KR20200094479A

KR20200094479A - 나도하수오 추출물을 이용한 주름 개선용 조성물

Info

Publication number: KR20200094479A
Application number: KR1020190012012A
Authority: KR
Inventors: 홍성수; 정원식; 이지은; 최춘환; 최윤혁; 이재연; 안은경
Original assignee: 재단법인 경기도경제과학진흥원
Priority date: 2019-01-30
Filing date: 2019-01-30
Publication date: 2020-08-07
Also published as: KR102164810B1

Abstract

본 발명은 콜라겐 분해효소인 엘라스타아제 저해 활성을 가지는 나도하수오 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물을 개시한다.

Description

나도하수오 추출물을 이용한 주름 개선용 조성물{Composition for Improving Anti-Wrinkle Using Extract of Fallopia ciliinervis}

본 발명은 나도하수오(Fallopia ciliinervis) 추출물을 이용한 주름 개선용 조성물에 관한 것이다.

피부는 각질 아래 표피, 진피, 피하조직으로 구성되어 있다. 표피는 주로 케라틴으로 되어 있는 케라티노사이트(keratinocytes), 멜라닌을 생성하고 분비하는 멜라닌 세포(melanocytes), 랑게르한스 세포(langerhans cells) 등의 면역세포 그리고 지각관련세포 (Merkel's copuscles)로 구성되는 얇은 보호층으로 외부자극과 병원균의 침입을 방지하고 체온조절, 수분과 지질 성분 유지 작용을 한다.

나이가 들면서 나타나는 피부 노화는 이러한 피부조직의 구조적·기능적 변화에 의해 나타나는 내인성 노화와 환경적 영향에 의해 나타나는 외인성 노화가 구분된다. 내인성 노화는 나이가 들면서 신진대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고 면역세포와 피부세포의 기능과 활성이 저하되어 콜라겐 등 피부 구성단백질의 생합성이 줄어들게 되어 나타나는 자연스러운 현상이고, 외인성 노화는 각종 환경 오염물질, 스트레스, 자외선 등 환경적 요인에 의해 나타나는 현상으로, 이러한 피부 노화 대표적인 증상은 콜라겐 등의 감소에 의한 피부 주름의 발생이다.

콜라겐은 피부 수분을 유지하고 피부 유연성과 탄력을 유지하는 데 가장 중요한 단백질로 진피층의 90%를 차지하고 있다(Journal of the American Academy of Dermatology, 2001, 17(4):610-613). 콜라겐 생성의 증가가 피부주름 개선에 주된 요소임은 분명하나 콜라겐 이외에 탄력섬유인 엘라스틴 등도 주름개선에 크게 기여하고 있다고 보고되고 있다(Current topics in developmental biology. 2007. 79:99-155). 엘라스타아제는 콜라겐을 분해할 수 있는 비특이적 효소이면서 진피 내 피부탄력을 유지하는 기질 단백질인 엘라스틴을 분해하는 효소이다. 엘라스타아제의 활성이 증가하면 피부 주름이 발생하고 피부 탄력성이 감소한다. 따라서 엘라스타아제를 저해하는 물질은 피부 주름을 개선하는 효과가 있다(Photochem. Photobiol. 74:283-290. 2001). 엘라스틴의 생성과 분해에 대한 관심이 고조됨에따라(J. investigative dermatology. 2006. 126:1272-1280), 엘라스틴 및 관련효소를 이용한 주름개선 후보물질의 탐색이 필요하다.

피부가 내재적 요인 또는 외재적 요인으로 노화가 진행됨에 따라, 피부에 유해한 대사가 활성화되어 과산화수소 등의 활성산소가 증가하고 항산화 효소의 발현이 감소하며 콜라겐과 엘라스틴의 사슬 절단과 비정상적인 교차결합이 유발됨으로써(Barber et al., 1998; Brenneisen et al., 1998; Masaki et al., 1995; Yamamoto, 2001; Yasui, Sakurai, 2000), 피부 조직 손상, 피부 주름 등이 발생하게 된다(Janssen et al., 1993; Park et al., 1999).

