KR20200093552A - 혈장 칼리크레인 저해제 및 그 염의 고체 형태 - Google Patents

혈장 칼리크레인 저해제 및 그 염의 고체 형태 Download PDF

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데이비드 말콤 크로
데이빗 마이클 에반스
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칼비스타 파마슈티컬즈 리미티드
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Abstract

본 발명은 혈장 칼리크레인 저해제의 새로운 고체 형태, 이를 포함하는 약학적 조성물 및 테라피에서의 이의 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명의 고체 형태의 제조 방법을 제공한다.

Description

혈장 칼리크레인 저해제 및 그 염의 고체 형태
본 발명은 혈장 칼리크레인 저해제의 새로운 고체 형태, 이를 포함하는 약학적 조성물 및 테라피에서의 그 용도에 관한 것이다. 또한, 본 발명은 본 발명의 고체 형태를 제조하는 방법을 제공한다.
혈장 칼리크레인의 저해제는 다수의 치료학적 용도, 특히 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 혈관 투과성 (retinal vascular permeability), 당뇨병성 황반 부종 및 유전성 혈관 부종의 치료에 있어 다수의 치료학적 용도를 가진다.
혈장 칼리크레인은 키니노겐으로부터 키닌을 해리시킬 수 있는 트립신-유사 세린 프로테아제이다 (K. D. Bhoola et al., "Kallikrein-Kinin Cascade", Encyclopedia of Respiratory Medicine, p483-493; J. W. Bryant et al., "Human plasma kallikrein-kinin system: physiological and biochemical parameters" Cardiovascular and haematological agents in medicinal chemistry, 7, p234-250, 2009; K. D. Bhoola et al., Pharmacological Rev., 1992, 44, 1; 및 D. J. Campbell, "Towards understanding the kallikrein-kinin system: insights from the measurement of kinin peptides", Brazilian Journal of Medical and Biological Research 2000, 33, 665-677). 혈장 칼리크레인은 혈액 응고 케스케이드에서 그 역할이 브래디키닌의 분리 또는 효소적 절단에 관여하는 것은 아니지만, 이러한 기본적인 혈액 응고 케스케이드에 필수 구성 요소이다. 혈장 프리칼리크레인은 단일 유전자에 의해 코딩되며, 간에서 합성된다. 이것은 고분자량의 키니노겐이 결합된 헤테로다이머 복합체로서, 혈장에서 순환하는 불활성의 혈장 프리칼리크레인 형태로 간세포에서 분비되며, 활성화되어 활성형의 혈장 칼리크레인이 된다. 키닌은 G 단백질-커플링된 수용체를 통해 작용하는 강력한 염증 매개인자로서, 키닌의 길항제 (예, 브래디키닌 길항제)는 다양한 장애를 치료하기 위한 잠재적인 치료제로서 이미 연구된 바 있다 (F. Marceau and D. Regoli, Nature Rev., Drug Discovery, 2004, 3, 845-852).
혈장 칼리크레인은 다양한 염증성 장애에서 역할을 하는 것으로 여겨진다. 혈장 칼리크레인에 대한 주요 저해제는 세르핀 C1 에스테라제 저해제이다. C1 에스테라제 저해제에 유전적인 결함을 가진 환자는 유전성 혈관 부종 (HAE)을 앓게 되며, 그로 인해 얼굴, 손, 목, 위장관 및 생식기에 간헐적으로 부종이 발생한다. 급성 발병시 생긴 수포에는, 고분자량의 키니노겐을 절단하여 브래디키닌을 해리시킴으로써 혈관 투과성을 높이는, 혈장 칼리크레인이 다량 함유되어 있다. 거대 단백질 혈장 칼리크레인의 저해제를 이용한 치료가, 혈관 투과성 증가를 야기하는 브래디키닌의 해리를 방지함으로써 HAE를 효과적으로 치료하는 것으로 밝혀졌다 (A. Lehmann "Ecallantide (DX-88), a plasma kallikrein inhibitor for the treatment of hereditary angioedema and the prevention of blood loss in on-pump cardiothoracic surgery" Expert Opin. Biol. Ther. 8, p1187-99).
혈장 칼리크레인-키닌 시스템은 진행성 당뇨병성 황반 부종을 앓고 있는 환자들에서 비정상적으로 다량 존재한다. 최근 들어, 혈장 칼리크레인이 당뇨병 랫의 망막 혈관 기능부전에 관여한다는 것이 발표되었다 (A. Clermont et al. "Plasma kallikrein mediates retinal vascular dysfunction and induces retinal thickening in diabetic rats" Diabetes, 2011, 60, p1590-98). 아울러, 혈장 칼리크레인 저해제 ASP-440의 투여시, 당뇨병 랫에서 망막 혈관 투과성과 망막 혈류 이상이 모두 완화되었다. 즉, 혈장 칼리크레인 저해제는 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 혈관 투과성과 당뇨병성 황반 부종을 낮추기 위한 치료제로서 유용할 것이다.
또한, 혈장 칼리크레인은 혈액 응고에 소정의 역할을 담당하고 있다. 선천적인 응고 케스케이드는 팩터 XII (FXII)에 의해 활성화될 수 있다. FXII가 (FXIIa로) 활성화되면, FXIIa는 팩터 XI (FXI)의 활성화를 통해 피브린 형성을 촉발하고, 이로써 혈액 응고가 발생한다. 혈장 칼리크레인은 FXII를 FXIIa로 활성화하므로 선천적인 응고 케스케이드의 핵심 인자이며, 따라서 선천적인 응고 경로를 활성화한다. 또한, FXIIa는 혈장 프리칼리크레인을 추가적으로 활성화하여 혈장 칼리크레인을 형성시킨다. 그 결과, 혈장 칼리크레인 시스템과 선천적인 응고 경로에 포지티브 피드백 증폭이 구축된다 (Tanaka et al. Thrombosis Research 2004, 113, 333-339); Bird et al. Thrombosis and Haemostasis, 2012, 107, 1141-50).
혈중 FXII가 음으로 하전된 표면 (예, 심장 폐 우회술시 혈액이 통과하는 산소발생기의 표면 또는 외부 관의 표면)과 접촉하면 자이모겐 FXII에 구조적인 변화가 유발되어, 활성 FXII (FXIIa)가 소량 만들어진다. FXIIa 생성은 혈장 칼리크레인의 형성을 촉발하여, 전술한 바와 같이 혈액 응고가 이루어진다. FXII에서 FXIIa로의 활성화는 또한 다양한 소스의 음으로 하전된 표면 (예, 패혈증의 경우 박테리아, 분해 세포 유래 RNA)과의 접촉에 의해 체내에서 발생할 수 있으며, 이로써 파종성 혈관내 응고를 유발할 수 있다 (Tanaka et al. Thrombosis Research 2004, 113, 333-339).
따라서, 혈장 칼리크레인의 저해가 전술한 혈액 응고 케스케이드를 저해할 것이며, 그래서 파종성 혈관내 응고의 치료와, 혈액 응고가 바람직하지 않은 심장 폐 우회술시 혈액 응고의 치료에 유용할 것이다. 예를 들어, Katsuura et al. (Thrombosis Research, 1996, 82, 361-368)에서는, LPC-유발성 파종성 혈관내 응고의 경우 혈장 칼리크레인 저해제 PKSI-527의 투여가, 혈소판 수치 및 피브리노겐 수준의 저하뿐 아니라, 파종성 혈관내 응고에서 통상적으로 발생하는 FDP 수준 증가를 현저하게 억제하는 것으로, 밝혀졌다. Bird et al. (Thrombosis and Haemostasis, 2012, 107, 1141-50)에서는, 혈장 칼리크레인-결핍 마우스에서 응고 시간이 증가하고 혈전증이 현저하게 감소하는 것으로 확인되었다. Revenko et al. (Blood, 2011, 118, 5302-5311)에서는, 마우스에서 안티센스 올리고뉴클레오티드 치료를 이용한 혈장 프리칼리크레인의 농도 감소가 항-혈전 효과를 발휘하는 것으로 확인되었다. Tanaka et al. (Thrombosis Research 2004, 113, 333-339)에서는, 혈액을 DX-88 (혈장 칼리크레인 저해제)과 접촉시키면 활성화 응고 시간 (activated clotting time, ACT)이 증가하는 것으로 확인되었다. Lehmann et al. (Expert Opin . Biol . Ther . 2008, 1187-99)에서는, 에칼란티드 (혈장 칼리크레인 저해제)가 접촉 활성화 유도성 응고 (contact activated induced coagulation)를 지연시키는 것으로, 확인되었다. Lehmann et al.에서는, 에칼란티드를 "혈장 칼리크레인을 저해함으로써 선천적인 응고 경로를 저해하여 시험관내 항-응고 효과를 나타낸다"고 결론내렸다.
또한, 혈장 칼리크레인은 혈소판 활성화, 즉 출혈의 중단을 저해하는 역할을 수행한다. 혈소판 활성화는 지혈 과정의 가장 초기 단계로서, 혈관 손상에 따른 혈소판 플러그 형성 및 빠른 지혈을 유발한다. 혈관 손상부에서, 노출된 콜라겐과 혈소판 간의 상호작용이 혈소판의 체류 및 활성화, 그리고 이후의 지혈에 매우 중요하다.
