KR20210068841A - Composition for anti-oxidant, anti-wrinkle and immune enhancement comprising bass extract - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to an antioxidant, anti-wrinkle and immune enhancement composition comprising a Micropterus salmoides extract. The Micropterus salmoides extract exhibits an excellent antioxidant effect through DPPH radical scavenging activity and ABTS scavenging activity, and exhibits an immune activation effect by increasing the production of nitric oxide (NO) that activates the immune response, so the composition of the present invention including the Micropterus salmoides extract can be usefully used as an antioxidant and anti-wrinkle cosmetic composition, a health functional food, and a composition for enhancing immune activity.

Description

배스 추출물을 포함하는 항산화, 주름개선 및 면역활성 증진용 조성물{Composition for anti-oxidant, anti-wrinkle and immune enhancement comprising bass extract}Composition for anti-oxidant, anti-wrinkle and immune activity enhancement comprising a bath extract {Composition for anti-oxidant, anti-wrinkle and immune enhancement comprising bass extract}

본 발명은 배스 추출물을 포함하는 항산화, 주름개선 및 면역활성 증진용 조성물에 관한 것으로, 구체적으로는, 배스 추출물을 포함하는 항산화 및 주름개선용 화장료 조성물 및 건강기능식품 조성물 및 배스 추출물을 포함하는 면역활성 증진용 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for antioxidant, anti-wrinkle and immune activity enhancement comprising a bath extract, and specifically, a cosmetic composition for antioxidant and anti-wrinkle improvement comprising a bath extract, and a health functional food composition and immunity comprising a bath extract It relates to a composition for enhancing activity.

배스(Micropterus salmoides)는 농어목(Perciformes) 검정우럭과 (Centrarchidae)에 속하며 원산지는 미국의 남동부 지역으로 양식 및 낚시를 목적으로 전 세계에 도입되었다. 우리나라에서 배스는 자원 조성용으로 수산청에서 1973년 처음 도입되었고 시험 연구를 통해 포식성과 방류 시 생태계에 끼칠 영향성에 대해 논의되었다. Bass ( Micropterus salmoides ) belongs to the family Centrarchidae of the order Perciformes, and its origin is in the southeastern part of the United States, and it was introduced to the world for the purpose of aquaculture and fishing. In Korea, bass was first introduced in 1973 by the Korea Fisheries Agency for the purpose of creating resources, and through a test study, its predation and its effect on the ecosystem during release were discussed.

배스는 머리와 몸통이 납작하고, 몸이 긴 방추형의 특징을 가진 민물고기 어종이다. 또한, 머리는 크고, 눈은 비교적 작으며 주둥이는 길면서 끝이 뾰족하고, 입은 크면서 하악이 상악보다 약간 앞으로 나와 있다. 등지느러미는 2개이고, 꼬리지느러미 후연 중앙은 안쪽으로 오목하게 파여 있다. 등쪽은 짙은 청색이고, 배쪽은 노란색을 띠며 몸 옆면 중앙에는 청갈색의 긴 줄무늬가 있다.Bass is a freshwater fish with a flat head and body and a long spindle-shaped body. In addition, the head is large, the eyes are relatively small, the snout is long and pointed, and the mouth is large, with the mandible protruding slightly ahead of the maxilla. There are two dorsal fins, and the center of the trailing edge of the caudal fin is concave inward. The back is dark blue, the belly is yellow, and there is a long blue-brown stripe in the center of the side of the body.

한편, 배스는 타 민물고기에 비해 칼슘, 인, 철 등의 미네랄이 1.5 내지 4배 가량 더 많이 함유되어 있어 영양이 풍부하고, 지방이 10 내지 30%에 불과하여 맛이 담백하다. 또한 노화를 방지하는 아미노산인 타우린이 다량 함유되어 있어 일본, 중국, 미국, 호주 등 여러 나라에서 고급어종으로 취급되고 있다.On the other hand, the bass contains 1.5 to 4 times more minerals such as calcium, phosphorus, and iron compared to other freshwater fish, so it is rich in nutrition and has only 10 to 30% fat, so it has a light taste. In addition, it contains a large amount of taurine, an amino acid that prevents aging, so it is treated as a high-quality fish in Japan, China, the United States, and Australia.

배스는 영양학적으로 가치가 높다고 평가되고 있으나 배스가 도입된 생태계에서 어류의 종다양성이 감소하고 그로 인해 저서 생물과 조류(algae)가 풍부해지면서 먹이사슬 구조와 생태계의 에너지 흐름 그리고 서식처 변화 등에 직·간접적인 영향을 미쳐 생태계 교란을 유발한다고 보고된 바 있다. 이러한 부정적인 인식 때문에 높은 영양학적 가치에 비해 배스를 활용하는 연구는 저조한 편이다. Bass is evaluated as having high nutritional value, but as the species diversity of fish decreases in the ecosystem to which the bass is introduced, and as a result, benthic organisms and algae become abundant, the structure of the food chain, the energy flow of the ecosystem, and habitat change are directly affected. · It has been reported to cause ecosystem disturbance through indirect effects. Due to these negative perceptions, studies using baths are low compared to their high nutritional value.

