KR20190021668A - Composition having Antimicrobial Effects on Acnes Bacteria Using Solid Phase Lactobacillus-fermentation Product of Prickly Pear Fruits - Google Patents

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Abstract

The present invention discloses a composition having antimicrobial effects on acne bacteria using a solid phase Lactobacillus fermented product of Opuntia ficus-indica fruits. The solid phase fermented product is obtained by preparing solid phase pills using fruit powder of Opuntia ficus-indica fruits and inoculating Lactobacillus plantarum into the pills.

Description

백년초 열매의 유산균 고상 발효물을 이용한 여드름균에 대한 항균 조성물{Composition having Antimicrobial Effects on Acnes Bacteria Using Solid Phase Lactobacillus-fermentation Product of Prickly Pear Fruits}[0001] The present invention relates to an antimicrobial composition for acne bacterium using a solid fermented product of lactic acid bacteria,

본 발명은 백년초(Opuntia ficus-indica, 손바닥선인장) 열매의 유산균 고상 발효물을 이용한 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a method for producing lactic acid bacteria of Opuntia ficus-indica ( Opuntia ficus-indica ) This invention relates to an antimicrobial composition against Propionibacterium acnes which is an acne bacterium using a fermented product.

손바닥 선인장이라고 불리기도 하는 백년초는 선인장과(Cactaceae)의 선인장속(Opuntia)에 속하는 열대성 귀화 식물로 우리나라에서는 제주도, 신안군 등 남해안 지방에 자생하고 있으며, 현재 제주도를 중심으로 백년초의 재배가 증가하고 있다. It is a tropical naturalized plant belonging to the cactus ( Opuntia ) of Cactaceae. In Korea, it grows in the south coast region such as Jeju Island and Sinan County. .

백년초는 가뭄 저항성이 강하고 그 열매는 식용으로 이용된다. 백년초는 항궤양 효과, 이뇨 효과, 고혈압 예방 효과, 콜레스테롤 저하 효과, 혈당 저하 효과, 항당뇨 효과, 상처 치유 효과, 항염증 효과, 항산화 효과 등이 알려져 있다(Molecules 19: 14879-14901, 2014; Korean J. Food Preserv. 16: 953-958, 2009; Korean J. Food Preserv. 6: 345-349, 1999; J. Fd Hyg. Safety 27: 401-405, 2012; J Ethnopharmacol 76:1-9, 2001). The perennial plant is resistant to drought and its fruit is used for food. There are known anti-ulcer effects, diuretic effect, prevention of hypertension, lowering of cholesterol, hypoglycemic effect, antidiabetic effect, wound healing effect, anti-inflammatory effect and antioxidant effect (Molecules 19: 14879-14901, 2014; J. Food Preserv. 16: 953-958, 2009; J. J. Food Preserv. 6: 345-349, 1999. J. Fd Hyg. Safety 27: 401-405, 2012. J Ethnopharmacol 76: 1-9, 2001).

여드름은 모든 연령대에서 대부분의 사람들에게 발생하고 얼굴, 가슴, 어깨 부위 등에 면모, 농포, 구진, 결절 등의 형태로 나타나는 다형성 피부질환으로 2차Acne is a polymorphic skin disease that occurs in most people in all ages and occurs in the form of facial, chest and shoulder patches, pustules, papules and nodules.

성숙이 있는 청소년기에 주로 발병한다. 11세에서 30세 사이에 약 80%가 발병하고, 30대 이후에서도 약 6%의 환자가 있는 것으로 보고되었으나 최근 들어 스트레스에 의한 성인 여드름의 발병 비율이 높아지고 있다. 이 질환은 환자에게 불쾌감을 주며 흉터 및 피부착색으로 인한 미관 손상을 일으킬 수 있다.It mainly affects adolescents with maturity. It has been reported that about 80% of cases develop from 11 to 30 years of age and about 6% of cases occur after 30 years of age. Recently, however, the incidence of adult acne due to stress has been increasing. The disease can be uncomfortable to the patient and cause aesthetic damage due to scarring and skin pigmentation.

여드름의 발생원인은 정확한 원인은 밝혀져 있지 않았으며, 생리적 및 환경적 측면에서 [0003] 다양한 병인을 가지고 있기 때문에, 다양한 유형으로 발병하는 여드름에 대한 알맞은 치료에는 어려움이 있다. The exact cause of acne has not been established, and because of its various physiological and environmental aspects, it is difficult to properly treat acne of various types.

일반적으로 피지선에서의 과도한 피지분비, 호르몬 불균형, 유전적 소질, 비정상적인 모낭 내 이상 각화 및 P. acnes의 증식 및 염증 반응 등 복합적인 요인으로 발생하며(Acne: Inflammation. Clin. Dermatol. 22: 380-384, 2004; An overview of acne. J. Invest. Dermatol. 62: 268-287, 1974), 이에 따라 여드름을 치료하기 위한 기본적인 방법으로 모낭 각화로 인한 형질 변화 교정, 피지선의 활동성을 감소, 여드름 유발 주요 균주에 대한 항균작용, 피부 항염작용 등이 적용되고 있다.Usually caused by excessive secretion of sebum, a complex of factors, including hormonal imbalance, genetic predisposition, abnormal hair follicle keratinocytes and at least within P. acnes proliferation, and inflammation of the sebaceous glands, and (Acne:... Inflammation Clin Dermatol 22: 380- As a basic method for the treatment of acne, it can be used to correct trait changes due to follicular keratinization, reduce the activity of sebaceous glands, induce acne Antimicrobial action against major strains, and skin anti-inflammatory action have been applied.

정상 피부에는 호기성 세균인 Staphylococci, Micrococci와 혐기성 세균인 Propionibacterium 속에 속하는 균등이 상주하고 있으며 이들 균주들의 활성에 의하여 여드름이 발생하게 될 수 있다. 특히 지방 친화를 지니는 혐기성 균주인 P. acnes가 여드름의 주요 원인균으로 지목되고 있다(Postgrad. Med. J. 75: 328, 1999).Normal skin contains aerobic bacteria such as Staphylococci, Micrococci and anaerobic bacteria belonging to Propionibacterium, and the activity of these strains may cause acne. In particular, P. acnes , a lipophilic anaerobic strain, has been identified as a major cause of acne (Postgrad. Med. J. 75: 328, 1999).

