KR20200129705A

KR20200129705A - 무정형의 pi3k 저해제 및 이를 포함하는 약학적 조성물

Info

Publication number: KR20200129705A
Application number: KR1020190054507A
Authority: KR
Inventors: 김성헌; 이준광; 선용호; 김지한
Original assignee: 보령제약 주식회사
Priority date: 2019-05-09
Filing date: 2019-05-09
Publication date: 2020-11-18
Also published as: EP3967693A4; EP3967693A1; CN113795492A; CA3134572A1; BR112021022544A2; WO2020225782A1; SG11202111983PA; JP2022532186A; US20220227759A1; KR20210155805A; AU2020270027A1; MX2021013647A

Abstract

본 발명은 무정형의 P13K 저해제 및 이를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따르면 용해성과 생체이용률을 향상시키고 안정성이 우수한 신규 무정형 PI3K 저해제 및 이를 포함하는 약학적 조성물을 제공할 수 있다.

Description

무정형의 PI3K 저해제 및 이를 포함하는 약학적 조성물 {PI3K Inhibitor of Amorphous and Pharmaceutical Composition Comprising the same}

본 발명은 무정형의 P13K 저해제 및 이를 포함하는 약학적 조성물에 관한 것이다.

포스파티딜이노시톨 3-키나아제(PI3 kinase; PI3K)는 단백질 대신 지질 분자를 인산화하는 지질 키나아제(lipid kinase)이며, 세포생존(cell survival), 신호전달(signal transduction), 세포막 투과조절(control of membrane trafficking)등에서 중요한 역할을 한다. 이들 조절에 문제가 생기면, 암, 염증성 질환, 자가면역 질환 등이 발생한다.

최근 PI3 키나아제에 대하여 선택적으로 억제하는 효과를 나타낼 수 있는 신규한 구조의 화합물을 개발하는 연구결과가 보고되고 있으며, 구체적으로, 국제공개특허 WO 2016/204429호는 PI3 키나아제 억제 활성을 보유하고, 암, 자가면역 질환 및 호흡기 질환 등의 치료에 유용한 화합물을 개시하고 있으며, 본 명세서에서 참고문헌으로서 포함된다.

의약품 제조 과정에서 적합한 투여제형을 설계할 때는 의약품 원료의 물리적인 상태, 즉 결정이냐 무정형이냐 하는 형태가 아주 중요하다.

그러나, 무정형은 일반적으로 입자가 작고 표면적이 넓어 필터링에 어려움이 있으며, 불안정하여 유통기간이 짧아지고, 또한 약의 방출과 혈중농도조절이 어려운 많은 문제점이 있다.

국제공개특허 WO 2016/204429호

본 발명의 목적은 가혹 안정성 및 장기 안정성이 우수하고, 용해성과 생체이용률을 향상시킬 수 있는 하기 화학식 I로 표시되는 PI3K 저해제의 무정형을 제공하는 것이다.

[화학식 1]

본 발명의 목적은 화학식 I로 표시되는 화합물의 무정형을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명자들은 P13 키나아제 억제 활성을 갖는 것으로 알려진 헤테로아릴 유도체 중 하나인 (S)-4-((1-(4,8-다이클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸)아미노)피리도[2,3-d]피리미딘-5(8H)-온(이하, 화학식 1 화합물)을 제제학적으로 사용하기 위하여, 장기간 안정성을 가지며 산업화 적용이 가능한 무정형을 발굴하고자 예의 연구 노력한 결과, 상기 화합물을 무정형의 형태로 전환시킴으로써 가속, 장기, 가혹의 보관조건에 따른 안정성, 열안정성, pH에 따른 안정성이 우수하여 장기적으로 함량의 변화 없이 안정적으로 유지될 수 있고, 무정형의 P13K 저해제는 높은 용해도를 나타내는 바, 높은 혈중 농도를 나타내어 생체이용률이 높아 우수한 약리효과를 나타낼 수 있다. 따라서, 상기 화합물의 무정형은 경구 투여 시 높은 생체이용률을 나타내는 바 적은 양을 복용하여도 우수한 치료 효과를 나타낼 수 있어 안전하고 부작용이 낮으며 환자의 복약 편의성을 현저하게 개선할 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.

