KR20190102818A - A aronia beverage composition having the increased antiaging and skin whitening effects - Google Patents

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Abstract

The present invention relates to an aronia beverage composition having increased anti-oxidant, skin whitening, and wrinkle improvement effect. The aronia beverage composition of the present invention comprising a combination of aronia vinegar, an aronia concentrate and a pear concentrate as active ingredients contains a large amount of useful ingredients such as polyphenol, flavonoid, tannin, or the like which are useful for the human body and various functional ingredients and has the anti-oxidant effect as well as the skin whitening and wrinkle reducing effects. Therefore, the aronia beverage composition of the present invention can be useful as a functional beverage composition for health promotion.

Description

항노화 및 피부 미백 효능이 증대된 아로니아 음료 조성물 {A aronia beverage composition having the increased antiaging and skin whitening effects}Aronia beverage composition having the increased antiaging and skin whitening effects

본 발명은 항노화 및 피부 미백 효능이 증대된 아로니아 음료 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 아로니아 농축액과 배 농축액을 발효시킨 아로니아 식초와 함께 아로니아 농축액 및 배 농축액을 혼합하여 제조된 아로니아 음료 조성물로서 인체 유용성분인 폴리페놀, 프라보노이드, 탄닌 함량이 증가하고 항산화 효능뿐만 아니라 피부 미백 및 주름 개선 효능이 증대된 아로니아 음료 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to an Aaronia beverage composition having increased anti-aging and skin lightening efficacy, and more specifically, to a Aaronia vinegar prepared by mixing the Aaronia concentrate and the pear concentrate with the Aronia vinegar fermenting the Aaronia concentrate and the pear concentrate. The present invention relates to an Aaronia beverage composition having increased polyphenols, prabonoids and tannins, which are useful components of the human body, and increased skin whitening and wrinkle improvement effects as well as antioxidant effects.

오늘날 급격한 산업발전에 따른 경제성장으로 야기되는 각종 환경오염, 급박한 현대사회의 경쟁에서 발생하는 스트레스, 식생활의 서구화로 인한 영양 과잉섭취와 운동부족 등으로 인해 발생하는 다양한 질병들이 현대인의 삶에 활기를 떨어뜨리고 있지만 현대의학의 크고 작은 부작용으로 치료에 어려움이 있는 것이 현실이다.Various diseases caused by various environmental pollutions caused by economic growth caused by rapid industrial development, stress caused by the urgent competition of modern society, and excessive nutrition and lack of exercise due to westernization of eating habits Although it is dropping, the reality is that treatment is difficult due to the large and small side effects of modern medicine.

이와 같은 현대의학의 크고 작은 부작용을 방지하기 위한 방법으로 우리나라에서 자생하는 야생초 등으로부터 추출한 추출물을 건강식품으로 활용하여 각종 환경오염, 스트레스 등으로 발생하는 다양한 증상에 효능을 가지는 다양한 건강 음료들이 시중에 대량으로 유통되고 있다. 이의 일환으로 개발되어 국내 특허출원된 건강 음료의 내용들을 살펴보면, 공개특허공보 제10-1993-0003854호의 한방 건강 음료의 제조방법, 공개특허공보 제10-1996-0013257호의 건강 음료의 제조방법, 공개특허공보 제10-1997-0032512호의 솔잎을 이용한 건강 음료, 공개특허공보 제10-1997-0014614호의 건강 음료수의 제조방법, 공개특허공보 제10-2000-0050444호의 건강 음료 조성물, 공개특허공보 제10-1998-0072976호의 생약을 주제로 한 건강 음료의 제조방법, 공개특허공보 제10-2005-0119837호의 화살나무 추출물이 함유된 건강 음료 제조방법과 같은 다양한 건강 음료들이 특허 출원된 바 있다. As a way to prevent such large and small side effects of modern medicine, various health drinks that are effective in various symptoms caused by various environmental pollution, stress, etc. are used in the market by using extracts extracted from wild grasses, etc. grown in Korea. It is distributed in large quantities. Looking at the contents of the health drink developed as a part of the domestic patent application, the method of manufacturing a herbal health drink of Publication No. 10-1993-0003854, the method of manufacturing a health drink of Publication No. 10-1996-0013257 Health drink using pine needles of Patent Publication No. 10-1997-0032512, Method of manufacturing a healthy drink of Publication No. 10-1997-0014614, Health drink composition of Publication No. 10-2000-0050444, Publication No. 10 A variety of healthy drinks have been patented, such as a method for preparing a health beverage based on the herbal medicine of 1998-0072976 and a method for preparing a healthy beverage containing arrow extract of Korean Patent Publication No. 10-2005-0119837.

한편, 아로니아(Aronia melanocarpa)는 장미과에 속하는 베리류의 식물열매로 북부 아메리카에 자생한다. 아로니아의 최대 생산국인 폴란드는 아로니아 산업을 적극 육성하고 기계화를 통해 아로니아 농축액 등 관련 제품을 대량 생산하는 세계 최대 생산국이다. 아시아 지역에는 30여년 전 일본과 중국에 보급되어 일부 재배되고 있으며, 쉽게 재배가 가능하기 때문에 최근 국내에서도 재배 면적이 급속도로 증가하고 있어 이를 수용할 수 있는 안정적인 가공시설과 판매망 확보가 필요하다. 아로니아 열매에 함유되어 있는 안토시아닌, 카테킨, 폴리페놀류 함량은 다른 베리류와 비교했을 때 현저하게 높게 나타난다고 보고되어 있으며, 특히 안토시아닌 함량은 kg 당 약 7~8g을 함유하여 블루베리의 5배, 포도의 80배, 복분자, 크렌베리의 20~40배 함유하는 것으로 보고된다.On the other hand, Aronia melanocarpa is a berry family fruit belonging to the family Rosaceae, native to northern America. Poland, the largest producer of Aaronia, is the world's largest producer of mass-related products, including Aaronia concentrates, through active development and mechanization of the Aaronia industry. In Asia, some 30 years ago, it was spread in Japan and China, and is partially grown. Since it is easily grown, the area of cultivation is rapidly increasing in Korea, and it is necessary to secure stable processing facilities and sales network to accommodate it. The content of anthocyanins, catechins, and polyphenols in the fruit of Aronia are reported to be significantly higher than those of other berries. Especially, the anthocyanin content is about 7-8g per kg, which is 5 times of blueberries, grapes. It is reported to contain 80 times of bokbunja, 20-40 times of bokbunja, cranberries.