여드름 주요 병원체인 P. acnes는 피부 내에 존재하는 혐기성 상재균으로써 피부 모낭 내에서 성장하는 지방 친화성 미생물이다. P. acnes는 남성호르몬인 androgen이나 다른 요인에 의해 생성된 피지의 트리글리세라이드(triglycerides)를 가수분해한 후 지방분해효소(lipase)와 화학주성인자의 분비를 통해 유리지방산을 생성하며 염증 반응을 일으킨다. 염증 반응이 진행됨에 따라 모낭 세포의 파괴가 나타나며 최종적으로 진피까지 염증 반응이 진행되게 된다. P. acnes와 같이 세균감염에 의한 여드름 발병에 대해 전신적인 치료 방법인 항생제 투여가 가장 큰 효과를 나타낸다(Pediatr. Dermatol. 14(6): 480-488, 1997). P. acnes , a major pathogen of acne, is a lipophilic microorganism that grows in the skin follicle as an anaerobic mantle in the skin. P. acnes hydrolyzes the triglycerides of sebum produced by androgen and other factors, and produces free fatty acids through the secretion of lipases and chemotactic factors, resulting in inflammatory responses . As the inflammatory reaction progresses, the hair follicles are destroyed and finally the inflammation reaction progresses to the dermis. Dermatol, 14 (6): 480-488, 1997), which is a systemic treatment for the development of acne caused by bacterial infections such as P. acnes (Pediatr.

여드름을 치료하기 위해 사용되는 항생제로는 테트라사이클린(tetracycline), 클린다미신(clindamycin) 등이 사용된다. 하지만 장기간 항생제를 사용할 경우 내성이 생겨 치료효과가 떨어질 수 있다(Kor. J. Dermatol. 33: 437-444, 1995).Antibiotics used to treat acne include tetracycline, clindamycin, and the like. However, long-term use of antibiotics may result in tolerance and reduced efficacy (Kor, J. Dermatol. 33: 437-444, 1995).

최근 여드름의 예방 또는 치유를 위해 생약 등 천연물을 이용한 항균 활성 대한 많은 연구가 진행되고 있다(Kor. J. Microbiol. Biotechnol. 37(1): 80-84, 2009).Recently, many studies have been conducted on the antimicrobial activity of natural products such as herbal medicines to prevent or cure acne (Kor. J. Microbiol. Biotechnol. 37 (1): 80-84, 2009).

본 발명은 백년초 열매의 유산균 고상 발효물의 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균 활성을 개시한다.The present invention discloses an antimicrobial activity against Propionibacterium acnes which is an acne bacterium of lactic acid bacteria solid phase fermented product of Baekjunseok .

본 발명의 목적은 백년초(Opuntia ficus-indica, 손바닥선인장) 열매의 유산균 고상 발효물을 이용한 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균 조성물을 제공하는 데 있다.An object of the present invention is to provide an antimicrobial composition against Propionibacterium acnes , an acne bacterium using lactic acid fermented product of Opuntia ficus-indica ( Opuntia ficus-indica ) fruit.

본 발명의 다른 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제시될 것이다. Other and further objects of the present invention will be described below.

본 발명은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 백년초 열매 분말을 이용한 고상(solid phase)의 환(pills)을 제조하고 여기에 유산균인 락토바실러스 플란타럼 KCCM 80077(Lactobacillus plantarum KCCM 80077)를 접종하여 백년초 열매 고상 발효물을 제조할 경우 그것의 추출물이 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균 활성을 가짐을 확인함으로써 완성된 것이다. 백년초 열매 비발효환의 추출물이나 백년초 유산균(Lactobacillus plantarum KCCM 80077) 액상 발효물의 추출물은 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대해 항균 활성을 나타내지 않았으며, 또한 아래의 실험예에서 제시되어 있지 않지만, 락토바실러스 플란타럼 KCCM 80077 배양물 자체의 추출물도 항균 활성을 나타내지 않았다. As shown in the following Examples and Experimental Examples, pancakes of solid phase using powdery white perennials were prepared and Lactobacillus plantarum KCCM 80077 ( Lactobacillus plantarum KCCM 80077), which is a lactic acid bacterium, ) Was inoculated to produce a fermented product of fruit perennial plant, which was completed by confirming that the extract had antimicrobial activity against Propionibacterium acnes , an acne bacterium. The extract of Lactobacillus plantarum KCCM 80077 and the extract of Lactobacillus plantarum KCCM 80077 showed no antimicrobial activity against Propionibacterium acnes , an acne bacterium, and it was also shown in the following experimental examples However, the extract of Lactobacillus plantarum KCCM 80077 culture itself did not exhibit antibacterial activity.

본 발명의 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균 조성물은 이러한 실험 결과에 기초하여 제공되는 것으로, 본 발명의 항균 조성물은 백년초 열매 분말에 정제수를 가하여 제조한 고상물(固狀物, solid phase product)에 유산균인 락토바실러스 플란타럼을 접종하여 얻어진 고상 발효물의 분말이나 그 추출물을 유효성분으로 포함함을 특징으로 한다. The antimicrobial composition for Propionibacterium acnes , an acne bacterium of the present invention, is provided on the basis of the results of these experiments. The antimicrobial composition of the present invention is prepared by adding purified water (solid Solid phase product obtained by inoculating Lactobacillus plantarum, which is a lactic acid bacterium, as an active ingredient.

본 명세서에서, "유효성분"은 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.As used herein, the term " active ingredient " refers to an ingredient that alone exhibits the desired activity or that can exhibit activity with a carrier that is itself inactive.

또 본 명세서에서, "고상 발효물의 추출물"이란 추출 대상인 그 고상물 자체 또는 그 분말을 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등), 메틸렌클로라이드, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, N,N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 침출하여 얻어진 추출물, 이산화탄소, 펜탄 등 초임계 추출 용매를 사용하여 얻어진 추출물 또는 그 추출물을 분획하여 얻어진 분획물을 의미하며, 추출 방법은 활성물질의 극성, 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방법을 적용할 수 있다. 분획된 추출물의 경우 추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 극성이 다른 용매와 혼합·정치시켜 얻은 분획물, 상기 조추출물을 실리카겔 등이 충진된 칼럼에 흡착시킨 후 소수성 용매, 친수성 용매 또는 이들의 혼합 용매를 이동상으로 하여 얻은 분획물을 포함하는 의미이다. 또한 상기 추출물의 의미에는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등의 방식으로 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고형상의 추출물이 포함된다. 바람직하게는 추출용매로서 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜(메탄올, 에탄올, 부탄올 등) 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물을 의미한다.In the present specification, the term " solid-phase fermented product extract " refers to an extract of a solid object itself or its powder as a target to be extracted with water, lower alcohols having 1 to 4 carbon atoms (methanol, ethanol, butanol), methylene chloride, ethylene, acetone, , An extract obtained by leaching using chloroform, ethyl acetate, butyl acetate, N, N-dimethylformamide (DMF), dimethylsulfoxide (DMSO), 1,3-butylene glycol, propylene glycol or a mixed solvent thereof, Refers to an extract obtained by using a supercritical extraction solvent such as carbon dioxide, pentane, or a fraction obtained by fractionating the extract. The extraction method is a method of extracting the supernatant from a supernatant, such as cold water, reflux, warming, Any method such as supercritical extraction can be applied. In the case of the fractionated extract, a fraction obtained by suspending the extract in a specific solvent and mixing and leaving with a solvent having a different polarity, the crude extract is adsorbed on a column packed with silica gel, and then a hydrophobic solvent, a hydrophilic solvent, Quot; means fractions obtained as a mobile phase. Also, the meaning of the extract includes a concentrated liquid extract or a solid extract in which the extraction solvent is removed by a method such as freeze drying, vacuum drying, hot air drying, spray drying and the like. Preferably means an extract obtained by using water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms (methanol, ethanol, butanol, etc.) or a mixed solvent thereof as an extraction solvent.

