KR20190035657A - Manufacturing method of solid-type starter of Saccharomyces cerevisiae Y283 - Google Patents

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여수환
백성열
최한석
강지은
정석태
문지영
백창호
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대한민국(농촌진흥청장)
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Abstract

The present invention relates to a method of optimizing the production of a solid-type starter using Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P). More specifically, the present invention has identified the following as optimal conditions for producing the solid-type starter of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P): culturing S. cerevisiae Y283 in an YPD medium at 30°C for 24 hours at a stirring rate of 150 rpm produced the highest degree of growth and viable cell count. Thus, the solid-type starter optimization conditions of the present invention may be beneficially used in a production method of the solid-type starter of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P).

Description

사카로마이세스 세르비지애 Y283의 고체종균 제조방법{Manufacturing method of solid-type starter of Saccharomyces cerevisiae Y283}{Manufacturing method of solid-type starter of Saccharomyces cerevisiae Y283} of Saccharomyces cerevisiae Y283}

본 발명은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P)을 이용한 고체종균 제조의 최적화 방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method of optimizing the production of solid seeds using Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P).

세계의 각국에는 그 지역의 기후, 풍토 및 습관에 따른 지방 고유의 술, 즉 민속주, 전통주 또는 지역 특산주라는 특유의 술이 전해져 오고 있다. 우리나라의 경우 탁주(막걸리), 약주 및 증류주 등으로 불리는 전통주가 오래전부터 이어져 내려오고 있다. 탁주(막걸리)는 곰팡이나 효모를 곡류에 배양시켜 만든 누룩을 이용하여 발효시켜 만든 발효주의 일종으로, 약주 및 증류주보다 식이섬유 및 생리활성 물질이 다량으로 함유되어 있어, 영양학적 가치가 높다. Each country in the world has been handed out unique liquor, which is local alcoholic beverages, such as traditional alcoholic beverages, traditional alcoholic beverages or regional beverages, depending on the climate, climate and customs of the area. In Korea, traditional wine called "takju" (makgeolli), yakju and distilled liquor has been passed down for a long time. Takju (makgeolli) is a type of fermented soybean fermented by using yeast made by cultivating fungi or yeast in cereals. It has higher nutritional value because it contains more dietary fiber and physiologically active substances than yakju and distilled liquor.

일반적으로 탁주 발효에 사용되는 균주로는 아스퍼질러스(Aspergillus) 속, 사카로마이세스(Saccharomyces) 속, 바실러스(Bacillus) 속, 락토바실러스(Lactobacillus) 속 등이 있으며, 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae)는 자낭균류에 속하는 대표적인 효모로, 빵효모(baker’s yeast)나 맥주효모(brewery yeast)를 비롯하여, 양조에 사용하는 효모의 대부분은 이 종의 근연이라고 할 수 있다.In general, the strains used for Takju fermentation include Aspergillus, Saccharomyces, Bacillus, and Lactobacillus, and Saccharomyces cerevisiae ( Saccharomyces cerevisiae) is a typical yeast belonging to the acanthaceous fungus. Most yeasts used for brewing, including baker's yeast and brewery yeast, are related to this species.

앞서 말한 바와 같이 탁주는 우리나라의 전통주로 영양학적 가치가 높음에도 불구하고, 대표적인 주류로 자리 잡지 못하고 있는 실정이며, 최근 주류에 대한 소비자의 욕구가 다양화되고, 고품질의 주류를 찾는 경향이 강해짐에 따라 독특한 향과 맛을 내는 우수한 종균 개발의 필요성이 요구되고 있다.As mentioned above, despite the high nutritional value of Korean traditional liquor, Takju is not a typical mainstream. Recently, consumers' desire for liquor has diversified and the tendency to find high quality liquor has become stronger. Accordingly, there is a demand for development of superior seeds that have unique flavors and flavors.