아로니아에는 비타민 A, C, E, B2, B6, B9, B12, 엽산, 퀴닌산, 페놀산, 안토시아닌, 탄닌, 카테킨, 퀘르시틴, 루틴, 헤스페리딘, 레스베라트롤, 베타카로틴과 생리활성 물질들 외 칼슘, 철분, 아연, 칼륨, 망간과 같은 다양한 유기미네랄도 함유하고 있는 것으로 밝혀져 있다. Aaronia includes vitamins A, C, E, B2, B6, B9, B12, folic acid, quinic acid, phenolic acid, anthocyanin, tannin, catechin, quercithin, rutin, hesperidin, resveratrol, beta carotene and bioactive substances. It is also found to contain various organic minerals such as calcium, iron, zinc, potassium and manganese.

아로니아가 가진 우수한 기능성에도 불구하고 쉽게 섭취하지 못하는 이유는 아로니아의 생과 껍질이 단단하고 두꺼우며, 다량의 카테킨 성분으로 인한 떫은맛 때문인데 이로 인해 서양에서는 열매가 익기 전에 동물이 먹으면 질식할 정도의 검은 열매라는 의미로 블랙 쵸크베리(Black chokeberry)로 불리우기도 한다. Despite its excellent functionality, it is not easily consumed because of its hard, thick skin, and its astringent taste due to the large amount of catechins. It is also called black chokeberry, meaning black fruit.

국내 아로니아 가공제품은 액상, 환, 분말 등 1차 단순 가공 제품들이 주를 이루고 있다. 따라서, 아로니아의 기능성을 활용할 수 있는 다양한 연구가 필요한 실정이다. Domestic Aaronia processed products mainly consist of primary simple processed products such as liquid, pill and powder. Therefore, there is a need for various studies that can utilize the functionality of Aaronia.

한편, 배는 쌍떡잎식물 장미목 장미과 배나무속 배나무의 열매로, 주로 계절이 뚜렷한 한국, 미국, 이탈리아, 중국 등에서 재배한다. 배는 100g당 수분함량이 85% 내지 88% 정도로 높아 갈증해소와 이뇨작용에 도움을 주며, 당분함량은 10% 내지 13%로 높은 편이고 그 중 소르비톨은 대변 연화능력이 있어 변비해소를 돕는다. 또한 배의 단백질함량은 0.3% 정도로 그 중에 함유된 아스파라긴산은 간장활동을 촉진시켜 숙취해소 작용을 하며 식이섬유가 많아 변비 및 정장작용에도 효과가 높다. 한편, 마그네슘 및 칼륨 등 알카리성 무기질이 무기질 함량 중 75% 정도로 함유되어 있는 강알카리성 식품이다.On the other hand, pears are the fruit of the dicotyledon rose Rosaceae pear tree, mainly grown in Korea, the United States, Italy, China, etc. with a clear season. Pears have a water content of 85% to 88% per 100g, which helps to quench thirst and diuretic, and the sugar content is high as 10% to 13%, of which sorbitol has a softening ability to help constipation. In addition, pear protein content of 0.3% aspartic acid contained in it promotes the liver activity to relieve hangover, and a lot of dietary fiber is also effective in constipation and intestinal action. On the other hand, it is a strong alkaline food containing about 75% of the inorganic minerals such as magnesium and potassium.

배에 함유된 기능성물질인 플라보노이드류 중 퀘르세틴은 항암이나 항산화 작용에 탁월하고, 루테올린은 기관지염, 가래, 기침을 다스리는 효과가 있으며, 배에 함유된 폴리페놀 화합물들은 항암작용뿐만 아니라 혈압 강하, 통풍예방, 항산화, 미백, 면역기능 증대, 콜레스테롤 저하 등에 효능이 있는 것으로 확인되었다. 상기와 같은 효능을 갖는 배는 날로 먹거나 주스, 통조림, 잼, 배숙, 배즙 등으로 제조하여 섭취되고 있다. 그러나, 상기 배즙은 고온처리로 인하여 색상이 캐러멜화(caramelization)되고 보관 중 침전과 가열취가 생겨 수요가 한정되는 문제점이 있었다. Among the flavonoids, a functional substance contained in the stomach, quercetin is excellent for anticancer and antioxidant activity, and luteolin has an effect on bronchiolitis, sputum, and cough, and the polyphenolic compounds in the stomach not only lower the blood pressure and gout It has been shown to be effective in prevention, antioxidant, whitening, immune function enhancement, and cholesterol lowering. Pear with the above effects is eaten raw or prepared by juice, canned food, jam, cooked, pear juice and the like. However, the pear juice has a problem that the color is caramelized due to the high temperature treatment and precipitation and heating odor are generated during storage, thereby limiting the demand.

이에 본 발명자들은 언제 어디서나 간편하게 즐길 수 있으면서 인체에 안전하고 기능성 성분을 다량 함유하여 건강에 유익한 음료로서 특히 항산화, 미백 및 주름 개선효과를 가지는 기능성 음료를 개발하기 위해 계속 연구를 진행하던 중 아로니아 농축액과 배 농축액을 혼합하여 제조된 아로니아 식초에 배 농축액과 아로니아 농축액을 추가로 혼합하여 제조된 아로니아 음료 조성물이 여러 가지 기능성 성분인 페놀, 플라보노이드, 탄닌 등 유용성분을 다량 함유하고 있을 뿐만 아니라 항산화 효능, 미백효능 및 주름 개선 효능을 가지고 있어 이를 유효성분으로 포함하는 기능성 건강 음료를 개발할 수 있다는 사실을 발견함으로써 본 발명을 완성하였다. Therefore, the present inventors continue to research to develop a functional drink having an antioxidant, whitening and anti-wrinkle effect as a health-friendly drink that can be enjoyed easily anytime and anywhere and containing a large amount of safe and functional ingredients to the human body. Aronia beverage composition prepared by additionally mixing pear vinegar and aronia concentrate in aronia vinegar prepared by mixing and pear concentrate contains not only a large amount of useful ingredients such as phenol, flavonoids and tannins. The present invention has been completed by discovering the fact that it has an antioxidant effect, a whitening effect and an anti-wrinkle effect, and thus can develop a functional health drink containing the same as an active ingredient.

따라서, 본 발명에서 해결하고자 하는 기술적 과제는 아로니아 함유 기능성 음료 조성물을 제공하기 위한 것이다. Therefore, the technical problem to be solved in the present invention is to provide a Aaronia-containing functional beverage composition.

상기한 기술적 과제를 해결하기 위하여, 본 발명에서는 아로니아 식초, 아로니아 농축액 및 배 농축액의 배합물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항노화 및 피부 미백 효능이 증대된 아로니아 음료 조성물을 제공한다.In order to solve the above technical problem, the present invention provides a Aaronia beverage composition with increased anti-aging and skin lightening effect, comprising a combination of Aaronia vinegar, Aaronia concentrate and pear concentrate as an active ingredient. .

