KR101501381B1 - A composition comprising Dracontomelon Macrocarpum extracts having anti-obesity activity - Google Patents

A composition comprising Dracontomelon Macrocarpum extracts having anti-obesity activity Download PDF

Info

Publication number
KR101501381B1
KR101501381B1 KR20130126237A KR20130126237A KR101501381B1 KR 101501381 B1 KR101501381 B1 KR 101501381B1 KR 20130126237 A KR20130126237 A KR 20130126237A KR 20130126237 A KR20130126237 A KR 20130126237A KR 101501381 B1 KR101501381 B1 KR 101501381B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
extract
obesity
composition
present
fat
Prior art date
Application number
KR20130126237A
Other languages
Korean (ko)
Inventor
김병우
권현주
박정애
진경숙
현숙경
Original Assignee
동의대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 동의대학교 산학협력단 filed Critical 동의대학교 산학협력단
Priority to KR20130126237A priority Critical patent/KR101501381B1/en
Application granted granted Critical
Publication of KR101501381B1 publication Critical patent/KR101501381B1/en

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/22—Anacardiaceae (Sumac family), e.g. smoketree, sumac or poison oak
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/3262—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having an effect on blood cholesterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A23V2200/332—Promoters of weight control and weight loss

Abstract

The present invention relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating obesity comprising a Dracontomelon macrocarpum (DM) extract as an active ingredient, and to a food additive composition for preventing or improving obesity comprising the DM extract as the active ingredient. The composition comprising the DM extract inhibits differentiation of fat precursor cells into fat cells, and inhibits activities of lipase in pancreas, thereby being useful as the anti-obesity composition. Therefore, the composition comprising the DM extract can be used as the pharmaceutical composition for preventing or treating diseases caused by accumulation of unnecessary fat such as fatty liver or lipid related cardiovascular diseases, or as the food additive composition for preventing or improving obesity.

Description

드라콘토멜론 마크로카펌 추출물을 포함하는 항비만 조성물{A composition comprising Dracontomelon Macrocarpum extracts having anti-obesity activity}A composition comprising Dracontomelon Macrocarpum extracts having anti-obesity activity,

본 발명은 드라콘토멜론 마크로카펌 (Dracontomelon macrocarpum, 이하 DM이라 약칭한다)을 포함하는 항비만 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로 본 발명은 드라콘토멜론 마크로카펌 (Dracontomelon macrocarpum, DM) 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물 및 상기 DM 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 개선용 식품 첨가용 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to an anti-obesity composition comprising Dracontomelon macrocarpum (hereinafter abbreviated as DM). More specifically, the present invention relates to an anti-obesity composition comprising Dracontomelon macrocarpum (DM) A composition for preventing or treating obesity and a composition for preventing or ameliorating obesity comprising the DM extract as an active ingredient.

비만 (obesity) 또는 비만증은 사람의 몸무게가 지나치게 많이 나가는 것을 통틀어 부르는 말로서 병리학적으로는 세계보건기구 (WHO)에서 정한 이른바 표준 몸무게 기준치 (body mass index; BMI)가 30 이상인 경우를 일컫지만 한국에서는 25 이상이면 비만으로 진단한다. 대부분의 경우 체중이 정상치보다 많이 나가는 것을 뜻하지만 체중이 그다지 많이 나가지 않더라도 몸의 구성성분 중 지방의 비율이 높은 경우 비만이라고 한다. 비만은 그 자체로서는 문제가 되지 않을 수도 있으나, 이로 인해 야기되는 사회적 장애 및 과다한 지방으로 유발되는 2차 합병증이 심각하다. 예를 들어 비만은 고지혈증, 고혈압, 동맥경화, 당뇨병, 지방간, 관절이상 등의 발생 비율을 현저하게 증가시킬 수 있다.Obesity or obesity refers to the excess weight of a person's body weight, which is pathologically referred to as the World Health Organization's (WHO) standard body mass index (BMI) of 30 or more. If it is 25 or more, it is diagnosed as obesity. In most cases, weight means more than normal, but even if you do not have a lot of weight, the proportion of fat in your body is high. Obesity may not be a problem in itself, but it has serious social problems and secondary complications caused by excessive fat. For example, obesity can significantly increase the incidence of hyperlipidemia, hypertension, arteriosclerosis, diabetes, fatty liver, joint disorders, and the like.

이와 같이 비만은 각종 성인병의 원인이 된다. 체중이 늘면 혈당처리 능력이 떨어져 당뇨병을 일으키기 쉬우며 고혈압도 발생할 수 있다. 체중이 정상 체중보다 20% 증가되면 당뇨병 발병 가능성은 정상인의 10배로 증가한다. 또한 심장 및 폐 기능이 약해져서 수명이 단축될 수도 있다. 고혈압, 당뇨병, 고콜레스테롤혈증, 동맥경화증 등의 복합적인 요인들이 심장기능에 압박을 주어 심부전증에 빠지고 돌발사를 유발하기도 한다. 여성의 경우는 여기에 더해 자궁내막암의 발병률이 높아지며 담석증이 생길 가능성도 높아진다. 남성에게는 대장암과 전립선암의 발병 확률이 높아진다. 뿐만 아니라, 체중이 증가하면 남들이 자신을 바라보는 시선을 의식하지 않을 수 없고 이에 대한 강박관념이 심해지면 사람들을 기피하고 혼자만 지내려는 증상이 생긴다. 또 신체에서 오는 열등감이 자신의 삶에 대한 자신감을 잃게 하여 자아에까지 영향을 미친다.As such, obesity causes various adult diseases. Increased weight can lead to diabetes and lower blood sugar, which can lead to hypertension. If the body weight is 20% higher than normal weight, the likelihood of developing diabetes increases to 10 times that of normal people. In addition, cardiovascular and pulmonary function may be impaired and life expectancy may be shortened. Complex factors such as hypertension, diabetes, hypercholesterolemia, and atherosclerosis may put pressure on the heart function and lead to heart failure and sudden death. In addition to women, the incidence of endometrial cancer is high, and cholelithiasis is more likely to occur. Men are more likely to develop colon cancer and prostate cancer. In addition, as the weight increases, people can not help but be conscious of the gaze that they are looking at, and if the obsession about it becomes worse, the symptoms of avoiding people and living alone are generated. The inferiority feeling that comes from the body also affects the self by losing confidence in his life.

이러한 비만을 예방하고 건강 체중을 유지하기 위해서는 균형 잡힌 식사와 규칙적인 운동으로 평생 동안 꾸준히 관리해야 한다. 특히 지방세포는 한번 만들어지면 크기는 줄일 수 있지만 자연적으로 제거하는 것은 불가능하여 영구적으로 인체에 남아있게 되므로 처음부터 비만이 되지 않도록 예방하는 것이 중요하다. 따라서 일차적으로는 섭취하는 칼로리의 양을 줄이고 활동 및 운동량을 증가시키는 방법으로 체중을 줄일 수 있다.In order to prevent obesity and maintain a healthy weight, balanced diet and regular exercise should be maintained throughout the lifetime. In particular, fat cells can be reduced in size once they are made, but it is impossible to remove them naturally and it is left permanently in the human body, so it is important to prevent obesity from beginning. Therefore, weight loss can be reduced primarily by reducing the amount of calories consumed and increasing activity and exercise.

그러나 상기한 바와 같이 일단 형성된 지방세포는 제거가 불가능하므로, 다이어트 식이 섭취와 더불어 지방흡수를 감소시키는 등의 약물을 복용하는 경우가 있다. 그러나 이러한 다이어트 약은 고혈압 등의 심혈관계질환 및 뇌졸중과 같은 부작용을 유발할 수 있으며, 복용을 중단할 경우 다시 체중이 증가하는 경우가 빈번하다. 중증 비만의 경우 수술요법을 시행할 수 있으며, 이러한 수술요법으로는 지방을 제거하는 수술이나 몸이 소화할 수 있는 음식량을 제한하기 위한 위성형술 또는 위밴드삽입술 등이 시행되고 있다.
However, as described above, since the fat cells once formed can not be removed, there are cases where a drug such as a diet meal intake and a fat absorption reduction is taken. However, such diet drugs can cause side effects such as cardiovascular disease and stroke, such as hypertension, and frequently increase in weight again when stopped. In the case of severe obesity, surgical treatment can be performed. Such surgery is performed by surgery to remove fat or gastroplasty or gastric banding to limit the amount of food that can be digested by the body.

이러한 배경 하에서, 본 발명자들은 항비만 효과를 나타내면서 부작용이 적은 천연물을 찾고자 예의 연구 노력한 결과, 중국 유래 자생 식물 중 하나인 드라콘토멜론 마크로카펌 (Dracontomelon macrocarpum) 추출물이 지방세포로의 분화를 억제하여 중성지방 생성율을 감소시킬 뿐만 아니라, 췌장 리파아제 효소 활성을 억제시키는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
Under these circumstances, the inventors of the present invention have made intensive studies to find natural products having an anti-obesity effect and low side effects. As a result, it has been found that Dracontomelon macrocarpum extract, one of Chinese native plants, inhibits the differentiation into adipocytes, The present invention has been accomplished by confirming that it inhibits the activity of pancreatic lipase enzyme as well as reducing the fat production rate.

본 발명의 하나의 목적은 드라콘토멜론 마크로카펌 (Dracontomelon macrocarpum) 추출물을 포함하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하는 것이다.It is an object of the present invention to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity comprising Dracontomelon macrocarpum extract.

