KR20170082591A

KR20170082591A - Sirt6 활성화제 및 dna 복구 효소를 포함하는 조성물

Info

Publication number: KR20170082591A
Application number: KR1020177015599A
Authority: KR
Inventors: 나딘 페르노데트; 켈리 동; 에드워드 펠레
Original assignee: 이엘씨 매니지먼트 엘엘씨
Priority date: 2014-12-09
Filing date: 2015-11-23
Publication date: 2017-07-14
Also published as: US9539196B2; US20160158139A1; EP3229825A1; CN106999400B; EP3229825A4; ES2769839T3; KR101991601B1; JP2017538700A; AU2015361060A1; EP3229825B1; CA2969421A1; JP6391837B2; US10022314B2; AU2015361060B2; US20170071845A1; WO2016094073A1; CA2969421C; CN106999400A

Abstract

본 발명의 조성물은 8-옥소구아닌 글리코실라제 (OGG1) 및 SIRT6 활성화 펩티드 G-A-G-V-S-A-E-NH₂를 포함한다. 본 발명의 조성물은 피부 세포 DNA의 복구를 촉진하고/거나 UV 손상으로부터 피부 세포 DNA를 보호함으로써 항노화 효과를 나타낸다.

Description

SIRT6 활성화제 및 DNA 복구 효소를 포함하는 조성물 {COMPOSITIONS COMPRISING A SIRT6 ACTIVATOR AND A DNA REPAIR ENZYME}

본 발명은 노화 피부의 외관을 개선하기 위한 관리 분야에 관한 것이다. 보다 구체적으로, 본 발명은 자외선에 의해 손상된 피부 세포에서의 DNA의 보호 및/또는 복구를 촉진하는 국소 조성물 및 방법에 관한 것이다.

시르투인(Sirtuin)은 수많은 세포성 후생유전학적 경로 또는 대사 경로에서 중요한 역할을 하는 효소이다. 포유류의 세포에서, SIRTUINS 1-7 또는 SIRT1-7이라 불리는 7종의 시르투인 상동체가 동정되었다. SIRT6은 세포 핵 (예를 들어, 인간 케라틴세포 및 피부 섬유모세포)에서 국재화되고 대사 및 장수와 연관된 시르투인 단백질의 보존 패밀리의 구성원이다. SIRT6은 히스톤 3, 리신 9 (H3K9) 데아세틸라제로서, 주로 DNA 복구 및 텔로미어 안정성에 관여한다.

"SIRT6 활성화 펩티드"라는 용어는 그 결과를 초래하는 어떤 경로에 의해서든지 세포 내 SIRT6의 양을 증가시키는 펩티드를 의미한다. 그 전문이 본원에 참조로 포함되는 US2011-0318284에 SIRT6 활성화 펩티드를 포함하는 조성물이 개시되어 있다. 이 펩티드는 인간 SIRT 단백질의 고도로 보존되는 영역으로부터 유래된다. US2011-0318284에 개시된 8개의 펩티드 서열 중에서, 여기서는 하기 서열이 관심 서열이다:

(서열식별번호(SEQ ID No.) 1) G-A-G-V-S-A-E-NH₂

Gly-Ala-Gly-Val-Ser-Ala-Glu-NH₂

펩티드의 C-말단에 있는 NH₂ 기가 펩티드에서 치환되어 특정 형태의 분해에 대한 펩티드의 저항성을 개선하였음을 주목한다. 상기 위치에 있는 NH₂는 자연적으로 발생하지 않는다.

상기 펩티드는 단기 배양에서 정상 인간 섬유모세포 및 정상 인간 케라틴세포에서의 시르투인 6 발현을 매우 유의하게 증가시키는 것으로 보고되었다. 또한, 시르투인 6 발현 자극 효과는 장기간 동안에도 유지되었다. 참고문헌에 따르면, 활성화 펩티드는 생리학상 허용되는 매체에서 단독으로 또는 적어도 1종의 다른 활성화제와 조합되어 사용될 수 있다. 참고문헌에는 또한 DNA 분해를 방지 및/또는 복구하고, 텔로미어 유지를 개선하고, 또한 세포 노화를 감소시키는 화장품 조성물의 사용이 개시되어 있다. 그러나, US2011-0318284에 아라비돕시스 탈리아나(Arabidopsis thaliana)에 대한 언급은 없다.

