KR20190060185A - 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 및 이의 제조 방법 - Google Patents
허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 및 이의 제조 방법 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20190060185A KR20190060185A KR1020170158142A KR20170158142A KR20190060185A KR 20190060185 A KR20190060185 A KR 20190060185A KR 1020170158142 A KR1020170158142 A KR 1020170158142A KR 20170158142 A KR20170158142 A KR 20170158142A KR 20190060185 A KR20190060185 A KR 20190060185A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- pin1
- dapk1
- mouse
- ischemic brain
- animal model
- Prior art date
Links
- 238000010171 animal model Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 14
- 208000037906 ischaemic injury Diseases 0.000 title description 2
- 101001128814 Pandinus imperator Pandinin-1 Proteins 0.000 claims abstract description 120
- 230000000302 ischemic effect Effects 0.000 claims abstract description 46
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 claims abstract description 42
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 21
- 102100038587 Death-associated protein kinase 1 Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 101000956145 Homo sapiens Death-associated protein kinase 1 Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims description 29
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 claims description 25
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 claims description 10
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 claims description 9
- 206010008118 cerebral infarction Diseases 0.000 claims description 9
- 230000013011 mating Effects 0.000 claims description 8
- 101100276970 Mus musculus Dapk1 gene Proteins 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 208000029028 brain injury Diseases 0.000 claims description 6
- 102000004195 Isomerases Human genes 0.000 claims description 5
- 108090000769 Isomerases Proteins 0.000 claims description 5
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010010071 Coma Diseases 0.000 claims description 3
- 208000020406 Creutzfeldt Jacob disease Diseases 0.000 claims description 3
- 208000003407 Creutzfeldt-Jakob Syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 208000010859 Creutzfeldt-Jakob disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010019196 Head injury Diseases 0.000 claims description 3
- 201000004810 Vascular dementia Diseases 0.000 claims description 3
- 230000006931 brain damage Effects 0.000 claims description 3
- 231100000874 brain damage Toxicity 0.000 claims description 3
- 230000035939 shock Effects 0.000 claims description 3
- 206010008111 Cerebral haemorrhage Diseases 0.000 claims description 2
- 231100000272 reduced body weight Toxicity 0.000 claims description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 abstract description 18
- 230000037430 deletion Effects 0.000 abstract description 18
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 abstract description 15
- 238000012216 screening Methods 0.000 abstract description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 3
- 108010031042 Death-Associated Protein Kinases Proteins 0.000 description 95
- 102000005721 Death-Associated Protein Kinases Human genes 0.000 description 95
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 7
- 201000006474 Brain Ischemia Diseases 0.000 description 6
- 206010008120 Cerebral ischaemia Diseases 0.000 description 6
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 6
- 230000016273 neuron death Effects 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 3
- 230000034994 death Effects 0.000 description 3
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 3
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 3
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229960000103 thrombolytic agent Drugs 0.000 description 3
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 2
- 101150016419 DAPK1 gene Proteins 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 101100276969 Homo sapiens DAPK1 gene Proteins 0.000 description 2
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 2
- 229940127218 antiplatelet drug Drugs 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 2
- 230000007773 growth pattern Effects 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 2
- 239000000106 platelet aggregation inhibitor Substances 0.000 description 2
- 101100005765 Arabidopsis thaliana CDF1 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100007579 Arabidopsis thaliana CPP1 gene Proteins 0.000 description 1
- 239000005528 B01AC05 - Ticlopidine Substances 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710186800 Death-associated protein kinase dapk-1 Proteins 0.000 description 1
- 206010014523 Embolism and thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 206010019233 Headaches Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000699684 Meriones unguiculatus Species 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010033557 Palpitations Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 102000001253 Protein Kinase Human genes 0.000 description 1
