KR20180062930A - Food composition comprising dendropanax morbifera lev. extract for preventing or improving tiredness, muscle weakness and reduced exercise capacity due to andropause - Google Patents

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오교녀
최은진
배동혁
오둘리
김유진
홍지애
최철웅
성락선
김기만
박종국
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Abstract

The present invention relates to a food composition comprising a Dendropanax morbifera extract for reducing symptoms due to andropause selected from tiredness, muscle weakness and reduced exercise capacity, and more specifically, to a food composition for preventing and alleviating andropause diseases and andropathy, which comprises a hot water extract of the Dendropanax morbifera or fractions from the hot water extract of the Dendropanax morbifera as an active ingredient to be able to reduce symptoms caused by the andropause including tiredness, muscle weakness and the like.

Description

남성 갱년기로 인한 피로감, 근력저하 및 운동능력 저하를 개선하는 황칠나무 추출물을 함유하는 기능성 식품 조성물{FOOD COMPOSITION COMPRISING DENDROPANAX MORBIFERA LEV. EXTRACT FOR PREVENTING OR IMPROVING TIREDNESS, MUSCLE WEAKNESS AND REDUCED EXERCISE CAPACITY DUE TO ANDROPAUSE}TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a functional food composition containing an extract of Euphorbiaceae extract which improves fatigue, muscle weakness and lowering of exercise performance due to menopausal period. [0002] FOOD COMPOSITION COMPRISING DENDROPANAX MORBIFERA LEV. EXTRACT FOR PREVENTING OR IMPROVING TIREDNESS, MUSCLE WEAKNESS AND REDUCED EXERCISE CAPACITY DUE TO ANDROPAUSE}

본 발명은 황칠나무 열수 추출물을 포함하는 남성 갱년기 증후군 예방 및 개선용 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 황칠나무 열수 추출물의 남성 갱년기 장애 개선, 남성 갱년기 질환에 대한 예방 및 개선용 건강 식품의 천연소재로서의 신규 용도에 관한 것이다. The present invention relates to a composition for preventing and ameliorating male menopausal symptoms, which comprises hot-water extract of Hwangchu-wood. More particularly, the present invention relates to a composition for preventing and ameliorating male menopausal disorders, Lt; / RTI >

여성은 폐경기가 오며 여성 호르몬이 급격히 감소하여 여러 가시적인 변화가 일어나게 되는데, 이를 갱년기라 한다. 통상 갱년기란 용어는 여성에 한정되어 사용되었으나, 근래에는 남성에서도 노화에 따른 체내 남성 호르몬의 점진적 감소로 인한 내분비 변화로 남성 갱년기 증후군의 개념이 대두되고 있다.Women become menopausal and female hormones are rapidly decreased, resulting in several visible changes, which are called menopause. The term "normal menopausal period" has been used only in women, but in recent years, the concept of male menopausal syndrome is emerging as a result of the gradual decrease of the male hormone in the body due to aging.

남성 호르몬은 스테로이드 호르몬으로, 테스토스테론(testosterone)이 대표적인 남성 호르몬에 속한다. 테스토스테론은 주로 고환(testis)의 라이디히 세포(Leydig cell)에서 생성되며, 유리된 형태로 존재하거나 혈중 단백질, 알부민 및 성호르몬결합글로불린(sex hormone binding globulin, 이하 SHBG)과 결합된 형태로 존재한다. 테스토스테론이 SHBG와 결합하게 되면 활성을 잃게 되고, 분리되면 호르몬으로 작용하게 된다. 고환은 뇌하수체에서 분비되는 여포자극호르몬(Folicle stimulating hormone, 이하 FSH) 및 황체형성호르몬(Luteinizing hormone, 이하 LH)에 의해 조절되는데, FSH와 LH는 성선(Gonad gland)을 자극하여 정자의 분화 및 성숙을 유도함으로써 정자 생성(Spermatogenesis)을 촉진시킨다. 라이디히 세포는 LH 수용체를 가지며, LH는 라이디히 세포에서 테스토스테론의 합성 및 분비를 촉진시키는 것으로 알려져 있다.Male hormones are steroid hormones, testosterone is a representative male hormone. Testosterone is mainly produced in Leydig cells of the testis and exists in a free form or in a form associated with blood proteins, albumin and sex hormone binding globulin (SHBG) . When testosterone binds to SHBG, it loses its activity, and when separated, it acts as a hormone. The testes are regulated by the follicle stimulating hormone (FSH) and the luteinizing hormone (LH) secreted from the pituitary gland. FSH and LH stimulate the gonads to differentiate and mature To promote spermatogenesis. Lydia cells have LH receptors, and LH is known to promote the synthesis and secretion of testosterone in Lydia cells.

남성 갱년기에 관한 정식 용어로는 2004년 국제남성노화학회(International Society for the Study of the Aging Male)에서 결정된 용어인 '후기발현 남성 성선기능저하증(late-onset hypogonadism, LOH)', '가령성 테스토스테론결핍증후군(ageassociated testosterone deciency syndrome, TDS)'이 있다. 남성갱년기 장애(Andropause)는 연령의 증가와 관련된 임상적 및 생화학적 증후군으로 전형적인 증상 및 혈청 테스토스테론 수준의 결핍으로 정의되고 있으며, 여러 신체기관의 기능에 부정적인 영향을 초래할 수 있다. 동반되는 증상으로는 성욕 및 발기 기능의 저하, 밤 시간 동안의 우울, 인지 능력의 감소, 피로, 체중 및 근육량의 감소, 근력의 저하, 내장 지방의 증가, 피부위축 등의 예를 들 수 있다.The term "menopausal menopause" refers to the term "late-onset hypogonadism (LOH)" as determined by the International Society for the Study of the Aging Male in 2004, Age-associated testosterone deciency syndrome (TDS). Andropause is a clinical and biochemical syndrome associated with increased age, defined as a typical symptom and a deficiency of serum testosterone levels, which can negatively affect the function of various organs. Concurrent symptoms include decreased sexual desire and erectile function, nighttime depression, decreased cognitive ability, decreased fatigue, weight and muscle mass, decreased muscle strength, increased visceral fat, and skin atrophy.

치료를 위해서는 폐경기 여성에 에스트로겐 대체 요법을 사용하는 것과 유사한 방식으로 남성 호르몬 대체 요법의 사용 가능성이 주장되고 있다. 한 연구에 따르면, 남성 갱년기 환자들을 테스토스테론 운데카노에이트 40 X 2㎎/일로 치료하는 경우 상당한 개선 효과가 얻어지는 것으로 보고된 바 있다. 그러나, 남성 호르몬의 투여는 간, 지질 상태, 심혈관 및 전립선 질환 등에 역효과를 미칠 수 있다는 위험성 또한 보고되어 있다. 또한, 선종 및 선암종에 비추어, 남성 갱년기에 기인하는 증상들을 갖는 환자의 약 30%는 남성 호르몬 대체 요법을 받을 수 없는 것으로 알려져 있다. 따라서, 호르몬 대체 요법의 단점을 제공하지 않는, 노화에 의한, 또는 화학적이나 외과적인 거세에 의해 유발된 남성 갱년기 증후군의 예방 및 치료에 유용한 신규 치료제의 개발이 필요하다.It is argued that the use of male hormone replacement therapy in a manner similar to the use of estrogen replacement therapy in postmenopausal women. According to one study, significant improvement in the effects of treating male menopausal patients with 40 x 2 mg / day of testosterone undecanoate has been reported. However, administration of male hormones has also been associated with the risk of adversely affecting liver, lipid conditions, cardiovascular and prostate diseases. In addition, in terms of adenomas and adenocarcinomas, it is known that about 30% of patients with symptoms attributable to male menopause can not receive male hormone replacement therapy. Therefore, there is a need for the development of new therapeutic agents useful in the prevention and treatment of male menopausal syndromes caused by aging, or chemical or surgical castration, which do not provide disadvantages of hormone replacement therapy.