2013년 10월 3일에 출원된 동시계속출원 US14/045,075에도 US2011-0318284와 동일한 SIRT6 활성화 펩티드를 포함하는 조성물이 개시되어 있다. 이 참고문헌에 따르면, SIRT6 활성화 펩티드는 0.0001 내지 8%, 바람직하게는 약 0.001 내지 3%, 보다 바람직하게는 약 0.01 내지 1% 범위의 양으로 조성물에 존재할 수 있다. 바람직한 실시양태에서, 활성화 펩티드는 효모 추출물의 성분으로서 제공된다.

US14/045,075는 또한 정상 인간 표피 케라틴세포 (NHEK)에서의 SIRT6 발현의 용량 의존성 증가가 하기 SIRT6 활성화 펩티드에 의해 초래됨을 보고하였다:

(서열식별번호 1) G-A-G-V-S-A-E-NH₂

Gly-Ala-Gly-Val-Ser-Ala-Glu-NH₂

또한, 정상 인간 피부 섬유모세포에서의 콜라겐 합성의 예상치 못한 증가가 상기 SIRT6 활성화 펩티드 (서열식별번호 1)를 함유하는 라미나리아 디기타타(Laminaria digitata) 추출물, 나르시수스 타제타(Narcissus tazetta) 구근 추출물, 및 효모 단백질 추출물의 조합에 의해 초래됨이 보고되었다. 추가로, US14/045,075에는 임의적 식물성 추출물의 긴 목록에 아라비돕시스 탈리아나 추출물이 언급되었고, 여기서 1종 이상의 임의적 식물성 추출물에 대한 권장 범위는 전체 조성물의 약 0.0001 내지 10 중량%, 바람직하게는 약 0.0005 내지 8 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.001 내지 5 중량%인 것으로 보고되었다. 그러나, 아라비돕시스 탈리아나 추출물은 임의의 특정 활성에 대해서 주목되지 않았고, 아라비돕시스 탈리아나 추출물과 본원에 개시된 임의의 SIRT6 활성화 펩티드 사이의 상승작용이 개시되지 않았다.

8- 옥소구아닌 글리코실라제를 함유하는 아라비돕시스 탈리아나 추출물

8-옥소구아닌 글리코실라제 (OGG1)는 반응성 산소종 및 이온화 방사선에 노출됨으로써 생성되는 염기 부산물인 8-옥소구아닌을 절단하는 DNA 복구 효소이다. OGG1은, 예를 들어 피부 세포에서의 게놈 DNA와 미토콘드리아 DNA 둘 모두에서 활성이다. 8-옥소구아닌 글리코실라제는 아라비돕시스 탈리아나 식물의 효모 발효에 의해 수득될 수 있다. 아라비돕시스 탈리아나는 십자화과(Brassicaceae family)에 속하는 종으로서, 식물 생물학의 연구에서 사용되는 모델 유기체 중 하나이므로 널리 공지되어 있다. 아라비돕시스 탈리아나 발효물로부터의 8-옥소구아닌 글리코실라제 추출물은 레시틴 및 물을 함유하는 리포솜 제형으로, 미국 뉴저지주 엥글우드 클리프스에 소재하는 바넷 프로덕츠 코포레이션(Barnet Products Corp.)으로부터 록시솜즈(Roxisomes)™라는 상표명으로 시판되고 있다. 약 0.5%의 록시솜™은 8-옥소구아닌 글리코실라제이다.

레보리스(Revoris)는 록시솜즈™ 및 2종의 펩티드: 팔미토일 올리고펩티드 (3 아미노산 펩티드) 및 팔미토일 테트라펩티드-7 (4 아미노산 펩티드)을 포함하는 것으로 보고된 시판용 주름 관리 제품이다. 이들 펩티드는 서열식별번호 1의 7 아미노산 펩티드와 동일하지도 않으며 이 펩티드를 시사하지도 않는다. 레보리스의 록시솜즈와 펩티드 사이의 상승작용도 시사되지 않았다.

본 발명의 조성물은 8-옥소구아닌 글리코실라제 (OGG1) 및 하기 SIRT6 활성화 펩티드를 포함한다.

(서열식별번호 1) G-A-G-V-S-A-E-NH₂

Gly-Ala-Gly-Val-Ser-Ala-Glu-NH₂

본 발명의 조성물은 피부 세포 DNA의 복구를 촉진하고/거나 자외선 손상으로부터 피부 세포 DNA를 보호함으로써 항노화 효과를 나타낸다.

