KR20170045410A - Manufacturing method of solid-type starter of Saccharomyces cerevisiae Y204 - Google Patents

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최한석
강지은
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Abstract

The present invention relates to an optimized method of manufacturing a solid starter using Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P). In particular, according to a check result of an optimal condition to manufacture the solid starter of the Saccharomyces cerevisiae Y204, the growth level and the number of live bacteria are confirmed to be highest when a starter of Saccharomyces cerevisiae Y204 is cultivated in a YPD medium at 25C and 150 revolution per minute (RPM) for 24 hours. When 10% of skim milk, 1% of lactose, and 7 to 10% of trehalose are added as a filler for manufacturing the solid starter, the life rate of the starter is confirmed to increase. In drying of a solid starter of Saccharomyces cerevisiae Y204 yeast, freeze-drying exhibits less by 1.2 to 1.4 folds of the number of living bacteria than hot air drying, but exhibits the contamination level to be half. Therefore, the optimal condition for the solid starter according to the present invention can be used as a useful method of manufacturing the solid starter of Saccharomyces cerevisiae Y204.

Description

사카로마이세스 세르비지애 Y204의 고체종균 제조방법{Manufacturing method of solid-type starter of Saccharomyces cerevisiae Y204}[0001] The present invention relates to a method for producing solid seeds of Saccharomyces cerevisiae Y204 (Saccharomyces cerevisiae Y204)

본 발명은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204(KACC93237P)을 이용한 고체종균 제조의 최적화 방법에 관한 것이다.The invention my processes Sergio non jiae as Saccharomyces (Saccharomyces cerevisiae) relates to an optimized method for producing a solid seed with Y204 (KACC93237P).

세계의 각국에는 그 지역의 기후, 풍토 및 습관에 따른 지방 고유의 술, 즉 민속주, 전통주 또는 지역 특산주라는 특유의 술이 전해져 오고 있다. 우리나라의 경우 탁주(막걸리), 약주 및 증류주 등으로 불리는 전통주가 오래전부터 이어져 내려오고 있다. 탁주(막걸리)는 곰팡이나 효모를 곡류에 배양시켜 만든 누룩을 이용하여 발효시켜 만든 발효주의 일종으로, 약주 및 증류주보다 식이섬유 및 생리활성 물질이 다량으로 함유되어 있어, 영양학적 가치가 높다. Each country in the world has been handed out unique liquor, which is local alcoholic beverages, such as traditional alcoholic beverages, traditional alcoholic beverages or regional beverages, depending on the climate, climate and customs of the area. In Korea, traditional wine called "takju" (makgeolli), yakju and distilled liquor has been passed down for a long time. Takju (makgeolli) is a type of fermented soybean fermented by using yeast made by cultivating fungi or yeast in cereals. It has higher nutritional value because it contains more dietary fiber and physiologically active substances than yakju and distilled liquor.

일반적으로 탁주 발효에 사용되는 균주로는 아스퍼질러스(Aspergillus) 속, 사카로마이세스(Saccharomyces) 속, 바실러스(Bacillus) 속, 락토바실러스(Lactobacillus) 속 등이 있으며, 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae)는 자낭균류에 속하는 대표적인 효모로, 빵효모(baker’s yeast)나 맥주효모(brewery yeast)를 비롯하여, 양조에 사용하는 효모의 대부분은 이 종의 근연이라고 할 수 있다.In general, the strains used for Takju fermentation include Aspergillus, Saccharomyces, Bacillus, and Lactobacillus, and Saccharomyces cerevisiae ( Saccharomyces cerevisiae) is a typical yeast belonging to the acanthaceous fungus. Most yeasts used for brewing, including baker's yeast and brewery yeast, are related to this species.

앞서 말한 바와 같이 탁주는 우리나라의 전통주로 영양학적 가치가 높음에도 불구하고, 대표적인 주류로 자리 잡지 못하고 있는 실정이며, 최근 주류에 대한 소비자의 욕구가 다양화되고, 고품질의 주류를 찾는 경향이 강해짐에 따라 독특한 향과 맛을 내는 우수한 종균 개발의 필요성이 요구되고 있다.As mentioned above, despite the high nutritional value of Korean traditional liquor, Takju is not a typical mainstream. Recently, consumers' desire for liquor has diversified and the tendency to find high quality liquor has become stronger. Accordingly, there is a demand for development of superior seeds that have unique flavors and flavors.

이에, 많은 연구자들이 탁주의 기호도 및 품질을 향상시키기 위한 연구를 진행하고 있다. 그러나, 기존의 탁주 관련 연구 내용은 주로 탁주 원료 및 누룩의 종류에 관한 내용이 대부분이었고, 탁주 발효 관련 효모에 관한 연구는 거의 이뤄지지 않았다(KOREAN J. FOOD SCI. TECHNOL. Vol. 42, No. 1, pp. 56~62, 2010).Therefore, many researchers are conducting researches to improve the taste and quality of Takju. However, most of the existing research on Takju has been mainly concerned with the types of Takju raw materials and yeast, and research on yeast related to Takju fermentation has been rarely conducted (KOREAN J. FOOD SCI. TECHNOL. , pp. 56-62, 2010).

최근, 우수하고 일정한 발효능을 갖으며, 향이나 맛을 증진시킬 수 있는 효모에 관한 관심이 대두되며, 향 또는 풍미에 우수한 특성을 갖고, 일정한 발효능을 유지하는 효모를 선별하여, 발효를 수행함으로써 우수한 발효주를 생산하고자 하는 연구에 많은 관심이 모아지고 있다.In recent years, attention has been focused on yeast which has excellent and constant efficacy, can improve flavor and taste, has a characteristic of excellent flavor or flavor, selects yeasts that maintain a constant efficacy, and performs fermentation The research on producing excellent fermented beans has attracted much attention.

이에, 본 발명자들은 일정한 발효능을 유지하며, 우수한 향기 생성능을 가진 효모를 선별하여, 대량생산을 위한 제조방법 및 최적조건을 찾고자 연구하던 중, 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204(KACC93237P)을 이용한 고체종균 제조의 최적화 방법을 확립함으로써, 본 발명을 완성하였다. Accordingly, the inventors of the present invention have conducted studies to select a yeast having a constant ability to produce an excellent flavor-producing ability, and a production method and an optimum condition for mass production, and found that Saccharomyces by establishing an optimized method for producing a solid seed with cerevisiae) Y204 (KACC93237P), and completed the present invention.

본 발명의 목적은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204(KACC93237P)을 이용한 고체종균 제조의 최적화 방법을 제공하는 것이다.An object of the present invention my process to the non-saccharide Sergio jiae (Saccharomyces cerevisiae) to provide an optimized method for producing a solid seed with Y204 (KACC93237P).

