본 출원에서 사용하기 위한 항체는 본 출원에 키메라, 사람화 또는 사람 형태일 수 있다.
"특이적으로 결합한다" 또는 "~와 면역 반응한다"는, 항체가 목적하는 항원의 하나 이상의 항원 결정 인자와 반응하고 다른 폴리펩타이드와 반응하지 않는다는 것을 의미한다. 특정 실시 형태에서, 항체는 단백질 및/또는 거대 분자의 복합 혼합물에서 이의 표적 항원을 우선적으로 인식할 때 항원에 특이적으로 결합한다고 한다. "항체"라는 용어는 대략적으로 2개의 중쇄 (H) 및 2개의 경쇄 (L)인 4개의 폴리펩타이드 쇄를 일반적으로 포함하는 면역글로불린 (Ig) 분자, 또는 Ig 분자의 필수 표적 결합 특징을 보유하는 이의 임의의 기능성 단편, 돌연변이체, 변이체 또는 유도체를 지칭한다. 이러한 돌연변이체, 변이체 또는 유도체 항체 형식은 당해 분야에 공지되어 있다. 본 발명의 이러한 항-ASC 및 항-NLRP1 항체는 각각 ASC 및 NLRP1의 일부에 결합할 수 있으며, 이는 카스파아제-1 활성화를 방해한다.
본 출원에서 사용되는 "사람화 항체"라는 용어는, 비-사람 항체의 최소 부분이 다른 사람 항체 내에 도입되는 항체를 지칭한다.
본 출원에서 사용되는 "사람 항체"라는 용어는, 단백질의 실질적으로 모든 부분이 사람에서 실질적으로 비면역원성이고 최소의 서열 변화 또는 변형만을 갖는 항체를 지칭한다.
전장 항체에서, 각각의 중쇄는 중쇄 가변 영역 (본 출원에서 HCVR 또는 VH로서 약기됨) 및 중쇄 불변 영역을 포함한다. 상기 중쇄 불변 영역은 CH1, CH2 및 CH3의 3개의 도메인을 포함한다. 각각의 경쇄는 경쇄 가변 영역 (본 출원에서 LCVR 또는 VL로서 약기됨) 및 경쇄 불변 영역을 포함한다. 상기 경쇄 불변 영역은 하나의 도메인 CL을 포함한다. 상기 VH 및 VL 영역은 프레임워크 영역 (framework region: FR)이라 불리는 보다 잘 보존되는 영역과 함께 배치된, 상보성 결정 영역 (complementarity determining region: CDR)이라 불리는 초가변 영역으로 추가로 세분화될 수 있다. 각각의 VH 및 VL은 아미노-말단으로부터 카복시-말단으로 다음 순서로 배열된 3개의 CDR 및 4개의 FR로 구성된다: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. 면역글로불린 분자는 임의의 유형 (예를 들어, IgG, IgE, IgM, IgD, IgA 및 IgY) 및 클래스 (예를 들어, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 및 IgA2) 또는 하위 클래스일 수 있다. IgG, IgD 및 IgE 항체는 일반적으로 2개의 동일한 중쇄 및 2개의 동일한 경쇄 및 2개의 항원 결합 도메인을 포함하며, 이러한 도메인 각각은 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL)으로 구성된다. 일반적으로, IgA 항체는 2개의 단량체로 구성되며, 각각의 단량체는 2개의 중쇄와 2개의 경쇄로 구성되고 (IgG, IgD 및 IgE 항체의 경우); 이러한 방식으로, 상기 IgA 분자는 4개의 항원 결합 도메인을 가지며, 각각은 VH와 VL로 구성된다. 특정 IgA 항체는 2개의 중쇄와 2개의 경쇄로 구성된다는 점에서 단량체성이다. 분비된 IgM 항체는 일반적으로 5개의 단량체로 구성되며, 각각의 단량체는 2개의 중쇄와 2개의 경쇄로 구성되고 (IgG 및 IgE 항체의 경우); 이러한 방식으로, 상기 IgM 분자는 10개의 항원 결합 도메인을 가지며, 각각은 VH와 VL로 구성된다. IgM의 세포 표면 형태도 또한 존재하며, 이것은 IgG, IgD 및 IgE 항체와 유사한 2개의 중쇄/2개의 경쇄 구조를 갖는다.
본 출원에서 사용되는 "항원 결합 단편" 또는 "항원 결합 부분" 또는 "항원 결합 부위" 또는 "결합 도메인" 또는 "결합 영역"이라는 용어는, 항원 (예를 들어, ASC 단백질)에 특이적으로 결합하는 능력을 보유하는 항체로부터 유래된 단백질, 폴리펩타이드, 올리고펩타이드 또는 펩타이드 또는 항체 또는 결합 도메인의 도메인, 영역, 부분 또는 부위를 지칭할 수 있다. 예시적인 결합 도메인으로는 단일 쇄 항체 가변 영역 (예를 들어, 도메인 항체, sFv, scFv, scFab), 항체 부분 (예를 들어, 도메인 항체), 수용체 엑토도메인 및 리간드 (예를 들어, 사이토카인, 케모카인)를 포함하는 융합 단백질이 포함된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 융합 단백질은 하나 이상의 CDR(들)을 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 상기 융합 단백질은 CDR H3 (VH CDR3) 및/또는 CDR L3 (VL CDR3)을 포함한다. 본 발명의 목적상, 융합 단백질은 하나 이상의 항체 및 추가의 아미노산 서열, 예를 들어, 항체 또는 이의 항체 단편의 N- 또는 C-말단에 부착된 또 다른 영역 유래의 이종 서열 또는 상동 서열을 포함한다. 예시적인 이종성 서열로는 FLAG 태그 또는 6His 태그와 같은 "태그", 또는 혈액에서 항체의 반감기를 증가시키는 효소 또는 폴리펩타이드가 포함되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 태그는 당해 분야에 널리 공지되어 있다. 추가의 아미노산 서열은 아미노- 및/또는 카복실-말단 융합물 및 단일 또는 다중 아미노산 잔기의 서열내 삽입물을 포함할 수 있으며, 길이가 1개의 잔기에서부터 100개 이상의 잔기를 포함하는 폴리펩타이드까지일 수 있다.
항원 결합 부위는 일반적으로 중쇄 가변 영역 (VH) 및 경쇄 가변 영역 (VL) 면역글로불린 도메인에 의해 형성될 수 있으며, 상보성 결정 영역 (CDR)으로 불리는 6개의 표면 폴리펩타이드 루프에 의해 형성된 항원 결합 계면을 갖는다. 프레임 워크 영역 (FR)과 함께 VH (HCDR1, HCDR2, HCDR3) 및 VL (LCDR1, LCDR2, LCDR3)에 각각 3개의 CDR이 있다. 특정 실시 형태에서, 상기 결합 도메인은 항원 결합 부위 (예를 들어, 대체 프레임 워크 영역 (FR) (예를 들어, 하나 이상의 아미노산 치환을 임의로 포함하는 사람 FR) 내에 배치된 항체로부터의 가변 중쇄 서열 및 가변 경쇄 서열 또는 3개의 경쇄 상보성 결정 영역 (CDR) 및 3개의 중쇄 CDR을 포함함)를 포함하거나 이로 이루어진다.
"CDR 영역" 또는 "CDR"이라는 용어는 문헌 [Kabat, E. A. et al., (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Edition. US Department of Health and Human Services, Public Service, NIH, Washington] 및 이후 에디션에 정의된 바와 같은 면역글로불린의 중쇄 또는 경쇄의 초가변 영역을 의미할 수 있다. 항체는 전형적으로 3개의 중쇄 CDR 및 3개의 경쇄 CDR을 포함한다.
항체의 항원 결합 기능은 전장 항체의 단편에 의해 수행될 수 있는 것으로 공지되어 있다. 항체 및 항체 단편의 실시 형태는 또한 이중 특이적 (bispecific), 삼중 특이적, 이중 특이적 (dual specific) 또는 다중 특이적 형식일 수 있으며; 2개 이상의 상이한 항원에 특이적으로 결합한다. 항체의 "항원 결합 단편"이라는 용어 내에 포함된 결합 단편의 예로는 다음이 포함된다: (i) VL, VH, CL 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fab 단편 (문헌 [Ward, E. S. et al., (1989) Nature 341, 544-546]); (ii) VH 및 CH1 도메인으로 이루어진 Fd 단편 (문헌 [McCafferty et al., (1990) Nature, 348, 552-554]); (iii) 단일 항체의 VL 및 VH 도메인으로 이루어진 Fv 단편 (문헌 [Holt et al., (2003) Trends in Biotechnology 21, 484-490]); (iv) VH 또는 VL 도메인으로 이루어진 dAb 단편 (문헌 [Ward, E. S. et al., Nature 341, 544-546 (1989)], [McCafferty et al., (1990) Nature, 348, 552-554], [Holt et al., (2003) Trends in Biotechnology 21, 484-490]); (v) 단리된 CDR 영역; (vi) 2개의 연결된 Fab 단편을 포함하는 2가 단편인 F(ab')2 단편; (vii) 단일 쇄 Fv 분자 (scFv), 여기서, VH 도메인 및 VL 도메인은 펩타이드 링커에 의해 연결되어 2개의 도메인이 결합하여 항원 결합 부위를 형성하도록 한다 (문헌 [Bird et al., (1988) Science, 242, 423-426], [Huston et al., (1988) PNAS USA, 85, 5879-5883]). 본 발명은 또한 Fab' 단편을 포함한다. 또한, Fv 단편의 2개의 도메인인 VL과 VH는 별개의 유전자에 의해 코딩되지만, 이들은, 상기 VL 및 VH 영역이 쌍을 이루어 1가 분자 (단일 쇄 Fv (scFv)로 공지됨)를 형성하는 단일 단백질 쇄로 만들어질 수 있도록 하는 합성 링커에 의해, 재조합 방법을 사용하여 결합될 수 있다. 이러한 단일 쇄 항체는 또한 항체의 "항원 결합 단편"이라는 용어 내에 포함되도록 의도된다. 본 발명의 특정 실시 형태에서, scFv 분자는 융합 단백질에 통합될 수 있다. 일부 실시 형태에서, 본 발명은 단일 쇄 카멜리드 항체; (viii) 이중 특이적 단일 쇄 Fv 이량체 (국제출원 PCT/US/92109965) 및 (ix) 유전자 융합에 의해 작제된 다가 또는 다중 특이적 단편인 "디아바디" (국제공개공보 WO 94/13804; 문헌 [Holliger, P. (1993) et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90 6444-6448]). 디아바디는, VH 및 VL 도메인이 단일 폴리펩타이드 쇄 상에서 발현되지만 너무 짧은 링커를 사용하여 동일 쇄 상의 2개의 도메인 사이에 쌍을 이루도록 허용함으로써 상기 도메인들이 또 다른 쇄의 상보적 도메인과 쌍을 이루도록 하여 2개의 항원 결합 부위를 생성하는 2가 이중 특이적 항체이다 (예를 들어, 문헌 [Holliger, P., et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:6444-6448]; [Poljak, R. J., et al. (1994) Structure 2:1121-1123] 참조). 이러한 항체 결합 단편은 당해 분야에 공지되어 있다 (문헌 [Kontermann and Dubel eds., Antibody Engineering (2001) Springer-Verlag. New York. 790 pp.]). 일부 양태에서, 본 발명은 단일 도메인 항체를 포함한다. 일반적으로, 본 출원에서 사용되는 "항체"라는 용어는 "항체 단편"을 포함한다. 항체 단편은 일반적으로 전장 항체의 항원 결합 특성을 보유한다.
Fv, scFv 또는 디아바디 분자는 VH 및 VL 도메인을 연결하는 디설파이드 브릿지의 도입에 의해 안정화될 수 있다 (문헌 [Reiter, Y. et al., Nature Biotech, 14, 1239-1245, 1996]). CH3 도메인에 연결된 scFv를 포함하는 미니바디도 또한 만들어질 수 있다 (문헌 [Hu, S. et al., (1996) Cancer Res., 56, 3055-3061]). 결합 단편의 다른 예는, 항체 힌지 영역 유래의 하나 이상의 시스테인을 포함하는 중쇄 CH1 도메인의 카복실 말단에 수개의 잔기를 첨가함으로써 Fab 단편과 상이한 Fab', 및 불변 도메인의 시스테인 잔기(들)가 유리 티올기를 보유하는 Fab' 단편인 Fab'-SH일 수 있다.
본 출원에서 사용될 때의 "Fv"는 항원 인식 부위와 항원 결합 부위 둘 다를 보유하는 항체의 최소 단편을 지칭할 수 있다. 본 출원에서 사용될 때의 "Fab"는 경쇄의 불변 도메인 및 중쇄의 CH1 도메인을 포함하는 항체의 단편을 지칭할 수 있다. "mAb"라는 용어는 단클론 항체를 지칭한다.
"Fc 영역" 또는 "Fc 도메인"은 세포 상의 항체 수용체 및 보체의 C1q 성분에 대한 결합을 담당하는 공급원 항체의 부분에 상응하거나 이로부터 유래된 폴리펩타이드 서열을 지칭한다. Fc는 단백질 결정을 용이하게 형성할 항체의 단편인 "단편 결정"을 의미한다. 단백질 가수분해성 분해에 의해 최초로 기술된 특유의 단백질 단편은 면역글로불린 단백질의 전반적인 일반 구조를 정의할 수 있다. 문헌에서 최초로 정의된 바와 같이, Fc 단편은 디설파이드 결합된 중쇄 힌지 영역인 CH2 및 CH3 도메인으로 이루어진다. 그러나, 보다 최근에, 상기 용어는 CH3, CH2, 및 제2의 이러한 쇄과 함께 디설파이드 결합된 이량체를 형성하기에 충분한 힌지의 적어도 일부로 이루어진 단일 쇄에 적용되었다. 면역글로불린 구조 및 기능의 검토에 대해서는 문헌 [Putnam, The Plasma Proteins, Vol. V (Academic Press, Inc., 1987), pp. 49-140]; 및 [Padlan, Mol. Immunol. 31:169-217, 1994]을 참조한다. 본 출원에서 사용되는 Fc라는 용어는 자연 발생 서열의 변이체를 포함한다. 하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편)은 변형된 Fc 영역 또는 도메인을 갖는다. 일부 경우에서, 상기 변형된 Fc 영역 또는 도메인은 생성된 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편에 증가된 열 안정성을 부여할 수 있다. 상기 증가된 열 안정성은 증가된 혈청 반감기를 초래할 수 있다. 상기 Fc 영역 또는 도메인은 미국 출원공개 US 2016/0193295에 기재된 바와 같이 변형될 수 있으며, 이의 내용은 본 출원에 참조로 포함된다. 미국 출원공개 US 2016/0193295에 기재된 바와 같이, Fc 영역 또는 도메인은 힌지 영역에서 하나 이상의 시스테인 잔기의 결실 및 하나 이상의 CH3-인터페이스 아미노산의 설프하이드릴 함유 잔기에 의한 치환을 갖도록 변형될 수 있다. 또 다른 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편의 Fc 영역 또는 도메인 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편)은, 그 내용이 본 출원에 참조로 포함되는 문헌 [Wozniak-Knopp G, Stadlmann J, Ruker F (2012) Stabilisation of the Fc Fragment of Human IgG1 by Engineered Intradomain Disulfide Bonds. PLoS ONE 7(1): e30083]에 기재된 바와 같이 Fc 영역을 조작하여 도메인내 디설파이드 결합을 보유함으로써 안정화될 수 있다. 더 또 다른 실시 형태에서, 상기 항체는 본 출원에 참조로 포함되는 국제공개공보 WO 99/58572에 기재된 바와 같이 변형된 Fc 영역을 갖는다. 또 다른 실시 형태에서, 상기 Fc 영역 또는 도메인은 미국 특허 US 9,574,010에 기재된 바와 같이 변형될 수 있으며, 이의 내용은 본 출원에 참조로 포함된다.
"카스파아제 활성화 동원 도메인 (CARD)을 함유하는 아폽토시스 관련 Speck 유사 단백질" 및 "ASC"라는 용어는, ASC 유전자의 발현 산물 또는 이의 이소타입, 또는 ASC와 적어도 65%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 아미노산 서열 동일성을 공유하고 (예를 들어, 사람에서의 NP_037390 (Q9ULZ3-1), NP_660183 (Q9ULZ3-2) 또는 Q9ULZ3-3, 마우스에서의 NP_075747 또는 래트에서의 NP_758825 (BAC43754)) ASC의 기능적 활성을 나타내는 단백질을 의미한다. 단백질의 "기능적 활성"은 단백질의 생리학적 기능과 관련된 임의의 활성이다. ASC의 기능적 활성은, 예를 들어, 카스파아제-1의 활성화 및 세포 사멸의 개시를 위한 단백질의 동원를 포함한다.
"ASC 유전자" 또는 "ASC 핵산"이라는 용어는 본래의 ASC-인코딩 핵산 서열, ASC cDNA가 전사될 수 있는 게놈 서열 및/또는 상기한 것들의 대립 유전자 변이체 및 동족체를 의미한다. 상기 용어는 이중 가닥 DNA, 단일 가닥 DNA 및 RNA를 포함한다.
본 출원에서 사용되는 "인플라마솜"이라는 용어는 카스파아제-1을 활성화시키는 다중 단백질 (예를 들어, 적어도 2개의 단백질) 복합체를 의미한다. 또한, "인플라마솜"이라는 용어는 카스파아제-1 활성을 활성화시켜 결국 IL-1β, IL-18 및 IL-33 가공 및 활성화를 조절하는 다중 단백질 복합체를 지칭한다. 문헌 [Arend et al. 2008]; [Li et al. 2008]; 및 [Martinon et al. 2002]을 참조하며, 이들 각각은 그 전문이 본 출원에 참조로서 포함된다. "NLRP1 인플라마솜", "NALP1 인플라마솜", "NLRP2 인플라마솜", "NALP2 인플라마솜", "NLRP3 인플라마솜", "NALP3 인플라마솜", "NLRC4 인플라마솜", "IPAF 인플라마솜" 또는 "AIM2 인플라마솜"이라는 용어는 적어도 카스파아제-1 및 하나의 어댑터 단백질, 예를 들어, ASC의 단백질 복합체를 의미한다. 예를 들어, "NLRP1 인플라마솜" 및 "NALP1 인플라마솜"이라는 용어는 카스파아제-1의 활성화 및 인터루킨-1β, 인터루킨-18 및 인터루킨-33의 가공을 위한 NLRP1, ASC, 카스파아제-1, 카스파아제-11, XIAP 및 파넥신-1을 포함하는 다중 단백질 복합체를 의미할 수 있다. "NLRP2 인플라마솜" 및 "NALP2 인플라마솜"이라는 용어는 NLRP2 (aka NALP2), ASC 및 카스파아제-1을 포함하는 다중 단백질 복합체를 의미할 수 있는 반면, "NLRP3 인플라마솜" 및 "NALP3 인플라마솜"이란 용어는 NLRP3 (aka NALP3), ASC를 포함하는 다중 단백질 복합체를 의미할 수 있으며, "NLRC4 인플라마솜" 및 "IPAF 인플라마솜"이라는 용어는 NLRC4 (aka IPAF), ASC 및 카스파아제-1을 포함하는 다중 단백질 복합체를 의미할 수 있다. 추가로, "AIM2 인플라마솜"이라는 용어는 AIM2, ASC 및 카스파아제-1을 포함하는 다중 단백질 복합체를 의미할 수 있다.
본 출원에서 사용되는 "서열 동일성"이라는 문구는, 갭 및 삽입물을 고려하여 2개의 서열 (예를 들어, 핵산 서열, 아미노산 서열)이 서브유닛 일치를 최대화하도록 정렬될 때, 상기 2개의 서열의 상응하는 위치에서 동일한 서브유닛의 퍼센트를 의미한다. 서열 동일성은 서열 분석 소프트웨어 (예를 들어, Sequence Analysis Software Package; Accelrys CGC, San Diego, CA)를 사용하여 측정될 수 있다.
"치료학적 유효량" 및 "유효 투약량"이라는 문구는, 치료학적으로 (예를 들어, 임상적으로) 바람직한 결과를 생성하기에 충분한 양을 의미하며; 결과의 정확한 특성은 치료되는 장애의 특성에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 치료되는 장애가 SCI인 경우, 그 결과는 운동 기술 및 보행 기능의 개선, 감소된 척수 병변 등일 수 있다. 본 출원에서 기재된 조성물은 매일 1회 이상 내지 매주 1회 이상 투여될 수 있다. 통상의 기술자는, 질환 또는 장애의 중증도, 이전 치료, 대상체의 전반적인 건강 및/또는 연령 및 존재하는 다른 질환을 포함하지만 이들에 한정되지 않는 특정 요인들이 대상체를 효과적으로 치료하기 위해 요구되는 투약량 및 시기에 영향을 줄 수 있다는 것을 인식할 것이다. 또한, 치료학적 유효량의 본 발명의 조성물에 의한 대상체의 치료는 단일 치료 또는 일련의 치료를 포함할 수 있다.
본 출원에서 사용되는 "치료"라는 용어는, 질환, 질환의 증상, 또는 질환에 대한 소인을 치료, 치유, 경감, 완화, 변경, 구제, 개선, 향상시키거나 영향을 주기 위한 목적으로, 환자에 대한 본 출원에서 기재되거나 본 출원에서 기재된 방법에 의해 확인된 치료제의 적용 또는 투여, 또는 질환, 질환의 증상 또는 질환에 대한 소인을 갖는 환자로부터 단리된 조직 또는 세포주에 대한 상기 치료제의 적용 또는 투여로서 정의된다.
"환자" "대상체" 및 "개체"라는 용어는 본 출원에서 상호 교환적으로 사용되며, 치료되는 포유 동물을 의미한다. 하나의 실시 형태에서, 상기 포유 동물 환자는 사람이다. 일부 경우에서, 본 발명의 방법은, 마우스, 래트 및 햄스터를 비롯한 설치류 뿐만 아니라 영장류를 포함하지만 이들에 한정되지 않는, 실험 동물에서, 수의학적 적용에서 및 질환 동물 모델의 개발에서의 용도를 발견한다.
본 출원에서 상호 교환적으로 사용되는 "앱센트 인 멜라노마 2" 및 "AIM2"는, AIM2 유전자의 발현 산물 또는 이소타입; 또는 AIM2와 적어도 65%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 아미노산 서열 동일성을 공유하고 (예를 들어, 수탁 번호(들) NX_014862, NP004824, XP016858337, XP005245673, AAB81613, BAF84731, AAH10940) AIM2의 기능적 활성을 나타내는 단백질을 의미할 수 있다.
본 출원에서 상호 교환적으로 사용되는 "NACHT, LRR 및 PYD 도메인 함유 단백질 1", "NALP1" 및 "NLRP1"은, NALP1 또는 NLRP1 유전자의 발현 산물 또는 이소타입; 또는 NALP1과 적어도 65%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 아미노산 서열 동일성을 공유하고 (예를 들어, 수탁 번호(들) AAH51787, NP_001028225, NP_127500, NP_127499, NP_127497, NP055737) NALP1의 기능적 활성을 나타내는 단백질을 의미한다.
본 출원에서 상호 교환적으로 사용되는 "NALP2" 및 "NLRP2"은, NALP2 또는 NLRP2 유전자의 발현 산물 또는 이소타입; 또는 NALP2와 적어도 65%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 아미노산 서열 동일성을 공유하고 (예를 들어, 수탁 번호(들) NP_001167552, NP_001167553, NP_001167554 또는 NP_060322) NALP2의 기능적 활성을 나타내는 단백질을 의미한다.
본 출원에서 상호 교환적으로 사용되는 "NALP3" 및 "NLRP3"은, NALP3 또는 NLRP3 유전자의 발현 산물 또는 이소타입; 또는 NALP3과 적어도 65%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 아미노산 서열 동일성을 공유하고 (예를 들어, 수탁 번호(들) NP_001073289, NP_001120933, NP_001120934, NP_001230062, NP_004886, NP_899632, XP_011542350, XP_016855670, XP_016855671, XP_016855672 or XP_016855673) NALP3의 기능적 활성을 나타내는 단백질을 의미한다.
본 출원에서 상호 교환적으로 사용되는 "NLRC4" 및 "IPAF"은, NLRC4 또는 IPAF 유전자의 발현 산물 또는 이소타입; 또는 NLRC4와 적어도 65%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99%의 아미노산 서열 동일성을 공유하고 (예를 들어, 수탁 번호(들) NP_001186067, NP001186068, NP_001289433 또는 NP_067032) NLRC4의 기능적 활성을 나타내는 단백질을 의미한다.
"뇌졸중" 및 "허혈성 뇌졸중"이라는 용어는, 혈류가 뇌 또는 척수의 일부로 차단되는 경우를 의미한다.
"CNS에 대한 외상성 손상"은 CNS 기능의 영구적 또는 일시적 장애를 초래할 수 있는 외부 기계적 힘으로 인한 CNS에 대한 임의의 손상을 의미한다.
종래의 분자 생물학 기술에 관련된 방법이 본 출원에서 기재되어 있다. 이러한 기술은 일반적으로 당해 분야에 공지되어 있으며, 문헌 [Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed., vol. 1-3, ed. Sambrook et al., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 2001] 및 [Current Protocols in Molecular Biology, ed. Ausubel et al., Greene Publishing and Wiley-Interscience, New York, 1992] (정기적으로 업데이트됨)과 같은 방법론 논문에 상세하게 기재되어 있다. 면역학 기술은 일반적으로 당해 분야에 공지되어 있으며, 문헌 [Advances in Immunology, volume 93, ed. Frederick W. Alt, Academic Press, Burlington, MA, 2007], [Making and Using Antibodies: A Practical Handbook, eds. Gary C. Howard and Matthew R. Kaser, CRC Press, Boca Raton, FL, 2006], [Medical Immunology, 6th ed., edited by Gabriel Virella, Informa Healthcare Press, London, England, 2007] 및 [Harlow and Lane ANTIBODIES: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1988]과 같은 방법론 논문에서 상세하게 기재되어 있다.
본 출원에서 기재된 것들과 유사하거나 동등한 조성물들 및 방법들이 본 발명의 실시 또는 테스트에서 사용될 수 있지만, 적합한 조성물들 및 방법들은 하기에서 기재될 것이다. 본 출원에서 언급된 모든 간행물, 특허 출원 및 특허는 그 전문이 참조로서 포함된다. 충돌하는 경우, 정의를 포함하는 본 명세서가 우세할 것이다. 하기에서 논의된 특별한 실시 형태들은 단지 예시일 뿐이며, 한정적인 것으로 의도되지 않는다.
개요
카스파아제 활성화 동원 도메인을 함유하는 아폽토시스 관련 Spec 유사 단백질 (ASC)에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공된다. 상기 단클론 항체 또는 이의 단편은 서열 번호 5의 아미노산 서열을 포함하거나 이로 이루어지거나 필수적으로 이루어지는 ASC의 항원성 단편에 특이적으로 결합할 수 있다. 본 실시 형태에 추가하여, 본 발명은 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도를 고려한다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 미국 특허 US 8,685,400에 기재된 바와 같이 포유 동물에서 염증을 감소시키는 방법에 사용될 수 있으며, 그 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 염증은 폐 및/또는 중추 신경계 (CNS)에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (Alzheimer's disease: AD), 파킨슨병 (Parkinson's disease: PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은, 예를 들어, 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물과 같은 조성물에 존재할 수 있다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 단편은 본 출원에서 제공된 치료 방법에서 하나 이상의 다른 제제와 조합하여 사용된다. 상기 다른 제제는 본 출원에서 제공된 임의의 제제 (예를 들어, EV 흡수 억제제) 및/또는 다른 인플라마솜 성분 (예를 들어, IL-18, 카스파아제-1, NALP1, AIM2 등)에 대해 지시된 항체 또는 항체 단편일 수 있다.
본 발명은 또한 ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 포괄하며, 여기서, 상기 항체 또는 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 본 발명은 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도를 고려한다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 미국 특허 US 8,685,400에 기재된 바와 같이 포유 동물에서 염증을 감소시키는 방법에 사용될 수 있으며, 그 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자에서 선천성 면역 또는 인플라마솜 관련 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 중추 신경계 (CNS) 손상 및/또는 자가 면역, 자가 염증성, 대사성 또는 신경 퇴행성 질환을 치료하는 데 사용된다. 상기 CNS 손상은 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 상기 자가 면역 또는 신경 퇴행성 질환은 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 알츠하이머병, 파킨슨병 (PD), 근위축증 (MD), 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염) 및 다발성 경화증 (MS)으로부터 선택될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MD를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MD를 치료하는데 사용된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 루푸스 신염을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 루푸스 신염을 치료하는데 사용된다. 상기 대사성 질환은 대사성 증후군, 비만, 진성 당뇨병, 당뇨병성 신병증 또는 당뇨병성 신장 질환 (DKD), 인슐린 저항성, 죽상 동맥 경화증, 지질 저장 장애, 글리코겐 저장 질환, 중쇄 아실-코엔자임 A 데하이드로게나아제 결핍, 비알코올성 지방간 질환 (예를 들어, 비알코올성 지방 간염 (NASH)) 및 통풍으로부터 선택될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 당뇨병성 신병증을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 당뇨병성 신병증을 치료하는데 사용된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 NASH를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 NASH를 치료하는데 사용된다. 상기 자가 염증 질환은 크리오피린 관련 주기적 증후군 (CAPS)일 수 있다. CAPS는 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (FCAS), 머클-웰스 증후군 (MWS) 및 신생아 발현 다발성 염증 질환 (NOMID)을 포괄할 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 CAPS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 CAPS를 치료하는데 사용된다. 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은, 예를 들어, 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물과 같은 조성물에 존재할 수 있다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 단편은 본 출원에서 제공된 치료 방법에서 하나 이상의 다른 제제와 조합하여 사용된다. 상기 다른 제제는 본 출원에서 제공된 임의의 제제 (예를 들어, EV 흡수 억제제) 및/또는 다른 인플라마솜 성분 (예를 들어, IL-18, 카스파아제-1, NALP1, AIM2 등)에 대해 지시된 항체 또는 항체 단편일 수 있다.