- 206010039203 Road traffic accident Diseases 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 102000003978 Tissue Plasminogen Activator Human genes 0.000 description 1
- 108090000373 Tissue Plasminogen Activator Proteins 0.000 description 1
- 208000032109 Transient ischaemic attack Diseases 0.000 description 1
- 206010053648 Vascular occlusion Diseases 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 229960004676 antithrombotic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229960004588 cilostazol Drugs 0.000 description 1
- RRGUKTPIGVIEKM-UHFFFAOYSA-N cilostazol Chemical compound C=1C=C2NC(=O)CCC2=CC=1OCCCCC1=NN=NN1C1CCCCC1 RRGUKTPIGVIEKM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 1
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- KAQKFAOMNZTLHT-VVUHWYTRSA-N epoprostenol Chemical compound O1C(=CCCCC(O)=O)C[C@@H]2[C@@H](/C=C/[C@@H](O)CCCCC)[C@H](O)C[C@@H]21 KAQKFAOMNZTLHT-VVUHWYTRSA-N 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009395 genetic defect Effects 0.000 description 1
- 150000002306 glutamic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 231100000869 headache Toxicity 0.000 description 1
- 210000001320 hippocampus Anatomy 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000031146 intracellular signal transduction Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 230000009223 neuronal apoptosis Effects 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004129 prosencephalon Anatomy 0.000 description 1
- 108060006633 protein kinase Proteins 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 230000004043 responsiveness Effects 0.000 description 1
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 230000035882 stress Effects 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- PHWBOXQYWZNQIN-UHFFFAOYSA-N ticlopidine Chemical compound ClC1=CC=CC=C1CN1CC(C=CS2)=C2CC1 PHWBOXQYWZNQIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005001 ticlopidine Drugs 0.000 description 1
- 229960000187 tissue plasminogen activator Drugs 0.000 description 1
- 201000010875 transient cerebral ischemia Diseases 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 208000021331 vascular occlusion disease Diseases 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
- A01K67/0276—Knock-out vertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/12—Transferases (2.) transferring phosphorus containing groups, e.g. kinases (2.7)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/93—Ligases (6)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y207/00—Transferases transferring phosphorus-containing groups (2.7)
- C12Y207/11—Protein-serine/threonine kinases (2.7.11)
- C12Y207/11001—Non-specific serine/threonine protein kinase (2.7.11.1), i.e. casein kinase or checkpoint kinase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y502/00—Cis-trans-isomerases (5.2)
- C12Y502/01—Cis-trans-Isomerases (5.2.1)
- C12Y502/01008—Peptidylprolyl isomerase (5.2.1.8), i.e. cyclophilin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
- A01K2217/075—Animals genetically altered by homologous recombination inducing loss of function, i.e. knock out
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/0306—Animal model for genetic diseases
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
본 발명은 허혈성 뇌질환 동물 모델 및 이의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델은 DAPK1 및 Pin1 유전자가 이중 결손되어 저항성을 나타내므로, 종래 허혈성 뇌질환 감수성 동물 모델들과 비교하여 허혈성 뇌질환과 관련된 시험 물질의 스크리닝에 유용하게 이용될 수 있고, 허혈성 뇌질환과 관련된 유전자 발현 연구에 참고용으로 이용될 수 있어, 관련된 약학 분야에서 유용하게 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 및 이의 제조 방법에 관한 것이다.
2001년 우리나라 사망원인 통계조사에 따르면, 뇌혈관 질환에 의한 사망률(인구 십만 명당 사망자수)이 암 다음으로 2위인 73.8명에 이르며, 이에 따른 사회, 경제적 비용은 2조 3,138억 원으로 추정되었다. 뇌혈관 질환 치료제에 대한 수요가 매우 높으므로, 뇌혈관 질환 치료를 통한 사회적 경제적 손실을 줄이기 위한 치료제 개발연구가 중요하다. 뇌혈관 질환은 특히 노령 연령층에 발병률이 높으며, 일단 발생하면 사망률이 매우 높다. 통계청에서 2003년 10월에 발표한 우리나라 노령 인구의 비율을 살펴보면, 우리나라는 지난 2000년 65세 이상 인구가 총인구에서 차지하는 비중이 7.2%에 이르러 고령화 사회에 들어섰으며, 오는 2019년에는 이 비율이 14%를 넘어 고령사회에 진입할 것으로 전망되고 있다.
뇌혈관 질환은 크게 2가지 형태로 분류될 수 있다. 하나는 뇌출혈 등에서 볼 수있는 출혈성 뇌질환이고, 다른 하나는 뇌혈관의 폐쇄 등에 의해 나타나는 허혈성 뇌질환이다. 출혈성 뇌질환은 교통사고 등에 의해서 주로 나타나며, 허혈성 뇌질환은 주로 노령의 사람들에서 자주 나타나는 질환이다. 허혈성 뇌질환은 혈전증(thrombosis), 색전증(em-bolism), 일과성 허혈 발작(transient ischemic attack) 및 소경색(lacune)등으로 세분할 수 있는데, 허혈성 뇌혈관질환은 주로 혈전과 색전 등에 의하여 뇌에 혈류를 공급하는 혈관에 병리학적 이상이 생긴 것이다.
대뇌에 일시적인 뇌허혈이 유발되는 경우, 뇌조직에 산소와 포도당의 공급이 차단되어 신경세포에서는 ATP감소, 부종(edema)이 발생하며, 결국 뇌의 광범위한 손상이 유발된다. 신경세포의 사멸은 뇌허혈이 있은 후 상당한 시간 경과 후에 나타나는데, 이를 지연성 신경세포사(delayed neuronal death)라고 한다. 지연성 신경세포사는 몽골리안 저빌(Mongolian gerbil)을 이용한 일과성 전뇌 허혈모델(transient forebrain ischemic model)을 통한 실험에서 살펴보면, 5분간 뇌허혈 유도 4일 후 해마(hippcampus)의 CA1 영역에서 신경세포사가 관찰되는 것으로 보고되고 있다(Kirino T, Sano K. Acta Neuropathol., 62, 201-208, 1984; Kirino T. Brain Res., 239, 57-69, 1982).