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204(KACC93237P)를 교반속도 120 내지 180 rpm, 온도 22 내지 28℃에서 24 내지 30시간 동안 배양하는 단계를 포함하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204 고체종균 제조방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention is saccharide as MY processes Sergio non jiae (Saccharomyces cerevisiae) Y204 (KACC93237P) the agitation speed from 120 to 180 rpm, comprising for 24 to 30 hours at a temperature 22 to 28 ℃ A method for producing Saccharomyces cerevisiae Y204 solid seeds is provided.

또한, 본 발명은 본 발명의 제조방법으로 제조된 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P)의 고체종균을 제공한다.The present invention also provides a solid seed of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) produced by the method of the present invention.

또한, 본 발명은 본 발명의 제조방법으로 제조된 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 종균을 곡류에 접종시킨 후 발효시키는 단계를 포함하는 탁주 제조방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for preparing Takju, which comprises fermenting grains of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) produced by the method of the present invention into cereals.

또한, 본 발명은 수탁번호 KACC93237P로 기탁된 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y204 균주를 제공한다.The present invention also provides Saccharomyces cerevisiae strain Y204 deposited with Accession No. KACC93237P.

본 발명은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204(KACC93237P)을 이용한 고체종균 제조의 최적화 방법에 관한 것으로, 구체적으로 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y204(KACC93237P)의 고체종균을 제조하기 위해 최적조건을 확인한 결과, S. cerevisiae Y204 종균을 YPD 배지에서 교반속도 150 rpm으로 25℃에서 24시간 배양하는 것이 생육도 및 생균수가 가장 높았고, 고체종균 제조 시 부형제로 skim milk 10%, lactose 1% 및 trehalose 7 내지 10%를 각각 첨가할 경우 종균 생존율이 높아짐을 확인하였으며, S. cerevisiae Y204 효모 고체종균 건조 시 동결건조 방법이 열풍건조보다 1.2 내지 1.4배 정도 낮은 생균수를 나타냈으며, 잡균의 오염도는 2배 정도 낮음을 확인함으로써, 본 발명의 고체종균 최적화 조건이 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법으로 유용하게 이용될 수 있다.The invention my processes Sergio non jiae as Saccharomyces (Saccharomyces cerevisiae) relates to an optimized method of manufacturing a solid seed with Y204 (KACC93237P), specifically, Saccharomyces as MY processes Sergio non jiae (Saccharomyces The optimum conditions for the production of solid seeds of S. cerevisiae Y204 (KACC93237P) were determined, and it was found that S. cerevisiae Y204 strain was cultured in YPD medium at a stirring speed of 150 rpm for 24 hours at 25 ° C., When the skim milk 10%, lactose 1% and trehalose 7 ~ 10% were added as an excipient in the production of seed culture, the survival rate of the seeds was increased. When the S. cerevisiae Y204 yeast solid yeast strain was dried, the freeze- 1.4 times as much as the number of viable cell counts and confirmed that the contamination degree of the germs was about twice as low as that of the present invention, the solid seed culture optimization condition of the present invention is usefully used in the production method of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) .

도 1은 자퍼멘터(Jar-fermentor)를 이용한 효모 배양을 나타낸 도이다.
도 2는 배지에 따른 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204(KACC93237P) 효모의 생육도 및 생균수를 나타낸 도이다.
도 3은 교반속도에 따른 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 효모의 생육도 및 생균수를 나타낸 도이다.
도 4는 배양 온도에 따른 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 효모의 생육도 및 생균수를 나타낸 도이다.
도 5는 배양 시간에 따른 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 효모의 생육도를 나타낸 도이다.
도 6은 부형제 종류 및 농도에 따른 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 효모 고체종균의 저장전과 저장후의 생균수를 나타낸 도이다.
도 7은 포장 용기별로 저장한 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 효모 고체종균을 나타낸 도이다.
도 8은 효모 고체종균의 동결 건조장치 및 열풍 건조장치를 나타낸 도이다.
도 9는 건조 방법과 부형제에 따른 탁주제조용 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균의 성상을 나타낸 도이다.
도 10은 건조 방법과 부형제에 따른 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균의 생균수를 나타낸 도이다.
1 is a diagram showing a yeast culture using a Jar-fermentor.
FIG. 2 is a graph showing the activity of Saccharomyces < RTI ID = 0.0 > cerevisiae ) Y204 (KACC93237P) It is a figure showing the degree of growth and viable cell count of yeast.
FIG. 3 is a graph showing the growth rate and viable cell count of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) yeast according to the stirring speed.
FIG. 4 is a graph showing the growth rate and viable cell count of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) yeast according to the culture temperature.
Fig. 5 is a graph showing the growth of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) yeast according to the incubation time.
Fig. 6 is a graph showing the number of live bacteria before and after storage of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) yeast solid germ according to the type and concentration of the excipient.
FIG. 7 is a diagram showing Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) yeast solid seeds stored for each packaging container.
8 is a diagram showing a freeze-drying apparatus and a hot-air drying apparatus for a yeast solid-seeded bacterium.
Fig. 9 is a diagram showing the characteristics of a solid culture of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) for the production of Takju according to the drying method and the excipient.
FIG. 10 is a graph showing the number of live cells of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) solid organism according to the drying method and the excipient.

이하 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명은 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204(KACC93237P)를 교반속도 120 내지 180 rpm, 온도 22 내지 28℃에서 24 내지 30시간 동안 배양하는 단계를 포함하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204 고체종균 제조방법을 제공한다.The invention my processes Sergio non jiae as Saccharomyces (Saccharomyces cerevisiae) provides Y204 (KACC93237P) the agitation speed from 120 to 180 rpm, temperature at 22 to 28 ℃ in Saccharomyces which comprises culturing for 24 to 30 hours non-Mai processes Sergio jiae Y204 solid seed method.

상기 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204는 본 발명자가 전통 발효식품에서 분리 균주로 2015년 6월 15일자로 국립농업과학원에 기탁번호 KACC93237P로 기탁되어 있는 균주이다.Saccharide in the My process Sergio non jiae (Saccharomyces cerevisiae) Y204 is a strain that is present inventors have deposited with the National Academy of Agricultural Sciences to isolates from traditional fermented foods dated 15 June 2015 Accession to the number KACC93237P.

상기 배양은 MEA, YPD, YM로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나의 배지를 사용하는 것이 바람직하며, YPD 배지를 사용하는 것이 가장 바람직하다.It is preferable to use any medium selected from the group consisting of MEA, YPD, and YM, and it is most preferable to use a YPD medium.

