KR20190056045A - 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법 - Google Patents

음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20190056045A
KR20190056045A KR1020170153053A KR20170153053A KR20190056045A KR 20190056045 A KR20190056045 A KR 20190056045A KR 1020170153053 A KR1020170153053 A KR 1020170153053A KR 20170153053 A KR20170153053 A KR 20170153053A KR 20190056045 A KR20190056045 A KR 20190056045A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
acid
anionic drug
composition
group
freeze
Prior art date
Application number
KR1020170153053A
Other languages
English (en)
Other versions
KR102259513B1 (ko
Inventor
최지혜
손지연
이소진
김보미
남혜영
Original Assignee
주식회사 삼양바이오팜
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 주식회사 삼양바이오팜 filed Critical 주식회사 삼양바이오팜
Priority to KR1020170153053A priority Critical patent/KR102259513B1/ko
Priority to US16/764,643 priority patent/US20210077406A1/en
Priority to PCT/KR2018/013964 priority patent/WO2019098691A2/ko
Priority to JP2020526886A priority patent/JP2021503461A/ja
Publication of KR20190056045A publication Critical patent/KR20190056045A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR102259513B1 publication Critical patent/KR102259513B1/ko

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/111—General methods applicable to biologically active non-coding nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/541—Organic ions forming an ion pair complex with the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
    • A61K47/6929—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle
    • A61K47/6931—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer
    • A61K47/6935—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer the polymer being obtained otherwise than by reactions involving carbon to carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamides or polyglycerol
    • A61K47/6937—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer the polymer being obtained otherwise than by reactions involving carbon to carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamides or polyglycerol the polymer being PLGA, PLA or polyglycolic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6949—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K48/00—Medicinal preparations containing genetic material which is inserted into cells of the living body to treat genetic diseases; Gene therapy
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1617—Organic compounds, e.g. phospholipids, fats
    • A61K9/1623—Sugars or sugar alcohols, e.g. lactose; Derivatives thereof; Homeopathic globules
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1635—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1682—Processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/5123—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A61K9/5153—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1135—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against oncogenes or tumor suppressor genes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/10—Type of nucleic acid
    • C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2320/00—Applications; Uses
    • C12N2320/30—Special therapeutic applications
    • C12N2320/32—Special delivery means, e.g. tissue-specific

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Nanotechnology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Optics & Photonics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조 및 재건 시 우수한 안정성 및 안전성, 및 효능을 나타낼 수 있도록 하는, 동결건조를 위한 조성물 및 방법이 개시된다.