도 1은 UVB 복사선에 노출된 NHEK에서의 DNA 단편화에 대한 SIRT6 활성화 펩티드 (서열식별번호 1)의 영향을 보여준다.
도 2는 UVB 복사선에 노출된 NHEK에서의 DNA 단편화에 대한 8-옥소구아닌 글리코실라제를 함유하는 아라비돕시스 탈리아나 추출물의 영향을 도시한다. 도면은 또한 서열식별번호 1의 펩티드를 함유하는 효모 발효물의 영향도 도시한다.

본원에 언급된 모든 백분율은, 달리 지시되지 않는 한, 전체 조성물의 중량 백분율이다.

시험예 1

본 발명자들은 SIRT6 활성화제 (서열식별번호 1의 펩티드)에 의한 정상 인간 표피 케라틴세포 (NHEK)의 처리가 UVB 복사선에 의해 유발되는 DNA 단편화를 유의하게 감소시킴을 입증하였다. 처리법에 관한 설명이 이어진다.

샘플 제조

이 연구에서는 대조 샘플과 3가지 유형의 시험 샘플이 사용되었다. 대조 샘플은 펩티드 처리도 되지 않았고, UVB 복사선에도 노출되지 않았다. 1형 샘플은 하기에 기재된 바와 같이 펩티드로 처리되었지만, UVB 복사선에 노출되지는 않았다. 2형 샘플은 펩티드로 처리되지 않았지만, UVB 복사선에 노출되었다. 3형 샘플은 하기에 기재된 바와 같이 펩티드로 처리되었고, 또한 UVB 복사선에도 노출되었다. 분말 형태의 SIRT6 활성화 펩티드 (서열식별번호 1)는 50 ppm의 용액으로 제조하였다.

모든 시험 샘플에 대하여, DNA 단편화 분석을 위해 정상 인간 표피 케라틴세포 (NHEK)를 트레비젠(Trevigen)의 Flare™ 슬라이드에 8,000개 세포/스폿으로 시딩하였다. 세포를 37℃, 95%의 습도 및 5% CO₂의 세포 배양 배지에서 24시간 동안 인큐베이션하였다. 1형 및 3형 샘플을 3%의 세포 배양 배지에서 50 ppm 분말 펩티드 용액으로 처리하고 (용액 중 0.00015%의 펩티드에 상응함), 모든 샘플을 48시간 동안 인큐베이션하였다. 그 후에, 세포 배양 배지를 모든 샘플로부터 제거하고 100 ㎕의 둘베코 인산염 완충 식염수(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline)로 교체하였다. 2형 및 3형 샘플을 옵시텍 닥터 그뢰벨(Opsytec Dr. Groebel)의 복사선 조사 장치에서 20 mJ/cm²의 UVB 복사선에 노출시켰다. 그 후에, 1형 및 3형 샘플을 다시 3%의 세포 배지에서 분말 펩티드 용액으로 처리하고, 모든 샘플을 6시간 동안 인큐베이션한 후, 코멧 분석법(comet assay)을 실시하였다.