상기 교반속도는 120 내지 180 rpm인 것이 바람직하며, 150 내지 160 rpm인 것이 더욱 바람직하고, 150 rpm인 것이 가장 바람직하다.The stirring speed is preferably 120 to 180 rpm, more preferably 150 to 160 rpm, and most preferably 150 rpm.

상기 배양 온도는 22 내지 28℃인 것이 바람직하며, 25 내지 26℃인 것이 더욱 바람직하고, 25℃인 것이 가장 바람직하다. 상기 배양 온도가 22℃ 미만이거나 28℃ 초과인 경우 오히려 사카로마이세스 세르비지애 Y204 종균의 생육도가 떨어질 수 있어 좋지 않다.The incubation temperature is preferably 22 to 28 ° C, more preferably 25 to 26 ° C, and most preferably 25 ° C. If the incubation temperature is lower than 22 ° C or higher than 28 ° C, the growth rate of Saccharomyces cerevisiae Y204 seedlings may deteriorate.

상기 배양은 24 내지 30시간 동안 배양하는 것이 바람직하며, 24내지 26시간 배양하는 것이 더욱 바람직하고, 24시간 배양하는 것이 가장 바람직하다. 상기 배양 시간이 24시간 미만이거나 30시간 초과인 경우 오히려 사카로마이세스 세르비지애 Y204 종균의 생육도가 떨어질 수 있어 좋지 않다.The culture is preferably performed for 24 to 30 hours, more preferably for 24 to 26 hours, and most preferably for 24 hours. If the incubation time is less than 24 hours or more than 30 hours, the degree of growth of Saccharomyces cerevisiae Y204 seedlings may deteriorate.

상기 배양은 skim milk, glutamate, lactose, trehalose 및 dextrin으로 구성된 부형제로부터 선택되는 어느 하나를 첨가해서 배양하는 것이 바람직하며, 그 중 skim milk, lactose 및 trehalose에서 선택되는 어느 하나를 첨가하는 것이 가장 바람직하다.The culture is preferably carried out by adding any one selected from skim milk, glutamate, lactose, trehalose and dextrin, and it is most preferable to add any one selected from skim milk, lactose and trehalose .

상기 부형제는 skim milk 8 내지 12%, glutamate 0.5 내지 2%, lactose 0.5 내지 2%, trehalose 5 내지 12% 및 dextrin 3 내지 7%로 포함되는 것이 바람직하며, 상기 부형제는 skim milk 10%, glutamate 1%, lactose 1%, trehalose 7 내지 10% 및 dextrin 5%로 포함되는 것이 더욱 바람직하다.Preferably, the excipient is comprised of skim milk 8-12%, glutamate 0.5-2%, lactose 0.5-2%, trehalose 5-12% and dextrin 3-7%, wherein the excipient is skim milk 10%, glutamate 1 %, lactose 1%, trehalose 7 to 10% and dextrin 5%.

상기 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균은 플라스틱, 일반비닐, 알루미늄 백 및 진공비닐 백으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나의 포장지에 보관할 수 있으며, -20℃ 내지 30℃ 온도에서 보관할 수 있고, -20℃에서 보관하는 것이 바람직하다.The saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) solid seed can be stored in any one of the packaging materials selected from the group consisting of plastic, ordinary vinyl, aluminum bag and vacuum vinyl bag, and is stored at a temperature of -20 ° C to 30 ° C And is preferably stored at -20 ° C.

상기 고체종균 제조방법에 배양된 효모를 건조시키는 단계를 더 포함할 수 있으며, 상기 건조는 동결건조 또는 열풍건조인 것이 바람직하다.The method may further include drying the yeast cultured in the solid seed production method, wherein the drying is preferably freeze drying or hot air drying.

본 발명의 구체적인 실시예에서, 본 발명자들은 전통 발효식품에서 배양 생육능이 뛰어나고 알코올 및 향기 생성능이 우수한 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y204(KACC93237P)를 탁주 제조용 효모로 선별하였으며, 선별된 S. cerevisiae Y204의 고체종균을 제조하기 위해 최적조건을 확인한 결과, S. cerevisiae Y204 종균을 YPD 배지에서 교반속도 150 rpm으로 25℃에서 24시간 배양하는 것이 생육도 및 생균수가 가장 높았고(도 2 내지 도 5 참조), 고체종균 제조 시 부형제로 skim milk 10%, lactose 1% 및 trehalose 7 내지 10%를 각각 첨가할 경우 종균 생존율이 높아짐을 확인하였으며(도 6 참조), 포장 용기에 따른 세균 오염유무를 조사한 결과, 일반 비닐, 플라스틱, 알루미늄 백, 진공비닐 백 순으로 세균이 검출되었고, 저장 온도별 세균 오염은 30℃, 4℃, -20℃ 순으로 세균이 검출됨을 확인하였으며(표 2 참조), S. cerevisiae Y204 효모 고체종균 건조 시 동결건조가 열풍건조보다 1.2 내지 1.4배 정도 낮은 생균수를 나타냈으나, 오염도가 2배 정도 낮음을 확인함으로써(도 10 참조), 본 발명의 고체종균 최적화 조건이 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법으로 유용하게 이용될 수 있다.In a specific embodiment of the present invention, the present inventors selected Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P), which is excellent in the ability to grow and grow in traditional fermented foods and has excellent alcohol and aroma-producing ability, as yeast for producing Takju, The optimal conditions for producing S. cerevisiae Y204 solid seeds were as follows. When the S. cerevisiae strain Y204 was cultured in YPD medium at a stirring speed of 150 rpm at 25 ° C. for 24 hours, (See FIG. 5), it was confirmed that when the skim milk 10%, the lactose 1% and the trehalose 7 ~ 10% were added as an excipient in the production of solid seeds, the survival rate was increased (see FIG. 6) Bacteria were detected in the order of ordinary vinyl, plastic, aluminum bag and vacuum vinyl bag. Bacterial contamination by storage temperature was 30 ℃, 4 ℃, -20 ℃ By this it was confirmed that the bacteria detection check (Table 2), S. cerevisiae Y204 yeast solids seed but did dry freeze drying the number of viable cells lower degree of 1.2 to 1.4 times that of a hot-air drying, contamination is twice as low ( See FIG. 10), the solid-seeded yeast optimization conditions of the present invention can be usefully employed in the production of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) solid seeds.

또한, 본 발명은 본 발명의 제조방법으로 제조된 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P)의 고체종균을 제공한다.The present invention also provides a solid seed of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) produced by the method of the present invention.

또한, 본 발명은 본 발명의 제조방법으로 제조된 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 종균을 곡류에 접종시킨 후 발효시키는 단계를 포함하는 탁주 제조방법을 제공한다.In addition, the present invention provides a method for preparing Takju, which comprises fermenting grains of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) produced by the method of the present invention into cereals.

