KR20170108222A - 상지 열수추출물과 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법 - Google Patents

상지 열수추출물과 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법 Download PDF

Info

Publication number
KR20170108222A
KR20170108222A KR1020160031775A KR20160031775A KR20170108222A KR 20170108222 A KR20170108222 A KR 20170108222A KR 1020160031775 A KR1020160031775 A KR 1020160031775A KR 20160031775 A KR20160031775 A KR 20160031775A KR 20170108222 A KR20170108222 A KR 20170108222A
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
group
above step
ort
hot water
extracting
Prior art date
Application number
KR1020160031775A
Other languages
English (en)
Other versions
KR101908772B1 (ko
Inventor
최상원
김은정
안은영
전영희
Original Assignee
대구가톨릭대학교산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 대구가톨릭대학교산학협력단 filed Critical 대구가톨릭대학교산학협력단
Priority to KR1020160031775A priority Critical patent/KR101908772B1/ko
Priority to PCT/KR2016/003209 priority patent/WO2017159912A1/ko
Publication of KR20170108222A publication Critical patent/KR20170108222A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR101908772B1 publication Critical patent/KR101908772B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/60—Moraceae (Mulberry family), e.g. breadfruit or fig
    • A61K36/605—Morus (mulberry)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/14—Extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/18—Fractionation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/48—Ultrasonic treatment
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2300/00—Processes
    • A23V2300/50—Concentrating, enriching or enhancing in functional factors

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)

Abstract

본 발명은 상지 열수추출물 및 상지 지표성분인 ORT를 함유하는 항당뇨 조성물에 관한 것으로 Streptozotocin 유도 당뇨쥐에 투여하여 상백피 열수추출물과 비교했을 때 소장 이당류분해효소 활성을 억제하여 혈당을 낮추고 혈장 내 지질 개선 효과가 더 뛰어날 뿐만 아니라 간 조직 내로 포도당 유입을 증가시키고 글리코겐 합성을 증가시켜 혈당강하 효과를 확인함으로써 상지 열수추출물 및 상지 지표성분인 ORT를 함유하는 당뇨 예방 및 치료 기능성 의약품 및 식품 조성물로 이용할 수 있는 뛰어난 효과가 있다.