본 발명에서, 상기 고상물의 형상은 특별한 제한이 없다. 환(pills) 형태, 과립 형태 등일 수 있다. In the present invention, the shape of the solid object is not particularly limited. Pills, granules, and the like.

또 본 발명에서, 상기 고상물은 유산균 열매 분말에 정제수를 가하여 반죽한 후 일정 형상으로 성형하여 얻어질 수 있는데, 이 때 정제수는 백년초 열매 분말 100 중량부 기준 10 내지 30 중량부로 첨가될 수 있다. 10 중량부 이하로 첨가될 경우 그 고상물의 제조를 위한 충분한 반죽이 이루어지지 않을 수 있고 30 중량부를 넘어설 경우 수분 함량이 많아 그 고상물 형태로 제작하는데 어려움이 있을 수 있다. 일정 형상으로 성형한 후에는 자연건조(음건), 열풍건조 등 임의의 방식으로 건조됨으로써 수분의 일부가 제거된 후에(고상물의 수분 함량이 10%(w/w) 이하가 되도록) 유산균 발효에 사용될 수도 있다. In the present invention, the solid matter may be obtained by adding purified water to the powder of lactic acid bacteria, kneading the same, and shaping the powder into a predetermined shape. In this case, the purified water may be added in an amount of 10 to 30 parts by weight based on 100 parts by weight of the fruit powder. If it is added in an amount of 10 parts by weight or less, sufficient dough may not be produced for the production of the solid, and if it exceeds 30 parts by weight, it may be difficult to produce the solid in the form of a large amount of water. After shaping into a predetermined shape, it is dried in an arbitrary manner such as natural drying (shade) or hot air drying, so that a part of the water is removed (the water content of the solid is less than 10% (w / w) It is possible.

또 본 발명에서 상기 유산균인 락토바실러스 플란타럼은 바람직하게는 아래의 실시예에서 사용된 락토바실러스 플란타럼 KCCM 80077이다.In the present invention, the lactic acid bacterium, Lactobacillus plantarum, is preferably Lactobacillus plantarum KCCM 80077 used in the following examples.

또 본 발명에서, 상기 유산균은 아래의 실시예에서 처럼 상기 접종 전 백년초 열매 물(열수 포함) 추출물로 활성화된 유산균, 구체적으로 백년초 열매 물 추출물과 당밀 등의 탄소원 등이 포함된 배지에 유산균을 접종·배양하여 얻어진 것을 사용하는 것이 바람직하다. 본 발명자들은 아래의 실험예에서 제시하지는 않았지만 백년초 열매 추출물로 활성화된 유산균을 사용할 경우 환의 심부까지 발효가 진행될 것으로 보고 있다. 이러한 백년초 열매 물(열수 포함) 추출물로 활성화된 유산균은 백년초 열매 물 추출물과 탄소원이 포함된 배지를 제조하고 여기에 유산균을 접종하여 얻어질 수 있는데, 이때 탄소원은 당업계에 공지된 임의의 탄소원, 예컨대 올리고당, 유당, 포도당, 과당, 설탕, 당밀, 덱스트로스, 전분, 글루코오스, 프럭토오스, 만노오스, 갈락토오스, 리보오스, 소르보오스, 리불로오스, 락토오스, 말토오스, 수크로오스, 라피노오스, 이들의 혼합물 등이 사용될 수 있고, 배지에의 첨가량은 1 내지 10%(w/v) 범위일 수 있으며, 또한 배지에는 질소원이나 미량원소가 0.1 내지 3%(w/v) 범위로 더 포함될 수 있는데, 질소원으로서는 암모니아, 암모늄염, 우레아, 아미노산, 대두박, 대두 단백질, 효모 추출물, 육즙 등을 들 수 있고, 미량원소로서는 칼슘, 마그네슘, 나트륨, 코발트, 몰리브덴, 칼륨, 망간, 아연, 구리, 철, 인, 황 등을 들 수 있다. 배양은 25℃ 내지 40℃, 바람직하게는 35 내지 37℃에서 12시간 내지 2일 정도 이루어질 수 있다.In the present invention, the lactic acid bacterium is inoculated with a lactic acid bacterium inactivated by a lactic acid bacterium activated with a bacterium extract (including hot water) before inoculation, specifically, a carbon source such as a bacterium, Or cultured in the same manner as described above. Although the present inventors have not shown in the following Experimental Example, it is believed that fermentation will proceed to the deep portion of the pancake when lactic acid bacteria activated with Baekseoncho extract are used. The lactic acid bacillus which is activated by the extract of water of Baekjangju (including hot water) can be obtained by preparing a medium containing the Baekjangjang water extract and the carbon source and inoculating the lactic acid bacterium thereto, wherein the carbon source is any carbon source, The present invention relates to a pharmaceutical composition containing the compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt thereof, such as oligosaccharide, lactose, glucose, fructose, sugar, molasses, dextrose, starch, glucose, fructose, mannose, galactose, ribose, sorbose, ribulose, lactose, maltose, sucrose, (W / v), and the medium may further contain a nitrogen source or a trace element in the range of 0.1 to 3% (w / v) Examples of the nitrogen source include ammonia, ammonium salts, urea, amino acids, soybean meal, soybean protein, yeast extract, and juice. Examples of the trace elements include calcium, magnesium, sodium, , Molybdenum, potassium, manganese, zinc, copper, iron, phosphorus, sulfur and so on. The cultivation can be carried out at 25 캜 to 40 캜, preferably 35 to 37 캜, for about 12 hours to 2 days.

또 본 발명에서, 상기 접종 후의 배양은 15℃~45℃의 온도 조건 특히 30℃~40℃의 온도 조건에서 이루어질 수 있다. 배양 온도가 상기 범위보다 낮을 경우 발효 속도가 느려질 수 있고 또한 원하지 않는 발효 산물이 생겨날 수 있으며, 배양 온도가 상기 범위보다 높을 경우도 발효 미생물의 사멸에 따라 마찬가지로 발효 속도가 느려지거나 원하지 발효 산물이 생겨날 수 있다. 배양 시간은 1 일 내지 7일 정도 이루어질 수 있다.In the present invention, the culture after inoculation may be carried out at a temperature of 15 ° C to 45 ° C, particularly at a temperature of 30 ° C to 40 ° C. If the incubation temperature is lower than the above range, the fermentation rate may be slowed and unwanted fermentation products may be produced. Even if the incubation temperature is higher than the above range, the fermentation rate may be similarly slowed down due to the death of the fermentation microorganisms, . The incubation time can be from 1 day to 7 days.