상기 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P)의 고체종균은 배양 생육능이 뛰어나고 알코올 및 향기 생성능이 우수한 것을 특징으로 한다.The solid seed of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) is characterized by excellent culture and growth ability and excellent alcohol and aroma-producing ability.

상기 곡류는 쌀, 보리, 밀, 호밀, 귀리, 조, 기장, 수수 및 메밀쌀과 같은 곡류; 옥수수, 고구마와 같은 서류; 및 이의 혼합물로 이루어진 군에서 선택될 수 있다.The cereal may be cereal such as rice, barley, wheat, rye, oats, barley, millet, sorghum and buckwheat rice; Papers such as corn, sweet potatoes; And mixtures thereof.

본 발명은 전통 발효식품에서 배양 생육능이 뛰어나고 알코올 및 향기 생성능이 우수한 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y204(KACC93237P)의 고체종균을 제조하기 위해 최적조건을 확인한 결과, S. cerevisiae Y204 종균을 YPD 배지에서 교반속도 150 rpm으로 25℃에서 24시간 배양하는 것이 생육도 및 생균수가 가장 높았고(도 2 내지 도 5 참조), 고체종균 제조 시 부형제로 skim milk 10%, lactose 1% 및 trehalose 7 내지 10%를 각각 첨가할 경우 종균 생존율이 높아짐을 확인하였으며(도 6 참조), 포장 용기에 따른 세균 오염유무를 조사한 결과, 일반 비닐, 플라스틱, 알루미늄 백, 진공비닐 백 순으로 세균이 검출되었고, 저장 온도별 세균 오염은 30℃, 4℃, -20℃ 순으로 세균이 검출됨을 확인하였으며(표 2 참조), S. cerevisiae Y204 효모 고체종균 건조 시 동결건조가 열풍건조보다 1.2 내지 1.4배 정도 낮은 생균수를 나타냈으나, 2배 정도 오염도가 낮음을 확인함으로써(도 10 참조), 본 발명의 고체종균 최적화 조건이 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법 및 이를 이용하여 제조되는 고체종균 및 탁주로 유용하게 이용될 수 있다.The present invention relates to a fermented food product which is excellent in the ability to grow and grow in traditional fermented foods, saccharomyces cerevisiae The optimum conditions for the production of solid seeds of S. cerevisiae Y204 (KACC93237P) were determined, and it was found that S. cerevisiae Y204 strain was cultured in YPD medium at a stirring speed of 150 rpm for 24 hours at 25 ° C. 2 to FIG. 5), it was confirmed that when the skim milk 10%, the lactose 1% and the trehalose 7 ~ 10% were added as an excipient in the solid seed culture, the survival rate was increased (see FIG. 6) Bacteria were detected in the order of ordinary vinyl, plastic, aluminum bag, and vacuum plastic bag in the order of contamination, and bacteria were detected in the order of 30 ° C., 4 ° C., and -20 ° C. (See FIG. 10), it was confirmed that the freeze-drying of S. cerevisiae Y204 yeast solid yeast strain showed a viable cell number of about 1.2 to 1.4 times lower than that of hot-air drying, Bell The microorganism optimization conditions may be usefully employed as a solid seedling and takju prepared by using the method of producing Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) solid seed culture.

또한, 본 발명은 수탁번호 KACC93237P로 기탁된 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204 균주를 제공한다.The present invention also provides processes Sergio Mai non jiae (Saccharomyces cerevisiae) strain Y204 with the saccharide deposited by accession No. KACC93237P.

상기 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204는 본 발명자가 전통 발효식품에서 분리 균주로 2015년 6월 15일자로 국립농업과학원에 기탁번호 KACC93237P로 기탁되어 있는 균주이다.Saccharide in the My process Sergio non jiae (Saccharomyces cerevisiae) Y204 is a strain that is present inventors have deposited with the National Academy of Agricultural Sciences to isolates from traditional fermented foods dated 15 June 2015 Accession to the number KACC93237P.

이하, 본 발명을 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples and Experimental Examples.

단, 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예 및 실험예에 의하여 한정되는 것은 아니다.However, the following Examples and Experimental Examples are merely illustrative of the present invention, and the contents of the present invention are not limited by the following Examples and Experimental Examples.

<< 실시예Example 1> 탁주 제조용 효모 종균 선별 1> Yeast seed selection for producing Takju

전통 발효식품에서 분리한 효모 7종중에서 배양 생육능이 뛰어나고 알코올 및 향기 생성능이 우수한 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204를 탁주 제조용 효모로 최종 선정하였으며, 2015년 6월 15일에 수탁번호 KACC93237P로 국립농업과학원에 기탁하였다. 상기 효모를 YPD배지에 계대 배양하였으며, 자퍼멘터(Jar-fermentor)를 사용하여 대량 배양하였다.Excellent ability to culture grown in yeast 7 jongjung separate from traditional fermented foods high alcohol and fragrance producing ability Saccharomyces My access Servigroup jiae (Saccharomyces cerevisiae) were selected for the final Y204 yeast to manufacture Takju, on June 15, 2015, it was deposited with the National Academy of Agricultural Science as accession number KACC93237P. The yeast was subcultured in a YPD medium and cultured in a large amount using a Jar-fermentor.

<< 실험예Experimental Example 1> 탁주 제조용 효모  1> Yeast for making Takju 사카로마이세스Sakaromayses 세르비지애Serbijia Y204( Y204 ( KACC93237PKACC93237P )를 이용한 고체종균 제조 최적 배양조건 확인) To determine the optimal culture conditions for the production of solid seeds

상기 <실시예 1>에서 선별된 S. cerevisiae Y204의 고체종균 제조 최적조건을 규명하기 위하여, 생육에 적합한 배양조건을 확인하였다.In order to identify the optimum conditions for the production of solid seeds of S. cerevisiae Y204 selected in Example 1, culturing conditions suitable for growth were confirmed.

<1-1><1-1> S.  S. cerevisiaecerevisiae Y204 효모 배양을 위한 액체배지 선정 Y204 Selection of liquid medium for yeast culture

S. cerevisiae Y204 효모 배양의 최적화 조건을 찾기 위해, 배지에 따른 생육능 및 생균수를 분석하였다. In order to find optimal conditions for S. cerevisiae Y204 yeast culture, viability and number of viable cells were analyzed by media.

