KR20200085609A - 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물이나 비자나무 잎 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물 및 염증 반응 억제용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물이나 비자나무 잎 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물 및 염증 반응 억제용 조성물을 개시한다.

Description

용암해수 숙성 백년초 열매 추출물이나 비자나무 잎 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물 및 염증 반응 억제용 조성물{Composition for Improving Skin Wrinkles or Anti-inflammatory Composition Using an Extract of Opuntia ficusindica Fruit or Torreya nucifera Leaf Aged by Magma Seawater}

본 발명은 용암해수 숙성 백년초(Opuntia ficusindica) 열매 추출물이나 비자나무(Torreya nucifera) 잎 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물 및 염증 반응 억제용 조성물에 관한 것이다.

피부의 가장 중요한 기능 중 하나는 장벽으로서의 보호기능이다. 외부 환경에 직접 노출되는 피부는 체액의 손실을 막고 유해한 환경으로부터 신체를 보호하는 가장 중요한 일차 방어선이다. 또한, 독성 물질이나 미생물, 물리적인 자극이나 자외선에 대한 장벽기능을 수행한다. 그러나 이러한 피부장벽 기능이 피부 외·내부의 다양한 자극들을 받게 되면, 피부장벽이 손상되어 피부가 건조해지거나 피부에 염증반응을 일으키게 된다. 아울러 이때 발생되는 초기 염증반응을 효과적으로 제어 하지 못하면 심한 피부염으로 악화 될 수 있다(J Am Acad Dermatol. 1980. 21(3):610-3).

피부 진피층의 90%를 차지하고 있고, 피부 수분을 유지하며 피부 유연성과 탄력을 유지하는 데 가장 중요한 단백질인 콜라겐은 피부의 강도와 장력을 부여하여 외부의 자극으로부터 피부를 보호하는 역할을 한다(J Am Acad Dermatol, 17(4):610-613. 2001). 콜라겐은 섬유아세포에서 합성되며 콜라게나제(collagenase)에 의해 분해된다. 나이가 들거나 자외선 등에 노출되면 섬유아세포의 작용과 세포 수가 감소하여 콜라겐의 합성량이 줄어들고 이들을 분해하는 콜라게아제의 작용이 증가하게 된다. 콜라겐에 의한 피부의 탄력성은 한번 감소하고 난 후 회복하기가 매우 어렵기 따문에, 엘라스타아제 활성을 억제하여 피부 주름을 개선하기 위한 연구가 활발하게 진행되고 있다.

최근들어 인구증가, 도시화, 산업화 및 자동차 증가 등의 영향으로 대기오염이 심화되고 있으며, 이에 따라 오염물질의 종류가 다양해지고 있다. 특히 우리나라의 위치적인 요인으로 중국에서 배출되는 대기오염 물질의 이동으로 인한 황사와 미세먼지 등의 피해에 직면하고 그 심각성도 높아지고 있다.

미세먼지(particulate matter)는 입자의 크기에 따라 지름이 10㎛이하인 미세먼지(PM10), 2.5㎛이하인 초미세먼지(PM2.5)로 분류된다. 이러한 미세먼지는 피부 모공의 약 20분의 1에 불과하기 때문에 피부에서 차단되지 못하고 모공 속으로 쉽게 침투되어 제거가 어렵다. 한 번 흡수된 미세먼지는 피부에 각종 화학자극을 일으키는 것은 물론 각질세포와 지질막 등에 악영향을 끼쳐 피부 면역력을 저하시키고 여드름 유발, 피부 건조, 주름 증가 및 색소 침착 등과 같은 피부 노화 현상을 더욱 가속화 시킨다. 따라서 미세먼지에 대한 피부 노출을 미리 차단하지 못하거나 침투된 미세먼지를 깨끗하게 제거하지 못하면 모공 속에서 염증 반응을 일으켜 피부 트러블이 발생할 확률이 높다.

피부에서의 염증반응(inflammatory response)은 물리적 자극이나 화학물질, 세균 등에 의해 피부손상이 유발될때 이를 방어하기 위한 작용으로서 시작되며 다양한 면역세포와 염증 유도 사이토카인이 관여한다. 체내 염증 과정에서는 과량의 NO 및 프로스타글라딘E2(PGE2) 등의 염증인자가 iNOS 및 COX-2에 의해 형성된다. 염증상태에서 iNOS에 의해 과잉 생성된 NO는 혈관 투과성, 부종 등의 염증반응을 촉진시킬 뿐만 아니라 염증매개체의 생합성을 촉진하여 염증을 심화시키는 것으로 알려져 있다(Antioxid Redox Signal. 2011. 15(9):2605-41).