혈장 칼리크레인은, 일단 활성화되면, 콜라겐에 결합하며, 이로써 GPVI 수용체에 의해 매개되는 혈소판의 콜라겐-매개 활성화를 방해한다 (Liu et al. (Nat Med., 2011, 17, 206-210)). 전술한 바와 같이, 혈장 칼리크레인 저해제는 혈장 칼리크레인-매개의 팩터 XII의 활성화를 저해함으로써, 혈장 프리칼리크레인의 활성화를 떨어뜨리고, 따라서 접촉 활성화 시스템에 의한 칼리크레인 시스템의 포지티브 피드백 증폭을 감소시킨다.
따라서, 혈장 칼리크레인의 저해는 혈장 칼리크레인이 콜라겐에 결합하는 것을 감소시키며, 따라서 지혈시 혈장 칼리크레인의 개입이 줄어든다. 이에, 혈장 칼리크레인 저해제는 뇌 출혈 및 수술 후 출혈을 치료하는데 이용가능할 것이다. 예를 들어, Liu et al. (Nat Med., 2011, 17, 206-210)에서는, 소분자 PK 저해제 ASP-440을 전신 투여하면 랫에서 혈종 확대가 줄어드는 것으로, 입증되었다. 뇌 혈종은 뇌내 출혈 후 발생할 수 있으며, 혈관 손상의 결과로서 혈관으로부터 주변 뇌 조직으로의 출혈에 의해 유발된다. Liu 등에 의해 발표된, 뇌 출혈 모델에서, 혈관을 손상시키는 뇌 실질내 절개를 수반하는 외과적 개입에 의해 출혈이 유발되었다. 이들 데이터는, 혈장 칼리크레인의 저해가 수술 후 출혈 감소 및 혈종의 크기 감소를 달성한다는 것을, 입증해준다. Bjorkqvist 등 (Thrombosis and Haemostasis, 2013, 110, 399-407)은, 아프로티닌 (혈장 칼리크레인 등의 세린 프로테아제를 저해하는 단백질)이 수술 후 출혈 저하를 위해 사용할 수 있다는 것을, 입증하였다.
혈장 칼리크레인과 모두 관련된 뇌 출혈, 신장병증, 심근증 및 신경병증 등의 기타 당뇨병 합병증 역시 혈장 칼리크레인 저해제의 타겟으로 볼 수 있다.
합성 소분자 혈장 칼리크레인 저해제들은, 기존에, 예를 들어 Garrett et al. ("Peptide aldehyde..." J. Peptide Res. 52, p62-71 (1998)), T. Griesbacher et al. ("Involvement of tissue kallikrein but not plasma kallikrein in the development of symptoms mediated by endogenous kinins in acute pancreatitis in rats" British Journal of Pharmacology 137, p692-700 (2002)), Evans ("Selective dipeptide inhibitors of kallikrein" WO03/076458), Szelke et al. ("Kininogenase inhibitors" WO92/04371), D. M. Evans et al. (Immunolpharmacology, 32, p115-116 (1996)), Szelke et al. ("Kininogen inhibitors" WO95/07921), Antonsson et al. ("New peptides derivatives" WO94/29335), J. Corte et al. ("Six membered heterocycles useful as serine protease inhibitors" WO2005/123680), J. Sturzbecher et al. (Brazilian J. Med. Biol. Res 27, p1929-34 (1994)), Kettner et al. (US 5,187,157), N. Teno et al. (Chem. Pharm. Bull. 41, p1079-1090 (1993)), W. B. Young et al. ("Small molecule inhibitors of plasma kallikrein" Bioorg. Med. Chem. Letts. 16, p2034-2036 (2006)), Okada et al. ("Development of potent and selective plasmin and plasma kallikrein inhibitors and studies on the structure-activity relationship" Chem. Pharm. Bull. 48, p1964-72 (2000)), Steinmetzer et al. ("Trypsin-like serine protease inhibitors and their preparation and use" WO08/049595), Zhang et al. ("Discovery of highly potent small molecule kallikrein inhibitors" Medicinal Chemistry 2, p545-553 (2006)), Sinha et al. ("Inhibitors of plasma kallikrein" WO08/016883), Shigenaga et al. ("Plasma Kallikrein Inhibitors" WO2011/118672), 및 Kolte et al. ("Biochemical characterization of a novel high-affinity and specific kallikrein inhibitor", British Journal of Pharmacology (2011), 162(7), 1639-1649)에서 언급된 바 있다. 또한, Steinmetzer et al. ("Serine protease inhibitors" WO2012/004678)은 인간 플라스민 및 혈장 칼리크레인의 저해제로서 환형 펩타이드 유사체를 개시하였다.
현재까지, 의학적인 용도로 허가된 유일한 선택적인 혈장 칼리크레인 저해제는 에칼란티드이다. 에칼란티드는 주사 용액으로서 제형화된다. 이것은 과민성 반응 위험성이 존재하는 거대 단백질 혈장 칼리크레인 저해제이다. 당해 기술 분야에 공지된 기타 혈장 칼리크레인 저해제는 일반적으로 소분자이며, 일부는 구아니딘 또는 아미딘과 같은 이온화 가능한 고 극성의 관능기를 함유하고 있다. 최근, 구아니딘 또는 아미딘 관능기를 특징으로 하지 않는 혈장 칼리크레인 저해제가 보고되었다. 예를 들어, Brandl et al. ("혈장 칼리크레인의 저해제로서 N-((6-아미노-피리딘-3-일)메틸)-헤테로아릴-카르복사미드" WO2012/017020), Evans et al. ("혈장 칼리크레인의 저해제로서 벤질아민 유도체" WO2013/005045), Allan et al. ("벤질아민 유도체" WO2014/108679), Davie et al. ("헤테로사이클릭 유도체" WO2014/188211), 및 Davie et al. ("혈장 칼리크레인의 저해제로서 N-((het)아릴메틸)-헤테로아릴-카르복사미드 화합물" WO2016/083820)을 참조한다.
약학적 제형의 제조에서, 상업적으로 실행가능한 제조 공정을 달성하기 위해 활성 화합물이 취급 및 가공이 용이할 수 있는 형태인 것이 중요하다. 따라서, 활성 화합물의 화학적 안정성 및 물리적 안정성이 중요한 인자이다. 활성 화합물과 이를 포함하는 제형은, 활성 화합물의 물리-화학적 특징 (예, 화학적 조성, 밀도, 흡습성 및 용해성)에 어떠한 유의한 변화를 야기하지 않으면서, 상당한 기간 동안 효과적으로 보관할 수 있어야 한다.
약학적 성분을 특정 고체 형태로 제조하는 방법이 여러가지 측면의 고체 형태 특성에 영향을 미칠 수 있으며, 용해성, 용해율, 화학적 안정성, 기계적 특성, 기술적 실현가능성, 가공성, 약동학적 특성 및 생체이용성 측면에서 이점을 제공할 수 있는 것으로 알려져 있다. 이러한 방법 중 일부는 "Handbook of Pharmaceutical Salts; Properties, Selection and Use", P. Heinrich Stahl, Camille G. Wermuth (Eds.) (Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich)에 기술되어 있다. 고체 형태로 제조하는 방법은 또한 "Practical Process Research and Development", Neal G. Anderson (Academic Press, San Diego) 및 "Polymorphism: In the Pharmaceutical Industry", Rolf Hilfiker (Ed) (Wiley VCH)에 기술되어 있다. 약제학적 결정에서의 다형성은 Byrn (Byrn, S.R., Pfeiffer, R.R., Stowell, J.G., "Solid-State Chemistry of Drugs", SSCI Inc., West Lafayette, Indiana, 1999), Brittain, H.G., "Polymorphism in Pharmaceutical Solids", Marcel Dekker, Inc., New York, Basel, 1999) 또는 Bernstein (Bernstein, J., "Polymorphism in Molecular Crystals", Oxford University Press, 2002)에 기술되어 있다.
본 출원인은 PCT/GB2017/051546에 기술된, 혈장 칼리크레인의 저해제인 새로운 화합물 시리즈를 개발하게 되었다. 이들 화합물은 혈장 칼리크레인에 대해 양호한 선택성을 나타내며, 당뇨병성 망막증, 황반 부종 및 유전성 혈관 부종을 치료하는데 잠재적으로 유용하다. 이러한 화합물 하나가 N-[(3-플루오로-4-메톡시피리딘-2-일)메틸]-1-({4-[(2-옥소피리딘-1-일)메틸]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드 (PCT/GB2017/051546의 실시예 6)이다.
명칭 N-[(3-플루오로-4-메톡시피리딘-2-일)메틸]-1-({4-[(2-옥소피리딘-1-일)메틸]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드는 식 A에 도시된 구조로 표시된다.
Figure pct00001
또한, 본 출원인은 PCT/GB2017/051579에 기술된 관련 화합물 N-[(3-플루오로-4-메톡시피리딘-2-일)메틸]-3-(메톡시메틸)-1-({4-[(2-옥소피리딘-1-일)메틸]페닐}메틸)피라졸-4-카르복사미드 및 이의 염의 새로운 고체 형태를 개발하게 되었다. 이들 고체 형태는 개발하기에 적합하게 만드는 유익한 물리-화학적 특성을 가진다.
발명의 설명
본 출원인은 본원에서 '형태 1'로 지칭되는 식 A의 화합물의 새로운 고체 형태를 개발하게 되었다. 형태 1은 개발에 적합하게 만드는 유익한 물리-화학적 특성을 가지며, 특히 결정화에 의한 이의 제조가 간단하고, 스케일러블 (scalable)하다. 결정질 고체 형태의 이점은 가공하기 훨씬 용이하다는 것이다. 즉, 결정화에 의한 제조는 부적절한 불순물을 제거하기 위한 일반적이고 쉽게 스케일러블한 공정이다.
