KR20190037094A - Skin external composition for promoting skin keratin turnover - Google Patents

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신진섭
김예원
송재하
이은정
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Abstract

The present invention relates to a composition for external application for skin, which comprises polypeptides derived from Jeju green soybean (scientific name: Glycine max, generic name: soybean, cultivar name: Pureunkong) and sodium lactate as an active ingredient. The composition is excellent in promoting skin keratin turnover and also has an effect of reducing the amount of skin keratin and improving skin texture, skin tone, skin transparency and application uniformity of make-up cosmetics.

Description

피부 각질 턴오버 촉진 효과가 우수한 피부 외용제 조성물{Skin external composition for promoting skin keratin turnover}(Skin external composition for promoting skin keratin turnover)

본 발명은 제주푸른콩(학명: Glycine max, 일반명: soybean, 품종명: Pureunkong), 더 정확하게는 제주푸른콩 발효물 유래 폴리펩타이드(polypeptide)와 소듐 락테이트(sodium lactate)를 함유함으로써 피부 각질 턴오버 촉진 효과가 우수하며, 또한 피부 각질량 감소 효과, 피부결, 피부톤, 투명도 및 메이크업 균일도 개선 효과가 우수한 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a method for promoting keratinocyte turnover by containing a polypeptide derived from Jeju pea fermented product and sodium lactate, more precisely, a Jeju peach ( Glycine max , generic name: Pureunkong) The present invention also relates to a composition for external application for skin, which is excellent in the effect of reducing skin mass, skin texture, skin tone, transparency and make-up uniformity.

피부의 각질층은 외부와 직접 접촉하는 가장 바깥 층으로 외부 위험 요소로부터 피부와 신체를 보호한다. 각질층은 케라틴(keratin)이라고 불리는 단백질이 50%를 차지하며, 나머지는 지방 20%, 수용성 물질 23% 및 수분 7%로 이루어져 있다. 피부세포는 계속 생성되어 기존 피부세포들을 점차 각질층으로 밀어 올리게 되는데, 이때 각질층에 도착한 세포들은 납작하고 편평한 죽은 세포들로서 이른바 '각질'이라고도 부른다. 피부에서는 하루에도 수백만 개의 죽은 각질세포가 떨어져 나가고 새 각질세포로 교체되는 작용이 일어난다. The stratum corneum of the skin is the outermost layer in direct contact with the outside, protecting the skin and the body from external hazards. The stratum corneum accounts for 50% of the protein called keratin, and the rest is composed of 20% fat, 23% water-soluble material and 7% moisture. Skin cells continue to be produced, pushing existing skin cells to the stratum corneum gradually, where the cells reaching the stratum corneum are flat and flat dead cells, also called 'keratin'. In the skin, millions of dead dead keratin cells fall apart and replaced with new keratinocytes.

이처럼 표피에서 새로운 세포층이 위치 변화하는 것을 턴오버(turnover)라고 한다. 부위나 연령에 따라 다르지만 정상피부에서 이 표피의 턴오버는 약 4주간 소요된다. 이러한 각질층이 정상적으로 박리되지 않고 피부표면에 남아 있게 되면 각질층은 두꺼워지고 얼굴빛은 칙칙하고 어두워진다. 또한 피부표면이나 모발의 모낭에 남아 있는 불순물은 산소나 미생물에 의해 산화되거나 분해되어 염증과 같은 피부 트러블을 일으키기도 한다.This change in position of the new cell layer in the epidermis is called turnover. Depending on area and age, it takes about 4 weeks for this skin to turn over in normal skin. If these stratum corneum remain on the surface of the skin without peeling normally, the stratum corneum becomes thicker and the face light becomes dark and dark. In addition, impurities remaining on the surface of the skin or hair follicles may be oxidized or decomposed by oxygen or microorganisms, causing skin troubles such as inflammation.

알파하이드록시산(AHA; Alpha Hydroxy Acids)은 대표적인 화학적 각질제거 성분으로, 산의 작용으로 각질층에서 각질 사이의 연결고리를 제거하는 데 도움을 주고, 각질을 부드럽게 녹이는 효과를 나타낸다. 구체적으로 AHA에 해당하는 성분들은 글리콜산(glycolic acid), 젖산(lactic acid), 말산(malic acid), 구연산(citric acid), 주석산(tartaric acid) 등이 있으며, 그 중에서도 젖산(lactic acid)은 천연보습인자(NMF; Natural Moisturizing Factor)로서 화장품에 이용되고 있다.Alpha Hydroxy Acids (AHA) is a typical chemical exfoliating ingredient, which helps remove the connective ring between the stratum corneum and the stratum corneum by the action of acid, and has the effect of gently dissolving keratin. Particularly, the components corresponding to AHA are glycolic acid, lactic acid, malic acid, citric acid, tartaric acid and the like. Among them, lactic acid It is used as a natural moisturizing factor (NMF) in cosmetics.

제주푸른콩(학명: Glycine max, 일반명: soybean, 품종명: Pureunkong)은 제주에서는 '푸린독새기콩'으로 불리며, 이는 푸른 달걀 모양 콩이라는 뜻이다. 또한 장을 담글 때 사용하여 '장콩'이라고도 부른다. 제주푸른콩은 제주도 남쪽지역 일부에서만 생산되는 토종자원으로, 종자 보존이 어려워 멸종위기에 있다. 일반 콩에 비해 키가 크게 자라 바람에 취약하며 재배 기간이 긴 편이고, 제주가 아닌 육지에 심을 경우 품질과 성분이 떨어질 수 있다. 제주푸른콩에는 이소플라본이 일반 콩에 비해 월등히 많이 함유되어 있으며, 제주푸른콩으로 담근 전통 된장은 시중에 파는 개량된장에 비해 자연으로부터 발생한 여러 복합균, 곰팡이, 효소가 작용하여 혈전용해능력, 항암효과 등 각종 효능이 뛰어난 것으로 알려져 있다.Jeju peach ( Glycine max , generic name: Pureunkong) is called "purin poisonous bean" in Jeju, which means blue egg-shaped bean. It is also called 'Jangkong' when used to soak the cabbage. Jeju is a native resource produced only in the southern part of Jeju Island. It is difficult to preserve the seeds and it is in danger of extinction. It grows taller than general beans and is vulnerable to winds. It has a longer growing period. If it is planted on land rather than Jeju, its quality and composition may be lowered. Jeju peanut contains much more isoflavone than regular beans. Traditional miso sauce, which is soaked with Jeju pea, has many different fungi, fungi and enzymes that are produced from nature compared to the modified soybean paste that is sold in the market. It is known to have excellent efficacy.

본 발명자들은 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드가 피부세포에서 콜라겐 유전자 발현을 촉진하고 세포 재생에도 효과가 있음을 연구 및 실험을 통해 알게 되었다. 또한 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드에 천연보습인자로서 보습제 역할을 하는 소듐 락테이트를 병용하면, 우수한 피부 각질 턴오버 촉진 효과를 나타낼 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.The present inventors have found through studies and experiments that a polypeptide derived from Jeju pea kee promotes collagen gene expression in skin cells and has an effect on cell regeneration. It has also been found that the use of sodium lactate as a moisturizing agent as a natural moisturizing factor can exert an excellent skin horny turnover promoting effect on the polypeptide derived from the Jeolla ginkgo in order to complete the present invention.

1. 인터넷 문서 "제주 푸른콩을 아시나요"(인터넷 url; https://farmer-story.kakao.com/farmer-story/pureunbeans) 1. Internet document "Do you know Jeju Peak" (internet url; https://farmer-story.kakao.com/farmer-story/pureunbeans) 2. 국내산 및 제초제 내성 콩의 단백질 조성 분석(Chun Hua Wei et al., "Protein Composition of Domestic and Glyphosate-Tolerant Soybean", Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition v.35 no.4, 2006, pp.470 - 475) 2. Analysis of Protein Composition of Domestic and Herbicide Resistant Soybean (Chun Hua Wei et al., "Protein Composition of Domestic and Glyphosate-Tolerant Soybean", Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition v.35 no.4, 2006, pp.470 - 475)

본 발명에서는 콩 유래 펩타이드와 소듐 락테이트로부터 종래에 알려진 각각의 효과인 탄력 증진이나 보습 효과 등을 얻는 데 그치지 않고, 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드 및 소듐 락테이트 두 성분을 병용함으로써 피부 각질 턴오버 촉진 효과가 우수한 피부 외용제 조성물을 제공하고자 한다. 또한 각질량 감소 효과, 피부결, 피부톤, 투명도, 및 메이크업 균일도 개선 효과가 우수한 피부 외용제 조성물을 제공하고자 한다. 본 발명은 또한 피부 외용제 조성물의 제조에 있어서, 제주푸른콩, 더 정확하게는 제주푸른콩 발효물 유래 폴리펩타이드 및 소듐 락테이트의 혼합물의 용도, 더 구체적으로는 피부 각질 턴오버 촉진 및/또는 피부결, 피부톤, 투명도, 및 메이크업 균일도 중 적어도 어느 하나의 개선을 위한 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드 및 소듐 락테이트의 혼합물의 용도를 제공하고자 한다.In the present invention, in addition to obtaining the conventionally known effects of the soybean-derived peptides and sodium lactate, which are effects of improving the elasticity and moisturizing effect, the two components of Jeju peanut-derived polypeptide and sodium lactate are used together to promote the skin horny turnover To provide an excellent composition for skin external application. It is also intended to provide a composition for external application for skin which is excellent in effect of reducing mass, skin texture, skin tone, transparency, and make-up uniformity. The present invention also relates to the use of a mixture of Jeju peanut, more precisely a peptide derived from Jeju peanut fermentation product and sodium lactate, more particularly a skin corneal turnover promoting and / or skin texture, , Transparency, and make-up uniformity of a mixture of Jeju pea derived polypeptides and sodium lactate.

