KR20200104465A - 활성산소 제거를 위한 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체 및 이의 용도 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 활성산소 제거를 위한 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체 및 이의 용도에 관한 것이다. 본 발명에 따른 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체는 활성산소제거 능력 및 항균성이 뛰어나고 안정적이며 생체적합성이 우수하므로, 항산화제, 약제학적 조성물, 의약외품 조성물, 화장료 조성물 또는 식품 조성물의 개발에 효과적으로 사용될 수 있다.
Description
본 발명은 활성산소 제거를 위한 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체 및 이의 용도에 관한 것이다. 본 발명에 따른 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체는 활성산소제거 능력 및 항균성이 뛰어나고 안정적이며 생체적합성이 우수하므로, 항산화제, 약제학적 조성물, 의약외품 조성물, 화장료 조성물 또는 식품 조성물의 개발에 효과적으로 사용될 수 있다.
자연계에 존재하는 활성 산소(자유 라디칼, free radicals)는 짝지어지지 않은 전자를 가지는 물질의 형태로 존재하여 주변 화합물과 빠르게 반응하는 물질이다. 인체에서 발생하는 활성산소는 산화/환원 작용과 물질의 대사 작용의 결과로 생성되는 것으로 알려져 있다(1993, Drugs and Aging, 3, 60-80). 또한, 식품에서 발생된 활성산소는 산화 작용을 유발하여 품질을 저하시키고 이를 섭취하면 인체 내에서 각종 질병을 유발한다(2008, Carbohydrate polymers, 74, 953-956). 식품에서 활성산소의 발생은 주로 식품 내에 존재하는 불포화 지방과 연쇄 반응하여 산패를 유발하여 식품의 풍미(Flavor)를 저하시켜 식품의 가치를 하락시키며 일단 활성 산소로 인한 산화 작용이 일어나면 지속적으로 불포화 지방산을 산화시켜 연쇄반응을 유발해서 산화에 의한 산패를 지속시킨다. 천연 식품에 존재하는 비타민 C와 E, 그리고 다양한 페놀 화합물과 같은 항산화 물질들은 식품에 존재하는 활성산소의 억제를 유발한다(2009, Food Chemistry, 114, 881-888). 이러한 활성산소 제거기능을 하는 물질들의 섭취는 체내에서 노화나 소화 혹은 대사를 통해 생산되는 활성산소를 제거하는 기능을 한다.
인체 내에서 각종 대사와 노화를 통해 발생하는 활성산소(자유 라디칼, free radicals)는 체내에 존재하는 활성산소제거효소에 의해 보통 균형을 이루고 있지만 미세먼지나 자외선 등의 외부요인 및 종양이나 염증, 심혈관 질환 등의 내부요인에 의해 비이상적으로 증가한다. 이 과잉생성된 활성산소는 단백질(Proteins), 지방(lipids)과 반응하여 노화(Aging)를 촉진시키고(2002, Archives of Biochemistry and Biophysics, 379, 354-9), 빈혈, 당뇨 또는 혈관 수축성 심장질환 같은 만성질환을 유발한다.(2007, Biochemistry(Moscow), 2, 809-827) 또한 활성산소(프리 라디칼, free radicals)는 핵산(Nucleic acid)이나 염색체(Chromosome)의 산화를 유발하여 생명에 치명적인 각종 암을 발생시키는 주요 요인 중의 하나로 알려져 있다.(2003, Biol.Pharm. Bull. 26, 1129-1134). 이러한 이유로 체내에서 과잉 발생하는 활성산소의 제거는 노화를 비롯한 각종 만성 질병과 생명에 치명적인 암의 예방의 필수 불가결한 것이다.
효과적으로 활성산소들을 제거할 수 있는 물질들은 이미 많이 개발되어 왔다. 대표적인 예로는 항산화제인 비타민계열 (retinol, tocophenol 등), 금나노입자, 플래티넘, 바나듐, 산화세륨 나노입자들이 있다. 최근에는 프러시안 블루 나노입자 (Prussian blue nanoparticle)들이 항산화 효소 (peroxidase (POD), catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) 등)의 기능을 보여줌으로써 활성산소들을 효과적으로 제거하고 생체 내에서 안전하게 항산화 효능을 보여줄 수 있는 가능성이 제기됐다.