6시간의 인큐베이션 후에, 샘플 세포를 인산염 완충 식염수로 세척하였다. 37℃에서 유지된 용융 아가로스 75 ㎕를 코멧 슬라이드의 각 스폿에 균등하게 피펫팅한 후에, 4℃에서 10분 동안 인큐베이션하였다. 슬라이드를 얼음 상의 저온 용해 용액에 3시간 동안 침지시켰다. 슬라이드를 용해 용액에서 꺼내어 실온에서 알칼리성 용액 (300 mM NaOH, 1 mM EDTA, pH>13)에 30분 동안 넣어 두었다. 이때 세포는 사멸하였고 DNA를 더이상 복구할 수 없다.　 후속적으로, 슬라이드를 전극으로부터 등거리에 있도록, 얼음으로 냉각된 전기영동 장치에 넣었다. 저온 알칼리성 전기영동 용액 (300 mM NaOH, 1 mM EDTA, pH>13)을 슬라이드를 덮을 정도로만 장치에 부었다. 전기영동을 23 V에서 30분 동안 전개시켰다. 전기영동 후에, 슬라이드를 물로 세정하고, 70% EtOH에 5분 동안 침지시켰다. 슬라이드를 EtOH 용액에서 꺼내어 타월 위에 두고 밤새 공기 건조시켰다. SYBR® 그린 1 핵산 염색약 (미국 오리건주 유진에 소재하는 몰리큘라 프로브스, 인크.(Molecular Probes, Inc.))을 TE 완충액 (10 mM 트리스(Tris)-HCl, 1 mM EDTA, pH 7.5)으로 1:10000 희석시켰다. 50 ㎕의 희석된 SYBR® 그린 1을 각 스폿에 피펫팅하였다. SYBR® 그린 I은 DNA와 결합하여 복합체를 형성하였고, 이것은 520　nm에서 녹색광을 발산하였다. 슬라이드를 4℃에서 5분 동안 인큐베이션하였다. 슬라이드로부터 과량의 염색약을 제거한 후에, 슬라이드를 다시 건조시켰다. 슬라이드를 20x 대물렌즈와 함께 FITC (플루오레세인 이소티오시아네이트) 필터를 갖는 올림푸스(Olympus) BX51 현미경으로 관찰하였다. 영상을 니콘 엘리먼츠(Nikon Elements) 소프트웨어를 사용하여 수집하였다. 트리텍, 코포레이션 (TriTek, Corp; 미국 버지니아주 서머덕 소재)의 코멧 스코어(Comet Score) 소프트웨어로 테일 모멘트(tail moment)를 분석하였다. 결과는 하기와 같다.

결과

도 1을 참조하면, 1형 샘플 (서열식별번호 1의 SIRT6 활성화제 펩티드로 처리되었으나, 복사선 조사는 받지 않았음)은 대조 샘플과 유사한 DNA 단편화를 가졌다. 2형 샘플 (UVB 복사선에 노출되었으나, 펩티드 처리되지 않았음)은 DNA 손상의 약 14배 증가를 보였다. 3형 샘플 (펩티드로 예비처리되었고, UVB 복사선에 노출되었고, 펩티드로 후속처리되었음)은 대조 샘플과 유사한 DNA 단편화를 가졌다. 본 발명자들은 서열식별번호 1의 펩티드가 NHEK에서의 SIRT6 수준을 자극하여, UVB 복사선에 의해 유발되는 DNA 단편화의 복구를 초래하였다는 결론을 내렸다.

시험예 2

이제 본 발명자들은 DNA 복구 효소 (OGG1)와 조합된, 서열식별번호 1의 SIRT6 활성화제 펩티드에 의한 정상 인간 표피 케라틴세포 (NHEK) 처리가 UVB 복사선에 의해 유발되는 DNA 단편화를 유의하게 감소시켰고, 또한 상승적으로 감소시켰음을 확인하였다. 처리법에 관한 설명이 이어진다.

샘플 제조

이 연구에서는 대조 샘플과 5가지 유형의 시험 샘플이 사용되었다. 모든 대조 샘플과 시험 샘플에 대하여, NHEK를 트레비젠의 Flare™ 슬라이드에서 성장시켰고, 인산염 완충 식염수의 얇은 층으로 덮었다. 그 후에, 2형 - 5형의 시험 샘플을 40 mJ/cm²의 UVB 복사선에 노출시켰다.　 대조 샘플은 추가 처리를 받지 않았다. UVB 복사선에 노출되지 않은 1형 시험 샘플은 록시솜즈™ (레시틴 및 물을 포함하는 리포솜 제형으로, 8-옥소구아닌 글리코실라제를 포함하는 아라비돕시스 탈리아나의 추출물)를 매체 중 0.05% 용액을 달성하도록 첨가하여 처리하였다. 2형 샘플은 추가 처리를 받지 않았다. 3형 시험 샘플은 록시솜즈™를 매체 중 0.025% 용액을 달성하도록 첨가하여 추가로 처리하였다. 4형 샘플은 약 2%의 서열식별번호 1의 펩티드를 포함하는 가수분해된 효모 추출물 (미국 켄터키주 커빙턴에 소재하는 애시랜드, 인크.(Ashland, Inc.))을 매체 중 0.5% 용액 (용액 중 약 0.01%의 펩티드에 상응함)을 달성하도록 첨가하여 추가로 처리하였다. 5형 샘플을 록시솜즈™ (0.025%) 및 효모 추출물 (0.5%)을 매체에 첨가하여 추가로 처리하였다. 모든 샘플을 4시간 동안 인큐베이션한 후에, 상기에 기재된 바와 같이 코멧 분석법을 수행하였다.