Description

상지 열수추출물과 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법{Anti-diabetic composition of mulberry twig hot water extract and oxyresveratrol as an efficient component and preparation method of the same}
본 발명은 상지 열수추출물 및 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로 더욱 상세하게는 Streptozotocin 유도 당뇨쥐에서 상기 상지 열수추출물 및 oxyresveratrol을 투여함으로써 당뇨 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
당뇨병은 전 세계적으로 증가하는 추세에 있으며, 우리나라에서도 최근 서구화된 식생활과 운동부족으로 인하여 대사성 질환과 암 등의 발병률이 점차 증가하고 있다. 2013년 통계청에서 실시한 사망원인통계에 따르면 당뇨병으로 인한 사망이 남녀 각각 6위와 4위로 높은 순위를 차지하고 있으며, 합병증으로 인한 사망까지 합하면 전체 사망 원인 중 더 큰 비율을 차지할 것으로 예상된다. 또한 2012년에 질병관리본부에서 실시한 국민건강영양조사에 따르면 당뇨병 유병률은 최근 10년간 2.4% 증가하였다. Guariguata 등은 우리나라에서 당뇨병 유병인이 2013년에는 우리나라 전체 인구의 8.9%이며, 2035년도에는 11.4%로 2.5% 증가할 것으로 예상됨으로서 당뇨는 이미 우리 사회에 심각한 사회, 보건 문제가 되었다.
당뇨병은 인슐린이 절대적 또는 상대적으로 부족하여 생기는 대사성 질환의 일종으로 발병원인에 따라 1형 당뇨와 2형 당뇨로 나뉜다. 1형 당뇨는 인슐린 자체가 부족하여 생기는 병으로 면역매개성과 특발성으로 나눌 수 있다. 자가면역반응으로 인하여 췌장 베타세포가 파괴되어 일어나는 경우를 면역매개성이라고 하며, 전체 당뇨병의 5-10% 정도에 해당한다. 1형 당뇨 중 원인이 밝혀지지 않은 당뇨는 특발성에 속한다. 1형 당뇨는 인슐린의 치료가 필수적이며 필요에 따라 경구혈당강하제를 같이 복용할 수 있다. 2형 당뇨는 인슐린 수용체에 저항성이 증가되거나 인슐린 민감도가 떨어져서 생기는 병으로 유전적 요인도 있지만 연령증가, 비만도 증가, 육체활동 감소 등 많은 환경적 요인과 합쳐져 발병이 된다.
당뇨병은 질병 그 자체보다 합병증으로 인해 문제가 되는데, 당뇨의 급성 합병증으로는 고혈당으로 인해 혼수상태에 빠지게 되는 고혈당성 혼수, 케톤산이 과 축적되어 생기는 케톤산혈증, 인슐린이나 혈당강하제의 잘못된 사용으로 인해 혈당이 너무 낮아지는 저혈당을 크게 들 수 있다. 만성 합병증으로는 고혈당으로 인해 혈액 순환이 잘 되지 않아 생기는 당뇨병성 망막증, 신증, 신경병증, 족부질환 등이 있다.
또한 당뇨병은 당을 제대로 이용하지 못해 일어나는 당 대사 관련 장애뿐만 아니라 지질대사에도 이상을 초래하기 때문에 당뇨병은 심혈관계 합병증의 위험 또한 증가시키는 대사성 질환이다. 당뇨병과 관계된 심혈관계 합병증의 종류로는 고혈압과 관상동맥질환, 뇌졸중, 말초동맥질환, 심근증, 심부전 등이 있다.
일반적으로 1형 당뇨의 치료에는 인슐린 제제를 투여하며, 2형 당뇨에는 경구혈당강하제를 사용한다. 경구혈당강하제의 종류로는 인슐린의 분비를 자극하며 인슐린 저항성을 개선하는 sulfonylurea계, 인슐린 분비를 증가시키며 글루카곤 분비를 억제하는 dipeptidyl peptidase-4(DPP-4) inhibitor계, 간의 당 신생을 억제하며 인슐린 저항성을 개선하는 biguanide계, 말초 조직과 간에서 인슐린 저항성을 감소시키는 thiazolidinedione(TZD)계, 포도당 흡수를 지연시키는 α-glucosidase 저해제 등이 있다. 경구혈당강하제는 작용기전에 따라 종류가 다양하기 때문에 당뇨의 분류에 따라 정해져 있는 것이 아니라 당뇨병이 걸린 시기와 진행 정도에 따라 인슐린제제와 경구혈당강하제를, 또는 경구혈당강하제끼리 병용해서 사용하는 경우가 많다. 당뇨병이 발병하는 이유는 다양하므로 각각의 병인에 근거한 새로운 약물의 개발을 위해 많은 연구가 진행되고 있다. 또한 당뇨병은 합병증으로 인한 문제가 크기 때문에, 그 합병증을 개선시킬 수 있는 약물의 개발은 당뇨병 치료 중 중요한 부분이다.
그러나 지금까지 개발된 약물들은 저혈당증, 인슐린 분비능 상실, 위장장애, 신장독성, 설사와 배탈, 심부전, 빈혈, 간부전 등을 유발하는 부작용이 보고되어 왔다. 또한 일부 약물은 심각한 간독성 및 심혈관계 부작용으로 사용이 금지된 경우도 있다. 혈당강하작용이 있다고 알려진 새로운 물질 중 몇몇 약제는 고가의 생산비 등으로 인해 현재 임상에서의 이용이 어려우므로, 단독 혹은 약물을 도와 당뇨의 증상을 낮추는 천연물 유래 신약 혹은 건강기능성 식품의 개발이 필요하다.
잠상산물은 뽕나무와 관련된 산물을 말하며 누에, 오디, 상엽, 상지, 상백피 등이 있다. 잠상산물은 예로부터 당뇨를 비롯한 여러 가지 질병에 효과가 있다고 알려져 왔다. 동의보감에 오디가 당뇨에 효과가 있다고 기록되어있으며, 상지는 풍과 이뇨에, 상엽은 몸이 붓는 증세에 효과가 있다고 기록되어있다. 또한 본초강목에서는 상엽, 상백피, 오디, 잠분에서 당뇨병에 효과가 있다고 기록되어 있으며 상엽, 상지, 잠분은 또한 풍에 효과가 있다고 기록되어 있다.
지금까지 연구된 동물모델에서 잠상산물의 항당뇨 효과를 보면 누에는 streptozotocin(STZ) 유도 당뇨쥐에서 혈청 포도당 농도를 낮추고 -glucosidase 억제 효과를 나타냈으며, 소장 proximal 부분의 이당류 분해효소 활성 감소 효과를 나타내었다고 보고되었다. 오디는 STZ 유발 당뇨쥐에서 혈당을 낮추며 혈청 중성지방 (triglyceride, TG) 농도, 총 콜레스테롤 (total-cholesterol, T-CHO) 농도, 저밀도지단백질 (low density lipoprotein cholesterol, LDL-CHO) 농도, thiobarbituric acid reactive substance(TBARS) 함량을 낮춘다고 보고되었다. 뽕나무의 잎인 상엽은 STZ 유발 당뇨쥐에서 공복혈당과 당화헤모글로빈 농도의 감소 및 소장의 이당류분해효소 활성 감소가 보고되었다. 또한 TG 농도와 T-CHO 농도, 저밀도지단백질 농도, TBARS 함량이 감소하였으며 고밀도지단백질 (high density lipoprotein cholesterol, HDL-CHO) 농도가 증가하였다는 보고가 있었다.
한편, 지금까지 보고된 상지 및 상백피의 항당뇨 효능에 관한 연구를 보면 먼저 상지 물추출물은 소장의 α-glucosidase 활성을 크게 억제하였으며, alloxan 유발 당뇨쥐에서 공복혈당을 크게 낮추었는 데 그 효과는 α-glucosidase 강력저해제로서 항당뇨약으로 잘 알려진 acarbose 만큼의 효능이 있는 것으로 보고된 바가 있다. 그리고 최근 본 연구진의 연구에 의하면 뽕나무 부위 중 상지 물추출물이 다른 부위보다 α-glucosidase 활성을 크게 억제하는 것으로 확인된 바가 있다. 이러한 상지 물추출물의 항당뇨 효능은 추출물에 존재하는 다당류가 췌장에서의 산화적스트레스나 염증 반응을 억제함으로써 나타나는 것으로 보고된 바가 있으며, 그리고 상지추출물은 streptozotocin(STZ) 유발 당뇨쥐의 체중 및 인슐린 증가를 유도함으로써 제2형 당뇨치료제로 잘 알려진 metformin 만큼의 효능을 나타냄을 확인한 바가 있다.
