KR20210005604A - 의약으로 사용하기 위한 오스테오폰틴 및 2'-푸코실락토오스의 조합물 - Google Patents
의약으로 사용하기 위한 오스테오폰틴 및 2'-푸코실락토오스의 조합물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20210005604A KR20210005604A KR1020207030625A KR20207030625A KR20210005604A KR 20210005604 A KR20210005604 A KR 20210005604A KR 1020207030625 A KR1020207030625 A KR 1020207030625A KR 20207030625 A KR20207030625 A KR 20207030625A KR 20210005604 A KR20210005604 A KR 20210005604A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- opn
- combination
- human
- osteopontin
- fucosylactose
- Prior art date
Links
- 102000004264 Osteopontin Human genes 0.000 title claims abstract description 115
- 108010081689 Osteopontin Proteins 0.000 title claims abstract description 115
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims abstract description 26
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims abstract description 20
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims abstract description 16
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims abstract description 16
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 claims abstract description 14
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims abstract description 14
- 108050003558 Interleukin-17 Proteins 0.000 claims abstract description 13
- 102000013691 Interleukin-17 Human genes 0.000 claims abstract description 13
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 9
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 8
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 8
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims abstract description 7
- 101000819111 Homo sapiens Trans-acting T-cell-specific transcription factor GATA-3 Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 102100021386 Trans-acting T-cell-specific transcription factor GATA-3 Human genes 0.000 claims abstract description 6
- 101000979342 Homo sapiens Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 101100260032 Mus musculus Tbx21 gene Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102100023050 Nuclear factor NF-kappa-B p105 subunit Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 claims abstract description 4
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 claims abstract description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 25
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 claims description 21
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 claims description 21
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 claims description 12
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 8
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims description 6
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 4
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 3
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 claims description 3
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 claims description 3
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 claims description 3
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 claims description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 claims description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 3
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 claims description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 claims 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 claims 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 9
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 5
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 abstract description 4
- VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N Dinitrochlorobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(Cl)C([N+]([O-])=O)=C1 VYZAHLCBVHPDDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 61
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 29
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 12
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 11
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 11
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 10
- 238000011725 BALB/c mouse Methods 0.000 description 9
- 230000002393 scratching effect Effects 0.000 description 9
- 238000006748 scratching Methods 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 8
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 7
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 7
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 7
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 6
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 6
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 6
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 5
- 235000020256 human milk Nutrition 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 5
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 4
- 210000004251 human milk Anatomy 0.000 description 4
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 101000845170 Homo sapiens Thymic stromal lymphopoietin Proteins 0.000 description 3
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 3
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 3
- 102100031294 Thymic stromal lymphopoietin Human genes 0.000 description 3
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 3
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 2
- 108010092408 Eosinophil Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 102000044708 Eosinophil peroxidases Human genes 0.000 description 2
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 2
- 238000012413 Fluorescence activated cell sorting analysis Methods 0.000 description 2
- 101000713602 Homo sapiens T-box transcription factor TBX21 Proteins 0.000 description 2
- 238000004977 Hueckel calculation Methods 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 238000010240 RT-PCR analysis Methods 0.000 description 2
- 102100036840 T-box transcription factor TBX21 Human genes 0.000 description 2
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000068 Th17 cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000005299 abrasion Methods 0.000 description 2
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000011532 immunohistochemical staining Methods 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 2
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 229950003937 tolonium Drugs 0.000 description 2
- HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M tolonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=C(C)C(N)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 HNONEKILPDHFOL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 2
