KR20190103666A - 식물 추출물을 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물 - Google Patents

식물 추출물을 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 육미지황탕 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 상기 육미지황탕 아임계 추출물을 유효성분은 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물일 수 있다.
상기 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물의 유효성분인 육미지황탕 아임계 추출물은 근육세포에서 당 섭취능을 유의적으로 증가시켰을 뿐만 아니라, 실험결과를 통하여 독성 결과를 확인한 결과 독성이 없는 것으로 확인되었으므로, 상기 당뇨병 예방 또는 개선용 기능성 식품 조성물은 당뇨병 또는 당뇨병 합병증의 치료, 예방 또는 개선을 위한 다양한 용도로 널리 사용될 수 있다.

Description

식물 추출물을 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물{FOOD COMPOSITION FOR PREVENTING OR IMPROVING DIABETES CONTANING PLANT EXTRACT}
본 발명은 육미지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이다.
당뇨병(Diabetes mellitus)이란 포도당의 세포 내 흡수에 관여하는 인슐린이 부족하거나 인슐린이 작용이상으로 포도당이 혈액 내에서 적절한 농도로 유지되지 못하는 만성 대사 질환을 말한다.
상기 당뇨병은 유전적 요인과 환경적 요인 등에 의해서 췌장의 베타세포에서 인슐린 분비가 일어나지 않는 제1형 당뇨병과 말초조직에서 인슐린 저항성이 일어나는 제2형 당뇨병 두 가지로 나뉜다.
췌장 베타세포가 죽거나 손상을 입는 것이 제1형 당뇨병의 근본적인 원인이며, 췌장 베타세포가 손상을 입는 원인 중 하나로 산화적 스트레스 (oxidative stress)가 알려져 있다. 또한 산화적 스트레스로 인한 점진적인 췌장 베타세포기능 이상은 제2형 당뇨병에서 인슐린 저항성을 더욱 증가 시킨다.
이런 산화적 스트레스는 체내 활성산소종(reactive oxygen species; ROS)이 많이 생성되거나 항산화 시스템의 기능이 저하되면서 체내 산화계와 항산화계의 불균형으로 일어나는 것으로 알려져 있는데, 당뇨병 발생으로 고혈당이 지속되면 활성산소(free radical (H2O2, O2-, HO-))가 생성되어 산화적 스트레스를 유발하여, 이로 인한 췌장 베타세포의 손상을 일으키게 됨으로써 당뇨병이 심화되거나 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 신증, 말초 신경병증, 콜레스테롤 과잉혈증, 고중성 지방혈증 등과 같은 당뇨병성 합병증을 유발하게 된다.
당뇨병 치료에 있어서 가장 중요한 목표는 혈당치를 가능한 정상치에 가깝게 조절하는 것이며, 치료 방법으로 약물요법, 식이요법 및 운동요법을 실시하고 있다.
현재 제1형 및 제2형 당뇨병환자에게 사용되는 경구혈당강하제로 α-글리코시다아제(α-glucosidase) 억제제, 설포닐우레아(sulfonylurea) 제제 및 비구아니드(biguanide) 제제가 있다.
상기 α-글루코시다아제 억제제는 섭취한 식이 중의 탄수화물의 소화와 흡수를 지연시켜 식후 혈당 및 혈중 인슐린의 상승을 감소시킴으로써 당뇨병의 치료효과를 나타낸다. 상기 α-글루코시다아제 저해제는 고인슐린혈증이나 저혈당을 유발하지 않고, 인슐린분비를 촉진시키며 글루카곤 분비를 억제하는 글루카곤-유사-펩티드-1(glucagon-like peptide-1)의 소장에서의 분비를 촉진하는 장점을 가지고 있다.
현재 임상에서 사용하고 있는 것으로는 아카보스(acarbose), 보길리보스(voglibose) 및 미글리톨(miglitol) 등이 있다. 또한 췌장 조직을 자극해 인슐린 분비를 증가시키는 술포닐우레아제 중 하나인 톨부타미드(tolbutamide)가 인슐린 요법의 보조약으로 사용되기도 한다.
그러나, 당뇨병 치료를 위해 현재 시판되어 사용되고 있는 α-글리코시다아제 저해제는 장기 복용한 경우 일부 환자에 있어서 복부 팽만감, 구토 설사 등 부작용을 나타낼 수 있어 그 사용이 제한될 수 있다.