[화학식 1]

본 발명에서는 무정형의 P13K 저해제를 제공한다.

본 발명의 무정형의 P13K 저해제는 생체이용률이 높아 치료 효과가 우수하면서도 동시에 안정성이 현저히 높다.

본 발명의 무정형의 P13K 저해제는 가속, 장기, 가혹의 보관조건에 따른 안정성, 열안정성, pH에 따른 안정성이 우수하여 장기적으로 함량의 변화 없이 안정적으로 유지될 수 있다. 따라서, 본 발명의 무정형의 P13K 저해제를 사용하여 제제를 제조하거나, 이를 포함하는 제제 제조 후에도 동일한 상태를 유지하여 제제의 함량 균일성이 장기간 동안 안정적으로 유지될 수 있고 유연물질 발생이 현저히 낮아 우수한 안정성을 장기간 동안 유지할 수 있다. 또한, 무정형의 P13K 저해제는 대량생산에 용이하게 적용될 수 있다.

본 발명의 무정형의 P13K 저해제는 높은 용해도를 나타내는 바, 높은 혈중 농도를 나타내어 생체이용률이 높아 우수한 약리효과를 나타낼 수 있다. 따라서 본 발명의 무정형의 PI3K 저해제는 효과적으로 암 질환을 치료할 수 있는 약학적 조성물의 새로운 유효성분으로써 유효하게 사용할 수 있다.

본 발명의 무정형의 P13K 저해제는 경구 투여 시 높은 생체이용률을 나타내는 바 적은 양을 복용하여도 우수한 치료 효과를 나타낼 수 있어 안전하고 부작용이 낮고 환자의 복약 편의성을 현저하게 개선할 수 있다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

무정형의 P13K 저해제

하기 화학식 1의 화합물의 무정형을 제공한다.

[화학식 1]

본 발명의 무정형의 PI3K 저해제는 가속, 장기, 가혹의 보관조건에 따른 안정성, 열안정성, pH에 따른 안정성이 우수하여 장기적으로 함량의 변화 없이 안정적으로 유지될 수 있다. 따라서, 무정형의 PI3K 저해제는 생체이용률이 높아 우수한 치료 효과를 나타내면서도 높은 안정성을 가질 수 있다.

일반적으로, 무정형은 용해도가 높아 생체이용률이 높음에도 불구하고 안정성이 낮아 쉽게 유연물질 발생하여 안정성에 문제를 일으킬 수 있으나, 본 발명의 무정형의 PI3K 저해제는 가속, 장기, 가혹의 보관조건에 따른 안정성, 열안정성, pH에 따른 안정성이 우수하여 장기적으로 함량의 변화 없이 안정적으로 유지될 수 있다. 따라서, 무정형의 PI3K 저해제는 생체이용률이 높아 우수한 치료 효과를 나타내면서도 높은 안정성을 가질 수 있다.

본 발명의 무정형의 P13K 저해제는 순도가 높고, 안전하며, 열, pH 및 습도에 대한 안정성이 우수하여 장기적으로 함량의 변화 없이 안정적으로 유지될 수 있다. 따라서, 본 발명의 무정형의 P13K 저해제를 사용하여 제제를 제조하거나, 이를 포함하는 제제 제조 후에도 동일한 상태를 유지하여 제제의 함량 균일성이 장기간 동안 안정적으로 유지될 수 있어 대량생산에 용이하게 적용될 수 있다. 또한 본 발명의 무정형의 P13K 저해제는 높은 용해도를 나타내는 바, 높은 혈중 농도를 나타내어 생체이용률이 높아 우수한 약리효과를 나타낼 수 있다. 따라서 본 발명의 무정형의 PI3K 저해제는 암 질환을 치료할 수 있는 약학적 조성물의 새로운 유효성분으로써 유효하게 사용할 수 있다. 따라서 본 발명의 무정형의 P13K 저해제는 경구 투여 시 높은 생체이용률을 나타내는 바 적은 양을 복용하여도 우수한 치료 효과를 나타낼 수 있어 안전하고 부작용이 낮고 환자의 복약 편의성을 현저하게 개선할 수 있다.