이에, 많은 연구자들이 탁주의 기호도 및 품질을 향상시키기 위한 연구를 진행하고 있다. 그러나, 기존의 탁주 관련 연구 내용은 주로 탁주 원료 및 누룩의 종류에 관한 내용이 대부분이었고, 탁주 발효 관련 효모에 관한 연구는 거의 이뤄지지 않았다(KOREAN J. FOOD SCI. TECHNOL. Vol. 42, No. 1, pp. 56~62, 2010).Therefore, many researchers are conducting researches to improve the taste and quality of Takju. However, most of the existing research on Takju has been mainly concerned with the types of Takju raw materials and yeast, and research on yeast related to Takju fermentation has been rarely conducted (KOREAN J. FOOD SCI. TECHNOL. , pp. 56-62, 2010).

최근, 우수하고 일정한 발효능을 갖으며, 향이나 맛을 증진시킬 수 있는 효모에 관한 관심이 대두되며, 향 또는 풍미에 우수한 특성을 갖고, 일정한 발효능을 유지하는 효모를 선별하여, 발효를 수행함으로써 우수한 발효주를 생산하고자 하는 연구에 많은 관심이 모아지고 있다.In recent years, attention has been focused on yeast which has excellent and constant efficacy, can improve flavor and taste, has a characteristic of excellent flavor or flavor, selects yeasts that maintain a constant efficacy, and performs fermentation The research on producing excellent fermented beans has attracted much attention.

이에, 본 발명자들은 일정한 발효능을 유지하며, 우수한 향기 생성능을 가진 효모를 선별하여, 대량생산을 위한 제조방법 및 최적조건을 찾고자 연구하던 중, 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P)을 이용한 고체종균 제조의 최적화 방법을 확립함으로써, 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the inventors of the present invention have found that when yeasts having a constant ability to produce an excellent flavor-producing ability are selected, and a preparation method and an optimum condition for mass production are studied, saccharomyces cerevisiae Y283 ( KACC93238P), thereby completing the present invention.

본 발명의 목적은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P)을 이용한 고체종균 제조의 최적화 방법을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a method of optimizing solid seed production using Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P).

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P)을 교반속도 120 내지 180 rpm, 온도 27 내지 32℃에서 24 내지 30시간 동안 배양하는 단계를 포함하는 사카로마이세스 세르비지애 Y283 고체종균 제조방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a method for culturing Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) at a stirring speed of 120 to 180 rpm at a temperature of 27 to 32 DEG C for 24 to 30 hours A method for producing Saccharomyces cerevisiae Y283 solid seeds is provided.

또한, 본 발명은 본 발명의 제조방법으로 제조된 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P)의 고체종균을 제공한다.Further, the present invention provides a solid seed of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) produced by the production method of the present invention.

또한, 본 발명은 본 발명의 제조방법으로 제조된 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P) 종균을 곡류에 접종시킨 후 발효시키는 단계를 포함하는 탁주 제조방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for preparing Takju, which includes fermenting a cereal strain of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) produced by the method of the present invention into cereals.

또한, 본 발명은 수탁번호 KACC93238P로 기탁된 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283 균주를 제공한다.The present invention also provides Saccharomyces cerevisiae strain Y283 deposited under Accession No. KACC93238P.

본 발명은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P)을 이용한 고체종균 제조의 최적화 방법에 관한 것으로, 구체적으로 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P)의 고체종균을 제조하기 위해 최적조건을 확인한 결과, S. cerevisiae Y283 종균을 YPD 배지에서 교반속도 150 rpm으로 30℃에서 24시간 배양하는 것이 생육도 및 생균수가 가장 높음을 확인함으로써, 본 발명의 고체종균 최적화 조건이 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P) 고체종균 제조방법으로 유용하게 이용될 수 있다.The present invention relates to a method for optimizing the production of solid seeds using Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P), and more particularly to a method for optimizing the production of solid seeds of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) It was confirmed that the S. cerevisiae Y283 strain was cultured in YPD medium at a stirring rate of 150 rpm at 30 ° C for 24 hours to obtain the highest degree of viability and viable cell count, This saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) can be usefully used as a solid seed production method.

