KR20180109985A - 염증성 질환의 치료 및 진단 - Google Patents

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Abstract

Hom-1의 발현을 억제하기 위한 핵산 분자를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체 내 염증성 질환을 치료하는 방법.

Description

염증성 질환의 치료 및 진단
조직 대식세포는 병원균 침입에 대한 숙주 방어 및 면역의 항상성에 중요한 역할을 한다. 가소성(plasticity)은 대식세포의 특징이다. 숙주 세포 및 미생물로부터의 신호로 가득한 미세환경에 거주하면서, 대식세포는 전-염증성(M1) 표현형 또는 항-염증성(M2) 표현형을 나타내기 위해 활성화될 수 있다. 대식세포의 비정상적인 분화 및 활성화는 염증의 병인(pathogenesis)에 중요한 역할을 한다. 예를 들어 IBD 환자의 경우, 점막의 CD14+ 대식세포의 증가로, M1 전-염증성 표현형을 나타낸다. 선천성 면역 및 적응성 면역 모두의 중심적인 집행자 역할에 기인하여, 대식세포는 자가 면역 및 염증성 질환을 조절하는 이상적인 표적으로 여겨져 왔다. 그러나, 대식세포 가소성이 어떻게 조절되는 지는 불완전하게 이해되고, 대식세포의 기능을 조절하기 위해 조작될 수 있는 세포 내재적 인자는 대부분 알려져 있지 않다.
요약
하나의 실시양태에서, 하기에 기술된 것은 대상체 내에서 염증성 질환을 치료하는 방법으로서, Hom-1의 발현을 억제하기 위한 핵산 분자를 이의 치료를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함한다.
하나의 구현예에서, 핵산 분자는 RNAi 제제 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드이다. 핵산 분자는 국소(topically), 경구(orally), 직장(rectally), 비강(nasally), 정맥 내(intravenously), 관절 내(intraarticularly), 결막(conjunctivally), 두개 내(intracranially), 복강 내(intraperitoneally), 흉강 내(intrapleurally), 근육 내(intramuscularly), 척수강 내(intrathecally), 또는 피하(subcutaneously)로 투여될 수 있다. 하나의 구현예에서, 핵산 분자는 노출되어 투여된다.
또 다른 실시양태에서, 본원에 기술된 것은 염증성 질환을 치료하기 위한 조성물로서, 상기 조성물은 Hom-1의 발현을 억제하기 위한 핵산 분자 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함한다. 하나의 구현예에서, 핵산 분자는 서열번호: 3, 4, 5, 또는 6의 서열을 갖는 모르폴리노(morpholino) 올리고뉴클레오티드이다. 조성물은 투여의 국소, 경구, 직장, 비강, 정맥 내, 관절 내, 결막, 두개 내, 복강 내, 흉강 내, 근육 내, 척수강 내, 또는 피하 경로로 제제화될 수 있다. 하나의 구현예에서, 핵산 분자(예를 들어, 서열번호: 3, 4, 5, 또는 6의 서열을 갖는 모르폴리노 올리고뉴클레오티드)는 노출된 핵산 분자이다.
또 다른 실시양태에서, 염증성 질환용 치료제를 동정하는 방법이 기술되어 있다. 이는 염증성 조직 샘플(inflamed tissue sample)을 시험 치료제와 접촉시키는 단계; 및 조직 샘플에서 Hom-1의 발현 수준을 검출하는 단계를 포함한다. 발현 수준이 대조군의 수준보다 낮거나 또는 이와 동일한 경우, 상기 시험용 치료제는 염증성 질환을 위한 후보군 치료제이다.
하나의 실시양태에서, 하기에 기술된 것은 염증성 질환을 위한 치료제를 이를 필요로 하는 대상체에서 선택하는 방법으로서, 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플을 치료제와 접촉시키는 단계; 대조군 수준과 비교하여 상기 조직 샘플에서 더 낮거나 또는 동일한 Hom-1의 발현 수준을 검출하는 단계; 및 대상체에게 치료제를 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 본원에서 고려되는 것은 염증성 질환용 치료제를 이를 필요로 하는 대상체에서 효능을 모니터링하는 방법으로서, 상기 대상체가 상기 치료제로 투여된 후에 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플 내 Hom-1의 발현 수준을 검출하는 단계; 상기 검출된 수준을 대조군 수준과 비교하는 단계; 및 상기 비교에 기초하여 치료 결정을 하고, 상기, 검출된 수준이 상기 대조군 수준보다 높은 경우, 상기 대상체에서 상기 치료제 또는 다른 치료제를 지속적으로 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 실시양태에서, 염증성 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 염증성 질환을 치료하는 방법이 본원에 기술되어 있다. 상기 방법은 Hom-1 억제제로 치료되거나 또는 Hom-1 억제제를 발현하기 위한 발현 작제물(construct)을 함유하는 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포를 제공하는 단계로서, 상기 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포는 대조군과 비교하여 더 낮은 수준의 Hom-1을 발현하는 단계; 및 유효량의 상기 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 하나의 구현예에서, 상기 방법은, 상기 제공하는 단계에 앞서, 상기 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플 내 대조군 수준보다 높은 Hom-1의 발현을 검출하는 단계를 포함한다.
하나 이상의 구현예의 세부 사항은 하기의 설명에서 기술된다. 구현예의 다른 특징, 대상, 및 장점은 상세한 설명 및 청구범위로부터 명확해질 것이다.
상세한 설명
조직 대식세포 내 Hom-1 발현을 넉다운(knock down)하는 것은 조직 염증을 완화시킬 수 있고 점막 상피 세포의 생존력을 보호할 수 있다는 것은 예상치 못하게 발견되었다.