- TYALNJQZQRNQNQ-UHFFFAOYSA-N #alpha;2,6-sialyllactose Natural products O1C(C(O)C(O)CO)C(NC(=O)C)C(O)CC1(C(O)=O)OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(O)OC2CO)O)O1 TYALNJQZQRNQNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CILYIEBUXJIHCO-UHFFFAOYSA-N 102778-91-6 Natural products O1C(C(O)C(O)CO)C(NC(=O)C)C(O)CC1(C(O)=O)OC1C(O)C(OC2C(C(O)C(O)OC2CO)O)OC(CO)C1O CILYIEBUXJIHCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940062827 2'-fucosyllactose Drugs 0.000 description 1
- HWHQUWQCBPAQQH-UHFFFAOYSA-N 2-O-alpha-L-Fucosyl-lactose Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O HWHQUWQCBPAQQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HWHQUWQCBPAQQH-BWRPKUOHSA-N 2-fucosyllactose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@H]([C@H](O)CO)[C@H](O)[C@@H](O)C=O HWHQUWQCBPAQQH-BWRPKUOHSA-N 0.000 description 1
- DVGKRPYUFRZAQW-UHFFFAOYSA-N 3 prime Natural products CC(=O)NC1OC(CC(O)C1C(O)C(O)CO)(OC2C(O)C(CO)OC(OC3C(O)C(O)C(O)OC3CO)C2O)C(=O)O DVGKRPYUFRZAQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000032544 Cicatrix Diseases 0.000 description 1
- 208000035874 Excoriation Diseases 0.000 description 1
- 101150112014 Gapdh gene Proteins 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- CILYIEBUXJIHCO-UITFWXMXSA-N N-acetyl-alpha-neuraminyl-(2->3)-beta-D-galactosyl-(1->4)-beta-D-glucose Chemical compound O1[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(=O)C)[C@@H](O)C[C@@]1(C(O)=O)O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)O)O[C@H](CO)[C@@H]1O CILYIEBUXJIHCO-UITFWXMXSA-N 0.000 description 1
- OIZGSVFYNBZVIK-UHFFFAOYSA-N N-acetylneuraminosyl-D-lactose Natural products O1C(C(O)C(O)CO)C(NC(=O)C)C(O)CC1(C(O)=O)OC1C(O)C(OC(C(O)CO)C(O)C(O)C=O)OC(CO)C1O OIZGSVFYNBZVIK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- SNFSYLYCDAVZGP-UHFFFAOYSA-N UNPD26986 Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OC1C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)OC(CO)C(O)C1O SNFSYLYCDAVZGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- TYALNJQZQRNQNQ-JLYOMPFMSA-N alpha-Neup5Ac-(2->6)-beta-D-Galp-(1->4)-beta-D-Glcp Chemical compound O1[C@@H]([C@H](O)[C@H](O)CO)[C@H](NC(=O)C)[C@@H](O)C[C@@]1(C(O)=O)OC[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)O)O1 TYALNJQZQRNQNQ-JLYOMPFMSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000004709 cell invasion Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 230000003920 cognitive function Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000003628 erosive effect Effects 0.000 description 1
- 230000034964 establishment of cell polarity Effects 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 210000004013 groin Anatomy 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 230000003832 immune regulation Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 208000019423 liver disease Diseases 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 230000033001 locomotion Effects 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 229940121649 protein inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 239000012268 protein inhibitor Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000037387 scars Effects 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/39—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin, cold insoluble globulin [CIG]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/19—Cytokines; Lymphokines; Interferons
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/125—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives containing carbohydrate syrups; containing sugars; containing sugar alcohols; containing starch hydrolysates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/40—Complete food formulations for specific consumer groups or specific purposes, e.g. infant formula
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/702—Oligosaccharides, i.e. having three to five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
Abstract
오스테오폰틴 (OPN) 및 2'-푸코실락토오스 (2-FL)의 조합물이 인간 또는 동물 개체에게 영향을 미치는 염증성 인자 분비로 인한 면역 질환 또는 장애의 예방 또는 치료에 사용된다. 상기 조합물은, 사이토카인 분비, 예를 들어 INF-γ, IL-2, IL-4, IL-17, IL-6, IL-10, TGF-β, Tbet, GATA3 및 NFκB의 분비 및/또는 면역글불린 분비, 예를 들어 IgE 및 Ig1의 분비로 인한 질환 또는 장애의 예방 또는 치료에 특히 유용하다.
Description
오스테오폰틴 (osteopontin: OPN)은, 인간의 모유에 고농축될 수 있고, 염증의 개시와 관련된 광범위하게 인산화된 산성 당단백질로서, 세포내 또는 세포외 국소화에 따라 세포접착, 주화성(chemotaxis), 면역 조절, 및 세포사멸로부터의 보호에 영향을 준다 (2-6). 흥미롭게도, OPN은 다발성 경화증 (7, 8), 류마티스 관절염 (2), 전신 홍반성 루푸스 (3), 염증성 장질환 (4, 9), 천식 (5) 및 간 질환 (10)을 포함한 다양한 면역 매개 질환에 관여하는 것으로 밝혀졌다.
인간 모유 올리고당 (human milk oligosaccharides: HMO)은 글리칸 패밀리이며 모유에서 세번째로 풍부한 성분이다 (1). 가장 일반적인 HMO 인 2'-푸코실락토오스 (2'-fucosyllactose: 2FL)는 모유내 모든 HMO의 30%를 차지할 수 있다. 이 고도의 생체활성인 HMO는 면역조절 활성, 병원성 박테리아 및 바이러스로부터의 보호 및 인지 기능 향상과 관련이 있다 (1).
현재 상업적으로 이용가능한 이 두 가지 인간 모유 성분은, 특히 임의의 관련 천연 소스에 존재하는 비율과는 상이한 OPN 및 2-FL 함량을 갖는 OPN 및 2-FL 조합물의 형태로 사용될 때, 염증성 사이토카인 분비의 조절로 인한, 그러나 이에 제한되지 않은 면역 장애들에 긍정정인 영향을 미칠 수 있다는 것이 본원에서 밝혀졌다.
놀랍게도, OPN과 2-FL을 OPN과 2-FL의 조합물의 형태로 사용하면 면역 반응을 조절하는데 상승적인 작용을 할 수 있다는 것이, BALB/c 쥐 염증 모델을 사용하여 또한 밝혀졌다. 특히, OPN과 2-FL을 조합물로 사용하면 염증을 감소시키고 T 세포 기능 및 사이토카인 분비와 같은 면역 매개변수를 조절하는데 상승적인 작용을 할 수 있다는 것이 관찰되었다.
이러한 성과들은, 인간 또는 동물의 면역계 기능장애에서 비롯된 장애 및 질환, 특히 염증성 인자 분비로 인한 질환 또는 장애를 치료 또는 예방하는 데 적합한 의약으로서, 또는 식품 또는 영양 또는 식이 보충제 형태로, 이들 두 성분의 잠재적인 응용 분야를 예상치 못하게 확대할 수 있다.
본 발명은 아래에 나타나는 명세서에서 뿐만 아니라 청구범위에서 정의된다.
1. Bode, L. (2012) Human milk oligosaccharides: every baby needs a sugar mama. Glycobiology 22, 1147-1162
2. Gravallese, E. M. (2003) Osteopontin: a bridge between bone and the immune system. The Journal of clinical investigation 112, 147-149
3. Kaleta, B. (2014) Role of osteopontin in systemic lupus erythematosus. Archivum immunologiae et therapiae experimentalis 62, 475-482
4. Kourepini, E., Aggelakopoulou, M., Alissafi, T., Paschalidis, N., Simoes, D. C., and Panoutsakopoulou, V. (2014) Osteopontin expression by CD103- dendritic cells drives intestinal inflammation. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 111, E856-865
5. Konno, S., Kurokawa, M., Uede, T., Nishimura, M., and Huang, S. K. (2011) Role of osteopontin, a multifunctional protein, in allergy and asthma. Clinical and experimental allergy : journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology 41, 1360-1366
6. Uede, T. (2011) Osteopontin, intrinsic tissue regulator of intractable inflammatory diseases. Pathology international 61, 265-280
본 발명
본 발명의 첫 번째 대상은, 인간 또는 동물 개체에게 영향을 미치는 염증성 인자 분비로 인한 면역 질환 또는 장애의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 오스테오폰틴 (OPN) 및 2'-푸코실락토오스 (2-FL)의 조합물이다.