바람직하게, 본 발명의 아로니아 음료 조성물은 아로니아 식초, 아로니아 농축액 및 배 농축액이 4 : 1~3 : 1~2의 중량비율로 혼합된 배합물을 포함하는 것을 특징으로 한다. Preferably, the Aaronia beverage composition of the present invention is characterized in that the Aaronia vinegar, the Aaronia concentrate and the pear concentrate comprise a mixture in a weight ratio of 4: 1 to 3: 1 to 2.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 상기 아로니아 식초는 아로니아 농축액과 배 농축액을 혼합한 다음 효모 균주를 이용하여 알코올 발효시킨 후 초산 균주를 이용하여 초산 발효시켜 제조된 산물이다.According to one embodiment of the present invention, the aronia vinegar is a product prepared by mixing the aronia concentrate and the pear concentrate, followed by alcohol fermentation using a yeast strain, followed by acetic acid fermentation using an acetic acid strain.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 상기 아로니아 농축액은 아로니아 열매를 착즙한 다음 여과하여 저온 숙성시킨 후 정제수와 혼합하여 다시 저온 숙성시킨 다음 여과 및 농축하여 제조될 수 있다. According to one embodiment of the present invention, the Aaronia concentrate may be prepared by squeezing the Aronia fruit, filtration and low temperature aging, then mixing with purified water and then low temperature aging and then filtration and concentration.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 상기 배 농축액은 배와 정제수를 혼합하여 추출한 다음 여과 및 농축하여 제조될 수 있다.According to one embodiment of the present invention, the pear concentrate may be prepared by extracting pear and purified water, followed by filtration and concentration.

본 발명의 기능성 음료 조성물의 유효성분인 아로니아 식초, 아로니아 농축액 및 배 농축액의 배합물에는 인체에 유용한 다양한 기능성 성분들이 다량으로 함유되어 있다. 구체적으로, 폴리페놀, 플라보노이드, 탄닌 등과 같은 유용성분이 다량 함유되어 있다. The combination of Aaronia vinegar, Aaronia concentrate and Pear concentrate, which are the active ingredients of the functional beverage composition of the present invention, contains a large amount of various functional ingredients useful for the human body. Specifically, it contains a large amount of useful components such as polyphenols, flavonoids, tannins and the like.

상기 폴리페놀 물질은 식물계에 색체를 부여하고, 한 분자 내에 2개 이상의 페놀성 수산화(OH)기를 가진 방향족 화합물로서 단백질 및 거대 분자들과 쉽게 결합한다(Lee et al., 2005). 식물체에 함유되어 있는 페놀성 화합물들은 항 돌연변이원성, 콜레스테롤 저하작용, 정장작용, 항암 및 항산화작용 등의 다양한 항산화 생리활성 기능을 가지고 있는데, 이것은 분자 내 페놀성 수산화기가 효소 단백질과 같은 거대 분자들과 결합하는 성격이 있어 이러한 생리활성 기능을 나타내는 주체로 인정되고 있다고 알려져 있다. 특히 항산화 작용과 관련하여 최근 생체 내에서의 산소 유리 라디칼 반응이 생체조직의 노화나 질병과 관련이 있으며 페놀성 물질의 수산화기는 유지의 유리기 수용체로서 유지 산패의 초기 단계에 생성된 유리기들이 안정된 화합물을 형성하도록 하여 산화억제 작용을 한다. 즉 페놀 함량이 높게 나타남은 산화 억제 작용이 높음을 의미한다(Lee et al., 2005-Choi et al., 2006).The polyphenolic material imparts color to the plant kingdom and easily binds to proteins and macromolecules as an aromatic compound having two or more phenolic hydroxyl (OH) groups in one molecule (Lee et al., 2005). Phenolic compounds in plants have various antioxidant and bioactive functions, such as anti-mutagenicity, cholesterol lowering activity, intestinal action, anticancer and antioxidant activity. It is known that it has a binding nature and is recognized as a subject that exhibits such bioactive functions. In particular, in relation to antioxidant activity, the oxygen free radical reaction in vivo is related to aging and disease of biological tissues, and the hydroxyl group of phenolic substance is a free radical receptor of fats and oils. It forms an antioxidant. In other words, high phenol content means high antioxidant activity (Lee et al., 2005-Choi et al., 2006).

또한, 본 발명의 아로니아 음료에 다량 함유되어 있는 플라보노이드는 주로 노란색을 띄는 색소물질로, 구조에 따라서 항균, 항암, 항바이러스, 항염증, 항산화 등 다양한 기능성을 나타내는 화합물이다. In addition, the flavonoids contained in a large amount in the Aaronia beverage of the present invention are mainly yellow pigments, and are compounds that exhibit various functions such as antibacterial, anticancer, antiviral, anti-inflammatory, and antioxidant depending on the structure.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 본 발명의 아로니아 음료 조성물은 DPPH(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) 라디칼 소거능 및 ABTS 양이온 라디칼 소거능이 우수하여 강력한 항산화 효능을 가진다. According to one embodiment of the present invention, the Aaronia beverage composition of the present invention is excellent in DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl) radical scavenging ability and ABTS cationic radical scavenging ability to have a strong antioxidant effect.

본 발명의 하나의 구현예에 따르면, 본 발명의 아로니아 음료 조성물은 티로시나아제의 저해활성 및 엘라스타아제 저해활성이 매우 우수하여 피부 미백 및 피부 주름 개선 효과를 가진다.According to one embodiment of the present invention, the Aaronia beverage composition of the present invention is very excellent in inhibiting activity and elastase inhibitory activity of tyrosinase and has an effect of skin whitening and skin wrinkle improvement.

이와 같이, 본 발명의 아로니아 음료 조성물에는 인체에 유용한 다양한 기능성 성분인 폴리페놀, 플라보노이드, 탄닌 등 유용성분이 다량 함유되어 있으며, 항산화 효과뿐만 아니라 피부 미백 및 주름 개선 효과를 가진다. 따라서, 본 발명의 아로니아 음료 조성물은 건강 증진을 위한 기능성 음료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.As such, the Aaronia beverage composition of the present invention contains a large amount of useful components such as polyphenols, flavonoids, tannins, and the like, which are useful for the human body, and have anti-oxidant effects as well as skin whitening and wrinkle improvement. Therefore, the Aaronia beverage composition of the present invention can be usefully used as a functional beverage composition for health promotion.

본 발명의 기능성 음료 조성물에는 유효성분인 아로니아 식초, 아로니아 농축액 및 배 농축액의 배합물을 조성물의 총 중량을 기준으로 하여 0.01 내지 50 중량%, 바람직하게는 0.1 내지 30 중량%의 양으로 함유할 수 있다. The functional beverage composition of the present invention may contain a combination of the active ingredients Aaronia vinegar, Aaronia concentrate and Pear concentrate in an amount of 0.01 to 50% by weight, preferably 0.1 to 30% by weight based on the total weight of the composition. Can be.

