KR20200047550A - 복강내 칸디다증의 예방 방법 및 치료 방법 - Google Patents

Abstract

본 명세서에는, 복강내 칸디다증(IAC)을 갖거나 또는 이를 발병할 위험이 있는 개체를 식별하는 방법 및 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물을, IAC를 효과적으로 치료 또는 예방하는데 충분한 양으로 투여함으로써 개체에서 IAC를 치료, 완화 또는 예방하는 방법이 제공된다.

Description

복강내 칸디다증의 예방 방법 및 치료 방법

본 발명은 복강내 칸디다증의 치료 또는 예방 방법을 특징으로 한다.

복강내 칸디다증(intra-abdominal candidiasis: IAC)은 높은 사망률과 연관된 현저한 침습성 진균 감염이다. 항진균 요법의 신속한 소스 제어 및 기관은 IAC를 가진 환자들 간에 성공적인 성과의 주된 결정 인자이다. 에키노칸딘(echinocandin) 항진균제는 IAC를 치료하기 위한 최우선 제제이지만, 이의 임상적 효과는 획기적인 내성에 대한 공지된 잠재성을 가진 채 고도로 다양하다. 또한, 감염 부위에서 약물 노출에 대해 알려진 바가 거의 없다. IAC의 농양 또는 병변 특징에의 제한된 약물 침투는 항진균 치료 실패의 주된 원인이고 치료에 대한 내성의 숨겨진 저장소를 생성하는 것이 상정된 바 있다. 따라서, 당업계에는 IAC를 예방 또는 치료하는 개선된 방법에 대한 요구가 있다.

본 발명은 염 또는 중성 형태의 CD101을 투여함으로써 개체에서 복강내 칸디다증(IAC)을 예방 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.

제1 양상에서, 본 발명은 복강내 칸디다증(IAC)을 가진 개체를 치료하는 방법을 특징으로 한다. 이 방법은 (i) 개체를 IAC를 가진 것으로 또는 IAC를 갖는다고 의심되는 것으로 식별하는 단계; 및 (ii) 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함하되, 여기서 상기 조성물은 IAC를 치료하기에 충분하다.

제2 양상에서, 본 발명은 IAC의 위험이 있는 개체에서 IAC를 예방하는 방법을 특징으로 한다. 이 방법은 (i) 개체를 IAC가 발병할 위험이 있는 것으로 식별하는 단계; 및 (ii) 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하되, 상기 조성물은 IAC의 발병을 예방하기에 충분하다.

상기 실시형태들 중 임의의 것에 있어서, 대상체는 복강내 농양(intra-abdominal abscess: IAA)을 가질 수 있고, 약제학적 조성물은 IAA 내의 CD101의 농도가 칸디다에 대해서 CD101의 돌연변이 예방 농도(혹은, 내성 예방 농도)(mutant prevention concentration: MPC)를 초과하기에 충분한 투약량 및 빈도로 개체에게 투여될 수 있다.

몇몇 실시형태에 있어서, IAA 내의 CD101의 농도는 투여 후 6시간 이내에 MPC를 초과하는 농도를 달성한다. 몇몇 실시형태에 있어서, IAA 내의 CD101의 농도는 적어도 24시간 동안 MPC를 초과하는 농도로 유지된다. 몇몇 실시형태에 있어서, IAA 내의 CD101의 농도는 적어도 48시간 동안 MPC를 초과하는 농도로 유지된다. 몇몇 실시형태에 있어서, IAA 내의 CD101의 농도는 적어도 72시간(예컨대, 적어도 72시간, 적어도 4일, 적어도 5일, 적어도 6일, 적어도 7일, 적어도 2주, 적어도 3주, 적어도 4주, 적어도 5주, 적어도 6주, 적어도 8주, 적어도 10주, 또는 적어도 12주) 동안 MPC를 초과하는 농도로 유지된다. 몇몇 실시형태에 있어서, MPC는 1 ㎍/㎖ 내지 30 ㎍/㎖(1.5 ㎍/㎖ ± 0.5 ㎍/㎖, 2.5 ㎍/㎖ ± 0.5 ㎍/㎖, 3 ㎍/㎖ ± 1 ㎍/㎖, 4 ㎍/㎖ ± 1 ㎍/㎖, 5 ㎍/㎖ ± 1 ㎍/㎖, 6 ㎍/㎖ ± 2 ㎍/㎖, 8 ㎍/㎖ ± 2 ㎍/㎖, 10 ㎍/㎖ ± 5 ㎍/㎖, 15 ㎍/㎖ ± 5 ㎍/㎖, 20 ㎍/㎖ ± 5 ㎍/㎖, 또는 25 ㎍/㎖ ± 5 ㎍/㎖)이다. 몇몇 실시형태에 있어서, MPC는 약 16 ㎍/㎖이다.

상기 실시형태들 중 임의의 것에 있어서, 약제학적 조성물은 피하로, 복강내로, 또는 정맥내로 투여될 수 있다. 몇몇 실시형태에 있어서, 약제학적 조성물은 1 내지 12주(예컨대, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 또는 12주) 동안 약 50㎎ 내지 약 1200㎎(예컨대, 100 ± 50㎎, 200 ± 50㎎, 300 ± 50㎎, 400 ± 50㎎, 500 ± 50㎎, 600 ± 50㎎, 700 ± 50㎎, 750 ± 50㎎, 800 ± 100㎎, 900 ± 100㎎, 1000 ± 100㎎ 또는 1100 ± 100㎎)의 양으로 투여된다.

상기 실시형태들 중 임의의 것에 있어서, 투여될 수 있는 약제학적 조성물은 단일 용량으로 대상체에게 투여되되, 여기서 단일 용량은 IAC를 치료하는데 충분한 염 또는 중성 형태의 CD101의 양을 포함한다. 몇몇 실시형태에 있어서, 단일 용량은 경구로, 정맥내로, 피하로 또는 복강내로 투여되는, 50㎎ 내지 1200㎎(예컨대, 100 ± 50㎎, 200 ± 50㎎, 300 ± 50㎎, 400 ± 50㎎, 500 ± 50㎎, 600 ± 50㎎, 700 ± 50㎎, 750 ± 50㎎, 800 ± 100㎎, 900 ± 100㎎, 1000 ± 100㎎, 또는 1100 ± 100㎎)의 CD101 염 또는 이의 중성 형태를 포함한다.

상기 방법들 중 어느 것인가에 있어서, 약제학적 조성물은 CD101 염 또는 이의 중성 형태, 및 1종 이상의 약제학적으로 허용 가능한 부형제로 이루어질 수 있다.

상기 방법들 중 어느 것인가에 있어서, CD101은, 참조에 의해 본 명세서에 편입된 미국 특허 제9,217,014호에 기재된 화합물로 치환될 수 있었다. 예를 들어, CD101은 화합물 6, 화합물 7, 화합물 12, 화합물 15, 화합물 17, 화합물 23, 화합물 24, 및 이들의 약제학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군으로부터 선택된 미국 특허 제9,217,014호에 기재된 화합물로 치환될 수 있었다.

정의

본 발명의 목적을 위하여, 이하의 약어 및 용어는 아래에 정의되어 있다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "약"은 특정값의 ±10%인 값의 범위를 지칭한다. 예를 들어, "약 150㎎"은 150㎎의 ±10%, 또는 135㎎ 내지 165㎎을 포함한다. 이러한 범위는 목적하는 기능을 수행하거나 또는 목적하는 결과를 달성한다. 예를 들어, "약"은 기술된 양의 10% 미만 이내, 또는 의 5% 미만 이내, 1% 미만 이내, 의 0.1% 미만 이내, 그리고 의 0.01% 미만 이내인 양을 지칭할 수 있다. 이들 예 이외에, 또는 달리 표시된 경우, 본 명세서에 사용된 성분 또는 반응 조건의 양을 표현하는 모든 수치는 모든 경우에 용어 "약"으로 수식되는 것으로 이해되어야 한다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "CD101염"은 화학식 1의 화합물의 염을 지칭한다. CD101은 CD101의 3차 암모늄 이온 양하전이 이의 염 형태에서 음의 반대이온(예컨대, 아세테이트)과 균형을 이루는 구조(이하)를 갖는다. CD101의 구조는 이하에 묘사되어 있다.

CD101은 칸디다 종인 폐포자충 낭종(Pneumocystis cyst)의 효모 형태의 진균 세포벽 및 아스퍼질러스 하이패(Aspergillus hyphae)의 활성 세포성장의 영역의 주된 성분인 1,3-β-D-글루칸의 합성을 저해하는 반합성 에키노칸딘 화합물이다. 1,3-β-D-글루칸의 합성은, 촉매적 소단위가 FKS1, FKS2 및 FKS3 유전자에 의해 암호화되는 효소 복합체인 1,3-β-D-글루칸 합성효소의 활성도에 좌우된다. 이 효소의 저해는, 예컨대, 칸디다 종의 신속한 농도-의존적 살진균 활성을 초래한다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같은 용어 "CD101 중성 형태"는, 화학식 1의 화합물이 순 양하전 또는 음하전을 갖지 않는 CD101의 양쪽성 이온 형태를 포함한다. 양쪽성 이온은 CD101 또는 CD101의 염에 대해서 염기성 매체(예컨대, pH 9) 중에 보다 높은 비율로 존재한다. 몇몇 실시형태에 있어서, 양쪽성 이온은 또한 이의 염 형태로 존재할 수 있다.

숙주 유기체의 "집락화"는 개체의 신체의 임의의 부분 내에 또는 상에 진균의 비일시적 체류를 포함한다. 본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 임의의 미생물 틈새에서의 병원성 진균(기회감염성 또는 비-기회감염성)의 집략화 저감"은 개체의 신체의 집락화된 부분에서 병원체의 체류의 저감 및/또는 병원체의 수(농도)의 저감을 포함한다.

"병행 항진균 치료"란, CD101이 개체에 치료적 유효 농도로 있을 때에 표적화된 진균 감염(예컨대, IAC)의 치료에서 치료적 유익을 제공하는(예컨대, 전신에 활성인) 항진균제 CD101의 단일 용량의 투여 전 또는 후 12시간, 24시간, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일, 또는 1주일 이내에 투여된 항진균제(예컨대, CD101 또는 다른 항진균제)의 임의의 추가의 용량을 의미한다. 몇몇 경우에, 단일 용량 치료는 투여 전 또는 후 1 내지 21일 이내에 임의의 다른 항진균 치료와 병용되지 않는다. 예를 들어, CD101의 단일 용량은 진균 감염(예컨대, IAC)을 가진 개체에게 (예컨대, 복강내로, 경구로, 정맥내로, 피하로, 또는 근육내로) 투여될 수 있고, 단일 용량은 CD101에 의한 단일 용량 치료 전, 동시에 또는 후에 추가의 항진균 치료를 필요로 하지 않는 진균 감염을 효율적으로 치료한다.

"용량"이란 개체에 투여된 CD101(화학식 1)의 양을 의미한다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같은 용어 "투약 형태" 또는 "단위 투약 형태"는, 단일 투약량, 예컨대, 환제, 정제, 당의정, 경질 캡슐 또는 연질 캡슐로서 적합한 물리적으로 분리된 단위를 지칭하며, 각 단위는 미리 결정된 양의 약물을 함유한다.

"유효"량은 진균 감염(예컨대, IAC) 또는 진균 감염(예컨대, IAC)과 연관된 질환을 치료 또는 예방하는데 요구되는 약물의 양을 의미한다. 진균 감염에 의해 초래되거나 이에 의해 기여된 병태의 치유적 또는 예방적 치료를 위하여 본 명세서에 기재된 방법을 실시하는데 사용된 약물의 유효량은 투여 방법, 개체의 연령, 체중 및 일반적 건강에 따라 다양하다. 궁극적으로, 담당 의사는 적절한 양 및 투약 요법을 결정할 것이다. 이러한 양은 "유효"량으로서 지칭된다.