뇌허혈에 의한 신경세포사 기전에는 크게 2가지가 있다. 하나는 뇌허혈에 의해서 세포 바깥에 과도한 글루타메이트(glutamate)가 축적되게 되며, 이러한 글루타메이트가 세포내로 유입되어 결국 과도한 세포내 칼슘의 축적으로 신경세포사가 유발되는 흥분성 신경세포사 기전(Kang TC et al., J. Neurocytol., 30, 945-955, 2001)이고, 다른 하나는 허혈-재관류 시에 갑작스러운 산소 공급으로 인해 생체내 라디칼의 증가로 인해 DNA 및 세포질에 손상을 입어 유발되는 산화성 신경세포사 기전이다(Won MH et al., Brain Res., 836, 70-78, 1999; Sun AY, Chen YM, J. Biomed. Sci., 5, 401-414, 1998; Flowers F, Zimmerman JJ. New Horiz., 6, 169-180, 1998).
허혈성 뇌질환에서 임상적으로 사용 가능한 약물은 희소하고, 현재 유일하게 허가된 약물은 항혈전제(항응고제, 항혈소판제, 혈전용해제를 포함)이다. 티크로피딘(ticlopidine), 시로스타졸(cilostazole) 및 프로스타시크린(prostacycline)의 항혈소판제나 항응고제는 종종 두통, 심계항진 및 간에 부담을 주는 부작용이 있어 사용에 제한이 따른다. 더불어, FDA 공인 시판 중인 조직플라즈미겐활성자(tissue plasminogen activator)는 혈전용해제로 뇌허혈을 유발시키는 혈전을 녹여 빠른 산소 및 포도당의 공급을 유도하는 물질로서, 직접적으로 신경세포를 보호하는 것이 아니기 때문에 빠른 사용이 필요하다. 또한, 혈전용해제라는 특징 때문에 과량 사용 또는 자주 사용 시에는 혈관벽이 얇아져 결국 출혈성 뇌혈관 질환을 유발하게 되므로 사용에 주의가 요구된다.
따라서, 새로운 허혈성 뇌질환의 치료제의 개발이 요구될 뿐만 아니라, 이를 대조적으로 확인 할 수 있는 허혈성 뇌질환을 유발시키는 물질 개발의 필요성이 대두되고 있다. 이에 따라, 상기 치료제 또는 유발제를 효과적이고 객관적으로 스크리닝할 수 있는 동물 모델의 필요성이 요구되고 있다.
본 발명의 목적은 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델을 제공할 수 있다.
또한 본 발명의 목적은 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 제조 방법을 제공할 수 있다.
상기 목적의 달성을 위해, 본 발명은 DAPK1(Death-associated protein kinase 1) 동형접합성((homozygote, DAPK1-/-) 마우스와 Pin1(peptidylprolyl cis/trans isomerase 1) 이형접합성(heterozygote, Pin1+/-) 마우스를 교배하여 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계; 및
상기 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-) 특징을 포함하는 마우스를 교배하여 DAPK1 동형접합성(DAPK-/-) 및 Pin1 동형접합성(Pin1-/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계;를 포함하는 DAPK1 및 Pin1 유전자가 이중 결손된 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델을 제공한다.
또한, 본 발명은 DAPK1 동형접합성((homozygote, DAPK1-/-) 마우스와 Pin1 이형접합성(heterozygote, Pin1+/-) 마우스를 교배하여 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계; 및
상기 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-) 특징을 포함하는 마우스를 교배하여 DAPK1 동형접합성(DAPK-/-) 및 Pin1 동형접합성(Pin1-/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계;를 포함하는 DAPK1 및 Pin1 유전자가 이중 결손된 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 제조 방법을 제공한다.
본 발명의 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델은 DAPK1 및 Pin1 유전자가 이중 결손되어 저항성을 나타내므로, 종래 허혈성 뇌질환 감수성 동물 모델들과 비교하여 허혈성 뇌질환과 관련된 시험 물질의 스크리닝에 유용하게 이용될 수 있고, 허혈성 뇌질환과 관련된 유전자 발현 연구에 참고용으로 이용될 수 있어, 관련된약학 분야에서 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 동물 모델의 제조 방법을 나타내는 모식도이다.