염증반응과 미세먼지의 상관관계는 여러 보고를 통해 알려져 있는데, 미세먼지는 다양한 세포주 에서 염증반응을 일으키고(Clin Exp Allergy. 1999. 29(9):1187-94), 염증성 사이토카인은 높은 수준의 미세먼지에 노출된 사람에서 과다 발현되며(Environ Pollut. 2008. 151(2):362-7), 사람과 동물이 미세먼지에 노출 되었을 때 염증 세포와 염증 유발 사이토카인 방출을 유도(Toxicol In Vitro. 2010 Feb;24(1):29-39)하는 연구가 보고 되었다. 이에, 미세먼지에 의한 피부 염증 개선 활성을 가지는 식의약품에 관한 연구가 더욱 필요한 실정이다.

한편, 화장품 업계에서는 여러 화학물질 등에 의한 피부 자극을 줄이기 위해 천연물을 사용한 제품이 다수 개발되고 있다. 천연 재료는 피부에 부작용이 적을 뿐 아니라, 최근 천연 재료를 이용한 화장품에 대한 소비자들의 호응이 높아짐에 따라 화장품 원료로서 개발가치가 한층 늘어나고 있다.

제주용암해수란 제주도에서만 볼 수 있는 특별한 수자원으로 해수가 현무암층과 사니질층을 통해 자연 여과되어 오랜 기간 동안 저장된 물이다(Nutr Res Pract. 2010. 4(1):3-10). 제주도는 화산활동으로 인한 현무암층이 넓게 분포되어 있으며, 경사가 완만한 동서 사면으로는 용암지대가 넓게 발달 되어 있고, 특히 동부지역은 투수성이 우수한 지층이 두껍고 넓게 분포되어 있어 해수가 유입될 수 있는 천연의 조건을 지니고 있다. 바다의 압력에 의해 현무암층으로 여과되면서 유입된 해수는 고지대에서 바다쪽으로 흘러 내려오는 지하담수와 만나 담·염수 경계면을 형성하게 된다(김창숙, 제주 바이오식품산업의 현황 및 육성 전략, 2012). 이 담·염수 혼합대 하부에 존재하는 해수가 용암해수이다.

용암해수에는 일반 해수 및 심층수보다 필수 미네랄(나트륨, 마그네슘, 칼슘, 칼륨 등)이 풍부하며 일반적인 미네랄 성분들(철, 몰리브덴, 아연, 망간)은 심층부와 삼다수보다 더 많은 양을 함유하고 있다. 또한, 용암해수의 수질은 물리적 특성 변화가 적고, 수온은 16∼18℃로 변함이 없으며, pH(수소 이온농도)는 평균 7.5범위를 나타내는 특징을 가진다. 또한, 용암해수에는 일반 해수 및 심층수보다 나트륨, 마그네슘, 칼슘 및 칼륨 등의 필수미네랄 뿐만 아니라, 일반 유용미네랄 성분들(철, 망간, 아연, 몰리브덴 등)도 심층수와 삼다수보다 많은 양이 포함되어 있다. 이러한 특징적인 이유로, 용암해수는 유용성분을 대량으로 포함하고 있으므로 산업적 활용가치가 매우 높다.

비자나무(Torreya nucifera Siebold et Zucc.)는 우리나라 남부와 제주도에 나는 상록수로, 전세계적으로 우리나라와 일본에만 제한되어 분포한다. 비자나무는 식용, 관상용, 공업용, 약용으로 쓰이고, 종자는 먹거나 기름을 짜내서 이용한다. 또한, 한방과 민간에서는 과실을 구충, 발모, 건위, 조경, 장출혈 등에 약재로 이용하고(Uisahak. 2008. 17(1):23-36), 목재는 건축재, 기구재, 선박용재 등에 사용한다고 알려져 있다(Mediat. Inflamm. 2013. 761506).