Description

음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법{Composition and process for freeze-drying of a pharmaceutical composition containing an anionic drug}
본 발명은 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 핵산 등의 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물 및 방법, 및 그의 동결건조물에 관한 것이다.
의약품은 건조제제로 완제품화되는 것이 보통이다. 이를 위하여 감압건조, 분무건조, 동결건조 등의 통상적인 건조 방법을 이용할 수 있다. 이 중 동결건조 방법은 물질을 동결시키고, 수증기(water vapor)의 부분압을 낮춤으로써 얼음을 직접 증기로 만드는 승화에 의해 건조하는 방법이다. 이와 같은 동결건조 시 보존제를 사용하는 경우가 많다.
'의약품 첨가제 가이드라인(2015년 12월)'에 따르면, 의약품 제제는 일반적으로 첨가제를 가하여 제제의 안정성, 안전성 또는 균질성을 유지하면서 품질과 경제성을 높이고자 한다. 즉 첨가제는 의약품을 제제화할 때 안정성, 안전성 및 품질 등의 유용성을 높이기 위하여 추가 사용하는 물질을 말하며, 제제화할 때 이들 첨가제를 사용하여 의약품의 품질을 조절하며 일반적으로 다량 사용하는 경우가 많으므로 특별히 안전성도 확립되어야 한다.
음이온성 약물, 특히 핵산은 유전자 치료에 있어서, 그 효능이 검증되었다. 이에 따라 안전하고 효율적인 약물 전달기술이 오랫동안 연구되어 왔으며, 다양한 전달체 및 전달기술이 개발되어 왔다. 최근에는 비바이러스성 전달체가 활발히 개발되는 중이며, 이러한 비바이러스성 전달체는 바이러스성 전달체에 비하여 효율성에서 뒤떨어지지만, 생체 내 안전성의 측면에서 부작용이 적고, 경제성 측면에서 생산 가격이 저렴하다는 장점을 가지고 있다. 특히, 한국 공개특허 제2017-0032858호는 유효성분으로서 음이온성 약물; 양이온성 화합물; 양친성 블록 공중합체; 및 폴리락트산염을 포함하며, 상기 음이온성 약물은 상기 양이온성 화합물과 정전기적 상호작용에 의해 복합체를 형성하고, 상기 복합체는 양친성 블록 공중합체 및 폴리락트산염이 형성하는 나노입자 구조 내부에 봉입되어 있는 것을 특징으로 하는, 음이온성 약물 전달용 조성물을 개시하고 있다.
상기한 바와 같이, 음이온성 약물의 생체 내, 생체 외로의 전달 효율, 치료 효과 검증 등에 대해서는 연구가 많이 이루어졌지만, 동결건조 보존제에 대한 연구는 이루어지지 않고 있다. 특히 핵산 종류의 음이온성 약물은 동결 혹은 동결건조 시 구조적인 변화를 나타낼 수 있고, 비바이러스성 전달체의 구조 변화를 야기할 수 있다.
이러한 배경하에서, 본 발명은 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조 및 재건 시 우수한 안정성 및 안전성, 및 우수한 효능을 나타낼 수 있도록 하는, 동결건조를 위한 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명의 다른 목적은 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조 및 재건 시 우수한 안정성 및 안전성, 및 우수한 효능을 나타낼 수 있도록 하는, 동결건조 방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조 및 재건 시 우수한 안정성 및 안전성, 및 우수한 효능을 나타낼 수 있는 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조물을 제공하는 것이다.
본 발명의 일 면은 유효성분으로서 음이온성 약물; 양이온성 화합물; 양친성 블록 공중합체; 및, 폴리락트산염을 포함하며, 상기 음이온성 약물은 상기 양이온성 화합물과 정전기적 상호작용에 의해 복합체를 형성하고, 상기 복합체는 양친성 블록 공중합체 및 폴리락트산염이 형성하는 나노입자 구조 내부에 봉입되어 있는 음이온성 약물 전달용 조성물, 및 동결건조 보존제로서 소비톨(sorbitol)을 포함하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 다른 면은 상기 조성물을 이용하여 동결건조를 수행하는 단계:를 포함하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조 방법에 관한 것이다.
본 발명의 또 다른 면은 상기 방법에 의해 동결건조된, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조물에 관한 것이다.
이하, 본 발명을 보다 상세히 설명한다.
본 발명자들은 본 출원인에 의해 출원된 한국 공개특허 제2017-0032858호에 따른 음이온성 약물 전달용 조성물에 다양한 동결건조 보존제를 첨가하여 동결건조 및 재건을 수행해본 결과, 소비톨을 사용한 경우 예기치 않게 우수한 안정성 및 안전성, 및 우수한 효능을 나타냄을 확인하였다. 즉, 소비톨 첨가 시 다른 보존제, 예를 들어, 트레할로스, 만니톨, 수크로스 또는 글루코스 첨가 시에 비해 동결건조 및 재건 시 낮은 미봉입 약물(예: siRNA) 함량, 낮은 약물(예: siRNA) 와해도, 낮은 독성 및 높은 효능을 동시에 나타낼 수 있음을 최초로 확인하였다.
따라서, 본 발명은 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조에 있어서 동결건조 보존제로서 소비톨을 사용하는 것을 특징으로 한다.
본 발명의 일 양태에서, 소비톨은 음이온성 약물 1 중량부 대비 1 내지 5,000 중량부로 사용하는 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는 1 내지 4,000 중량부, 보다 더 바람직하게는 5 내지 3,000 중량부, 가장 바람직하게는 5 내지 2,000 중량부로 사용할 수 있다. 상기 중량 범위에서 낮은 미봉입 약물 함량, 낮은 약물 와해도, 낮은 독성 및 높은 효능을 얻을 수 있기 때문이다.
음이온성 약물 전달용 조성물의 구성성분 중, 상기 음이온성 약물과 양이온성 화합물은, 양친성 블록 공중합체와 폴리락트산염에 의하여 형성된 나노입자 구조 내부에 봉입되고, 이러한 음이온성 약물 및 양이온성 화합물의 복합체가 봉입된 고분자 나노입자 전달체의 대략적인 구조를 도 1에 나타내었다. 도 1을 참조하면, 음이온성 약물은 양이온성 화합물과 정전기적 상호작용을 통해 서로 결합하여, 음이온성 약물과 양이온성 화합물 복합체를 형성한다. 형성된 음이온성 약물과 양이온성 화합물 복합체는, 양친성 블록 공중합체 및 폴리락트산염에 의해 형성되는 나노입자 구조 내에 봉입된다.
도 1에 나타낸 바와 같이, 양친성 블록 공중합체 및 폴리락트산염에 의해 형성되는 나노입자 구조체는 수성 환경에서 양친성 블록 공중합체의 친수성 부분이 나노입자의 외벽을 형성하고 양친성 블록 공중합체의 소수성 부분과 상기 양친성 블록 공중합체와 별도의 성분으로 함유된 폴리락트산염이 나노입자의 내벽을 형성하고, 그 형성된 나노입자의 내부에 음이온성 약물과 양이온성 화합물 복합체가 봉입된 구조이다.
상기 음이온성 약물과 양이온성 화합물 복합체는 상기 양친성 블록 공중합체 및 폴리락트산염에 의해 형성되는 나노입자 구조체 내에 봉입된 상태를 유지하여 혈중 또는 체액 내에서의 안정성이 향상된다. 일 실시예에서, 상기 나노입자의 입자 크기는, 10 내지 200 ㎚이며, 더욱 구체적으로는 10 내지 150 ㎚인 것이 좋다. 또한, 상기 나노입자 입자의 표준 전하는 -20 내지 20 mV이며, 더욱 구체적으로 -10 내지 10 mV인 것이 좋다. 상기 입자 크기 및 표준 전하는, 나노입자 구조의 안정성 및 구성성분들의 함량과 체내에서 음이온성 약물의 흡수도 및 약제학적 조성물로서 멸균의 편의성면에서 가장 바람직하다.
본 발명에 따른 조성물에 유효성분으로 포함되는 음이온성 약물은 수용액 중에서 분자 내에 음전하를 띄는 약리학적 활성을 가진 모든 물질을 포함하는 개념이다. 구체적인 일 양태로서, 상기 음이온성은, 카르복시기, 포스페이트기 및 설페이트기로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 작용기로부터 부여될 수 있다. 또한, 본 발명의 일 양태로서 음이온성 약물은 펩타이드, 단백질 또는 헤파린 등의 다중 음이온성 약물 또는 핵산일 수 있다.
상기 핵산은, 디옥시리보핵산, 리보핵산 또는 백본(backbone), 당 또는 염기가 화학적으로 변형되거나 말단이 수식된 폴리뉴클레오타이드 유도체 등의 핵산 약물일 수 있으며, 보다 구체적으로는 RNA, DNA, siRNA(short interfering RNA), 압타머(aptamer), 안티센스 ODN(antisense oligodeoxynucleotide), 안티센스 RNA(antisense RNA), 리보자임(ribozyme) 및 디엔에이자임(DNAzyme) 등으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상의 핵산일 수 있다. 나아가, 상기 핵산은 혈중 안정성을 증가시키거나 면역 반응을 약화시키는 등의 목적을 위해 백본(backbone), 당 또는 염기가 화학적으로 변형되거나 말단이 수식될 수 있다. 구체적으로, 핵산의 포스포다이에스테르(phosphodiester) 결합의 일부를 포스포로티오에이트(phosphorothioate) 또는 보라노포스페이트(boranophosphate) 결합으로 대체하거나, 일부 리보오스 염기의 2'-OH 위치에 메틸기, 메톡시에틸기, 불소 등의 다양한 작용기가 도입된 수식된 뉴클레오티드를 1종 이상 포함할 수 있다.
또한, 상기 핵산의 하나 이상의 말단은 콜레스테롤, 토코페롤 및 탄소수 10 내지 24개의 지방산으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상으로 수식될 수 있다. 예를 들어, siRNA의 경우 센스 및/또는 안티센스 가닥의 5' 말단, 또는 3' 말단, 또는 양 말단에 수식될 수 있으며, 바람직하게 센스 가닥의 말단에 수식될 수 있다.
상기 콜레스테롤, 토코페롤 및 탄소수 10 내지 24개의 지방산에는 콜레스테롤, 토코페롤 및 지방산의 각 유사체, 유도체, 및 대사체가 포함된다.