도 1은 자퍼멘터(Jar-fermentor)를 이용한 효모 배양을 나타낸 도이다.
도 2는 배지에 따른 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P) 효모의 생육도 및 생균수를 나타낸 도이다.
도 3은 교반속도에 따른 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P) 효모의 생육도 및 생균수를 나타낸 도이다.
도 4는 배양 온도에 따른 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P) 효모의 생육도 및 생균수를 나타낸 도이다.
도 5는 배양 시간에 따른 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P) 효모의 생육도를 나타낸 도이다.
1 is a diagram showing a yeast culture using a Jar-fermentor.
FIG. 2 is a diagram showing the growth rate and viable cell count of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) yeast according to the medium.
FIG. 3 is a diagram showing the growth rate and viable cell count of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) yeast according to the stirring speed.
FIG. 4 is a diagram showing the growth rate and viable cell count of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) yeast according to the culture temperature.
FIG. 5 is a graph showing the growth of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) yeast according to the incubation time.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P)을 교반속도 120 내지 180 rpm, 온도 27 내지 32℃에서 24 내지 30시간 동안 배양하는 단계를 포함하는 사카로마이세스 세르비지애 Y283 고체종균 제조방법을 제공한다.The present invention relates to a method for producing Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P), which comprises culturing Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) at a stirring speed of 120 to 180 rpm and a temperature of 27 to 32 ° C for 24 to 30 hours, Y283 solid seed culture.

상기 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283은 본 발명자가 전통 발효식품에서 분리 균주로 2015년 6월 15일자로 국립농업과학원에 기탁번호 KACC93238P로 기탁되어 있는 균주이다.Saccharomyces cerevisiae Y283 is a strain which has been deposited with the National Institute of Agricultural Science and Technology under accession number KACC93238P on June 15, 2015, as a strain isolated from traditional fermented foods.

상기 배양은 MEA, YPD, YM으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 배지를 사용하는 것이 바람직하며, YPD 배지를 사용하는 것이 가장 바람직하다.It is preferable to use any medium selected from the group consisting of MEA, YPD, and YM, and it is most preferable to use a YPD medium.

상기 교반속도는 120 내지 180 rpm인 것이 바람직하며, 150 내지 160 rpm인 것이 더욱 바람직하고, 150 rpm인 것이 가장 바람직하다.The stirring speed is preferably 120 to 180 rpm, more preferably 150 to 160 rpm, and most preferably 150 rpm.

상기 배양 온도는 27 내지 32℃인 것이 바람직하며, 30 내지 31℃인 것이 더욱 바람직하고, 30℃인 것이 가장 바람직하다. 상기 배양 온도가 27℃ 미만이거나 32℃ 초과인 경우 오히려 사카로마이세스 세르비지애 Y283 종균의 생육도가 떨어질 수 있어 좋지 않다.The incubation temperature is preferably 27 to 32 ° C, more preferably 30 to 31 ° C, and most preferably 30 ° C. If the incubation temperature is less than 27 캜 or more than 32 캜, the degree of growth of Saccharomyces cerevisiae Y283 strain may be lowered.

상기 배양은 24 내지 30시간 동안 배양하는 것이 바람직하며, 24내지 26시간 배양하는 것이 더욱 바람직하고, 24시간 배양하는 것이 가장 바람직하다. 상기 배양 시간이 24시간 미만이거나 30시간 초과인 경우 오히려 사카로마이세스 세르비지애 Y283 종균의 생육도가 떨어질 수 있어 좋지 않다.The culture is preferably performed for 24 to 30 hours, more preferably for 24 to 26 hours, and most preferably for 24 hours. If the incubation time is less than 24 hours or more than 30 hours, the degree of growth of Saccharomyces cerevisiae Y283 strain may be lowered.

상기 배양은 skim milk, glutamate, lactose, trehalose 및 dextrin으로 구성된 부형제로부터 선택되는 어느 하나를 첨가하여 배양할 수 있으며, 플라스틱, 일반비닐, 알루미늄 백 및 진공비닐 백과 같은 포장지에 보관하는 것이 바람직하다.The culture may be carried out by adding any one selected from skim milk, glutamate, lactose, trehalose and dextrin, and it is preferably stored in a wrapping paper such as plastic, ordinary vinyl, aluminum bag and vacuum plastic bag.

상기 고체종균 제조방법에 배양된 효모를 건조시키는 단계를 더 포함할 수 있다.And drying the yeast cultured in the solid-seed-producing method.