따라서 엘라스타아제를 저해할 수 있는 가지는 활성을 가지거나 활성산소를 제거할 수 있는 활성을 가지는 물질은 피부 주름 개선 효과를 가질 수 있다.

한편, 하수오는 중국에서 들어온 것으로 알려져 있으며 오랫동안 재배되고 있는 덩굴성 약용식물로 중국과 한국에서 염증, 박테리아 감염, 화농성 피부염 등을 치료하는 민간요법으로 활용되어왔다(Chem Pharm Bull(Tokyo). 2002. 50(5):605-8). 특히, 나도하수오는 분리된 anthraquinone 화합물과 생약학적 외부형태의 유사성에 의해 하수오의 근연 생약으로 이해되고 있으며, 나도하수오로부터 emodin, physcion 및 emodin-8-O-β-D-glucopyranoside를 분리함으로써 하수오의 대용 생약이 될 가능성을 제시하였다(생약학회지.1981. 12(4):221-226).

본 발명은, 엘라스타제 저해 활성과 항산화 활성을 가지는 나도하수오 추출물을 개시한다.

본 발명의 목적은 나도하수오 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 다른 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.

본 발명은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 나도하수오 추출물이 엘라스타아제 저해 활성과 항산화 활성을 가짐을 확인함으로써 완성된 것이다.

전술한 바를 고려할 때 본 발명은 일 측면에 있어서, 나도하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 주름 개선용 조성물로 파악할 수 있고, 다른 측면에 있어서는 나도하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화 조성물로 파악할 수 있다.

본 명세서에서, "나도하수오 추출물"이란 추출 대상인 나도하수오 줄기, 잎, 열매, 꽃, 뿌리, 이들의 혼합물 등을 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 메틸렌클로라이드, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, N,N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 침출하여 얻어진 추출물, 이산화탄소, 펜탄 등 초임계 추출용매를 사용하여 얻어진 추출물 또는 그 추출물을 분획하여 얻어진 분획물을 의미하며, 추출 방법은 활성물질의 극성, 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방식이 적용될 수 있다. 분획된 추출물의 경우 상기 추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 극성이 다른 용매와 혼합·정치시켜 얻은 분획물, 상기 추출물을 실리카겔 등이 충진된 칼럼에 흡착시킨 후 소수성 용매, 친수성 용매 또는 이들의 혼합 용매를 이동상으로 하여 얻은 분획물을 포함하는 의미이다. 또한 상기 추출물의 의미에는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등의 방식으로 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고형상의 추출물이 포함된다. 바람직하게는 추출용매로서 물, 에탄올 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물, 더 바람직하게는 추출용매로서 물과 에탄올의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물을 의미한다.

또 본 명세서에서 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.