천연물 유래 조성물의 이용이 전 세계적으로 증가하는 추세로, 남성 갱년기 질환과 관련하여서도 최근 종래 호르몬 대체 요법에 의한 문제점을 극복하기 위하여 천연 생약을 주성분으로 하는 조성물을 이용하여 남성갱년기 증후군을 개선하고자 하는 시도가 이루어지고 있다. 황칠나무(Dendropanax morbifera Lev .)는 우리나라의 남부 해안 지역과 제주도에서 자생하는 상록활엽교목으로 겨울에도 낙엽이 지지 않는 수종으로 수피에 상처를 주면 황색의 수지액이 나오는데 이것을 황칠(黃漆)이라고 한다. 황칠은 삼국시대부터 황제의 갑옷, 투구, 기타 금속 장신구의 황금색을 발하는 진귀한 도료로 이용되어 왔으며 고려시대에 쓰여진 고려사절요, 중국의 계림유사, 계림지, 해동역사에 황칠의 채취시기, 사용용도 등이 기록되어 있으며 그 이전인 백제의 특산품이었다는 것이 당나라 역사서인 책부원구, 통전에 남아있다. 이시진의 본초강목에는 황칠나무가 번열 제거, 안질 및 화상치료, 나병에 효과가 있으며 무해하다고 기록되어 있으며, 최근 차 등 식용으로 이용되고 있다.In order to overcome the problems caused by the conventional hormone replacement therapy in relation to the menopausal disease, it is desired to improve the male menopausal syndrome by using a composition containing the natural herbal medicine as the main ingredient, An attempt is being made. Dendropanax morbifera Lev . ) Is an evergreen broad-leaved arboreous tree native to the southern coast of Korea and Jeju-do. It is a species that does not fall into winter when it blooms in the winter. When it bruises the bark, yellowish resinous liquor is called 黄 漆. Huangchil has been used as a rare paint for the emperor's armor, helmet, and other metal ornaments since the Three Kingdoms period. It has been used in the Goryeo period, which was written in the Goryeo period, the Guilin variety in China, And it is said that it was a special product of Baekje which was before it, and it remains in the passage of the book department of the Tang history book. It is said that it is effective for burning removal, eye quality, burn treatment, leprosy, harmlessness, and it is used recently for tea and food.

KRKR 10144323000001014432300000 B1B1

본 발명은 황칠나무 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군의 예방, 개선 또는 치료용 식품 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.It is an object of the present invention to provide a food composition for preventing, ameliorating, or treating male menopausal syndrome, which comprises an extract of Hwangbuk tree as an active ingredient.

본 발명의 일 측면에 따르면, 황칠나무(Dendropanax morbifera Lev .) 열수 추출물 또는 황칠나무 열수 추출물로부터 분획된 황칠나무 분획물을 유효성분으로 함유하는 피로감, 근력저하 또는 운동능력 저하로부터 선택된 남성 갱년기 증상 개선용 기능성 식품 조성물이 제공된다.According to one aspect of the present invention, there is provided a dendropanax morbifera Lev . ) A functional food composition for improving male menopausal symptoms selected from fatigue, muscular weakness, or impaired exercise capacity containing hot water or hot pepper extract fraction as an active ingredient is provided.

또한, 상기 황칠나무 열수 추출물은 황칠나무에 5 내지 30배 부피의 물을 첨가하고 3 내지 6시간동안 100 내지 130℃온도에서 추출하여 제조될 수 있다.In addition, the Hwangbok tree hydrothermal extract can be prepared by adding 5 to 30 times as much volume of water to woodweed and extracting it at 100 to 130 ° C for 3 to 6 hours.

또한, 상기 황칠나무 분획물은 황칠나무 열수 추출물을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 분획용매로 분획하여 얻어질 수 있다.The fragrant woody fraction can be obtained by fractionating at least one member selected from the group consisting of hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol with a fraction solvent.

또한, 상기 황칠나무 분획물은 황칠나무 열수 추출물을 헥산, 클로로포름 및 에틸아세테이트로 순차 분획하여 얻어지는 에틸아세테이트 분획물일 수 있다.In addition, the above-described Wuchu-cuticle fraction may be an ethylacetate fraction obtained by successively fractionating the Hwangchu-jatu extract in hot water with hexane, chloroform and ethyl acetate.

또한, 상기 기능성 식품 조성물은 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제, 담체, 부형제 및 희석제로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.In addition, the functional food composition may further include at least one selected from the group consisting of food-acceptable food-aid additives, carriers, excipients and diluents.

또한, 상기 기능성 식품 조성물은 과립, 분말, 정제, 캡슐, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조될 수 있다.In addition, the functional food composition may be prepared in any one form selected from the group consisting of granules, powders, tablets, capsules, liquid solutions and rings.

본 발명의 다른 측면에 따르면, 상기 기능성 식품 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 증상 개선용 기능성 식품 첨가제가 제공된다.According to another aspect of the present invention, there is provided a functional food additive for improving menopausal symptoms, which comprises the functional food composition.

본 발명의 다른 측면에 따르면, 상기 기능성 식품 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 증상 개선용 건강 기능성 식품이 제공된다.According to another aspect of the present invention, there is provided a health functional food for improving male menopausal symptoms, which comprises the functional food composition.

본 발명의 일 측면에 따른 황칠나무 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 식품 조성물은 체내 테스토스테론 분비를 촉진시키고 활성을 증진시킬 수 있다. 이를 통하여, 근력 감소 및 피로 등을 포함하는, 남성 갱년기로 인해 유발되는 증상을 완화시킬 수 있으므로, 남성 갱년기 장애, 남성 질환의 예방 및 개선을 목적으로 식품산업 분야에서 이용될 수 있다.The food composition containing the extract of Huangchuang as an active ingredient according to one aspect of the present invention can promote the secretion of testosterone in the body and enhance the activity. This can be used in the food industry for the purpose of preventing and ameliorating menopausal disorders and male diseases because it can alleviate symptoms caused by menopausal symptoms, including muscle weakness and fatigue.

또한, 본 발명의 일 측면에 따른 황칠나무 열수 추출물을 포함하는 조성물은 정상세포의 세포사멸(apoptosis)을 유도하지 않아 인체에 대한 안전성이 우수하므로, 안전한 식품 첨가물로 사용될 수 있다.In addition, the composition comprising the hydrothermal extract of Huangchu tree according to one aspect of the present invention does not induce apoptosis of normal cells, so that it is safe for human body and can be used as a safe food additive.

또한, 본 발명의 일 측면에 따른 황칠나무 열수 추출물을 포함하는 조성물은 천연 식물 유래 추출물을 포함함으로써, 기존 화학물질을 포함하는 조성물에 비해 독성 및 부작용으로 인한 문제를 저감시킬 수 있다.In addition, the composition comprising the extract of Hwangbuk tree according to one aspect of the present invention can reduce the toxicity and side effects due to the natural plant-derived extract.