본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 전통 발효식품에서 배양 생육능이 뛰어나고 알코올 및 향기 생성능이 우수한 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P)을 탁주 제조용 효모로 선별하였으며, 선별된 S. cerevisiae Y283의 고체종균을 제조하기 위해 최적조건을 확인한 결과, S. cerevisiae Y283 종균을 YPD 배지에서 교반속도 150 rpm으로 30℃에서 24시간 배양하는 것이 생육도 및 생균수가 가장 높음을 확인함으로써(도 2 내지 도 5 참조), 본 발명의 고체종균 최적화 조건이 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P) 고체종균 제조방법으로 유용하게 이용될 수 있다.In a specific example of the present invention, the present inventors selected Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P), which is excellent in the ability to grow and grow in traditional fermented foods and has an excellent alcohol and aroma-producing ability, as yeast for producing Takju, The optimum condition for the production of S. cerevisiae Y283 was determined by culturing S. cerevisiae Y283 strain on YPD medium at a stirring rate of 150 rpm at 30 ° C for 24 hours to determine the highest degree of viability and viable cell count 2 to 5), the solid seed microorganism optimization conditions of the present invention can be usefully employed in the production of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) solid seeds.

또한, 본 발명은 본 발명의 제조방법으로 제조된 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P)의 고체종균을 제공한다.Further, the present invention provides a solid seed of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) produced by the production method of the present invention.

또한, 본 발명은 본 발명의 제조방법으로 제조된 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P) 종균을 곡류에 접종시킨 후 발효시키는 단계를 포함하는 탁주 제조방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for preparing Takju, which includes fermenting a cereal strain of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) produced by the method of the present invention into cereals.

상기 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P)의 고체종균은 배양 생육능이 뛰어나고 알코올 및 향기 생성능이 우수한 것을 특징으로 한다.The solid seeds of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) are characterized by excellent culture growth ability and excellent alcohol and aroma-producing ability.

상기 곡류는 쌀, 보리, 밀, 호밀, 귀리, 조, 기장, 수수 및 메밀쌀과 같은 곡류; 옥수수, 고구마와 같은 서류; 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.The cereal may be cereal such as rice, barley, wheat, rye, oats, barley, millet, sorghum and buckwheat rice; Papers such as corn, sweet potatoes; And mixtures thereof.

본 발명은 전통 발효식품에서 배양 생육능이 뛰어나고 알코올 및 향기 생성능이 우수한 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(KACC93238P)의 고체종균을 제조하기 위해 최적조건을 확인한 결과, S. cerevisiae Y283 종균을 YPD 배지에서 교반속도 150 rpm으로 30℃에서 24시간 배양하는 것이 생육도 및 생균수가 가장 높음을 확인함으로써(도 2 내지 도 5 참조), 본 발명의 고체종균 최적화 조건이 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P) 고체종균 제조방법 및 이를 이용하여 제조되는 고체종균 및 탁주로 유용하게 이용될 수 있다.The present inventors have found that the optimum conditions for the production of solid seeds of Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P), which has excellent ability to grow and grow in traditional fermented foods and has excellent alcohol and aroma-producing ability, were found to be S. cerevisiae Y283 Were cultured in a YPD medium at a stirring speed of 150 rpm at 30 DEG C for 24 hours to determine the highest degree of viability and the number of viable cells (see FIGS. 2 to 5). Thus, the solid seed- Jiao Y283 (KACC93238P) solid seed culture method and solid seeds and takju prepared by using the same.

또한, 본 발명은 수탁번호 KACC93238P로 기탁된 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283 균주를 제공한다.The present invention also provides Saccharomyces cerevisiae strain Y283 deposited under Accession No. KACC93238P.

상기 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283은 본 발명자가 전통 발효식품에서 분리 균주로 2015년 6월 15일자로 국립농업과학원에 기탁번호 KACC93238P로 기탁되어 있는 균주이다.Saccharomyces cerevisiae Y283 is a strain which has been deposited with the National Institute of Agricultural Science and Technology under accession number KACC93238P on June 15, 2015, as a strain isolated from traditional fermented foods.

이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples and Experimental Examples.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의하여 한정되는 것은 아니다.However, the following Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, and the contents of the present invention are not limited by the following Examples and Experimental Examples.

