KR20190007721A - CARTRIDGE for cell culture - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 세포배양용 카트리지에 관한 것이며, 더욱 상세하게는 세포배양 지지체의 탈착이 용이하면서 안정적인 세포배양 환경을 제공할 수 있고, 고밀도의 세포배양에 유리한 세포배양용 카트리지에 관한 것이다.The present invention relates to a cell culture cartridge, and more particularly, to a cell culture cartridge which is capable of providing a stable cell culture environment with ease of desorption of a cell culture support and is advantageous for high-density cell culture.
최근, 질병 치료에 배양 세포의 이용이 확대됨에 따라 세포배양에 대한 관심 및 연구가 증가하고 있다. 세포배양은 세포를 생체로부터 채취하고, 생체 밖에서 배양시키는 기술이며, 배양된 세포는 피부, 장기, 신경 등 신체의 다양한 조직으로 분화시켜 인체에 이식되거나 분화시키기 전 상태로 인체에 이식시켜 생착 및 분화를 동시에 이루어지게 하여 다양한 질병 치료에 활용될 수 있다.Recently, as the use of cultured cells for disease treatment is expanded, interest and research on cell culture are increasing. Cell culture is a technique for extracting cells from a living body and culturing them out of the living body. The cultured cells are differentiated into various tissues of the body such as skin, organs, nerves, etc. and transplanted into the human body before transplantation into the human body. And can be used for treating various diseases.
이와 같은 세포배양이 연계된 분야가 조직공학(tissue engineering)이며, 세포학, 생명과학, 공학, 의학 등의 기존의 과학 영역을 응용하는 다학제간 학문으로써, 생체조직의 구조와 기능 사이의 상관관계를 이해하고, 손상된 조직이나 장기를 정상적인 조직으로 대체, 재생시키기 위한 새로운 융합기술이 연구되고 있다.This field of tissue culture is related to cell culture and it is a multidisciplinary study applying existing scientific fields such as cytology, life sciences, engineering, medicine, etc., and the correlation between the structure and function of living tissue And new fusion techniques are being studied to replace damaged tissues or organs with normal tissues and regenerate them.
한편, 재생 의료 분야에서 환자에게서 채취한 세포를 생체 외에서 배양할 수 있도록 세포배양 지지체와 세포배양기를 제작하고, 세포배양 지지체에서 배양된 세포를 다시 생체 내로 이식함으로써 의료 효과를 향상시키는 연구가 진행되고 있다.On the other hand, in the field of regenerative medicine, a study is carried out to prepare a cell culture support and a cell culture unit so that cells collected from a patient can be cultured in vitro, and the cells cultured in the cell culture support are transplanted in vivo to improve the medical effect have.
이러한 세포배양기를 통해 세포를 배양하기 위해서는 목적하는 세포가 부착된 세포배양 지지체를 세포배양기에 넣고 세포의 크기와 종류를 고려하여 다양한 세포배양액을 주입하여 목적하는 세포의 배양이 가능하다.In order to cultivate the cells through such a cell incubator, the desired cell-cultured support can be cultured in a cell incubator by injecting various cell cultures in consideration of the size and type of the cells.
그러나 통상적인 세포배양기에서의 세포배양은 다음과 같은 문제가 있다. However, cell culture in a conventional cell culture incubator has the following problems.
첫 번째, 세포배양 지지체가 세포배양기 내에 고정되어 있지 않아서 세포배양 지지체의 미세한 흔들림이나 작은 충격에도 세포가 사멸할 수 있고, 이로 인한 세포의 생존율이 저하되는 문제점이 있다.First, since the cell culture support is not immobilized in the cell culture medium, the cell may be killed even when the cell culture support is finely shaken or subjected to a small impact, and the survival rate of the cell is deteriorated.
두 번째, 배양된 세포를 이식하기 위해서는 배양된 세포가 부착되어 있는 세포배양 지지체에 물리, 화학적 기작을 통하여 세포배양기로부터 분리시켜야 하는데, 이때 세포배양 지지체의 간접적인 파손 또는 배양된 세포 자체에 대한 직접적인 물리, 화학적 작용에 의해 세포가 손상되어 세포의 생존율이 저하될 수 있다.Second, in order to transplant the cultured cells, it is necessary to separate them from the cell culture medium by physicochemical mechanism to the cell culture support having the cultured cells attached thereto. In this case, the indirect destruction of the cell culture support or direct The physiological and chemical action may damage the cells and decrease the survival rate of the cells.
세 번째, 접착필름 등을 통하여 세포배양 지지체를 세포배양기에 고정시킬 경우, 세포배양 지지체를 분리하는 과정에서 지지체의 손상이 발생할 수 있어 지지체의 재사용율 면에서 불리한 문제점이 있다.Third, when the cell culture support is immobilized to the cell culture medium through the adhesive film or the like, the support may be damaged during the separation of the cell culture support, which is disadvantageous in view of the reusability of the support.
네 번째, 종래의 세포배양기는 복수 개의 세포배양 지지체를 구비하면서 동일한 미세 환경을 부여하는 고밀도의 세포배양이 어려워 재생 의료 분야와 같이 대량의 세포 배양이 요구되는 분야에서 적합하지 않은 문제점이 있다.Fourth, the conventional cell culture incubator has a problem in that it is difficult to cultivate high-density cells that have the same microenvironment while having a plurality of cell culture supports, which is not suitable in a field where a large amount of cell culture is required as in the field of regenerative medicine.
이에 따라 본 발명자들은 세포배양기에 세포배양 지지체를 고정시킬 수 있어 안정적인 세포배양 환경을 제공하되, 세포배양기로부터 세포배양 지지체의 탈착이 용이하여 분리과정에서 세포 또는 지지체의 손상을 방지할 수 있고, 고밀도의 세포배양에 유리한 세포배양용 카트리지에 대한 연구를 진행하여 발명을 완성하였다.Accordingly, the present inventors have found that a cell culture support can be immobilized on a cell culture incubator, thereby providing a stable cell culture environment, facilitating desorption of a cell culture support from a cell culture incubator, preventing cell or support damage during the separation process, The present invention has been completed based on studies on cartridges for cell culture which are advantageous for cell culture of cells.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 감안하여 안출한 것으로, 세포배양 지지체의 탈착이 용이하면서 세포배양 지지체를 고정시켜 안정적인 세포배양 환경을 제공하여 세포배양율을 향상시킬 수 있는 세포배양용 카트리지를 제공하는데 목적이 있다.Disclosure of the Invention The present invention has been made in view of the above problems, and provides a cell culture cartridge capable of easily detaching a cell culture support and fixing a cell culture support to provide a stable cell culture environment, thereby improving a cell culture rate There is a purpose.
또한, 본 발명은 세포배양 지지체에 세포배양액을 분산시켜도 지지체의 흔들림을 방지할 수 있고 지지체의 부위에 상관없이 배양되는 각 세포에 동일한 기계, 물리, 화학적 자극을 부여함으로써 세포를 균일하게 증식시킬 수 있는 세포배양기를 제공하는데 다른 목적이 있다.In addition, the present invention can prevent shaking of the supporter even when the cell culture medium is dispersed in the cell culture supporter, and it is possible to uniformly multiply the cells by imparting the same mechanical, physical, and chemical stimulus to each cultured cell regardless of the supporter Lt; RTI ID = 0.0 > incubator. ≪ / RTI >
또한, 본 발명은 대량으로 세포를 배양해야 하는 분야에 적합하도록 고밀도의 세포배양이 가능한 세포배양용 카트리지를 제공하는데 또 다른 목적이 있다.It is another object of the present invention to provide a cell culture cartridge capable of high-density cell culture so as to be suitable for a field in which a large number of cells must be cultured.
또한, 본 발명은 세포배양 지지체의 분리과정에서 세포에 손상을 가하지 않고 목적하는 검사 및 실험에 적합한 형상을 가지는 세포를 배양할 수 있는 세포배양기를 제공하는데 또 다른 목적이 있다.Another object of the present invention is to provide a cell incubator capable of culturing a cell having a shape suitable for a desired test and experiment without damaging the cell in the process of separating the cell culture support.
상술한 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 직물을 포함하는 세포배양 지지체, 상기 세포배양 지지체의 하면에 배치되는 제1 지지부 및 상기 세포배양 지지체의 상면에 배치되는 제2 지지부를 포함하고, 상기 제1 지지부 및 제2 지지부 각각은 테두리부와 중심부를 포함하는 세포배양용 카트리지를 제공한다.In order to solve the above-described problems, the present invention provides a cell culture support comprising a cell culture support, a first support portion disposed on a lower surface of the cell culture support, and a second support portion disposed on an upper surface of the cell culture support, Each of the support portion and the second support portion includes a rim portion and a center portion.
본 발명의 실시예에 의하면, 상기 제1 지지부 및 제2 지지부 중 어느 하나의 테두리부에는 적어도 하나의 돌출부를 포함하고, 상기 제1 지지부 및 제2 지지부 중 다른 하나의 테두리부에는 상기 돌출부가 인입되는 수용부를 포함할 수 있다.According to an embodiment of the present invention, at least one of the first support portion and the second support portion includes at least one protrusion, and the rim of the other one of the first support portion and the second support portion As shown in FIG.
또한, 상기 중심부는 지지기능을 수행하는 프레임부 및 세포배양액이 투과되는 메쉬부를 포함할 수 있다.In addition, the central portion may include a frame portion that performs a supporting function and a mesh portion through which a cell culture liquid is permeated.
또한, 상기 메쉬부의 표면에는 세포 접착 저해물질을 포함할 수 있다.In addition, the surface of the mesh portion may include a cell adhesion inhibitor.
또한, 상기 직물은 방적사, 필라멘트사 및 슬리팅사 중 어느 하나 이상의 원사로 제직될 수 있다. In addition, the fabric may be woven into a yarn of at least one of a yarn spun yarn, a filament yarn, and a slitting yarn.