인간 호메오박스(homeobox) 전사 인자인, Hom-1은 표준(canonical) Wnt 신호전달의 길항제(antagonist)이다. Hom-1의 핵산 서열(서열번호: 1) 및 이의 인코딩(encoding) 아미노산 서열(서열번호: 2)은 하기에 나타낸다:
acctggccgc catgcgcctc tcctcctccc cacctcgtgg cccgcagcag ctctccagct ttggctccgt ggactggctc tcccagagca gctgctcagg gccgacccac acccccaggc ctgccgactt ctccctgggg agcctccctg gcccaggcca gacatccggc gcccgggagc cccctcaggc cgtcagcatc aaggaggccg ccgggtcctc aaatctgcct gcgccggaga ggaccatggc cgggttgagt aaggagccaa ataccttgcg ggccccccgt gtccgcacag ccttcaccat ggagcaggtc cgcaccttgg agggcgtctt ccagcaccac cagtacctga gccctctgga gcggaagagg ctggccaggg agatgcagct ctcagaggtc cagataaaaa cctggtttca gaatcgccgc atgaaacaca aacggcaaat gcaggacccc cagctgcaca gccccttctc ggggtctctc catgcgcccc cagctttcta ctcaacgtct tctggccttg ccaatggcct gcagctgctg tgcccttggg cacccctgtc cgggccccag gctctgatgc tgccccctgg ctccttctgg ggtctctgcc aagtggcaca agaggccctg gcatctgcgg gagcttcctg ctgcgggcag cctctggcgt cccacccccc taccccaggc cggccttcgc tgggaccagc cctgtccacg gggccccggg gcctgtgtgc tatgccacag acgggggatg cattttgagg aggcacctct gactcccaca ctcgcggtct tgctgatcgc acctggctcc tacctggagg actcagttgt tctgtttaca tcctggtggc acctctcacc ctgacccaca caaaggttct ggagattact ggagaatata tataaatata tatatgtacg tatatatgta aatacacata tacgtatata taaatatata tatacatatg tgtgtgtata tatatatata tttttttttt tttttttttt tttgagacgg agtgttgctc tgtcacccag gctggagtgc aatgacgcaa tctcggctca ctgcaacctc cgcctcctgg gttcaagcga ttctccagcc tcagcctccc gagtagctgg gattacagac acccgccacc acgcccggct aattttttct atttttagta gaaatggggt ttcaccatgt tagccaggct ggtctcaaac tcctgaccct gtgatccgcc cgcctcggcc tcccaaagtg ctgggattac aggcatgagc cactgcaccc ggccctgaga atatatttat taaagccacc tcttcactga aagttaccga aagagtcggt ttaggaagga aacgaagggt cagtgaacag agtcaaatgc agaagtgggc ttgtcatggg tagggctttc ggcgtacgat aaaaggatca tttgtttttt aaaaggggtt ggaaaaactg gttttccagt tggaaacagt aaaggttgta agctttgtgt gtacaaaaga aaacagggaa tgcaggtgtg tttatagcgt tgtggttcaa gtccctctta acaagaactc caaagctgga aagcaggagg gaacaaaggt gaacatgaag gcgaggatgc tggggccctg cagtgcgctc taggctgtgc gtgagccggg actgtaccca cagcttgctg agggctgctc ttcttgggcc agggaaagca gggcagccgg gacctgcggc tgtgcctgga ctgaagctgt cccgcaggtc cccaccctcc aacacgtgct cacctgtccc cctcctcgca gcagcctcgg gacaaaacaa tgactcaagg acagcacttc tcgcagaagg tctggaagtg cccagaatgg gaggcacgga agcccctccc ggggaggact cccgcgttga tggaccgttc ttggtgcaga ctcctgactg cgtgcatgaa acctgagaca agtgcaattc cttccatgtc gccccagagt gcccaggagg caggcagtgc ggggtgccca ggcagacggg ttcagcctgc agaactggag gcgacctgtg aaacccaccc gggcacccca acaggaacag aagcgtggtc ctgcggctgc gtccccagcg agtttcactt tccccttgct cgtttctccc ttgttgtaag tgtttacaac tggcatgtgc ttttaaacgt caggtaagag gggaacagct gctgtacatc gtcctggcga gtgacaatgt gacagaagcc tgggcgaggc cctcggaggg cagcagctgg acaggggcta ctgggtttgg cctggacagc actgatttgt ggatgtggat gggggcacgt tgtccgtgat aaaagtacaa gtgcccctca caaaaaaaaa aaaaaaaa (서열번호: 1; 밑줄: 암호화 서열)
mrlssspprg pqqlssfgsv dwlsqsscsg pthtprpadf slgslpgpgq tsgareppqa vsikeaagss nlpapertma glskepntlr aprvrtaftm eqvrtlegvf qhhqylsple rkrlaremql sevqiktwfq nrrmkhkrqm qdpqlhspfs gslhappafy stssglangl qllcpwapls gpqalmlppg sfwglcqvaq ealasagasc cgqplashpp tpgrpslgpa lstgprglca mpqtgdaf (서열번호 2; 밑줄: aa. 91-151/호메오도메인)
본원에서 기술된 것은 염증성 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 Hom-1 억제제, 예를 들어, Hom-1의 발현을 억제하기 위한 핵산 분자를 상기 대상체에게 투여함으로써 염증성 질환을 치료하는 방법이다.
핵산 분자는 RNAi 제제 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드일 수 있다. 하나의 구현예에서, 상기 핵산 분자는 모르폴리노 올리고뉴클레오티드이다. 모르폴리노 올리고뉴클레오티드는 표준 DNA 염기(A, C, G, T)를 가지지만 상기 염기는 모르폴린(morpholine) 고리에 결합되고 포스포로디아미데이트(phosphorodiamidate) 그룹을 통해 연결된다. 항-Hom-1 모르폴리노 올리고뉴클레오티드는
5'-TACTCAACCCTGACATAGAGGGTAA-3' (서열번호: 3),
5'-GAGCCCGGTTTGCATACACGGCTAA-3' (서열번호: 4),
5'-GCCCAGATAAGCAGCGCCTAATTGC-3' (서열번호: 5), 및
5'-CTGTAGGAAAAGCAAGATCAGAACA-3' (서열번호: 6)으로부터 선택된 서열을 가질 수 있다.
용어 "RNAi 제제"는 RNA 간섭(interference)을 유도하기 위해 표적 RNA에 대한 충분한 서열 상보성을 갖는, RNA(또는 이의 유사체)를 말한다. 일반적으로, 간섭 RNA ("iRNA")는 특정한 mRNA의 촉매 분해를 야기하는 이중가닥의 짧은-간섭 RNA (siRNA) 또는 짧은 헤어핀(hairpin) RNA (shRNA)이다. 안티센스 올리고뉴클레오티드는 전형적으로 표적 핵산 분자에 결합할 수 있는 서열을 갖는 단일-가닥 DNA, RNA, 또는 이의 유사체이다.