본 발명은 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드 및 소듐 락테이트를 특정 비율로 함유하여, 피부 각질 턴오버 촉진 효과가 우수하고, 또한 피부 각질량 감소 효과, 피부결, 피부톤, 투명도 및 메이크업 균일도 개선 효과가 우수한 피부 외용제 조성물을 제공한다. 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드로는 제주푸른콩을 원료로 하여 고초균 액상 발효와 초미세 여과 공정을 거쳐 제조한 저분자량 펩타이드를 사용한다.The present invention relates to a skin care composition which contains Jeju peanut derived polypeptide and sodium lactate at a specific ratio and which is excellent in accelerating skin corneal turnover effect and having skin angle mass reduction effect, skin texture, skin tone, transparency and makeup uniformity improvement effect Thereby providing an external application composition. A low molecular weight peptide prepared by fermentation of Bacillus subtilis in liquid fermentation and ultrafiltration process is used as a polypeptide derived from Jeolla peat.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 피부 각질 박리능이 뛰어나 각질 턴오버 주기를 줄여주어 피부 각질 턴오버 촉진 효과가 우수하다. 또한 탈락되지 않고 오랫동안 피부에 남아 피부를 칙칙하게 하거나 트러블을 일으키는 원인이 되는 각질의 양을 감소시켜, 피부결, 피부톤, 투명도 및 메이크업 균일도 개선 효과를 나타낸다.The composition for external application for skin according to the present invention is excellent in the exfoliation ability of the skin, and has a superior horny turnover promoting effect by reducing the exfoliation turnover cycle. Also, it does not disappear and remains on the skin for a long time to reduce the amount of keratin which causes the skin to become dull or cause troubles, and shows the effect of improving skin texture, skin tone, transparency and makeup uniformity.

도 1은 Visioscan VC98을 사용하여 실시예 1의 피부 외용제 조성물 사용 전과 사용 3일 후, 사용 1주 후, 사용 2주 후의 각질량을 촬영한 사진이다.
도 2는 i-Scope를 사용하여 실시예 1의 피부 외용제 조성물 사용 전과 사용 3일 후, 사용 1주 후, 사용 2주 후의 각질을 촬영한 사진이다.
도 3은 실시예 1에서 제조한 피부 외용제 조성물의 각질 박리능을 알아보기 위하여 시험자의 전박 부분의 각질을 형광 염색한 후 시료를 도포하여 형광 촬영한 것이다. 형광이 진하게 나타나는 것은 상대적으로 각질 박리가 잘 일어나지 않은 것을 의미한다. (각 사진의 왼쪽: 무도포 시, 각 사진의 오른쪽: 실시예 1의 도포 시)
도 4는 액체 크로마토그래피(UPLC)를 이용하여 본 발명에 따른 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드의 아미노산 성분을 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 5는 본 발명에 따른 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드의 아미노산 함량 조성을 백분율로 환산하여 나타낸 그래프이다.
도 6은 LC-ESI-MS로 분석한 본 발명에 따른 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드의 디펩타이드 분석 결과이다. 도 6a는 총 이온 전류, 도 6b는 총 이온 전류로부터 추출된 이온(Leu/Val 관련 디펩타이드 이온)에 대한 것이다.
Fig. 1 is a photograph of each mass obtained before use of the composition for external application for skin of Example 1, 3 days after use, 1 week after use, and 2 weeks after use using Visioscan VC98.
Fig. 2 is a photograph of the keratin before the use of the composition for external application of the skin of Example 1, 3 days after use, 1 week after use, and 2 weeks after use using i-Scope.
FIG. 3 is a photograph of the skin external application composition prepared in Example 1 to examine the keratin peel ability of the composition, after applying fluorescent dyes to the horny part of the test piece, and then applying the sample to the fluorescence image. The dense appearance of fluorescence means that the exfoliation does not occur relatively well. (Left of each photograph: non-embossed, right of each photograph: when applying Example 1)
FIG. 4 shows the results of analyzing the amino acid components of the peptides derived from the peony root of the present invention using liquid chromatography (UPLC).
FIG. 5 is a graph showing the composition of the amino acid content of the Jeolla ginkgo-derived polypeptide according to the present invention as a percentage.
Fig. 6 shows the results of the dipeptide analysis of the peptides derived from Jeolla ginseng according to the present invention, which was analyzed by LC-ESI-MS. FIG. 6A shows the total ion current, and FIG. 6B shows the ion (Leu / Val-related peptide ion) extracted from the total ion current.

본 발명은 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드와 소듐 락테이트를 유효성분으로 함유함으로써, 피부 각질 턴오버 촉진 효과가 우수하며, 또한 피부 각질량 감소 효과, 피부결, 피부톤, 투명도 및 메이크업 균일도 개선 효과가 우수한 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a skin care composition comprising Jeju peanut derived polypeptide and sodium lactate as an active ingredient and having excellent effect of accelerating skin horny turnover and having skin angle mass reduction effect, skin texture, skin tone, transparency and makeup uniformity improvement effect And an external preparation composition.

콩 유래 펩타이드나 가수분해 콩 단백질은 노화 방지 및 보습 효과가 종래에 알려져 있으며, 본 발명자들은 특히 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드가 콜라겐 유전자 발현을 촉진하고 세포 재생에 효과가 있음을 시험을 통해 확인하였다.The soybean-derived peptide or the hydrolyzed soybean protein has been conventionally known to have anti-aging and moisturizing effects. The present inventors have confirmed through experiments that the polypeptide derived from Jeju pea keong promotes collagen gene expression and is effective for cell regeneration.

또한 소듐 락테이트는 락트산의 나트륨 염 형태로 보습 화장품에 널리 이용되는 성분이며, 천연보습인자(NMF)의 하나로서 보습제(humectant) 역할을 하는 것으로 알려져 있다. In addition, sodium lactate is a sodium salt of lactic acid and is widely used in moisturizing cosmetics. It is known to act as a humectant as one of natural moisturizing factors (NMF).

본 발명에서는 이러한 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드와 소듐 락테이트를 동시에 사용하여 각질 박리 효능을 증대하고 피부 각질 턴오버를 촉진시키고자 한다. 기존의 각질 박리 제품들은 주로 표피 위에서의 각질 박리(exfoliation) 기능에만 의존하고 있었다. 그러나 보다 근본적인 각질 박리를 위해서는 표피 위에서의 각질 박리뿐 아니라 피부 과립층과 기저층에서의 새로운 세포 생성과 분화가 활성화되어야만 턴오버를 촉진시킬 수 있으며, 피부 항상성을 유지할 수 있게 된다. In the present invention, the Jeju pea derived polypeptide and sodium lactate are used at the same time to increase the exfoliating effect and accelerate skin horn turnover. The existing exfoliating products mainly depend on exfoliation function on the epidermis. However, for the more fundamental exfoliation, activation of new cell formation and differentiation in the skin granules and basal layer as well as exfoliation on the epidermis can promote turnover and maintain skin homeostasis.