본 발명의 항균용 조성물은 그 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 그 유효성분인 왜당귀 잎 정유 추출물을, 본 발명의 항균용 조성물이 구체화되는 제품 형태에 따라 0.0001 중량% 내지 20 중량%, 바람직하게는 0.0001 중량% 내지 15 중량%, 더 바람직하게는 0.0001 중량% 내지 10 중량%의 범위로 함유할 수 있다. The antimicrobial composition of the present invention can be used in an amount of from 0.0001 to 20% by weight, preferably from 0.0001 to 20% by weight, based on the total weight of the composition, depending on the form of the antimicrobial composition of the present invention, Can be contained in the range of 0.0001 wt% to 15 wt%, more preferably 0.0001 wt% to 10 wt%.

본 발명의 항균용 조성물은 그 유효성분 이외에 분산제와 담체를 포함하여 제조될 수 있다. The antimicrobial composition of the present invention may be prepared by including a dispersant and a carrier in addition to the effective ingredient.

그러한 분산제로서 물, 알코올(예: 메틸 알코올, 에틸 알코올, 에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 디에틸렌 글리콜, 글리세린 등), 케톤(예: 아세톤, 메틸 에틸 케톤 등), 에테르(예: 디옥산, 테트라하이드로푸란, 셀로솔브, 디에틸렌 글리콜 디메틸 에테르 등), 지방족 탄화수소(예: 헥산, 케로센 등), 방향족 탄화수소(예:벤젠, 톨루엔, 크실렌, 나프탈렌, 메틸 나프탈렌 등), 할로겐화 탄화수소(예: 클로로포름, 카본 테트라클로라이드 등), 산 아미드(예: 디메틸 포름아디드 등), 에스테르(예: 메틸 아세테이트 에스테르, 에틸 아세테이트 에스테르, 부틸 아세테이트 에스테르, 지방산 글리세린 에스테르 등), 니트롤(예: 아세토니트릴 등), 계면 활성제(고급 알코올 설페이트 에스테르, 알킬 설폰산, 알킬 알릴 설폰산, 4급 암모늄 염, 옥시 알킬 아민, 지방산 에스테르, 폴리알킬렌 옥시드 화합물, 안하이드로 소르비톨 화합물) 등을 들 수 있는데, 상기 분산제는 단독으로 또는 2종 이상의 혼합물로 본 발명의 항균용 조성물에 포함되어 제조될 수 있다.Such dispersants include water, alcohols such as methyl alcohol, ethyl alcohol, ethylene glycol, propylene glycol, diethylene glycol, glycerin, etc., ketones such as acetone and methyl ethyl ketone, ethers such as dioxane, Aliphatic hydrocarbons such as hexane and kerosene; aromatic hydrocarbons such as benzene, toluene, xylene, naphthalene and methylnaphthalene; halogenated hydrocarbons such as chloroform, Carbon tetrachloride and the like), acid amides (e.g., dimethylformamide), esters (e.g., methyl acetate ester, ethyl acetate ester, butyl acetate ester, fatty acid glycerin ester and the like), nitrol (e.g., acetonitrile) Surfactants (higher alcohol sulfate esters, alkyl sulfonic acids, alkyl allyl sulfonic acids, quaternary ammonium salts, oxyalkylamines, fatty acid esters A polyalkylene oxide compound, and an anhydrous sorbitol compound). The dispersant may be incorporated into the antimicrobial composition of the present invention alone or as a mixture of two or more thereof.

담체의 경우로서는 점토(예: 카올린, 벤토나이트, 산 점토 등), 활석(예: 활석 분말, 납석 분말 등), 실리카(예: 규조토, 규산 무수물, 운모 분말 등), 알루미나, 황 분말, 활성탄 등이 예시될 수 있으며, 이들 담체도 단독으로 또는 2종 이상의 혼합물로서 본 발명의 항균용 조성물에 포함되어 제조될 수 있다. Examples of the carrier include clay (e.g., kaolin, bentonite, acid clay, etc.), talc (such as talc powder and tin powder), silica (such as diatomaceous earth, silicic anhydride, and mica powder), alumina, sulfur powder, May be exemplified, and these carriers may be prepared by being included in the antimicrobial composition of the present invention alone or as a mixture of two or more kinds.

본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서는 약제학적 조성물로 파악될 수 있다. 본 발명의 조성물이 약제학적 조성물로 파악될 경우 그 약리효과 또는 그 용도는 여드름균에 대한 항균 활성에 의한 여드름 예방 또는 치료로 이해될 수 있다.In a specific embodiment, the composition of the present invention can be identified as a pharmaceutical composition. When the composition of the present invention is identified as a pharmaceutical composition, its pharmacological effect or its use can be understood as prevention or treatment of acne due to antimicrobial activity against acne bacteria.

본 발명의 약제학적 조성물은 유효성분 이외에 약제학적으로 허용되는 담체를 포함하여 당업계에 공지된 통상의 방법으로 투여 경로에 따라 경구용 제형 또는 비경구용 제형으로 제조될 수 있다. 여기서 투여 경로는 국소 경로, 경구 경로, 정맥 내 경로, 근육 내 경로, 및 점막 조직을 통한 직접 흡수를 포함하는 임의의 적절한 경로일 수 있으며, 두 가지 이상의 경로를 조합하여 사용할 수도 있다. 두 가지 이상 경로의 조합의 예는 투여 경로에 따른 두 가지 이상의 제형의 약물이 조합된 경우로서 예컨대 1차로 어느 한 약물은 정맥 내 경로로 투여하고 2차로 다른 약물은 국소 경로로 투여하는 경우이다. The pharmaceutical composition of the present invention may be prepared into oral formulations or parenteral formulations according to the route of administration by conventional methods known in the art, including pharmaceutically acceptable carriers in addition to the active ingredient. Where the route of administration may be any suitable route including local routes, oral routes, intravenous routes, intramuscular routes, and direct absorption through mucosal tissues, and combinations of two or more routes may be used. An example of a combination of two or more routes is a combination of two or more formulations of the drug according to the route of administration, for example, one drug is administered intravenously and another drug is administered via a local route.

약학적으로 허용되는 담체는 투여 경로나 제형에 따라 당업계에 주지되어 있으며, 구체적으로는 "대한민국약전"을 포함한 각국의 약전을 참조할 수 있다. Pharmaceutically acceptable carriers are well known in the art depending on the route of administration and formulation, and specific reference may be made to the pharmacopoeia of each country, including the " Korean Pharmacopoeia ".