또한, 배스는 다른 어종에 비해 특유의 비린내가 더 심해 음식이나 식품으로 활용하기 어렵다는 단점도 있다.In addition, there is a disadvantage in that it is difficult to use the bass as food or food because the characteristic fishy smell is stronger than that of other fish species.

본 발명자들은 생태계 교란어종으로 분류된 배스의 활용도를 높이기 위해 배스 추출물의 활성을 스크리닝 하였고, 배스 추출물이 우수한 항산화 효과 및 면역활성 증진 효과를 갖는다는 것을 규명함으로써 본 발명을 완성하였다. The present inventors screened the activity of the bath extract to increase the utilization of the bass classified as an ecosystem-disrupting species, and completed the present invention by identifying that the bath extract has an excellent antioxidant effect and immune activity enhancing effect.

따라서, 본 발명의 목적은 배스 추출물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다. Accordingly, an object of the present invention is to provide a cosmetic composition for antioxidants comprising a bath extract.

본 발명의 다른 목적은 배스 추출물을 포함하는 주름개선용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.Another object of the present invention is to provide a cosmetic composition for improving wrinkles comprising a bath extract.

본 발명의 또 다른 목적은 배스 추출물을 포함하는 항산화용 건강기능식품 조성물을 제공하는 데 있다.Another object of the present invention is to provide a health functional food composition for antioxidants comprising a bath extract.

본 발명의 또 다른 목적은 배스 추출물을 포함하는 주름개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는 데 있다. Another object of the present invention is to provide a functional food composition for wrinkle improvement comprising a bath extract.

본 발명의 또 다른 목적은 배스 추출물을 포함하는 면역활성 증진용 조성물을 제공하는 데 있다.Another object of the present invention is to provide a composition for enhancing immune activity comprising a bath extract.

본 발명의 일 양태에 따르면, 본 발명은 배스 추출물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물에 관한 것이다. According to one aspect of the present invention, the present invention relates to a cosmetic composition for antioxidants comprising a bath extract.

본 발명의 다른 일 양태에 따르면, 본 발명은 배스 추출물을 포함하는 주름개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. According to another aspect of the present invention, the present invention relates to a cosmetic composition for improving wrinkles comprising a bath extract.

본 발명에서 사용되는 배스는 전국 각지에 고르게 분포하고 있는 민물어종으로 다른 어종에 비해 미네랄, 단백질 및 지질이 풍부하다. 특히 배스에는 다른 민물어종 또는 바다어종에 비해 타우린이 풍부한 것으로 알려져 있으나 배스 특유의 비린내로 인해 풍미감이 현저히 떨어져 음식이나 식품으로 활용되기 어렵다는 단점이 있다.The bath used in the present invention is a freshwater fish that is evenly distributed throughout the country and is rich in minerals, proteins and lipids compared to other fish species. In particular, the bath is known to be rich in taurine compared to other freshwater or sea fish species, but it has a disadvantage in that it is difficult to use as food or food because of the characteristic fishy smell of the bath, which makes it difficult to use it as food or food.

본 발명에서는 추출 과정을 통해 배스가 갖는 특유의 비린내를 효과적으로 제거함으로써 화장료 조성물 또는 건강기능식품 조성물에 포함되었을 때 냄새 또는 풍미에 있어서 불쾌감을 느끼지 않을 수 있도록 하였다. In the present invention, the characteristic fishy smell of the bath is effectively removed through the extraction process, so that when it is included in a cosmetic composition or a health functional food composition, it is possible not to feel unpleasant in smell or flavor.

본 발명의 배스 추출물은 배스를 물, HCl 용액, NaOH 수용액, 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 헥산 및 디에틸에테르로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 용매로 추출하여 얻은 조추출물일 수 있다. The bath extract of the present invention consists of a bath water, HCl solution, NaOH aqueous solution, straight or branched alcohol having 1 to 4 carbon atoms, acetone, ethyl acetate, butyl acetate, 1,3-butylene glycol, hexane and diethyl ether. It may be a crude extract obtained by extraction with one or more solvents selected from the group.

본 발명의 일 구현예에 따르면, 본 발명의 배스 추출물은 배스를 물, HCl 용액 또는 NaOH 수용액을 용매로 추출하여 얻은 조추출물일 수 있다. According to one embodiment of the present invention, the bath extract of the present invention may be a crude extract obtained by extracting the bath with water, HCl solution, or aqueous NaOH solution as a solvent.