본 발명의 다른 목적은 상기 드라콘토멜론 마크로카펌 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 개선용 식품 첨가용 조성물을 제공하는 것이다.
It is another object of the present invention to provide a composition for preventing or ameliorating obesity, which comprises the extract of Draconto melon mark Lokamer as an active ingredient.

본 발명자들은 항비만 효과를 나타내면서 부작용이 적은 천연물을 찾고자 다양한 천연물을 대상으로 연구를 수행하던 중, 드라콘토멜론 마크로카펌 (Dracontomelon macrocarpum, DM)에 주목하게 되었다.The present inventors focused on Dracontomelon macrocarpum (DM) while carrying out research on various natural products in order to find a natural product having an anti-obesity effect and a low side effect.

상기 DM을 메탄올로 추출하여 DM 추출물을 제조하고, 상기 DM 추출물의 항비만 효과를 시험한 결과, 상기 DM 추출물은 지방전구세포에 대하여 세포독성을 나타내지 않으면서도, 췌장에서 분비되는 리파아제에 대하여 저해활성을 나타내고, 지방전구세포가 지방세포로 분화되는 것을 억제하고, 지방세포내에서 중성지방의 생성을 억제함을 확인하였다.As a result of testing the anti-obesity effect of the DM extract, the DM extract showed inhibitory activity against the lipase secreted from the pancreas without showing cytotoxicity against the lipid precursor cells, And inhibited the differentiation of adipose precursor cells into adipocytes and inhibited the production of triglycerides in adipocytes.

이처럼, 상기 DM 추출물은 리파아제에 대하여 저해활성을 나타내고, 지방세포의 분화를 억제할 뿐만 아니라 지방세포에서 중성지방의 생성을 억제하는 효과를 나타내므로, 비만의 예방, 치료 또는 개선에 사용될 수 있음을 알 수 있었다.
As described above, the DM extract exhibits an inhibitory activity against lipase and inhibits the differentiation of adipocytes as well as inhibits the production of triglycerides in adipocytes. Therefore, it can be used for preventing, treating or improving obesity Could know.

상기 목적을 달성하기 위한 일 실시양태로서, 본 발명은 DM 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
In one embodiment, the present invention provides a pharmaceutical composition for preventing or treating obesity comprising DM extract as an active ingredient.

본 발명의 용어 "비만 (obesity)"은 체지방이 과도한 상태를 말하는 것으로, 임상적으로 체질량지수가 한국의 경우 25, 세계보건기구 (WHO)에 의하면 30 이상인 경우를 의미한다. 이때 체질량지수 (body mass index; BMI)는 신장의 제곱에 대한 체중 (㎏/m2)으로 계산된다. 일반적으로 체중이 정상치보다 높은 경우를 의미하지만 체중이 많이 나가지 않더라도 몸의 구성성분 중 체지방의 비율이 높은 경우 비만이라고 진단하며, 성인과 어린이 모두에서 발병하는 질환이다. 비만은 생명을 단축시키며, 고혈압, 당뇨, 심장질환 및 일부 암과 같은 질환에 걸릴 위험에 처하게 할 수 있다. 비만인 경우 건강에 문제가 생길 확률이 높으며 비만의 정도가 증가할수록 위험성 또한 높아진다. 비만이 생기는 이유는 매우 다양하며 여러 가지 원인이 복합적으로 작용하는 경우가 많다. 이 중 가장 빈번한 원인은 유전적 영향, 생리적 영향, 음식섭취와 섭식장애, 생활방식, 체중력, 임신, 및 약물 등이다. 비만의 첫 번째 징후는 평균을 웃도는 체중 이상이며 증상은 다음과 같다: 수면문제, 수면무호흡, 호흡 짧아짐, 정맥류, 피부문제, 담석 또는 체중부하로 인한 골관절염 등. 비만은 또한 고혈압을 비롯한 고혈당 (당뇨), 고콜레스테롤혈증, 고중성지방혈증 등의 질환과 관련이 있다. 한번 과체중이 되면 그 상태를 벗어나기가 쉽지 않으므로 비만은 대부분 평생 겪게 된다. 하지만 비만에 의해 생긴 질병이나 문제는 체중이 감소되면 호전될 수 있다.The term "obesity " of the present invention refers to an excessive state of body fat, which means that the body mass index is clinically 25 in the case of Korea and 30 or more according to the World Health Organization (WHO). The body mass index (BMI) is calculated as the body weight (kg / m 2 ) relative to the height of the kidney. Generally, it means that the body weight is higher than the normal value. However, when the body fat percentage of the body composition is high, even if the body weight does not go out, it is diagnosed as obesity. Obesity can shorten life and put you at risk for diseases like hypertension, diabetes, heart disease and some cancers. Obesity is likely to cause health problems, and as the degree of obesity increases, the risk also increases. Obesity is caused by a wide variety of reasons and many causes are often combined. The most frequent causes are genetic influences, physiological effects, food intake and eating disorders, lifestyle, weight, pregnancy, and medications. The first signs of obesity are above average weight, and the symptoms are: sleep problems, sleep apnea, shortness of breath, varicose veins, skin problems, osteoarthritis caused by gallstones or weight loss, Obesity is also associated with diseases such as hypertension, hyperglycemia (diabetes), hypercholesterolemia, and hypertriglyceridemia. Once you are overweight, it is not easy to get out of it, so obesity is a lifelong experience. However, diseases or problems caused by obesity can improve if weight is reduced.

이하 본 발명에서는 "항비만 (anti-obesity)" 이라는 용어를 비만 예방, 치료 또는 개선을 모두 포함하는 의미로 사용한다. 이에 따라, 본 발명에서 사용되는 "항비만 조성물"이라는 용어는 상기 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물을 의미한다.Hereinafter, the term "anti-obesity " is used in the present invention to mean prevention, treatment, or improvement of obesity. Accordingly, the term "anti-obesity composition" used in the present invention means a pharmaceutical composition for preventing or treating obesity.

본 발명에서, 용어 "예방"이란 본 발명에 따른 약학적 조성물의 투여에 의해 비만의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하고, "치료"란 상기 약학적 조성물의 투여에 의해 비만의 의심 및 발병 개체의 증상이 호전되거나 이롭게 변경하는 모든 행위를 의미한다.
In the present invention, the term "prevention" means any action which inhibits or delays the onset of obesity by the administration of the pharmaceutical composition according to the present invention, and "treatment" Means any action that alters or alleviates symptoms of an onset individual.

본 발명의 용어 "드라콘토멜론 마크로카펌 (Dracontomelon macrocarpum, DM)"은 아나카르디아시에 (Anacardiaceae) 과에 속하는 종자식물이다. 캄보디아, 베트남, 중국 남부에 분포한다. DM이 속하는 드라콘토멜론 중에 가장 일반적으로 식용하는 종은 드라콘토멜론 듀퍼레아넘 (Dracontomelon duperreanum)이며, 캄보디아, 베트남, 중국에서 식용되는 과일을 생산한다. DM의 일반적인 높이는 18 미터이고, 말단의 작은 가지는 회색에서 갈색이며, 가지에서 돋아 나오는 하얀 피목과 함께 미세하게 부드러운 짧은 털로 덮여 있거나 털 없이 매끈하게 돋아 있다. 잎자루와 잎대는 얇고 매끄러운 원통형이며, 회색에서 노란색의 털이 나기 시작한다. 잎새는 50 ㎝까지 자라며, 추가의 작은 잎이 있기 때문에 잎자루가 뻗어 자란 깃축의 좌우에 작은 잎이 달려 좌우 대칭의 깃모양 우상복엽을 이루고 있지 않다. 작은 잎꼭지는 4-6 ㎜이며, 자세히 보면 회색으로 털이 나기 시작하며, 위쪽으로 홈이 파져 있다. 작은 잎꼭지 잎새는 길쭉하며, 매우 비대칭적으로 대략 9 x 2.5 ㎝ 정도이다. DM은 아직까지 구체적인 효능에 대해서는 알려진 바가 없으며, 특히 항비만 효과에 대해서는 전혀 알려진 바가 없었다. 이에 본 발명자들은 상기 DM 추출물이 항비만 효과가 있음을 확인하고, 이를 식품 또는 의약품에 적용할 수 있음을 확인하였다.
The term " Dracontomelon macrocarpum ( DM) "of the present invention is a seed plant belonging to the family Anacardiaceae . It is distributed in Cambodia, Vietnam and southern China. Among the Draconto melons to which the DM belongs, the most commonly edible species is Draconomonon duperreanum , which produces edible fruits in Cambodia, Vietnam and China. The typical height of DM is 18 meters, the small branch at the end is gray to brown, covered with finely soft short hair with smooth white sprouting from the branches, or smooth hairless. The petiole and leaf stand are thin and smooth cylindrical, gray to yellow hairs begin to appear. Leaves grow up to 50 ㎝, and there are additional small leaves, so there are small leaves on the left and right sides of the feathers growing on the petiole, and they do not form symmetrical pinnate leaves. The small petals are 4-6 ㎜ in size, and when viewed in detail, they begin to gray in color and have grooves on the top. The petiole leaflets are elongated and very asymmetrically about 9 x 2.5 cm. DM has not yet been known for its specific efficacy, especially for its anti-obesity effect. Thus, the present inventors confirmed that the DM extract had an anti-obesity effect and could apply it to foods or medicines.