일부 실시 형태에서, 본 발명은 ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 제공하며, 여기서, 상기 항체 또는 항체 단편은 경쇄 가변 (VL) 영역 및 중쇄 가변 (VH) 영역을 포함하고, 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 본 발명은 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도를 고려한다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 미국 특허 US 8,685,400에 기재된 바와 같이 포유 동물에서 염증을 감소시키는 방법에 사용될 수 있으며, 그 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자에서 선천성 면역 또는 인플라마솜 관련 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 중추 신경계 (CNS) 손상 및/또는 자가 면역, 자가 염증성, 대사성 또는 신경 퇴행성 질환을 치료하는 데 사용된다. 상기 CNS 손상은 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 상기 자가 면역 또는 신경 퇴행성 질환은 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 알츠하이머병, 파킨슨병 (PD), 근위축증 (MD), 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염) 및 다발성 경화증 (MS)으로부터 선택될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MD를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MD를 치료하는데 사용된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 루푸스 신염을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 루푸스 신염을 치료하는데 사용된다. 상기 대사성 질환은 대사성 증후군, 비만, 진성 당뇨병, 당뇨병성 신병증 또는 당뇨병성 신장 질환 (DKD), 인슐린 저항성, 죽상 동맥 경화증, 지질 저장 장애, 글리코겐 저장 질환, 중쇄 아실-코엔자임 A 데하이드로게나아제 결핍, 비알코올성 지방간 질환 (예를 들어, 비알코올성 지방 간염 (NASH)) 및 통풍으로부터 선택될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 당뇨병성 신병증을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 당뇨병성 신병증을 치료하는데 사용된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 NASH를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 NASH를 치료하는데 사용된다. 상기 자가 염증 질환은 크리오피린 관련 주기적 증후군 (CAPS)일 수 있다. CAPS는 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (FCAS), 머클-웰스 증후군 (MWS) 및 신생아 발현 다발성 염증 질환 (NOMID)을 포괄할 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 CAPS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 CAPS를 치료하는데 사용된다. 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은, 예를 들어, 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물과 같은 조성물에 존재할 수 있다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 단편은 본 출원에서 제공된 치료 방법에서 하나 이상의 다른 제제와 조합하여 사용된다. 상기 다른 제제는 본 출원에서 제공된 임의의 제제 (예를 들어, EV 흡수 억제제) 및/또는 다른 인플라마솜 성분 (예를 들어, IL-18, 카스파아제-1, NALP1, AIM2 등)에 대해 지시된 항체 또는 항체 단편일 수 있다.
다른 실시 형태에서, 본 발명은 또한 ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 제공하며, 여기서, 상기 항체 또는 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 본 발명은 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도를 고려한다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 미국 특허 US 8,685,400에 기재된 바와 같이 포유 동물에서 염증을 감소시키는 방법에 사용될 수 있으며, 그 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자에서 선천성 면역 또는 인플라마솜 관련 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 중추 신경계 (CNS) 손상 및/또는 자가 면역, 자가 염증성, 대사성 또는 신경 퇴행성 질환을 치료하는 데 사용된다. 상기 CNS 손상은 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 상기 자가 면역 또는 신경 퇴행성 질환은 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 알츠하이머병, 파킨슨병 (PD), 근위축증 (MD), 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염) 및 다발성 경화증 (MS)으로부터 선택될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MD를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MD를 치료하는데 사용된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 루푸스 신염을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 루푸스 신염을 치료하는데 사용된다. 상기 대사성 질환은 대사성 증후군, 비만, 진성 당뇨병, 당뇨병성 신병증 또는 당뇨병성 신장 질환 (DKD), 인슐린 저항성, 죽상 동맥 경화증, 지질 저장 장애, 글리코겐 저장 질환, 중쇄 아실-코엔자임 A 데하이드로게나아제 결핍, 비알코올성 지방간 질환 (예를 들어, 비알코올성 지방 간염 (NASH)) 및 통풍으로부터 선택될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 당뇨병성 신병증을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 당뇨병성 신병증을 치료하는데 사용된다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 NASH를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 NASH를 치료하는데 사용된다. 상기 자가 염증 질환은 크리오피린 관련 주기적 증후군 (CAPS)일 수 있다. CAPS는 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (FCAS), 머클-웰스 증후군 (MWS) 및 신생아 발현 다발성 염증 질환 (NOMID)을 포괄할 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 CAPS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 CAPS를 치료하는데 사용된다. 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은, 예를 들어, 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물과 같은 조성물에 존재할 수 있다. 일부 경우에서, 상기 단클론 항체 또는 이의 단편은 본 출원에서 제공된 치료 방법에서 하나 이상의 다른 제제와 조합하여 사용된다. 상기 다른 제제는 본 출원에서 제공된 임의의 제제 (예를 들어, EV 흡수 억제제) 및/또는 다른 인플라마솜 성분 (예를 들어, IL-18, 카스파아제-1, NALP1, AIM2 등)에 대해 지시된 항체 또는 항체 단편일 수 있다.
선천성 면역 또는 인플라마솜 관련 염증을 감소시키기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 상기 인플라마솜 관련 염증은 선천성 면역 또는 인플라마솜 관련 염증을 초래하거나 유발하는 병태를 겪었거나 이에 의해 영향을 받는 포유 동물의 CNS에 존재한다. 일부 경우에서, 상기 인플라마솜 관련 염증은 선천성 면역 또는 인플라마솜 관련 염증과 관련이 있거나 이를 초래하거나 유발하는 병태에 의해 영향을 받거나 영향을 받는 것으로 의심되는 포유 동물 (예를 들어, 사람)에 존재한다. 상기 선천성 면역 또는 인플라마솜 관련 염증을 초래하거나 유발하는 병태는 CNS 손상, 자가 면역, 자가 염증성, 신경 퇴행성 및/또는 대사성 질환 또는 장애일 수 있다. 상기 CNS 손상은 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택된다. 상기 자가 면역 또는 신경 퇴행성 질환은 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 알츠하이머병, 파킨슨병 (PD), 근위축증 (MD), 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염) 및 다발성 경화증 (MS)으로부터 선택될 수 있다. 상기 대사성 질환은 대사성 증후군, 비만, 진성 당뇨병, 당뇨병성 신병증 또는 당뇨병성 신장 질환 (DKD), 인슐린 저항성, 죽상 동맥 경화증, 지질 저장 장애, 글리코겐 저장 질환, 중쇄 아실-코엔자임 A 데하이드로게나아제 결핍, 비알코올성 지방간 질환 (예를 들어, 비알코올성 지방 간염 (NASH)) 및 통풍으로부터 선택될 수 있다. 상기 자가 염증 질환은 크리오피린 관련 주기적 증후군 (CAPS)일 수 있다. CAPS는 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (FCAS), 머클-웰스 증후군 (MWS) 및 신생아 발현 다발성 염증 질환 (NOMID)을 포괄할 수 있다. 본 출원에서 기재된 조성물 및 방법은 포유 동물 인플라마솜의 적어도 하나의 성분 (예를 들어, ASC)에 특이적으로 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편 및/또는 세포외 소포 (EV) 흡수를 조절하고 (예를 들어, 억제시키거나 감소시키고) 화합물을 포함할 수 있으며, 포유 동물에서 CNS 염증에 대한 치료제로서 용도를 갖는다. 상기 CNS에서 염증을 초래할 수 있는 병태의 예로는 CNS 손상 (예를 들어, 척수 손상 (SCI), 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 뇌졸중), 신경 퇴행성 질환, 자가 면역 질환 (예를 들어, MS), 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환 (chronic obstructive pulmonary disease: COPD), 낭포성 섬유증, 간질 성 폐 질환 또는 급성 호흡 곤란 증후군이 포함된다. 상기 조성물은 치료학적 유효량으로 투여될 수 있다. 상기 치료학적 유효량은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 용량일 수 있다. 상기 제제는 세포외 소포 (EV) 흡수 억제제 및/또는 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편 또는 이들의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다.
다발성 경화증 (MS)을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에서 MS를 치료하기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 제공되는 MS를 치료하는 방법은 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에게 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 약제학적 조성물)을 투여하는 것을 수반할 수 있다. 다발성 경화증 (MS)은 뇌와 척수에 영향을 미치는 자가 면역 질환이다. 상기 대상체는 MS와 일치하는 임상 증상을 나타낼 수 있다. 상기 대상체는 당해 분야에 공지된 임의의 유형의 MS로 진단될 수 있다. 상기 MS는 재발 완화형 MS (relapsing-remitting MS: RRMS), 이차 진행성 MS (secondary-progressive MS: SPMS), 일차 진행성 MS (primary-progressive MS: PPMS) 또는 진행성 재발 MS (progressive-relapsing MS: PRMS)일 수 있다. MS 진단은 당해 분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 결정될 수 있거나 결정되었을 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 대상체는 2017년 9월 20자로 출원된 미국 출원 62/560,963에 상세히 기재된 방법을 사용하여 MS를 갖는 것으로 진단되었으며, 상기 문헌의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 제제는 MS에 대해 당해 분야에 공지된 표준 치료, EV 흡수 억제제 (예를 들어, 표 1로부터의 임의의 EV 흡수 억제제), 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편, 예를 들어, IC 100) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 상기 표준 치료는 질병 결과의 변경, 재발 관리, 증상 관리 또는 이들의 조합을 지향하는 요법으로부터 선택될 수 있다. 질병 결과의 변경을 지향하는 요법은 베타-인터페론, 글라티라머 아세테이트, 핀골리모드, 테리플루노마이드, 디메틸 푸마레이트, 미톡산트론, 오크렐리주맙, 알렘투주맙, 다클리주맙 및 나탈리주맙으로부터 선택될 수 있다.
파킨슨병 (PD)을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에서 PD를 치료하기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 제공되는 PD를 치료하는 방법은 PD를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에게 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 약제학적 조성물)을 투여하는 것을 수반할 수 있다. 파킨슨병 (PD)은, PD를 앓고 있는 포유 동물 (예를 들어, 사람)의 뇌에서 신경 세포의 점진적 파괴 및/또는 사멸로 인해 운동에 영향을 미치는 진행성 신경계 장애이다. PD는 5 단계 (즉, 1~5 단계)를 통해 발생 및/또는 진행될 수 있으며, 본 출원에서 제공된 조성물 및 방법은 5 단계 중 임의의 단계에서 PD를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 개체를 치료하는데 사용될 수 있다. PD 진단은 당해 분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 결정될 수 있거나 결정되었을 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 대상체는 2018년 9월 20자로 출원된 국제공개공보 WO 2019/060516에 상세히 기재된 방법을 사용하여 PD를 갖는 것으로 진단되었으며, 상기 문헌의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 제제는 PD에 대해 당해 분야에 공지된 표준 치료, EV 흡수 억제제 (예를 들어, 표 1로부터의 임의의 EV 흡수 억제제), 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편, 예를 들어, IC 100) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 표준 치료는 카르비도파 (로도신), 레보도파 카르비도파-레보도파 조합, 듀오파, 도파민 작용제, MAO B 억제제, 카테콜 O-메틸트랜스퍼라아제 (catechol O-methyltransferase: COMT) 억제제, 항콜린제, 아만타딘 및 심부 뇌 자극으로부터 선택될 수 있다. 상기 도파민 작용제는 프라미펙솔 (미라펙스), 로피니롤 (리큅) 및 로티고틴 (뉴프로)으로부터 선택될 수 있다. 상기 MAO B 억제제는 셀레길린 (엘데프릴, 젤라파), 라사길린 (아질렉트) 및 사피나미드 (사다고)로부터 선택될 수 있다. 상기 COMT 억제제는 엔타카폰 (콤탄) 및 톨카폰 (타스마)으로부터 선택될 수 있다. 상기 항콜린제는 벤즈트로핀 (코젠틴) 또는 트리헥시페니딜로부터 선택될 수 있다.
알츠하이머병 (AD)을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에서 AD를 치료하기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 제공되는 AD를 치료하는 방법은 AD를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에게 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 약제학적 조성물)을 투여하는 것을 수반할 수 있다. 알츠하이머병 (AD)은, AD를 앓고 있는 개체에서 뇌 세포가 퇴화되어 사멸하고 경도 인지 장애 (mild cognitive impairment: MCI)에서부터 완전한 기억 상실 및 심지어 성격과 행동의 변화까지 진행하는 진행성 신경계 장애이다. AD 진단은 당해 분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 결정될 수 있거나 결정되었을 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 대상체는 2018년 9월 20자로 출원된 국제공개공보 WO 2019/060516에 상세히 기재된 방법을 사용하여 AD를 갖는 것으로 진단되었으며, 상기 문헌의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 제제는 AD에 대해 당해 분야에 공지된 표준 치료, EV 흡수 억제제 (예를 들어, 표 1로부터의 임의의 EV 흡수 억제제), 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편, 예를 들어, IC 100) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 상기 표준 치료는 콜린에스테라아제 억제제 및 메만틴 (나멘다)으로부터 선택될 수 있다. 콜린에스테라아제 억제제는 도네페질 (아리셉트), 갈란타민 (라자다인) 및 리바스티그민 (엑셀론)으로부터 선택될 수 있다.
류마티스 관절염 (rheumatoid arthritis: RA)을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에서 RA를 치료하기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 제공되는 RA를 치료하는 방법은 RA를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에게 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 약제학적 조성물)을 투여하는 것을 수반할 수 있다. 류마티스 관절염 (RA)은 개체의 관절 뿐만 아니라 피부, 눈, 폐, 심장 및 혈관에 손상을 일으킬 수 있는 만성 자가 면역 염증 질환이다. RA 진단은 당해 분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 결정될 수 있거나 결정되었을 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 대상체는 2018년 9월 20자로 출원된 국제공개공보 WO 2019/060516에 상세히 기재된 방법을 사용하여 RA를 갖는 것으로 진단되었으며, 상기 문헌의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 제제는 RA에 대해 당해 분야에 공지된 표준 치료, EV 흡수 억제제 (예를 들어, 표 1로부터의 임의의 EV 흡수 억제제), 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편, 예를 들어, IC 100) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 상기 표준 치료는 비스테로이드성 항염증 약물 (nonsteroidal anti-inflammatory drug: NSAID), 스테로이드 (예를 들어, 프레드니손), 질환 변경 항류마티스 약물 (disease-modifying antirheumatic drug: DMARD) 및 생물학적 제제로부터 선택될 수 있다. NSAID로는 이부프로펜 (애드빌, 모트린 IB) 및 나프록센 나트륨 (알리브)이 포함될 수 있다. DMARD로는 메토트렉세이트 (트렉살, 오트렉스업 등), 레플루노마이드 (아라바), 하이드록시클로로퀸 (플라케닐) 및 설파살라진 (아줄피딘)이 포함될 수 있다. 생물학적 제제로는 아바타셉트 (오렌시아), 아달리무맙 (휴미라), 아나킨라 (키네레트), 바리시티닙 (올루미언트), 세르톨리주맙 (심지아), 에타너셉트 (엔브렐), 골리무맙 (심포니), 인플릭시맙 (레미케이드), 리툭시맙 (리툭산), 사릴루맙 (케브자라), 토실리주맙 (악템라) 및 토파시티닙 (젤잔즈)이 포함될 수 있다.
루푸스 신염을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에서 루푸스 신염을 치료하기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 제공되는 루푸스 신염을 치료하는 방법은 루푸스 신염을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에게 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 약제학적 조성물)을 투여하는 것을 수반할 수 있다. 루푸스 신염은, 종종 단순히 루푸스로서 종종 지칭되는 전신 홍반성 루푸스의 흔한 합병증인 신장 염증의 한 유형이다. 루푸스 신염은, 루푸스 자가 항체가 신장 염증 뿐만 아니라 혈뇨, 단백뇨, 고혈압, 신장 기능 손상 또는 심지어 신부전을 초래할 수 있는 개체 신장에서 구조에 영향을 미치는 자가 면역 질환이다. 루푸스 신염 진단은 당해 분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 결정될 수 있거나 결정되었을 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 대상체는 2018년 9월 20자로 출원된 국제공개공보 WO 2019/060516에 상세히 기재된 방법을 사용하여 루푸스 신염을 갖는 것으로 진단되었으며, 상기 문헌의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 제제는 루푸스 신염에 대해 당해 분야에 공지된 표준 치료, EV 흡수 억제제 (예를 들어, 표 1로부터의 임의의 EV 흡수 억제제), 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편, 예를 들어, IC 100) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 루푸스 신염에 대한 표준 치료는 혈압을 조절하는 약물 및/또는 단백질과 염분이 적은 특별 식단을 포함할 수 있다. 추가로, 루푸스 신염에 대한 표준 치료는, 예를 들어, 비스테로이드성 항염증제 (NSAID), 항말라리아 약물, 코르티코스테로이드 (예를 들어, 프레드니손; 메틸 프레드니솔론), 면역 억제제 또는 생물학적 제제와 같은 루푸스 치료제일 수 있다. NSAID의 예로는 나프록센 나트륨 (알리브) 및 이부프로펜 (애드빌, 모트린 IB 등)이 포함될 수 있다. 항말라리아 약물의 예로는 하이드록시클로로퀸 (플라케닐)이 있을 수 있다. 면역 억제제의 예로는 아자티오프린 (이무란, 아자산), 마이코페놀레이트 모페틸 (셀셉트) 및 메토트렉세이트 (트렉살)가 포함될 수 있다. 생물학적 제제의 예로는 벨리무맙 (벤리스타) 또는 리툭시맙 (리툭산)이 포함될 수 있다.
비알코올성 지방 간염 (NASH)을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에서 NASH를 치료하기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 제공되는 NASH를 치료하는 방법은 NASH를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에게 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 약제학적 조성물)을 투여하는 것을 수반할 수 있다. NASH는 비알코올성 지방간 질환 (Nonalcoholic fatty liver disease: NAFLD)의 한 유형이다. NAFLD는 술을 거의 마시지 않거나 전혀 마시지 않는 사람들에게 영향을 미치는 다양한 간 질환에 대한 포괄적인 용어이다. NAFLD의 주요 특징은 간 세포에 너무 많은 지방이 저장되고 간 염증으로 표시되어 흉터와 돌이킬 수 없는 손상으로 진행될 수 있다. 이러한 손상은 과도한 알코올 사용에 기인하는 손상과 유사할 수 있다. 가장 심각한 비알코올성 지방 간염은 간경화와 간부전으로 진행될 수 있다. NASH 진단은 당해 분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 결정될 수 있거나 결정되었을 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 대상체는 2018년 9월 20자로 출원된 국제공개공보 WO 2019/060516에 상세히 기재된 방법을 사용하여 NASH를 갖는 것으로 진단되었으며, 상기 문헌의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 제제는 NASH에 대해 당해 분야에 공지된 표준 치료, EV 흡수 억제제 (예를 들어, 표 1로부터의 임의의 EV 흡수 억제제), 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편, 예를 들어, IC 100) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. NASH에 대한 표준 치료로는 체중 감량, 운동 증가, 간 손상 약물 회피, 콜레스테롤 저하 및/또는 당뇨병 관리와 같은 생활 방식 변화가 포함될 수 있다.
당뇨병성 신병증을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에서 당뇨병성 신병증을 치료하기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 제공되는 당뇨병성 신병증을 치료하는 방법은 당뇨병성 신병증을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에게 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 약제학적 조성물)을 투여하는 것을 수반할 수 있다. 당뇨병성 신병증은 당뇨병성 신장 질환 (DKD)으로도 또한 지칭될 수 있는 1형 당뇨병 및 2형 당뇨병의 심각한 신장 관련 합병증이다. DKD 진단은 당해 분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 결정될 수 있거나 결정되었을 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 대상체는 2018년 9월 20자로 출원된 국제공개공보 WO 2019/060516에 상세히 기재된 방법을 사용하여 DKD를 갖는 것으로 진단되었으며, 상기 문헌의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 제제는 DKD에 대해 당해 분야에 공지된 표준 치료, EV 흡수 억제제 (예를 들어, 표 1로부터의 임의의 EV 흡수 억제제), 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편, 예를 들어, IC 100) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 당뇨병성 신병증에 대한 표준 치료로는 체중 감량, 운동 증가, 콜레스테롤 저하, 소변내 단백질 조절, 뼈 건강 증진, 고혈압 조절, 당뇨병 관리, 신장 투석 또는 이식과 같은 생활 습관 변화가 포함될 수 있다.
염증성 장 질환 (inflammatory bowel disease: IBD)을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에서 IBD를 치료하기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 제공되는 IBD를 치료하는 방법은 IBD를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에게 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 약제학적 조성물)을 투여하는 것을 수반할 수 있다. IBD는 개체의 소화관의 만성 염증과 관련되는 장애를 기술하는데 사용되는 포괄적인 용어이다. IBD로는 궤양성 대장염과 크론병이 포함될 수 있다. 궤양성 대장염은 대장 (결장)과 직장의 가장 안쪽 내막에서 오래 지속되는 염증과 상처 (궤양)인 반면, 크론병은 종종 감염된 조직에 깊숙이 퍼지는 소화관 내벽의 염증을 특징으로 한다. IBD 진단은 당해 분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 결정될 수 있거나 결정되었을 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 대상체는 2018년 9월 20자로 출원된 국제공개공보 WO 2019/060516에 상세히 기재된 방법을 사용하여 IBD를 갖는 것으로 진단되었으며, 상기 문헌의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 제제는 IBD에 대해 당해 분야에 공지된 표준 치료, EV 흡수 억제제 (예를 들어, 표 1로부터의 임의의 EV 흡수 억제제), 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편, 예를 들어, IC 100) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. IBD에 대한 표준 치료로는 항염증 약물, 면역계 억제제, 항생제, 항설사 약물, 진통제, 철분 보충제, 칼슘 및 비타민 D 보충제가 포함될 수 있다. 항생제로는 시프로플록사신 (시프로) 및 메트로니다졸 (플라길)이 포함될 수 있다. 면역 억제제의 예로는 아자티오프린 (아자산, 이무란), 머캅토퓨린 (퓨린에톨, 푸릭산), 사이클로스포린 (젠그라프, 네오랄, 산디문) 및 메토트렉세이트 (트렉살)가 포함될 수 있다. 면역 억제제의 다른 예로는 종양 괴사 인자 (tumor necrosis factor: TNF)-알파 억제제 또는 생물제제, 예를 들어, 인플릭시맙 (레미케이드), 아달리무맙 (휴미라), 골리무맙 (심포니), 나탈리주맙 (티사브리), 베돌리주맙 (엔티비오) 및 우스테키누맙 (스텔라라)이 포함될 수 있다. 항염증제로는 코르티코스테로이드 및 아미노살리실레이트, 예를 들어, 메살라민 (아사콜 HD, 델지콜), 발살라지드 (콜라잘) 및 올살라진 (디펜툼)이 포함될 수 있다. 크리오피린 관련 주기적 증후군 (CAPS)을 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에서 CAPS를 치료하기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 제공되는 CAPS를 치료하는 방법은 CAPS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체에게 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물 (예를 들어, 약제학적 조성물)을 투여하는 것을 수반할 수 있다.
크리오피린 관련 자가 염증 증후군으로도 또한 불리는 크리오피린 관련 주기적 증후군 (CAPS)은 동일 유전자 (즉, NLRP3)의 결함과 관련된 다음 3개의 자가 염증 질환으로 이루어진다: 신생아 발현 다발성 염증 질환 (NOMID), 머클-웰스 증후군 (MWS) 및 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (FCAS). NOMID는 여러 장기에서 염증을 동반하는 열을 특징으로 한다. NOMID의 초기 증상은 가렵지 않은 두드러기 유사 발진; 두통, 실명 또는 청력 상실을 유발하는, 뇌를 둘러싸는 막의 염증; 눈에 대한 융기 모양; 및 구토의 에피소드를 포함할 수 있다. 1세 이후, NOMID 소아의 절반은 관절통과 종창이 발생할 수 있다. MWS는 피부 발진, 충혈안, 관절통, 및 구토를 동반한 심각한 두통을 비롯하여 왔다 갔다하는 증상을 특징으로 한다. 에피소드는 1 내지 3일 동안 지속된다. 완전할 수 있는 청력 상실은 종종 10대 때에 발생한다. FCAS는 발열, 오한, 메스꺼움, 극심한 갈증, 두통 및 관절통을 특징으로 한다. CAPS 진단은 당해 분야에 공지된 임의의 방법을 사용하여 결정될 수 있거나 결정되었을 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 대상체는 2018년 9월 20자로 출원된 국제공개공보 WO 2019/060516에 상세히 기재된 방법을 사용하여 CAPS를 갖는 것으로 진단되었으며, 상기 문헌의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 제제는 CAPS에 대해 당해 분야에 공지된 표준 치료, EV 흡수 억제제 (예를 들어, 표 1로부터의 임의의 EV 흡수 억제제), 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 항체 단편 (예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 이의 항체 단편, 예를 들어, IC 100) 또는 이들의 임의의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. CAPS에 대한 표준 치료로는 인터루킨-1을 표적화하는 생물학적 제제 뿐만 아니라 물리 치료, 관절 변형을 치료하기 위한 부목, 증상을 감소시키기 위한 비스테로이드성 항염증 약물, 코르티코스테로이드 또는 메토트렉세이트가 포함될 수 있다.
폐 염증을 초래하거나 유발하는 병태를 겪었거나 이에 의해 영향을 받는 포유 동물의 폐에서 염증을 감소시키기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 기재된 조성물 및 방법은 포유 동물 인플라마솜의 적어도 하나의 성분 (예를 들어, ASC)에 특이적으로 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편 (예를 들어, IC 100) 및/또는 세포외 소포 (EV) 흡수를 조절하고 (예를 들어, 억제시키거나 감소시키고) 화합물을 포함할 수 있으며, 포유 동물에서 폐 염증에 대한 치료제로서 용도를 갖는다.
폐에서 염증 반응을 초래하고/하거나 유발하는 병태를 갖는 포유 동물의 폐에서 염증을 감소시키기 위한 방법이 본 출원에서 기재된다. 하나의 실시 형태에서, 포유 동물의 폐에서 염증을 치료하는 방법은 인플라마솜 신호 전달을 억제하는 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물을 포유 동물에게 투여하는 단계를 포함한다. 상기 포유 동물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 환자 또는 대상체일 수 있다. 상기 폐에서 염증을 초래할 수 있는 병태의 예로는 중추 신경계 (CNS) 손상 (예를 들어, 척수 손상 (SCI), 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 뇌졸중), 신경 퇴행성 질환, 자가 면역 질환 (예를 들어, MS), 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환 (COPD), 낭포성 섬유증, 간질 성 폐 질환 또는 급성 호흡 곤란 증후군이 포함된다. 상기 조성물은 치료학적 유효량으로 투여될 수 있다. 상기 치료학적 유효량은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 용량일 수 있다. 상기 제제는 세포외 소포 (EV) 흡수 억제제, 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편 또는 이들의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다.
신장 염증을 초래하거나 유발하는 병태를 겪었거나 이에 의해 영향을 받는 포유 동물의 신장에서 염증을 감소시키기 위한 조성물 및 방법이 본 출원에서 제공된다. 본 출원에서 기재된 조성물 및 방법은 포유 동물 인플라마솜의 적어도 하나의 성분 (예를 들어, ASC)에 특이적으로 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편 (예를 들어, IC 100) 및/또는 세포외 소포 (EV) 흡수를 조절하고 (예를 들어, 억제시키거나 감소시키고) 화합물을 포함할 수 있으며, 포유 동물에서 신장 염증에 대한 치료제로서 용도를 갖는다.
신장에서 염증 반응을 초래하고/하거나 유발하는 병태를 갖는 포유 동물의 신장에서 염증을 감소시키기 위한 방법이 본 출원에서 기재된다. 하나의 실시 형태에서, 포유 동물의 신장에서 염증을 치료하는 방법은 인플라마솜 신호 전달을 억제하는 제제 (예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물을 포유 동물에게 투여하는 단계를 포함한다. 상기 포유 동물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 환자 또는 대상체일 수 있다. 신장에서 염증을 초래할 수 있는 병태의 예로는 루푸스 신염이 포함된다. 상기 조성물은 치료학적 유효량으로 투여될 수 있다. 상기 치료학적 유효량은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 용량일 수 있다. 상기 제제는 세포외 소포 (EV) 흡수 억제제, 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편 또는 이들의 조합일 수 있다. 상기 조성물은 임의의 적합한 경로에 의해, 예를 들어, 흡입에 의해, 정맥내로, 복강내로 또는 뇌혈관내로 투여될 수 있다. 상기 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다.