백년초(Opuntia)의 플라보노이드는 실험관 내(in-vitro) 실험에서 항염증 활성을 보였고(Cellular Biochemistry. 2013. 114(2):336-345), 특히 피부 염증 치료에 사용되고 있다(Industrial Crops and Products. 2014. 62:412-420).

본 발명은, 용암해수로 비자나무와 백년초 숙성하여 추출한 추출물을 유효성분으로 하여 주름개선 활성과 항염증 등의 피부 개선 활성을 개시한다.

본 발명의 목적은 용암해수를 이용한 숙성 백년초 열매 추출물이나 비자나무 잎 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물 또는 염증 반응 억제용 조성물을 제공하는 데 있다.

본 발명의 또 다른 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다.

본 발명자들은 용암해수에 백년초 열매 또는 비자나무 잎 분말을 침지시켜 7일~14일 숙성(그대로 방치)한 후 얻은 추출물이, 숙성하지 아니한 백년초 열매 추출물 또는 비자나무 잎 추출물에 비해, 사람 각질형성세포인 HaCaT에서의 미세먼지에 의해 유도된 콜라게나아제(MMP-1)의 생성 촉진의 억제 활성과, 또 인공피부조직에서 미세먼지에 의해 유도된 염증 반응의 억제 활성에 있어서 뚜렷하게 높음을 확인함으로써 완성된 것이다.

전술한 바를 고려할 때, 본 발명은 일 측면에 있어서 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물, 용암해수 숙성 비자나무 잎 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 이용한 피부 주름의 개선용 조성물, 특히 자외선 또는 미세먼지에 의한 피부 주름 개선용 조성물로 파악할 수 있고, 다른 측면에 있어서는 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물, 용암해수 숙성 비자나무 잎 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 염증 반응의 억제용 조성물 특히 미세먼지에 의한 염증 반응 억제용 조성물로 파악할 수 있다.

본 명세서에서, "용암해수"는 발명의 명칭이 "미네랄 조성물의 제조 방법 및 그 방법에 의하여 얻어진 미네랄 조성물"인 한국 특허 제0853244호(출원번호: 제10-2008-0027861호)에서 정의되고 설명된 바의 "제주도 동부지역에 부존하고 있는 염지하수"와 같은 의미이다. 구체적으로 "제주도 동부지역"은 행정구역상 제주도 구좌읍, 성산읍 및 표선면을 의미하며, "염지하수"는 일정량 이상 염분이 함유된 지하수를 의미하는데, 구체적으로는 고기원 등의 논문(고기원 등, 제주도 동부지역의 수문지질에 관한 연구(Ⅱ), 2003, 경원대학교; 본 명세서의 일부로서 간주된다)에서 사용한 염분 농도에 의거 제주도 지하수를 분류한 기준에 따라 저염지하수(전기전도도가 1,700㎲/cm ~17,350㎲/cm)와 염수지하수(전기전도도가 17,350㎲/cm 이상)를 모두를 포함하는 의미로서 이해될 수 있지만, 바람직하게는 전기전도도가 17,350 ㎲/cm 이상 또는 염의 농도가 30‰(permilliage) 이상(통상 해수의 염분 농도가 32 내지 35‰임)인 염수지하수를 의미하는 것으로 이해될 수 있다.

또 본 명세서에서 "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.

또 본 명세서에서, "추출물"이란 추출 대상을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등), 메틸렌클로라이드, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, N,N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 침출하여 얻어진 추출물, 이산화탄소, 펜탄 등 초임계 추출 용매를 사용하여 얻어진 추출물 또는 그 추출물을 분획하여 얻어진 분획물을 의미하며, 추출 방법은 활성물질의 극성, 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방법을 적용할 수 있다. 분획된 추출물의 경우 추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 극성이 다른 용매와 혼합·정치시켜 얻은 분획물, 상기 조추출물을 실리카겔 등이 충진된 칼럼에 흡착시킨 후 소수성 용매, 친수성 용매 또는 이들의 혼합 용매를 이동상으로 하여 얻은 분획물을 포함하는 의미이다. 또한 상기 추출물의 의미에는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등의 방식으로 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고형상의 추출물이 포함된다. 바람직하게는 추출용매로서 물(또는 열수), 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등) 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물을 의미한다.