한편, 최근 상지로부터 옥시레스베라트롤 유도체(배당체인 mulberroside A와 아글리콘인 oxyresveratrol), 레스베라트롤, 및 2-arylbenzofuran 유도체가 확인된 바가 있으며, 이 중 옥시레스베라트롤은 상지의 주된 생리활성물질로서 지금까지 항염증, 항멜라닌, 및 항산화성분으로 보고된 바가 있다. 그리고 상지에도 존재하며, 특히 상백피의 주된 생리활성물질로 보고된 mulberroside A 성분은 최근 alloxan 유발 당뇨쥐 모델에서 항당뇨 효능이 보고된 바가 있다. 이와같이 지금까지 상지 물추출물 및 주된 성분인 mulberroside A의 항당뇨 작용이 보고된 바가 있으나 거의 대부분 제2형 당뇨모델에서의 항당뇨 효능을 밝힌 연구이었으며, 본 연구에서와 같이 STZ을 여러번 처리하여 유발된 제1형 당뇨모델에서의 상지 물추출물 및 oxyresveratrol의 항당뇨 효능과 그 기전에 관한 연구보고는 아직 없다.
본 발명과 관련된 선행문헌으로는 대한민국 등록특허 제10-1438543호에 공지되어 있으나 이는 항염증, 항노화 기능성 옥시레스베라트롤, 트란스-레스베라트롤 및 모라신이 함유된 뽕나무 가지추출물의 제조방법에 관한 것이다. 그러나 현재까지 상지 열수추출물 및 oxyresveratrol(이하 ORT라 한다)의 항당뇨 기능성 조성물에 관련된 발명은 공지된 바 없다.
따라서 본 발명의 목적은 당뇨병에 효과가 있는 상지 열수추출물 및 지표성분 ORT를 유효성분으로 함유하는 조성물 및 그 제조 방법을 제공하는 데 있다.
본 발명은 건조한 상지 200g 및 상백피 100g에 이온수 1L를 가하여 초음파추출기에서 가장 바람직하게는 2시간 동안 추출하는 단계와; 상기 단계에서 추출한 상지 및 상백피 추출액을 감압 농축하여 각각 상지 및 상백피 열수 추출물을 얻는 단계와;
상지를 80% 에탄올수용액으로 2회 초음파추출한 후 여과 및 감압농축하는 단계와; 상기 단계에서 감압농축한 80% 에탄올추출물을 다시 80% 에탄올에 녹인 후 헥산으로 분획하여 얻은 탈지 에탄올추출물을 감압농축하는 단계와; 상기 단계에서 감압농축한 탈지 에탄올추출물에 가수한 다음 CH2Cl2, EtOAC 및 n-BuOH 용매로 순차적으로 분획하여 EtOAC 분획에서 oxyresveratrol(ORT)을, n-BuOH 분획에서 oxyresveratrol 3‘,4-O-β-D-diglucopyranoside(ORTG)를 각각 분리 및 정제하는 단계를 통해 얻은 oxyresveratrol의 항당뇨 기능성을 streptozotocin(STZ) 유도 당뇨쥐에서 검증하고 이를 평가함으로써 달성하였다.
본 발명에 따른 뽕나무로부터 채취 및 추출한 상지 열수추출물 및 ORT를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 및 개선 기능성 의약품 및 식품 조성물을 제공할 수 있는 뛰어난 효과가 있다.
본 발명에 따르면 상기 상지 열수추출물은 상백피 열수추출물과 비교했을 때 항당뇨 효능이 더 우수한 의약품 및 식품 조성물을 제공할 수 있는 뛰어난 효과가 있다.
도1은 상지 열수추출물, 상백피 열수추출물 및 ORT의 HPLC 결과를 나타낸 그래프이다.
도2는 본 발명에 따른 상지 에탄올추출물로부터 두 가지 기능성 지표성분(ORT & ORTG)의 분리 및 정제방법을 나타낸 모식도이다.
도3은 본 발명에 따른 당뇨 유발을 위해 실험동물에 STZ 투여 후 MT 및 MRB 투여를 나타낸 모식도이다.
도4는 본 발명에 따른 당뇨 유발을 위해 실험동물에 STZ 투여 후 ORTG, ORT 및 Met 투여를 나타낸 모식도이다.
도5는 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물의 공복혈당 측정값을 나타낸 그래프이다.
도6은 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물의 혈장 포도당 및 인슐린 함량의 측정값을 나타낸 그래프이다.
도7은 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 상지 열수추출물 투여에 따른 지질대사 변화량을 나타낸 그래프이다.
도8은 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 상지 열수추출물 투여 후 triglyceride 함량을 나타낸 그래프이다.
도9는 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 상지 열수추출물 투여 후 free fatty acid 함량의 측정값을 그래프이다.
도10은 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 상지 열수추출물 투여 후 간 조직에서 triglyceride 및 지질대사 변화량을 나타낸 그래프이다.
도11은 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 상지 열수추출물 투여 후 소장 점막의 이당류분해효소 활성을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.
도12는 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 상지 지표성분인 ORT 투여 후 혈중 공복혈당 측정값을 나타낸 그래프이다.
도13은 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 ORT 투여 후 혈장 포도당 및 인슐린 함량의 측정값을 나타낸 그래프이다.
도14는 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 ORT 투여 후 지질대사 변화량을 나타낸 그래프이다.
도15는 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 ORT 투여 후 혈장에서 free fatty acid 함량의 측정값을 나타낸 그래프이다.
도16은 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 ORT 투여 후 소장 점막의 이당류분해효소 활성을 나타낸 그래프이다.
도17은 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 ORT 투여 후 간 조직 GLUT2 mRNA 발현량의 측정값을 나타낸 그래프이다.
도18은 본 발명에 따른 당뇨 유발 실험동물에 ORT 투여 후 간 조직 글리코겐 함량의 측정값을 나타낸 그래프이다.
도19는 본 발명에 따라 상지 열수추출물 및 ORT 투여 시 나타나는 당뇨 억제 효과를 나타낸 모식도이다.
본 발명은 상지 열수추출물 및 ORT를 유효성분으로 함유하는 당뇨병 예방 및 치료용 의약품 및 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따르면 상기 상지 열수추출물은 상백피 열수추출물보다 mulberroside A 및 ORT의 함량이 2~3배 높다.
본 발명에 따르면 상기 상지 열수추출물은 상백피 열수추출물보다 ORT 함량은 높은 반면, ORTG의 함량은 매우 낮다[상지 열수추출물: ORTG(2.45±0.06%), ORT(0.92±0.02%); 상백피 열수추출물: ORTG(19.71±2.80%), ORT(0.04±0.01%)]