도 2는 2차 교배 하여 획득한 DAPK1 및 Pin1 유전자 이중 결손 마우스의 유전형을 분석한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 야생형, DAPK1 및 Pin1 이중 결손(DAPK1/Pin1 DAPK1/Pin1 DKO), DAPK1 단일 결손(DAPK1 KO) 또는 Pin1 단일 결손(Pin1 KO) 마우스의 몸 길이를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 야생형, DAPK1 및 Pin1 이중 결손(DAPK1/Pin1 DAPK1/Pin1 DKO), DAPK1 단일 결손(DAPK1 KO) 또는 Pin1 단일 결손(Pin1 KO) 마우스의 체중을 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 5는 DAPK1 및 Pin1 이중 결손(DAPK1/Pin1 DAPK1/Pin1 DKO), DAPK1 단일 결손(DAPK1 KO) 또는 Pin1 단일 결손(Pin1 KO) 마우스에 국소적 허혈성 중대뇌동맥 폐색술(MCAo)을 수행한 후, DAPK1 및 Pin1의 억제제 처리에 따른 유전자의 발현 정도를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 2는 2차 교배 하여 획득한 DAPK1 및 Pin1 유전자 이중 결손 마우스의 유전형을 분석한 결과를 나타낸 도이다.
도 3은 야생형, DAPK1 및 Pin1 이중 결손(DAPK1/Pin1 DAPK1/Pin1 DKO), DAPK1 단일 결손(DAPK1 KO) 또는 Pin1 단일 결손(Pin1 KO) 마우스의 몸 길이를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 4는 야생형, DAPK1 및 Pin1 이중 결손(DAPK1/Pin1 DAPK1/Pin1 DKO), DAPK1 단일 결손(DAPK1 KO) 또는 Pin1 단일 결손(Pin1 KO) 마우스의 체중을 확인한 결과를 나타낸 도이다.
도 5는 DAPK1 및 Pin1 이중 결손(DAPK1/Pin1 DAPK1/Pin1 DKO), DAPK1 단일 결손(DAPK1 KO) 또는 Pin1 단일 결손(Pin1 KO) 마우스에 국소적 허혈성 중대뇌동맥 폐색술(MCAo)을 수행한 후, DAPK1 및 Pin1의 억제제 처리에 따른 유전자의 발현 정도를 확인한 결과를 나타낸 도이다.
본 발명은 DAPK1(Death-associated protein kinase 1) 동형접합성((homozygote, DAPK1-/-) 마우스와 Pin1(peptidylprolyl cis/trans isomerase 1) 이형접합성(heterozygote, Pin1+/-) 마우스를 교배하여 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계; 및
상기 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-) 특징을 포함하는 마우스를 교배하여 DAPK1 동형접합성(DAPK-/-) 및 Pin1 동형접합성(Pin1-/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계;를 포함하는 DAPK1 및 Pin1 유전자가 이중 결손된 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델을 제공한다.
본 발명에서 용어, "DAPK1(Death-associated protein kinase 1)"는 칼슘/칼모듈린 의존성 인산화 효소이고, "Pin1(peptidylprolyl cis/trans isomerase 1)"는 이성질화 효소로서, 상기 DAPK1 및 Pin1는 산화적 스트레스에 반응하여 세포사멸 신호를 활성화시키는 중요한 조절인자로 작용한다. DAPK1 및 Pin1의 신호기작은 세포내 신호전달 체계를 구성하는 특정 단백질과 상호작용하여 기질단백질의 구조적 변화를 유도하거나 특정 모티프(motif)의 인산화를 통하여 기능적 변화를 야기한다.
상기 동물 모델은 허혈성 뇌질환에 저항성이고, 상기 저항성은 DAPK1 및 Pin1의 유전자 결손에 의하여 유발되는 것으로, 이에 제한되지 않는다.
상기 허혈성 뇌질환 동물 모델은 야생형과 비교하여 체중이 감소하고 및 몸 길이가 짧아진다.
상기 허혈성 뇌질환은 중풍, 뇌졸중, 뇌일혈, 뇌경색, 두부손상, 알츠하이머, 혈관성 치매, 크로이츠펠트-야콥병, 혼수 및 쇼크 뇌손상으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이나, DAPK1 및 Pin1의 유전자 결손에 의한 허혈성 뇌질환의 저항성 목적을 달성하기 위해서라면 이에 제한되지 않는다.
동물모델에 사용되는 동물은 인간을 제외한 다양한 포유류를 포함하며, 이로 제한하는 것은 아니나, 소, 돼지, 양, 토끼, 설취류가 사용될 수 있다. 한 구현예에서는 상기 동물은 쥣과 (murine)동물, 예를 들면 마우스이다.