아울러, 식 A의 화합물은 놀랍게도 양호한 약동한 특성, 특히 시험관내 투과성을 나타내는 것으로 밝혀졌다.
따라서, 본 발명은 일 측면에서 식 A의 화합물의 고체 형태를 제공한다. 본 발명에서 이 고체 형태는 '형태 1'로 지칭된다.
또한, 본 출원인은 식 A의 화합물의 염산염의 새로운 고체 형태를 개발하게 되었다. 이 새로운 고체 형태는 개발에 적합하게 만드는, 특히 결정화에 의한 제조가 단순하고 스케일러블한, 유익한 물리-화학적 특성을 가진다.
본 발명은 본원에서 '형태 2'로서 지칭되는 식 A의 화합물의 염산염의 고체 형태를 제공한다.
또한, 본 출원인은 식 A의 화합물의 황산염의 새로운 고체 형태를 개발하게 되었다. 이 새로운 고체 형태는 개발에 적합하게 만드는, 특히 결정화에 의한 제조가 단순하고 스케일러블한, 유익한 물리-화학적 특성을 가진다.
본 발명은 본원에서 '형태 3'으로 지칭되는 식 A의 화합물의 황산염의 고체 형태를 제공한다.
본원에서 식 A의 화합물의 염을 지칭하는 용어 "황산염"은 모노-황산염 및 헤미-황산염 둘다를 포괄하는 것으로 의도된다. 일 구현예에서, 식 A의 화합물의 형태 3은 모노-황산염이다. 다른 구현예에서, 식 A의 화합물의 형태 3은 헤미-황산염이다.
본원에서 언급되는 용어 "고체 형태"는 결정질 형태 (crystalline form)를 포함한다. 선택적으로, 본 발명의 결정 형태는 결정질 형태이다.
본 명세서에서, X선 분말 회절 피크 (°2θ로 표시)는 Cu Kα선 조사 (Cu Kα radiation)를 이용해 측정한다.
본 발명은, 대략적으로 하기 위치에서 특징적인 X선 분말 회절 피크 (Cu Kα선 조사, °2θ로 표시)들을 적어도 나타내는, 식 A의 화합물의 고체 형태 (형태 1)를 제공한다:
(1) 6.7, 9.5, 11.0, 13.3, 및 17.3; 또는
(2) 6.7, 8.2, 9.5, 11.0, 13.3, 15.6, 및 17.3; 또는
(3) 6.7, 8.2, 9.5, 11.0, 13.3, 14.5, 15.6, 17.3, 및 20.5.
용어 "대략적으로"는 그 맥락에서 °2θ± 0.3 (°2θ로 표시), 바람직하게는 ± 0.2 (°2θ로 표시)로 측정값에 불확정성이 존재한다는 의미이다.
또한, 본 발명은, 대략적으로 6.7, 8.2, 9.5, 11.0, 13.3, 13.7, 14.5, 15.6, 17.3, 19.1, 및 20.5에서 특징적인 피크들 (°2θ로 표시)을 포함하는 X선 분말 회절 패턴을 가진, 식 A의 화합물의 고체 형태 (형태 1)를 제공한다.
또한, 본 발명은 도 1에 도시된 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 가진, 식 A의 화합물의 고체 형태 (형태 1)를 제공한다.
고체 형태의 X선 분말 회절 패턴은 도면에 도시된 것과 "실질적으로" 동일한 것으로 본원에 기술될 수 있다. X선 분말 회절 패턴에서 피크들은 그 위치와 상대적인 세기가 당해 기술 분야의 당업자들에게 공지된 다양한 요인으로 인해 약간 변동될 수 있는 것으로 이해될 것이다. 예를 들어, 패턴의 피크들의 상대적인 세기 또는 피크 위치들의 변동이, 사용 장치, 샘플 준비 방법, 바람직한 패킹 및 오리엔테이션, 방사선 소스 및 데이터 수집 방법 및 길이에 따라 생길 수 있다. 그러나, 당해 기술 분야의 당업자라면 본원의 도면에 도시된 X선 분말 회절 패턴을 미지의 고체 형태와 비교하여 고체 형태의 정체를 확인할 수 있을 것이다.
본 발명은 대략적으로 하기 위치에서 특징적인 X선 분말 회절 피크 (Cu Kα선 조사, °2θ로 표시)들을 적어도 나타내는, 식 A의 화합물의 염산염의 고체 형태 (형태 2)를 제공한다:
(1) 7.3, 8.6, 11.6, 14.3, 및 16.2; 또는
(2) 7.3, 8.6, 11.6, 13.5, 14.3, 16.2, 및 18.3; 또는
(3) 7.3, 8.6, 11.2, 11.6, 13.5, 14.3, 14.7, 16.2, 및 18.3.
또한, 본 발명은 대략적으로 7.3, 7.8, 8.6, 11.2, 11.6, 13.5, 14.3, 14.7, 16.2, 17.2, 17.7, 및 18.3에서 특징적인 피크들 (°2θ로 표시)을 포함하는 X선 분말 회절 패턴을 가진, 식 A의 화합물의 염산염의 고체 형태 (형태 2)를 제공한다.
또한, 본 발명은 도 3에 도시된 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 가진, 식 A의 화합물의 염산염의 고체 형태 (형태 2)를 제공한다.
본 발명은 대략적으로 하기 위치에서 특징적인 X선 분말 회절 피크 (Cu Kα선 조사, °2θ로 표시)들을 적어도 나타내는, 식 A의 화합물의 황산염의 고체 형태 (형태 3)를 제공한다:
(1) 4.7, 6.4, 9.1, 15.1, 및 16.4; 또는
(2) 4.7, 6.4, 9.1, 15.1, 16.4, 18.4, 및 19.5.
또한, 본 발명은 대략적으로 4.7, 6.4, 9.1, 12.8, 15.1, 16.4, 18.4, 18.8, 및 19.5에서 특징적인 피크들 (°2θ로 표시)을 포함하는 X선 분말 회절 패턴을 가진, 식 A의 화합물의 황산염의 고체 형태 (형태 3)를 제공한다.
또한, 본 발명은 도 4에 나타낸 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 가진, 식 A의 화합물의 황산염의 고체 형태 (형태 3)를 제공한다.
당해 기술 분야의 당업자라면 XRPD 패턴을 측정하는 기법에 익숙하다. 특히, 화합물 샘플의 X선 분말 회절 패턴은 하기 실험 조건에서 Philips X-Pert MPD 회절기로 기록할 수 있다:
스캔 파라미터:
스캔 축: 고니오(Gonio)
시작 위치 [°2θ]: 4.0084
종료 위치 [°2θ]: 39.9804
스텝 크기 [°2θ]: 0.0170
스캔 스텝 시간 [s]: 10.1600
스캔 타입: 연속
PSD 모드: 스캐닝
PSD 길이 [°2θ]: 2.12
오프셋 [°2θ]: 0.0000
발산 슬릿 타입: 자동
조사 길이 [mm] 10.00
시료 길이 [mm]: 10.00
측정 온도 [℃]: 25.00
애노드 물질: Cu
K-α1 [Å]: 1.54060
K-α2 [Å]: 1.54443
K-A2 / K-A1 비: 0.50000
제너레이터 설정: 40 mA, 40 kV
회절계 타입: 0000000011038600
회절계 번호: 0
고니오미터 반경 [mm]: 240.00
Dist. Focus-발산 슬릿 [mm]: 100.00
입사빔 모노크로메이터: X
스피닝: O
샘플: 분석 샘플 약 5 mg을 XRPD zero 백그라운드 싱글 사선 컷 실리카 샘플 홀더에서 가볍게 압축.
본 발명은 STA 서모그래프에서 164 ± 3℃, 바람직하게는 164 ± 2℃, 더 바람직하게 164 ± 1℃에서 흡열 피크를 나타내는, 식 A의 화합물의 고체 형태 (형태 1)를 제공한다.
본 발명은 도 2에 도시된 것과 실질적으로 동일한 STA 서모그래프를 가지는, 식 A의 화합물의 고체 형태 (형태 1)를 제공한다.
당해 기술 분야의 당업자는 STA 서모그래프를 측정하는 기법에 익숙하다. 특히, 화합물 샘플의 STA 서모그래프는,
(a) 샘플 약 5 mg을 세라믹 도가니에서 칭량하고;
(b) 샘플을 Perkin-Elmer STA 600 TGA/DTA 분석기의 챔버에 주위 온도에서 로딩하고;
(c) 샘플을 10℃/분의 속도로 25℃에서 300℃까지 가열하고, 20 cm3/min 질소 퍼지를 수행하면서 샘플의 중량 변화 및 DTA 신호를 모니터링하여, 기록할 수 있다.
본 발명은 전술한 X선 분말 회절 패턴 및 전술한 STA 서모그래프를 가진, 식 A의 화합물의 고체 형태 (형태 1)를 제공한다.
본 발명의 고체 형태는 비-용매화된 형태 및 용매화된 형태 둘다로 존재할 수 있다. 용어 '용매화물'은 본 발명의 화합물과 소정량의 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 용매, 예를 들어, 에탄올을 포함하는 분자 복합체를 기술하기 위해 사용된다. 용어 '수화물'은 용매가 물일 경우에 사용된다.
본 발명은 본원에 기술된 식 A의 화합물의 고체 형태 및 이의 염의 용매화물 (예, 수화물)을 포괄한다.