항-hom-1 핵산 분자는 임의의 투여 경로, 예를 들어 국소, 경구, 직장, 비강, 정맥 내, 관절 내, 결막, 두개 내, 복강 내, 흉강 내, 근육 내, 척수강 내, 또는 피하 투여의 경로를 통해 대상체에게 투여될 수 있다. 상기 경로는 염증 부위에 기초하여 선택될 수 있다. 항-Hom-1 핵산 분자를 함유하는 약제학적 조성물은 임의의 투여 경로, 예를 들어, 주사 용액, 환제, 캡슐제, 점안제, 분무제, 흡입제, 국소 크림 또는 겔, 또는 에어로졸로 제형화될 수 있다.
하나의 구현예에서, 항-Hom-1 핵산 분자는 노출되어 투여된다. 즉, 리포좀 또는 바이러스성 벡터와 같은 전달 비히클은 상기 핵산 분자에 사용되지 않는다.
대상체에게 임의의 Hom-1 억제제를 투여하기 전에, 상기 대상체는 남성 또는 여성이 대조군 수준과 비교하여 Hom-1의 상승된 발현 수준 및/또는 염증성 사이토카인의 상승된 발현 수준을 결정하기 위해 테스트될 수 있다. 하나의 구현예에서, 상기 발현 수준은 상기 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플에서 검출된다. Hom-1의 증가된 발현 수준을 지닌 대상체는 Hom-1 억제제로 치료될 수 있다. 대조군 수준은 비-염증성 조직 또는 염증성 질환이 없는 대상체 내 Hom-1 발현 수준을 나타내는 수준, 또는 치료될 대상체 내 비-염증성 조직에서 발견되는 수준일 수 있다.
"대상체"는 인간 및 비-인간 동물을 말한다. "치료하는" 또는 "치료"는 질환을 지닌, 대상체에게 치유(cure), 경감(alleviate), 완화(relieve), 치료(remedy), 발병의 지연, 또는 질환, 질환의 증상, 질환에 2차적인 질병 상태, 또는 질환에 대한 소인(predisposition)을 개선(ameliorate)시키기 위한 목적으로, 화합물 또는 제제의 투여를 말한다. "유효량"은 치료된 대상체에서 의학적으로 바람직한 결과를 생성할 수 있는 화합물의 양을 말한다. 치료방법은 단독으로 또는 다른 약물 또는 치료와 함께 수행될 수 있다.
또한 본원에서 기술된 것은 염증성 질환용 치료제를 동정하는 스크리닝(screening) 방법이다. 상기 방법은 염증성 조직 샘플을 시험용 치료제와 접촉시키는 단계 및 상기 조직 샘플 내 Hom-1의 발현 수준을 검출하는 단계를 포함한다. 상기 발현 수준이 대조군 수준보다 낮거나 또는 이와 동일한 경우, 시험용 치료제는 염증성 질환의 후보군 치료제이다.
염증성 질환용 치료제를 이를 필요로하는 대상체에서 선택하는 방법은 또한 기술되어 있다. 상기 방법은 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플을 치료제와 접촉시키는 단계, 대조군 수준과 비교하여 상기 조직 샘플 내 더 낮거나 또는 이와 동일한 Hom-1의 발현 수준을 검출하는 단계, 및 상기 대상체에게 상기 치료제를 투여하는 단계를 포함한다.
추가로 기술된 것은 염증성 질환용 치료제를 이를 필요로 하는 대상체 내 효능을 모니터링하는 방법이다. 상기 방법은 치료제가 대상체에게 투여된 후 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플 내 Hom-1의 발현 수준을 검출하는 단계, 대조군의 수준과 상기 검출된 수준을 비교하는 단계, 및 상기 비교에 기초하여 치료를 결정하는 단계를 포함한다. 검출된 수준이 대조군 수준보다 낮은 경우, 치료제가 대상체 내 염증 치료에 효과적임을 나타낸다. 검출된 수준이 대조군 수준과 동일하거나 또는 보다 높은 경우, 동일한 치료제를 지속적으로 제공하거나 또는 다른 치료제를 시도하도록 결정할 수 있다.
치료용 또는 시험용 치료제는 단백질, 펩타이드, 펩타이드 유사체, 펩토이드, 세포, 항체 또는 이의 단편, 소분자 화합물, 핵산 분자, 또는 식물 추출물일 수 있다. 하나의 구현예에서, 치료용 또는 시험용 치료제는 스테로이드, 비-스테로이드성 항-염증제, 또는 면역-억제제일 수 있다.
상기-기술된 스크리닝, 선택 또는 모니터링 방법에서, 대조군 수준은 비-염증성 조직 내 Hom-1의 발현 수준을 나타내는 수준일 수 있다. 그것은 또한 치료제 또는 시험용 치료제와 접촉되기 전에 염증성 조직 샘플 내 Hom-1의 발현 수준일 수 있다. 숙련된 기술자는 적절한 대조군 수준을 결정할 수 있다.
하나의 실시 양태에서, 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포를 사용하여 염증성 질환을 치료하는 방법이 기술되어 있다. 상기 방법은 Hom-1 억제제로 치료되거나 또는 Hom-1 억제제를 발현하기 위한 발현 작제물을 함유하는 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포를 제공하는 것을 포함한다. 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포는 대조군 수준과 비교하여 낮은 수준의 Hom-1을 발현한다. 유효량의 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포는 염증성 질환을 갖는 대상체에게 투여된다.
Hom-1 억제제는 단백질, 펩타이드, 펩타이드유사체, 펩토이드, 세포, 항체 또는 이의 단편, 소분자 화합물, 핵산 분자, 또는 식물 추출물일 수 있다. 하나의 구현예에서, 억제제는 RNAi 제제 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드(예를 들어, 모르폴리노 올리고뉴클레오티드)이다.
변형된 세포를 대상체에게 투여하기 전에, 상기 대상체로부터 수득된 샘플(예를 들어, 염증성 조직 샘플)에서 Hom-1의 발현 수준이 결정될 수 있다. 발현 수준이 대조군 수준보다 높은 경우, 대상체는 치료에 적합한 것으로 간주된다. 대조군 수준은 비-염증성 조직 내 수준을 나타내는 수준 또는 치료될 대상체로부터 수득된 비-염증성 조직 샘플에서 검출된 수준일 수 있다. 또한, 숙련된 의료 종사자는 적절한 대조군 수준을 결정할 수 있다.
Hom-1 발현 수준은 mRNA 수준 또는 단백질 수준에서 결정될 수 있다. mRNA 수준 및 단백질 수준을 측정하는 방법은 당해 기술분야에서 잘 알려져 있다.