도 1은 본 발명의 황칠나무 열수 추출물이 노령 수컷 쥐 실험모델에서 혈중 테스토스테론 분비를 증가시키는 효과를 나타내는 것을 보여주는 도면이고,
도 2는 본 발명의 황칠나무 열수 추출물이 노령 수컷 쥐 실험모델에서 혈중 SHBG 농도를 감소시키는 효과를 나타내는 것을 보여주는 도면이고,
도 3은 본 발명의 황칠나무 열수 추출물이 노령 수컷 쥐 실험모델에서 혈중 LH 및 FSH 분비를 증가시키는 효과를 나타내는 것을 보여주는 도면이고,
도 4는 본 발명의 황칠나무 열수 추출물이 노령 수컷 쥐 실험모델에서 혈중 DHEA-s 분비를 증가시키는 효과를 나타내는 것을 보여주는 도면이고,
도 5는 본 발명의 황칠나무 열수 추출물이 노령 수컷 쥐 실험모델에서 피로감, 근력저하 및 운동능력 개선 효과를 나타내는 것을 보여주는 도면이고,
도 6은 본 발명의 황칠나무 열수 추출물이 TM3 세포에서 세포 독성을 나타내지 않는 것을 보여주는 도면이고,
도 7은 본 발명의 황칠나무 열수 추출물이 TM3 세포에서 테스토스테론 분비를 증가시키는 효과를 나타내는 것을 보여주는 도면이고,
도 8은 본 발명의 황칠나무 열수 추출물이 TM3 세포에서 과산화수소로 유도된 산화적 스트레스 환경하에 테스토스테론 분비를 증가시키는 효과를 나타내는 것을 보여주는 도면이고,
도 9는 본 발명의 황칠나무 분획물이 TM3 세포에서 과산화수소로 유도된 산화적 스트레스 환경하에 테스토스테론 분비를 증가시키는 효과를 나타내는 것을 보여주는 도면이다.
Brief Description of the Drawings Fig. 1 is a graph showing the effect of the extract of Huangchu tree hydrothermal extract of the present invention on the blood testosterone secretion in an experimental model of male rats in the old age,
FIG. 2 is a graph showing that the extract of Huangchu tree hydrothermal extract of the present invention has an effect of decreasing SHBG concentration in blood in an old male rat experimental model,
FIG. 3 is a graph showing that the extract of Huangchu tree hydrothermal extract of the present invention has an effect of increasing the secretion of LH and FSH in blood in an old male rat experimental model,
FIG. 4 is a graph showing that DHWH extract of the present invention has an effect of increasing DHEA-s secretion in blood in an experimental male rat model,
FIG. 5 is a graph showing that the extract of Huangchu tree hydrothermal extract of the present invention shows an effect of improving fatigue, muscle strength and athletic performance in an experimental male rat model,
FIG. 6 is a graph showing that the hydrothermal extract of P. japonicus does not show cytotoxicity in TM3 cells,
FIG. 7 is a graph showing the effect of the hydrothermal extract of Hwangcholga extract of the present invention on the increase of testosterone secretion in TM3 cells,
FIG. 8 is a graph showing the effect of the hydrothermal extract of P. japonicus on the increase of testosterone secretion under oxidative stress environment induced by hydrogen peroxide in TM3 cells,
FIG. 9 is a graph showing the effect of the present invention fraction of quercitin on the increase of testosterone secretion under an oxidative stress environment induced by hydrogen peroxide in TM3 cells. FIG.

본 발명은 황칠나무(Dendropanax morbifera Lev .) 열수 추출물 또는 황칠나무 열수 추출물로부터 분획된 황칠나무 분획물을 유효성분으로 포함하는 남성 갱년기 증후군의 예방 또는 개선용 기능성 식품 조성물, 그를 포함하는 건강 기능성 식품 및 식품 첨가제에 관한 것이다.The invention hwangchil tree (Dendropanax morbifera Lev . ) Functional food composition for prevention or amelioration of male menopausal syndrome which comprises, as an active ingredient, fragrant wood fractions fractionated from a hot-water extract or a hot-water extract of Hwangchu-wood, a health-functional food and a food additive comprising the same.

이하, 본 발명에 대해 보다 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명의 조성물은 황칠나무 열수 추출물 또는 황칠나무 열수 추출물로부터 분획된 황칠나무 분획물을 유효성분으로 포함한다.The composition of the present invention contains as an active ingredient an extract of Hwangchujanggae or a fraction of Hwangchujangchae which is fractionated from a hydrothermal extract of Hwangchuok tree.

상기 황칠나무의 열수 추출물 또는 분획물을 제조하기 위하여, 먼저 황칠나무를 건조시켜 준비할 수 있다. In order to prepare the hot-water extract or the fraction of the Hwigae-gil, the Hwigae can be prepared by drying.

본 발명에 있어서, 황칠나무 열수 추출물을 분리할 수 있는 황칠나무의 부분은 특별히 한정되지 않으며, 황칠나무의 잎, 가지, 뿌리 및 열매로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 이용할 수 있다. 바람직하게는 황칠나무의 잎, 가지 및 뿌리로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 이용하는 것이 좋다. 이를 통상의 방법에 의하여 절단, 건조 및 분쇄하여 이용할 수 있다. 황칠나무를 건조함으로써 황칠나무의 기능성을 향상시킬 수 있다. 상기 건조 방법은 특별히 한정되지 않으며, 예를 들면, 자연건조 또는 동결건조를 이용할 수 있다. 필요에 따라, 상기 황칠나무는 건조 전 또는 건조 후 절단 또는 분쇄될 수 있다.In the present invention, the portion of the Hwigae-jinja that can separate the Hwangchu-kogyo hot-water extract is not particularly limited, and at least one selected from the group consisting of leaves, branches, roots and fruits of Huaculi can be used. Preferably, at least one selected from the group consisting of leaves, branches and roots of Hwigae-gil. This can be cut, dried and pulverized by a conventional method. It is possible to improve the functionality of Uchihaku by drying it. The drying method is not particularly limited, and for example, natural drying or freeze-drying may be used. If necessary, the wood can be cut or crushed before or after drying.

본 발명에 있어서, 상기 황칠나무 열수 추출물은 황칠나무 원료에 추출용매를 처리하여 열수 추출한 후 감압 농축하여 수득할 수 있다. 본 발명에 있어서, 상기 추출용매로는 물이 선택되는 것이 바람직하다. 추출용매를 처리하여 추출물을 분리할 시 추출용매는 황칠나무 전체 건조 중량의 5 내지 30배로 첨가될 수 있다. 상기 추출용매가 황칠나무 전체 건조 중량의 5배 미만 또는 30배 초과인 경우에는 추출 효율이 저하되어 제조 비용이 상승하는 문제가 발생할 수 있다. 바람직하게는, 추출용매는 황칠나무 전체 건조 중량의 10 내지 20배로 첨가되는 것이 좋다.In the present invention, the above-mentioned hot-water extract of Huangchuang can be obtained by treating the Huangchu-wood raw material with an extraction solvent, subjecting it to hot water extraction, and then concentrating under reduced pressure. In the present invention, water is preferably selected as the extraction solvent. When extracting the extractant by treating the extracting solvent, the extracting solvent may be added at 5 to 30 times the dry weight of the whole wood. If the extraction solvent is less than 5 times or more than 30 times the dry weight of the whole wood, the extraction efficiency may be lowered and the manufacturing cost may increase. Preferably, the extraction solvent is added in an amount of 10 to 20 times the dry weight of the whole wood.

추출용매를 처리하여 추출물을 분리할 시의 온도는 추출방법에 따라 조절될 수 있다. 예를 들면, 80 내지 140℃일 수 있다. 상기 온도에서 2 내지 10시간 동안 추출하여 황칠나무 열수 추출물을 분리할 수 있다. 바람직하게는, 100 내지 130℃에서 3 내지 6시간동안 추출기로 추출하여 황칠나무 열수 추출물을 분리할 수 있다. 보다 바람직하게는, 100 내지 120℃에서 4 내지 5시간 동안 추출하여 황칠나무 열수 추출물을 분리할 수 있다. 상기 분리된 추출물은 이후 여과, 농축 또는 건조과정을 통해 용매를 제거함으로써 농도가 조절된 액체 또는 고체 분말의 형태로 제공될 수 있다. 바람직하게는, 유용 성분의 농도를 높이고 저장성을 향상시키기 위하여, 농축시킨 후 동결건조하여 분말의 형태로 제공되는 것이 좋다. 상기 여과, 농축 또는 건조시키는 방법은 특별히 한정되지 않으며, 통상의 방법으로 수행될 수 있다.The temperature at which the extract is separated by treating the extraction solvent can be adjusted according to the extraction method. For example, from 80 to 140 캜. The extract may be extracted at the above temperature for 2 to 10 hours to isolate the extract of Fusarium oxysporum; Preferably, the extract is extracted with an extracting machine at 100 to 130 ° C for 3 to 6 hours to isolate the extract of Hwangcholgak tree. More preferably, the extract is extracted at 100 to 120 ° C for 4 to 5 hours to isolate the extract of Hwangjak tree. The separated extract may be provided in the form of a liquid or solid powder having a controlled concentration by removing the solvent through filtration, concentration or drying. Preferably, in order to increase the concentration of the useful component and improve the shelf life, it is preferable to concentrate and freeze-dry to provide it in powder form. The method of filtration, concentration or drying is not particularly limited and can be carried out by a conventional method.