상기 siRNA는, 표적 유전자와 동일한 세포에 존재하는 경우에 siRNA의 서열에 상보적인 mRNA의 분해를 매개함으로써, 표적 유전자의 발현을 감소시키거나 억제할 수 있는 이중가닥 RNA(duplex RNA), 또는 단일가닥 RNA 내부에서 이중가닥의 형태를 띄는 단일가닥 RNA를 지칭한다. 이중가닥 사이의 결합은, 뉴클레오티드 간의 수소 결합을 통해 이루어지며, 이중가닥 내부의 모든 뉴클레오티드가 상보적으로 서로 결합해야 하는 것은 아니며, 상기 양 가닥은 분리되어 있거나(separate) 분리되어 있지 않을 수 있다. 일 양태로서, 상기 siRNA의 길이는 약 15 내지 60개의(이중 가닥 RNA의 한쪽 뉴클레오티드의 갯수, 즉, 염기쌍의 갯수를 의미하며, 단일 가닥 RNA인 경우에는 단일 가닥 RNA 내부의 이중 가닥의 길이를 의미한다) 뉴클레오티드이며, 구체적으로는, 약 15 내지 30개의 뉴클레오티드이고, 보다 구체적으로는 약 19 내지 25개의 뉴클레오티드인 siRNA를 포함한다.
일 양태로서, 이중가닥 siRNA는 3' 또는 5' 말단에 1-5 뉴클레오티드의 돌출부(overhang)를 한쪽 말단에, 또는 양쪽 말단에 가질 수 있다. 또 다른 예에서는 양 말단이 돌출부를 갖지 않는 블런트(blunt) 형태일 수 있다. 구체적으로는 미국특허공개 제2002-0086356호, 미국특허 제7,056,704호에 개시된 siRNA일 수 있다(상기 문헌은 본 명세서에 참조로서 포함된다).
또한, 상기 siRNA는 두 가닥의 길이가 동일한 대칭적인 구조를 갖거나, 한 가닥이 다른 가닥보다 짧은 비대칭적인 이중가닥 구조일 수 있다. 구체적으로, 19 내지 21 뉴클레오티드(nucleotide, nt)의 안티센스(antisense); 및 상기 안티센스에 상보적인 서열을 갖는 15 내지 19nt의 센스(sense);로 구성되는 이중가닥(double strand)의 siRNA 분자(small interfering RNA molecule)로서, 상기 siRNA는 안티센스의 5' 방향의 말단이 블런트 말단(blunt end)이고 안티센스의 3' 말단에 1-5 뉴클레오타이드 돌출부(overhang)를 갖는 비대칭 siRNA일 수 있다. 구체적으로 국제특허공개 제09/078685호에 개시된 siRNA일 수 있다.
본 발명에서, 음이온성 약물은, 전체 조성물의 중량을 기준으로, 0.001 내지 10 중량%, 구체적으로는 0.01 내지 8 중량%로 포함되는 것이 좋다. 상기 음이온성 약물의 함량이 0.001 중량% 미만이면 약물에 비하여 사용되는 전달체의 양이 너무 많아서 전달체에 의한 부작용이 있을 수 있고, 10 중량%를 초과하면, 나노입자의 크기가 너무 커져 나노입자의 안정성이 저하되고 필터 멸균시 손실율이 커질 우려가 있다.
구체적인 일 양태에서, 상기 양이온성 화합물은, 음이온성 약물과 정전기적 상호작용에 의해 결합되어 복합체를 형성하고, 상기 복합체는 양친성 블록 공중합체의 나노입자 구조 내부에 봉입된다. 따라서, 상기 양이온성 화합물은, 음이온성 약물과 정전기적 상호작용에 의해 복합체를 형성할 수 있는 모든 형태의 화합물을 포함하며, 예를 들어, 지질과 고분자 종류일 수 있다. 양이온성 지질은, N,N-디올레일-N,N-디메틸암모늄클로라이드(DODAC), N,N-디스테아릴-N,N-디메틸암모늄브로마이드(DDAB), N-(1-(2,3-디올레오일옥시)프로필-N,N,N-트리메틸암모늄클로라이드(DOTAP), N,N-디메틸-(2,3-디올레오일옥시)프로필아민(DODMA), N,N,N-트리메틸-(2,3-디올레오일옥시)프로필아민(DOTMA), 1,2-디아실-3-트리메틸암모늄-프로판(TAP), 1,2-디아실-3-디메틸암모늄-프로판(DAP), 3베타-[N-(N',N',N'-트리메틸아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(TC-콜레스테롤), 3베타-[N-(N',N'-디메틸아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(DC-콜레스테롤), 3베타-[N-(N'-모노메틸아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(MC-콜레스테롤), 3베타-[N-(아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(AC-콜레스테롤), 콜레스테릴옥시프로판-1-아민(COPA), N-(N'-아미노에탄)카바모일프로파노익 토코페롤(AC-토코페롤) 및 N-(N'-메틸아미노에탄)카바모일프로파노익 토코페롤(MC-토코페롤)로 구성된 군으로부터 선택된 하나 또는 둘 이상의 조합일 수 있다. 이러한 양이온성 지질을 사용하는 경우, 양이온성 지질로부터 유발되는 독성을 감소시키기 위하여 분자 내의 양이온 밀도가 높은 폴리양이온성 지질을 적게 사용하는 것이 바람직하고, 보다 구체적으로는 분자당 수용액 상에서 양이온을 나타낼 수 있는 작용기가 하나일 수 있다. 이에 따라, 보다 바람직한 일 양태에서, 상기 양이온성 지질은 3베타-[N-(N',N',N'-트리메틸아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(TC-콜레스테롤), 3베타[N-(N',N'- 디메틸아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(DC-콜레스테롤), 3베타[N-(N'- 모노메틸아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(MC-콜레스테롤), 3베타[N-(아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(AC-콜레스테롤), N-(1-(2,3-디올레오일옥시) 프로필-N,N,N-트리메틸암모늄클로라이드(DOTAP), N,N-디메틸-(2,3-디올레오일옥시)프로필아민(DODMA), 및 N,N,N-트리메틸-(2,3-디올레오일옥시)프로필아민(DOTMA)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 것일 수 있다. 한편, 양이온성 고분자는 키토산(chitosan), 글라이콜 키토산(glycol chitosan), 프로타민(protamine), 폴리라이신(polylysine), 폴리아르기닌(polyarginine), 폴리아미도아민(PAMAM), 폴리에틸렌이민(polyethylenimine), 덱스트란(dextran), 히알루론산(hyaluronic acid), 알부민(albumin), 고분자폴리에틸렌이민(PEI), 폴리아민 및 폴리비닐아민(PVAm)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하며, 바람직하게는 고분자폴리에틸렌이민(PEI), 폴리아민 및 폴리비닐아민(PVA)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 1종 이상의 것일 수 있다.
구체적인 일 양태에서, 양이온성 지질은 하기 화학식 7의 양이온성 지질일 수 있다:
[화학식 7]
Figure pat00001
상기 식에서,
n과 m은 각각 0 내지 12이되, 2 ≤ n + m ≤ 12이며, a와 b는 각각 1 내지 6이며, R1과 R2는 각각 독립적으로 탄소수 11 내지 25개의 포화 또는 불포화 탄화수소로 이루어진 군에서 선택된 것이다.
바람직하게는, n과 m은 독립적으로 1 내지 9이며, 2 ≤ n + m ≤ 10일 수 있다.
바람직하게는, a와 b가 2 내지 4일 수 있다.
바람직하게는, R1과 R2는, 각각 독립적으로, 라우릴(lauryl), 미리스틸(myristyl), 팔미틸(palmityl), 스테아릴(stearyl), 아라키딜(arachidyl), 베헨닐(behenyl), 리그노세릴(lignoceryl), 세로틸(cerotyl), 미리스트올레일(myristoleyl), 팔미트올레일(palmitoleyl), 사피에닐(sapienyl), 올레일(oleyl), 리놀레일(linoleyl), 아라키도닐(arachidonyl), 에이코사펜타에닐(eicosapentaenyl), 에루실(erucyl), 도코사헥사에닐(docosahexaenyl), 및 세로틸(cerotyl)로 이루어진 군에서 선택된 것일 수 있다.
양이온성 지질의 구체적인 예는 1,6-디올레오일트리에틸렌테트라마이드, 1,8-디리놀레오일테트라에틸렌펜타마이드, 1,4-디미리스톨레오일디에틸렌트리아마이드, 1,10-디스테아로일펜타에틸렌헥사마이드 및 1,10-디올레오일펜타에틸렌헥사마이드로 구성된 그룹으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.
본 발명에서 사용되는 양이온성 화합물은, 전체 조성물의 중량을 기준으로, 0.01 내지 50 중량%, 구체적으로는 0.1 내지 10 중량% 포함될 수 있다. 상기 양이온성 지질의 함량이 0.01 중량% 미만이면 음이온성 약물과 복합체를 형성할 수 있는 충분한 양이 되지 못하고, 50 중량%를 초과하면, 나노입자의 크기가 너무 커져 나노입자의 안정성이 저하되고 필터 멸균시 손실율이 커질 우려가 있다.
상기 양이온성 화합물과 음이온성 약물은, 정전기적 상호작용을 통해 결합하여, 복합체를 형성한다. 구체적인 일 양태로서, 상기 음이온성 약물(P)과 양이온성 화합물(N)의 전하량의 비율(N/P; 음이온성 약물의 음이온 전하에 대한 양이온성 화합물의 양이온 전하 비율)은, 0.1 내지 128이며, 구체적으로는 0.5 내지 64, 더 구체적으로는 1 내지 32이고, 보다 더 구체적으로는 1 내지 24, 가장 구체적으로는 6 내지 24인 것이 좋다. 상기 비율(N/P)이 0.1 미만인 경우에는 충분한 양의 음이온성 약물을 포함하는 복합체를 형성하기 어렵기 때문에, 0.1 이상이어야 충분한 양의 음이온 약물을 포함하는 복합체를 형성할 수 있어서 유리하다. 반면, 비율(N/P)이 128 초과시에는 독성을 유발할 우려가 있으므로, 128 이하로 하는 것이 좋다.
구체적인 일 양태에서, 상기 양친성 블록 공중합체는, 친수성 A 블록 및 소수성 B 블록을 포함하는 A-B 형 블록 공중합체일 수 있다. 상기 A-B 형 블록 공중합체는, 수용액 상에서, 소수성 B 블록이 코어(내벽)를 형성하고 친수성 A 블록이 쉘(외벽)을 형성하는 코어-쉘 타입의 고분자 나노입자를 형성한다.
이와 관련하여, 상기 친수성 A 블록은 폴리알킬렌글리콜, 폴리비닐알콜, 폴리비닐피롤리돈, 폴리아크릴아미드 및 그 유도체로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다. 보다 구체적으로, 친수성 A 블록은 모노메톡시폴리에틸렌클리콜, 모노아세톡시폴리에틸렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 폴리에틸렌과 프로필렌글리콜의 공중합체 및 폴리비닐피롤리돈으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다. 상기 친수성 A 블록은 수평균분자량이 200 내지 50,000 달톤, 보다 구체적으로는 1,000 내지 20,000 달톤, 보다 더 구체적으로는 1,000 내지 5,000 달톤인 것일 수 있다.