구체적으로, 하기 표 1의 MEA, YPD 및 YM 배지에 따라 Jar-fermentor로 배양하였으며, 배양조건은 4 ℓ배지에 30℃ 온도로 24시간 동안 150 rpm으로 교반하며 배양하였다. 생육도 측정은 S. cerevisiae Y204 효모를 각각 백금이로 취해, 전배양한 후, MEA, YPD 및 YM 본배양 배지에 각각 1%씩 접종하여 상기 배양조건으로 배양한 후, UV-visible spectrophotometer로 660nm에서 생육도를 측정하였다. 생균수 측정 방법은 시료 10 g을 취하여 멸균 백에 넣고 90 ㎖의 멸균 생리식염수를 가하여 균질기로 용해하고 멸균 생리식염수로 단계별로 희석한 후, PCA배지에 도말하고 나타난 균체수를 CFU/g로 표기하였다.Specifically, the cells were cultured in a Jar-fermentor according to the MEA, YPD and YM medium shown in Table 1, and cultured at 4 ° C for 24 hours at 150 rpm. For the measurement of growth, S. cerevisiae Y204 yeast was plated on each platinum strain, and pre-cultured. The cells were inoculated with 1% each of the MEA, YPD, and YM main culture media, cultured under the above culture conditions, Were measured. For the measurement of viable cell count, 10 g of the sample was taken in a sterilized bag, and 90 ml of sterile physiological saline was added thereto. The cell was dissolved in a homogenizer and diluted with sterilized physiological saline stepwise. Respectively.

성분ingredient 배지 조성(%)Medium composition (%) MEAMEA YMYM YPDYPD Malt extractMalt extract 33 0.30.3 -- Yeast extractYeast extract -- 0.30.3 1One PolypeptonePolypeptone -- -- 22 PeptonePeptone 0.50.5 0.50.5 -- DextroseDextrose -- 1One 22 AgarAgar 1.51.5 -- 22

그 결과 도 2에 나타난 바와 같이, S. cerevisiae Y204 효모의 생육도 및 생균수는 YPD 배지, YM 배지, MEA 배지 순으로 높았으며(도 2), 이에, 탄소원 및 질소원을 고루 갖춘 YPD 배지를 S. cerevisiae Y204 효모의 배양을 위한 최적 배지로 선정하였다.As a result, as shown in FIG. 2, S. cerevisiae Y204 growth of yeast and bacteria are also YPD medium, YM culture medium, MEA medium was a higher order (FIG. 2), and thus, the YPD culture medium with a carbon source and a nitrogen source evenly S It was selected as the best medium for the cultivation of yeast cerevisiae Y204.

<1-2><1-2> S.  S. cerevisiaecerevisiae Y204 효모 배양을 위한 액체배양  Y204 Liquid culture for yeast culture 교반속도Stirring speed 선정 selection

효모 종균화를 만들기 위해서는 액체배양에서 균체의 생성량이 많아야 하며, 이를 위해 풍부한 배지와 더불어 교반속도도 매우 중요한 인자로 작용한다. 따라서, S. cerevisiae Y204 효모를 액체배양할 때, 발효조의 교반속도에 따른 균주의 생육도 및 생균수를 확인하였다. In order to produce yeast seed culture, the amount of cells produced in the liquid culture should be high. For this, the agitation speed is also an important factor in addition to the abundant culture medium. Therefore, when the S. cerevisiae Y204 yeast was liquid cultured, the growth of the strain and the viable cell count were confirmed according to the stirring speed of the fermentation tank.

구체적으로, S. cerevisiae Y204 효모를 Jar-fermentor를 이용하여 배양하였으며, 배양조건은 YPD 배지 4 ℓ에 30℃ 온도로, 각각 100, 150 및 200 rpm의 3가지 교반속도로 24시간 동안 배양하여, 실험예 <1-1>의 방법으로 이들의 생육도 및 생균수를 측정하였다. Specifically, S. cerevisiae Y204 yeast was cultivated using a Jar-fermentor. Culturing conditions were incubated at 4 ° C for 30 minutes at 30 ° C for 24 hours at 100, 150, and 200 rpm, The degree of growth and viable cell counts of these were measured by the method of Experimental Example < 1-1 &gt;.

그 결과 도 3에서 나타난 바와 같이, 150, 100, 200 rpm 순으로 효모의 생육도 및 생균수가 높은 경향을 보였으며, 150 rpm에서 S. cerevisiae Y204 효모의 균체는 100 또는 200 rpm 배양 속도와 비교하여 1.1 내지 1.4배 이상의 균체수를 가짐을 확인하였다(도 3). 따라서, S. cerevisiae Y204 효모를 배양하기 위한 최적 교반속도를 150 rpm으로 선정하였다.As a result, as shown in FIG. 3, the growth rate of yeast and the number of viable cells tended to increase in the order of 150, 100, and 200 rpm, and the bacterial counts of S. cerevisiae Y204 yeast at 150 rpm were compared with those at 100 or 200 rpm It was confirmed that it had a cell number of 1.1 to 1.4 times or more (Fig. 3). Therefore, the optimum agitation speed for culturing S. cerevisiae Y204 yeast was selected at 150 rpm.

<1-3><1-3> S.  S. cerevisiaecerevisiae Y204 효모 배양을 위한 액체배양 최적온도 선정 Optimal temperature for liquid culture for Y204 yeast culture

S. cerevisiae Y204 효모 액체배양 시, 발효조의 배양 온도에 따른 균주의 생육도 및 생균수를 확인하였다.During the liquid culture of S. cerevisiae Y204 yeast, the growth of the strain and the viable cell count were determined according to the incubation temperature of the fermenter.

구체적으로, 배양조건은 YPD 배지 4 ℓ에 발효조의 배양 온도를 25℃, 30℃ 및 37℃ 3가지로 분류하여 24시간 동안 150 rpm 교반속도로 배양한 후, 실험예 <1-1>의 방법으로 이들의 생육도 및 생균수를 각각 측정하였다.Specifically, the culture conditions were as follows: the culturing temperature of the fermenter was divided into 4 kinds of YPD medium and the cultivation temperature was set at 25 ° C., 30 ° C. and 37 ° C., and the mixture was cultured at a stirring rate of 150 rpm for 24 hours. And their viability and viable cell count were measured.

그 결과 도 4에 나타난 바와 같이, S. cerevisiae Y204 효모는 중온인 30℃ 및 37℃보다 낮은 온도인 25℃에서 생육도와 생균수가 높았다(도 4). 따라서 S. cerevisiae Y204 효모는 37℃ 보다는 낮은 25℃ 내지 30℃ 영역의 온도에서 생육을 잘하는 효모이므로, 탁주 제조시 실온에서 알코올 발효를 잘할 것으로 판단된다.As a result, as shown in Fig. 4, S. cerevisiae The Y204 yeast was more viable and viable at 25 ° C than the mid-temperature 30 ° C and 37 ° C (Fig. 4). Therefore, S. cerevisiae Y204 yeast is a yeast that grows well at a temperature in the range of 25 ° C to 30 ° C, which is lower than 37 ° C. Therefore, it is judged that alcohol fermentation is good at room temperature when preparing Takju.