상기 황칠나무 열수 추출물로부터 황칠나무 분획물을 분리할 수 있다. 상기 분획물은 황칠나무 열수 추출물을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 분획용매로 사용하여 분획함으로써 얻을 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 황칠나무 분획물은 황칠나무 열수 추출물을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올을 이용하여 순차적으로 용매이행하여 얻어지는 분획물일 수 있다. 상세하게는, 상기 황칠나무 열수 추출물을 물로 현탁하고 헥산으로 1차 용매이행하여 물층 및 헥산층으로 분리하고, 헥산 가용 성분이 제거된 물 분획에 클로로포름으로 2차 용매이행을 수행하여 물층 및 클로로포름층으로 분리하고, 클로로포름 가용 성분이 제거된 물 분획에 에틸아세테이트로 3차 용매이행을 수행하여 물층과 에틸아세테이트층으로 분리하고, 에틸아세테이트 가용 성분이 제거된 물 분획에 n-부탄올로 4차 용매이행을 수행하여 극성 정도가 상이한 분획물을 얻을 수 있으며, 본 발명의 황칠나무 분획물은 1차, 2차, 3차 및 4차 용매이행하여 얻어진 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물의 분획을 포함할 수 있다. 보다 바람직하게는, 본 발명의 황칠나무 분획물은 황칠나무 열수 추출물을 헥산, 클로로포름 및 에틸아세테이트를 분획용매로 이용하여 순차적으로 용매이행하여 얻어지는 에틸아세테이트 분획물일 수 있다. 상기 분리된 분획물은 이후 여과, 농축 또는 건조과정을 통해 용매를 제거함으로써 농도가 조절된 액체 또는 고체 분말의 형태로 제공될 수 있다. 바람직하게는, 유용 성분의 농도를 높이고 저장성을 향상시키기 위하여, 농축시킨 후 동결건조하여 분말의 형태로 제공되는 것이 좋다. 상기 여과, 농축 또는 건조시키는 방법은 특별히 한정되지 않으며, 통상의 방법으로 수행될 수 있다. The fragrant wood fractions can be isolated from the above-mentioned hot-water extract of Hwangchu-kaku. The fractions can be obtained by fractionating the extract of Hwangjak tree using fractional solvent of at least one selected from the group consisting of hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol. Preferably, the Fusarium oxysaccharide fraction of the present invention may be a fraction obtained by sequentially transferring the Fusarium oxysporum extract to solvent using hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol. In detail, the hot water extract of Huangchu tree was suspended in water, transferred to a primary solvent with hexane, separated into a water layer and a hexane layer, a secondary solvent was transferred to a water fraction from which the hexane soluble component had been removed with chloroform to obtain a water layer and a chloroform layer , And the water fraction from which chloroform soluble component was removed was subjected to a tertiary solvent transfer with ethyl acetate to separate into a water layer and an ethyl acetate layer. To the water fraction from which the ethyl acetate soluble component had been removed, a fourth solvent was passed through n-butanol And fractions having different degrees of polarity can be obtained. The fragments of the woody wood of the present invention can contain fractions of hexane, chloroform, ethyl acetate, butanol and water obtained by transferring primary, secondary, tertiary and quaternary solvents have. More preferably, the Fusarium oxysulfur fraction of the present invention may be an ethyl acetate fraction obtained by sequentially subjecting a Fusarium oxysporum extract to a solvent using hexane, chloroform, and ethyl acetate as a fraction solvent. The separated fraction may be provided in the form of a liquid or solid powder having a controlled concentration by removing the solvent through filtration, concentration or drying. Preferably, in order to increase the concentration of the useful component and improve the shelf life, it is preferable to concentrate and freeze-dry to provide it in powder form. The method of filtration, concentration or drying is not particularly limited and can be carried out by a conventional method.

상기와 같은 제조방법에 따라 제조된 황칠나무 열수 추출물 또는 황칠나무 분획물은 체내 남성 호르몬인 테스토스테론(testosterone)의 분비 및 활성을 증가 또는 증진시킬 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 상기와 같은 제조방법에 따라 제조된 황칠나무 열수 추출물 또는 황칠나무 분획물을 포함함으로써, 테스토스테론의 분비 감소로 인해 유발되는 남성 갱년기 증후군의 예방 또는 개선에 이용될 수 있다. 본 발명에서 남성 갱년기 증후군은 남성 갱년기로 인해 유발되는 증후군, 남성 갱년기 장애 및 남성 갱년기로 인한 질환을 포함한다. 예를 들면, 테스토스테론 저하증, 호르몬 변화로 인한 기분변화, 수면장애, 피로감, 근력 저하, 운동능력 저하, 정력감소, 체중 및 근육량의 감소, 내장지방 증가, 성기능 장애, 인지능력 저하 및 우울증 등이 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 남성 갱년기 증후군은 노화에 의해 유도되거나, 화학적 또는 외과적 거세에 의해 유도된 것일 수 있다. 상기 남성 갱년기 증후군은 남성 호르몬의 분비 저하에 의해 유도된 것일 수 있다.The hydrothermal extract or the fractions of Fusarium oxyspora prepared according to the above production method can increase or enhance the secretion and activity of the male hormone testosterone. The food composition of the present invention can be used to prevent or ameliorate male menopausal syndrome caused by decreased secretion of testosterone by containing hot water extract of Hwangchuok tree or fragrant woody fraction prepared according to the above production method. In the present invention, male menopausal syndrome includes male-menopausal-induced syndromes, male-menopausal disorders, and male-menopausal-related diseases. For example, there are hypothyroidism, mood changes due to hormonal changes, sleep disturbances, fatigue, muscle weakness, decreased exercise capacity, decreased strength, decreased body weight and muscle mass, increased visceral fat, sexual dysfunction, decreased cognitive abilities, and depression But is not limited thereto. The male menopausal syndrome may be induced by aging, or induced by chemical or surgical castration. The male menopausal syndrome may be one induced by decreased secretion of male hormone.

필요에 따라, 본 발명의 식품 조성물은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 더 포함할 수 있다. 상기 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분은 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제, 담체, 부형제 및 희석제로 이루어지는 군에서 선택되는 적어도 하나일 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 예를 들면, 영양제, 비타민, 광물(전해질), 풍미제, 착색제, 중진제, 펙트산, 펙트산염, 알긴산, 알긴산염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산화제, 과육 등을 더 포함할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 필요에 따라, 본 발명의 식품 조성물은 과립, 분말, 정제, 캡슐, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조될 수 있다. 이를 통하여, 섭취시의 편의성을 증진시킬 수 있다.If desired, the food composition of the present invention may further comprise ingredients that are conventionally added in food preparation. The ingredients commonly added during the manufacture of the food may be at least one selected from the group consisting of pharmaceutically acceptable food-aid additives, carriers, excipients and diluents, but are not limited thereto. For example, there may be mentioned nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), flavors, coloring agents, thickening agents, pectic acid, pectate salts, alginic acid, alginates, organic acids, protective colloid thickening agents, pH adjusting agents, stabilizers, preservatives, , Carbonating agent, pulp, and the like, but is not limited thereto. If desired, the food composition of the present invention may be prepared into any one of formulations selected from the group consisting of granules, powders, tablets, capsules, liquid solutions and rings. Through this, convenience for ingestion can be improved.