본 발명의 일 측면에서, 식 A의 화합물의 형태 1은 용매화물 또는 수화물이 아니다.
본 발명의 일 측면에서, 식 A의 화합물의 형태 2는 이수화물이다.
본 발명의 일 측면에서, 식 A의 화합물의 형태 3은 일수화물이다.
또한, 특정 화합물에 대한 언급은 모든 동위원소 변이체를 포괄한다.
또한, 본 발명은, 용매 또는 용매 혼합물 중의 식 A의 화합물 용액으로부터 고체 형태를 결정화하는 것을 포함하는, 본 발명의 형태 1의 제조 방법을 포함한다. 용매 또는 용매 혼합물은 이소프로판올 (IPA)을 포함할 수 있다. 바람직하게는, 용매는 이소프로판올이다. 용매 또는 용매 혼합물 (예, 이소프로판올)에 식 A의 화합물을 첨가한 후, 조합한 혼합물 (화합물 + 용매(들))을 약 60-85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 70-85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 80-85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 80, 81, 82, 83, 84 또는 85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 82℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 환류 가열할 수 있다. 가열 후, 조합한 혼합물을 냉각시킬 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 0-40℃의 온도로 냉각할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 10-30℃의 온도로 냉각할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 실온으로 냉각할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 0℃로 냉각할 수 있다.
또한, 본 발명은, 이소프로판올 (IPA) 중의 식 A의 화합물 용액으로부터 고체 형태를 결정화하는 것을 포함하는, 식 A의 화합물의 고체 형태의 제조 방법을 포함한다. 이소프로판올에 식 A의 화합물을 첨가한 후, 조합한 혼합물 (화합물 + 이소프로판올)을 약 60-85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 70-85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 80-85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 80, 81, 82, 83, 84 또는 85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 82℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 환류 가열할 수 있다. 가열 후, 조합한 혼합물을 냉각시킬 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 0-40℃의 온도로 냉각할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 10-30℃의 온도로 냉각할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 실온으로 냉각할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 0℃로 냉각할 수 있다.
또한, 본 발명은, 이소프로판올 (IPA) 중의 식 A의 화합물 용액으로부터 고체 형태를 결정화하는 것을 포함하는 방법에 의해 수득가능한, 식 A의 화합물의 고체 형태를 포함한다. 이소프로판올에 식 A의 화합물을 첨가한 후, 조합한 혼합물 (화합물 + 이소프로판올)을 약 60-85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 70-85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 80-85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 80, 81, 82, 83, 84 또는 85℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 82℃의 온도로 가열할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 환류 가열할 수 있다. 가열 후, 조합한 혼합물을 냉각시킬 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 0-40℃의 온도로 냉각할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 10-30℃의 온도로 냉각할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 실온으로 냉각할 수 있다. 다른 구현예에서, 조합한 혼합물을 약 0℃로 냉각할 수 있다.
또한, 본 발명은 용매 또는 용매 혼합물 중의 식 A의 화합물의 염산염의 용액으로부터 고체 형태를 결정화하는 것을 포함하는, 본 발명의 형태 2의 제조 방법을 포함한다. 선택적으로, 식 A의 화합물의 염산염의 용액은 용매 또는 용매 혼합물 중의 식 A의 화합물의 용액 또는 현탁액에 염산을 첨가함으로써 제조할 수 있다.
또한, 본 발명은 용매 또는 용매 혼합물 중의 식 A의 화합물의 황산염의 용액으로부터 고체 형태를 결정화하는 것을 포함하는, 본 발명의 형태 3의 제조 방법을 포함한다. 선택적으로, 식 A의 화합물의 황산염의 용액은 용매 또는 용매 혼합물 중의 식 A의 화합물의 용액 또는 현탁액에 황산을 첨가함으로써 제조할 수 있다.
또한, 본 발명의 방법은 본 발명의 고체 형태의 결정 시드 (crystalline seed)를 첨가하는 것을 포함할 수 있다.
일 측면에서, 본 발명은 본 발명에 따른 방법으로 제조하였을 때 본 발명의 고체 형태를 제공한다.
전술한 바와 같이, 본 발명의 고체 형태는 다수의 치료학적 용도, 특히 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태의 치료에 있어 다수의 치료학적 용도를 가진다.
이에, 본 발명은 테라피에 사용하기 위한 전술한 식 A의 화합물의 고체 형태 및 그 염을 제공한다. 바람직하게는 고체 형태는 형태 1이다.
또한, 본 발명은 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어, 전술한 식 A의 화합물의 고체 형태 및 그 염의 용도를 제공한다. 바람직한 구현예에서, 고체 형태는 형태 1이다.
또한, 본 발명은 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태를 치료하는 방법에 사용하기 위한 식 A의 화합물의 고체 형태 및 그 염을 제공한다. 바람직한 구현예에서, 고체 형태는 형태 1이다.
또한, 본 발명은 전술한 식 A의 화합물의 고체 형태 및 그 염을 치료학적 유효량으로 치료가 필요한 포유류에게 투여하는 것을 포함하는, 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태의 치료 방법을 제공한다. 바람직한 구현예에서, 고체 형태는 형태 1이다.
일 측면에서, 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태는 시력 손상, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 혈관 투과성, 당뇨병성 황반 부종, 유전성 혈관 부종, 망막 정맥 폐쇄, 당뇨병, 췌장염, 뇌 출혈, 신장병증, 심근증, 신경병증, 염증성 장 질환, 관절염, 염증, 패혈증 쇼크, 저혈압, 암, 성인 호흡 곤란 증후군, 파종성 혈관내 응고, 심폐 우회술 중의 혈액 응고, 및 외과 수술 후 출혈로부터 선택된다. 바람직한 구현예에서, 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태는 당뇨병성 황반 부종이다. 다른 바람직한 구현예에서, 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태는 유전성 혈관 부종이다.
대안적으로, 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태는 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 혈관 투과성, 당뇨병성 황반 부종 및 유전성 혈관 부종으로부터 선택될 수 있다. 대안적으로, 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태는 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 혈관 투과성 또는 당뇨병성 황반 부종일 수 있다. 식 A의 화합물 및 그 염의 고체 형태는 환자의 눈 부위에 주입하기에 적합한 형태, 특히 유리체강내 주입 (intra-vitreal injection)에 적합한 형태로 투여할 수 있다.
본 발명의 맥락에서, 본원의 "치료"에 대한 언급은 구체적으로 반하는 것으로 언급되지 않은 한 근치적 (curative), 고식적 (palliative) 또는 예방적 치료에 대한 언급을 포괄한다. 용어 "테라피", "치료학적" 및 "치료학적으로"는 동일한 방식으로 해석되어야 한다.
본 발명의 고체 형태는 단독으로 투여되거나, 또는 하나 이상의 다른 약물과 조합하여 투여될 수 있다. 일반적으로, 하나 이상의 약제학적으로 허용가능한 부형제와 조합된 제형으로서 투여될 것이다. 용어 "부형제"는 본원에서 제형에 기능성 (즉, 약물 방출 속도 제어) 및/또는 비-기능성 (즉, 가공 보조제 또는 희석제) 특징을 부여할 수 있는 본 발명의 화합물(들) 이외의 임의의 성분을 지칭한다. 부형제의 선정은 구체적인 투여 방식, 부형제가 용해성 및 안정성에 미치는 효과 및 투약 형태의 특성 등의 인자에 따라 크게 달라질 것이다.
다른 측면에서, 본 발명의 화합물은 망막의 레이저 치료와 조합하여 투여될 수 있다. 당뇨병성 황반 부종을 치료하기 위한 VEGF 저해제의 유리체강내 주입과 레이저 치료의 조합이 공지되어 있다 (Elman M, Aiello L, Beck R, et al. "Randomized trial evaluating ranibizumab plus prompt or deferred laser or triamcinolone plus prompt laser for diabetic macular edema". Ophthalmology. 27 April 2010).
본 발명의 고체 형태를 전달하는데 적합한 약학적 조성물 및 이의 제조 방법은 당해 기술 분야의 당업자라면 자명할 것이다. 이러한 조성물과 제조 방법은 예를 들어 Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995)에서 확인할 수 있다.
인간 환자에게 투여하는 경우, 본 발명의 고체 형태의 1일 총 투여량 (total daily dose)은 물론 투여 방식에 따라, 전형적으로 0.1 mg - 10,000 mg, 또는 1 mg - 5000 mg, 또는 10 mg - 1000 mg의 범위이다. 유리체강내 주입에 의해 투여되는 경우, 눈 당 0.0001 mg (0.1 ㎍) - 0.2 mg (200 ㎍) 또는 0.0005 mg (0.5 ㎍) - 0.05 mg (50 ㎍)의 더 낮은 투여량이 고려된다.
1일 총 투여량은 1회 투여로 또는 분할 투여로 투여할 수 있으며, 의사의 재량에 따라 본원에 주어진 전형적인 범위를 벗어날 수도 있다. 이러한 투여량은 체중 약 60 kg - 70 kg의 평균 인간 개체를 기준으로 한다. 의사는 유아 또는 노년층 등의 이러한 범위에서 벗어난 개체에 대해서도 투여량을 쉽게 결정할 수 있을 것이다.
이에, 본 발명은 전술한 식 A의 화합물의 고체 형태, 및 약제학적으로 허용가능한 담체, 희석제 및/또는 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다. 바람직한 구현예에서, 고체 형태는 형태 1이다. 전술한 식 A의 화합물의 고체 형태에 대한 언급이 전술한 유리 염기 및 이의 염 둘다를 포함하는 것으로 이해될 것이다.