현재까지 당뇨병의 완치법은 확립되어 있지 않고, 약물치료의 부작용 때문에 약물사용에 제한이 많아 천연물로부터 당뇨병치료제를 탐색하려는 연구가 활발히 진행되고 있으며, WHO 에서도 당뇨병에 효과가 있으며 부작용이 적은 천연물의 이용을 적극 추천하고 있어, 당뇨병에 효능이 있는 천연식물 유래의 물질로부터 활성 성분을 찾으려는 노력이 진행 중에 있다.
KR 10-1727132 B KR 10-1486021 B
본 발명은 당뇨 질환을 효과적으로 치료 또는 예방하고, 당뇨 질환을 억제할 뿐만 아니라 인체에도 무해한 천연식물의 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물 및 당뇨병 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명은 일 실시예에 따른 식물 추출물, 구체적으로 육미지황 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 치료 또는 예방용 조성물에 관한 것이다
상기 육미지황탕은 숙지황, 산약, 산수유, 복령, 목단피 및 택사 혼합물인 것일 수 있다.
상기 육미지황탕 아임계 추출물은 숙지황, 산약, 산수유, 복령, 목단피 및 택사 혼합물의 3 MPa 압력조건 및 200 ℃ 온도조건에서 3분동안 아임계 추출을 수행하여 제조된 것일 수 있다.
상기 당뇨병 개선 또는 예방용 식품 조성물은 당뇨병 개선 또는 예방용 건강기능식품일 수 있다.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
본 발명의 발명자들은 당뇨 효과가 있는 물질을 인체 안전성이 확보된 천연식물 유래의 물질로부터 연구하던 중, 육미지황탕이 근육세포에서 당섭취능을 증가시켜, 인슐린 저항성에 의한 당뇨병을 개선할 수 있다는 것을 확인하였고, 육미지황탕의 각각의 성분의 경우 아임계 추출 보다 수용매의 물 추출에서 더 우수한 효과를 나타낸 반면, 각 성분의 혼합물인 육미지황탕의 추출물의 경우 혼합물의 3 MPa 압력조건 및 200 ℃ 온도조건에서 3분동안 아임계 추출을 수행한 경우, 당섭취능 효과를 개선시키는 것을 확인하여, 이를 토대로 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명은 육미지황탕 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 개선 또는 예방용 식품 조성물을 제공한다. 상기 당뇨병 개선 또는 예방용 식품 조성물은 당뇨병 개선 또는 예방용 건강기능식품일 수 있다.
상기 육미지황탕은 숙지황, 산약, 산수유, 복령, 목단피 및 택사 혼합물인 것일 수 있다. 구체적으로, 상기 육미지황탕은 중량을 기준으로 숙지황 16 중량부, 산수유 8 중량부, 산약 8 중량부, 백복령 6 중량부, 택사 6 중량부 및 목단피 6 중량부를 혼합하여 제조된 것일 수 있다.
상기 본 발명의 추출물은 추출용매로 추출하거나 추출용매로 추출하여 제조한 추출물에 분획용매를 가하여 분획하여 제조할 수 있다.
상기 추출용매는 물 및 유기용매로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상 일 수 있다. 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올 등의 탄소수 1 내지 5의 알코올, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매와 벤젠, 헥산 또는 디클로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매 일 수 있다.
상기 본 발명의 육미지황탕 추출물은 통상의 식물 추출물의 제조방법에 따라 제조된 것일 수 있다. 보다 구체적으로, 육미지황탕에 추출용매를 가하고 추출과정을 수행하는 방법으로 수행할 수 있다. 상기 추출과정은 아임계 추출법, 냉침추출법, 온침추출법, 가압추출법 또는 초음파 분쇄 추출법으로 수행할 수 있으며, 바람직하게는 아임계 추출법으로 수행할 수 있고, 더 바람직하게는 3 MPa 압력조건 및 200 ℃ 온도조건에서 아임계 추출법으로 수행한 것일 수 있다.
상기 분획용매는 물, 부탄올, 에틸아세테이트, 클로로포름, 헥산 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 분획물은 상기 추출법으로 제조한 추출물, 구체적으로 조추출액에 분획과정을 더욱 실시한 분획물일 수 있다. 상기 분획용매는 에틸아세테이트, 에테르, 클로로포름, 벤젠, 헥산, 메틸렌클로라이드 및 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 용매일 수 있다. 상기 분획과정은 구체적으로 상기 조추출액에 헥산, 플로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물을 순서로 가한 후에, 층 분리한 헥산 분획물, 클로로포름 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 물 분획물을 순차적으로 수득하는 방법으로 수행할 수 있다.