본 명세서에 있어서, 용어 「무정형」이란, 주지된 바와 같이, 화합물 분자가 특정한 결정형을 띄지 않고 집합되어 있는 상태를 의미하는 것으로, 미량의 결정형 분자가 포함되더라도 X-선 분말 회절 패턴으로 보아 실질적으로 아무런 결정형이 관찰되지 않는 혼합물까지를 포함하는 것으로 의미한다.

도 1은 본 발명의 무정형 화합물의 X-선 분말 회절 분석(PXRD) 패턴 결과이며, 본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 무정형 화합물은 [도 1]과 같은 X-선 분말 회절 피크 스펙트럼을 가지는 것일 수 있다.

도 1에서 확인되는 바와 같이, 본 발명의 무정형 화합물은 X-선 분말 회절 패턴에서 특정한 값에서 나타나는 피크가 없었고, 무정형 물질에서 전형적인, 확산된 할로(Halo)의 X-선 분말 회절 분석 패턴을 나타내었다. 이로써 생성물은 결정성이 없는 무정형임을 확인하였다.

본 발명의 일 구현예에 있어서, 상기 무정형 화합물은 승온속도가 10℃/min인 경우 281 내지 285℃에서 DSC(Differential Scanning Calorimetry) 흡열 전이를 가질 수 있고, 구체적으로 [도 2]와 같은 DSC 스펙트럼을 가지는 것일 수 있으며, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명의 무정형 화합물은, 도 2에서 확인되는 바와 같이, 281 내지 285℃에서 샤프(sharp)한 흡열피크를 나타낼 수 있다.

무정형 화합물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물

본 발명은 상기 화학식 1의 무정형 화합물을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.

본 명세서에 있어서, 용어 「유효 성분」이란, 내재된 약리작용에 의해 그 조성물의 효능 효과를 직접 또는 간접적으로 발현한다고 기대되는 물질 또는 물질군(약리학적 활성성분 등이 밝혀지지 않은 생약 등을 포함한다)으로서 주성분을 포함하는 것을 의미한다.

상기 약학적 조성물은 암의 예방 또는 치료용일 수 있으며, 이에 제한되지는 않는다.

본 발명에 있어서, 용어 「암」이란, 의학적으로 세포의 정상적인 분열, 분화 또는 사멸의 조절 기능에 문제가 발생하여 비정상적으로 과다 증식하여 주위 조직 또는 장기에 침윤하여 덩어리를 형성하고 기존의 구조를 파괴하거나 변형시키는 모든 상태를 의미한다. 암은 크게, 발생한 부위에 존재하는 원발암과 발생 부위로부터 신체의 다른 부위로 퍼져나간 전이암으로 구분된다.

본 발명의 일 구현예에 있어서, 암 질환은 폐암, 비-소세포 폐암(NSCL), 기관지 폐포 세포 폐암, 위암, 위장관암, 간암, 골암, 췌장암, 피부암, 두경부암, 피부 또는 안구 흑색종, 자궁암, 난소암, 직장암, 대장암, 결장암, 유방암, 자궁 육종, 나팔관 암종, 내궁내막 암종, 자궁경부 암종, 질 암종, 외음부 암종, 식도암, 후두암, 소장암, 갑상선암, 부감상선암, 연조직의 육종, 요도암, 음경암, 전립선암, 다발성 골수종, 만성 또는 급성 백혈병, 유년기의 고상종양, 림프종, 방광암, 신장암, 신장세포 암종, 신장 골반 암종, 축수축 종양, 뇌간 신경교종 또는 뇌하수체 아데노마 중 어느 하나 일 수 있으며, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 약학적 조성물은 상기 화학식 1의 무정형 화합물을 포함함으로써 암의 예방 및 치료 활성이 현저해진다.

본 발명에 있어서, 용어 「예방」이란, 질병, 장애 또는 질환의 발병을 억제하거나 지연을 의미한다. 질병, 장애 또는 질환의 발병이 예정된 기간 동안 억제되거나 지연된 경우 예방은 완전한 것으로 간주될 수 있다.

본 발명에서 용어 「치료」란, 특정 질병, 장애 및/또는 질환 또는 질환에 따른 증상을을 부분적으로 또는 완전히 경감, 개선, 완화, 저해 또는 지연시키며, 중증도를 감소시키거나, 하나 이상의 증상 또는 특징의 발생을 감소시키는 것을 의미한다.