본원에 기술된 임의의 방법에서, 염증의 지표로서 Hom-1의 발현 수준(예를 들어, 염증의 존재 또는 정도)을 검출하는 것 이외에 또는 대안으로서, 전-염증성 사이토카인의 발현 및/또는 분비, 항-염증성 사이토카인의 발현 및/또는 분비, M1 또는 M2 대식세포의 마커의 발현, DC 분화 및 활성화의 마커의 발현은 또한 염증을 측정하기 위해 사용될 수 있다.
염증성 질환은 국소 또는 전신성, 급성, 또는 만성 염증으로 특징지어 진다. 염증성 질환은 염증성 피부병(dermatosis)(예를 들어, 피부염(dermatitis), 건선(psoriasis), 습진(eczema), 아토피성 피부염(atopic dermatitis), 알레르기성 접속성 피부염(allergic contact dermatitis), 두드러기(urticaria), 괴사 혈관염(necrotizing vasculitis), 피부 혈관염(cutaneous vasculitis), 과민 혈관염(hypersensitivity vasculitis), 호산구증다성근염(eosinophilic myositis), 다발성 근염(polymyositis), 피부 근염(dermatomyositis), 또는 호산성 근막염(eosinophilic fasciitis)), 염증성 장 질환(예를 들어, 크론 병(Crohn's disease) 및 궤양성 대장염(ulcerative colitis)), 급성 호흡 곤란 증후군(respiratory distress syndrome), 적격 간염(fulminant hepatitis), 췌장염(pancreatitis), 과민성 폐질환(hypersensitivity lung disease)(예를 들어, 과민성 폐렴(hypersensitivity pneumonitis), 호산구성 폐렴(eosinophilic pneumonia), 지연-형 과민증(delayed-type hypersensitivity), 간질성 폐질환(interstitial lung disease) 또는 ILD, 특발성 폐 섬유증(idiopathic pulmonary fibrosis), 및 류마티스성 관절염(rheumatoid arthritis) 관련 ILD)), 천식(asthma), COPD, 알레르기성 비염(allergic rhinitis), 류마티스 관절염(rheumatoid arthritis), 건선성 관절염(psoriatic arthritis), 전신 홍반성 루프스(systemic lupus erythematosus), 중증 근무력증(myasthenia gravis), 청소년 발병 당뇨병(juvenile onset diabetes), 사구체신염(glomerulonephritis), 자가면역성 갑상선염(autoimmune throiditis), 강직성 척추염(ankylosing spondylitis), 전신성 경화증(systemic sclerosis), 다발성 경화증(multiple sclerosis), 일차성 측삭 경화증(primary lateral sclerosis), 근위축성 측삭 경화증(amyotrophic lateral sclerosis), 아나필락시(anaphylaxia), 전신성 아나필락시(systemic anaphylaxia), 과민성 반응(hypersensitivity responses), 전신 염증성 상태(systemic inflammatory condition), 약물 알레르기(drug allergy), 곤충 침 알레르기(insect sting allergy), 동종이식편 거부반응(allograft rejection), 이식편대숙주병(graft-versus-host disease), 쇼그렌 증후군(Sjogren's syndrome), 인간 면역결핍(human immunodeficiency), 바이러스 감염(virus infection), 죽상 경화증(atherosclerosis), 고혈압(hypertension), 당뇨병(diabetes), 및 만성 신장 질환(chronic renal diseases), 안구 염증성 질환(ocular inflammatory diseases), 포도막(uveitis) 및 결막염(conjunctivitis), 신경염(neuritis)을 포함하지만, 이에 제한되지 않는다.
숙련된 의료 종사자는 사람이 염증성 질환을 가지고 있는지의 여부를 결정할 수 있다. 염증성 질환을 가지는 것으로 의심되는 대상체로부터 수득된 샘플(예를 들어, 조직, 세포 또는 체액 샘플)에서의 Hom-1의 발현 수준은 또한 진단 도구로서 사용될 수 있다.
하기의 특정 실시예는 단지 예시적인 것으로 해석되어야 하고, 어떠한 방식으로든 본 발명의 나머지 부분을 제한하여 해석되어서는 안된다. 추가의 상세한 설명 없이, 당해 기술분야의 숙련된 기술자는, 본원의 설명에 기초하여, 본원 발명을 최대한 활용할 수 있는 것으로 고려된다.
실시예
대식세포는 선천성 및 적응성 면역 모두의 중요한 조절 인자이다. 대식세포 가소성이 세포 고유 인자에 의해 어떻게 조절되는 지는 불완전하게 이해되고 있다. 하기에 기술된 데이터는 인간 호메오박스 전사인자, Hom-1이 M1 표현형으로 대식세포의 분극(polarization)을 유도하는 중추적인 역할을 한다는 것을 입증한다. Hom-1 발현은 IBD 환자의 염증성 점막으로부터 분리된 조직 대식세포에서 비정상적으로 상승된다. 일괄 배양(en bloc culture) 모델을 사용하여, 모르폴리고 올리고뉴클레오티드에 의한 조직 대식세포 내 Hom-1 발현의 넉다운(knockdown)은 조직 염증을 완화시킬 수 있고 점막 상피 세포의 생존능을 보호할 수 있음을 보여주었다. 종합하면, 상기 데이터는 Hom-1이 염증성 질환을 관리하기 위한 새로운 표적으로서 제공될 수 있음을 시사한다.
Hom-1 발현은 염증성 위장 점막으로부터 분리된 대식세포에서 상향-조절된다.
시험관 내 단핵구-유래 대식세포 모델을 사용하여, 본 발명자들은 Hom-1이 단핵구 분화 및 전-염증성 활성을 제어한다는 것을 입증하였다. 조직 대식세포 분화 및 활성화에서 Hom-1의 잠재적인 역할을 조사하기 위해 IBD 환자의 점막으로부터 분리된 점막 대식세포 내 Hom-1 발현을 검사하였다. Hom-1 발현은 동일한 환자의 정상 점막으로부터 분리된 대조군 대식세포와 비교하여, 염증성 점막으로부터 분리된 대식세포 내 유의하게 상승되었다는 것을 발견하였다. FACAS 및 ELISA 분석을 이용하여, Hom-1의 상승된 발현과 동시에, M1 표면 마커의 발현, 예를 들어 CD40, CD80, 및 CD86 뿐만 아니라 M1 전-염증성 사이토카인의 발현 및 분비는 염증성 점막으로부터 분리된 대식세포 내에서 상승되었다는 것을 발견하였다. 또한, 활성 산소 종(ROS) 및 산화 질소(NO)의 발현은 또한 염증성 점막으로부터 분리된 대식세포 내에서 상승되었다는 것을 발견하였다.