상기 배스 추출물을 수득하는데 사용된 물은 상온(18 내지 25℃) 이상의 온도를 갖는 물일 수 있고, 예를 들어, 50℃ 이상의 열수일 수 있다. The water used to obtain the bath extract may be water having a temperature of room temperature (18 to 25° C.) or higher, for example, hot water at 50° C. or higher.

본 발명에 따른 배스 추출물은 용매 조추출물을 추가의 용매로 분획한 용매 분획물일 수 있다. The bath extract according to the present invention may be a solvent fraction obtained by fractionating the crude solvent extract with an additional solvent.

상기 '추출물'은 용매 조추출물, 특정 용매 가용 추출물(용매 분획물) 및 용매 조추출물의 용매 분획물을 포함하며, 상기 배스 추출물은 용액, 농축물 및/또는 분말 상태일 수 있다.The 'extract' includes a crude solvent extract, a specific solvent soluble extract (solvent fraction), and a solvent fraction of a crude solvent extract, and the bath extract may be in a solution, concentrate and/or powder form.

구체적으로, 본 명세서에서 사용되는 용어 '추출물'은 상술한 바와 같이 당업계에서 조추출물(crude extract)로 통용되는 의미를 갖지만, 광의적으로는 추출물을 추가적으로 분획(fractionation)한 분획물도 포함한다.Specifically, the term 'extract' as used herein has the meaning commonly used as a crude extract in the art as described above, but in a broad sense also includes a fraction obtained by additionally fractionating the extract.

즉, 배스 추출물은 상술한 추출용매를 이용하여 얻은 것뿐만 아니라, 여기에 정제과정을 추가적으로 적용하여 얻은 것도 포함한다. 예를 들어, 상기 추출물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 배스 추출물에 포함되는 것이다.That is, the bath extract includes not only those obtained using the above-described extraction solvent, but also those obtained by additionally applying a purification process thereto. For example, a fraction obtained by passing the extract through an ultrafiltration membrane having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (prepared for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity), etc., additionally carried out The fractions obtained through various purification methods are also included in the bath extract of the present invention.

본 발명에서 이용되는 배스 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 농축물 및/또는 분말 상태로 제조될 수 있다.The bath extract used in the present invention may be prepared in the form of a concentrate and/or powder by additional processes such as vacuum distillation and freeze drying or spray drying.

배스 추출물이 본 발명의 조성물에 포함된 양적 상한은 당업자가 적절한 범위 내에서 선택하여 실시할 수 있다.The upper limit of the quantity of the bath extract contained in the composition of the present invention may be selected by those skilled in the art within an appropriate range.

본 발명의 조성물은 DPPH 라디칼 및 ABTS 라디칼을 소거함으로써, 항산화 효과를 나타내며 따라서 항산화용 조성물로 사용될 수 있다.The composition of the present invention exhibits an antioxidant effect by scavenging DPPH radicals and ABTS radicals, and thus can be used as an antioxidant composition.

나이가 듦에 따라 활성산소종을 비롯한 여러 가지 인자에 의해 노화가 촉진 되고 이는 노화의 대표적인 표현형인 주름으로 나타나게 된다. 노화, 즉, 주름을 방지하기 위한 방법으로 노화의 발생원인의 80%를 차지하는 UV 노출을 줄이는 것과, 항산화제의 충분한 공급이 중요한 예방 및 치료법 중 하나라 할 수 있다.As we age, aging is accelerated by various factors, including reactive oxygen species, which appear as wrinkles, a representative phenotype of aging. As a method to prevent aging, that is, wrinkles, reducing UV exposure, which accounts for 80% of the causes of aging, and sufficient supply of antioxidants are important prevention and treatment methods.

항산화제가 활성산소종을 제거하여 세포의 산화스트레스를 줄임으로써 노화를 막고, 각각의 항산화제들이 노화 기전 또는 콜라겐 합성 같은 노화와 관련이 있는 기전에 각기 다른 기능으로 영향을 미쳐 노화 및 이에 대한 표현형인 주름을 억제하며, 항산화제가 세포의 산화환원 시그널링에 영향을 미쳐 수리 단백질(repair protein)의 활성화를 유도함으로써 수리 활성을 높여 피부 노화를 막는 것으로 알려져 있다. Antioxidants prevent aging by reducing oxidative stress in cells by removing reactive oxygen species, and each antioxidant affects aging mechanisms or mechanisms related to aging, such as collagen synthesis, with different functions, resulting in aging and its phenotype. It is known that it suppresses wrinkles and prevents skin aging by increasing repair activity by inducing the activation of repair proteins by an antioxidant effect on redox signaling in cells.

따라서, 우수한 항산화 활성을 나타내는 본 발명의 조성물은 주름개선 용도로 사용할 수 있다. Therefore, the composition of the present invention exhibiting excellent antioxidant activity can be used for wrinkle improvement.

본 발명의 항산화용 조성물 및 주름개선용 조성물은 화장료 조성물로서 제조될 수 있다. The composition for antioxidant and wrinkle improvement of the present invention may be prepared as a cosmetic composition.