결과

도 2에서, DNA 단편화는 2형 시험 샘플 (UVB가 조사되었지만, 예비처리를 받지 않은 것)에 대하여 정규화되었다. 이 척도에서, 대조 샘플은 약 0.075의 정규화된 코멧 점수를 갖는 반면에, 1형 시험 샘플 (록시솜즈™로 처리되었으나, 복사선 조사는 받지 않았음)은 약 0.2의 코멧 점수를 나타냈고, 이는 록시솜즈™가 DNA 단편화를 가속시켰음을 시사한다. 3형 샘플 (록시솜즈™로 처리된 다음, UVB 복사선에 노출되었음)은 약 1.025의 코멧 점수를 가졌고, 이 역시 록시솜즈™가 DNA 단편화를 가속시켰음을 시사한다. 4형 시험 샘플 (효모 추출물로 처리된 다음, UVB 복사선에 노출되었음)은 2형 시험 샘플과 비교하여 22% 감소한, 약 0.78의 코멧 점수를 가졌다. 이는 실시예 1의 결과와 일치한다. 5형 시험 샘플 (록시솜즈™ 및 효모 추출물로 처리된 다음, UVB 복사선에 노출되었음)은 2형 시험 샘플과 비교하여 79% 감소한, 약 0.21의 코멧 점수를 가졌다.

고찰

단독으로 사용되었을 때, 록시솜즈™ (8-옥소구아닌 글리코실라제 (OGG1))는 NHEK에서의 DNA 단편화를 증가시키는 것으로 보인다. 단독으로 사용되었을 때, 서열식별번호 1의 펩티드를 포함하는 효모 발효 추출물은 SIRT6을 자극하여 UVB 노출로 인한 DNA 단편화를 복구시키는 것으로 보인다 (22% 개선). 조합되어 사용되었을 때, 효모 발효 추출물과 록시솜즈™는 SIRT6을 자극하여 UVB 노출로 인한 DNA 단편화를 복구시키는 것으로 보인다 (훨씬 높은 79% 개선). 이는 특히 단독으로 사용되는 록시솜즈™가 NHEK에서의 DNA 단편화를 증가시키는 것으로 보이므로, 전혀 예상치 못한 것이었다. 본 발명자들은 서열식별번호 1의 펩티드와 OGG1의 조합이 상승작용하여 NHEK에서의 SIRT6 수준을 자극함으로써, UVB 복사선에 의해 유발되는 DNA 단편화의 매우 높은 수준의 복구를 초래하였다는 결론을 내렸다.

본 발명의 조성물

SIRT6 활성화 펩티드 (서열식별번호 1)의 권장 농도는 전체 조성물의 0.0001 내지 1 중량%, 바람직하게는 약 0.001 내지 약 0.1 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.005 중량% 내지 약 0.02 중량% 범위이다. 일부 바람직한 실시양태에서, 활성화 펩티드는 효모 추출물의 성분으로서 제공될 수 있다. 이 경우에는, 조성물이 0.0001 내지 1%의 펩티드 (서열식별번호 1)를 포함하도록 보장하기 위해 추출물의 펩티드 함량을 알고 있어야 한다.

8-옥소구아닌 글리코실라제 (OGG1)의 권장 농도는 최종 조성물의 총 중량에 대하여 약 0.0001% 내지 약 0.05%, 바람직하게는 약 0.0005% 내지 약 0.01%, 보다 바람직하게는 약 0.001% 내지 약 0.005%이다. 록시솜즈™의 권장 농도는 최종 조성물의 총 중량에 대하여 약 0.02% 내지 약 10%, 바람직하게는 약 0.1% 내지 약 2%, 보다 바람직하게는 약 0.2% 내지 약 1%이다.