<실시예 1> 탁주 제조용 효모 종균 선별<Example 1> Yeast seed selection for producing takju

전통 발효식품에서 분리한 효모 7종중에서 배양 생육능이 뛰어나고 알코올 및 향기 생성능이 우수한 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283(수탁번호 KACC93238P)을 탁주 제조용 효모로 최종 선정하였으며, 2015년 6월 15일에 수탁번호 KACC93238P로 국립농업과학원에 기탁하였다. 상기 효모를 YPD배지에 계대 배양하였으며, 자퍼멘터(Jar-fermentor)를 사용하여 대량 배양하였다. Saccharomyces cerevisiae Y283 (Accession No. KACC93238P), which is excellent in the growth and growth ability and excellent in alcohol and aroma production ability among seven yeasts isolated from traditional fermented foods, was finally selected as a yeast for producing Takju, And deposited with the National Academy of Sciences on the 15th day under accession number KACC93238P. The yeast was subcultured in a YPD medium and cultured in a large amount using a Jar-fermentor.

<실험예 1> 탁주 제조용 효모 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P)을 이용한 고체종균 제조 최적 배양조건 확인<Experimental Example 1> Preparation of solid seeds using yeast Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) for preparing Takju

상기 <실시예 1>에서 선별된 S. cerevisiae Y283의 고체종균 제조 최적조건을 규명하기 위하여, 생육에 적합한 배양조건을 확인하였다.In order to identify the optimal conditions for the production of the solid seeds of S. cerevisiae Y283 selected in Example 1, culturing conditions suitable for growth were confirmed.

<1-1><1-1> S. cerevisiae S. cerevisiae Y283 효모 배양을 위한 액체배지 선정 Y283 Selection of liquid medium for yeast culture

S. cerevisiae Y283 효모 배양의 최적화 조건을 찾기 위해, 배지에 따른 생육능 및 생균수를 분석하였다. In order to find optimal conditions for S. cerevisiae Y283 yeast culture, viability and number of viable cells were analyzed by media.

구체적으로, 하기 표 1의 MEA, YPD 및 YM 배지에 따라 자퍼멘터(Jar-fermentor)로 배양하였으며, 배양조건은 4 ℓ배지에 30℃ 온도로 24시간 동안 150 rpm으로 교반하며 배양하였다. 생육도 측정은 S. cerevisiae Y283 효모를 각각 백금이로 취해, 전배양한 후, MEA, YPD 및 YM 본배양 배지에 각각 1%씩 접종하여 상기 배양조건으로 배양한 후, UV-visible spectrophotometer로 660nm에서 생육도를 측정하였다. 생균수 측정 방법은 시료 10 g을 취하여 멸균 백에 넣고 90 ㎖의 멸균 생리식염수를 가하여 균질기로 용해하고 멸균 생리식염수로 단계별로 희석한 후, PCA배지에 도말하고 나타난 균체수를 CFU/g로 표기하였다.Specifically, the cells were cultured in a Jar-fermentor according to the MEA, YPD, and YM mediums shown in Table 1 below. The culture conditions were as follows: the cells were cultured in 4 L medium at 30 ° C. for 24 hours with stirring at 150 rpm. The growth rate of S. cerevisiae Y283 yeast was platinum, pre-incubated, and then 1% of each of the cells was inoculated into MEA, YPD, and YM main culture media. The cells were cultured under the above culture conditions, Were measured. For the measurement of viable cell count, 10 g of the sample was taken in a sterilized bag, and 90 ml of sterile physiological saline was added thereto. The cell was dissolved in a homogenizer and diluted with sterilized physiological saline stepwise. Respectively.