"감염" 또는 "진균 감염"이란, 1종 이상의 진균(예컨대, 진균 병원체 또는 기회감염 병원체)에 의해 개체의 신체의 임의의 부분의 과성장 또는 집락화를 특징으로 하는 미생물의 장내 세균 불균형(예컨대, IAC)을 의미하며, 이의 저감은 숙주에게 유익을 제공할 수 있다. 예를 들어, 감염은 개체의 신체 내에 또는 상에 정상적으로 존재하는 진균 종의 과도한 성장 또는 해당 진균 종에 의한 집락화를 포함할 수 있다. 대안적으로, 감염은 개체의 신체 내에 또는 상에 정상적으로 존재하지 않는 진균 종에 의한 집락화를 포함할 수 있다. 몇몇 경우에, 감염은 인간 신체의 일부 부분(예컨대, GI관)에 고유하지만 다른 부분(예컨대, GI관 이외의 복부 조직)에서 발견될 경우 해로운 진균에 의한 신체의 일부분의 감염을 포함할 수 있다. 더욱 일반적으로, 감염은 미생물의 집단(들)의 존재가 숙주 신체에 손상을 입히는 임의의 상황일 수 있다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, "복강내 칸디다증" 또는 "IAC"는, 칸디다가 개체 내 복강내 부위로부터 수집된 샘플에서 검출(예컨대, 배양액 또는 비-배양액 접급법을 이용해서 검출)되는 개체 내 복강내 감염을 지칭한다. IAC는, 원발성 복막염, GI관 소스에 기인하는 이차성 복막염; GI관 소스에 기인하는 복강내 농양(IAA), 감담도 또는 췌장 소스에 기인하는 이차성 복막염, 감담도 또는 췌장 소스에 기인하는 IAA, 감염된 췌장 괴사, 담낭염 또는 담관염을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아닌 상이한 분류 하에 분류될 수 있다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, "복강내 농양" 또는 "IAA"는 건강한 조직으로부터 벽으로 나뉘어진 감염의 국재화된 포켓을 지칭한다. 몇몇 경우에, IAA는 (a) GI관의 병리 과정 또는 틈새 또는 (b) 간, 담낭, 담관 또는 간관 또는 췌장의 병리 과정으로부터 기인될 수 있다. 감염된 담즙종, 췌장 위낭포, 또는 기타 췌장 또는 췌장주변 병변은 또한 농양으로서 분류된다. IAA는, 예를 들어, 영상 연구(예컨대, 컴퓨터 단층촬영 스캔)에 의해 또는 수술중 검사에 의해 식별될 수 있다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "최소 저해 농도" 또는 "MIC"는, 진균의 50% 내지 100% 성장 저해가 양성 성장 대조군에 비해서 달성되는 항진균제의 농도를 지칭한다. MIC를 확립하는 방법은 시험된 특정 화합물에 따라 달라질 것이다. 예를 들어, 에키노칸딘(예컨대, CD101)에 대해서, MIC 종말점은 24시간 배양 후 결정되고, 탁도의 현저한 감소(예컨대, 약물-무함유 성장 대조군에 비해서 대략 50% 성장 저감)를 생성하는 최저 약물 농도에 대응한다. 항진균제의 MIC를 결정하는 추가의 방법에 대해서는, 문헌[CLSI - Reference method for broth dilution antifungal susceptibility testing of yeasts; Approved-standard - Third Edition. CLSI document M27-A3. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute, 2008]을 참조한다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "돌연변이 예방 농도" 또는 "MPC"는 전체이지만 매우 희귀한 자발적인 돌연변이체의 발생을 억제하는데 충분한 약물의 농도를 지칭한다. MIC와 MPC 간의 약물 농도의 범위는 데 노보(de novo) 돌연변이체가 가장 일어날 가능성이 있는 돌연변이체 선택창을 나타낸다. 이에 따라서 과잉의 MPC로 약물 농도의 지속 기간을 최소화하는 치료 요법은 요법의 과정 동안 내성 발달에 대한 가능성을 최소화한다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, "비경구 투여" 및 "비경구적으로 투여된"은 장용 및 국소 투여 이외의 투여 모드, 예컨대, 주사를 지칭하고, 제한 없이, 정맥내, 근육내, 흉강내, 혈관내, 심낭내, 동맥내, 척추강내, 낭내, 안와내, 심장내, 피부내, 복막내, 기관경유, 피하, 표피하, 관절내, 피막하, 지주막하, 척수내 및 기질내 주사 및 주입을 포함한다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "염"은, 약제학적 산업에서 통상 사용되는, 임의의 약제학적으로 허용 가능한 염, 예컨대, 비독성 산 부가염, 금속염 또는 금속 복합체를 지칭한다. 산 부가염은 특히 유기산, 예컨대, 아세트산, 락트산, 파모인산, 말레산, 시트르산, 콜산, 카프르산, 카프릴산, 라우르산, 글루타르산, 글루쿠론산, 글리세르산, 글리코콜산, 글리옥실산, 아이소시트르산, 아이소발레르산, 락트산, 말산, 옥살로아세트산, 옥살로석신산, 프로피온산, 피루브산, 아스코르브산, 석신산, 벤조산, 팔미트산, 수베르산, 살리실산, 타타르산, 메탄설폰산, 톨루엔설폰산 및 트라이플루오로아세트산, 및 무기산, 예컨대, 염산, 하이드로브로민산, 황산 및 인산을 포함한다. 대표적인 알칼리 또는 알칼리 토금속염은 나트륨, 리튬, 칼륨, 칼슘 및 마그네슘을 포함한다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 "단일 용량" 또는 "단일 용량 치료"는, 6주, 8주 또는 12주 기간 동안 염 또는 중성 형태의 CD101 및 1종 이상의 약제학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 포함하는 약제학적 조성물의 1회 이하의 용량의 투여에 의해 개체 내에서의 진균 감염(예컨대, IAC)의 치료(예컨대, 실질적인 제거)를 지칭한다. 바람직하게는, 단일 용량 투여는 "병행 항진균 치료"를 요하지 않는 진균 감염(예컨대, IAC)을 치료하는데 충분하다.

"개체" 또는 "환자"란, 인간, 비-인간 영장류, 또는 기타 포유동물, 예컨대, 제한되지 않지만, 개, 고양이, 말, 소, 돼지, 칠면조, 염소, 어류, 원숭이, 닭, 래트, 마우스 및 양을 의미한다. 진균 감염(예컨대, IAC)에 대해서 치료 중인 개체는, 그 사례가 이러한 병태를 가질 수 있는 것으로 의료 전문가에 의해 진단된 자이다. 진단은 임의의 적합한 수단에 의해 수행될 수 있다. 당업자라면, 본 발명의 개체가 표준 시험을 겪을 수 있었거나 또는 검사 없이, 하나 이상의 위험 인자의 존재로 인해 높은 위험에 있는 자로서 식별될 수 있었던 것임이 이해될 것이다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 진균 감염(예컨대, IAC)을 "실질적으로 제거하는"이란 용어는 개체에 유익을 허용하는(예컨대, 증상을 지속 가능하게 치유하는데 충분한 양으로 집락화를 저감시키는) 그리고/또는 통상의 진균 집단을 회복하는데 충분한 양(예컨대, 대략 건강한 개체에서 발견되는 양)으로 집락화를 하나 이상의 기회감염성 또는 비-기회감염 병원성 진균에 의해 (예컨대, 출발 양에 비해서 약 1%, 2%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% 또는 100%만큼) 저감시키는 것을 지칭한다. 예를 들어, 진균 감염은 개체의 신체에 통상 존재하지만 건강한 수준보다 높게 성장된 기회감염 병원체의 과성장에 의해 초래될 수 있으며, 이러한 사례에서 감염은 진균 종을 반드시 제거할 필요 없이 건강한 개체에서 전형적으로 발견되는 수준으로 진균 종을 저감시킴으로써 제거될 수 있다. 대안적으로, 예를 들어, 진균 병원체 또는 기회감염 병원체는, 전형적으로 체류되지 않고 따라서 진균 집단이 근절될 경우 감염이 치료되는 신체의 일부분을 집락화시킬 수 있다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "실질적으로 예방하다"는, 정상의 진균 집단을 유지시키는데 충분한 양(예컨대, 대략 건강한 개체에서 발견되는 양)으로 신체의 하나 이상의 부분에서 하나 이상의 기회감염성 또는 비-기회감염 병원성 진균에 의해 (출발 양에 비해서 약 1%, 2%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 100%, 또는 100% 초과만큼) 증가된 집락화를 예방하고, 진균 감염(예컨대, IAC)의 개시를 예방하고, 그리고/또는 감염과 연관된 증상 또는 병태를 예방하는 것을 지칭한다. 예를 들어, 개체는 면역손상된 개체(예컨대, 암을 갖거나, HIV/AIDS를 갖거나, 또는 면역억제제를 취하는 개체)에서, 또는 장기간 항생제 요법을 받는 개체에서, 침습적 의료 절차가 준비 중(예컨대, 수술이 준비 중, 예컨대, 이식, 줄기세포 요법, 이식편, 인공기관을 입수하거나, 장기간 또는 빈번한 정맥내 카테터삽입을 받거나, 또는 침습적 케어 유닛으로 치료를 받는 중)인 진균 감염을 실질적으로 예방하기 위한 예방 치료를 받을 수 있다.

본 명세서에서 이용되는 바와 같이, 용어 "치료하는"은 예방적 및/또는 치료적 목적을 위하여 약제학적 조성물을 투여하는 것을 지칭한다. "질환을 예방하는" 것은, 아직 아프지 않지만 특정 질환에 걸리기 쉽거나 또는 다르게는 특정 질환의 위험이 있는 개체의 예방적 치료를 지칭한다. "질환을 치료하는" 또는 "치유적 치료"를 위한 용도는 개체의 병태를 개선 또는 안정화시키기 위하여 질환을 이미 앓고 있는 개체에 대한 치료를 투여하는 것을 지칭한다. 따라서, 청구범위 및 실시형태에서, 치료하는은 치료 목적 또는 예방 목적 중 어느 하나를 위하여 개체에 대한 투여이다.

본 발명의 기타 특징 및 이점은 이하의 상세한 설명, 도면 및 청구범위로부터 명백해질 것이다.

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도 1a는 미카펀진(micafungin)의 단일 용량 후에 복강내 칸디다증(IAC)의 마우스 모델로부터 단리된 감염된 간 조직에서의 미카펀진의 약물 분포를 도시한다. 상부 행에서는, 5 ㎎/㎏에서 미카펀진의 단일 용량 후 1시간, 3, 6, 24 및 48시간에 수집된 대표적인 간 조직에서의 미카펀지의 이온 맵이다. 신호 강도 컬러 막대는 미카펀진에 대해서 고정되는데, 청색(무신호)에서부터 적색(최대 신호)까지 점차로 강도가 증가하고 있다. 인접한 단면의 헤마톡실린 및 에오신(H&E) 염색 및 고모리 메테나민 은(Gomori methenamine silver: GMS) 염색은 각 세트의 이온 맵 아래에 도시되어 있다. 윤곽은 각 조직 단면 상의 병변 영역을 강조하고 있다. 축척 막대(scalebar), 3㎜.
도 1b는 CD101의 단일 용량 후 IAC의 마우스 모델로부터 단리된 감염된 간 조직에서의 CD101의 약물 분포를 도시한다. 상부 행에는, 20 ㎎/㎏의 CD101의 단일 용량 후의 1시간, 3, 6, 24 및 48시간에 수집된 대표적인 간 조직에서 CD101의 이온 맵이다. 신호 강도 컬러 막대는 CD101에 대해서 고정되는데, 청색(무신호)에서부터 적색(최대 신호)까지 점차로 강도가 증가하고 있다. 정합된 H&E 및 GMS 염색 결과는 각각 중간 열 및 하부 열에 도시되어 있다. 축척 막대, 3㎜.
도 2는 IAC의 마우스 모델에서 단일 투약 후 24시간에 미카펀진 그리고 6 및 48시간에 CD101에 대한 약물 침투의 확대도를 도시한다. 단일 병변에서의 약물 분포의 확대도는 화소 수준(상부 수준)에서 도시되어 있다. 인접한 단면의 정합된 GMS 염색은 하부 열에 도시되어 있다. 신호 강도는 각각 CD101 및 미카펀진에 대해서 고정되어 있다. 축척 막대, 5㎜.
도 3은 IAC의 마우스 모델로부터 단리된 간 병변 및 둘레 조직에서의 약물 노출의 정량화를 도시한다. 약물 농도는 5 ㎎/㎏에서의 미카펀진 또는 20 및 5 ㎎/㎏에서의 CD101의 단일 용량 후 6 및 24시간에 수집된 간 단면으로부터 절개된 병변 및 둘레의 연관이 없는 조직에서 측정되었다. 오차 막대, 3 내지 5개의 간 조각 또는 별개의 병변의 평균 ± 표준편차(s.d.).
도 4a는 미카펀진의 다회 투약 후 약물 침투를 도시한다. 미카펀진은 2회 및 3회 용량 시 농양에 꾸준히 축적된다. 미카펀진 신호는 3회 용량 후 정상 상태에서 병변 중앙으로부터 단지 검출되었다(상부열). 인접한 단면의 H&E 및 GMS 염색은 각 세트의 이온 맵 아래쪽에 도시되어 있다. 윤곽은 각 조직 단면 상의 병변 영역을 강조한다. 축척 막대, 3㎜.
도 4b는 CD101 단일 투약 후의 약물 침투를 도시한다. CD101은 단일 투약 후 48시간에 완전히 병변에 확산되었고, 72시간에 각 병변의 괴사 영역에 축적되었다. 인접한 단면의 H&E 및 GMS 염색은 각 세트의 이온 맵 아래쪽에 도시되어 있다. 윤곽은 각 조직 단면 상의 병변 영역을 강조한다. 축척 막대, 3㎜.
도 5는 미카펀진의 다회 용량(5 ㎎/㎏)과 CD101의 단일 용량(20 ㎎/㎏) 간의 IAC의 마우스 모델로부터 단리된 조직에서의 약물 축적을 비교하는 그래프를 도시한다. 절대 약물 수준은 미카펀진의 제1 용량 후 48시간 및 72시간에 수집된 간 샘플로부터의 병변 둘레의 연관이 없는 조직에 대해서 측정되었고, 이들은 CD101의 단일 용량으로 치료되고 정합된 시점에서 수집되었다. 오차 막대, 3 내지 5개의 간 조각 또는 별개의 병변의 평균 ± 표준편차.
도 6은 CD101의 단일 용량 후 IAC의 마우스 모델로부터 단리된 이환된 신장 조직 내 CD101의 약물 분포를 나타낸다. 상부 행에는 20 ㎎/㎏의 CD101의 단일 용량 후 3, 6, 12 및 48시간에 수집된 대표적인 신장 조직에서의 CD101의 이온 맵이 도시되어 있다. 신호 강도 컬러 막대는 CD101에 대해서 고정되는데, 청색(무신호)에서부터 적색(최대 신호)까지 점차로 강도가 증가하고 있다.
도 7은 단일 용량 CD101 후 IAC의 마우스 모델로부터 단리된 감염된 신장 조직에서의 CD101의 약물 분포를 도시한다. 상부 행에는, 10 ㎎/㎏, 20 ㎎/㎏, 또는 40 ㎎/㎏의 CD101의 단일 용량 후 3 및 12시간에 수집된 대표적인 신장 조직에서의 CD101의 이온 맵이 도시되어 있다. 신호 강도 컬러 막대는 CD101에 대해서 고정되는데, 청색(무신호)에서부터 적색(최대 신호)까지 점차로 강도가 증가하고 있다.

본 명세서에서는, 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물을 복강내 칸디다증(IAC)을 유효하게 치료 또는 예방하는데 충분한 양으로 투여함으로써 개체에서의 IAC를 가지거나 또는 이를 발병시킬 위험이 있는 개체를 식별하는 방법 및 IAC를 치료, 완화 또는 예방하는 방법이 제공된다.

I. 치료 적응증

IAC의 개요

본 명세서에서 제공된 방법은 IAC의 치료 또는 예방을 필요로 하는 개체에서 그러한 치료 또는 예방에서 사용하기 위하여 나타낸다. IAC는, 개체로부터의 복강내 부위에서 수집된 샘플에서 칸디다 종이 검출(예컨대, 배양액 또는 비배양 기반 접근법을 이용해서 검출되는, 복강내 감염을 지칭한다. IAC는 다양한 기저 병태를 갖고 위장(gastrointestinal: GI)관 및 소화기 계통과 연루된 위험 인자를 갖는 환자에서 일어날 수 있는 일정 범위의 질환을 포괄한다. 본 명세서에서 제공된 방법은 IAC의 임의의 분류를 치료하는데 사용될 수 있다. IAC의 상이한 분류는 하기를 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다:

(i) 원발성(혹은 일차성) 복막염(예컨대, GI관의 겉보기 틈새 또는 내장 기관에서의 병리 과정의 부재 시 일어나는, 칸디다 종의 회수와 연관된 복막 염증);

(ii) GI관 소스에 기인하는 이차성 복막염(예컨대, GI관(위, 소장, 또는 결장), 예컨대, 천공, 수술 유출 또는 외상의 병리 과정 또는 틈새에 기인하는 복막 칸디다 감염증);

(iii) GI관 소스에 기인하는 복강내 농양(IAA)(예컨대, GI관의 병리 과정 또는 틈새에 기인하는, 건강한 조직으로부터 벽으로 나뉘어진 칸디다 및 고름의 국재화된 수집물);

(iv) 감담도 또는 췌장 소스에 기인하는 이차성 복막염(예컨대, 간, 담낭, 담관, 간관 또는 췌장의 병리 과정에 기인하는 복막 칸디다 감염증);

(v) 감담도 또는 췌장 소스에 기인하는 IAA(예컨대, 간, 담낭, 담관, 간관 또는 췌장의 병리 과정에 기인하는 IAA);

(vi) 감염된 췌장 괴사(예컨대, 만성 췌장염에 기인하는 비활력화 췌장 조직의 칸디다 감염증); 또는

(vii) 담낭염 또는 담관염(예컨대, 담낭 또는 담도의 칸디다 감염증).