본 발명의 조성물은 액체, 반고체 또는 고체 형태일 수 있으며, 또한 에멀젼, 용액, 현탁액 또는 무수 형태일 수 있다. 용액 또는 현탁액 형태라면, 조성물은 약 50 내지 99.9%의 물을 함유할 수 있다. 에멀젼 형태라면, 조성물은 약 5-95%의 물 및 약 5-95%의 오일을 함유할 수 있다. 무수 형태라면, 조성물은 약 10-99%의 오일 및 10-99%의 고화제를 포함할 수 있다. 조성물이 수성 용액, 분산액 또는 에멀젼 형태인 경우에, 수성상은 물 이외에도 1종 이상의 수성상 구조화제, 즉 조성물의 수성상의 점도를 증가시키거나 또는 수성상을 증점시키는 작용제를 함유할 수 있다. 이는 조성물이 세럼 또는 젤의 형태일 때 특히 바람직하다. 수성상 구조화제가 존재한다면, 그의 적합한 범위는 전체 조성물의 약 0.01 내지 30 중량%, 바람직하게는 약 0.1 내지 20 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.5 내지 15 중량%이다. 이러한 작용제의 예는 다양한 아크릴레이트 기재 증점제, 천연 또는 합성 검, 폴리사카라이드 등을 포함한다.

본 발명의 조성물이 에멀젼 형태인 경우에, 조성물은 오일상을 포함할 것이다. 오일 성분은 피부 보습 및 보호 특성을 위해 바람직하다. 적합한 오일은 실리콘, 에스테르, 식물성 오일, 합성 오일, 예를 들어 비제한적으로 본원에 서술된 것들을 포함한다. 오일은 휘발성 또는 비휘발성일 수 있고, 바람직하게는 실온에서 부을 수 있는 액체 형태이다. "휘발성"이라는 용어는 오일이 측정가능한 증기압을 갖거나, 또는 20℃에서 적어도 약 2 mm.의 수은에 해당하는 증기압을 가짐을 의미한다. "비휘발성"이라는 용어는 오일이 20℃에서 약 2 mm. 미만의 수은에 해당되는 증기압을 가짐을 의미한다. 적합한 휘발성 오일은 일반적으로 25℃에서 약 0.5 내지 5 센티스토크 범위의 점도를 가지며, 선형 실리콘, 시클릭 실리콘, 파라핀계 탄화수소, 또는 이들의 혼합물을 포함한다. 비휘발성 오일은 일반적으로 25℃에서 약 5 센티스토크 초과 내지 10 센티스토크의 점도를 가지며, 25℃에서 약 1,000,000 센티푸아즈 이하의 점도 범위를 가질 수 있다. 비휘발성 오일의 예는 모노-, 디- 또는 트리에스테르 형태의 에스테르를 비제한적으로 포함한다.

조성물이 무수 형태 또는 에멀젼 형태인 경우에, 화장품 조성물에 1종 이상의 오일상 구조화제를 포함하는 것이 바람직할 수 있다. "오일상 구조화제"라는 용어는 오일상에서 가용성 또는 분산성을 나타내며, 오일상의 점도를 증가시키거나 또는 오일상을 구조화할 성분 또는 성분의 조합을 의미한다. 구조화제는 증가한 점도를 갖는 액체 조성물, 자가-지지형일 수 있는 반고체, 또는 일부 경우에는 고체 조성물을 제공하는 충분한 양으로 존재할 수 있다. 구조화제 자체가 액체, 반고체 또는 고체 형태로 존재할 수 있다. 구조화제의 권장 범위는 전체 조성물의 약 0.01 내지 70 중량%, 바람직하게는 약 0.05 내지 50 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.1-35 중량%이다.

조성물은, 특히 에멀젼 형태일 경우에, 1종 이상의 계면활성제를 함유할 수 있다. 그러나, 이러한 계면활성제는 조성물이 무수 형태인 경우에도 사용될 수 있고, 극성을 갖는 성분, 예를 들어 안료의 분산을 용이하게 할 것이다. 이러한 계면활성제는 실리콘 또는 유기 계열일 수 있다. 계면활성제는 유중수 형태이든지 또는 수중유 형태이든지, 안정한 에멀젼의 형성을 용이하게 할 것이다. 계면활성제는 존재하는 경우에, 그의 범위가 전체 조성물의 약 0.001 내지 30 중량%, 바람직하게는 약 0.005 내지 25 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.1 내지 20 중량%일 수 있다.

본 발명의 조성물은 약 1-100, 바람직하게는 약 5-80, 가장 바람직하게는 약 5-50% 범위의 특정 SPF (일광 차단 지수) 값을 갖도록 임의적으로 제형화될 것이지만, 이러한 제형화가 바람직하다. SPF 값의 계산은 관련 기술분야에서 널리 공지되어 있다. 이를 달성하기 위해, 조성물에 1종 이상의 화학적 UVA 또는 UVB 선스크린제 또는 물리적 선스크린제를 미립자 형태로 포함시키는 것이 바람직할 수 있다.