본 발명자들은 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드가 피부세포에서 콜라겐 유전자 발현 및 세포 재생을 촉진하는 효과를 지니는 것을 확인하였다. 그리고 이를 소듐 락테이트와 병용 시 피부 각질 턴오버 촉진 효과를 낼 것으로 예측하였다. 향상된 피부 재생력이 건강한 세포를 피부 위로 보다 활발하게 밀어 올려주어 턴오버 주기를 감소시키고, 각질이 박리된 후의 피부 항상성 유지에도 도움을 줄 것으로 예측하였으며, 뒤에 소개할 실시예와 시험예 등을 통해 그 시너지 효과를 확인하여 본 발명을 완성하게 되었다.The present inventors have confirmed that a polypeptide derived from Jeju pea keon promotes collagen gene expression and cell regeneration in skin cells. And it was predicted that it would accelerate skin keratin turnover when it was combined with sodium lactate. It has been predicted that improved skin regeneration will actively push healthy cells onto the skin to reduce turnover cycles and help maintain skin homeostasis after exfoliation. The synergy effect was confirmed, and the present invention was completed.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물에 사용되는 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드는 제주도 남쪽지역에서 생산되는 제주 토종자원인 제주푸른콩을 고초균(Bacillus subtilis)으로 액상 발효하여 저분자 펩타이드로 분해한 뒤 초미세 여과 공정을 거쳐 제조될 수 있다. 보다 상세하게는 제주푸른콩을 분쇄하고 여과한 제주푸른콩을 정제수에 넣고 고초균을 첨가하여 발효시킨 후, 한외여과막으로 여과하고 여과액을 농축시킨 다음 분무 건조하여 최종적으로 파우더 형태의 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드를 얻을 수 있다.The Jeju sweet potato-derived polypeptide used in the composition for external application of the skin according to the present invention is obtained by fermenting Jeju sweet potato as a Jeju native plant produced in the southern part of Jeju Island by liquid fermentation with Bacillus subtilis and decomposing into low molecular peptide, . More specifically, Jeju peanut is crushed and filtered, and the filtered Jeju peanut is added to purified water, followed by fermentation with Bacillus subtilis, followed by filtration through an ultrafiltration membrane, concentrating the filtrate, and spray drying to finally obtain a powdery peel- Can be obtained.

본 발명에서 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드는 3,000Da 미만의 평균 분자량을 갖는 저분자량 펩타이드이다. 상기 저분자량 펩타이드는 바람직하게는 1,000Da 내지 2,500Da, 더 바람직하게는 1,000Da 내지 1,500Da의 평균 분자량을 가질 수 있다.In the present invention, the peanut derived peptides are low molecular weight peptides having an average molecular weight of less than 3,000 Da. The low molecular weight peptide preferably has an average molecular weight of 1,000 Da to 2,500 Da, more preferably 1,000 Da to 1,500 Da.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드를 건조중량으로서 조성물 총 중량에 대하여 0.000001 내지 5 중량% 함유할 수 있다. 0.000001 중량% 미만이면 지나치게 함량이 낮아 피부 외용제로서의 효능을 기대하기 어렵고, 5 중량% 초과하면 피부 안전성의 우려가 있다. 보다 상세하게는 0.005 내지 0.05 중량% 함유하는 것이 바람직하다.The composition for external application for skin according to the present invention may contain 0.000001 to 5% by weight, based on the total weight of the composition, of the Jeju peanut derived polypeptide as a dry weight. If the content is less than 0.000001% by weight, the content is too low and it is difficult to expect the effect as an external preparation for skin, and if it exceeds 5% by weight, there is a fear of skin safety. More specifically, it is preferably contained in an amount of 0.005 to 0.05% by weight.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 소듐 락테이트를 조성물 총 중량에 대하여 0.000001 내지 20 중량% 함유할 수 있다. 0.000001 중량% 미만이면 지나치게 함량이 낮아 피부 외용제로서의 효능을 기대하기 어렵고, 20 중량% 초과하면 피부 안전성의 우려가 있다. 보다 상세하게는 1 내지 10 중량% 함유하는 것이 바람직하다.The composition for external application for skin according to the present invention may contain sodium lactate in an amount of 0.000001 to 20% by weight based on the total weight of the composition. If the content is less than 0.000001% by weight, the content is too low and it is difficult to expect the effect as an external preparation for skin. If the content is more than 20% by weight, there is a fear of skin safety. More specifically, it is preferably contained in an amount of 1 to 10% by weight.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 피부 각질 턴오버 촉진 효과를 갖는다. 또한 각질량 감소 효과, 피부결, 피부톤, 투명도, 및 메이크업 균일도 개선 효과를 갖는다.The composition for external application for skin according to the present invention has a skin cornea turnover promoting effect. It also has effects of reducing mass, skin texture, skin tone, transparency, and makeup uniformity.

본 발명에 따른 조성물에서 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드 및 소듐 락테이트는 중량을 기준으로 1:100 내지 1:2000, 바람직하게는 1:100 내지 1:500의 혼합비로 혼합하는 것이, 피부 각질 턴오버 촉진 효과를 나타내면서 동시에 피부결, 피부톤, 투명도 및 메이크업 균일도 중 적어도 하나 이상의 개선 효과를 나타내는 데 유리할 수 있다. In the composition according to the present invention, it is preferred that mixing the Jeolla ganoderma derived polypeptide and sodium lactate at a mixing ratio of 1: 100 to 1: 2000, preferably 1: 100 to 1: 500 on the basis of weight, Effect of at least one of skin texture, skin tone, transparency, and make-up uniformity.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 스킨, 로션, 크림, 팩, 젤, 파우더, 연고 또는 스프레이 형태로 화장품에 사용될 수 있다.The composition for external application for skin according to the present invention may be in the form of a solution, a gel, a solid, a paste anhydrous product, an emulsion obtained by dispersing an oil phase in a water phase, a suspension, a microemulsion, a microcapsule, a microgranule or an ionic (liposome) In the form of a dispersant, or in the form of a skin, lotion, cream, pack, gel, powder, ointment or spray.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 더 함유할 수 있다.The composition for external application for skin according to the present invention can be used in the form of a skin, an organic solvent, a solubilizer, a thickening agent, a gelling agent, a softening agent, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, The active ingredient may be combined with any other ingredients commonly used in cosmetics, such as ionic emulsifiers, fillers, sequestering agents, chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, And may further contain adjuvants conventionally used in the same cosmetic or dermatological field.

본 발명에 따른 피부 외용제 조성물은 상기 성분들 이외에도 당업계에서 통상적으로 사용하는 부가적인 첨가물질들을 더 사용할 수 있다.The composition for external application for skin according to the present invention may further contain additional additives conventionally used in the art in addition to the above-mentioned components.

이하, 실시예 및 시험예를 통해 본 발명을 좀 더 상세히 설명한다. 그러나, 하기 실시예 및 시험예는 본 발명의 이해를 돕기 위한 예시일 뿐, 본 발명의 내용이 이에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail by way of Examples and Test Examples. However, the following examples and test examples are provided only to aid understanding of the present invention, and the present invention is not limited thereto.

[참고예 1] 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드의 제조[Referential Example 1] Preparation of polypeptides derived from Jeju peanut

본 발명에 사용한 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드는 제주도 서귀포시 중문동에서 생산된 제주푸른콩에 고초균을 첨가하여 액상 발효하고, 초미세 여과공정을 적용하여 3,000Da 미만의 평균 분자량을 갖는 저분자량 펩타이드를 제조하여 사용하였다. 구체적으로 제주푸른콩을 분쇄(grinding)하고 100mesh로 여과한 제주푸른콩 4kg을 정제수 40kg에 넣고 고초균 40g을 첨가하여 50℃에서 6시간 동안 발효시킨 후 90~95℃에서 30분 동안 불활성화(deactivation)시키고 50~60℃로 냉각시킨다. 그런 다음 10kDa 사이즈의 한외여과막(ultrafiltration membrane)을 이용하여 여과하고 60℃에서 여과액을 농축(concentration)시킨 뒤 마지막으로 분무 건조(Spray-dry; 조건 Stirring speed 30rpm, Input 185℃, Output 85~90℃?)하여 최종적으로 파우더 형태의 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드를 얻었다.The peptides derived from the Jeju pea kerosene used in the present invention were prepared by fermenting Bacillus subtilis in Jeju alpine produced in Jeongmun-dong, Seogwipo city, Jeju, Korea, and applying a microfiltration process to prepare low molecular weight peptides having an average molecular weight of less than 3,000 Da . Specifically, 4 kg of Jeju pea pods, which were ground and filtered with 100 mesh, were added to 40 kg of purified water, 40 g of Bacillus subtilis was added, and the mixture was fermented at 50 ° C for 6 hours, deactivated at 90 to 95 ° C for 30 minutes And cooled to 50 to 60 ° C. The filtrate was concentrated at 60 ° C and finally spray-dried (condition Stirring speed 30 rpm, Input 185 ° C, Output 85 to 90 ° C). The filtrate was filtered through a 10 kDa ultrafiltration membrane, To obtain a powdery peptides derived from Jeju pea ke.