약학적 조성물은, 예를 들어, 눈-점적제, 크림제, 용액제, 현탁제, 헵타플루오로알칸 (HFA) 에어로졸제 및 건조 분말 제형 형태로, 국소적으로 (예, 눈, 피부 또는 폐 및/또는 기도) 투여될 수 있거나; 또는, 전신으로, 예를 들어, 정제, 캡슐제, 시럽제, 산제 또는 과립제 형태의 경구 투여에 의해; 또는 용액제 또는 현탁제 형태로 비경구 투여에 의해; 또는 피하 투여에 의해; 또는 좌제 형태로 직장 투여에 의해; 또는 경피적으로 투여될 수 있다. 다른 구현예에서, 약학적 조성물은 현탁제, 정제, 캡슐제, 산제, 과립제 또는 좌제의 형태이다.
본 발명의 일 구현예에서, 활성 성분은 경구로 투여된다. 경구 투여는 연하 작용 (swallowing)을 수반할 수 있으며, 그래서 화합물이 위장관으로 들어가거나, 및/또는 화합물이 입에서 직접 혈류로 유입되는 볼, 혀 또는 설하 투여를 수반할 수 있다.
경구 투여에 적합한 제형으로는 고체 플러그 (solid plug), 고체 미세입자, 반고체 및 액체 (다중상 (multiple phases) 또는 분산된 시스템), 예를 들어 정제; 멀티- 또는 나노-입자, 액체, 에멀젼 또는 산제를 함유한 연질 또는 경질 캡슐제; 로젠제 (액체-충전된 제형 포함); 츄잉제; 겔제; 신속 분산형 투약 형태; 필름제; 질좌제 (ovules); 스프레이제 및 볼/점막점착 패치 등이 있다.
액체 (다중상 및 분산된 시스템 포함) 제형으로는 에멀젼, 현탁제, 용액제, 시럽제 및 엘릭서제 등이 있다. 이들 제형은 연질 또는 경질 캡슐제에 충진제로서 제공될 수 있다. 또한, 액체 제형은 예를 들어 사셰 (sachet)의 고체를 재구성함으로써 제조될 수도 있다.
본 발명의 고체 형태는 또한 Liang and Chen, Expert Opinion in Therapeutic Patents, 2001, 11 (6), 981-986에 기술된 등의 신속-용해형, 신속-붕해형 투약 형태로 사용할 수 있다.
정제 제형은 H. Lieberman and L. Lachman의 Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1 (Marcel Dekker, New York, 1980)에 기술되어 있다.
본 발명은 하기 비-제한적인 실시예들을 들어 설명될 것이다. 실시예에서, 하기 도면들이 제시된다:
도 1: 식 A의 화합물의 형태 1 (실시예 1)의 X선 분말 회절 패턴.
도 2: 식 A의 화합물의 형태 1 (실시예 1)의 STA.
도 3: 식 A의 화합물의 염산염의 형태 2 (실시예 2)의 X선 분말 회절 패턴.
도 4: 식 A의 화합물의 황산염의 형태 3 (실시예 3)의 X선 분말 회절 패턴.
일반적인 실험 내용
하기 실시예들에서, 다음과 같은 약어 및 정의가 사용된다:
aq 수용액
DCM 다이클로로메탄
DMF N,N-다이메틸포름아미드
DMSO 다이메틸 설폭사이드
DSC 시차 주사 열량 측정법
EtOAc 에틸 아세테이트
HATU 2-(3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-b]피리딘-3-일)-1,1,3,3-테트라메틸이소우로늄 헥사플루오로포스페이트(V)
hrs 시간
HOBt 하이드록시벤조트리아졸
IPA 2-프로판올 / 프로판-2-올 / 이소-프로판올
LCMS 액체 크로마토그래피 질량 분석법
Me 메틸
MeCN 아세토니트릴
MeOH 메탄올
min 분
MS 질량 스펙트럼
NMR 핵 자기 공명 스펙트럼 - NMR 스펙트럼은 달리 언급되지 않은 한 진동수 400MHz에서 기록함
Pet. Ether 60-80℃에서 끓는 페트롤륨 에테르 분획
Ph 페닐
STA 동시적인 열 분석
SWFI 멸균 주사용수
rt 실온
THF 테트라하이드로푸란
TFA 트리플루오로아세트산
XRPD X선 분말 회절
모든 반응은 달리 언급되지 않은 한 질소 분위기 하에 수행하였다.
1H NMR 스펙트럼은 중수소 용매를 기준 물질로 사용하여 실온에서 Bruker (400MHz) 또는 JEOL (400MHz) 스펙트로미터에서 기록하였다.
분자 이온은, Chromolith Speedrod RP-18e 컬럼, 50 x 4.6 mm를 이용해 13분간 10% -> 90% 0.1% HCO2H/MeCN에서 0.1% HCO2H/H2O로의 선형 농도 구배로 유속 1.5 mL/min으로 수행하여 LCMS에서, 또는 4분간 Agilent, X-Select, 산성, 5-95% MeCN/물을 이용하여 수득하였다. 데이터는 Thermofinnigan Surveyor LC 시스템과 연계하여 전자분무 이온화와 Thermofinnigan Surveyor MSQ 질량 분광측정기를 이용해 수집하였다.
다른 예로, 분자 이온은, Agilent Poroshell 120 EC-C18 (2.7㎛, 3.0 x 50mm) 컬럼을 사용하고, 0.1% v/v 포름산/물 [용리제 A]; MeCN [용리제 B]; 유속 0.8mL/min; 샘플 사이의 평형화 시간 1.5분 및 하기 농도 구배를 적용하여 수행한, LCMS에서 수득하였다. 질량 검출은 API 2000 질량 분광측정기 (전자분무)로 수행하였다.
농도구배:
시간 (분) 용리제 A ( % ) 용리제 B ( % )
0.00 95 5
0.20 95 5
2.00 5 95
3.00 5 95
3.25 95 5
3.50 95 5
산물을 플래쉬 크로마토그래피로 정제하는 경우, '실리카'는 크로마토그래피용 실리카 겔, 0.035 내지 0.070 mm (220 내지 440 mesh) (예, Merck silica gel 60)을 지칭하며, 질소를 최대 10 p.s.i의 압력으로 적용하여 칼럼 용출을 가속화하였다. 역상 분취용 HPLC 정제는 Waters 2996 포토다이오드 어레이 검출기를 이용하고 전형적으로 유속 20 mL/min으로 Waters 2525 바이너리 농도 구배 펌핑 시스템을 사용해 수행하였다.
용매와 시판 시약 모두 제공받은 그대로 사용하였다.
화합물의 명칭은 MDL Information Systems 사의 ISIS 드로우 패키지의 일부로 제공되는 Autonom 소프트웨어, 또는 MarvinSketch의 일부로서 또는 IDBS E-WorkBook의 일부로서 제공되는 Chemaxon 소프트웨어를 사용해 생성하였다.
X선 분말 회절 패턴은 Philips X-Pert MPD 회절기에서 수집하고, 하기 실험 조건을 이용해 분석하였다:
스캔 파라미터:
스캔 축: 고니오
시작 위치 [°2θ]: 4.0084
종료 위치 [°2θ]: 39.9804
스텝 크기 [°2θ]: 0.0170
스캔 스텝 시간 [s]: 10.1600
스캔 타입: 연속
PSD 모드: 스캐닝
PSD 길이 [°2θ]: 2.12
오프셋 [°2θ]: 0.0000
발산 슬릿 타입: 자동
조사 길이 [mm] 10.00
시료 길이 [mm]: 10.00
측정 온도 [℃]: 25.00
애노드 물질: Cu
K-α1 [Å]: 1.54060
K-α2 [Å]: 1.54443
K-A2 / K-A1 비: 0.50000
제너레이터 설정: 40 mA, 40 kV
회절계 타입: 0000000011038600
회절계 번호: 0
고니오미터 반경 [mm]: 240.00
Dist. Focus-발산 슬릿 [mm]: 100.00
입사빔 모노크로메이터: X
스피닝: O
분석 샘플 약 5 mg을 XRPD 제로 백그라운드 싱글 경사 절단된 실리카 샘플 홀더에서 가볍게 압착하였다. 그런 후, 샘플을 분석을 위해 회절기에 로딩하였다.
동시적인 열 분석 (STA) 데이터는 다음과 같은 방법으로 수집하였다: 샘플 약 5 mg을 세라믹 도가니에서 정확하게 칭량하고, 이를 주위 온도에서 Perkin-Elmer STA 600 TGA/DTA 분석기의 챔버에 넣었다. 그런 후, 샘플을 10℃/min의 속도로, 전형적으로 25℃에서 300℃까지 가열하였으며, 이때 중량 변화와 DTA 신호를 모니터링하였다. 사용한 퍼지 가스는 유속 20 cm3/min의 질소였다.