상기 추출물 또는 분획물은 추출 또는 분획과정을 수행한 이후, 감압 여과 과정을 수행하거나 추가로 농축 및/또는 동결건조를 수행하여 농축하거나 용매를 제거할 수 있다. 상기 수득한 추출물은 사용시까지 급속 냉동 냉장고(deep freezer)에 보관할 수 있다.
본 발명에 있어서, 당뇨병은 체내 인슐린 감수성과 인슐린 분비의 균형이 깨어지는 경우, 즉 인슐린이 결핍되거나 인슐린 감수성이 저하되어 혈중의 당분을 이용하지 못해 혈당 조절이 되지 아니하여 소변에 포도당을 배출하는 질환을 의미한다. 또한, 상기 당뇨병은 당뇨합병증을 포함하는 것일 수도 있다.
상기 당뇨병은 크게 제1형 당뇨병과 제2형 당뇨병으로 구분되며, 상기 당뇨병은 바람직하게는 T-세포(T-cell), B-세포(B-cell) 및 대식세포(macrophage)가 활성 산소종 등을 방출하여 췌장 베타세포의 파괴와 기능이상을 유발하는 것으로 알려진 제1형 당뇨병 일 수 있다.
또한, 상기 당뇨합병증은 콜레스테롤과잉혈증(hypercholesteremia), 고중성지방혈증(hypertriglyceridemia) 또는 아테롬성 동맥경화증(atherosclerosis)과 같은 콜레스테롤 대사 이상 관련 질환, 혈전증, 죽상경화증, 미세혈관병증(micro angiopathy), 신장 질환, 심장 질환, 당뇨병성 망막증(diabetic retinopathy) 또는 백내장 등일 수 있다.
상기 콜레스테롤 대사 이상 관련 질환은 콜레스테롤 조절 기능에 이상이 생겨 체내 또는 혈관에 콜레스테롤이 적정수준 이상으로 축적되어 발생되는 질환 또는 이로 인해 유발되는 질환을 의미하며, 일 예로 고지혈증, 콜레스테롤과잉혈증, 고중성지방혈증 또는 아테롬성 동맥경화증과 같은 콜레스테롤 대사 이상 관련 질환 등일 수 있다. 상기 고지혈증이란 혈액 속의 지방 성분이 높아 질병을 유발할 수 있는 상태 또는 혈중 지방의 높은 함량에 의해 발병되는 질병을 의미한다.
본 발명의 육미지황탕 추출물은 근육세포를 이용하여 실험을 통하여 확인한 결과, 3 MPa 압력조건 및 200 ℃ 온도조건으로 아임계 추출하는 경우 가장 우수한 항당뇨 효과를 갖는 것으로 확인되었다.
본 명세서에서 식품이라 함은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 바람직하게는 어느 정도의 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서 건강기능식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제를 모두 포함하는 의도이다.
상기 식품은 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능식품 등일 수 있다. 추가로, 본 발명에서 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영, 유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실 및 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연조미료(예, 라면스프 등)를 포함하나 이에 한정되지 않는다.
상기 식품, 건강기능식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.
본 발명에서 건강기능식품이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절 기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미한다.
상기 건강기능식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 건강기능식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.
본 발명에서 음료란 갈증을 해소하거나 맛을 즐기기 위하여 마시는 것의 총칭을 의미하며, 건강기능음료를 포함하는 의도이다.
상기 음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 육미지황탕 추출물을 유효성분으로 포함하는 것 외에 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상기의 천연 탄수화물의 예는 포도당이나 과당 등과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로스 등과 같은 디사카라이드, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 폴리사카라이드 또는 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올 등일 수 있다. 상기 향미제는 타우마틴이나 레바우디오시드 A 또는 글리시르히진과 같은 스테비아 추출물과 같은 천연 향미제 또는 사카린, 아스파르탐 등과 같은 합성 향미제일 수 있다.
상기 천연 탄수화물의 첨가량은 본 발명의 식품 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g, 바람직하게는 5 g 내지 12 g일 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지 않지만, 본 발명의 육미지황탕 추출물 100 중량부 당 0 내지 2,000 중량부 범위에서 선택될 수 있다.
본 발명에서 건강기능음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다.
상기 건강기능음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 육미지황탕 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상기의 천연 탄수화물의 예는 포도당이나 과당 등과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로스 등과 같은 디사카라이드, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 폴리사카라이드 또는 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올 등일 수 있다. 상기 향미제는 타우마틴이나 레바우디오시드 A 또는 글리시르히진과 같은 스테비아 추출물과 같은 천연 향미제 또는 사카린, 아스파르탐 등과 같은 합성 향미제일 수 있다.