[참고예 2] 백운콩 유래 펩타이드의 제조[Referential Example 2] Preparation of Peptide Derived from White Soybean

제주푸른콩을 백운콩으로 대체한 것을 제외하고, [참고예 1]과 동일한 과정을 거쳐 백운콩 유래 펩타이드를 제조하였다.Peptide derived from Baekun bean was prepared through the same procedure as in [Referential Example 1], except that Jeju peach was replaced with white bean.

[참고예 3] 풍산콩 유래 펩타이드의 제조[Referential Example 3] Production of Peptide Derived from Pungsan Soybean

제주푸른콩을 풍산콩으로 대체한 것을 제외하고, [참고예 1]과 동일한 과정을 거쳐 풍산콩 유래 펩타이드를 제조하였다.The peptides derived from the peonies were obtained through the same procedure as in [Referential Example 1], except that the Jeju peas were replaced with the peonies.

[참고예 4] 소듐 락테이트[Reference Example 4] Sodium lactate

소듐 락테이트는 Corbion사의 PURASAL® S/PF 60를 사용하였다.Sodium lactate was PURASAL S / PF 60 from Corbion.

[실시예 및 비교예의 제조][Preparation of Examples and Comparative Examples]

상기 참고예 1의 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드와 상기 참고예 4의 소듐 락테이트를 포함한 실시예 1 내지 3과 상기 참고예 2의 백운콩 유래 펩타이드와 소듐 락테이트를 포함한 비교예 1, 상기 참고예 1의 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드와 포타슘 락테이트를 포함한 비교예 2, 상기 참고예 3의 풍산콩 유래 펩타이드와 소듐 락테이트를 포함한 비교예 3의 필링 크림을 하기 표 1의 조성으로 제조하였다.(단위: 중량%)Examples 1 to 3, which contained the peptides derived from the Jeju pea kerks of Reference Example 1, the sodium lactate of Reference Example 4, Comparative Example 1, which contained peptides derived from Baekun soybean and sodium lactate, Peeling cream of Comparative Example 2 containing Peptide derived from Jeju pea kerosene and Potassium lactate and Peeling cream of Comparative Example 3 containing Peptide derived from Poongsan bean derived peptide of Reference Example 3 and sodium lactate was prepared according to the composition shown in Table 1 below: weight%)

성분ingredient 실시예 1Example 1 실시예 2Example 2 실시예 3Example 3 비교예 1Comparative Example 1 비교예 2Comparative Example 2 비교예 3Comparative Example 3 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드Peptide derived from Jeju peanut 0.01 0.01 0.01 0.01 0.0050.005 00 0.010.01 00 백운콩 유래 펩타이드Pea derived from white bean soybean 00 00 00 0.010.01 00 00 풍산콩 유래 펩타이드Peptide derived from poison soybean 00 00 00 00 00 0.010.01 소듐 락테이트Sodium lactate 10 10 55 1010 1010 00 1010 포타슘 락테이트Potassium lactate 00 00 00 00 1010 00 스쿠알란Squalane 55 55 55 55 55 55 폴리소르베이트 60Polysorbate 60 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 세테아릴알코올Cetearyl alcohol 1.51.5 1.51.5 1.51.5 1.51.5 1.51.5 1.51.5 글리세린glycerin 22 22 22 22 22 22 정제수Purified water to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100 to 100to 100 합계Sum 100100 100100 100100 100100 100100 100100

상기 제조된 실시예 및 비교예 조성물의 각질량, 피부결, 피부톤, 피부 투명도, 및 메이크업 균일도 개선 효과와 피부 각질 턴오버 촉진 효과를 인체 적용 시험을 통해 확인하였다.The effects of improving the mass, skin texture, skin tone, skin transparency, makeup uniformity and promoting skin horny turnover of the prepared examples and comparative compositions were confirmed through human body application tests.

인체 적용 시험 대상자는 25 내지 35세 여성(평균 나이: 29.391±3.313)으로, 최종 유효 평가 인원수는 23명이었고, 중도 탈락 인원수는 2명이었다. 시험 기간은 총 4주(제품 사용 전, 사용 3일 후, 사용 7일 후, 사용 2주 후, 사용 4주 후) 동안 진행되었고, 상기 실시예 및 비교예 크림을 안면 및 전박에 매일 1회 도포하여 테스트하였다. The subjects were 25 to 35 years old (mean age: 29.391 ± 3.313). The final validity was 23, and the number of dropouts was 2. The test period lasted for a total of 4 weeks (before use, 3 days after use, 7 days after use, 2 weeks after use, 4 weeks after use), and the above Example and Comparative Example creams were applied once daily And tested.

[시험예 1: 피부 각질량 측정][Test Example 1: skin angle mass measurement]

피부 각질량 측정은 Visioscan VC98(Courage-Khazaka electronic GmbH, Germany)을 이용하였으며, 상기 실시예 1의 필링 크림 사용 전과 사용 3일 후, 사용 1주 후, 사용 2주 후에 측정하였다. 측정은 특수 필름(Corneofix)을 이용하여 볼 부위의 각질을 채취한 후, Visioscan VC98으로 영상을 촬영하고 분석하여 측정값 D.I(Desquamation Index: 표피탈락지수)를 피부 각질 평가 자료로 사용하였으며, 하기 식에 따라 산출하였다.Visioscan VC98 (Courage-Khazaka electronic GmbH, Germany) was used to measure the skin mass, and it was measured before use of the peeling cream of Example 1 and 3 days after use, 1 week after use, and 2 weeks after use. The corneal epithelium was collected by using a special film (Corneofix), and images were taken with Visioscan VC98 and analyzed. The measured value DI (Desquamation Index) Respectively.

Figure pat00001
Figure pat00001

상기 식에서, D.I는 표피탈락지수(%)이고, A는 각질세포로 덮인 면적의 백분율이고, Tn은 두께와 연관된 각질세포의 백분율이고, 그리고 n은 두께의 수준(1 내지 5)이다.Where A is the percentage of the area covered with keratinocytes, Tn is the percentage of keratinocytes associated with thickness, and n is the level of thickness (1 to 5).

그 결과로 얻은 각질량 D.I의 평균값과 개선된 시험 대상자 수를 하기 표 2와 표 3에 각각 나타내었다.The average value of the resulting D.I. and the number of improved subjects are shown in Tables 2 and 3, respectively.

  평균값medium 사용 전Before use 사용 3일 후After 3 days of use 사용 1주 후After 1 week of use 사용 2주 후After 2 weeks of use 각질량 (D.I)Each mass (D.I) 18.413 18.413 16.951 16.951 15.983 15.983 15.481 15.481

개선된 시험대상자 수 (%)Number of improved subjects (%) 사용 전-사용 3일 후Before use - After 3 days of use 사용 전-사용 1주 후Before use - After 1 week of use 사용 전-사용 2주 후Before use - After 2 weeks of use 각질량 (D.I)Each mass (D.I) 17 (73.9)17 (73.9) 20 (87.0)20 (87.0) 20 (87.0)20 (87.0)

상기 표 2에 나타내었듯이, 본원발명에 따른 피부 외용제 조성물 사용 시 각질량 D.I의 평균값이 사용 전과 비교하여 사용 3일 후, 사용 1주 후, 사용 2주 후에 7.940%, 13.197%, 15.924%로 유의하게 감소(p<0.017)하였다. As shown in the above Table 2, the average value of the mass DIs was 7.940%, 13.197%, and 15.924% after 3 days of use, 1 week after use, and 2 weeks after use, (P <0.017), respectively.

또한 상기 표 3에 나타냈듯이, 각질량 D.I 지수가 개선된 시험대상자 수가 사용 3일 후에는 73.9%, 사용 1주 후와 2주 후에는 87%로 매우 높은 비율을 보였다. Also, as shown in Table 3, the number of subjects having improved the respective mass D.I scores was 73.9% after 3 days of use, 87% after 1 week and 87% after 2 weeks of use.

따라서, 본원발명에 따른 피부 외용제 조성물은 각질량을 감소시키는 효과가 뛰어남을 확인할 수 있었다.Thus, it was confirmed that the composition for external application for skin according to the present invention is excellent in reducing the respective masses.

[시험예 2: 각질량 개선 육안평가 (각질량 + 각질 성숙 육안평가)][Test Example 2: Visual evaluation of each mass (each mass + keratin mature visual evaluation)]

각질량 개선 육안평가는 i-Scope를 이용하여 상기 실시예 1의 필링 크림 사용 전과 사용 3일 후, 사용 1주 후, 사용 2주 후에 피부 각질량과 각질 성숙의 육안평가를 실시하였다.Each mass enhancement visual evaluation was carried out using i-Scope before the peeling cream of Example 1 and after 3 days of use, 1 week after use, 2 weeks after use, and visual evaluation of skin mass and keratin maturity.