본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 제조될 경우, 스킨, 스킨 소프트너, 스킨 토너, 로션, 밀크로션, 모이스쳐로션, 영양로션, 마사지크림, 영양크림, 아이크림, 모이스쳐크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 클렌징폼, 클렌징워터, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌져, 비누 및 파우더 중에서 선택된 어느 하나의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 이들 각 제형으로 이루어진 화장료 조성물은 그 제형의 제제화에 필요하고 적절한 각종의 기제와 첨가물을 함유할 수 있으며, 이들 성분의 종류와 양은 당업자에 의해 용이하게 선정될 수 있다.When the composition of the present invention is prepared as a cosmetic composition, skin, skin softener, skin toner, lotion, milk lotion, moisture lotion, nourishing lotion, massage cream, nourishing cream, eye cream, moisture cream, hand cream, essence, nutrition It may have any one formulation selected from essence, pack, cleansing foam, cleansing water, cleansing cream, body lotion, body cleanser, soap and powder, but is not limited thereto. The cosmetic composition consisting of each of these formulations may contain various bases and additives necessary and appropriate for the formulation of the formulation, and the types and amounts of these components can be easily selected by those skilled in the art.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판-부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component, and in particular, in the case of a spray, additional chlorofluorohydro It may contain a propellant such as carbon, propane-butane or dimethyl ether.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solvating agent or emulsifying agent is used as a carrier component, for example, water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene. fatty acid esters of glycol, 1,3-butylglycol oil, glycerol fatty esters, polyethylene glycol or sorbitan.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is a suspension, as a carrier component, a liquid diluent such as water, ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester; Microcrystalline cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar, or tracanth may be used.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 아세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the cosmetic composition of the present invention is surfactant-containing cleansing, aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, acetionate, imidazolinium derivative, methyl taurate, sarcosinate as carrier components , fatty acid amide ether sulfate, alkylamidobetaine, fatty alcohol, fatty acid glyceride, fatty acid diethanolamide, vegetable oil, linoline derivative or ethoxylated glycerol fatty acid ester, etc. may be used.

본 발명의 화장료 조성물은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습제, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당 유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention may further contain excipients including fluorescent substances, fungicides, hydrophobicity-inducing substances, moisturizers, fragrances, fragrance carriers, proteins, solubilizers, sugar derivatives, sunscreens, vitamins, plant extracts, and the like. .

본 발명의 다른 일 양태에 따르면, 본 발명은 배스 추출물을 포함하는 항산화용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다. According to another aspect of the present invention, the present invention relates to a health functional food composition for antioxidants comprising a bath extract.

본 발명의 다른 일 양태에 따르면, 본 발명은 배스 추출물을 포함하는 주름개선용 건강기능식품 조성물에 관한 것이다. According to another aspect of the present invention, the present invention relates to a health functional food composition for improving wrinkles comprising a bath extract.

본 발명의 건강기능식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 건강기능식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 양은 그의 사용 목적(예방 또는 개선)에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시 본 발명의 건강기능식품 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가 된다. 그러나 건강을 목적으로 하는 장기간의 섭취인 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로 사용될 수 있다.When the health functional food composition of the present invention is used as a food additive, the health functional food composition may be added as it is or used together with other foods or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The amount of the active ingredient may be appropriately used depending on the purpose of its use (prevention or improvement). In general, in the production of food or beverage, the health functional food composition of the present invention is added in an amount of 15 parts by weight or less, preferably 10 parts by weight or less, based on the raw material. However, in the case of long-term intake for health purposes, the amount may be less than the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount greater than the above range.

상기 건강기능식품의 종류에 특별한 제한은 없다. 상기 건강기능식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.There is no particular limitation on the type of the health functional food. Examples of foods to which the health functional food composition can be added include meat, sausage, bread, chocolate, candy, snacks, confectionery, pizza, ramen, other noodles, gum, dairy products including ice cream, various soups, beverages, tea There are drinks, alcoholic beverages, vitamin complexes, and the like, and includes all health foods in the ordinary sense.

또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 본 발명의 기능성 식품은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분 이외에 천연 탄수화물 또는 향미제를 추가 성분으로서 포함할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등), 디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등), 올리고당, 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등) 또는 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)인 것이 바람직하다. 상기 향미제는 천연 향미제(예컨대, 타우마틴, 스테비아 추출물 등)와 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 이용할 수 있다.In addition, the health functional food composition of the present invention may be prepared as a food, particularly a functional food. The functional food of the present invention includes ingredients commonly added during food production, for example, proteins, carbohydrates, fats, nutrients and seasonings. For example, when it is prepared as a drink, natural carbohydrates or flavoring agents may be included as additional ingredients in addition to the active ingredient. The natural carbohydrates include monosaccharides (eg, glucose, fructose, etc.), disaccharides (eg, maltose, sucrose, etc.), oligosaccharides, polysaccharides (eg, dextrin, cyclodextrin, etc.) or sugar alcohols (eg, , xylitol, sorbitol, erythritol, etc.). As the flavoring agent, natural flavoring agents (eg, taumatine, stevia extract, etc.) and synthetic flavoring agents (eg, saccharin, aspartame, etc.) may be used.