본 발명의 약제학적 조성물이 경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 분말, 과립, 정제, 환제, 당의정제, 캡슐제, 액제, 겔제, 시럽제, 현탁액, 웨이퍼 등의 제형으로 제조될 수 있다. 이때 적합한 담체의 예로서는 락토스, 글루코스, 슈크로스, 덱스트로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨 등의 당류, 옥수수 전분, 감자 전분, 밀 전분 등의 전분류, 셀룰로오스, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로오스, 하이드록시프로필메틸셀룰로오스 등의 셀룰로오스류, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 마그네슘 스테아레이트, 광물유, 맥아, 젤라틴, 탈크, 폴리올, 식물성유, 에탄올, 그리세롤 등을 들 수 있다. 제제화활 경우 필요에 따라적절한 결합제, 윤활제, 붕해제, 착색제, 희석제 등을 포함시킬 수 있다. 적절한 결합제로서는 전분, 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분페리스트, 젤라틴, 메틸셀룰로스, 소듐 카복시메틸셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 글루코스, 옥수수 감미제, 소듐 알지네이트, 폴리에틸렌 글리콜, 왁스 등을 들 수 있고, 윤활제로서는 올레산나트륨, 스테아르산나트륨, 스테아르산마그네슘, 벤조산나트륨, 초산나트륨, 염화나트륨, 실리카, 탈쿰, 스테아르산, 그것의 마그네슘염과 칼슘염, 폴리데틸렌글리콜 등을 들 수 있으며, 붕해제로서는 전분, 메틸 셀룰로스, 아가(agar), 벤토나이트, 잔탄 검, 전분, 알긴산 또는 그것의 소듐 염 등을 들 수 있다. 또 희석제로서는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 소비톨, 셀룰로스, 글라이신 등을 들 수 있다. When the pharmaceutical composition of the present invention is prepared into an oral formulation, it may be formulated into powder, granules, tablets, pills, sugar tablets, capsules, solutions, gels, syrups, suspensions, wafers And the like. Examples of suitable carriers include starches such as lactose, glucose, sucrose, dextrose, sorbitol, mannitol and xylitol, corn starch, potato starch and wheat starch, cellulose, methylcellulose, ethylcellulose, sodium carboxymethylcellulose, Hydroxypropylmethylcellulose and the like; polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, magnesium stearate, mineral oil, malt, gelatin, talc, polyol, vegetable oil, ethanol Serol, and the like. In case of formulation, suitable binders, lubricants, disintegrants, coloring agents, diluents and the like may be included as needed. Examples of suitable binders include starch, magnesium aluminum silicate, starch pellets, gelatin, methyl cellulose, sodium carboxymethyl cellulose, polyvinyl pyrrolidone, glucose, corn sweetener, sodium alginate, polyethylene glycol, wax and the like. Examples of the disintegrating agent include starch, methylcellulose, magnesium stearate, magnesium stearate, magnesium stearate, sodium benzoate, sodium acetate, sodium chloride, silica, talcum, stearic acid, Agar, bentonite, xanthan gum, starch, alginic acid or its sodium salt, and the like. Examples of the diluent include lactose, dextrose, sucrose, mannitol, sorbitol, cellulose, glycine and the like.

본 발명의 약제학적 조성물이 비경구용 제형으로 제조될 경우, 적합한 담체와 함께 당업계에 공지된 방법에 따라 주사제, 경피 투여제, 비강 흡입제 및 좌제의 형태로 제제화될 수 있다. 주사제로 제제화할 경우 적합한 담체로서는 수성 등장 용액 또는 현탁액을 사용할 수 있으며, 구체적으로는 트리에탄올 아민이 함유된 PBS(phosphate buffered saline)나 주사용 멸균수, 5% 덱스트로스 같은 등장 용액 등을 사용할 수 있다. 경피 투여제로 제제화할 경우 연고제, 크림제, 로션제, 겔제, 외용액제, 파스타제, 리니멘트제, 에어롤제 등의 형태로 제제화할 수 있다. 비강 흡입제의 경우 디클로로플루오로메탄, 트리클로로플루오로메탄, 디클로로테트라플루오로에탄, 이산화탄소 등의 적합한 추진제를 사용하여 에어로졸 스프레이 형태로 제제화할 수 있으며, 좌제로 제제화할 경우 그 담체로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 폴리에틸렌글리콜류, 카카오지, 라우린지, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류, 폴리옥시에틸렌 스테아레이트류, 소르비탄 지방산 에스테르류 등을 사용할 수 있다.When the pharmaceutical composition of the present invention is prepared into a parenteral dosage form, it may be formulated in the form of an injection, transdermal drug delivery, nasal aspirate and suppository together with a suitable carrier according to methods known in the art. As the carrier suitable for injection preparation, aqueous isotonic solutions or suspensions may be used. Specifically, PBS (phosphate buffered saline) containing triethanolamine, sterile water for injection, and isotonic solution such as 5% dextrose may be used . When formulated with a transdermal preparation, it can be formulated in the form of ointments, creams, lotions, gels, external liquids, pastes, liniments, and air-lozenges. Nasal inhalers may be formulated in the form of aerosol sprays using suitable propellants such as dichlorofluoromethane, trichlorofluoromethane, dichlorotetrafluoroethane, carbon dioxide, etc., and when formulated as a suppository, witepsol, tween 61, polyethylene glycols, cacao butter, laurin, polyoxyethylene sorbitan fatty acid esters, polyoxyethylene stearates, and sorbitan fatty acid esters.

약제학적 조성물의 구체적인 제제화와 관련하여서는 당업계에 공지되어 있으며, 예컨대 문헌[Remington's Pharmaceutical Sciences(19th ed., 1995)] 등을 참조할 수 있다. 상기 문헌은 본 명세서의 일부로서 간주 된다.The formulation of pharmaceutical compositions is well known in the art and can be found, for example, in Remington ' s Pharmaceutical Sciences (19th ed., 1995). This document is considered part of this specification.

본 발명의 약제학적 조성물의 바람직한 투여량은 환자의 상태, 체중, 성별, 연령, 환자의 중증도, 투여 경로에 따라 1일 0.001mg/kg ~ 10g/kg 범위, 바람직하게는 0.001mg/kg ~ 1g/kg 범위일 수 있다. 투여는 1일 1회 또는 수회로 나누어 이루어질 수 있다. 이러한 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 해석되어서는 아니 된다. The preferred dosage of the pharmaceutical composition of the present invention is 0.001 mg / kg to 10 g / kg per day, preferably 0.001 mg / kg to 1 g / day, depending on the patient's condition, body weight, sex, age, / kg < / RTI > The administration can be carried out once or several times a day. Such dosages should in no way be construed as limiting the scope of the invention.