본 발명의 용암해수 숙성 백년초(Opuntia ficusindica) 열매 또는 비자나무 잎은 용암해수에 백년초 열매 또는 비자나무 잎을 침지시키는 단계, 및 침지 후 7일 이상 숙성(방치)하는 단계를 거쳐 얻어질 수 있다. 여기서 용암해수는 원수, 부유물질을 제거한 정제 원수, 역삼투압법나 전기투석법 등의 담수화 방법에 의한 담수화시 부산물로 발생하는 염분과 미네랄 함유 용암해수일 수 있으며, 특히 역삼투압법에 의한 담수화시 부산물로 발생하는 용암해수일 수 있다. 역삼투압법(RO)은 물에 용해되어 있는 염 등 이온성 물질을 멤브레인으로 이용하여 배제하시키고, 순수한 물만 통과시키는 방법이기 때문에 그 부산물로 발생하는 용암해수는 염분과 이온성 미네랄 등을 함유한다. 또 여기서 숙성 시 온도는 특별한 제한이 없으나 아래의 실시예를 참조할 때 15℃ 이하의 저온, 특히 4℃~15℃인 것이 바람직하다. 또 여기서 숙성 기간은 아래의 실시예를 참조할 때 7일 이상 14일 이하인 것이 바람직하다.

본 발명의 조성물은 유효성분 이외에, 피부 주름 개선 효과나 염증 반응 억제 효과의 상승·보강 등을 위하여 또는 피부 과민 반응 억제 활성, 피부 보호 활성(자외선에 의한 피부 손상 억제, 피부 보습 등) 등 유사활성의 부가를 통한 복용이나 섭취, 사용의 편리성을 증진시키기 위하여, 당업계에서 이미 안전성이 검증되고 해당 활성을 갖는 것으로 공지된 임의의 화합물이나 천연 추출물을 추가로 포함할 수 있다. 이러한 화합물 또는 추출물에는 각국 약전(한국에서는 "대한민국약전"), 각국 건강기능식품공전(한국에서는 식약처 고시인 "건강기능식품 기준 및 규격"임), 각국 기능성화장품공전(한국에서는 식약처 고시인 "기능성화장품 기준 및 시험방법") 등의 공정서에 실려 있는 화합물 또는 추출물, 의약품의 제조·판매를 규율하는 각국의 법률(한국에서는 "약사법"임)에 따라 품목 허가를 받은 화합물 또는 추출물, 건강기능식품의 제조·판매를 규율하는 각국 법률(한국에서는 「건강기능식품에관한법률」임)에 따라 기능성이 인정된 화합물 또는 추출물, 기능성 화장품의 제조·판매를 규율하는 각국 법률(한국에서는 「화장품법」임)에 따라 기능성이 인정된 화합물 또는 추출물이 포함된다. 예컨대 피부 주름 개선 성분으로서는 레티놀, 레티닐팔미테이트, 아데노신, 폴리에톡실레이티드아마이드 등을 들 수 있고, 자외선 보호 성분으로서는 드로메트리졸, 드로메트리졸트리실록산, 디갈로일트리올리에이트, 디메치코디에칠벤잘말로네이트, 디에칠헥실부타미도트리아존, 소나무 껍질 추출물 등의 복합물, 포스파티딜세린, 핑거루트 추출 분말, 홍삼과 산수유 등의 복합 추출물 등을 들 수 있고, 보습 성분으로서는 AP 콜라겐 효소 분해 펩타이드, Collactive 콜라겐 펩타이드, N-아세틸글루코사민, 곤약 감자 추출물, 민들레 등의 복합 추출물, 쌀겨 추출물, 옥수수 배아 추출물, 저분자 콜라겐 펩타이드, 지초 추출 분말, 포스파티딜세린, 히알루론산 등을 들 수 있으며, '과민피부상태 개선' 기능성 성분으로서는 L. sakei Probio 65, 감마리놀렌산 함유 유지, 과채 유래 유산균인 L.plantarum CJLP133, 프로바이오틱스 ATP 등을 들 수 있다. 이러한 화합물 또는 천연 추출물은 본 발명의 조성물에 그 유효성분과 함께 하나 이상 포함될 수 있다.