프러시안 블루 나노 입자들은 미국 식약처 (US FDA)의 승인을 받은 물질로 방사능 물질들을 제거할 수 있는 기능을 가지고 있으며 세포 독성이 전혀 없는 생체 내 안전성이 높은 물질이다. 또한 근적외선(NIR) 파장에서 강한 흡광도를 보임으로써 암 치료를 위한 photothermal ablation agent와 photoacoustic imaging contrast agent, MRI 조영제로 조명되고 있다. 하지만 프러시안 블루 나노입자 자체는 생체 내 안정성이 낮아 쉽게 뭉침 현상(aggregation)이 발생할 수 있어서, 유기물질들을(polyvinylpyrrolidone (PVP), polylactic acid(PLA), polydiallyldimethylammonium chloride(PDDA) 등) template로 첨가해 구조적인 안정성을 향상시키는 연구들이 많이 진행되고 있다.
이에 본 발명자들은 프러시안 블루 나노 입자들의 안정성을 향상시킬 수 있을 뿐 아니라 항산화 효능을 증가시킬 수 있는 키토산을 template로 사용하여 프러시안 블루/키토산 나노입자(Prussian blue/chitosan nanoparticle, PB/Chi NP) 복합체를 제조하고, 이의 활성산소 제거 효과를 확인함으로써 본 발명을 완성하였다. 본 발명에 따른 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체의 제조 방법에 대한 모식도를 도 1에 나타내었다.
본 발명은 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 항산화제를 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 또한 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 약제학적 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 또한 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 의약외품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 또한 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 또한 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
제1구현예에 따르면,
본 발명은 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 항산화제를 제공하고자 한다.
본 발명에 따른 항산화제에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 1 내지 50kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 항산화제에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 10kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 항산화제에 있어서, 상기 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체의 크기는 1 내지 500 nm인 것을 특징으로 한다.
제2구현예에 따르면,
본 발명은 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 활성산소 과잉생성으로 인해 유발되는 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 1 내지 50kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 10kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체의 크기는 1 내지 500 nm인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물에 있어서, 상기 활성산소 과잉생성으로 인해 유발되는 질환은 뇌졸중, 파킨슨병, 알츠하이머병, 노화, 심장질환, 허혈, 동맥경화, 피부질환, 염증, 류마티스, 자가면역질환, 고지혈증, 간질환, 당뇨병, 암, 만성궤양, 화상 또는 창상인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 약제학적 조성물은 일반적인 경구 또는 비경구 투여 방법으로 환자에게 투여될 수 있으며, 고체 또는 액체 형태 어떠한 형태로도 가능하다. 또한, 본 발명에 따른 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 1종 이상의 액체 또는 고체 담체를 더 포함할 수 있다. 또한 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 상기 고체 형태의 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제, 펠렛제, 세립제 또는 분제일 수 있으며, 이러한 고형제제는 상기 복합체에 담체, 부형제 및/또는 희석제를 첨가하여 조제할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및/또는 희석제로는 락토오스(lactose), 수크로오스(sucrose), 덱스트로오스(dextrose), 만니톨(mannitol), 말리톨(malitol), 소르비톨(sorbitol), 자일리톨(xylitol), 에리트리톨(erithritol), 전분(starch), 아카시아고무(acacia rubber), 알지네이트(alginate), 젤라틴(gelatin), 칼슘 포스페이트(calcium phosphate), 칼슘 실리케이트(calcium silicate), 셀룰로오스(cellulose), 폴리비닐 피롤리돈(polyvinyl pyrrolidone), 마그네슘 스테아레이트(magnesium stearate) 및 광물유 등이 있다. 상기 액체 형태의 제제는 용액, 현탁액 또는 유탁액일 수 있으며, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 경구용으로 적당한 수성 현탁제로는 미분된 활성 성분을 천연 또는 합성검, 수지, 메틸셀룰로오스(methyl cellulose), 소디움카르복시메틸셀룰로오스(Sodium carboxymethyl cellulose) 및 공지의 현탁제와 같은 점성 물질에 분산시켜 제조될 수 있다. 비경구 투여제로는 주사제, 점적제, 수액, 연고, 스프레이제, 현탁제, 유제, 좌제 등을 들 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌글리콜(polyethylene glycol), 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트(ethyl oleate)와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골(macrogol), 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴(glycerogelatin) 등이 사용될 수 있다.