본 발명의 또 다른 대상은, 인간 또는 동물 개체에게 영향을 미치는, IL-17 및 IL-4 분비와 같은 염증성 사이토카인 분비로 인한 또는 IgE 분비와 같은 면역글로불린 분비로 인한, 면역 질환 또는 장애의 예방 또는 치료에 사용하기 위한, 오스테오폰틴 (OPN) 및 2'-푸코실락토오스 (2-FL)의 조합물이다.
본 발명의 또 다른 대상은, 오스테오폰틴 (OPN) 및 2'-푸코실락토오스 (2-FL)의 조합물을 필요한 개체에게 투여하는 것을 포함하는, 인간 또는 동물 개체에게 영향을 미치는 염증성 인자 분비로 인한 면역 질환 또는 장애의 예방 또는 치료 방법이며, 선택적으로 상기 조합물은 식품 또는 영양 또는 식이 보충제와 조합되거나 이에 내장된다.
본 발명의 또 다른 대상은, 오스테오폰틴 (OPN) 및 2'-푸코실락토오스 (2-FL)의 조합물을 필요한 개체에게 투여하는 것을 포함하는, 인간 또는 동물 개체에 영향을 미치는, IL-17 및 IL-4 분비와 같은 염증성 사이토카인 분비 또는 IgE 분비와 같은 면역글로불린 분비로 인한, 면역 질환 또는 장애의 예방 또는 치료 방법이며, 선택적으로 상기 조합물은 식품 또는 영양 또는 식이 보충제와 조합되거나 이에 내장된다.
정의
용어 "OPN"은 인간 또는 동물 기원의 오스테오폰틴 뿐만 아니라, 본 발명의 골격 내에서 적용될 때 동일하거나 동등하거나 유사한 효과를 발휘할 수 있는, 이의 임의의 유도체 또는 전구체를 나타낸다. 이 용어는 인간 또는 동물의 OPN과 재조합 OPN을 또한 포함한다.
용어 "2-FL"은 천연의, 가장 빈번하게는 포유 동물 기원, 합성 또는 박테리아 발효 기원의 2'-푸코실락토오스 뿐만 아니라, 본 발명의 골격 내에서 적용될 때 동일하거나 동등하거나 유사한 효과를 발휘할 수 있는, 이의 임의의 유도체 또는 전구체를 나타낸다. 이 용어는 본 발명의 골격 내에서 특정 상황에서는 3'-시알릴락토오스 및 6'-시알릴락토오스와 같은 HMO를 포함할 수도 있다.
본원에서 용어 "인간 개체"는 조산아, 신생아, 영아, 유아, 청소년, 성인 또는 노인, 특히 면역 기능의 미성숙 또는 기능 장애에 영향을 받는 영아 개체와, 후자가 회복되어야 하는 인간 개체를 정의하는 데 사용된다.
용어 "동물 개체"은 주로 포유동물, 예를 들어, 소 또는 애완 동물과 같은 포유동물을 나타낸다.
용어 "염증성 인자 분비로 인한 면역 질환 또는 장애"는 아토피성 피부염, 건선, 알레르기, 알레르기성 비염, 천식 및 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD)과 같은 질환 또는 장애를 포함한다. 그러나 이 예시들은 제한적인 것이 아니다.
용어 "염증성 인자"는 사이토카인, 특히 INF-γ, IL-2, IL-4, IL-17, IL-6, IL-10, TGF-β, Tbet, GATA3 및 NFκB, 및 면역글로불린, 예를 들어 IgE 및 IgG1을 나타낸다.
용어 "투여"는 경구 또는 장내, 비경구 또는 국소 투여를 포함한다.
용어 "조합된(combined with)"및 "내장된(embedded in)"은 당업계에서 통용된다.
특정 구현예
OPN 및 2-FL은 BALB/c 마우스에서 DNCB로 유도된 AD-유사 증상을 약화시켰다.
염증 및 아토피성 피부염 (AD)의 출현에 대한 OPN 또는 2-FL 또는 OPN/2FL 조합물의 잠재적인 치료 효과를 조사하기 위해, 귀와 등쪽 피부 각각에 DNCB를 국소 적용하여 BALB/c AD 모델을 확립하였다. DNCB를 여러번 챌린지한 후 DNCB에 감작화된 마우스의 피부에서 부종, 찰상, 홍반 및 흉터가 분명해졌다. 놀랍게도, BALB/c 마우스에서 DNCB-유도된 AD-유사 증상의 중증도는, 식염수-보충 마우스와 비교하여 OPN (37.5 또는 2.7mg/kg(bw).일) 및 2-FL (600 또는 75 mg/kg(bw).일)의 보충에 의해 개선되었다. 가려움증(pruritus)는 AD의 중요한 특징이다. 긁는 행동은 동물 모델에서 가려움증을 평가하기 위한 객관적인 지표로서 이미 확립된 바 있다.
도 1에 나타난 바와 같이, OPN과 2-FL의 경구 투여는 AD 점수를 실질적으로 감소시켰다. 흥미롭게도, 2FL/OPN의 다양한 조합물, 특히 실험 7과 8에 의해 나타난 결과들은, 고용량의 OPN 적용시 AD-유사 증상들의 현저한 감소를 증명하며 이는 상승적 효과를 제시한다.
도 2에 나타난 바와 같이, OPN과 2-FL의 경구 투여는 긁는 행동을 감소시켰다. 2FL/OPN의 조합물 (특히 실험 7과 8 참조)은 AD-유사 증상들의 가장 현저한 감소를 증명하며 이는 상승적 효과를 제시한다.
OPN 및 2-FL은 DNCB 감작 마우스에서 혈청 IgE 상승을 감소시키고 비만세포 침윤을 완화했다.
식염수 대조군과 비교했을 때, OPN 및 2-FL이 보충된 마우스의 혈청 IgE 농도는 27 일에 결정되었다. 예상한대로, DNCB의 국소 적용은 BALB/c AD 마우스에서 혈청 IgE의 유의한 발현을 유도한 반면(1025.02± 82.68 μg/ml), 혈청 IgE 농도는 OPN (388.22± 61.28 μg/ml) 및 2-FL (621.27± 46.79 μg/ml) 보충된 군 둘 다에서 감소했다 (도 3).