또한, 필요에 따라 친수성 A 블록의 말단에 특정 조직이나 세포에 도달할 수 있는 작용기, 리간드, 또는 세포내 전달을 촉진할 수 있는 작용기를 화학적으로 결합시켜 양친성 블록 공중합체와 폴리락트산염으로 형성된 고분자 나노입자 전달체의 체내 분포를 조절하거나 상기 나노입자 전달체가 세포 내로 전달되는 효율을 높일 수 있다. 상기 작용기나 리간드는 단당류, 다당류, 비타민, 펩타이드, 단백질 및 세포 표면 수용체에 대한 항체로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 작용기나 리간드는 아니사마이드(anisamide), 비타민 B9(엽산), 비타민 B12, 비타민A, 갈락토오스, 락토오스, 만노오스, 히알루론산, RGD 펩타이드, NGR 펩타이드, 트랜스페린, 트랜스페린 수용체에 대한 항체 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
상기 소수성 B 블록은, 생체적합성 생분해성 고분자로서, 일 실시예에서, 폴리에스테르, 폴리언하이드라이드, 폴리아미노산, 폴리오르소에스테르 및 폴리포스파진으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다. 보다 구체적으로는, 상기 소수성 B 블록은 폴리락타이드, 폴리글리콜라이드, 폴리카프로락톤, 폴리디옥산-2-온, 폴리락타이드와 글리콜라이드의 공중합체, 폴리락타이드와 폴리디옥산-2-온의 공중합체, 폴리락타이드와 폴리카프로락톤의 공중합체 및 폴리글리콜라이드와 폴리카프로락톤의 공중합체로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다. 또 다른 일 실시예에서, 상기 소수성 B 블록은 수평균분자량이 50 내지 50,000 달톤, 보다 구체적으로는 200 내지 20,000 달톤, 보다 더 구체적으로는 5,00 내지 5,000 달톤인 것일 수 있다. 또한, 소수성 블록의 소수성을 증가시켜 나노입자의 안정성을 향상시키기 위하여 토코페롤, 콜레스테롤, 또는 탄소수 10 내지 24개의 지방산을 소수성 블록 말단의 히드록시기에 화학적으로 결합시킬 수 있다.
상기 친수성 블록(A)과 소수성 블록(B)을 포함하는 양친성 블록 공중합체의 함량은, 조성물 전체 건조중량을 기준으로, 40 내지 99.98 중량%이며, 구체적으로는 50 내지 99.8 중량%, 더 구체적으로는 60 내지 90 중량%인 것이 좋다. 상기 양친성 블록 공중합체의 함량이 40 중량% 미만이면 나노입자의 크기가 너무 커져 나노입자의 안정성이 저하되고 필터 멸균시 손실율이 커질 우려가 있고, 함량이 99.98 중량%를 초과하면 함입할 수 있는 음이온성 약물의 함량이 너무 적어지게 된다.
또 다른 일실시예에서, 상기 양친성 블록 공중합체에 있어서, 친수성 블록(A)과 소수성 블록(B)의 조성비는, 공중합체 중량을 기준으로, 친수성 블록(A)이 40 내지 70 중량%, 구체적으로는 50 내지 60 중량% 범위일 수 있다. 친수성 블록(A)의 비율이 40 중량% 미만이면 고분자의 물에 대한 용해도가 낮아서 나노입자를 형성하기 어렵기 때문에, 공중합체가 나노입자를 형성하기에 충분한 물에 대한 용해도를 갖기 위하여 친수성 블록(A)의 비율이 40 중량% 이상인 것이 좋은 한편, 70 중량%를 초과하면 친수성이 너무 높아 고분자 나노입자의 안정성이 낮아져서 음이온성 약물/양이온성 지질 복합체의 가용화 조성물로 사용하기 어려우므로, 나노입자 안정성을 고려하여 친수성 블록(A)의 비율이 70 중량% 이하인 것이 좋다.
구체적인 일 양태에서, 상기 양친성 블록 공중합체는 수용액 상에서 음이온성 약물과 양이온성 지질 복합체를 나노입자 구조 내부에 봉입시키는데, 이 때 양친성 블록 공중합체의 중량(b) 대비 음이온성 약물 및 양이온성 지질 복합체의 중량(a) 비율[a/b X 100;(음이온성 약물 중량+양이온성 지질 중량)/양친성 블록 공중합체 중량 X 100]은, 0.001 내지 100 중량%, 구체적으로는 0.01 내지 50 중량%, 보다 구체적으로는 0.1 내지 20 중량%일 수 있다. 상기 중량 비율이, 0.001 중량% 미만인 경우에는 음이온성 약물 및 양이온성 지질 복합체의 함량이 지나치게 낮아져서 음이온성 약물이 효과적으로 작용할 수 있는 유효 함량을 충족시키기 어려우며, 반대로 100 중량% 초과시에는 양친성 블록 공중합체의 분자량과 음이온성 약물 및 지질 복합체의 양을 고려할 때 적절한 크기의 나노입자 구조를 형성하지 못하기 때문이다.
본 발명에 따른 조성물 중 나노입자 구조체는 폴리락트산염(PLANa)를 포함하는 것을 특징으로 한다. 상기 폴리락트산염은 나노입자의 코어(내벽)에 분포하여 코어의 소수성을 강화시켜 나노입자를 안정시킴과 동시에 체내에서 세망내피계(RES)를 효과적으로 회피하는 역할을 한다. 즉, 폴리락트산염의 카르복실산 음이온이 폴리락트산보다 효과적으로 양이온성 복합체와 결합하여 고분자 나노입자의 표면전위를 감소시켜 폴리락트산염을 포함하지 않는 고분자 나노입자에 비해 표면전위의 양성 전하가 감소하여 세망내피계에 의해 덜 포획되고, 이로 인하여 목적하는 부위(예컨대, 암세포, 염증세포 등)로의 전달 효율이 우수하다는 장점이 있다.
상기 양친성 블록 공중합체와 별도의 성분으로 나노입자 내벽 성분으로 포함되는 폴리락트산염은 수평균분자량이 500 내지 50,000 달톤, 구체적으로 1,000 내지 10,000 달톤인 것이 좋다. 분자량이 500 달톤 미만이면 소수성이 너무 낮아 나노입자의 코어(내벽)에 존재하기 어렵고, 분자량이 50,000 달톤을 초과하면 고분자 나노입자의 입자가 커지는 문제가 있다.
상기 폴리락트산염은 양친성 블록 공중합체 100 중량부에 대하여 1 내지 200 중량부, 구체적으로 1 내지 100 중량부, 더 구체적으로 10 내지 60 중량부로 사용될 수 있다. 폴리락트산염의 함량이 양친성 블록 공중합체 100 중량부 대비 200 중량부를 초과하면 나노입자의 크기가 증가하여, 멸균막을 사용한 여과가 어렵게 되고, 1 중량부 미만이면 목적하는 효과를 충분히 얻을 수 없다.
일 구체예에서, 음이온성 약물 1 중량부 대비 양친성 블록 공중합체를 10 내지 1,000 중량부, 폴리락트산염을 5 내지 500 중량부로 함유할 수 있다. 바람직하게는 양친성 블록 공중합체를 50 내지 800 중량부, 보다 바람직하게는 100 내지 500 중량부로 함유할 수 있다. 바람직하게는, 폴리락트산염을 5 내지 300 중량부, 보다 바람직하게는 10 내지 100 중량부로 함유할 수 있다.
한 구체예에서, 상기 폴리락트산염의 말단 중 카르복실산나트륨의 반대편의 말단은, 히드록시, 아세톡시, 벤조일옥시, 데카노일옥시, 팔미토일옥시 및 탄소수 1 내지 2개의 알콕시로 이루어진 그룹 중에서 선택된 하나로 치환될 수 있다.
바람직한 하나의 양태로서, 본 발명의 폴리락트산염은 하기 화학식 1 내지 6의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있다.
[화학식 1]
Figure pat00002
상기 식 1에서, A는 -COO-CHZ-이고; B는 -COO-CHY-, -COO-CH2CH2CH2CH2CH2- 또는 -COO-CH2CH2OCH2-이며; R은 수소원자, 또는 아세틸, 벤조일, 데카노일, 팔미토일, 메틸, 또는 에틸기이고; Z와 Y는 각각 수소원자, 또는 메틸 또는 페닐기이며; M은 Na, K, 또는 Li이고; n은 1 내지 30의 정수이며; m은 0 내지 20의 정수이다.
[화학식 2]
Figure pat00003
상기 식 2에서, X는 메틸기이고; Y'는 수소원자 또는 페닐기이며; p는 0 내지 25의 정수이고, q는 0 내지 25의 정수이되, 단 p+q는 5 내지 25의 정수이고; R은 수소원자, 또는 아세틸, 벤조일, 데카노일, 팔미토일, 메틸 또는 에틸기이며; M은 Na, K, 또는 Li이고; Z 는 수소 원자, 메틸 또는 페닐기이다.
[화학식 3]
Figure pat00004
상기 식 3에서, W-M'는
Figure pat00005
또는
Figure pat00006
이고; PAD는 D,L-폴리락트산, D-폴리락트산, 폴리만델릭산, D,L-락트산과 글리콜산의 공중합체, D,L-락트산과 만델릭산의 공중합체, D,L-락트산과 카프로락톤의 공중합체 및 D,L-락트산과 1,4-디옥산-2-온의 공중합체로 구성된 그룹으로부터 선택되는 것이며; R은 수소원자, 또는 아세틸, 벤조일, 데카노일, 팔미토일, 메틸 또는 에틸기이고; M은 독립적으로 Na, K, 또는 Li이다.
[화학식 4]
Figure pat00007
상기 식 4에서, S는
Figure pat00008
이고; L은 -NR1- 또는 -0-이며, 여기서 R1은 수소원자 또는 C1 - 10알킬이고; Q는 CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH2CH2CH2CH3, 또는 CH2C6H5이고; a는 0 내지 4의 정수이며; b는 1 내지 10의 정수이고; M은 Na, K, 또는 Li이며; PAD는 D,L-폴리락트산, D-폴리락트산, 폴리만델릭산, D,L-락트산과 글리콜산의 공중합체, D,L-락트산과 만델릭산의 공중합체, D,L-락트산과 카프로락톤의 공중합체, 및 D,L-락트산과 1,4-디옥산-2-온의 공중합체로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상이다.
[화학식 5]
Figure pat00009
또는
Figure pat00010
상기 식 5에서, R'는 -PAD-O-C(O)-CH2CH2-C(O)-OM이고, 여기서 PAD는 D,L-폴리락트산, D-폴리락트산, 폴리만델릭산, D,L-락트산과 글리콜산의 공중합체, D,L-락트산과 만델릭산의 공중합체, D,L-락트산과 카프로락톤의 공중합체, D,L-락트산과 1,4-디옥산-2-온의 공중합체로 구성된 그룹으로부터 선택되는 것이고, M은 Na, K, 또는 Li이며; a는 1 내지 4의 정수이다.
[화학식 6]
Figure pat00011
상기 식 6에서, X 및 X'은 독립적으로 수소, 탄소수가 1~10인 알킬 또는 탄소수가 6~20인 아릴이고; Y 및 Z는 독립적으로 Na, K, 또는 Li이며; m 및 n은 독립적으로 0 내지 95의 정수이되, 5 < m + n < 100이고; a 및 b는 독립적으로 1 내지 6의 정수이며; R은 -(CH2)k-, 탄소수가 2~10인 2가 알케닐(divalent alkenyl), 탄소수가 6~20인 2가 아릴(divalent aryl) 또는 이들의 조합이고, 여기서 k는 0 내지 10의 정수이다.
상기 폴리락트산염은 화학식 1 또는 화학식 2의 화합물인 것인 바람직하다.
일 구체예에서, 본 발명의 조성물은 음이온성 약물의 세포 내 전달 효율을 증가시키기 위하여 전체 조성물의 중량을 기준으로 0.01 내지 50 중량%, 구체적으로는 0.1 내지 10 중량%의 융합성 지질을 추가로 포함할 수 있다.