본 발명의 황칠나무 열수 추출물 또는 황칠나무 분획물을 포함하는 조성물은 식품 첨가제로 제공될 수 있다. 상기 식품첨가제의 형태는 과립, 분말, 정제, 캡슐 액상의 용액 및 환 형태일 수 있다.The composition of the present invention comprising hot-water extract of Huangchu tree or fractions of Huangchu wood can be provided as a food additive. The form of the food additive may be in the form of a granule, a powder, a tablet, a solution in a capsule liquid phase, and a ring form.

본 발명의 황칠나무 열수 추출물 또는 황칠나무 분획물을 포함하는 조성물은 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 상기 기능성 식품이란 황칠나무 열수 추출물 또는 황칠나무 분획물을 식품소재에 첨가하여 제조된 식품이거나, 황칠나무 열수 추출물 또는 황칠나무 분획물을 캡슐, 분말, 현탁액 등으로 제조한 식품으로, 이를 섭취할 경우 건강상 특정한 효과를 가져오는 통상적인 의미의 건강 식품을 포함한다. 상기 식품의 종류로는, 예를 들면, 드링크제, 육류, 소세지, 빵, 비스켓, 떡, 쵸코렛, 캔디, 스넥, 과자, 피자, 면류, 껌, 아이스크림, 스프, 음료, 차, 비타민 복합제 등이 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 식품의 형태는 분말, 과립, 정제, 캡슐, 액상 또는 음료 형태일 수 있다. The composition of the present invention comprising hot-water extract of Hwangbuk tree or fragrant wood fractions can be produced as a functional food. The functional food refers to a food prepared by adding hot water extract of Huangchu tree or fractions of Huangchu tree to a food material, or a food prepared by capsules, powder or suspension of Huangchu hot water extract or Huangchu wood fraction, And include health foods in the usual sense that bring about certain effects. Examples of the food include drink, meat, sausage, bread, biscuit, rice cake, chocolate, candy, snack, confection, pizza, noodle, gum, ice cream, soup, beverage, tea, vitamin complex But is not limited thereto. The form of the food may be in the form of a powder, a granule, a tablet, a capsule, a liquid or a drink.

본 발명에 있어서, 남성 갱년기 증후군의 예방 또는 개선이 기대되는 황칠나무 열수 추출물 또는 황칠나무 분획물의 함량은 각종 기호성 식품 총 중량의 1 내지 99중량%일 수 있으며, 바람직하게는 10 내지 50중량%일 수 있다. 본 발명에 있어서, 남성 갱년기 증후군의 예방 또는 개선이 기대되는 황칠나무 열수 추출물 또는 황칠나무 분획물의 유효량은 0.01㎎/㎏ 내지 10g/㎏, 바람직하게는 1㎎/㎏ 내지 1g/㎏일 수 있다.In the present invention, the content of the hotchprimer extract or the yellowish chestnut fraction may be 1 to 99% by weight, preferably 10 to 50% by weight, . In the present invention, the effective amount of the extract of Hwangbok tree or the extract of Hwacheon-shin wood, which is expected to prevent or ameliorate menopausal symptoms, may be 0.01 mg / kg to 10 g / kg, preferably 1 mg / kg to 1 g / kg.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 본 발명을 하기 실시예에 의거하여 좀 더 상세하게 설명한다. 단, 이들 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐 첨부된 특허청구범위를 제한하는 것이 아니며, 본 발명의 범주 및 기술사상 범위 내에서 실시예에 대한 다양한 변경 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속하는 것도 당연한 것이다.BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. It will be apparent to those skilled in the art that these embodiments are illustrative of the present invention and are not intended to limit the scope of the appended claims and that various changes and modifications may be made to the embodiments within the scope and spirit of the invention , And it is natural that such variations and modifications fall within the scope of the appended claims.

실시예Example

<황칠나무 열수 추출물의 제조>&Lt; Preparation of Hot Water Extract of Yellowtail &

황칠나무 잎, 가지 및 뿌리를 분리하고 건조시켜 수분을 제거하였다. 수분이 제거된 황칠나무의 각 부위를 균일하게 분쇄하여 분말로 만든 후, 황칠나무 분말에 물을 20배 부피로 첨가하고 4시간동안 120℃온도에서 추출하였다. 여과지를 이용하여 여과하고 상등액을 감압 및 농축한 후에 동결건조하여 황칠나무 열수 추출물을 수득하였다.The leaves, branches and roots were separated and dried to remove moisture. Each part of the water - removed Hwangchu - wood was uniformly pulverized and powdered, and water was added to the Hwangchu - wood powder at 20 times volume and extracted at 120 ℃ for 4 hours. After filtration using a filter paper, the supernatant was decompressed and concentrated, and then lyophilized to obtain a hydrothermal extract.

<황칠나무 분획물의 제조>&Lt; Preparation of fragrant wood fractions >

건조된 황칠나무 열수 추출물 200g에 증류수와 헥산(hexane)을 1:1 부피비로 첨가한 후, 물층과 헥산 층으로 분리되면 헥산층을 수득하는 방법으로 1차 분획하였다. 상기 헥산층이 분리되고 남은 물층에 1:1 부피비로 클로로포름(chloroform)을 첨가하여, 물층과 클로로포름층으로 분리되면 클로로포름층을 수득하는 방법으로 2차 분획하였다. 상기 클로로포름층이 분리되고 남은 물층에 1:1 부피비로 에틸아세테이트(ethylacetate)를 가해, 물층과 에틸아세테이트층으로 분리되면 에틸아세테이트층을 수득하는 방법으로 3차 분획하였다. 상기 에틸아세테이트층이 분리되고 남은 물층에 1:1 부피비로 부탄올(buthanol)을 첨가하여, 물층과 부탄올층으로 분리된 후 각 층을 수득하는 방법으로 4차 분획하였다. 상기에서 얻은 각 분획물을 증발시켜 농축시킴으로써, 극성 정도가 상이한 황칠나무의 헥산 분획물, 클로로포름 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 물 분획물을 수득하였다.Distilled water and hexane were added in a volume ratio of 1: 1 by volume to 200 g of the dried Hwangchu tree hydrothermal extract, and the water layer and the hexane layer were separated into a first fraction and a hexane layer. The hexane layer was separated and chloroform was added in a volume ratio of 1: 1 to the remaining water layer. When the water layer and the chloroform layer were separated, a second fraction was obtained by a method of obtaining a chloroform layer. The chloroform layer was separated, and ethyl acetate was added to the remaining water layer in a volume ratio of 1: 1. When the water layer and ethyl acetate layer were separated, a third fraction was obtained by a method of obtaining an ethyl acetate layer. The ethylacetate layer was separated, and butanol was added to the remaining water layer in a volume ratio of 1: 1, followed by separation into a water layer and a butanol layer, followed by the fourth step of obtaining each layer. Each of the fractions obtained above was evaporated and concentrated to obtain hexane fraction, chloroform fraction, ethyl acetate fraction, butanol fraction and water fraction of Hwanghaek tree having different degrees of polarity.