OPN/2-FL 의 고용량 조합물 (특히 실험 8 참조)은, 다른 처치들과 비교할 때, IgE 수준을 현저하게 감소시켜(396.71± 54.71 μg/ml) 시너지 효과를 나타냈다.
AD-유사 마우스에서 OPN 및 2-FL 처리 후 Th1, Th2 및 Th17 세포의 비율 감소
2FL 및/또는 OPN 의 보충과 함께 또는 보충없이, DNCB 처리된 BALB/c 마우스에서 CD4+ Th 세포의 분화를 평가하였다. DNCB에 감작된 마우스에서 얻은 림프구를 세포간 염색에 의해 IFN-γ, IL-4 및 IL-17의 발현에 대해 테스트한 후 FACS 분석으로 평가하였다. IFN-γ-생성 CD4+ Th1 림프구의 비율은 식염수-처리군에서보다 OPN 및 2-FL 보충군에서 유의하게 낮았다. 한편, IL-4를 생산하는 CD4+ Th2 림프구와 IL-17을 생산하는 CD4+ Th17 림프구의 값도 식염수-처리군에 비해 상기 보충군에서 유의하게 감소했다 (도 4(a) 및 (b)).
이들 데이터 (도 4a의 실험 7 & 8과, 도 4b의 실험 6, 7 & 8 참조)는 OPN 및 2-FL 보충이 Th1, Th2 및 Th17 세포 분극화(polarization)를 조절하여 AD 염증을 실질적으로 감소시킬 수 있음을 나타낸다.
BALB/c 마우스에서 OPN 및 2-FL은 TSLP 및 IL-17A의 DNCB-유도된 mRNA 발현을 감소시켰다.
대조군 및 처치된 BALB/c 마우스의 등쪽 피부로부터 총 RNA를 분리하였다 다음으로, 피부 샘플에서 사이토카인 mRNA 발현을 RT-PCR로 측정하였다. Th2-연관 사이토카인인, TSLP 및 IL-4의 발현은, 식염수 처리군에 비해 OPN 및 2-FL 보충군에서 현저하게 감소하는 것으로 나타났다 (도 5). 또한, IL-17의 mRNA 발현은 식염수 처리된 AD 마우스에서보다 OPN 또는 2-FL 보충된 AD 마우스의 피부에서 유의적으로 낮았다.
흥미롭게도, 낮은 발현 수준은 개별 성분들이 아닌 OPN/2FL 조합물의 보충과 관련이 있었다 (도 5a 및 도5b의 실험 6 내지 8, 특히 7 참조).
OPN 및 2-FL은 마우스에서 DNCB-유도된 Th1, Th2 및 Th17 반응의 증가를 감소시킨다.
활성화된 CD4+ T 세포가 AD의 병인에 중요한 역할을 한다는 점을 고려하여, 감작된 마우스의 dLN에서 CD4+ Th 세포의 하위집합(subset)을 FACS 분석을 통해 분석하였다. IFN-γ-생산 CD4+ Th1 림프구, IL-4-생산 CD4+ Th2 림프구, IL-17-생산 CD4+ Th17 림프구의 비율은, 대조군 마우스에서보다 OPN 및 2-FL 처리된 AD 마우스에서 현저히 낮았다. 그러나 Foxp3-양성 CD4+ Treg 림프구의 빈도는 그룹들 간에 비슷했다 (도 8a-8c).
반면, IFN-γ (Th1 사이토카인), IL-4 (Th2 사이토카인) 및 IL-17 (Th17 사이토카인)의 mRNA 수준은, 대조군 AD 마우스와 비교시, OPN 및 2-FL 처리된 AD 마우스의 피부 병변에서 현저하게 억제되었다 (도 15). 또한, 대응되는 전사인자 (즉, T-bet, GATA3, ROR-γt)의 수준을 측정한 결과 그룹들 간에 유사한 변화가 나타났다 (도 9a-9d).
DNCB 처리 마우스에서 OPN 및 2-FL은 비만세포 및 호산구가 피부 병변으로 침윤하는 것을 억제한다.
비만세포와 호산구는 알레르기 질환에 해로운 기여를 하는 것으로 악명 높게 알려져 있다.
실험 결과 WT 대조군 마우스보다 OPN 및 2-FL 처리된 AD 마우스의 피부 병변에서 비만 세포의 수가 유의하게 낮았다 (도 6).
유사하게, 면역조직화학 염색 결과는 OPN 및 2-FL 처리된 AD 마우스의 피부 병변에 침윤된 호산구의 수가 WT에 비해 현저하게 감소함을 보여주었다 (도 7).
일반적으로, 약 2.5 내지 45 mg/체중kg/일의 OPN 투여량 및 약 75 내지 750 mg/체중kg/일의 2-FL 투여량의 매우 광범위한 투여량으로 개체에게 OPN 및 2-FL을 제공하는 본 발명에 따른 조합물의 투여에 의하여 양호한 결과가 달성되었다.
최고 성능, 특히 상승적 효과를 입증하는 최고 성능은 (아래 실시예들 참조) OPN의 고용량, 특히 약 35 내지 45 mg/체중kg/일의 투여량 및 2-FL을 약 600 mg/체중kg/일의 투여량으로 개체에게 제공할 때 얻어졌다.
옵션으로서 및 필요한 인간 개체, 예를 들어 영아, 유아 또는 노인에 따라, OPN 및 2-FL의 조합물을 포함하는 의약은 식품 또는 영양 또는 식이 보충제와 함께 투여되거나 이에 내장될 수 있다. 이것은 경구 및 장내 투여에도 적용될 수 있다. 적합한 식품 또는 영양 또는 식이 보충제는 현재 상업적으로 이용가능하다.
동일한 사항이 동물들, 예를 들어 소 또는 애완동물과 같은 적용가능한 동물들에게 적용된다.