그 결과로 얻은 각질량 육안평가 점수 평균값과 각질 성숙(maturation) 육안평가 점수의 평균값, 및 이들 합산 점수를 하기 표 4에 나타내었으며, 개선된 시험대상자 수는 표 5에 나타내었다.Table 4 shows the average value of each of the mass visual evaluation scores, the average value of the maturation visual evaluation scores, and the sum of the scores of the obtained mass visual evaluation scores, and the number of improved test subjects is shown in Table 5.

평균값medium 사용 전Before use 사용 3일 후After 3 days of use 사용 1주 후After 1 week of use 사용 2주 후After 2 weeks of use 각질량 육안평가Each mass visual evaluation 2.087 2.087 2.435 2.435 2.826 2.826 3.261 3.261 각질 성숙 육안평가Evaluation of keratin maturity 1.870 1.870 2.217 2.217 2.174 2.174 1.957 1.957 각질 육안평가(합산)Horny visual evaluation (summed) 3.957 3.957 4.652 4.652 5.000 5.000 5.217 5.217

개선된 시험대상자 수 (%)Number of improved subjects (%) 사용 전-사용 3일 후Before use - After 3 days of use 사용 전-사용 1주 후Before use - After 1 week of use 사용 전-사용 2주 후Before use - After 2 weeks of use 각질량 육안평가Each mass visual evaluation 10 (43.5)10 (43.5) 16 (69.6)16 (69.6) 19 (82.6)19 (82.6) 각질 성숙 육안평가Evaluation of keratin maturity 7 (30.4)7 (30.4) 10 (43.5)10 (43.5) 8 (34.8)8 (34.8) 각질 육안평가(합산)Horny visual evaluation (summed) 13 (56.5)13 (56.5) 16 (69.6)16 (69.6) 17 (73.9)17 (73.9)

상기 표 4에 나타냈듯이, 각질량 육안평가 점수의 평균값은 사용 전과 비교하여 사용 1주 후, 사용 2주 후에 35.410%, 56.253% 유의하게 증가(p<0.017)하였다. 각질 성숙 육안평가 점수의 평균값은 사용 전과 비교하여 유의한 차이를 보이지 않았다. 합산 점수(각질량 육안평가 + 각질 maturation 육안평가)는 사용 전과 비교하여 사용 3일 후, 사용 1주 후, 사용 2주 후에 17.564%, 26.358%, 31.842% 유의하게 증가(p<0.017)하였다.As shown in Table 4, the average value of each visual inspection score was significantly increased by 35.410% and 56.253% (p < 0.017) after one week of use and two weeks after use, respectively. There was no significant difference in the average value of keratin mature visual assessment score compared with before use. The cumulative score (each visual and horny maturation visual evaluation) was significantly increased (p <0.017) after 3 days of use, 1 week after use, 17.564%, 26.358%, and 31.842% after 2 weeks of use compared to before use.

또한 상기 표 5에 나타냈듯이, 각질 육안평가 합산 점수에서 개선된 시험대상자 수의 비율이 사용 3일 후 56.5%, 사용 1주 후 69.6%, 사용 2주 후에는 73.9%로 높은 비율을 보였다. Also, as shown in Table 5, the ratio of improved number of test subjects was 56.5% at 3 days, 69.6% at 1 week, and 73.9% at 2 weeks after use.

따라서, 본원발명에 따른 피부 외용제 조성물은 육안으로 평가하였을 때 각질량 감소 효과가 있다고 판단한 시험자가 많았음을 확인할 수 있었다.Therefore, it can be confirmed that the composition for external application for skin according to the present invention has many testers judged to be effective in mass reduction when evaluated visually.

[시험예 3: 메이크업 균일도 측정][Test Example 3: Measurement of makeup uniformity]

메이크업 균일도 측정은 Visia-CR(Canfield Imaging Systems, USA)을 이용하여 안면을 측정하였으며, 상기 실시예 1의 필링 크림 사용 전과 3일 후에 동일한 양의 메이크업 제품을 안면에 도포한 후 촬영하였다. 촬영한 이미지의 특정 영역을 지정한 다음, Image-pro plus를 이용하여 그 영역의 피부 균일도를 의미하는 Intensity의 표준편차를 분석하였다. Intensity의 표준편차 값이 감소할수록 메이크업 균일도가 개선됨을 의미한다.To measure the makeup uniformity, the face was measured using Visia-CR (Canfield Imaging Systems, USA), and the same amount of makeup product was applied to the face before and 3 days after the peeling cream of Example 1 was used. After specifying a specific area of the photographed image, the standard deviation of the intensity, which means skin uniformity of the area, was analyzed using Image-pro plus. The decrease in the standard deviation value of the intensity means that the makeup uniformity is improved.

그 결과로 얻은 메이크업 균일도(Intensity's std)의 평균값을 하기 표 6에 나타내었으며, 개선된 시험대상자 수는 표 7에 나타내었다.The average value of the resulting make-up uniformity (Intensity's std) is shown in Table 6, and the number of improved test subjects is shown in Table 7.

평균값medium 사용 전Before use 사용 3일 후After 3 days of use 메이크업 균일도(Intensity's std)Makeup Uniformity (Intensity's std) 5.922 5.922 5.399 5.399

  개선된 시험대상자 수 (%)
(사용 전-사용 3일 후)
Number of improved subjects (%)
(Before use - after 3 days of use)
메이크업 균일도(Intensity's std)Makeup Uniformity (Intensity's std) 22 (95.7)22 (95.7)

상기 표 6에 나타냈듯이, 본원발명에 따른 피부 외용제 조성물 사용 시 메이크업 균일도(Intensity의 std)의 평균값이 사용 전과 비교하여 사용 3일 후에 8.831% 유의하게 감소(p<0.05)하였다.As shown in Table 6, the mean value of the makeup uniformity (std of intensity) when using the composition for external application according to the present invention was significantly decreased (p <0.05) by 8.831% after 3 days of use as compared with before use.

또한 상기 표 7에 나타냈듯이, 메이크업 균일도가 개선된 시험대상자 수가 사용 3일 후 95.7%로 매우 높은 비율을 보였다. Also, as shown in Table 7, the number of test subjects whose makeup uniformity was improved was very high at 95.7% after 3 days of use.

따라서, 본원발명에 따른 피부 외용제 조성물은 메이크업 균일도 개선 효과가 뛰어남을 확인할 수 있었다.Accordingly, it was confirmed that the composition for external application for skin according to the present invention is excellent in the make-up uniformity improvement effect.

[시험예 4: 피부결, 피부톤, 피부 투명도 측정][Test Example 4: skin texture, skin tone, skin transparency measurement]

피부결 측정은 3D 피부 촬영 장치 PRIMOS premium(GFMesstechnik GmbH, Germany)을 이용하여 안면 볼 부위를 측정하였다. 측정은 동일한 부위를 촬영하였고, 저장된 이미지의 피부 Ra값을 분석하였다. Ra는 평균 거칠기(Average Roughness)를 의미하며, 값이 감소할수록 피부결이 개선됨을 의미한다.The skin texture was measured using the 3D skin imaging system PRIMOS premium (GFMesstechnik GmbH, Germany). The measurements were taken at the same site and the skin Ra values of the stored images were analyzed. Ra means Average Roughness, which means that the skin texture is improved as the value decreases.

피부톤 측정은 Visia-CR(Canfield Imaging Systems, USA)을 이용하여 동일한 부위를 측정하였다. 촬영한 이미지의 특정 영역을 지정한 다음, Image-pro plus를 이용하여 그 영역의 피부 밝기를 의미하는 L*값을 분석하였다. 이미지의 L*값이 증가할수록 피부톤이 개선됨을 의미한다.Skin tones were measured using the Visia-CR (Canfield Imaging Systems, USA). After specifying a specific area of the photographed image, L * value indicating the skin brightness of the area was analyzed using Image-pro plus. This means that as the L * value of the image increases, the skin tone improves.

피부 투명도 측정은 Translucency(TLS850)를 사용하여 측정하였다. 측정은 Translucency probe를 피부에 접촉시켜 3회 실시하여 Alpha값을 피부 투명도 평가 자료로 사용하였으며, Alpha값이 감소할수록 피부 투명도가 개선됨을 의미한다.Skin transparency was measured using Translucency (TLS850). The Alpha value was used as the skin transparency evaluation data when the translucency probe was applied to the skin 3 times. The lower the Alpha value, the better the skin transparency.