<황칠나무 열수 추출물의 혈중 테스토스테론 분비 증가 효과 측정><Measurement of the increase of testosterone secretion in the blood of Hwangchulchae hydrothermal extract>

황칠나무 열수 추출물의 in vivo 레벨에서의 남성호르몬 분비 증가 효과는 노령의 수컷 쥐를 이용하여 확인하였다. 생후 6개월령 스프라그-다우리(Sparague-Dawley) 계통의 웅성 흰쥐를 1주일간 적응시킨 뒤, 황칠나무 열수 추출물(50, 100 및 200mg/kg)을 투여한 실험군과 투여하지 않은 대조군으로 나누어 실험에 사용하였다. 동물실험실의 사육조건은 온도 23±1℃, 습도 45±5%, 명암은 12시간 주기로 자동 조명 조절하고, 물과 식이는 자유롭게 섭취시켰다. The increase of male hormone secretion in the in vivo level of hydrothermal extract of P. japonicus was confirmed by using male rats of old age. The experimental group was divided into two groups. One group was Sprague-Dawley male rats aged 6 months, and the other group was a control group. Respectively. The experimental animals were kept in a temperature of 23 ± 1 ℃, humidity of 45 ± 5%, 12 hours of light intensity, and water and diet were freely consumed.

실험군은 3개 그룹으로 구분하고, 각 그룹별로 다른 농도로 황칠나무 열수 추출물을 경구투여하였다. 실험군은 그룹별로 황칠나무 열수 추출물을 50, 100 또는 200mg/kg 농도로 증류수에 녹여 매일 오전 같은 시간에 경구투여하였으며, 대조군은 동량의 증류수를 경구투여하였다. 4주(28일)간 경구투여하고 절식시킨 후 마지막 경구 투여하고 혈액을 채취하였으며, 채취한 혈액은 4000rpm에서 10분간 원심분리하여 혈청을 분리하였다. 분리된 혈청을 대상으로 Testosterone ELISA kit(ADI-900-065, ENZO Life Sciences, U.S.A)를 이용하여 테스토스테론 함량을 측정하고 그 결과를 도 1에 도시하였다. The experimental group was divided into three groups, and each group was orally administered the extract of Hwangchu - kogyo with different concentrations. In the experimental group, the extracts of Hwangjak tree were dissolved in distilled water at a concentration of 50, 100 or 200 mg / kg and then administered orally at the same time of day. Oral administration of the same amount of distilled water was performed in the control group. After oral administration and fasting for 4 weeks (28 days), blood was collected for the last oral administration. The collected blood was centrifuged at 4000 rpm for 10 minutes to separate the serum. Testosterone ELISA kit (ADI-900-065, ENZO Life Sciences, U.S.A) was used to measure the testosterone content in the separated serum. The results are shown in FIG.

도 1에서, 측정된 결과는 평균과 표준오차로 표기하고, 통계적 유의성 검증은 Student's t-test 분석법을 이용하여 p값이 0.05 미만(p<0.05)인 경우를 통계학적으로 유의하다고 보았다. 이는 하기 도 2 내지 9에도 동일하게 적용된다. 또한, 도 1에서 대조군은 control로, 실험군은 DM 50, DM100 및 DM200으로 각각 표기하였으며, 각 실험군의 숫자는 황칠나무 열수 추출물의 농도(단위 mg/kg)를 의미한다. 이는 하기 도 2 내지 5에도 동일하게 적용된다.In Fig. 1, the measured results were expressed as mean and standard error. Statistical significance was evaluated statistically by using Student's t-test for p <0.05 (p <0.05). This is also applied to Figs. 2 to 9 described below. In FIG. 1, the control group was denoted by control, and the experimental group was denoted by DM 50, DM100, and DM200, respectively. The number of each test group means the concentration (unit mg / kg) This is also applied to FIGS. 2 to 5 as follows.

도 1을 참고하면, 황칠나무 열수 추출물을 4주간 경구투여한 모든 실험군에서 대조군에 비해 혈중 테스토스테론 함량이 농도 의존적으로 유의성 있게 증가하는 것으로 나타났다(p>0.05, p<0.01). 이를 통하여, 황칠나무 열수 추출물이 체내에서 테스토스테론 분비를 증가시킨 것을 확인할 수 있다.Referring to FIG. 1, blood testosterone levels were significantly increased in all the experimental groups administered orally for 4 weeks (p> 0.05, p <0.01) compared to the control group. Through this, it can be confirmed that the hydrothermal extract of Huangchu tree increased testosterone secretion in the body.

<황칠나무 열수 추출물의 SHBG 억제 효과 측정><Measurement of inhibitory effect of SHBG on hydrothermal extract of Hwangchulchae>

황칠나무 열수 추출물의 SHBG의 농도 억제 효과를 확인하기 위하여 상기의 '황칠나무 열수 추출물의 테스토스테론 분비량 증가 효과 측정' 실험에서 분리된 대조군 및 실험군의 혈청을 대상으로 SHBG kit(Cloud-Clone Corp, USA)를 이용하여 혈중 SHBG 함량을 측정하고 그 결과를 도 2에 도시하였다.The SHBG kit (Cloud-Clone Corp., USA) was used for the control and experimental group sera from the experiment of measuring the effect of increasing the testosterone secretion amount of the hot-water extract of Hwangchulchae, Was used to measure the SHBG content in blood and the results are shown in Fig.

도 2를 참고하면, 황칠나무 열수 추출물을 4주간 경구투여한 모든 실험군에서 대조군에 비해 혈중 SHBG 함량이 감소하는 것으로 나타났다(p<0.05 및 p<0.01). 황칠나무 열수 추출물은 체내에서 SHBG 농도를 저하시킴으로써 테스토스테론 활성을 증가시킬 수 있다.Referring to FIG. 2, the SHBG content in blood was decreased in all the experimental groups administered orally for 4 weeks, compared with the control group (p <0.05 and p <0.01). Hydrothermal extract of Hwangchuang can increase the testosterone activity by decreasing SHBG concentration in the body.

<황칠나무 열수 추출물의 FSH 및 LH의 분비 증가 효과 측정><Determination of FSH and LH secretion increase effect of DHW extract>

황칠나무 열수 추출물의 성선자극 호르몬의 증감에 미치는 효과를 확인하기 위하여 상기의 '황칠나무 열수 추출물의 테스토스테론 분비량 증가 효과 측정' 실험에서 분리된 대조군 및 실험군의 혈청을 대상으로 혈중 FSH 및 LH 함량을 각각 측정하고 그 결과를 도 3에 도시하였다.In order to confirm the effect of the hydrothermal extract of Hwangchulchae on the increase and decrease of the gonadotropin, serum FSH and LH contents of the control and experimental groups isolated from the above test of " And the results are shown in Fig.

도 3을 참고하면, 황칠나무 열수 추출물을 4주간 경구투여한 모든 실험군에서 대조군에 비해 혈중 FSH 및 LH 함량이 농도의존적으로 증가하는 것으로 나타났다. 황칠나무 열수 추출물은 체내 성선자극 호르몬의 분비를 촉진시켜 정자의 분화 및 성숙을 유도하고 테스토스테론 분비를 촉진하여, 남성 갱년기 증후군으로 인한 정력 감소 증상을 완화시킬 수 있다.3, the serum FSH and LH contents were increased in a dose-dependent manner in all the experimental groups administered orally for 4 weeks, compared with the control group. Hwangchu tree hydrothermal extract promotes the secretion of gonadotropin in the body, induces differentiation and maturation of sperm, promotes testosterone secretion, and alleviates symptoms of diminished vigor due to male menopausal syndrome.

<황칠나무 열수 추출물의 DHEA-s 분비 증가 효과 측정><Measurement of DHEA-s secretion increase effect of DHW extract>

황칠나무 열수 추출물의 DHEA-s 분비에 미치는 효과를 확인하기 위하여 상기의 '황칠나무 열수 추출물의 테스토스테론 분비량 증가 효과 측정' 실험에서 분리된 대조군 및 실험군의 혈청을 대상으로 DHEA-s kit(Fine Biological Technology, Hubei)를 이용하여 혈중 DHEA-s 함량을 측정하고 그 결과를 도 4에 도시하였다.In order to confirm the effect of DHEA-s on DHEA-s secretion, DHEA-s kit (Fine Biological Technology) was used for the control and experimental group sera isolated from the experiment of measuring the increase of testosterone secretion amount of the DHEA extract. , Hubei), and the results are shown in FIG.