1. 방법
1.1 동물 취급
Balb/c 마우스는 남방의과대학(중국 광저우)의 동물 센터에서 구입했다. 동물은 통제된 온도 (20-25℃) 및 습도 (50±5 %)에서 특정 병원체가 없는 동물 시설에서 12시간 명/암 주기로 유지되었다. 모든 마우스에게 규칙적인 식이와 오토클레이브된 물을 공급했다. 본 연구의 모든 동물 실험은 남방의과대학의 동물실험윤리위원회의 승인을 받았다. AD-유사 증상을 유발하기 위해, 디니트로클로로벤젠 (DNCB) 용액 (아세톤과 올리브 오일의 3:1 혼합물에 용해됨)을 마우스 (암컷, 6-8 주령)의 등쪽 피부와 귀에 도포했다. 등쪽 털을 완전히 제거하고 (약 4cm2) 1일 후, 등쪽 피부에 150μl의 2% DNCB 용액을 도포하고, 1일차에 양쪽 귀 뒤에 각각 10μl를 도포했다. 감작한지 4일 후, 아세톤:올리브 오일 혼합물(3:1 vol/vol)에 용해된 0.5% DNCB 을 도포하여 등쪽 피부 (150μl)와 양쪽 귀 뒤쪽 (각각 10μl)에 2일에 한 번씩 챌린지하였다 (5일차-27일차). OPN 및 2-FL을 0.9% 생리식염수에 용해시켰다. DNCB로 처리된 마우스는 0일부터 27일차까지 2-FL, OPN, 또는 2-FL + OPN를 위내 투여하였다. 비히클 및 다른 DNCB 군의 마우스에는 동일한 부피의 생리식염수를 투여하였다.
1.2 AD 점수 평가
등쪽 피부 병변의 중증도는 부종, 홍반/출혈, 찰상/침식, 및 흉터/건조의 4가지 증상에 따라 육안으로 평가하였고, 개별 점수들 (0, 증상 없음; 1, 경증; 2, 중등도; 3, 중증) 의 합을 0에서 12까지의 범위로 최종 피부염 점수로 나타내었다. 이러한 시각적 평가는 이틀마다 두 명 이상의 독립적인 조사자가 수행했다.
1.3 긁는 행동(scratching behaviour) 평가
적응(habituation)을 위해 마우스들을 1시간 동안 케이지에 두었다. 적응 후 15분 동안 긁음 에피소드의 수를 육안으로 세었다. 발을 사용한 일련의 긁는 움직임들은 하나의 긁힘 에피소드로 간주하였다. 총 긁는 행동의 수는 15 분 내에 계산하였다. 실험의 7일차, 14일차, 및 21일차에 긁는 행동을 테스트했다.
1.4 혈청 IgE 수준의 결정
실험의 마지막 날에 개별 마우스 혈청을 수집했다. IgE의 혈청 수준은 제조업체의 지침에 따라 상용 ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) 키트 (Invitrogen, San Diego, USA)를 사용하여 정량화하였다.
1.5 유세포 분석
실험 종료시에 피부 배액 림프절 (draining lymph node: dLN) (액와와 서혜부)로부터 단일-세포 현탁액을 준비하였다. Th1, Th2 및 Th17 염색을 위해, 제조업체의 프로토콜에 따라, 5x106 림프구를 세포 자극 칵테일 및 단백질 억제제 (Invitrogen, San Diego, USA)와 함께 500μl/웰의 부피로 바닥이 평평한 96-웰 플레이트에서 5시간 동안 배양했다. FITC-표지된 랫트 항-마우스 CD4 (Clone RM4-5, BD Pharmingen, San Jose, CA, USA)로 표면 염색한 후, 투과된 세포를 PE-Cy7 표지된 랫트 항-마우스 IFN-γ mAb (Clone XMG1. 2, BD Pharmingen), APC-표지된 랫트 항-마우스 IL-4 mAb (Clone 11B11, BD Pharmingen) 및 PE-표지된 랫트 항-마우스 IL-17mAb (Clone eBio17B7, BD Pharmingen)을 이용하여 염색하였다.
1.6 RNA 분리 및 정량적 실시간 PCR
제조업체의 지침서에 따라 TRIzol (TransGen Biotech, Beijing, China)을 사용하여 등쪽 피부에서 총 RNA를 분리했다. 총 부피 10 μL에서 TranScript All-in-One First-Strand cDNA Synthesis SuperMix (TransGen Biotech, Beijing, China)를 사용한 역전사 반응으로 500ng RNA를 정량화했다. TransStart Green qPCR SuperMix (TransGen Biotech, Beijing, China)를 사용하여 유전자 발현의 정량적 실시간 PCR (RT-PCR) 분석을 수행했다. 표적 유전자의 수준은 GAPDH 유전자 발현에 대하여 표준화하였다.
2. 실시예
다음의 실시예는 본 발명의 단순한 예시일 뿐이며, 본 발명의 제한을 나타내는 것으로 간주되지 않는다.
실시예 1
도 1: BALB/c 마우스에서, 피부염 점수 평가에 따른, DNCB에 의해 유도된 AD-유사 증상들의 OPN 및 2-FL 완화 (1) 대조군 (2) DNCB 군 (3) DNCB 군 + 고용량 2FL (4) DNCB 군 + 고용량 OPN (5) DNCB 군 + 저용량 2FL + 저용량 OPN (6) DNCB 군 + 고용량 2FL + 저용량 OPN (7) DNCB 군 + 저용량 2FL + 고용량 OPN 및 (8) DNCB 군 + 고용량 2FL + 고용량 OPN. 고용량 OPN = 37.5mg/kg(bw)/일, 저용량 OPN = 2.7mg/kg(bw)/일, 고용량 2FL = 600mg/kg(bw)/일 및 저용량 2FL = 75mg/kg(bw)/일. *p<0.05, **p<0.01.