하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 방법에서의 제제 (예를 들어, 단독 또는 예를 들어, EV 흡수 억제제와의 조합의 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편 (예를 들어, IC 100))의 투여는 대상체의 CNS, 신장 또는 폐에서 포유 동물 인플라마솜의 성분의 활성 및/또는 발현 수준의 감소를 초래할 수 있다. 상기 감소는 폐의 세포, 예를 들어, II형 폐포 세포에서 있을 수 있다. 상기 감소는 대조군과 비교될 수 있다. 상기 대조군은 제제의 투여 이전의 대상체일 수 있다. 상기 대조군은 제제를 투여받지 않은 대상체에서 인플라마솜 성분(들)의 활성 및/또는 발현 수준일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 제제의 투여는 적어도 대상체의 CNS 또는 CNS 세포에서 카스파아제-1 활성화의 감소를 초래한다. 하나의 실시 형태에서, 제제의 투여는 적어도 대상체의 폐 또는 폐 세포에서 카스파아제-1 활성화의 감소를 초래한다. 하나의 실시 형태에서, 제제의 투여는 적어도 대상체의 CNS 또는 CNS 세포에서 하나 이상의 인플라마솜 성분 (예를 들어, ASC, AIM2, NALP1, NALP2, NALP2, NALP3 또는 NLRC4)의 발현 수준의 감소를 초래한다. 하나의 실시 형태에서, 제제의 투여는 적어도 대상체의 폐 또는 폐 세포에서 하나 이상의 인플라마솜 성분 (예를 들어, ASC, AIM2, NALP1, NALP2, NALP2, NALP3 또는 NLRC4)의 발현 수준의 감소를 초래한다.
또 다른 실시 형태에서, 제제 (예를 들어, 단독 또는 예를 들어, EV 흡수 억제제와의 조합의 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편)의 투여는 급성 폐 손상 (ALI)의 감소 또는 제거를 초래할 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 ALI의 감소는 폐포 및/또는 간질 공간내 호중구 침윤의 감소, 폐포 중격 비후의 감소 또는 부재 또는 이들의 조합에 의해 입증된다. 상기 감소는 대조군과 비교될 수 있다. 상기 대조군은 제제의 투여 이전의 대상체의 ALI일 수 있다. 상기 대조군은 제제를 투여받지 않은 ALI를 앓고 있는 대상체의 ALI일 수 있다.
더 또 다른 실시 형태에서, 제제 (예를 들어, 단독 또는 예를 들어, EV 흡수 억제제와의 조합의 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편 (예를 들어, IC 100))의 투여는 대상체의 CNS 또는 폐에서 파이롭토시스의 감소 또는 제거를 초래할 수 있다. 파이롭토시스는 카스파아제-1의 활성화에 연루되는 세포 사멸의 전염증성 형태이다. 파이롭토시스는 가스더민 D (GSDMD)의 카스파아제-1 매개성 절단에 의해 촉발될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 파이롭토시스의 감소는 대상체의 폐 또는 폐 세포 (예를 들어, II형 폐포 세포)에서 GSDMD의 절단의 감소 또는 결핍에 의해 입증된다. 파이롭토시스의 감소 또는 제거는 대조군과 비교될 수 있다. GSDMD의 절단의 감소 또는 결핍은 대조군과 비교될 수 있다. 상기 대조군은 제제의 투여 이전의 대상체에서 파이롭토시스의 수준일 수 있다. 상기 대조군은 제제를 투여받지 않은 파이롭토시스를 앓고 있는 대상체에서 파이롭토시스의 수준일 수 있다.
본 출원에서 제공된 치료 방법 (예를 들어, CNS 손상, 자가 면역, 자가 염증성, 신경 퇴행성 또는 대사성 질환 (예를 들어, MS, PD, 루푸스 신염, NASH, DKD, CAPS, 염증성 장 질환 (IBD); AD, 류마티스 관절염), 선천성 면역 또는 인플라마솜 관련 염증, CNS 염증 및/또는 폐 염증을 치료하는 방법)의 성공 또는 이에 대한 반응은 적어도 하나의 인플라마솜 단백질의 수준을 측정하여 모니터링될 수 있다. 따라서, 일부 실시 형태에서는 본 출원에서 제공된 치료 방법이, 치료 후 대상체로부터 수득된 생물학적 샘플에서 적어도 하나의 인플라마솜 단백질의 수준을 측정하는 단계, 상기 치료에 대한 양성 반응과 관련된 치료 인플라마솜 단백질 시그니처 (signature)를 준비하되, 여기서, 상기 치료 단백질 시그니처가 감소된 수준의 적어도 하나의 인플라마솜 단백질을 포함하는 단계, 및 상기 치료에 양성으로 반응하는 것으로 치료 단백질 시그니처의 존재를 나타내는 대상체를 식별하는 단계를 추가로 포함한다. 하나 이상의 인플라마솜 단백질 (예를 들어, ASC, IL-18 또는 카스파아제-1)의 수준, 존재비 (abundance) 또는 농도의 감소는 대상체에서 치료의 효능을 나타낸다. 치료 후 수득된 샘플에서 측정된 하나 이상의 인플라마솜 단백질은 치료 이전에 수득된 샘플에서 측정된 인플라마솜 단백질과 동일하거나 상이할 수 있다. 상기 인플라마솜 단백질 수준은 또한 치료제의 투약량 또는 빈도를 조정하는데 사용될 수 있다. 상기 인플라마솜 단백질 수준은 본 출원에서 제공된 방법 및 기술을 사용하거나 2017년 9월 20일자로 출원된 미국 출원 US 62/560,963에서 밝혀진 바와 같이 확인될 수 있다.
하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 치료 방법에서 투여되는 제제는 EV 흡수 억제제이다. 상기 EV 흡수 억제제는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 화합물, 안티센스 RNA, siRNA, 펩타이드, 항체 또는 이의 활성 단편 또는 이들의 조합일 수 있다. 상기 화합물 또는 펩타이드는 헤파린, α-디플루오로메틸오르니틴 (DFMO), 에녹사파린, 아시알로페투인, 사람 수용체 관련 단백질 (receptor-associated protein: RAP), RGD (Arg-Gly-Asp) 펩타이드, 사이토칼라신 D, 사이토칼라신 B, 에틸렌디아민테트라 아세트산 (EDTA), 라트룬쿨린 A, 라트룬쿨린 B, NSC23766, 다이나소어, 클로르프로마진, 5-(N-에틸-N-이소프로필)아밀로라이드 (EIPA), 아밀로라이드, 바필로마이신 A 모넨신 및 클로로퀸, 아넥신-V, 워트만닌, LY294002, 메틸-β-사이클로덱스트린 (MβCD), 필리핀, 심바스타틴, 푸모니신 B1 및 N-부틸데옥시노지리마이신 하이드로클로라이드, U0126 또는 양성자 펌프 억제제로부터 선택된 하나 이상의 화합물일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 EV 흡수 억제제 항체 또는 이의 활성 단편은 표 1에서 열거된 단백질 표적에 대해 지시된 하나 이상의 항체 또는 이의 활성 단편일 수 있다. EV 흡수 억제제를 사용하여 포유 동물의 CNS 또는 폐에서 염증을 치료 및/또는 감소시키기 위한 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다.
[표 1]
Figure pct00001
Figure pct00002
Figure pct00003
Figure pct00004
하나의 실시 형태에서, 투여되는 제제는 포유 동물 인플라마솜의 성분 또는 이로부터 유래된 항원 또는 에피토프에 대해 지시된 본 출원에서 제공된 항체 또는 이의 활성 단편이다. 또 다른 실시 형태에서, 투여되는 제제는 포유 동물 인플라마솜의 성분에 대해 지시된 안티센스 RNA 또는 siRNA이다. 상기 인플라마솜 성분은 당해 분야에 공지된 임의의 인플라마솜, 예를 들어, NAPL1, NALP2, NALP3, NLRC4 또는 AIM2 인플라마솜의 성분일 수 있다. 전형적인 실시 형태에서, 상기 항체는 ASC 또는 이로부터 유래된 항원 또는 에피토프에 특이적으로 결합한다. 그러나, 포유 동물 인플라마솜 (예를 들어, NALP1, NALP2, NALP3, NLRC4 또는 AIM2 인플라마솜)의 임의의 다른 성분에 대한 항체가 사용될 수 있다.
본 출원에서 기재된 바와 같은 항체는 단클론 또는 다클론 항체 또는 이의 활성 단편일 수 있다. 상기 항체 또는 활성 단편은 본 출원에서 기재된 바와 같이 키메라, 사람 또는 사람화 형태일 수 있다.
ASC에 특이적으로 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 임의의 적합한 항체 또는 이의 활성 단편이 사용될 수 있으며, 예를 들어, 대상체의 CNS (예를 들어, CNS 세포) 또는 폐 세포 (예를 들어, II형 폐포 세포)에서 ASC 활성을 억제하는 항체가 사용될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 항체는 서열 번호 1 또는 서열 번호 2의 아미노산 서열과 적어도 85%의 서열 동일성을 갖는 아미노산에 특이적으로 결합한다. 또 다른 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 단편은 KKFKLKLLSVPLREGYGRIPR의 아미노산 서열 (서열 번호 5)과 적어도 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열에 결합한다. 더 또 다른 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 단편은 KKFKLKLLSVPLREGYGRIPR의 아미노산 서열 (서열 번호 5) 또는 서열 번호 5의 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 또는 20개의 아미노산에 결합한다. 더 추가의 실시 형태에서, 상기 항체 또는 이의 단편은 서열 번호 5의 2~5, 5~10, 10~15 또는 15~20개의 아미노산에 결합한다. 일부 실시 형태에서, 항체 또는 항체 단편에 의해 결합된 ASC의 에피토프 (예를 들어, 서열 번호 5의 아미노산을 갖는 에피토프)는 연속적이다. 일부 실시 형태에서, 항체 또는 항체 단편에 의해 결합된 ASC의 에피토프 (예를 들어, 서열 번호 5의 아미노산을 갖는 에피토프)는 불연속적이다. 일부 경우에서, 본 출원에서 제공된 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 ASC의 활성을 억제하거나 감소시킨다.
본 출원에서 사용되는 "에피토프"라는 용어는 면역글로불린 또는 면역글로불린 단편에 특이적으로 결합할 수 있는 임의의 단백질 결정 인자를 포함한다. 에피토프 결정 인자는 일반적으로 아미노산 또는 당 측쇄와 같은 분자의 화학적 활성 표면 그룹으로 이루어지며, 일반적으로 특정한 3차원 구조적 특성 뿐만아니라 특정한 전하 특성을 갖는다. "에피토프"라는 용어는 또한 면역글로불린 중쇄 가변 (VH) 영역과 경쇄 가변 (VL) 영역 쌍에 의해 통상적으로 결합된 구조 단위를 지칭한다. 에피토프는 항체에 대한 최소 결합 부위를 정의할 수 있으므로, 항체의 특이성의 표적을 나타낼 수 있다.
유사하게, 또 다른 실시 형태에서, 상기 인플라마솜은 NALP1 인플라마솜이고, 상기 적어도 하나의 성분은 NALP1 (즉, NLRP1)이다. 본 실시 형태에서, 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편은 서열 번호 3 또는 서열 번호 4의 아미노산 서열과 적어도 85%의 서열 동일성을 갖는 아미노산에 특이적으로 결합한다.
더 또 다른 실시 형태에서, 제제는 인플라마솜의 성분에 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 하나 이상의 항체 또는 이의 활성 단편과 조합된 하나 이상의 EV 흡수 억제제이다. 상기 EV 흡수 억제제는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 임의의 EV 흡수 억제제일 수 있다. 인플라마솜의 성분에 결합하는 항체는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 임의의 인플라마솜 성분에 결합하는 임의의 항체일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, CN S 또는 폐 염증을 앓고 있는 대상체에게 투여되는 제제는 AIM2 인플라마솜의 성분 (예를 들어, ASC)에 결합하는 항체와 조합된 헤파린 (예를 들어, 에녹사파린)을 포함한다.
하나의 실시 형태에서, 상기 방법은 포유 동물 인플라마솜 (예를 들어, AIM2 인플라마솜)의 적어도 하나의 성분 (예를 들어, ASC)에 특이적으로 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편을 포함하는 치료학적 유효량의 조성물을 제공하는 단계; 및 CNS 또는 폐 염증 또는 MS를 앓고 있는 포유 동물에게 상기 조성물을 투여하되, 여기서, 상기 포유 동물에게 상기 조성물을 투여하는 것이 상기 포유 동물의 CNS 또는 폐에서 카스파아제-1 활성화의 감소를 초래하는 단계를 포함한다. 또 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 포유 동물 인플라마솜 (예를 들어, AIM2 인플라마솜)의 적어도 하나의 성분 (예를 들어, ASC)에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 치료학적 유효량의 조성물을 제공하는 단계; 및 CNS 또는 폐 염증 또는 MS를 앓고 있는 포유 동물에게 상기 조성물을 투여하되, 여기서, 상기 포유 동물에게 상기 조성물을 투여하는 것이 하나 이상의 인플라마솜 성분 (예를 들어, ASC)의 수준의 감소를 초래하는 단계를 포함한다. 더 또 다른 실시 형태에서, 상기 방법은 포유 동물 인플라마솜 (예를 들어, AIM2 인플라마솜)의 적어도 하나의 성분 (예를 들어, ASC)에 특이적으로 결합하는 항체를 포함하는 치료학적 유효량의 조성물을 제공하는 단계; 및 CNS 또는 폐 염증 또는 MS를 앓고 있는 포유 동물에게 상기 조성물을 투여하되, 여기서, 상기 포유 동물에게 상기 조성물을 투여하는 것이 ALI의 감소를 초래하는 단계를 포함한다. 상기 CNS 또는 폐 염증은 CNS 손상 (예를 들어, SCI 또는 TBI), 천식, 만성 폐쇄성 폐 장애 (COPD), 신경 퇴행성 질환, 또는 염증성 성분을 갖는 자가 면역 질환의 결과일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 폐 염증은 CNS 손상, 예를 들어, TBI 또는 SCI에 기인한다.
하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 방법은 CNS 또는 폐 염증 또는 MS를 앓고 있는 것으로 의심되는 대상체 유래의 샘플에서 포유 동물 인플라마솜의 하나 이상의 성분의 수준 또는 활성을 검출하는 단계를 추가로 포함한다. 상기 수준 또는 활성을 검출하는 방법은 대상체로부터 수득된 샘플에서 적어도 하나의 인플라마솜 단백질 (예를 들어, ASC 또는 AIM2)의 수준을 측정하는 단계; 상기 적어도 하나의 인플라마솜 단백질 (예를 들어, ASC 또는 AIM2)의 상승된 수준 또는 활성의 존재 또는 부재를 결정하는 단계를 포함한다. 상기 적어도 하나의 인플라마솜 단백질의 수준 또는 활성은 대조군 샘플에서 상기 적어도 하나의 인플라마솜 단백질의 수준에 비해 증진될 수 있다. 단백질 시그니처에서 상기 적어도 하나의 인플라마솜 단백질의 수준 또는 활성은 예비 결정된 기준 값 또는 기준 값의 범위에 비해 증진될 수 있다. 적어도 하나의 인플라마솜 단백질은 뉴클레오티드-결합 류신-풍부 반복 피린 도메인 함유 단백질 1 (NLRP1), NLRP2, NLRP3, NLRC4, AIM2, 카스파아제 동원 도메인 함유 아폽토시스-관련된 Speck 유사 단백질, 카스파아제-1 또는 이의 조합일 수 있다. 상기 샘플은 뇌척수액 (cerebrospinal fluid: CSF), 타액, 혈액, 혈청, 혈장, 소변 또는 폐 흡인물일 수 있다.
포유 동물 인플라마솜의 적어도 하나의 성분에 특이적으로 결합하는 항체
포유 동물의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시키기 위해 본 출원에서 기재된 방법은 포유 동물 인플라마솜 (예를 들어, AIM2 인플라마솜)의 적어도 하나의 성분 (예를 들어, ASC, AIM2)에 특이적으로 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편을 포함하는 조성물을 포함한다. 포유 동물의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 치료 및/또는 감소시키기 위한 조성물은 적어도 하나의 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제를 추가로 포함할 수 있다. 본 출원의 방법에서 사용하기 위해 포유 동물 인플라마솜의 성분에 대해 지시된 예시적인 항체는 미국 특허 US 8,685,400에서 발견된 것들일 수 있으며, 이의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 예시적인 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 또한 본 출원에서 제공되며, 여기서, 예를 들어, 상기 단클론 항체 또는 항체 단편은, VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3을 포함하도록 VH 영역과, VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3을 포함하도록 VL 영역을 포함한다.
하나의 실시 형태에서, 포유 동물의 CNS 또는 폐에서 염증을 치료 및/또는 감소시키기 위한 조성물은 포유 동물 ASC 단백질, 예를 들어, 사람, 마우스 또는 래트 ASC 단백질의 도메인 또는 이의 부분에 특이적으로 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편을 포함한다. 임의의 적합한 항-ASC 항체가 사용될 수 있으며, 수개가 시판 중이다. 본 출원의 방법에서 사용하기 위한 항-ASC 항체의 예는 미국 특허 US 8,685,400에서 발견된 것들일 수 있으며, 이의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 본 출원에서 제공된 방법에서 사용하기 위한 시판되는 항-ASC 항체의 예로는 04-147 항-ASC, 클론 2EI-7 마우스 단클론 항체 (MilliporeSigma), AB3607 - 항-ASC 항체 (Millipore Sigma), orb194021 항-ASC (Biorbyt), LS-C331318-50 항-ASC (LifeSpan Biosciences), AF3805 항-ASC (R & D Systems), NBP1-78977 항-ASC (Novus Biologicals), 600-401-Y67 항-ASC (Rockland Immunochemicals), D086-3 항-ASC (MBL International), AL177 항-ASC (Adipogen), 단클론 항-ASC (클론 o93E9) 항체, 항-ASC 항체 (F-9) (Santa Cruz Biotechnology), 항-ASC 항체 (B-3) (Santa Cruz Biotechnology), ASC 다클론 항체 - ADI-905-173 (Enzo Life Sciences) 또는 A161 항-사람 ASC (Leinco Technologies)가 포함되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 상기 사람 ASC 단백질은 수탁 번호 NP_037390.2 (Q9ULZ3-1), NP_660183 (Q9ULZ3-2) 또는 Q9ULZ3-3일 수 있다. 상기 래트 ASC 단백질은 수탁 번호 NP_758825 (BAC43754)일 수 있다. 상기 마우스 ASC 단백질은 수탁 번호 NP_075747.3일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 항체는 포유 동물 ASC 단백질 (예를 들어, 사람, 마우스 또는 래트 ASC)의 PYRIN-PAAD-DAPIN 도메인 (PYD) 또는 이의 부분 또는 단편에 결합한다. 이러한 실시 형태에서, 본 출원에서 기재된 바와 같은 항체는 사람, 마우스 또는 래트 ASC의 PYD 도메인 또는 이의 단편과 적어도 65% (예를 들어, 65, 70, 75, 80, 85%)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열에 특이적으로 결합한다. 하나의 실시 형태에서, 항체는 포유 동물 ASC 단백질 (예를 들어, 사람, 마우스 또는 래트 ASC)의 C-말단 카스파아제 동원 도메인 (CARD) 또는 이의 부분 또는 단편에 결합한다. 이러한 실시 형태에서, 본 출원에서 기재된 바와 같은 항체는 사람, 마우스 또는 래트 ASC의 CARD 도메인 또는 이의 단편과 적어도 65% (예를 들어, 65, 70, 75, 80, 85%)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열에 특이적으로 결합한다. 더 또 다른 실시 형태에서, 항체는 PYD 도메인과 CARD 도메인 사이에 위치한 포유 동물 ASC 단백질 서열 (예를 들어, 사람, 마우스 또는 래트 ASC)의 부분 또는 이의 단편에 결합한다. 또 다른 실시 형태에서, 포유 동물의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 치료 및/또는 감소시키기 위한 조성물은 래트 ASC의 영역, 예를 들어, ALRQTQPYLVTDLEQS의 아미노산 서열 (서열 번호 1) (즉, 래트 ASC의 잔기 178~193, 수탁 번호 BAC43754)에 특이적으로 결합하는 항체를 포함한다. 이러한 실시 형태에서, 본 출원에서 기재된 바와 같은 항체는 래트 ASC의 ALRQTQPYLVTDLEQS의 아미노산 서열 (서열 번호 1)과 적어도 65% (예를 들어, 65, 70, 75, 80, 85%)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열에 특이적으로 결합한다. 또 다른 실시 형태에서, 포유 동물의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 치료 및/또는 감소시키기 위한 조성물은 사람 ASC의 영역, 예를 들어, RESQSYLVEDLERS의 아미노산 서열 (서열 번호 2)에 특이적으로 결합하는 항체를 포함한다. 더 또 다른 실시 형태에서, 포유 동물의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 치료 및/또는 감소시키기 위한 조성물은 사람 ASC의 영역, 예를 들어, KKFKLKLLSVPLREGYGRIPR의 아미노산 서열 (서열 번호 5; 즉, 사람 ASC의 잔기 21~41) 또는 서열 번호 5의 5~10, 10~15 또는 15~20개의 아미노산에 특이적으로 결합하는 항체를 포함한다. 하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 기재된 바와 같은 ASC 도메인에 결합하는 항체 또는 이의 단편은 폐 세포, 예를 들어, 포유 동물의 II형 폐포 세포에서 ASC 활성을 억제한다. 또 다른 실시 형태에서, 본 출원에서 기재된 바와 같은 ASC 도메인에 결합하는 항체 또는 이의 단편 (예를 들어, 본 출원에서 제공된 단클론 항-ASC 항체 또는 이의 항체 단편)은 CNS 손상 또는 장애를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 포유 동물의 CNS에서 ASC 활성을 억제한다. CNS 손상 또는 장애의 예로는 TBI, SCI, 뇌졸중, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)이 포함될 수 있다.
특정 실시 형태에서, 본 발명은 ASC에 특이적으로 결합하고 표 2에 나타낸 하나 이상의 아미노산 서열을 포함하는 항체 및 항체 단편을 제공한다. 표 2에 나타낸 핵산 서열을 포함하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 인코딩하는 단리된 핵산 분자가 또한 본 출원에서 제공된다. 일부 경우에서, 발현 벡터는 표 2의 핵산 분자를 포함한다. 상기 발현 벡터는 중쇄 또는 경쇄 불변 영역을 포함할 수 있다. 본 출원에서 제공된 조성물 및 방법에서 사용하기 위한 경쇄 및 중쇄 발현 벡터 시스템의 예는 IgG4 (S241P) 중쇄 및 카파 경쇄에 대한 안티토프 pANT 발현 벡터 시스템이다. 중쇄 또는 경쇄에 대한 핵산 분자는 숙주 세포에서 핵산 절편의 발현에 적합한 조절 서열에 작동적으로 연결될 수 있다.
[표 2]
Figure pct00005
Figure pct00006
Figure pct00007
Figure pct00008
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22, 또는 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교할 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 29, 30 또는 31, 또는 서열 번호 28, 29, 30 또는 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22, 또는 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 29, 30 또는 31, 또는 서열 번호 28, 29, 30 또는 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 서열 번호 19를 포함하는 VH 영역 아미노산 서열 및 서열 번호 30을 포함하는 VL 영역 아미노산 서열을 포함하는 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 IC 100으로서 지칭될 수 있다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
하나의 실시 형태에서, ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 본 출원에서 제공되며, 여기서, 상기 항체 또는 이의 항체 단편은 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 또는 카파 쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함한다. 본 실시 형태에 추가하여, 대상체에서 염증을 치료하기 위한 방법에서 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 용도가 본 출원에서 제공된다. 상기 염증은 선천성 면역 염증일 수 있다. 상기 염증은 인플라마솜 관련 염증일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 미국 특허 US 8,685,400에 기재된 바와 같이 포유 동물에서 염증을 감소시키는 방법에 사용될 수 있으며, 그 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 상기 염증은 폐 및/또는 CNS에 존재할 수 있다. 상기 폐 및/또는 CNS의 염증은 손상 (예를 들어, 외상성 뇌 손상 (TBI) 또는 척수 손상 (SCI)) 또는 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통의 결과일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 CNS의 질환, 병태 또는 고통 또는 CNS에 영향을 미치는 질환, 병태 또는 고통은 뇌졸중 뿐만 아니라, 자가 면역 질환 및/또는 CNS 질환, 예를 들어, 근위축성 측삭 경화증 (ALS) 루게릭, 다발성 경화증 (MS), 면역 기능 장애 근육 CNS 파괴, 근위축증 (MD), 알츠하이머병 (AD), 파킨슨병 (PD)일 수 있다. 염증을 치료하는 방법에서 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 사용은 환자의 CNS 및/또는 폐에서 염증을 감소시킬 수 있다. 상기 감소는 대조군 (예를 들어, 치료되지 않은 환자 및/또는 치료 전 환자)과 비교될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편은 상기 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편을 MS를 앓고 있거나 앓고 있는 것으로 의심되는 환자에게 투여함으로써 MS를 치료하는데 사용된다. 일부 경우에서, 본 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편은 조성물에 존재한다. 상기 조성물은 본 출원에서 제공되는 바와 같은 약제학적 조성물일 수 있다.
또 다른 실시 형태에서, 포유 동물의 CNS 또는 폐에서 염증을 감소시키기 위한 조성물은 NLRP1 (예를 들어, 항-NLRP1 닭 항체) 또는 이의 도메인에 특이적으로 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편을 포함한다. 임의의 적합한 항-NLRP1 항체가 사용될 수 있으며, 수개가 시판 중이다. 본 출원의 방법에서 사용하기 위한 항-NLRP1 항체의 예는 미국 특허 US 8,685,400에서 발견된 것들일 수 있으며, 이의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 본 출원에서 제공된 방법에서 사용하기 위한 시판되는 항-NLRP1 항체의 예로는 사람 NLRP1 다클론 항체 AF6788 (R&D Systems), 토끼 다클론 항-NLRP1 ABF22 (EMD Millipore), 토끼 다클론 항-NLRP1 NB100-56148 (Novus Biologicals), 마우스 다클론 항-NLRP1 SAB1407151 (Sigma-Aldrich), 토끼 다클론 항-NLRP1 ab3683 (Abcam), 토끼 다클론 항-NLRP1 orb325922 (Biorbyt), 토끼 다클론 항-NLRP1 MBS7001225 (mybiosource), 양 다클론 AF6788 (R&D systems), 마우스 단클론 항-NLRP1 oaed00344 (Aviva Systems), 토끼 다클론 항-NLRP1 ARO54478_P050 (Aviva Systems), 토끼 다클론 항-NLRP1 APO7775PU-N (Origene), 토끼 다클론 항-NLRP1 ABIN768983 (Antibodies online), 토끼 다클론 항-NLRP1 3037 (Prosci), 토끼 다클론 항-NLRP1 12256-1-AP (Proteintech), 마우스 단클론 항-NLRP1 ALX-804-803-C100 (Enzo), 마우스 단클론 항-NLRP1 MA1-25842 (Invitrogen), 마우스 단클론 항-NLRP1 GTX16091 (GeneTex), 토끼 다클론 항-NLRP1 200-401-CX5 (Rockland) 또는 토끼 다클론 항-NLRP1 4990 (Cell Signaling Technology)이 포함되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 상기 사람 NLRP1 단백질은 수탁 번호 AAH51787, NP_001028225, NP_055737, NP_127497, NP_127499 또는 NP_127500일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 항체는 포유 동물 NLRP1 단백질 (예를 들어, 사람 NLRP1)의 피린, NACHT, LRR1~6, FIIND 또는 CARD 도메인 또는 이의 부분 또는 단편에 결합한다. 이러한 실시 형태에서, 본 출원에서 기재된 바와 같은 항체는 사람 NLRP1의 특정 도메인 (예를 들어, 피린, NACHT, LRR1~6, FIIND 또는 CARD) 또는 이의 단편과 적어도 65% (예를 들어, 65, 70, 75, 80, 85%)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열에 특이적으로 결합한다. 하나의 실시 형태에서, 맞춤 설계되고 Ayes Laboratories에 의해 생산된 닭 항-NLRP1 다클론은 폐 염증을 감소시키기 위해 사용된다. 이러한 항체는 사람 NLRP1에서 다음의 아미노산 서열에 대해 지시될 수 있다: CEYYTEIREREREKSEKGR (서열 번호 3). 하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 기재된 바와 같은 NLRP1 도메인에 결합하는 항체 또는 이의 단편은 폐 세포, 예를 들어, 포유 동물의 II형 폐포 세포에서 NLRP1 활성을 억제한다.