본 발명에 따르면 STZ를 이용한 당뇨 유발 마우스에서 상백피 열수추출물보다 상지 열수추출물 및 그 지표성분인 ORT 투여시 항당뇨 효과가 더 뛰어난 것이 특징인 의약품 및 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 상기 상지 추출물은 물, 에탄올, 메탄올과 같은 친수성 유기용매 또는 이들의 혼합 용매에 의해 추출된 것일 수 있으며, 가장 바람직하게는 열수를 이용하여 추출된 열수추출물이다.
또, 본 발명의 상기 ORT는 상지 열수추출물로부터 분리시 가장 바람직하게는 EtOAC로 분리하는 것이다.
본 발명에 따른 상기 식품 조성물은 음료, 껌, 차 및 선식 중 어느 하나의 제형인 것이 특징인 식품조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 상기 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캅셀제, 현탁제, 유제, 시럽제, 비수성용제, 현탁제 및 동결건조제제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가지는 것이 특징인 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 약제학적 조성물 형태로 제조할 수 있으며, 하나 또는 그 이상의 무독성 및 약제학적으로 허용 가능한 담체, 부형제, 보조제 또는 희석제 또는 다른 활성성분을 추가로 더 포함할 수 있다.
본 발명의 상기 상지 및 상백피는 통상 시중에서 구입할 수 있다.
본 발명을 실시예, 실험예 및 제조예에 따라 더욱 상세하게 설명한다. 그러나 하기 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하기 위한 것에 불과하므로 본 발명의 권리범위를 한정하는 것으로 의도되지는 않는다.
본 발명의 제조예1 내지 제조예4에는 가장 바람직하게는 상지 열수추출물 또는 ORT 함유량의 수치를 1중량%로 한정하였으나 0.5~2.5중량%까지 첨가하여도 좋다.
제조예1. 상지 열수추출물 또는 ORT를 함유하는 음료
성분 함량(중량%)
꿀 0.3
치옥토산아미드 0.0003
니코틴산아미드 0.0003
염산리보플라빈나트륨 0.0001
염산피리독신 0.0001
이노시톨 0.001
오르트산 0.002
물 98.6962
상지 열수추출물 또는 ORT 1
합계 100
제조예2. 상지 열수추출물 또는 ORT를 함유하는 껌
성분 함량(중량%)
껌 베이스 20
설탕 75
향료 2
물 2
상지 열수추출물 또는 ORT 1
합계 100
제조예3. 상지 열수추출물 또는 ORT를 함유하는 차
성분 함량(중량%)
함수포도당 96.8
구연산 0.05
비타민c 0.15
자일리톨 1
HPMC 1
상지 열수추출물 또는 ORT 1
합계 100
제조예4. 상지 열수추출물 또는 ORT를 함유하는 선식
성분 함량(중량%)
현미 30
율무 20
보리 20
찹쌀 7
들깨 7
검정콩 7
검정깨 7
영지 0.5
지황 0.5
상지 열수추출물 또는 ORT 1
합계 100
실시예1. 상지로부터 ORTG 및 ORT의 추출, 분리 및 정제
상지는 봄에 잎이 내돋지 않은 뽕나무로부터 채취 후 1주일간 음건한 다음 50℃ 이하 열풍건조기(COBP-15S, Sjunheung dryer, Boryyeong, Korea)에서 건조한 것을 공시재료로 사용하였다. 상기 건조한 상지로부터 두 가지 기능성 지표성분의 분리를 위해 상지를 초음파 추출기를 이용하여 80% 에탄올수용액으로 두번 추출하여 여과 및 감압농축 하였다. 상기 단계의 감압농축한 탈지 에탄올추출물을 물에 녹인 다음 CH2Cl2, EtOAC 및 n-BuOH 용매를 이용하여 순차적으로 분획하였다. EtOAC 분획으로부터 oxyresveratrol(ORT)을, n-BuOH 분획으로부터는 oxyresveratrol 3‘,4-O-β-D-diglucopyranoside(ORTG)를 각각 분리하여 정제하였다(도2).
실험예1. 상지 및 상백피 열수추출물의 지표성분 ORT의 HPLC 분석
상기 실시예1의 방법으로 추출한 상지 및 상백피 열수추출물의 지표성분 ORT 및 ORTG의 HPLC 분석을 위해 Merck HPLC grade(Darmastadt, Germany)를 이용하여 분석하였다.
이를 평가하기 위해 상지 및 상백피 열수추출물(1 g)을 증류수 100mL로 희석하고 0.45㎛ 필터로 여과 후 HPLC에 10㎕ 주입하여 정량분석하였으며, 이때 HPLC 분석은 Waters e2690.5 HPLC 고속액체크로마토그래피, 칼럼; YMC-Pack Pro C18, 용매A(0.05% H3PO4 in H2O), 용매B(CH3CN), 유속; 0.8mL/min 조건으로 수행하였다. 상기 HPLC로 측정한 상지 및 상백피 열수추출물의 두 가지 기능성 지표성분 ORT 및 ORTG는 표준물질의 보지시간(retention time)과 비교 분석하였으며, 두 추출물의 함량은 2개의 표준물질의 검량곡선으로부터 산출하였다.
두 가지 표준물질(A), 상지 열수추출물(B) 및 상백피 열수추출물(C)의 ORTG(1) 및 ORT(2)의 측정 결과는 도1에 나타냈다.
실시예2. 실험동물
상지 및 상백피 열수추출물의 항당뇨 효과 실험에 사용된 실험동물은 체중 29±0.2g의 수컷, 6주령 ICR 마우스를 코아텍 바이오에서 구입하여 1주 동안 고형사료를 급여하며 실험환경에 적응시켰다. 실험동물은 정상대조군(Normal control, NC) 10수, 당뇨대조군(diabetes control, DC) 10수, 상지 열수추출물 투여한 상지당뇨군(Mulberry twig, MT) 10수 및 상백피 열수추출물 투여한 상백피당뇨군(Mulberry root bark, MRB) 10수로 분류하였다. 상기 정상대조군 및 당뇨대조군은 멸균식염수를 투여하였고 상지당뇨군은 상지 열수추출물을 5g/kg의 농도로 투여하였고 상백피당뇨군은 상백피 열수추출물을 600mg/kg 농도로 투여하였다.
상지 지표성분의 항당뇨 효과 실험에 사용된 실험동물은 체중 33±0.3g의 수컷, 6주령 ICR 마우스를 사용하였다. 실험동물은 멸균식염수를 투여한 정상대조군(Normal control, NC) 7수, 멸균식염수를 투여한 당뇨대조군(Diabetes control, DC) 7수, ORTG를 600mg/kg의 농도로 투여한 당뇨군 10수, ORT을 600mg/kg의 농도로 투여한 당뇨군 10수 및 metformin을 600mg/kg의 농도로 투여한 당뇨군(Metformin, Met) 10수로 나뉘어 실험을 하였다.
실시예3. 당뇨유발
상기 실시예2의 실험동물의 당뇨를 유발시키기 위해 STZ를 0.1M citrate buffer(pH 4.5)에 녹여 50mg/kg/day의 용량으로 복강에 5일간 일정한 시간에 주사하였다. STZ 투여 시작일로부터 14일 후 미정맥에서 채혈하여 혈당을 확인하여 당뇨 유발을 확인하였다. 상기 당뇨 유발이 확인된 실험동물에 실험 시작 15일 후부터 16일 동안 상지 당뇨군(MT)에 상지 열수추출물을 5g/kg 경구 투여하였고 상백피 당뇨군(MRB)에 상백피 열수추출물을 6g/kg 경구 투여하였다(도3). 시료 투여기간이 지난 후 동물을 희생하여 혈액, 간, 가자미근, 부고환지방 및 소장을 채취하여 시료분석에 사용하였다.
실시예4. 상지 지표성분 항당뇨 효과
상지 지표성분의 항당뇨 효과를 확인하기 위해 상기 실시예2의 실험동물에 STZ를 40mg/kg/day의 용량으로 5일간 복강주사 하였으며, STZ 투여 시작일로부터 17일 후 미정맥에서 채혈하여 혈당 상승을 확인하였다. 상기 단계의 혈당 상승을 확인한 실험동물을 실험 시작 18일 후부터 22일간 ORTG, ORT 및 Met을 각각 0.6g/kg의 농도로 경구 투여하였다(도4). 시료 투여 후 동물을 희생시켜 혈액, 간, 췌장 및 소장을 채취하여 시료분석에 사용하였다.