본 발명의 조성물은 그 유효성분을 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 의도하는 피부 주름 개선 활성, 염증 억제 활성 등을 나타낼 수 있는 한 임의의 양(유효량)으로 포함할 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 15 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 그 적용 대상인 포유동물 바람직하게는 사람에게 의료 또는 피부 전문가 등의 제언에 의한 투여 기간 동안 본 발명의 조성물이 투여될 때, 피부 주름 개선 효과, 염증 억제 효과 등 의도한 피부학적·약리학적 효과를 나타낼 수 있는, 본 발명의 조성물에 포함되는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.

본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 식품 조성물로서 파악할 수 있다. 본 발명의 조성물이 식품 조성물로 파악될 경우 염증 억제 용도는 염증성 피부 자극 완화의 용도로 이해될 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 어떠한 형태로도 제조될 수 있으며, 예컨대 차, 쥬스, 탄산음료, 이온음료 등의 음료류, 우유, 요구르트 등의 가공 유류, 껌류, 떡, 한과, 빵, 과자, 면 등의 식품류, 정제, 캡슐, 환, 과립, 액상, 분말, 편상, 페이스트상, 시럽, 겔, 젤리, 바 등의 건강기능식품 제제류 등으로 제조될 수 있다.

또 본 발명의 식품 조성물은 법률상·기능상의 구분에 있어서 제조·유통 시점의 시행 법규에 부합하는 한 임의의 제품 구분을 띨 수 있다. 예컨대 한국 「건강기능식품에관한법률」에 따른 건강기능식품이거나, 한국 「식품위생법」의 식품공전(식약처 고시 「식품의 기준 및 규격」)상 각 식품유형에 따른 과자류, 두류, 다류, 음료류, 특수용도식품 등일 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 식품첨가물이 포함될 수 있다. 식품첨가물은 일반적으로 식품을 제조, 가공 또는 보존함에 있어 식품에 첨가되어 혼합되거나 침윤되는 물질로서 이해될 수 있는데, 식품과 함께 매일 그리고 장기간 섭취되므로 그 안전성이 보장되어야 한다. 식품의 제조·유통을 규율하는 각국 법률(한국에서는 「식품위생법」임)에 따른 식품첨가물공전에는 안전성이 보장된 식품첨가물이 성분 면에서 또는 기능 면에서 한정적으로 규정되어 있다. 한국 식품첨가물공전(식약처 고시 「식품첨가물 기준 및 규격」)에서는 식품첨가물이 성분 면에서 화학적 합성품, 천연 첨가물 및 혼합 제제류로 구분되어 규정되어 있는데, 이러한 식품첨가물은 기능 면에 있어서는 감미제, 풍미제, 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등으로 구분된다.

감미제는 식품에 적당한 단맛을 부여하기 위하여 사용되는 것으로, 천연의 것이거나 합성된 것 모두 본 발명의 조성물에 사용할 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다.

풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다.

보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등이 사용될 수 있고, 또 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있으며, 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등이 사용될 수 있다. 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다.

점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 전술한 바의 식품첨가물 이외에, 기능성과 영양성을 보충, 보강할 목적으로 당업계에 공지되고 식품첨가물로서 안정성이 보장된 생리활성 물질이나 미네랄류를 포함할 수 있다.

그러한 생리활성 물질로서는 녹차 등에 포함된 카테킨류, 비타민 B1, 비타민 C, 비타민 E, 비타민 B12 등의 비타민류, 토코페롤, 디벤조일티아민 등을 들 수 있으며, 미네랄류로서는 구연산 칼슘 등의 칼슘 제제, 스테아린산마그네슘 등의 마그네슘 제제, 구연산철 등의 철 제제, 염화 크롬, 요오드칼륨, 셀레늄, 게르마늄, 바나듐, 아연 등을 들 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에는 전술한 바의 식품첨가물이 제품 유형에 따라 그 첨가 목적을 달성할 수 있는 적량으로 포함될 수 있다.

본 발명의 식품 조성물에 포함될 수 있는 기타의 식품첨가물과 관련하여서는 각국 식품공전이나 식품첨가물 공전을 참조할 수 있다.

본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서는 약제학적 조성물로 파악될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 경구용 제형 또는 비경구용 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 투여 경로는 국소 경로, 경구 경로, 정맥 내 경로, 근육 내 경로, 및 점막 조직을 통한 직접 흡수를 포함하는 임의의 적절한 경로일 수 있으며, 두 가지 이상의 경로를 조합하여 사용할 수도 있다. 두 가지 이상 경로의 조합의 예는 투여 경로에 따른 두 가지 이상의 제형의 약물이 조합된 경우로서 예컨대 1차로 어느 한 약물은 정맥 내 경로로 투여하고 2차로 다른 약물은 국소 경로로 투여하는 경우이다.