본 발명의 용어 "추출물"은 생약을 적절한 침출액으로 짜내고 침출액을 증발시켜 농축한 제제를 의미하는 것으로, 이에 제한되지는 않으나, 추출처리에 의해 얻어지는 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다.The term "extract " of the present invention means a preparation which is obtained by squeezing a herbal medicine with an appropriate leaching solution and concentrating the liquid by evaporating the leaching solution, and is not limited thereto. The extract is obtained by drying the extract, diluted solution, Dried products, controlled products thereof or purified products thereof.

본 발명에 있어서, 상기 추출물은 추출용매로 추출하거나 추출용매로 추출하여 제조한 추출물에 분획용매를 가하여 분획함으로써 제조할 수 있다. 상기 추출용매는 이에 제한되지는 않으나, 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매 등을 사용할 수 있으며, 상기 유기용매는 탄소수 1 내지 4의 알코올이나, 에틸아세테이트 또는 아세톤 등의 극성용매, 헥산 또는 디클로로메탄의 비극성용매 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 또한, 바람직하게는 물, 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매를 사용할 수 있다. 본 발명의 일 실시예에서는 상기 용매로서 95% 메탄올을 이용한 추출물을 제조하였다.In the present invention, the extract may be prepared by extracting with an extraction solvent or extracting with an extraction solvent, followed by fractionation with a fraction solvent. The extraction solvent may be, but is not limited to, water, an organic solvent or a mixed solvent thereof. The organic solvent may be an alcohol having 1 to 4 carbon atoms, a polar solvent such as ethyl acetate or acetone, hexane or dichloromethane Non-polar solvents or mixed solvents thereof may be used. Further, water, an alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof may be preferably used. In one embodiment of the present invention, an extract using 95% methanol as the solvent was prepared.

상기 DM 추출물은 당업계에 공지된 일반적인 추출방법, 분리 및 정제방법을 이용하여 제조할 수 있다. 상기 추출방법으로는, 이에 제한되지는 않으나, 바람직하게 열탕 추출, 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 방법을 사용할 수 있다.
The DM extract can be prepared by using common extraction, isolation and purification methods known in the art. The extraction method may be, but not limited to, hot water extraction, hot water extraction, cold extraction, reflux cooling extraction, or ultrasonic extraction.

본 발명의 용어 “드라콘토멜론 마크로카펌 (DM) 추출물”은 DM의 다양한 부분, 즉 DM의 잎, 줄기 및 꽃 중 일부 또는 전부를 포함하는 시료로부터 추출하여 수득한 추출물을 의미한다.
The term " Draconto melon marcormacum (DM) extract " of the present invention means an extract obtained by extracting various parts of DM, that is, a sample containing some or all of leaves, stems and flowers of DM.

본 발명의 구체적인 일 실시예에 의하면 (실시예 1), 본 발명의 DM 추출물은 일정 중량의 DM을 분말로 파쇄하고 5 내지 10배의 용매를 가하여 추출하였다. 용매로는 유기용매를 사용할 수 있으며, 상기 유기용매는 C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매일 수 있고, 바람직하게는 메탄올일 수 있다. 또한 상기 추출은 바람직하게 65 내지 85 ℃의 온도에서 수행될 수 있으며, 보다 바람직하게 75 ℃에서 수행될 수 있다. 상기 추출은 수회 반복하여 수행되었으며, 추출한 시료는 여과 후 감압농축기로 농축하고 동결 건조하였다.
According to one embodiment of the present invention (Example 1), the DM extract of the present invention is prepared by disintegrating a certain amount of DM into powder and extracting it with 5 to 10 times of a solvent. As the solvent, an organic solvent may be used, and the organic solvent may be a C1 to C4 lower alcohol or a mixture thereof, preferably methanol. Further, the extraction can be preferably carried out at a temperature of 65 to 85 캜, and more preferably at 75 캜. The extraction was repeated several times, and the extracted sample was filtered, concentrated by a vacuum concentrator, and lyophilized.

본 발명의 다른 일 실시예에 의하면 (실시예 2), DM 추출물의 농도별 처리를 통하여, 본 발명의 DM 추출물이 리파아제의 활성을 농도 의존적으로 유의적으로 억제시키는 것을 확인하였다(도 1). 리파아제의 활성이 억제되면 음식물을 통해 섭취된 지방의 체내 유입을 억제할 수 있으므로, 결과적으로는 비만을 예방 또는 치료하는 효과를 나타낼 수 있다.
According to another embodiment of the present invention (Example 2), it was confirmed that the DM extract of the present invention significantly inhibited the lipase activity in a concentration-dependent manner through treatment of the concentration of DM extracts (Fig. 1). When the activity of lipase is inhibited, the inflow of the fat ingested through the food can be inhibited, and consequently, the effect of preventing or treating obesity can be exhibited.

본 발명의 또다른 일 실시예에 의하면 (실시예 3), 본 발명의 항비만 조성물은 생체에서 안전하게 사용할 수 있는 지 여부를 확인하였다. 구체적으로 DM 추출물의 세포 독성 분석을 실시하여 세포 생존율을 담체를 처리한 대조군에 대한 %로 나타낸 결과, DM 추출물은 100 ㎍/㎖의 농도 까지 세포 독성을 전혀 유발하지 않는 안전한 물질임을 확인하였다 (도 2).
According to another embodiment of the present invention (Example 3), it has been confirmed whether the anti-obesity composition of the present invention can be safely used in vivo. Specifically, the cytotoxicity analysis of DM extracts was performed and the cell survival rate was expressed as a percentage of the control group treated with the carrier. As a result, it was confirmed that the DM extract was a safe substance which did not induce any cytotoxicity up to a concentration of 100 μg / ml 2).

본 발명의 또 다른 일 실시예에 의하면 (실시예 5), 본 발명의 항비만 조성물이 지방생성관련 단백질에 어떠한 영향을 미치는지 분석하였다. 구체적으로, DM 추출물을 다양한 농도로 처리한 지방세포에서 지방생성에 관여하는 핵심 인자인 C/EBPα, C/EBPβ 및 PPARγ의 발현량을 웨스턴 블럿 분석을 통해 분석함으로써, DM 추출물의 처리농도에 따른 C/EBPα, C/EBPβ 및 PPARγ의 발현량 변화를 확인한 결과, DM 추출물을 처리하지 않은 대조군(Con)의 경우에는 상기 C/EBPα, C/EBPβ 및 PPARγ이 모두 다량으로 검출되었으나, DM 추출물의 처리농도가 증가할 수록 상기 각 단백질의 함량이 감소됨을 확인하였다(도 5). 이는 본 발명의 DM 추출물이 지방생성에 관여하는 핵심인자의 발현을 저해하여, 항비만 활성을 나타냄을 시사하였다.
According to another embodiment of the present invention (Example 5), the effect of the anti-obesity composition of the present invention on lipogenesis-related proteins was analyzed. Specifically, the expression levels of C / EBPα, C / EBPβ and PPARγ, which are key factors involved in fat production in adipocytes treated with DM extract at various concentrations, were analyzed by western blot analysis, C / EBP?, C / EBP? And PPAR? Were detected in a large amount in the control group (Con) in which the DM extract was not treated, And the content of each protein was decreased as the treatment concentration was increased (FIG. 5). This suggests that the DM extract of the present invention inhibits the expression of key factors involved in fat production and thus exhibits anti-obesity activity.

본 발명의 또 다른 일 실시예에 의하면 (실시예 6), 본 발명의 항비만 조성물이 이미 생성된 지방세포에 대하여 어떠한 영향을 나타내는 지를 분석하였다. 구체적으로, 지방전구세포로부터 분화된 지방세포에 DM 추출물을 처리하고, 지방세포내의 중성지방(TG)의 함량과 배지로 분비된 글리세롤의 분비량을 측정한 결과, DM 추출물의 처리농도가 증가할 수록 지방세포내 중성지방(TG)의 함량이 감소하고 배지로 분비된 글리세롤의 분비량이 증가함을 확인하였다(도 6a 내지 6c). 이는 본 발명의 DM 추출물이 이미 형성된 지방세포내의 TG를 분해하여 항비만 활성을 나타냄을 시사하였다.
According to another embodiment of the present invention (Example 6), the effect of the anti-obesity composition of the present invention on already produced adipocytes was analyzed. Specifically, the DM extract was treated with adipocytes differentiated from adipose precursor cells, and the content of triglyceride (TG) in the adipocyte and the amount of glycerol secreted by the medium were measured. As the concentration of DM extract increased It was confirmed that the content of triglyceride (TG) in adipocytes was decreased and the amount of secreted glycerol in the medium was increased (Figs. 6A to 6C). This suggests that the DM extract of the present invention has anti-obesity activity by decomposing TG in already formed adipocytes.