또한, 본 발명의 기능성 음료 조성물에는 본 발명의 아로니아 식초, 아로니아 농축액 및 배 농축액의 배합물 이외에 구연산, 액상과당, 설탕, 포도당, 초산, 사과산, 과즙 등과 같은 통상의 음료 조성물에 포함될 수 있는 추가의 성분들을 포함시킬 수 있다.In addition, the functional beverage composition of the present invention, in addition to the combination of the Aaronia vinegar, Aaronia concentrate and pear concentrate of the present invention, may be included in conventional beverage compositions such as citric acid, liquid fructose, sugar, glucose, acetic acid, malic acid, fruit juice, etc. It may include components of.

이와 같이, 본 발명의 아로니아 음료 조성물에는 인체에 유용한 다양한 기능성 성분인 폴리페놀, 플라보노이드, 탄닌 등 유용성분이 다량 함유되어 있으며, 항산화 효과뿐만 아니라 피부 미백 및 주름 개선 효과를 가진다. 따라서, 본 발명의 아로니아 음료 조성물은 건강 증진을 위한 기능성 음료 조성물로서 유용하게 사용될 수 있다.As such, the Aaronia beverage composition of the present invention contains a large amount of useful components such as polyphenols, flavonoids, tannins, and the like, which are useful for the human body, and have anti-oxidant effects as well as skin whitening and wrinkle improvement. Therefore, the Aaronia beverage composition of the present invention can be usefully used as a functional beverage composition for health promotion.

도 1은 아로니아 농축액과 배 농축액의 혼합물을 효모로 배양한 다음 알코올 발효시켜 제조된 아로니아 와인의 알코올 함량, 포도주, 전환당, pH 및 당도 변화를 측정한 결과이다.
도 2는 아로니아 농축액과 배 농축액의 혼합물을 알코올 발효시킨 후 초산 발효시켜 제조된 아로니아 식초의 산도를 나타낸 그래프이다.
도 3은 아로니아 음료의 전자공여능을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 4는 아로니아 음료의 ABTS 양이온 라디칼 소거능을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 5는 아로니아 음료의 Fe3+ 환원력을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 6은 아로니아 음료의 Fe2+ 킬레이트화를 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 7은 아로니아 음료의 티로시나아제 저해활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.
도 8은 아로니아 음료의 엘라스타아제 저해활성을 측정하여 나타낸 그래프이다.
1 is a result of measuring the alcohol content, wine, invert sugar, pH and sugar change of the Aaronia wine prepared by incubating the mixture of the Aaronia concentrate and the pear concentrate in yeast and then fermented with alcohol.
2 is a graph showing the acidity of aronia vinegar prepared by acetic acid fermentation after alcohol fermentation mixture of the Aaronia concentrate and pear concentrate.
3 is a graph showing the electron donating ability of the Aaronia beverage.
4 is a graph showing the ABTS cationic radical scavenging ability of Aaronia beverages.
5 is a graph showing the Fe 3+ reducing power of the Aaronia beverage.
6 is a graph showing Fe 2+ chelation of Aaronia beverages.
Figure 7 is a graph showing the measurement of tyrosinase inhibitory activity of Aaronia beverages.
8 is a graph showing the measurement of the elastase inhibitory activity of the Aaronia beverage.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다. Hereinafter, examples and the like will be described in detail to help understand the present invention. However, embodiments according to the present invention can be modified in many different forms, the scope of the invention should not be construed as limited to the following examples. Embodiments of the present invention are provided to more fully describe the present invention to those skilled in the art.

<실시예 1> 아로니아 농축액 제조 Example 1 Preparation of Aaronia Concentrate

아로니아 열매 10,000kg을 버블 세척한 후 스쿠르 방식 착즙기를 이용하여 수율 60%의 아로니아 착즙액 6,000kg을 얻었으며, 1차 탱크에서 80℃ 50분간 살균 처리한 후 0.2um 원통 여과필터 장치로 1차 필터하고 -2℃ 저온 냉동에서 7일간 숙성한다. 숙성된 아로니아 착즙액과 정제수 8 : 2 비율로 85℃ 3시간 2반복하여 아로니아 추출물을 제조하였으며, 2차 여과장치로 원통 필터를 거쳐 아로니아 잔여물(35-38kg)을 제거하고 3차 Sediment 필터를 사용하여 불순물을 완전히 제거하였다.After washing the 10,000 kg of Aronia fruit, a 6,000 kg of Aronia juice with a yield of 60% was obtained using a squall juicer. After sterilizing at 80 ° C. for 50 minutes in the primary tank, a 0.2um cylindrical filtration filter was used. Tea filter and aged for 7 days in -2 ℃ low temperature freezing. Aronia extract was prepared by repeating the ripened Aaronia juice with purified water at a ratio of 8: 2 at 85 ° C. for 3 hours and 2 hours, and removing the Aaronia residue (35-38kg) through a cylindrical filter with a secondary filter. Sediment filter was used to completely remove impurities.

이어서, 농축기 온도를 75℃로 세팅하고 5.6배 농축한 최종 60Brix 이상 1,020kg의 아로니아 농축액을 제조하였다.Subsequently, 1,020 kg of Aaronia concentrate was prepared, which was set at a concentrator temperature of 75 ° C. and concentrated at 5.6 times to a final 60 Brix.

<실시예 2> 배 농축액 제조Example 2 Preparation of Pear Concentrate

순천 낙안배 10,000kg을 불순물 제거한 후 세척한 다음 배와 젱제수 1 : 5 비율로 95℃ 3시간 2반복 추출하였으며, 1차 여과장치로 원통 필터를 거쳐 배 잔여물을 제거하고 2차 Sediment 필터를 사용하여 불순물을 완전히 제거하였다. After removing 10,000kg of Suncheon Nak'an's pears, they were washed and then extracted twice at 95 ° C for 3 hours twice at a ratio of 1 to 5 times of pear and distilled water. To remove impurities completely.

이어서, 농축기 온도를 75℃에 세팅하고 5배 농축한 최종 72Brix 이상 2,960kg의 배 농축액을 제조하였다.Subsequently, 2,960 kg of pear concentrate was prepared, which was set at 75 ° C. and concentrated five times, to a final 72 Brix.

<실시예 3> 아로니아 식초 제조 Example 3 Preparation of Aronia Vinegar

(1) 알코올 발효(1) alcohol fermentation

알코올 발효를 위해 초기 당도는 아로니아 농축액 (60ㅀbrix)와 배 농축액을 1:1로 배합 후 21.8°brix로 희석 조절하고 효모균주인 KCTC 17299를 접종하여 28℃에서 7일간 배양하여 주모로 사용하여 알코올 발효시켰다. 이러한 알코올 발효에 의해 제조된 발효물을 아로니아 와인으로 명명하였다.For alcohol fermentation, the initial sugar content was mixed with Aronia concentrate (60 ㅀ brix) and pear concentrate 1: 1, then diluted to 21.8 ° brix, inoculated with the yeast strain KCTC 17299, incubated at 28 ° C for 7 days, and used as the main mother. Alcohol fermentation. The fermented product produced by this alcoholic fermentation was named Aaronia wine.