더 또 다른 실시 형태에서, 포유 동물의 CNS 또는 폐에서 염증을 감소시키기 위한 조성물은 AIM2 또는 이의 도메인에 특이적으로 결합하는 본 출원에서 제공되는 바와 같은 항체 또는 이의 활성 단편을 포함한다. 임의의 적합한 항-AIM2 항체가 사용될 수 있으며, 수개가 시판 중이다. 본 출원에서 제공된 방법에서 사용하기 위한 시판되는 항-AIM2 항체의 예로는 토끼 다클론 항-AIM2 카탈로그 번호 20590-1-AP (Proteintech), 항-AIMS 항체 (ab119791) (Abcam), 토끼 다클론 항-AIM2 (N-말단 영역) 카탈로그 번호 AP3851 (ECM biosciences), 토끼 다클론 항-ASC 카탈로그 번호 E-AB-30449 (Elabsciences), 카탈로그 번호 sc-293174를 갖는 AIM2 항체 (3C4G11)로 불리는 항-AIM2 마우스 단클론 항체 (Santa Cruz Biotechnology), 카탈로그 번호 TA324972를 갖는 마우스 단클론 AIM2 항체 (Origene), AIM2 단클론 항체 (10M2B3) (Thermofisher Scientific), AIM2 토끼 다클론 항체 ABIN928372 또는 ABIN760766 (Antibodies-online), 카탈로그 번호 CAE02153을 갖는 코트 항-AIM2 다클론 항체 (Biomatix), 항-AIM2 다클론 항체 (OABF01632) (Aviva Systems Biology), 토끼 다클론 항-AIM2 항체 LS-C354127 (LSBio-C354127), 카탈로그 번호 MA5-16259를 갖는 토끼 단클론 항-AIM2 항체 (Cell Signaling Technology), 토끼 다클론 항-AIM2 단클론 항체 (Fab Gennix International Incorporated), 카탈로그 번호 AIM2 201AP, 토끼 다클론 항-AIM2 카탈로그 번호 MBS855320 (MyBiosource ), 토끼 다클론 항 AIM2 카탈로그 번호 36253 (Signalway), 토끼 다클론 항-AIM2 카탈로그 번호 43900002 (Novus Biological), 토끼 다클론 항-AIM2 GTX54910 (GeneTex), 토끼 다클론 항-AIM2 26-540 (Prosci), 마우스 단클론 항-AIM2 orb333902 (Biorbyt), 토끼 다클론 항-AIM2 ab93015 (Abcam), 토끼 다클론 항-AIM2 ab76423 (Abcam), 마우스 다클론 항-AIM2 SAB1406827 (Signma Aldrich) 또는 항-AIM2 3B10 (Biolegend)이 포함되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 상기 사람 AIM2 단백질은 수탁 번호 NX_014862, NP004824, XP016858337, XP005245673, AAB81613, BAF84731 또는 AAH10940일 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 항체는 포유 동물 AIM2 단백질 (예를 들어, 사람 AIM2)의 피린 또는 HIN-200 도메인 또는 이의 부분 또는 단편에 결합한다. 이러한 실시 형태에서, 본 출원에서 기재된 바와 같은 항체는 사람 AIM2의 특정 도메인 (예를 들어, 피린 또는 HIN-200) 또는 이의 단편과 적어도 65% (예를 들어, 65, 70, 75, 80, 85%)의 서열 동일성을 갖는 아미노산 서열에 특이적으로 결합한다. 하나의 실시 형태에서, 본 출원에서 기재된 바와 같은 AIM2 도메인에 결합하는 항체 또는 이의 단편은 폐 세포, 예를 들어, 포유 동물의 II형 폐포 세포에서 AIM2 활성을 억제한다.
본 출원에서 기재된 바와 같은 항-인플라마솜 (예를 들어, 항-ASC, 항-NLRP1 또는 항-AIM2) 항체는 면역글로불린 가변 영역의 적어도 하나의 항원 결합 영역을 갖는 다클론 및 단클론 설치류 항체, 다클론 및 단클론 사람 항체, 또는 이들의 임의의 부분을 포함하며, 여기서, 상기 항체는 포유 동물 인플라마솜 (예를 들어, AIM2 인플라마솜)의 성분, 예를 들어, ASC 또는 AIM2에 특이적으로 결합한다. 일부 경우에서, 항체는 ASC에 대해 특이적이어서 항체는 폴리펩타이드의 에피토프에 대해 생산되는 경우 ASC에 대해 특이적이고 천연 또는 재조합 단백질의 적어도 일부에 결합한다.
특정 실시 형태에서, 본 출원에서 제공된 항체는 하나 이상의 아미노산 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 폴리펩타이드를 포함한다. 예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 ASC 결합 항체 단편은 서열 번호 6~8, 12~14, 18~22 또는 28~31 중 하나 이상의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드와 비교하여 하나 이상의 아미노산 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 폴리펩타이드를 포함한다. 본 출원에서 제공된 항체는 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 또는 그 이상의 아미노산 치환, 결실 또는 삽입을 가질 수 있다. 예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 ASC 결합 항체 단편은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10개 또는 그 이상의 아미노산 치환, 결실 또는 삽입을 가질 수 있다. 치환, 결실 또는 삽입은 항-ASC 항체 또는 ASC 결합 항체 단편의 폴리펩타이드를 인코딩하는 핵산 분자의 부위 특이적 돌연변이 유발 또는 PCR 매개성 돌연변이 유발과 같은 표준 기술에 의해 도입될 수 있다.
특정 실시 형태에서, 보존적 아미노산 치환은 본 출원에서 개시된 항체 또는 항체 단편의 아미노산 서열내 하나 이상의 위치에서 이루어진다. "보존적 아미노산 치환"은, 아미노산 잔기가 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기로 대체되는 것이다. 특정 실시 형태에서, 보존적 아미노산 치환은 항체 또는 항체 단편의 CDR 서열이 아닌 FR 서열에서만 이루어진다. 유사한 측쇄를 갖는 아미노산 잔기의 계열은, 염기성 측쇄 (예를 들어, 라이신, 아르기닌, 히스티딘), 산성 측쇄 (예를 들어, 아스파르트산, 글루탐산), 비하전 극성 측쇄 (예를 들어, 글리신, 아스파라긴, 글루타민, 세린, 트레오닌, 타이로신, 시스테인), 비극성 측쇄 (예를 들어, 알라닌, 발린, 류신, 이소류신, 프롤린, 페닐알라닌, 메티오닌, 트립토판), 베타-분지된 측쇄 (예를 들어, 트레오닌, 발린, 이소류신) 및 방향족 측쇄 (예를 들어, 타이로신, 페닐알라닌, 트립토판, 히스티딘)을 비롯하여, 당해 분야에 정의되어 있다. 따라서, 예를 들어, 항-ASC 단클론 항체 또는 ASC 결합 항체 단편의 폴리펩타이드내 아미노산 잔기는 동일한 측쇄 계열의 다른 아미노산 잔기로 대체될 수 있다. 특정 실시 형태에서, 아미노산의 스트링 (string)은 측쇄 계열 구성원의 순서 및/또는 조성이 상이한 구조적으로 유사한 스트링으로 대체될 수 있다. 당해 분야의 통상의 기술자는 서열 번호 6~8, 12~14, 18~22 또는 28~31 중 하나 이상의 아미노산 서열을 갖는 폴리펩타이드와 비교하여 하나 이상의 아미노산 치환, 결실 또는 삽입을 갖는 폴리펩타이드를 포함하는 항-ASC 단클론 항체 또는 ASC 결합 항체 단편이 ELISA, 웨스턴 블롯, 파지 디스플레이 등을 포함하지만 이들에 한정되지 않는 일상적이고 당해 분야에서 인정된 방법을 사용하여 ASC 단백질에 결합하는지 여부를 평가할 수 있을 것이다.
서열 상동성 또는 동일성 (이러한 용어는 본 출원에서 상호 교환적으로 사용됨)의 계산은 다음과 같이 수행될 수 있다.
2개의 아미노산 서열 또는 2개의 핵산 서열의 퍼센트 동일성을 결정하기 위해, 상기 서열들을 최적 비교 목적을 위해 정렬한다 (예를 들어, 최적 정렬을 위해 캡을 제1 및 제2 아미노산 또는 핵산 서열 중 하나 또는 둘 다에 도입할 수 있으며, 비-상동 서열을 비교 목적을 위해 무시할 수 있다). 예시적인 실시 형태에서, 비교 목적을 위해 정렬된 기준 서열의 길이는 기준 서열의 길이의 적어도 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 75%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100%이다. 그 다음, 상응하는 아미노산 위치 또는 뉴클레오타이드 위치에서 아미노산 잔기 또는 뉴클레오타이드를 비교한다. 제1 서열 내의 위치가 제2 서열 내의 상응하는 위치와 동일한 아미노산 잔기 또는 뉴클레오타이드에 의해 점유될 때, 분자들은 해당 위치에서 동일하다 (본 출원에서 사용되는 아미노산 또는 핵산 "동일성"은 아미노산 또는 핵산 "상동성"과 동일하다). 2개의 서열 사이의 퍼센트 동일성은 갭의 수를 고려하여 서열에 의해 공유되는 동일한 위치의 수의 함수이며, 각 갭의 길이는 상기 2개의 서열의 최적 정렬을 위해 도입될 필요가 있다.
2개의 서열 사이의 서열의 비교와 퍼센트 동일성의 결정은 수학적 알고리즘을 사용하여 수행될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 2개의 아미노산 서열들 사이의 퍼센트 동일성은 GCG 소프트웨어 패키지 (www.gcg.com에서 이용 가능)의 GAP 프로그램 내에 통합된 니들만 알고리즘 (문헌 [Needleman et al., (1970) J. Mol. Biol. 48:444-453])을 사용하고, BLOSUM 62 매트릭스 또는 PAM250 매트릭스, 및 16, 14, 12, 10, 8, 6 또는 4의 갭 가중치 및 1, 2, 3, 4, 5 또는 6의 길이 가중치를 사용하여 결정된다. 더 또 다른 실시 형태에서, 2개의 뉴클레오타이드 서열들 사이의 퍼센트 동일성은 GCG 소프트웨어 패키지 (www.gcg.com에서 이용 가능)의 GAP 프로그램을 사용하고, NWSgapdna CMP 매트릭스, 및 40, 50, 60, 70 또는 80의 갭 가중치 및 1, 2, 3, 4, 5 또는 6의 길이 가중치를 사용하여 결정된다. 한 세트의 파라미터 (및 분자가 본 발명의 서열 동일성 또는 상동성 한계 내에 있는지 결정하기 위해 실무자가 어떤 파라미터를 적용해야 하는지에 대해 불확실한 경우에 사용될 수 있는 것)는 12의 갭 패널티, 4의 갭 확장 페널티 및 5의 프레임시프트 갭 패널티를 갖는 BLOSUM 62 점수 매트릭스이다.
2개의 아미노산 또는 뉴클레오타이드 서열 사이의 퍼센트 동일성은 문헌 [Meyers et al. (1989) CABIOS 4:11-17]의 알고리즘을 사용하여 결정될 수 있으며, 이는 PAM120 가중치 잔기 표, 12의 갭 길이 페널티 및 4의 갭 페널티를 사용하여 ALIGN 프로그램 (버전 2.0)에 포함되었다.
특정 양태에서, 항체는 단클론 항체이다. 다른 양태에서, 항체는 다클론 항체이다. "단클론 항체"라는 용어는 항원의 특정 에피토프와 면역 반응할 수 있는 항원 결합 부위의 한 종만을 포함하는 항체 분자 집단을 지칭한다. 따라서, 단클론 항체 조성물은 전형적으로 면역 반응하는 특정 단백질에 대한 단일 결합 친화성을 나타낸다.
일부 양태에서, 본 발명의 항체 (항-ASC 단클론 항체 또는 ASC 결합 항체 단편)는 사람화, 키메라 또는 사람 항체이다.
일부 실시 형태에서, 본 발명의 항체는 사람화 항체이다.
본 출원에서 사용되는 "사람화 항체"라는 용어는 중쇄 및/또는 경쇄의 비-사람 (예를 들어, 마우스, 래트 또는 햄스터) 상보성 결정 영역 (CDR)과 함께 가변 영역에 하나 이상의 사람 프레임워크 영역을 포함하도록 조작된 항체를 지칭한다. 특정 실시 형태에서, 사람화 항체는 CDR 영역을 제외하고 완전히 사람인 서열을 포함한다. 일부 경우에서, 상기 사람 면역글로불린의 Fv 프레임워크 영역 (FR) 잔기는 상응하는 비-사람 잔기로 대체된다. 또한, 사람화 항체는 항체의 사람 형태에서나 도입된 CDR 또는 프레임워크 서열에서도 발견되지 않지만 항체 성능을 추가로 정제하고 최적화하기 위해 포함되는 잔기를 포함할 수 있다. 일반적으로, 사람화 항체는 실질적으로 모든 적어도 1개, 전형적으로는 2개의 가변 도메인을 포함할 것이며, 여기서, 모든 또는 실질적으로 모든 CDR 영역은 비-사람 면역글로불린의 것들에 상응하고, 모든 또는 실질적으로 모든 FR 영역은 사람 면역글로불린 공통 서열의 것들이다. FR 영역은 당해 분야에 공지되어 있고/있거나 본 출원에서 제공된 임의의 방식으로 변형될 수 있다. 이러한 변형은 숙주 세포에서 증가된 반감기 및/또는 개선된 발현과 같은 바람직한 특성을 부여할 수 있다. 하나의 실시 형태에서, FR 영역(들)은 본 출원에서 참조로 포함되는 미국 출원공개 US 2015/0232557에 기재된 바와 같이 변형 또는 돌연변이될 수 있다. 다른 형태의 사람화 항체는, 원래 항체로부터의 하나 이상의 CDR "로부터 유래된" 하나 이상의 CDR로도 또한 지칭되는, 원래 항체에 대해 변경되는 하나 이상의 CDR (CDR L1, CDR L2, CDR L3, CDR H1, CDR H2 또는 CDR H3)을 가질 수 있다. 사람화 항체는 또한 적어도 면역글로불린 불변 영역 또는 도메인 (Fc)의 일부, 전형적으로는 사람 면역글로불린의 일부를 임의로 포함할 것이다.
사람화 항체는 전형적으로 비-사람화 항체에 비해 사람에 대한 면역원성이 낮으므로, 특정 상황에서 치료 이점을 제공한다. 예를 들어, 항체 불변 영역은 면역학적으로 불활성 (예를 들어, 보체 용해를 촉발하지 않음)이 되도록 조작될 수 있다. 예를 들어, PCT 출원 PCT/GB99/01441; 영국 특허 출원 9809951.8을 참조하며, 이들 각각은 그 전문치 본 출원에 참조로 포함된다. 당해 분야의 통상의 기술자는 사람화 항체를 알고 있을 것이며, 또한 이의 생성에 적합한 기술을 알고 있을 것이다. 예를 들어, 문헌 [Hwang, W. Y. K., et al., Methods 36:35, 2005]; [Queen et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86:10029-10033, 1989]; [Jones et al., Nature, 321:522-25, 1986]; [Riechmann et al., Nature, 332:323-27, 1988]; [Verhoeyen et al., Science, 239:1534-36, 1988]; [Orlandi et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86:3833-37, 1989]; 미국 특허 US 5,225,539; US 5,530,101; US 5,585,089; US 5,693,761; US 5,693,762; US 6,180,370; 및 셀릭 등 (Selick et al.)의 국제공개공보 WO 90/07861을 참조하며, 이들 각각은 그 전문이 본 출원에 참조로 포함된다. 이용될 수도 있는 항체를 사람화하는 다른 방법은 문헌 [Daugherty et al., Nucl. Acids Res. 19:2471-2476, 1991] 및 미국 특허 US 6,180,377; US 6,054,297; US 5,997,867; US 5,866,692; US 6,210,671; 및 US 6,350,861 및 PCT 국제공개공보 WO 01/27160에 개시되어 있으며, 이들의 각각은 그 전체가 본 출원에 참조로 포함된다. 예를 들어, 본 발명의 항-ASC 항체 또는 항-ASC 항원 결합 단편은 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3을 포함하는 VH 영역 아미노산 서열; 및 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3을 포함하는 VL 영역 아미노산 서열; 및 하나 이상의 사람 프레임워크 영역 서열을 포함할 수 있다.
일부 실시 형태에서, 본 발명의 항체는 키메라 항체이며, ASC에 특이적으로 결합한다. 일부 경우에서, 항-ASC 키메라 항체는 ASC의 활성을 감소시킨다. 본 출원에서 사용되는 "키메라 항체"라는 용어는 적어도 하나의 사람 불변 영역을 포함하도록 조작된 항체를 지칭한다. 예를 들어, 마우스 항체 (예를 들어, 마우스 단클론 항체)의 경쇄(들)의 하나 또는 모든 가변 영역 및/또는 중쇄(들)의 하나 또는 모든 가변 영역은 각각 사람 불변 영역, 예를 들어, 제한 없이 IgG1 사람 불변 영역에 결합될 수 있다. 키메라 항체는 전형적으로 비-키메라 항체에 비해 사람에 대한 면역원성이 낮으므로, 특정 상황에서 치료 이점을 제공한다. 당해 분야의 통상의 기술자는 키메라 항체를 알고 있을 것이며, 또한 이의 생성에 적합한 기술을 알고 있을 것이다. 예를 들어, 캐빌리 등 (Cabilly et al.)의 미국 특허 US 4,816,567; 슈마커 등 (Shoemaker et al.)의 미국 특허 US 4,978,775; 비버스 등 (Beavers et al.)의 미국 특허 US 4,975,369; 및 보스 등 (Boss et al.)의 미국 특허 US 4,816,397를 참조하며, 이들 각각은 그 전문이 본 출원에 참조로 포함된다. 예를 들어, 본 발명의 항체 또는 항원 결합 단편은 서열 번호 22를 포함하는 VH 영역; 서열 번호 31을 포함하는 VL 영역; 및 사람 불변 영역을 포함할 수 있다.
본 출원에서 사용되는 "면역학적 결합" 및 "면역학적 결합 특성"이라는 용어는 면역글로불린 분자 (예를 들어, 항체)와 면역글로불린이 특이적인 항원 사이에 발생하는 유형의 비공유 상호 작용을 지칭한다. 면역학적 결합 상호 작용의 강도 또는 친화성은 상호 작용의 해리 상수 (Kd)로 표현될 수 있으며, 여기서, 보다 작은 Kd는 보다 큰 친화성을 나타낸다. 선택된 폴리펩타이드의 면역학적 결합 특성은 당해 분야에 널리 공지된 방법을 사용하여 정량화될 수 있다. 이러한 방법 중 하나는 항원 결합 부위/항원 복합체 형성 및 해리의 속도를 측정하는 것을 수반하며, 여기서, 이러한 속도는 복합체 파트너의 농도, 상호 작용의 친화성 및 양방향 속도에 동일하게 영향을 미치는 기하학적 파라미터에 좌우된다. 따라서 "온 속도 상수 (on rate constant)" (Kon)와 "오프 속도 상수 (off rate constant)" (Koff)는 농도와 결합 및 해리의 실제 속도를 계산하여 결정될 수 있다. (문헌 [Nature 361:186-87 (1993)] 참조). Koff/Kon의 비율은 친화성과 관련이 없는 모든 파라미터의 취소를 가능하게 하며 해리 상수 Kd와 동일하다. (일반적으로 문헌 [Davies et al. (1990) Annual Rev Biochem 59:439-473] 참조). 평형 결합 상수 (Kd)가 방사성 리간드 결합 분석 또는 당해 분야의 통상의 기술자에게 공지된 유사한 분석과 같은 분석에 의한 측정시 ≤10 μM, ≤10 nM, ≤10 nM, 및 ≤100 pM 내지 약 1 pM일 때, 본 발명의 항체는 에피토프 (예를 들어, 아미노산 서열 번호 5를 갖는 ASC 단편)에 특이적으로 결합한다고 한다.
특정 양태에서, 본 발명의 항체는 1가 또는 2가이며, 단일 또는 이중 쇄를 포함한다. 기능적으로, 항체의 결합 친화성은 10-5 M 내지 10-12 M의 범위 내일 수 있다. 예를 들어, 항체의 결합 친화성은 10-6 M 내지 10-12 M, 10-7 M 내지 10-12 M, 10-8 M 내지 10-12 M, 10-9 M 내지 10-12 M, 10-5 M 내지 10-11 M, 10-6 M 내지 10-11 M, 10-7 M 내지 10-11 M, 10-8 M 내지 10-11 M, 10-9 M 내지 10-11 M, 10-10 M 내지 10-11 M, 10-5 M 내지 10-10 M, 10-6 M 내지 10-10 M, 10-7 M 내지 10-10 M, 10-8 M 내지 10-10 M, 10-9 M 내지 10-10 M, 10-5 M 내지 10-9 M, 10-6 M 내지 10-9 M, 10-7 M 내지 10-9 M, 10-8 M 내지 10-9 M, 10-5 M 내지 10-8 M, 10-6 M 내지 10-8 M, 10-7 M 내지 10-8 M, 10-5 M 내지 10-7 M, 10-6 M 내지 10-7 M, 또는 10-5 M 내지 10-6 M이다.
경쟁적 억제에 의해 단클론 항체 특이성 및 친화성을 결정하는 방법은 문헌 [Harlow, et al., Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, N.Y., 1988], [Colligan et al., eds., Current Protocols in Immunology, Greene Publishing Assoc. and Wiley Interscience, N.Y., (1992, 1993)] 및 [Muller, Meth. Enzymol. 92:589-601, 1983]에서 발견될 수 있으며, 이들 문헌은 그 전체가 본 출원에 참조로 포함된다.
본 발명의 항-인플라마솜 (예를 들어, 항-ASC 및 항-AIM2) 항체는 폴리펩타이드 또는 항원성 단편에 의한 적절한 동물의 접종, 림프구 집단의 시험관내 자극, 합성 방법, 하이브리도마, 및/또는 이러한 항-ASC 또는 항-NLR1 항체를 인코딩하는 핵산을 발현하는 재조합 세포와 같은 방법이지만 이들에 한정되지 않는 방법에 따라 일상적으로 만들어질 수 있다. 정제된 재조합 ASC 또는 이의 펩타이드 단편, 예를 들어, 래트 ASC (예를 들어, 수탁 번호 BAC43754)의 잔기 178~193 (서열 번호 1), 사람 ASC의 서열 번호 2 또는 사람 ASC (예를 들어, 수탁 번호 NP_037390.2)의 잔기 21~41 (서열 번호 5)을 사용하는 동물의 면역화는, 항-ASC 항체를 제조하는 방법의 한 예이다. 유사하게, 정제된 재조합 NLRP1 또는 이의 펩타이드 단편, 예를 들어, 래트 NALP1의 잔기 MEE SQS KEE SNT EG-cys (서열 번호 4) 또는 사람 NALP1의 서열 번호 3을 사용하는 동물의 면역화는, 항-NLRP1 항체를 제조하는 방법의 한 예이다.
ASC 또는 NLRP1에 특이적으로 결합하는 단클론 항체는 당해 분야의 통상의 기술자에게 공지된된 방법으로 수득될 수 있다. 예를 들어, 문헌 [Kohler and Milstein, Nature 256:495-497, 1975]; 미국 특허 US 4,376,110; [Ausubel et al., eds., Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Assoc. and Wiley Interscience, N.Y., (1987, 1992)]; [Harlow and Lane ANTIBODIES: A Laboratory Manual Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1988]; [Colligan et al., eds., Current Protocols in Immunology, Greene Publishing Assoc. and Wiley Interscience, N.Y., (1992, 1993)]을 참조하며, 이들의 전문은 본 출원에 참조로 포함된다. 이러한 항체는 IgG, IgM, IgE, IgA, GILD 및 임의의 이의 서브클레스를 비롯한 임의의 면역글로불린 클래스일 수 있다. 본 발명의 단클론 항체를 생산하는 하이브리도마는 시험관내에서, 제자리에서 또는 생체내에서 배양될 수 있다. 하나의 실시 형태에서, 본 개시 내용의 항-ASC 단클론 항체를 생산하는 하이브리도마는 ICCN1.0H 하이브리도마이다. 본 개시 내용의 항-ASC 단클론 항체를 생산하는 하이브리도마는 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하는 단클론 항체를 생산하며, 여기서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이들의 변이체를 포함한다. 본 개시 내용의 항-ASC 단클론 항체를 생산하는 하이브리도마는 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하는 단클론 항체를 생산하며, 여기서, 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이들의 변이체를 포함한다. 더 또 다른 실시 형태에서, 본 개시 내용의 항-ASC 단클론 항체를 생산하는 하이브리도마는 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하는 단클론 항체를 생산하며, 여기서, 상기 VH 영역 아미노산 서열은 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이들의 변이체를 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열은 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이들의 변이체를 포함한다.
조성물의 투여
본 발명의 조성물은 포유 동물 (예를 들어, 설치류, 사람)에게 임의의 적합한 제형으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 항-ASC 항체는 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제, 예를 들어, 생리 식염수 또는 완충된 염 용액 중에서 제형화될 수 있다. 적합한 담체 및 희석제는 투여의 방식 및 경로 및 표준 약제 실무에 기초하여 선택될 수 있다. 예시적인 약제학적으로 허용되는 담체 및 희석제 뿐만 아니라 약제학적 제형의 기재는 문헌 [Remington's Pharmaceutical Sciences], 당해 분야의 표준 텍스트 및 USP/NF에서 발견될 수 있다. 다른 물질이 조성물을 안정화시키고/시키거나 보존하기 위해 조성물에 첨가될 수 있다.
본 발명의 조성물은 포유 동물에게 임의의 통상의 기술로 투여될 수 있다. 전형적으로, 이러한 투여는 흡입 또는 비경구 (예를 들어, 정맥내, 피하, 종양내, 근육내, 복강내 또는 척수강내 도입)에 의해 이루어질 수 있다. 조성물은 또한 표적 부위로, 예를 들어, 수술 전달에 의해 내부 또는 외부 표적 부위로, 또는 카테터에 의해 혈관에 의해 접근 가능한 부위로 직접 투여될 수 있다. 조성물은 단일 볼루스로, 다중 주사로, 또는 연속 주입에 의해 (예를 들어, 정맥내로, 복막 투석에 의해, 펌프 주입에 의해) 투여될 수 있다. 비경구 투여의 경우, 조성물은 멸균된 발열성 물질 제거 형태로 제형화될 수 있다.
유효 용량
상기에서 기재된 조성물은 포유 동물 (예를 들어, 래트, 사람)에게 유효량, 즉, 처리된 포유 동물에서 바람직한 결과를 생성할 수 있는 (예를 들어, CNS 또는 뇌졸중에 대한 외상성 손상을 겪었거나 자가 면역 또는 자가 염증성, 대사성, 신경 퇴행성 또는 CNS 질환을 갖는 포유 동물의 CNS에서 염증을 감소시킬 수 있는) 양으로 투여될 수 있다. 이러한 치료학적 유효량은 하기에 기재된 바와 같이 결정할 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 제제 (예를 들어, 본 출원에서 제공되는 바와 같은 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편, 예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물의 치료학적 유효량은, 일반적으로 약 0.001, 0.005, 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 125, 150, 175 또는 200 mg/kg 환자 체중일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 제제 (예를 들어, 본 출원에서 제공되는 바와 같은 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편, 예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물의 치료학적 유효량은, 일반적으로 약 0.001 내지 약 200 mg/kg 환자 체중일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 제제 (예를 들어, 본 출원에서 제공되는 바와 같은 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편, 예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물의 치료학적 유효량은 일반적으로 대상체의 체중 당 약 0.001 mg/kg 내지 약 0.01 mg/kg, 약 0.01 mg/kg 내지 약 0.1 mg/kg, 약 0.1 mg/kg 내지 약 1 mg/kg, 약 1 mg/kg 내지 약 10 mg/kg, 약 10 mg/kg 내지 약 25 mg/kg, 약 25 mg/kg 내지 약 50 mg/kg, 약 50 mg/kg 내지 약 75 mg/kg, 약 75 mg/kg 내지 약 100 mg/kg, 약 100 mg/kg 내지 약 125 mg/kg, 약 125 mg/kg 내지 약 150 mg/kg, 약 150 mg/kg 내지 약 175 mg/kg, 또는 약 175 mg/kg 내지 약 200 mg/kg일 수 있다. 본 출원에서 제공되는 바와 같은 제제 (예를 들어, 본 출원에서 제공되는 바와 같은 단클론 항체 또는 이로부터 유래된 항체 단편, 예를 들어, IC 100)를 포함하는 조성물은 단일 또는 다중 용량으로 투여될 수 있다.
본 발명의 방법에서 사용되는 조성물의 독성 및 치료학적 효능은 LD50 (집단의 50%에 치명적인 용량)을 결정하기 위해 배양 세포 또는 실험 동물을 사용하여 표준 약제 절차에 의해 결정될 수 있다. 독성 효과와 치료 효과 사이의 용량비는 치료 지수이며, 이것은 LD50/ED50 비로 표현될 수 있다. 일부 경우에서, 본 출원에서 제공된 조성물은 큰 치료 지수를 나타낸다. 독성 부작용을 나타내는 것들이 사용될 수 있지만, 이러한 부작용의 잠재적 손상을 최소화하는 전달 시스템을 설계하도록 주의를 기울여야 한다. 일부 경우에서, 본 출원에서 제공된 조성물의 투약량은 독성이 거의 없거나 없는 ED50을 포함하는 범위 내에 있다. 상기 투약량은 사용되는 투여 형태 및 이용되는 투여 경로에 따라 상기 범위 내에서 달라질 수 있다.
의학 및 수의학 기술에서 널리 공지된 바와 같이, 임의의 하나의 대상체에 대한 투약량은 대상체의 크기, 체표면적, 연령, 투여되는 특정 조성물, 투여 시간, 투여 경로, 전반적인 건강, 및 동시 투여되는 다른 약물을 비롯한 다수의 요인에 좌우된다.
실시예
본 발명은 추가로 하기 구체적인 실시예에 의해 예시된다. 실시예는 예시를 위해서만 제공되며, 어떠한 식으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 안된다.