<1-4><1-4> S.  S. cerevisiaecerevisiae Y204 효모 배양을 위한 액체배양 최적 시간 선정 Y204 Optimal time for liquid culture for yeast culture

탁주 제조를 위한 S. cerevisiae Y204 효모의 배양시간에 따른 생육 최적조건을 구명하기 위해, YPD 배지 4 ℓ에 30℃ 온도에서 150 rpm 교반속도로 배양하며, 2일 동안 6시간 간격으로 배양액을 샘플링하여 생육도를 조사하였다. 생육도 측정은 상기 실험예 <1-1>의 방법으로 수행하였다. S. cerevisiae for the production of Takju Y204 yeast were cultured in 4 L of YPD medium at 30 ℃ and 150 rpm, and the growth was examined by sampling the culture at 6 hour intervals for 2 days. The degree of growth was measured by the method of Experimental Example 1-1.

그 결과 도 5에 나타난 바와 같이, S. cerevisiae Y204 효모는 6 내지 12시간 사이 대수 증식기 때 급격하게 생육하고, 정지기인 24시간 이후부터는 큰 변화 없이 일정하게 생육을 유지함을 확인하였다(도 5).As a result, as shown in Fig. 5, S. cerevisiae Y204 yeast grew rapidly during the logarithmic growth period between 6 and 12 hours and maintained constant growth after 24 hours after the stopping period without significant change (Fig. 5).

따라서, 탁주 제조용 효모 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P)를 YPD배지에서 30℃, 150 rpm으로 24시간 배양하면 균주의 생육도가 높을 뿐만 아니라 균체 생성량도 많아 질 것으로 사료된다. Therefore, when yeast Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) for the production of Takju is cultured in YPD medium at 30 ° C and 150 rpm for 24 hours, it is considered that not only the degree of growth of the strain but also the amount of cell mass is increased.

<< 실험예Experimental Example 2> 탁주 제조용 효모  2> Yeast for making Takju SaccharomycesSaccharomyces cerevisiaecerevisiae Y204를 이용한 고체종균 제조 최적 부형제 종류 및 농도조건 확인 Determination of the type and concentration of the optimal excipient for the production of solid seeds using Y204

효모용 고체종균 제조에 적합한 부형제 종류 및 적정농도를 선정하기 위하여, 4종의 부형제 및 이들의 농도에 따른 고체종균의 생균수 변화를 측정하였다. In order to select the type of excipient suitable for the production of solid yeast seeds and the appropriate concentration, the change in the number of viable cells of the solid seedlings was measured according to the concentration of the four excipients and their concentrations.

구체적으로, 5종류의 부형제 skim milk, glutamate, lactose, trehalose 및 dextrin을 1, 3, 5, 7 및 10% 농도로 조제한 S. cerevisiae Y204 효모 고체종균을 4℃에서 30일 동안 저장한 후, 부형제 종류 및 이들 농도에 따른 고체종균의 생균수 변화를 확인하였다. 생균수 측정은 상기 실험예 <1-1>의 방법으로 수행하였다.Specifically, the prepared five types of excipients, skim milk, glutamate, lactose, trehalose and dextrin in 1, 3, 5, 7 and 10% concentrations S. cerevisiae Yeast solid yeasts were stored at 4 캜 for 30 days, and then the number of live bacteria in the solid medium was determined according to the type of excipients and their concentrations. The viable cell count was measured by the method of Experimental Example 1-1.

그 결과 도 6에 나타난 바와 같이, S. cerevisiae Y204 효모 고체종균에 대한 생균수 변화는 부형제 종류에 따라 차이가 있지만, skim milk, lactose 및 trehalose가 생균수를 유지하는데 유용한 부형제로 확인되었다(도 6). 또한, 각각의 부형제 농도별로 조사해 보면, skim milk 10%, glutamate 1%, lactoses 1%, trehalose 7 내지 10% 및 dextrin 5%의 부형제 농도에서 생존율이 높게 나타났다(도 6).As a result, as shown in FIG. 6, skim milk, lactose and trehalose were found to be useful as an excipient to maintain viable cell counts, although the viable cell count of S. cerevisiae Y204 yeast solid yeast strain varied depending on the type of excipient (FIG. 6 ). Survival rates of skim milk 10%, glutamate 1%, lactoses 1%, trehalose 7-10%, and dextrin 5% were higher than those of other excipients (FIG. 6).

<< 실험예Experimental Example 3> 탁주 제조용 효모  3> Yeast for making Takju SaccharomycesSaccharomyces cerevisiaecerevisiae Y204의 Y204 고체종균Solid seed 보호용 포장지 선정 및 저장온도에 따른 세균 오염도 확인 Selection of protective wrapping paper and confirmation of bacterial contamination according to storage temperature

제조된 S . cerevisiae Y204 효모 고체종균을 효율적으로 보관할 수 있는 보호용 포장 용기 및 저장 온도를 확인하였다.The prepared S. The protective packaging container and the storage temperature which can efficiently store the yeast solid yeast strain of S. cerevisiae Y204 were confirmed.

구체적으로, 제조된 S . cerevisiae Y204 효모 고체종균을 플라스틱, 일반비닐, 알루미늄 백 및 진공비닐 백을 사용하여 포장하였으며, 부형제로 trehalose 10%, lactose 1%를 첨가하여 보존하였다. 각각의 포장 용기에 보관된 효모 고체종균을 -20℃, 4℃ 및 30℃에서 3개월 동안 보관한 후, 세균 오염도를 측정하였다. 세균 오염도는 시료 10 g을 취하여 멸균 백에 넣고 90 ㎖의 멸균 생리식염수를 가하여 균질기로 용해하고 멸균 생리식염수로 단계별로 희석한 후, PCA배지에 도말하고 나타난 세균의 균체수를 CFU/g로 표기하였다.Specifically, the produced S. The cerevisiae Y204 yeast solid seeds were packaged using plastic, ordinary vinyl, aluminum bag and vacuum plastic bags. Trehalose 10% and lactose 1% were added as excipients and preserved. The yeast solid seeds stored in the respective packaging containers were stored at -20 ° C, 4 ° C and 30 ° C After 3 months of storage, bacterial contamination was measured. Bacterial contamination was determined by dissolving 10 g of the sample in a sterilized bag, adding 90 ml of sterile physiological saline, dissolving in a homogenizer, diluting with sterilized physiological saline stepwise, plated on PCA medium and counting the number of bacterial cells in CFU / g Respectively.