성분ingredient 배지 조성(%)Medium composition (%) MEAMEA YMYM YPDYPD Malt extractMalt extract 33 0.30.3 -- Yeast extractYeast extract -- 0.30.3 1One PolypeptonePolypeptone -- -- 22 PeptonePeptone 0.50.5 0.50.5 -- DextroseDextrose -- 1One 22 AgarAgar 1.51.5 -- 22

그 결과 도 2에 나타난 바와 같이, S. cerevisiae Y283 효모의 생육도 및 생균수는 YPD 배지, YM 배지, MEA 배지 순으로 높았으며(도 2), 이에, 탄소원 및 질소원을 고루 갖춘 YPD 배지를 S. cerevisiae Y283 효모의 배양을 위한 최적 배지로 선정하였다.As a result, as shown in FIG. 2, S. cerevisiae Y283 growth of yeast and bacteria are also YPD medium, YM culture medium, MEA medium was a higher order (FIG. 2), and thus, the YPD culture medium with a carbon source and a nitrogen source evenly S were selected as the optimal medium for the cultivation of S. cerevisiae Y283 yeast.

<1-2><1-2> S. cerevisiae S. cerevisiae Y283 효모 배양을 위한 액체배양 교반속도 선정 Y283 Selection of liquid culture stirring speed for yeast culture

효모 종균화를 만들기 위해서는 액체배양에서 균체의 생성량이 많아야 하며, 이를 위해 풍부한 배지와 더불어 교반속도도 매우 중요한 인자로 작용한다. 따라서, S. cerevisiae Y283 효모를 액체배양할 때, 발효조의 교반속도에 따른 균주의 생육도 및 생균수를 확인하였다. In order to produce yeast seed culture, the amount of cells produced in the liquid culture should be high. For this, the agitation speed is also an important factor in addition to the abundant culture medium. Therefore, when the yeast of S. cerevisiae Y283 was liquid cultured, the growth of the strain and the viable cell count were confirmed according to the stirring speed of the fermenter.

구체적으로, S. cerevisiae Y283 효모를 자퍼멘터를 이용하여 배양하였으며, 배양조건은 YPD 배지 4 ℓ에 30℃ 온도로, 각각 100, 150 및 200 rpm의 3가지 교반속도로 24시간 동안 배양하여, 실험예 <1-1>의 방법으로 이들의 생육도 및 생균수를 측정하였다. Specifically, S. cerevisiae Y283 yeast was cultivated using a zipper. The culture conditions were as follows: incubation was carried out in 4 L of YPD medium at a temperature of 30 DEG C at three stirring speeds of 100, 150 and 200 rpm for 24 hours, The viability and viable cell counts of these were measured by the method of Example <1-1>.

그 결과 도 3에서 나타난 바와 같이, 150, 100, 200 rpm 순으로 효모의 생육도 및 생균수가 높은 경향을 보였으며, 150 rpm에서 S. cerevisiae Y283 효모의 균체는 100 또는 200 rpm 배양 속도와 비교하여 1.2 내지 1.3배 이상의 균체수를 가짐을 확인하였다(도 3). 따라서, S. cerevisiae Y283 효모를 배양하기 위한 최적 교반속도를 150 rpm으로 선정하였다.As a result, as shown in FIG. 3, the growth rate of yeast and the number of viable cells tended to increase in the order of 150, 100, and 200 rpm, and the bacterial cells of S. cerevisiae Y283 yeast at 150 rpm were compared with the culture rates of 100 or 200 rpm It was confirmed that it had a cell number of 1.2 to 1.3 times or more (Fig. 3). Therefore, the optimum agitation speed for culturing S. cerevisiae Y283 yeast was selected at 150 rpm.

<1-3><1-3> S. cerevisiae S. cerevisiae Y283 효모 배양을 위한 액체배양 최적온도 선정 Y283 Optimal temperature for liquid culture for yeast culture

S. cerevisiae Y283 효모 액체배양 시, 발효조의 배양 온도에 따른 균주의 생육도 및 생균수를 확인하였다.During the liquid culture of S. cerevisiae Y283 yeast, the growth of the strain and the viable cell count were determined according to the incubation temperature of the fermenter.

구체적으로, 배양조건은 YPD 배지 4 ℓ에 발효조의 배양 온도를 25℃, 30℃ 및 37℃ 3가지로 분류하여 24시간 동안 150 rpm 교반속도로 배양한 후, 실험예 <1-1>의 방법으로 이들의 생육도 및 생균수를 각각 측정하였다.Specifically, the culture conditions were as follows: the culturing temperature of the fermenter was divided into 4 kinds of YPD medium and the cultivation temperature was set at 25 ° C., 30 ° C. and 37 ° C., and the mixture was cultured at a stirring rate of 150 rpm for 24 hours. And their viability and viable cell count were measured.