실시예 1: TBI 후 ALI에서 EV 매개성 인플라마솜 신호 전달의 역할 및 이의 중화의 효과
폐 기능 장애는 종종 중증 외상성 뇌 손상의 합병증으로서 나타난다 (1). TBI 대상체의 대략 20~25 퍼센트는 급성 폐 손상 (ALI)을 발병하지만 (2), TBI 유도된 ALI의 병리를 매개하는 기전은 여전히 잘 정의되지 있지 않다. 선행 문헌은 TBI 후 폐 기능 장애가 심폐 기능 장애를 초래하는 증가된 두개내압에 대한 교감 신경 반응에 기인한다는 생각을 뒷받침하였다 (42). 그러나, 보다 최근 연구들은 전신 염증성 반응이 또한 TBI 유도된 폐 손상에 주요한 역할을 한다는 것을 밝혀냈다 (43). 특히, HMGB1-RAGE 리간드 수용체 경로는 TBI 후 폐 기능 장애에 대한 중심 전달 기전 (central transduction mechanism)의 역할을 한다 (8). 추가로, HMGB1은 AIM2 인플라마솜 활성화를 유도한다 (37). 또한, 선행 문헌은 병원체가 DAMP, 예를 들어, HMGB1을 운반하는 EV를 분비하고 염증을 촉발한다는 것을 밝혀냈다 (문헌 [Buzas et al., 2014]). 다양한 연구들은 혈액 뇌 장벽 (blood brain barrier: BBB)이 뇌와 혈관내 구획 사이의 보호 장벽에 손상을 초래하는 손상 후 빠르면 3~6 시간에 TBI 후 투과성이며 단백질 및 유체의 누출을 초래한다는 것을 밝혀냈다 (44). 손상 후 BBB의 붕괴는 DAMP와 같은 염증 매개체의 분비를 초래하고, 이는 추가로 뇌 염증 및 원위 장기 손상을 일으킬 수 있다 (5). 수개의 염증 매개체는 뇌 손상에 대한 명확한 마커로서 역할을 할 수 있지만, 이들의 타당성은 널리 받아 들여지지 않는다 (45). 또한, TBI 유도된 ALI에 대해 임상적으로 승인된 치료제 또는 바이오 마커는 현재 없다. 최근에, EV는 폐 손상 (46) 및 TBI (47)를 비롯한 여러 가지 다양한 유형의 질환에 대한 바이오 마커 연구에서 관심 대상의 영역이 되었다. TBI 환자의 뇌척수액으로부터 단리된 EV에서, 대조군 샘플과 비교하여 인플라마솜 단백질의 증가가 존재하는 것으로 이전에 밝혀졌다 (14). 이러한 실시예에서, TBI 유도된 ALI의 병인에서 EV 매개성 인플라마솜 신호 전달의 기여를 검사하였다.
재료 및 방법
동물 및 외상성 뇌 손상
모든 동물 절차는 마이애미 밀러 대학 의학부의 동물 실험 윤리 위원회 (Institutional Animal Care and Use Committee of the University of Miami Miller School of Medicine) (Animal Welfare Assurance A3224-01)에 의해 승인되었으며, 실험 동물의 관리 및 사용 (Care and Use of Laboratory Animals)에 대한 NIH 가이드에 따라 수행되었다. 이러한 연구를 수행할 때 ARRIVE 가이드라인을 따랐다. 모든 C57/BL6 마우스는 8~12 주령 및 24 내지 32 그램이었다. 마우스를 TBI에 대한 실험 그룹 (가성, 4h, 24), 입양 전이 및 처리에 대한 실험 그룹 (미경험 (naive), 가성 염수, 미처리, 에녹사파린, 항-ASC)에 전향적으로 무작위 배정하였다. TBI 실험 그룹의 경우, 가성 동물은 외과 수술을 겪지만 손상되지 않았다. 입양 전이 처리 연구의 경우, 가성 염수 그룹은 외과 수술을 겪으며 비히클 처리로서 염수를 투여받았다. 미경험 동물은 외과 수술을 겪지 않았다. 5 내지 6의 샘플 크기를 각 그룹에 대해 배율 (power) 분석 (G* 배율 분석 사용, 효과 크기 F=0.85, α 설정 0.05) 및 이력 데이터에 기초하여 사용하였다49, 50. 모든 마우스를 마이애미 대학 (University of Miami)의 로이스 포프 라이프 센터 (Lois Pope Life Center)의 바이러스 항원 부재 (viral antigen free: VAF) 동물 시설에 12 시간 명/암 주기로 수용하고, 음식과 물을 무제한으로 공급하였다. 상기 시설은 주 2회 축산 (husbandry) 절차를 수행하고, 동물의 병태를 매일 점검한다. 수술 후 동물을 관찰하며, 여기서, 이들을 가열 패드 상에 유지시키고, 체온을 직장 프로브로 제어하고, 수술실에서 370C로 유지한 다음, 동물 축사로 옮겼다.
수술 전에 동물을 케타민 및 자일라진 (복강내, i.p.)으로 마취하였다. 그 다음, 37℃의 체온을 보장하기 위해 마취 동물을 가열 패드 상에 놓았다. 제어된 피질 충격 (Controlled Cortical Impact: CCI) 모델을 사용하여 TBI를 수행하였다. 5 mm의 개두술을 우측 피질에 수행하였다 (정수리점으로부터 -2.5 mm 후방, 2.0 mm 측면). 3 mm의 임파운더 (impounder)를 갖는 ECCI-6.3 장치 (Custom Design & Fabrication, Richmond, VA, USA)를 6 m/s 속도, 0.8 mm 깊이 및 150 ms 충격 지속 기간으로 사용하여 손상을 유도하였다 (15). 이러한 절차 후, 동물을 케이지로 돌려보내고, 음식과 물을 제공하였다. 기재된 바와 같이 TBI 후 4 시간 및 24 시간에 동물을 희생시켰다. 가성 동물을 마취하고, 손상된 동물과 동일한 수술 전 절개를 수행하였지만, 개두술 또는 타박상을 겪지 않았다.
조직 수집
관류 전에, 모든 동물을 케타민 및 자일라진으로 마취하였다. 동물은 기관 관류를 겪었다. 20 cm H2O에서 기관 카테터를 사용하여 폐에 4% 파라포름알데히드 (PFA)를 주입한 다음, 4℃에서 4% PFA에 밤새 고정하였다. 고정된 폐 조직을 파라핀 포매하고, 5 μm 절편을 처리하였다 (16). 단백질 단리 및 분자 분석을 위해 우측 폐 조직을 수집하였다. 그 다음, 동물을 참수하고, 단백질 단리 및 분자 분석을 위해 우측 피질 조직을 수집하였다.
파이롭토솜 단리 분석
5 μm의 저결합 폴리비닐리덴 디플루오라이드 (PVDF) 막 (Millipore)을 통해 마우스 폐 조직 용해물을 여과하였다. 여과 후, 상청액을 2,700 xg에서 8분 동안 원심 분리하였다. 펠렛을 40 μl의 3[(3-콜아미도프로필)디메틸암모니오]-프로판설폰산 (CHAPS) 완충액 (20 mmol/L HEPES-KOH, pH 7.5, 5 mmol/L MgCl2, 0.5 mmol/L EGTA, 0.1 mmol/L 페닐메틸설포닐 플루오라이드, 프로테아제 억제제 칵테일 및 0.1% CHAPS) 중에 재현탁시켰다. 파이롭토솜을 2,700 xg에서 8분 동안 원심 분리하여 펠렛화하였다. 그 다음, 펠렛을 재현탁시키고, 2.2 μl의 디석신이미딜 기질을 갖는 27.8 μl의 CHAPS 완충액 (9) 중에서 30분 동안 실온에서 인큐베이션하여 ASC 이량체를 가교 결합시켰다. 마지막으로, 동량의 2x 라엠리 (Laemmli) 완충액을 첨가하고, ASC 및 가스더민 D (GSD)에 대한 시판 항체를 사용하여 단백질을 면역 블롯팅에 의해 분석하였다.
핵 및 세포질 추출
NE-PER 핵 및 세포질 추출 시약 (Thermo Scientific)을 사용하여 제조업자의 지시에 따라 핵 및 세포질 분획을 추출하였다. 간단히 말하자면, 마우스 폐 조직 샘플을 20~100 mg 조각으로 절단하고, 500 xg에서 5분 동안 원심 분리하였다. 조직 조각을 세포질 추출 시약으로 균질화하고, 16,000 xg에서 5분 동안 원심 분리하였다. 그 다음, 상청액 (세포 추출물)을 제거하고, 펠렛을 핵 추출 시약 (Thermo Scientific)으로 16,000 xg에서 10분 동안 원심 분리하였다. 이러한 상청액은 핵 분획과 상응하였으며, 이를 제거하고, -80℃에서 보관하였다.
면역 블롯팅
폐 및 뇌 조직 샘플을 액체 질소로 급속 냉동시키고, -80℃에서 보관하였다. 프로테아제 및 포스파타아제 억제제 칵테일을 포함하는 추출 완충액 (Sigma, St Louis, MO, USA) 중에 우측 하부 폐 및 우측 피질 조직의 2-mm 절편을 균질화하고, 카스파아제-1 (Novus Biologicals), ASC (Santa Cruz), IL-1β (Cell Signaling), IL-18 (Abcam), AIM2 (Santa Cruz) 및 HMGB1 (Millipore)에 대한 항체를 사용하여 문헌 [de Rivero Vaccari et al. 2015 (13)]에 기재된 바와 같이 4~20% Tris-TGX 크리테리온 프리캐스트 겔 (Criterion precasted gel) (Bio-Rad, Hercules, CA, USA) 중에 분해하였다. 이미지 랩 (Image Lab)을 사용하여 밴드 밀도의 정량화를 수행하고, 모든 데이터를 β-액틴으로 정규화하였다.
면역 조직 화학
조직 절편을 자일렌 중에서 탈파라핀화한 다음, 에탄올 및 트리스 완충 염수를 사용하여 재수화하였다. 그 다음, 이중 염색을 위해 면역 조직 화학 절차를 이전에 기재된 바와 같이 수행하였다 (16). 4℃에서 밤새 절편을 카스파아제-1 및 ASC (Millipore), AIM2 (Santa Cruz), HMGB1 (Millipore) 및 SPC (Millipore)에 대한 항체와 함께 인큐베이션하였다. 가성, 4 시간 및 24 시간 마우스의 면역 염색된 폐 절편을 Zeiss 레이저 주사 공초점 현미경 (Zeiss, Inc., Thornwood, NY, USA)으로 검사하였다. 폐 절편을 그룹으로 맹검화된 개체로 분석하였다.
EV 단리
제업조자 (Invitrogen)의 지시에 따라 전체 엑소좀 단리 용액을 사용하여 TBI 손상된 마우스 및 손상 마우스 유래의 혈청으로부터 EV를 단리하였다. 간단히 말하자면, 100 μl의 각 샘플을 2000 xg에서 30분 동안 원심 분리하였다. 그 다음, 상청액을 20 μl의 전체 엑소좀 단리 (Total Exosome Isolation: TEI) 시약과 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션한 후, 10,000 xg에서 10분 동안 실온에서 원심 분리하였다. 상청액을 폐기하고, 펠렛을 100 μl의 PBS 중에 재현탁시켰다. EV를 CD81의 발현 및 나노사이트 추적 분석 (Nanosight Tracking analysis)으로 특성화하였다 (도 6).
EV의 입양 전이
C57BL-6 TBI 및 가성 마우스로부터의 혈청 유래 EV를 미경험 C57BL-6 마우스에 경정맥을 통해 1.0 x 1010 입자/그램/체중의 용량으로 주사하였다48. 입자 계수를 나노사이트 추적 분석에 의해 측정하고, 이에 따라 샘플을 희석하였다. 수술 전에 동물을 케타민 및 자일렌으로 마취하였다. 1~2 cm의 절개를 턱과 쇄골 사이에 실시하였다. 경정맥을 올리고 묶은 후, 카테터를 배치하였다. 혈청 유래 EV를 전이시키고, 분석을 위해 주사 후 24 시간에 폐 및 뇌 조직을 수집하였다 (n=5).
에녹사파린 및 항-ASC 처리
TBI 마우스로부터의 혈청 유래 EV를 미경험 C57-BL6 마우스에 경정맥 주사를 통해 주사하였다. 1 시간 후, 에녹사파린 (3 mg/kg) (n=4) 및 항-ASC (IC 100; 5 mg/kg) (n=4)를 수용 동물에게 투여하였다. 다음 그룹을 사용하였다: 1) 미경험 그룹은 처리를 받지 않았고, 2) 가성 염수 그룹은 음성 대조군으로서 사용되었며 염수만의 경정맥 주사를 투여받았고, 3) 미처리 그룹은 어떠한 처리 없이 TBI 마우스로부터의 EV를 투여받았으며 양성 대조군으로 사용되었고, 4) ENOX 그룹은 TBI 마우스로부터의 EV 및 에녹사파린을 투여받았고, 5) 항-ASC 그룹은 TBI 마우스로부터의 EV 및 항-ASC를 투여받았다. 처리 순서를 무작위화하였다. 분석을 위해 주사 후 24 시간에 폐 및 뇌 조직을 수집하였다. 처리 실험에서 사용되는 항-ASC 항체는 ASC에 대한 사람화 단클론 항체이었으며, 쥐과 동물, 사람 및 돼지 ASC를 인식한다는 것에 유의해야 한다.
조직학 및 폐 손상 점수화
조직학, 형태학 및 ALI 점수화를 위해 폐 조직 절편을 표준 헤마톡실린 및 에오신 방법으로 염색하였다. 미국 흉부 학회 워크숍 보고서 (American Thoracic Society Workshop Report)로부터의 폐 손상 점수화 시스템 (Lung Injury Scoring System)을 사용하여 폐 절편을 맹검 병리학자에 의해 점수하였다 (17). 점수화를 위해 20의 무작위 고배율 시야 (high power fields)를 선택하였다. ALI 점수화를 위한 기준은 폐포 공간 및 간질 공간내 호중구의 수, 유리질 막, 공간을 충전하는 단백질성 잔해물, 및 폐포 중격 비후에 기초한다. 이러한 기준에 기초하여, 0 (손상 없음)과 1 (중증 손상) 사이의 점수를 제공하였다.
통계 분석
2개의 그룹에 대한 스튜던트 t 검정 및 일원 ANOVA, 이어서 2개의 이상의 그룹에 대한 터키 다중 비교 검정 (GraphPad Prism version 7.0)를 사용하여 데이터를 분석하였다. 다고스티노-피어슨 (D'Agostino-Pearson) 검정을 사용하여 정규성에 대해 검정하였다. 데이터를 평균+/-SEM으로 표현한다. 사용된 유의성의 P 값은 * p<0.05이었다.
결과
중증 TBI는 마우스의 뇌에서 AIM2 인플라마솜 단백질 및 HMGB1 발현을 증가시킨다
과도한 수준의 염증 유발성 사이토카인 IL-1β 및 IL-18 및 인플라마솜 단백질은 유체 타진 뇌 손상 후 이차 손상과 관련된다 (18). 그러나, 염증 유발성 사이토카인의 중증 CCI 유도된 가공 및 인플라마솜 단백질 및 피질 용해물 수준의 변경이 분석되는지를 결정하기 위해, 중증 TBI에서 인플라마솜 활성화에 대한 제한된 연구가 있다. 이러한 실시예에서, 중증 CCI 후, 피질 용해물을 카스파아제-1 (도 1a, b) (p<.001), ASC (도 1a, c) (p= .003), IL-18 (도 1a, d) (p=.0042), AIM2 (도 1a, f) (p=0.0197) 및 IL-1β (도 1a, g) (p=0.0141)의 수준에 대해 손상 후 4 및 24 시간에 검사하였다. 카스파아제-1, ASC, AIM2 및 IL-1β의 수준은 CCI 후 4 시간에 최고이었으며, 24 시간까지 감소하였다. 염증성 사이토카인 성숙에 대한 시간 과정은 약간 다르지만, TBI 후 24 시간에 최고이었다. 다른 것들이 AIM2 인플라마솜을 활성화시키는 인플라마솜 DAMP HMGB1의 역할을 나타냈기 때문에, 이들 단백질의 수준을 또한 피질 용해물 중에서 측정하였다. 도 1a, 1e에 도시된 바와 같이, CCI는 손상 후 4 및 24 시간에서 HMGB1의 수준 (도 1a, 1e) (p=0.0121)의 유의한 증가를 유도하였다. 이러한 데이터는 마우스에서 중증 CCI 후, AIM2 인플라마솜 단백질의 수준이 손상 후 피질에서 유의하게 상승하였다는 것을 나타낸다.
중증 TBI는 마우스의 폐에서 AIM2 인플라마솜 단백질 및 HMGB1 발현을 증가시킨다
CCI가 폐에서 인플라마솜 활성화를 유도하는지를 결정하기 위해, 폐 용해물의 면역블롯 분석을 카스파아제-1 (도 1h, i) (p=.0026), ASC (도 1h, j) (p=.0427), IL-18 (도 1h, k) (p=.0025), IL-1β (도 1h, n) (p=.0012) 및 AIM2 (도 1h, m) (p<.001) 및 NLRP3 (p=.0047) (보충 도 1)에 대해 수행하였다. 증가된 수준의 카스파아제-1, ASC, IL-18 및 AIM2는 가성 대조군과 비교하여 손상 후 4 시간 및 24 시간에 유의하게 증가하였다. 그러나, 단백질 발현 증가의 시간 과정은 뇌에서 관찰된 것과 약간 다르며, 이는 CCI 후 24 시간에 최고이었다. HMGB1-RAGE 축은 TBI가 폐 기능 장애를 유도하는 기전에서 역할을 하기 때문에 (8), 폐 용해물을 HMGB1 단백질 발현의 수준에 대해 분석하였다. 도 1h, 1l (p=.0158)은 HMGB1 발현이 TBI 후 4 및 24 시간에 증가한 것을 도시하며, 이는 AIM2 인플라마솜 및 HMGB1이 TBI 후 폐에서 염증성 반응에서 역할을 한다는 것을 나타낸다.
TBI는 마우스의 폐에서 파이롭토시스를 유도한다
이전에 나타낸 바와 같이, 피질 뉴런에서의 AIM2 인플라마솜 활성화는 파이롭토틱 (pyroptotic) 세포 사멸을 초래한다 (19). TBI가 마우스 폐 조직에서 파이롭토시스를 초래하는지 검사하기 위해, 폐 조직에서 파이롭토솜을 TBI 후 단리하였다. 손상 후 4 시간에 희생된 TBI 동물은 가성 동물과 비교하여 ASC 올리고머화의 증거를 나타냈다 (도 4a). ASC 이량체 및 삼량체는 TBI 동물에서 나타났다 (각각 50, 75 kDA). 이러한 결과는 파이롭토솜 형성을 나타내며, 이는 ASC 올리고머의 초분자 조립을 특징으로 할 수 있다. 추가로, 카스파아제-1의 활성화시에 절단되고 파이롭토시스 및 IL-1β의 방출을 촉발하는 가스더민 D (GSDMD) (20)는, 가성과 비교하여, TBI 동물의 폐에서 유의하게 증가하였다 (도 4b 및 4c) (p=0.0001). 이러한 결과는 파이롭토시스가 TBI 후 폐 조직에서 세포 사멸에 기여한다는 것을 나타냈다.
TBI는 II형 폐포 상피 세포에서 인플라마솜 단백질의 면역 반응성을 증가시킨다
TBI는 모세혈관 누출을 초래할 수 있어서, II형 뉴모시스티스로 불리는 특화된 폐포 상피 세포에 증가된 혈관 투과성 및 손상을 초래한다 (5). 손상 후 폐에서 인플라마솜 발현에 미치는 TBI의 세포 효과를 검사하기 위해, 면역 조직 화학 분석을 가성, 4 시간 및 24 시간 손상된 동물의 폐 절편에서 수행하였다. II형 폐포 상피 세포는 ALI에서 손상된 폐 세포의 주요 유형인 것으로 공지되어 있다 (17). 폐 절편을 AIM2, 카스파아제-1 및 ASC (녹색)에 대한 항체로 염색하고, 프로-계면 활성제 단백질 C (Pro-SPC, 적색), II형 상피 세포의 마커 및 DAPI 핵 염색 (청색)으로 공동 염색하였다. 도 2a~2c에 도시된 바와 같이, 활성 카스파아제-1 (도 2a), ASC (도 2b) 뿐만 아니라 AIM2 (도 2c)는 SPC 양성 세포에 존재한다 (화살표). 이러한 인플라마솜 단백질의 면역 반응성은 TBI 후 증가하였다. 이러한 결과는 인플라마솜 단백질이 II형 폐포 상피 세포에서 발현되고 TBI가 이러한 세포에서 증가된 면역 반응성을 초래한다는 것을 나타낸다.
TBI는 핵 및 세포질 HMGB1 발현을 증가시킨다
TBI 후 폐 세포에서 HMGB1의 세포 분포를 결정하기 위해, 폐 균질물로부터 핵 및 세포질 분획을 단리하였다 (도 3a, 3c) (p=.0337). 면역 블롯팅은 둘 다의 분획이 TBI 후 4 시간에 HMGB1 발현의 유의한 증가를 갖는다는 것을 나타냈다 (도 3b, 3d) (p=.0345). TBI 후 폐 절편에서 면역 반응성의 변화를 결정하기 위해 HMGB1의 면역 조직 화학 분석을 또한 수행하였다. 절편을 HMGB1 (녹색) 및 SPC (적색) 및 DAPI 핵 염색 (청색)에 대해 공동 염색하였다. HMGB1의 면역 반응성은 가성과 비교하여 4 시간 및 24 시간에 증가하였다. HMGB1의 약한 면역 반응성은 SPC 양성 세포 (화살표)에서 관찰되었고 (도 3e); 따라서, 이는 손상된 폐 조직의 HMGB1 변화가 세포질에 존재할 수 있다는 것을 시사한다.
TBI는 폐 형태의 변화를 유도하고 ALI를 유도한다
ALI는 염증성 과정를 특징으로 할 수 있으며, 이는 폐포성 및 간질성 부종 뿐만 아니라 염증성 세포의 폐포 공간내 침윤을 초래한다 (23). 폐 조직의 조직 병리학적 분석 (도 5a)은 중증 TBI가 손상 후 4 및 24 시간에 폐 구조 및 형태의 실질적 변화를 초래한다는 것을 나타낸다. 가성 동물은 정상 폐포 형태를 나타내는 반면, 손상된 동물은 폐포성 부종의 급성 변화를 나타냈지만 손상 후 24 시간까지 약간 감소하였다 (긴 화살표). 추가로, 둘 다의 시점에서 호중구 침윤 (화살표 머리) 및 폐포 모세혈관 막의 형태 변화 (*)의 증거가 존재하였다. 손상된 동물은 간질성 부종의 징후를 나타냈으며, 이는 손상 후 4 시간에 보다 두드러졌지만 손상 후 24 시간에도 여전히 분명하였다 (짧은 화살표). 마지막으로, 손상된 동물은 또한 간질 영역 및 폐포 중격의 비후의 증거를 나타냈다 (파운드, #).
중증 손상이 ALI를 유도한다는 것을 확인하기 위해, 미국 흉부 학회 (American Thoracic Society)에 의해 정의되는 ALI 점수화 시스템을 사용하여 조직학적 절편을 분석하였다 (17). 이러한 시스템은 폐포 및 간질 공간내 호중구 침윤, 유리질 막 형성, 공간을 채우는 단백질성 잔해물, 및 폐포 중격 비후의 증거에 기초한다 (17). 이러한 특징은 손상된 동물에서 유의하게 상승하였으며, ALI 점수는 가성과 비교하여 TBI 동물에서 전반적으로 보다 높았다 (도 5b) (p=0.0017).
에녹사파린 및 항-ASC 항체 처리는 TBI 마우스 유래의 EV의 입양 전이 후 인플라마솜 발현 및 ALI를 유의하게 감소시킨다
TBI 후 순환으로 방출될 수 있는 EV 및 이의 카고가 폐에서 인플라마솜 활성화를 유도할 수 있다는 증거를 제공하기 위해, 중증 CCI 마우스로부터의 혈청 유래 EV를 사용하여 전형적인 입양 전이 실험을 수행하였다. EV 마커 CD81에 대한 웨스턴 블롯을 사용하여 EV 제제를 검증하였다 (도 6). 대조군은 가성 또는 미경험 동물로부터 단리된 EV를 투여받았다. 도 7a~7f에 도시된 바와 같이, 활성 카스파아제-1 (도 7a, 7b), ASC (도 7a, 7c), IL-18 (도 7a, 7d), AIM2 (도 7a, 7e) 및 HMGB1 (도 7a, 7f)은 비손상 또는 미경험 마우스 또는 미경험 마우스 유래의 EV를 투여받는 동물의 폐와 비교하여 TBI 손상된 동물 유래의 EV를 투여받은 동물의 폐에서 유의하게 상승하였다. 또한, 염증성 세포의 침윤 (화살표)은 TBI 마우스 유래의 EV로 처리된 폐에서 명백하였다 (도 7g). 마지막으로, ALI 점수는 또한 손상된 마우스 유래의 EV를 투여받은 동물에서 유의하게 보다 높았다 (도 7g). 이러한 연구는 TBI 후 순환으로 방출되는 EV가 ALI의 발병 기전에 기여하는 폐 표적 세포에서 인플라마솜을 활성화하는 신경-호흡기-인플라마솜 축 (neural-respiratory-inflammasome axis)에 대한 증거를 제공하였다.
다음으로, 손상된 마우스에서 미경험 마우스까지 EV의 입양 전이 후, ASC에 대한 에녹사파린 또는 단클론 항체 (IC 100) 중 어느 하나로 처리하여 엑소좀 흡수 차단을 시도하였다. 음성 대조군 동물은 염수를 투여받았으며, 양성 대조군 동물은 처리를 받지 않았다. 도 8a~8f에 도시된 바와 같이, 카스파아제-1 (도 8a, 8b), ASC (도 8a, 8c), IL-1β (도 8a, 8d), AIM2 (도 8a, 8e) 및 HMGB1 (도 8a, 8f)은 에녹사파린 또는 사람화 단클론 항-ASC 항체 (예를 들어, IC 100 항체)에 의한 처리 후 미처리 (양성 대조군) 그룹과 비교하여 유의하게 감소하였다 (p=<.0001). 추가로, H&E 염색된 폐 절편은 폐포 및 간질 공간 내로 유의하게 보다 적은 호중구 침윤을 나타냈을 뿐만 아니라 중격 비후의 징후도 나타내지 않았다 (도 9a~d). 에녹사파린 및 항-ASC 항체 (IC 100)로 처리된 동물에 대한 ALI 점수는 미처리 그룹과 비교하여 유의하게 보다 낮았다 (도 9e) (p=<.0001). 따라서, TBI 후 순환으로 방출된 EV는 폐 세포에서 인플라마솜 활성화에 역할을 하고 ALI를 초래한다.
결론
TBI는 특정한 의학적 합병증, 특히, 폐 및 중추 신경계 기능 장애의 보다 높은 비율과 관련될 수 있다. 이러한 실시예에서, 중증 TBI는 피질 및 폐 조직에서 HMGB1 및 인플라마솜 발현 (예를 들어, AIM2, 카스파아제-1 및 ASC 발현)을 증가시키고 ALI (예를 들어, 폐포 및 간질 공간내 호중구의 침윤, 폐포 중격 비후 및 폐포성 부종 및 출혈)와 일치하는 폐 형태의 변화를 유도하는 것으로 나타냈으며, 이는 신경 호흡기 염증 축 (Neural Respiratory Inflammatory Axis)의 생각을 도입한다. 중요하게, TBI는 폐 조직에서 파이롭토시스 (예를 들어, GSDMD 절단의 존재)를 초래하였으며, II형 폐포 상피 세포에서 인플라마솜 단백질의 발현을 증가시켰다. 추가로, TBI 마우스 유래 EV의 입양 전이가 인플라마솜을 활성화시키고 ALI를 유도하였으며, 이는 뇌 손상이 인플라마솜 단백질의 카고를 포함하는 EV의 방출을 유도한 다음, 운반되어 ALI을 초래한다는 것을 나타낸다. 추가로, EV 흡수 억제 (에녹사파린)와 인플라마솜 활성화 억제 (항-ASC 항체 (IC 100) 처리) 둘 다에 의해, 인플라마솜 단백질 발현 및 ALI의 발병의 감소가 있는 것으로 나타났다.
요약하면, 이러한 실시예는 AIM2 인플라마솜 신호 전달이 TBI 후 폐 손상의 병리 기전에서 중심 역할을 하며 EV 매개성 인플라마솜 신호 전달에 연루되는 TBI 유도된 ALI의 기전을 입증한다는 것을 나타냈다. 이러한 데이터는 EV 매개성 인플라마솜 신호 전달이 신경원성-호흡기-염증성 축에 연루되는 중요한 역할을 할 수 있다는 증거를 제공하였다. 따라서, 인플라마솜 단백질에 대한 항체 또는 EV 흡수를 차단하는 약물로 이러한 축을 표적화하는 것은 중요한 치료 의약의 모든 영역에서 신경 외상 유도된 ALI에서 치료학적 접근을 제공할 수 있다. 이러한 결과에 비추어, 개시된 치료학적 전략은 일반적으로 폐의 염증성 질환의 치료에 유용할 수 있다.
참조에 의한 포함
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실시예 2: 사람 환자에서 TBI 후 ALI에서 EV 매개성 인플라마솜 신호 전달의 역할
실시예 1의 마우스 실험에 대한 후속 조치로서, 사람 폐 내피 세포에서 인플라마솜 신호 전달에 대한 사람 TBI 환자로부터 단리된 EV의 역할을 검사하였다.