본 발명의 항비만 조성물은 체중감소, 체지방감소, 혈중 중성지방 함량 감소 및 혈중 콜레스테롤 함량 감소의 효과를 가진다. 본 발명의 구체적인 실시예에 의하면 (실시예 4), IBMX (3-isobutyl-1-methylxanthine), 덱사메타손 및 인슐린을 포함하는 지방세포 분화배지를 이용하여 3T3-L1 지방전구세포의 분화를 유도한 경우, 상기 본 발명의 DM 추출물을 첨가하여 지방세포 생성을 억제함으로써 추출물의 농도에 따라 중성지방 함량이 감소하는 것을 확인할 수 있었다 (도 3 및 도 4).
The anti-obesity composition of the present invention has effects of weight loss, decrease of body fat, decrease of blood triglyceride content and decrease of blood cholesterol content. According to a specific example of the present invention (Example 4), when the differentiation of 3T3-L1 adipose precursor cells was induced using an adipogenic differentiation medium containing IBMX (3-isobutyl-1-methylxanthine), dexamethasone and insulin , And the DM extract of the present invention was added to inhibit the production of adipocytes, whereby the content of triglyceride was decreased according to the concentration of the extract (FIGS. 3 and 4).

추가적으로 상기 본 발명의 항비만 조성물은 지방생성을 억제함으로써, 비만뿐만 아니라 비만과 직간접적으로 관련된 지방간 또는 지질관련 심혈관 질환에 대한 예방 또는 치료의 효과를 나타낼 수 있다.In addition, the anti-obesity composition of the present invention can inhibit fat production, thereby showing effects of preventing or treating not only obesity but also fatty liver or lipid-related cardiovascular diseases directly or indirectly related to obesity.

본 발명의 용어 "지방간"은 지방질, 그 중에서도 특히 중성지방 (triglyceride)이 간세포에 축적되어 간 무게의 5% 이상을 차지하고 있는 질병이다. 음식물 등을 통하여 섭취한 지방질을 원활하게 처리하지 못하는 경우 발생하기도 하지만, 지방간을 일으키는 대표적인 원인은 술이다. 술은 간의 여러 가지 대사기능, 특히 지방산 산화 분해력을 감소시켜 간에 지방을 축적시킨다. 비만한 사람에게도 자주 지방간이 발생하며, 그 외, 당뇨병, 갑상선 기능 항진증 등의 내분비 질환, 스테로이드 호르몬의 과다 사용이나 심한 영양부족에 의해서도 발생할 수 있다. 특별한 증상이 없으므로 증상만으로 진단할 수 없으며, 간 질환의 일반적인 증상인 피로감, 식욕부진, 무기력 등이 나타날 수 있고, 오른쪽 갈비뼈 아래쪽에 불쾌감이나 둔통을 느끼기도 한다.The term " fatty liver "of the present invention is a disease in which fat, especially triglyceride, accumulates in hepatocytes and accounts for more than 5% of liver weight. However, the most common cause of fatty liver disease is alcohol. Alcohol reduces various metabolic functions of the liver, especially fatty acid oxidative degradation, and accumulates fat in the liver. Fatty liver often occurs in obese people, and it can also be caused by endocrine diseases such as diabetes, hyperthyroidism, overuse of steroid hormone, or severe nutritional deficiency. There are no special symptoms, so it is not possible to diagnose it by symptoms alone. Fatigue, anorexia and lethargy, which are common symptoms of liver disease, can occur and feel discomfort or dullness in the lower part of the right rib.

본 발명의 용어 "지질관련 심혈관 질환"은 지방산이나 콜레스테롤 등이 과도한 섭취나 대사 장애로 인해 축적되어 발생하는 질병이다. 특히 혈액 중의 중성지방의 농도가 비정상적으로 높아지는 고중성지방혈증은 미국 심장협회에 의해 심혈관질환의 위험인자로 규정되어 있다. 혈장중성지방은 식후 급격히 증가하여 약 8시간 후에는 식전 수준으로 돌아온다. 중성지방은 당뇨병, 비만, 음주자에서 증가하며 당분을 많이 섭취하는 사람에서도 증가한다. 그 외 갑상선 기능저하, 신증후군, 신부전증, 피임약 및 대량의 이뇨제와 베타차단제도 중성지방을 증가시킬 수 있다. 혈중중성지방이 증가할수록 LDL (low density lipoprotein) - 콜레스테롤이 증가하며, 상기 LDL은 죽상경화를 촉진시킨다. 상기 지질관련 심혈관 질환으로는 고지혈증, 심장병, 고혈압, 동맥경화증 등이 될 수 있다.
The term "lipid-related cardiovascular disease" of the present invention is a disease caused by accumulation of fatty acid or cholesterol due to excessive intake or metabolic disorder. Hypertriglyceridemia, in which the concentration of triglycerides in the blood is abnormally high, is defined by the American Heart Association as a risk factor for cardiovascular disease. Plasma triglyceride increases rapidly after meals and returns to the pre-meal level after about 8 hours. Triglycerides increase in diabetes, obesity, and drinkers, and increase in people who consume a lot of sugar. Other hypothyroidism, nephrotic syndrome, kidney failure, birth control pills, and large amounts of diuretics and beta blockers can also increase triglycerides. As the blood triglyceride increases, LDL (low density lipoprotein) - cholesterol increases and the LDL promotes atherosclerosis. Examples of the lipid-related cardiovascular diseases include hyperlipidemia, heart disease, hypertension, arteriosclerosis, and the like.

상기 본 발명의 약학조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 용어 "약학적으로 허용 가능한"이란 상기 조성물에 노출되는 세포나 인간에게 독성이 없는 특성을 나타내는 것을 의미한다. 상기 담체는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제, 기제, 부형제, 윤활제 등 당업계에 공지된 것이라면 제한 없이 사용할 수 있다. 또한 본 발명의 약학조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다. 나아가, 연고제, 로션제, 스프레이제, 패취제, 크림제, 산제, 현탁제, 겔제 또는 젤의 형태의 피부 외용제의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 DM 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트 (calcium carbonate), 수크로즈 (sucrose) 또는 락토오즈 (lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데 흔히 사용되는 단순희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다.
The pharmaceutical composition of the present invention may further comprise a pharmaceutically acceptable carrier. The term "pharmaceutically acceptable" of the present invention means that it exhibits properties that are not toxic to the cells or humans exposed to the composition. Such carriers may be used without limitation as long as they are known in the art such as buffers, preservatives, wetting agents, solubilizers, isotonic agents, stabilizers, bases, excipients and lubricants. In addition, the pharmaceutical composition of the present invention may be formulated in the form of powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols and the like, oral preparations, suppositories and sterilized injection solutions according to a conventional method have. Furthermore, it can be used in the form of an external preparation for skin in the form of ointments, lotions, spray agents, patches, creams, powders, suspensions, gels or gels. Examples of carriers, excipients and diluents that can be contained in the composition of the present invention include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia rubber, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, Cellulose, methylcellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil. In the case of formulation, a diluent or excipient such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrant, or a surfactant is usually used. Solid formulations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules and the like, which may contain at least one excipient such as starch, calcium carbonate, sucrose, sucrose), lactose, gelatin, and the like. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc are also used. Liquid preparations for oral use may include various excipients such as wetting agents, sweetening agents, fragrances, preservatives, etc. in addition to water and liquid paraffin, which are simple diluents commonly used in suspension, liquid solutions, emulsions and syrups have. Formulations for parenteral administration include sterilized aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations, and suppositories. Examples of the suspending agent include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like. Examples of the suppository base include witepsol, macrogol, tween 61, cacao butter, laurin, glycerogelatin and the like.

본 발명의 일 실시예에 따른 약학 조성물에 포함된 상기 DM 추출물의 함량은 특별히 이에 제한되지 않으나, 최종 조성물 총중량을 기준으로 0.0001 내지 50 중량%, 보다 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%의 함량으로 포함할 수 있다.
The content of the DM extract contained in the pharmaceutical composition according to one embodiment of the present invention is not particularly limited but may be in the range of 0.0001 to 50% by weight, more preferably 0.01 to 10% by weight, based on the total weight of the final composition can do.

한편, 본 발명의 약학조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명의 용어 "투여"란, 적절한 방법으로 개체에게 소정의 물질을 도입하는 것을 의미하며 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 복강내 투여, 정맥내 투여, 근육내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 국소 투여, 비내 투여, 폐내 투여, 직장내 투여될 수 있으나, 이에 제한되지는 않는다.Meanwhile, the pharmaceutical composition of the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount. The term "administering" of the present invention means introducing a predetermined substance into an individual by an appropriate method, and the administration route of the composition can be administered through any conventional route so long as it can reach the target tissue. But are not limited to, intraperitoneal, intravenous, intramuscular, subcutaneous, intradermal, oral, topical, intranasal, intrathecal, rectal.

상기 용어 "개체"란 비만이 발병하였거나 발병할 수 있는 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물을 의미한다. 바람직하게는, 인간을 포함한 포유동물일 수 있다.The term "individual " refers to all animals, including mice, mice, livestock, etc., including humans who have developed or are capable of developing obesity. Preferably, it may be a mammal, including a human.

상기 용어 "약학적으로 유효한 양"이란 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분하며 부작용을 일으키지 않을 정도의 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 성별, 연령, 체중, 건강상태, 질병의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 방법, 투여 시간, 투여 경로, 및 배출 비율, 치료 기간, 배합 또는 동시에 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 바람직하게 본 발명의 약학 조성물은 이에 포함된 DM 추출물을 기준으로 1일 0.0001 내지 100 ㎎/체중 kg으로, 바람직하게는 0.001 내지 100 ㎎/체중 ㎏으로 투여할 수 있다. 투여는 상기 권장 투여량을 하루에 한 번 투여할 수도 있고, 수 회 나누어 투여할 수도 있다.
The term "pharmaceutically effective amount" means an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit / risk ratio applicable to medical treatment and not causing side effects, and the effective dose level is determined by the patient's sex, Including, but not limited to, medicaments and other medical fields that are used in combination, or in combination with, or in combination with, a pharmaceutically acceptable carrier, excipient, Can be readily determined by those skilled in the art according to known factors. Preferably, the pharmaceutical composition of the present invention can be administered at a dose of 0.0001 to 100 mg / kg of body weight per day, preferably 0.001 to 100 mg / kg of body weight per day based on the DM extract contained therein. The administration may be such that the recommended dose is administered once a day or divided into several times.