그 결과 하기 표 2에 나타난 바와 같이, 포장 용기에 따라서는 일반 비닐> 플라스틱>알루미늄 백>진공비닐 백 순으로 세균이 검출되었으며, 저장 온도별 세균 오염은 30℃>4℃>-20℃ 순으로 포장 용기에 무관하게 세균이 검출되었다(표 2). As a result, as shown in Table 2, bacteria were detected in the order of ordinary vinyl> plastic> aluminum bag> vacuum plastic bag depending on the packaging container, and bacterial contamination by storage temperature was 30 ° C> 4 ° C> -20 ° C Bacteria were detected irrespective of packaging containers (Table 2).

종류
Kinds
저장온도
Storage temperature
세균 오염도Bacterial contamination
저장 전Before storage 저장 후After saving
플라스틱

plastic
-20℃ -20 ° C 1.6±0.5×101.6 ± 0.5 × 10 1.4±0.7×101.4 占 0.7 占 10
4℃4 ℃ 1.7±0.4×101.7 ± 0.4 × 10 2.5±2.8×102.5 ± 2.8 × 10 30℃30 ℃ 1.5±0.6×101.5 ± 0.6 × 10 6.9±2.5×106.9 占 2.5 占 10
일반 비닐

Regular vinyl
-20℃ -20 ° C 1.7±0.2×101.7 ± 0.2 × 10 1.2±0.3×101.2 ± 0.3 × 10
4℃4 ℃ 2.1±0.8×102.1 ± 0.8 × 10 3.2±2.5×103.2 占 2.5 占 10 30℃30 ℃ 1.4±0.6×101.4 ± 0.6 × 10 7.7±4.6×107.7 ± 4.6 × 10
알루미늄 백

Aluminum bags
-20℃ -20 ° C 1.5±0.5×101.5 ± 0.5 × 10 1.9±0.6×101.9 ± 0.6 × 10
4℃4 ℃ 1.7±0.5×101.7 ± 0.5 × 10 1.9±0.4×101.9 ± 0.4 × 10 30℃30 ℃ 1.9±0.9×101.9 ± 0.9 × 10 5.9±2.9×105.9 ± 2.9 × 10
진공비닐 백

Vacuum plastic bag
-20℃ -20 ° C 1.9±0.5×101.9 ± 0.5 × 10 1.6±0.7×101.6 ± 0.7 × 10
4℃4 ℃ 1.6±0.3×101.6 ± 0.3 × 10 1.8±0.7×101.8 ± 0.7 × 10 30℃30 ℃ 1.7±0.5×101.7 ± 0.5 × 10 3.6±4.5×103.6 ± 4.5 × 10

<< 실험예Experimental Example 4> 탁주 제조용 효모  4> Yeast for making Takju SaccharomycesSaccharomyces cerevisiaecerevisiae Y204의 고체종균 최적 건조조건 확인 Determination of optimum drying conditions of Y204 solid seeds

S. cerevisiae Y204 효모 고체종균의 산업용 대량생산을 위해 건조 최적조건을 확립하고자 건조 방식에 따른 생균수 및 세균 오염도를 측정하였다. In order to establish optimum conditions for industrial mass production of S. cerevisiae Y204 yeast solid seedlings, viable cell count and bacterial contamination degree were measured by drying method.

구체적으로, S. cerevisiae Y204 효모 고체종균의 균체를 약 3×106 CFU/㎖이 되도록 하고, 10% skim milk 및 10% trehalose를 각각 부형제로 현탁하여 1시간 동안 평형화시켰다. 그런 다음, 각각 동결건조 및 열풍건조를 수행하였다. 동결 건조는 -80℃에서 급속 동결한 후, 동결 건조장치를 이용하여 48시간 동안 동결 건조하였으며, 열풍 건조 방식은 45℃에서 48시간 열풍건조 하였다. 수득된 고체종균에서 건조방법에 따른 고체종균의 수분 함량, 생균수 및 세균 오염도를 측정하였다. 생균수 및 세균 오염도는 상기 실험예 <1-1>의 방법으로 수행하였으며, 수분함량 분석은 수분 측정기(MX-50, A&D Co., Ltd, Tokyo, Japan)에 시료 10 g을 칭량후 수분함량을 분석하였다.Specifically, the cells of the S. cerevisiae Y204 yeast solid phase strain were adjusted to about 3 × 10 6 CFU / ml, 10% skim milk and 10% trehalose were each suspended in an excipient and equilibrated for 1 hour. Then, lyophilization and hot air drying were performed, respectively. Freeze-drying was performed by rapid freezing at -80 ° C, freeze drying for 48 hours using a freeze dryer, and hot air drying at 45 ° C for 48 hours. The moisture content, viable cell count and bacterial contamination degree of the solid seeds were measured according to the drying method in the obtained solid seeds. The water content was measured by weighing 10 g of a sample in a moisture analyzer (MX-50, A & D Co., Ltd., Tokyo, Japan) Respectively.

그 결과 도 9 및 도 10에 나타난 바와 같이, S. cerevisiae Y204 효모 고체종균의 경우, 수분함량은 동결건조의 경우 7 내지 9%, 열풍건조의 경우 5 내지 6%를 나타내었다. Skim milk를 부형제로 처리한 경우 고체종균의 생균수는 건조 전 3.1×106 ± 7.2 CFU/㎖, 동결건조 후 1.7×106 ± 4.4 CFU/㎖, 열풍건조 후 2.5×106 ± 1.7 CFU/㎖을 나타내며, trehalose를 부형제로 처리한 경우 고체종균의 생균수는 건조 전 2.2×106 ± 1.7 CFU/㎖, 동결건조 후 1.6×106 ± 2.6 CFU/㎖, 열풍건조 후 1.9×106 ± 0.4 CFU/㎖로 건조 전에 비해 약 20%정도 낮은 생존율을 나타내었다(도 10). 이로써, S. cerevisiae Y204 효모의 생균수는 동결건조가 열풍건조보다 1.2 내지 1.4배 정도 낮은 생존율을 나타내는 것을 확인하였다.As a result, as shown in Figs. 9 and 10, in the case of S. cerevisiae Y204 yeast solid seed, the moisture content was 7 to 9% in the case of lyophilization and 5 to 6% in the case of hot air drying. When skim milk was treated with excipients, the viable cell counts of solid specimens were 3.1 × 10 6 ± 7.2 CFU / ㎖ before drying, 1.7 × 10 6 ± 4.4 CFU / ㎖ after lyophilization, 2.5 × 10 6 ± 1.7 CFU / Ml of trehalose was treated with excipients, the viable cell counts of solid organisms were 2.2 × 10 6 ± 1.7 CFU / ㎖ before drying, 1.6 × 10 6 ± 2.6 CFU / ㎖ after lyophilization, 1.9 × 10 6 0.4 CFU / ml, indicating a survival rate as low as about 20% as compared to that before drying (Fig. 10). As a result, it was confirmed that the viable cell count of S. cerevisiae Y204 yeast showed a survival rate 1.2 to 1.4 times lower than that of the hot air drying.