약학적으로 허용되는 담체는 투여 경로나 제형에 따라 당업계에 주지되어 있으며, 구체적으로는 "대한민국약전"을 포함한 각국의 약전을 참조할 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물이 경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때 적합한 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 덱스트로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 등의 당류, 옥수수 전분, 감자 전분, 밀 전분 등의 전분류, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 맥아, 젤라틴, 탈크, 폴리올, 식물성유, 에탄올, 그리세롤 등을 들 수 있다. 제제화활 경우 필요에 따라적절한 결합제, 윤활제, 붕해제, 착색제, 희석제 등을 포함시킬 수 있다. 적절한 결합제로서는 전분, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분페리스트, 젤라틴, 메틸셀룰로스, 소듐 카복시메틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 글루코스, 옥수수 감미제, 소듐 알지네이트, 폴리에틸렌 글리콜, 왁스 등을 들 수 있고, 윤활제로서는 올레산나트륨, 스테아르산나트륨, 스테아르산마그네슘, 벤조산나트륨, 초산나트륨, 염화나트륨, 실리카, 탈쿰, 스테아르산, 그것의 마그네슘염과 칼슘염, 폴리데틸렌글리콜 등을 들 수 있으며, 붕해제로서는 전분, 메틸 셀룰로스, 아가(agar), 벤토나이트, 잔탄 검, 전분, 알긴산 또는 그것의 소듐 염 등을 들 수 있다. 또 희석제로서는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 소비톨, 셀룰로스, 글라이신 등을 들 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사제로 제제화할 경우 적합한 담체로서는 수성 등장 용액 또는 현탁액을 사용할 수 있으며, 구체적으로는 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화할 수 있다. 비강 흡입제의 경우 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 등의 적합한 추진제를 사용하여 에어로졸 스프레이 형태로 제제화할 수 있으며, 좌제로 제제화할 경우 그 담체로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 폴리에틸렌글리콜류, 카카오지, 라우린지, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트류, 소르비탄 지방산 에스테르류 등을 사용할 수 있다.

약제학적 조성물의 구체적인 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 예컨대 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주 된다.

본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 성별, 연령, 환자의 중증도, 투여 경로에 따라 1일 0.001mg/kg ~ 10g/kg 범위, 바람직하게는 0.001mg/kg ~ 1g/kg 범위일 수 있다. 투여는 1일 1회 또는 수회로 나누어 이루어질 수 있다. 이러한 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 아니 된다.

본 발명의 조성물은 또 다른 구체적인 양태에 있어서, 화장료 조성물로 파악할 수 있다. 본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 파악될 경우 염증 억제 용도는 염증성 피부 자극 완화의 용도로 이해될 수 있다.

본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 파악될 경우에도 그 화장료 조성물은 그 용도상, 법률상 임의의 제품 구분을 띨 수 있으며, 구체적으로 피부 트러블 개선, 아토피 피부염 개선 등의 용도를 가진 기능성 화장품, 비기능성 일반 화장품 등일 수 있다. 제품 형태에 있어서도 임의의 제품 형태를 띨 수 있는데, 구체적으로 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 등의 제품 형태를 띨 수 있다. 구체적인 제품 형태에 있어서는 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형 등일 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들, 예컨대, 안정화제, 용해화제, 계면활성제, 비타민, 색소 및 항료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되는데, 구체적으로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 주름 개선 활성을 나타내는 그 유효성분을 포함하는 것을 제외하고는 당업계에 통상적으로 행하여지는 화장료 조성물의 제조방법에 따라 제조할 수 있다.

전술한 바의 본 발명에 따르면, 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물이나 용암해수 숙성 비자나무 잎 추출물을 이용한 피부 주름 개선용 조성물이나 염증 반응 억제용 조성물을 제공할 수 있다. 본 발명의 조성물은 식품, 의약품 또는 화장품으로 제품화되어 사용될 수 있다.

이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.