IAC는 또한 재발성 IAC(예컨대, 초기 칸디다 감염증의 겉보기 해상도(apparent resolution) 또는 임상 또는 방사선촬영 지견 후 일어나는 복강내 칸디다 감염증) 또는 지속적 IAC(예컨대, 복강내 샘플로부터의 배양액 상에서 칸디다가 재단리된 적절한 소스 제어 및 활성 항진균 치료 후 대략 48시간 이상 동안 계속되는 감염)로서 분류될 수도 있다. 예컨대, 문헌[Vergidis et al. (2016). PloS ONE. 11(4): e0153247] 참조(이것은 참조에 의해 본 명세서에 편입됨).

또한, 본 명세서에 기재된 방법은, 1종 이상의 칸디다 종, 예컨대, 씨. 알비칸스(C. albicans), 씨. 글라브라타(C. glabrata), 씨. 두블리니엔시스(C. dubliniensis), 씨. 크루세이(C. krusei), 씨. 파랍실로시스(C. parapsilosis), 씨. 트로피칼리스(C. tropicalis), 씨. 오쏩실로시스(C. orthopsilosis), 씨. 구일리에르몬디이(C. guilliermondii), 씨. 루고사(C. rugosa), 씨. 아우리스(C. auris), 씨. 루시타니애(C. lusitaniae), 씨. 우틸리스(C. utilis), 또는 기타 칸디다 종에 의한 감염과 연관된 IAC를 치료 또는 예방하는데 사용될 수 있다. 몇몇 경우에, IAC는 1종 이상의 항진균 약물(예컨대, 아졸 화합물, 에키노칸딘, 폴리엔 화합물, 또는 플루사이토신)에 의한 치료에 대해 내성이 있는 칸디다 감염증과 연관될 수 있다. 몇몇 경우에, IAC는 칸디다 단일-감염과 연관된다. 대안적으로, IAC는 박테리아 공동-감염과 연관될 수 있는데, 여기서 칸디다 종 및 1종 이상의 박테리아 종(예컨대, 엔테로코커스(Enterococcus), 엔테로박테리아세(Enterobacteriaceae) 또는 클레브시엘라(Klebsiella) 종)이 개체로부터의 복강내 부위에서 수집된 샘플에서 검출된다.

식별 및 치료 방법

일 양상에서, 본 명세서에서는 IAC를 가진 개체를 식별 및 치료하는 방법이 제공되되, 여기서 치료는 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물의 투여를 포함한다. 몇몇 경우에, 개체는 복강내 감염의 임상 증거 및 개체로부터 수집된 샘플 내 칸디다의 검출에 기초하여 IAC를 가진 것으로 식별될 수 있다. 개체로부터 얻어진 샘플은, 예를 들어, 감염 부위로부터의 수술 또는 흡입 동안 얻어진 혈액 샘플 또는 복강내 검체(예컨대, 화농성 또는 괴사성 복강내 검체)를 포함할 수 있다. 개체로부터 샘플의 획득 시, 당업계에 공지된 하나 이상의 방법론은 칸디다 감염증의 증거에 대해서 샘플을 평가하는데 사용될 수 있다. IAC를 가진 개체를 식별하는 진단 기준은 배양 및/또는 비-배양-기반 방법을 포함할 수 있다. 비-배양 진단 방법은, 예컨대, 칸디다의 존재를 검출하는 항원 또는 항체(예컨대, 만난 또는 항-만난 IgG) 검출, β-D-글루칸 검출 검정법, 또는 중합효소 연쇄 반응(PCR) 검정법을 포함한다. 배양 기반 방법은, 예컨대, 혈액 배양액 또는 감염된 부위로부터 회수된 조직 또는 유체의 배양액을 포함한다. 예컨대, 문헌[Bassetti et al. (2013). Intensive Care Med. 39:2092-2106. 및 Pappas et al. (2016) CID. 62(4):e1-50.] 참조(참조에 의해 본 명세서에 편입됨). 농양 및 병변은 IAC를 가진 개체로부터 복부 장기 내의 현저한 병리조직학적 발견물이다. 그와 같이, 개체는 영상-기반 접근법(예컨대, 컴퓨터 단층촬영 스캔)을 사용하여 또는 수술중 검사에 의해 병변 또는 IAA의 존재에 대해서 더욱 평가될 수 있다.

또 다른 양상에서, 본 명세서에서는 IAC를 발병할 위험이 있는 개체를 식별하고 치료하는 방법을 제공하되, 여기서 치료는 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물의 투여를 포함한다. IAC를 발병할 위험이 있는 개체는 하나 이상의 위험 인자에 기초하여 식별될 수 있다. IAC에 대한 특정 위험 인자의 예는, 복부 수술(예컨대, 앞선 12개월 내의 소화기 또는 담도와 연루된 수술); 위장(GI) 천공(예컨대, 재발성 천공 및/또는 24시간 내 미치료된 천공); 위장 문합 누출(예컨대, 상부 GI관 누출 또는 하부 GI관 누출); 또는 칸디다 종에 의한 다발성 집락화를 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 본 명세서에 기재된 치료로부터 유익을 받을 수 있는 개체는 또한 다발성 집락화는 또한 급성 신부전, 중심 정맥 카테터 설치, 총 비경구 영양, 집중 치료실 스테이(intensive care unit stay), 패혈증, 당뇨병, 면역억제, 또는 연장된 광범위 항균요법을 포함하는 비특이적 위험 인자에 기초하여 식별될 수 있다. IAC에 대한 추가의 위험 인자는 충수염, 게실염, 크론병, 췌장염, 골반염 질환, 외상성 복부 손상(예컨대, 간, 췌장, 비장 및 장의 열상 및 혈종)과 같은 병태를 초래하는 감염 또는 염증, 또는 일반화된 복막염을 초래하는 병태를 포함한다.

본 명세서에 기재된 방법을 이용하는 IAC의 치료는 하나 이상의 추가의 치료 방법을 더 포함할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 방법에 따른 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물이 투여된 개체는 부가적으로 감염된 재료의 배출, 손상된 조직의 절제 및/또는 기저 병리의 수술적 교정(예컨대, 천공 또는 누출)을 포함하는 IAC에 대한 적절한 소스 제어 개입을 받을 수 있다. 몇몇 경우에, 소스 제어는 수술적 개입, 경피적 배액, 또는 경위장관 배액이다. 몇몇 경우에, 본 명세서에 기재된 치료 방법은, 이하의 IV 부분에 더욱 기재된 바와 같이, 개체에 대한 1종 이상의 추가의 항-미생물제(예컨대, 항박테리아제 및/또는 항진균제)의 투여를 더 포함할 수 있다.

II. 약제학적 제형

본 명세서에 기재된 방법의 약제학적 조성물(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함)은, 예컨대, 복강내 투여, 구강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피부내 투여, 동맥내 투여, 피하 투여, 경구 투여, 또는 흡입에 의한 투여를 위하여 제형화될 수 있다. 몇몇 경우에, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물은 정맥내 투여를 위하여 제형화될 수 있다. 몇몇 경우에, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물은 복강내 투여를 위하여 제형화될 수 있다.

CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용 가능한 희석제, 담체 및/또는 부형제와 제형화될 수 있다. 투여 모드 및 투약량에 따라서, 본 명세서에 기재된 방법의 약제학적 조성물은 손쉬운 전달을 허용하도록 적합한 약제학적 조성물로 제형화될 것이다. 약제학적 조성물은 필요에 따라서 단위 용량 형태일 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물에 포함된 활성 성분(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 양은 지시된 범위 내의 적합한 용량(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101의 50 내지 800㎎ 또는 500㎎ 내지 1200㎎의 용량)이 제공되도록 한다.

본 발명의 약제학적 조성물에서의 허용 가능한 담체 및 부형제는 이용되는 투약량 및 농도에서 수용자에 대해서 비독성이다. 허용 가능한 담체 및 부형제는, 완충제, 예컨대, 인산염, 시트르산염, HEPES, 및 TAE, 항산화제, 예컨대 아스코르브산 및 메티오닌, 보존제, 예컨대, 헥사메토늄 클로라이드, 옥타데실다이메틸벤질 암모늄 클로라이드, 레졸시놀 및 벤즈알코늄 클로라이드, 단백질, 예컨대, 인간 혈청 알부민, 젤라틴, 덱스트란 및 면역글로불린, 친수성 고분자, 예컨대, 폴리비닐피롤리돈, 아미노산, 예컨대, 글리신, 글루타민, 히스티딘 및 라이신, 및 탄수화물, 예컨대, 글루코스, 만노스, 수크로스 및 솔비톨을 포함한다. 조성물은 통상의 약제학적 관행에 따라서 제형화될 수 있다. 제형 내 화합물의 농도는, 투여될 약물의 투약량 및 투여 경로를 비롯한 다수의 인자에 따라서 다양할 것이다.

몇몇 경우에, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물은 액체 용액 또는 현탁액의 형태로 제형화될 수 있고, 비경구 경로(예컨대, 피하, 복강내, 정맥내, 또는 근육내)에 의해 투여될 수 있다. 약제학적 조성물은 주사 또는 주입을 위하여 제형화될 수 있다. 비경구 투여용의 약제학적 조성물은 멸균 용액 또는 임의의 약제학적으로 허용 가능한 액체를 비히클로서 사용해서 제형화될 수 있다. 약제학적으로 허용 가능한 비히클은 멸균수, 생리 식염수 또는 세포 배양 배지(예컨대, 둘베코의 변성 이글스 배지(DMEM), α-변성 이글스 배지(α-MEM), F-12 배지)를 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다. 주사 가능한 제형을 위하여, 각종 유효한 약제학적 담체가 당업계에 공지되어 있다. 예컨대, 문헌[Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 22nd ed., (2012) 및 ASHP Handbook on Injectable Drugs, 18th ed., (2014)]을 참조한다.

몇몇 경우에, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물은 경구 제형의 형태로 제조될 수 있다. 경구 용도용의 제형은 정제, 당의정, 캡슐, 시럽, 또는 허용 가능한 부형제와의 혼합물에 활성 성분(들)을 함유하는 경구 액체 투약 형태를 포함할 수 있다. 이들 부형제는, 예를 들어, 불활성 희석제 또는 충전제(예컨대, 수크로스, 솔비톨, 당, 만니톨, 미세결정성 셀룰로스, 감자 전분을 포함하는 전분, 탄산칼슘, 염화나트륨, 락토스, 인산칼슘, 황산칼슘 또는 인산나트륨); 과립화제 및 붕해제(예컨대, 미세결정성 셀룰로스를 포함하는 셀룰로스 유도체, 감자 전분을 포함하는 전분, 크로스카멜로스 나트륨, 알기네이트, 또는 알긴산); 결합제(예컨대, 수크로스, 글루코스, 솔비톨, 아카시아, 알긴산, 알긴산나트륨, 젤라틴, 전분, 전호화 전분, 미세결정성 셀룰로스, 마그네슘알루미늄 실리케이트, 카복시메틸셀룰로스 나트륨, 메틸셀룰로스, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스, 에틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 또는 폴리에틸렌 글리콜); 및 윤활제, 활택제 및 접착방지제(예컨대, 스테아르산마그네슘, 스테아르산아연, 스테아르산, 실리카, 수소화 식물성 오일 또는 탤크)일 수 있다. 기타 약제학적으로 허용 가능한 부형제는 착색제, 착향제, 가소제, 보습제, 완충제 등일 수 있다. 경구 용도용 제형은 또한 츄어블(chewable) 정제, 논-츄어블(non-chewable) 정제, 당의정, 캡슐(예컨대로서, 경질 젤라틴 캡슐(여기서 활성 성분은 불활성 고체 희석제와 혼합되어 있음)로서, 또는 연질 젤라틴 캡슐(여기서 활성 성분은 물 또는 오일 매체와 혼합되어 있음)로서 단위 투약 형태로 제공될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 화합물의 경구 생체이용률을 개선시키는 부형제와 제형화될 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 투약 형태는 중간 사슬(C8 내지 C12) 지방산(또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염), 예컨대, 카프르산, 카프릴산, 라우르산, 또는 이의 약제학적으로 허용 가능한 염, 또는 이들의 혼합물과 경구 투여용으로 제형화될 수 있다. 제형은 선택적으로 기타 부형제 중 중간 사슬(C8 내지 C12) 알킬 알코올을 포함할 수 있다. 대안적으로, 본 발명의 화합물은 1종 이상의 중간 사슬 알킬 사카라이드(예컨대, 알킬 (C8 내지 C14) 베타-D-말토사이드, 알킬 (C8 내지 C14) 베타-D-글루코사이드, 옥틸 베타-D-말토사이드, 옥틸 베타-D-말토피라노사이드, 데실 베타-D-말토사이드, 테트라데실 베타-D-말토사이드, 옥틸 베타-D-글루코사이드, 옥틸 베타-D-글루코피라노사이드, 데실 베타-D-글루코사이드, 도데실 베타-D-글루코사이드, 테트라데실 베타-D-글루코사이드) 및/또는 중간 사슬 당 에스터(예컨대, 수크로스 모노카프레이트, 수크로스 모노카프릴레이트, 수크로스 모노라우레이트 및 수크로스 모노테트라데카노에이트)와 경구 투여용으로 제형화될 수 있다.

본 명세서에 개시된 방법은 또한 염 또는 중성 형태의 CD101의 즉시-방출, 연장 방출 또는 지연-방출 제형의 투여를 더 포함할 수 있다.

III. 투약량 및 투여

본 명세서에 기재된 방법의 약제학적 조성물(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함)은 IAC를 치료하는데 충분한 투약량 및 빈도로 개체에 투여될 수 있다. 침습성 칸디다 감염증과 연관된 농양 및 병변은 IAC를 가진 개체로부터의 복부 장기 내의 현저한 병리조직학적 발견물이다. 몇몇 경우에, 칸디다 감염증을 효과적으로 표적화하기 위하여, 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물은, CD101이 농양 또는 병변에 침투하는데 충분한 투약량 및 빈도로 개체에 투여될 수 있고, 칸디다 감염증을 실질적으로 저감 또는 제거(예컨대, 출발량에 비해서 약 1%, 2%, 5%, 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 또는 100%만큼 개체 내 칸디다의 복강내 집단을 저감)시키는데 충분한 농도에서 그리고 시간 길이 동안 (예컨대, IAA 또는 병변 내) 감염 부위에 유지될 수 있다.