각각은 상기 실시예 1의 필링 크림 사용 전과 사용 3일 후, 사용 1주 후에 측정하였다.Each was measured before use of the peeling cream of Example 1 and 3 days after use and one week after use.

그 결과로 얻은 피부결(Ra), 피부톤(L*), 피부 투명도(Alpha) 각각의 평균값을 하기 표 8에 나타내었으며, 개선된 시험대상자 수는 표 9에 나타내었다.The average values of skin roughness (Ra), skin tone (L *) and skin transparency (Alpha) obtained as a result are shown in Table 8, and the number of improved subjects is shown in Table 9.

  평균값medium 사용 전Before use 사용 3일 후After 3 days of use 사용 1주 후After 1 week of use 피부결 (Ra)Skin texture (Ra) 13.090 13.090 12.603 12.603 12.276 12.276 피부톤 (L*)Skin tone (L *) 66.815 66.815 67.425 67.425 68.061 68.061 투명도 (Alpha)Transparency (Alpha) 0.033 0.033 0.032 0.032 0.032 0.032

개선된 시험대상자 수 (%)Number of improved subjects (%) 사용 전-사용 3일 후Before use - After 3 days of use 사용 전-사용 1주 후Before use - After 1 week of use 피부결 (Ra)Skin texture (Ra) 17 (73.9)17 (73.9) 19 (82.6)19 (82.6) 피부톤 (L*)Skin tone (L *) 22 (95.7)22 (95.7) 22 (95.7)22 (95.7) 투명도 (Alpha)Transparency (Alpha) 20 (87.0)20 (87.0) 20 (87.0)20 (87.0)

상기 표 8에 나타냈듯이, 본원발명에 따른 피부 외용제 조성물 사용 시 피부결(Ra)의 평균값이 사용 전과 비교하여 사용 1주 후에 6.218% 유의하게 감소(p<0.05)하였다. 피부톤(L*)의 평균값은 사용 전과 비교하여 사용 3일 후, 사용 1주 후에 0.913%, 1.865% 유의하게 증가(p<0.025)하였다. 피부 투명도(Alpha)의 평균값은 사용 전과 비교하여 사용 3일 후, 사용 1주 후에 1.220%, 1.524% 유의하게 감소(p<0.05)하였다.As shown in Table 8, the average value of skin roughness (Ra) was 6.218% (p < 0.05) after 1 week of use compared to before use when using the composition for external application according to the present invention. The mean value of skin tone (L *) was significantly increased (p <0.025) by 0.913% and 1.865% after 3 days of use compared to before use. The mean value of skin transparency (Alpha) was 1.220% and 1.524% significantly decreased (p <0.05) 3 days after use and 1 week after use compared to before use.

또한 상기 표 9에 나타냈듯이, 피부결, 피부톤, 투명도가 개선된 시험대상자 수가 사용 1주 후 각각 82.6%, 95.7%, 87.0%로 매우 높은 비율을 보였다. As shown in Table 9, the number of subjects having improved skin texture, skin tone, and transparency was 82.6%, 95.7%, and 87.0%, respectively, after 1 week of use.

따라서, 본원발명에 따른 피부 외용제 조성물은 피부결, 피부톤, 투명도 개선 효과가 뛰어남을 확인할 수 있었다.Therefore, it was confirmed that the composition for external application for skin according to the present invention is excellent in improving skin texture, skin tone and transparency.

[시험예 5: 각질 턴오버 효과 측정][Test Example 5: Measurement of horny turnover effect]

각질 턴오버 효과 측정은 상기에서 제조한 실시예 1 내지 3 및 비교예 1 내지 3의 각질 박리능을 평가한 것으로 하기 시험을 수행하였다. 이 실험은 25 내지 35세 여성 23명을 대상으로 시험 기간은 4주에 걸쳐 수행하였으며, 평가 방법은 다음과 같다:The measurement of the horny turnover effect was made by evaluating the exfoliating ability of keratin in Examples 1 to 3 and Comparative Examples 1 to 3 prepared above. This study was conducted on 23 women aged 25 to 35 years. The test period was 4 weeks. The evaluation method was as follows:

1. 전박 세척 후 4㎠로 부위를 선정하였다.1. After washing the entire area, the area was selected as 4 cm 2.

2. 직경 20mm 여과지에 단실 염화물(Dansyl chloride; 트리글리세라이드 오일 내) 100㎕를 로딩(loading)한 다음 시험 부위에 첩포하였다.2. 100 μl of Dansyl chloride (in triglyceride oil) was loaded on a filter paper having a diameter of 20 mm and then spread on the test site.

3. 형광 염색 확인 후 24시간 동안 안정화한 다음 매일 1회씩 시험부위에 시료 32 ㎕를 도포하였다(시험자 한 명이 20회 롤링(rolling)으로 시료 도포).3. After stabilization for 24 hours after confirming fluorescent staining, 32 ㎕ of sample was applied to the test site once a day (one sample was applied by rolling 20 times).

4. 매일 다른 빛은 차단하고 UV 하에서 각질층 형광 촬영을 실시하였다.4. Daily light was blocked and stratum corneum fluorescence was taken under UV.

< 촬영조건 ><Photography Conditions>

디지털 카메라의 매뉴얼 모드에서, 조리개 3.5, 셔터 스피드 5In digital camera manual mode, aperture 3.5, shutter speed 5

<각질 박리능 평가 방법><Evaluation method of peelability>

- 단실 염화물로 전박을 형광 염색한 후 제품 사용에 의한 각질 박리능을 형광강도의 감소 비율로 분석하였다.- After dyes were fluorescently dyed with dansyl chloride, the exfoliation ability of the product was analyzed by decreasing the fluorescence intensity.

연속된 t-테스트(p<0.05), ANOVA 테스트 및 기술적 통계 분석을 이용하여 유의차를 분석하였으며, 그 결과를 표 10과 표 11, 도 3에 나타내었다.Significant differences were analyzed using continuous t-test (p <0.05), ANOVA test and technical statistical analysis, and the results are shown in Tables 10 and 11 and FIG.

  Intensity 평균값Intensity Average 사용 전Before use 사용 1주 후After 1 week of use 사용 2주 후After 2 weeks of use 사용 4주 후After 4 weeks of use 무도포Martial arts 188.425 188.425 109.459 109.459 94.722 94.722 90.83990.839 실시예 1Example 1 186.410 186.410 101.081 101.081 92.320 92.320 66.52466.524 실시예 2Example 2 186.562186.562 103.283103.283 92.04392.043 67.45267.452 실시예 3Example 3 187.933187.933 103.582103.582 92.72392.723 69.32469.324 비교예 1Comparative Example 1 189.345189.345 114.532114.532 94.80694.806 82.23582.235 비교예 2Comparative Example 2 186.356186.356 124.457124.457 93.87593.875 81.24581.245 비교예 3Comparative Example 3 187.259187.259 119.533119.533 94.97494.974 87.25387.253

  개선된 시험대상자 수 (%)Number of improved subjects (%) 사용 전-사용 1주 후Before use - After 1 week of use 사용 전-사용 2주 후Before use - After 2 weeks of use 무도포Martial arts 17 (73.9)17 (73.9) 14 (60.9)14 (60.9) 실시예 1Example 1 23 (100.0)23 (100.0) 23 (100.0)23 (100.0) 실시예 2Example 2 23 (100.0)23 (100.0) -- 실시예 3Example 3 22 (95.6)22 (95.6) -- 비교예 1Comparative Example 1 17 (73.9)17 (73.9) -- 비교예 2Comparative Example 2 18 (78.2)18 (78.2) -- 비교예 3Comparative Example 3 17 (73.9)17 (73.9) --

상기 표 10에 나타냈듯이, 실시예 1의 조성물 사용 시 각질 박리능 형광강도(Intensity)의 평균값이 사용 전과 비교하여 사용 1주 후 45.775%, 사용 2주 후 50.475%, 사용 4주 후 64.313% 유의하게 감소(p<0.05)하였다. 실시예 2는 사용 1주 후 44.638%, 사용 2주 후 50.664%, 사용 4주 후 63.845% 유의하게 감소(p<0.05)하였으며, 실시예 3은 사용 1주 후 44.883%, 사용 2주 후 50.662%, 사용 4주 후 63.112% 유의하게 감소(p<0.05)하였다.As shown in Table 10, when the composition of Example 1 was used, the average value of the fluorescence intensity of keratin removing ability was 45.775% after 1 week of use, 50.475% after 2 weeks of use, 64.313% after 4 weeks of use, (P < 0.05). Example 2 significantly reduced (p <0.05) from 44.638% after 1 week of use, 50.664% after 2 weeks of use and 63.845% after 4 weeks of use, whereas Example 3 was 44.883% after 1 week of use, 50.662 %, And 63.112% after 4 weeks of use (p <0.05).