본 발명의 드라콘토멜론 마크로카펌 추출물은 천연 한약재를 원료로 하므로 식품 조성물, 화장료 조성물, 또는 약학적 조성물로 사용할 경우에도 일반적인 합성 화합물에 비하여 부작용이 덜할 수 있으므로 안전하게 포함되어 유용하게 사용될 수 있다.
The extract of Draconto melon mark Lokamper according to the present invention is used as a food composition, a cosmetic composition, or a pharmaceutical composition because it is a natural herbal medicine raw material, so it can be used safely and usefully because it has less side effects than general synthetic compounds.

상기 목적을 달성하기 위한 다른 실시양태로서, 본 발명은 DM 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 개선용 식품 첨가용 조성물을 제공한다.
As another embodiment for achieving the above object, the present invention provides a composition for preventing or improving obesity comprising DM extract as an active ingredient.

상기 본 발명의 DM 추출물은 항비만 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 천연물로부터 유래되어 안전성이 입증되었으므로, 식품 첨가용 조성물로서 활용되어 비만 예방 또는 개선용 건강기능식품의 제조에 사용될 수 있다.
Since the DM extract of the present invention not only exhibits an anti-obesity effect but also has proven safety derived from natural products, it can be used as a composition for food addition and can be used for the production of a health functional food for prevention or improvement of obesity.

이처럼 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 DM 추출물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 통상의 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있으며, 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 추가로 포함할 수 있다. 본 발명의 DM 추출물은 천연물로부터 유래되어 안전성 면에서 문제가 없기 때문에 식품에 첨가되는 함량은 특별히 제한되지 않으나, 바람직하게는 식품 조성물의 총 중량에 대하여 0.01 내지 90 중량%, 보다 바람직하게는 1 내지 60 중량%로 포함된다. 식품이 음료인 경우에는 100㎖를 기준으로 1 내지 30g, 바람직하게는 3 내지 20g의 비율로 포함될 수 있다. 또한, 상기 조성물은 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 포함할 수 있다. 예들 들어, 비타민 A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, 니아신 (niacin), 비오틴 (biotin), 폴레이트 (folate), 판토텐산 (panthotenic acid) 등을 포함할 수 있다. 또한, 아연 (Zn), 철 (Fe), 칼슘 (Ca), 크롬 (Cr), 마그네슘 (Mg), 망간 (Mn), 구리 (Cu) 등의 미네랄을 포함할 수 있다. 또한, 라이신, 트립토판, 시스테인, 발린 등의 아미노산을 포함할 수 있다. 또한, 방부제 (소르빈산 칼륨, 벤조산나트륨, 살리실산, 데히드로초산나트륨 등), 살균제 (표백분과 고도 표백분, 차아염소산나트륨 등), 산화방지제 (부틸히드록시아니졸 (BHA), 부틸히드록시톨류엔 (BHT) 등), 착색제 (타르색소 등), 발색제 (아질산 나트륨, 아초산 나트륨 등), 표백제 (아황산나트륨), 조미료 (MSG 글루타민산나트륨 등), 감미료 (둘신, 사이클레메이트, 사카린, 나트륨 등), 향료 (바닐린, 락톤류 등), 팽창제 (명반, D-주석산수소칼륨 등), 강화제, 유화제, 증점제 (호료), 피막제, 검기초제, 거품억제제, 용제, 개량제 등의 식품 첨가물 (food additives)을 첨가할 수 있다. 상기 첨가물은 식품의 종류에 따라 선별되고 적절한 양으로 사용된다.
When used as a food additive, the DM extract may be added as it is or may be used together with other food or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to the intended use (prevention, health or therapeutic treatment), and may further include a food-acceptable food-aid additive. The DM extract of the present invention is derived from a natural product and has no problem in terms of safety. Therefore, the content added to the food is not particularly limited, but is preferably 0.01 to 90% by weight, more preferably 1 to 100% by weight, 60% by weight. When the food is a beverage, it may be contained in a proportion of 1 to 30 g, preferably 3 to 20 g based on 100 ml. In addition, the composition may contain additional ingredients which are commonly used in food compositions and which can improve odor, taste, vision and the like. For example, vitamins A, C, D, E, B1, B2, B6, B12, niacin, biotin, folate, panthotenic acid and the like. In addition, it may include minerals such as zinc (Zn), iron (Fe), calcium (Ca), chromium (Cr), magnesium (Mg), manganese (Mn) and copper (Cu) It may also include amino acids such as lysine, tryptophan, cysteine, valine, and the like. In addition, it is also possible to use antiseptics (such as potassium sorbate, sodium benzoate, salicylic acid, and sodium dehydroacetate), disinfectants (such as bleaching powder and highly bleached white powder, sodium hypochlorite), antioxidants (butylhydroxyanilide (BHA), butylhydroxytoluene BHT), etc.), coloring agents (such as tar pigments), coloring agents (such as sodium nitrite and sodium acetic acid), bleaching agents (sodium sulfite), seasoning (such as MSG sodium glutamate), sweeteners (such as hypoglycemia, , Food additives such as flavorings (vanillin, lactones, etc.), swelling agents (alum, potassium hydrogen D-tartrate), emulsifiers, emulsifiers, thickeners, encapsulating agents, gum bases, foam inhibitors, ) Can be added. The additives are selected according to the type of food and used in an appropriate amount.

본 발명의 식품 첨가용 조성물은 통상적인 식품의 제조시에 첨가물로서 사용되어 비만의 예방 또는 개선효과를 갖는 식품의 제조에 사용될 수 있고, 상기 식품 첨가용 조성물이 첨가된 식품은 기능성 식품, 건강기능식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용 가능하다.The food additive composition of the present invention can be used as an additive in the production of a conventional food, and can be used in the production of food having an effect of preventing or improving obesity. The food to which the food additive composition is added is a functional food, Food, and the like.

본 발명의 용어 "기능성 식품"은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 의미하며, "기능성"이라 함은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.The term "functional food" in the present invention means a food prepared and processed by using a raw material or ingredient having functionality useful to the human body according to Law No. 6727 on health functional foods, and " And function of the nutrient for the purpose of obtaining a beneficial effect in health use such as controlling the nutrient or physiological action.

또한, 본 발명의 용어 "건강기능식품"은 건강보조의 목적으로 특정성분을 원료로 하거나 식품 원료에 들어있는 특정성분을 추출, 농축, 정제, 혼합 등의 방법으로 제조, 가공한 식품을 말하며, 상기 성분에 의해 생체방어, 생체리듬의 조절, 질병의 방지와 회복 등 생체조절기능을 생체에 대하여 충분히 발휘할 수 있도록 설계되고 가공된 식품을 말하는 것으로서, 상기 건강식품용 조성물은 질병의 예방 및 질병의 회복 등과 관련된 기능을 수행할 수 있다.
The term "health functional food" of the present invention refers to a food prepared by processing a specific ingredient as a raw material for the purpose of health assisting or by extracting, concentrating, refining, mixing, or the like a specific ingredient contained in a food raw material, Refers to a food which is designed and processed so that the body control function such as bio-defense, regulation of biorhythm, prevention and recovery of disease and the like can be sufficiently exhibited to the living body by the above components. Recovery, and so on.

본 발명의 조성물이 사용될 수 있는 식품의 종류에는 제한이 없다. 아울러 본 발명의 DM 추출물을 활성성분으로 포함하는 조성물은 당업자의 선택에 따라 식품에 함유될 수 있는 적절한 기타 보조 성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다.There is no limitation on the kind of food in which the composition of the present invention can be used. In addition, the composition comprising the DM extract of the present invention as an active ingredient can be prepared by admixing other suitable auxiliary ingredients, which may be contained in food, with known additives according to the selection of a person skilled in the art. Examples of foods that can be added include dairy products including meats, sausages, breads, chocolates, candies, snacks, confectionery, pizza, ramen and other noodles, gums, ice creams, soups, beverages, tea, Vitamin complex, and the like, and can be prepared by adding to the juice, tea, jelly, and juice prepared from the extract of the present invention as a main component.

또한, 본 발명에 적용될 수 있는 식품에는 예컨대, 특수영양식품 (예: 조제유류, 영유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류 (예: 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품 (예: 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류 (예: 스낵류), 유가공품 (예: 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품 (각종 김치류, 장아찌 등), 음료 (예: 과실, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류 등), 천연 조미료 (예: 라면스프 등) 등 모든 식품을 포함할 수 있다.Examples of foods that can be used in the present invention include special nutritive foods (such as crude oil, infant formula, etc.), processed meat products, fish meat products, tofu, jelly, noodles (such as ramen, (Such as fermented milk, cheese), other processed foods, kimchi, pickled foods (various kinds of kimchi, pickles, etc.), seasonings (such as soy sauce, soybean paste, , Beverages (such as fruit, vegetable beverages, beverages, fermented beverages, etc.), and natural seasonings (eg, ramen soup, etc.).