본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서, 화장료 조성물로 파악할 수 있다. In another specific embodiment, the composition of the present invention can be identified as a cosmetic composition.

본 발명의 조성물이 화장료 조성물로 파악될 경우에도 그 화장료 조성물은 그 용도상, 법률상 임의의 제품 구분을 띨 수 있으며, 구체적으로 피부 트러블 개선, 아토피 피부염 개선 등의 용도를 가진 기능성 화장품, 비기능성 일반 화장품 등일 수 있다. 제품 형태에 있어서도 임의의 제품 형태를 띨 수 있는데, 구체적으로 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 젤, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 스프레이 등의 제품 형태를 띨 수 있다. 구체적인 제품 형태에 있어서는 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형 등일 수 있다.Even when the composition of the present invention is identified as a cosmetic composition, the cosmetic composition may be classified into any product category according to the use of the cosmetic composition. Specifically, the cosmetic composition may contain functional cosmetic products having applications such as improvement of skin troubles and improvement of atopic dermatitis, General cosmetics, and the like. Specific examples of the product form include a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing oil, powder foundation, emulsion foundation, wax Foundation, spray, and the like. In a specific product form, it may be a form of flexible lotion, nutritional lotion, nutritional cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder.

본 발명의 화장료 조성물은 그 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들, 예컨대, 안정화제, 용해화제, 계면활성제, 비타민, 색소 및 항료와 같은 통상적인 보조제, 및 담체를 포함할 수 있다. The cosmetic composition of the present invention may contain, in addition to its active ingredient, conventional additives such as stabilizers, solubilizing agents, surfactants, vitamins, colorants and antioxidants, and carriers commonly used in cosmetic compositions.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, a cream or a gel, an animal oil, vegetable oil, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as a carrier component .

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. In the case of a spray, in particular, / Propane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되는데, 구체적으로 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜, 소르비탄의 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, a solubilizing agent or an emulsifying agent is used as a carrier component. Specifically, water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, 1,3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol, fatty acid esters of sorbitan, and the like.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, a carrier, such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspension such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester, polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar, etc. may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component is selected from aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 주름 개선 활성을 나타내는 그 유효성분을 포함하는 것을 제외하고는 당업계에 통상적으로 행하여지는 화장료 조성물의 제조방법에 따라 제조할 수 있다.The cosmetic composition of the present invention can be produced according to a method for producing a cosmetic composition which is usually carried out in the art, except that it contains the effective ingredient showing skin wrinkle improving activity.

전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 항산화 활성이 상승하고 맛, 향, 조직감 등이 기호도가 상승한 백년초 열매의 유산균 발효환을 제공할 수 있다.As described above, according to the present invention, it is possible to provide a fermented fermented product of lactic acid bacteria having an increased antioxidative activity and an increased likeness such as taste, flavor, texture and the like.

도 1은 평판배양 사진이다.1 is a plate culture photograph.

이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described with reference to Examples and Experimental Examples. However, the scope of the present invention is not limited to these examples and experimental examples.

<< 실시예Example > > 백년초 유산균 발효환의 제조Production of lactic acid fermented product

(1) 백년초 유산균 발효환의 제조를 위하여, 미분쇄된 백년초 분말에 백년초 100 중량부 기준 15 중량부 정제수를 가하여 반죽하고 제환기를 이용하여 직경 3~4mm 환 형태로 제조한 후 당의기를 이용하여 균일한 모양의 원형으로 만들고 그 후 65~70℃에서 6~12시간 가량 건조하여 수분을 일부 제거하여(환의 수분 함량 10%(w/w) 이하) 백년초 비발효 환을 만들었다. 다음 이 비발효 환에 멸균된 분무기를 이용하여 유산균 희석액을 분무한 후 밀폐용기에서 30~37℃의 온도로 1~5일간(제조예 1 내지 5, 1일 배양은 제조예 1이고, 배양 기간에 따라 5일 배양은 제조예 5임) 배양하여 발효시키고, 발효 후 65~70℃에서 6~12시간 가량 건조하여 환 형태의 유산균 발효물을 제조하였다. (1) For the production of lactic acid fermentation product of 100 years old, 15 parts by weight of purified water of 100 parts by weight per 100 parts by weight of the perennial plant was added to the finely ground perennial plant powder, kneaded and kneaded using a ventilator to form a 3-4 mm diameter ring, And then dried at 65 ~ 70 ℃ for 6 ~ 12 hours to partially remove the water (10% (w / w) water content of the ring). Next, the lactic acid bacteria diluted solution was sprayed using a sprayer sterilized in a non-fermentation ring, and the mixture was sprayed in a sealed container at a temperature of 30 to 37 ° C for 1 to 5 days (Production Example 1 to 5, , The fermentation was carried out at a temperature of 65 to 70 ° C. for 6 to 12 hours to prepare a fermented product of lactic acid bacteria in the form of a ring.

(2) 상기 유산균 희석액은 백년초 건조 분말에 20배(w/w)에 해당하는 정제수 1ℓ 투입하여 100℃에서 1시간 열수추출하고 그 추출액을 0.45㎛의 마이크로필터를 이용하여 여과한 후, 이 여액에 당밀 4%(w/v), 효모 추출물 1.2%(w/v), 탄산칼슘 0.5%(w/v)를 첨가·혼합하고 121℃에서 15분간 멸균하여 배지를 준비하고, 여기에 미리 MRS(DeMan, Rogosa, and Sharpe) broth 배지에서 준비한 Lactobacillus plantarum KCCM 80077 배양액을 1%(v/v) 접종하여 30℃ 내지 37℃의 온도에서 20시간 정치 배양하고, 배양 후 균체를 회수하기 위하여 10,000rpm에서 15분간 원심분리하여 상층액을 제거하고, 생리식염수를 제거된 상층액의 만큼의 양으로 첨가·희석하여 준비하였다. (2) The diluted lactic acid bacterium was prepared by adding 1 L of purified water corresponding to 20 times (w / w) to the dried powder of Baicin Seaweed, subjecting it to hot water extraction at 100 ° C for 1 hour, filtering the resulting extract with a 0.45 μm microfilter, Were added and mixed with 4% (w / v) molasses, 1.2% (w / v) yeast extract and 0.5% (w / v) calcium carbonate and sterilized at 121 ° C for 15 minutes to prepare a medium. (V / v) of the Lactobacillus plantarum KCCM 80077 culture prepared in a DeMan, Rogosa, and Sharpe broth medium and cultured at a temperature of 30 ° C to 37 ° C for 20 hours. After culturing, For 15 minutes to remove the supernatant, and physiological saline was added and diluted as much as the supernatant.