상기 천연 탄수화물의 첨가량은 본 발명의 식품 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g, 바람직하게는 5 g 내지 12 g일 수 있다.
그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 이러한 성분을 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 그렇게 중요하지 않지만, 본 발명의 육미지황탕 추출물 100 중량부 당 0 내지 20 중량부 범위에서 선택될 수 있다.
본 발명에서 건강기능음료란 음료에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 음료의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 음료 군이나 음료 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병방지와 회복 등에 관한 체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 음료를 의미한다.
상기 건강기능음료는 지시된 비율로 필수 성분으로서 본 발명의 흰색 감국 추출물을 함유하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상기의 천연 탄수화물의 예는 포도당이나 과당 등과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로스 등과 같은 디사카라이드, 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 폴리사카라이드 또는 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올 등일 수 있다. 상기 향미제는 타우마틴이나 레바우디오시드 A 또는 글리시르히진과 같은 스테비아 추출물과 같은 천연 향미제 또는 사카린, 아스파르탐 등과 같은 합성 향미제일 수 있다.
상기 천연 탄수화물의 첨가량은 본 발명의 식품 조성물 100 ㎖ 당 일반적으로 약 1 g 내지 20 g, 바람직하게는 5 g 내지 12 g일 수 있다. 그밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일 주스, 과일 쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육을 추가로 함유할 수 있다.
또한, 당뇨병 예방 또는 개선의 효과를 목적으로 하는 식품 조성물에 있어서, 상기 육미지황탕 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 중량% 내지 15 중량%로 포함될 수 있으며, 음료 조성물은 100 ㎖를 기준으로 0.02 g 내지 5 g, 바람직하게는 0.3 g 내지 1 g의 비율로 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물의 유효성분인 육미지황탕 추출물은 실험을 통하여 확인한 결과, 우수한 항당뇨 효과가 있음이 확인되었고, 육미지황탕을 구성하는 각 식물의 개별 추출물이 수용매를 이용한 물 추출물에서 항당뇨 효과가 가장 우수한 것으로 확인된 것과 달리 육미지황탕 추출물의 경우에는 3 MPa 압력조건 및 200 ℃ 온도조건으로 아임계 추출을 수행하는 경우, 항당뇨 효과가 가장 우수한 것으로 확인하였다.
상기 육미지황탕 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물에 있어서, 상기 육미지황탕 추출물의 양은 전체 식품 중량의 0.01 중량% 내지 15 중량%일 수 있다. 또한, 상기 육미지황탕 추출물 음료 조성물 100 ㎖를 기준으로 0.02 g 내지 5 g 또는 0.3 g 내지 1 g의 비율로 포함될 수 있다.
본 발명의 육미지황탕 추출물은 근육세포에서 당 섭취능을 개선하는 것이 확인되었고, 특히 개별 식물 추출물과 달리 아임계 추출을 하는 경우 당 섭취능 개선 효과가 가장 우수한 것으로 확인되어, 당뇨병의 치료, 예방 또는 개선에 유용하게 사용될 수 있을 뿐만 아니라 인공 화합물질과 달리 부작용도 문제되지 않으므로, 건강기능식품을 비롯한 식품 조성물에 널리 사용될 수 있다.
도 1 및 도 2는 본 발명의 일 실시예에 따른 근육세포의 당 섭취능 개선 효과를 확인한 결과를 나타낸 그래프로, 도 1은 육미지황탕의 추출방법 및 추출조건에 따른 당 섭취능 개선 효과를 나타낸 것이고, 도 2는 육미지황탕을 구성하는 개별 식물의 추출방법 및 추출조건에 따른 당 섭취능 개선 효과를 나타낸 것이다.
이하, 본 발명의 바람직한 실시예를 기재한다. 하기의 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 육미지황탕 추출물의 제조
육미지황탕, 목단피, 육계 및 산수유의 추출물을 제조하였다.
상기 육미지황탕은 전라남도 한약재상에서 구입한 숙지황(16 g), 산수유(8 g), 산약(8 g), 백복령(6 g), 택사(6 g) 및 목단피(6 g)를 혼합하여 제조하였다.
상기 추출물의 제조방법은 수용매를 이용한 용매 추출법과 아임계 추출법을 이용하였다.