본 발명의 건강기능식품 조성물이 음료의 형태로 사용될 경우에는 통상의 음료와 같이 여러 가지 감미제, 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 외에 본 발명의 건강기능식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.
When the health functional food composition of the present invention is used in the form of a drink, it may contain various sweeteners, flavors, or natural carbohydrates as an additional ingredient such as ordinary beverages. In addition to the above, the health functional food composition of the present invention may contain various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloid thickening agents, pH adjusting agents, stabilizers, , Alcohols, carbonating agents used in carbonated drinks, and the like. It may also contain flesh for the production of natural fruit juices, fruit juice drinks and vegetable drinks.

본 발명의 드라콘토멜론 마크로카펌 (Dracontomelon macrocarpum, DM) 추출물을 포함하는 조성물은 지방전구세포의 지방세포로의 분화를 억제하고 췌장 리파아제 효소 활성을 억제시키는 능력을 가지므로 항비만 조성물로 유용하게 사용될 수 있으므로 지방간, 또는 지질관련 심혈관 질환과 같은 불필요한 지방의 축적으로 유발되는 질환의 예방 또는 치료를 위한 약학적 조성물 또는 비만 예방 또는 개선용 식품 첨가용 조성물로 이용될 수 있다.
The composition comprising the extract of Dracontomelon macrocarpum (DM) of the present invention has the ability to inhibit the differentiation of adipose precursor cells into adipocytes and inhibit the activity of pancreatic lipase enzyme, It can be used as a pharmaceutical composition for prevention or treatment of diseases caused by the accumulation of unnecessary fat such as fatty liver or lipid-related cardiovascular diseases, or a composition for preventing or improving obesity.

도 1은 본 발명의 DM 추출물의 췌장 리파아제 (pancreatic lipase) 효소 활성 저해능을 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 DM 추출물의 세포 독성을 나타낸 그래프이다.
도 3은 본 발명의 DM 추출물의 농도 의존적 지방생성 억제를 확인하기 위하여, DM 추출물을 각각 다양한 농도(0, 5, 10, 25, 50, 75, 100 ㎍/㎖)로 첨가하여 분화시킨 3T3-L1 세포를 오일 레드 오 염색 (Oil red O staining)하여 현미경으로 관찰한 결과를 나타낸 사진이다.
도 4는 상기 도 3에서 염색된 오일 레드 오 염색 부위의 흡광도를 측정하여 계산한 중성지방 트리글리세라이드의 함량을 나타내는 그래프이다.
도 5는 본 발명의 DM 추출물의 처리농도에 따른 C/EBPα, C/EBPβ 및 PPARγ의 발현량 변화를 나타내는 웨스턴 블럿 분석사진이다.
도 6a는 본 발명의 DM 추출물의 처리농도에 따른 배지내 글리세롤의 분비량을 나타내는 그래프이다.
도 6b는 본 발명의 DM 추출물의 처리농도에 따른 지방세포의 변화를 나타내는 사진이다.
도 6c는 본 발명의 DM 추출물의 처리농도에 따른 지방세포내 중성지방(TG)의 함량변화를 나타내는 그래프이다. FIG. 1 is a graph showing the ability of the DM extract of the present invention to inhibit pancreatic lipase enzyme activity. FIG.
2 is a graph showing cytotoxicity of the DM extract of the present invention.
FIG. 3 is a graph showing the effect of the DM extract of the present invention on the inhibition of the concentration-dependent adipogenesis of 3T3-D, which is obtained by adding DM extracts at various concentrations (0, 5, 10, 25, 50, 75, 100 / / L1 cells were observed under a microscope by oil red o staining.
FIG. 4 is a graph showing the content of triglyceride triglyceride calculated by measuring the absorbance of the stained oil-red dyed area in FIG.
FIG. 5 is a Western blot analysis image showing the change in the expression level of C / EBP?, C / EBP? And PPAR? According to the treatment concentration of the DM extract of the present invention.
6A is a graph showing the secretion amount of glycerol in the medium according to the treatment concentration of the DM extract of the present invention.
6B is a photograph showing the change of adipocytes according to the treatment concentration of the DM extract of the present invention.
FIG. 6C is a graph showing changes in the content of triglyceride (TG) in fat cells according to the treatment concentration of the DM extract of the present invention. FIG.

이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the constitution and effects of the present invention will be described in more detail through examples. These examples are only for illustrating the present invention, and the scope of the present invention is not limited by these examples.

실시예 1: 드라콘토멜론 마크로카펌 (DM) 추출물의 제조Example 1 Preparation of Draconto Melon Mark Lokaperm (DM) Extract

DM 10 g을 파쇄하고, 이에 시료 부피의 5 내지 10배의 95% 메탄올을 가하여 75 ℃에서 추출한 다음, 여과하여 액상성분을 수득하는 과정을 3회 반복하여 추출액을 수득하였다. 상기 추출액을 감압농축기 (N-1000S-W, EYELA, Japan)에 적용하여 농축한 다음, 농축액을 동결건조 장치 (FDU2100, EYELA, Japan)에 적용하여 건조분말 형태의 DM 추출물을 수득하였다.
10 g of DM was disrupted, 95% methanol of 5 to 10 times the volume of the sample was added thereto, and the mixture was extracted at 75 DEG C and then filtered to obtain a liquid component. This procedure was repeated three times to obtain an extract. The extract was applied to a vacuum concentrator (N-1000S-W, EYELA, Japan) and concentrated. Then, the concentrate was applied to a lyophilizer (FDU2100, EYELA, Japan) to obtain a DM extract in the form of a dry powder.

실시예 2: DM 추출물의 췌장 리파아제 (pancreatic lipase) 효소 활성 억제능 분석Example 2: Inhibition effect of DM extract on pancreatic lipase enzyme activity

DM 추출물의 리파아제 활성 억제능 보유 유무를 알아보기 위해 각 추출물의 농도별 처리에 따른 리파아제의 활성 변화를 분석하였다. 리파아제는 주로 췌장에서 분비되어 중성지방인 트리글리세라이드 (Triglyceride, TG)를 글리세롤 (glycerol)과 지방산 (fatty acid) 으로 가수분해하는 효소로서 지방소화효소인 췌장 리파아제의 활성 저해능은 시료가 보유한 항비만 활성을 예측하기에 매우 유용한 시험법이다. 본 실시예에서는 각 시료의 항비만 활성을 세포 실험계에서 분석하기에 앞서 시료가 보유한 리파아제 효소 활성 저해능을 다음과 같이 측정하였다.To investigate the inhibitory effect of DM extracts on the lipase activity, we analyzed the activity of lipase by treatment with each concentration of each extract. Lipase is an enzyme that hydrolyzes triglyceride (TG), which is secreted from the pancreas and triglyceride (TG) into glycerol and fatty acid. The inhibitory activity of pancreatic lipase, a lipid digesting enzyme, This is a very useful test method to predict. In this example, the inhibitory activity of the lipase enzyme activity of the sample was measured as follows before analyzing the anti-obesity activity of each sample in a cell assay system.

먼저 1.5 ㎖ 튜브에 0.25 M Tris 완충액 (pH 7.7), 250 mM CaCl2, 5 mM 4-nitrophenyldodecanoate (PNPD)로 구성된 효소액과 기질을 넣고 잘 섞어준 후 37 ℃에서 5 분간 예열하고, 0.25 M Tris 완충액 (pH 7.7)에 녹인 리파아제와 다양한 농도의 DM 추출물을 넣어 37 ℃에서 10분간 반응시킨 후 20% sodium dodecyl sulfate (SDS)를 첨가하여 반응을 종료하였다. 반응액을 4 ℃, 15,000 rpm에서 20분간 원심 분리하여, 분리한 상층액을 96-웰 조직 배양 플레이트에 분주하고 멀티플레이트 리더 (multi-plate reader)를 이용하여 412 nm에서 흡광도를 측정한 후, 10분간 반응시킨 시료의 흡광도로부터 0분 반응 시료의 흡광도를 뺀 값을 시료 비처리 대조군 대비 백분율로 나타내었다. 측정값은 3회 반복 실험의 평균값으로 나타내었다 (도 1).First, an enzyme solution and a substrate composed of 0.25 M Tris buffer (pH 7.7), 250 mM CaCl 2 , and 5 mM 4-nitrophenyldodecanoate (PNPD) were added to a 1.5 ml tube and mixed thoroughly. The mixture was preheated at 37 ° C for 5 minutes and washed with 0.25 M Tris buffer (pH 7.7) and DM extracts at various concentrations were added to the reaction mixture at 37 ° C for 10 minutes, and the reaction was terminated by the addition of 20% sodium dodecyl sulfate (SDS). The reaction solution was centrifuged at 15,000 rpm for 20 minutes at 4 ° C. The separated supernatant was dispensed into a 96-well tissue culture plate and absorbance was measured at 412 nm using a multi-plate reader. The value obtained by subtracting the absorbance of the reaction sample at 0 minutes from the absorbance of the sample reacted for 10 minutes was expressed as a percentage of the sample untreated control group. The measured value was expressed as an average value of three repeated experiments (Fig. 1).