제3구현예에 따르면,
본 발명은 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 활성산소 과잉생성으로 인해 유발되는 질환의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명에 따른 의약외품 조성물에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 1 내지 50kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 의약외품 조성물에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 10kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 의약외품 조성물에 있어서, 상기 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체의 크기는 1 내지 500 nm인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 의약외품 조성물에 있어서, 상기 활성산소 과잉생성으로 인해 유발되는 질환은 뇌졸중, 파킨슨병, 알츠하이머병, 노화, 심장질환, 허혈, 동맥경화, 피부질환, 염증, 류마티스, 자가면역질환, 고지혈증, 간질환, 당뇨병, 암, 만성궤양, 화상 또는 창상인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 의약외품 조성물에 있어서, 상기 의약외품 조성물은 소독 청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제 비누, 핸드 워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터 충진제인 것을 특징으로 한다.
제4구현예에 따르면,
본 발명은 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 활성산소로 유발되는 증상 또는 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 활성산소로 유발되는 증상 또는 질환은 피부노화, 주름생성, 피부색소침착, 아토피, 여드름, 건선 또는 습진인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 1 내지 50kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 10kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체의 크기는 1 내지 500 nm인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 화장료 조성물에 있어서, 상기 화장료는 앰플, 크림, 로션, 화장수, 에센스 또는 팩의 형태로 제조될 수 있다. 또한, 보존이나 취급을 용이하게 하기 위하여 덱스트린(dextrin), 사이클로덱스트린(cyclodextrin) 등의 통상 제제화에 사용되는 캐리어, 그 밖의 임의의 조제를 부가하여도 좋다.
제5구현예에 따르면,
본 발명은 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 식품 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 1 내지 50kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 키토산 나노입자의 분자량은 10kDa인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체의 크기는 1 내지 500 nm인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 식품은 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 또는 비타민 복합제인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 식품 조성물에 있어서, 상기 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체는 활성산소제거 능력 및 항균성이 뛰어나고 안정적이며 생체적합성이 우수하므로, 항산화제, 약제학적 조성물, 의약외품 조성물, 화장료 조성물 또는 식품 조성물의 개발에 효과적으로 사용될 수 있을 것으로 기대된다.
도 1은 본 발명에 따른 프러시안 블루/키토산 나노입자(PB/Chi NP)의 제조 방법에 대한 모식도를 나타낸다.
도 2는 프러시안 블루 나노 입자(PB NP)와 PB/키토산 나노 입자 (PB/Chi NP)의 크기를 분석한 결과를 나타낸다(도 2에서 부분적으로 침전된 나노입자 그룹은 '▲'로 표시하였다)
도 3은 PB NP와 PB/Chi NPs의 3차 증류수 내 안정성 평가 결과를 나타낸다(도 3에서 부분적으로 침전된 나노 입자의 그룹은 '▲'로 표시하였다.)
도 4는 Chitosan, PB NP와 PB/Chi NPs의 항산화력(O2·- 활성산소제거 능력)을 평가한 결과를 나타낸다.
도 5는 Chitosan, PB NP와 PB/Chi NPs의 항산화력 (OH· 활성산소제거 능력)을 평가한 결과를 나타낸다.
도 6은 PB/Chi10k NP의 농도별 세포독성 결과를 나타낸다.
도 2는 프러시안 블루 나노 입자(PB NP)와 PB/키토산 나노 입자 (PB/Chi NP)의 크기를 분석한 결과를 나타낸다(도 2에서 부분적으로 침전된 나노입자 그룹은 '▲'로 표시하였다)
도 3은 PB NP와 PB/Chi NPs의 3차 증류수 내 안정성 평가 결과를 나타낸다(도 3에서 부분적으로 침전된 나노 입자의 그룹은 '▲'로 표시하였다.)
도 4는 Chitosan, PB NP와 PB/Chi NPs의 항산화력(O2·- 활성산소제거 능력)을 평가한 결과를 나타낸다.
도 5는 Chitosan, PB NP와 PB/Chi NPs의 항산화력 (OH· 활성산소제거 능력)을 평가한 결과를 나타낸다.
도 6은 PB/Chi10k NP의 농도별 세포독성 결과를 나타낸다.
이하, 발명의 이해를 돕기 위해 다양한 실시예를 제시한다. 하기 실시예는 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐 발명의 보호범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예>
실시예 1. 프러시안 블루/키토산 나노 입자(PB/Chi NP)의 제조
키토산(150mg)을 3ml의 3차 증류수(deionized water)에 녹여준 뒤 potassium ferricyanide(8.5mg, 5mM) 1ml 첨가하여 상온에서 30분 동안 450rpm으로 stirring하며 반응시켰다. 550rpm으로 stirring 하고 있는 반응용액에 iron chloride tetrahydrate(5mg, 5mM) 1ml을 천천히 dropwise해준 뒤 1시간 동안 반응시켰다. 키토산의 분자량별 (DAC90; 3, 10, 20, 50, 100 kDa)로 위의 방법을 반복해 복합체를 제조하였다. 반응 중 생성되는 KCl을 제거하기 위해 PB NP는 ultrafiltration(Amicon Ultra-15 filter)을 진행하고 PB/Chi NPs는 용액 부피 4배의 acetone(99%, Sigma aldrich)으로 침전시킨 뒤, 3일간 동결 건조하였다.