우선, 물 추출액은 육미지황탕 50 g, 목단피 50 g, 육계 50 g 및 산수유 50 g에 증류수 550 mL를 첨가한 후, 100 ℃에서 1시간 동안 열수 추출을 수행하여 제조하였다.
아임계 추출액은 육미지황탕, 목단피, 육계 및 산수유 각각에 대해, 아임계 추출장치를 활용하여 3 MPa의 압력조건 및 150 ℃ 또는 200 ℃의 온도조건에서 각각 3분 동안 아임계 추출을 수행하여 제조하였다.
상기 각각의 추출물은 상기 추출과정을 수행하여 수득한 추출액을 여과한 후, 감압농축하고 동결건조하여 제조하였다.
실시예 2. 육미지황탕 추출물의 당뇨병 예방 또는 개선 효과 확인
상기 실시예 1에서 제조된 육미지황탕, 목단피, 육계 및 산수유의 추출물의 당뇨병 예방 또는 개선 효과를 확인하기 위하여, 근육세포를 이용하여 당 섭취능 개선 효과를 확인하였다.
보다 구체적으로, ATCC(American Type CultureCollection, USA)에서 구입한 L6 myocytes를 37℃에서 95% 산소와 5% CO2를 공급해주며 10% FBS, 100 μg/ml streptomycin 및 100 units/ml penicillin이 포함된 DMEM 배지에서 배양하였다. 상기 배양배지는 2일마다 신선한 배지로 보충하였으며, 상기 세포를 배양하여 세포가 80 내지 90% 배양되면, 0.25% trypsin-EDTA(Hyclone, USA)를 처리하여 계대 배양하여 실험에 사용하였다.
96-well plate에 상기 L6 myocytes 세포를 0.5x104 cells/well로 분주하고, 10% FBS DMEM 배지에서 48시간 동안 배양한 후, 세포 분화를 위해 상기 세포를 2% horse serum DMEM 배지로 교환하고 7일 동안 배양하였다. 상기 배양을 통해 분화된 L6 랫트 근육세포에 상기 실시예 1에서 제조된 각 시료를 농도 별로 처리하고 24시간 동안 배양하였다. 상기 배양 후, 배지를 제거하고, 2-NBDG [2-(N-(7-nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4 -yl) amino)-2-deoxyglucose, 80 μM]를 처리한 후, 30분 동안 배양하였다. 상기 배양 후, PBS 세척을 하고 Victor Ⅲ(perkinelmer, USA)에서 여기파장(Ex) 485 nm, 방출파장(Em) 535 nm 범위에서 형광을 측정하였다. 상기 측정한 결과를 도 1 및 도 2에 나타내었다.
혈당조절효과 관련하여, 상기 도 1에 나타낸 바와 같이 육미지황탕에서는 물 추출물이나 3 MPa 압력조건 및 150 ℃ 온도조건으로 아임계 추출을 수행하여 제조된 아임계 추출물에 비하여, 3 MPa 압력조건 및 200 ℃ 온도조건으로 수행하여 제조된 아임계 추출물을 처리한 경우, 근육세포인 L6 myocytes 세포에서 당 섭취능 개선 효과가 가장 우수한 것으로 확인되었다.
이러한 결과는 도 2에서 나타낸 바와 같이, 항당뇨 효과가 인정되지 않은 목단피 추출물은 물론 가장 항당뇨 효과가 우수한 산수유 추출물과 육계 추출물에서도 수용매를 이용한 물 추출물이 가장 항당뇨 효과가 우수한 것으로 나타낸 것과 구분되는 것으로, 여러 식물을 혼합한 육미지황탕의 경우 다른 식물 추출물과 달리 항당뇨 효과의 측면에서 3 MPa 압력조건 및 200 ℃ 온도조건으로 아임계 추출법을 수행하여 제조되는 아임계 추출물의 당 섭취능 개선 효과 즉, 항당뇨 효과가 가장 우수한 것으로 확인되었다.

Claims (4)

  1. 육미지황탕 아임계 추출물을 유효성분으로 포함하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 육미지황탕은 숙지황, 산약, 산수유, 복령, 목단피 및 택사 혼합물인 것을 특징으로 하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 육미지황탕 아임계 추출물은 숙지황, 산약, 산수유, 복령, 목단피 및 택사 혼합물의 3 MPa 압력조건 및 200 ℃ 온도조건으로 아임계 추출을 수행하여 제조된 것임을 특징으로 하는 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물은 당뇨병 예방 또는 개선용 건강기능식품인 당뇨병 예방 또는 개선용 식품 조성물.
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