Hom-1은 점막 대식세포 가소성을 조절하고 점막 대식세포를 M1 표현형으로 분극화시킨다.
가소성은 대식세포의 특징이다. 환경적인 단서에 반응하여, 대식세포는 고전적인 전-염증성 M1 표현형으로부터 구별된 특징을 갖는 다양한 M2 표현형의 범위로, 표현형의 스펙트럼을 나타낸다. 코르티코스테로이드는 염증성 질환을 관리하기 위해 광범위하게 사용되어왔고 대식세포의 M2 표현형을 유도하는 것으로 나타났다. Hom-1이 점막 대식세포의 가소성을 조절하는 데 역할을 하는지 확인하기 위해, Hom-1의 발현에 미치는 코르티코스테로이드의 영향을 조사하였다. 프레드니솔론(predinisolone)과 함께 점막 CD14 대식세포의 배양은 Hom-1 발현의 유의한 감소된 수준 및 M1 사이토카인 IL12의 특징적인 감소된 분비로 유도하였지만, M2 사이토카인 IL10의 증가된 분비를 유도하였다. 대식세포 가소성을 조절하는 데 Hom-1의 잠재적인 역할과 일치하게, GFP-Hom-1의 형질감염(trasfection)된 점막 대식세포가 아닌 GFP의 형질감염된 형태(morphology)가 특징적인 라운드업 표현형을 나타내는 PD에 의해 유도될 수 있다. CD80의 세포 표면 발현의 FACS 분석 및 GPF 또는 GFP-Hom-1 발현 대식세포 내 IL12 배양 배지의 분비의 ELISA 분석은 Hom-1이 대식세포에 PD 유도된 CD80의 감소 및 IL12의 분비에 내성이 있음을 나타내었다. Hom-1이 대식세포 분극을 조절하는지 여부를 추가로 연구하기 위해, 이전에 기술된 바와 같이 시험관 내 대식세포 분화 모델을 사용하여, 유도된 M2에서 M1으로의 변환 동안 Hom-1 발현을 조사하였다. Hom-1 발현이 유도된 M2에서 M1으로의 분극 동안 상승된다는 것을 발견하였다. 대식세포의 분극 내 Hom-1의 중요한 조절 역할을 정의하기 위해, LPS-유도된 M2 에서 M1 표현형의 변환에서 Hom-1을 넉다운시키는 효과를 조사하였다. Hom-1의 하향-조절은 대식세포를 LPS 유도된 M1 분극에 대하여 내성이 되게 한다는 것을 발견하였고, 상기 과정 내 Hom-1의 중요한 조절 역할을 시사한다. 대식세포 분극 내 Hom-1의 기능을 추가로 정의하기 위해, M2 대식세포 내 Hom-1의 이소성 발현의 효과를 연구하였고 Hom-1의 과발현이 M1 마커, CD80의 표면 발현의 유의한 증가를 유도하였을 뿐 아니라 M1 사이토카인, IL1b, IL12 및 TNFa의 분비를 상승시켰다는 것을 발견하였다. 종합하면, 상기 데이터는 Hom-1이 대식세포의 가소성을 조절하는 데 중요한 역할을 하고 M1 표현형으로 대식세포를 분극화한다는 것을 시사하였다.
Hom-1은 M1 및 M2 유전자의 발현을 구별하여 조절한다.
Hom-1에 의해 조절되는 대식세포의 분극화의 잠재적인 기전을 연구하기 위해, 특이적인 M1 및 M2의 발현에 미치는 Hom-1의 이소성 발현(ectopic expression)의 효과를 조사하였다. Hom-1 발현이 IL1, IL12 및 TNFa와 같은, M1 유전자의 발현을 촉진하지만, IL10 및 TGFb와 같은 M2 유전자의 발현을 억제한다는 것을 발견했다. Hom-1의 발현이 테스트된 M2 유전자의 발현이 아닌, M1 유전자의 발현에 필요하다는 이전 연구 결과와 함께, 상기 데이터는 Hom-1이 M1 및 M2 유전자 발현의 분극화를 통해 대식세포의 가소성을 조절함을 시사하였다.
조직 염증의 병인에 Hom-1-조절된 대식세포 가소성을 표적화
Hom-1-조절된 대식세포가 조직 염증을 완화시키기 위해 표적화될 수 있는지 여부를 추가로 결정하기 위해, 본 발명자들은 궤양성 대장염(UC) 환자의 염증 또는 정상 점막으로부터 수득된 조직의 일괄 배양을 사용하였다. 임상 결과와 일치하게, TNFa, IL1β 및 질산염과 같은 염증성 사이토카인의 분비는 염증성 조직의 배양에서 유의하게 증가되는 것을 발견하였다. 이후에, 본 발명자들은 조직 배양에 항-Hom-1 모르폴리노 올리고뉴클레오티드(MO)를 첨가하였고 점막 대식세포 내 Hom-1의 발현을 하향-조절할 수 있는지 여부를 조사하였다. Hom-1 MO가 일괄 조직 배양에서 대식세포 내 Hom-1의 발현을 효과적으로 억제하였다는 것을 발견하였다. 조직 염증에 대한 Hom-1 MO의 효과를 추가로 연구하기 위해, ELISA 분석을 사용하여, Hom-1과 일괄 조직 배양 동안 TNFa의 농도를 조사하였다. Hom-1 MO가 투여량 의존적인 방식으로 배양에서 TNFa의 양을 감소시켰음을 발견하였다. 다른 전-염증성 사이토카인의 분비에 미치는 Hom-1 MO의 효과를 추가로 조사하기 위해, IL1 및 질산염의 분비에 대한 Hom-1 MO의 효과를 조사하였고, TNFa와 유사하게, Hom-1 MO가 일괄 배양 시스템에서 상기 전-염증성 사이토카인의 강한 억제력을 나타내는 것을 발견하였다. 생체 외 일괄 배양이 생체 내 조직 미세환경을 반영할 수 있으므로, 상기 데이터는 Hom-1 MO가 조직 염증을 완화시키기 위해 조직 대식세포를 표적화할 수 있다는 것을 시사하였다.