실시예 2
도 2: OPN 및/또는 2FL의 존재 및 부재하에서 DNCB로 처리된 BALB/c 마우스에서 15분 동안 긁힘 에피소드의 수. (1) 대조군 (2) DNCB 군 (3) DNCB 군 + 고용량 2FL (4) DNCB 군 + 고용량 OPN (5) DNCB 군 + 저용량 2FL + 저용량 OPN (6) DNCB 군 + 고용량 2FL + 저용량 OPN (7) DNCB 군 + 저용량 2FL + 고용량 OPN 및 (8) DNCB 군 + 고용량 2FL + 고용량 OPN. 고용량 OPN = 37.5mg/kg(bw)/일, 저용량 OPN = 2.7mg/kg(bw)/일, 고용량 2FL = 600mg/kg(bw)/일 및 저용량 2FL = 75mg/kg(bw)/일
실시예 3
도 3: 27일차에 OPN 및/또는 2FL의 존재 및 부재하에서 DNCB로 처리된 BALB/c 마우스의 혈청 IgE 수준. **p < 0.01. (1) 대조군 (2) DNCB 군 (3) DNCB 군 + 고용량 2FL (4) DNCB 군 + 고용량 OPN (5) DNCB 군 + 저용량 2FL + 저용량 OPN (6) DNCB 군 + 고용량 2FL + 저용량 OPN (7) DNCB 군 + 저용량 2FL + 고용량 OPN 및 (8) DNCB 군 + 고용량 2FL + 고용량 OPN. 고용량 OPN = 37.5mg/kg(bw)/일, 저용량 OPN = 2.7mg/kg(bw)/일, 고용량 2FL = 600mg/kg(bw)/일 및 저용량 2FL = 75mg/kg(bw)/일.
실시예 4
도 4 (a)와 (b): 생리식염수-처리된 또는 OPN 및 2-FL-처리된 AD-유사 마우스(n=6)에서 (a) IL-17-생산 CD4+ Th17 림프구와 (b) IL-4-생산 CD4+ Th2 림프구의 비율. *p < 0.05, **p < 0.01. (1) 대조군 (2) DNCB 군 (3) DNCB 군 + 고용량 2FL (4) DNCB 군 + 고용량 OPN (5) DNCB 군 + 저용량 2FL + 저용량 OPN (6) DNCB 군 + 고용량 2FL + 저용량 OPN (7) DNCB 군 + 저용량 2FL + 고용량 OPN 및 (8) DNCB 군 + 고용량 2FL + 고용량 OPN. 고용량 OPN = 37.5mg/kg(bw)/일, 저용량 OPN = 2.7mg/kg(bw)/일, 고용량 2FL = 600mg/kg(bw)/일 및 저용량 2FL = 75mg/kg(bw)/일.
실시예 5
도 5(a), (b) 및 (c): OPN 및/또는 2FL의 존재 및 부재하에서 DNCB로 처리된 BALB/c 마우스로부터 추출하고, RT-PCR로 측정하고 GAPDH의 비율로 표시한, Th2-연관 사이토카인 ((a) TSLP 및 (b) IL-4) 및 IL-17a 의 상대적 mRNA 발현 수준. *p < 0.05, **p < 0.01. (1) 대조군 (2) DNCB 군 (3) DNCB 군 + 고용량 2FL (4) DNCB 군 + 고용량 OPN (5) DNCB 군 + 저용량 2FL + 저용량 OPN (6) DNCB 군 + 고용량 2FL + 저용량 OPN (7) DNCB 군 + 저용량 2FL + 고용량 OPN 및 (8) DNCB 군 + 고용량 2FL + 고용량 OPN. 고용량 OPN = 37.5mg/kg(bw)/일, 저용량 OPN = 2.7mg/kg(bw)/일, 고용량 2FL = 600mg/kg(bw)/일 및 저용량 2FL = 75mg/kg(bw)/일.
실시예 6
도 6: DNCB-처리된 마우스의 피부의 톨루이딘 블루 (TB) 염색을 사용하여 비만세포를 확인하였다. DNCB+ns 군과 비교하여 섹션당 무작위로 선택된 4개의 필드에서 등쪽 피부에서 비만세포의 침윤을 평균값으로 정량화하였다 (**p < 0.01).
실시예 7
도 7: 호산구 퍼옥시다제 (eosinophil peroxidase: EPX)에 대한 면역조직화학 염색을 사용하여 호산구를 확인하였다. DNCB+ns 군과 비교하여 섹션당 무작위로 선택된 4개의 필드에서 등쪽 피부에서 호산구의 침윤을 평균값으로 정량화하였다(**p < 0.05).
실시예 8
도 8a - 8c: 2-FL 및 OPN 를 처리하거나 처리하지 않은 AD 마우스의 피부 병변에서 IFN-γ, IL-4, IL-17의 mRNA 수준을 정량적 RT-PCR 분석으로 측정하고 GAPDH에 대한 비율로 표시하였고 DNCB+ns 군과 비교하였다 (*p < 0.05, **p < 0.01).
실시예 9
도 9a - 9d: 2-FL 및 OPN 를 처리하거나 처리하지 않은 AD 마우스의 피부 병변에서 T-bet, GATA3, ROR-γt 및 Foxp3의 mRNA 수준을 정량적 RT-PCR 분석으로 측정하고 GAPDH에 대한 비율로 표시하였고 DNCB+ns 군과 비교하였다 (*p < 0.05, **p < 0.01)(도 9).