실시예5. 시료 수집
상기 실시예3 및 실시예4에서 희생시킨 실험동물의 시료를 분석하기 위해 희생 전 12시간 절식 후 CO2로 마취한 실험동물을 복부 대정맥에서 헤파린 1000IU/mL 처리된 주사기를 사용하여 채혈하였다. 혈액은 4℃에서 13,200rpm으로 원심분리하여 혈장을 분리한 후 -80℃에 보관하였다. 채혈 후 간, 가자미근, 부고환지방 및 췌장을 적출하여 무게 측정 후 액체질소로 급속동결하여 -80℃에서 보관하였고 동시에 적출한 소장은 소장상피를 긁어 액체질소로 급속동결하여 -80℃에서 보관하였다.
실험예1. 상지 및 상백피 열수추출물 실험에서의 체중변화
상지 및 상백피 열수추출물의 항당뇨 효과 실험에서 NC, DC, MT 및 MRB 그룹의 실험동물의 실험 시작 전 초기체중과 실험 종료 후 마지막 체중을 측정하여 비교하였다.
실험 결과, 하기 표5에서 알 수 있듯이 NC군에 비하여 당뇨를 유발한 DC, MT 및 MRB 세군에서 체중이 감소하였다.
Group Initial BW(g) Final BW(g)
NC 34.00±0.28 35.10±0.61
DC 34.87±0.38 30.67±0.84
MT 34.56±0.32 30.42±0.78
MRB 36.06±0.29 31.49±0.45
실험예2. 혈당 및 혈장 인슐린 함량 측정
상지 및 상백피 열수추출물의 항당뇨 효과를 확인하기 위해 실험동물에 실험 시료 투여 10일 후에 12시간 절식시키고 다음날 오전에 실험 시료 투여 전 공복혈당을 측정하였다. 혈당 측정은 미정맥으로부터 소량의 혈액을 채취하여 혈당계(blood glucose monitoring kit, ARKRAY)를 이용하여 측정하였다.
실험 결과, 도5에서 알 수 있듯이 경구투여 10일 경과 후 공복혈당은 NC군에 비해 DC군에서 증가하였고, DC군에 비해 MT군에서 감소하였다. DC군에 비해 MRB군은 유의적인 차이는 없었다.
또 도6에서 알 수 있듯이 실험동물 희생 후 혈장에서 측정한 혈당은 NC군에 비해 DC군이 증가하였고 DC군에 비해 MT군이 44% 감소하였으나 MRB군에서는 유의적인 차이는 없었다. 혈장 인슐린 농도는 NC군에 비해 MT군만 유의적인 감소를 나타냈다.
실험예3. 혈중지질 농도 측정
상지 및 상백피 열수추출물 투여에 따른 혈당과 혈중 인슐린 농도를 측정하기 위해 상기 실시예5에서 얻은 혈장을 이용하여 혈중지질 농도를 측정하였다. 혈장 포도당 함량 측정을 위해 포도당 측정용 시액(Asan kit)을 사용하였다. 혈장 인슐린은 mouse Insulin ELISA kit(U-type, Shibayagi Co.)를 사용하여 측정하였다.
실험 결과, 도7에서 알 수 있듯이 Total cholesterol(T-CHO) 농도는 DC군에 비해 MT 및 MRB군이 각각 72%, 73% 감소하였고 HDL-cholesterol(HDL-CHO) 농도는 실험군간의 차이는 없었다. HDL-CHO/T-CHO 비율은 NC군에 비해 DC군이 80% 감소하였고 DC군과 비교했을 때 MT군과 MRB군이 각각 135%, 130% 증가하였다. 결론적으로 MT군가 MRB군에서 DC군과 비교했을 때 T-CHO 농도가 감소하였고 HDL-CHO/T-CHO 비율이 증가하여 혈중 지질 농도 개선의 효과를 확인하였다.
또 도8에서 알 수 있듯이 혈장에서 triglyceride(TG) 함량은 NC군에 비해 DC군에서 감소하였으며 DC군에 비해 MT군에서 증가하였다.
도9에서 알 수 있듯이 혈장 내 free fatty acid(FFA) 농도는 NC군과 비교했을 때 DC, MT 및 MRB군에서 감소하였고 세군 사이에서 유의적인 차이는 없었다.
실시예4. 간 조직 TG 및 T-CHO 함량
상지 및 상백피 열수추출물 투여에 따른 간에서 TG 및 T-CHO 농도를 측정하기 위해 상기 실시예5의 방법으로 얻은 간 조직을 이용하여 TG, T-CHO 및 FFA 농도를 측정하였다.
실험 결과, 도10에서 알 수 있듯이 간 TG 농도는 NC군이 9.5, DC군이 19.4, MT군이 8.5, MRB군이 22.5mg/g으로 측정되어 NC군에 비해 DC군이 204% 증가하였고, DC군에 비해 MT군이 44%로 정상수준으로 감소하였다. 간 T-CHO 농도는 NC군이 2.6, DC군이 2.9, MT군이 2.5, MRB군이 1.9mg/g으로 NC군에 비해 DC군이 증가하였고 DC군에 비해 MT군 및 MRB군이 감소하였으나 유의적인 차이는 없었다. FFA 함량은 NC군에 비해 DC군, MT군 및 MRB군 모두 감소하였고 감소한 세군 사이의 차이는 없었다. 결론적으로 MT군이 DC군에 비해 간의 FFA 농도에는 효과가 없었으나 간 조직 TG 농도를 정상수준으로 감소시켰으며 T-CHO 수준을 감소시켜 간 조직의 지질수준 개선 효과를 나타내었다.
실험예5. 소장 점막의 이당류분해효소 활성
상지 및 상백피 열수추출물 투여에 따른 MT군의 혈당강하 효과가 당이 대사되어 흡수되는 과정에서 차이가 있었는지 확인하기 위해 상기 실시예5에서 얻은 소장을 이용하여 소장 점막증의 lactase, sucrase 및 maltase 활성을 Dahlqvist의 방법으로 측정하였다.
이를 평가하기 위해 상기 실시예5의 방법으로 얻은 소장의 유문괄약근에서 10cm 떨어진 지점부터 맹장 직전까지 자른 후 3등분 하여 proximal, middle distal 부분으로 구분하여 생리식염수로 세척하였고 소장은 길이대로 잘라 편 후 차가운 생리식염수로 씻어 냉각 판에서 점만을 microscopic glass로 긁어서 무게를 측정 후 측정한 무게의 4배의 증류수와 함께 homogenizer로 균질화 시켜 4℃, 7000xg에서 10분간 원심분리하였다. 원심분리 후 상층액을 취해 효소활성 측정시료로 사용하였다. 희석시킨 효소 시료(lactase:1배, sucrase: 8배, maltase: 10배) 0.1mL, 기질 용액 0.056M disaccahride solution 및 0.1M sodium maltase buffer(pH 6.0) 0.1mL를 시험관에 넣고 잘 혼합해서 37℃ water bath에서 1시간 반응시킨 후 증류수 0.8mL를 넣고 2분간 끊는 물에 담근 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다.
실험 결과, 도11에서 알 수 있듯이 proximal의 lactase 활성은 MT군이 DC군에 비해 70% 감소하였다. sucrase 활성은 NC군에 비해 DC군이 120% 증가하였으며 DC군에 비해 MT 및 MRB군이 각각 67%, 75% 감소하였다. maltase 활성은 NC군에 비해 DC군이 138% 증가하였으며 MT군은 77% 감소하였다. MRB군은 DC군에 비해 70% 감소하였다. middle 부분의 lactase 및 sucrase 활성은 각 군의 유의적인 차이는 없었다. maltase 활성은 NC군에 비해 DC, MT 및 MRB군 모두 감소하였다. Distal 부분은 lactase, sucrase 및 maltase 활성은 NC군에 비해 DC, MT 및 MRB군 모두 감소하였다.
실험예6. 상지 지표성분 실험동물의 체중변화량
상지 지표성분의 항당뇨 효과 실험에서 NC, DC, ORTG, ORT 및 Met 그룹의 실험동물의 실험 시작 전 초기체중과 실험 종료 후 마지막 체중을 측정하여 비교하였다.
실험 결과, 하기 표6에서 알 수 있듯이 각 실험군간의 유의적인 차이는 없었다.
Group Initial BW(g) Final BW(g)