염증성 조직 염증 내 상피 세포의 Hom-1 MO 구조 생존능
점막 궤양을 유발하는, 상피 세포의 세포사멸(apoptosis)은, IBD의 특징이다. 조직 염증은 점막 상피 세포의 세포 사멸의 주된 원인으로 생각되었다. 일괄 조직 배양을 사용하여, 정상 대조군 조직 내 상피 세포의 세포사멸 속도와 비교하여 염증성 점막으로부터 분리된 조직 내 점막 상피 세포의 세포 사멸의 속도가 더 빠르다는 것을 발견하였다. Hom-1 MO가 일괄 조직 배양에 첨가되었을 때, 대조군 MO가 아닌 Hom-1 MO가 조직 배양 내 상피 세포의 세포 사멸에 강한 억제 효과를 나타냄을 발견하였다. Hom-1 MO가 조직 염증을 완화시킬 수 있다는 발견과 함께, 상기 데이터는 Hom-1 MO가 염증을 조절하는 작용제로서 기능할 수 있음을 시사하였다.
단핵구의 분리 및 배양
보스톤 아동 병원의 건강한 성인 기증자로부터 말초 혈액 단핵구 세포 (PBMC)는 피콜(Ficoll) 밀도 구배 원심분리로 분리되었다. 인간 재료의 실험은 브리검 여성 병원의 기관 검토 위원회에 의해 승인을 받은 지침에 따라 수행되었다. CD14+ 단핵구는 항-CD14-코팅된 마이크로비드(Miltenyi Biotec)를 사용하여 PBMC로부터 정제되었다. 신선하게 분리된 CD14+ 단핵구의 순도는 유세포 분석에 의해 분석하였을 때 95% 이상이었다. 단핵구는 12-웰 플레이트에서 10% 소태아혈청(FBS)를 함유한 RPMI 1640 배지에 1 x 106 세포/ml로 배양되었다. M-CSF, GM-CSF, 및 IL3은 PeproTech에서 구입되었고 100ng/ml의 최종 농도로 사용되었다. 사이토카인은 2일 또는 3일 마다 배양물에 첨가되었다.
RNA 간섭
인간 1차 단핵구는 제조사의 지시에 따라 인간 단핵구 뉴클레오펙터 키트 (Lonza)를 사용하여 형질감염되었다. 간단하게, 뉴클레오펙터 II 장치 (Lonza)와 함께 전기천공(electroporation) 전에 Hom-1 siRNA (정방향: 5'-UUCAGAAUCGCCGCAUGAAACACAAACGG-3' (서열번호: 7); 역방항: 5'-CCGUUUGUGUUUCAUGCGGCGAUUCUGAA-3' (서열번호: 8)) 또는 비효율적인 GFP siRNA (정방향: 5'-UGACCACCCUGACCUACGGCGUGCAGUGC-3' (서열번호: 9); 역방향: 5'-GCACUGCACGCCGUAGGUCAGGGUGGUCA-3' (서열번호: 10))의 0.5nmol을 가진 100 ㎕ 뉴클레오펙터 용액에 재현탁하였다. 세포는 이후에 즉시 장치로부터 제거되었고 2mM 글루타민 및 10% FBS를 함유하는 1ml의 예열된 인간 단핵구 뉴클레오펙터 배지와 함께 밤새(overnight) 배양되었다. 세포는 이후에 완전한 RPMI 배지로 재현탁되었고 대식세포로의 분화를 유도하기 위해 적절한 사이토카인으로 처리되었다. 유사하게, 단핵구로부터 유래된 대식세포는 제조사의 지시에 따라 인간 대식세포 뉴클레오펙터 키트(Lonza)로 형질 감염되었다.
FACS 분석
단핵구/대식세포의 표현형 분석은 형광 염료 접합된 항체로 세포의 면역 표지 후 유세포 분석을 사용하여 수행되었다. 하기의 항체는 사용되었다: PE-접합된 항-CD71, CD11b, CD11c, CD16, CD64, CD80, CD86, HLA-DR, CD14, TLR4, IL1-β 및 TNF-α, 및 FITC-접합된 항-CD40, CD36 (eBioscience); FITC-접합된 항-만노스 수용체(MR), 및 비접합된 마우스 항-MCSFR (R&D 시스템). 동위원소(isotope) 대조군 표 작성은 병행하여 수행되었다. 항체는 공급체에 의해 권장되는 대로 희석되었다. 마우스 IgG 항체에 대한 PE-접합된 토끼가 2차 M-CSFR 염색에 사용되었다. 표지된 세포는 셀퀘스트 소프트웨어(CellQuest software)를 사용하여 FACScan 유동 세포 계측기(BD Bioscience)로 분석되었다. 결과는 동위원소 대조군 항체로 수득된 MFI를 뺀 후 양성 세포의 백분율 및/또는 평균 형광 감도(MFI) 값으로 표현된다.
RT-PCR
트리졸(TRIzol) 시약에 의해 총 RNA는 분리되었고, 제조사의 프로토콜에 따르는 수퍼스크립트 III 제 1 가닥 합성 시스템(SuperScript III First-Strand Synthesis System)(Invitrogen)으로 제 1 가닥 cDNA 합성을 위해 사용되었다. 종래의 PCR로 Hom-1 cDNA를 증폭시키기 위하여, AccuPrimeTM Taq DNA 중합효소 시스템 (Invitrogen)은 제조사의 지시에 따라 사용되었다. PCR 산물은 2% 아가로스 겔에서 분리되었고 에티디움 브로마이드(ethidium bromide)로 염색되었다. GADPH는 내부 대조군으로서 사용되었다. LightCycler®(480 실시간(Real-time) PCR 시스템; Roche)에서 SYBR Green으로 Hom-1 및 사이토카인 cDNA의 정량 측정을 수행하였다.
사이토카인 측정
대장균(E.coli) LPS (Sigma) 및 IFN-γ (PeproTech) 처리된 대식세포 또는 LPS 처리된 U937 세포의 상층액 내 IL-1β 및 TNF-α 및 IL12p70의 수준을 eBiosciences 로부터 수득된 ELISA 키트(kit)를 사용하여 정량화하였다. 분석은 제조사의 지시에 따라 수행되었다.