(예컨대, IAA 또는 병변 내) 감염 부위를 효과적으로 침투할 수 있는 약물(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 양은 IAC를 치료하기 위한 하나의 중요한 고려사항이다. 예를 들어, 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물은, (예컨대, IAA 또는 병변 내) 감염 부위에서의 CD101의 농도가 칸디다의 돌연변이 예방 농도(MPC)를 초과하는데 충분한 투약량 및 빈도에서 개체에 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물은, (예컨대, IAA 또는 병변 내) 감염 부위에서의 CD101의 농도가 약 1 ㎍/㎖ 내지 약 30 ㎍/㎖(예컨대, 약 1 ±0.5 ㎍/㎖, 1.5 ±0.5 ㎍/㎖, 2 ±1 ㎍/㎖, 3 ±1 ㎍/㎖, 4 ±1 ㎍/㎖, 5 ±1 ㎍/㎖, 6 ±1 ㎍/㎖, 7 ±1 ㎍/㎖, 8 ±1 ㎍/㎖, 9 ±1 ㎍/㎖, 10 ±2 ㎍/㎖, 12 ±2 ㎍/㎖, 14 ±2 ㎍/㎖, 16 ±2 ㎍/㎖, 18 ±2 ㎍/㎖, 20 ±2 ㎍/㎖, 22 ±2 ㎍/㎖, 24 ±2 ㎍/㎖, 26 ±2 ㎍/㎖, 28 ±2 ㎍/㎖, 또는 30 ±2 ㎍/㎖ 초과)의 MPC 이상이 되는데 충분한 투약량 및 빈도에서 개체에 투여된다. 몇몇 경우에, (예컨대, IAA 또는 병변 내) 감염 부위에서의 CD101의 농도는 약 16 ㎍/㎖ 이상의 MPC이다. 몇몇 경우에, 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물은 감염 부위에서의 CD101의 농도가 약 1시간 내지 약 24시간 내에(예컨대, 약 30분, 1시간, 2시간, 3시간, 4시간, 5시간, 6시간, 7시간, 8시간, 9시간, 10시간, 12시간, 14시간, 16시간, 18시간, 20시간, 22시간 또는 24시간 내에) 칸디다의 MPC 이상의 농도를 달성하는데 충분한 투약량 및 빈도에서 개체에 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, 투약량 및 투여 빈도는 (예컨대, IAA 또는 병변 내) 감염 부위에서의 CD101의 농도가 약 6시간 이내에 MPC 이상의 농도를 달성하는데 충분하면 된다.

IAC의 치료에 있어서 다른 중요한 고려사항은 약물(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)이 (예컨대, IAA 또는 병변 내) 감염 부위에서 유지되는 시간의 길이이다. 몇몇 경우에, 본 명세서에 기재된 약제학적 조성물은 (예컨대, IAA 또는 병변 내) 감염 부위에서의 CD101의 농도가 약 12시간 내지 약 75시간 동안(예컨대, 약 12시간, 14시간, 16시간, 18시간, 20시간, 22시간, 24시간, 26시간, 28시간, 30시간, 35시간, 40시간, 45시간, 50시간, 55시간, 60시간, 65시간, 70시간 또는 75시간 동안) MPC 이상인 농도에서 유지되는데 충분한 투약량 및 빈도에서 개체에 투여된다. 몇몇 경우에, (예컨대, IAA 또는 병변 내) 감염 부위에서의 CD101의 농도는 약 72시간 동안 MPC 이상인 농도에서 유지된다.

본 명세서에 기재된 약제학적 조성물은 단일 용량 또는 다회 용량 치료 요법의 일부로서 전달될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 투약량은 투여 경로 및 개체의 신체적 특징, 예컨대, 연령, 체중, 일반적 건강을 비롯한 인자에 따라 좌우된다. 투약량은 질환의 정도 및 개체의 상이한 파라미터와 같은 통상의 인자에 따라서 의사에 의해 조정될 수 있다. 전형적으로, 1회 이상의 용량 내에 함유되는 약제학적 조성물(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 양은 상당한 독성을 유도하는 일 없이 개체에서 IAC를 치료하거나 또는 이의 위험을 효과적으로 저감시키는 양일 수 있다.

몇몇 경우에, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 단일 용량을 포함하는 약제학적 조성물은 항진균제의 추가의 용량을 필요로 하는 일 없이 개체에서 IAC를 치료 또는 예방하는데 충분한 양으로 투여된다. 몇몇 경우에, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 단일 용량은 CD101이 개체 내에서 치료적 유효 농도에 있을 때 치료 유익을 부여하는(예컨대, 전신으로 활성이 되는) 일정 시간 기간 이내(예컨대, CD101의 단일 용량의 투여 전 또는 후 1분, 30분, 1시간, 2시간, 12시간, 24시간, 2일, 3일, 4일, 5일, 6일 또는 1주 이내)에 추가의 항진균제(예컨대, CD101 또는 또 다른 항진균제)의 병행 투여 없이 투여된다. 몇몇 경우에, 단일 용량 치료는 투여 전 또는 후 1 내지 21일 이내에 임의의 다른 항진균 치료와 조합되지 않는다. 예를 들어, CD101의 단일 용량은 진균 감염(예컨대, IAC)을 갖거나 또는 이의 위험이 있는 개체에 (예컨대, 경구로, 정맥내로, 피하로, 또는 근육내로) 투여될 수 있고, 단일 용량은 CD101에 의한 단일 용량 치료 전, 동안 또는 후에 추가의 항진균 치료를 필요로 하는 일 없이 진균 감염(예컨대, IAC)를 효과적으로 예방한다.

단일 용량 제형은 치료적 유효량으로 개체에게 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, CD101의 단일 용량(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)은 비경구 제형(예컨대, 정맥내, 복강내, 피하, 또는 근육내)을 포함할 수 있고, 약 50㎎ 내지 약 2000㎎(예컨대, 75 ±25㎎, 100 ±25㎎, 150 ±50㎎, 200 ±50㎎, 250 ±50㎎, 300 ±50㎎, 350 ±50㎎, 400 ±50㎎, 450 ±50㎎, 500 ±100㎎, 600 ±100㎎, 700 ±100㎎, 800 ±100㎎, 900 ±50㎎, 1000 mg ±100㎎, 1100 ±100㎎, 1200 ±100㎎, 1300 ±100㎎, 1400 ±100㎎, 1500 ±100㎎, 1600 ±100㎎, 1700 ±100㎎, 1800 ±100㎎, 또는 1900 ±100㎎)의 투약량으로 비경구적으로 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, 단일 용량은 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 경구 제형을 포함할 수 있고, 약 50㎎ 내지 약 2000㎎(예컨대, 75 ±25㎎, 100 ±25㎎, 150 ±50㎎, 200 ±50㎎, 250 ±50㎎, 300 ±50㎎, 350 ±50㎎, 400 ±50㎎, 500 ±100㎎, 600 ±100㎎, 700 ±100㎎, 800 ±100㎎, 900 ±50㎎, 1000 mg ±100㎎, 1100 ±100㎎, 1200 ±100㎎, 1300 ±100㎎, 1400 ±100㎎, 1500 ±100㎎, 1600 ±100㎎, 1700 ±100㎎, 1800 ±100㎎, 또는 1900 ±100㎎)의 용량으로 경구 투여될 수 있다.

몇몇 경우에, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물은 개체에서 IAC를 치료 또는 예방하는데 충분한 양 및 빈도로 다회용량 요법의 부분으로서 투여된다. 다회용량 요법은 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물의 2회 이상의 용량(2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 10회 초과의 용량)의 투여를 포함할 수 있다.

몇몇 경우에, 다회용량 요법은 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 비경구 (예컨대, 정맥내, 복강내, 또는 피하) 제형을 포함할 수 있다. 예를 들어, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)은 약 50-1200㎎(예컨대, 50-125㎎, 75-150㎎, 100-175㎎, 125-200㎎, 150-225㎎, 175-250㎎, 200-275㎎, 225-300㎎, 250-325㎎, 275-350㎎, 300-375㎎, 325-400㎎, 350-425㎎, 375-450㎎, 400-475㎎, 425-500㎎, 450-525㎎, 475-550㎎, 500-575㎎, 525-600㎎, 550-625㎎, 575-650㎎, 600-675㎎, 625-700㎎, 650-725㎎, 675-750㎎, 700-775㎎, 725-800㎎, 750-825㎎, 775-850㎎, 800-875㎎, 825-900㎎, 850-925㎎, 875-950㎎, 900-975㎎, 925-1000㎎, 950-1025㎎, 975-1050㎎, 1000-1075㎎, 1025-1100㎎, 1050-1125㎎, 1075-1150㎎, 1100-1175㎎, 1125-1200㎎, 50-250㎎, 250-400㎎, 200-600㎎, 400-1200㎎, 50-400㎎, 또는 50-1200㎎)의 투약량으로 비경구적으로(예컨대, 정맥내로, 복강내로 근육내로 또는 피하로) 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, 초회 용량은 약 400㎎의 CD101 또는 이의 중성 형태를 함유하고, 후속의 용량의 각각은 약 200㎎의 CD101의 염, 또는 이의 중성 형태를 함유한다. 몇몇 경우에, 초회 용량은 약 400㎎의 CD101, 또는 이의 염 또는 중성 형태를 포함하고, 후속의 용량의 각각은 약 50-400㎎(예컨대, 50-125㎎, 75-150㎎, 100-175㎎, 125-200㎎, 150-225㎎, 175-250㎎, 200-275㎎, 225-300㎎, 250-325㎎, 275-350㎎, 300-375㎎, 325-400㎎, 50-250㎎, 250-400㎎, 또는 50-400㎎)의 CD101, 또는 이의 염 또는 중성 형태를 포함한다. 비경구 제형은 규칙적(예컨대, 매일, 2일마다, 3일마다, 주마다) 또는 불규칙적인 간격으로 1회 또는 다수회 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, 비경구 제형은 경구 투약 제형과 병용하여 투여된다. 비경구 투약 형태의 투여는 경구 투약 형태의 투여 시간에 대해서 일치할 수 있거나 또는 상이한 시간(예컨대, 15분, 45분, 1시간, 12시간, 24시간, 또는 3일)에 일어날 수 있다. 경우에 따라서, 비경구 투약 형태는 1주 또는 그 이상마다의 용량(예컨대, 1, 2, 3, 또는 4회 용량/개월) 또는 1개월 또는 그 이상마다의 용량(1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12회 용량/년)으로 개체에 투여될 수 있다. 대안적으로, 비경구 투약 형태는 개체에 1회 투여될 수 있고, 추가의 투약량이 후속되지 않는다.

몇몇 경우에, 다회 치료 용법은 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 경구 제형을 포함할 수 있고, 약 50㎎ 내지 약 2000㎎(예컨대, 75 ±25㎎, 100 ±25㎎, 150 ±50㎎, 200 ±50㎎, 250 ±50㎎, 300 ±50㎎, 350 ±50㎎, 400 ±50㎎, 500 ±100㎎, 600 ±100㎎, 700 ±100㎎, 800 ±100㎎, 900 ±50㎎, 1000 mg ±100㎎, 1100 ±100㎎, 1200 ±100㎎, 1300 ±100㎎, 1400 ±100㎎, 1500 ±100㎎, 1600 ±100㎎, 1700 ±100㎎, 1800 ±100㎎, 또는 1900 ±100㎎)의 용량으로 경구 투여될 수 있다. CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101) 또는 항진균제의 임의의 제형의 경구 투약량은 매일 또는 주당 1회 이상(예컨대, 1주에 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6일) 투여될 수 있다. 예를 들어, 투약량은 2 내지 8주(예컨대, 2 내지 8주, 2 내지 7주, 2 내지 6주, 2 내지 5주, 2 내지 4주, 또는 2 내지 3주)의 과정에 걸쳐서 주당 1회 이상 투여될 수 있다.

다회용량 치료 용법에서, 각 투약량의 화합물(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 투여 시기는 개체의 의학적 및 건강 상태에 따라 좌우된다. 각 투약량의 화합물(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)의 투여 시기는 개체에서 진균 감염(예컨대, IAC)을 치료하거나 이의 가능성을 저감시키기 위하여 의사에 의해 최적화될 수 있다.

본 명세서에 기재된 방법 중 어느 하나에 있어서, 약제학적 조성물은 개체에서 진균 감염(예컨대, IAC)의 가능성을 효과적으로 저감시키기 위한 투약량 패턴, 빈도 또는 지속기간에 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, 약제학적 조성물은 1회 이상/년(예컨대, 1, 2, 3, 4, 5, 또는 6회/년), 1회 이상/개월(예컨대, 1, 2, 3, 또는 4회/년), 1회 이상/주(예컨대, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 또는 7회/주), 또는 1회 이상/일(예컨대, 1, 2, 또는 3회/일) 투여된다. 몇몇 경우에, 약제학적 조성물은 연속 일(예컨대, 매일), 연속 주(예컨대, 매주) 또는 연속 개월(예컨대, 매월) 투여된다. 몇몇 경우에, 약제학적 조성물은 비연속 일(예컨대, 하루 걸러, 3일마다, 4일마다, 5일마다 또는 6일마다), 주(예컨대, 한주 걸러, 2주마다 또는 3주마다) 또는 개월(예컨대, 한달 걸러, 또는 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 또는 11개월마다)에 투여된다. 몇몇 경우에, 약제학적 조성물은 약 1 내지 8주(예컨대, 1 내지 3, 2 내지 4, 3 내지 5, 4 내지 6, 5 내지 7, 또는 6 내지 8주)의 지속 기간 동안 투여된다. 몇몇 경우에, 약제학적 조성물은 약 2 내지 12개월(예컨대, 2 내지 4, 3 내지 5, 4 내지 6, 5 내지 7, 6 내지 8, 7 내지 9, 8 내지 10, 9 내지 11, 또는 10 내지 12개월)의 지속 기간 동안 투여된다.

IV. 병용 요법

몇몇 경우에, 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물은 공동-감염과 연관된 IAC를 치료 또는 예방하기 위하여 1종 이상의 추가의 항-미생물 제제(예컨대, 항진균제 또는 항박테리아제)와 병용하여 투여될 수 있으며, 여기서 공동-감염은 칸디다 및 1종 이상의 추가의 진균 또는 박테리아 균주를 포함한다. CD101과 병용하여 투여될 수 있는 항진균제 및 항박테리아제는 이하에 더욱 기재된다.