NC 33.24 34.78
DC 33.73 32.33
ORTG 33.43 33.19
ORT 33.92 31.66
Met 33.09 32.84
실험예7. 혈당 및 혈장 인슐린 함량 측정
상지 지표성분의 항당뇨 효과를 확인하기 위해 실험동물에 실험 시료 투여 19일 후에 12시간 절식시키고 다음날 오전에 실험 시료 투여 전 공복혈당을 측정하였다. 혈당 측정은 미정맥으로부터 소량의 혈액을 채취하여 혈당계(blood glucose monitoring kit, ARKRAY)를 이용하여 측정하였다.
실험 결과, 도12에서 알 수 있듯이 경구투여 19일 경과 후 공복혈당은 NC군에 비해 DC군이 232% 증가하였고, DC군에 비해 ORTG군, ORT군 및 Met군 모두 감소하였다.
또 도13에서 알 수 있듯이 실험동물 희생 후 혈장에서 측정한 혈당은 NC군에 비해 DC군이 증가하였고 DC군에 비해 ORT군이 43% 감소하여 정상수준으로 나타났다. ORTG군 및 Met군은 유의적인 차이는 없었다. 혈장 인슐린 농도는 NC군에 비해 당뇨를 유발한 DC, ORT, ORTG 및 Met군 모두 유의적인 감소를 나타냈고 네군 사이의 차이는 없었다. 따라서 각 군의 혈당 농도의 변화는 인슐린 농도의 변화로 인한 것이 아닌 것으로 나타났다.
실험예8. 장기 무게 측정
상지 지표성분의 항당뇨 실험에서 상기 실시예5의 방법으로 얻은 시료의 무게를 측정하였다.
실험 결과, 하기 표7에서 알 수 있듯이 간과 췌장의 무게는 각 실험군간의 유의적인 차이는 나타나지 않았다.
Group Liver(g) Pancreas(g)
NC 21.5±0.53 5.7±0.34
DC 23.0±0.93 6.2±0.52
ORTG 21.7±1.27 6.0±0.44
ORT 20.5±1.37 5.9±0.38
Met 23.4±0.68 6.8±0.26
실험예9. 혈중지질 농도 측정
상지 지표성분 투여에 따른 혈중 지질농도를 측정하기 위해 상기 실시예5에서 얻은 혈장을 이용하여 혈중지질 농도를 측정하였고 혈장 포도당 함량 측정을 위해 포도당 측정용 시액(Asan kit)을 사용하였다. 혈장 인슐린은 mouse Insulin ELISA kit(U-type, Shibayagi Co.)를 사용하여 측정하였다.
실험 결과, 도14에서 알 수 있듯이 혈장 TG농도와 GDL-CHO 농도는 실험군간의 차이가 없었다. T-CHO 농도는 DC군에 비해 ORTG군, ORT군 및 Met군에서 감소하였고 NC군과 DC군간의 차이는 없었다. HDL-CHO/T-CHO 비율은 다른 실험군에 비해 Met군에서 크게 증가하였다.
또 도15에서 알 수 있듯이 혈장 내 free fatty acid(FFA) 농도는 NC군과 비교했을 때 DC, ORTG, ORT 및 Met군에서 감소하였고 네군 사이에서 유의적인 차이는 없었다.
실험예10. 소장 점막의 이당류분해효소 활성
상지 지표성분 투여에 따른 혈당강하 효과가 당이 대사되어 흡수되는 과정에서 차이가 있었는지 확인하기 위해 상기 실시예5에서 얻은 소장을 이용하여 소장 점막증의 lactase, sucrase 및 maltase 활성을 Dahlqvist의 방법으로 측정하였다.
이를 평가하기 위해 상기 실시예5의 방법으로 얻은 소장의 유문괄약근에서 10cm 떨어진 지점부터 맹장 직전까지 자른 후 3등분 하여 proximal, middle distal 부분으로 구분하였다. 생리식염수로 세척하였고 소장은 길이대로 잘라 편 후 차가운 생리식염수로 씻어 냉각 판에서 점만을 microscopic glass로 긁어서 무게를 측정 후 측정한 무게의 4배의 증류수와 함께 homogenizer로 균질화 시켜 4℃, 7000xg에서 10분간 원심분리하였다. 원심분리 후 상층액을 취해 효소활성 측정시료로 사용하였다. 희석시킨 효소 시료(lactase:1배, sucrase: 8배, maltase: 10배) 0.1mL, 기질 용액 0.056M disaccahride solution 및 0.1M sodium maltase buffer(pH 6.0) 0.1mL를 시험관에 넣고 잘 혼합해서 37℃ water bath에서 1시간 반응시킨 후 증류수 0.8mL를 넣고 2분간 끊는 물에 담근 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 상기 실험예5의 결과에서 proximal 부분에서만 이당류분해효소 활성 효과가 나타났기 때문에 proximal 부분만 이당류분해효소 활성을 측정하였다.
실험 결과, 도16에서 알 수 있듯이 proximal 부분의 lactase, sucrase 및 maltase의 활성은 NC군에 비해 DC군, ORTG군, ORT군 및 Met군에서 모두 효소 활성이 증가하였으며 네군간의 유의적인 차이는 없었다.
실험예11. 간 조직 GLUT2 mRNA 발현량 확인
상지 지표성분 투여에 따른 간으로 포도당 유입이 증가하였는지를 확인하기 위해 상기 실시예5의 방법으로 얻은 간 조직을 사용하여 포도당수송체인 glucose transporter 2(GLUT2)의 mRNA 발현량을 측정하였다.
이를 평가하기 위해 간 조직을 액체질소가 담긴 막자사발에서 균질화하였고 대장 조직 0.1g당 RNAiso Plus(TaKaRa) 1mL을 첨가하였다. 상층액을 취해 chloroform 200uL를 첨가하여 4℃, 10,000rpm에서 5분간 원심분리하였다. 원심분리하여 얻은 상층액에 isopropanol 500uL를 첨가한 후 4℃, 14,000rpm에서 20분 동안 원심분리하여 RNA pellet을 얻었다. 상기 단계에서 얻은 RNA pellet을 75% ethanol로 washing하고 4℃, 9,500rpm에서 5분 동안 원심 분리한 후 air-dry 후 diethyl pyrocarbonate(DEPC)-treated water에 녹여 분석하였다.
실험 결과, 도17에서 알 수 있듯이 간의 mRNA 발현량은 NC군에 비해 DC군에서 감소하였고, DC군에 비해 ORTG군이 증가하였으나 유의적인 차이는 없었다. 그러나 DC군에 비해 ORT군 및 Met군은 유의적으로 증가하였다.
실험예12. 간 조직 글리코켄 함량 확인
상기 실험예11에서 GLUT2 mRNA 발현량의 차이를 확인하였기 때문에 상피 지표성분 투여에 따른 간 조직 내로 유입되는 포도당의 양에도 차이가 있을 것으로 생각하고 간 조직의 포도당 저장 형태인 글리코겐 양의 변화를 분석하였다.
실험 결과, 도18에서 알 수 있듯이 간의 글리코겐 함량은 NC군에 비해 DC군에서 감소하였고, DC군에 비해 ORTG군과 ORT군은 증가하였으나 유의적인 차이는 없었고, Met군은 유의적으로 증가하였다.
결론적으로 상지 열수추출물이 소장 이당류분해효소 활성을 억제하여 혈당을 낮춰 혈장 T-CHO 농도를 감소시키고 간 조직 TG 농도를 감소시켜 지질 개선 효과가 나타났고 상백피 열수추출물과 비교했을 때 효능이 더 뛰어나게 나타났다. 상지 지표성분의 항당뇨 효과 실험에서는 상지의 주된 물질인 ORT의 혈당강하 효과를 확인하였고 그 기전으로 ORT가 간 조직의 GLUT2 mRNA 발현량을 증가시켜 간 조직 내로의 포도당 유입을 증가시키고 글리코겐의 합성을 증가시켜 혈당을 낮추는 것으로 나타났다. 또한 혈장 T-CHO 농도를 감소시켜 지질 개선에도 효과가 있다(도19).
본 발명은 상지 열수추출물 및 상지 지표성분인 ORT를 함유하는 당뇨병 예방 및 치료용 조성물을 제공하는 뛰어난 효과가 있으므로 건강식품 및 의약품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다.