상기 건강기능식품 조성물 이외에 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 더 함유할 수 있다. 이러한 상기 첨가되는 성분의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 건강기능식품 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.In addition to the health functional food composition, various nutrients, vitamins, electrolytes, flavoring agents, colorants, pectic acid and its salts, alginic acid and its salts, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, carbonic acid It may further contain a carbonation agent and the like used in beverages. The ratio of these added ingredients is not very important, but is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight based on 100 parts by weight of the health functional food composition of the present invention.

본 발명의 다른 일 양태에 따르면, 본 발명은 배스 추출물을 포함하는 면역활성 증진용 조성물에 관한 것이다. According to another aspect of the present invention, the present invention relates to a composition for enhancing immune activity comprising a bath extract.

본 발명의 배스 추출물은 일산화질소(Nitric oxide, NO)의 생성을 증가시킴으로써 면역활성 효과를 나타낸다. The bath extract of the present invention exhibits an immunoactive effect by increasing the production of nitric oxide (NO).

NO는 혈관계에서는 혈소판의 응집 및 호중성구의 집합 작용, 골격근에서는 대사 조절 등 다양한 생리학적 기능을 하며 염증 반응에서 핵심적인 역할을 하는 세포 신호전달 물질로 대식세포, 백혈구, T림프구 등 면역에 관련된 많은 세포들에 의해 합성된다. 염증 과정에서 NO는 감염 관리, 신호전달 인자와 전사 인자 조절, 혈관 반응 조절, 백혈구 이동, 사이토카인 생성, 세포사멸 등에 관여한다. NO has various physiological functions such as platelet aggregation and neutrophil aggregation in the vascular system and metabolic regulation in skeletal muscle. synthesized by cells. In the inflammatory process, NO is involved in infection control, regulation of signaling and transcription factors, regulation of vascular responses, leukocyte migration, cytokine production, and apoptosis.

배스 추출물은 면역증강에 중요한 역할을 하는 NO를 자극하여 활성화시키는 면역활성 인자로 작용하는 것으로 나타나 면역 증진에 도움이 되는 소재로 활용될 수 있다. The bath extract appears to act as an immune activating factor that stimulates and activates NO, which plays an important role in immune enhancement, and thus can be used as a material helpful in improving immunity.

본 발명의 면역활성 증진용 조성물은 사료 조성물로서 제조될 수 있다. The composition for enhancing immune activity of the present invention may be prepared as a feed composition.

사료 조성물로서 제조될 경우, 유효성분으로서 배스 추출물 외에 당업계에 공지된 다양한 사료 성분을 포함할 수 있다. When prepared as a feed composition, it may include various feed ingredients known in the art in addition to the bath extract as an active ingredient.

상기 사료 조성물은 동물용 사료 조성물일 수 있다. The feed composition may be a feed composition for animals.

상기 동물은 특별한 제한이 있는 것은 아니지만, 바람직하게는 개 또는 고양이일 수 있다. 특히 개의 경우 배스에 풍부하게 포함된 영양소로 인해 개의 골격발달과 성장발달에 도움을 주며, 고양이의 경우에는 배스에 타우린이 다량 함유되어 있기 때문에 필수 아미노산인 타우린을 섭취하는데 도움이 된다.The animal is not particularly limited, but may preferably be a dog or a cat. In particular, in the case of dogs, the nutrients contained in the bath help the dog's skeletal development and growth development, and in the case of cats, the bath contains a large amount of taurine, so it is helpful to ingest the essential amino acid taurine.

본 발명은 배스 추출물을 포함하는 항산화, 주름개선 및 면역활성 증진용 조성물에 관한 것이다. 배스 추출물은 DPPH 라디칼 소거활성, ABTS 소거활성을 통해 우수한 항산화 효과를 나타내고, 면역반응을 활성화시키는 NO(nitric oxide)을 생성을 증가시킴으로써 면역활성화 효과를 나타내므로 배스 추출물을 포함하는 본 발명의 조성물은 항산화 및 주름개선을 위한 화장료 조성물 및 건강기능식품, 면역활성 증진을 위한 조성물로 유용하게 사용될 수 있다. The present invention relates to a composition for antioxidant, anti-wrinkle and immune activity enhancement comprising a bath extract. The bath extract exhibits an excellent antioxidant effect through DPPH radical scavenging activity and ABTS scavenging activity, and exhibits an immune activation effect by increasing the generation of NO (nitric oxide) that activates the immune response. It can be usefully used as a cosmetic composition for antioxidant and anti-wrinkle improvement, a health functional food, and a composition for enhancing immune activity.