제1 실험에서, 전체 엑소좀 단리 키트 (Total Exosome Isolation kit; Thermofisher)를 사용하여 혈청 유래 EV를 TBI 및 대조군 환자로부터 단리하였다. 폐 사람 미세 혈관 내피 세포 (HMVEC-Lonza)를 배양하고 12-웰 플레이트에 플레이팅하였다. 밀집도에 도달한 후, TBI 및 대조군 환자로부터 단리된 EV (1.94 x 108 입자/ml)를 4 시간의 인큐베이션 기간 동안 세포에 전달하였다. 인큐베이션 후, 세포를 200 ul의 용해 완충액으로 수확하고, 세포 용해물을 웨스턴 블롯 분석에 사용하였다.
제2 실험에서, 전체 엑소좀 단리 키트 (Thermofisher)를 사용하여 혈청 유래 EV를 TBI 및 대조군 환자로부터 단리하였다. 폐 사람 미세 혈관 내피 세포 (HMVEC-Lonza)를 배양하고 96-웰 플레이트에 플레이팅하였다. 밀집도에 도달한 후, TBI 및 대조군 환자로부터 단리된 EV (1.94 x 108 입자/ml)를 3 시간의 인큐베이션 기간 동안 세포에 전달한 다음, 추가로 1 시간의 인큐베이션 기간 동안 카스파아제-1 FAM FLICA (Immunohistochemistry Technologies)와 1:30 부피 대 부피 비율로 전달하였다. 인큐베이션 후, 배지를 제거하고, 세포를 아폽토시스 세척 완충액 (Immunohistochemistry Technologies)으로 3회 세척하였다. 그 다음, 세포를 핵 염색을 위한 훽스트 (Hoechst)와 세포 사멸을 위한 프로피움 요오다이드로 공동 염색하였다. EVOS 현미경을 사용하여 이미지를 촬영한 다음, 492 nm의 여기 파장 및 520 nm의 방출 파장에서 형광 플레이트 판독기로 세포를 판독하였다.
결과
도 10a~10f에서 도시된 바와 같이, TBI 환자로부터의 혈청 유래 EV의 전달은 폐 내피 세포에서 인플라마솜 단백질 발현을 증가시켰다. 도 10a~10e는 카스파아제-1, ASC, AIM2 및 HMGB1이 4 시간 동안 대조군-EV와 함께 인큐베이션된 PMVEC와 비교하여 4 시간 동안 TBI-EV와 함께 인큐베이션된 PMVEC에서 상승하였다는 것을 나타냈다. 면역 분석 결과는 Ella 단순 플렉스 분석을 사용하여 IL-1 베타 발현의 유의한 증가를 나타냈다 (도 10f).
도 11a~11c에서 도시된 바와 같이, 폐 내피 세포에 대한 TBI-EV의 전달은 활성 카스파아제-1의 면역 반응성 및 세포 사멸을 증가시켰다.
결론
이러한 연구는 TBI 후 순환으로 방출되는 EV가 ALI의 발병 기전에 기여하는 폐 표적 세포에서 인플라마솜을 활성화하는 신경-호흡기-인플라마솜 축에 대한 증거를 추가로 제공하였다.
실시예 3: 다발성 경화증의 동물 모델에서 사람화 항-ASC 항체 사용의 효과
MS 치료에서 사람화 항-ASC 단클론 항체의 유용성을 결정하기 위해, 상기 항체를 실험적 알러지성 뇌척수염 (experimental allergic encephalomyelitis: EAE) 마우스에 투여하였다. EAE는 문헌 [Hoftberger R, Leisser M, Bauer J, Lassmann H (Dec 2015). "Autoimmune encephalitis in humans: how closely does it reflect multiple sclerosis?". Acta Neuropathol Commun. 3 (1): 80] 및 [Lassman Hans (Feb 2010). "Acute disseminated encephalomyelitis and multiple sclerosis". Brain. 133: 317-319] 및 [L. Gomez Vicente et al. Relapse in a paucisymptomatic form of multiple sclerosis in a patient treated with nivolumab, Neuro Oncol (2016) 18 (suppl 4): iv25]에 기재된 바와 같이 MS의 동물 (즉, 설치류) 모델이다.
방법
EAE의 유도 및 IC 100에 의한 처리
이전에 기재된 바와 같이 (문헌 [Brambilla et al., 2014]), 미엘린 희소 돌기 아교 세포 당단백질 35-55 펩타이드 (MOG35-55, BioSynthesis)를 갖는 2 월령 C57BL/6 암컷 마우스에서 활성 EAE를 유도하였다. 간단히 말해서, PBS 중에 용해된 백일해 독소의 복강내 (i.p.) 주사 (350 ng/마우스; 0 일차), 이어서, 완전 프로인트 아쥬반트 중에 유화된 MOG35-55 (300 ng/마우스; 1 일차)의 피하 투여 및 백일해 독소의 두번째 i.p. 주사 (350 ng/마우스, 2 일차)를 마우스에 투여하였다. EAE의 유도 후 8 일차에 시작하여 4일 마다 i.p 주사를 통해 비히클 (0.9% 염수) 또는 IC 100을 마우스에 3개의 상이한 용량 (10, 30 및 45 mg/kg)으로 투여하였다. EAE의 임상 증상을 다음과 같이 0에서 6까지의 척도로 매일 평가하였다: 0, 임상 징후 없음; 1, 꼬리 탄력 (tail tone)의 상실; 2, 이완 꼬리; 3, 완전한 뒷다리 마비; 4, 완전한 앞다리 마비; 5, 빈사 상태; 6, 사망.
유세포 계측을 위한 세포 단리
PBS에 의한 경심 관류 후, 척수를 수확하고, Mg2+ 및 Ca2+를 함유하지 않는 차가운 HBSS 용액 (Hanks' Balanced Salt Solution; HBSS w/o)에 넣었다. 70 um 스트레이너를 통해 샘플을 단일 세포 현탁액에 수동으로 해리시키고, HBSS w/o로 세척하였다. 비장 샘플을 1200 rpm에서 10분 동안 4℃에서 회전시키고, 상청액을 제거하고, 제조업자의 지침에 따라 적혈구 (RBC)를 2 ml의 RBC 용해 완충액 (eBioscience) 중에 용해시켰다. 그 다음, 비장 세포를 PBS 중에 재현탁시켰다. 척수로부터 분리된 세포를 유세포 계측 완충액 (FCB, eBioscience) 중에 재현탁시키고, 미엘린 제거 비드 II (Myelin Removal Beads II; Miltenyi)와 함께 인큐베이션하였다. 제조업자의 프로토콜 (Miltenyi)에 기재된 바와 같이 LS 자기 컬럼을 사용하여 미엘린을 고갈시켰다. 비장 세포와 유사하게, 척수 세포를 PBS 중에 재현탁시키고, 하기에서 기재된 바와 같이 염색하였다.
면역 라벨링 및 유세포 계측 분석
카스파아제-1을 평가한 실험의 경우, 제조업자의 지침에 따라 FAM FLICATM 카스파아제 1 키트 (BioRad)를 사용하였다. 세포를 FLICA 용액 (BioRad) 중에 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하고, 아폽토시스 세척 완충액 (Apoptosis Wash Buffer; BioRad)으로 세척하고, 1ml의 PBS 중에 재현탁시켰다. 그 다음, 샘플을 고정 가능한 생/사 염색 (Tonbo Biosciences)과 함께 4℃에서 30분 동안 인큐베이션하고, 1200 rpm에서 10분 동안 4℃에서 회전시키고, 상청액을 제거하였다. 세포를 100 ul의 FACS 완충액 중에 재현탁시키고, 항-CD16/32 (FcR block, eBioscience)로 실온에서 5분 동안 차단하고, 4℃에서 30분 동안 면역 염색하고, 1% PFA로 고정하였다. CytExpert 2.1 소프트웨어 (Beckman Coulter)가 장착된 CytoFLEX S 유세포 측정기로 샘플을 분석하였다. 척수 백혈구의 수를 123카운트 이비즈 (123count eBeads; eBioscience)로 결정하였다. TC20TM 자동화 세포 계수기 (TC20TM Automated Cell Counter; Bio-Rad)를 사용하는 트립판 블루 배제 계수와 조합하여 유세포 계측에 의해 비장 백혈구의 수를 결정하였다. 유세포 계측 항체의 목록은 하기 표 3에 제공된다.
[표 3]
Figure pct00015
룩솔 패스트 블루 (luxol fast blue) 염색 및 탈수초 백질 부피의 정량화
척수의 파라포름알데히드 (PFA) 고정 절편을 파라핀 포매하고, Leica RM 2135 마이크로톰으로 10 mm 두께의 횡단면으로 절단하고, 룩솔 패스트 블루 (luxol fast blue: LFB)로 염색하였다. 50 um 간격의 10개의 연속 절편을 사용하여 탈수초 백질 부피를 추정하였다. 탈수초 영역에 대해 Olympus BX51 현미경으로 윤곽을 나타내고, 탈수초 백질 부피를 Stereoinvestigator 소프트웨어 (MicroBrightfield)로 정량화하였다. 탈수초 척수의 3D 재구성을 Neurolucida 소프트웨어 (MBF Bioscience)로 동일한 연속 절편 상에서 수행하였다.
조직내 IC 100의 정량화
Meso Scale Technology를 사용하는 InflamaCORE, LLC에서 개발된 분석법을 사용하여 EAE의 유도 후 35 일차 (dpi)에 뇌, 척수, 간 및 비장에서 IC 100을 정량화하였다. QuickPlex SQ 120 기기 (Meso Scale Diagnostics, Maryland)를 사용하여 분석을 판독하였다.
항-ASC가 척수 뉴런을 관통하는지를 확인하기 위해서 타박상 경부 척수 손상의 래트 모델에서 유사한 실험을 수행하였다.
IC 100이 세포에 흡수되는지 확인하기 위해, THP-1 세포를 포함하는 조직 배양 배지 (사람 단핵구 세포주)에 플루오레세인 라벨링된 IC 100을 첨가한다.
결과
항-ASC 항체 IC 100에 의한 처리는 실험적 자가 면역 뇌척수염 (experimental autoimmune encephalomyelitis: EAE)의 기능적 결과를 개선시킨다
IC 100의 치료학적 잠재력을 평가하기 위해, EAE를 2월령 암컷 C57BL/6 마우스에서 MOG35-55 펩타이드 (문헌 [Brambilla et al., 2014])로 유도하고, 질병의 유도 후 8 일차 (dpi)부터 IC 100 또는 비히클 단독을 투여하였다. 35 dpi로 설정된 희생 때까지 이러한 투여를 4일 마다 반복하였다. 10, 30 및 45 mg/Kg의 3개의 용량을 테스트하였다.
IC 100은 30 및 45 mg/Kg의 용량으로 사용될 때 기능 회복을 상당히 개선하였으며, 실험 기간 전체에 걸쳐 임상 질환 점수의 강력한 감소를 나타냈다 (도 12a). 처리는 누적 질병 지수 (CDI)의 감소로 측정될 때 EAE의 전체 중증도 뿐만 아니라 평균 최고 임상 점수 (도 12b)를 감소시켰다 (도 12c). 30 및 45 mg/Kg IC 100으로 처리된 마우스는 또한 지연된 질병 발병의 경향을 나타냈다 (도 12d). 마우스가 최대 질병 점수에 도달한 날에는 차이가 관찰되지 않았다 (도 12e).
항-ASC 항체 IC 100에 의한 처리는 EAE 후 척수내 말초 면역 세포의 침윤을 감소시킨다
EAE의 임상 증상의 개시, 지속성 및 중증도는 척수내 면역 세포의 침윤과 직접적인 상관 관계가 있다. IC 100이 이러한 과정에 영향을 미치는지 여부를 평가하기 위해, 35 dpi에 척수로부터 단리된 면역 세포 집단을 유세포 측정으로 프로파일링하였다. 30 mg/Kg IC 100에 의한 처리는, EAE 병리를 유도하는데 가장 중요한 면역 세포 집단인, 뇌염 유발 CD4+ T 세포 뿐만 아니라 CD8+ T 세포의 총 수를 유의하게 감소시켰다 (도 13a). 다른 모든 면역 세포 집단은 감소를 향한 분명한 경향을 나타냈다. 비장에서 IC 100 용량 중 어느 것에서도 세포 수의 차이가 관찰되지 않았으며, 이는 처리가 EAE 시험 감염 (challenge)에 대한 적절한 면역 반응을 일으키는 마우스의 능력을 방해하지 않았다는 것을 시사한다 (도 13b).
항-ASC 항체 IC 100에 의한 처리는 EAE 후 미세 아교 세포의 수 및 활성화 상태를 감소시킨다
미세 아교 세포는 CNS 질환에 대한 면역 염증 반응에 참여한다. 이들의 활성화 상태가 증가함에 따라, 이들은 증식하고 MHCII의 표면 발현을 상향 조절한다. IC 100이 이러한 반응에 영향을 미치는지 여부를 평가하기 위해, 척수에서 총 미세 아교 세포 및 MHCII+ 활성화된 미세 아교 세포의 수를 유세포 계측으로 정량화하였다. 두 집단 모두는 30 mg/Kg IC 100에 의한 처리에 의해 유의하게 감소하였으며, 이는 이러한 용량에서 IC 100이 미세 아교 세포 활성화 및 미세 아교 세포 매개성 신경 염증을 억제하는데 효과적이라는 것을 나타낸다 (도 14 참조).
IC 100은 뇌 및 척수를 관통한다
MS를 후퇴시키는 약물을 설계하는데 중요한 파라미터는 약물이 치료 수준으로 CNS 내로 침투하는지 여부를 결정하는 것이다. 이것은 특히 진행형 MS의 치료에서 중요한 특징인데, 이는 혈액-뇌 장벽이 질병의 이러한 단계에서 비교적 온전한 것으로 나타나기 때문이다 (문헌 [Lassman et al. 2012]). 따라서, 본 발명자들은 뇌, 척수, 간 및 비장을 수확하여 이러한 조직에서 IC 100의 수준을 결정하였다. 도 15에서 도시된 바와 같이, IC 100은 3개의 모든 투약량으로 뇌와 척수를 비롯한 이러한 모든 조직을 관통하였다. 흥미롭게도, 척수내 IC 100의 수준은 30 mg/kg 용량에서 보다 높았으며, 이러한 용량에서 보다 큰 치료학적 효과와 일치하였다.
플루오레세인 라벨링된 IC 100은 THP-1 세포 (사람 단핵구 세포주)에 흡수되며, 조직 배양 배지에 첨가될 때 ASC specks 내에 혼입된다. 추가로, 이러한 세포의 인플라마솜 유도는 로다민 라벨링된 덱스트란과 함께 라벨링된 IC 100의 ASC specks 내 흡수를 자극하며, 이는 IC 100 흡수가 세포내 이입에 의해 매개된다는 것을 시사한다 (도 16 참조).
마찬가지로, IC 100은 THP-1 세포로부터 IL-1β가 방출되는 것을 방지하였다 (도 17 참조).
항-ASC 항체 (예를 들어, IC 100)는 또한 타박상 경부 척수 손상의 래트 모델에서 척수 뉴런을 관통하였다.
IC 100은 세포내와 세포외 둘 다에서 작용할 수 있다. 세포내에서, 이것은 ASC 단백질에 결합하고 이를 억제함으로써 작용하므로, 다중 단백질 인플라마솜의 조립 및 염증 반응의 개시를 방지할 수 있다. 이것은 또한 ASC specks의 ASC에 결합하여 큰 섬유상 신호 전달 플랫폼의 전파를 방지하므로, 만성 염증성 질환에서 염증을 지속시키는 역할을 담당하는 프로-ILβ의 세포외 활성화를 억제할 수 있다.
참조에 의한 포함
하기 참고 문헌은 모든 목적을 위해 그 전문이 참조로 포함된다.
문헌 [Brambilla R, Morton PD, Ashbaugh JJ, Karmally S, Lambertsen K, and Bethea JR (2014) Astrocytes play a key role in EAE pathophysiology by orchestrating in the CNS the inflammatory response of resident and peripheral immune cells and by suppressing remyelination. GLIA, 62:452-457].
문헌 [Lassmann, H., van Horssen, J. & Mahad, D. Progressive multiple sclerosis: pathology and pathogenesis. Nat Rev Neurol 8, 647-656, doi:10.1038/nrneurol.2012.168 (2012)].
실시예 4: 후보 항-ASC 단클론 항체의 동력학 분석
생물층 간섭계 (biolayer interferometry: BLI)를 사용하여 후보 항-ASC 단클론 항체의 동력학 분석을 수행하였다. BLI에서, 표면과의 결합 또는 해리는 반사광의 파장에서 이동을 일으키고, 시간 경과에 따른 이동의 측정은 결합 동력학의 결정을 가능하게 할 수 있다.
BLI 분석은 하기로 이루어졌다:
센서 체크 (30s) --> Ab 로딩/Supnt. (700s) ---> 기준선 (300s) --> Ab 결합 (600s) --> 해리 (600s) --> 반복
후보 마우스 IgG 항체 상청액을 7개의 상이한 농도 (즉, 540 nM; 180 nM; 60 nM; 20 nM; 6.67 nM; 2.22 nM; 0.741 nM)에서 사람 ASC 펩타이드 (서열 번호 5)에 대한 결합에 대해 테스트하였다. 테스트된 항체는 ICCN 1.0H (즉, IC 100); ICCN 2.0H; 및 ICCN 3.0H이었다. 미희석 상청액의 마우스 IgG를 AMC (항-마우스 IgG Fc) 바이오 센서에 로딩하였다. 3개의 후보 항체에 대한 미가공 항체 동력학 데이터는 도 21에 도시되어 있는 반면, 도 22는 글로벌 KD 값을 나타낸다.
실시예 5: 흡수, 분포, 대사 및 배설 연구: IC 100의 약동학 연구
CD-1 수컷 래트 내에서 IC 100의 배치를 설명하기 위해서 흡수, 분포, 대사 및 배설 (ADME) 실험을 수행할 것이다.
제1 실험에서, 30 마리의 6 주령 CD-1 수컷 래트를 Charles River로부터 수득할 것이다. 실험을 Bolder BioPath (BBP)에서 수행할 것이다. 도착 후 마우스를 BBP에서 적어도 7일 동안 순화시킬 것이다. 마우스를 케이지 당 4 마리의 동물로 수용시킬 것이다.
동물을 체중을 기준으로 처리 그룹 (그룹 당 9 마리의 마우스)에 무작위 배정하고, IC 100의 용량을 정맥내 (IV)로 투여할 것이다. 처리 그룹은5 mg/kg, 15 mg/kg 또는 30 mg/kg IC 100 중 하나를 투여받을 것이다. 약동학 (PK) 모니터링을 위해 단일 IV 투여 후 다양한 시간에서 혈장을 수집할 것이다. 혈장 수집의 예시적인 시간표는 하기 표 4에 나타나 있다. 임상 관찰을 통해 급성 독성을 모니터링할 것이다. 분석을 위해 혈장을 Antibody Solutions에 배송할 것이다. 실험을 10주 동안 계속할 것이다.
체중 측정을 0, 7, 14, 21, 28 및 35 일차에 수행할 것이다.
적절한 양의 혈액을 수집하기 위해 안와후 출혈을 사용할 것이며; 샘플 수집 전에 마우스를 이소플루란으로 마취할 것이다. 각 그룹의 동물 1, 2, 3을 1 및 10 일차에 출혈시킬 것이고; 동물 4, 5, 6을 2 및 15 일차에 출혈시킬 것이고; 동물 7, 8, 9를 5 및 20 일차에 출혈시킬 것이다.
최종 시점에서, 동물을 이소플루란으로 마취할 것이며, 방혈 후 양측 기흉에 출혈시킬 것이다. 동물 1, 2 및 3을 25 일차에 희생시킬 것이다. 동물 4, 5 및 6을 30 일차에 희생시킬 것이다. 동물 7, 8 및 9을 35 일차에 희생시킬 것이다.
[표 4]
Figure pct00016
실시예 6. 암컷 B6 알비노 마우스 및 형광 이미지화를 사용한 IC 100의 생체 분포
제2 실험에서, 확립된 VivoTag 프로토콜에 따라 IC 100 및 대조군 마우스 IgG를 VivoTag 680XL 형광 라벨링 염료로 라벨링하고, 결합 친화성을 결정할 것이다. 간단히 말하자면, VivoTag 프로토콜에 따르면, 라벨링 프로토콜은 다음을 수반할 것이다:
1. PBS에서 1~10 mg/mL로 항체 (> 7 kDa) 용액을 준비한다. 항체는 반응성 염료와의 반응 경쟁을 줄이기 위해 암모늄 이온 또는 1차 아민을 포함하지 않을 것이다.
2. 0.25 mg의 VivoTag 680XL을 10 μL의 건조 DMSO 중에 용해시킬 것이다. 재구성시, VivoTag 680XL은 2~8℃에서 보관하고 빛으로부터 보호할 때 최대 7일 동안 안정하다.
3. 0.5 mL의 단백질 (0.5~5 mg), 50 μL의 중탄산 나트륨, 각 단백질 mg 당 2 μL의 VivoTag 680XL을 에펜도르프 튜브에 첨가할 것이다. 혼합물을 진탕하면서 실온에서 2 시간 동안 암실에서 인큐베이션할 것이다.
4. 유리 염료로부터 단백질 컨쥬게이트를 분리한다. 컬럼의 하단 마개를 비틀고 캡을 풀어준다. 컬럼을 15 mL의 원뿔형 수집 튜브에 배치하고, 1,000 xg에서 2 분 동안 원심 분리할 것이다. 2 mL의 PBS를 컬럼에 첨가하고, 1,000 xg에서 2분 동안 원심 분리할 것이다. 세척을 2회 더 반복할 것이다.
5. 컬럼을 새로운 15 mL의 원뿔형 수집 튜브에 배치할 것이다. 모든 단백질 샘플 (200~700 μL)을 컬럼에 로딩하고, 1,000 xg에서 2분 동안 원심 분리할 것이다. 유동하는 통과 단백질 샘플을 수집할 것이다.
6. 수집된 라벨링된 항체 샘플을 라벨링의 정도 (degree of labeling: DOL)에 대해 분석할 수 있다. 정제된 컨쥬게이트의 흡광도를 280 nm 및 668 nm에서 결정한다.
7. 668 nm 흡광도의 16%인 VivoTag 680XL의 280 nm 흡광도를 빼서 정제된 단백질의 280 nm 흡광도를 조정한다.
8. 흡광도 분석를 UV 분광 광도계 또는 Nanodrop 분광 광도계로 수행할 수 있다. 후자를 사용하기 위해, 측정 전에 샘플을 0.5~2 mg/mL 범위로 희석해야 한다. 광 경로가 1 mm이므로, 판독 값을 10배로 정규화해야 한다.
제3 실험에서, IC 100의 생체 분포를 결정할 것이다. 15 마리의 8~12 주령 암컷 B6 알비노 (C57BL6) 마우스를 연구에 사용할 것이다. 1 일차 체중에 기초하여 동물을 그룹에 무작위 배정할 것이다.
암컷 B6 알비노 마우스는 미처리 (음성 대조군), VivoTag 680XL로 라벨링된 IC 100의 단일 용량, 또는 VivoTag 680XL로 라벨링된 마우스 IgG의 단일 용량 (음성 대조군)을 투여받을 것이다. 치료제를 100 μg/동물의 용량으로 정맥내 (부피 = 200 μL)로 투여할 것이다.
생체내 형광 이미화를 2 시간, 8 시간, 24 시간, 48 시간, 72 시간 및 96 시간에 수행하고, 형광 이미화를 처리 후 최대 96 시간의 다양한 시간 간격으로 사용하여 등쪽 및 복부 생체내 전신 이미지를 캡쳐한다. 모든 동물로부터 뇌, 시신경 동반 눈, 심장, 좌측 및 우측 신장, 대장, 예를 들어, 말단 결장, 간, 폐, 난소, 췌장, 소장, 척주, 위장, 갑상선 및 방광의 생체외 이미지화를 수행할 것이다.
전혈을 수집할 것이며, 면역 침윤을 CD4+ T 세포 (CD4+ CD11b- CD3+ CD8-), CD8+ T 세포 (CD8+ CD11b-CD3+CD4-), B 세포 (CD3-CD111b-CD45R+), 단핵구 (CD3-CD11b+CD115+) 및 NK 세포 (CD3-CD49b+CD335+)에 대해 분석할 것이다. Ab-VivoTag 680 XL의 발현을 정량화하여 전달된 라벨링된 항체의 수준을 결정할 것이다. 생세포의 수를 정량화하기 위해 LIVE/DEAD 염료를 유세포 계측 패널에 포함시킬 것이다. 전체 항체 패널은 CD3, CD4, CD8, CD11b, CD115, CD45R, CD49b, CD335 및 LIVE/DEAD 염료 대해 지정된 항체를 포함할 것이다.
실시예 7: 인플라마솜 신호 전달에 대한 IC 100 투여의 효과
인플라마솜 단백질의 바이오 마커 분석을 위해 비알코올성 지방 간염 (NASH), 당뇨병성 신병증 및 루푸스 신염 사람 환자 유래의 혈액을 BioReclamation IVT로부터 수득할 것이다. NASH, 당뇨병성 신병증 및 루푸스 신염 환자 유래의 조직을 Bolder BioPath로부터 수득할 것이고, 단백질 용해물을 이러한 조직으로부터 수득할 것이고, 카스파아제-1 및 ASC를 비롯한 인플라마솜 신호 전달 단백질의 발현을 위해 면역 블롯팅 및 기타 생화학 기술로 분석할 것이다.
추가로, 사람 암 세포주를 사용하여 ASC 의존성 인플라마솜의 활성화를 실시간으로 검사할 것이다. 본 연구는 2가지 목표로 이루어질 것이며, 6~9 주간에 걸쳐 시작할 것이다.
구체적인 목표 1: 항체 라벨링
2 mg의 IC 100을 IgG-680 XL-IFC (VivoTag® 680 XL, PerkinElmer #-NEV11120) 형광 라벨링 염료로 라벨링할 것이며, 라벨링의 화학 양론을 제조업자의 지침에 따라 결정할 것이다. 대조군 마우스 IgG (Charles River Laboratories (CRL) 제공)를 유사하게 라벨링하고 분석할 것이다.
구체적인 목표 2: 결합 친화성 결정
사람 암 세포주 THP-1을 대수 증식기에 배양할 것이며, 100 μL의 배지 부피로 웰 당 20,000개의 세포로 백색 폴리스티렌 6-웰 마이크로 배양 플레이트 (Corning® Costar® 96-웰 평저 플레이트, 카탈로그. # 3917)에 플레이팅할 것이다. 그 다음, 라벨링된 항체를 웰에 이중으로 첨가할 것이다 (10점 용량 반응, 1:3 희석, 최고 농도 200 nM). Charles River의 프로토콜에 따라 결합 항체를 모든 웰에 대해 검출할 것이다. 결합 항체 (평균 형광 강도)를 항체 농도의 함수로서 플롯팅할 것이며, 결합 친화도 (Kd)를 다음 수학식을 데이터에 피팅하여 추정할 것이다: Y=Bmax*X/(Kd + X).
실시예 8: NASH 래트 모델에서 IC 100의 생체내 연구
콜린 결핍 고지방 식이 (choline deficient, high fat diet: CDHFD)를 먹이는 간 섬유증 수컷 Wistar Han 래트는 NASH의 동물 모델의 역할을 할 것이다. 55 마리의 마우스를 본 연구에 사용할 것이다. 8~9 주령 Wistar Han 래트를 Envigo 또는 Charles River로부터 수득할 것이다. 도착 후 래트를 Bolder Biopath에 3~7일 동안 순화시킬 것이다. 래트를 케이지 당 2~3 마리의 동물로 수용시킬 것이다. 표준 사료를 동물에게 먹일 것이다.
0 일차에, 동물을 체중에 따라 5개의 그룹에 무작위 배정할 것이다. 표준 식단인 Teklad Global Diets-Rodent 2014를 그룹 1에게 먹일 것이다. 그룹 2, 3, 4, 5에게 CDHFD 식단을 먹일 것이다.
연구 38 일차에, 동물을 임상 화학을 위해 출혈시키고, 알라닌 아미노트랜스퍼라아제 (ALT) 농도를 기준으로 처리 그룹에 배치한다. 연구 42 일차에, 처리를 개시할 것이다. 실시예 5로부터 수득된 약동학 데이터에 기초하여 결정될 용량을 사용하여 IC 100의 효능을 테스트할 것이다. 하나의 그룹은 음성 대조군의 역할을 하기 위해 비히클에 의한 처리를 받을 것이다. 표준 식단 요법을 제공받는 그룹도 또한 비히클에 의한 처리를 받을 것이다. 체중, 음식 소비 및 케이지 측면 임상 관찰을 매주 측정할 것이다. 38 일차와 63 일차에, 꼬리 정맥 수집을 통해 전혈을 수득할 것이다. 부검을 84 일차에 실시할 것이다. 동물을 이소플루란 마취로 희생시고, 방혈에 이은 양측 기흉에 출혈시킬 것이다.
동물을 연구의 -1, 0, 2, 4, 6, 7, 14, 21, 28, 35, 42, 45, 49, 52, 56, 59, 63, 66, 70, 73, 77, 80 및 83 일차에 체중을 측정할 것이다.
음식 소비의 주간 업데이트 (그램/일/래트)를 연구의 0, 7, 14, 21, 28, 35, 42, 49, 56, 63, 70, 77 및 84 일차에 기록할 것이다.