항진균제

본 명세서에 기재된 다회용량 요법에서, 제2 항진균제는 진균 감염(예컨대, IAC)을 치료하거나 이의 가능성을 저감 또는 예방하기 위하여 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물과 병용하여 사용될 수 있다. 제2 항진균제 및 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물은 병행하여 투여될 수 있다. 대안적으로, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물이 먼저 투여될 수 있고 이어서 항진균제가 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, 제2 항진균제가 먼저 투여되고 이어서 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물이 투여된다.

CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물과 병용하여 제2 항진균제로서 사용될 수 있는 항진균제는 CD101(예컨대, CD101의 염 또는 이의 중성 형태), 클린다마이신(브랜드명 CLEOCIN® 및 DALACIN®하에 판매), 트리메토프림(trimethoprim)(브랜드명 PROLOPRIM®, MONOTRIM® 및 TRIPRIM®하에 판매), 설파메톡사졸(브랜드명 GANTANOL®하에 판매), 코트리목사졸(트라이메토프림과 설파메톡사졸의 조합물(TMP-SMX라고도 알려짐); 이 조합물은 브랜드명 BACTRIM®, COTRIM®, SULFATRIM® 및 SEPTRA®하에 판매됨), 아토바쿠온(atovaquone)(브랜드명 MEPRON®하에 판매), 펜타미딘(pentamidine)(브랜드명 NEBUPENT® 및 PENTRAM® 하에 판매), 프리마퀸(primaquine), 피리메타민(pyrimethamine)(브랜드명 DARAPRIM®하에 판매), 및 이들의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

대안적으로, 본 명세서에 기재된 제2 항진균제는 글루칸 합성효소 저해제(예컨대, 에키노칸딘, 엔푸마펀진(enfumafungin)), 폴리엔 화합물, 아졸 화합물, 및 이들의 약제학적으로 허용 가능한 염으로부터 선택될 수 있다.

제2 항진균제로서 사용될 수 있는 글루칸 합성효소 저해제는 에키노칸딘(예컨대, 카스포펀진(caspofungin), 미카펀진, 또는 아니둘라펀진(anidulafungin)) 엔푸마펀진(예컨대, SCY-078(MK-3118이라고도 알려짐, 문헌[Lepak et al., Antimicrobial agents and chemotherapy 59:1265 (2015)] 참조) 및 이의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

아졸 화합물은 아졸기를 함유하는 항진균 화합물(즉, 적어도 1개의 N과 N, O 또는 S로부터 선택된 1개 이상의 헤테로원자를 갖는 5-원 복소환식 고리)이다. 아졸 화합물은 효소인 14α-데메틸라제에 대한 결합에 의해 기능하고, 그의 천연 기능을 파괴, 저해 및/또는 예방한다. 효소인 14α-데메틸라제는 라노스테롤이 진균 세포벽 내 필수 성분인 에르고스테롤로 전환되기 전에 라노스테롤로부터 C-14 α-메틸기의 제거를 촉매하는 사이토크롬 P450 효소이다. 따라서, 14α-데메틸라제를 저해함으로써, 에르고스테롤의 합성이 저해된다. 본 발명의 제1 투약 형태에 사용될 수 있는 아졸 화합물은 (예컨대, VT-1161, VT-1129, VT-1598, 플루코나졸, 알바코나졸, 바이포나졸(bifonazole), 부토코나졸, 클로트라이마졸, 에코나졸, 에페나코나졸, 펜티코나졸, 이사부코나졸, 아이소코나졸, 이트라코나졸, 케토코나졸, 룰리코나졸, 미코나졸, 오모코나졸, 옥시코나졸, 포사코나졸, 프라미코나졸, 라부코나졸, 세르타코나졸, 설코나졸, 터코나졸, 티오코나졸 및 보리코나졸), VL-2397, 및 플루사이토신(flucytosine)(ANCOBON®)을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

폴리엔 화합물은 진균막에 삽입되고, 진균막에서 에르고스테롤 및 구조적으로 관련된 스테롤에 결합되고, 막 구조 완전성을 파괴하여, 진균으로부터 세포 성분의 누출을 초래하여 감염을 일으키는 화합물이다. 폴리엔 화합물은 전형적으로 3 내지 8개의 공액된 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 대형 락톤 고리를 포함하고 또한 당 모이어티 및 방향족 모이어티를 또한 함유할 수 있다. 폴리엔 화합물은 전형적으로 3 내지 8개의 공액된 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 대형 락톤 고리를 포함하고 또한 당 모이어티 및 방향족 모이어티를 또한 함유할 수 있다. 본 발명의 제1 투약 형태에 사용될 수 있는 폴리엔 화합물은 67-121-A, 67-121-C, 암포테리신 B, 암포테리신 B의 유도체(예컨대, C35deOAmB; 문헌[Gray et al., Proceedings of the National Academy of Sciences 109:2234 (2012)] 참조), 아레놈브신 B(arenomvcin B), 앙루레닌(aurenin), 아우레오펀진 A(aureotuscin A), 아우레오투신(aureotuscin), 칸디딘(candidin), 키닌(chinin), 키틴 합성 저해제(예컨대, 루페누론(lufenuron)), 데메톡시라마마이신(demethoxyrapamycin), 더모스타틴 A(dermostatin A), 더모스타틴 B, DJ-400-B1, DJ-400-B2, 엘리자베틴(elizabethin), 유로시딘 A(eurocidin A), 유로시딘 B, 필리핀 I(filipin I), 필리핀 II, 필리핀 III, 필리핀 IV, 펀지크로민(fungichromin), 간니바마이신(gannibamycin), 하마이신(hamycin), 레보린(levorin) A2, 리에노마이신(lienomycin), 루센소마이신(lucensomycin), 마이코헵틴(mycoheptin), 마이코티신 A(mycoticin A), 마이코티신 B, 나타마이신(natamycin), 나이스타틴(nystatin) A, 나이스타틴 A3, 파트리신 A(partricin A), 파트리신 B, 페리마이신 A(perimycin A), 피마리신(pimaricin), 폴리펀진 B(polifungin B), 라파마이신, 렉틸라벤돔브신(rectilavendomvcin), 리모시딘(rimocidin), 로플라마이코인(roflamycoin), 테트라마이신 A, 테트라마이신 B, 테트린 A(tetrin A), 테트린 B, 및 이들의 약제학적으로 허용 가능한 염을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

제2 항진균제로서 사용될 수 있는 항진균 특성을 갖는 기타 화합물은 폴리고디알(polygodial), 벤조산, 시클로피록스(ciclopirox), 톨나프테이트(tolnaftate), 운데실렌산, 플루사이토신 또는 5-플루사이토신, 그리세오풀빈(griseofulvin) 및 할로프로긴(haloprogin)을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

항박테리아제

본 명세서에 기재된 다회용량 요법에서, 항박테리아제는 공동-감염과 연관된 IAC를 치료하거나, 이의 가능성을 저감시키거나 또는 예방하기 위하여 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물과 병용하여 사용될 수 있다. 몇몇 경우에, 항박테리아제와 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물은 병행해서 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물이 먼저 투여되고 나서 항박테리아제가 투여될 수 있다. 몇몇 경우에, 항박테리아제가 먼저 투여되고 나서 CD101(예컨대, 염 또는 중성 형태의 CD101)을 포함하는 약제학적 조성물이 투여될 수 있다.

항박테리아제는, 아미노글리코사이드류(예컨대, 아미카신(AMIKIN®), 젠타마이신(GARAMYCIN®), 카나마이신(KANTREX®), 네오마이신(MYCIFRADIN®), 네틸마이신(netilmicin)(NETROMYCIN®), 토브라마이신(NEBCIN®), 파로모마이신(Paromomycin)(HUMATIN®)), 안사마이신류(ansamycins)(예컨대, 겔다나마이신(geldanamycin), 허비마이신(herbimycin)), 카바세펨(carbacephem)(예컨대, 로라카베프(loracarbef)(LORABID®), 카바페넴류(Carbapenems)(예컨대, 에르타페넴(ertapenem)(INVANZ®), 도리페넴(doripenem)(DORIBAX®), 이미페넴(imipenem)/실라스타틴(cilastatin)(PRIMAXIN®), 메로페넴(meropenem)(MERREM®), 세팔로스포린류(cephalosporins)(제1 세대)(예컨대, cefadroxil (DURICEF®), cefazolin (ANCEF®), 세팔로틴(cefalotin) 또는 세팔로틴(cefalothin)(KEFLIN®), 세팔렉신(cefalexin)(KEFLEX®), 세팔로스포린류(제2 세대)(예컨대, 세파클로르(cefaclor)(CECLOR®), 세파만돌(cefamandole)(MANDOL®), 세폭시틴(cefoxitin)(MEFOXIN®), 세프프로질(cefprozil)(CEFZIL®), 세푸록심(cefuroxime)(CEFTIN®, ZINNAT®)), 세팔로스포린류(제3 세대)(예컨대, 세픽심(cefixime)(SUPRAX®), 세프디니어(cefdinir)(OMNICEF®, CEFDIEL®), 세프티도렌(cefditoren)(SPECTRACEF®), 세포페라존(cefoperazone)(CEFOBID®), 세포탁심(cefotaxime)(CLAFORAN®), 세프포독심(cefpodoxime)(VANTIN®), 세프타지딤(ceftazidime)(FORTAZ®), 세프티부텐(ceftibuten)(CEDAX®), 세프티족심(ceftizoxime)(CEFIZOX®), 세프트라이악손(ceftriaxone)(ROCEPHIN®)), 세팔로스포린류(제4 세대)(예컨대, 세페핌(cefepime)(MAXIPIME®)), 세팔로스포린류(제5 세대)(예컨대, 세프토비프롤(ceftobiprole)(ZEFTERA®)), 글리코펩타이드류(glycopeptides)(예컨대, 테이코플라닌(teicoplanin)(TARGOCID®), 반코마이신(vancomycin)(VANCOCIN®), 텔라반신(telavancin)(VIBATIV®)), 린코사마이드류( lincosamides)(예컨대, 클린다마이신(clindamycin)(CLEOCIN®), 린코마이신(lincomycin)(LINCOCIN®)), 리포펩타이드(lipopeptide)(예컨대, 답토마이신(daptomycin)(CUBICIN®)), 마크롤라이드류(macrolides)(예컨대, 아지트로마이신(azithromycin)(ZITHROMAX®, SUMAMED®, ZITROCIN®), 클라리트로마이신(clarithromycin)(BIAXIN®), 디리트로마이신(dirithromycin)(DYNABAC®), 에리트로마이신(erythromycin)(ERYTHOCIN®, ERYTHROPED®), 록시트로마이신(roxithromycin), 트롤레안도마이신(troleandomycin)(TAO®), 텔리트로마이신(telithromycin)(KETEK®), 스펙티노마이신(spectinomycin)(TROBICIN®)), 모노박탐류(monobactams)(예컨대, 아즈트레오남(aztreonam)(AZACTAM®)), 나이트로퓨란류(nitrofurans)(예컨대, 퓨라졸리돈(furazolidone)(FUROXONE®), 나이트로퓨란토인(nitrofurantoin)(MACRODANTIN®, MACROBID®)), 페니실린류(penicillins)(예컨대, 아목시실린(amoxicillin)(NOVAMOX®, AMOXIL®), 암피실린(ampicillin)(PRINCIPEN®), 아즐로실린(azlocillin), 카베니실린(carbenicillin)(GEOCILLIN®), 클록사실린(cloxacillin)(TEGOPEN®), 디클록사실린(dicloxacillin)(DYNAPEN®), 플루클록사실린(flucloxacillin)(FLOXAPEN®), 메즐로실린(mezlocillin)(MEZLIN®), 메티실린(methicillin)(STAPHCILLIN®), 나프실린(nafcillin)(UNIPEN®), 옥사실린(oxacillin)(PROSTAPHLIN®), 페니실린 G(penicillin G)(PENTIDS®), 페니실린 V(PEN-VEE-K®), 피페라실린(piperacillin)(PIPRACIL®), 테모실린(temocillin)(NEGABAN®), 티카실린(ticarcillin)(TICAR®)), 페니실린 조합물(penicillin combinations)(예컨대, 아목시실린(amoxicillin)/클로불라네이트(clavulanate)(AUGMENTIN®), 암피실린(ampicillin)/설박탐(sulbactam)(UNASYN®), 피페라실린(piperacillin)/타조박탐(tazobactam)(ZOSYN®), 티카실린(ticarcillin)/클라불라네이트(TIMENTIN®)), 폴리펩타이드류(예컨대, 바시트라신(bacitracin), 콜리스틴(colistin)(COLY-MYCIN-S®), 폴리믹신 B(polymyxin B), 퀴놀론류(quinolones)(예컨대, 시프로플록사신(ciprofloxacin)(CIPRO®, CIPROXIN®, CIPROBAY®), 에녹사신(enoxacin)(PENETREX®), 가티플록사신(gatifloxacin)(TEQUIN®), 레보플록사신(levofloxacin)(LEVAQUIN®), 로메플록사신(lomefloxacin)(MAXAQUIN®), 목시플록사신(moxifloxacin)(AVELOX®), 날리딕산(nalidixic acid)(NEGGRAM®), 노르플록사신(norfloxacin)(NOROXIN®), 오플록사신(ofloxacin)(FLOXIN®, OCUFLOX®), 트로바플록사신(trovafloxacin)(TROVAN®), 그레파플록사신(grepafloxacin)(RAXAR®), 스파르플록사신(sparfloxacin)(ZAGAM®), 테마플록사신(temafloxacin)(OMNIFLOX®)), 설폰아마이드류(sulfonamides)(예컨대, 마페나이드(mafenide)(SULFAMYLON®), 설폰아미도크리소이딘(sulfonamidochrysoidine)(PRONTOSIL®), 설파세타마이드(sulfacetamide)(SULAMYD®, BLEPH-10®), 설파디아진(sulfadiazine)(MICRO-SULFON®), 은 설파디아진(silver sulfadiazine)(SILVADENE®), 설파메티졸(sulfamethizole)(THIOSULFIL FORTE®), 설파메톡사졸(sulfamethoxazole)(GANTANOL®), 설파닐리마이드(sulfanilimide), 설파살라진(sulfasalazine)(AZULFIDINE®), 설피속사졸(sulfisoxazole)(GANTRISIN®), 트라이메토프림(trimethoprim)(PROLOPRIM®), TRIMPEX®), 트라이메토프림-설파메톡사졸(trimethoprim-sulfamethoxazole)(코-트라이목사졸)(TMP-SMX)(BACTRIM®, SEPTRA®)), 테트라사이클린류(예컨대, 데메클로사이클린(demeclocycline)(DECLOMYCIN®), 독시사이클린(VIBRAMYCIN®), 미노사이클린(minocycline)(MINOCIN®), 옥시테트라사이클린(TERRAMYCIN®), 테트라사이클린(SUMYCIN®, ACHROMYCIN® V, STECLIN®)), 마이코박테리아에 대한 약물(예컨대, 클로파지민(clofazimine)(LAMPRENE®), 답손(dapsone)(AVLOSULFON®), 세프레오마이신(capreomycin)(CAPASTAT®), 사이클로세린(cycloserine)(SEROMYCIN®), 에탐부톨(ethambutol)(MYAMBUTOL®), 에티오나마이드(ethionamide)(TRECATOR®), 이소니아지드(isoniazid)(I.N.H.®), 피라지나마이드(pyrazinamide)(ALDINAMIDE®), 리팜핀(rifampin)(RIFADIN®, RIMACTANE®), 리파부틴(rifabutin)(MYCOBUTIN®), 리파펜틴(rifapentine)(PRIFTIN®), 스트렙토마이신(streptomycin)), 및 기타(예컨대, 아르스페나민(arsphenamine)(SALVARSAN®), 클로람페니콜(chloramphenicol)(CHLOROMYCETIN®), 포스포마이신(fosfomycin)(MONUROL®), 푸시딘산(fusidic acid)(FUCIDIN®), 리네졸리드(linezolid)(ZYVOX®), 메트로니다졸(metronidazole)(FLAGYL®), 무피로신(mupirocin)(BACTROBAN®), 플라텐시마이신(platensimycin), 퀴누프리스틴(quinupristin)/달포프리스틴(dalfopristin)(SYNERCID®), 리팍시민(rifaximin)(XIFAXAN®), 티암페니콜(thiamphenicol), 티게사이클린(tigecycline)(TIGACYL®), 티니다졸(tinidazole)(TINDAMAX®, FASIGYN®))을 포함하지만, 이들로 제한되는 것은 아니다.