또한, 본 발명에 따른 동물모델의 제조를 위해 사용할 수 있는 실험용 마우스의 종류로는 이에 제한되지는 않으나, 계통별 분류상 폐쇄군(Closed Colony)에 속하는 ICR 또는 DDY; 근교계(Inbred)에 속하는 BALB/cA, C57BL/6N, C3H/HeN, DBA/2N 또는 CBA/N; 교잡군(hybrid)에 속하는 BDF1(C57BL/6 x DBA/2), CDF1(CBA/N x DBA/2) 또는 B6C3F1(C57BL/6 x C3H/HeN); 돌연변이계(Mutant)에 속하는 BALB/c-nu 또는 C,B-17SCID 등 실험용 마우스로 사용되고 있는 것이라면 모두 이용할 수 있다. 바람직하게는 c57BL/6 마우스를 사용할 수 있다. 상기 c57BL/6 마우스는 종종 "C57 블랙(black) 6" 또는 단순히 "블랙(black) 6"로도 불리는 근교계 실험용 마우스이다. 이 종은 사람의 질병 모델을 위한 유전자 변형 마우스의 "유전적 기반(genetic background)"으로 가장 널리 사용되고 있으며, 이들은 congenic 균주들의 이용가능성, 손쉬운 교배, 강건성(robustness), 및 유전자 변형 모델들과의 관계 등에서 장점을 갖는다. 특히 C57BL/6로부터의 면역 반응은 BALB/c와 같은 다른 근교계 종들과 차별화 될 수 있다.
따라서 본 발명은 상기와 같은 방법에 따라 허혈성 뇌질환 동물모델을 제조하는 방법을 제공할 수 있으며, 또한, 상기 방법에 의해 제조된 허혈성 뇌질환 동물모델을 제공할 수 있다.
본 발명의 방법에 따라 제조된 허혈성 뇌질환 동물모델은 통상적으로 사용되는 허혈성 뇌질환 동물모델에 비해 DAPK1 및 Pin1 유전자 또는 단백질의 발현이 저해되어 저항성이 증가된 특징이 있다.
또한, 본 발명은 DAPK1 동형접합성((homozygote, DAPK1-/-) 마우스와 Pin1 이형접합성(heterozygote, Pin1+/-) 마우스를 교배하여 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계; 및
상기 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-) 특징을 포함하는 마우스를 교배하여 DAPK1 동형접합성(DAPK-/-) 및 Pin1 동형접합성(Pin1-/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계;를 포함하는 DAPK1 및 Pin1 유전자가 이중 결손된 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 제조 방법을 제공한다.
또한 본 발명은 (1) 제1항의 허혈성 뇌질환 동물 모델 및 야생형 동물에 시험 물질을 투여하는 단계; 및
(2) 상기 야생형의 DAPK1 및 Pin1의 유전자 또는 단백질 발현이 제1항의 허혈성 뇌질환 동물 모델만큼 저하된 경우 허혈성 뇌질환 치료제로 선발하거나, 제1항의 허혈성 뇌질환 동물 모델의 DAPK1 및 Pin1의 유전자 또는 단백질 발현이 변화된 경우 허혈성 뇌질환 유발제로 선발하는 단계;를 포함하는 허혈성 뇌질환 유발제 또는 치료제의 스크리닝 방법을 제공한다.
상기 허혈성 뇌질환은 중풍, 뇌졸중, 뇌일혈, 뇌경색, 두부손상, 알츠하이머, 혈관성 치매, 크로이츠펠트-야콥병, 혼수 및 쇼크 뇌손상으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상이나, 이에 제한되지 않는다.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예는 본 발명의 내용을 구체화하기 위한 것일 뿐 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> DAPK1(Death-associated protein kinase 1) 또는Pin1(peptidylprolyl cis/trans isomerase 1)의 단일 또는 이중 결손 마우스 모델 제작
도 1에 나타낸 바와 같이, DAPK1 및 Pin1 이중 결손(DAPK1/Pin1 Double Knock Out, DAPK1/Pin1 DKO) 마우스를 제작하기 위하여 DAPK1 (-/-) 암컷 마우스와 Pin1 (+/-) 수컷 마우스의 교배를 1차로 진행하였다. Pin1 (-/-) 마우스의 생식능력이 제한적이기 때문에, 1차 교배 시 Pin1 (-/-) 마우스가 아닌 Pin1 (+/-) 마우스를 이용하여 DAPK1 (-/-) 마우스와 교배를 진행하였다. 이 후, DAPK1(+/-)/Pin1(+/-) 1세대 (F1) 마우스를 확보하고 동일한 유전형 (DAPK1+/-Pin1+/-) 간의 2차교배를 통하여 2세대 (F2) 마우스를 획득하였다. 2세대 마우스의 Genomic DNA를 이용하여 유전형을 분석하였다. 2세대 마우스의 꼬리를 절단하여 genomic DNA를 분리한 후, DAPK1 또는 DAPK1 유전자에 특이적 프라이머를 이용하여 DAPK1 또는 Pin1의 야생형(WT)과 KO 타입에 대한 DNA-PCR을 수행하였다. 각 타입에 대한 프라이머 서열은 하기 표 1에 나타내었다. 그 결과를 도 2에 나타내었다.