도 1은 아로니아 농축액과 배 농축액의 혼합물을 효모로 배양한 다음 알코올 발효시켜 제조된 아로니아 와인의 알코올 함량, 포도주, 전환당, pH 및 당도 변화를 측정한 결과이다. 여기에서 보듯이, 알코올 함량, 포도주, 전환당, pH 및 당도가 발효 4일째 급격히 증가하거나 감소하는 경향을 나타내었다. 4일 이후부터는 더 이상 증가하거나 감소하지 않았으므로 아로니아 농축액과 배 농축액의 배합물을 효모 균주를 이용하여 발효하는데 필요한 시간은 6일이 가장 적합한 것으로 판단하였다. 1 is a result of measuring the alcohol content, wine, invert sugar, pH and sugar change of the Aaronia wine prepared by incubating the mixture of the Aaronia concentrate and the pear concentrate in yeast and then fermented with alcohol. As shown here, alcohol content, wine, invert sugar, pH and sugar tended to increase or decrease rapidly on day 4 of fermentation. Since it was no longer increased or decreased after 4 days, it was judged that 6 days was the most suitable time for fermenting the combination of the aronia concentrate and the pear concentrate using the yeast strain.

(2) 초산 발효(2) acetic acid fermentation

상기 알코올 발효 6일차의 알코올 함량이 13.5%인 아로니아 와인을 초산발효를 위해 초기 알코올 함량을 9.0%로 희석하여 진행하였다. Aronia wine having an alcohol content of 13.5% on the 6th day of alcohol fermentation was diluted with 9.0% of the initial alcohol content for acetic acid fermentation.

초산균주 아세토박터 속(Acetobacter sp.) PA97을 접종하여 30℃에서 200rpm으로 72시간 배양하여 종초로 사용하였고, 초기 산도는 1%로 조절한 후 2주간 28℃에서 300rpm에서 초산 발효를 진행하였다. Acetobacter of the acetic acid strain sp.) PA97 was inoculated and incubated at 30 ° C. at 200 rpm for 72 hours to be used as a seed. The initial acidity was adjusted to 1%, followed by acetic acid fermentation at 300 rpm at 28 ° C. for 2 weeks.

도 2는 아로니아 농축액과 배 농축액의 혼합물을 알코올 발효시킨 후 초산 발효시켜 제조된 아로니아 식초의 산도를 나타낸 그래프이다. 여기에서 보듯이, 초기 산도 1%에서 발효 8일째에는 2.5%로 산도가 높게 나타났으며, 12일째는 4.2%로 발효 정점을 보였다. 반면 알코올함량은 12일째에 5.8%로 감소하였으며, 이후 알코올 함량의 변화는 일어나지 않았다. 이에 따라, 아로니아와 초산 발효는 대략 2주 정도 소요되며 최종 산도는 약 4.0% 이상 정도되는 것으로 확인되었다. 2 is a graph showing the acidity of aronia vinegar prepared by acetic acid fermentation after alcohol fermentation mixture of the Aaronia concentrate and pear concentrate. As shown here, the acidity was high from 1% of the initial acidity to 2.5% on the 8th day of fermentation, and peaked at 4.2% on the 12th day. On the other hand, alcohol content decreased to 5.8% at 12 days, after which no change in alcohol content occurred. Accordingly, aronia and acetic acid fermentation took about 2 weeks and the final acidity was found to be about 4.0% or more.

<실시예 4> 아로니아 음료 조성물 제조Example 4 Preparation of Aaronia Beverage Composition

상기 실시예 3에서 제조된 아로니아 식초, 상기 실시예 1에서 제조된 아로니아 농축액 및 상기 실시예 2에서 제조된 배 농축액을 4 : 2 : 1.5의 중량비로 혼합하여 아로니아 음료 조성물을 제조하였다. 이하 아로니아 음료 조성물을 '아이케어 아로니아'라고 칭하였다.The Aaronia vinegar prepared in Example 3, the Aaronia concentrate prepared in Example 1, and the pear concentrate prepared in Example 2 were mixed at a weight ratio of 4: 2: 1.5 to prepare an Aaronia beverage composition. The Aaronia beverage composition is hereinafter referred to as 'eyecare Aaronia'.

<시험예 1> 아로니아 음료 조성물의 유효성분 함량 측정<Test Example 1> Determination of the active ingredient content of the Aaronia beverage composition

(1) 총 폴리페놀 함량 측정(1) Determination of Total Polyphenol Content

플라보노이드 정량은 증류수에 희석한 시료 25㎕에 증류수 75㎕와 Folin-Ciocalteu phenol reagent 시약 25㎕를 가하고, 6분간 반응 시킨 뒤 포화용액 Na2CO3 100㎕를 가하여 혼합한 후 90분간 실온에서 방치하고, 765nm에서 흡광도를 측정한 후, 표준물질인 갈산으로 미리 작성한 표준곡선의 흡광도 값과 비교하여 폴리페놀 함량을 산출하였다.Flavonoids are quantified and allowed to stand at then a solution was added to a sample 25㎕ diluted in distilled water and distilled water 75㎕ Folin-Ciocalteu phenol reagent was added to the reagent 25㎕, 6 minutes of reaction after which a saturated solution of Na 2 CO 3 100㎕ 90 minutes at room temperature After measuring the absorbance at 765 nm, the polyphenol content was calculated by comparing the absorbance value of the standard curve prepared with gallic acid, the standard material.

(2) 총 플라보노이드 함량 측정(2) Determination of Total Flavonoid Content

총 플라보노이드 함량은 1.25 mL를 가하고 5% NaNO2 용액 75 μL를 넣고 5분간 방치하였다. 10% AlCl3ㅇ6H2O 용액 150 μL를 가하고 다시 6분간 방치하였다. 위 반응액에 1M NaOH 500 μL와 증류수 275 μL를 가한 후 510 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질은 쿼세틴을 사용하여 표준 검량선을 작성 후 추출물의 총 플라보노이드 함량은 mg QE(Quercetin equivalent)/g로 나타내었다.The total flavonoid content was added 1.25 mL and 75 μL of 5% NaNO 2 solution was added and left for 5 minutes. 150 μL of a 10% AlCl 3 ˜6H 2 O solution was added and left for 6 minutes. 500 μL of 1M NaOH and 275 μL of distilled water were added to the reaction solution, and the absorbance was measured at 510 nm. After preparing a standard calibration curve using quercetin, the total flavonoid content of the extract was expressed as mg QE (Quercetin equivalent) / g.