도 1a는 배스 열수 추출물(50℃)의 세포독성을 측정한 결과이다.
도 1b는 배스 열수 추출물(100℃)의 세포독성을 측정한 결과이다.
도 1c는 배스 HCl 추출물의 세포독성을 측정한 결과이다.
도 1d는 배스 NaOH 추출물의 세포독성을 측정한 결과이다.
도 2는 배스 추출물의 활성산소 제거능력을 DPPH 어세이를 통해 분석한 결과이다.
도 3은 배스 추출물의 항산화 능력을 ABTS 어세이를 통해 분석한 결과이다.
도 4는 배스 추출물에 대한 면역활성화 여부를 측정한 결과이다.
Figure 1a is a result of measuring the cytotoxicity of the bath hot water extract (50 ℃).
Figure 1b is the result of measuring the cytotoxicity of the bath hot water extract (100 ℃).
Figure 1c is a result of measuring the cytotoxicity of the bath HCl extract.
Figure 1d is a result of measuring the cytotoxicity of the bath NaOH extract.
Figure 2 is the result of analyzing the active oxygen removal ability of the bath extract through the DPPH assay.
3 is a result of analyzing the antioxidant ability of the bath extract through the ABTS assay.
Figure 4 is a result of measuring whether the immune activation to the bath extract.

이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의하여 더욱 상세히 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의하여 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, these examples are only for illustrating the present invention, and the scope of the present invention is not limited by these examples.

제조예. 배스 추출물의 제조manufacturing example. Preparation of Bath Extract

배스의 살과 껍질, 내장, 머리 등을 200-300 메시(mesh)로 분쇄하여 파우더의 형태로 제조한 다음, 증류수(50℃, 100℃), 1%(v/v) HCl 또는 1%(v/v) NaOH에서 30분간 반응 시키고 3,000g X 20분 동안 원심분리 후 상층액을 수득하였다. The flesh, skin, intestines, and head of the bath are crushed into 200-300 mesh to make a powder, and then distilled water (50℃, 100℃), 1% (v/v) HCl or 1% ( v/v) NaOH for 30 minutes and centrifugation for 3,000 g X 20 minutes to obtain a supernatant.

실시예 1. 배스 추출물의 세포 안전성 평가Example 1. Evaluation of cell safety of bath extracts

인간 피부세포인 HaCat 세포를 96웰 플레이트에 5x103개 시딩하였다. 37℃에서 24시간 동안 배양한 후 DMEM 세포 배양액에 4종류의 배스 추출물을 0, 1, 2.5, 5, 10, 25, 50, 100%(v/v) 비율로 희석한 후 플레이트의 배양액을 교환하였다. 37℃에서 24시간 더 배양한 후 EZ-Cytox를 배지의 10%(v/v) 비율로 첨가한 후 30분 뒤 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. Human skin cells, HaCat cells, were seeded in 96-well plates at 5×10 3 cells. After culturing at 37°C for 24 hours, dilute 4 types of bath extracts in DMEM cell culture medium at a ratio of 0, 1, 2.5, 5, 10, 25, 50, 100% (v/v), and then exchange the culture medium on the plate. did. After further culturing at 37°C for 24 hours, EZ-Cytox was added at a ratio of 10% (v/v) of the medium, and absorbance was measured at 450 nm after 30 minutes.

NaOH 추출물을 제외한 3종류 추출물(50℃ 열수 추출물, 100℃ 열수 추출물 및 HCl 추출물)은 50%(v/v) 이상에서 세포독성이 나타났다(도 2a-2d). 100%(v/v) 추출물을 처리한 경우, 모든 실험군에서 세포독성이 나타났다. 배스 추출물을 일반적인 사료로 사용할 경우, 세포에 20%(v/v) 이상으로 처리될 가능성은 없으므로 세포 안전성은 매우 높은 것으로 사료된다. 50℃ 열수 추출물과 NaOH 추출물에서 25%(v/v) 처리군까지 강한 세포 증식 효과를 보여주었다.Except for the NaOH extract, the three extracts (50°C hot water extract, 100°C hot water extract and HCl extract) showed cytotoxicity at 50% (v/v) or more ( FIGS. 2a-2d ). When 100% (v/v) extract was treated, cytotoxicity was observed in all experimental groups. When the bath extract is used as a general feed, there is no possibility that the cells will be treated with more than 20% (v/v), so cell safety is considered to be very high. The 50℃ hot water extract and NaOH extract showed a strong cell proliferation effect up to 25% (v/v) treatment group.