이하의 실시예는 본 발명을 이것으로 제한하지 위함이 아니라 더욱 예시하기 위한 것이다.

실시예

실시예 1. 복강내 농양 모델 내 감염 부위에서의 에키노칸딘 항진균의 약물 침투

본 연구의 목적은 감염 부위에서 에키노칸딘 약물의 침투를 결정적으로 평가하고, 그리고 병변 내의 약물 수준이 진행된 병기의 내성 출현에 대한 관찰된 임상 반응 및 잠재성에 대한 설명을 얼마나 돕는지를 평가하기 위한 것이다.

실험 방법

칸디다 알비칸스 균주 및 항진균 약물. 씨. 알비칸스 균주 SC4315는 하룻밤 진탕하면서 37℃에서 효모 추출 펩톤 덱스트로스 브로쓰에서 배양하였다. 세포를 세척하고, 계수하고, 접종을 위하여 1×10⁸개의 집락 형성 단위(CFU)/㎖로 준비하였다. CD101, CD101-D9(Cidara Therapeutics, Inc., 미국 캘리포니아주 샌디에이고 소재) 및 미카펀진(Astellas Pharma Inc., 일본 도쿄 소재)은 이들의 제조사로부터 표준 분말로서 얻었다. ¹³C₆-미카펀진은 프랑스 소재의 ALSACHIM으로부터 구입하였다.

복강내 칸디다증의 마우스 모델 및 조직 샘플 수집. IAC의 마우스 모델은 이 연구에 사용되었다. 18 내지 22g 중량의 암컷 6 내지 8주령의 CD1 마우스(Charles River Laboratories)는 1×10⁷ CFU의 씨. 알비칸스 SC5314와 함께 앞서 기재된 바와 같은 멸균 대변 매트릭스와 함께 복막내(IP)로 감염되었다. 20 ㎎/㎏(인간화된 치료 용량과 등가)에서의 CD101 또는 5 ㎎/㎏(치료 용량)에서의 미카펀진의 단일 IP 용량을 접종 후 3일째에 15마리 마우스의 군에 투여하였다. 마우스를 항진균 치료(n=1) 직전, 및 용량 후 1, 3, 6, 24 및 48시간(시점당 군당 3마리의 마우스)에 희생시켰다. 간 및 신장을 농양 > 1㎜ 직경에 대해서 이용하고, 절개하여, 냉동조직 트레이(cryohistology tray) 상에 놓고, 액체 질소에서 스냅-냉동하고, MALDI 영상화를 위한 조직 단면에 대해서 -80℃에서 보존하였다.

추가의 실험에 있어서, 5 ㎎/㎏에서의 CD101의 저용량을 투여하고, 미카펀진을 동일 용량에서 부여하였다. 간 및 신장 샘플을 MALDI 영상화 및 절대 약물 정량화 둘 다를 위하여 투약 후 6시간 및 24시간에 수집하였다.

단일 용량 CD101 및 다회 용량의 미카펀진의 치료 수준을 비교할 목적으로 또 다른 별도의 실험에서, 20 ㎎/㎏에서의 CD101의 단일 용량을 접종 후 3일째에 부여하고, 접종 후 3일째에 시작해서 5 ㎎/㎏의 미카펀진의 1일 1회 치료 및 총 3회 용량의 미카펀진을 투여하였다. 간 및 신장을 각 약물의 초회 용량 후 48시간 및 72시간에 수집하였다.

조직 절편화 및 매트릭스 적용. Leica CM1850 cryostat(일리노이주 버팔로 그로브 소재)를 이용해서 조직을 12㎛로 절편화하고 스테인리스강 슬라이드(MALDI-MSI 분석용) 또는 젖빛 유리 현미경 슬라이드(H&E 염색용) 상에 장착하였다. 조직 단면을 분석 때까지 -80℃에서 보존하였다. MALDI-MSI 분석 전에, 조직 단면을 해동시키고 이온화 매트릭스에 적용하였다. CD101에 대해서, 267 f㏖/㎕의 CD101-D9를 함유하는 2,5-다이하이드록시벤조산(DHB)(50% 메탄올 중 20 ㎎/㎖)(Cidara Therapeutics, Inc)을 50 ㎕/분의 유량, 60℃ 노즐 온도 및 5 p.s.i.에서 작동하는 HTX TM 스프레이어(노스캐롤라이나주 채플힐 소재)를 이용해서 표면에 도포하였다. 조직에 대해서 25회 통과를 수행하였다. 미카펀진에 대해서, 5 n㏖/㎕ ¹³C₆-미카펀진(Alsachim, 프랑스 소재)을 함유하는 1,5-다이아미노나프탈렌(1,5-DAN) 매트릭스(50% 아세톤 중 5 ㎎/㎖)를 60 ㎕/분의 유량, 50℃ 노즐 온도 및 5 p.s.i.에서 상기 TM 스프레이어에 의해 조직 표면에 코팅하였다. 조직에 대해서 25회 통과를 수행하였다.

MALDI-MSI 분석. MALDI-MSI 분석은 m/z 400, 반치 전폭에서 60,000의 해상도를 갖는 MALDI LTQ Orbitrap XL 질량 분광기(Thermo Fisher Scientific, 독일 브레멘 소재)를 사용해서 수행되었다. 이 해상도는 MS/MS로부터의 요건 및 후속의 신호 손실 없이 배경으로부터의 CD101, CD101-D9, 미카펀진 및 ¹³C₆-미카펀진 피크를 해상하는데 충분하였다. 그러나, 약물 피크 동질성은 투약된 조직으로부터 직접 몇 개의 MS/MS 스펙트럼을 획득함으로써 확인되었다. CD101 및 미카펀진에 대한 표준은 기기 파라미터를 최적화하기 위하여 약물-미경험 간 조직에 스파이킹된 것과 스테인리스강제 표적 플레이트로부터 둘 다 직접 분석되었다. 미카펀진 및 CD101의 MALDI-MSI 분석에 대한 검출 하한(LOD)은, 각각 기재된 바와 같이 계산된, 500 ng/g 및 1 ㎍/g의 간 또는 신장 조직이었다.

CD101에 대해서, 스펙트럼은 25 μJ의 레이저 에너지를 이용한 양이온화를 사용해서 m/z 1000 내지 1500 범위에서 획득되었고, 15개의 레이저 샷이 각 위치에서 발사되었다. 미카펀진에 대한 스펙트럼은 10 μJ의 레이저 에너지를 이용한 음이온화 모드 하에 동일한 m/z 범위에서 획득되었고, 5개의 레이저 샷이 각 위치에서 발사되었다. 레이저 단차 크기는 50 내지 75㎛에서 설정되었고, 병변 내의 작은 괴사 영역은 쉽게 해상될 수 있었고, 인접한 획득부 상에서의 레이저 스팟의 중첩은 관찰되지 않았다.

데이터 시각화는 Thermo ImageQuest 소프트웨어를 사용해서 수행되었다. CD101의 정규화된 이온 영상은 CD101 [M+H]⁺ 신호(m/z 1225.603 ± 0.005)를CD101-D9 [M+H]⁺ 신호(m/z 1234.651± 0.005)로 나눔으로써 생성되었다. 미카펀진의 정규화된 이온 영상은 [M-H]^- 신호(m/z 1268.444 ± 0.005)를 ¹³C₆-미카펀진 [M-H]^- 신호 (m/z 1274.455 ± 0.005)로 나눔으로써 생성되었다.

레이저-캡처 현미해부. 합해서 2 내지 6백만 ㎛²의 괴사성 병변 및 둘레 조직 영역은 Leica LMD6500 시스템(일리노이주 버팔로 그로브 소재)을 이용한 3 내지 6개의 일련의 간 또는 신장 생검 조직 단면으로부터 절개되었다. 병변 영역은 인접하게-절편화된 H&E 참조 조직과의 비교에 의해 명시야 영상 스캔으로부터 광학적으로 식별되었다. 풀링되어 절개된 병변 조직은 0.25㎖ 표준 PCR 튜브에 수집하고, 즉시 보관을 위하여 -80℃ 냉동고로 옮겼다.

분석 전에, 튜브를 30분 동안 실온에서 해동시켰다. 각 튜브에 50㎕의 추출 용액(100 ng/㎖의 CD101-D9와 100 ng/㎖의 ¹³C₆-미카펀진을 가진 ACN/MeOH(1/1))을 첨가하고, 이어서 5분 동안 초음파 처리하고 실온에서 5분 동안 10000 RPM에서 원심분리시켰다. 40㎕의 상청액을 LC/MS-MS 분석으로 옮기고 추가의 40㎕의 MilliQ 워터로 희석시켰다.

모든 화합물에 대한 순수한 1 ㎎/㎖ DMSO 스톡을 50/50 아세토나이트릴/물에 연속 희석시켜 표준 곡선 및 품질 대조군 스파이킹 용액을 작성하였다. 3㎕의 순수한 스파이킹 용액을 2㎕의 병변 균질물에 첨가하고, 50㎕의 추출 용액(100 ng/㎖ CD101-D9 및 100 ng/㎖ ¹³C₆-미카펀진과 함께 ACN/MeOH(1/1))을 첨가함으로써 추출을 수행하였다. 추출물을 5분 동안 와류시키고, 5분 동안 10000 RPM에서 원심분리시켰다. 40㎕의 상청액을 LC/MS-MS 분석을 위하여 옮기고, 추가의 40㎕의 MilliQ 워터로 희석시켰다. 앞서 최적화된 LC/MS-MS 파라미터는 분석을 위하여 사용되었다(LC/MS-MS 부문 참조).

LC/MS-MS에 의한 약물 정량화. LC-MS 분석은 Thermo Scientific Dionex UltiMate 3000 바이너리 시스템에 결합된 Q Exactive 고해상도 질량분광기(Thermo Fisher Scientific, 매사추세츠주 월섬 소재) 상에서 수행하였다. 크로마토그래피는, 이동상 A에 대해서 ACN:H₂O(60:40) 및 10mM 아세트산암모늄, 그리고 이동상 B에 대해서 IPA:ACN:MeOH(80:10:10) 및 10mM 아세트산암모늄에 의한 역상 구배 용리를 이용하는 Kinetex C18 칼럼(2.1×50㎜; 입자 크기 1.7㎛, Phenomenex, 캘리포니아주 토런스 소재)으로 수행하였다. 300㎕/분의 유량이 이용되었고, 구배는 0.5분 동안 20% B 유지, 이어서 3.5분에 95%까지 선형 증가, 2.2분 동안 유지 및 0.3분에 초기 20% B로 복귀로 이루어졌다. 칼럼은 다음 주사 전에 1.5분 동안 평형화되었고, 칼럼 및 샘플 트레이의 온도는 각각 50℃ 및 4℃에서 유지되었다. CD101 및 미카펀진에 대한 칼럼 체류 시간은 각각 3.32분 및 3.2분이었다.

주된 MS 파라미터는 다음과 같았다: 스프레이 전압, 3.5 kV; 모세관 온도, 320℃; HESI 프로브 온도, 400℃; S-렌즈 RF 수준, 50. 차단스 가스(sheath gas) 및 보조 가스는 각각 45 유닛 및 10 유닛으로 설정되었다. 외부 질량 교정은 수순 전에 수행되었다. CD101에 대해서, 풀 스캔(full scan)은 100㎳의 최대 IT에 대해서 해상력 70,000, AGC 표적 3e6에서 m/z 250 내지 1500의 질량 범위를 가진 양이온화 모드로 적용되었다. 미카펀진에 대해서, 풀 스캔은 100㎳의 최대 IT에 대해서 해상력 70,000, AGC 표적 3e6에서 m/z 250 내지 1500의 질량 범위를 가진 음이온화 모드로 적용되었다. CD101 [M+H]+ 신호는 CD101-D9 [M+H]+에 대해서 정규화되었고 미카펀진 [M+H]- 신호는 ¹³C₆-미카펀진 [M+H]-에 대해서 정규화되었다.

통계학적 분석. 절대 약물 농도를 그래프화하고 GraphPad 소프트웨어(Prism 7; GraphPad Software, Inc., 캘리포니아주 샌디에이고 소재)에서 통계학적으로 분석하였다. 상이한 시점에서 상이한 조직 구획에서의 약물 수준을, 일원변량분석(one way analysis of variance: ANOVA) 및 둔의 다중비교(Dunn' multiple comparison)를 사후 분석에 사용하였다. 통계학적 유의성은 P < 0.05로서 정의되었다. 신속한 항진균 요법 및 소스 대조군은 성공적인 치료에 있어서 중요하다.

결과

미카펀진 및 CD101의 단일 용량 후의 조직 분포 및 침투.