<실시예> 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물 및 비자나무 잎 추출물의 제조

<실시예 1> 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물의 제조

<실시예 1-1> 용암해수 숙성 백년초 열매의 제조

백년초 열매를 반으로 가른 뒤, 55℃의 열풍건조기에 2일 간 열풍건조하고 분쇄하여 백년초 열매 분말을 준비하였다. 여기에 10배 중량의 용암해수(원수의 농축수, 역삼투압법에 의하여 탈염 용암해수 제조시 생성되는 부산물로 염분과 이온성 미네랄을 포함하고 있음)를 가하고 4℃ 내지 15℃의 온도를 유지하여 백년초 열매 건조분말을 7일 내지 14일간 숙성시켰다.

백년초 열매 분말과 용암해수 혼합물을 120 메쉬 나일론 여과포로 여과하여 숙성한 백년초 열매 분말을 얻은 후, 그 백년초 열매 분말에 10배 중량의 정제수를 가하여 혼합하고 120 메쉬 나일론 여과포에 여과하는 과정을 5번 반복하여 숙성한 백년초 열매 분말에 남아있는 염분을 제거하였다. 염분을 제거한 백년초 열매 분말을 55℃ 열풍건조기에서 1일간 건조한 후 건식분쇄기를 이용하여 분말화하여 이를 추출에 사용하였다.

<실시예 1-2> 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물의 제조

상기 실시예 1에서 얻어진 숙성 백년초 열매 분말에 10배 중량의 70% 에탄올을 가하고 3시간 동안 초음파 추출하고 여과지(1㎛ 공극도)로 여과한 후 그 여액을 감압농축하고 동결건조하여 분말상의 숙성 백년초 열매 에탄올 추출물을 제조하였다.

<실시예 2> 용암해수 숙성 비자나무 잎 추출물의 제조

백년초 열매 대신에 비자나무 잎을 이용하는 것을 제외하고, 상기 실시예 1과 동일한 방법으로 용암해수 숙성 비자나무 잎의 70% 에탄올 추출물을 제조하였다.

<비교예> 일반 백년초 열매 및 비자나무 잎 추출물의 제조

숙성하지 않은, 일반 백년초 열매 분말 또는 비자나무 잎 분말을 추출 대상으로 하여 상기 실시예 1-2와 동일한 방법으로 백년초 열매 또는 비자나무 잎의 70% 에탄올 추출물을 제조하였다.

<실험예> 주름 개선 활성 실험 및 염증 반응 억제 활성 실험

<실험예 1> 미세먼지에 의한 주름의 개선 활성 실험

미세먼지에 의한 주름의 개선 활성을, 미세먼지에 의해 MMP-1 생성을 유도하고 그 생성 유도 억제 활성을 평가하여 수행하였다.

6 well plate에 HaCaT을 0.6 × 10⁴ cells/well씩 분주한 후, 세포 배양조건에서 24시간 배양하였다. 배지를 버리고 PBS로 세척한 다음 FBS를 포함하지 않은 DMEM 배지(serum free 배지)를 사용하여 세포를 기아상태로 만들어 준 후, 다음 날 미세먼지(TSP, Total suspended Particles)를 처리하여 배양하였다. 96well plate에 NHF를 0.6 × 10⁴ cells/well로 분주한 후, 24시간 동안 세포가 plate에 잘 붙도록 37℃, 5% CO₂세포 배양기에서 배양하고 24시간 후 미세먼지 자극을 받은 HaCaT 배양액을 시료와 함께 농도 별로 처리하여 다시 24시간 동안 배양하였다. 이 때 양성대조군으로는 EGCG(Epigallocatechin gallate)를 사용하였다. MMP-1 (R&D System, DY901) ELISA kit를 이용하여 실험 후, ELISA reader로 450nm에서 흡광도를 측정하였으며, 최종 MMP-1의 양은 일정 단백질 당 MMP-1 양으로 환산하여 무처리군인 음성 대조군과 비교하였다. 참고로 미세먼지는 보건환경연구원에서 공급받아 사용하였다.

결과를 아래의 표에 나타내었다.

상기 표를 참조하여 보면, 용암해수 숙성 비자잎 및 백년초 추출물은 숙성 전 비자잎 및 백년초 추출물보다 더 높은 MMP-1의 생성 억제 활성을 보였다.