그 결과, 도 1에서 보듯이, DM 추출물 처리 농도의 증가에 따라 (0, 0.05, 0.1, 0.15, 0.2, 0.25, 0.5, 1 ㎍/㎖) 시료 비처리 대조군 대비 리파아제 활성이 감소됨을 확인함으로써 DM 추출물이 리파아제 활성을 농도 의존적으로 유의적으로 억제시키는 것을 확인하였다. 이러한 결과는 시료가 리파아제 저해제 (lipase inhibitor)로 작용하여 체내 지방 흡수율을 저하시켜 항비만 활성을 보유할 수 있다는 것을 의미한다.
As a result, as shown in FIG. 1, it was confirmed that the lipase activity was decreased compared to the sample-untreated control group (0, 0.05, 0.1, 0.15, 0.2, 0.25, 0.5, 1 ㎍ / It was confirmed that the extract significantly inhibited the lipase activity in a concentration-dependent manner. These results indicate that the sample acts as a lipase inhibitor to lower the absorption of fat in the body and thus possess antiobesity activity.

실시예 3: DM 추출물의 세포 독성 분석Example 3: Cytotoxicity analysis of DM extract

본 발명의 DM 추출물을 생체에서 안전하게 사용할 수 있는 지 여부를 확인하기 위하여 DM 추출물의 세포 독성 분석을 실시하였다. 마우스 지방전구세포 (preadipocyte) 세포주인 3T3-L1을 American Type Culture Collection (ATCC, USA) 으로부터 구입하여 10% 송아지 혈청 (bovine calf serum (BCS)) 및 페니실린/스트렙토마이신 (penicillin/streptomycin)이 포함된 DMEM (Dulbecco's modified eagle medium) 배지에서 배양하였다. 24 웰 조직 배양 플레이트에 웰 당 105 개의 세포를 분주하여 24 시간 동안 부착시키고 다양한 농도 (0, 1, 5, 10, 25, 50, 75, 100 ㎍/㎖)의 DM 추출물 용액으로 각각 처리하였다. 72시간 경과 후 DM 추출물을 포함하는 배지를 제거하고 WST (Water-soluble tetraolium salt) 시약을 포함하는 신선한 배지로 교체하여 37 ℃에서 30 분간 인큐베이션 하고 멀티플레이트 리더 (multiplate reader, Paradigm, Beckman, USA)를 이용하여 480 ㎚에서의 흡광도를 측정하였다 (도 2). 이때, 세포 생존율은 담체 (vehicle, dimethylsulfoxide, DMSO)를 처리한 대조군에 대한 %로 나타내었다.To determine whether the DM extract of the present invention can be safely used in vivo, the cytotoxicity analysis of the DM extract was conducted. 3T3-L1, a mouse preadipocyte cell line, was purchased from the American Type Culture Collection (ATCC, USA) and cultured with 10% calf serum (BCS) and penicillin / streptomycin And cultured in DMEM (Dulbecco's modified eagle medium) medium. 10 5 cells per well were plated on 24-well tissue culture plates for 24 h and treated with DM extract solutions at various concentrations (0, 1, 5, 10, 25, 50, 75, 100 ug / ml) . After 72 hours, the medium containing the DM extract was removed and replaced with fresh medium containing water-soluble tetraolium salt (WST) reagent. The plate was incubated at 37 ° C for 30 minutes, and a multiplate reader (Paradigm, Beckman, Absorbance at 480 nm was measured (Fig. 2). At this time, the cell survival rate was expressed as a percentage of the vehicle treated with vehicle (dimethylsulfoxide, DMSO).

그 결과, 도 2에서 보듯이, DM 추출물은 100 ㎍/㎖의 농도까지 세포독성을 전혀 유발하지 않는 안전한 물질임을 확인하였다.
As a result, as shown in FIG. 2, it was confirmed that the DM extract was a safe substance which did not induce cytotoxicity at all up to a concentration of 100 μg / ml.

실시예 4: DM 추출물의 지방생성 억제능 분석Example 4: Inhibitory effect of DM extract on lipogenesis

DM 추출물의 지방생성 억제효과를 확인하기 위하여, 지방세포로의 분화를 유도하고 그에 따른 지방생성 및 그 억제효과를 확인하였다.In order to confirm the effect of DM extract to inhibit lipogenesis, we induced the differentiation into adipocytes and confirmed lipogenesis and its inhibitory effect.

먼저, 3T3-L1 지방전구세포 (preadipocyte)를 0.5 μM 3-이소부틸-1-메틸크산틴 (3-isobutyl-methylxanthine; IBMX), 1 μM 덱사메타손 (dexamethasone; DEX) 및 10 ㎍/㎖ 인슐린 (insulin)을 포함하는 지방형성 분화배지에 배양하여 지방세포로의 분화를 유도하였다. 12 웰 조직 배양 플레이트에 웰 당 105 개의 세포를 분주하고 2일 후 10% 소 태아혈청 (fetal bovine syndrome, FBS)을 포함하는 배지로 교체하였다. 2일 경과 후 IBMX, DEX 및 인슐린을 포함하는 배지로 교환하면서 DM 추출물을 농도별로 처리하고 2일 간격으로 총 4회 인슐린 및 상기 추출물을 처리하고 2일 후 지방생성 억제능을 측정하였다.First, 3T3-L1 preadipocytes were incubated with 0.5 μM 3-isobutyl-methylxanthine (IBMX), 1 μM dexamethasone (DEX) and 10 μg / mL insulin ) To induce differentiation into adipocytes. 10 5 cells per well were plated on 12 well tissue culture plates and replaced with medium containing 10% fetal bovine syndrome (FBS) 2 days later. After 2 days, the DM extract was treated at different concentrations in the medium containing IBMX, DEX and insulin, and the insulin and the extract were treated 4 times at 2-day intervals, and the inhibitory effect on the fat production was measured 2 days later.

이때, 상기 지방생성 억제능은 다음과 같이 측정하였다: 지방세포로의 분화 유도 및 시료 처리가 완료된 세포를 1X 인산완충용액 (phosphate buffered saline, PBS)으로 세척한 다음 10% 포르말린 (formalin)으로 고정하고 오일 레드 오 염색 용액으로 처리한 후 30분 간 인큐베이션하였다. 염색이 완료된 후 100% 이소프로판올 (isopropanol)을 이용하여 세포에 침착한 염료를 추출하고 520 ㎚ 에서 상기 염료 추출액의 흡광도를 측정하였다 (도 3 및 도 4).The cells were washed with 1X phosphate buffered saline (PBS) and fixed with 10% formalin. The cells were washed with 1 ml of phosphate buffered saline (PBS) Red ocher solution and incubated for 30 minutes. After the dyeing was completed, the dye deposited on the cells was extracted with 100% isopropanol and the absorbance of the dye extract was measured at 520 nm (FIGS. 3 and 4).

그 결과, 도 3 및 도 4에 나타난 바와 같이 DM 추출물은 농도 의존적으로 중성지방 생성을 감소시키는 것을 확인하였다.As a result, as shown in FIG. 3 and FIG. 4, it was confirmed that DM extract decreased triglyceride production in a concentration-dependent manner.

상기 결과로부터, 본 발명의 DM 추출물이 지방 생성을 억제하는 효과를 나타냄을 알 수 있었다.
From the above results, it was found that the DM extract of the present invention has an effect of inhibiting lipogenesis.

실시예 5: 지방생성관련 단백질 분석Example 5: Analysis of lipogenesis-related proteins

실시예 4에서 지방세포로의 분화 유도 및 시료 처리가 완료된 세포를 파쇄하고, 이로부터 단백질을 분리한 다음, 지방생성에 관여하는 핵심 인자인 C/EBPα, C/EBPβ 및 PPARγ에 대한 각각의 항체를 이용한 웨스턴 블럿 분석에 적용하여, 본 발명의 추출물의 처리에 따른 상기 각 단백질의 발현량 변화를 분석하였다(도 5). 이때, 내부대조군으로는 액틴을 사용하였다.In Example 4, the cells that had been induced to differentiate into adipocytes and treated with the sample were disrupted, proteins were separated from the cells, and then the respective antibodies against C / EBP?, C / EBP? And PPAR? The Western blot analysis was used to analyze the expression amount of each protein according to the treatment of the extract of the present invention (FIG. 5). At this time, actin was used as an internal control group.

도 5에서 보듯이, 본 발명의 DM 추출물을 처리하지 않은 대조군(Con)의 경우에는 상기 C/EBPα, C/EBPβ 및 PPARγ이 모두 다량으로 검출되었으나, DM 추출물의 처리농도가 증가할 수록 상기 각 단백질의 함량이 감소됨을 확인하였다. As shown in FIG. 5, in the case of the control (Con) not treated with the DM extract of the present invention, all of the C / EBPα, C / EBPβ and PPARγ were detected in large amounts. However, And the protein content was decreased.

따라서, 본 발명의 DM 추출물은 지방생성에 관여하는 핵심인자의 발현을 저해함으로서 항비만 활성을 나타냄을 알 수 있었다.
Therefore, the DM extract of the present invention showed anti-obesity activity by inhibiting the expression of key factors involved in fat production.