<비교예> <Comparative Example> 백년초 비발효환과 백년초 유산균 발효액의 제조Production of non-fermented beans and fermented broth of lactic acid bacteria

<비교예 1> &Lt; Comparative Example 1 & 백년초 비발효환의 제조Production of non-fermented perennials

백년초 비발효 환의 제조는, 상기 실시예와 동일하게 제조하였다. 구체적으로 미분쇄된 백년초 분말에 백년초 100 중량부 기준 15 중량부 정제수를 가하여 반죽하고 제환기를 이용하여 직경 3~4mm 환 형태로 제조한 후 당의기를 이용하여 균일한 모양의 원형으로 만들고 그 후 65~70℃에서 6~12시간 가량 건조하여 수분을 일부 제거하여 제조하였다.The production of non-fermented perennials was carried out in the same manner as in the above example. Specifically, 15 parts by weight of purified water of 100 parts by weight per 100 parts by weight of 100 parts by weight of the perennial plant was added to the finely pulverized perennial plant powder, and the plant was kneaded using a ventilating machine to form a 3 to 4 mm diameter circle, And dried at ~ 70 ° C for about 6 to 12 hours to partially remove water.

<비교예 2> &Lt; Comparative Example 2 & 백년초 유산균 발효액의 제조Preparation of fermentation broth of lactic acid bacteria

백년초 유산균 발효액의 제조는 백년초 건조 분말에 20배(w/w)에 해당하는 정제수 1L 투입하여 100℃에서 1시간 열수추출하고 그 추출액을 0.45 m의 마이크로필터를 이용하여 여과한 후, 이 여액에 당밀 4%(w/v), 효모추출물 1.2%(w/v), 탄산칼슘 0.5%(w/v)를 첨가혼합하고 121℃에서 15분간 멸균하여 배지를 준비하였다. 준비한 배지에 미리 MRS (DeMan, Rogosa, and Sharpe) 평판 배지에서 준비한 Lacobacillus plantarum KCCM 80077의 균체를 취하여 접종하였고, 30 내지 37℃의 온도에서 20시간 정치 배양하였다. 배양액은 다시 121℃에서 15분간 멸균한 후, 동결건조하여 분말상으로 얻었다.The fermentation of lactic acid bacteria was carried out by adding 1 L of purified water of 20 times (w / w) to the dried powder of Baekseongchocho, hot water extraction at 100 ℃ for 1 hour, filtering the extract with 0.45 m microfilter, The medium was prepared by adding 4% (w / v) molasses, 1.2% (w / v) yeast extract and 0.5% (w / v) calcium carbonate and sterilization at 121 ° C for 15 minutes. Cells of Lacobacillus plantarum KCCM 80077 prepared in a MRS (DeMan, Rogosa, and Sharpe) plate medium were inoculated in the prepared medium and cultured at a temperature of 30 to 37 ° C for 20 hours. The culture broth was sterilized again at 121 ° C for 15 minutes and then lyophilized to obtain a powder.

<< 실험예Experimental Example > > 여드름 균에 대한 항균 활성 실험-생육저해환의 측정Antibacterial activity against acne bacteria - Measurement of inhibition of growth

여드름 균에 대한 항균 활성을 측정하기 위한 시료의 제조를 위해서, 상기 비교예 1의 백년초 비발효환과 상기 제조예 1 내지 5의 백년초 유산균 발효환 각각에, 상온에서 20배(w/v)에 해당하는 70% 주정(에탄올) 1 L를 투입하여 24 시간 추출한 후 0.45 m의 마이크로 필터를 이용하여 여과하는 과정을 3회 반복하고, 그 여액은 감압농축 동결건조하여 분말상의 추출물을 제조하여 사용하였다. 비교예 2의 백년초 유산균 배양액에 대해서도 상기와 동일하게 그 동결건조된 분말에, 상온에서 20배(w/v)에 해당하는 70% 주정(에탄올) 1 L를 투입하여 24 시간 추출한 후 0.45 m의 마이크로 필터를 이용하여 여과하는 과정을 3회 반복하고, 그 여액은 감압농축 동결건조하여 분말상의 추출물을 제조하여 사용하였다.In order to prepare a sample for measuring the antimicrobial activity against acne bacteria, 20 μl (w / v) was added to each of the non-fermented perennials of Comparative Example 1 and each of the fermented fermented lactic acid bacteria of each of the above- (Ethanol) was added for 24 hours and then filtered using a 0.45 m microfilter. The filtrate was concentrated under reduced pressure and lyophilized to prepare a powdery extract. For the culture of the lactic acid bacteria of the comparative example 2, 1 L of 70% alcohol (ethanol) corresponding to 20 times (w / v) was added to the lyophilized powder at the room temperature for 24 hours, The process of filtration using a microfilter was repeated three times, and the filtrate was concentrated under reduced pressure and lyophilized to prepare a powdery extract.

상기 얻어진 각 분말상의 추출물에 50% 에탄올을 가하여 100 mg/mL 농도의 시료 용액로 제조한 후, 이 100 mg/mL의 시료 용액 100 ㎕와 멸균 정제수 100 ㎕를 1:1(v/v)로 혼합하여, 최종적으로 25% EtOH 용액에 시료 50 mg/mL 농도가 되도록 제조하여, 항균 활성 측정을 위한 시료로 사용하였다. 100 μl of the 100 mg / mL sample solution and 100 μl of sterilized purified water were mixed at a ratio of 1: 1 (v / v) to prepare a sample solution having a concentration of 100 mg / mL by adding 50% ethanol to each of the obtained powdery extracts The mixture was finally mixed with a 25% EtOH solution so as to have a concentration of 50 mg / mL and used as a sample for antimicrobial activity measurement.

항균 활성 측정에 이용된 균주는 Propionibacterium acnes로 KCTC(Korea Collection for Type Cultures)로부터 구입 분양받아 사용하였다. P. acnes의 배양 배지는 RCM(Reinforced clostridial medium)를 사용하여 활성화 시켰으며, 균을 배양 배지에 접종한 후 anaerobic jar에서 AnaeroGen (oxoid)를 이용하여 밀봉하여 37℃에서 48시간 동안 혐기성 배양하여 사용하였다. The strains used for antimicrobial activity measurement were purchased from KCTC (Korea Collection for Type Cultures) as propionibacterium acnes . The culture medium of P. acnes was activated by using RCM (Reinforced clostridial medium). After incubation of the bacteria in the culture medium, Anaerobic jar was sealed with AnaeroGen (oxoid) and anaerobically cultured at 37 ° C for 48 hours Respectively.