상기 융합성 지질은 음이온성 약물과 양이온성 지질의 복합체에 혼합시, 소수성 상호작용으로 결합하여 음이온성 약물, 양이온성 지질 및 융합성 지질의 복합체를 형성하고, 상기 융합성 지질을 포함하는 복합체는 양친성 블록 공중합체의 나노입자 구조 내부에 봉입된다. 일 구체예에서, 상기 융합성 지질은 인지질, 콜레스테롤, 및 토코페롤로 구성된 군으로부터 선택된 하나 또는 둘 이상의 조합일 수 있다.
구체적으로, 상기 인지질은 포스파티딜에탄올아민(phosphatidylethanolamin, PE), 포스파티딜콜린(phosphatidylcholine, PC) 및 포스파티딘산(phosphatidic acid)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다. 상기 포스파티딜에탄올아민(phosphatidylethanolamin, PE), 포스파티딜콜린(phosphatidylcholine, PC) 및 포스파티딘산은 하나 또는 2개의 C10-24 지방산과 결합된 형태일 수 있다. 상기 콜레스테롤 및 토코페롤에는 콜레스테롤 및 토코페롤의 각 유사체, 유도체, 및 대사체가 포함된다.
구체적으로는 융합성 지질은 디라우로일 포스파티딜에탄올아민(dilauroyl phosphatidylethanolamine), 디미리스토일 포스파티딜에탄올아민(dimyristoyl phosphatidylethanolamine), 디팔미토일 포스파티딜에탄올아민(dipalmitoyl phosphatidylethanolamine), 디스테아로일 포스파티딜에탄올아민(distearoyl phosphatidylethanolamine), 디올레오일 포스파티딜에탄올아민(dioleoyl phosphatidylethanolamine), 디리놀레오일 포스파티딜에탄올아민(dilinoleoyl phosphatidylethanolamine), 1-팔미토일-2-올레오일 포스파티딜에탄올아민(1-palmitoyl-2-oleoyl phosphatidylethanolamine), 1,2-디피타노일-3-sn-포스파티딜에탄올아민(1,2-diphytanoyl-3-sn-phosphatidylethanolamine), 디라우로일 포스파티딜콜린(dilauroyl phosphatidylcholine), 디미리스토일 포스파티딜콜린(dimyristoyl phosphatidylcholine), 디팔미토일 포스파티딜콜린(dipalmitoyl phosphatidylcholine), 디스테아로일 포스파티딜콜린(distearoyl phosphatidylcholine), 디올레오일 포스파티딜콜린(dioleoyl phosphatidylcholine), 디리놀레오일 포스파티딜콜린(dilinoleoyl phosphatidylcholine), 1-팔미토일-2-올레오일 포스파티딜콜린(1-palmitoyl-2-oleoyl phosphatidylcholine), 1,2-디피타노일-3-sn-포스파티딜콜린(1,2-diphytanoyl-3-sn-phosphatidylcholine), 디라우로일 포스파티딘산(dilauroyl phosphatidic acid), 디미리스토일 포스파티딘산(dimyristoyl phosphatidic acid), 디팔미토일 포스파티딘산(dipalmitoyl phosphatidic acid), 디스테아로일 포스파티딘산(distearoyl phosphatidic acid), 디올레오일 포스파티딘산(dioleoyl phosphatidic acid), 디리놀레오일 포스파티딘산(dilinoleoyl phosphatidic acid), 1-팔미토일-2-올레오일 포스파티딘산(1-palmitoyl-2-oleoyl phosphatidic acid), 1,2-디피타노일-3-sn-포스파티딘산(1,2-diphytanoyl-3-sn-phosphatidic acid), 콜레스테롤 및 토코페롤로 구성된 군으로부터 선택된 하나 또는 둘 이상의 조합일 수 있다.
바람직한 구체예에서, 상기 융합성 지질은 디올레오일 포스파티딜에탄올아민(dioleoyl phosphatidylethanolamine, DOPE), 디팔미토올레오일포스포콜린(1,2-dipalmitoleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine, DPPC), 디올레오일포스포콜린(1,2-dioleoyl-sn-glycero-3-phosphocholine, DOPC), 디팔미토올레오일포스포에탄올아민(1,2-dipalmitoleoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine, DPPE) 등으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있다.
구체적인 일 양태로서, 본 발명에 따른 양친성 블록 공중합체 및 폴리락트산염 나노입자 구조체에 봉입된 음이온 약물-양이온성 화합물 복합체 함유 조성물은, 혈관, 근육, 피하, 경구, 뼈, 경피 또는 국소 조직 등의 투여 경로를 통하여 투여될 수 있고, 이러한 투여 경로에 적합하게, 다양한 경구 또는 비경구 투여 제제로 제형화될 수 있다. 상기 경구 투여 제제로는 정제, 캡슐, 분체 제제, 액제 등, 비경구 투여 제제로는 점안제, 주사제 등 다양한 제제를 예시할 수 있는데, 바람직한 일 양태로서, 상기 조성물은 주사용 제제일 수 있다. 예를 들어, 본 발명에 따른 조성물의 동결건조물을 주사용 증류수, 0.9% 생리식염수 및 5% 덱스트로스 수용액 등으로 재건하여 주사용 제제 형태로 제조할 수 있다.
본 발명에 따르면, 음이온성 약물 전달용 조성물에 대해 우수한 안정성 및 안전성, 및 효능을 유지하도록 하는 동결건조 조성물 및 방법을 제공할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 음이온성 약물 및 양이온성 화합물의 복합체가 봉입된 고분자 나노입자 전달체의 개략적인 구조를 나타낸 도면이다.
이하, 본 발명을 하기 실시예에 의거하여 보다 자세하게 설명하나, 이들은 본 발명을 설명하기 위한 것일 뿐 이들에 의하여 본 발명의 범위가 어떤 식으로든 제한되는 것은 아니다.
[ 제조예 ] KRAS siRNA /1,6- 디올레오일 트리에틸렌테트라미드 ( dio - TETA )/mPEG-PLA-토코페롤/ PLANa /DOPE 함유 고분자 나노입자 제조
KRAS siRNA 5 ㎍은 증류수 94.52 ㎕에 녹이고, dio-TETA 94.52 ㎍은 94.52 ㎕의 20 mM 아세테이트 버퍼(pH 4.6)에 녹인 후 초음파 분쇄 상태에서 한 방울씩 섞어주었다. 이 혼합물을 동결건조시켜 분말 상태로 만들어 준 후 에틸아세테이트 10 ㎕로 분말을 녹여주었다. 여기에 PLANa 300 ㎍을 에틸아세테이트 15 ㎕에 녹인 용액, DOPE 104.2 ㎍을 에틸아세테이트 5.2 ㎕에 녹인 용액, mPEG-PLA-토코페롤 1000 ㎍을 에틸아세테이트 20 ㎕에 녹인 용액을 차례로 넣어준 후 섞어 주었다. 본 혼합액을 증류수 100 ㎕에 한 방울씩 가하면서 초음파 분쇄기를 이용하여 복합 유상액을 제조하였다. 제조한 복합 유상액을 1-구 둥근 플라스크에 넣고 증류농축장치(rotary evaporator)에서 감압 증류함으로써 에틸아세테이트를 선택적으로 제거하여 siRNA/1,6-디올레오일 트리에틸렌테트라아마이드(dio-TETA)/mPEG-PLA-토코페롤 /PLANA/DOPE 함유 고분자 나노입자를 제조하였다.
조성물 종류 조성비 siRNA Cationic lipid 고분자 1 고분자 2 Helper lipid
제조예 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤)/PLANa/DOPE 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍
[ 실시예 1-4] KRAS siRNA /1,6- 디올레오일 트리에틸렌테트라미드( dio -TETA)/mPEG-PLA-토코페롤/ PLANa /DOPE/ 소비톨 함유 고분자 나노입자 동결건조 제제 제조
제조예에서 제조한 고분자 나노입자의 농도를 siRNA 100 ng/㎕로 고정한 후 소비톨을 넣고 초저온냉동고에서 얼린 후 동결건조를 실시하였다. 동결건조 조건은 아래의 표 2에 나타낸 바와 같다.
단계 온도조건 진공도
( mTorr ) 		공정시간(분)
설정온도(℃) 변경조건
초기 냉각 -40 내림 대기압 90
Freezing -40 유지 대기압 240
Cold Trap -50 내림 대기압 20
1 Step -40 유지 200 60
2 Step -10 올림 200 240
3 Step -10 유지 200 360
4 Step +5 올림 200 120
5 Step +5 유지 150 1,200
6 Step +25 올림 150 120
7 Step +25 유지 150 240
합계 2,690
동결건조가 완료된 분말에 상온의 멸균증류수를 넣고 흔들어 녹임으로써 siRNA/dio-TETA/mPEG-PLA-토코페롤/DOPE/소비톨 함유 조성물을 제조하였다.
조성물 종류 조성비 siRNA Cationic lipid 고분자 1 고분자 2 Helper lipid 소비톨
실시예 1 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 0.25 ㎎
실시예 2 siRNA/dioTETA /mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 2.5 ㎎
실시예 3 siRNA/dioTETA /mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 5 ㎎
실시예 4 siRNA/dioTETA /mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 10 ㎎
[ 비교예 1-4] KRAS siRNA /1,6- 디올레오일 트리에틸렌테트라미드( dio -TETA)/mPEG-PLA-토코페롤/ PLANa /DOPE/ 트레할로스 함유 고분자 나노입자 동결건조 제제 제조
동결건조 보존제로 트레할로스를 포함하는 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/트레할로스 함유 고분자 나노입자를 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다.
조성물 종류 조성비 siRNA Cationic lipid 고분자 1 고분자 2 Helper lipid 트레할로스
비교예 1 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE /트레할로스 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 2.5 ㎎
비교예 2 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE /트레할로스 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 5 ㎎