그에 비해, 비교예 1은 Intensity 값이 사용 1주 후 39.511%, 사용 2주 후 49.929%, 사용 4주 후 56.569% 유의하게 감소(p<0.05)하였고, 비교예 2는 사용 1주 후 33.215%, 사용 2주 후 49.626%, 사용 4주 후 56.403% 유의하게 감소(p<0.05)하였으며, 비교예 3은 사용 1주 후 36.167%, 사용 2주 후 49.282%, 사용 4주 후 53.405% 유의하게 감소(p<0.05)하였다. In contrast, in Comparative Example 1, the Intensity value was significantly reduced (p <0.05) after 39.51% of the first week, 49.929% after 2 weeks, 56.569% , 49.626% at 2 weeks after use, 56.403% at 4 weeks after use, and 36.167% at 1 week after use, 49.282% at 2 weeks after use, 53.405% after 4 weeks of use (P < 0.05).

실시예나 비교예의 조성물을 도포하지 않은 경우의 Intensity 값은 사용 전과 비교하여 사용 1주 후 41.908%, 사용 2주 후 49.730%, 사용 4주 후 51.790% 유의하게 감소(p<0.05)하였다.Intensity values without application of the compositions of the examples and the comparative examples were significantly reduced (p <0.05) by 41.908% after 1 week, 49.730% after 2 weeks, and 51.790% after 4 weeks of use, respectively.

실시예 1 내지 3은 무도포와 비교하여 사용 전과 사용 1주 후, 사용 2주 후, 사용 4주 후에 유의한 차이(p<0.05)를 나타냈으며, 비교예 1 내지 3과 비교하여도 유의한 차이(p<0.05)를 나타냈다. 특히 사용 4주 후에는, 실시예 1 내지 3의 Intensity 감소율이 무도포와 비교하여 약 11.3% 내지 약 12.5% 높았고, 비교예 1 내지 3과 비교하여도 약 6.5% 내지 10.9% 높았다. 이는 본원발명에 따른 실시예의 각질 박리능이 통상적인 턴오버 주기인 4주 후 시점에 가장 뚜렷한 효과를 나타낸다는 것을 보여준다.Examples 1 to 3 showed a significant difference (p < 0.05) before use, after 1 week of use, after 2 weeks of use, after 4 weeks of use, and significant differences compared to Comparative Examples 1 to 3 (p < 0.05). In particular, after 4 weeks of use, the intensity reduction rates of Examples 1 to 3 were about 11.3% to about 12.5% higher than those of the non-coated type, and about 6.5% to 10.9% higher than those of Comparative Examples 1 to 3. This shows that the exfoliating ability of the embodiment according to the present invention shows the most pronounced effect at the point of 4 weeks after the ordinary turnover cycle.

또한 상기 표 11에 나타냈듯이, 각질 박리능 평가에서 개선된 시험 대상자 수는 실시예 1의 조성물 사용 시 사용 전과 비교하여 사용 1주 후, 사용 2주 후에 100%로 매우 높은 비율이었다. 그리고 실시예 2와 실시예 3의 조성물도 사용 전과 비교하여 사용 1주 후 개선된 시험 대상자 수가 각각 100%와 95.6%로 매우 높은 비율을 보였다.As shown in Table 11, the number of subjects to be improved in the evaluation of keratin peel ability was as high as 100% after one week of use and two weeks after use as compared with before using the composition of Example 1. Also, the composition of the compositions of Example 2 and Example 3 showed a very high ratio of 100% and 95.6%, respectively, after 1 week of use compared to before use.

도 3은 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물의 각질 박리능을 알아보기 위하여 실시예 1을 도포한 부위와 무도포 부위의 각질을 형광 염색한 후 시료를 도포하여 형광 촬영한 것으로서, 형광이 진하게 나타나는 것은 상대적으로 각질 박리가 잘 일어나지 않은 것을 의미한다. 실시예 1의 조성물 사용 시 무도포 시와 비교하여 사용 1주 후 형광강도가 눈에 띄게 감소함을 도 3을 통해 확인할 수 있다.FIG. 3 is a photograph showing fluorescence images obtained by applying fluorescent dyes to the keratin materials of the area coated with Example 1 and the non-coated area, and then irradiating the sample with fluorescence to examine the exfoliation performance of the external composition for skin according to the present invention. It means that the exfoliation does not occur relatively well. It can be seen from FIG. 3 that the fluorescence intensity of the composition of Example 1 is significantly reduced after one week of use compared to non-application.

따라서, 표 10 내지 표 11, 도 3의 결과를 통해, 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드 및 소듐 락테이트를 함유하는 실시예 1 내지 3의 조성물을 사용할 경우, 무도포 시보다 피부 각질 박리능이 뛰어남을 알 수 있었다. 또한 상기 실시예 1 내지 3은 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드 대신 다른 콩 유래 펩타이드를 함유한 비교예 1 및 비교예 3, 그리고 소듐 락테이트 대신 포타슘 락테이트를 함유한 비교예 2보다도 각질 박리능이 우수하고, 특히 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드를 0.01 중량% 및 소듐 락테이트를 10 중량% 함유하는 실시예 1의 각질 박리능이 가장 우수함을 알 수 있었다. 이로써 본 발명에 따른 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드 및 소듐 락테이트를 함유하는 피부 외용제 조성물은 각질 박리능이 우수하여 피부 각질 턴오버 촉진 효과가 뛰어남을 확인하였다.Therefore, the results of Tables 10 to 11 and FIG. 3 show that when the compositions of Examples 1 to 3 containing the Jeju peanut derived polypeptide and sodium lactate were used, there was. In addition, the above Examples 1 to 3 are superior to Comparative Examples 1 and 3 containing peptides derived from other soybean peptides in place of the Jeju peanut derived polypeptide, and to Comparative Example 2 containing potassium lactate in place of sodium lactate, In particular, it was found that the peel-off performance of Example 1 containing 0.01% by weight of peach-derived peach-derived polypeptide and 10% by weight of sodium lactate was the best. As a result, it was confirmed that the composition for external application for skin containing the peanut-derived peptides and sodium lactate according to the present invention is excellent in the exfoliating ability of the keratin and promotes the skin horny turnover.

[시험예 6] 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드의 아미노산 분석[Test Example 6] Amino acid analysis of polypeptides derived from Jeju pea

상기 참고예 1에서 제조한 최종 파우더 형태의 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드에 포함된 아미노산 성분을 Ultra Performance Liquid Chromatography(Waters UPLC H-Class, Waters Co. Ltd., USA)로 분석하였다.The amino acid components contained in the final powder-form Jeju pea derived polypeptide prepared in Referential Example 1 were analyzed by Ultra Performance Liquid Chromatography (Waters UPLC H-Class, Waters Co. Ltd., USA).

상기 UPLC로 분석된 크로마토그램은 도 4에 나타내었으며, 상기 아미노산 분석에 따른 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드의 아미노산 함량은 다음 표 12와 같았다. 이를 백분율로 환산한 그래프는 도 5에 나타내었다.The chromatograms analyzed by the UPLC are shown in FIG. 4, and the amino acid contents of the peptides derived from Jeju pea kwon according to the amino acid analysis were as shown in Table 12 below. FIG. 5 shows a graph of the percentage conversion.

아미노산amino acid 함량
(μg/mg)
content
(μg / mg)
IsoleucineIsoleucine 9.189.18 PhenylalaninePhenylalanine 7.307.30 TyrosineTyrosine 5.085.08 MethionineMethionine 5.065.06 Glutamic acidGlutamic acid 4.824.82 LeucineLeucine 4.574.57 SerineSerine 3.673.67 AlanineAlanine 3.573.57 LysineLysine 2.992.99 ArginineArginine 2.882.88 GlycineGlycine 2.672.67 TheanineTheanine 2.602.60 AsparagineAsparagine 2.552.55 Aspartic acidAspartic acid 2.432.43 TryptophanTryptophan 2.322.32 ProlineProline 2.282.28 HistidineHistidine 1.601.60 GlutamineGlutamine 0.750.75 CystineCystine 0.730.73 GABAGABA 0.680.68 ValineValine 0.230.23 총 함량Total content 67.9667.96

상기 표 12와 도 5의 결과를 통해, 아이소루신(13.5%)과 페닐알라닌(10.7%)이 10 μg/mg 이상의 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드에서 가장 풍부함을 확인하였다.From the results shown in Table 12 and FIG. 5, it was confirmed that isoleucine (13.5%) and phenylalanine (10.7%) were the most abundant in the peptides derived from Jeju peanut over 10 μg / mg.