생육저해환(clear zone) 측정법은 CLSI(Clinical and Laboratory Standards Institute) 표준방법을 변형하여 측정하였다. 구체적으로 평판배지에 순수 분리된 균주를 백금이로 취하여 RCM 액체 배지 10 mL에 현탁한 후 spectrophotometer를 이용하여 600 nm에서 0.08-0.10 범위의 흡광도를 갖도록 stock culture를 제조하였다. Stock culture는 10배 희석하여 working culture를 제조한 후 평판 배지에 100 ㎕ 분주하여 spreader로 균일하게 도말하였다. 균주가 도말된 RCM 고체 평판배지 표면에 멸균된 filter paper disc(8 mm, Tokyo, Japan)를 올려놓은 다음 50 mg/mL 농도의 시료용액 50 ㎕ 분주하여 흡수시킨 후 뒤집어서 37℃에서 48 hr 동안 혐기배양한 후 disc 주위의 clear zone(mm)의 직경을 1 disc당 4회 측정하였다. The clear zone measurement method was modified by the CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) standard method. Specifically, strains isolated from platelets were platinum, suspended in 10 mL of RCM liquid medium, and then stock culture was performed using spectrophotometer at an absorbance ranging from 0.08-0.10 at 600 nm. Stock cultures were diluted 10-fold to prepare working cultures, and 100 μl of the culture was spread on a flat plate. After sterilized filter paper discs (8 mm, Tokyo, Japan) were placed on the surface of the RCM solid plate culture medium, 50 μl of the 50 mg / ml sample solution was absorbed and inoculated. After the incubation, the clear zone (mm) diameter around the disc was measured four times per disc.

대조구는 양성 대조구로 여드름 균주에 대한 항생제로 알려진 clindamycin(대조구 1)과 tetracycline(대조구 2)을 10% 농도로 멸균 정제수에 희석하여 제조하여 사용하였고, 음성 대조구로는 25% EtOH solution(대조구 3)을 제조하여 사용하였다. 결과는 각 농도별 3번 반복 실험에 따른 결과에서 filter paper disc(8 mm) 직경을 제외한 값에 대하여 평균편차를 구하여 아래 [표 1]에 나타내었고 각 군별 대표적인 평판배양 사진을 [도 1]에 나타내었다. In the control, clindamycin (control 1) and tetracycline (control 2), known as antibiotics for acne, were diluted in sterile purified water at a concentration of 10%, and 25% EtOH solution (control 3) Were prepared and used. The results are shown in Table 1 below and the mean deviation of the values except for the diameter of filter paper disc (8 mm) was obtained from the results of three repeated experiments for each concentration, and representative plate culture photographs of each group were shown in FIG. 1 Respectively.

생육저해환Inhibition of growth 시료sample Diameter of clear zone(mm)Diameter of clear zone (mm) 대조구 1Control 1 26.0 ± 2.426.0 ± 2.4 대조구 2Control 2 14.1 ± 4.114.1 ± 4.1 대조구 3Control 3 N.D.N.D. 비교예 1Comparative Example 1 N.D.N.D. 비교예 2Comparative Example 2 N.D.N.D. 제조예 1Production Example 1 18.8 ± 1.318.8 ± 1.3 제조예 2Production Example 2 17.2 ± 0.117.2 ± 0.1 제조예 3Production Example 3 18.4 ± 1.018.4 ± 1.0 제조예 4Production Example 4 18.3 ± 0.418.3 ± 0.4 제조예 5 Production Example 5 15.8 ± 1.315.8 ± 1.3

상기 [표 1]과 [도 1]의 결과에서 확인되듯이, 비교예 1의 비발효 백년초 추출물과 비교예 2의 백년초 유산균 발효액 추출물의 경우 여드름 균주인 P. acnes에 대해서 항균 활성을 보이지 않았다. 25% EtOH(대조구 3)도 항균 활성을 보이지 않았다. 실시예의 백년초 유산균 발효환 추출물(제조예 1~5)의 경우 10% clindamycin (대조구 1)보다 낮은 항균 활성을 보였으나, 10% tetracycline(대조구 2)에 보다 높은 항균 활성을 나타내었다. As can be seen from the results of [Table 1] and [Figure 1], the non-fermented perennial plant extract of Comparative Example 1 and the perennial plant extract of Fermentation Lactic acid bacteria of Comparative Example 2 showed no antimicrobial activity against the acne strain, P. acnes . 25% EtOH (control 3) showed no antimicrobial activity. The antimicrobial activity of 10% clindamycin (control 1) was higher than that of 10% tetracycline (control 2).

비교예 1의 비발효 백년초 추출물이 항균 활성을 보이지 않은데 반하여 실시예의 백년초 유산균 발효환 추출물(제조예 1~5)의 경우 높은 항균 활성을 보인 것은 백년초의 유산 발효에 의해 생성된 발효 산물이 P. acnes에 대하여 항균력을 가지기 때문으로 판단되고, 비교예 2의 백년초 유산균 발효액 추출물이 항균 활성을 보이지 않은 것은 유산균이 액상과 고상에서의 발효 환경 차이로 인하여 생성하는 발효 산물의 차이 때문으로 판단된다. Fermented product of Comparative Example 1 showed no antimicrobial activity, whereas the antimicrobial activity of the lactic acid fermented product extracts of Preparation Example 1 (Preparation Examples 1 to 5) was shown to be higher than that of the fermented product produced by lactic acid fermentation of Paeoniae . acnes and the fermentation broth of Comparative Example 2 showed no antimicrobial activity due to differences in fermentation products due to differences in the fermentation environment between the liquid phase and the solid phase.

Claims (6)

백년초 열매 분말에 정제수를 가하여 제조한 고상물(固狀物, solid phase product)에 유산균인 락토바실러스 플란타럼을 접종하여 얻어진 고상 발효물의 분말이나 그 추출물을 유효성분으로 포함하는, 여드름균인 프로피오니박테리움 아크네스(Propionibacterium acnes)에 대한 항균 조성물.
A solid phase product prepared by adding purified water to a powder of Baekjunju powder, and a solid phase fermented product obtained by inoculating Lactobacillus plantarum, which is a lactic acid bacterium, with an extract thereof, An antimicrobial composition for Onion Bacterium acnes .
제1항에 있어서,
상기 추출물은 물, 에탄올 또는 이들의 혼합용매 추출물인 것을 특징으로 하는 항균 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the extract is water, ethanol or a mixed solvent thereof.
제1항에 있어서,
상기 유산균은 락토바실러스 플란타럼 KCCM 80077인 것을 특징으로 하는 백년초 열매를 이용한 항균 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the lactic acid bacterium is Lactobacillus plantarum KCCM 80077.
제1항 내지 제3항에 있어서,
상기 조성물은 화장료 조성물인 것을 특징으로 하는 항균 조성물.
4. The method according to any one of claims 1 to 3,
Wherein the composition is a cosmetic composition.
제1항 내지 제3항에 있어서,
상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 항균 조성물.
4. The method according to any one of claims 1 to 3,
Wherein said composition is a pharmaceutical composition.
제5항에 있어서,
상기 조성물은 여드름의 치료 또는 예방 약리 효과를 갖는 항균 조성물.
6. The method of claim 5,
Wherein said composition has a therapeutic or prophylactic pharmacological effect of acne.
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