또한, 상기 원사에는 세포배양 향상물질을 더 포함할 수 있다.In addition, the yarn may further include a cell culture improving material.
또한, 상기 세포배양 향상물질은 세포의 부착, 이동, 성장, 증식(proliferation) 및 분화(differentiation) 중 어느 하나 이상을 유도하는 생리활성성분일 수 있다.In addition, the cell culture enhancing substance may be a physiologically active ingredient that induces at least one of cell adhesion, migration, growth, proliferation, and differentiation.
또한, 상기 생리활성성분은 모노아민, 아미노산, 펩타이드, 당류(saccharide), 지질(lipid), 단백질, 당단백질(glucoprotein), 당지질(glucolipid), 프로테오글리칸, 뮤코다당(mucopolysaccharide) 및 핵산(nucleic acid) 으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 화합물 및 세포 중 어느 하나 이상을 포함할 수 있다.In addition, the physiologically active component may be selected from the group consisting of monoamines, amino acids, peptides, saccharides, lipids, proteins, glucoproteins, glucolipids, proteoglycans, mucopolysaccharides, ) And one or more of the cells.
또한, 상기 원사는 폴리스티렌(PS), 폴리에틸렌테레프탈레이트(PET), 폴리이더술폰(PES), 폴리비닐리덴플루오라이드(PVDF), 폴리아크릴로나이트릴(PAN), 폴리디메틸실록산(PDMS), 폴리아미드, 폴리알킬렌, 폴리알킬렌옥사이드(poly(alkylene oxide)), 폴리아미노산(poly(amino acids)), 폴리알릴아민(poly(allylamines), 폴리포스파젠(polyphosphazene) 및 폴리에틸렌옥사이드-폴리프로필렌옥사이드 블록공중합체로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 비생분해성 섬유형성성분을 포함하거나 또는 폴리카프로락톤(polycaprolactone), 폴리다이옥사논(polydioxanone), 폴리글리콜릭산(polyglycolic acid), PLLA(poly(L-lactide)), PLGA(poly(DL-lactide-co-glycolide)), 폴리락틱산(Polylactic acid) 및 폴리비닐알코올(polyvinyl alcohol)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 생분해성 섬유형성성분을 포함할 수 있다.In addition, the yarn may be selected from the group consisting of polystyrene (PS), polyethylene terephthalate (PET), polyether sulfone (PES), polyvinylidene fluoride (PVDF), polyacrylonitrile (PAN), polydimethylsiloxane Amide, polyalkylene, poly (alkylene oxide), poly (amino acids), poly (allylamines), polyphosphazene and polyethylene oxide-polypropylene oxide Block copolymers, or at least one non-biodegradable fiber-forming component selected from the group consisting of polycaprolactone, polydioxanone, polyglycolic acid, PLLA (poly (L- lactide, lactide), PLGA (poly (DL-lactide-co-glycolide)), polylactic acid and polyvinyl alcohol. There .
또한, 본 발명은 내부에 상기 세포배양용 카트리지가 복수 개로 적층되어 구비된 세포배양기를 제공한다.The present invention also provides a cell incubator comprising a plurality of the cell culture cartridges stacked inside.
또한, 본 발명은 복수개의 세포배양용 카트리지가 소정의 간격을 두고 이격되어 고정된 세포배양용 카트리지 어레이를 제공한다.In addition, the present invention provides a cell culture cartridge array in which a plurality of cell culture cartridges are fixed with a predetermined spacing therebetween.
또한, 본 발명은 상기 세포배양용 카트리지 어레이를 포함하는 세포배양기를 제공한다.The present invention also provides a cell incubator comprising the cell culture cartridge array.
본 발명의 의하면, 세포배양 지지체의 탈착이 용이하면서 세포배양 지지체를 고정시켜 안정적인 세포배양 환경을 제공하여 세포배양율을 향상시킬 수 있다.According to the present invention, the cell culture support can be easily desorbed and the cell culture support can be fixed, thereby providing a stable cell culture environment and improving the cell culture rate.
또한, 세포가 배양되는 과정에서 세포배양 지지체의 흔들림을 방지할 수 있어서 세포배양효율을 제고할 수 있다.In addition, it is possible to prevent shaking of the cell culture supporter during the culturing of the cells, thereby improving cell culture efficiency.
또한, 세포배양 지지체에 세포배양액을 분산시켜도 지지체의 흔들림을 방지할 수 있고 지지체의 부위에 상관없이 배양되는 각 세포에 동일한 기계, 물리, 화학적 자극을 부여함으로써 세포를 균일하게 증식시킬 수 있다.In addition, even if the cell culture medium is dispersed in the cell culture support, it is possible to prevent shaking of the support, and uniform cell growth can be achieved by imparting the same mechanical, physical and chemical stimulation to each cell to be cultured regardless of the region of the support.
본 발명은 대량으로 세포를 배양해야 하는 분야에 적합하도록 고밀도의 세포배양이 가능하다.The present invention enables a high-density cell culture to be suitable for a field where a large number of cells must be cultured.
본 발명은 세포배양 지지체의 분리과정에서 세포에 손상을 가하지 않고 목적하는 검사 및 실험에 적합한 형상을 가지는 세포를 배양할 수 있다.The present invention can cultivate a cell having a shape suitable for a desired test and experiment without damaging the cell in the process of separating the cell culture support.
도 1은 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지를 나타내는 분해 사시도,
도 2는 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지의 제1 지지부를 나타내는 사시도,
도 3은 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지의 제2 지지부를 나타내는 사시도,
도 4는 본 발명에 따른 세포배양 지지체를 나타내는 사시도 및 단면 확대도,
도 5는 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지의 제1 및 제2 지지부와 세포배양 지지체가 결합된 모습을 나타내는 사시도,
도 6은 도 5에 도시된 선 I-I'의 단면도,
도 7은 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지를 포함하는 세포배양기를 나타내는 사시도, 그리고
도 8은 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지를 포함하는 또 다른 세포배양기를 나타내는 사시도이다.1 is an exploded perspective view showing a cell culture cartridge according to the present invention,
FIG. 2 is a perspective view showing a first supporting part of the cell culture cartridge according to the present invention,
3 is a perspective view showing a second support part of the cell culture cartridge according to the present invention,
4 is a perspective view and a sectional enlarged view showing a cell culture support according to the present invention,
FIG. 5 is a perspective view showing a state where first and second supporting portions of a cell culture cartridge according to the present invention are combined with a cell culture support,
6 is a cross-sectional view taken along the line I-I 'shown in Fig. 5,
7 is a perspective view showing a cell incubator including the cell culture cartridge according to the present invention, and
8 is a perspective view showing another cell incubator including the cell culture cartridge according to the present invention.
이하, 첨부한 도면을 참고로 하여 본 발명의 실시예에 대하여 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 상세히 설명한다. 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다. 도면에서 본 발명을 명확하게 설명하기 위해서 설명과 관계없는 부분은 생략하였으며, 명세서 전체를 통하여 동일 또는 유사한 구성요소에 대해서는 동일한 참조부호를 부가한다.Hereinafter, exemplary embodiments of the present invention will be described in detail with reference to the accompanying drawings, which will be readily apparent to those skilled in the art to which the present invention pertains. The present invention may be embodied in many different forms and is not limited to the embodiments described herein. In order to clearly illustrate the present invention, parts not related to the description are omitted, and the same reference numerals are assigned to the same or similar components throughout the specification.
산업적으로 세포배양 할 수 있는 세포는 크게 초대 배양 세포에서 대를 이어 얻어진 세포계(cell line) 세포와 배아 또는 성체에 있는 여러 종류의 세포로 분화할 수 있는 미분화 세포인 줄기세포(stem cell)로 구분할 수 있다. 최근 보고된 바에 의하면 줄기세포의 경우 세포계(cell line) 세포의 배양보다 훨씬 섬세한 조작이 필요하다. 즉 세포배양 과정에서 세포가 배양된 세포배양 지지체(300)의 미세한 흔들림이나 작은 충격에도 세포가 사멸할 수 있는데, 일반적으로 공지된 세포배양기는 이를 해결하기 위해 세포배양 지지체(300)를 세포배양기 바닥에 고정시켜 외부의 흔들림이나 충격이 세포에 가해지는 영향을 최소화하고 있다.The cells that can be cultured industrially are classified into cell line cells obtained from the primary culture cells and stem cells which are undifferentiated cells capable of differentiating into various types of cells in the embryo or adult body . Recently, it has been reported that stem cells require much more delicate manipulation than cell line cells. In other words, the cell may be killed even when the cell culture support 300 has been cultured in the course of cell culture. However, in order to solve this problem, the
그러나 바닥에 고정된 세포배양 지지체(300)에서 배양되는 세포는 2차원적으로만 증식, 성장하는 경향이 커서 3차원 세포군집체를 제조하기 어려운 문제가 있다. 또한, 세포배양 지지체 내부로 이동하여 증식, 성장하는 세포가 있을 경우 세포배양액이 세포배양 지지체(300) 내부로 세포배양액이 균일하게 분산되기 어렵고, 지지체 내부에 침투한 세포배양액은 지지체 상부에 위치한 세포배양액과 순환이 원활히 이루어지지 않은 문제점이 있고, 이로 인해 배양된 세포의 균일성이 저하되고 세포 배양효율이 현저히 떨어지게 된다.However, the cells cultured in the
상기와 같은 문제점을 해결하기 위해 세포배양 지지체(300)를 세포배양기 바닥면으로부터 일정공간 이격시킨 형태로 세포배양기 측벽에 고정시키는 경우, 세포배양 지지체(300)의 상면과 하면에 부착된 세포에 세포배양액이 고르게 분산될 수 있다. 다만, 세포배양 지지체(300)를 세포배양기 내부에 고정시키기 위하여 접착 필름 등의 추가적인 구성이 필요하여 이로 인한 세포배양액 오염 문제가 발생할 수 있고, 세포배양 지지체(300)를 세포배양기로부터 회수하는 것이 용이하지 않다. 즉 세포배양 지지체(300)를 회수하는 과정에서 세포배양 지지체(300)에 과도한 외력이 가해져서 세포가 사멸하거나 세포배양 지지체(300) 자체가 파손되는 문제점이 있을 수 있다. In order to solve the above problems, when the
나아가 약제, 화장품 및 재생 의료 분야와 같이 대량으로 세포배양이 요구되는 특정 분야에서는 배양되는 각 세포들의 형상과 크기 등의 물성이 균일하게 유지되면서도 고밀도의 세포배양 환경을 제공되어야 한다. 뿐만 아니라 배양되는 세포의 목적에 적합하도록 세포 산생물을 예측 또는, 컨트롤할 수 있는 세포배양용 기재가 필요하다.Further, in a specific field requiring large cell culturing such as pharmaceuticals, cosmetics, and regenerative medicine, a high density cell culture environment should be provided while keeping uniform physical properties such as the shape and size of each cultured cell. In addition, there is a need for a cell culture substrate capable of predicting or controlling cell-living organisms to suit the purpose of the cells to be cultured.
이에 본 발명은 세포배양 지지체(300)의 상면과 하면에서 세포배양 지지체를 고정시켜 주는 세포배양용 카트리지를 제공함으로써, 세포배양 환경의 안정성을 담보하고, 세포배양 지지체(300)를 개별적으로 수용하여 각각에 대한 컨트롤이 가능하며, 세포를 대량으로 배양함과 동시에 각 세포배양 환경의 균일성을 제고할 수 있다.Accordingly, the present invention provides a cell culture cartridge that fixes the cell culture support on the upper and lower surfaces of the
보다 구체적으로, 도 1 내지 도 3을 참조하면 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지(10)는 제1 지지부(100), 제2 지지부(200) 및 세포배양 지지체(300)를 포함한다. 도 1 내지 도 3에는 원형의 세포배양용 카트리지(10)를 도시하였으나, 상기 세포배양용 카트리지(10)는 세포배양 지지체(300)를 수용할 수 있는 형상이면 어떠한 형상이라도 가능하며, 배양되는 세포 또는 세포배양 지지체(300)의 크기 및 종류를 고려하여 다양한 형상으로 변형이 가능하다.1 to 3, the
상기 제1 지지부(100)는 세포배양 지지체(300)의 하면에 배치되어 세포배양 지지체(300)를 지지한다. 상기 제1 지지부(100)는 중심부(120) 및 상기 중심부(120)의 측면을 둘러싸서 제1 지지부(100)의 전체적 틀을 유지하는 테두리부(110)를 포함한다.The
상기 테두리부(110)는 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지(10)의 형상을 유지시켜주며 상측 일부가 세포배양 지지체(130)와 접할 수 있다. 이 경우, 상기 세포배양 지지체(130)를 후술한 제2 지지부(200)와 함께 상방 및 하방에서 압박하여 고정시킬 수 있다. 또한 이 경우, 세포배양 지지체(130)와 접하는 부분에서 세포가 제1 지지부(100)의 표면에 접착하여 사멸하거나, 분리 과정에서의 손상을 방지하기 위해 세포 접착 저해성 물질이 코팅될 수 있으며 이에 대해서는 후술하기로 한다.The
상기 테두리부(110)의 재료는 특별히 한정하지 않으나, 세포배양 중 물리, 화학적 자극으로 인한 변형 및 기계적 물성의 저하를 방지할 수 있는 공지의 재료가 사용될 수 있다. 예를 들어, 상기 테두리부(110)는 금속, 유리, 세라믹, 실리콘 등의 무기 재료, 엘라스토머, 플라스틱(예를 들면 폴리에스테르 수지, 폴리에틸렌 수지, 폴리프로필렌 수지, ABS 수지, 나일론, 아크릴 수지, 불소 수지, 폴리카보네이트 수지, 폴리우레탄 수지, 메틸펜텐 수지, 페놀 수지, 멜라민 수지, 에폭시 수지, 염화비닐 수지)으로 대표되는 유기 재료가 사용될 수 있다. 그 형상도 한정되지 않고, 예를 들면 평판, 평막, 필름 등의 평탄한 형상이나 입체적인 형상을 가질 수 있다. 필름을 사용할 경우, 그 두께는 특히 제한되지 않지만 통상 0.1~1000μm의 범위를 가질 수 있다.The material of the
또한, 상기 테두리부(110)는 후술한 제2 지지부(200) 돌출부(211)가 인입될 수 있는 적어도 하나 이상의 수용부(111)를 포함할 수 있다. 상기 돌출부(211)가 수용부(111)에 인입되는 구조에 대하여는 후술하기로 한다.In addition, the
다음, 상술한 테두리부 (110)로 둘러 싸여 세포배양 지지체(130)와 접하는 중심부(120)는 프레임부(121)와 메쉬부(123)를 포함할 수 있다.The
상기 프레임부(121)부는 상기 테두리부(110)의 내측 양 끝단에서 연결되고, 상기 테두리부(110)와 함께 세포배양용 카트리지(10)의 전체적인 틀을 형성하면서 세포배양 지지체(300)에 대해 지지기능을 수행한다. 따라서 상기 프레임부(121)는 전술한 테두리부(110)와 동일한 재료일 수 있으나 이에 한정되지 않는다. 또한 도면에는 상기 프레임부(121)가 가로방향과 세로방향으로 구성된 것으로 도시하였으나 이에 한정되지 않고, 목적하는 세포의 종류와 크기 및 형상을 고려하여 동심원형, 다각형 등 다양한 형태로 구성될 수 있다. 이와 마찬가지로 상기 프레임부(121)의 개수도 제한되지 않으며, 세포배양액에 투과율이 저하되지 않는 정도에 변형이 가능하다.The
또한, 상기 테두리부(110) 및 상술한 프레임부(121)는 세포배양 지지체(300)에서 배양되는 세포와 접착할 수 있는데 이 경우, 세포가 달라붙어 사멸할 수 있고 세포배양 지지체(300)를 제1 지지부(100)에서부터 분리하여 회수하는 과정에서 박리가 용이하지 않아서 세포 생존율과 세포 회수성이 동시에 저하될 수 있다.The
따라서 상기 테두리부(110) 또는 프레임부(121) 중 적어도 어느 하나의 표면에는 세포 접착 저해물질이 코팅될 수 있다. 예를 들어 탄소 산소 결합을 가지는 유기 화합물의 피막을 상기 프레임부(121)의 표면 상에 형성하여 세포배양 지지체(300)에서 배양되는 세포와의 접착을 방지할 수 있다. 이러한 세포 접착 저해물질의 재료로는 탄소 산소 결합을 가지는 유기 화합물의 피막 형성이 가능한 재료라면 특별히 한정되지 않는다. 구체적으로는 금속, 유리, 세라믹, 실리콘 등의 무기 재료, 엘라스토머, 플라스틱(예를 들면 폴리에스테르 수지, 폴리에틸렌 수지, 폴리프로필렌 수지, ABS 수지, 나일론, 아크릴 수지, 불소 수지, 폴리카보네이트 수지, 폴리우레탄 수지, 메틸펜텐 수지, 페놀 수지, 멜라민 수지, 에폭시 수지, 염화비닐 수지)으로 대표되는 유기 재료를 들 수 있다. Therefore, the cell adhesion inhibiting substance may be coated on the surface of at least one of the
상기 메쉬부(123)는 상기 프레임부(121) 및 테두리부(110) 또는 하나의 프레임부(121)와 다른 하나의 프레임부(121)로 둘러 싸여 형성된 공간에 마련될 수 있다. 상기 메쉬부(123)는 세포배양 지지체(300)의 일면과 직접적으로 접촉하거나 소정의 간격으로 이격되도록 상기 제1 지지부(100)에 구비되어 배양되는 세포의 탈리를 방지할 수 있다.The
즉 세포배양 과정에서 세포배양액의 투과 압력 및/또는 세포배양 지지체(300)에 대해 가해지는 미세한 외력에 의해 세포배양 지지체(300) 상에서 배양되는 세포가 탈리될 수 있는데, 상기 메쉬부(123)는 압력이나 외력으로부터 세포배양 지지체(300)를 보호하여 세포배양 지지체(300)의 흔들림이나 세포의 탈리를 방지할 수 있고, 비교적 크기가 큰 세포의 경우 직접적으로 외부로의 탈리를 방지시킬 수 있다. 또한, 세포배양 지지체(300)를 분리하는 과정에서 세포에 대한 직접적인 외적 자극을 막아 줄 수 있다.That is, the cells cultured on the
상기 메쉬부(123)의 재료는 특별히 제한되지 않지만 메쉬부(123)에 배양되는 세포가 접촉할 수 있는 측면에서, 바람직하게는 세포에 대한 친화성을 가지는 생체 유래 재료로 구성될 수 있다. 구체적인 재료로서는 각종 콜라겐, 펩타이드 하이드로 겔, 라미닌, 콘드로넥틴, 글리코사미노글리칸, 히알루론산, 프로테오글리칸, 상기기재 이외의 세포 외 매트릭스 성분 단백질, 젤라틴, 아가로스, 올리고핵산, 폴리핵산 등의 고분자 화합물에 의한 겔을 들 수 있다.The material of the
또한, 생체에서 추출한 것이 아니고 인공적으로 합성된 생체 유래 재료를 모방한 재료도 사용할 수 있다. 예를 들면 각종의 인공 펩타이드 및 그 유도체, 인공 올리고 펩타이드 및 그 유도체, 인공 폴리펩타이드 및 그 유도체, 인공 다당류 및 그 유도체 등을 들 수 있다.In addition, a material mimicking an artificially synthesized bio-derived material may be used instead of being extracted from a living body. For example, various artificial peptides and derivatives thereof, artificial oligopeptides and derivatives thereof, artificial polypeptides and derivatives thereof, artificial polysaccharides and derivatives thereof, and the like.
나아가 상기 메쉬부(123)에는 무기 촉매 및 유기 촉매 등의 촉매물질 또는 세포배양에 도움이 되는 생리활성성분이 부착 또는 내장될 수 있다. 상기 유기 촉매, 무기촉매 및 생리활성성분들은 물리적 단순흡착 방법, 물질간의 이온 결합을 이용하는 방법, 또는 물질의 작용기를 이용한 화학적 결합 방법을 사용할 수 있고, 폴리도파민(polydopamine), 폴리노레피네프린(polynorepinephrine)과 같이 카테콜(catechol)기를 기반으로 하는 접착성 물질을 이용하는 방법 등 다양한 방법을 통하여 유기 촉매, 무기 촉매 또는 생리활성성분들이 상기 메쉬부(123)에 부착 또는 내장될 수 있다.Further, the
또한, 본 발명의 일 실시예에 따른 메쉬부(123)는 도 2 및 도 3에 도시된 것과 같이, 서로 교차하도록 배치되는 복수 개의 제1 메쉬선(123a)과 제2 메쉬선(123b)을 포함한다. 이러한 제1 메쉬선(123a)과 제2 메쉬선(123b)의 교차배열로 다수 개의 다공홀(123c)이 형성될 수 있다. 이때 세포배양액이 상기 다공홀(123c)을 원활히 투과하여 세포배양 지지체(300)에 균일한 배양환경을 제공할 수 있도록 상기 제1 메쉬선(123a)과 제2 메쉬선(123b)의 굵기 및 각각의 간격을 조절할 수 있다.2 and 3, the
즉 세포배양액의 점도 및 투과속도에 대응하여 상기 메쉬선들로부터 형성되는 다공홀(123c)의 크기를 조절할 수 있어서, 세포배양 지지체(300)에서 배양되는 각 세포에 균일한 미세 환경을 제공할 수 있고, 다공홀(123c)을 이용함으로써 세포의 상방이 덮이지 않고 세포 증식의 방향성의 제한을 완화할 수 있다That is, the sizes of the
이와 같은 본 발명의 일 실시예에 따른 메쉬부(123)는 세포배양액이 원활히 투과될 수 있도록 상기 다공홀(123c)의 면적은 5 ~ 50㎛의 범위를 가질 수 있다. 만일 상기 다공홀(123c)의 면적이 50㎛를 초과하는 경우 세포배양액의 투과압력에 의하여 세포배양 지지체가 파손되거나, 배양되는 세포에 균일한 배양액을 공급할 수 없는 문제점이 있다. 또한, 만일 상기 다공홀(123c)의 면적이 5㎛ 미만인 경우, 세포배양액이 원활하게 투과하지 못하고 메쉬부 및 프레임부에 배양액이 고일 수 있어서 불균등 세포배양 환경 조성되는 문제점이 있을 수 있다.In the
다음, 상기 제2 지지부(200)에 대하여 설명한다. 다만, 전술한 제1 지지부(100)와 공통되는 구성에 대하여는 설명을 생략하기로 한다.Next, the
상기 제2 지지부(200)는 세포배양 지지체(300)의 상면에 배치되어 제1 지지부(100)와 함께 세포배양 지지체(300)를 고정할 수 있다. 상기 제2 지지부(200)는 제2 지지부(200)의 틀을 유지하는 테두리부(210) 및 상기 테두리부(210)의 외측을 감싸는 중심부(220)를 포함한다.The
상기 테두리부(210)는 제1 지지부(100)의 수용부(111)에 인입될 수 있는 돌출부(211)를 포함할 수 있다. 도면에 도시된 것과 같이 상기 돌출부(211)는 테두리부(210)로부터 분화되며 끝단부에 걸림턱을 구비할 수 있다. The
도 5에 도시된 것과 같이, 돌출부(211)가 제1 지지부(100)에 수용부(111)에 인입되고 걸림고정되어 제1 지지부(100)와 제2 지지부(200)가 끼워맞춤식으로 고정될 수 있으며, 일정한 외력에도 고정이 풀리지 않을 수 있어 보다 안정적인 세포배양 환경을 제공할 수 있다. 나아가, 상기 돌출부(211)의 걸림고정된 부분에 압력을 가함으로써 제1 지지부(100)와 제2 지지부(200)를 손쉽게 분리할 수 있다. 다만 도면에 도시된 수용부(110)는 설명의 편의를 위한 것으로, 이와 제1 지지부(100)와 제2 지지부(200)를 안정적으로 고정시킬 수 있고 손쉽게 분리 가능한 구조라면 다양한 형상과 크기를 가지는 돌출부(211)로의 변형이 가능하다. 5, the projecting
또한 전술한 것과 같이 상기 수용부(111)와 돌출부(211)의 위치가 서로 바뀔 수 있다. 즉 제1 지지부(100) 및 제2 지지부(200) 중 어느 하나의 테두리부(110, 210)에는 적어도 하나의 돌출부(211)를 포함하고, 상기 제1 지지부(100) 및 제2 지지부(200) 중 다른 하나의 테두리부(210, 110)에는 상기 돌출부(211)가 인입되는 수용부(111)를 포함할 수 있다. Also, as described above, the positions of the receiving
다음 세포배양 지지체(300)에 대하여 설명한다.Next, the
본 발명에 따른 세포배양 지지체(300)는 직물을 포함하며, 편물 및 부직포 중 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있다. 다만, 상기 세포배양 지지체(300)가 직물만을 포함하여 구성된 경우, 위사와 경사로 이루어진 섬유로 형성되는 규칙적인 배열의 공경으로 인해 세포배양액의 투과율이 향상될 수 있으므로, 직물로만 구성되는 것이 바람직하다.The
예를 들어, 도 4 도시된 것과 같이 도시된 것과 같이 상기 세포배양 지지체(300)가 직물로 구성된 경우, 직물에 포함되는 섬유(310)가 종횡의 방향성이 있으며, 구체적인 조직은 평직, 능직 등일 수 있으며, 경사와 위사의 밀도는 특별히 한정하지 않는다.For example, as shown in FIG. 4, when the
상술한 본 발명의 일 실시예에 따라 세포배양 지지체(300)가 직물로 구성된 경우 상기 직물을 구성하는 원사(310)는 한 개 또는 복수 개의 모노사로 이루어질 수 있으며 상기 한 개 또는 복수 개의 모노사는 방적사, 필라멘트사, 슬리팅사(slitting yarn) 또는 전기방사된 나노섬유일 수 있다.According to one embodiment of the present invention, when the
모노사가 방적사나 필라멘트사일 경우 섬도가 0.1 ~ 1,000 데니어일 수 있다. 다만, 이에 제한되는 것은 아니며, 배양시키려는 세포의 종류, 크기, 세포집합체의 형상 및 크기에 적합하도록 변경될 수 있다.If monosaccharides are spun yarns or filament yarns, the fineness may be between 0.1 and 1,000 denier. However, the present invention is not limited thereto and may be modified to suit the kind, size, shape and size of the cell cluster to be cultured.
또한, 상기 방적사는 공지된 방법에 의한 원면을 통하여 제조된 것일 수 있다. 또한, 상기 필라멘트사는 공지된 방법에 의하여 방사되어 제조된 것일 수 있고, 상기 방사는 화학방사 또는 전기방사 등의 공지된 방사방법일 수 있다. The spinning yarn may also be produced through a raw cotton by a known method. Further, the filament yarn may be one produced by spinning by a known method, and the spinning may be a known spinning method such as chemical spinning or electrospinning.
또한, 상기 슬리팅사는 시트상의 섬유집합체, 원단 등을 소정의 폭을 갖도록 절단시켜 제조된 것일 수 있다. 바람직하게는 상기 슬리팅사는 3차원 네트워크 구조를 갖는 시트상의 섬유웹을 소정의 폭을 갖도록 절단시켜 제조된 모노사일 수 있다. 이때, 상기 섬유웹은 일정한 압력으로 압착시켜 슬리팅 공정의 용이성을 향상시키고, 슬리팅사의 강도를 증가시킬 수 있다.In addition, the slitting yarn may be produced by cutting a sheet-like fiber aggregate, a fabric or the like so as to have a predetermined width. Preferably, the slitting yarn may be a mono-yarn produced by cutting a sheet-like fibrous web having a three-dimensional network structure to have a predetermined width. At this time, the fibrous web may be pressed at a constant pressure to improve the ease of the slitting process and increase the strength of the slitting yarn.
일 예로 상기 슬리팅사는 평량이 0.1 ~ 100g/㎡인 섬유웹을 폭이 0.1 ~ 30㎜ 되도록 절단한 모노사일 수 있다. 만일 폭을 0.1㎜ 미만으로 슬리팅할 경우 절단이 용이하지 않고, 가연시 가해지는 장력과 회전력에 의해 쉽게 사절될 수 있는 문제가 있다. 또한, 폭을 30㎜ 초과하여 슬리팅할 경우 연사시 불균일한 꼬임이 발생할 수 있는 문제가 있다.For example, the slitting yarn may be a mono-sintered fiber web having a basis weight of 0.1 to 100 g / m < 2 > and having a width of 0.1 to 30 mm. If the width is less than 0.1 mm, it is not easy to cut and there is a problem that it can be easily broken by the tensile force and the rotational force applied in the case of flammability. Further, when the width is more than 30 mm, there is a problem that nonuniform twisting may occur at the time of twisting.
또한 상기 전기방사된 나노섬유는 방향의 정함 없이 복수 회 폴딩되어 배열/적층됨을 통해 3차원 네트워크 구조를 형성할 수 있다. 또는 복수개의 나노섬유를 포함하여 각각의 나노섬유가 독립적으로 폴딩 및/또는 섬유길이방향의 정함이 없이 각각이 배열/적층됨을 통해 3차원 네트워크 구조를 형성할 수 있다. 이때, 한 가닥 나노섬유 내의 서로 다른 표면간 및/또는 서로 다른 나노섬유의 표면간에는 접착 또는 융착이 발생할 수 있고, 이를 통해 3차원 네트워크 구조가 구조적으로 더 복잡해지며 지지체에 로딩된 세포가 3차원 네트워크 구조로 형성된 기공 내부로 이동/증식할 수 있고, 입체적 형상/구조를 갖는 세포군집체로 세포를 배양시키기에 유리할 수 있다. 또한, 지지체 내부/외부에서 배양되는 세포의 증식률 및 생존률을 증가시키기 위해서는 세포의 증식에 필요한 영양분 등의 공급이 중요한데, 3차원 네트워크 구조의 나노섬유의 영양분을 포함하는 배양용액의 유로가 매우 복잡, 다양하게 형성됨으로써 지지체 내부에 위치한 세포까지 용이하게 영양분이 공급되어 세포사멸을 방지하고 세포증식을 향상시킬 수 있다.In addition, the electrospun nanofibers can be folded and arranged / laminated a plurality of times without any orientation, thereby forming a three-dimensional network structure. Or a plurality of nanofibers, each of the nanofibers can be independently arranged in a folded and / or non-fixed length direction to form a three-dimensional network structure. At this time, adhesion or fusing may occur between the different surfaces and / or the surfaces of the different nanofibers in the one-stranded nanofiber, thereby making the three-dimensional network structure more structurally complicated, Can move / propagate into pores formed by the structure, and may be advantageous for culturing cells with a cell aggregate having a three-dimensional shape / structure. In order to increase the proliferation rate and the survival rate of the cells cultured in the inside / outside of the support, it is important to supply the nutrients necessary for cell proliferation. The channel of the culture solution containing the nutrients of the nanofibers of the three- It is possible to easily supply nutrients to the cells located inside the support to prevent cell death and improve cell proliferation.
상술한 원사(310)를 구성하는 모노사들은 섬유상으로 제조될 수 있는 공지된 섬유형성성분으로 구현된 것일 수 있으며, 모노사 종류에 따라서 적합한 재질을 선택하여 구현될 수 있고, 분해성이 요구되는 등 특별한 목적에 따라서 재질을 달리 선택할 수 있음에 따라서 본 발명은 이에 대해 특별히 한정하지 않는다. 상기 섬유형성성분은 면, 마, 등의 셀룰로오스 성분, 양모, 견 등의 단백질 성분, 또는 광물성 성분 등의 천연섬유 성분을 포함할 수 있다. 또는 상기 섬유형성성분은 공지된 인조섬유의 성분일 수 있다.The mono yarns constituting the
한편, 상기 섬유형성성분은 목적에 따라서 폴리스티렌(PS), 폴리에틸렌테레프탈레이트(PET), 폴리이더술폰(PES), 폴리비닐리덴플루오라이드(PVDF), 폴리아크릴로나이트릴(PAN), 폴리디메틸실록산(PDMS), 폴리아미드, 폴리알킬렌, 폴리알킬렌옥사이드(poly(alkylene oxide)), 폴리아미노산(poly(amino acids)), 폴리알릴아민(poly(allylamines), 폴리포스파젠(polyphosphazene) 및 폴리에틸렌옥사이드-폴리프로필렌옥사이드 블록공중합체로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 비생분해성 성분, 또는 폴리카프로락톤(polycaprolactone), 폴리다이옥사논(polydioxanone), 폴리글리콜릭산(polyglycolic acid), PLLA(poly(L-lactide)), PLGA(poly(DL-lactide-co-glycolide)), 폴리락틱산(Polylactic acid) 및 폴리비닐알코올(polyvinyl alcohol)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 생분해성 성분을 포함할 수 있다.On the other hand, the fiber forming component may be selected from the group consisting of polystyrene (PS), polyethylene terephthalate (PET), polyether sulfone (PES), polyvinylidene fluoride (PVDF), polyacrylonitrile (PAN), polydimethylsiloxane (PDMS), polyamide, polyalkylene, poly (alkylene oxide), poly (amino acids), poly (allylamines), polyphosphazene and polyethylene Oxide-polypropylene oxide block copolymer, or at least one non-biodegradable component selected from the group consisting of polycaprolactone, polydioxanone, polyglycolic acid, PLLA (poly (L a biodegradable component selected from the group consisting of poly (lactide-co-glycolide), poly (lactide-co-glycolide), polylactic acid and polyvinyl alcohol .
다음, 본 발명에 따른 세포배양 지지체(300)의 세포배양액 평균 투과량은 점도가 0.1 ~ 100cps 인 세포배양액에 대하여 10 ~ 10,000 ㎖/mm2·min·bar를 가질 수 있다. 세포배양 지지체(300)를 통과하여 순환하는 세포배양액의 투과량은 세포배양 지지체(300)에서 배양되는 세포의 성장 및 분화에 다양한 영향을 미칠 수 있기 때문에 세포배양액에 대한 최소한의 투과량을 만족해야 한다. 다만, 투과량이 과도할 경우 배양된 세포가 탈리되어 세포의 밀도가 저하되거나 세포배양 지지체(300)에 과도한 압력이 가해져서 지지체가 붕괴될 수 있으므로 점도가 0.1 ~ 100 cps인 세포배양액에 대하여 평균수투과량은 10 ~ 10,000 ㎖/mm2·min·bar의 범위를 가질 수 있다. 또한, 세포배양 중 세포배양액이 세포배양기(100)를 순환하며 세포에 배양용액을 제공하거나 배양액이 지속적으로 투과되는 경우, 세포배양 지지체(300)가 세포배양액의 투과 압력에 견디지 못하여 세포배양기로부터 분리되거나 손상되는 문제점이 있을 수 있으므로 일정 수준 이상의 투과량을 만족할 필요가 있다.Next, the average cell culture liquid permeability of the
한편, 상기 세포배양액은 배양되는 세포의 생장 및 반응을 일으킬 수 있는데, 이때 상기 세포배양 지지체(300)를 순환하는 세포배양액의 흐름에 의한 마찰력이 과도할 경우, 배양되는 세포가 이를 자극으로 인식하여 생리적 반응이 유발될 수 있다. 따라서 이와 같이 목적하지 않는 부반응을 억제하기 위하여 세포배양액의 미세한 유량 및 유속에 대한 조절이 필요하다. 특히, 세포가 상기 세포배양 지지체(300)에 부착되는 초기 부착시간에는 세포배양액의 유량 및 유속을 미세하게 조절하여 상술한 부반응을 억제해야 한다. 예를 들어 세포가 상기 세포배양 지지체(300)에 부착되는 3 ~ 6시간 사이에는 배양되는 세포의 크기와 종류 및 세포배양 지지체(300)의 물성(평량, 기공도 등)을 고려하여 세포배양액의 유량 및 유속을 적절하게 조절하여야 한다.Meanwhile, the cell culture medium may cause growth and reaction of cells to be cultured. When the frictional force due to the flow of the cell culture fluid circulating in the
또한, 본 발명에 따른 세포배양 지지체(300)의 기공의 평균공경은 10 ~ 100 ㎛ 일 수 있다. 상기 기공은 세포배양 지지체(300)를 이루는 원사(310)가 경·위사로 배열됨에 따라 형성되는 원사(310)들 사이의 공간으로 세포배양 지지체(300)가 직물로 배열된 경우 기공의 크기는 모두 균일하게 형성될 수 있다. 상기 기공의 평균공경은 전술한 세포배양액에 투과량에 밀접한 관계가 있으며, 만일 기공의 평균공경이 10㎛ 미만일 경우, 세포배양액의 투과도가 저하되고 세포배양액의 순환이 원활하지 않아서 세포배양의 균일도가 저하되거나, 세포배양 지지체(300)의 과도한 압력이 가해져서 세포배양 지지체(300)가 휘어지거나 절단될 수 있다. 또한, 상기 기공의 평균공경이 100㎛를 초과하는 경우 세포배양액의 투과량이 증가하고 세포배양 지지체(300)의 기계적 강도가 저하되어 세포배양의 안정성이 저하될 수 있다.In addition, the average pore size of the
또한, 본 발명에 따른 세포배양 지지체(300)의 기공도는 1 ~ 20% 일 수 있다. 상기 기공도는 세포배양 지지체(300)를 구성하는 전체 원사(310) 대비 기공의 면적을 나타내는 것으로, 기공의 평균공경과 더불어 세포배양액의 투과량에 밀접한 영향을 미친다. 만일 세포배양 지지체의 기공도가 1% 미만일 경우 세포배양액의 투과도가 저하되고 세포배양액의 순환이 원활하지 않아서 세포배양의 균일도가 저하되거나, 세포배양 지지체(300)의 과도한 압력이 가해져서 세포배양 지지체(300)가 휘어지거나 절단될 수 있다. 또한, 만일 기공도가 20%를 초과하는 경우 세포배양액의 투과량이 증가하고 세포배양 지지체(300)의 기계적 강도가 저하되어 세포배양의 안정성이 저하될 수 있다.Also, the porosity of the
또한, 본 발명에 따른 세포배양 지지체(300)의 평량은 10 ~ 100g/㎡ 일 수 있다. 만일 세포배양 지지체(300)의 평량이 10g/㎡ 미만일 경우 세포배양 지지체(300)가 세포배양액의 압력을 견디지 못하고 구부러지는 등의 기계적 파손이 발생할 수 있고, 만일 세포배양 지지체(300)의 평량이 100g/㎡ 를 초과하는 경우 세포배양 지지체(300)의 불투명도가 너무 높아서 세포 관찰이 용이하지 않은 문제점이 있고, 배양된 세포를 이동하는 과정에서 세포를 탈리시키거나 이동시킬 때 문제가 발생될 수 있다.The basis weight of the
이와 같이 본 발명에 따른 세포배양 지지체(300)는 일정 수준 이상의 세포배양액 투과량을 가짐으로써, 세포배양액을 고르게 순환시켜 지지체의 상면과 하면에 부착된 세포의 균일한 미세환경을 부여하여 배양된 세포의 균일성을 제고할 수 있다.As described above, the
한편, 상술한 세포배양 지지체(300)를 구성하는 원사(310)는 섬유형성성분 이외에 세포배양성 향상물질로서 접착성분이나 생리활성성분 중 어느 하나 이상을 더 포함할 수 있다. 이때, 상기 원사의 내부에는 접착성분이나 생리활성성분이 구비되지 않고, 외부면 일 영역에 고정된 접착성분을 통해 생리활성성분이 원사 외부면 일부분에 고정될 수 있다. 또는 원사의 외부면을 전부 피복하여 구비되는 접착성분을 전부 피복하도록 생리활성성분이 구비될 수도 있다.In addition, the
최근 연구되고 있는 세포배양기술은 실제 체내의 세포간 환경을 in vitro에서 구현시키는 방향으로 연구되고 있으며, 세포배양 환경을 체내의 세포환경과 유사하게 조성시키기 위하여 체내 세포외 기질(ECM)에 구비되는 각종 성분을 in vitro 배양시 배양용액에 포함시켜 적용하는 추세에 있다. 그러나 배양용액에 세포배양을 증진시킬 수 있는 물질을 포함시킬 경우 배양되는 세포에 지속적으로 상기 물질을 노출시키는데 한계가 있으며, 지속적 노출을 위해서는 배양용액에 상기 물질의 함량을 증가시켜야 하나, 이는 비용의 증가, 증식효율에 있어서 문제가 있다.Recently, cell culture technology has been studied in an attempt to realize the intercellular environment in vivo in vitro . In order to construct the cell culture environment similar to the cell environment in the body, It is in the trend to incorporate various components into culture solutions when cultivated in vitro . However, when a substance capable of promoting cell culture is added to a culture solution, there is a limit to continuously expose the substance to the cultured cells. For the continuous exposure, the content of the substance should be increased in the culture solution. And there is a problem in the propagation efficiency.
이에 따라 본 발명의 일 실시예에 따른 원사(310)의 표면에는 접착성분 및 생리활성성분이 고정된 상태로 지지체에 구비시켜 원사(310) 상에 또는 원사(310)로 둘러싸인 공간 내에 위치하는 배양세포에 생리활성성분을 통한 세포자극 및 이를 통한 세포 내 신호전달을 지속, 증폭시켜 세포증식을 더욱 가속화시킬 수 있는 이점이 있다. Accordingly, the surface of the
상기 접착성분은 배양세포를 초기에 세포 지지체 상에 고정시켜 배양용액상에 로딩된 세포가 부유하는 것을 방지하는 기능 및/또는 생리활성성분을 원사 원사(310) 상에 고정시켜 생리활성성분이 원사 원사(310) 상에 세포배양 되는 과정에서 지지섬유에서 탈리를 방지하는 기능을 수행할 수 있다. 상기 접착성분은 통상의 생체적합성이 있어서 세포독성을 발생시키지 않는 공지된 접착성분의 경우 제한 없이 사용될 수 있다.The adhesive component is used to immobilize the cultured cells on the cell support in the initial stage so that the cells loaded on the culture solution are prevented from floating, and / or a physiologically active ingredient is fixed on the
다음으로, 원사(310)에 구비될 수 있는 생리활성성분에 대해 보다 구체적으로 설명한다. 상기 생리활성성분은 세포배양을 증진시킬 수 있도록 세포의 부착, 이동, 성장, 증식(proliferation) 및 분화(differentiation) 중 어느 하나 이상을 직/간접적으로 유도하는 물질일 수 있으며, 이와 같은 기능을 발현하는 것으로 알려진 공지의 물질인 경우 제한 없이 포함될 수 있다. 일예로, 상기 생리활성성분은 모노아민, 아미노산, 펩타이드, 당류(saccharide), 지질(lipid), 단백질, 당단백질(glucoprotein), 당지질(glucolipid), 프로테오글리칸, 뮤코다당(mucopolysaccharide) 및 핵산(nucleic acid) 으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 화합물 및 세포 중 어느 하나 이상을 포함할 수 있다. 이때, 모노아민은 일예로, 카테콜아민, 인돌아민 등 1차 아민을 포함하는 화합물을 포함한다. 또한, 상기 펩타이드는 올리고펩타이드를 포함하며, 상기 단백질은 폴리펩티드를 포함하고 일 예로, 피브로넥틴 등일 수 있다. 상기 당류는 단당류, 다당류, 올리고당 및 탄수화물을 포함하고, 상기 지질은 일예로 스테로이드 호르몬일 수 있다. Next, the physiologically active component that can be provided in the
한편, 상기 생리활성성분은 모티프를 포함할 수 있다. 상기 모티프는 생장인자(growth factor) 또는 세포외기질(extracellular matrix)에 포함되는 단백질, 당단백질 및 프로테오글리칸 중에서 선택된 어느 하나 이상에 구비된 소정의 아미노산 서열을 포함하는 천연 펩타이드 또는 재조합 펩타이드일 수 있다. 구체적으로 상기 모티프는 아드레노메둘린(Adrenomedullin), 앙기오포이에틴(Angiopoietin), 뼈형성단백질(BMP), 뇌유래신경영양인자(BDNF), 표피생장인자(EGF), 에리스로포이에틴(Erythropoietin), 섬유아세포 증식인자(Fibroblast growth factor), 신경교의세포주유래신경영양인자(GDNF), 과립구집락자극인자(Granulocyte colony-stimulating factor, G-CSF), 과립대식세포집락자극인자(Granulocyte macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF), 성장분화인자-9(Growth differentiation factor-9, GDF9), 간세포생장인자(HGF), 간세포선종 유래 생장인자(Hepatoma-derived growth factor, HDGF), 인슐린유사생장인자(Insulin-like growth factor, IGF), 각질세포 증식인자(Keratinocyte growth factor , KGF), 이동자극인자(Migration-stimulating factor, MSF), 마이오스타틴(Myostatin , GDF-8), 신경생장인자(Nerve growth factor, NGF), 혈소판유래생장인자(Platelet-derived growth factor, PDGF), 트롬보포이에틴(Thrombopoietin, TPO), T-세포생장인자(T-cell growth factor, TCGF), 뉴로필린, 형질전환생장인자-알파(TGF-α), 형질전환생장인자-베타(TGF-β), 종양괴사인자-알파(TNF-α), 혈관내피생장인자(VEGF), IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6 및 IL-7로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 생장인자(GF)에 포함된 소정의 아미노산 서열을 포함할 수 있다. 또는, 히알루론산, 헤파린황산염, 콘드로이틴황산염, 테르마틴황산염, 케라탄황산염, 알진염, 피브린, 피브리노겐, 콜라겐, 엘라스틴, 피브로넥틴, 비트로넥틴, 카드헤린 및 라미닌으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 세포외기질(extracellular matrix)에 포함되는 소정의 아미노산의 서열을 포함할 수 있다. 또한, 상기 모티프는 생장인자에 포함되는 소정의 아미노산 서열 및 상기 세포외기질에 포함되는 공지된 아미노산 서열을 모두 포함할 수도 있다. On the other hand, the physiologically active ingredient may include a motif. The motif may be a natural peptide or a recombinant peptide comprising a predetermined amino acid sequence contained in at least one selected from the group consisting of a growth factor or an extracellular matrix protein, a glycoprotein, and a proteoglycan. Specifically, the motif is selected from the group consisting of adrenomedullin, angiopoietin, bone morphogenetic protein (BMP), brain derived neurotrophic factor (BDNF), epidermal growth factor (EGF), erythropoietin, (GDNF), granulocyte colony-stimulating factor (G-CSF), granulocyte macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), fibroblast growth factor, glial cell line derived neurotrophic factor Growth differentiation factor-9 (GDF9), hepatocyte growth factor (HGF), hepatoma-derived growth factor (HDGF), insulin-like growth factor (IGF), keratinocyte growth factor (KGF), migration-stimulating factor (MSF), myostatin (GDF-8), nerve growth factor Platelet-derived growth factor cell growth factor (TCGF), neurofilin, transforming growth factor-alpha (TGF-a), transforming growth factor- (TGF-beta), tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha), vascular endothelial growth factor (VEGF), IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-7. ≪ RTI ID = 0.0 > (GF) < / RTI > Or at least one extracellular matrix selected from the group consisting of hyaluronic acid, heparin sulfate, chondroitin sulfate, termarine sulfate, keratan sulfate, alginate, fibrin, fibrinogen, collagen, elastin, fibronectin, bitonectin, carderine and laminin or a sequence of a predetermined amino acid included in an extracellular matrix. In addition, the motif may include both a predetermined amino acid sequence included in the growth factor and a known amino acid sequence contained in the extracellular matrix.
한편, 상기 모티프는 상술한 접착성분에 공유결합시켜 일체로 구현될 수도 있다. 일 예로, 상기 접착성분이 단백질인 경우 폴리펩티드의 N-말단 및/또는 C-말단에 상기 모티프를 직접 공유결합 시키거나 이종의 펩타이드 또는 폴리펩타이드를 개재시켜 공유결합 시킬 수 있으며, 이 경우 원사에 더욱 견고히 생리활성성분을 부착시킬 수 있고, 생리활성성분의 세포배양 중 탈리를 최소화시킬 수 있다. On the other hand, the motif may be integrally formed by covalently bonding to the adhesive component. For example, when the adhesive component is a protein, the motif may be directly covalently bonded to the N-terminal and / or C-terminal of the polypeptide or may be covalently bonded through a heterogeneous peptide or polypeptide. In this case, The physiologically active ingredient can be adhered firmly and the desorption of the physiologically active ingredient in the cell culture can be minimized.