(3) 축합형 탄닌 함량 측정(3) Condensation type tannin content measurement

총 탄닌 함량은 증류수에 희석한 시료 1mL에 H2SO4 용액에 녹인 바닐린 2mL를 가하고 15분 동안 방치한 후 500nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준물질은 카테킨을 사용하여 표준 검량선을 작성 후 추출물의 총 탄닌 함량은 mg CE (catechin equivalen)/g으로 나타내었다.The total tannin content was measured by absorbance at 500 nm after adding 2 mL of vanillin dissolved in H 2 SO 4 solution to 1 mL of the sample diluted in distilled water. After preparing a standard calibration curve using a catechin, the total tannin content of the extract was expressed in mg CE (catechin equivalen) / g.

(4) 총 안토시아닌 함량 측정(4) Determination of Total Anthocyanin Content

300 mM 아세테이트 완충액(pH 3.6), 40 mM HCl에 용해한 10 mM TPTZ (2,4,6-트리피리딜-S-트리아진) 용액 및 20 mM FeCl3 ·6H2O를 각각 10:1:1(v/v/v)의 비율로 미리 혼합한 다음 37℃ 수욕상에서 가온한 것을 사용하였다. 추출물 100 μL를 차례로 혼합하여 37℃에서 4분간 반응시킨 후 UV 분광광도계를 사용하여 593nm에서 흡광도를 측정하였다.300 mM acetate buffer (pH 3.6), 10 mM HCl is dissolved in 40 mM TPTZ (2,4,6- tree pyridyl -S- triazine) solution and 20 mM FeCl 3 · 6H 2 O, respectively 10: 1: 1 Pre-mixed at a ratio of (v / v / v) and then warmed in a 37 ° C. water bath was used. 100 μL of the extract was sequentially mixed and reacted at 37 ° C. for 4 minutes, and the absorbance was measured at 593 nm using a UV spectrophotometer.

그 결과는 하기 표 1에 나타내었다. The results are shown in Table 1 below.

시료명Sample name 폴리페놀 (GAE)Polyphenols (GAE) 플라보노이드
(QE)
Flavonoids
(QE)
탄닌
(CE)
Tannins
(CE)
안토시아닌
(CE)
Anthocyanins
(CE)
아로니아 음료 조성물
(아이케어 아로니아)
Aaronia Beverage Composition
(Eye Care Aaronia)
303.30 ± 4.11303.30 ± 4.11 145.49 ± 4.07145.49 ± 4.07 2241.78 ± 76.982241.78 ± 76.98 1.09 ± 0.011.09 ± 0.01
아로니아 식초Aaronia Vinegar 98.88 ± 2.6398.88 ± 2.63 119.32 ± 2.92119.32 ± 2.92 180.66 ± 28.87180.66 ± 28.87 13.64 ± 0.9113.64 ± 0.91

상기 표 1에서 보듯이, 아로니아 음료 조성물은 폴리페놀, 플라보노이드 및 탄닌 함량이 아로니아 식초에 비하여 월등하게 증대되었음을 확인할 수 있었다. 다만, 안토시아닌 성분은 다소 감소하였다. As shown in Table 1, the Aaronia beverage composition was confirmed that the polyphenol, flavonoids and tannin content is significantly increased compared to the Aaronia vinegar. However, the anthocyanin component decreased slightly.

<시험예 2> 아로니아 음료 조성물의 항산화 활성 측정Test Example 2 Antioxidant Activity of Aaronia Beverage Composition

(1) 전자공여능 측정(1) Measurement of electron donating ability

전자공여능 (EDA; electron donating ability)은 Blois의 방법을 응용하여 측정하였다. 각 시료용액 120㎕에 0.45mM의 1,1-디페닐-2-피크릴하이드라질 (DPPH) 60㎕를 넣고 15분간 방치한 다음 517nm에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 양성 대조군으로 비타민 C를 사용하였다. 전자공여능은 하기 수학식 1에 따라 시료용액의 첨가군와 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다. 그 결과는 도 3에 나타내었다. Electron donating ability (EDA) was measured by applying the method of Blois. 60 µl of 0.45 mM 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) was added to 120 µl of each sample solution, which was allowed to stand for 15 minutes, and the absorbance was measured at 517 nm. At this time, vitamin C was used as a positive control. The electron donating ability was expressed as the absorbance reduction rate of the sample solution addition group and no addition group according to Equation 1 below. The results are shown in FIG.

Figure pat00001
Figure pat00001

도 3은 아로니아 음료의 전자공여능을 측정하여 나타낸 그래프이다. 여기에서 보듯이, 아로니아 음료 조성물(아이케어 아로니아)에서 농도가 증가할수록 전자공여능이 증가하는 경향을 나타내었고, 아로니아 식초보다는 32배를 희석한 농도에서 2배 이상의 높은 활성을 나타내었다. 또한, 양성 대조군과 비교할 때 매우 우수한 전자공여능을 나타내었다. 특히 32배로 희석한 농도에서 아이케어 아로니아는 양성 대조군인 비타민 C의 10μM 농도와 동일한 활성을 나타내었다. 제품 원액의 농도에서는 시료 농도에 따른 흡광도 방해로 인해 효과가 낮게 나타났다. 3 is a graph showing the electron donating ability of the Aaronia beverage. As shown here, the electron donating ability tended to increase with increasing concentration in the Aronia beverage composition (Eye Care Aronia), and showed more than two times higher activity at a concentration diluted 32 times than that of Aronia vinegar. In addition, it showed a very good electron donating ability compared to the positive control. In particular, eye care Aaronia showed the same activity as the 10 μM concentration of vitamin C, a positive control at a concentration diluted 32-fold. In the concentration of the stock solution, the effect was low due to the absorbance interference according to the sample concentration.

(2) ABTS 양이온 라디칼 소거능 측정(2) ABTS cationic radical scavenging activity measurement

ABTS 라디칼을 이용한 항산화력 측정은 ABTS+ 라디칼 탈색 분석에 의하여 측정하였다. 7mM 2,2-아지노-비스(3-에틸-벤티아졸린-6-술폰산)과 2.45mM 과황산 칼륨을 혼합하여 실온에서 24시간 동안 방치하여 ABTS+ 라디칼을 형성시킨 후 에탄올로 희석하여 ABTS+ 라디칼 100㎕에 시료 100㎕를 가하여 7분 동안 방치한 후 734nm에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 양성 대조군으로 비타민 C를 사용하였다. 소거능은 하기 수학식 2에 따라 산술하였다. Antioxidant activity using ABTS radicals was determined by ABTS + radical decolorization assay. 7 mM 2,2-azino-bis (3-ethyl-benthiazoline-6-sulfonic acid) and 2.45 mM potassium persulfate were mixed for 24 hours at room temperature to form ABTS + radicals and diluted with ethanol to ABTS + 100 μl of the sample was added to 100 μl of radicals, and the resultant was left for 7 minutes and the absorbance was measured at 734 nm. At this time, vitamin C was used as a positive control. Scavenging ability was calculated according to the following equation (2).