합성예
실시예 1 - N-[(3- 플루오로 -4- 메톡시피리딘 -2-일) 메틸 ]-1-({4-[(2- 옥소피리딘 -1-일)메틸]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드의 형태 1
3- 플루오로 -4- 메톡시 -피리딘-2- 카르보니트릴
대형 마이크로웨이브 바이얼에서, DMF (5 mL) 중의 2-브로모-3-플루오로-4-메톡시피리딘 (1 g, 4.9 mmol) 용액에 시아노구리 (1.304 g, 14.6 mmol)를 첨가하였다. 반응 바이얼을 밀봉하여, 6시간 동안 100℃로 가열하였다. 반응 혼합물을 물 (20 mL) 및 EtOAc (20 mL)로 희석하였다. 걸쭉한 현탁액에 초음파를 처리하고, 석출된 고형물을 파괴하기 위해 초음파를 처리하면서 물 (40 mL)과 EtOAc (2 x 50 mL)를 추가로 첨가하였다. 층을 조합하여 셀라이트 플러그를 통해 여과하고, 유기층을 분리하여 브린 (50 mL)으로 헹군 후 MgSO4 상에서 건조, 여과 및 감압 하 용매 제거를 수행하여, 3-플루오로-4-메톡시-피리딘-2-카르보니트릴로서 식별되는 옅은 녹색 고형물 (100 mg, 0.58 mmol, 12 %의 수율)을 수득하였다.
(3- 플루오로 -4- 메톡시 -피리딘-2- 일메틸 )-카르밤산 tert -부틸 에스테르
3-플루오로-4-메톡시-피리딘-2-카르보니트릴 (100 mg, 0.58 mmol)을 무수 MeOH (10 mL, 247 mmol)에 용해하고, 니켈 클로라이드 6수화물 (14 mg, 0.058 mmol)을 첨가한 후 다이-tert-부틸 다이카보네이트 (255 mg, 1.16 mmol)를 첨가하였다. 제조된 옅은 녹색 용액을 얼음-염 조에서 -5℃로 냉각시킨 다음 반응 온도를 ~0℃로 유지하면서 소듐 보로하이드라이드 (153 mg, 4.1 mmol)를 첨가하였다. 담갈색 용액을 0℃에서 교반하고 서서히 rt까지 승온시킨 후 3시간 동안 rt에서 교반하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 증발시켜 건조하여 검정색 잔사를 수득하였으며, 이는 DCM (10 mL)으로 희석하여 소듐 하이드로겐 카보네이트 (aq) (10 mL)로 헹구었다. 형성된 에멀젼에서 상 분리 카트리지를 통해 유기상을 분리하여, 농축하였다. 액체 조산물을 크로마토그래피에서 EtOAc/이소-헥산으로 용출시켜 정제하여, 맑은 노란색 오일로서 (3-플루오로-4-메톡시-피리딘-2-일메틸)-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (108 mg, 62% 수율)를 수득하였다.
[MH]+ = 257
(3-플루오로-4- 메톡시 -피리딘-2-일)-메틸아민 다이염산염
(3-플루오로-4-메톡시-피리딘-2-일메틸)-카르밤산 tert-부틸 에스테르 (108 mg, 0.36 mmol)를 이소-프로필 알코올 (1 mL) 중에 취한 다음 여기에 HCl (6N/이소프로필 알코올) (1 mL, 0.58 mmol)을 rt에서 첨가하여, 2시간 동안 40℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 감압하 농축한 다음 다이에틸 에테르로 트리투레이션하고 초음파 처리하여, (3-플루오로-4-메톡시-피리딘-2-일)-메틸아민 다이염산염으로서 식별되는 크림색 고형물 (75 mg, 55%의 수율)을 수득하였다.
[MH]+ = 157
1-(4- 클로로메틸 - 벤질 )-3- 트리플루오로메틸 -1H- 피라졸 -4-카르복시산 에틸 에스테르
폴리머-지지된 (polymer-supported) 트리페닐포스핀 (3.0mmol/g, 1.0g)을 THF/DCM (1:1, 100 mL) 중에서 팽윤시켰다. 질소 분위기 하에, 에틸 3-트리플루오로메틸-1H-피라졸-4-카르복실레이트 (1.0 g, 4.8 mmol) 및 4-(클로로메틸)벤질알코올 (903 mg, 5.8 mmol)을 첨가한 다음, THF/DCM (1:1, 10 mL) 중의 다이이소프로필 아조다이카르복실레이트 (1.46 g, 7.2 mmol) 용액을 30분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 rt에서 18시간 교반한 다음 혼합물을 여과하고, 수지를 DCM/MeOH (15 mL)로 3회 사이클로 헹구었다. 여과물을 조합하여 진공 증발시켰다. 주 산물 2종을 플래쉬 크로마토그래피 (실리카)에 의해 용리제 20% EtOAc, 80% Pet Ether를 사용해 분리하여, 무색 백색 고형물을 수득하였다. 용출된 2번째 산물이 표제 화합물로서 식별되었다 (790 mg, 47%).
[MH]+ = 347.1
1-[4-(2-옥소-2H-피리딘-1- 일메틸 )- 벤질 ]-3- 트리플루오로메틸 -1H- 피라졸 -4-카르복시산 에틸 에스테르
1-(4-클로로메틸-벤질)-3-트리플루오로메틸-1H-피라졸-4-카르복시산 에틸 에스테르 (790mg, 2.3 mmol)를 아세톤 (150 mL)에 용해하였다. 2-하이드록시피리딘 (260 mg, 2.7 mmol) 및 K2CO3 (945mg, 6.8 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 3시간 동안 50℃에서 교반한 다음 용매를 진공 제거하였다. 잔사를 EtOAc (100 mL) 중에 취하여 물 (1x 30mL), 브린 (1x 30mL)으로 헹군 후, 건조 (Na2SO4)하고 진공 증발시켰다. 잔사를 플래쉬 크로마토그래피 (실리카)에서 용리제 3% MeOH, 97% CHCl3를 사용해 정제하여, 표제 화합물로서 식별되는 무색 오일 (670mg, 1.7 mmol)을 수득하였다.
[M+H]+ = 406.2
1-[4-(2-옥소-2H-피리딘-1- 일메틸 )- 벤질 ]-3- 트리플루오로메틸 -1H- 피라졸 -4-카르복시산
1-[4-(2-옥소-2H-피리딘-1-일메틸)-벤질]-3-트리플루오로메틸-1H-피라졸-4-카르복시산 에틸 에스테르 (670 mg, 1.7 mmol)를 THF (50 mL) 및 물 (5 mL)에 용해하고, 리튬 하이드록사이드 (19 8mg, 8.3 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 18시간 교반한 후, 용매를 진공 농축하고, 잔사를 EtOAc (50 mL) 중에 취하였다. 수층을 분리하고, 1M HCl을 첨가하여 pH2로 산성화한 다음 CHCl3 (3x 50 mL)로 추출하였다. 조합한 유기 추출물을 물 (1x 30 mL), 브린 (1x 30 mL)으로 헹구고, 건조 (Na2SO4), 여과 및 진공 증발하여, 표제 화합물로서 동정되는 백색 고형물 (580mg, 1.5 mmol, 93%)을 수득하였다.
[M+H]+ = 378.2
N-[(3- 플루오로 -4- 메톡시피리딘 -2-일) 메틸 ]-1-({4-[(2- 옥소피리딘 -1-일) 메틸 ]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드
1-[4-(2-옥소-2H-피리딘-1-일메틸)-벤질]-3-트리플루오로메틸-1H-피라졸-4-카르복시산 (150 mg, 0.4 mmol)을 DCM (30mL)에 용해하였다. N,N,N',N''-테트라메틸-O-(1H-벤조트리아졸-1-일)우로늄 헥사플루오로포스페이트 (181mg, 0.48 mmol) 및 N,N-다이이소프로필에틸아민 (77 mg, 0.6 mmol)을 rt에서 첨가하였다. 20분 후, (3-플루오로-4-메톡시-피리딘-2-일)메틸아민 (68mg, 0.44mmol)을 첨가하여, 반응 혼합물을 rt에서 18시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 CHCl3 (50 mL)로 희석하고, 이 용액을 NaHCO3 포화 수용액 (1x 30mL), 물 (1x 30mL), 브린 (1x 30mL)으로 헹군 다음 건조 (Na2SO4) 및 진공 증발하여, 노란색 오일을 수득하였다. 잔사를 플래쉬 크로마토그래피 (실리카)에서 용리제 3% MeOH, 97% CHCl3를 사용해 정제하고, 진공 농축하여, 표제 화합물의 형태 1로서 식별되는 백색 고형물 (116mg, 0.23 mmol, 57%)을 수득하였다.
[M+H]+ = 516.3
1H NMR (d6-DMSO, 400MHz) δ 3.92 (3H, s), 4.49 (2H, dd, J = 5.6, 2.0Hz), 5.08 (2H, s), 5.40 (2H, s), 6.21-6.24 (1H, m), 6.40 (1H, d, J = 9.0Hz), 7.16-7.25 (1H, m), 7.29 (4H, s), 7.39-7.43 (1H, m), 7.76 (1H, dd, J = 6.8, 2.0Hz), 8.21 (1H, d, J = 5.5Hz), 8.44 (1H, s), 8.70 (1H, t, J = 5.4Hz) ppm.
형태 1의 XRPD 회절도는 도 1에 도시한다.
피크 위치 표:
No. 위치 [ °2θ ] 높이 [cts] 상대적인 세기 [ % ]
1 6.7 67.7 10.9
2 8.2 57.3 9.2
3 9.5 112.9 18.2
4 11.0 74.5 12.0
5 11.6 29.5 4.8
6 13.3 308.9 49.7
7 13.7 114.4 18.4
8 14.5 94.8 15.3
9 15.6 151.8 24.4
10 17.3 621.2 100.0
11 18.8 98.4 15.8
12 19.1 205.9 33.1
13 19.7 65.4 10.5
14 20.0 64.9 10.5
15 20.5 218.4 35.2
16 21.3 89.2 14.4
17 22.1 101.5 16.4
18 22.9 261.3 42.1
19 23.9 219.7 35.4
20 24.3 262.8 42.3
21 24.5 281.2 45.3
22 25.2 129.1 20.8
23 25.7 126.8 20.4
24 26.2 79.3 12.8
25 27.7 115.0 18.5
26 28.2 92.2 14.8
27 29.1 85.0 13.7
28 29.6 58.6 9.4
29 31.5 73.9 11.9
30 33.1 15.4 2.5
31 34.0 17.0 2.7
32 34.8 28.9 4.7
33 36.4 47.6 7.7
34 38.2 12.9 2.1
동시적인 열 분석 ( STA )
형태 1의 STA 데이터는 도 2에 도시한다.