비교예 3 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE /트레할로스 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 10 ㎎
[ 비교예 5] KRAS siRNA /1,6- 디올레오일 트리에틸렌테트라미드( dio -TETA)/mPEG-PLA-토코페롤 / PLANa /DOPE/ 만니톨 함유 고분자 나노입자 동결건조 제제 제조
동결건조 보존제로 만니톨을 포함하는 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/만니톨 함유 고분자 나노입자를 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다.
조성물 종류 조성비 siRNA Cationic lipid 고분자 1 고분자 2 Helper lipid 만니톨
비교예 4 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE /만니톨 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 2.5 ㎎
[ 비교예 6] KRAS siRNA /1,6- 디올레오일 트리에틸렌테트라미드( dio -TETA)/mPEG-PLA-토코페롤/ PLANa /DOPE/ 수크로스 함유 고분자 나노입자 동결건조 제제 제조
동결건조 보존제로 수크로스를 포함하는 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/수크로스 함유 고분자 나노입자를 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다.
조성물 종류 조성비 siRNA Cationic lipid 고분자 1 고분자 2 Helper lipid 수크로스
비교예 5 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE /수크로스 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 2.5 ㎎
[ 비교예 7] KRAS siRNA /1,6- 디올레오일 트리에틸렌테트라미드( dio -TETA)/mPEG-PLA-토코페롤/ PLANa /DOPE/ 글루코스 함유 고분자 나노입자 동결건조 제제 제조
동결건조 보존제로 글루코스를 포함하는 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤 /PLANa/DOPE/글루코스 함유 고분자 나노입자를 실시예 1과 동일한 방법으로 제조하였다.
조성물 종류 조성비 siRNA Cationic lipid 고분자 1 고분자 2 Helper lipid 글루코스
실시예 10 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/글루코스 5-18-1-0.3-1 5 ㎍ 94.5 ㎍ 1000 ㎍ 300 ㎍ 104.2 ㎍ 2.5 ㎎
[ 실험예 1] siRNA / dioTETA /mPEG- PLA -토코페롤/ PLANa /DOPE/동결건조 보존제 함유 고분자 나노입자의 사이즈 측정과 안정성 비교(헤파린 경쟁 분석법)
동결건조 보존제 종류를 달리한 고분자 나노입자의 사이즈를 확인하였다. 동적 광산란(DLS: dynamic light scattering) 방법을 이용하여 입자의 크기를 측정하였다. 구체적으로, He-Ne 레이져를 광원으로 사용하였으며, MALVERN사의 Zetasizer Nano ZS90 기기를 매뉴얼에 따라 작동하였다.
또한, 동결건조 보존제 종류에 따른 고분자 나노입자의 in vitro 안정성을 확인하기 위해 헤파린 경쟁분석법을 실시하였다. 제형 10 ㎕(siRNA 300 ng)에 헤파린 40 ㎍을 처리하여 10분간 상온에 반응시킨 후 전기영동을 통해 와해된 siRNA를 측량하였다. siRNA 와해도가 낮을수록 안정성이 우수한 제형이다. 더불어 제형 자체만을 전기영동하여 제형 내 미봉입된 siRNA 또한 측량하였다.
동결건조 보존제 종류를 달리한 실시예 2와 비교예 1, 4 내지 6의 미봉입 siRNA, 입자 크기, siRNA 와해도 결과를 아래의 표 8에 나타내었다.
조성물 종류 미봉입 siRNA 입자 크기 siRNA 와해도(%)
제조예 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE 수용액 제제 0% 38 ㎚ 5%
실시예 2 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 2.5 ㎎ 동결건조 제제 0% 46 ㎚ 13%
비교예 1 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/트레할로스 2.5 ㎎ 동결건조 제제 5% 23 ㎚ 8%
비교예 4 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/만니톨 2.5 ㎎ 동결건조 제제 18% 25 ㎚ 14%
비교예 5 siRNA /dioTETA /mPEG-PLA-토코페롤 /PLANa /DOPE /수크로스 2.5 ㎎ 동결건조 제제 0% 154 ㎚ 37%
비교예 6 siRNA /dioTETA /mPEG-PLA-토코페롤 /PLANa /DOPE /글루코스 2.5 ㎎ 동결건조 제제 0% 34 ㎚ 15%
표 8로부터 알 수 있는 바와 같이, 트레할로스나 만니톨을 사용한 경우 미봉입 siRNA 함량이 증가하고, 수크로스를 사용한 경우 siRNA 와해도가 높은 것으로 나타나, 트레할로스, 만니톨 및 수크로스는 적절한 동결건조 보존제가 아님을 확인할 수 있었다.
동결건조 보존제 중 소비톨과 트레할로스의 함량을 달리한 실시예 1 내지 4 및 비교예 1 내지 3의 분석결과를 아래 표 9에 나타내었다.
조성물 종류 미봉입 siRNA 입자 크기 siRNA 와해도(%)
제조예 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE 수용액 제제 0% 38 ㎚ 5%
실시예 1 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 0.25 ㎎ 동결건조 제제 0% 42 ㎚ 16%
실시예 2 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 2.5 ㎎ 동결건조 제제 0% 46 ㎚ 13%
실시예 3 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 5 ㎎ 동결건조 제제 0% 48 ㎚ 8%
실시예 4 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 10 ㎎ 동결건조 제제 0% 34 ㎚ 13%
비교예 1 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/트레할로스 2.5 ㎎ 동결건조 제제 5% 23 ㎚ 8%
비교예 2 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/트레할로스 5 ㎎ 동결건조 제제 25% 43 ㎚ 28%
비교예 3 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/트레할로스 10 ㎎ 동결건조 제제 14% 52 ㎚ 26%
표 9로부터 알 수 있는 바와 같이, 트레할로스를 사용한 경우 미봉입 siRNA 함량이 증가하고, 트레할로스 양이 증가할수록 siRNA 와해도도 증가하는 것으로 나타나, 트레할로스는 적절한 동결건조 보존제가 아님을 확인할 수 있었다.
[ 실험예 2] siRNA / dioTETA /mPEG- PLA -토코페롤/ PLANa /DOPE/동결건조 보존제 함유 고분자 나노입자의 세포 효능 및 독성 비교
제조예와 실시예 2에서 제조된 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/동결보존제 고분자 나노입자에 대해 폐암 세포주인 A549에서 siRNA의 전달효능을 mRNA 수준에서 확인하였다. 96웰 세포 배양판에 웰당 5000개의 세포를 분주하고 24시간 후 각 웰의 세포가 50~60% 정도 균일하게 성장한 것을 확인한 후, 웰 안에 배지를 제거하고 최종 부피의 10%의 혈청을 함유하는 새 배지를 90 ㎕씩 첨가하였다. 제조예와 실시예 2 내지 4와 비교예 1 및 6의 조성물을 400 nM, 200 nM, 100 nM, 50 nM, 5 nM, 0.5 nM, 0.05 nM의 농도로 siRNA가 함유되도록 상기의 세포 배양 배지에 각각 가하였다. 37 ℃의 5% CO2 배양기에서 48시간 동안 배양 후 배양액을 제거하고 cell lysis mixture 100 ㎕를 넣어 50 ℃에서 1시간 동안 반응시켜 주었다. 그 후 mRNA 발현 확인을 위해 Branched DNA assay(bDNA, Quantigene 2.0 Assay kit, Panomics, QS0009)을 이용하였고, 프로토콜에 따라 2.0 substrate를 넣고 상온에서 5분간 반응시킨 후 microplate fluorescence reader(Bio-Tek, Synergy HT)를 이용하여 형광 발현양을 측정하였다. 또한, 세포 내 독성 분석을 위해 Cell Titer-Glo luminescent cell viability assay(Promega, G7571)을 이용하였고 프로토콜에 따라 상온화시킨 cell plate에 분석샘플(100 ㎕)과 cell titer assay reagent(100 ㎕)를 넣고 30분간 반응시켜준 후 microplate fluorescence reader(Bio-Tek, Synergy HT)기를 이용하여 값을 측정하였다. 세포주 효능 독성 평가 결과는 표 10에 나타내었다.
조성물 LC50 IC50
제조예 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE 수용액 제제 138 32.3
실시예 2 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 2.5 ㎎ 동결건조 제제 262 22.1
실시예 3 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 5 ㎎ 동결건조 제제 290.7 11.2
실시예 4 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/소비톨 10 ㎎ 동결건조 제제 238.8 9.0
비교예 1 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/트레할로스 2.5 ㎎ 동결건조 제제 293.6 4.6
비교예 6 siRNA/dioTETA/mPEG-PLA-토코페롤/PLANa/DOPE/글루코스 2.5 ㎎ 동결건조 제제 179.9 6.3
표 10에서 명시된 바와 같이, 동결건조 전보다 후에서 LC50이 증가하고 IC50이 감소한 것으로 보아 독성은 감소되고 효능은 증가하는 경향을 보였다. LC50/IC50의 결과, 소비톨 2.5 ㎎ > 소비톨 5 ㎎ > 소비톨 10 ㎎ > 글루코스 2.5 ㎎ > 트레할로스 2.5 ㎎ 순서대로 우수한 효능을 보였다.