Claims (18)
- 인간 또는 동물 개체에게 영향을 미치는 염증성 인자 분비로 인한 면역 질환 또는 장애의 예방 또는 치료에 사용하기 위한,
오스테오폰틴 (OPN) 및 2'-푸코실락토오스 (2-FL)의 조합물. - 제1항에 있어서,
염증성 인자가 사이토카인 및 면역글로불린에서 선택되는 것인, 조합물. - 제1항 또는 제2항에 있어서,
사이토카인이 INF-γ, IL-2, IL-4, IL-17, IL-6, IL-10, TGF-β, Tbet, GATA3 및 NFκB 에서 선택되고, 면역글로불린이 IgE 및 IgG1에서 선택되는 것인, 조합물. - 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
면역 질환 또는 장애가 아토피성 피부염, 건선, 알레르기, 알레르기성 비염, 천식 및 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD)을 포함하는 군에서 선택되는 것인, 조합물. - 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
오스테오폰틴 (OPN)이 인간 또는 동물 기원이거나 또는 재조합 OPN 인, 조합물. - 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
2'-푸코실락토오스 (2-FL)가 천연 또는 합성 기원이거나 또는 박테리아 발효 기원인, 조합물. - 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서,
오스테오폰틴 (OPN)이 약 2.5 내지 45, 바람직하게는 약 35 내지 40 mg/체중kg/일의 투여량으로 필요한 인간 또는 동물 개체에게 제공되는 것인, 조합물. - 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
2'-푸코실락토오스 (2-FL)가 약 75 내지 750, 바람직하게는 약 600 mg/체중kg/일의 투여량으로 필요한 인간 또는 동물 개체에게 제공되는 것인, 조합물. - 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서,
오스테오폰틴 (OPN) 및 2'-푸코실락토오스 (2-FL)가 하나 또는 복수의 단일 단위투여 형태로 필요한 인간 또는 동물 개체에게 제공되는 것인, 조합물. - 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
식품 또는 영양 또는 식이 보충제와 조합되거나 이에 내장되어 필요한 인간 또는 동물 개체에게 제공되는 것인, 조합물. - 오스테오폰틴 (OPN) 및 2'-푸코실락토오스 (2-FL)의 조합물을 개체에게 투여하는 것을 포함하는, 인간 또는 동물 개체에게 영향을 미치는 염증성 인자 분비로 인한 면역 질환 또는 장애의 예방 또는 치료 방법.
- 제11항에 있어서,
염증성 인자가 사이토카인 및 면역글로불린에서 선택되는 것인, 방법. - 제11항 또는 제12항에 있어서,
사이토카인이 INF-γ, IL-2, IL-4, IL-17, IL-6, IL-10, TGF-β, Tbet, GATA3 및 NFκB 에서 선택되고, 면역글로불린이 IgE 및 IgG1에서 선택되는 것인, 방법. - 제10항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서,
면역 질환 또는 장애가 아토피성 피부염, 건선, 알레르기, 알레르기성 비염, 천식 및 만성 폐쇄성 폐질환 (COPD)에서 선택되는 것인, 방법. - 제10항 내지 제14항 중 어느 한 항에 있어서,
오스테오폰틴 (OPN)이 인간 또는 동물 기원이거나 또는 재조합 OPN 인, 방법. - 제10항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서,
2'-푸코실락토오스 (2-FL)가 천연 또는 합성 기원이거나 또는 박테리아 발효 기원인, 방법. - 제10항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
조합물내 오스테오폰틴 (OPN)이 약 2.5 내지 45, 바람직하게는 약 35 내지 40 mg/체중kg/일의 투여량으로 필요한 인간 또는 동물 개체에게 제공되는 것인, 방법. - 제10항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서,
조합물내 2'-푸코실락토오스 (2-FL)가 약 75 내지 750, 바람직하게는 약 600 mg/체중kg/일의 투여량으로 필요한 인간 또는 동물 개체에게 제공되는 것인, 방법.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IBPCT/IB2018/000464 | 2018-04-25 | ||
| IBPCT/IB2018/000464 | 2018-04-25 | ||
| PCT/IB2019/000297 WO2019207355A1 (en) | 2018-04-25 | 2019-04-24 | Combinations of osteopontin and 2'-fucosyllactose for use as medicaments |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20210005604A true KR20210005604A (ko) | 2021-01-14 |
Family
ID=68294966
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020207030625A KR20210005604A (ko) | 2018-04-25 | 2019-04-24 | 의약으로 사용하기 위한 오스테오폰틴 및 2'-푸코실락토오스의 조합물 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210236605A1 (ko) |
| EP (1) | EP3784268A4 (ko) |
| KR (1) | KR20210005604A (ko) |
| CN (1) | CN112040973B (ko) |
| AU (1) | AU2019260626A1 (ko) |
| CA (1) | CA3095082A1 (ko) |
| SG (1) | SG11202009574RA (ko) |
| WO (1) | WO2019207355A1 (ko) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102527378B1 (ko) | 2022-04-28 | 2023-05-02 | (주)에이피테크놀로지 | 2'-fl을 함유하는 도파민 감소로 말미암아 발생하는 질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물 |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112914104B (zh) * | 2021-03-08 | 2021-11-12 | 合生元（广州）健康产品有限公司 | 用于预防婴幼儿肥胖的一种营养组合物 |
| CN112890200B (zh) * | 2021-03-08 | 2021-11-12 | 合生元（广州）健康产品有限公司 | 用于促进低体重婴幼儿生长追赶的一种营养组合物 |
| CN115399480A (zh) * | 2021-09-26 | 2022-11-29 | 黑龙江飞鹤乳业有限公司 | 含泛酸的促神经发育营养组合物及其制备和应用 |
| WO2023144416A1 (en) * | 2022-01-31 | 2023-08-03 | Société des Produits Nestlé S.A. | Compositions comprising osteopontin (opn) |
| CN114586983A (zh) * | 2022-03-07 | 2022-06-07 | 黑龙江飞鹤乳业有限公司 | 一种促神经发育营养组合物及其制备和应用 |
| CN115843880A (zh) * | 2022-11-29 | 2023-03-28 | 黑龙江飞鹤乳业有限公司 | 含母乳低聚糖和骨桥蛋白的营养组合物、食品及用途 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2370129A1 (en) * | 1999-04-15 | 2000-10-26 | Children's Medical Center Corporation | Methods and compositions for modulating an immune response |
| CN1827777A (zh) * | 2005-03-04 | 2006-09-06 | 中国科学院上海生命科学研究院 | 骨桥蛋白抑制剂在类风湿关节炎中的应用 |
| BR112012000760B8 (pt) | 2009-07-15 | 2022-09-20 | Nutricia Nv | composição nutricional |
| EP2465507A1 (en) | 2010-11-23 | 2012-06-20 | Nestec S.A. | Oligosaccharide composition for treating skin diseases |
| NZ715430A (en) * | 2013-07-05 | 2022-01-28 | Arla Foods Amba | Mammalian milk osteopontin for enhancing immune responsiveness |
| MX2019000228A (es) * | 2016-07-06 | 2019-08-29 | Building Block Nutritionals Llc | Formula nutricional. |
-
2019
- 2019-04-24 CN CN201980026719.3A patent/CN112040973B/zh active Active
- 2019-04-24 SG SG11202009574RA patent/SG11202009574RA/en unknown
- 2019-04-24 CA CA3095082A patent/CA3095082A1/en active Pending