Figure pat00002
Figure pat00002

도 4는 아로니아 음료의 ABTS 양이온 라디칼 소거능을 측정하여 나타낸 그래프이다. 여기에서 보듯이, 아이케어 아로니아에서 농도가 증가할수록 양이온 라디칼 소거능이 증가하는 경향을 나타내었고 아로니아의 식초보다는 64배로 희석한 농도에서 2배 이상의 높은 활성을 나타내었다. 또한, 양성 대조군에 비교해 보았을 때도 매우 우수한 전자공여능을 나타내었다. 특히 64배로 희석한 농도에서 양성대조군인 비타민 C의 100μM 농도와 동일한 활성을 아이케어 아로니아가 나타내었다. 제품 원액의 농도에서는 시료 농도에 따른 흡광도 방해로 인해 효과가 낮게 나타났다. 4 is a graph showing the ABTS cationic radical scavenging ability of Aaronia beverages. As shown here, as the concentration increased, the cation radical scavenging activity tended to increase as the concentration increased, and the activity was more than 2 times higher at the concentration diluted 64 times than that of aronia. In addition, it showed very good electron donating ability as compared to the positive control. In particular, eye care Aaronia showed the same activity as the concentration of 100 μM of the positive control vitamin C at a concentration diluted 64 times. In the concentration of the stock solution, the effect was low due to the absorbance interference according to the sample concentration.

(3) Fe3 + → Fe2 + 환원력 측정(3) Fe 3 + → Fe 2 + reducing power measurement

환원력의 측정은 Oyaizu의 방법을 변형하여 측정하였다. 시료 1 mL에 200 mM 인산 완충액(pH 6.6) 및 1%의 페리시안화 칼륨(potassium ferricyanide)을 각각 1 mL씩 차례로 가하여 교반한 후 50℃의 수욕 상에서 20분간 반응시킨 뒤, 10% TCA 용액 1 mL 가하여 13,500Xg에서 15분간 원심분리하였다. 그 후 상등액 증류수 및 염화제2철(ferric chloride)을 각각 1 mL씩 혼합하여 700 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 양성 대조군으로 비타민 C를 사용하였다. Reducing power was measured by modifying Oyaizu's method. 200 mL phosphate buffer (pH 6.6) and 1% potassium ferricyanide (1 mL) were added to 1 mL of the sample each in turn, followed by stirring for 20 minutes in a water bath at 50 ° C., followed by 1 mL of 10% TCA solution. The mixture was centrifuged at 13,500Xg for 15 minutes. Thereafter, 1 mL of the supernatant distilled water and ferric chloride were each mixed, and the absorbance was measured at 700 nm. At this time, vitamin C was used as a positive control.

도 5는 아로니아 음료의 Fe3+의 환원력을 측정하여 나타낸 그래프이다. 여기에서 보듯이, 아이케어 아로니아에서 농도가 증가할수록 환원력이 증가하는 경향을 나타내었고, 아로니아의 식초의 경우에는 높은 활성을 나타내지 않았지만 아이케어 아로니아의 경우에는 양성 대조군보다 높은 활성을 나타내었다. 또한 양성 대조군과 비교할 때 매우 우수한 환원력을 나타내었다. 특히 8배로 희석한 농도에서 아이케어 아로니아가 양성 대조군인 비타민 C의 100μM 농도보다도 높은 환원력을 나타내었다. 제품 원액의 농도에서는 시료 농도에 따른 흡광도 방해로 인해 효과가 낮게 나타났다. 5 is a graph showing the reduction of Fe 3+ of the Aaronia beverage. As shown here, in the case of eye care aronia, the reducing power tended to increase, and in the case of aronia vinegar, it did not show high activity, but in the case of eye care aronia, it showed higher activity than the positive control. . In addition, it showed a very good reducing power compared to the positive control. In particular, eye care Aaronia showed higher reducing power than 100 μM concentration of vitamin C, which is a positive control at the concentration diluted 8-fold. In the concentration of the stock solution, the effect was low due to the absorbance interference according to the sample concentration.

(4) Fe2+ 킬레이트화(chelating) 측정(4) Fe 2+ chelating measurement

Fe2+ 킬레이트 측정은 Dinis 등의 방법(1994)의 방법을 변형하여 측정하였다. 시료 0.4 mL에 FeCl2 용액 (0.1 mL, 0.6 mM), 바이피리딜 용액 (0.1 mL, 5mM)을 차례로 가하여 10분간 반응 후 562 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이 때 양성 대조군으로 비타민 C를 사용하였다. Fe 2+ chelate measurement was determined by modifying the method of Dinis et al. (1994). FeCl 2 solution (0.1 mL, 0.6 mM) and bipyridyl solution (0.1 mL, 5 mM) were added sequentially to 0.4 mL of the sample, and the absorbance was measured at 562 nm after 10 minutes of reaction. At this time, vitamin C was used as a positive control.

도 6은 아로니아 음료의 Fe2+ 킬레이트화를 측정하여 나타낸 그래프이다. 여기에서 보듯이, Fe2+ 킬레이트화를 측정한 결과 아이케어 아로니아와 아로니아 식초에서 킬레이트의 효과는 미비하게 나타났다. 이는 환원력과 반대되는 경향을 주로 나타냄으로 아이케어 아로니아와 아로니아 식초가 환원력 및 라디칼 소거능에 특화된 효능을 나타다고 예측할 수 있다. 6 is a graph showing Fe 2+ chelation of Aaronia beverages. As shown here, the measurement of Fe 2+ chelation results in negligible chelate effects in eye care Aaronia and Aaronia vinegar. This shows a tendency opposite to reducing power, so it can be predicted that eye care Aaronia and Aaronia vinegar have a specific effect on reducing power and radical scavenging ability.

<시험예 4> 미백 활성 측정Test Example 4 Measurement of Whitening Activity

티로시나아제 저해활성 측정은 Yagi 등의 방법을 참고 및 변형하여 측정하였다. 반응구는 67mM 인산나트륨 완충액 (pH 6.8)에 10mM L-DOPA 및 시료용액의 혼합액에 버섯형 티로시나아제(mushroom tyrosinase, 125U/mL)을 첨가하여 37℃에서 10분간 반응시켜 반응액 중에 생성된 DOPA 크롬을 492nm에서 측정하였다. 티로시나아제 저해활성은 하기 수학식 3에 따라 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.Tyrosinase inhibitory activity was measured by referring to and modifying the method of Yagi et al. The reaction zone was prepared by adding mushroom-type tyrosinase (125 U / mL) to a mixture of 10 mM L-DOPA and a sample solution in a 67 mM sodium phosphate buffer (pH 6.8) and reacting for 10 minutes at 37 ° C. Chromium was measured at 492 nm. The tyrosinase inhibitory activity was expressed as the absorbance reduction rate of the sample solution addition group and no addition group according to Equation 3 below.