실시예 2. 배스 추출물의 항산화 활성 평가Example 2. Evaluation of antioxidant activity of bath extract

2-1. 활성산소 제거 활성2-1. Active oxygen removal activity

에탄올에 0.25 mM DPPH를 녹여 최종 0.0019 g/20 mL의 농도를 만들고, 0.22 μm 필터 주사기로 필터링하였다. 4종류 추출물을 3차 증류수로 희석하여 농도별(0, 1, 10, 50, 100%)로 준비하였다. 음성대조군으로 증류수, 양성대조군으로 아스코르브산을 사용하였다. 튜브에 DPPH 시약을 350 μl씩 분주하고 대조군과 추출물 샘플을 동일한 양으로 분주하였다. 샘플의 보유 색을 제거해주기 위해 증류수를 350 μl씩 분주한 다음, 추출물 샘플을 동일한 양으로 분주하였다. 볼텍싱 후, 상온에서 20 분간 반응시키고 96웰 플레이트에 각 200 μl씩 3반복으로 분주하였다. ELISA reader기를 사용해 흡광도 517 nm에서 흡광도를 측정하였다. 0.25 mM DPPH was dissolved in ethanol to make a final concentration of 0.0019 g/20 mL, and filtered with a 0.22 μm filter syringe. Four types of extracts were diluted with tertiary distilled water and prepared by concentration (0, 1, 10, 50, 100%). Distilled water was used as a negative control and ascorbic acid was used as a positive control. 350 μl of DPPH reagent was dispensed into the tube, and the same amount of control and extract samples were dispensed. In order to remove the retained color of the sample, 350 μl of distilled water was dispensed, and then the extract sample was dispensed in the same amount. After vortexing, the reaction was performed at room temperature for 20 minutes, and 200 μl each was dispensed in 3 repetitions in a 96-well plate. Absorbance was measured at 517 nm using an ELISA reader.

그 결과, 50℃ 열수 추출물은 50%(v/v) 농도부터 높은 활성산소 제거 활성을 나타냈고, 100℃ 열수 추출물은 농도가 점차 증가할수록 활성산소 제거 효과가 감소되는 것으로 나타났다(도 3). HCl 추출물 및 NaOH 추출물은 10%(v/v) 농도부터 활성산소 제거 효과가 나타나기 시작했고 최고 농도 100%(v/v)에서 아스코르브산(100 μM)의 50% 이상 활성을 나타냈다. 최고 농도인 100%(v/v) 추출물에서 열수 추출물 보다 HCl 추출물 및 NaOH 추출물에서 활성산소 소거능 활성이 월등히 높게 나타났다. As a result, the 50 ℃ hot water extract showed high active oxygen removal activity from 50% (v/v) concentration, and the 100 ℃ hot water extract showed that the active oxygen removal effect decreased as the concentration gradually increased (FIG. 3). The HCl extract and NaOH extract started to show the active oxygen removal effect from 10% (v/v) concentration, and showed more than 50% activity of ascorbic acid (100 μM) at the highest concentration of 100% (v/v). In the 100% (v/v) extract, which is the highest concentration, the active oxygen scavenging activity was significantly higher in the HCl extract and the NaOH extract than in the hot water extract.

결론적으로 배스 추출물을 사료 성분으로 사용할 경우, 동물의 체내에서 산, 염기성 체액에 의해 분해된 후 세포로 이동되면 높은 활성산소 제거 능력을 나타낼 것으로 사료된다.In conclusion, when the bath extract is used as a feed ingredient, it is thought that it will exhibit a high ability to remove active oxygen when it is decomposed by acid and basic fluid in the body of an animal and then transferred to cells.

2-2. 항산화능 평가(ABTS 어세이)2-2. Antioxidant activity evaluation (ABTS assay)

7 mM ABTS와 2.4 mM potassium persulfate를 3차 증류수에 녹인 후 혼합하고 빛을 차단한 상태에서 상온에 12-16시간 동안 반응시켰다. ELISA reader기에서 흡광도 414 nm로 측정하여 1.5 ± 0.03의 수치가 될 때까지 3차 증류수로 희석하였다. 추출물 샘플 농도별로 3차 증류수로 희석하여 준비하였다. 7 mM ABTS and 2.4 mM potassium persulfate were dissolved in tertiary distilled water, mixed, and reacted at room temperature for 12-16 hours while blocking light. The absorbance was measured at 414 nm in an ELISA reader and diluted with tertiary distilled water until a value of 1.5 ± 0.03. The extract was prepared by diluting with tertiary distilled water for each sample concentration.