PB NP와 분자량이 다른 키토산이 코팅된 PB/Chi NPs의 크기를 Zetasizer(Nano-ZS, Malvern) 장비를 이용하여 분석하였다.
그 결과, 키토산이 코팅되지 않은 PB NP는 30nm 정도의 크기로 제조되었으며, 분자량이 높은 키토산이 코팅 될수록 크기가 30nm에서 60nm까지 증가하면서 키토산의 분자량이 50kDa 및 100kDa인 경우 부분적인 침전이 발생하였다(도 2). 따라서, 키토산 라이브러리 중 PB/Chi NP를 안정적으로 제조할 수 있는 키토산 종류는 3kDa에서 20kDa까지인 것으로 확인되었다.
<실험예>
실험예 1. 프러시안 블루/키토산 나노 입자의 안정성 평가
동결 건조된 상기 실시예 1에서 제조된 프러시안 블루/키토산 나노입자를 3차 증류수에 분산 후 37℃, 100rpm에서 안정성 평가를 진행하였다. 이때, 상기 실시예 1에서 불안정하게 제조된 것으로 확인된 PB/Chi50k NP와 PB/Chi100k NP는 제외하였다. 시간별로 3차 증류수에서 나노 입자의 안정성을 확인하기 위해서 0일, 1일, 3일, 7일, 2주, 3주, 4주에 나노 입자의 크기 및 색상 변화를 분석하였다.
그 결과, PB NP는 3주 뒤 부분적으로 침전되었고 PB/Chi3k는 4주 뒤 부분적으로 침전되어서 안정성이 떨어지는 것으로 나타났다. PB/Chi10k NP는 4주 동안 크기 변화가 없었고 PB/Chi20k NP는 침전되진 않았지만 나노입자 크기가 4주에 걸쳐 점차 증가하는 것으로 나타났다. 따라서, 수용액 내의 안정성이 가장 뛰어난 최적화 그룹은 PB/Chi10k NP임이 확인되었다
실험예 2. 프러시안 블루/키토산 나노 입자의 활성산소제거능 평가
2.1 DPPH assay
키토산, PB NP와 PB/Chi NPs (10mg/ml)를 1ml의 3차 증류수에 녹여준 뒤 96-well plate에 150 μl 분주하였다. DPPH 용액(2mg, 0.5mM)을 methanol 10ml에 제조한 뒤 나노 입자 용액을 분주한 wells에 150 μl를 분주하였다. 상온에서 30분간 어둠 속에서 반응시켜준 후 absorbance(λ=517nm)를 측정하였다. DPPH 없이 methanol에서의 PB NP와 PB/Chi NPs의 absorbance도 측정하여 PB의 background absorbance를 배제시키고 활성산소제거능을 평가하였다. 한편, ascorbic acid(10mg/ml)를 positive control로 사용하였다. 측정된 absorbance를 바탕으로 하기의 식에 따라 항산화력을 계산하였다.
그 결과, PB NP 자체의 항산화력(O2·- 활성산소제거 능력)은 약 20%인 반면, PB NP에 키토산(3, 10, 20kDa)을 코팅한 경우 항산화력이 현저히 증가하는 것으로 확인되었다. 그 중에서, PB/Chi10k NP의 항산화력이 가장 우수한 것으로 확인되었다(도 4).
2.2 Hydroxyl radical assay
키토산, PB NP와 PB/Chi10k NPs 용액 (3mg/ml)을 준비하였다. 15ml tube에 0.1ml EDTA(0.1mM), 0.1ml FeCl3(0.1mM), 0.1ml H2O2(1 mM), 0.1ml 2-deoxy-D-ribose(3.75 mM), 1ml 나노입자, 0.5ml phosphate buffer(20 mM)와 0.1ml ascorbic acid(0.1mM)를 넣어주었다. 하나는 H2O2와 나노입자 대신 3차 증류수를, 또 다른 하나는 나노입자 대신 3차 증류수를 넣어 control과 blank를 준비하였다. 그 후, 1시간 동안 37℃, 100rpm에서 반응시켰다. 그 다음, 15 ml NaOH(0.05 M)에 녹인 2-thiobarbituric acid(0.15g, TBA)와 15ml 3차 증류수에 녹인 trichloroacetic acid(0.3g, TCA)를 1ml씩 반응용액에 첨가하고 85℃의 water bath에서 20분간 중탕하였다. 무색이던 반응용액이 분홍색으로 변하면 96-well plate에 300μl씩 분주하고 absorbance (λ=535nm)를 측정하였다. 측정된 absorbance를 바탕으로 하기의 식에 따라 활성산소제거능력을 계산하였다.