Claims (5)

  1. 건조한 상지에 이온수를 가하여 초음파추출기에서 초음파 추출하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 상지 추출물을 감압 농축하여 열수 추출하는 단계로 이루어지거나 또는 상기 단계에서 얻은 상지 열수추출물을 초음파분쇄기를 이용하여 에탄올 추출 단계와; 상기 단계에서 얻은 에탄올 추출물을 여과 및 감압농축하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 농축물을 다시 에탄올에 용해한 후 헥산으로 분획하여 얻은 탈지 에탄올 추출물을 감압농축하는 단계와; 상기 단계에서 감압농축한 탈지 에탄올 추출물에 가수하여 CH2Cl2, EtOAC 및 n-BuOH로 순차적으로 분획하여 EtOAC 분획물로부터 oxyresveratrol aglycon을 분리 및 정제하는 단계로 이루어진 상지 지표성분 oxyresveratrol aglycon의 중 어느 하나를 함유하는 당뇨 예방 및 건강 기능성 식품 조성물.
  2. 건조한 상지에 이온수를 가하여 초음파추출기에서 초음파 추출하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 상지 추출물을 감압 농축하여 열수 추출하는 단계로 이루어지거나 또는 상기 단계에서 얻은 상지 열수추출물을 초음파분쇄기를 이용하여 에탄올 추출 단계와; 상기 단계에서 얻은 에탄올 추출물을 여과 및 감압농축하는 단계와; 상기 단계에서 얻은 농축물을 다시 에탄올에 용해한 후 헥산으로 분획하여 얻은 탈지 에탄올 추출물을 감압농축하는 단계와; 상기 단계에서 감압농축한 탈지 에탄올 추출물에 가수하여 CH2Cl2, EtOAC 및 n-BuOH로 순차적으로 분획하여 EtOAC 분획물로부터 oxyresveratrol aglycon을 분리 및 정제하는 단계로 이루어진 상지 지표성분 oxyresveratrol aglycon의 중 어느 하나를 함유하는 당뇨 예방 및 치료용 약학적 조성물.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 식품 조성물은 음료, 껌, 차 및 선식 중 어느 하나의 제형인 것이 특징인 식품조성물.
  4. 제 2항에 있어서, 상기 약학적 조성물은 정제, 환제, 산제, 과립제, 캅셀제, 현탁제, 유제, 시럽제, 비수성용제, 현탁제 및 동결건조제제로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형을 가지는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  5. 제 2항에 있어서, 상기 조성물은 약학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제를 추가로 더 포함하는 것이 특징인 약학적 조성물.
KR1020160031775A 2016-03-17 2016-03-17 상지 열수추출물과 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법 KR101908772B1 (ko)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160031775A KR101908772B1 (ko) 2016-03-17 2016-03-17 상지 열수추출물과 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법
PCT/KR2016/003209 WO2017159912A1 (ko) 2016-03-17 2016-03-29 상지 열수추출물과 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020160031775A KR101908772B1 (ko) 2016-03-17 2016-03-17 상지 열수추출물과 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20170108222A true KR20170108222A (ko) 2017-09-27
KR101908772B1 KR101908772B1 (ko) 2018-10-16