<실험예 2> 미세먼지에 의한 염증 반응의 억제 활성 평가

미세먼지에 의한 염증 반응의 개선 활성을, 인공피부조직을 이용하여 미세먼지에 의해 염증성 사이토카인의 생성을 유도하고 그 생성 유도 억제 활성을 평가하여 수행하였다.

인공피부조직은 Reconstructed Human Epidermis(RHE, EpiSkin, 프랑스)와 Human Full Thickness Model(T-Skin, Episkin, 프랑스)를 구입하여 사용하였으며, 인공피부 조직 수령 후, 6 well plate에 옮겨주며 각 well당 적당량의 인공피부 배양용 배지(EpiSkin, 프랑스)를 넣어 37℃, 5% CO₂를 포함하는 배양기 내에서 24시간 배양하였다. 이 과정은 Equilibration 과정으로 본 실험 전에 진행하는 인공피부 안정화 작업이다.

다음 Equilibration이 완료된 인공피부 위에 미세먼지 추출물과 시료(0.05 mg/mL)를 처리하였다. 3시간 배양 후, 미세먼지 추출물을 제거하고 PBS로 세척하였다. 인공피부 위에 잔류 용액이 남아있지 않도록 하여 각질층을 공기 중에 노출시켰다. 다음 날, 인공피부 배양액을 수거해서 보관하며 위의 방법을 3일간 반복하여 72시간 인공피부 배양액을 얻었다. 여기서 미세먼지 추출물은 보건환경연구원에서 공급받은 미세먼지(TSP)를, Low Volume Air Sampler(APM 엔지니어링, 한국 경기)에 16.7L/min의 유량으로, 입경이 10㎛ 이하인 미세먼지를 포집하는 필터와 입경이 2.5㎛ 이하인 미세먼지를 포집하는 필터를 통과시키고 각 필터를 회수한 후 각 필터를 잘게 자르고 정제수를 가하여 교반하면서 12시간 추출하여 분말상의 미세먼지 추출물 PM10(입경이 10㎛ 이하인 미세먼지), PM2.5(입경이 2.5㎛ 이하인 미세먼지)를 얻고 이를 100배 희석하여 사용하였다.

인공피부 배양액에 함유되어 있는 사이토카인(IL-6, IL-8, GRO-α)의 생성량을 각 사이토카인의 ELISA kit(R&D System)을 이용하여 정량하였다. 배양액은 인공피부 시험을 통해 얻은 72시간 배양액을 이용하였다. 각 사이토카인 정량을 위한 시험법은 Kit에 동봉된 protocol을 사용하였으며, 시료는 비자나무 잎 70% 에탄올 추출물만을 사용하였다.

결과를 미세먼지 추출물 PM10과 PM2.5에 대해 아래의 표에 나타내었다.

상기 표를 참조하여 보면, 미세먼지 추출물 PM10과 PM2.5에 의해 염증성 사이토카인인 IL-6, IL-8 및 GRO-α가 뚜렷하게 증가하였음을 알 수 있고 숙성 후의 비자나무 잎 추출물은, 숙성 전의 비자나무 잎 추출물보다 훨씬 높게 사이토카인의 생성을 억제함을 알 수 있다.

Claims (10)

1. 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물, 용암해수 숙성 비자나무 잎 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 이용한 피부 주름의 개선용 조성물.
   
2. 제1항에 있어서,
   상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알콜 또는 이들의 혼합용매에 의한 추출물인 조성물.
   
3. 제1항에 있어서,
   상기 피부 주름은 자외선 또는 미세먼지에 의한 피부 주름인 조성물.
   
4. 제1항 내지 제3항에 있어서,
   상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
5. 제1항 내지 제3항에 있어서,
   상기 조성물은 화장품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
6. 용암해수 숙성 백년초 열매 추출물, 용암해수 숙성 비자나무 잎 추출물 또는 이들의 혼합물을 유효성분으로 이용한 염증 반응 억제용 조성물.
   
7. 제6항에 있어서,
   상기 염증 반응은 미세먼지에 의한 염증 반응인 조성물.
   
8. 제6항에 있어서,
   상기 추출물은 물, 탄소수 1 내지 4의 알콜 또는 이들의 혼합용매에 의한 추출물인 조성물.
   
9. 제6항 내지 제8항에 있어서,
   상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
   
10. 제6항 내지 제8항에 있어서,
    상기 조성물은 화장품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.