본 발명의 피부 주름 개선용 조성물이나 항산화 조성물은 그 유효성분 이외에, 피부 관련 활성을 보강·추가하거나 복용의 편리성을 위하여 당업계에 공지된 항산화 성분, 피부 미백 성분, 피부 주름 개선 성분, 자외선 보호 성분, 피부 보습 성분 등을 포함하여 제조될 수 있다. 구체적으로 항산화 성분으로는 코엔자임Q10, 유비퀴놀, 비즈왁스알코올, 프랑스해안송 껍질 추출물, 복분자 주정 추출 폴리페놀, 메론 추출물, 녹차 추출물, 홍삼 등을 들 수 있고, 피부 미백 성분으로서는 알부틴, 나이아신아마이드, 아스코빌글루코사이드, 알파-비사보롤, 유용성 감초 추출물(Oil Soluble Licorice(Glycyrrhiza) Extract) 등을 들 수 있으며, 또 피부 주름 개선 성분으로서는 레티놀, 레티닐팔미테이트, 아데노신, 폴리에톡실레이티드아마이드 등을 들 수 있고, 자외선 보호 성분으로서는 드로메트리졸, 드로메트리졸트리실록산, 디갈로일트리올리에이트, 디메치코디에칠벤잘말로네이트, 디에칠헥실부타미도트리아존, 소나무 껍질 추출물 등의 복합물, 포스파티딜세린, 핑거루트 추출 분말, 홍삼과 산수유 등의 복합 추출물 등을 들 수 있다. 또 보습 성분으로서는 AP 콜라겐 효소 분해 펩타이드, Collactive 콜라겐 펩타이드, N-아세틸글루코사민, 곤약 감자 추출물, 민들레 등의 복합 추출물, 쌀겨 추출물, 옥수수 배아 추출물, 저분자 콜라겐 펩타이드, 지초 추출 분말, 포스파티딜세린, 히알루론산 등을 들 수 있다. 여타의 피부 미백 성분, 주름 개선 성분, 자외선 보호 성분, 피부 보습 성분들에 대해서는 화장품법에 따른 기능성화장품공전(식약처고시 "기능성화장품 기준 및 시험방법"), 건강기능식품에관한법률의 건강기능식품공전(식약처고시 "건강기능식품 기준 및 규격)을 참조할 수 있다. 이러한 성분들은 본 발명의 피부 주름 개선용 조성물에 그 유효성분과 함께 하나 이상 포함될 수 있다.

본 발명의 피부 주름 개선용 조성물이나 항산화용 조성물(이하 "본 발명의 조성물")에서 그 유효성분은 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 임의의 양(유효량)으로 포함될 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 20.0 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 주름 개선 효과, 항산화 효과를 유도할 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.

본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 화장료 조성물로 파악할 수 있다.

본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 파악될 경우에도 그 화장료 조성물은 그 용도상, 법률상 임의의 제품 구분을 띨 수 있으며, 구체적으로 피부 주름 개선 등의 용도를 가진 기능성 화장품, 비기능성 일반 화장품 등일 수 있다. 제품 형태에 있어서도 임의의 제품 형태를 띨 수 있는데, 구체적으로 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 등으로 제형화될 수 있다. 구체적인 제품 형태에 있어서는 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형 등일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들, 예컨대, 안정화제, 용해화제, 계면활성제, 비타민, 색소 및 항료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분을 포함하는 것을 제외하고는 당업계에 통상적으로 행하여지는 화장료 조성물의 제조방법에 따라 제조할 수 있다.

본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서, 식품 조성물로 파악할 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 어떠한 형태로도 제조될 수 있으며, 예컨대 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구루트 등의 가공 유류, 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 등의 건강기능식품 제제류 등으로 제조될 수 있다. 또 본 발명의 식품 조성물은 법률상·기능상의 구분에 있어서 제조·유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띨 수 있다. 예컨대 건강기능식품에관한법률에 따른 건강기능식품이거나, 식품위생법의 식품공전(식약처 고시, 식품의 기준 및 규격)상 각 식품유형에 따른 두유류, 발효음료류, 특수용도식품 등일 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 식품첨가물이 포함될 수 있다. 식품첨가물은 일반적으로 식품을 제조, 가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가되어 혼합되거나 침윤되는 물질로서 이해되는데, 식품과 함께 매일 그리고 장기간 복용되므로 그 안전성이 보장되어야 한다. 식품위생법에 따른 식품첨가물공전(식약처 고시, 식품첨가물 기준 및 규격)에는 안전성이 보장된 식품첨가물이 화학적 합성품, 천연 첨가물, 혼합 제제류로 구분하여 한정적으로 규정되어 있다.

이들 식품첨가물은 기능적 측면에 있어서는 감미제, 풍미제, 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등으로 구분될 수 있다.

감미제는 식품이 적당한 단맛을 나게 하는 양으로 사용될 수 있으며, 천연의 것이거나 합성된 것일 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다.

풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수도 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다.

보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등이 사용될 수 있고, 또 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있으며, 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등이 사용될 수 있다. 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다.

점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 전술한 바의 식품첨가물 이외에, 기능성과 영양성을 보충, 보강할 목적으로 당업계에 공지되고 식품첨가물로서 안정성이 보장된 생리활성 물질이나 미네랄류를 포함할 수 있다.