"UVA 선스크린제"라는 용어는 약 320 내지 400 nm의 파장 범위에 있는 UV 복사선을 차단하는 화학적 화합물을 의미한다. 조성물은 UVA 선스크린제를 조성물의 약 0.001-20 중량%, 바람직하게는 0.005-5 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.005-3 중량%로 함유할 수 있다. UVA 선스크린제 화합물의 예는 4-메틸디벤조일메탄, 2-메틸디벤조일메탄, 4-이소프로필디벤조일메탄, 4-tert-부틸디벤조일메탄, 2,4-디메틸디벤조일메탄, 2,5-디메틸디벤조일메탄, 4,4'디이소프로필벤조일메탄, 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄, 4,4'-디이소프로필벤조일메탄, 2-메틸-5-이소프로필-4'-메톡시디벤조일메탄, 2-메틸-5-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄 등을 포함한다. 4-tert-부틸-4'-메톡시디벤조일메탄이 특히 바람직하다. 다른 유형의 UVA 선스크린제는 디캠퍼 술폰산 유도체, 예컨대 테레프탈릴리덴 디캠퍼 술폰산을 포함한다.

"UVB 선스크린제"라는 용어는 약 290 내지 320 nm의 파장 범위에 있는 UV 복사선을 차단하는 화합물을 의미한다. 일반적으로, 존재하는 UVB 화학적 선스크린제의 양은 전체 조성물의 약 0.001-45 중량%, 바람직하게는 0.005-40 중량%, 보다 바람직하게는 약 0.01-35 중량%의 범위일 수 있다. 알파-시아노-베타,베타-디페닐 아크릴산 에스테르, 예컨대 2-에틸헥실 2-시아노-3,3-디페닐아크릴레이트를 비롯하여, 다양한 UVB 화학적 선스크린제가 존재한다. 다른 적합한 선스크린제는 벤질리덴 캠퍼 유도체를 포함한다. 신나메이트 유도체, 예컨대 에틸헥실 메톡시신나메이트가 또한 적합하다. UVB 스크린제로서 벤조페논 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 및 12를 비롯하여, 다양한 벤조페논 유도체가 또한 적합하다. 벤조페논 3, 벤조페논 4 및 벤조페논 5가 특히 바람직하다. 특정 멘틸 살리실레이트 유도체, 예컨대 호모멘틸 살리실레이트 또는 멘틸 안트라닐레이트가 또한 적합하다. 살리실레이트 유도체는 또한 허용되는 UVB 흡수제이다.

조성물은 보존제를 전체 조성물의 0.001-8 중량%, 바람직하게는 0.01-6 중량%, 보다 바람직하게는 0.05-5 중량%로 함유할 수 있다. 예컨대 벤조산, 벤질 알콜, 벤질헤미포르말, 벤질파라벤, 5-브로모-5-니트로-1,3-디옥산, 2-브로모-2-니트로프로판-1,3-디올, 부틸 파라벤, 메틸 파라벤, 프로필 파라벤, 디아졸리디닐 우레아, 칼슘 벤조에이트, 칼슘 프로피오네이트, 카프릴릴 글리콜, 비구아니드 유도체, 페녹시에탄올, 캡탄, 클로르헥시딘 디아세테이트, 클로르헥시딘 디글루코네이트, 클로르헥시딘 디히드로클로라이드, 클로로아세트아미드, 클로로부탄올, p-클로로-m-크레졸, 클로로펜, 클로로티몰, 클로로크실레놀, m-크레졸, o-크레졸, DEDM 히단토인, DEDM 히단토인 디라우레이트, 데히드로아세트산, 디아졸리디닐 우레아, 디브로모프로파미딘 디이세티오네이트, DMDM 히단토인 등을 비롯하여, 다양한 보존제가 적합하다. 하나의 바람직한 실시양태에서, 조성물은 파라벤이 존재하지 않을 수 있다.

일반적으로, 본 발명에 따른 임의의 조성물은 오일상 성분 및 수상 성분을 별도로 조합하고, 잘 혼합함으로써 제조될 수 있다. 에멀젼을 형성하기 위해 필요한 임의의 단계 또는 최종 조성물에 구조를 부여하기 위해 필요한 임의의 단계는 본 발명의 효능을 방해하지 않을 것이다.