반면, 세균 오염도를 측정한 결과, skim milk를 부형제로 처리한 경우, 건조 전에 2.0×102 ± 0.6 CFU/㎖, 동결건조 후 5.0×102 ± 2.5 CFU/㎖, 열풍건조 후 1.0×102 ± 0.5 CFU/㎖이었다(도 10). Trehalose를 부형제로 처리한 경우는 건조 전에 3.0×102 ± 0.7 CFU/㎖, 동결건조 후 5.0×102 ± 1.0 CFU/㎖, 열풍건조 후 8.0×102 ± 1.5 CFU/㎖로 동결건조하는 방법이 2배 정도의 오염도가 낮아 열풍건조보다는 동결건조가 적합하다고 판단되어진다(도 10).On the other hand, when the skim milk was treated with excipient, it was found to be 2.0 × 10 2 ± 0.6 CFU / ㎖ before drying, 5.0 × 10 2 ± 2.5 CFU / ㎖ after lyophilization, 1.0 × 10 2 ± 0.5 CFU / ml (FIG. 10). When trehalose was treated with excipient, it was lyophilized to 3.0 × 10 2 ± 0.7 CFU / ㎖ before drying, 5.0 × 10 2 ± 1.0 CFU / ㎖ after lyophilization and 8.0 × 10 2 ± 1.5 CFU / ㎖ after hot air drying It is judged that freeze drying is more suitable than hot air drying (Fig. 10).

국립농업과학원National Academy of Agricultural Sciences KACC93237PKACC93237P 2015061520150615

Claims (12)

사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae ) Y204(KACC93237P)를 교반속도 120 내지 180 rpm, 온도 22 내지 28℃에서 24 내지 30시간 동안 배양하는 단계를 포함하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204 고체종균 제조방법.
Saccharomyces cerevisiae) Y204 (KACC93237P) the agitation speed from 120 to 180 rpm, temperature at 22 to 28 ℃ in Saccharomyces which comprises culturing for 24 to 30 hours non-Mai processes Sergio jiae Y204 solid seed method.
제 1항에 있어서, 상기 배양은 YPD 배지를 사용하는 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법.
The method for producing Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) solid seeds according to claim 1, wherein the culture uses YPD medium.
제 1항에 있어서, 상기 배양의 교반속도는 150 내지 160 rpm인 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법.
The method according to claim 1, wherein the stirring speed of the culture is 150 to 160 rpm.
제 1항에 있어서, 상기 배양의 온도는 25 내지 26℃인 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법.
The method according to claim 1, wherein the temperature of the culture is 25 to 26 占 폚. The method for producing solid phase Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P).
제 1항에 있어서, 상기 배양은 24 내지 26시간 동안 배양하는 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법.
The method according to claim 1, wherein the culture is cultured for 24 to 26 hours. A method for producing Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) solid seeds.
제 1항에 있어서, 상기 배양은 skim milk, glutamate, lactose, trehalose 및 dextrin으로 구성된 부형제로부터 선택되는 어느 하나를 첨가해서 배양하는 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법.
The method according to claim 1, wherein the culture is carried out by adding any one selected from skim milk, glutamate, lactose, trehalose and dextrin, and culturing the mixture. The solid medium of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) Way.
제 6항에 있어서, 상기 부형제는 skim milk 8 내지 12%, glutamate 0.5 내지 2%, lactose 0.5 내지 2%, trehalose 5 내지 12% 및 dextrin 3 내지 7%로 포함되는 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법.
7. The method according to claim 6, wherein said excipient is comprised of skim milk 8-12%, glutamate 0.5-2%, lactose 0.5-2%, trehalose 5-12% and dextrin 3-7% Production method of Serbijia Y204 (KACC93237P) solid seeds.
제 1항에 있어서, 배양된 효모를 건조시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법.
2. The method of claim 1, further comprising drying the cultured yeast.
제 8항에 있어서, 상기 건조는 동결건조 또는 열풍건조인 것을 특징으로 하는 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 고체종균 제조방법.
9. The method according to claim 8, wherein the drying is lyophilization or hot-air drying.
제 1항의 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P)의 고체종균
The solid seed of the Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) of claim 1
제 10항의 사카로마이세스 세르비지애 Y204(KACC93237P) 종균을 곡류에 접종시킨 후 발효시키는 단계를 포함하는 탁주제조 방법.
A method for producing takju comprising the step of inoculating grains of Saccharomyces cerevisiae Y204 (KACC93237P) strain of claim 10 into cereals and fermenting them.
수탁번호 KACC93237P로 기탁된 사카로마이세스 세르비지애(Saccharomyces cerevisiae) Y204 균주.

Saccharomyces cerevisiae strain Y204 deposited with accession number KACC93237P.

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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018186594A1 (en) 2017-04-07 2018-10-11 주식회사 엘지화학 Battery module having improved connection structure between electrode leads and manufacturing method therefor
KR102125363B1 (en) * 2018-12-13 2020-06-22 대한민국 Manufacturing method of powder yeast for making grain wine
KR20210076303A (en) * 2019-12-13 2021-06-24 대한민국(농촌진흥청장) Method for culturing sweet type yeast and powdering thereof

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20080057078A (en) * 2006-12-19 2008-06-24 주식회사 두산 Saccharomyces cerevisiae tw50 increasing aromatic compounds in alcoholic liquor and method for preparing alcoholic liquor using the same
KR101166489B1 (en) * 2010-11-29 2012-07-19 한국식품연구원 Brewing yeast Saccharomyces cerevisiae 183-2 and brewed alcohol made therewith
KR20140016761A (en) * 2012-07-31 2014-02-10 주식회사 덕화푸드 Saccharomyces cerevisiae seperated makgeoliies and prepatation method using the same
KR101497434B1 (en) * 2012-12-18 2015-03-02 하이트진로 주식회사 Saccharomyces cerevisiae jy230 strain with high productivity of flavor components and process for preparing alcoholic liquors using same

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2018186594A1 (en) 2017-04-07 2018-10-11 주식회사 엘지화학 Battery module having improved connection structure between electrode leads and manufacturing method therefor
KR102125363B1 (en) * 2018-12-13 2020-06-22 대한민국 Manufacturing method of powder yeast for making grain wine
KR20210076303A (en) * 2019-12-13 2021-06-24 대한민국(농촌진흥청장) Method for culturing sweet type yeast and powdering thereof

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