병리조직학 및 MALDI 영상 분석. IAC 모델은 감염 후 3일에 풍부한 불균질 병변을 수득하였다. 이어서, 에키노칸딘 항진균 약물을 도입하고, 미카펀진 및 CD101의 공간적 분포를, 간 및 신장 조직에서의 약물 농도의 고-해상도 히드 맵을 전달하는 MALDI 질량 분광분석 영상화(MALDI-MSI)에 의해 가시화하였다. 인접한 단면의 병리조직학적 염색(헤마톡실린 및 에오신(H&E) 및 고모리 메테나민 은(GMS))을 이용하는 이들 영상의 사이드 바이 사이드 비교는 상이한 병변 구조에서의 약물 침투뿐만 아니라, 약물 분포와 진균 세포의 위치 간의 관계를 나타내었다. 병리조직학적 분석에서, 복부 장기에 형성된 병변이 각종 크기의 괴사성 코어를 둘러싸는 거대 대식세포/호중구 침윤물을 특징으로 하는 것이 관찰되었다. 진균-특이적 GMS 염색은 또한 병변 내 진균 부하가 병변의 괴사성 중증도와 상관이 있는 것으로 나타난 것을 더욱 뒷받침하였다. 대부분, 고농도 진균 염색이 괴사 영역에서 관찰되었다.

단일 인간화된 용량 후, 두 에키노칸딘이 간 및 신장으로 신속하게 분배되었다. 그러나, 조직 노출의 약동학 및 병변 침투의 패턴은 이들 두 약물에 대해서 현저하게 상이하였다. 5 ㎎/㎏에서의 미카펀진의 단일 용량 투여 후에, 약물은 간 조직에 신속하게 분배되었고 1시간에 피크 강도에 도달하였다(도 1a). 전체 조직에 대한 감소된 약물 강도(상대 약물 존재비)가 3시간 및 6시간에 관찰되었지만; 약물 신호는 약물이 괴사성 코어 내로 약간 침투가 검출된 상태로 병변의 가장자리에서 관찰된 경우 6시간까지 병변에서 간신히 검출 가능하였다. 괴사성 병변 내로의 약물의 침투는, 미카펀진 신호가 병변 내부에서 검출되고 둘레의 연관이 없는 조직뿐만 아니라, 괴사성 중심에 비해서 병변의 외부 가장자리에서 더 높은 강도로 현저한 경우, 24시간에 명백하게 관찰되었다. 24-시간 MALDI 영상 및 인접한 GMS 염색 단면의 확대도(도 2)는 미카펀진이 병변 가장자리에 현저하게 존재하는 한편, 진균 세포는 전체 병변을 통해서 대량의 망상체를 구성하는 것을 나타내었다. 따라서, 약물과 진균 간의 상호작용은 병변의 외부 부분에 제한되었다. 그러나, 진균 집단의 대부분이 존재하는 괴사성 중심 내에는, 검출 가능한 약물 노출이 없었다(미카펀진 및 CD101의 MALDI-MSI 분석에 대한 검출 한계는 간 또는 신장 조직에 대해서 각각 500 ng/g 및 1 ㎍/g이었다). 더욱이, 24시간 경과 시 추가의 투약 없이, 병변 내의 이러한 약물의 체류는 너무 낮아서 간으로부터의 신속한 약물 청소를 능가하지 못하였으며, 이때 약물 수준은 검출 하한 훨씬 아래로 떨어져, 어떠한 약물 신호도 48시간에 검출되지 않았다. 신장에서, 조직 분포 및 병변 침투의 동일한 동역학 패턴이 미카펀진에 대해서 관찰되었다.

간에서, CD101 신호 강도가 조사된 최초 시점(투약 후 1시간)에서 검출되었고, 3시간 및 6시간에 점차 증가되었고, 투약 후 6시간에 최대로 되었다(도 1b). 그 후, CD101 약물 강도는 서서히 감소되었지만 투약 후 48시간에도 강하게 여전히 지속되었다. 이온 맵 및 GMS 염색의 보다 엄밀한 조사는 가능한 빠르게 3시간에 검출 가능한 병변 침투를 드러냈고(CD101 신호가 병변의 내부에 나타남), 약물 분포의 구배는 6시간에 병변 내에서 관찰되었는데 외부 영역에서 더 높은 약물 강도 그리고 괴사성 중심에서 더 적은 신호로 관찰되었다(도 2). 후기 시점(24시간 및 48시간)에서, CD101은 둘레 조직 약물이 감소하면서 병변 내부에서서 느린 축적으로 주로 지속되고 있었다. 48-시간 확대도는 병변 내의 CD101의 더욱 균질한 분포를 매핑해내었다(도 2). 신장에서의 CD101의 약물 분포 및 침투는 간에서 관찰된 것과 유사한 반면, 신장에서의 병변 형성 및 병리조직학은 간에서 관찰된 것과 일치하지 않았는데 불균질한 징후가 매우 작은 병변에서부터 커다란 또는 다발성 병변에 이르렀다.

간 병변에서의 약물 노출의 정량적 평가. MALDI 영상 분석은 공간적 분포 및 병변 침투에 대한 귀중한 정보를 제공한다. 그러나, 이것은 단지 반정량적일 뿐, 감염 부위에서의 정확한 약물 노출의 척도는 아니다. 그러므로, 2개의 대표적인 시점인 투약 후 6시간 및 24시간에 관련된 조직의 별개의 구획부에서 절대 약물 농도를 정량하기 위하여, 레이저 캡처 현미해부(LCM)가 이어서 적용되고 나서, 탠덤 질량 분광기가 결합된 고압 액체 크로마토그래피(LC/MS-MS)를 적용하였다. 신장 병변이 너무 작아서 최소 정량화 요건을 충족시키지 못하였다는 사실로 인해서 간 샘플만 분석하였다. 정량화 시(도 3), 5 ㎎/㎏ 미카펀진의 단일 용량(이 투약량에서, 6시간에 대략 7 내지 10 ㎍/㎖의 범위이고 24시간에서 대략 2 ㎍/㎖인 약물 수준실험 혈청 약물 수준)은 6시간 및 24시간에 각각 연관 없는 둘레 조직에서 6.5 및 1 ㎍/㎖, 병변에서 4.9 및 3.4 ㎍/㎖의 약물 체류를 초래하였다. 이와 대조적으로, 현저하게 높은 수준의 CD101이 간 조직에서 발견되었다. CD101의 치료적 투약(20㎎/㎏) 후(이것은 6시간 및 24시간에 각각 43 및 22 ㎍/㎖의 혈청 약물을 초래함), 6시간에서의 평균 약물 수준은 비-병변 부분에서 80.1 ㎍/㎖였고, 병변에서 31.6 ㎍/㎖였다. 24시간에, 둘레 조직에서의 약물 수준은 상당히 떨어졌지만(P=0.01), 여전히 높아서 평균 농도는 38.7 ㎍/㎖였다. 게다가, 병변 내의 평균 약물 농도는 이러한 증가의 통계학적 유의성이 작은 샘플 크기로 인해 달성되지 못하였음에도 불구하고 24시간에 44.5 ㎍/㎖로 증가되었다. 5 ㎎/㎏에서의 더 낮은 용량의 CD101이 투여된 경우, 비례하여 감소되지만 높은 수준의 약물이 두 시점에서 두 구획부로부터 관찰되었다. 약물 농도는 둘레 조직에서 6시간에 15.8 ㎍/㎖, 24시간에 19.8 ㎍/㎖였고, 6시간 및 24시간에서 각각 병변에서 6.6 및 12.7 ㎍/㎖였다.

미카펀진 및 CD101의 단일 용량의 다회 용량 후 감염 부위에서의 약물 축적의 비교.

MALDI 영상화. 임상 세팅에서의 표준 미카펀진 요법이 매일 투약된다는 사실을 고려해서, 다회 용량 실험은 정상 상태에서 미카펀진의 약물 축적을 조사하도록 설계되었다. 미카펀진의 2 및 3회 치료 용량 후 24시간에서의 약물 분포가 분석되었다. MALDI 영상 분석(도 4a)은 다회 투약이 간 조직 내로의 구획화 시 제한된 영향을 미쳤음을 나타내었는데, 그 이유는 약물 신호가 미카펀진의 3회 투약 후에도 조직의 비-병변 부분에서 거의 캡처되지 않았기 때문이다. 둘레 조직에서의 근소하게 검출 가능한 약물 수준과 대조적으로, 다회 투약 후, 현저하게 증가된 약물 강도가 병변 내부에서 관찰되었는데, 이는 미카펀진이 정상 상태에서 정상 조직 약물 수준 이상에서 병변 내에 다소 축저되고 있던 것을 나타낸다. 단일 치료 용량 CD101 아암은 다회 투약 미카펀진 아암과 병렬로 확립되었다. CD101 아암으로부터의 조직 샘플은, 미카펀진의 2 및 3회 투약 후의 24시간에 상당하는, 각각 투약 후 48시간 및 72시간에 수집하였다. 이전의 단일 용량 실험과 일관되게, 48시간에, 강인한 CD101 신호가 전체 조직으로부터 검출되었고, 약물은 병변 내로 더욱 효과적으로 확산되었다(도 4b). 병변의 괴사성 영역 내의 약물 축적은, 둘레 조직의 약물 강도가 저감된 경우, 72시간에 더욱 가시적으로 되었다.

약물 수준의 정량화. 단일 용량 미카펀진과 비교해서, 3회 투약 후 정상 상태에 도달하는 추가의 매일 투약인 비-병변 조직 둘레의 약물 수준은, 단지 대략 0.5 ㎍/㎖로 낮고 단일 투약 후 24시간에 그것과는 훨씬 상이하지 않음에도 불구하고, 병변 내의 약물 체류를 촉진시켰다(도 5). 미카펀진은 병변에 서서히 축적되었지만, 계속적으로 제2 및 제3 약물 투약 후 24시간에 각각 3.5 ㎍/㎖ 및 4.9 ㎍/㎖를 유지하였다. 이에 비해서, 단일 용량 CD101 후의 광범위한 조직 분포 및 병변 침투는, 샘플이 정지 상태 미카펀진 검출 수집물과 일치하도록 연장된 시점에서 평가된 경우 다시 한번 확인되었다. 37.7 ㎍/㎖ 및 29.7 ㎍/㎖의 평균 CD101 농도가 각각 48시간 및 72시간에 절개된 병변으로부터 보고되었고, 둘레 조직에서의 대응하는 약물 수준이 42.2 ㎍/㎖ 및 19.1 ㎍/㎖에서 측정되었다(도 5). 이들 결과는 MALDI 영상화 데이터와 일치한다.

결론

여기서, 임상적으로 관련된 IAC 마우스 모델에서의 MALDI 영상화 수법 및 LCM-유도 약물 정량화를 이용함으로써, 복강내 농양 내의 약물 노출이 평가되었다.

IAC는 치료되기 어렵고, 적당한 소스 제어 및 적절한 항진균 치료 후에도 성과가 나쁘다. 이들 관찰은 IAC에 대한 요법 동안 불충분한 약물 침투에 대한 우려를 증가시킨다. 흥미롭게도, 데이터는, 미카펀진이 간 및 신장 농양으로 점차로 침투하지만, 초회 용량 후에 6시간에 병변 내에서 검출 가능한 수준에 도달할 뿐임을 나타내었다. 침투는 다회 용량의 치료 시 개선되었고, 단지 정상 상태에서, 대량의 진균 세포가 증식되고 있는 괴사성 코어로부터의 약물 신호만이 정상 상태에서 관찰되었다. 상이한 투약 후 시잠에서 병변으로부터의 절대 약물 정량화는 이 약물 축적 패턴을 더욱 확인해주었다.

본 연구에서, CD101은 20 ㎎/㎏에서의 단일 용량 치료 후 6시간에 비-병변 부분에서 80.1 ㎍/㎖의 인상 깊은 약물 수준을 가진 광범위한 조직 분포를 갖는다. 더욱 현저하게는, 약물은 가능한 한 조기인 3시간에 농양 내로 신속하게 침투하고, 6시간에 주 진균 집단과 상호작용하는 괴사성 코어에 신속하게 도달하였으며, 병변에서 31.6 ㎍/㎖의 평균을 지니는 것으로 관찰되었다. 병변 내 CD101의 지속적인 약물 침투 및 축적은 연구에 포함된 모든 나머지 시점에 대해서 연속해서 관찰되었다. CD101의 단일 용량 후 72시간에도, 병변 내측의 약물 수준은 여전히 30 ㎍/㎖에 근접하고, 정상 상태에서 미카펀진에 대한 것보다 약 6-배 높았다. 감염 부위에서의 CD101의 현저한 침투는 용량-의존성이다. 낮은 용량(5 ㎎/㎏) CD101 실험에서, 동일한 침투 패턴이 관찰되었지만, 20 ㎎/㎏ 치료에 비해서 선택된 시점에서 병원 내부 및 외부 둘 다에서 약물 수준이 비례하여 낮아졌다. CD101의 단일의 낮은 용량 후 24시간에, 병변에서의 평균 약물 농도는 12.7 ㎍/㎖였고, 동일 투약량(3.4 ㎍/㎖)에서 미카펀진에 의해 관찰된 것보다 약 4-배 더 높았는데, 이는 CD101의 진실로 우수한 병변 침투 특성을 나타낸다.

감염 부위에서 약물 수준을 속도론적으로 정량화하는 능력은 약물 내성의 출현에 대한 중요한 암시를 지닌다. 병변에서의 불충분한 침투 및/또는 약물 축적은 특정 틈새에서의 시간적 또는 공간적 창을 생성할 수 있는데, 이는 주된 약물 표적 유전자에서의 돌연변이의 획득을 허용하고, 궁극적으로 내성의 출현을 용이하게 한다. 돌연변이 예방 농도(MPC)는 항박테리아제에 대한 내성 출현을 제한하기 위한 투약 전략의 필요성을 해소하도록 제기된 돌연변이 선택창 가설로부터 유도되었다. MPC는 약물-민감성 돌연변이체 하위집단을 저해하는 최소 농도이다. 두 CD101 및 미카펀진에 대한 MPC는 씨. 알비칸스 및 씨. 글라브라타의 야생형 균주에 대해서 16 ㎍/㎖로서 보고되어 있다. 이 연구에서, 정상 상태 미카펀진은 5 ㎍/㎖가 조금 못되게 농양으로 확산되었는데, 이 수치는 최소 저해 농도(MIC=0.03 ㎍/㎖)보다 높지만 보고된 MPC보다는 낮은 것이었다. 이 결과는 몇몇 IAC 환자에 의해 관찰된 에키노칸딘 치료 실패 및 내성 출현을 해소하는 것을 도울 수 있는데, 그 이유는 약물이 임계 수준 아래로 떨어지기 때문이다. 이와 대조적으로, CD101은 20 ㎎/㎏의 단일 용량 후에 가능한 빨리 6시간에 병변으로 침투하였고, 약물 수준은, MPC보다 상당히 높은 29.7 ㎍/㎖의 평균 농도로 72-시간 종점 내내 이례적으로 높게 유지되었다. 이것은, 잘 결정되고 적절하게 설계된 투약 요법 하에, CD101이 현재 승인된 에키노칸딘 제제의 불충분한 약물 침투에 의해 유도된 내성 발달을 극복할 수 있거나 제한할 수 있음을 시사한다.