본 발명에 따른 피부 관리 조성물의 여러 예가 하기에 제공되고, 이들은 단지 예시 목적으로 서술된다.

항노화 크림 (실시예 1, 2)

* 록시솜즈™: 0.5% 8-옥소구아닌 글리코실라제 (OGG1)를 포함하는 물/아라비돕시스 탈리아나의 효모 발효 추출물/레시틴.

피부 미스트 (실시예 3)

주 주전자에서, 물을 70℃로 가열하였다. 폴리쿼터늄-4를 교반하면서 분산시켰다. 록시솜즈™를 제외한 나머지 파트 A 성분을 첨가하였다. 50℃로 냉각시켰다. 록시솜즈™를 첨가하였다. 파트 B 성분을 하나씩 혼합하면서 첨가하였다. 40℃로 냉각시켰다. 예비혼합된 파트 C를 주 주전자에 첨가하였다.

수중유 피부 크림 (실시예 4)

파트 A를 서서히 혼합하고 85℃로 가열하였다. 파트 B를 혼합하였다. 카르보폴을 물에 분산시키고; TEA를 제외한 나머지 파트 B를 첨가하였고; 85℃로 가열하였다. 파트 B를 파트 A에 전단 하에 첨가하였다. 40℃로 냉각시키면서, TEA를 전단 하에 첨가하였다. 파트 C를 40℃ 미만에서 첨가하였다.

수중유 피부 로션 (실시예 5)

파트 A를 혼합하고 80℃로 가열하였다. 파트 B를 혼합하고 80℃로 가열하였다. 파트 B를 파트 A에 교반하면서 첨가하였다. 40℃로 냉각시킨다. 파트 C를 40℃ 미만에서 첨가하였다.

선스크린제 (실시예 6)

상처 치유 촉진제 (실시예 7)

본 발명이 바람직한 실시양태와 관련하여 기재되었지만, 본 발명의 범주를 서술된 특정 형태로 제한하려는 것은 아니며, 오히려 첨부된 청구범위에 의해 한정된 본 발명의 취지 및 범주 내에 포함될 수 있는 대안물, 수정물 및 등가물을 포함시키고자 한다.

SEQUENCE LISTING <110> Pernodet, Nadine A. Dong, Kelly Pelle, Edward <120> Compositions Comprising A Sirt6 Activator And A DNA Repair Enzyme <130> 14.98 <160> 1 <210> SEQ ID NO 1 <211> LEGNTH: 7 <212> TYPE: PRT <213> ORGANISM: Artificial Sequence <220> FEATURE: <223> OTHER INFORMATION: Synthetic Peptide <220> FEATURE: <221> NAME/KEY: MOD_RES <222> LOCATION: (7)..(7) <223> OTHER INFORMATION: AMIDATION <400> SEQUENCE: 1 Gly Ala Gly Val Ser Ala Glu 1 5

Claims

조성물의 중량을 기준으로, 0.0001% 내지 1%의 SIRT6 활성화 펩티드 및 0.0001% 내지 0.05%의 8-옥소구아닌 글리코실라제를 포함하는 조성물을 국소 적용하는 단계를 포함하고, 여기서 SIRT6 활성화 펩티드는 하기와 같은 것인, DNA 단편화의 복구와 같은 관리를 필요로 하는 피부 세포에서의 UVB 노출로 인한 DNA 단편화를 복구시키는 방법.
(서열식별번호 1) G-A-G-V-S-A-E-NH₂
Gly-Ala-Gly-Val-Ser-Ala-Glu-NH₂.
제1항에 있어서, SIRT6 활성화 펩티드가 효모 발효 추출물의 형태로 조성물에 혼입되고, 여기서 펩티드는 추출물의 성분인 방법.
조성물의 중량을 기준으로 0.0001% 내지 1%의 SIRT6 활성화 펩티드 및 0.0001% 내지 0.05%의 8-옥소구아닌 글리코실라제를 포함하고, 여기서 SIRT6 활성화 펩티드는 하기와 같은 것인 조성물.
(서열식별번호 1) G-A-G-V-S-A-E-NH₂
Gly-Ala-Gly-Val-Ser-Ala-Glu-NH₂.
제3항에 있어서, SIRT6 활성화 펩티드가 효모 발효 추출물의 형태로 조성물에 혼입되고, 여기서 펩티드는 추출물의 성분인 조성물.