임상 케이지 측면 관찰을 0~7, 14, 21, 28, 35, 42, 45, 49, 52, 56, 59, 63, 66, 70, 73, 77, 80, 83 일차에 수행할 것이다. 동물이 독성 또는 질병의 임상 징후를 보이기 시작하면, 동물을 매일 관찰하고 체중을 측정할 것이다.
부검시, 간, 갈색 지방 조직 및 우측 서혜부 지방 조직의 무게를 측정할 것이다. 간의 좌측 외측엽의 4 x 7 mm 생검을 수득하고, 액체 질소로 냉동시키고, -80℃에서 보관할 것이다. 간의 내측엽, 좌측 외측엽 및 우측 외측엽의 3 mm 횡단면을 수득하고 조직 병리를 위해 주변 온도에서 70% 에탄올에 보관하기 전에 36~48 시간 동안 10% 포르말린에서 고정할 것이다. 3 조각의 100 mg 지방 조직을 액체 질소로 급속 냉동시키고 -80℃에서 에펜도르프 안전 잠금 튜브에 보관할 것이다. 3 조각의 동일 크기 갈색 지방 조직을 액체 질소로 즉시 냉동하시키고 -80℃에서 에펜도르프 안전 잠금 튜브에 보관할 것이다.
서혜부 피하 지방 조직, 백색 지방 조직 축적 부위 (white adipose tissue depot: WAT)를 다음 프로토콜에 따라 수집할 것이다. 마우스의 하단 절반을 벗겨내어 서혜부 삼각 SQ 축적 부위를 드러낼 것이다. 상부 부속 기관과 흉곽을 한 손으로 잡을 것이며, 피부를 다른 손으로 발쪽으로 당길 것이다. 노출된 축적 부위를 머리카락으로 오염시키지 않도록 주의하면서 마우스를 앙와위로 향하게 할 것이다. 수술 기구를 청소할 것이며, 장갑을 교체할 것이다. 이어서, 샘플을 근육, 인접 지방, 유선 또는 혈액으로 오염시키지 않도록 주의하면서 피하 지방의 삼각을 해부할 것이다. 경계가 명확하게 정의되지 않는 경우, 해부 현미경을 사용할 것이다. 지방 축적 부위를 제거하고 50:1 고정액 대 조직 부피의 10% 중성 완충 포르말에 옮기고 실온에서 36~48 시간 동안 고정할 것이다. RNA 또는 단백질을 추출해야 하는 경우, 조직을 액체 질소에 침지하여 동결하고 -80℃에 보관하여 분해를 방지할 것이다. 장갑을 자주 교체하여 지방 축적 부위들 사이를 교차 오염시키지 않도록 노력할 것이다.
조직학 처리를 Histotox Labs에서 수행할 것이다. LLL, MLL 및 RLL 조직학 처리를 3개의 간 횡단면/동물에 대해 수행할 것이다. 샘플을 시리우스 레드와 헤마톡실린 및 에오신 (H & E)으로 염색할 것이다.
실시예 9: BTBR Ob/Ob 마우스 모델에서 당뇨병성 신병증에 대한 IC 100의 효과의 생체내 연구
ob/ob 렙틴 결핍 돌연변이 마우스 균주 BTBR은 당뇨병성 신병증에 대한 마우스 모델의 역할을 한다. 수컷 BTBR Ob/Ob 마우스를 사용하여 당뇨병성 신병증 효과의 반전에서 IC 100의 효과를 평가할 것이다. 5 마리의 수컷 야생형 (WT) BTBR 마우스는 음성 대조군으로 활용될 것이며, 처리를 받지 않을 것이다. 50 마리의 BTBR Ob/Ob 마우스를 사용하여 5개의 그룹으로 나눌 것이다. 그룹들은 실시예 5에 기초하여 결정된 용량으로 비히클, 대조군 또는 IC 100을 투여받을 것이다. 실험을 6주에 걸쳐 진행할 것이다.
조직학을 Histotox Labs에서 마우스 신장에 대해 수행할 것이다. 현재 Bolder BioPATH 방법을 사용하여 병리학자가 적절한 파라미터를 결정할 것이다.
꼬리를 절단하고 True Metrix 혈당 측정기와 호환되는 테스트 스트립에 혈액 한 방울 (~ 5 μL)을 적용하여 혈당 측정을 수행할 것이다. 연구가 완료될 때까지 혈당 측정을 1주일에 2회 수행할 것이다.
마우스를 거꾸로 잡고 복부에 압력을 가하여 마우스로부터 소변을 짜냄으로써 단백뇨 점수화를 수행할 것이다. Albustix 시약 스트립을 사용하여 소변내 단백질의 양을 결정할 것이다.
동물이 사망한 것으로 발견되는 경우, 샘플을 채취하지 않을 것이다. 이유에 관계없이 동물을 안락사시켜야 하는 경우, 연구 후 7 일차에 부검할 때와 같이 샘플을 채취할 것이다.
실시예 10: 마우스 모델에서 루푸스 신염에 대한 IC 100의 효과에 대한 생체내 연구
12 주령 암컷 MRL/MpJ-Tnfrsf6lpr/J 마우스를 사용하여 루푸스 신염 모델을 개발할 것이다. 마우스를 Bolder BioPath로부터 수득할 것이다. 마우스를 체중에 따라 처리 그룹에 무작위 배정할 것이다. 동물을 중요한 임상 징후, 빈사 상태 및 사망에 대해 매일 관찰할 것이다. 루푸스 신염은 대략 12~14 주령에 발병할 것이다.
루푸스 신염의 발병 후, 마우스를 5개의 그룹으로 나눌 것이며, 실시예 5, 비히클 또는 대조군 IgG의 결과에 따라 다양한 용량의 IC 100으로 처리할 것이다.
체중, 소변 단백뇨, 림프절 병증 점수 및 피부 병변 점수를 수집할 것이다. 부검을 20 주차에 실시할 것이며, 분석을 위해 조직과 전혈을 수집할 것이다. 본 실험은 15주 동안 지속될 것으로 예상된다.
실시예 11: 알비노 래트에서 IC 100의 급성 및 21일 범위 조사 볼루스 정맥 주사 독성 연구
알비노 래트를 Charles River로부터 수득할 것이다. 최종 28일 다중 용량 독성에 대한 IC 100의 용량 수준 및 래트의 약동학 연구를 확립할 것이다. 래트를 3 마리의 래트/성별/용량을 포함하는 4개의 그룹으로 나눌 것이다. 상승 및 하강 연구를 수행할 것이다.
반복 투여 연구를 3주에 걸쳐 수행할 것이다. 5 마리의 래트를 포함하는 모든 수컷 또는 모든 암컷의 그룹으로 래트를 나눌 것이다. IC 100의 1회 용량 수준을 래트에 매주 투여할 것이다. 사망률, 임상 징후, 체중, 및 독성 역학 임상 실험실을 비롯한 생전 파라미터를 수행할 것이다.
실시예 12: 시노몰구스 (cynomolgus) 원숭이에서 IC 100의 최대 내약 용량 및 22일 용량 범위 조사 연구
IC 100에 대한 용량 수준 및 약동학을 시노몰구스 원숭이에서 확립할 것이다. 실험을 Charles River에서 수행할 것이다. 원숭이를 원숭이/성별/용량을 포함하는 4개의 그룹으로 나눌 것이다. 상승 및 하강 연구를 28일에 걸쳐 수행할 것이다.
반복 투여 연구를 3주에 걸쳐 수행할 것이다. 2 마리의 원숭이를 포함하는 모든 수컷 또는 모든 암컷의 그룹으로 원숭이를 나눌 것이다. IC 100의 1회 용량 수준을 원숭이에 매주 투여할 것이다. 사망률, 임상 징후, 체중, 및 독성 역학 임상 실험실을 비롯한 생전 파라미터를 수행할 것이다.
본 실험은 15주 동안 지속될 것으로 예상된다.
실시예 13: 래트에서 IC 100 후 4주 회복 기간의 독성 연구
Charles River로부터 수득된 래트에서 IC 100의 정맥내 투여 후 회복 기간에 따른 독성 및 독성 역학을 확립할 것이다.
3개의 용량 수준 및 대조군을 포함하는 10~15 마리의 래트/성별/그룹으로 래트를 나눌 것이다. 추가의 그룹은 4주 회복을 위해 5 마리의 래트/성별을 포함할 고용량 그룹 및 대조군을 포함할 것이다.
사망률, 체중, 음식 소비, 임상 관찰, 임상 병리학 (혈액학 및 임상 화학), 부검 소견, 장기 조직 병리학 및 독성 역학을 측정할 것이다. 회복 후, 독성 역학을 제외한 동일한 파라미터를 측정할 것이다.
본 실험은 6 개월 동안 지속될 것으로 예상된다.
실시예 14: 시노몰구스 원숭이에서 IC 100 후 4주 회복 기간의 독성 연구
비-사람 영장류에서 IC 100의 정맥내 투여 후 회복 기간에 따른 독성 및 독성 역학을 Charles River에서 확립할 것이다.
3개의 용량 수준 및 대조군을 포함하는 3 마리의 원숭이/성별/그룹으로 원숭이를 나눌 것이다. 추가의 그룹은 4주 회복을 위해 2 마리의 원숭이/성별을 포함할 고용량 그룹 및 대조군을 포함할 것이다.
사망률, 체중, 음식 소비, 임상 관찰, 임상 병리학 (혈액학 및 임상 화학), 부검 소견, 장기 조직 병리학 및 독성 역학을 측정할 것이다. 회복 후, 독성 역학을 제외한 동일한 파라미터를 측정할 것이다.
본 실험은 6 개월 동안 지속될 것으로 예상된다.
실시예 15: hERG 분석을 이용한 시험관내 심혈관 연구
심혈관 독성 (QT 연장)의 가능성을 CHO 또는 HEK293 세포에 의한 시험관내 분석에서 평가할 것이다.
본 실험은 IC 100의 HERG 채널 차단에 대한 IC50을 확립할 것이다.
본 실험은 2 개월 동안 지속될 것으로 예상된다.
실시예 16: 시험관내 혈액 용혈 연구
시험관내에서 사람 적혈구의 용혈을 유발하는 IC 100의 정맥내 제형에 대한 잠재력을 평가할 것이다. IC 100의 농도 (실시예 5에 기초하여 결정됨)를 시험관내 시스템에서 적혈구와 혼합할 것이다. 용혈 정도를 확립할 것이다. 본 실험은 2 개월 동안 지속될 것으로 예상된다.
실시예 17: 파킨슨병 (PD) 치료에서 IC 100의 생체내 효능 검사
PD의 여러 동물 (즉, 설치류) 모델에서 5 mg/kg, 15 mg/kg, 30 mg/kg의 IC 100을 투여함으로써 PD 치료에 대한 IC 100의 효능을 평가할 것이다.
PD의 6-OHDA 래트 모델은 마우스가 회전 비대칭 및 운동 결함을 비롯한 거동 결함을 나타내는 PD의 화학적으로 유도된 편측성 모델 (선조체내 (intrastriatal) 또는 내측 전뇌 다발 병변)이다. 6-OHDA 모델은 선조체에서 감소된 도파민, DOPAC 및 HVA 함량을 표시하며 조직학에 의해 흑질에서 TH 양성 세포의 감소를 나타낸다.
PD의 6-OHDA 모델을 사용하는 한 세트의 실험에서, 하기와 같이 처리될 3개의 실험 그룹 (n=15 래트/그룹)으로 총 45 마리의 수컷 래트를 분리할 것이다:
1. 처리된 가성 유발 래트를 비히클로 처리할 것이고;
2. 처리된 6-OHDA 유발 래트를 비히클로 처리할 것이고;
3. 처리된 6-OHDA 유발 래트를 IC 100 용량 1 (PK/반감기 연구에 기초하여 선택됨)로 처리할 것이다.
편측성 6-OHDA/가성 주입을 연구 0 일차에 수행할 것이다.
일일 용량 제형 및 투여 (QD, p.o.)를 연구 15~28 일차에 수행할 것이고;
체중 추적을 수행할 것이고, 거동 테스트를 14 일차 (기준선), 28 일차 및 42 일차에 수행할 것이며 암페타민 유발 회전을 포함할 것이다.
말기 혈액, CSF 및 뇌 샘플링을 연구 42 일차에 수행한 후 HPLC로 선조체 및 IHC에서 DA, DOPAC 및 HVA를 검사하여 SNpc에서 TH+ 세포를 검사할 것이다.
PD의 6-OHDA 모델을 사용하는 제2 세트의 실험에서, 하기와 같이 처리될 3개의 실험 그룹 (n=15 래트/그룹)으로 총 45 마리의 수컷 래트를 분리할 것이다:
1. 처리된 가성 유발 래트를 비히클로 처리할 것이고;
2. 처리된 6-OHDA 유발 래트를 비히클로 처리할 것이고;
3. 처리된 6-OHDA 유발 래트를 IC 100 용량 1 (PK/반감기 연구에 기초하여 선택됨)로 처리할 것이다.
연구 0 일차에 수행하는 편측성 6-OHDA/가성 주입으로 6주에 걸쳐 본 실험을 수행할 것이고;
일일 용량 제형 및 투여 (QD, p.o.)를 연구 1 일차에 수행할 것이며, 6-OHDA 주입 후 6주까지 계속할 것이다.
거동 테스트를 14 일차 (기준선), 28 일차 및 42 일차에 수행할 것이며 암페타민 유발 회전 및 실린더 테스트를 포함할 것이다.
말기 뇌 샘플링을 연구 42 일차에 수행한 후 HPLC로 선조체 및 IHC에서 DA, DOPAC 및 HVA를 검사하여 SNc (양측으로)에서 TH 및 Iba-1을 검사할 것이다.
PD의 6-OHDA 모델을 사용하는 제3 세트의 실험에서, 하기와 같이 처리될 6개의 실험 그룹 (개시에서 14 일차 기준선까지 n=18 래트/그룹, 표적으로서 n=15 래트/그룹)으로 총 90 마리의 수컷 래트를 분리할 것이다:
1. 비히클로 처리된 가성 유발 래트
2. 비히클로 처리된 6-OHDA 유발 래트
3. IC 100 용량 1로 처리된 6-OHDA 유발 래트
4. IC 100 용량 2로 처리된 6-OHDA 유발 래트
5. IC 100 용량 3로 처리된 6-OHDA 유발 래트
6. IC 100 용량 4로 처리된 6-OHDA 유발 래트
연구 0 일차에 수행하는 편측성 6-OHDA/가성 주입으로 6주에 걸쳐 본 실험을 수행할 것이고;
일일 용량 제형 및 투여 (QD, p.o.)를 연구 15~42 일차에 수행할 것이다.
거동 테스트를 14 일차 (기준선), 28 일차 및 42 일차에 수행할 것이며 암페타민 유발 회전 및 실린더 테스트를 포함할 것이다.
말기 뇌 샘플링을 연구 42 일차에 수행한 후 HPLC로 선조체 및 IHC에서 DA, DOPAC 및 HVA를 검사하여 SNc (양측으로)에서 TH 및 Iba-1을 검사할 것이다.
실시예 18: 파킨슨병 (PD) 치료에서 IC 100의 시험관내 효능 검사
TOM20 분석:
PD 발병 기전은 미토콘드리아 복합체 I 억제제 로테논이 파킨슨증을 유발한다는 결과를 시작으로 여러 라인의 연구를 통해 미토콘드리아 기능 장애와 관련이 있었다. 또한, PARK2 및 PINK1과 같은 기능 장애 및 과잉 미토콘드리아 (미토파지)의 선택적 제거에 관여하는 단백질을 인코딩하는 유전자의 돌연변이는 대부분의 상염색체 열성 PD 사례에 존재한다. 마찬가지로, AD, ALS 및 헌팅턴병 (Huntington's disease: HD)과 같은 다른 신경 퇴행성 질환에서 미토콘드리아 기능 장애와 관련된 일련의 증거가 증가하고 있다. 따라서, 질병 관련 세포 배경에서 미토콘드리아 (dys) 기능을 측정하기 위한 표현형 판독 값은, 신경 퇴행성 병리 생물학을 조사하고 미토파지를 증대시킬 수 있는 잠재적 치료제를 확인하기 위한 강력한 예측 도구를 나타내는 것으로 여겨진다.
TOM20은 미토콘드리아 외막의 트랜스로카아제 (translocase of the outer membrane: TOM) 복합체의 서브유닛이며 미토콘드리아 존재비에 대한 바이오 마커를 나타낸다. 확립된 미토파지 유발 트리거 (trigger)의 부재 (단일 처리) 및 존재 (공동 처리)하에 치료학적 후보를 프로파일링함으로써, 미토콘드리아를 직접 손상시키지 않고도 트리거 유발 미토콘드리아 제거를 증진시키는 후보 분자 (예를 들어, IC 100)를 선택할 수 있다.
TOM20 손실 분석은 신경 세포 배경에서 미토파지를 증대시키는 능력에 대해 화합물을 스크리닝하는 확장 가능하고 신속한 시험관내 분석이다.
TOM20 분석은 1 일차 (D1) 및 4 일차 (D4)에 새롭게 하면서 0 일차 (D0)에 시작하여 7일 동안 성장 인자 (bFGF, EGF)의 회수 및 프로-분화 인자 (cAMP, GDNF)의 첨가에 의해 분화될 라미닌 코팅된 96-웰 플레이트 중에 50,000개 세포/웰로 씨딩된 불멸화 사람 중뇌 선조 세포 (ReNcell VM)를 사용할 것이다. 그 다음, 7 일차에 1 마이크로몰 올리고마이신/안티마이신 (O/A; 흔히 사용되는 미토파지 트리거)의 부재 및 존재하에 세포를 18 시간 동안 IC 100으로 처리한 후, 항-TOM20 항체에 의한 TOM20의 고정 면역 세포 화학적 염색 및 DAPI 염색 (즉, 8 일차에)을 수행할 것이다. 결국, 이러한 분석은 1 uM O/A 양성 대조군 및 0.1% DMSO 음성 대조군을 포함할 것이다.
미토파지 강화 화합물과 1 uM O/A의 조합 처리는 O/A 처리 단독으로 유발된 감소 외에도 TOM20 수준의 급격한 감소를 초래할 것이다. Charles River Labs에서 개발된 고함량 분석 (high content analysis: HCA) 기반 알고리즘을 사용하여 TOM20 면역 염색 강도를 정량화할 것이다. 잠재적 화합물 (예를 들어, IC 100) 유발 세포 독성을 확인하기 위해 핵 계수를 정량화할 것이다.
알파-시누클레인 응집 분석:
시냅스전 단백질 알파-시누클레인의 응집물은 PD의 주요 바이오 마커로서 간주되며, 증거는 알파-시누클레인 응집물이 신경 세포 사멸을 직접 매개한다는 것을 시사한다. 이와 같이, 알파-시누클레인 응집 및 독성 감소를 목표로 하는 전략은 치료학적 잠재력을 가질 수 있다.
본 분석에서, 라미닌 코팅된 96-웰 플레이트 중에 10,000개 세포/웰로 씨딩된 불멸화 사람 중뇌 선조 세포를 0 일차 (D0)에 시작하여 7일 동안 성장 인자 (bFGF, EGF)의 회수 및 분화 유발 인자 (cAMP, GDNF)의 첨가에 의해 분화시킬 것이다. 또한, D0에서, 세포를 야생형 사람 알파-시누클레인을 인코딩하는 아데노바이러스로 형질 도입할 것이다. 24 시간 후, 세포를 IC 100으로 처리한 다음, 알파/베타 시누클레인 (Syn205; Cell Signaling Technology) 및 응집된 알파-시누클레인 (MJFR14; Abcam)을 검출하는 항체를 사용하여 면역 세포 화학에 의해 6일 후에 알파-시누클레인 발현 및 응집을 검출하고, 이어서 TOM20 분석에 대해 기재된 바와 같이 HCA 정량화를 수행할 것이다. 결국, 이러한 분석은 또한 10 uM KU 0063794 양성 대조군 및 D1 및 D4에 첨가된 0.1% DMSO 음성 대조군을 포함할 것이다.
번호를 매긴 본 개시 내용의 실시 형태
본 개시 내용에 의해 고려되는 다른 주제는 번호를 매긴 하기 실시 형태에서 설명된다:
실시 형태 1. 염증의 치료를 필요로 하는 환자의 폐 염증을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 인플라마솜 신호 전달을 억제하는 제제를 포함하는 조성물을 상기 환자에게 투여하여 상기 환자의 폐 염증을 치료하는 단계를 포함하는, 방법.
실시 형태 2. 실시 형태 1에 있어서, 상기 폐 염증이 중추 신경계 (CNS) 손상, 신경 퇴행성 질환, 자가 면역 질환, 천식, 만성 폐쇄성 폐 질환, 낭포성 섬유증, 간질성 폐 질환 및 급성 호흡 곤란 증후군으로부터 선택된 병태에 기인하는, 방법.
실시 형태 3. 실시 형태 2에 있어서, 상기 CNS 손상이 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
실시 형태 4. 실시 형태 2에 있어서, 상기 신경 퇴행성 질환이 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 다발성 경화증 (MS) 및 파킨슨병 (PD)으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
실시 형태 5. 실시 형태 1 내지 4 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 조성물의 투여가 상기 환자의 폐 세포에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래하는, 방법.
실시 형태 6. 실시 형태 1 내지 4 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 조성물의 투여가 상기 환자의 폐 세포에서 대조군과 비교하여 카스파아제-1, 뉴클레오타이드 결합 류신 풍부 반복 피린 도메인 함유 단백질 1 (NLRP1), 뉴클레오타이드 결합 류신 풍부 반복 피린 도메인 함유 단백질 2 (NLRP2), 뉴클레오타이드 결합 류신 풍부 반복 피린 도메인 함유 단백질 3 (NLRP3), NLR 계열 CARD 도메인 함유 단백질 4 (NLRC4), 카스파아제-11, 아폽토시스 단백질의 X 연결 억제제 (XIAP), 파넥신-1, 카스파아제 활성화 동원 도메인을 함유하는 아폽토시스 관련 Spec 유사 단백질 (ASC), 인터루킨-18 (interleukin-18: IL-18), 고 이동성 그룹 상자 1 (HMGB1) 또는 앱센트 인 멜라노마 2 (AIM2) 수준의 감소를 초래하고, 여기서, 상기 대조군이 치료되지 않은 환자인, 방법.
실시 형태 7. 실시 형태 5 또는 6에 있어서, 상기 폐 세포가 II형 폐포 세포인, 방법.
실시 형태 8. 실시 형태 1 내지 5 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 조성물의 투여가 대조군과 비교하여 급성 폐 손상 (ALI)의 감소를 초래하고, 상기 대조군이 치료되지 않은 환자인, 방법.
실시 형태 9. 실시 형태 8에 있어서, 상기 ALI의 감소가 폐포 및/또는 간질 공간으로의 호중구 침윤의 감소, 폐포 중격 비후의 감소 또는 부재 또는 이들의 조합에 의해 입증되는, 방법.
실시 형태 10. 실시 형태 1 내지 9 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 제제가 세포외 소포 (EV) 흡수 억제제, 인플라마솜 성분에 결합하는 항체 또는 이들의 조합인, 방법.
실시 형태 11. 실시 형태 10에 있어서, 상기 EV 흡수 억제제가 화합물 또는 항체이고, 상기 항체가 표 1로부터 선택되는, 방법.
실시 형태 12. 실시 형태 10 또는 11에 있어서, 상기 제제가 인플라마솜 성분에 결합하는 항체와 조합된 EV 흡수 억제제인, 방법.
실시 형태 13. 실시 형태 12에 있어서, 상기 EV 흡수 억제제가 헤파린인, 방법.
실시 형태 14. 실시 형태 13에 있어서, 상기 헤파린이 에녹사파린인, 방법.
실시 형태 15. 실시 형태 10 내지 14 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 인플라마솜 성분에 결합하는 항체가 포유 동물 AIM2, NLRP1, NLRP2, NLRP3 또는 NLRC4 인플라마솜의 성분에 특이적으로 결합하는 항체인, 방법.
실시 형태 16. 실시 형태 10 또는 15에 있어서, 상기 인플라마솜 성분이 카스파아제-1, ASC 또는 AIM2인, 방법.
실시 형태 17. 실시 형태 16에 있어서, 상기 인플라마솜 성분이 ASC인, 방법.
실시 형태 18. 실시 형태 17에 있어서, 상기 항체가 N-말단 PYRIN-PAAD-DAPIN 도메인 (PYD), C-말단 카스파아제 동원 도메인 (CARD), 또는 상기 ASC 단백질의 PYD 또는 CARD로부터 유래하는 에피토프에 결합하는, 방법.
실시 형태 19. 실시 형태 17에 있어서, 상기 항체가 서열 번호 1 및 서열 번호 2로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 85%의 서열 동일성을 갖는 아미노산에 결합하는, 방법.
실시 형태 20. 실시 형태 17 내지 19 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 항체가 상기 환자의 폐에서 ASC 활성을 억제하는, 방법.
실시 형태 21. 실시 형태 1 내지 20 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 조성물이 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제와 제형화되는, 방법.
실시 형태 22. 실시 형태 1 내지 21 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 조성물이 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 투여되는, 방법.
실시 형태 23. 중추 신경계 (CNS) 손상을 받은 환자의 폐에서 염증을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 인플라마솜 신호 전달을 억제하는 제제를 포함하는 조성물을 상기 환자에게 투여하여 상기 환자의 폐에서 상기 염증을 치료하는 단계를 포함하는, 방법.
실시 형태 24. 실시 형태 23에 있어서, 상기 CNS 손상이 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
실시 형태 25. 실시 형태 23 또는 24에 있어서, 상기 조성물의 투여가 상기 환자의 폐 세포에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래하는, 방법.
실시 형태 26. 실시 형태 23 또는 24에 있어서, 상기 조성물의 투여가 상기 환자의 폐 세포에서 대조군과 비교하여 카스파아제-1, NLRP1, NLRP2, NLRP3, NLRC4, 카스파아제-11, XIAP, 파넥신-1, 카스파아제 활성화 동원 도메인을 함유하는 아폽토시스 관련 Spec 유사 단백질 (ASC), 인터루킨-18 (IL-18), 고 이동성 그룹 상자 1 (HMGB1) 또는 앱센트 인 멜라노마 2 (AIM2) 수준의 감소를 초래하고, 여기서, 상기 대조군이 치료되지 않은 환자인, 방법.
실시 형태 27. 실시 형태 25 또는 26에 있어서, 상기 폐 세포가 II형 폐포 세포인, 방법.
실시 형태 28. 실시 형태 23 내지 27 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 조성물의 투여가 대조군과 비교하여 급성 폐 손상 (ALI)의 감소를 초래하고, 상기 대조군이 치료되지 않은 환자인, 방법.
실시 형태 29. 실시 형태 28에 있어서, 상기 ALI의 감소가 폐포 및/또는 간질 공간으로의 호중구 침윤의 감소, 폐포 중격 비후의 감소 또는 부재 또는 이들의 조합에 의해 입증되는, 방법.
실시 형태 30. 실시 형태 23 내지 29 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 제제가 세포외 소포 (EV) 흡수 억제제, 인플라마솜 성분에 결합하는 항체 또는 이들의 조합인, 방법.
실시 형태 31. 실시 형태 30에 있어서, 상기 EV 흡수 억제제가 화합물 또는 항체이고, 상기 항체가 표 1로부터 선택되는, 방법.
실시 형태 32. 실시 형태 30 또는 31에 있어서, 상기 제제가 인플라마솜 성분에 결합하는 항체와 조합된 EV 흡수 억제제인, 방법.
실시 형태 33. 실시 형태 32에 있어서, 상기 EV 흡수 억제제가 헤파린인, 방법.
실시 형태 34. 실시 형태 33에 있어서, 상기 헤파린이 에녹사파린인, 방법.
실시 형태 35. 실시 형태 30 내지 34 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 인플라마솜 성분에 결합하는 항체가 포유 동물 AIM2, NLRP1, NLRP2, NLRP3 또는 NLRC4 인플라마솜의 성분에 특이적으로 결합하는 항체인, 방법.
실시 형태 36. 실시 형태 30 또는 35에 있어, 상기 인플라마솜 성분이 카스파아제-1, ASC 또는 AIM2인, 방법.
실시 형태 37. 실시 형태 36에 있어서, 상기 인플라마솜 성분이 ASC인, 방법.
실시 형태 38. 실시 형태 37에 있어서, 상기 항체가 상기 PYD, CARD 도메인, 또는 상기 ASC 단백질의 PYD 또는 CARD로부터 유래하는 에피토프에 결합하는, 방법.
실시 형태 39. 실시 형태 37에 있어서, 상기 항체가 서열 번호 1 및 서열 번호 2로 이루어진 그룹으로부터 선택된 아미노산 서열과 적어도 85%의 서열 동일성을 갖는 아미노산에 결합하는, 방법.
실시 형태 40. 실시 형태 37 내지 39 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 항체가 상기 환자의 폐에서 ASC 활성을 억제하는, 방법.
실시 형태 41. 실시 형태 23내지 40 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 조성물이 약제학적으로 허용되는 담체 또는 희석제와 제형화되는, 방법.
실시 형태 42. 실시 형태 23 내지 41 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 조성물이 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 투여되는, 방법.