- 2019-04-24 KR KR1020207030625A patent/KR20210005604A/ko unknown
- 2019-04-24 US US17/050,036 patent/US20210236605A1/en active Pending
- 2019-04-24 WO PCT/IB2019/000297 patent/WO2019207355A1/en unknown
- 2019-04-24 AU AU2019260626A patent/AU2019260626A1/en active Pending
- 2019-04-24 EP EP19793414.4A patent/EP3784268A4/en active Pending
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| 1. Bode, L. (2012) Human milk oligosaccharides: every baby needs a sugar mama. Glycobiology 22, 1147-1162 |
| 2. Gravallese, E. M. (2003) Osteopontin: a bridge between bone and the immune system. The Journal of clinical investigation 112, 147-149 |
| 3. Kaleta, B. (2014) Role of osteopontin in systemic lupus erythematosus. Archivum immunologiae et therapiae experimentalis 62, 475-482 |
| 4. Kourepini, E., Aggelakopoulou, M., Alissafi, T., Paschalidis, N., Simoes, D. C., and Panoutsakopoulou, V. (2014) Osteopontin expression by CD103- dendritic cells drives intestinal inflammation. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 111, E856-865 |
| 5. Konno, S., Kurokawa, M., Uede, T., Nishimura, M., and Huang, S. K. (2011) Role of osteopontin, a multifunctional protein, in allergy and asthma. Clinical and experimental allergy : journal of the British Society for Allergy and Clinical Immunology 41, 1360-1366 |
| 6. Uede, T. (2011) Osteopontin, intrinsic tissue regulator of intractable inflammatory diseases. Pathology international 61, 265-280 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102527378B1 (ko) | 2022-04-28 | 2023-05-02 | (주)에이피테크놀로지 | 2'-fl을 함유하는 도파민 감소로 말미암아 발생하는 질환의 개선, 예방 또는 치료용 조성물 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN112040973B (zh) | 2022-03-29 |
| EP3784268A1 (en) | 2021-03-03 |
| EP3784268A4 (en) | 2022-04-27 |
| SG11202009574RA (en) | 2020-10-29 |
| AU2019260626A1 (en) | 2020-11-12 |
| WO2019207355A1 (en) | 2019-10-31 |
| CN112040973A (zh) | 2020-12-04 |
| CA3095082A1 (en) | 2019-10-31 |
| US20210236605A1 (en) | 2021-08-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR20210005604A (ko) | 의약으로 사용하기 위한 오스테오폰틴 및 2'-푸코실락토오스의 조합물 | |
| Liang et al. | Immunotoxicity mechanisms of perfluorinated compounds PFOA and PFOS | |
| Lee et al. | Polysaccharide isolated from Aloe vera gel suppresses ovalbumin-induced food allergy through inhibition of Th2 immunity in mice | |
| Rosenkranz et al. | Induction of regulatory T cells in Th1-/Th17-driven experimental autoimmune encephalomyelitis by zinc administration | |
| Budai et al. | Aloe vera downregulates LPS-induced inflammatory cytokine production and expression of NLRP3 inflammasome in human macrophages | |
| Dimeloe et al. | Regulatory T cells, inflammation and the allergic response—the role of glucocorticoids and vitamin D | |
| Faria et al. | Food components and the immune system: from tonic agents to allergens | |
| US20170020939A1 (en) | Immune balance regulator | |
| Zhang et al. | Mechanisms underlying effects of 1, 25-dihydroxyvitamin D 3 on the Th17 cells | |
| Zhang et al. | Attenuation of allergic responses following treatment with resveratrol in anaphylactic models and IgE-mediated mast cells | |
| Kim et al. | Luteolin attenuates airway inflammation by inducing the transition of CD4+ CD25–to CD4+ CD25+ regulatory T cells | |
| Li et al. | Placenta‑derived mesenchymal stem cells improve airway hyperresponsiveness and inflammation in asthmatic rats by modulating the Th17/Treg balance | |
| Meng et al. | Astilbin ameliorates experimental autoimmune myasthenia gravis by decreased Th17 cytokines and up-regulated T regulatory cells | |
| Lajqi et al. | The role of microbiota in neutrophil regulation and adaptation in newborns | |
| Okamoto et al. | Brazilian propolis ameliorates trinitrobenzene sulfonic acid-induced colitis in mice by inhibiting Th1 differentiation | |
| Lei et al. | Crucial role of OX40/OX40L signaling in a murine model of asthma | |
| TW201000113A (en) | Preventative and/or therapeutic agent against atopic dermatitis | |
| Wang et al. | Obaculactone exerts a novel ameliorating effect on contact dermatitis through regulating T lymphocyte | |
| WO2007132900A1 (ja) | 皮膚保湿剤および皮膚炎治療剤 | |
| Grund et al. | Vitamin D3 resolved human and experimental asthma via B lymphocyte–induced maturation protein 1 in T cells and innate lymphoid cells | |
| WO2012144501A1 (ja) | 抗アレルギー物質、抗アレルギー剤及び食品 | |
| Yu et al. | Secoisolariciresinol diglucoside-derived metabolite, enterolactone, attenuates atopic dermatitis by suppressing Th2 immune response | |
| Roy-Chowdhury et al. | dietary approach for post-COVID treatment of olfactory loss | |
| Chen et al. | The protective effects of human milk components, 2′-fucosyllactose and osteopontin, against 2, 4-dinitrochlorobenzene-induced atopic dermatitis in mice | |
| US20170224746A1 (en) | Nutritional Support Method For Health Issues |