그러한 생리활성 물질로서는 녹차 등에 포함된 카테킨류, 비타민 B1, 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B12 등의 비타민류, 토코페롤, 디벤조일티아민 등을 들 수 있으며, 미네랄류로서는 구연산 칼슘 등의 칼슘 제제, 스테아린산마그네슘 등의 마그네슘 제제, 구연산철 등의 철 제제, 염화 크롬, 요오드칼륨, 셀레늄, 게르마늄, 바나듐, 아연 등을 들 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에는 전술한 바의 식품첨가물이 제품 유형에 따라 그 첨가 목적을 달성할 수 있는 적량으로 포함될 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에 포함될 수 있는 기타의 식품첨가물과 관련하여서는 식품공전이나 식품첨가물 공전을 참조할 수 있다.

본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 약제학적 조성물로 파악할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 경구용 제형 또는 비경구용 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 "약제학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다.

본 발명의 약제학적 조성물이 경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때 약제학적으로 허용되는 적합한 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 덱스트로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 등의 당류, 옥수수 전분, 감자 전분, 밀 전분 등의 전분류, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 맥아, 젤라틴, 탈크, 폴리올, 식물성유 등을 들 수 있다. 제제화활 경우 필요에 따라 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 및/또는 부형제를 포함하여 제제화할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사제로 제제화활 경우 적합한 담체로서는 멸균수, 에탄올, 글리세롤이나 프로필렌 글리콜 등의 폴리올 또는 이들의 혼합물을 들수 있으며, 바람직하게는 링거 용액, 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화될 수 있다. 비강 흡입제의 경우 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 등의 적합한 추진제를 사용하여 에어로졸 스프레이 형태로 제제화될 수 있으며, 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 폴리에틸렌글리콜류, 카카오지, 라우린지, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트류, 소르비탄 지방산 에스테르류 등이 사용될 수 있다.

약제학적 조성물의 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 구체적으로 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주 된다.

본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 성별, 연령, 환자의 중증도, 투여 경로에 따라 1일 0.001mg/kg ~ 10g/kg 범위, 바람직하게는 0.001mg/kg ~ 1g/kg 범위일 수 있다. 투여는 1일 1회 또는 수회로 나누어 이루어질 수 있다. 이러한 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 아니 된다.

전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 나도하수오 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물을 제공할 수 있다.

본 발명의 피부 주름 개선용 조성물은 식품, 화장품, 약품 등으로 제품화될 수 있다.

도 1은 나도하수오 추출물의 엘라스타아제 저해 활성 실험 결과이다.
도 2는 나도하수오 추출물의 ABTS 라디칼 소거 활성과 DPPH 라디칼 소거 활성 실험 결과이다.

이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.

<실시예> 나도하수오 추출물의 제조

나도하수오(추출 부위: 전초) 건조분말에 10배 중량의 70% 에탄올을 첨가하여 실온에서 24시간 침출한 뒤 와트만(whatman paper) 여과지 No.2로 여과한 후, 상기 여과액을 감압농축하고 동결 건조하여 고형상의 나도하수오 추출물을 제조하였다.

<실험예 1> 엘라스타아제 저해 assay에 의한 주름 개선 효능 실험

50 mM Tris-Cl buffer (pH 8.5)에 농도 별로 희석한 시료를 첨가한 후 50 mM Tris-Cl buffer (pH 8.5) 에 기질 1 mg/ml N-succinyl-(Ala)₃-p-nitroanilide를 첨가하였다. 0.6 U/ml PPE(porcine pancreas elastase)를 첨가하여 잘 섞은 후 25℃에서 반응 시켜 405 nm에서 ELISA reader를 이용하여 흡광도를 측정하였다. 결과를 시료 무처리군 대비 백분율로 도 1에 나타내었다. 양성대조군으로 ursolic acid를 사용하였다.