본 발명의 일 구현예에 있어서, 본 발명의 약학적 조성물은 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조될 수 있다.

본 발명에서 용어 「담체」는, 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물을 의미하고, 용어 「약학적으로 허용되는」 이란, 생리학적으로 허용되고 인간에게 투여될 때, 통상적으로 위장 장애, 현기증과 같은 알레르기 반응 또는 이와 유사한 반응을 일으키지 않는 조성물을 말한다.

상기 약학적으로 허용되는 담체는 제제시에 통상적으로 이용되는 것으로서, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미결정셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸 히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 약학적 조성물은 상기 성분들 이외에 충전제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등의 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명에 있어서, 상기 약학적 조성물에 포함되는 첨가제의 함량은 특별히 한정되는 것은 아니며 통상의 제제화에 사용되는 함량 범위 내에서 적절하게 조절될 수 있다.

상기 약학적 조성물은 당업자에게 자명하게 경구용 또는 비경구용 제제 형태로 제조될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여용일 수 있다. 본 발명에서 용어 「경구 투여」는, 활성물질이 소화되도록 제조된 물질, 즉 흡수를 위한 위장기관으로 투여되는 것을 의미한다. 상기 경구 투여용 제제의 비제한적인 예로는, 정제, 트로키제 (troches), 로젠지 (lozenge), 수용성 현탁액, 유성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등을 들 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물을 경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로오스 또는 젤라틴 등과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕해제; 스테아르산 마그네슘, 스테아르산 칼슘, 스테아릴 푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스 등과 같은 윤활유 등을 사용할 수 있으며, 감미제, 방향제, 시럽제 등도 사용할 수 있다. 나아가 캡슐제의 경우에는 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등을 추가로 사용할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 연령, 성별, 건강상태, 식이 체질 특이성, 제제의 성질, 질병의 정도, 조성물의 투여시간, 투여방법, 투여기간 또는 간격, 배설율, 및 약물 형태에 따라 그 범위가 다양할 수 있으며, 이 분야 통상의 기술자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 예컨대, 약 0.1 내지 1,000 mg/kg의 범위, 약 1 내지 800 mg/kg의 범위, 약 5 내지 600 mg/kg의 범위, 또는 약 10 내지 400 mg/kg의 범위일 수 있으며, 바람직하게는 약 50 내지 500 mg/kg의 범위일 수 있으나 이에 제한되지 않으며, 월 1회 투여될 수 있다.

본 명세서에서 용어 「약학적 조성물의 유효 투여량」은, 특정한 증상을 치료하기 위해 충분한 활성성분의 조성물의 양을 의미한다. 약학적 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있으며, 약학적 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 잘 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물의 투여는 하루에 1회 투여될 수 있고, 수회에 나누어 투여될 수도 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 순차적 또는 동시에 투여될 수 있다. 상기 요소를 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양으로 투여할 수 있으며, 이는 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 경구 투여용일 수 있다. 본 명세서에 있어서, 용어 「비경구투여」는 입으로 투여하는 것을 제외한 피하, 근육내, 정맥, 튜브를 이용한 복강내로 투여하는 방법을 의미한다. 비경구 투여를 위한 제제로는 각각 통상의 방법에 따라 멸균된 수용액, 액상제, 비수성용제, 현탁제, 에멀젼, 점안제, 안연고제, 시럽, 좌제, 에어로졸 등의 외용제 및 멸균 주사제제의 형태로 제형화하여 사용될 수 있으며, 바람직하게는 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 안연고제, 점안제, 파스타제 또는 카타플 라스마제의 약제학적 조성물을 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 국소 투여의 조성물은 임상적 처방에 따라 무수형 또는 수성형일 수 있다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적으로 허용가능한 첨가제는 상기 조성물에 대해 0.1~99.9 중량부 포함될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 상기 화학식 1의 무정형 화합물에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.

암 질환의 예방 또는 치료 방법

본 발명의 다른 목적은 필요로 하는 개체에게 상기 화학식 1의 무정형 화합물을 포함하는 암 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 투여하는 것을 포함하는 암의 예방 또는 치료방법을 제공하는 것이다.