Family

ID=59850428

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020160031775A KR101908772B1 (ko) 2016-03-17 2016-03-17 상지 열수추출물과 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법

Country Status (2)

Country Link
KR (1) KR101908772B1 (ko)
WO (1) WO2017159912A1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108403729A (zh) * 2018-05-14 2018-08-17 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） 茶树菇提取物的制备方法及其在制备降尿酸药物的应用

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102275824B1 (ko) 2021-01-22 2021-07-09 주식회사 리우에이치 당뇨 예방 및 개선용 복합 천연물 조성물 및 이의 제조 방법
CN113461532B (zh) * 2021-07-05 2023-05-02 南昌大学 一种具有降血糖作用的黑桑素a及其制备方法和应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20110037020A (ko) * 2009-10-05 2011-04-13 농업회사법인 주식회사 청보건강 양잠산물과 한약재를 함유하는 항당뇨 조성물
KR101438543B1 (ko) * 2012-02-14 2014-09-18 대구가톨릭대학교산학협력단 항염증, 항노화 기능성 옥시레스베라트롤, 트란스-레스베라트롤 및 모라신이 함유된 뽕나무 가지추출물의 제조방법
KR20140147996A (ko) * 2013-06-21 2014-12-31 고려대학교 산학협력단 상백피 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈중 콜레스테롤 저하제 조성물
KR20160017994A (ko) * 2014-08-07 2016-02-17 (주)주환바이오.셀 이당류 소화효소활성 억제에 의한 혈당강하용 조성물

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20010105095A (ko) * 2000-05-19 2001-11-28 박찬우 당뇨병 치료제 및 기능성 식품
KR101067979B1 (ko) * 2011-03-17 2011-09-26 양평군 발효뽕잎 상지음료 및 그 제조방법
JP2016033125A (ja) * 2014-07-30 2016-03-10 株式会社ソシア 血糖上昇抑制作用と血圧上昇抑制作用を合わせ持つ桑小枝及び桑枝皮微粉砕後の生理活性

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20110037020A (ko) * 2009-10-05 2011-04-13 농업회사법인 주식회사 청보건강 양잠산물과 한약재를 함유하는 항당뇨 조성물
KR101438543B1 (ko) * 2012-02-14 2014-09-18 대구가톨릭대학교산학협력단 항염증, 항노화 기능성 옥시레스베라트롤, 트란스-레스베라트롤 및 모라신이 함유된 뽕나무 가지추출물의 제조방법
KR20140147996A (ko) * 2013-06-21 2014-12-31 고려대학교 산학협력단 상백피 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈중 콜레스테롤 저하제 조성물
KR20160017994A (ko) * 2014-08-07 2016-02-17 (주)주환바이오.셀 이당류 소화효소활성 억제에 의한 혈당강하용 조성물

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108403729A (zh) * 2018-05-14 2018-08-17 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） 茶树菇提取物的制备方法及其在制备降尿酸药物的应用
CN108403729B (zh) * 2018-05-14 2021-09-14 广东省微生物研究所（广东省微生物分析检测中心） 茶树菇提取物的制备方法及其在制备降尿酸药物的应用

Also Published As

Publication number Publication date
WO2017159912A1 (ko) 2017-09-21
KR101908772B1 (ko) 2018-10-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106074971A (zh) 一种降血糖中药组合物及制备方法与应用
US7959956B2 (en) Method for treating diabetic complications
KR101908772B1 (ko) 상지 열수추출물과 oxyresveratrol을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 기능성 조성물 및 그 제조방법
US11266668B2 (en) Dietary supplement for glycemia control and diabetes prevention
WO2010107170A1 (ko) 대사성질환 치료용 조성물
KR101427784B1 (ko) 인삼 및 뽕나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 항당뇨 조성물
KR101127454B1 (ko) 가공된 알로에 베라 겔을 포함하는 제2형 당뇨병 치료용의약 조성물
KR101976941B1 (ko) 토종 보리수 추출물을 포함하는 당뇨병 예방 및 치료용 조성물
EP3146976B1 (en) Pharmaceutical composition for preventing or treating macular degeneration, containing natural mixture extract as active ingredient
KR20200079206A (ko) 결명자 추출물을 포함하는 당뇨병 예방 또는 치료용 조성물
EP3616697A1 (en) Use of a pharmaceutical carrier in the preparation of an anti-diabetic pharmaceutical composition
KR101910898B1 (ko) 새콩 분말 또는 이의 추출물을 포함하는 당뇨병 및 당뇨 합병증 예방 및 치료를 위한 조성물
KR20160048089A (ko) 쌀의 특징화
KR20080085358A (ko) 측백 추출물, 분획물 또는 이로부터 분리한 화합물을포함하는 당뇨병 합병증 예방 및 치료용 조성물
KR20220132349A (ko) 신품종 고춧잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 대사성 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
KR20100111088A (ko) 복합 생약 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병 또는 이로 인한 합병증의 예방 및 치료용 조성물
KR100706134B1 (ko) 녹나무 잎 추출물 또는 그의 분획물을 유효성분으로포함하는 당뇨병 예방 및 치료용 조성물
TWI610681B (zh) 一種黑蒜頭之抗血色素糖化及降血糖萃取物之製作方法
CN110404029B (zh) 一种具有降血糖功效的组合物及其制备方法和应用
KR20050102017A (ko) 식초 가공 인삼제제를 이용한 제2형 당뇨병과대사증후군의 예방 및 치료용 조성물
CN109700964B (zh) 一种减肥的组合物及其制备方法与用途
KR20180121338A (ko) 설포라핀을 다량 함유하는 무씨 추출물의 제조방법 및 이로부터 추출된 무씨 추출물을 함유하는 체중, 혈당조절용 및 지방간 예방용 식품 조성물, 약품 조성물, 동물용 의약품
KR102261920B1 (ko) 황기 및 지치 복합 추출물을 유효성분으로 포함하는 간 손상 예방 및 치료용 조성물
EP4389135A1 (en) Eye damage prevention composition containing dendropanax morbifera lev. extract
KR20100108869A (ko) 생약재 혼합 추출물을 포함하는 당뇨병 예방 및 치료용 조성물

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
E902 Notification of reason for refusal
E90F Notification of reason for final refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant