KR20190002366A - Pharmaceutical composition for preventing or treating comprising avocado oil as an active ingredient - Google Patents
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- Y10S514/956—
Abstract
Description
본 발명은 아보카도 오일을 유효성분으로 포함하는 난청의 예방 또는 치료용 약학적 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating hearing loss comprising avocado oil as an active ingredient.
귀는 귓바퀴와 외이도까지를 외이로 분류하고, 고막과 이소골은 중이, 그리고 달팽이관과 청신경을 내이로 분류한다.The ears classify the ear canal and the ear canal into the outer ear, the eardrum and ossicles in the middle ear, and the cochlea and the auditory nerve in the inner ear.
소리는 음향학적 에너지로서 귓바퀴와 외이도를 통해 전달되어 고막을 진동시키고, 고막의 진동은 기계적인 에너지를 발생시켜 이소골로 전달된다. 이소골의 마지막 뼈인 등골은 달팽이관에 연결되어, 전달된 에너지를 달팽이관 내의 림프액으로 전달한다. 림프액으로 전달된 에너지는 림프액에 파동을 일으키고, 이러한 파동에 의해 달팽이관 내에 있는 유모세포가 자극을 받는다. 유모세포의 움직임으로 이온변화가 일어나면서 유모세포에 붙어있는 청신경으로 신경전달물질이 전달되고, 소리에너지는 청신경에서 전기적인 에너지 형태로 뇌까지 전달된다.Sound is an acoustic energy transmitted through the auricle and outer ear canal to vibrate the eardrum, and the vibration of the eardrum is transmitted to the ossicles by generating mechanical energy. The last bone of the ossicle, the spine, is connected to the cochlea, which transfers the delivered energy to the lymph fluid in the cochlea. The energy delivered to the lymph fluid causes a wave in the lymph fluid, which is stimulated by the hair cells in the cochlea. As the hair cells move, the neurons are transferred to the auditory nerves attached to the hair cells, and the sound energy is transmitted from the auditory nerve to the brain in the form of electrical energy.
외이와 중이는 소리를 전달하는 기관으로서 염증 같은 질병에 감염되었을 때, 대부분 치료 또는 수술로 회복될 수 있고, 그로 인한 청력 손실 역시 치료에 의해 개선될 수 있다. 이러한 난청을 전음성 난청(conductive hearing loss)이라 한다. 한편, 소리를 감지하는 기관인 달팽이관과 전기적 에너지로 소리를 전달하는 청신경, 및 소리의 변별, 이해 등 종합적인 역할을 하는 뇌에 문제가 생겨 발생되는 난청을 감각신경성 난청(sensorineural hearing loss)이라 한다.As a result, the hearing loss can be improved by the treatment. This hearing loss is called conductive hearing loss. On the other hand, the hearing loss caused by a problem in the brain that plays a comprehensive role, such as the cochlea which is a sound sensing organization, the auditory nerve transmitting sound by electric energy, and the discrimination and understanding of sound is called sensorineural hearing loss.
신체의 감각 기관 중 청각 기관은 의사소통에 가장 기초적인 감각으로 언어나 지식을 습득하고, 사회생활을 하며 인간적 삶을 사는데 가장 중요한 감각 중 하나이다. 대부분의 청력손실은 현재까지 예방 외에 치료방법이 없는 감각신경성 난청에 해당하며, 일단 난청이 발생하면 보청기 등의 보조수단을 이용하거나 기계적 장치를 체내에 이식하는 방법을 사용한다. 감각신경성 난청은 발병의 원인과 시기에 따라 분류할 수 있는데, 시기에 따라서는 선천적 난청 및 후천적 난청으로 분류된다. 선천적 난청은 태생전에 손상에 의해 난청이 발생한 것으로서, 유전, 태내에서의 문제 또는 태생과정에서의 문제로 인해 발생한다.The auditory organ in the body's sensory organs is one of the most important senses to acquire language and knowledge, social life and human life with the most basic sense of communication. Most of the hearing loss corresponds to sensory neural deafness, which has not been treated so far except for the treatment. Once hearing loss occurs, hearing aids or other mechanical means are used or implanted into the body. Sensory neural deafness can be classified according to the cause and timing of onset. Depending on the timing, it is classified into congenital deafness and acquired hearing loss. Congenital hearing loss is the result of hearing loss caused by damage before birth, caused by genetic problems, problems in the womb, or problems in the birth process.
선천적 난청은 대부분 그 정도가 매우 심하고 언어를 습득하는 것도 별도의 훈련이나 교육없이는 불가능하다. 선천적인 난청은 대부분 고출력의 보청기나 인공와우(cochlear implant)를 이식하여 소리를 들을 수 있게 한다. 그러나, 이와 같은 보조장치는 난청의 정도가 심할수록 그 효과도 떨어지고 정상적인 청취능력과는 차이가 커 일상생활이 여전히 불편하다. 한편, 후천적 난청은 태생 이후, 질병, 소음, 약물 또는 사고에 의해 발생하는 난청으로, 원인 인자로는 소음, 약물, 노화, 외상, 바이러스 등이 있다. 최근에는 소음 및 노화로 인한 난청이 급격히 증가하고 있다.Congenital hearing loss is mostly severe, and learning a language is impossible without training or education. Most congenital hearing loss implants hearing aids or cochlear implants to hear sounds. However, the severity of hearing loss in such ancillary devices is so low that it is not as good as normal listening ability and daily life is still inconvenient. On the other hand, acquired hearing loss is caused by illness, noise, medication or accident after birth, and the causes are noise, drugs, aging, trauma, and viruses. Recently, hearing loss due to noise and aging is increasing rapidly.
과학기술의 발달로 인간의 수명이 길어지면서 전 세계적으로 노인인구가 급격히 증가하고 있다. 노인성 난청 역시 감각신경성 난청이 대부분으로, 예방과 관리외에 치료나 개선을 위한 약물이나 치료방법이 없는 실정이다.With the development of science and technology, the life expectancy of man has been lengthened, and the elderly population is rapidly increasing worldwide. Most of senile hearing loss is sensory neural deafness, and there are no medications or treatment methods for treatment or improvement besides prevention and management.
또한, 사회의 산업화로 인해 소음으로 인한 난청인구 역시 급격히 증가하고 있다. 소음환경에서 일하는 근로자나 군인과 같은 직업적 소음성 난청뿐만 아니라, 문화 및 여가생활에 의해 소음성 난청도 증가하고 있는 추세이다. 이와 관련하여, 미국의 OSHA(Occupational Safety and Health Administration)에서는 85 dBA을 기준으로 그 이상의 소음환경에 대해서는 소음관리를 시행하고 있다. 연구에 따르면, 인간의 청각기관은 75 dBA 이상의 소음에서 영향을 받는 것으로 보고되어 있는데 75 dBA의 소음은 도로변의 소음정도이므로, 현대사회에서는 모든 사람이 청각기관에 해로운 정도의 소음 속에서 생활하는 것으로 볼 수 있다. 이외에도 MP3 사용과 같은 여가생활에서도 큰 소리에 노출되는 경우가 많아 소음성 난청은 다양한 연령대에서 발생한다.In addition, due to the industrialization of society, the hearing loss due to noise is also rapidly increasing. In addition to occupational noise-induced hearing loss such as workers and soldiers working in a noisy environment, noise and hearing loss are also increasing due to cultural and leisure activities. In this regard, Occupational Safety and Health Administration (OSHA) in the United States is implementing noise management for noise environments above 85 dBA. Studies have shown that human auditory organs are affected by noise above 75 dBA, since the noise level of 75 dBA is the noise level of the roadside, so that in modern society, everyone lives in a level of noise that is harmful to the hearing organ can see. In addition, many people are exposed to loud sounds in leisure activities such as MP3 use, and noise-induced hearing loss occurs at various ages.
젊은 시절에 발생한 소음성 난청은 결국 40대부터 보청기를 사용할 정도로 청력을 손상시키고, 여기에 신체적 노화가 병행되면 점점 더 난청의 정도가 심해진다. 보조기구도 난청의 정도가 심해질수록 그 효과가 떨어지기 때문에 고심도의 청각손상은 결국 의사소통에 심각한 문제를 발생시킨다.In the young age, noise-induced hearing loss eventually hurts hearing ability to use hearing aids from the forties, and when physical aging is accompanied by this, the degree of hearing loss is getting worse. As the degree of hearing loss becomes worse, the effectiveness of assistive devices decreases, so serious hearing damage causes serious communication problems.
이와 관련하여, 대한민국 특허출원 제10-2008-0044810호에는 황금 추출물이 소음성 난청 동물모델에서 유의적인 청각손상 예방 효과가 있음을 개시하고 있다. 이외에도, 난청의 예방 또는 치료에 효과적인 물질로서, 항산화제, NMDA(N-methyle-D-aspartate) 길항제, 세포사멸 억제제, 성장인자 등이 연구되고 있다. 그러나 이와 같은 물질들은 임상시험까지 진행되는데 한계를 보였다.In this respect, Korean Patent Application No. 10-2008-0044810 discloses that the golden extract has a significant effect of preventing hearing damage in an animal model of noise-null hearing loss. In addition, antioxidants, NMDA (N-methyle-D-aspartate) antagonists, cell death inhibitors, growth factors and the like have been studied as effective substances for preventing or treating hearing loss. However, such substances have been limited to clinical trials.
이에, 본 발명자들은 난청의 치료에 사용할 수 있는 물질을 개발하던 중, 아보카도의 오일, 특히 아보카도 껍질로부터 착유된 오일이 제브라피쉬 모델에서 카나마이신에 의해 감소된 유모세포의 수를 유의적으로 증가시키는 것을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.Thus, the inventors have found that, while developing a substance that can be used for the treatment of hearing loss, the oil of avocado, especially the oil milk from avocado shell, significantly increases the number of hair cells reduced by kanamycin in the zebrafish model By confirming, the present invention has been completed.
본 발명의 목적은 아보카도 오일을 포함하는 난청의 치료용 조성물 및 이의 제조방법을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a composition for the treatment of hearing loss comprising avocado oil and a method of producing the same.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 아보카도 오일을 유효성분으로 포함하는 난청의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating hearing loss comprising avocado oil as an active ingredient.
또한, 본 발명은 아보카도 오일을 유효성분으로 포함하는 난청의 개선용 건강기능식품을 제공한다.The present invention also provides a health functional food for improving hearing loss comprising avocado oil as an active ingredient.
또한, 본 발명은 아보카도를 40 내지 70℃의 온도에서 착유하는 단계를 포함하는 아보카도 오일의 제조방법을 제공한다. The present invention also provides a method for producing avocado oil comprising milking avocado at a temperature of 40 to 70 캜.
본 발명에 따른 아보카도 오일, 특히 아보카도의 껍질로부터 착유된 아보카도 껍질 오일이 제브라피쉬 모델에서 카나마이신에 의해 감소된 유모세포의 수를 유의적으로 증가시킴으로써, 상기 아보카도 오일은 난청의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.The avocado oil according to the present invention, particularly the avocado shell oil milked from the shell of avocado, significantly increases the number of hair cells reduced by kanamycin in the zebrafish model, so that the avocado oil can be useful for the treatment of deafness have.
도 1은 아보카도의 과육, 껍질 또는 씨로부터 착유된 오일이 카나마이신에 의해 감소한 유모세포의 수를 증가시키는 것을 세포 수준에서 확인한 그래프이다.
도 2는 아보카도의 껍질 오일(AVPO), 아보카도의 과육 부틸렌글라이콜 추출물(BGAVO), 시판되고 있는 아보카도 과육 오일 I(AVOI) 또는 아보카도 과육 오일 II(AVOII)를 1 또는 10 ㎍/㎖의 농도로 첨가하였을 때, 카나마이신에 의해 감소한 제브라피쉬의 유모세포가 증가한 것을 현미경으로 촬영한 사진이다(NOR: 무처리 대조군, KM: 음성대조군).
도 3은 아보카도의 껍질 오일(AVPO), 아보카도의 과육 부틸렌글라이콜 추출물(BGAVO), 시판되고 있는 아보카도 과육 오일 I(AVOI) 또는 아보카도 과육 오일 II(AVOII)를 1 또는 10 ㎍/㎖의 농도로 첨가하였을 때, 카나마이신에 의해 감소한 제브라피쉬의 유모세포가 증가한 것을 확인한 그래프이다(NOR: 무처리 대조군, KM: 음성대조군).
도 4는 아보카도의 껍질 오일(AVPO), 아보카도 껍질의 에탄올 추출물(AVPE), 아보카도 과육의 에탄올 추출물 (AVUE) 또는 아보카도 씨의 에탄올 추출물 (AVSE)을 1 또는 10 ㎍/㎖의 농도로 첨가하였을 때, 카나마이신에 의해 감소한 제브라피쉬의 유모세포가 증가한 것을 현미경으로 촬영한 사진이다(NOR: 무처리 대조군, KM: 음성대조군).
도 5는 아보카도의 껍질 오일(AVPO), 아보카도 껍질의 에탄올 추출물(AVPE), 아보카도 과육의 에탄올 추출물 (AVUE) 또는 아보카도 씨의 에탄올 추출물 (AVSE)을 1 또는 10 ㎍/㎖의 농도로 첨가하였을 때, 카나마이신에 의해 감소한 제브라피쉬의 유모세포가 증가한 것을 확인한 그래프이다(NOR: 무처리 대조군, KM: 음성대조군).
도 6은 아보카도의 껍질 오일(peel), 아보카도의 과육 오일(pulp), 또는 아보카도 씨 오일(seed)의 성분을 209 nm UV 검출기로 장착된 HPLC로 분석한 결과이다.
도 7은 아보카도의 껍질 오일(peel), 아보카도의 과육 오일(pulp), 또는 아보카도 씨 오일(seed)의 성분을 254 nm UV 검출기로 장착된 HPLC로 분석한 결과이다.
도 8은 아보카도의 껍질 오일(peel), 아보카도의 과육 오일(pulp), 또는 아보카도 씨 오일(seed)의 성분을 280 nm UV 검출기로 장착된 HPLC로 분석한 결과이다. FIG. 1 is a graph showing that at the cellular level, the number of hair cells reduced by the oil obtained from the flesh, hulls or seeds of avocado is reduced by kanamycin.
FIG. 2 is a graph showing the concentration of avocado peel oil (AVPO), avocado fructitized butylolyglycolic acid extract (BGAVO), commercially available avocado flesh oil I (AVOI) or avocado flesh oil II (AVOII) at a concentration of 1 or 10 μg / (NOR: untreated control group, KM: negative control group), which was obtained by microscopic observation of the increase of hair cells of zebrafish reduced by kanamycin.
FIG. 3 is a graph showing the results obtained when the avocado peel oil (AVPO), avocado fructus butanol extract (BGAVO), commercially available avocado flesh oil I (AVOI) or avocado flesh oil II (AVOII) (NOR: untreated control group, KM: negative control group) when kanamycin-added zebrafish cells were added.
Fig. 4 shows the results when the avocado oil (AVPO), the ethanol extract of avocado skin (AVPE), the ethanol extract (AVUE) of avocado flesh or the ethanol extract (AVSE) of avocado seed were added at a concentration of 1 or 10 / / (NOR: untreated control group, KM: negative control group), which was obtained by microscopic observation of the increase of hair cells of zebrafish reduced by kanamycin.
Figure 5 shows that when AVPO of avocado, AVPE of avocado bark, AVUE of avocado pulp or AVSE of avocado were added at a concentration of 1 or 10 mu g / mL, (NOR: untreated control group, KM: negative control group), which was decreased by kanamycin.
FIG. 6 shows the results of analysis of components of avocado peel, avocado pulp, or avocado seed oil by HPLC equipped with a 209 nm UV detector.
FIG. 7 shows the results of analysis of components of avocado peel, avocado pulp, or avocado seed oil by HPLC equipped with a 254 nm UV detector.
Figure 8 shows the results of analysis of components of avocado peel, avocado pulp, or avocado seed oil by HPLC equipped with a 280 nm UV detector.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.
본 발명은 아보카도 오일을 유효성분으로 포함하는 난청의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.The present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating hearing loss comprising avocado oil as an active ingredient.
상기 아보카도 오일은 아보카도의 껍질, 과육 및 씨로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상, 구체적으로 아보카도의 껍질로부터 착유된 오일일 수 있다. 상기 아보카도 오일은 압착법, 용매 추출법, 초임계 이산화탄소 추출법 또는 수증기증류법 등의 천연물의 오일을 얻는 방법으로 추출된 것일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 아보카도 오일은 압착법에 의해 착유된 것일 수 있다.The avocado oil may be any one or more selected from the group consisting of the shells, pulp and seeds of avocados, and more specifically milk oiled from the shell of avocado. The avocado oil may be extracted by a method of obtaining an oil of a natural product such as a compression method, a solvent extraction method, a supercritical carbon dioxide extraction method, or a steam distillation method. In one embodiment of the present invention, the avocado oil may be milked by a pressing method.
본 명세서에 사용된 용어 "아보카도 오일(avocado oil)"은 아보카도로부터 압착, 침출 및 증류 등과 같은 방법으로 추출된 오일을 의미한다. 상기 아보카도 오일은 아보카도 에센스, 향유, 에센셜 오일 및 정유 등과 같은 표현으로 사용될 수 있다.As used herein, the term " avocado oil " refers to oils extracted from avocado by methods such as compression, leaching and distillation. The avocado oil may be used in the expression such as avocado essence, ointment, essential oil and essential oil.
상기 난청은 전음성 난청 및 감각신경성 난청으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있다. 상기 감각신경성 난청은 소음, 약물, 노화, 외상 및 바이러스 등에 의해 발생하는 난청일 수 있고, 구체적으로 이독성 난청일 수 있다. 상기 이독성 난청은 이독성 약물인 젠타마이신(gentamicin), 스트렙토마이신(streptomycin), 카나마이신(kanamycin), 네오마이신(neomycin), 아미카신(amikacin), 토브라마이신(tobramycin), 네틸마이신(netilmicin), 디베카신(dibekacin), 시소마이신(sisomycin), 리보도마이신(livodomycin), 시스플라틴(cisplatin), 카르보플라틴(carboplatin) 및 옥살리플라틴(oxaliplatin)으로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상의 약물의 투여로 인한 난청일 수 있다. 구체적으로, 상기 이독성 난청은 카나마이신의 투여로 인한 난청일 수 있다.The hearing loss may be any one or more selected from the group consisting of total hearing loss and sensory nerve impairment. The sensory neuron deafness may be hearing loss caused by noise, drugs, aging, trauma, viruses, and the like, and may be specifically toxic hearing loss. This toxic hearing loss is caused by the toxic drugs gentamicin, streptomycin, kanamycin, neomycin, amikacin, tobramycin, netilmicin, Administration of one or more drugs selected from the group consisting of diclofenac, dibekacin, sisomycin, livodomycin, cisplatin, carboplatin and oxaliplatin Can be caused by hearing loss. Specifically, the toxic hearing loss may be caused by administration of kanamycin.
본 발명의 구체적인 일 실시예에서, 본 발명자들은 아보카도의 껍질, 과육 또는 씨로부터 오일을 제조하였으며, 특히 아보카도의 껍질로부터 착유된 아보카도 껍질 오일이 카나마이신에 의해 감소된 제브라피쉬 치어의 유모세포 수를 유의적으로 증가시킴을 확인하였다 (도 1 참조). In one specific embodiment of the present invention we have made oils from the shells, pulp or seeds of avocados, and in particular the avocado shell oil milked from the shell of avocados has been shown to reduce the number of hair cells in zebra fishes reduced by kanamycin (See FIG. 1).
또한, 본 발명자들은 카나마이신에 의해 감소한 제브라피쉬 모델에 아보카도 과육의 부틸렌글라이콜 추출물(BGAVO), 시판되고 있는 아보카도 과육 오일 I(AVOI) 또는 아보카도 과육 오일 II(AVOII)를 처리하였을 때, 대조군과 비교하여 유모세포의 수에 유의적 변화가 없는 반면, 아보카도 껍질 오일(AVPO) 처리 시 유모세포의 수가 유의적으로 현저히 증가함을 확인하였다 (도 2 및 도 3 참조).The present inventors also found that when the butylene glycol extract (BGAVO), avocado flesh oil I (AVOI) or avocado flesh oil II (AVOII) of avocado pulp was treated with a zebrafish model reduced by kanamycin, (Fig. 2 and Fig. 3), while the number of hair cells was not significantly changed compared with that of avocado skin oil (AVPO).
또한, 본 발명자들은 카나마이신에 의해 감소한 제브라피쉬 모델에 아보카도 껍질의 에탄올 추출물(AVPE), 아보카도 과육의 에탄올 추출물(AVUE), 또는 아보카도 씨의 에탄올 추출물(AVSE)을 처리하였을 때, 대조군과 비교하여 유모세포의 수에 유의적 변화가 없는 반면, 아보카도 껍질 오일(AVPO) 처리 시 유모세포의 수가 유의적으로 현저히 증가함을 확인하였다 (도 4 및 도 5 참조).The present inventors also found that when the ethanol extract (AVPE) of avocado shell, the ethanol extract (AVUE) of avocado pulp, or the ethanol extract (AVSE) of avocado seed were treated with a zebrafish model reduced by kanamycin, The number of cells was not significantly changed, whereas the number of hair cells was significantly increased during treatment with avocado oil (AVPO) (see FIGS. 4 and 5).
따라서, 본 발명의 아보카도 과육 오일은 난청의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.Therefore, the avocado flesh oil of the present invention can be useful for the treatment of deafness.
본 발명에 따른 약학 조성물은 조성물 전체 중량에 대하여 유효성분인 아보카도 오일을 10 내지 95 중량%로 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 약학 조성물은 상기 유효성분 이외에 추가로 동일 또는 유사한 기능을 나타내는 유효성분을 1종 이상 추가로 포함할 수 있다.The pharmaceutical composition according to the present invention may contain 10 to 95% by weight of avocado oil as an active ingredient, based on the total weight of the composition. In addition, the pharmaceutical composition of the present invention may further contain at least one active ingredient which exhibits the same or similar functions in addition to the above-mentioned effective ingredients.
본 발명의 약학 조성물은 생물학적 제제에 통상적으로 사용되는 담체, 희석제, 부형제 또는 이의 혼합물을 포함할 수 있다. 약학적으로 허용가능한 담체는 조성물을 생체 내에 전달하는데 적합한 것이면 모두 사용할 수 있다. 구체적으로, 상기 담체는 Merck Index, 13th ed., Merck & Co. Inc.에 기재된 화합물, 식염수, 멸균수, 링거액, 덱스트로스 용액, 말토덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 또는 이의 혼합물일 수 있다. 또한, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등과 같은 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다.The pharmaceutical compositions of the present invention may include carriers, diluents, excipients or mixtures thereof conventionally used in biological preparations. Pharmaceutically acceptable carriers can be used as long as they are suitable for delivering the composition in vivo. Specifically, the carrier is selected from Merck Index, 13th ed., Merck & Sterile water, Ringer's solution, dextrose solution, maltodextrin solution, glycerol, ethanol, or a mixture thereof. If necessary, conventional additives such as an antioxidant, a buffer, a bacteriostatic agent and the like may be added.
상기 조성물을 제제화하는 경우, 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 첨가할 수 있다.When the composition is formulated, a diluent such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, a surfactant, or an excipient may be added.
본 발명의 조성물은 경구용 제제 또는 비경구용 제제로 제형화될 수 있다. 경구용 제제로는 고형 제제 및 액상 제제가 포함될 수 있다. 상기 고형 제제는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 또는 트로키제일 수 있고, 이러한 고형 제제는 상기 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제를 첨가하여 조제할 수 있다. 상기 부형제는 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 또는 이의 혼합물일 수 있다. 또한, 상기 고형 제제는 윤활제를 포함할 수 있고, 그 예로는 마그네슘 스티레이트, 탈크등이 있다. 한편, 상기 액상 제제는 현탁제, 내용액제, 유제 또는 시럽제일 수 있다. 이때, 상기 액상 제제에는 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등과 같은 부형제가 포함될 수 있다.The compositions of the present invention may be formulated into oral or parenteral formulations. Oral preparations may include solid preparations and liquid preparations. The solid preparation may be a tablet, a pill, a powder, a granule, a capsule, or a troche. The solid preparation may be prepared by adding at least one excipient to the composition. The excipient may be starch, calcium carbonate, sucrose, lactose, gelatin or a mixture thereof. In addition, the solid preparation may comprise a lubricant, examples of which include magnesium stearate, talc, and the like. On the other hand, the liquid preparation may be a suspension, a solution, an emulsion or a syrup. At this time, the liquid preparation may contain an excipient such as a wetting agent, a sweetener, a fragrance, a preservative, and the like.
상기 비경구용 제제는 주사제, 좌제, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 파우더 및 크림 등을 포함할 수 있다. 상기 주사제는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁용제, 유제 등을 포함할 수 있다. 이때, 비수성용제 또는 현탁용제로서는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름이나, 에틸올레이트와 같이 주사가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.The parenteral preparation may contain injections, suppositories, respiratory inhalation powders, aerosol formulations for spraying, powders and creams. The injection may include a sterilized aqueous solution, a non-aqueous solvent, a suspending agent, an emulsion, and the like. As the non-aqueous solvent or suspension, vegetable oils such as propylene glycol, polyethylene glycol and olive oil, and injectable esters such as ethyl oleate may be used.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 또는 비경구로 투여될 수 있다. 비경구 투여는 복강내, 직장내, 피하, 정맥, 근육내 또는 흉부내 주사 방식을 포함할 수 있다.The composition of the present invention can be administered orally or parenterally according to the desired method. Parenteral administration may include intraperitoneal, rectal, subcutaneous, intravenous, intramuscular or intrathecal injection.
상기 조성물은 약제학적으로 유효한 양으로 투여될 수 있다. 이는 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 환자의 민감도, 투여 시간, 투여 경로, 치료기간, 동시에 사용되는 약물 등에 따라 달라질 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명에 따른 약학 조성물에 포함되는 유효성분의 양은 0.0001 내지 10,000 ㎎/㎏, 구체적으로 0.001 내지 5 g/㎏일 수 있다. 상기 투여는 하루에 1회 수회일 수 있다.The composition may be administered in a pharmaceutically effective amount. This may vary depending on the type of disease, severity, activity of the drug, sensitivity of the patient to the drug, administration time, route of administration, duration of treatment, However, for the desired effect, the amount of the active ingredient contained in the pharmaceutical composition according to the present invention may be 0.0001 to 10,000 mg / kg, specifically 0.001 to 5 g / kg. The administration may be several times per day.
본 발명의 조성물은 단독 또는 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있다. 병용 투여시, 투여는 순차적 또는 동시일 수 있다.The composition of the present invention may be administered alone or in combination with other therapeutic agents. When administered concomitantly, the administration can be sequential or simultaneous.
또한, 본 발명은 아보카도 오일을 유효성분으로 포함하는 난청의 개선용 건강기능식품을 제공한다.The present invention also provides a health functional food for improving hearing loss comprising avocado oil as an active ingredient.
본 발명에 따른 아보카도 오일은 상술한 바와 같은 특징을 가질 수 있다. 일례로, 상기 아보카도 오일은 아보카도의 껍질, 과육 및 씨로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나 이상으로부터 착유된 오일일 수 있고, 구체적으로는 아보카도의 껍질로부터 착유된 오일일 수 있다.The avocado oil according to the present invention may have the characteristics as described above. In one example, the avocado oil may be an oil that is milked from at least one selected from the group consisting of shells, pulp and seeds of avocados, and in particular may be an oil that is milked from the shell of avocado.
상기 난청은 상술한 바와 같다. 일례로, 상기 난청은 전음성 난청 및 감각신경성 난청으로 구성된 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상일 수 있고, 구체적으로 감각신경성 난청일 수 있다. 상기 감각신경성 난청은 이독성 난청일 수 있다.The above-described hearing loss is as described above. For example, the hearing loss may be any one or more selected from the group consisting of pre-speech hearing loss and sensory nerve impairment, and specifically may be sensory nerve impairment. The sensory neural deafness may be this toxic hearing loss.
본 발명의 구체적인 일 실시예에서, 본 발명자들은 아보카도의 껍질, 과육 또는 씨로부터 오일을 제조하였으며, 특히 아보카도의 껍질로부터 착유된 아보카도 껍질 오일이 카나마이신에 의해 감소된 제브라피쉬 치어의 유모세포 수를 유의적으로 증가시킴을 확인하였다 (도 1 참조). In one specific embodiment of the present invention we have made oils from the shells, pulp or seeds of avocados, and in particular the avocado shell oil milked from the shell of avocados has been shown to reduce the number of hair cells in zebra fishes reduced by kanamycin (See FIG. 1).
또한, 본 발명자들은 카나마이신에 의해 감소한 제브라피쉬 모델에 아보카도의 과육 부틸렌글라이콜 추출물(BGAVO), 시판되고 있는 아보카도 과육 오일 I(AVOI) 또는 아보카도 과육 오일 II(AVOII)를 처리하였을 때, 대조군과 비교하여 유모세포의 수에 유의적 변화가 없는 반면, 아보카도 껍질 오일(AVPO) 처리 시 유모세포의 수가 유의적으로 현저히 증가함을 확인하였다 (도 2 및 도 3 참조).The present inventors also found that when zebrafish reduced by kanamycin was treated with FG (BGAVO), avocado flesh oil I (AVOI) or avocado flesh oil II (AVOII) of avocado, (Fig. 2 and Fig. 3), while the number of hair cells was not significantly changed compared with that of avocado skin oil (AVPO).
또한, 본 발명자들은 카나마이신에 의해 감소한 제브라피쉬 모델에 아보카도 껍질의 에탄올 추출물(AVPE), 아보카도 과육의 에탄올 추출물(AVUE), 또는 아보카도 씨의 에탄올 추출물(AVSE)을 처리하였을 때, 대조군과 비교하여 유모세포의 수에 유의적 변화가 없는 반면, 아보카도 껍질 오일(AVPO) 처리 시 에탄올 추출물을 처리한 것보다 유모세포의 수가 유의적으로 현저히 증가함을 확인하였다 (도 4 및 도 5 참조).The present inventors also found that when the ethanol extract (AVPE) of avocado shell, the ethanol extract (AVUE) of avocado pulp, or the ethanol extract (AVSE) of avocado seed were treated with a zebrafish model reduced by kanamycin, The number of hair cells was significantly increased as compared to the ethanol extract treatment of avocado shell oil (AVPO) treatment (see FIGS. 4 and 5), while there was no significant change in the number of cells.
따라서, 본 발명의 아보카도 과육 오일은 난청의 개선에 유용하게 사용될 수 있다.Therefore, the avocado flesh oil of the present invention can be usefully used for improving the hearing loss.
본 발명의 조성물은 식품에 그대로 첨가하거나, 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있다. 이때, 첨가되는 유효성분의 함량은 목적에 따라 결정될 수 있고, 일반적으로는 전체 식품 중량의 0.01 내지 90 중량부일 수 있다.The composition of the present invention can be added directly to food or used together with other food or food ingredients. At this time, the content of the active ingredient to be added may be determined depending on the purpose, and may generally be 0.01 to 90 parts by weight of the total food weight.
건강기능식품의 형태 및 종류는 특별히 제한되지 않는다. 구체적으로, 상기 건강기능식품은 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상 및 환의 형태일 수 있다. 상기 건강기능식품은 추가성분으로서 여러 가지 향미제, 감미제 또는 천연 탄수화물을 포함할 수 있다. 상기 감미제는 천연 또는 합성 감미제일 수 있고, 천연 감미제의 예로는 타우마틴, 스테비아 추출물 등이 있다. 한편, 합성 감미제의 예로는 사카린, 아스파르탐 등이 있다. 또한, 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드, 디사카라이드, 폴리사카라이드, 올리고당 및 당알코올 등일 수 있다.The form and kind of the health functional food are not particularly limited. Specifically, the health functional food may be in the form of a tablet, a capsule, a powder, a granule, a liquid and a ring. The health functional food may contain various flavors, sweeteners or natural carbohydrates as an additional ingredient. The sweeteners may be natural or synthetic sweeteners, examples of natural sweeteners include tau martin and stevia extract. On the other hand, examples of synthetic sweeteners include saccharin and aspartame. The natural carbohydrates may be monosaccharides, disaccharides, polysaccharides, oligosaccharides, sugar alcohols, and the like.
본 발명의 건강기능식품은 상기 서술한 추가성분 외에, 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙스탄 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 등을 더 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합으로 사용될 수 있다. 상기 첨가제의 비율은 본 발명의 조성물의 100 중량부당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택될 수 있다.The health functional food of the present invention may contain, in addition to the above-described additional ingredients, a nutrient, a vitamin, an electrolyte, a flavoring agent, a colorant, a pectin and a salt thereof, an alginic acid and its salt, an organic acid, a protective colloid thickening agent, , Glycerin, alcohol, and the like. These components may be used independently or in combination. The proportion of the additive may be selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.
또한, 본 발명은 아보카도 오일의 제조방법을 제공한다.The present invention also provides a process for producing avocado oil.
상기 아보카도 오일은 아보카도의 껍질로부터 착유된 오일일 수 있다. 상기 아보카도 오일은 압착법, 용매 추출법, 초임계 이산화탄소 추출법 또는 수증기증류법 등의 천연물의 오일을 얻는 방법으로 추출된 것일 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서, 상기 아보카도 오일은 압착법에 의해 착유된 것일 수 있다. The avocado oil may be an oil that is milked from the shell of avocado. The avocado oil may be extracted by a method of obtaining an oil of a natural product such as a compression method, a solvent extraction method, a supercritical carbon dioxide extraction method, or a steam distillation method. In one embodiment of the present invention, the avocado oil may be milked by a pressing method.
상기 제조방법은 아보카도를 착유하는 단계를 포함할 수 있다. The manufacturing method may include milking avocados.
상기 아보카도를 착유하는 온도는 40 내지 70℃일 수 있고, 구체적으로 45 내지 65℃, 더 구체적으로 50 내지 60℃일 수 있고, 더욱 더 구체적으로는 52 내지 63℃일 수 있다. 상기 아보카도를 착유하는 온도 조건을 벗어난 범위에서는 착유가 충분히 이루어지지 않아 유효성분의 함량이 미미할 수 있다. 또는 독성을 나타내는 성분의 함량이 증가할 수 있다. The temperature for milking the avocado may be 40 to 70 캜, specifically 45 to 65 캜, more specifically 50 to 60 캜, and still more specifically 52 to 63 캜. Milking is not sufficiently carried out within a range beyond the temperature condition for milking the avocado, so that the content of the active ingredient may be insufficient. Or the content of components exhibiting toxicity may increase.
또한, 상기 제조방법에 있어서, 착유된 아보카도 오일을 원심분리하여 상등액을 수득하는 단계를 더 포함할 수 있다. In addition, in the above production method, the step of centrifuging the milked avocado oil to obtain a supernatant may be further included.