실시예 2 - N-[(3- 플루오로 -4- 메톡시피리딘 -2-일) 메틸 ]-1-({4-[(2- 옥소피리딘 -1-일)메틸]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드 하이드로클 로라이드의 형태 2
아세토니트릴 (100 ㎕) 중의 N-[(3-플루오로-4-메톡시피리딘-2-일)메틸]-1-({4-[(2-옥소피리딘-1-일)메틸]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드 (10 mg) 현탁액에, 5M 염산(aq) 1.1 당량 (4.3 ㎕)을 첨가하였다. 혼합물을 잘 혼합하고, 18-24시간 동안 주위 온도와 40℃에서 온도 사이클링을 수행하였다. 용매를 질소 하에 증발시키고, 잔사를 진공 하에 24시간 동안 40℃에서 건조하여, N-[(3-플루오로-4-메톡시피리딘-2-일)메틸]-1-({4-[(2-옥소피리딘-1-일)메틸]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드 하이드로클로라이드의 형태 2를 수득하였다.
형태 2의 XRPD 회절도는 도 3에 도시한다.
피크 위치 표:
No. 위치 [° 2θ ] 높이 [cts] 상대적인 세기 [ % ]
1 4.3 43.4 15.7
2 5.4 21.8 7.9
3 7.3 201.8 72.8
4 7.7 60.1 21.7
5 7.8 64.4 23.2
6 8.6 179.3 64.7
7 9.2 25.2 9.1
8 9.9 38.8 14.0
9 11.2 138.4 49.9
10 11.6 178.6 64.4
11 12.3 7.9 2.9
12 13.5 121.7 43.9
13 13.9 63.5 22.9
14 14.3 172.2 62.1
15 14.7 113.7 41.0
16 15.3 20.0 7.2
17 16.2 200.1 72.2
18 17.2 176.8 63.8
19 17.7 218.0 78.6
20 18.3 277.3 100.0
21 18.8 130.8 47.2
22 19.8 151.3 54.6
23 20.0 110.9 40.0
24 20.3 55.3 20.0
25 20.9 80.2 28.9
26 21.4 49.5 17.9
27 21.7 171.5 61.8
28 22.1 74.4 26.8
29 22.7 124.7 45.0
30 23.1 33.3 12.0
31 23.5 48.9 17.6
32 24.2 99.1 35.8
33 24.7 176.3 63.6
34 25.3 109.4 39.5
35 26.1 177.4 64.0
36 26.6 122.4 44.2
37 26.9 100.4 36.2
38 28.0 156.0 56.3
39 29.5 93.1 33.6
40 29.8 76.8 27.7
41 30.5 100.9 36.4
42 31.4 49.9 18.0
43 31.8 31.4 11.3
44 32.3 24.2 8.7
45 32.8 16.3 5.9
46 34.2 52.3 18.9
47 34.9 52.8 19.0
48 35.9 92.0 33.2
49 37.1 26.0 9.4
50 37.9 17.8 6.4
실시예 3 - N-[(3- 플루오로 -4- 메톡시피리딘 -2-일) 메틸 ]-1-({4-[(2- 옥소피리딘 -1-일)메틸]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드 설페이트의 형태 3
아세토니트릴 (100 ㎕) 중의 N-[(3-플루오로-4-메톡시피리딘-2-일)메틸]-1-({4-[(2-옥소피리딘-1-일)메틸]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드 (7 mg) 현탁액에 5M 황산(aq) 1.1 당량 (4.3 ㎕)을 첨가하였다. 혼합물을 잘 혼합하고, 18-24시간 동안 주위 온도와 40℃에서 온도 사이클링을 수행하였다. 용매를 질소 하에 증발시키고, 잔사를 진공 하에 24시간 동안 40℃에서 건조하여, N-[(3-플루오로-4-메톡시피리딘-2-일)메틸]-1-({4-[(2-옥소피리딘-1-일)메틸]페닐}메틸)-3-(트리플루오로메틸)피라졸-4-카르복사미드 설페이트의 형태 3을 수득하였다.
형태 3의 XRPD 회절도는 도 4에 도시한다.
피크 위치 표:
No. 위치 [ °2θ ] 높이 [cts] 상대적인 세기 [ % ]
1 4.7 84.1 37.8
2 6.4 106.5 47.8
3 8.5 14.6 6.5
4 9.1 73.9 33.2
5 10.9 12.9 5.8
6 12.8 40.4 18.1
7 13.9 38.5 17.3
8 15.1 222.7 100.0
9 15.9 32.1 14.4
10 16.4 132.8 59.6
11 17.9 37.6 16.9
12 18.4 125.5 56.4
13 18.8 123.3 55.3
14 19.5 165.9 74.5
15 20.1 32.5 14.6
16 20.6 47.1 21.2
17 21.8 78.1 35.1
18 22.5 53.5 24.0
19 22.8 90.1 40.4
20 23.5 109.7 49.3
21 23.9 84.6 38.0
22 24.2 136.9 61.5
23 25.2 190.1 85.4
24 25.5 176.0 79.0
25 27.3 74.4 33.4
26 28.3 37.4 16.8
27 29.0 13.8 6.2
28 30.3 43.9 19.7
29 38.3 11.0 5.0
생물학적 방법
식 A의 화합물의 혈장 칼리크레인 저해력을 아래 생물학적 분석을 이용하여 측정할 수 있다. 기준 화합물, WO2016/083820의 실시예 41 (N-[(3-플루오로-4-메톡시피리딘-2-일)메틸]-3-(메톡시메틸)-1-({4-[(2-옥소피리딘-1-일)메틸]페닐}메틸)피라졸-4-카르복사미드)에 대한 데이터 역시 비교 목적으로 제공된다.
혈장 칼리크레인에 대한 IC 50 결정
시험관내 혈장 칼리크레인 저해 활성을 공개된 표준 방법을 이용하여 측정하였다 (예, Johansen et al., Int. J. Tiss. Reac. 1986, 8, 185; Shori et al., Biochem. Pharmacol., 1992, 43, 1209; Sturzebecher et al., Biol. Chem. Hoppe-Seyler, 1992, 373, 1025). 인간 혈장 칼리크레인 (Protogen)을 25℃에서 형광 기질 H-DPro-Phe-Arg-AFC 및 다양한 농도의 시험 화합물과 함께 인큐베이션하였다. 잔류 효소 활성 (반응의 개시 속도)을 410 nm에서의 광학 흡광도 변화를 측정함으로써 구하고, 시험 화합물의 IC50 값을 결정하였다.
본 분석으로 수득한 데이터는 표 1에 나타낸다.
화합물에서 관련 효소 KLK1에 대한 저해 활성을 추가적으로 스크리닝하였다. 화합물의 KLK1 저해력을 다음과 같은 생물학적 분석을 이용해 결정할 수 있다:
KLK1에 대한 IC 50 결정
시험관내 KLK1 저해 활성은 공개된 표준 방법을 이용하여 측정하였다 (예, Johansen et al., Int. J. Tiss. Reac. 1986, 8, 185; Shori et al., Biochem. Pharmacol., 1992, 43, 1209; Sturzebecher et al., Biol. Chem. Hoppe-Seyler, 1992, 373, 1025). 인간 KLK1 (Callbiochem)을 형광 기질 H-DVal-Leu-Arg-AFC 및 다양한 농도의 시험 화합물과 25℃에서 인큐베이션하였다. 잔류 효소 활성 (반응의 개시 속도)을 410 nm에서의 광학 흡광도의 변화를 측정함으로써 구하고, 시험 화합물의 IC50 값을 결정하였다.
본 분석으로 수득한 데이터는 표 1에 나타낸다.
또한, 관련 효소 FXIa에 대한 저해 활성을 화합물에서 스크리닝하였다. 화합물의 FXIa 저해력을 다음과 같은 생물학적 분석을 이용해 결정할 수 있다:
FXIa에 대한 저해성% 측정
공개된 표준 방법으로 시험관내 FXIa 저해 활성을 측정하였다 (예, Johansen et al., Int. J. Tiss. Reac. 1986, 8, 185; Shori et al., Biochem. Pharmacol., 1992, 43, 1209; Sturzebecher et al., Biol. Chem. Hoppe-Seyler, 1992, 373, 1025). 인간 FXIa (Enzyme Research Laboratories)를 형광 기질인 Z-Gly-Pro-Arg-AFC와 40 μM 시험 화합물 (또는 IC50을 결정하기 위해 다양한 농도의 시험 화합물)과 함께 25℃에서 인큐베이션하였다. 잔류 효소 활성 (반응의 개시 속도)을 410 nm에서의 광학 흡광도 변화를 측정함으로써 구하고, 시험 화합물의 IC50을 결정하였다.
본 분석으로 수득한 데이터는 표 1에 나타낸다.