도 2에 나타낸 바와 같이, DAPK1와 Pin1 유전자가 모두 결손된 DAPK1-/-Pin1-/- 마우스를 선발하였다.
| gene | type | sequence |
| DAPK1 | WT, KO | sense : 5'-GTC CCT CCA GTT GCA GTT AGA ATC-3' |
| WT | antisense : 5'-CTT TCA GAG GTC TGC GGC TTG GTG CAT GAG-3' | |
| KO | antisense : 5'-AGG ATC TCG TCG TGA CCC ATG GCG A-3' | |
| Pin1 | WT, KO | sense : 5'-CCG ATC CTG TTC TGC AAA CT-3' |
| WT | antisense : 5'-GGA TTA GAA GCA AGA TTC GAC T-3' | |
| KO | antisense : 5'-CCA CTT GTG TAG CGC CAA GTG C-3' |
<실시예 2> DAPK1/Pin1 DKO 마우스의 표현형 (Phenotype) 및 성장패턴 분석
상기 실시예 1에서 선발한 DAPK1 및 Pin1 이중 결손(DAPK1/Pin1 DAPK1/Pin1 DKO), DAPK1 단일 결손(DAPK1 KO) 또는 Pin1 단일 결손(Pin1 KO) 마우스의 표현형 및 성장 패턴을 분석하여 비교하였다.
구체적으로, Wild type, DAPK1 KO, Pin1 KO, DAPK1/Pin1 DKO의 7주령 암컷 마우스의 몸 길이(cm)를 측정하여 비교하였다. 몸 길이는 코에서부터 항문까지를 측정하였다. 그 결과를 도 3에 나타내었다. 또한, 6주부터 14주까지 야생형(C57BL/6 마우스), DAPK1 KO, Pin1 KO 및 DAPK1/Pin1 DKO 마우스의 체중을 측정하여 각 그룹의 평균을 비교 및 분석하였다. 그 결과를 도 4에 나타내었다.
도 3에 나타낸 바와 같이, Pin1 KO과 DAPK1/Pin1 DKO 마우스의 Body length가 야생형과 DAPK1 KO 마우스에 비하여 상대적으로 감소되어 있음을 확인하였다.
또한, 도 4에 나타낸 바와 같이, 야생형과 DAPK1 KO 마우스의 체중 간에는 차이가 없었으나, Pin1 KO과 DAPK1/Pin1 DKO 마우스는 야생형에 비하여 유의한 감소가 나타남을 확인하였다
따라서, 본 발명의 DAPK1/Pin1 DKO 마우스는 야생형과 비교하여 체중 및 몸 길이가 유의적으로 감소됨을 확인하였다.
<실시예 3> 허혈성 뇌손상을 통한 DAPK1/Pin1 DKO 마우스의 유전적 발현 조절 확인 및 반응 활성 확인
상기 실시예 1에서 선발한 DAPK1 및 Pin1 이중 결손(DAPK1/Pin1 DAPK1/Pin1 DKO), DAPK1 단일 결손(DAPK1 KO) 또는 Pin1 단일 결손(Pin1 KO) 마우스의 유전자 발현 양상을 확인하였다. RT-PCR을 이용하여 DAPK1 KO 마우스와 Pin1 KO 마우스의 뇌조직에서 해당 유전자의 결손을 확인하였다(도 5A). 이 후, 이 후, 국소적 허혈성 중대뇌동맥 폐색술(MCAo)을 수행하여, 허혈성 뇌손상을 일으킨 후, 1시간 후 및 6시간 후의 유전자 발현을 확인하였다. 그 결과를 도 5에 나타내었다.
도 5에 나타낸 바와 같이, 정상상태 (MCAo 비수술군)의 DAPK1 KO 마우스 뇌조직에서 WT 마우스와 비교시, DAPK1 유전자 발현이 억제되고 Pin1 유전자의 발현증가를 확인하였다. Pin1 KO 마우스 뇌조직에서는 반대로 Pin1의 유전자 발현이 억제되고 DAPK1 유전자의 발현됨을 확인하였다.
또한, 허혈성 뇌손상을 유발한 WT 마우스의 뇌조직에서 Pin1의 발현 증가 (MCAo 수술 후 6시간)와 DAPK1의 발현증가 (MCAo 수술 후 1일)를 확인하였다. MCAo 수술 이후 DAPK1 KO 뇌조직에서 Pin1의 발현감소가 관찰되었고, Pin1 KO 뇌조직에서는 DAPK1의 발현이 증가됨을 확인하였다.