상기 착유된 아보카도 오일을 원심분리하는 온도 조건은 10 내지 40℃, 구체적으로 10 내지 35℃, 더 구체적으로 12 내지 30℃, 더욱 더 구체적으로는 15 내지 25℃일 수 있다. 상기 착유된 아보카도 오일을 원심분리하는 회전 조건은 8,000 내지 16,000 rpm, 구체적으로 9,000 내지 15,000 rpm, 더 구체적으로 10,000 내지 14,000 rpm, 더욱 더 구체적으로 11,000 내지 13,000 rpm일 수 있다. 상기 착유된 아보카도 오일을 원심분리하는 조건을 벗어난 범위에서는 원심분리가 충분히 이루어지지 않거나 과도하게 이루어져 상등액 내 유효성분의 함량이 미미하거나 유효성분 외 성분의 함량이 높을 수 있다.The temperature condition for centrifuging the above milked avocado oil may be 10 to 40 캜, specifically 10 to 35 캜, more specifically 12 to 30 캜, still more specifically 15 to 25 캜. The rotation conditions for centrifuging the milked avocado oil may be 8,000 to 16,000 rpm, specifically 9,000 to 15,000 rpm, more specifically 10,000 to 14,000 rpm, even more specifically 11,000 to 13,000 rpm. Centrifugation may not be performed sufficiently or excessively in a range beyond the condition of centrifuging the above milked avocado oil, so that the content of the active ingredient in the supernatant liquid may be insignificant or the content of the non-active ingredient may be high.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명이 이들에 의해 제한되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to examples. However, the following examples are illustrative of the present invention, but the present invention is not limited thereto.
실시예 1. 아보카도 껍질 오일의 제조Example 1. Preparation of avocado shell oil
아보카도(미국산)의 껍질을 벗겨 612.1 g의 껍질을 수득하였다. 상기 수득된 껍질을 55℃의 온도에서 48시간 동안 건조시켜, 138.5 g의 건조된 아보카도 껍질을 수득하였다. 건조된 아보카도 껍질로부터 엑스펠라식 착유기(오일러브 프리미엄 L 렌찌 자동형, NATIONAL ENG CO., LTD)를 이용하여 55℃의 온도에서 아보카도 껍질 오일을 제조하였다. 제조된 아보카도 껍질 오일을 20℃, 12,000 rpm의 조건에서 원심분리하고, 상등액만 수득하여 이를 여과하여 최종적으로 실험에 사용될 70.8 g의 아보카도 껍질 오일을 11.56%의 수율로 얻었다. 상기 아보카도 껍질 오일은 사용하기 전까지 상온에 보관하였다.The avocado (from the United States) was peeled to give 612.1 g of a shell. The obtained shell was dried at a temperature of 55 DEG C for 48 hours to obtain 138.5 g of dried avocado shell. From the dried avocado shells, avocado shell oil was prepared at a temperature of 55 ° C using an Xpella-type milking machine (OilLube Premium LENCHI AUTO, NATIONAL ENG CO., LTD.). The prepared avocado shell oil was centrifuged at 20 DEG C and 12,000 rpm to obtain only supernatant, which was then filtered to obtain 70.8 g of avocado shell oil to be used for the experiment at a yield of 11.56%. The avocado shell oil was stored at room temperature until use.
비교예Comparative Example 1. 아보카도 과육 오일의 제조 1. Preparation of avocado pulp oil
986.8 g의 아보카도 과육을 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일한 조건 및 방법으로 아보카도 과육 오일을 제조하였다. 그 결과, 175.7 g의 아보카도 과육 오일을 17.8%의 수율로 수득하였다.Avocado flesh oil was prepared under the same conditions and procedures as in Example 1 except that 986.8 g of avocado flesh was used. As a result, 175.7 g of avocado flesh oil was obtained in a yield of 17.8%.
비교예Comparative Example 2. 아보카도 씨 오일의 제조 2. Production of avocado seed oil
207.5 g의 아보카도 씨를 사용한 것을 제외하고는, 실시예 1과 동일한 조건 및 방법으로 아보카도 씨 오일을 제조하였다. 그 결과, 4.7 g의 아보카도 씨 오일을 2.3%의 수율로 수득하였다.Avocado seed oil was prepared under the same conditions and procedures as in Example 1, except that 207.5 g of avocado seed was used. As a result, 4.7 g of avocado seed oil was obtained in a yield of 2.3%.
비교예Comparative Example 3. 아보카도 부틸렌 3. Avocado butylene 글라이콜Glycoll 추출물의 제조 Preparation of extract
1.063 g의 아보카도(미국산) 과육을 55℃의 온도에서 48시간 동안 건조시켜, 302 g의 건조된 아보카도 과육을 수득하였다. 상기 건조된 아보카도 과육에 500 ㎖의 부틸렌글라이콜을 첨가하고, 55℃의 온도에서 1시간 동안 초음파 추출기를 사용하여 아보카도 과육의 부틸렌글라이콜 추출물을 제조하였다. 수득된 추출물을 여과 및 농축하여 79.2 g의 아보카도 과육의 부틸렌글라이콜 추출물을 7.45%의 수율로 수득하였다.1.063 g of avocado (US) flesh was dried at a temperature of 55 ° C for 48 hours to yield 302 g of dried avocado flesh. 500 ml of butylene glycol was added to the dried avocado flesh and the butylene glycolysis extract of avocado flesh was prepared using an ultrasonic extractor at 55 ° C for 1 hour. The obtained extract was filtered and concentrated to obtain 79.2 g of butylene glycolysis extract of avocado pulp with a yield of 7.45%.
비교예Comparative Example 4. 아보카도 에탄올 추출물의 제조 4. Preparation of avocado ethanol extract
<4-1> 아보카도 껍질의 에탄올 추출물<4-1> Ethanol extract of avocado skin
2400 g의 아보카도(미국산) 껍질을 55℃의 온도에서 48시간 동안 건조시켜, 500 g의 건조된 아보카도 껍질을 수득하였다. 상기 건조된 아보카도 껍질에 1000 ㎖의 70% 에탄올을 첨가하고, 55℃의 온도에서 1시간 동안 40 kHz로 초음파 추출하여 아보카도 껍질의 에탄올 추출물을 제조하였다. 수득된 추출물을 여과 및 농축하여 48.25 g의 아보카도 껍질의 에탄올 추출물을 9.65%의 수율로 수득하였다.2400 g of avocado (US) shell was dried at a temperature of 55 ° C for 48 hours to obtain 500 g of dried avocado shell. 1000 ml of 70% ethanol was added to the dried avocado shell and ultrasonically extracted at 55 ° C for 1 hour at 40 kHz to prepare an ethanol extract of avocado shell. The obtained extract was filtered and concentrated to obtain 48.25 g of an ethanol extract of avocado skin in a yield of 9.65%.
<4-2> 아보카도 과육의 에탄올 추출물<4-2> Ethanol extract of avocado pulp
2000 g의 아보카도(미국산) 과육을 55℃의 온도에서 48시간 동안 건조시켜, 500 g의 건조된 아보카도 과육을 수득하였다. 상기 건조된 아보카도 과육에 1000 ㎖의 70% 에탄올을 첨가하고, 55℃의 온도에서 1시간 동안 40 kHz로 초음파 추출하여 아보카도 과육의 에탄올 추출물을 제조하였다. 수득된 추출물을 여과 및 농축하여 71 g의 아보카도 과육의 에탄올 추출물을 14.2%의 수율로 수득하였다.2000 g of avocado (US) flesh was dried at a temperature of 55 ° C for 48 hours to yield 500 g of dried avocado flesh. 1000 ml of 70% ethanol was added to the dried avocado flesh, and the ethanol extract of avocado flesh was prepared by sonication at 55 k < 0 > C for 1 hour at 40 kHz. The obtained extract was filtered and concentrated to obtain an ethanol extract of 71 g of avocado pulp with a yield of 14.2%.