또한, 상기 생리활성성분이 모티프일 경우 상기 모티프는 세포의 부착성을 증진시키기 위하여 공지된 홍합단백질 또는 홍합단백질 중 특정한 도메인이나 모티프를 더 포함하여 구현될 수 있다. When the physiologically active component is a motif, the motif may further include specific domains or motifs of known mussel proteins or mussel proteins to enhance cell adhesion.
다음, 도 5 및 도 6을 참조하여 본 발명의 따른 세포배양용 카트리지의 측면 결합도를 설명하기로 한다.Next, referring to FIGS. 5 and 6, the side coupling of the cell culture cartridge according to the present invention will be described.
도 5 및 도 6에 도시된 것과 같이, 본 발명의 일 실시예에 따라 제1 지지부(100) 및 제2 지지부(200)가 상술한 세포배양 지지체(300)를 상방과 하방에서 고정하여 지지할 수 있다. 이때, 상기 세포배양 지지체(300) 양 끝단의 소정의 영역(A 영역)은 제1 지지부(100)와 제2 지지부(200)와 접함으로써 세포배양 지지체(300)의 흔들림을 방지하고, 세포배양액의 투과압력에 따른 미세한 이격현상에 따른 세포 균일도 저하를 방지할 수 있다. 또한 상기 A 영역 및 프레임부(121)와 세포배양 지지체(300)가 접하는 영역에는 전술한 것과 같이 세포 접착 저해물질이 코팅될 수 있어서 배양과정 또는 분리과정에서 세포의 사멸이나 탈리를 방지할 수 있어 세포 생존율과 배양율을 동시에 향상시킬 수 있다. As shown in FIGS. 5 and 6, according to an embodiment of the present invention, the
다음, 도 7 및 도 8을 참조하여, 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지(10)를 포함하는 세포배양기(400, 400')에 대하여 설명하기로 한다.Next, a
상기 세포배양액은 목적하는 세포에 따라 세포의 부착, 이동, 성장, 증식(proliferation) 및 분화(differentiation) 중 어느 하나 이상을 촉진하거나 세포에 영양분을 제공하는 세포배양액일 수 있으며, 이에 대해서는 특별히 제한하지 않는다.The cell culture solution may be a cell culture solution that promotes at least one of cell adhesion, migration, growth, proliferation, and differentiation or provides nutrients to cells according to a target cell. Do not.
도 7에 도시된 것과 같이, 본 발명의 일 실시예에 따른 세포배양기(400)는 복수 개의 세포배양용 카트리지(10a 내지 10e)를 포함할 수 있다. 도면에는 도시하지 않았지만 상기 복수 개의 세포배양용 카트리지(10a 내지 10e)는 일정간격으로 이격하여 세포배양기(400) 내부의 고정부재를 통해 각각이 고정될 수 있다. As shown in FIG. 7, the
또한, 세포배양용 카트리지(10a 내지 10e)는 소정의 간격을 두고 이격되어 고정된 세포배양용 카트리지 어레이의 형태를 구성할 수 있다. 이 경우 세포배양용 카트리지 어레이는 각각의 세포배양용 카트리지(10a 내지 10e)가 소정의 간격으로 이격되어 고정될 수 있도록 또 다른 고정부재를 포함할 수 있다. 이에 따라서 도 7과 다르게 세포배양기는 복수 개의 세포배양용 카트리지를 하나의 어레이 형태로 구비할 수 있으며, 이를 통해 각각에 대해 동일한 미세환경을 제공할 수 있고 고밀도 세포배양 측면에서 유리할 수 있다. 나아가 하나의 어레이에 구비된 세포배양용 카트리지에 대한 개별적인 분리가 용이하여, 세포배양 전에는 물론 세포배양 중에도 배양 환경을 신속히 제어할 수 있어서 세포의 균일성과 생존율을 동시에 향상시킬 수 있는 장점이 있다. 더불어, 하나의 어레이에 구비된 카트리지별로 이종의 세포를 로딩시켜 배양함을 통해 단일의 배양환경에서 이종의 세포들을 분리시켜 배양시킬 수 있다. In addition, the
도면에 화살표로 도시된 것과 같이 상기 세포배양액은 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지(10a 내지 10e)를 통과하면서 세포배양 지지체(300)의 상면 및 하면에서 배양되는 세포에 배양 물질을 제공하며 세포배양기(100)를 순환할 수 있다. 이때 직물로 이루어진 세포배양 지지체(300)의 세포배양액에 대한 투과성으로 인해 세포배양액은 세포배양 지지체(300)를 통과하면서 세포배양 지지체(300)에 과도한 압력이 걸리지 않게 하여, 흔들림이나 기계적 파손을 방지할 수 있다. 또한 세포배양 지지체(300)의 상면과 하면을 고르게 순환함으로써 세포배양 지지체(300)의 상면과 하면에서 배양되는 세포의 균일성을 제고할 수 있으며 세포배양 지지체(300)의 면적에 따른 배양 세포를 늘릴 수 있어 세포배양 지지체(300)의 경제성이 향상될 수 있다. 나아가 하나의 세포배양기(400)에서 복수 개의 세포배양용 카트리지(10a 내지 10e) 고정시켜 세포의 균일성을 유지하면서 고밀도의 세포배양이 가능하다.As shown by the arrows in the figure, the cell culture liquid provides a culture material to the cells cultured on the upper and lower surfaces of the
도 8에 도시된 것과 같이, 본 발명의 다른 실시예에 따른 세포배양기(400') 또한 복수 개의 세포배양용 카트리지(10a 내지 10e)를 포함할 수 있으며, 도 5에 도시된 세포배양기와(400) 기술적 특징이 동일함에 따라 중복설명은 생략하기로 한다.As shown in FIG. 8, the cell incubator 400 'according to another embodiment of the present invention may also include a plurality of
상기 세포배양기(400') 유입구(405)를 통해 유입된 세포배양액은 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지(10a 내지 10e)를 통과하면서 세포배양 지지체(300)의 상면 및 하면에서 배양되는 세포에 배양 물질을 제공하며 세포배양기(100)를 순환할 수 있다. 이후 다시 유출구(407)를 통해 세포배양액 및 기타 물질(영양물, 노폐물, 생산물 등)이 빠져나갈 수 있다. The cell culture fluid introduced through the
이와 같이 본 발명에 따른 세포배양용 카트리지(10)를 포함한 세포배양기(400, 400')는 세포배양 지지체의 탈착이 용이하면서 세포배양 지지체를 고정시켜 안정적인 세포배양 환경을 제공하여 세포배양율을 향상시킬 수 있고, 세포가 배양되는 과정에서 세포배양 지지체의 흔들림을 방지할 수 있어서 세포배양효율을 제고할 수 있다.As described above, the cell incubator (400, 400 ') including the
또한 세포배양 지지체에 세포배양액을 분산시켜도 지지체의 흔들림을 방지할 수 있고 지지체의 부위에 상관없이 배양되는 각 세포에 동일한 기계, 물리, 화학적 자극을 부여함으로써 세포를 균일하게 증식시킬 수 있다. 나아가 대량으로 세포를 배양해야 하는 분야에 적합하도록 고밀도의 세포배양이 가능하며, 세포배양 지지체의 분리과정에서 세포에 손상을 가하지 않고 목적하는 검사 및 실험에 적합한 형상을 가지는 세포를 배양할 수 있다.Also, even if the cell culture solution is dispersed in a cell culture support, it is possible to prevent shaking of the support, and uniform cell growth can be achieved by imparting the same mechanical, physical and chemical stimulation to each cell to be cultured regardless of the region of the support. Further, it is possible to cultivate high density cells suitable for the field where cells are cultured in large quantities, and cells having a shape suitable for the desired test and experiment can be cultured without damaging the cells in the process of separating the cell culture support.
하기 표 1은 본 발명에서 설명된 서열번호에 따른 아미노선 서열을 나타낸 서열목록에 대한 표이다. Table 1 below is a table for the sequence listing showing the amino acid sequences according to the sequence numbers described in the present invention.
Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala
Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro
Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ser Ser Glu
Glu Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His Tyr His Ser
Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys
Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly
Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr
Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr
Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser
Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys
Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro
Pro Thr Tyr LysMet Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr
Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala
Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro
Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ser Ser Glu
Gly Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His Tyr His Ser
Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys
Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly
Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr
Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr
Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser
Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys
Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro
Pro Thr Tyr Lys
Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala
Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro
Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ser Ser Glu
Glu Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His Tyr His Ser
Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys
Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly
Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr
Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr
Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser
Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys
Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro
Pro Thr Tyr Lys Gly Arg Gly Asp Ser ProMet Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr
Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala
Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro
Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ser Ser Glu
Gly Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His Tyr His Ser
Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys
Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly
Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr
Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr
Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser
Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys
Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro
Pro Thr Tyr Lys Gly Arg Gly Asp Ser Pro
Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala
Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro
Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Pro Trp Ala
Asp Tyr Tyr Gly Pro Lys Tyr Gly Pro Pro Arg Arg Tyr Gly Gly Gly
Asn Tyr Asn Arg Tyr Gly Arg Arg Tyr Gly Gly Tyr Lys Gly Trp Asn
Asn Gly Trp Lys Arg Gly Arg Trp Gly Arg Lys Tyr Tyr Gly Ser Ala
Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro
Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro
Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr
Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys LeuMet Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr
Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala
Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro
Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Pro Trp Ala
Asp Tyr Tyr Gly Pro Lys Tyr Gly Pro Pro Arg Arg Tyr Gly Gly Gly
Asn Tyr Asn Arg Tyr Gly Arg Arg Tyr Gly Gly Tyr Lys Gly Trp Asn
Asn Gly Trp Lys Arg Gly Arg Trp Gly Arg Lys Tyr Tyr Gly Ser Ala
Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro
Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro
Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr
Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Leu
Gly Asn Tyr Asn Arg Tyr Gly Arg Arg Tyr Gly Gly Tyr Lys Gly Trp
Asn Asn Gly Trp Lys Arg Gly Arg Trp Gly Arg Lys Tyr TyrAla Asp Tyr Tyr Gly Pro Lys Tyr Gly Pro Pro Arg Arg Tyr Gly Gly
Gly Asn Tyr Asn Arg Tyr Gly Arg Arg Tyr Gly Gly Tyr Lys Gly Trp
Asn Asn Gly Trp Lys Arg Gly Arg Trp Gly Arg Lys Tyr Tyr
Tyr His Ser Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr
Lys Gly Lys Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys
Asn Ser Gly Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg
Lys Gly Tyr Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Gly Ser SerSer Ser Glu Glu Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His
Tyr His Ser Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr
Lys Gly Lys Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys
Asn Ser Gly Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg
Lys Gly Tyr Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Gly Ser Ser
Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys
Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr
Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr LysAla Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro
Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys
Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr
Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys
10: 세포배양용 카트리지 100: 제1 지지부
110: 테두리부 111: 수용부
120: 중심부 121: 프레임부
123: 메쉬부 123a: 제1 메쉬선
123b: 제2 메쉬선 200: 제2 지지부
210: 테두리부 211: 수용부
220: 중심부 221: 프레임부
223: 메쉬부 223a: 제1 메쉬선
223b: 제2 메쉬선 300: 세포배양 지지체
400, 400': 세포배양기10: Cartridge for cell culture 100: First support part
110: rim portion 111: accommodating portion
120: center portion 121: frame portion
123:
123b: second mesh line 200: second support portion
210: rim portion 211: accommodating portion
220: center portion 221: frame portion
223:
223b: second mesh line 300: cell culture support
400, 400 ': cell incubator
<110> AMOLIFESCIENCE <120> CARTRIDGE FOR CELL CULTURE <130> 1060405 <160> 28 <170> KopatentIn 2.0 <210> 1 <211> 196 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Motif for cell culture scaffold <400> 1 Met Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr 1 5 10 15 Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala 20 25 30 Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro 35 40 45 Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ser Ser Glu 50 55 60 Glu Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His Tyr His Ser 65 70 75 80 Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys 85 90 95 Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly 100 105 110 Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr 115 120 125 Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 130 135 140 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser 145 150 155 160 Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys 165 170 175 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 180 185 190 Pro Thr Tyr Lys 195 <210> 2 <211> 202 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Motif for cell culture scaffold <400> 2 Met Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr 1 5 10 15 Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala 20 25 30 Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro 35 40 45 Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ser Ser Glu 50 55 60 Glu Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His Tyr His Ser 65 70 75 80 Gly Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys 85 90 95 Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly 100 105 110 Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr 115 120 125 Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 130 135 140 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser 145 150 155 160 Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys 165 170 175 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 180 185 190 Pro Thr Tyr Lys Gly Arg Gly Asp Ser Pro 195 200 <210> 3 <211> 172 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Motif for cell culture scaffold <400> 3 Met Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr 1 5 10 15 Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala 20 25 30 Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro 35 40 45 Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Pro Trp Ala 50 55 60 Asp Tyr Tyr Gly Pro Lys Tyr Gly Pro Pro Arg Arg Tyr Gly Gly Gly 65 70 75 80 Asn Tyr Asn Arg Tyr Gly Arg Arg Tyr Gly Gly Tyr Lys Gly Trp Asn 85 90 95 Asn Gly Trp Lys Arg Gly Arg Trp Gly Arg Lys Tyr Tyr Gly Ser Ala 100 105 110 Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro 115 120 125 Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro 130 135 140 Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro 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Gly Ser Tyr His Gly Ser Gly Tyr His Gly Gly Tyr Lys Gly Lys 85 90 95 Tyr Tyr Gly Lys Ala Lys Lys Tyr Tyr Tyr Lys Tyr Lys Asn Ser Gly 100 105 110 Lys Tyr Lys Tyr Leu Lys Lys Ala Arg Lys Tyr His Arg Lys Gly Tyr 115 120 125 Lys Lys Tyr Tyr Gly Gly Ser Ser Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr 130 135 140 Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser 145 150 155 160 Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys 165 170 175 Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro 180 185 190 Pro Thr Tyr Lys 195 <210> 2 <211> 202 <212> PRT <213> Artificial Sequence <220> <223> Motif for cell culture scaffold <400> 2 Met Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr 1 5 10 15 Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala 20 25 30 Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro 35 40 45 Thr Tyr Lys Ala Lys Pro Ser Tyr Pro Pro Thr Tyr Lys Ser Ser Glu 50 55 60 Gly Tyr Lys Gly Gly Tyr Tyr Pro Gly Asn Thr Tyr His 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Claims (12)
상기 세포배양 지지체의 하면에 배치되는 제1 지지부; 및
상기 세포배양 지지체의 상면에 배치되는 제2 지지부를 포함하고,
상기 제1 지지부 및 제2 지지부 각각은 테두리부와 중심부를 포함하는 세포배양용 카트리지.A cell culture support comprising a fabric;
A first support disposed on a lower surface of the cell culture support; And
And a second support portion disposed on an upper surface of the cell culture support body,
Wherein each of the first support portion and the second support portion includes a rim portion and a center portion.
상기 제1 지지부 및 제2 지지부 중 어느 하나의 지지부 테두리부에는 적어도 하나의 돌출부를 포함하고,
다른 하나의 지지부의 테두리부에는 상기 돌출부가 인입되는 수용부를 포함하는 세포배양용 카트리지.The method according to claim 1,
Wherein at least one protrusion is formed on a rim portion of one of the first and second support portions,
And a rim of the other support portion includes a receiving portion into which the protruding portion is inserted.
상기 중심부는 지지기능을 수행하는 프레임부 및 세포배양액이 투과되는 메쉬부를 포함하는 세포배양용 카트리지.The method according to claim 1,
Wherein the central portion includes a frame portion for performing a supporting function and a mesh portion through which a cell culture fluid is permeated.
상기 프레임부 표면에는 세포 접착 저해물질을 코팅된 세포배양용 카트리지.The method of claim 3,
Wherein a cell adhesion inhibiting substance is coated on the surface of the frame part.
상기 직물은 방적사, 필라멘트사 및 슬리팅사 중 어느 하나 이상의 원사로 제직된 세포배양용 카트리지.The method according to claim 1,
Wherein the fabric is woven from at least one of a yarn, a filament yarn and a slitting yarn.
상기 원사에는 세포배양 향상물질을 더 포함하는 세포배양용 카트리지.6. The method of claim 5,
Wherein the yarn further comprises a cell culture enhancing substance.
상기 세포배양 향상물질은 세포의 부착, 이동, 성장, 증식(proliferation) 및 분화(differentiation) 중 어느 하나 이상을 유도하는 생리활성성분인 세포배양용 카트리지.The method according to claim 6,
The cell culture enhancing substance is a physiologically active ingredient that induces at least one of cell adhesion, migration, growth, proliferation, and differentiation.
상기 생리활성성분은 모노아민, 아미노산, 펩타이드, 당류(saccharide), 지질(lipid), 단백질, 당단백질(glucoprotein), 당지질(glucolipid), 프로테오글리칸, 뮤코다당(mucopolysaccharide) 및 핵산(nucleic acid) 으로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 화합물 및 세포 중 어느 하나 이상을 포함하는 세포배양용 카트리지.8. The method of claim 7,
The physiologically active component may be selected from the group consisting of monoamines, amino acids, peptides, saccharides, lipids, proteins, glucoproteins, glucolipids, proteoglycans, mucopolysaccharides and nucleic acids. And at least one selected from the group consisting of at least one compound selected from the group consisting of:
상기 원사는 폴리스티렌(PS), 폴리에틸렌테레프탈레이트(PET), 폴리이더술폰(PES), 폴리비닐리덴플루오라이드(PVDF), 폴리아크릴로나이트릴(PAN), 폴리디메틸실록산(PDMS), 폴리아미드, 폴리알킬렌, 폴리알킬렌옥사이드(poly(alkylene oxide)), 폴리아미노산(poly(amino acids)), 폴리알릴아민(poly(allylamines), 폴리포스파젠(polyphosphazene) 및 폴리에틸렌옥사이드-폴리프로필렌옥사이드 블록공중합체로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 비생분해성 섬유형성성분 또는
폴리카프로락톤(polycaprolactone), 폴리다이옥사논(polydioxanone), 폴리글리콜릭산(polyglycolic acid), PLLA(poly(L-lactide)), PLGA(poly(DL-lactide-co-glycolide)), 폴리락틱산(Polylactic acid) 및 폴리비닐알코올(polyvinyl alcohol)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상의 생분해성 섬유형성성분을 포함하는 세포배양용 카트리지.6. The method of claim 5,
The yarn may be selected from the group consisting of polystyrene (PS), polyethylene terephthalate (PET), polyether sulfone (PES), polyvinylidene fluoride (PVDF), polyacrylonitrile (PAN), polydimethylsiloxane (PDMS) Poly (alkylene oxide), poly (amino acids), poly (allylamines), polyphosphazene, and polyethylene oxide-polypropylene oxide block copolymers At least one non-biodegradable fiber forming component selected from the group consisting of
Polycaprolactone, polydioxanone, polyglycolic acid, PLLA (poly-L-lactide), PLGA (poly-DL-lactide-co-glycolide), polylactic acid A biodegradable fiber-forming component selected from the group consisting of polylactic acid and polyvinyl alcohol.
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