Claims (13)

  1. 유효성분으로서 음이온성 약물; 양이온성 화합물; 양친성 블록 공중합체; 및 하기 화학식 1 내지 6의 화합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 폴리락트산염을 포함하며, 상기 음이온성 약물은 상기 양이온성 화합물과 정전기적 상호작용에 의해 복합체를 형성하고, 상기 복합체는 양친성 블록 공중합체 및 폴리락트산염이 형성하는 나노입자 구조 내부에 봉입되어 있는 음이온성 약물 전달용 조성물, 및 동결건조 보존제로서 소비톨을 포함하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물:
    [화학식 1]
    Figure pat00012

    상기 식 1에서, A는 -COO-CHZ-이고; B는 -COO-CHY-, -COO-CH2CH2CH2CH2CH2- 또는 -COO-CH2CH2OCH2-이며; R은 수소원자, 또는 아세틸, 벤조일, 데카노일, 팔미토일, 메틸, 또는 에틸기이고; Z와 Y는 각각 수소원자, 또는 메틸 또는 페닐기이며; M은 Na, K, 또는 Li이고; n은 1 내지 30의 정수이며; m은 0 내지 20의 정수이다.
    [화학식 2]
    Figure pat00013

    상기 식 2에서, X는 메틸기이고; Y'는 수소원자 또는 페닐기이며; p는 0 내지 25의 정수이고, q는 0 내지 25의 정수이되, 단 p+q는 5 내지 25의 정수이고; R은 수소원자, 또는 아세틸, 벤조일, 데카노일, 팔미토일, 메틸 또는 에틸기이며; M은 Na, K, 또는 Li이고; Z 는 수소 원자, 메틸 또는 페닐기이다.
    [화학식 3]
    Figure pat00014

    상기 식 3에서, W-M'는
    Figure pat00015
    또는
    Figure pat00016
    이고; PAD는 D,L-폴리락트산, D-폴리락트산, 폴리만델릭산, D,L-락트산과 글리콜산의 공중합체, D,L-락트산과 만델릭산의 공중합체, D,L-락트산과 카프로락톤의 공중합체 및 D,L-락트산과 1,4-디옥산-2-온의 공중합체로 구성된 그룹으로부터 선택되는 것이며; R은 수소원자, 또는 아세틸, 벤조일, 데카노일, 팔미토일, 메틸 또는 에틸기이고; M은 독립적으로 Na, K, 또는 Li이다.
    [화학식 4]
    Figure pat00017

    상기 식 4에서, S는
    Figure pat00018
    이고; L은 -NR1- 또는 -0-이며, 여기서 R1은 수소원자 또는 C1 - 10알킬이고; Q는 CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, CH2CH2CH2CH3, 또는 CH2C6H5이고; a는 0 내지 4의 정수이며; b는 1 내지 10의 정수이고; M은 Na, K, 또는 Li이며; PAD는 D,L-폴리락트산, D-폴리락트산, 폴리만델릭산, D,L-락트산과 글리콜산의 공중합체, D,L-락트산과 만델릭산의 공중합체, D,L-락트산과 카프로락톤의 공중합체, 및 D,L-락트산과 1,4-디옥산-2-온의 공중합체로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상이다.
    [화학식 5]
    Figure pat00019
    또는
    Figure pat00020

    상기 식 5에서, R'는 -PAD-O-C(O)-CH2CH2-C(O)-OM이고, 여기서 PAD는 D,L-폴리락트산, D-폴리락트산, 폴리만델릭산, D,L-락트산과 글리콜산의 공중합체, D,L-락트산과 만델릭산의 공중합체, D,L-락트산과 카프로락톤의 공중합체, D,L-락트산과 1,4-디옥산-2-온의 공중합체로 구성된 그룹으로부터 선택되는 것이고, M은 Na, K, 또는 Li이며; a는 1 내지 4의 정수이다.
    [화학식 6]
    Figure pat00021

    상기 식 6에서, X 및 X'은 독립적으로 수소, 탄소수가 1~10인 알킬 또는 탄소수가 6~20인 아릴이고; Y 및 Z는 독립적으로 Na, K, 또는 Li이며; m 및 n은 독립적으로 0 내지 95의 정수이되, 5 < m + n < 100이고; a 및 b는 독립적으로 1 내지 6의 정수이며; R은 -(CH2)k-, 탄소수가 2~10인 2가 알케닐(divalent alkenyl), 탄소수가 6~20인 2가 아릴(divalent aryl) 또는 이들의 조합이고, 여기서 k는 0 내지 10의 정수이다.
  2. 제1항에 있어서, 음이온성 약물 100 중량부 대비 소비톨을 1 ~ 5,000 중량부로 포함하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물.
  3. 제1항에 있어서, 상기 음이온성 약물은 핵산인 것을 특징으로 하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물.
  4. 제1항에 있어서, 상기 양이온성 화합물은 양이온성 지질 및 양이온성 고분자로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 양이온성 지질은 N,N-디올레일-N,N-디메틸암모늄클로라이드(DODAC), N,N-디스테아릴-N,N-디메틸암모늄브로마이드(DDAB), N-(1-(2,3-디올레오일옥시)프로필-N,N,N-트리메틸암모늄클로라이드(DOTAP), N,N-디메틸-(2,3-디올레오일옥시)프로필아민(DODMA), 1,2-디아실-3-트리메틸암모늄-프로판(TAP), 1,2-디아실-3-디메틸암모늄-프로판(DAP), 3베타-[N-(N',N',N'-트리메틸아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(TC 콜레스테롤), 3베타[N-(N',N'-디메틸아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(DC-콜레스테롤), 3베타[N-(N'-모노메틸아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(MC-콜레스테롤), 3베타[N-(아미노에탄)카바모일]콜레스테롤(AC-콜레스테롤), 콜레스테릴옥시프로판-1-아민(COPA), N-(N'-아미노에탄)카바모일프로파노익 토코페롤(AC-토코페롤) 및 N-(N'-메틸아미노에탄)카바모일프로파노익 토코페롤(MC-토코페롤)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물.
  6. 제4항에 있어서, 상기 양이온성 지질은 하기 화학식 7의 양이온성 지질인, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물:
    [화학식 7]
    Figure pat00022