본 발명에 있어서, 용어 「개체」란, 원숭이, 소, 말, 개, 고양이, 토끼, 레트, 마우스 등의 포유 동물을 의미하며, 특히 인간을 포함한다. 상기 예방 또는 치료 방법은 치료학적으로 유효한 양의 투여를 포함한다.

본 발명에 있어서, 용어 「치료학적으로 유효한 양」이란, 암의 예방 또는 치료에 유효한 본 발명의 상기 화학식 1의 무정형 화합물의 양을 나타낸다.

본 발명의 예방 또는 치료방법은 상기 화학식 1의 무정형 화합물을 포함하는 암 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 투여함으로써, 징후의 발현 전에 질병 그 자체를 다룰 뿐만 아니라, 이의 징후를 저해하거나 피하는 것을 또한 포함한다. 질환의 관리에 있어서, 특정 활성 성분의 예방적 또는 치료학적 용량은 질병 또는 상태의 본성(nature)과 심각도, 그리고 활성 성분이 투여되는 경로에 따라 다양할 것이다. 용량 및 용량의 빈도는 개별 환자의 연령, 체중 및 반응에 따라 다양할 것이다. 적합한 용량 용법은 이러한 인자를 당연히 고려하는 이 분야의 통상의 지식을 가진 자에 의해 쉽게 선택될 수 있다. 또한, 본 발명의 예방 또는 치료방법은 상기 화학식 1의 무정형 화합물을 포함하는 암 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물과 함께 질환 치료에 도움이 되는 추가적인 활성 제제의 치료학적으로 유효한 양의 투여를 더 포함할 수 있으며, 추가적인 활성제제는 상기 화학식 1의 무정형 화합물을 포함하는 암 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물과 함께 시너지 효과 또는 상가적 효과를 나타낼 수 있다.

암의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 용도

본 발명의 목적은 암의 예방 또는 치료용 약제의 제조를 위한 상기 화학식 1의 무정형 화합물을 포함하는 약학적 조성물의 용도를 제공하는 것이다.

본 발명의 일 구현예에 있어서, 약제의 제조를 위한 본 발명의 상기 화학식 1의 무정형 화합물을 포함하는 약학적 조성물은 허용되는 담체 등을 혼합할 수 있으며, 다른 작용제들을 추가로 더 포함할 수도 있다.

본 발명의 무정형 화합물, 약학적 조성물, 치료 방법, 용도에서 언급된 사항은 서로 모순되지 않는 한 동일하게 적용된다.

본 발명의 신규한 무정형 화합물은 가속, 장기, 가혹의 보관조건에 따른 안정성, 열안정성, pH에 따른 안정성이 우수하여 장기적으로 함량의 변화 없이 안정적으로 유지될 수 있으며, 신규한 무정형 화합물은 높은 용해도를 나타내는 바, 높은 혈중 농도를 나타내어 우수한 약리효과를 나타낼 수 있다.

본 발명의 신규한 무정형 화합물은 경구 투여 시 높은 생체이용률을 나타내는 바 적은 양을 복용하여도 우수한 치료 효과를 나타낼 수 있어 안전하고 부작용이 낮고 환자의 복약 편의성을 현저하게 개선할 수 있다.

도 1은 본 발명의 실시예 1에 따른 무정형 화합물의 X-선 분말 회절 분석(PXRD) 결과를 나타낸 것이다 (가로축의 2Theta의 단위는 ^o이다).
도 2는 본 발명의 실시예 1에 따른 무정형 화합물의 시차주사열량계(DSC) 열분석 (thermogram) 결과를 나타낸 도이다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 다만 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 예시하는 것일 뿐 본 발명의 범위가하기 실시예에 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 실시예는 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.

이하에서 언급된 시약 및 용매는 특별한 언급이 없는 한 Sigma-Aldrich Korea, TCI, Alfa Aesar로부터 구입한 것이며, HLPC는 Agilent Technoliges 사의 1100Series를 사용하였다. ¹H NMR 데이터는 Bruker Avance III (400 MHz)를 사용하여 측정하였다.