활성 산소 종(ROS) 및 산화 질소(NO)의 검출
활성화된 대식세포 내 ROS 수준은 결과가 형광 현미경 및 유동 세포 계측법에 의해 분석되는 것을 제외하고는 기본적으로 제조사의 지침에 따라 이미지-iT®LIVE 녹색 반응성 산소 종 검출 키트(Green Reactive Oxygen Species Detection Kit)(Invitrogen)로 검출되었다. NO 수준은 제조사가 제공한 프로토콜에 따라 아질산염 측정을 위한 Griess 시약 키트(Griess Reagent Kit for Nitrite Determination) (Invitrogen)에 의해 측정되었다.
세포염색
라이트-김사(Wright-Giemsa) 염색을 위해, Sigma로부터의 염색 키트가 제조사의 지시에 따라 사용되었다.
통계 분석
데이터는 한 쌍의 스튜던트 t 테스트(Student's t test)(양측) 및 윌콕슨 순위합 테스트(Wilcoxon rank-sum test)를 사용하여 분석되었다. p 값이 <0.05의 차이로 통계적으로 유의한 것으로 고려되었다.
기타 구현예
본 명세서에서 개시된 모든 특징은 임의의 조합으로 조합될 수 있다. 본 명세서에 개시된 각각의 특징은 동일, 동등, 또는 유사한 목적을 수행하는 대안적인 특징으로 대체될 수 있다. 따라서, 다르게 명시적으로 언급되지 않은 경우, 각각의 개시된 특징은 단지 동등하거나 또는 유사한 특징의 일반적인 일련의 실시예 일 뿐이다.
상기 설명으로부터, 당해 기술분야의 통상의 기술자는 기술된 실시예의 본질적인 특징을 용이하게 확인할 수 있으며, 본 발명의 사상 및 범위로부터 벗어남 없이, 다양한 용도 및 조건에 적응시키기 위해 다양한 변경 및 수정을 할 수 있다. 따라서, 다른 실시예 또한 청구 범위 내에 존재한다.
SEQUENCE LISTING <110> Zhu, Zhenglun Gao, Hong <120> TREATMENT AND DIAGNOSIS OF INFLAMMATORY DISORDERS <130> IPA180915-US <150> US 62/291,271 <151> 2016-02-04 <160> 10 <170> PatentIn version 3.5 <210> 1 <211> 2428 <212> DNA <213> Homo sapiens <220> <221> CDS <222> (12)..(788) <223> Hom-1 <400> 1 acctggccgc c atg cgc ctc tcc tcc tcc cca cct cgt ggc ccg cag cag 50 Met Arg Leu Ser Ser Ser Pro Pro Arg Gly Pro Gln Gln 1 5 10 ctc tcc agc ttt ggc tcc gtg gac tgg ctc tcc cag agc agc tgc tca 98 Leu Ser Ser Phe Gly Ser Val Asp Trp Leu Ser Gln Ser Ser Cys Ser 15 20 25 ggg ccg acc cac acc ccc agg cct gcc gac ttc tcc ctg ggg agc ctc 146 Gly Pro Thr His Thr Pro Arg Pro Ala Asp Phe Ser Leu Gly Ser Leu 30 35 40 45 cct ggc cca ggc cag aca tcc ggc gcc cgg gag ccc cct cag gcc gtc 194 Pro Gly Pro Gly Gln Thr Ser Gly Ala Arg Glu Pro Pro Gln Ala Val 50 55 60 agc atc aag gag gcc gcc ggg tcc tca aat ctg cct gcg ccg gag agg 242 Ser Ile Lys Glu Ala Ala Gly Ser Ser Asn Leu Pro Ala Pro Glu Arg 65 70 75 acc atg 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tcc ggg ccc cag gct ctg atg ctg ccc cct ggc tcc ttc tgg ggt ctc 626 Ser Gly Pro Gln Ala Leu Met Leu Pro Pro Gly Ser Phe Trp Gly Leu 190 195 200 205 tgc caa gtg gca caa gag gcc ctg gca tct gcg gga gct tcc tgc tgc 674 Cys Gln Val Ala Gln Glu Ala Leu Ala Ser Ala Gly Ala Ser Cys Cys 210 215 220 ggg cag cct ctg gcg tcc cac ccc cct acc cca ggc cgg cct tcg ctg 722 Gly Gln Pro Leu Ala Ser His Pro Pro Thr Pro Gly Arg Pro Ser Leu 225 230 235 gga cca gcc ctg tcc acg ggg ccc cgg ggc ctg tgt gct atg cca cag 770 Gly Pro Ala Leu Ser Thr Gly Pro Arg Gly Leu Cys Ala Met Pro Gln 240 245 250 acg ggg gat gca ttt tga ggaggcacct ctgactccca cactcgcggt 818 Thr Gly Asp Ala Phe 255 cttgctgatc gcacctggct cctacctgga ggactcagtt gttctgttta catcctggtg 878 gcacctctca ccctgaccca cacaaaggtt ctggagatta ctggagaata tatataaata 938 tatatatgta cgtatatatg taaatacaca tatacgtata tataaatata tatatacata 998 tgtgtgtgta tatatatata tatttttttt tttttttttt tttttgagac ggagtgttgc 1058 tctgtcaccc aggctggagt gcaatgacgc aatctcggct cactgcaacc 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Leu Ser Lys Glu Pro Asn Thr Leu Arg Ala Pro Arg Val Arg Thr 85 90 95 Ala Phe Thr Met Glu Gln Val Arg Thr Leu Glu Gly Val Phe Gln His 100 105 110 His Gln Tyr Leu Ser Pro Leu Glu Arg Lys Arg Leu Ala Arg Glu Met 115 120 125 Gln Leu Ser Glu Val Gln Ile Lys Thr Trp Phe Gln Asn Arg Arg Met 130 135 140 Lys His Lys Arg Gln Met Gln Asp Pro Gln Leu His Ser Pro Phe Ser 145 150 155 160 Gly Ser Leu His Ala Pro Pro Ala Phe Tyr Ser Thr Ser Ser Gly Leu 165 170 175 Ala Asn Gly Leu Gln Leu Leu Cys Pro Trp Ala Pro Leu Ser Gly Pro 180 185 190 Gln Ala Leu Met Leu Pro Pro Gly Ser Phe Trp Gly Leu Cys Gln Val 195 200 205 Ala Gln Glu Ala Leu Ala Ser Ala Gly Ala Ser Cys Cys Gly Gln Pro 210 215 220 Leu Ala Ser His Pro Pro Thr Pro Gly Arg Pro Ser Leu Gly Pro Ala 225 230 235 240 Leu Ser Thr Gly Pro Arg Gly Leu Cys Ala Met Pro Gln Thr Gly Asp 245 250 255 Ala Phe <210> 3 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 3 tactcaaccc tgacatagag ggtaa 25 <210> 4 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 4 gagcccggtt tgcatacacg gctaa 25 <210> 5 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 5 gcccagataa gcagcgccta attgc 25 <210> 6 <211> 25 <212> DNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 6 ctgtaggaaa agcaagatca gaaca 25 <210> 7 <211> 29 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 7 uucagaaucg ccgcaugaaa cacaaacgg 29 <210> 8 <211> 29 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 8 ccguuugugu uucaugcggc gauucugaa 29 <210> 9 <211> 29 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 9 ugaccacccu gaccuacggc gugcagugc 29 <210> 10 <211> 29 <212> RNA <213> Artificial Sequence <220> <223> Synthetic oligonucleotide <400> 10 gcacugcacg ccguagguca gggugguca 29

Claims (24)