실시 형태 43. 카스파아제 활성화 동원 도메인을 함유하는 아폽토시스 관련 Spec 유사 단백질 (ASC)에 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편으로서, 상기 항체 또는 항체 단편이 ASC의 에피토프에 특이적으로 결합하고, 여기서, 상기 에피토프가 서열 번호 5의 아미노산 서열 또는 서열 번호 5의 5~10, 10~15 또는 15~20개의 아미노산을 포함하거나 이들로 이루어지는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 44. ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편으로서, 상기 항체 또는 항체 단편이 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 여기서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 45. ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편으로서, 상기 항체 또는 항체 단편이 경쇄 가변 (VL) 영역 및 중쇄 가변 (VH) 영역을 포함하고, 여기서, 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 46. ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편으로서, 상기 항체 또는 항체 단편이 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고, 여기서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 47. 실시 형태 44에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22, 또는 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 48. 실시 형태 45에 있어서, 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 29, 30 또는 31, 또는 서열 번호 28, 29, 30 또는 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 49. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22, 또는 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 29, 30 또는 31, 또는 서열 번호 28, 29, 30 또는 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 50. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 51. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 52. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 53. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 54. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 55. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 56. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 57. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 58. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 59. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 60. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 61. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 62. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 63. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 64. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 65. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 66. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 67. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 68. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 69. 실시 형태 46에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고; 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 70. 실시 형태 44 내지 69 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 ASC가 사람 ASC 단백질인, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 71. 실시 형태 44 내지 70 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 항체 단편이 Fab, F(ab')2, Fab', scFv, 단일 도메인 항체, 디아바디 또는 단일 쇄 카멜리드 항체인, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 72. 실시 형태 44 내지 71 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 사람, 사람화 또는 키메라 형태인, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
실시 형태 73. 실시 형태 44 내지 72 중 어느 한 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 인코딩하는 단리된 핵산 분자.
실시 형태 74. 실시 형태 73의 핵산 분자를 포함하는 발현 벡터.
실시 형태 75. 실시 형태 32에 있어서, 상기 핵산 분자가 숙주 세포에서 핵산 분절의 발현에 적합한 조절 서열에 작동적으로 연결되어 있는, 발현 벡터.
실시 형태 76. 실시 형태 74 또는 75의 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포.
실시 형태 77. ASC에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 생산하는 방법으로서, 상기 방법이 실시 형태 74 또는 75의 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포를, 핵산 분자가 발현되는 조건하에 배양하여 ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 생산하는 단계를 포함하는, 방법.
실시 형태 78. 실시 형태 44 내지 72 중 어느 한 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편과 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는, 약제학적 조성물.
실시 형태 79. 대상체에서 염증을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 치료학적 유효량의 실시 형태 44 내지 72 중 어느 한 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 염증을 치료하는 단계를 포함하는, 방법.
실시 형태 80. 실시 형태 79에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시키는, 방법.
실시 형태 81. 실시 형태 80에 있어서, 상기 염증이 인플라마솜 관련 염증인, 방법.
실시 형태 82. 실시 형태 81에 있어서, 상기 인플라마솜 관련 염증이 중추 신경계 (CNS) 손상, 자가 면역, 자가 염증성, 대사성 또는 신경 퇴행성 질환과 관련되는, 방법.
실시 형태 83. 실시 형태 82에 있어서, 상기 CNS 손상이 외상성 뇌 손상 (TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
실시 형태 84. 실시 형태 82에 있어서, 상기 자가 면역 또는 신경 퇴행성 질환이 근위축성 측삭 경화증 (ALS), 알츠하이머병, 파킨슨병, 근위축증 (MD), 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염) 또는 다발성 경화증 (MS)인, 방법.
실시 형태 85. 실시 형태 82에 있어서, 상기 자가 염증성 질환이 크리오피린 관련 주기적 증후군 (CAPS)인, 방법.
실시 형태 86. 실시 형태 85에 있어서, 상기 CAPS가 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (FCAS), 머클-웰스 증후군 (MWS) 및 신생아 발현 다발성 염증 질환 (NOMID)으로부터 선택되는, 방법.
실시 형태 87. 실시 형태 82에 있어서, 상기 대사성 질환이 대사성 증후군, 비만, 진성 당뇨병, 당뇨병성 신병증 또는 당뇨병성 신장 질환 (DKD), 인슐린 저항성, 죽상 동맥 경화증, 지질 저장 장애, 글리코겐 저장 질환, 중쇄 아실-코엔자임 A 데하이드로게나아제 결핍, 비알코올성 지방간 질환 (예를 들어, 비알코올성 지방 간염 (NASH)) 및 통풍인, 방법.
실시 형태 88. 실시 형태 79 내지 87 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래하는, 방법.
실시 형태 89. 실시 형태 79 내지 87 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래하는, 방법.
실시 형태 90. 실시 형태 89에 있어서, 상기 대조군이 치료되지 않은 대상체인, 방법.
실시 형태 91. 실시 형태 79 내지 90 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 투여가 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어지는, 방법.
실시 형태 92. 대상체에서 다발성 경화증 (MS)을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 치료학적 유효량의 실시 형태 44 내지 72 중 어느 한 실시 형태의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 MS를 치료하는 단계를 포함하는, 방법.
실시 형태 93. 실시 형태 92에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시키는, 방법.
실시 형태 94. 실시 형태 92에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래하는, 방법.
실시 형태 95. 실시 형태 92 내지 94 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래하는, 방법.
실시 형태 96. 실시 형태 95에 있어서, 상기 대조군이 치료되지 않은 대상체인, 방법.
실시 형태 97. 실시 형태 92 내지 96 중 어느 한 실시 형태에 있어서, 상기 투여가 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어지는, 방법.
* * * * * * *
상기에서 기재된 다양한 실시 형태는 추가의 실시 형태를 제공하기 위해 조합될 수 있다. 본 명세서에 언급된 모든 미국 특허, 미국 특허 출원 공보, 미국 특허 출원, 외국 특허, 외국 특허 출원 및 비특허 공보는 그 전문이 본 출원에 참조로 포함된다. 더 추가의 실시 형태를 제공하기 위해 다양한 특허, 출원 및 공보의 개념을 사용할 필요가 있는 경우, 실시 형태의 양태는 변형될 수 있다.
이러한 변화 또는 다른 변화가 상기 상세한 설명을 고려하여 실시 형태에 대해 이루어질 수 있다. 일반적으로, 하기 청구범위에서는 사용되는 용어가 청구범위를 명세서 및 청구범위에 개시된 구체적인 실시 형태로 한정하는 것으로 해석되어서는 안되지만, 이러한 청구범위가 권리를 갖는 균등물의 전체 범위와 함께 모든 가능한 실시 형태를 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 따라서, 청구범위는 본 개시 내용에 의해 제한되지 않는다.
<110> University of Miami Keane, Robert W. Dietrich, W. Dalton De Rivero Vaccari, Juan Pablo Bramlett, Helen M. Brambilla, Roberta <120> METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING INFLAMMASOME RELATED DISEASES OR CONDITIONS <130> UNMI-010/02WO 316457-2045 <150> US 16/026,482 <151> 2018-07-03 <160> 35 <170> KoPatentIn 3.0 <210> 1 <211> 16 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 1 Ala Leu Arg Gln Thr Gln Pro Tyr Leu Val Thr Asp Leu Glu Gln Ser 1 5 10 15 <210> 2 <211> 14 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 2 Arg Glu Ser Gln Ser Tyr Leu Val Glu Asp Leu Glu Arg Ser 1 5 10 <210> 3 <211> 19 <212> PRT <213> Homo sapiens <400> 3 Cys Glu Tyr Tyr Thr Glu Ile Arg Glu Arg Glu Arg Glu Lys Ser Glu 1 5 10 15 Lys Gly Arg <210> 4 <211> 15 <212> PRT <213> Rattus norvegicus <400> 4 Met Glu Glu Ser Gln Ser Lys Glu Glu Ser Asn Thr Glu Gly Cys 1 5 10 15 <210> 5 <211> 21 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> antigenic fragment of caspase activating recruitment domain (ASC) <400> 5 Lys Lys Phe Lys Leu Lys Leu Leu Ser Val Pro Leu Arg Glu Gly Tyr 1 5 10 15 Gly Arg Ile Pro Arg 20 <210> 6 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy Chain CDR1 Amino Acid Sequence <400> 6 Thr Ser Gly Met Gly Val Ser 1 5 <210> 7 <211> 16 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy Chain CDR2 Amino Acid Sequence <400> 7 His Ile Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser Leu Lys Ser 1 5 10 15 <210> 8 <211> 11 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy Chain CDR3 Amino Acid Sequence <400> 8 Ser Thr Pro Ile Val Ala Asn Ala Met Asp Tyr 1 5 10 <210> 9 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy Chain CDR1 Nucleic Acid Sequence <400> 9 actagtggaa tgggtgtgag c 21 <210> 10 <211> 48 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy Chain CDR2 Nucleic Acid Sequence <400> 10 cacatttatt gggatgatga taagcgctac aacccatctc tgaagagc 48 <210> 11 <211> 33 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Heavy Chain CDR3 Nucleic Acid Sequence <400> 11 agcaccccca tcgtggccaa cgccatggac tac 33 <210> 12 <211> 15 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light (Kappa) Chain CDR1 Amino Acid Sequence <400> 12 Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp Gly Asp Ser Tyr Met Asn 1 5 10 15 <210> 13 <211> 7 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light (Kappa) Chain CDR2 Amino Acid Sequence <400> 13 Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser 1 5 <210> 14 <211> 9 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Light (Kappa) Chain CDR3 Amino Acid Sequence <400> 14 Gln Gln Ser Asn Glu Asp Pro Tyr Thr 1 5 <210> 15 <211> 45 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Light (Kappa) Chain CDR1 Nucleic Acid Sequence <400> 15 aaggccagcc agagtgttga ctacgacggc gacagttaca tgaat 45 <210> 16 <211> 21 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Light (Kappa) Chain CDR2 Nucleic Acid Sequence <400> 16 gccgcatcta acctggaatc c 21 <210> 17 <211> 27 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Light (Kappa) Chain CDR3 Nucleic Acid Sequence <400> 17 cagcaatcta atgaggaccc ttacact 27 <210> 18 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH1 Heavy Chain Sequence <400> 18 Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Ile Val Lys Pro Thr Gln 1 5 10 15 Thr Leu Thr Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala His Ile Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Ser Ser Lys Asn Gln Val 65 70 75 80 Val Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Ser 85 90 95 Cys Ala Arg Ser Thr Pro Ile Val Ala Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 19 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH2 Heavy Chain Sequence <400> 19 Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln 1 5 10 15 Thr Leu Thr Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala His Ile Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Ser Ser Lys Asn Gln Val 65 70 75 80 Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Ser 85 90 95 Cys Ala Arg Ser Thr Pro Ile Val Ala Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 20 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH3 Heavy Chain Sequence <400> 20 Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln 1 5 10 15 Thr Leu Thr Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala His Ile Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Ser Ser Lys Asn Gln Val 65 70 75 80 Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Arg Ser Thr Pro Ile Val Ala Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 21 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH4 Heavy Chain Sequence <400> 21 Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Ala Leu Val Lys Pro Thr Gln 1 5 10 15 Thr Leu Thr Leu Thr Cys Thr Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ala Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala His Ile Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Thr Ser Lys Asn Gln Val 65 70 75 80 Val Leu Thr Met Thr Asn Met Asp Pro Val Asp Thr Ala Thr Tyr Tyr 85 90 95 Cys Ala Arg Ser Thr Pro Ile Val Ala Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 22 <211> 121 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VH0 (Chimeric) Heavy Chain <400> 22 Gln Val Thr Leu Lys Glu Ser Gly Pro Gly Ile Leu Gln Pro Ser Gln 1 5 10 15 Thr Leu Ser Leu Thr Cys Ser Phe Ser Gly Phe Ser Leu Ser Thr Ser 20 25 30 Gly Met Gly Val Ser Trp Ile Arg Gln Pro Ser Gly Lys Gly Leu Glu 35 40 45 Trp Leu Ala His Ile Tyr Trp Asp Asp Asp Lys Arg Tyr Asn Pro Ser 50 55 60 Leu Lys Ser Arg Leu Thr Ile Ser Lys Asp Ser Ser Ser Asn Gln Val 65 70 75 80 Phe Leu Lys Ile Thr Ser Val Asp Thr Ala Asp Thr Ala Thr Tyr Ser 85 90 95 Cys Ala Arg Ser Thr Pro Ile Val Ala Asn Ala Met Asp Tyr Trp Gly 100 105 110 Gln Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 23 <211> 363 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VH1 Heavy Chain Sequence <400> 23 caggtcacct tgaaggagtc tggtcctgcc atcgtgaaac ccacacagac cctcacgctg 60 acctgcagct tctctgggtt ctcactcagc actagtggaa tgggtgtgag ctggatccgt 120 cagccctcag gaaagggcct ggagtggctt gcacacattt attgggatga tgataagcgc 180 tacaacccat ctctgaagag caggctcacc atctccaagg acagctccaa aaaccaggtg 240 gtccttaaaa tcaccagcgt ggaccctgtg gacacagcca catattcctg tgcacggagc 300 acccccatcg tggccaacgc catggactac tggggccaag gaaccagcgt caccgtctcc 360 tca 363 <210> 24 <211> 363 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VH2 Heavy Chain Sequence <400> 24 caggtcacct tgaaggagtc tggtcctgcc ctggtgaaac ccacacagac cctcacgctg 60 acctgcagct tctctgggtt ctcactcagc actagtggaa tgggtgtgag ctggatccgt 120 cagcccgccg gaaagggcct ggagtggctt gcacacattt attgggatga tgataagcgc 180 tacaacccat ctctgaagag caggctcacc atctccaagg acagctccaa aaaccaggtg 240 gtccttacaa tgaccaacat ggaccctgtg gacacagcca catattcctg tgcacggagc 300 acccccatcg tggccaacgc catggactac tggggccaag gaaccctggt caccgtctcc 360 tca 363 <210> 25 <211> 363 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VH3 Heavy Chain Sequence <400> 25 caggtcacct tgaaggagtc tggtcctgcc ctggtgaaac ccacacagac cctcacgctg 60 acctgcagct tctctgggtt ctcactcagc actagtggaa tgggtgtgag ctggatccgt 120 cagcccgccg gaaagggcct ggagtggctt gcacacattt attgggatga tgataagcgc 180 tacaacccat ctctgaagag caggctcacc atctccaagg acagctccaa aaaccaggtg 240 gtccttacaa tgaccaacat ggaccctgtg gacacagcca catattactg tgcacggagc 300 acccccatcg tggccaacgc catggactac tggggccaag gaaccctggt caccgtctcc 360 tca 363 <210> 26 <211> 363 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VH4 Heavy Chain Sequence <400> 26 caggtcacct tgaaggagtc tggtcctgcc ctggtgaaac ccacacagac cctcacgctg 60 acctgcacct tctctgggtt ctcactcagc actagtggaa tgggtgtgag ctggatccgt 120 cagcccgccg gaaagggcct ggagtggctt gcacacattt attgggatga tgataagcgc 180 tacaacccat ctctgaagag caggctcacc atctccaagg acacctccaa aaaccaggtg 240 gtccttacaa tgaccaacat ggaccctgtg gacacagcca catattactg tgcacggagc 300 acccccatcg tggccaacgc catggactac tggggccaag gaaccctggt caccgtctcc 360 tca 363 <210> 27 <211> 363 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VH0 (Chimeric) Heavy Chain <400> 27 caggttactc tgaaagagtc tggccctggg atattgcagc cctcccagac cctcagtctg 60 acttgttctt tctctgggtt ttcactgagc acttctggta tgggtgtgag ctggattcgt 120 cagccttcag gaaagggtct ggagtggctg gcacacattt actgggatga tgacaagcgc 180 tataacccat ccctgaagag ccggctcaca atctccaagg attcctccag caaccaggtc 240 ttcctcaaga tcaccagtgt ggacactgca gatactgcca catactcctg tgctcgaagt 300 actccgattg tagctaatgc tatggactac tggggtcaag gaacctcagt caccgtctcc 360 tca 363 <210> 28 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VL1 Light Chain Sequence <400> 28 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Glu Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 29 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VL2 Light Chain Sequence <400> 29 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 30 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VL3 Light Chain Sequence <400> 30 Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser 65 70 75 80 Ser Leu Gln Pro Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gln Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 31 <211> 111 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> VLO Chimeric Light Chain Sequence <400> 31 Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Ala Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 1 5 10 15 Gln Arg Ala Thr Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gln Ser Val Asp Tyr Asp 20 25 30 Gly Asp Ser Tyr Met Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln Pro Pro 35 40 45 Lys Leu Leu Ile Tyr Ala Ala Ser Asn Leu Glu Ser Gly Ile Pro Ala 50 55 60 Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Asn Ile His 65 70 75 80 Pro Val Glu Glu Glu Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Asn 85 90 95 Glu Asp Pro Tyr Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Leu Glu Ile Lys 100 105 110 <210> 32 <211> 333 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VL1 Light Chain Sequence <400> 32 gacatcgtgc tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60 atcaactgca aggccagcca gagtgttgac tacgacggcg acagttacat gaattggtac 120 cagcagaaac caggacagcc tcctaagctg ctcatttacg ccgcatctaa cctggaatcc 180 ggcatccctg cccgattcag tggcagcggg tctgggacag atttcactct caccatcagc 240 agcctgcagg aggaagatgt ggcaacttat tactgtcagc aatctaatga ggacccttac 300 acttttggcc aggggaccaa gctggagatc aaa 333 <210> 33 <211> 333 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VL2 Light Chain Sequence <400> 33 gacatcgtgc tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60 atcaactgca aggccagcca gagtgttgac tacgacggcg acagttacat gaattggtac 120 cagcagaaac caggacagcc tcctaagctg ctcatttacg ccgcatctaa cctggaatcc 180 ggcatccctg cccgattcag tggcagcggg tctgggacag atttcactct caccatcagc 240 agcctgcagc ctgaagatgt ggcaacttat tactgtcagc aatctaatga ggacccttac 300 acttttggcc aggggaccaa gctggagatc aaa 333 <210> 34 <211> 333 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VL3 Light Chain Sequence <400> 34 gacatcgtga tgacccagtc tccagactcc ctggctgtgt ctctgggcga gagggccacc 60 atcaactgca aggccagcca gagtgttgac tacgacggcg acagttacat gaattggtac 120 cagcagaaac caggacagcc tcctaagctg ctcatttacg ccgcatctaa cctggaatcc 180 ggcatccctg cccgattcag tggcagcggg tctgggacag atttcactct caccatcagc 240 agcctgcagc ctgaagatgt ggcaacttat tactgtcagc aatctaatga ggacccttac 300 acttttggcc aggggaccaa gctggagatc aaa 333 <210> 35 <211> 333 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> VLO Chimeric Light Chain Sequence <400> 35 gacattgtgc tgacccaatc tccagcttct ttggctgtgt ctctagggca gagggccacc 60 atctcctgca aggccagcca aagtgttgat tatgatggtg atagttatat gaactggtac 120 caacagaaac caggacagcc acccaaactc ctcatctatg ctgcatccaa tctagaatct 180 ggcatcccag ccaggtttag tggcagtggg tctgggacag acttcaccct caacatccat 240 cctgtggagg aggaggatgc tgcaacctat tactgtcagc aaagtaatga ggacccgtac 300 acgttcggag gggggaccaa gctggaaata aaa 333

Claims (55)

  1. 카스파아제 활성화 동원 도메인을 함유하는 아폽토시스 관련 Spec 유사 단백질 (Apoptosis-associated Spec-like protein containing a Caspase Activating Recruitment Domain: ASC)에 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편으로서, 상기 항체 또는 항체 단편이 ASC의 에피토프에 특이적으로 결합하고, 상기 에피토프가 서열 번호 5의 아미노산 서열 또는 서열 번호 5의 5~10, 10~15 또는 15~20개의 아미노산을 포함하거나 이들로 이루어지는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  2. ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편으로서, 상기 항체 또는 항체 단편이 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고,
    상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  3. ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편으로서, 상기 항체 또는 항체 단편이 경쇄 가변 (VL) 영역 및 중쇄 가변 (VH) 영역을 포함하고,
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  4. ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편으로서, 상기 항체 또는 항체 단편이 중쇄 가변 (VH) 영역 및 경쇄 가변 (VL) 영역을 포함하고,
    상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 6의 HCDR1, 서열 번호 7의 HCDR2 및 서열 번호 8의 HCDR3, 또는 HCDR1, HCDR2 및/또는 HCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 12의 LCDR1, 서열 번호 13의 LCDR2 및 서열 번호 14의 LCDR3, 또는 LCDR1, LCDR2 및/또는 LCDR3에서 적어도 하나의 아미노산 치환을 갖는 이의 변이체를 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  5. 제2항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22, 또는 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  6. 제3항에 있어서, 상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 29, 30 또는 31, 또는 서열 번호 28, 29, 30 또는 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  7. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22, 또는 서열 번호 18, 19, 20, 21 또는 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 29, 30 또는 31, 또는 서열 번호 28, 29, 30 또는 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  8. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  9. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  10. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  11. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 18, 또는 서열 번호 18의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  12. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  13. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  14. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  15. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 19, 또는 서열 번호 19의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  16. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  17. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  18. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  19. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 20, 또는 서열 번호 20의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  20. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  21. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  22. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  23. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 21, 또는 서열 번호 21의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  24. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 28, 또는 서열 번호 28의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  25. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 29, 또는 서열 번호 29의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  26. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 30, 또는 서열 번호 30의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  27. 제4항에 있어서, 상기 VH 영역 아미노산 서열이 서열 번호 22, 또는 서열 번호 22의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하고;
    상기 VL 영역 아미노산 서열이 서열 번호 31, 또는 서열 번호 31의 아미노산 서열과 적어도 95%, 96%, 97%, 98% 또는 99% 동일한 아미노산 서열을 포함하는, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  28. 제2항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 ASC가 사람 ASC 단백질인, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  29. 제2항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체 단편이 Fab, F(ab')2, Fab', scFv, 단일 도메인 항체, 디아바디 또는 단일 쇄 카멜리드 (camelid) 항체인, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  30. 제2항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편이 사람, 사람화 또는 키메라 형태인, 단클론 항체 또는 이의 항체 단편.
  31. 제2항 내지 제27항 중 어느 한 항의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편를 인코딩하는 단리된 핵산 분자.
  32. 제31항의 핵산 분자를 포함하는 발현 벡터.
  33. 제32항에 있어서, 상기 핵산 분자가 숙주 세포에서 핵산 분절의 발현에 적합한 조절 서열에 작동적으로 연결되어 있는, 발현 벡터.
  34. 제32항의 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포.
  35. ASC에 특이적으로 결합하는 항체 또는 항체 단편을 생산하는 방법으로서, 상기 방법이 하기 단계를 포함하는, 방법:
    제32항의 발현 벡터를 포함하는 재조합 숙주 세포를, 핵산 분자가 발현되는 조건하에 배양하여 ASC에 특이적으로 결합하는 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 생산하는 단계.
  36. 제2항 내지 제27항 중 어느 한 항의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편과 약제학적으로 허용되는 담체, 희석제 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물.
  37. 대상체에서 염증을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 치료학적 유효량의 제2항 내지 제27항 중 어느 한 항의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 염증을 치료하는 단계를 포함하는, 방법.
  38. 제37항에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시키는, 방법.
  39. 제38항에 있어서, 상기 염증이 인플라마솜 관련 염증인, 방법.
  40. 제39항에 있어서, 상기 인플라마솜 관련 염증이 중추 신경계 (central nervous system: CNS) 손상, 자가 면역, 자가 염증성, 대사성 또는 신경 퇴행성 질환과 관련되는, 방법.
  41. 제40항에 있어서, 상기 CNS 손상이 외상성 뇌 손상 (traumatic brain injury: TBI), 뇌졸중 및 척수 손상 (spinal cord injury: SCI)으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는, 방법.
  42. 제40항에 있어서, 상기 자가 면역 또는 신경 퇴행성 질환이 근위축성 측삭 경화증 (amyotrophic lateral sclerosis: ALS), 알츠하이머병, 파킨슨병, 근위축증 (muscular dystrophy: MD), 전신 홍반성 루푸스, 루푸스 신염, 류마티스 관절염, 염증성 장 질환 (예를 들어, 크론병 및 궤양성 대장염) 또는 다발성 경화증 (multiple sclerosis: MS)인, 방법.
  43. 제40항에 있어서, 상기 자가 염증성 질환이 크리오피린 관련 주기적 증후군 (cryopyrin-associated periodic syndrome: CAPS)인, 방법.
  44. 제43항에 있어서, 상기 CAPS가 가족성 한랭 자가 염증성 증후군 (FCAS), 머클-웰스 증후군 (Muckle-Wells syndrome: MWS) 및 신생아 발현 다발성 염증 질환 (neonatal-onset multisystem inflammatory disease: NOMID)으로부터 선택되는, 방법.
  45. 제40항에 있어서, 상기 대사성 질환이 대사성 증후군, 비만, 진성 당뇨병, 당뇨병성 신병증 또는 당뇨병성 신장 질환 (DKD), 인슐린 저항성, 죽상 동맥 경화증, 지질 저장 장애, 글리코겐 저장 질환, 중쇄 아실-코엔자임 A 데하이드로게나아제 결핍, 비알코올성 지방간 질환 (예를 들어, 비알코올성 지방 간염 (Nonalcoholic steatohepatitis: NASH)) 및 통풍인, 방법.
  46. 제37항에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래하는, 방법.
  47. 제37항에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래하는, 방법.
  48. 제47항에 있어서, 상기 대조군이 치료되지 않은 대상체인, 방법.
  49. 제37항에 있어서, 상기 투여가 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어지는, 방법.
  50. 대상체에서 다발성 경화증 (MS)을 치료하는 방법으로서, 상기 방법이 치료학적 유효량의 제2항 내지 제27항 중 어느 한 항의 단클론 항체 또는 이의 항체 단편을 상기 대상체에게 투여하여 상기 대상체에서 MS를 치료하는 단계를 포함하는, 방법.
  51. 제50항에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 적어도 염증성 사이토카인의 수준을 감소시키는, 방법.
  52. 제50항에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 상기 대상체에서 인플라마솜 활성화의 억제를 초래하는, 방법.
  53. 제50항에 있어서, 상기 단클론 항체 또는 이의 항체 단편의 투여가 대조군과 비교하여 ASC의 활성 감소를 초래하는, 방법.
  54. 제53항에 있어서, 상기 대조군이 치료되지 않은 대상체인, 방법.
  55. 제50항에 있어서, 상기 투여가 뇌혈관내로, 복강내로, 정맥내로 또는 흡입으로 이루어지는, 방법.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11840565B2 (en) 2016-12-29 2023-12-12 University Of Miami Methods and compositions for treating virus-associated inflammation
WO2018126009A1 (en) * 2016-12-29 2018-07-05 University Of Miami Method for modulating inflammasome activity and inflammation in the lung
CA3176521A1 (en) * 2020-04-27 2021-11-04 University Of Miami Compositions and methods for treating inflammasome related diseases or conditions
AU2022390134A1 (en) * 2021-11-16 2024-05-16 Ac Immune Sa Novel molecules for therapy and diagnosis
WO2024055015A1 (en) * 2022-09-09 2024-03-14 University Of Miami Inflammasome antibody compositon and method for treating neurologic disorder

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20040018194A1 (en) * 2000-11-28 2004-01-29 Francisco Joseph A. Recombinant anti-CD30 antibodies and uses thereof
WO2005111283A1 (ja) * 2004-05-17 2005-11-24 Denki Kagaku Kogyo Kabushiki Kaisha ポリ塩化ビニル繊維及びその製造方法並びに人工毛髪
AU2005306997B2 (en) * 2004-10-25 2012-07-05 Merck Sharp & Dohme Corp. Anti-ADDL antibodies and uses thereof
TW200636064A (en) * 2004-10-28 2006-10-16 Centocor Inc Anti-respiratory syncytial virus antibodies, antigens and uses thereof
AU2008219666A1 (en) * 2007-02-27 2008-09-04 Genentech, Inc. Antagonist OX40 antibodies and their use in the treatment of inflammatory and autoimmune diseases
US8685400B2 (en) * 2007-07-30 2014-04-01 University Of Miami Modulating inflammasome activity and inflammation in the central nervous system
WO2010003092A1 (en) * 2008-07-03 2010-01-07 University Of Massachusetts Methods and compositions for reducing inflammation and treating inflammatory disorders
PT3195880T (pt) * 2010-05-14 2020-02-21 Amgen Inc Formulações de anticorpos antiesclerostina de concentração elevada
WO2012123299A1 (en) * 2011-03-11 2012-09-20 Roche Diagnostics Gmbh Asc as marker for chronic obstructive pulmonary disease (copd)
US20140314746A1 (en) * 2013-03-13 2014-10-23 Philadelphia Health And Education Corporation, d/b/a Drexel University College of Medicine Methods for treating or preventing fibrosis in subjects afflicted with scleroderma
JP6359013B2 (ja) * 2013-07-29 2018-07-18 国立大学法人 鹿児島大学 １，５−ｄ−アンヒドロフルクトースを含むアポトーシス関連スペック様カード蛋白質の機能阻害薬
KR101948048B1 (ko) * 2016-12-08 2019-02-14 한양대학교 에리카산학협력단 톡소포자충 ｇｒａ７ 항원 유래 재조합 단백질을 유효성분으로 포함하는 결핵 예방 또는 치료용 약학 조성물
US11840565B2 (en) * 2016-12-29 2023-12-12 University Of Miami Methods and compositions for treating virus-associated inflammation
WO2018126009A1 (en) * 2016-12-29 2018-07-05 University Of Miami Method for modulating inflammasome activity and inflammation in the lung

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