도 1에서와 같이, 나도하수오 추출물은 농도 의존적으로 엘라스타아제 저해 활성을 보였으며, 가장 낮은 처리 농도인 100 ㎍/ml에서도 45 % 가까이 저해 활성을 보여 IC₅₀은 215.95 ㎍/ml 표 1로 나타났다.

시료	IC₅₀ (ug/ml)
나도하수오 추출물	215.95
Ursolic acid (양성대조군)	46.29

<실험예 2> ABTS assay에 의한 항산화 활성 실험

7 mM ABTS buffer와 2.45 mM potassium persulfate buffer(K2S2O8)를 제조하여 ABTS:K2S2O8=2:1 비율로 섞은 후 12-16시간 차광하에 반응시켜 양이온 라디칼을 형성시킨 후 Stock buffer를 734 nm에서 측정한 O.D. 값이 0.70 ± 0.02가 나오도록 희석하고 buffer 100 ㎕와 농도별로 희석한 추출물 시료 100 ㎕를 첨가하고 실온에서 6 분간 반응시켰다. 반응 후 734 nm에서 흡광도를 측정하여 아래의 식에 따라 대조군인 무처리군과 비교하여 각 처리 농도에 따른 시료의 ABTS 양이온 라디칼 소거 활성을 구하여 도 2에 나타내었고 50 %의 소거 활성에 해당하는 농도 IC₅₀ 값을 구하여 아래의 표 2에 나타내었다. 양성대조군으로 항산화제인 BHA를 사용하였다.

ABTS 양이온 라디칼 소거율(%) = (Control-sample) / Control × 100

시료	IC₅₀ (ug/ml)
나도하수오 추출물	6.58
BHA (양성대조군)	2.94

도 2에서 보는바와 같이, 나도하수오 추출물은 25 ㎍/㎖까지는 농도 의존적으로 항산화 활성을 보이고 있으며 100 ㎍/㎖의 처리 농도부터는 거의 100%에 근접한 항산화 활성을 보이고 있음을 알 수 있다. 나도하수오 추출물의 IC₅₀ 값은 6.58 ㎍/mL로 나타났다.

<실험예 3> DPPH assay에 의한 항산화 활성 실험

200 μM DPPH 메탄올 용액을 만든 후 DPPH 용액 100 ㎕와 농도별로 메탄올로 희석한 시료 100 ㎕를 넣어서 30분 동안 상온에서 반응시킨 후 ELISA reader를 이용하여 520 nm에서 흡광도를 측정하고 아래의 식에 따라 대조군인 무처리군과 비교하여 각 처리 농도에 따른 시료의 DPPH 라디칼 소거 활성을 구하여 도 2에 나타내었고 50 %의 소거 활성에 해당하는 농도 IC₅₀ 값을 구하여 아래의 표 3에 나타내었다. 양성대조군으로 항산화제인 BHA를 사용하였다.

DPPH 라디칼 소거율(%) = (Control-sample) / Control × 100

시료	IC₅₀ (ug/ml)
나도하수오 추출물	11.65
BHA (양성대조군)	15.58

도 3에서 보는 바와 같이, 나도하수오 추출물은 100 ㎍/㎖의 처리 농도까지는 농도 의존적으로 항산화 활성을 나타내고 있다. IC₅₀ 값은 11.65 ㎍/㎖로 나타났다.

이상의 실험결과를 통해 본 발명의 나도하수오 추출물을 함유하는 조성물은 엘라스타아제 활성 저해 효과 및 항산화 활성을 나타냄으로써 피부의 주름을 개선하는 효과를 나타내는 조성물인 것을 확인하였다.

Claims

나도하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 주름 개선용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 나도하수오 추출물은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 얻은 추출물인 것을 특징으로 하는 피부 주름 개선용 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 조성물은 화장료 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
제1항 또는 제2항에 있어서,
상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
나도하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 식품 조성물.
나도하수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 화장료 조성물.
제6항 또는 제7항에 있어서,
상기 나도하수오 추출물은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 얻은 추출물인 것을 특징으로 하는 항산화용 조성물.