Figure pat00003
Figure pat00003

도 7은 아로니아 음료의 티로시나아제 저해활성을 측정하여 나타낸 그래프이다. 여기에서 보듯이, 미백에 관련된 버섯유래의 티로시나아제 저해활성 측정결과, 아로니아 식초에서 농도가 증가할수록 효소저해 활성이 증가하는 경향을 나타내었으며, 아이케어 아로니아의 경우에도 농도 의존적으로 저해 활성이 증가함을 확인 할 수 있었다. 또한 양성 대조군에 비교해 보았을 때도 매우 우수한 효소저해 활성을 나타내었다. 특히 4배를 희석한 농도에서 양성대조군인 비타민 C의 300μM 농도와 유사한 정도의 활성을 나타내었다. 제품 원액의 농도에서는 시료 농도에 따른 흡광도 방해로 인해 효과가 낮게 나타났다.Figure 7 is a graph showing the measurement of tyrosinase inhibitory activity of Aaronia beverages. As shown here, as a result of measurement of mushroom-derived tyrosinase inhibitory activity related to whitening, the enzyme inhibition activity tended to increase with increasing concentration in Aaronia vinegar. This increase was confirmed. In addition, it showed a very good enzyme inhibitory activity when compared to the positive control. In particular, 4 times dilute concentration showed a similar activity to the 300μM concentration of the positive control vitamin C. In the concentration of the stock solution, the effect was low due to the absorbance interference according to the sample concentration.

<시험예 5> 엘라스타아제 저해활성 측정Test Example 5 Measurement of Elastase Inhibitory Activity

시료를 200 mM Tris-HCl 완충액(pH 8.0) 50 μL에 10 μL/ml 엘라스타아제 100 μL와 5 mM N-숙시닐-ala-ala-ala-p-니트로아닐라이드 50 μL를 넣고 잘 섞은 후, 실온에서 20분 간 반응시키고 생성된 p-니트로아닐린의 양을 410 nm에서 마이크로플레이트 리더를 이용하여 측정하였다. 이 때 양성 대조군으로 비타민 C를 사용하였다. 대조군으로 추출물과 같은 농도인 비타민 C를 사용하여 위와 동일한 실험을 수행하여 후보물질의 엘라스타아제의 활성 억제 정도를 비교하였다.Add 50 μL of 10 μL / ml elastase and 50 μL of 5 mM N-succinyl-ala-ala-ala-p-nitroanilide to 50 μL of 200 mM Tris-HCl buffer (pH 8.0). The reaction was carried out for 20 minutes at room temperature and the amount of p-nitroaniline produced was measured at 410 nm using a microplate reader. At this time, vitamin C was used as a positive control. As a control, the same experiment was performed using the same concentration of vitamin C as the extract to compare the degree of inhibition of the elastase activity of the candidates.

엘라스타아제 저해활성은 하기 수학식 4에 따라 시료용액의 첨가군과 무첨가군의 흡광도 감소율로 나타내었다.Elastase inhibitory activity was expressed as a decrease in absorbance of the sample solution addition group and no addition group according to Equation 4 below.

Figure pat00004
Figure pat00004

도 8은 아로니아 음료의 엘라스타아제 저해활성을 측정하여 나타낸 그래프이다. 여기에서 보듯이, 주름에 관련된 효소로 알려진 엘라스타아제 저해활성 측정을 한 결과 아로니아 식초에서 농도가 증가할수록 효소저해 활성이 월등히 증가하는 경향을 나타내었고 아이케어 아로니아는 양성 대조군과 유사한 활성을 나타내었다. 제품 원액의 농도에서는 시료 농도에 따른 흡광도 방해로 인해 효과가 낮게 나타났다. 8 is a graph showing the measurement of the elastase inhibitory activity of the Aaronia beverage. As shown here, the results of measuring the elastase inhibitory activity known as the enzyme related to wrinkles showed that the enzyme inhibitory activity tended to increase with increasing concentration in Aaronia vinegar, and eyecare Aaronia showed similar activity as the positive control. Indicated. In the concentration of the stock solution, the effect was low due to the absorbance interference according to the sample concentration.

Claims (5)

아로니아 식초, 아로니아 농축액 및 배 농축액의 배합물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 항노화 및 피부 미백 효능이 증대된 아로니아 음료 조성물.Aaronia beverage composition with enhanced anti-aging and skin lightening effect, comprising a combination of Aaronia vinegar, Aaronia concentrate and pear concentrate as an active ingredient. 제 1 항에 있어서,
상기 아로니아 식초, 아로니아 농축액 및 배 농축액의 배합물이 아로니아 식초, 아로니아 농축액 및 배 농축액이 4 : 1~3 : 1~2의 중량비율로 혼합된 것임을 특징으로 하는 항노화 및 피부 미백 효능이 증대된 아로니아 음료 조성물.
The method of claim 1,
Anti-aging and skin whitening effect, characterized in that the combination of the Aaronia vinegar, Aaronia concentrate and pear concentrate is a mixture of Aronia vinegar, Aaronia concentrate and pear concentrate in a weight ratio of 4: 1 to 3: 1 to 2. This enhanced Aaronia beverage composition.
제 1 항에 있어서,
상기 아로니아 식초는 아로니아 농축액과 배 농축액을 혼합한 다음 효모 균주를 이용하여 알코올 발효시킨 후 초산 균주를 이용하여 초산 발효시켜 제조된 것임을 특징으로 하는 항노화 및 피부 미백 효능이 증대된 아로니아 음료 조성물.
The method of claim 1,
The Aaronia vinegar is an Aaronia beverage having an anti-aging and skin whitening effect, which is prepared by mixing an Aaronia concentrate and a pear concentrate and then fermenting with alcohol using a yeast strain followed by acetic acid fermentation using an acetic acid strain. Composition.
제 1 항에 있어서,
상기 아로니아 농축액은 아로니아 열매를 착즙한 다음 여과하여 저온 숙성시킨 후 정제수와 혼합하여 다시 저온 숙성시킨 다음 여과 및 농축하여 제조된 것임을 특징으로 하는 항노화 및 피부 미백 효능이 증대된 아로니아 음료 조성물.
The method of claim 1,
The Aaronia concentrate is a Aaronia beverage composition, characterized in that the anti-aging and skin lightening effect is increased by filtration and concentrating the Aronia fruit is filtered and then aged at low temperature, mixed with purified water and then aged at low temperature, filtered and concentrated. .
제 1 항에 있어서,
상기 배 농축액은 배와 정제수를 혼합하여 추출한 다음 여과 및 농축하여 제조된 것임을 특징으로 하는 항노화 및 피부 미백 효능이 증대된 아로니아 음료 조성물.
The method of claim 1,
The pear concentrate is extracted by mixing the pear and purified water and then filtered and concentrated to produce an anti-aging and skin lightening effect Aaronia beverage composition.
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