도 4를 참고하면, 황칠나무 열수 추출물을 4주간 경구투여한 모든 실험군에서 대조군에 비해 혈중 DHEA-s 함량이 농도의존적으로 증가하는 것으로 나타났다(p<0.05). Referring to FIG. 4, DHEA-s content in blood was increased in a dose-dependent manner in all experimental groups administered orally for 4 weeks, compared with the control group (p <0.05).

<황칠나무 열수 추출물의 피로감, 근력저하 및 운동능력 개선 효과 측정><Measurement of fatigue, muscle weakness and exercise capacity improvement effect of hot water extract of Hwangchil tree>

황칠나무 열수 추출물의 피로감, 근력저하 및 운동능력 개선 효과는 트레드밀(treadmill) 운동장치를 이용하여 측정하였다. 대조군 및 실험군은 상기 '황칠나무 열수 추출물의 테스토스테론 분비량 증가 효과 측정' 실험과 동일한 방법으로 증류수 또는 황칠나무 열수 추출물을 경구투여하여 실험에 이용하였다. 트레드밀 운동장치의 회전롤 회전속도는 20rpm으로 하고, 각도는 지상과 20°의 각도로 전기자극판 쪽으로 기울게 하였다. 투여 마지막날에 10분간 적응 훈련을 시켰으며, 24시간후, 동일한 속도로 회전하는 트레드밀 운동장치 위에 쥐들을 올려 달리도록 하고, 쥐들이 탈진하여 더이상 달리지 못하는 한계시점까지를 운동시간으로 설정하여 황칠나무 열수 추출물의 항피로 효과 활성을 측정하였다. 측정된 결과는 도 5에 도시하였다.The fatigue, muscle weakness and exercise capacity of Hwangchilga were investigated using a treadmill exercise machine. Control and experimental groups were orally administered with distilled water or hot water extract of Hwangchuok tree in the same manner as in the experiment for measuring the increase of testosterone secretion amount of the hot water extract of Hwangchuok tree. The rotational speed of the rotating roll of the treadmill exercise device was set to 20 rpm, and the angle was inclined toward the electric stimulating plate at an angle of 20 degrees with the ground. On the last day of the administration, adaptive training was given for 10 minutes. After 24 hours, the rats were put on a treadmill exercise machine rotating at the same speed, and the exercise time was set up to the limit point where the rats could not run anymore, The anti - fatigue activity of the hot - water extract was measured. The measured results are shown in Fig.

도 5를 참고하면, 황칠나무 열수 추출물을 4주간 경구투여한 모든 실험군에서 대조군에 비해 트레드밀 운동시간이 유의미하게 증가하는 것으로 나타났다(p<0.05). 이를 통하여, 황칠나무 열수 추출물이 남성 갱년기로 인한 피로감, 근력저하 및 운동능력 저하에 대한 개선 효과를 가지는 것을 확인할 수 있다.5, the treadmill exercise time was significantly increased in all experimental groups administered orally for 4 weeks, compared with the control group (p <0.05). The results showed that the extract of Hwangchulchae hydrothermal extract had an improvement effect on the fatigue, muscle weakness and decrease in exercise capacity due to menopausal period.

<황칠나무 열수 추출물의 세포독성 측정><Cytotoxicity measurement of hot-water extract of Hwangchil tree>

본 발명의 황칠나무 열수 추출물이 세포에 독성을 나타내지 않는 것을 확인하고, 세포 사멸을 유도하지 않으면서 효과를 낼 수 있는 적합한 처리농도를 결정하기 위해 세포 독성 검사를 수행하였다. 황칠나무 열수 추출물의 세포 독성은 쥐의 고환에서 유래하며 남성 호르몬인 테스토스테론을 분비하는 라이디히 세포인 TM3 세포주를 대상으로 측정하였다. TM3 세포는 DMEM에 10% FBS 및 1% penicillin/streptomycin을 첨가한 배지에서 37℃, 5% CO2 조건에서 배양한 것을 사용하였다.The cytotoxicity test was conducted in order to confirm that the extract of Huangchu tree hydrothermal extract of the present invention does not show toxicity to cells and to determine an appropriate treatment concentration capable of effecting induction without inducing apoptosis. The cytotoxicity of the extract of Hwangchulchae was determined in TM3 cell line, which is a Lydia cell which secretes testosterone derived from rat testis and a male hormone. TM3 cells were cultured in DMEM supplemented with 10% FBS and 1% penicillin / streptomycin at 37 ° C and 5% CO 2 .

TM3 세포를 96-well plate에 1×105cells/mL 농도로 넣고 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하였다. 황칠나무 열수 추출물을 0, 1, 3, 10, 30 및 100 μg/mL농도로 각 well에 처리하고 24시간동안 배양하였다. MTT 용액을 첨가하고 3시간이 지난 후 상층액을 제거하고 DMSO를 well당 100 μL씩 첨가한 후 ELISA reader를 이용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하고 그 결과를 도 6에 도시하였다. TM3 cells were cultured in a 96-well plate at a concentration of 1 × 10 5 cells / mL at 37 ° C and 5% CO 2 . The extracts were treated at 0, 1, 3, 10, 30 and 100 μg / mL for 24 h. MTT solution was added. After 3 hours, the supernatant was removed, and 100 μL of DMSO was added to each well. Absorbance was measured at 540 nm using an ELISA reader. The results are shown in FIG.

도 6을 참고하면, 황칠나무 열수 추출물은 처리한 모든 농도에서 TM3 세포에 대해 세포독성을 나타내지 않는 것을 확인할 수 있다.Referring to FIG. 6, it can be confirmed that the extract of Hwangcholga extract does not show cytotoxicity against TM3 cells at all concentrations treated.

<황칠나무 열수 추출물이 TM3세포에서 테스토스테론 분비 증가에 미치는 효과 측정><Effect of hydrothermal extract of Hwangchu tree on the increase of testosterone secretion in TM3 cells>

황칠나무 열수 추출물의 in vitro 레벨에서의 남성호르몬 분비 증가 효과는 마우스의 라이디히 세포인 TM3세포를 이용하여 확인하였다. TM3 세포를 24-well plate에 1×105cells/mL 농도로 넣고 37℃, 5% CO2 조건에서 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 배양하였다. 황칠나무 열수 추출물을 0, 1, 3, 10, 30 및 100 μg/mL농도로 각 well에 처리하고 24시간동안 배양한 후에, 상층액을 취하여 Testosterone ELISA kit(ADI-900-065, ENZO Life Sciences, U.S.A)를 이용하여 테스토스테론 함량을 측정하고 그 결과를 도 7에 도시하였다. The increase of male hormone secretion at the in vitro level of hydrothermal extract of Hwangchulchae was confirmed by using TM3 cells, Lydia cells of mouse. TM3 cells were inoculated into a 24-well plate at a concentration of 1 × 10 5 cells / mL and cultured in DMEM supplemented with 10% FBS at 37 ° C and 5% CO 2 . The testosterone ELISA kit (ADI-900-065, ENZO Life Sciences, Inc.) was used to collect the supernatant after 24 hours of incubation at 0, 1, 3, 10, 30 and 100 μg / , USA) was used to measure the testosterone content, and the results are shown in FIG.

도 7을 참고하면, 황칠나무 열수 추출물을 처리한 모든 실험군에서 테스토스테론 분비가 농도의존적으로 유의성있게 증가하는 것을 확인할 수 있다(p<0.05).Referring to FIG. 7, it can be seen that testosterone secretion was significantly increased in all the experimental groups treated with the extract of Hwangchu-kogyo (FIG. 7) in a concentration-dependent manner (p <0.05).