요약하면, CD101은 미카펀진에 비해서 감염 부위에서 색다른 침투 속성을 나타낸다.

실시예 2. CD101에 의한 인간 대상체에서의 IAC의 치료

인간 대상체는 표준 진단 절차를 이용해서 IAC로 진단된다. 이 대상체에게는 복강내 주사, 피하 주사 또는 정맥내 주입에 의해 최대 12주 동안 CD101의 아세트산염 400㎎ 내지 1200㎎이 매주 투여된다. 대상체는 IAC에 대한 표준 소스 제어 절차(예컨대, 감염된 물질의 배출, 손상된 조직의 제거 및/또는 수술 교정)를 추가로 받는다. CD101의 투여 및 표준 소스 제어 절차 후에, 대상체는 추적 방문에서 평가되고, IAC가 해소된 것으로 확인된다.

실시예 3. CD101의 단일 용량에 의한 인간 대상체의 IAC의 치료

인간 대상체는 표준 진단 절차를 이용해서 IAC로 진단된다. 이 대상체는 복강내 주사, 피하 주사 또는 정맥내 주입에 의해 투여된 CD101의 아세트산염의 400㎎ 내지 1200㎎의 단일 용량으로 치료를 받는다. 이 대상체는 IAC에 대한 표준 소스 제어 절차(예컨대, 수술 또는 배출)를 받지만, 단일 용량 CD101 치료의 투여 전 또는 후 1 내지 3주 이내에 다른 항진균 치료는 대상체에게 제공되지 않는다. CD101의 단일 용량 투여 후(예컨대, 1 내지 3주 후), 대상체는 추적 방문에서 평가되고, IAC가 해소된 것으로 확인된다.

실시예 4. 씨. 알비칸스 감염된 신장에서의 CD101의 신장 침투

CD101의 조직 분포는 면역적격 침습적 칸디다증 마우스 모델에서 신규한 매트릭스-원조 레이저 탈착 이온화 질량 분광 영상화 기법(matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry imaging: MALDI-MSI)를 사용해서 조사하였었다.

실험 방법

BALB/c 마우스에게 0일째에 2×10⁶ CFU의 씨. 알비칸스 균주 ATCC 90028로 IV 시험감염시켰다. 10, 20, 40 또는 60 ㎎/㎏에서의 CD101의 단일 용량을 IP 주사를 통해서 감염 후 24시간에 투여하였다. 약동학 평가를 위하여 투약 전 및 투약 후 1시간, 3, 6, 12, 24 및 48시간(3마리의 마우스/시점/용량)에서 혈액을 채혈하였다. 혈장 농도는 액체 크로마토그래피 질량분광/질량분광법(LC-MS/MS)에 의해 측정하였다. 투약 후 0, 1, 3, 6, 12 및 48시간 시점에서 10 ㎎/㎏ 군으로부터의 신장을 MALDI-MSI에 의해 조직 분포에 대해서 분석하였다.

결과

CD101의 최대 혈장 농도(C_max)는 1시간 및 12시간에 관찰되었는데, 각각 10, 20, 40 및 60 ㎎/㎏의 용량에 대해서 23.1, 43.3, 82.3 및 95.8 ㎍/㎖의 평균 C_max 값을 지녔다. 면적하곡선(AUC)_0-t(여기서 t = 투약 후 48시간)에 대한 대응하는 평균치는, 736, 1250, 2380 및 3300 ㎍*h/㎖였다. 평균 반감기는 29.8 내지 52.0시간 범위로 각 용량에 대해서 길었다. CD101은 수질에서 더 높은 약물 신호로 관찰되었지만 외부 피질에 도달하는 약물의 수준은 더 낮았다. 신장에서의 CD101은 시간 경과에 따라서 축적되었는데, 강한 신호가 3시간 내지 12시간에 시각화되었다. 약물 신호는 투약 후 12시간 후에 서서히 감소되었고, 뚜렷한 신호는 20 ㎎/㎏(이는 마우스 등가 인간 용량임)에서 48시간에 여전히 검출 가능하였다(도 6). 도 7은 투약 후 3시간 및 12시간에서의 CD101 용량 비교를 도시하며, 히트 맵 강도에 의한 농도를 나타낸다. 투약 후 시간의 증가 및 용량의 증가는 감염된 신장에서의 CD101의 최대 농도를 입증한다.

결론

이 연구는 CD101이 IAC의 치료 동안 감염 부위에서 신장 조직을 효율적으로 침투할 수 있다는 것을 입증한다.

실시예 5. 아니둘라펀진, 카스포펀진 및 미카펀진에 대한 감수성 범위를 나타내는 씨. 글라브라타 임상 단리체에 대한 CD101 MIC 및 MPC

배경

에키노칸딘은 침습적 칸디다증의 대부분의 유형에 대한 선택 제제이지만, 최대 40%의 사례에서 치료 실패가 일어난다. 이 부류의 사용 증강에 의해, 특히 칸디다 글라브라타(Candida glabrata) 간에 내성의 출현을 초래하였다. 내성-부여 FKS 유전자 돌연변이는 소정의 센터에서 씨. 글라브라타 균주의 8 내지 18%에서 검출되고 있다. 동시에, 크기 조절 가능한 대부분의 치료 실패는 에키노칸딘 내성으로 인한 것은 아니다. 데이터는 감염된 조직 부위로의 에키노칸딘 전달이 칸디다를 제거하거나 또는 내성을 억제하는 농도를 달성하는데 종종 불충분하는 것을 시사한다.

칸디다 감염증의 부위에서의 에키노칸딘 약동학-약력학(PK-PD)에 대한 제한된 데이터가 있다. 조혈적 파종성 칸디다증(DC)의 마우스 모델을 이용하는 두 연구에서, 에키노칸딘은 신장 내에서 지속되었고, 혈액 수준이 최소 저해 농도(MIC) 미만으로 떨어진 후에 진행하는 항-칸디다 활성을 작용시켰다. 이들 결과는 중요하지만, 이들은 칸디다혈증 이외의 침습적 칸디다증의 유형에 또는 기타 조직에 반드시 작용 가능할 필요는 없다. 마우스가 감염 시간 내에 치료되었으므로, PK-PD 결과는, 칸디다 세포가 농양 내에 격리되기 전에, 신장 침범의 초기에 개시된 치료에 관련될 뿐이다. 침습적 칸디다증을 가진 환자는 통상 이것을 조기에 치료되지 못하는데, 그 이유는 진단 배양액이 연장된 인큐베이션을 필요로 하고, 질환의 말기까지 종종 음성이기 때문이다. 참으로, 산발적인 농양은 침습적 칸디다증을 가진 인간으로부터의 신장 및 기타 장기 내에 현저한 병리조직학적 발견물이다. 농양으로의 제한된 확산은, 적어도 부분적으로, 항진균 치료에서 지연을 나타낸 불량한 성과를 해명하는데 상정된다. 최강의 에키노칸딘 PK-PD 연구는, 전체 장기 또는 혈청이라기보다는, 조직 내 농양 또는 기타 감염된 병변을 조사할 것이다.

칸디다혈증 및 IAC는 2가지 가장 공통적인 유형의 침습적 칸디다증이지만, 후자의 발병기전 및 항진균 치료는 잘 연구되어 있지 않다.　본 발명자들은 인간에서 질환의 발병기전 및 진행을 모방하는 씨. 글라브라타 IAC의 마우스 모델을 개발하였다. 이 모델은 씨. 글라브라타가 명백하게 획정된 농양 내에 국재화되고 지속되기 때문에 감염 부위에서 연구 PK-PD에 이상적으로 적합화된다.

실험 방법

168개의 씨. 글라브라타 단리체를 본 발명자들의 보관소 내의 혈액 또는 기타 멸균 부위로부터 수집한다. 아니둘라펀진, 카스포펀진, 및 미카펀진, 및/또는 잠복 돌연변이체 또는 야생형 FKS 유전자에 대해서 각종 감수성 프로파일을 나타내는 11개의 임상 단리체를 선택한다(표 1). 또한, 모두 3개의 에키노칸딘 및 잠복 야생형 FKS 유전자에 감수성이 있는 29개의 단리체를 선택한다. 이들 40개의 임상 단리체에 CLSI 액체배지 미량희석 기준 방법에 따른 CD101 감수성 시험을 시행한다. 저장 용액을 DMSO에 제조한다. 시험된 CD101의 범위는 0.015 내지 16 ㎍/㎖이다. MIC는 24-시간 배양 후 가시적으로 결정한다. 씨. 크루세이 ATCC 6258 및 씨. 파랍실로시스 ATCC 22019가 품질 대조군을 위하여 포함된다.

씨. 글라브라타 단리체의 감수성 프로파일
단리체	아니둘라펀진	카스포펀진	미카펀진	FKS
1	0.015 (S)	0.125 (S)	0.015 (S)	R653I
2	0.015 (S)	0.25 (I)	0.03 (S)	야생형
3	0.06 (S)	1 (R)	0.06 (S)	F659L
4	0.5 (R)	1 (R)	0.06 (S)	F659S
5	0.5 (R)	4 (R)	0.12 (I)	R636S
6	2 (R)	8 (R)	4 (R)	F659del
7	2 (R)	8 (R)	8 (R)	S663P
8	0.5 (R)	0.5 (R)	0.5 (R)	S663P
9	0.5 (R)	2 (R)	0.25 (R)	D632Y
10	1 (R)	2 (R)	0.25 (R)	D632Y
11	2 (R)	16 (R)	4 (R)	F659del

MPC는 역가를 나타내며, 그 역가를 넘어 내성 돌연변이체의 선택적 증식이 단지 드물게 일어날 것으로 예상된다. 따라서, MPC는 내성 돌연변이체의 선택을 제한하는 제제의 능력을 포함하는 항생제 역가의 단순한 척도로서 잠재적으로 역할한다. 에키노칸딘-감수성이고 야생형 FKS를 보유하는 5개의 씨. 글라브라타 임상 단리체가 선택된다. CD101 및 미카펀진의 MPC는 표준 방법을 이용해서 측정된다.

실시예 6. 농양 및 주변 장기 내의 CD101 PK 및 약물 분포

실험 방법

6주령의 ICR 마우스를 멸균 대변과 혼합된 1×10⁸개의 씨. 글라브라타 BG2(0.06 ㎍/㎖의 야생형 FKS 유전자의 MIC를 가진 미카펀진-감수성)로 복막내(IP) 감염시킨다. 이 임상 단리체는 IAC 씨. 글라브라타 모델을 확립시키는데 사용되고, 농양이 감염 후 3일 후에 명백해지는 것이 결정된다. 감염 후 3일에, 마우스를 60 ㎎/㎏의 CD101로 1회 IV로 처리한다. 약물 비교를 위하여, 마우스를 3일 동안 미카펀진(5　㎎/㎏, 100 내지 150 ㎎/일을 공급받은 인간과 유사한 혈청 AUC를 달성하는 용량)으로 매일 IV로 치료한다.

2마리의 마우스를 농양 내 CD101 PK 및 효능 연구를 위하여 4 내지 6일에 매일 희생시킨다(제3일의 조직 전처리가 대조군으로서 사용된다). 간은, 커서 절개하기 용이하기 때문에 조직 연구를 위한 장기로서 그리고 농양에 대한 주된 표적으로서 주목되며; 농양 주위의 간 조직은 낮은 유기체 부담을 갖는다. MALDI-MSI는 농양 및 조직 내 CD101 분포 및 구배를 시각화하는데 사용되고, 그로코트 메테나민 은(Grocott methenamine silver: GMS) 염색이 씨. 글라브라타를 국재화시키는데 사용된다. 약물 분포 및 PK 데이터는 이전의 연구로부터의 조직 부담 데이터와 상관 관계가 있고, IAC 동안 항진균 활성도 및 한계 내성을 최적화하는 요법을 위한 예측을 유도하는데 사용된다. CD101 약물 농도 및 분포는 또한 내성의 억제 및 효능과의 상관 관계가 평가된다.

기타 실시형태는 청구범위 내이다.

Claims (12)

1. 복강내 칸디다증(intra-abdominal candidiasis: IAC)을 가진 개체를 치료하는 방법으로서,
   (i) 상기 개체를 IAC를 가진 것으로 또는 IAC를 갖는다고 의심되는 것으로 식별하는 단계; 및
   (ii) 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하되, 상기 조성물은 상기 IAC를 치료하기에 충분한, 방법.
2. IAC의 위험이 있는 개체에서 IAC를 예방하는 방법으로서,
   (i) 상기 개체를 IAC가 발병할 위험이 있는 것으로 식별하는 단계; 및
   (ii) 염 또는 중성 형태의 CD101을 포함하는 약제학적 조성물을 상기 개체에게 투여하는 단계를 포함하되, 상기 조성물은 상기 IAC의 발병을 예방하기에 충분한, 방법.
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 대상체는 복강내 농양(intra-abdominal abscess: IAA)을 지니고, 상기 약제학적 조성물은 상기 IAA 내의 CD101의 농도가 칸디다(Candida)에 대해서 CD101의 돌연변이 예방 농도(mutant prevention concentration: MPC)를 초과하기에 충분한 투약량 및 빈도로 상기 개체에게 투여되는, 방법.
4. 제3항에 있어서, 상기 IAA 내의 CD101의 농도는 투여 후 6시간 이내에 상기 MPC를 초과하는 농도를 달성하는, 방법.
5. 제3항 또는 제4항에 있어서, 상기 IAA 내의 CD101의 농도는 적어도 24시간 동안 상기 MPC를 초과하는 농도로 유지되는, 방법.
6. 제5항에 있어서, 상기 IAA 내의 CD101의 농도는 적어도 48시간 동안 상기 MPC를 초과하는 농도로 유지되는, 방법.
7. 제6항에 있어서, 상기 IAA 내의 CD101의 농도는 적어도 72시간 동안 상기 MPC를 초과하는 농도로 유지되는, 방법.
8. 제3항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 MPC는 1 ㎍/㎖ 내지 30 ㎍/㎖인, 방법.
9. 제8항에 있어서, 상기 MPC는 약 16 ㎍/㎖인, 방법.
10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 피하로, 복강내로 또는 정맥내로 투여되는, 방법.
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 200 내지 1200㎎의 양으로 1 내지 12주 동안 주1회 투여되는, 방법.
12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 약제학적 조성물은 상기 대상체에게 단일 용량으로 투여되고, 상기 단일 용량은 IAC를 치료하는데 충분한 염 또는 중성 형태의 상기 CD101의 양을 포함하는, 방법.

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