<110> inje university industry-academic cooperation foundation
<120> Ischemic injury stroke resistance animal model and method for
producing the same
<130> PN1708-274
<160> 6
<170> KoPatentIn 3.0
<210> 1
<211> 24
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> sense primer of DAPK1 WT and KO
<400> 1
gtccctccag ttgcagttag aatc 24
<210> 2
<211> 30
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> antisense primer of DAPK1 WT
<400> 2
ctttcagagg tctgcggctt ggtgcatgag 30
<210> 3
<211> 25
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> antisense primer of DAPK1 KO
<400> 3
aggatctcgt cgtgacccat ggcga 25
<210> 4
<211> 20
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> sense primer of Pin1 WT and KO
<400> 4
ccgatcctgt tctgcaaact 20
<210> 5
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> antisense primer of Pin1 WT
<400> 5
ggattagaag caagattcga ct 22
<210> 6
<211> 22
<212> DNA
<213> Artificial Sequence
<220>
<223> antisense primer of Pin1 KO
<400> 6
ccacttgtgt agcgccaagt gc 22
Claims (4)
- DAPK1(Death-associated protein kinase 1) 동형접합성((homozygote, DAPK1-/-) 마우스와 Pin1(peptidylprolyl cis/trans isomerase 1) 이형접합성(heterozygote, Pin1+/-) 마우스를 교배하여 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계; 및
상기 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-) 특징을 포함하는 마우스를 교배하여 DAPK1 동형접합성(DAPK-/-) 및 Pin1 동형접합성(Pin1-/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계;를 포함하는 DAPK1 및 Pin1 유전자가 이중 결손된 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델. - 제1항에 있어서,
상기 허혈성 뇌질환 동물 모델은 야생형과 비교하여 체중이 감소하고 및 몸 길이가 짧아진 것을 특징으로 하는, 동물 모델 제조 방법. - 제1항에 있어서,
상기 허혈성 뇌질환은 중풍, 뇌졸중, 뇌일혈, 뇌경색, 두부손상, 알츠하이머, 혈관성 치매, 크로이츠펠트-야콥병, 혼수 및 쇼크 뇌손상으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 동물 모델 제조 방법. - DAPK1 동형접합성((homozygote, DAPK1-/-) 마우스와 Pin1 이형접합성(heterozygote, Pin1+/-) 마우스를 교배하여 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계; 및
상기 DAPK1 이형접합성(DAPK1+/-) 및 Pin1 이형접합성(Pin1+/-) 특징을 포함하는 마우스를 교배하여 DAPK1 동형접합성(DAPK-/-) 및 Pin1 동형접합성(Pin1-/-)을 포함하는 마우스를 선발하는 단계;를 포함하는 DAPK1 및 Pin1 유전자가 이중 결손된 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 제조 방법.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170158142A KR102088556B1 (ko) | 2017-11-24 | 2017-11-24 | 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 및 이의 제조 방법 |
| PCT/KR2018/014416 WO2019103476A1 (ko) | 2017-11-24 | 2018-11-22 | 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 및 이의 제조 방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020170158142A KR102088556B1 (ko) | 2017-11-24 | 2017-11-24 | 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 및 이의 제조 방법 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20190060185A true KR20190060185A (ko) | 2019-06-03 |
| KR102088556B1 KR102088556B1 (ko) | 2020-03-12 |
Family
ID=66632122
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020170158142A KR102088556B1 (ko) | 2017-11-24 | 2017-11-24 | 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 및 이의 제조 방법 |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102088556B1 (ko) |
| WO (1) | WO2019103476A1 (ko) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022035049A1 (ko) * | 2020-08-13 | 2022-02-17 | 동국대학교 산학협력단 | 신규한 뇌혈관질환 동물모델 제조방법 및 이에 의해 제조된 뇌혈관질환 동물모델을 이용하여 뇌혈관질환 발병 감수성 개체 차이가 작은 동물을 생산하기 위한 방법 |
| KR20220060718A (ko) * | 2020-11-05 | 2022-05-12 | 한림대학교 산학협력단 | 지연성 뇌허혈 진단을 위한 dapk1 바이오마커 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101301486B1 (ko) * | 2012-04-25 | 2013-08-29 | 충남대학교산학협력단 | 파킨슨병 동물 모델과 그 제조방법 및 이를 이용한 파킨슨병 치료제의 스크리닝 방법 |
| KR20160086775A (ko) * | 2016-02-11 | 2016-07-20 | 성균관대학교산학협력단 | Pin1 저해제를 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
-
2017
- 2017-11-24 KR KR1020170158142A patent/KR102088556B1/ko active IP Right Grant
-
2018
- 2018-11-22 WO PCT/KR2018/014416 patent/WO2019103476A1/ko active Application Filing