    상기 식에서, n과 m은 각각 0 내지 12이되, 2 ≤ n + m ≤ 12이며, a와 b는 각각 1 내지 6이며, R1과 R2는 각각 독립적으로 탄소수 11 내지 25개의 포화 또는 불포화 탄화수소로 이루어진 군에서 선택된 것이다.
  7. 제6항에 있어서, R1과 R2는, 각각 독립적으로, 라우릴(lauryl), 미리스틸(myristyl), 팔미틸(palmityl), 스테아릴(stearyl), 아라키딜(arachidyl), 베헨닐(behenyl), 리그노세릴(lignoceryl), 세로틸(cerotyl), 미리스트올레일(myristoleyl), 팔미트올레일(palmitoleyl), 사피에닐(sapienyl), 올레일(oleyl), 리놀레일(linoleyl), 아라키도닐(arachidonyl), 에이코사펜타에닐(eicosapentaenyl), 에루실(erucyl), 도코사헥사에닐(docosahexaenyl), 및 세로틸(cerotyl)로 이루어진 군에서 선택된 것인, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물.
  8. 제1항에 있어서, 상기 양친성 블록 공중합체는 친수성 A 블록과 소수성 B 블록으로 구성되는 A-B 형 이중 블록 공중합체이며, 상기 친수성 A 블록은 폴리알킬렌글리콜, 폴리비닐알콜, 폴리비닐피롤리돈, 폴리아크릴아미드 및 그 유도체로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상이며, 상기 소수성 B 블록은 폴리에스테르, 폴리언하이드라이드, 폴리아미노산, 폴리오르소에스테르 및 폴리포스파진으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물.
  9. 제8항에 있어서, 상기 소수성 B 블록의 말단 히드록시기는 콜레스테롤, 토코페롤, 및 탄소수 10 내지 24개의 지방산으로 구성된 군으로부터 선택되는 하나 이상으로 수식된 것을 특징으로 하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물.
  10. 제1항에 있어서, 융합성 지질(fusogenic lipid)을 추가로 포함하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물.
  11. 제10항에 있어서, 상기 융합성 지질은 디라우로일 포스파티딜에탄올아민(dilauroyl phosphatidylethanolamine), 디미리스토일 포스파티딜에탄올아민(dimyristoyl phosphatidylethanolamine), 디팔미토일 포스파티딜에탄올아민(dipalmitoyl phosphatidylethanolamine), 디스테아로일 포스파티딜에탄올아민(distearoyl phosphatidylethanolamine), 디올레오일 포스파티딜에탄올아민(dioleoyl phosphatidylethanolamine), 디리놀레오일 포스파티딜에탄올아민(dilinoleoyl phosphatidylethanolamine), 1-팔미토일-2-올레오일 포스파티딜에탄올아민(1-palmitoyl-2-oleoyl phosphatidylethanolamine), 1,2-디피타노일-3-sn-포스파티딜에탄올아민(1,2-diphytanoyl-3-sn-phosphatidylethanolamine), 디라우로일 포스파티딜콜린(dilauroyl phosphatidylcholine), 디미리스토일 포스파티딜콜린(dimyristoyl phosphatidylcholine), 디팔미토일 포스파티딜콜린(dipalmitoyl phosphatidylcholine), 디스테아로일 포스파티딜콜린(distearoyl phosphatidylcholine), 디올레오일 포스파티딜콜린(dioleoyl phosphatidylcholine), 디리놀레오일 포스파티딜콜린(dilinoleoyl phosphatidylcholine), 1-팔미토일-2-올레오일 포스파티딜콜린(1-palmitoyl-2-oleoyl phosphatidylcholine), 1,2-디피타노일-3-sn-포스파티딜콜린(1,2-diphytanoyl-3-sn-phosphatidylcholine), 디라우로일 포스파티딘산(dilauroyl phosphatidic acid), 디미리스토일 포스파티딘산(dimyristoyl phosphatidic acid), 디팔미토일 포스파티딘산(dipalmitoyl phosphatidic acid), 디스테아로일 포스파티딘산(distearoyl phosphatidic acid), 디올레오일 포스파티딘산(dioleoyl phosphatidic acid), 디리놀레오일 포스파티딘산(dilinoleoyl phosphatidic acid), 1-팔미토일-2-올레오일 포스파티딘산(1-palmitoyl-2-oleoyl phosphatidic acid), 1,2-디피타노일-3-sn-포스파티딘산(1,2-diphytanoyl-3-sn-phosphatidic acid), 콜레스테롤, 및 토코페롤로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조를 위한 조성물.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 이용하여 동결건조를 수행하는 단계:
    를 포함하는, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조 방법.
  13. 제12항에 따른 방법에 의해 동결건조된, 음이온성 약물 전달용 조성물의 동결건조물.
KR1020170153053A 2017-11-16 2017-11-16 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법 KR102259513B1 (ko)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170153053A KR102259513B1 (ko) 2017-11-16 2017-11-16 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법
US16/764,643 US20210077406A1 (en) 2017-11-16 2018-11-15 Composition and method for freeze-drying pharmaceutical composition containing anionic drug
PCT/KR2018/013964 WO2019098691A2 (ko) 2017-11-16 2018-11-15 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법
JP2020526886A JP2021503461A (ja) 2017-11-16 2018-11-15 アニオン性薬物含有医薬組成物の凍結乾燥のための組成物及び方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020170153053A KR102259513B1 (ko) 2017-11-16 2017-11-16 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20190056045A true KR20190056045A (ko) 2019-05-24
KR102259513B1 KR102259513B1 (ko) 2021-06-02

Family

ID=66537806

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020170153053A KR102259513B1 (ko) 2017-11-16 2017-11-16 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20210077406A1 (ko)
JP (1) JP2021503461A (ko)
KR (1) KR102259513B1 (ko)
WO (1) WO2019098691A2 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022231375A1 (ko) * 2021-04-30 2022-11-03 주식회사 삼양홀딩스 양친성 고분자를 함유하지 않는 나노입자를 포함하는 약물전달용 조성물

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20120108842A (ko) * 2011-03-25 2012-10-05 서울대학교산학협력단 폴리소르비톨계 삼투압적 활성 전달체 및 이를 이용한 유전자 치료
KR20160090202A (ko) * 2015-01-21 2016-07-29 주식회사 디알나노 약물 및 ｓｉＲＮＡ의 공동―운반용 나노복합체 및 이의 용도
KR20160096971A (ko) * 2015-02-06 2016-08-17 포항공과대학교 산학협력단 세포내 전달능이 증진된 siRNA 접합체
KR20170032858A (ko) * 2015-09-15 2017-03-23 주식회사 삼양바이오팜 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물 및 그 제조방법

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20080260850A1 (en) * 2004-05-06 2008-10-23 Samyang Corporation Delivery System For Bioactive Agents on the Basis of a Polymeric Drug Carrier Comprising an Amphiphilic Block Polymer and a Polylacticacid Derivative
NZ593735A (en) * 2008-12-26 2013-08-30 Samyang Biopharmaceuticals Preparation method of polymeric micellar nanoparticles composition containing a poorly water-soluble drug
KR101296326B1 (ko) * 2009-12-30 2013-08-14 주식회사 삼양바이오팜 폴리락트산을 포함하는 음이온성 약물 전달용 조성물 및 그 제조 방법
AU2011353233B2 (en) * 2010-12-30 2016-02-11 Samyang Holdings Corporation Carrier for negatively charged drugs comprising a cationic lipid and a preparation method thereof
KR101801566B1 (ko) * 2014-12-30 2017-11-28 주식회사 삼양바이오팜 고분자 나노입자 동결건조물 및 그 제조방법
WO2017048018A1 (ko) * 2015-09-15 2017-03-23 주식회사 삼양바이오팜 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물 및 그 제조방법
WO2017105138A1 (ko) * 2015-12-18 2017-06-22 주식회사 삼양바이오팜 음이온성 약물을 함유하는 고분자 미셀의 제조방법

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20120108842A (ko) * 2011-03-25 2012-10-05 서울대학교산학협력단 폴리소르비톨계 삼투압적 활성 전달체 및 이를 이용한 유전자 치료
KR20160090202A (ko) * 2015-01-21 2016-07-29 주식회사 디알나노 약물 및 ｓｉＲＮＡ의 공동―운반용 나노복합체 및 이의 용도
KR20160096971A (ko) * 2015-02-06 2016-08-17 포항공과대학교 산학협력단 세포내 전달능이 증진된 siRNA 접합체
KR20170032858A (ko) * 2015-09-15 2017-03-23 주식회사 삼양바이오팜 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물 및 그 제조방법

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022231375A1 (ko) * 2021-04-30 2022-11-03 주식회사 삼양홀딩스 양친성 고분자를 함유하지 않는 나노입자를 포함하는 약물전달용 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
WO2019098691A9 (ko) 2019-08-29
WO2019098691A2 (ko) 2019-05-23
US20210077406A1 (en) 2021-03-18
KR102259513B1 (ko) 2021-06-02
JP2021503461A (ja) 2021-02-12
WO2019098691A3 (ko) 2019-07-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR101948839B1 (ko) 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물 및 그 제조방법
KR101870316B1 (ko) 음이온성 약물을 함유하는 고분자 미셀의 제조방법
KR101209265B1 (ko) 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물 및 그 제조방법
KR101296326B1 (ko) 폴리락트산을 포함하는 음이온성 약물 전달용 조성물 및 그 제조 방법
KR20190127277A (ko) mRNA 전달용 고분자 나노입자 조성물 및 그 제조방법
KR102650691B1 (ko) 폴리락트산염을 포함하는 약물전달용 나노입자 조성물 제조용 키트
WO2017048018A1 (ko) 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물 및 그 제조방법
KR102259513B1 (ko) 음이온성 약물 함유 약제학적 조성물의 동결건조 조성물 및 방법
KR101949507B1 (ko) Kras를 표적으로 하는 핵산 함유 약제학적 조성물 및 그 제조방법
KR101916941B1 (ko) 플라스미드 디엔에이 전달용 고분자 나노입자 조성물 및 그의 제조방법
KR20190053429A (ko) 음이온성 약물 전달용 지질 나노입자의 동결건조 조성물 및 방법
EP4331576A1 (en) Composition for drug delivery comprising nanoparticles not containing amphiphilic polymer

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
N231 Notification of change of applicant
GRNT Written decision to grant