4종류 추출물을 3차 증류수로 희석하여 농도별(0, 1, 10, 50, 100%)로 준비하였다. 음성대조군으로 증류수, 양성대조군으로 아스코르브산을 사용하였다. 튜브에 DPPH 시약을 600 μl씩 분주하고 추출물 샘플을 200 μl 분주하였다. 샘플의 보유 색을 제거해주기 위해 증류수를 600 μl씩 분주한 다음, 추출물 샘플을 200 μl 분주하였다. 볼텍싱 후, 상온에서 10 분간 반응시키고 96웰 플레이트에 각 200 μl씩 3반복으로 분주하였다. ELISA reader기를 사용해 흡광도 414 nm에서 흡광도를 측정하였다. Four types of extracts were diluted with tertiary distilled water and prepared by concentration (0, 1, 10, 50, 100%). Distilled water was used as a negative control and ascorbic acid was used as a positive control. 600 μl of DPPH reagent was dispensed into the tube, and 200 μl of the extract sample was dispensed. In order to remove the retained color of the sample, 600 μl of distilled water was dispensed, and then 200 μl of the extract sample was dispensed. After vortexing, the reaction was performed at room temperature for 10 minutes, and 200 μl each was dispensed in 3 repetitions in a 96-well plate. Absorbance was measured at 414 nm using an ELISA reader.

DPPH 분석과 다르게 모든 샘플에서 농도가 증가할수록 항산화 효과가 증가하는 확인하였다(도 3). 4종류 추출물은 50% 농도까지 아스코르브산의 활성보다 높게 나타났으며, 최고농도 100%에서는 아스코르브산의 활성과 비슷한 효과를 나타냈다. 결론적으로 배스 추출물을 우수한 항산화 효과를 나타내기 때문에 면역력, 노화방지 등에 탁월한 효과를 줄 수 있을 것으로 사료된다. Unlike the DPPH analysis, it was confirmed that the antioxidant effect increased as the concentration increased in all samples (FIG. 3). The four extracts showed higher activity than ascorbic acid up to 50% concentration, and showed similar effects to ascorbic acid activity at the highest concentration of 100%. In conclusion, it is thought that the bath extract can have excellent effects on immunity and anti-aging because it exhibits excellent antioxidant effect.

실시예 3. 배스 추출물의 면역활성화 능력 평가Example 3. Evaluation of immune activation ability of bath extract

THP-1 세포를 24웰 플레이트에 시딩하고 10% 또는 20% 농도로 배지에 희석 추출물 샘플 및 LPS(1 μg/ml)를 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 상층액을 모은 후 Griess reagent와 1:1로 혼합하여 상온에서 15분 동안 배양하고, 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. THP-1 cells were seeded in a 24-well plate, treated with a diluted extract sample and LPS (1 μg/ml) in the medium at a concentration of 10% or 20%, and cultured for 24 hours. After collecting the supernatant, it was mixed with Griess reagent 1:1, incubated at room temperature for 15 minutes, and absorbance was measured at 540 nm.

Human 유래 Monocyte 세포주인 THP-1 세포를 사용하여 면역 활성화에 의해 생성, 분비되는 Nitric Oxide(NO) 양을 정량하는 방법으로 배스를 포함하는 사료의 면역활성화 효과를 확인하였다. 배스에 대한 4종류 추출물을 세포 독성이 없는 농도로 희석하고, LPS(1 μg/ml)과 함께 24시간 배양하였다. 추출방법과 무관하게 모두 대조군 대비 NO값이 유의 있게 증가하는 것으로 확인되었다. 따라서, 배스 추출물은 면역활성화를 유도하는 것으로 판단된다(도 4). The immune activation effect of the feed containing the bath was confirmed by quantifying the amount of Nitric Oxide (NO) produced and secreted by immune activation using THP-1 cells, a human-derived monocyte cell line. Four types of extracts for the bath were diluted to a concentration without cytotoxicity, and incubated with LPS (1 μg/ml) for 24 hours. Regardless of the extraction method, it was confirmed that the NO value significantly increased compared to the control group. Therefore, it is determined that the bath extract induces immune activation (FIG. 4).

Claims (6)

배스 추출물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for antioxidants comprising a bath extract.
제 1 항에 있어서, 상기 추출물은 물, HCl 용액, NaOH 수용액, 탄소수 1 내지 4개의 직쇄 또는 분지형 알코올, 아세톤, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 1,3-부틸렌 글리콜, 헥산 및 디에틸에테르로 이루어진 군으로부터 선택된 1종 이상의 용매로 추출하여 얻어진 추출물인 것인, 항산화용 화장료 조성물.
The method of claim 1, wherein the extract is water, HCl solution, NaOH aqueous solution, a linear or branched alcohol having 1 to 4 carbon atoms, acetone, ethyl acetate, butyl acetate, 1,3-butylene glycol, hexane and diethyl ether. An extract obtained by extraction with one or more solvents selected from the group consisting of, an antioxidant cosmetic composition.
배스 추출물을 포함하는 주름개선용 화장료 조성물.
A cosmetic composition for wrinkle improvement comprising a bath extract.
배스 추출물을 포함하는 항산화용 건강기능식품 조성물.
A health functional food composition for antioxidants comprising a bath extract.
배스 추출물을 포함하는 주름개선용 건강기능식품 조성물.
A health functional food composition for wrinkle improvement comprising a bath extract.
배스 추출물을 포함하는 면역활성 증진용 조성물. A composition for enhancing immune activity comprising a bath extract.
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