또한, 하기 실시예에 의해 제조된 (S)-4-((1-(4,8-다이클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸)아미노)피리도[2,3-d]피리미딘-5(8H)-온의 다양한 결정의 확인은 X-선 회절법에 의한 X-선 회절패턴 그리고 시차 주사 열량측정법(DSC)법에 의한 DSC 패턴으로 확인하였다.

하기 실시예에서 이용한, X-선 회절 분석은 회전 측정기와 고체 상태 검출기가 구비된 BRUKER AXS의 X-선 분말 회절계 모델 D2 PHASER를 이용하였으며, Cu-Kα선을 사용하여 분석범위 0°~40°, 분당 3°의 조사속도 조건하에서 업계에 공지된 방법으로 측정하였다. 또한, 시차 주사 열량측정법(DSC)법에 의한 DSC측정은 METTLER TOREDO사의 HP DSC1을 이용하여, 10℃/min의 속도로 승온하며 30~300℃에서 측정한 값이다.

제조예 1. (S)-4-((1-(4,8-다이클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸)아미노)피리도[2,3-d]피리미딘-5(8H)-온의 제조

[화학식 1] (S)-4-((1-(4,8-다이클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸)아미노)피리도[2,3-d]피리미딘-5(8H)-온

표제의 (S)-4-((1-(4,8-다이클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸)아미노)피리도[2,3-d]피리미딘-5(8H)-온 (4-((1-(4,8-dichloro-1-oxo-2-phenyl-1,2-dihydroisoquinolin -3-yl)ethyl)amino)pyrido[2,3-d]pyrimidin-5(8H)-one)은 국제 공개특허공보 WO2016/204429의 실시예 10에 기재된 방법과 동일한 방법으로 제조하였다.

실시예 1. 무정형 화합물의 제조

디메틸설폭사이드(DMSO) 10 mL에 제조예 1에서 제조된 (S)-4-((1-(4,8-다이클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸)아미노)피리도[2,3-d]피리미딘-5(8H)-온 3 g을 첨가하여 용해시킨 후 정제수(H₂O) 100 mL를 적가한 후 상온에서 밤새 교반하였다. 생성된 고체를 여과하고 정제수(H₂O) 15 mL로 세척 후, 45℃ 열풍건조기에서 건조하여 고체 화합물 2.99 g (수율 100 %)을 수득하였다.

상기 고체 화합물에 대한 X-선 분말 회절(PXRD) 피크 및 시차주사열량 (DSC) 흡열 피크를 분석하였으며, 그 결과는 각각 도 1 및 도 2와 같다.

도 1에서 확인되는 바와 같이, 상기 고체 화합물은 특정한 값에서 나타나는 피크가 없었고, 무정형 물질에서 전형적인, 확산된 할로(Halo)의 X-선 분말 회절 분석 패턴을 나타내었다. 생성물은 결정성이 없는 무정형임을 확인하였다.

또한, 상기 도 2에서 확인되는 바와 같이, 상기 고체 화합물은 281 내지 285℃에서 샤프(sharp)한 흡열피크가 나타냄을 알 수 있었다.

실험예 1. 가속안정성 시험

상기 실시예 1에서 제조된 고체 화합물의 파우더를 LDPE백으로 2중 밀봉포장 후 알루미늄백 밀봉포장하여 40±2℃, RH 75±5%에서 0개월, 6개월 방치 후 Karl Fischer법을 이용하여 수분을 측정하였고, 표준품을 이용한 HPLC법을 이용하여 함량을 측정하였으며, 하기와 같은 조건의 고속액체크로마토그래피(HPLC)를 이용하여 불순물의 양 측정하였다. 그 결과는 하기 표 1에 나타내었다.

- 검출기 : 자외부흡광광도계 (측정파장 307nm)

- 칼 럼 : Kromasil 100-5C18 (4.6 × 250mm, 5㎛) 또는 이와 유사한 컬럼

- 칼럼온도 : 25℃

- 주입량 : 10㎕

- 이동상 : 이동상 A - 20mmol/L 암모늄아세테이트완충액 (pH 4.5, 아세트산), 이동상 B - 아세토니트릴:메탄올=8:2

[표 1]

(단위: 중량%)

상기 표 1의 결과에서 무정형 화합물은 유연물질 및 함량의 유의적인 변화 및 경시변화가 관찰되지 않았다.