실시예 6: 지방분해능 분석Example 6: Fat resolution analysis

105개의 3T3-L1 지방전구세포 (preadipocyte)를 12웰 플레이트에 각각 분주하여 2일 동안 배양하고, 10% FBS가 포함된 배지로 교체하여 다시 2일 동안 배양한 다음, 0.5μM IBMX, 1μM DEX 및 10 ㎍/㎖ 인슐린을 포함하는 지방형성 분화배지로 교체하여 2일 동안 배양하고, 지방형성 분화배지로 교환하고 2일 동안 배양하는 단계를 2회 추가로 수행하였다. 이때, 마지막으로 지방형성 분화배지로 교환할 때, 0, 5, 10, 25 또는 50㎍/㎖의 DM 추출물을 각각 추가하여 처리하였다. 최종 배양이 종료된 후, 배양상층액을 수득하여 배양상층액으로 분비된 글리세롤의 함량을 정량하고(도 6a), 분화된 지방세포를 Oil Red O staining을 통해 염색하였으며(도 6b), 지방세포내에 축적된 중성지방(TG)의 함량을 정량하였다(도 6c).10 5 3T3-L1 preadipocytes were each divided into 12-well plates, cultured for 2 days, replaced with medium containing 10% FBS, incubated again for 2 days, and then treated with 0.5 μM IBMX, 1 μM DEX And 10 쨉 g / ml insulin, for 2 days, exchanged with adipogenic differentiation medium, and incubated for 2 days. At this time, when the cells were finally replaced with an adipogenic differentiation medium, DM extracts of 0, 5, 10, 25 or 50 μg / ml were added, respectively. After completion of the final culture, a culture supernatant was obtained and the content of glycerol secreted into the culture supernatant was quantitated (Fig. 6A). The differentiated fat cells were stained with Oil Red O staining (Fig. 6B) (TG) was quantitated (Fig. 6C).

도 6a에서 보듯이, DM 추출물의 처리농도에 비례하여 배지로 분비되는 글리세롤의 분비량이 증가함을 확인하였고, 도 6b에서 보듯이, DM 추출물의 처리농도에 비례하여 Oil Red O staining을 통한 지방세포염색량이 감소함을 확인하였으며, 도 6c에서 보듯이, DM 추출물의 처리농도에 비례하여 지방세포내 중성지방(TG)의 함량이 감소됨을 확인하였다.As shown in FIG. 6A, it was confirmed that the secretion amount of glycerol secreted to the medium was increased in proportion to the treatment concentration of the DM extract, and as shown in FIG. 6B, in proportion to the treatment concentration of the DM extract, As shown in FIG. 6C, it was confirmed that the content of triglyceride (TG) in adipocytes was decreased in proportion to the treatment concentration of DM extract.

상기 도 6a 내지 6c의 결과는 본 발명의 DM 추출물의 처리를 통해 지방세포내 중성지방(TG)이 분해되어 분해산물인 글리세롤이 세포외부로 분비됨을 나타내었다.The results of FIGS. 6A to 6C show that glycerol, which is a degradation product, is secreted out of the cells through the treatment of the DM extract of the present invention.

따라서, 본 발명의 DM 추출물은 정상세포가 지방세포로 분화되는 것을 억제할 뿐만 아니라, 이미 분화된 지방세포내의 중성지방(TG)을 분해하여, 보다 효과적인 항비만 활성을 나타냄을 알 수 있었다.Therefore, the DM extract of the present invention not only inhibits differentiation of normal cells into adipocytes, but also decomposes triglyceride (TG) in already differentiated adipocytes, and thus shows more effective anti-obesity activity.

Claims (6)

드라콘토멜론 마크로카펌 (Dracontomelon macrocarpum, DM) 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 약학 조성물.
A pharmaceutical composition for the prevention or treatment of obesity, comprising an extract of Dracontomelon macrocarpum (DM) as an active ingredient.
제1항에 있어서,
상기 DM 추출물의 함량은 최종 조성물 총중량을 기준으로 0.0001 내지 50 중량%인 것인 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the content of DM extract is from 0.0001 to 50% by weight, based on the total weight of the final composition.
제1항에 있어서,
상기 추출물은 탄소수 1 내지 4의 알코올, 에틸아세테이트, 아세톤, 헥산, 디클로로메탄 또는 이들의 혼합용매로 구성된 군으로부터 선택되는 용매로 추출하여 수득한 것인 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the extract is obtained by extracting with a solvent selected from the group consisting of alcohols having 1 to 4 carbon atoms, ethyl acetate, acetone, hexane, dichloromethane or a mixed solvent thereof.
제1항에 있어서,
상기 추출물은 95% 메탄올을 용매로 사용하여 65 내지 85℃의 온도에서 추출하여 수득한 것인 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the extract is obtained by extraction at a temperature of 65 to 85 캜 using 95% methanol as a solvent.
제1항에 있어서,
상기 추출물은 지방전구세포가 지방세포로 분화되는 것을 억제하는 것인 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the extract inhibits the lipid precursor cells from differentiating into adipocytes.
드라콘토멜론 마크로카펌 (Dracontomelon macrocarpum) 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 개선용 식품 첨가용 조성물.A composition for preventing or improving obesity, comprising Dracontomelon macrocarpum extract as an active ingredient.
KR20130126237A 2013-10-22 2013-10-22 A composition comprising Dracontomelon Macrocarpum extracts having anti-obesity activity KR101501381B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20130126237A KR101501381B1 (en) 2013-10-22 2013-10-22 A composition comprising Dracontomelon Macrocarpum extracts having anti-obesity activity

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR20130126237A KR101501381B1 (en) 2013-10-22 2013-10-22 A composition comprising Dracontomelon Macrocarpum extracts having anti-obesity activity

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR101501381B1 true KR101501381B1 (en) 2015-03-12

Family

ID=53027165

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR20130126237A KR101501381B1 (en) 2013-10-22 2013-10-22 A composition comprising Dracontomelon Macrocarpum extracts having anti-obesity activity

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101501381B1 (en)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020251253A1 (en) * 2019-06-10 2020-12-17 부산대학교 산학협력단 Vital melon for preventing or treating obesity, and extract thereof
WO2023106777A1 (en) * 2021-12-10 2023-06-15 광동제약 주식회사 Vital melon (kctc14699bp) and anti-obesity composition comprising extract thereof

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101129621A (en) * 2007-08-09 2008-02-27 倪慧文 Anti-alcoholic medical tea

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101129621A (en) * 2007-08-09 2008-02-27 倪慧文 Anti-alcoholic medical tea

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020251253A1 (en) * 2019-06-10 2020-12-17 부산대학교 산학협력단 Vital melon for preventing or treating obesity, and extract thereof
WO2023106777A1 (en) * 2021-12-10 2023-06-15 광동제약 주식회사 Vital melon (kctc14699bp) and anti-obesity composition comprising extract thereof

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20120052138A1 (en) Composition comprising green tea extract
JP5718468B2 (en) Composition for suppressing obesity or lowering blood glucose, comprising Hariguwa and Yokuinin, and use thereof
KR102411434B1 (en) Composition for improvementing, preventing or treating obesity and metabolic diseases comprising fractions or extract of radish leave
WO2015072674A1 (en) Composition containing a borage officinalis extract for alleviating, preventing, or treating metabolic diseases
KR101908221B1 (en) Compositions for anti-obesity comprising extract of Cyperus microiria Steud.
KR101501381B1 (en) A composition comprising Dracontomelon Macrocarpum extracts having anti-obesity activity
KR101445966B1 (en) A composition comprising Amomum cardamomum L. extracts having anti-obesity activity
KR102416786B1 (en) Composition for improvementing, preventing or treating obesity and metabolic diseases comprising fractions or extract of pepper leave
US20220354918A1 (en) Anti-obesity composition including geumhwagyu extract as active ingredient
KR20150012926A (en) A composition comprising Chrysanthemum zawadskii extracts having anti-obesity activity
KR101851639B1 (en) Composition for anti-obesity comprising Chaenomelis Fructus extract or its fraction as effective component
KR20230014156A (en) Composition for Anti-Obesity Comprising Catechin, and Complex Extracts of Rosa davurica Pall as Active Ingredient
KR101669717B1 (en) Antiobesity composition comprising Capsicoside G
KR101501380B1 (en) A composition comprising Euptelea Pleiosperma extracts having anti-obesity activity
KR20120130477A (en) Composition comprising an extract of Akebiae Caulis for preventing and treating obesity
KR20190103665A (en) Food composition for improving or preventing obesity containing extract of saururus chinensis
KR20150046698A (en) A composition comprising Salsola Collina extracts having anti-obesity activity
KR20110078237A (en) Composition for treating or preventing obesity containing eriobotrya japonica extract
US11864575B2 (en) Composition comprising low temperature water extract of hibiscus manihot for anti-obesity
KR102487651B1 (en) A composition for preventing, improving or treating sarcopenia comprising extracts of wheat sprout
KR20150046699A (en) A composition comprising Ardisia Arborescens extracts having anti-obesity activity
KR102411428B1 (en) Composition for improvementing, preventing or treating obesity and metabolic diseases comprising fractions or extract of molokhia leave
KR101451473B1 (en) Composition comprising an extract of Osterici Radix as an effective ingredient for treatment or prevention of diabetes
KR102025572B1 (en) Composition for preventing, ameliorating or treating metabolic diseases comprising mixture of Diospyros lotus leaf and grape fruit stem extract as effective component
KR101863603B1 (en) Composition for prevention, improvement or treatment of arthritis comprising Mollugo pentaphylla extract as effective component

Legal Events

Date Code Title Description
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20190402

Year of fee payment: 5