<황칠나무 열수 추출물이 과산화수소 유도 조건하에 TM3세포에서 테스토스테론 분비 증가에 미치는 효과 측정><Determination of the effect of hydrothermal extract of Hwangchulchae on the increase of testosterone secretion in TM3 cells under hydrogen peroxide induction condition>

TM3 세포를 24-well plate에 1×105cells/mL 농도로 넣고 37℃, 5% CO2 조건에서 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 배양하였다. 황칠나무 열수 추출물을 0, 1, 3, 10, 30 및 100 μg/mL농도로 각 well에 처리하고 H2O2를 200μM 농도로 각 well에 처리하여 24시간동안 배양한 후에, 상층액을 취하여 Testosterone ELISA kit(ADI-900-065, ENZO Life Sciences, U.S.A)를 이용하여 테스토스테론 함량을 측정하고 그 결과를 도 8에 도시하였다.TM3 cells were inoculated into a 24-well plate at a concentration of 1 × 10 5 cells / mL and cultured in DMEM supplemented with 10% FBS at 37 ° C and 5% CO 2 . The extracts were treated at 0, 1, 3, 10, 30, and 100 μg / mL concentration, and H 2 O 2 was treated at 200 μM for 24 hours. The testosterone content was measured using a testosterone ELISA kit (ADI-900-065, ENZO Life Sciences, USA) and the results are shown in FIG.

도 8을 참고하면, 과산화수소 세포독성이 유도된 TM3 세포의 테스토스테론 농도는 H2O2 처리하지 않은 군(control)에 비해 테스토스테론 분비량이 유의성 있게 감소하였으며(p<0.05), H2O2 및 황칠나무 열수 추출물을 동시 처리하는 경우에는 테스토스테론 분비량이 농도의존적으로 증가하는 것을 확인하였다(p<0.05, p<0.01 및 p<0.001). Referring to FIG. 8, the hydrogen peroxide testosterone concentration of TM3 cell cytotoxicity induced was decreased testosterone secretion is significant compared to the group (control) was not treated H 2 O 2 (p <0.05 ), H 2 O 2 and hwangchil (P <0.05, p <0.01 and p <0.001), respectively, in the case of simultaneous treatment of hot water extracts of trees.

<황칠나무 분획물이 과산화수소 유도 조건하에 TM3세포에서 테스토스테론 분비 증가에 미치는 효과 측정><Determination of Effect of Foliar Trees on Increase of Testosterone Secretion in TM3 Cells under Hydrogen Peroxide Induction Condition>

TM3 세포를 24-well plate에 1×105cells/mL 농도로 넣고 37℃, 5% CO2 조건에서 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지를 이용하여 배양하였다. 황칠나무의 헥산 분획물, 클로로포름 분획물, 에틸아세테이트 분획물, 부탄올 분획물 및 물 분획물을 0, 1, 3 및 10 μg/mL농도로 각 분획별 및 농도별로 구분하여 well에 처리하고, H2O2를 200μM 농도로 각 well에 처리하여 24시간동안 배양한 후에, 상층액을 취하여 Testosterone ELISA kit(ADI-900-065, ENZO Life Sciences, U.S.A)를 이용하여 테스토스테론 함량을 측정하고 그 결과를 도 9에 도시하였다. 참고로, 도 9에서 각 분획물은 해당 용매의 층으로 표기하였다. 예를들면, 도 9의 헥산층은 헥산 분획물을 의미하고, 물층은 4차 분획후 남은 물 분획물을 의미한다.TM3 cells were inoculated into a 24-well plate at a concentration of 1 × 10 5 cells / mL and cultured in DMEM supplemented with 10% FBS at 37 ° C and 5% CO 2 . The hexane fraction, the chloroform fraction, the ethylacetate fraction, the butanol fraction and the water fraction of Hwangchulchu were classified into 0, 1, 3 and 10 μg / mL by each fraction and concentration and treated with 200 μM H 2 O 2 , And then the supernatant was taken and the testosterone content was measured using a Testosterone ELISA kit (ADI-900-065, ENZO Life Sciences, USA). The results are shown in FIG. 9 . For reference, in FIG. 9, each fraction was indicated as a corresponding solvent layer. For example, the hexane layer in Figure 9 refers to the hexane fraction and the water layer refers to the water fraction remaining after the fourth fraction.

도 9를 참고하면, 과산화수소 세포독성이 유도된 TM3 세포의 테스토스테론 농도는 H2O2 처리하지 않은 군(control)에 비해 테스토스테론 분비량이 유의성 있게 감소하였으며, H2O2 및 황칠나무 분획물을 동시 처리하는 경우에는 테스토스테론 분비량이 농도의존적으로 증가하는 것을 확인하였다(p<0.01 및 p<0.001). 황칠나무 분획물 중에서 에틸아세테이트(EtOAc) 분획물이 다른 분획물에 비해 우수한 효과를 가지는 것으로 나타났다.9, the testosterone concentration of TM3 cells induced by H 2 O 2 cytotoxicity was significantly lower than that of control without H 2 O 2 , and the testosterone secretion was significantly decreased, while the H 2 O 2 and Houttuynia chinensis fractions were simultaneously treated (P <0.01 and p <0.001), respectively. Ethyl acetate (EtOAc) fractions were found to be more effective than other fractions of Hwanyeong tree fractions.

Claims (8)

황칠나무(Dendropanax morbifera Lev .) 열수 추출물 또는 황칠나무 열수 추출물로부터 분획된 황칠나무 분획물을 유효성분으로 함유하는 피로감, 근력저하 또는 운동능력 저하로부터 선택된 남성 갱년기 증상 개선용 기능성 식품 조성물.
Dendropanax morbifera Lev . ) A functional food composition for improving male menopausal symptoms selected from fatigue, muscle weakness or athletic ability deprivation containing hot water or hot pepper extract fraction as an active ingredient.
제 1항에 있어서,
상기 황칠나무 열수 추출물은 황칠나무에 5 내지 30배 부피의 물을 첨가하고 3 내지 6시간동안 100 내지 130℃온도에서 추출하여 제조되는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 증상 개선용 기능성 식품 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the water extract of Huangchu tree is prepared by adding 5 to 30 times volume of water to Huaculi tree and extracting at 100 to 130 ° C for 3 to 6 hours.
제 1항에 있어서,
상기 황칠나무 분획물은 황칠나무 열수 추출물을 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 및 부탄올로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 분획용매로 분획하여 얻어지는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 증상 개선용 기능성 식품 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the extract is obtained by fractionating at least one member selected from the group consisting of hexane, chloroform, ethyl acetate and butanol with a fraction solvent to obtain a functional food composition for improving the menopausal symptom.
제 1항에 있어서,
상기 황칠나무 분획물은 황칠나무 열수 추출물을 헥산, 클로로포름 및 에틸아세테이트로 순차 분획하여 얻어지는 에틸아세테이트 분획물인 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 증상 개선용 기능성 식품 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the fragrant woody fraction is an ethyl acetate fraction obtained by successively fractionating the extract of Fusarium oxysporum horticulture with hexane, chloroform and ethyl acetate.
제 1항에 있어서,
식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제, 담체, 부형제 및 희석제로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 증상 개선용 기능성 식품 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the composition further comprises at least one selected from the group consisting of a pharmaceutically acceptable food-aid additive, a carrier, an excipient and a diluent.
제 1항에 있어서,
과립, 분말, 정제, 캡슐, 액상의 용액 및 환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형으로 제조된 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 증상 개선용 기능성 식품 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the active ingredient is at least one selected from the group consisting of granules, powders, tablets, capsules, liquid solutions and rings.
제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항의 기능성 식품 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 증상 개선용 기능성 식품 첨가제.
A functional food additive for improving menopausal symptom, which comprises the functional food composition according to any one of claims 1 to 6.
제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항의 기능성 식품 조성물을 포함하는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 증상 개선용 건강 기능성 식품.
A health functional food for improving menopausal symptoms characterized by comprising the functional food composition of any one of claims 1 to 6.
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