그 결과 도 4에 나타난 바와 같이, S. cerevisiae Y283 효모는 30℃에서 생육도와 생균수가 높았다(도 4). 따라서 S. cerevisiae Y283 효모는 37℃ 보다는 낮은 25℃ 내지 30℃ 영역의 온도에서 생육을 잘하는 효모이므로, 탁주 제조시 실온에서 알코올 발효를 잘할 것으로 판단된다.As a result, as shown in Fig. 4, S. cerevisiae Y283 yeast was high in viability and viable count at 30 ° C (FIG. 4). Therefore, S. cerevisiae Y283 yeast is a yeast that grows well at a temperature in the range of 25 ° C to 30 ° C, which is lower than 37 ° C. Therefore, it is judged that alcohol fermentation will be performed well at room temperature when preparing Takju.

<1-4><1-4> S. cerevisiae S. cerevisiae Y283 효모 배양을 위한 액체배양 최적 시간 선정 Y283 Optimal time for liquid culture for yeast culture

탁주 제조를 위한 S. cerevisiae Y283 효모의 배양시간에 따른 생육 최적조건을 구명하기 위해, YPD 배지 4 ℓ에 30℃ 온도에서 150 rpm 교반속도로 배양하며, 2일 동안 6시간 간격으로 배양액을 샘플링하여 생육도를 조사하였다. 생육도 측정은 상기 실험예 <1-1>의 방법으로 수행하였다.To determine optimum growth conditions of S. cerevisiae Y283 yeast for the production of Takju, cultivation was carried out at 4 ° C in YPD medium at 30 ° C and 150 rpm, and the culture was sampled at 6 hour intervals for 2 days Growth rate was investigated. The degree of growth was measured by the method of Experimental Example 1-1.

그 결과 도 5에 나타난 바와 같이, S. cerevisiae Y283 효모는 6 내지 12시간 사이 대수 증식기 때 급격하게 생육하고, 정지기인 24시간 이후부터는 큰 변화 없이 일정하게 생육을 유지함을 확인하였다(도 5).As a result, as shown in FIG. 5, it was confirmed that S. cerevisiae Y283 yeast grew rapidly during the logarithmic growth period between 6 and 12 hours, and maintained constant growth without any significant change after 24 hours as a stopper (FIG. 5).

따라서, 탁주 제조용 효모 사카로마이세스 세르비지애 Y283(KACC93238P)를 YPD배지에서 30℃, 150 rpm으로 24시간 배양하면 균주의 생육도가 높을 뿐만 아니라 균체 생성량도 많아 질 것으로 사료된다. Therefore, when yeast Saccharomyces cerevisiae Y283 (KACC93238P) for the production of Takju is cultured in YPD medium at 30 ° C and 150 rpm for 24 hours, it is expected that not only the strain will grow but also the amount of cell mass will increase.

국립농업과학원National Academy of Agricultural Sciences KACC93238PKACC93238P 2015061520150615

Claims (2)

수탁번호 KACC93238P로 기탁된 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y283를 교반속도 150 내지 155 rpm, 온도 30 내지 31℃에서 24 내지 25시간 동안 YPD 배지에서 액체배양하는 단계; 및
상기 단계에서 얻어진 액체배양액을 이용하여 탁주제조용 효모 고체종균을 제조하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세르비지애 Y283 탁주제조용 효모 고체종균 제조방법.
Liquid culture of Saccharomyces cerevisiae Y283 deposited with accession number KACC93238P in a YPD medium for 24 to 25 hours at a stirring speed of 150 to 155 rpm and a temperature of 30 to 31 DEG C; And
A process for producing yeast solid seeds for the production of saccharomyces cerevisiae Y283 takju using the liquid culture obtained in the above step, which comprises the step of producing yeast solid seeds for producing Takju.
제1항의 제조방법으로 제조된 사카로마이세스 세르비지애 Y283의 탁주제조용 효모 고체종균.

A yeast solid seed for the production of Takju of Saccharomyces cerevisiae Y283 produced by the method of claim 1.

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