따라서 실시예 1의 무정형 화합물은 가속 조건에서 6개월 동안 높은 순도를 안정적으로 유지할 수 있어 안정성(stability)이 우수하며, 유연물질의 발생이 현저히 낮아 우수한 안전성(safety)을 장기간 유지할 수 있으며 수분 함량 변화가 거의 없고 보관 동안 수분을 거의 흡수하지 않는 것을 알 수 있었다.

실험예 2. 장기안정성 시험

상기 실시예 1에서 제조된 고체 화합물의 파우더를 LDPE백으로 2중 밀봉포장 후 알루미늄백 밀봉포장하여 장기안정성 시험 (25±2°C, 60±5% RH)을 진행하였고, 실험예 1과 동일한 방법으로 수분 함량 및 불순물의 양 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

[표 2]

(단위: 중량%)

상기 표 2의 결과에서 무정형 화합물은 유연물질 및 함량의 유의적인 변화 및 경시변화가 관찰되지 않았다.

따라서 실시예 1의 무정형 화합물은 6개월 동안 높은 순도를 안정적으로 유지할 수 있어 안정성(stability)이 우수하며, 유연물질의 발생이 현저히 낮아 우수한 안전성(safety)을 장기간 유지할 수 있으며 수분 함량 변화가 거의 없고 보관 동안 수분을 거의 흡수하지 않는 것을 알 수 있었다.

실험예 3. 가혹안정성 시험

상기 실시예 1에서 제조된 고체 화합물을 가혹조건(온도: 60°C, 습도: 40°C, RH75%)에서 0일, 7일, 14일 방치 후 고속액체크로마토그래피를 이용하여 불순물을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 3에 나타내었다.

[표 3]

(단위: 중량%)

상기 표 3의 결과에서 무정형 화합물은 유연물질 및 함량의 유의적인 변화 및 경시변화가 관찰되지 않았다.

실험예 4. 약동학(PK) 시험

실시예 1의 무정형 화합물에 대하여 약동학(PK) 실험을 실시하였다.

실시예 1의 무정형 화합물의 파우더를 캡슐에 100 mg으로 충진하고, 상기 캡슐을 1일 1회 100 mg으로 비글견에 경구 투여한 후 약물의 체내동태를 확인하였다.

구체적으로 비글견에 무정형 화합물 100 mg 용량으로 경구로 투여하고, 정해진 시간에 채혈한 후 (S)-4-((1-(4,8-다이클로로-1-옥소-2-페닐-1,2-다이하이드로아이소퀴놀린-3-일)에틸)아미노)피리도[2,3-d]피리미딘-5(8H)-온의 농도를 측정하였다. 약물동태 파라미터는 BA Calc 2007 프로그램을 사용하여 AUCt (투약시간부터 최종혈중농도 정량시간 t까지의 혈중농도-시간곡선하 면적), AUCi (투약시간부터 무한시간까지의 혈중농도-시간 곡선하 면적), C_max (최고 혈중농도), T_max (최고 혈중농도 도달시간) 및 t_1/2 (혈중 소실 반감기)을 산출하였다. 결과는 95 % 신뢰구간에서 Student t-test(SPSS)로 물질간 유의성을 확인하였으며, 그 결과는 하기 표 4와 같다.

[표 4]

상기 표 4에서 확인할 수 있는 것과 같이, 실시예 1의 무정형은 높은 혈중농도를 나타내었다.

따라서 실시예 1에 따른 무정형 화합물은 우수한 생체이용률을 나타내어 치료 효과가 현저히 우수함을 알 수 있었다.

Claims

하기 화학식 1로 표시되는 화합물의 무정형.
[화학식 1]
제1항에 있어서, 상기 무정형 화합물은 X-선 분말 회절 패턴이 할로 패턴을 나타내는 것인 화학식 I로 표시되는 화합물의 무정형.
제1항에 있어서, 승온속도가 10℃/min인 경우 281 내지 285℃에서 DSC(Differential Scanning Calorimetry) 흡열 전이를 갖는 화학식 1로 표시되는 화합물의 무정형.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 따른 무정형 화합물을 포함하는 약학적 조성물.