<4-3> 아보카도 씨의 에탄올 추출물<4-3> Ethanol extract of avocado seed
3000 g의 아보카도(미국산) 씨를 55℃의 온도에서 48시간 동안 건조시켜, 500 g의 건조된 아보카도 씨를 수득하였다. 상기 건조된 아보카도 씨에 1000 ㎖의 70% 에탄올을 첨가하고, 55℃의 온도에서 1시간 동안 40 kHz로 초음파 추출하여 아보카도 씨의 에탄올 추출물을 제조하였다. 수득된 추출물을 여과 및 농축하여 62.5 g의 아보카도 씨의 에탄올 추출물을 12.5%의 수율로 수득하였다.3000 g of avocado (US) seeds were dried at a temperature of 55 ° C for 48 hours, yielding 500 g of dried avocado seed. 1000 ml of 70% ethanol was added to the dried avocado seed, and the resulting extract was sonicated at 55 k < 0 > C for 1 hour at 40 kHz to prepare an ethanol extract of avocado seed. The obtained extract was filtered and concentrated to obtain 62.5 g of an ethanol extract of avocado seed in a yield of 12.5%.
실험예Experimental Example 1. One. 제브라피쉬Zebra fish 모델에서 아보카도 껍질, 씨, 과육 오일의 내이독성에 대한 효과 비교 Comparison of the effect of avocado bark, seeds and flesh oil on the innards toxicity in the model
실시예 1, 비교예 1 및 2에서 제조된 아보카도의 껍질, 과육 및 씨 오일의 카나마이신에 의해 감소된 유모세포에 대한 효과를 다음과 같은 방법으로 확인하였다.The effects of avocado shells, pulp and seed oil prepared by Example 1 and Comparative Examples 1 and 2 on hair cells reduced by kanamycin were confirmed by the following method.
구체적으로, 수정 6일 후의 제브라피쉬 치어(larvae)를 24웰 플레이트에 넣고, 25 μM 농도의 카나마이신을 첨가하였다. 30분 후, 카나마이신을 제거하고 실시예 1 내지 3에서 제조된 아보카도의 껍질, 과육 및 씨 오일을 1, 10, 50, 100, 250 또는 500 ㎍/㎖의 농도로 첨가하였다. 이때, 대조군으로서 0.03%(w/v)의 해수염 용액을 사용하였다. 12시간 후, 0.1% YO-PRO(Life Technologies, 미국)를 첨가하여 치어의 유모세포를 30분 동안 염색시켰다. 염색된 유모세포를 형광현미경(Olympus 1x70, Olympus, 일본)을 사용하여 관찰하고, 관찰된 유모세포의 개수를 세어 분석하였다. 그 결과, 형광현미경으로 관찰된 유모세포의 개수를 도 1에 나타내었다.Specifically, 6 days after fertilization, zebrafish larvae were placed in a 24-well plate, and 25 mu M kanamycin was added. After 30 minutes, kanamycin was removed and the shells, flesh and seed oil of the avocado prepared in Examples 1 to 3 were added at a concentration of 1, 10, 50, 100, 250 or 500 占 퐂 / ml. At this time, a 0.03% (w / v) sea salt solution was used as a control. After 12 hours, 0.1% YO-PRO (Life Technologies, USA) was added to stain the hair cells of the fry for 30 minutes. Dyed hair cells were observed using a fluorescence microscope (Olympus 1x70, Olympus, Japan), and the number of hair cells observed was counted. As a result, the number of hair cells observed by fluorescence microscopy is shown in Fig.
도 1에 나타난 바와 같이, 아보카도 껍질 오일이 과육 및 씨 오일에 비해 제브라피쉬 치어의 유모세포(hair cell)를 유의적으로 증가시켰다(도 1). As shown in Fig. 1, avocado skin oil significantly increased hair cells of zebra fish fry compared to pulp and seed oil (Fig. 1).
실험예Experimental Example 2. 2. 제브라피쉬Zebra fish 모델에서 아보카도 껍질 오일과 아보카도 과육 오일 및 아보카도 과육 부틸렌글라이콜 추출물의 내이독성의 효과에 대한 비교 Comparison of effects of poison ivy on avocado peel oil and avocado flesh oil and avocado fructose butylanalcohol extract on model
실시예 1, 비교예 3에서 제조된 아보카도 껍질 오일 및 아보카도 과육의 부틸렌글라이콜 추출물과, 시판중인 아보카도 과육 오일 I(AVOI, AGROCOMERCIAL CAMPESINA, 멕시코) 및 아보카도 과육 오일 II(AVOII, AVOCADO OIL NEW ZEALAND LTD, 뉴질랜드)의 카나마이신에 의해 감소된 유모세포에 대한 효과를 다음과 같은 방법으로 비교하였다.AVOI, AGROCOMERCIAL CAMPESINA, Mexico) and avocado flesh oil II (AVOII, AVOCADO OIL NEW ZEALAND, manufactured by Nisshinbo Industries, Inc.) and the commercially available avocado flesh oil I (AVOI, AGROCOMERCIAL CAMPESINA, Mexico) LTD, New Zealand) on the hair cells reduced by kanamycin were compared in the following manner.
구체적으로, 수정 6일 후의 제브라피쉬 치어를 24웰 플레이트에 넣고, 25 μM 농도의 카나마이신을 첨가하였다. 30분 후, 카나마이신을 제거하고, 1 또는 10 ㎍/㎖의 아보카도 껍질 오일(AVPO), 아보카도 과육의 부틸렌글라이콜 추출물(BGAVO), 시판중인 아보카도 과육 오일 I(AVOI) 또는 시판중인 아보카도 과육 오일 II(AVOII)를 첨가하였다. 이때, 대조군으로서 0.03%(w/v)의 해수염 용액(sea salt solution)을 사용하였다. 12시간 후, 0.1% YO-PRO를 첨가하여 치어의 유모세포를 30분 동안 염색시켰다. 염색된 유모세포를 형광현미경(Olympus 1x70, Olympus, 일본)을 사용하여 관찰하고, 관찰된 유모세포의 개수를 세어 분석하였다. 그 결과, 형광현미경으로 관찰된 유모세포의 사진을 도 2에, 측정된 유모세포의 개수를 도 3에 나타내었다.Specifically, the zebrafish fry after 6 days of fertilization was placed in a 24-well plate and kanamycin at a concentration of 25 μM was added. After 30 minutes, the kanamycin was removed, and 1, or 10 / / ml Avocado Peel Oil (AVPO), the Butyleneglycolic Acid Extract (BGAVO) of Avocado Flesh, the Commercial Avocado Fruit Oil I (AVOI) II < / RTI > (AVOII). At this time, 0.03% (w / v) sea salt solution was used as a control. After 12 hours, 0.1% YO-PRO was added to stain the hair cells of the fry for 30 minutes. Dyed hair cells were observed using a fluorescence microscope (Olympus 1x70, Olympus, Japan), and the number of hair cells observed was counted. As a result, photographs of the hair cells observed by fluorescence microscopy are shown in Fig. 2, and the number of hair cells measured is shown in Fig.