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101301486B1 (ko) * | 2012-04-25 | 2013-08-29 | 충남대학교산학협력단 | 파킨슨병 동물 모델과 그 제조방법 및 이를 이용한 파킨슨병 치료제의 스크리닝 방법 |
| KR20160086775A (ko) * | 2016-02-11 | 2016-07-20 | 성균관대학교산학협력단 | Pin1 저해제를 유효성분으로 포함하는 뇌졸중 예방 또는 치료용 약학적 조성물 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 이승훈의 인제대학교 박사학위 논문, 논문명 : ‘허혈성 뇌손상시 신경세포 사멸억제에 Pin1 이성질화 효소의 작용 기작 규명’(2014.02.28. 공개)* * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2022035049A1 (ko) * | 2020-08-13 | 2022-02-17 | 동국대학교 산학협력단 | 신규한 뇌혈관질환 동물모델 제조방법 및 이에 의해 제조된 뇌혈관질환 동물모델을 이용하여 뇌혈관질환 발병 감수성 개체 차이가 작은 동물을 생산하기 위한 방법 |
| KR20220021933A (ko) | 2020-08-13 | 2022-02-23 | 동국대학교 산학협력단 | 신규한 뇌혈관질환 동물모델 제조방법 및 이에 의해 제조된 뇌혈관질환 동물모델을 이용하여 뇌혈관질환 발병 감수성 개체 차이가 작은 동물을 생산하기 위한 방법 |
| KR20220060718A (ko) * | 2020-11-05 | 2022-05-12 | 한림대학교 산학협력단 | 지연성 뇌허혈 진단을 위한 dapk1 바이오마커 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR102088556B1 (ko) | 2020-03-12 |
| WO2019103476A1 (ko) | 2019-05-31 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Horvitz et al. | The genetics of programmed cell death in the nematode Caenorhabditis elegans | |
| Nakagawa et al. | Regulation of neurogenesis in adult mouse hippocampus by cAMP and the cAMP response element-binding protein | |
| Streisinger et al. | Production of clones of homozygous diploid zebra fish (Brachydanio rerio) | |
| Satokata et al. | Msx1 deficient mice exhibit cleft palate and abnormalities of craniofacial and tooth development | |
| CN100381570C (zh) | 滑膜细胞蛋白质 | |
| Arai et al. | Genomic constitution and atypical reproduction in polyploid and unisexual lineages of the Misgurnus loach, a teleost fish | |
| Ayton et al. | Truncation of the Mll gene in exon 5 by gene targeting leads to early preimplantation lethality of homozygous embryos | |
| Brewster et al. | Deletion of Dad1 in mice induces an apoptosis‐associated embryonic death | |
| Miller-Bertoglio et al. | Maternal and zygotic activity of the zebrafish ogon locus antagonizes BMP signaling | |
| KR20190060185A (ko) | 허혈성 뇌질환 저항성 동물 모델 및 이의 제조 방법 | |
| Tam et al. | Phenotypic characteristics of commonly used inbred mouse strains | |
| Mendonsa et al. | Genetic analysis of tissue interactions required for otic placode induction in the zebrafish | |
| Machado et al. | Teratogenic response to arsenite during neurulation: relative sensitivities of C57BL/6J and SWV/Fnn mice and impact of the splotch allele. | |
| Peterka et al. | Body weight in mouse embryos specifies staging of tooth development | |
| KR20160012735A (ko) | Dyrk1aa 유전자가 결실된 제브라피쉬 모델 및 이를 이용한 혈관 발생 결함 예방 및 치료제 스크리닝 방법 | |
| Amiot et al. | Mice heterozygous for a deletion of the tumor necrosis factor‐α and lymphotoxin‐α genes: biological importance of a nonlinear response of tumor necrosis factor‐α to gene dosage | |
| Johnson | Brachyphalangy, an allele of extra-toes in the mouse | |
| Coucouvanis et al. | Genetic approaches for studying programmed cell death during development of the laboratory mouse | |
| Wang et al. | Mice Lacking the Transcriptional Coactivator PGC-1α Exhibit Hyperactivity | |
| CN111485003A (zh) | 一种视网膜血管疾病模型的构建方法及其应用 | |
| EP1723235B1 (en) | Modified cells that co-express blimp1 and a reporter molecule and methods of using the same | |
| Becker et al. | The black-pearl gene of Drosophila defines a novel conserved protein family and is required for larval growth and survival | |
| KR102145290B1 (ko) | DAPK1 또는 Pin1을 포함하는 허혈성 뇌질환의 예방 또는 치료용 조성물 | |
| Ma et al. | bFGF promotes neurological recovery from neonatal hypoxic–ischemic encephalopathy by IL‐1β signaling pathway‐mediated axon regeneration | |
| Purdom et al. | Spontaneous mutation in Drosophila: Studied on the rate of mutation in mature and immature male germ cells |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right |