또한 관련 효소 FXIIa의 저해 활성을 화합물에서 스크리닝하였다. 화합물의 FXIIa 저해력을 다음과 같은 생물학적 분석을 이용해 결정할 수 있다:
FXIIa에 대한 IC 50 결정
시험관내 팩터 XIIa 저해 활성을 공개된 표준 방법을 이용해 확인하였다 (예, Shori et al., Biochem. Pharmacol., 1992,43, 1209; Baeriswyl et al., ACS Chem. Biol., 2015, 10 (8) 1861; Bouckaert et al., European Journal of Medicinal Chemistry 110 (2016) 181). 인간 팩터 XIIa (Enzyme Research Laboratories)를 25℃에서 형광 기질 H-DPro-Phe-Arg-AFC 및 다양한 농도의 시험 화합물과 인큐베이션하였다. 잔류 효소 활성 (반응의 개시 속도)을 410 nm에서의 광학 흡광도 변화를 측정함으로써 구하고, 시험 화합물의 IC50을 결정하였다.
본 분석으로 수득한 데이터는 표 1에 나타낸다.
표 1
화합물 IC 50 (인간 PKal) nM IC 50 (인간 KLK1 ) nM IC 50 (인간 FXIa) nM 저해 % @ 40M (인간 FXIa) IC 50 (인간 FXIIa) nM
WO2016/083820의 실시예 41 3.3 >40,000 >40,000 0 >40,000
식 A의 화합물 3.2 >4000 >40,000 2 >4,000
효소 선택성 결정
적절한 형광성 기질을 사용해 인간 세린 프로테아제 효소 플라스민, 트롬빈 및 트립신에 대해 효소 활성을 분석하였다. 5분간 기질로부터 방출되는 형광 누적을 모니터링함으로써 프로테아제 활성을 측정하였다. 분당 선형적인 형광 증가율을 활성 퍼센트 (%)로 표시하였다. 각 기질 절단에 대한 Km을 미카엘리스-멘텐 등식의 표준 변형에 의해 구하였다. 화합물 저해 분석을 기질 Km 농도에서 수행하였으며, 활성은 비-저해 효소 활성 (100%)의 50% 저해 (IC50)를 제공하는 저해제의 농도로서 계산하였다.
이러한 분석으로 수득한 데이터는 아래 표 2에 나타낸다:
표 2 - 선택성 데이터
화합물 IC 50 (nM)
플라스민 트롬빈 트립신
식 A의 화합물 >40000 >40000 >40000
시험관내 ADME 데이터
시험관내 투과성을 경구 흡수에 대한 Caco-2 모델을 사용해 결정하였다. 방법은 공개된 표준 방법으로부터 개조하였다 (Wang Z, Hop C.E., Leung K.H. and Pang J. (2000) J Mass Spectrom 35(1); 71-76). Caco-2 단층을 BiocoatTM HTS 원섬유 콜라겐 24웰 멀티웰 인서트 시스템 (1.0 ㎛, PET membrane, Corning 354803)에 구축하였으며, 각 인서트에 세포 200,000주를 접종하여 투과성 분석에 사용하기 전 3일간 유지시켰다. 분석을 위해, 50 μM 시험 화합물을 인서트의 정상부에 첨가하여, 교반 플랫폼 (120 rpm)에서 1시간 동안 37℃에서 인큐베이션하였다. 양쪽 구획에서 1시간 동안 인큐베이션한 다음 시험 물질을 LCMS에 의해 측정하여, 정상부에서 기저측부로의 이동을 측정하였다. Caco-2 단층의 온전성을 2가지 방법, (i) 실험 전 및 실험 후 경피 전기 저항 (transepithelial electrical resistance, TEER) 비교, 및 (ii) 루시퍼 옐로우 플럭스 평가로 검증하였다. 결과는 아래 표 3에 나타낸다.
표 3 - 투과성 데이터
화합물 Caco -2 ( Papp x10 -6 cm/s)
WO2016/083820의 실시예 41 9
식 A의 화합물 17
약동학
표 4의 화합물에 대해 약물동태 실험을 수행하여, 스프라그-다울리 수컷 랫에 1회 경구 투여한 이후의 약물동태 특성을 분석하였다. 랫 2마리에, 비히클에 시험 화합물을 명목 농도 2 mg/mL로 용해한 조성물을 1회 po 투여량 5 mL/kg (10 mg/kg)으로 제공하였다. 투여 후, 혈액 샘플을 24시간에 걸쳐 수집하였다. 샘플 수집 시간은 5분, 15분, 30분과 1, 2, 4, 6, 8 및 12시간이다. 수집 후, 혈액 샘플을 원심분리하고, 혈장 분획에서 LCMS에 의해 시험 화합물의 농도를 분석하였다. 이 실험에서 수득한 경구 노출 데이터를 하기 표 4에 나타낸다:
표 4 - 경구 노출 데이터
화합물 비히클 용량 po (mg/kg) Cmax (ng/mL) Tmax (min)
WO2016/083820의 실시예 41 10% DMSO/10% 크레모포르/80% SWFI 10.5 1534 180
식 A의 화합물 10% DMSO/10% 크레모포르/80% SWFI 2.2 1802 30

Claims (23)

  1. 적어도 대략적으로 6.7, 9.5, 11.0, 13.3 및 17.3에서 특징적인 X선 분말 회절 피크 (Cu Kα선 조사, °2θ로 표시)들을 나타내는, 식 A의 화합물의 고체 형태:
    Figure pct00002
  2. 제1항에 있어서,
    도 1에 나타낸 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 가지는, 고체 형태.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서,
    STA 서모그래프에서 164 ± 3℃에서 흡열 피크를 나타내는, 고체 형태.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    도 2에 도시된 STA 서모그래프와 실질적으로 동일한 STA 서모그래프를 가지는, 고체 형태.
  5. STA 서모그래프에서 164 ± 3℃에서 흡열 피크를 나타내는, 식 A의 화합물의 고체 형태:
    Figure pct00003
  6. 제5항에 있어서,
    도 2에 도시된 STA 서모그래프와 실질적으로 동일한 STA 서모그래프를 가지는, 고체 형태.
  7. 적어도 대략적으로 7.3, 8.6, 11.6, 14.3, 및 16.2에서 특징적인 X선 분말 회절 피크 (Cu Kα선 조사, °2θ로 표시)들을 나타내는, 식 A의 화합물의 염산염의 고체 형태:
    Figure pct00004
  8. 제7항에 있어서,
    도 3에 나타낸 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 가지는, 고체 형태.
  9. 도 3에 나타낸 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 가지는, 식 A의 화합물의 염산염의 고체 형태:
    Figure pct00005
  10. 적어도 대략적으로 4.7, 6.4, 9.1, 15.1, 및 16.4에서 특징적인 X선 분말 회절 피크 (Cu Kα선 조사 °2θ로 표시)들을 나타내는, 식 A의 화합물의 황산염의 고체 형태:
    Figure pct00006
  11. 제9항에 있어서,
    도 4에 나타낸 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 가지는, 고체 형태.
  12. 도 4에 나타낸 패턴과 실질적으로 동일한 X선 분말 회절 패턴을 가진, 식 A의 화합물의 황산염의 고체 형태:
    Figure pct00007
  13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 고체 형태; 및 약제학적으로 허용가능한 보강제, 희석제 및/또는 담체를 포함하는, 약학적 조성물.
  14. 테라피 (therapy)에 사용하기 위한, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 고체 형태.
  15. 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태의 치료에 사용하기 위한, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 고체 형태.
  16. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 고체 형태를 치료학적 유효량으로 치료가 필요한 포유류에 투여하는 것을 포함하는, 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태의 치료 방법.
  17. 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태를 치료하기 위한 약제의 제조에 있어, 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 고체 형태의 용도.
  18. 제15항, 제16항 또는 제17항에 있어서,
    상기 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태가 시력 손상, 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 혈관 투과성, 당뇨병성 황반 부종, 유전성 혈관 부종, 망막 정맥 폐쇄, 당뇨병, 췌장염, 뇌 출혈, 신장병증, 심근증, 신경병증, 염증성 장 질환, 관절염, 염증, 패혈증 쇼크, 저혈압, 암, 성인 호흡 곤란 증후군, 파종성 혈관내 응고, 심폐 우회술 중의 혈액 응고 및 외과 수술 후 출혈로부터 선택되는, 고체 형태, 치료 방법 또는 용도.
  19. 제15항, 제16항 또는 제17항에 있어서,
    상기 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태가 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 혈관 투과성, 당뇨병성 황반 부종 및 유전성 혈관 부종으로부터 선택되는, 고체 형태, 치료 방법 또는 용도.
  20. 제15항, 제16항 또는 제17항에 있어서,
    상기 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태가 당뇨병성 망막병증과 관련된 망막 혈관 투과성 및 당뇨병성 황반 부종으로부터 선택되는, 고체 형태, 치료 방법 또는 용도.
  21. 제15항, 제16항 또는 제17항에 있어서,
    상기 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태가 유전성 혈관 부종인, 고체 형태, 치료 방법 또는 용도.
  22. 제15항, 제16항 또는 제17항에 있어서,
    상기 혈장 칼리크레인에 의해 매개되는 질환 또는 병태가 당뇨병성 황반 부종인, 고체 형태, 치료 방법 또는 용도.
  23. 제20항 또는 제22항에 있어서,
    상기 고체 형태가 환자의 눈 부위에 주입하기 적합한 형태, 특히 유리체강내 주입에 적합한 형태로 투여되는, 고체 형태, 치료 방법 또는 용도.
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