또한, 상기 아미노산 분석 결과에 따르면, 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드는 국내산 다른 품종의 콩에 비해, 아이소루신이 매우 풍부한 것으로 파악된다. 문헌 [국내산 및 제초제 내성 콩의 단백질 조성 분석(Chun Hua Wei et al., Protein Composition of Domestic and Glyphosate-Tolerant Soybean, Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition v.35 no.4, 2006, pp.470 - 475)]에 기재된 풍산콩의 아미노산 조성은 글루타민이 가장 풍부하고(15.54%), 그 다음에 페닐알라닌(9.00%), 글리신(8.50%) 순이다. 그리고 이 문헌에는 다른 국내산 콩인 황금콩과 두유콩의 아미노산 조성비도, 트립토판과 프롤라민을 제외하고는 풍산콩과 유사한 것으로 기재되어 있다. 이에 비해 본원발명에 따른 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드는 글루타민은 1.1%로 함량이 낮은 반면, 아이소루신은 국내산 다른 품종에 비해 월등히 뛰어난 13.5%의 함량을 나타냈다.According to the above amino acid analysis results, it is understood that the polypeptide of Jeju alpine root is very rich in isoleucine as compared with other bean of domestic varieties. Analysis of Protein Composition of Domestic and Herbicide Resistant Soybean (Chun Hua Wei et al., Protein Composition of Domestic and Glyphosate-Tolerant Soybean , Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition v.35 no.4, 2006, pp. 470 - 475), the amino acid composition of the peonies is richest in glutamine (15.54%), followed by phenylalanine (9.00%) and glycine (8.50%). In this document, the amino acid composition ratio of the other domestic soybean such as golden brown bean and soybean soy bean is also described as being similar to that of poison soybean except for tryptophan and pyrrolamine. In contrast, according to the present invention, the content of glutamine was low in 1.1% of the peptides derived from Jeolla peat, while the content of isoleucine was 13.5%, which is superior to other domestic varieties.

[시험예 7] 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드의 디펩타이드 분석[Test Example 7] Dipeptide analysis of polypeptides derived from Jeju kelp

상기 참고예 1에서 제조한 최종 파우더 형태의 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드를 전처리한 후, LC-ESI-MS를 통해 디펩타이드 이온 분석을 실시하였다. 1.5ml 유리바이알에 1mg 시료당 1ml의 증류수를 1,000ppm 넣어 10분간 초음파 처리(sonication)하고, 13,000rpm, 4℃에서 20분간 원심분리한 뒤, 상층액 100μl를 취하여 분석하였다. 상기 전처리된 상층액을 Liquid Chromatography Mass Spectrometry(Thermo Q Exaxtive Plus, Thermo Fisher Scientific, USA)를 이용하여 분석하였다.The final powder-form Jeju pea-derived polypeptide prepared in Referential Example 1 was pretreated and analyzed for peptide ions by LC-ESI-MS. 1 ml of 1 ml of distilled water per 1,000 ml of the sample was added to a 1.5 ml glass vial, sonicated for 10 minutes, centrifuged at 13,000 rpm at 4 ° C for 20 minutes, and 100 μl of the supernatant was analyzed. The pretreated supernatant was analyzed by Liquid Chromatography Mass Spectrometry (Thermo Q Exxtive Plus, Thermo Fisher Scientific, USA).

상기 LC-ESI-MS에 의해 분석된 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드의 총 이온 전류는 도 6a에 나타내었다. 이 총 이온 전류로부터 m/z 231.16942 내지 231.17061 범위의 Leu/Val 관련 디펩타이드 이온을 추출하였다. 그 결과는 도 6b에 나타내었으며, 추출된 Leu/Val 관련 디펩타이드 이온 함량은 하기 표 5에 나타내었다. Val-Ile과 Val-Leu은 Ile-Val의 표준품을 이용하여 상대적으로 정량하였다.The total ionic current of the Jeju pea derived polypeptides analyzed by the LC-ESI-MS is shown in FIG. 6A. From this total ion current, Leu / Val-associated dipeptide ions in the range of m / z 231.16942 to 231.17061 were extracted. The results are shown in FIG. 6B, and the extracted Leu / Val-related peptide ion content is shown in Table 5 below. Val-Ile and Val-Leu were relatively quantified using Ile-Val standards.

RTRT [M+H][M + H] &lt; ++ IdentificationIdentification Peak areaPeak area Concentration (μg/ml)Concentration (μg / ml) 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드 중 함량(%)Content (%) of polypeptides derived from Jeju peanut 2.33 2.33 231.17047231.17047 Ile-ValIle-Val 1.092E+081.092E + 08 0.25 0.25 0.0025 0.0025 2.70 2.70 231.16948231.16948 Val-IleVal-Ile 2.723E+082.723E + 08 0.57 0.57 0.0057 0.0057 3.10 3.10 231.17039231.17039 Val-LeuVal-Leu 5.214E+085.214E + 08 1.06 1.06 0.0106 0.0106

상기 이온 분석을 통해, 본 발명에 따른 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드에는 Leu-Val 디펩타이드 군의 일종인 Val-Leu, Val-Ile과 Ile-Val 디펩타이드가 각각 106, 57, 25 ppm으로 고농도 함유되어 있음을 확인하였다.Through the ion analysis, it was confirmed that the Val-Leu, Val-Ile and Ile-Val dipeptides, which are one kind of the Leu-Val dipeptide group, are contained at a high concentration of 106, 57 and 25 ppm, respectively Respectively.

Claims (7)

제주푸른콩(학명: Glycine max, 일반명: soybean, 품종명: Pureunkong) 유래 폴리펩타이드(polypeptide) 및 소듐 락테이트(sodium lactate)를 유효성분으로 함유하는 피부 각질 턴오버 촉진용 화장료 조성물.A cosmetic composition for accelerating horny turnover comprising as an active ingredient a polypeptide derived from Jeju alpine ( Glycine max , generic name: Pureunkong, variety name: Pureunkong) and sodium lactate. 제 1항에 있어서, 상기 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드는 3,000Da 미만의 평균 분자량을 갖는 저분자량 펩타이드임을 특징으로 하는, 피부 각질 턴오버 촉진용 화장료 조성물.The cosmetic composition for promoting skin horny turnover according to claim 1, wherein the peptides derived from the Jeolla peat is a low molecular weight peptide having an average molecular weight of less than 3,000 Da. 제 2항에 있어서, 상기 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드는 제주푸른콩을 고초균(Bacillus subtilis)으로 액상 발효한 뒤, 초미세 여과 공정을 통해 얻어진 것임을 특징으로 하는, 피부 각질 턴오버 촉진용 화장료 조성물.[Claim 3] The cosmetic composition for accelerating skin keratinocyte turnover according to claim 2, wherein the Jeolla peat derived polypeptide is obtained by fermenting Jeju peanut with Bacillus subtilis in liquid phase followed by ultrafiltration. 제 1항에 있어서, 상기 제주푸른콩 유래 폴리펩타이드의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 0.000001 내지 5 중량%임을 특징으로 하는, 피부 각질 턴오버 촉진용 화장료 조성물.The cosmetic composition for accelerating horny keratinous turnover according to claim 1, wherein the content of the peanut derived peptides is 0.000001 to 5 wt% based on the total weight of the composition. 제 1항에 있어서, 상기 소듐 락테이트의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 0.000001 내지 20 중량%임을 특징으로 하는, 피부 각질 턴오버 촉진용 화장료 조성물.The cosmetic composition for promoting skin horny turnover according to claim 1, wherein the content of sodium lactate is 0.000001 to 20% by weight based on the total weight of the composition. 제주푸른콩(학명: Glycine max, 일반명: soybean, 품종명: Pureunkong) 유래 폴리펩타이드(polypeptide) 및 소듐 락테이트(sodium lactate)를 유효성분으로 함유하는 메이크업 균일도 개선용 화장료 조성물.A cosmetic composition for improving make-up uniformity, comprising as an active ingredient, a polypeptide derived from Jeju alpine ( Glycine max , generic name: Pureunkong, variety name: Pureunkong) and sodium lactate. 제주푸른콩(학명: Glycine max, 일반명: soybean, 품종명: Pureunkong) 유래 폴리펩타이드(polypeptide) 및 소듐 락테이트(sodium lactate)를 유효성분으로 함유하는 피부결, 피부톤, 및 투명도 개선용 화장료 조성물.A cosmetic composition for improving skin texture, skin tone, and transparency, comprising as an active ingredient, a polypeptide derived from Jeju alpaca (generic name: Glycine max , generic name: Pureunkong, variety name: Pureunkong) and sodium lactate.
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