그 결과, PB NP, 키토산과 PB/Chi NP 그룹 모두 항산화력 (OH· 활성산소제거 능력)이 positive control인 ascorbic acid (약 25%)보다 높은 것으로 확인되었다. PB NP의 경우 약 30%의 항산화력을 나타낸 반면, PB NP에 키토산 Chi3k, Chi10k 및 Chi20k을 코팅한 경우 모두 95% 이상의 항산화력이 있는 것으로 확인되었다.
실험예 3. 프러시안 블루/키토산 나노 입자의 세포독성 평가
세포 (Raw 264.7 macrophage)를 96-well plate에 한 well당 세포 수 1Ⅹ104씩 분주하고 12시간동안 37℃, 5% CO2 환경에서 배양하였다. 세포에 다른 농도의 PB/Chi10k NP 용액 (1000, 100, 50, 20, 10 μg/ml)을 처리하고 24시간 incubation하였다. 세포 생존율은 cck-8 분석법을 통해 absorbance (λ=450nm)에서 측정하였다.
그 결과, PB/Chi10k NP는 고농도인 1mg/ml에서도 세포독성을 일으키지 않기 때문에 생체적합성이 우수한 물질임이 입증되었다.
이상으로 본 발명 내용의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적 기술은 단지 바람직한 실시태양일 뿐이며, 이에 의해 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백할 것이다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항들과 그것들의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
Claims (10)
- 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 항산화제.
- 제 1 항에 있어서,
상기 키토산 나노입자의 분자량은 1 내지 50kDa인 것을 특징으로 하는 것인, 항산화제.
- 제1항에 있어서,
상기 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체의 크기는 1 내지 500 nm인 것을 특징으로 하는 것인, 항산화제.
- 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 활성산소 과잉생성으로 인해 유발되는 질환의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물로서,
상기 활성산소 과잉생성으로 인해 유발되는 질환은 뇌졸중, 파킨슨병, 알츠하이머병, 노화, 심장질환, 허혈, 동맥경화, 피부질환, 염증, 류마티스, 자가면역질환, 고지혈증, 간질환, 당뇨병, 암, 만성궤양, 화상 또는 창상인 것을 특징인 것을 특징으로 하는 것인, 약제학적 조성물.
- 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 활성산소 과잉생성으로 인해 유발되는 질환의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물로서,
상기 활성산소 과잉생성으로 인해 유발되는 질환은 뇌졸중, 파킨슨병, 알츠하이머병, 노화, 심장질환, 허혈, 동맥경화, 피부질환, 염증, 류마티스, 자가면역질환, 고지혈증, 간질환, 당뇨병, 암, 만성궤양, 화상 또는 창상인 것을 특징인 것을 특징으로 하는 것인, 의약외품 조성물.
- 제5항에 있어서,
상기 의약외품 조성물은 소독 청결제, 샤워폼, 가그린, 물티슈, 세제 비누, 핸드 워시, 가습기 충진제, 마스크, 연고제 또는 필터 충진제인 것을 특징으로 하는 것인, 의약외품 조성물.
- 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 활성산소로 유발되는 증상 또는 질환의 예방 또는 개선용 화장료 조성물로서,
상기 활성산소로 유발되는 증상 또는 질환은 피부노화, 주름생성, 피부색소침착, 아토피, 여드름, 건선 또는 습진인 것을 특징으로 하는 것인, 화장료 조성물.
- 제7항에 있어서,
상기 화장료는 앰플, 크림, 로션, 화장수, 에센스 또는 팩인 것을 특징으로 하는 것인, 화장료 조성물.
- 프러시안 블루/키토산 나노입자 복합체를 유효 성분으로 포함하는 식품 조성물.
- 제9항에 있어서,
상기 식품은 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 또는 비타민 복합제를 특징으로 하는 것인, 식품 조성물.
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