도 2 및 3에 나타난 바와 같이, 카나마이신을 처리한 음성대조군(KM)에 비해 아보카도 껍질 오일을 첨가한 치어에서 유모세포의 수가 유의적으로 증가하였으며, 아보카도 과육의 부틸렌글라이콜 추출물(BGAVO) 또는 시판중인 2종류의 아보카도 과육 오일(AVOI, AVOII)을 첨가한 실험군에 비해서도 아보카도 껍질 오일을 첨가한 치어에서 유모세포의 수가 유의적으로 증가하였다 (도 2 및 3).As shown in Figs. 2 and 3, the number of hair cells was significantly increased in avocado skin oil-supplemented fry compared to the negative control (KM) treated with kanamycin, and the amount of butylolyglycolic extract (BGAVO) The number of hairy cells was significantly increased in avocado shell oil-supplemented fry compared to the experimental group supplemented with commercially available two kinds of avocado flesh oil (AVOI, AVOII) (FIGS. 2 and 3).
실험예Experimental Example 3. 3. 제브라피쉬Zebra fish 모델에서 아보카도 껍질 오일과 아보카도 껍질, 과육 및 씨의 에탄올 추출물의 내이독성의 효과에 대한 비교 Comparison of effects of poisoning of avocado peel oil and ethanol extracts of avocado bark, flesh and seed in the model
실시예 1 및 비교예 4에서 제조된 아보카도 껍질 오일 및 아보카도 껍질, 과육 및 씨의 에탄올 추출물의 카나마이신에 의해 감소된 유모세포에 대한 효과를 다음과 같은 방법으로 비교하였다.The effects of the ethanol extracts of avocado shell oil, avocado shell, pulp and seed prepared in Example 1 and Comparative Example 4 on the hair cells reduced by kanamycin were compared in the following manner.
구체적으로, 실시예 1 및 비교예 4에서 제조한 1 또는 10 ㎍/㎖의 아보카도 껍질 오일(AVPO), 아보카도 껍질의 에탄올 추출물(AVPE), 아보카도 과육의 에탄올 추출물(AVUE) 또는 아보카도 씨의 에탄올 추출물(AVSE)을 첨가한 것을 제외하고는, 실험예 1과 동일한 조건 및 방법으로 유모세포를 분석하였다. 그 결과, 형광현미경으로 관찰된 유모세포의 사진을 도 4에, 측정된 유모세포의 개수를 도 5에 나타내었다.Specifically, the ethanol extract (AVPE) of avocado skin (AVPO), the avocado skin extract (AVPE), the ethanol extract of avocado flesh (AVUE), or the ethanol extract of avocado seed prepared in Example 1 and Comparative Example 4 (AVSE) were added to the hair cells, the hair cells were analyzed under the same conditions and in the same manner as in Experimental Example 1. As a result, photographs of the hair cells observed by fluorescence microscopy are shown in Fig. 4, and the number of hair cells measured is shown in Fig.
도 4 및 5에 나타난 바와 같이, 카나마이신을 처리한 음성대조군(KM)에 비해 아보카도 껍질 오일을 첨가한 치어에서 유모세포의 수가 유의적으로 증가하였으며, 아보카도 껍질, 과육, 또는 씨의 에탄올 추출물을 각각 첨가한 실험군에 비해서도 아보카도 껍질 오일을 첨가한 치어에서 유모세포의 수가 증가하였다 (도 4 및 5).As shown in FIGS. 4 and 5, the number of hair cells was significantly increased in avocado skin oil supplemented fish compared to the negative control (KM) treated with kanamycin, and the ethanol extracts of avocado skin, pulp, The number of hair follicle cells increased in fry to which avocado skin oil was added compared to the experimental group added (Figs. 4 and 5).
실험예Experimental Example 4. 아보카도 껍질, 과육 및 씨 오일의 성분 분석 4. Analysis of components of avocado skin, pulp and seed oil
실시예 1, 비교예 1 및 2로부터 제조된 아보카도 껍질, 과육 및 씨 오일의 성분을 비교하고자 하였다. To compare the components of the avocado shell, pulp and seed oil prepared from Example 1 and Comparative Examples 1 and 2.
구체적으로, 실시예 1, 비교예 1 및 2에서 제조한 아보카도 껍질, 과육 및 씨 오일 각각의 시료를 C18 컬럼이 장착된 HPLC(High performance liquid chromatography)로 분석하였다. 컬럼은 C18 컬럼(ischoff Chromatography, ProntoSIL C 18 column (250*4.5 mm, 5 ㎛))을 사용하였고, 검출기는 209, 254, 및 280 nm의 UV 검출기를 사용하였다. 이동상은 하기 표 1에 나타낸 바와 같이 0.2% 포름산(formic acid) 및 아세토니트릴(acetonitrile)을 분석 시간에 따라 비율을 조절하여 사용하였으며, 분석 시간(run time)은 55분, 시료 주입량은 10 ㎕, 컬럼의 온도는 35℃의 조건에서 실시하였다. 그 결과, 209, 254 및 280 nm에서 측정된 아보카도 껍질, 과육 및 씨 오일의 HPLC 결과를 도 6 내지 도 8에 나타내었다. Specifically, samples of avocado shell, pulp and seed oil prepared in Example 1 and Comparative Examples 1 and 2 were analyzed by HPLC (High performance liquid chromatography) equipped with a C18 column. The column used was a C18 column (Ischoff Chromatography, ProntoSIL C 18 column (250 * 4.5 mm, 5 탆)) and a detector using 209, 254, and 280 nm UV detectors. As the mobile phase, 0.2% formic acid and acetonitrile were used in proportions adjusted according to the analysis time as shown in Table 1. The run time was 55 minutes, the sample injection amount was 10 μl, The temperature of the column was set at 35 캜. As a result, HPLC results of avocado shell, pulp and seed oil measured at 209, 254 and 280 nm are shown in Figs.
도 6 내지 도 8에 나타난 바와 같이, 실시예 1에서 제조한 아보카도 껍질 오일의 성분은 비교예 1 및 2에서 제조한 아보카도 과육 및 씨 오일의 성분과 상이하며, 동일한 성분이더라도 아보카도 껍질 오일의 성분의 함량이 현저하게 높았다. As shown in Figs. 6 to 8, the components of the avocado shell oil prepared in Example 1 were different from those of the avocado pulp and seed oil prepared in Comparative Examples 1 and 2, The content was remarkably high.
Claims (10)
A pharmaceutical composition for preventing or treating hearing loss comprising avocado oil as an active ingredient.
The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the avocado is at least one selected from the group consisting of the skin, flesh and seed of avocado.
The pharmaceutical composition according to claim 2, wherein the avocado is a bark of avocado.
The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the hearing loss is at least one selected from the group consisting of hearing loss and hearing loss.
The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the avocado oil is prepared by a compression method, a solvent extraction method, a supercritical carbon dioxide extraction method, or a steam distillation method.
The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the avocado oil is oil, avocado essence, perfume oil, essential oil or essential oil.
A health functional food for improving hearing loss containing avocado oil as an active ingredient.
The health functional food according to claim 7, wherein the avocado is at least one selected from the group consisting of shells, pulp and seeds of avocado.
9. The health functional food according to claim 8, wherein the avocado is the skin of avocado.
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