  1. Hom-1의 발현을 억제하기 위한 핵산 분자를 이를 필요로 하는 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 대상체 내 염증성 질환을 치료하는 방법.
  2. 제1항에 있어서, 상기 핵산 분자는 RNAi 제제(agent) 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드(antisense oligonucelotide)인 방법.
  3. 제2항에 있어서, 상기 핵산 분자는 모르폴리노(morpholino) 올리고뉴클레오티드인 방법.
  4. 제3항에 있어서, 상기 모르폴리노 올리고뉴클레오티드는 서열번호: 3, 4, 5 또는 6의 서열을 갖는 방법.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 핵산 분자는 국소(topically), 경구(orally), 직장(rectally), 비강(nasally), 정맥 내(intravenously), 관절 내(intraarticularly), 결막 내(conjunctivally), 두개 내(intracranially), 복강 내(intraperitoneally), 흉강 내(intrapleurally), 근육 내(intramuscularly), 척수강 내(intrathecally) 또는 피하(subcutaneously)로 투여되는 방법.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 핵산 분자는 노출되어 투여되는 방법.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플은 대조군 수준과 비교하여 더 높은 수준의 Hom-1을 발현하는 방법.
  8. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 투여 단계에 앞서, 대조군 수준과 비교하여 상기 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플 내 더 높은 발현 수준의 Hom-1을 검출하는 단계를, 추가로 포함하는 방법.
  9. 제8항에 있어서, 상기 투여 단계 후, 상기 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플 내 Hom-1 또는 염증성 사이토카인의 발현 수준을 검출하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대조군 수준은 비-염증성 조직 샘플 내 Hom-1의 발현 수준에 상응하는 방법.
  11. Hom-1의 발현을 억제하기 위한 핵산 분자 및 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는, 염증성 질환 치료용 조성물.
  12. 제11항에 있어서, 상기 핵산 분자는 서열번호: 3, 4, 5 또는 6의 서열을 갖는 모르폴리노 올리고뉴클레오티드인 조성물.
  13. 제11항 또는 제12항에 있어서, 상기 조성물은 국소, 경구, 직장, 비강, 정맥 내, 관절 내, 결막 내, 두개 내, 복강 내, 흉강 내, 근육 내, 척수강 내 또는 피하의 투여 경로를 위해 제형화되는 조성물.
  14. 염증성 질환을 위한 치료제를 동정하는 방법으로서,
    염증성 조직 샘플을 시험용 치료제와 접촉시키는 단계; 및
    상기 조직 샘플 내 Hom-1의 발현 수준을 검출하는 단계를 포함하고,
    상기 발현 수준이 대조군 수준보다 낮거나 또는 이와 동일한 경우, 상기 시험용 치료제는 염증성 질환을 위한 후보군 치료제인 방법.
  15. 염증성 질환을 위한 치료제를 이를 필요로 하는 대상체에서 선택하는 방법으로서,
    상기 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플을 치료제와 접촉시키는 단계;
    대조군 수준과 비교하여 상기 조직 샘플 내 Hom-1보다 낮거나 또는 이와 동일한 발현 수준을 검출하는 단계; 및
    상기 대상체에게 상기 치료제를 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  16. 염증성 질환용 치료제를 이를 필요로 하는 대상체에서 효능을 모니터링하는 방법으로서,
    상기 대상체가 상기 치료제로 투여된 후에 상기 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플 내 Hom-1의 발현 수준을 검출하는 단계;
    상기 검출된 수준을 대조군 수준과 비교하는 단계; 및
    상기 비교에 기초하여 치료 결정을 하고, 상기, 검출된 수준이 상기 대조군 수준보다 높은 경우, 상기 대상체에게 상기 치료제 또는 다른 치료제를 지속적으로 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  17. 제15항 또는 제16항에 있어서, 상기 치료제가 스테로이드, 비-스테로이드성 항-염증제, 면역-억제제인 방법.
  18. 제15항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료제는 Hom-1 억제제인 방법.
  19. 제15항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료제는 단백질, 펩타이드, 펩타이드유사체, 펩토이드, 세포, 항체 또는 이의 단편, 소분자 화합물, 핵산 분자, 또는 식물 추출물인 방법.
  20. 제15항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 대조군 수준은 치료제와 접촉하기 전 비-염증성 조직 샘플 또는 염증성 조직 샘플 내 Hom-1의 발현 수준에 상응하는 방법.
  21. 염증성 질환의 치료를 필요로 하는 대상체에서 염증성 질환을 치료하는 방법으로서,
    Hom-1 억제제로 치료되거나 또는 Hom-1 억제제를 발현하기 위한 발현 작제물(construct)을 함유하는 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포를 제공하는 단계로서, 상기 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포는 대조군 수준과 비교하여 더 낮은 수준의 Hom-1을 발현하는 단계; 및
    유효량의 상기 변형된 대식세포, 단핵구, 또는 수지상 세포를 상기 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는 방법.
  22. 제21항에 있어서, 상기 Hom-1 억제제는 Hom-1의 발현을 억제하는 방법.
  23. 제22항에 있어서, 상기 Hom-1 억제제는 RNAi 제제 또는 안티센스 올리고뉴클레오티드인 방법.
  24. 제21항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 제공 단계에 앞서, 상기 대상체로부터 수득된 염증성 조직 샘플 내 대조군 수준보다 높은 Hom-1의 발현을 검출하는 단계를 추가로 포함하는 방법.

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