KR20170066515A - 관절 질환의 치료 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 관절 염증을 치료하기 위한 방법에 관한 것이다. 보다 특히, 본 발명은 개인에서의 성장 분화 인자 15 (GDF15) 의 저해 또는 불활성화를 포함하는 관절 질환의 치료 방법에 관한 것이다.
Description
본 발명은 관절 염증을 치료하기 위한 방법에 관한 것이다. 보다 특히, 본 발명은 개인에서의 성장 분화 인자 15 (GDF15) 의 저해 또는 불활성화를 포함하는 관절 질환의 치료 방법에 관한 것이다.
성장 분화 인자 (GDF15) 는 TGFβ-슈퍼패밀리의 멤버이다. GDF15, 또는 대식세포 저해 사이토카인 (MIC-1) 은 활성화된 대식세포에 의해 분비된 인자로서 본래 확인되었다 [1]. 서열 분석은 GDF15 가 TGFβ-패밀리의 보다 먼 멤버라는 것을 나타내었으며 [2]: GDF15 는 전형적인 TGFβ 시스테인 도메인을 기반으로 그 상동성을 공유하지만, TGFβ1, GDF5 및 BMP 와 같은 다른 패밀리 멤버에 대해 심지어 30% 미만의 서열 상동성을 공유한다. 단백질은 다양한 조직에서 발현된다. 높은 수준의 GDF15 는 태반에서 검출되며, 신장, 췌장 및 전립선 조직에서는 낮은 함량으로 검출된다 [3]. GDF15 발현은 통상 증식하고 있지 않은 조직에서는 낮지만 다양한 세포 스트레스 신호, 예컨대 저산소증 및 산소결핍증, 염증, 단파장 광 노출 및 조직 손상에 대한 적응성 스트레스 반응 이후 증가할 수 있다 ([4] 에서 개괄). 심혈관 연구에서, GDF15 는 사망의 독립적 예측자로서 드러났다 [5, 6]. 이러한 관점에서, 상승한 GDF15 수준은 심혈관 손상을 제한하고자 하는 내인성 보호 메커니즘으로서 고려된다 [7]. 최근, GDF15 가 CCR-2 매개 주화성에 수반된다는 것이 입증되었다 [8]. 또한, WO2005/099746 은 암 환자에서의 GDF15 발현 증가가 악액질과 연관되며, 이러한 발현을 저해함으로써 체중 손실의 심각도를 역전시키거나 감소시킬 수 있다는 것을 기재하고 있다.
오늘날, 놀랍게도 류마티스 질환 환자에서의 GDF15 혈청 수준에 대해 알려져 있는 것은 적다. GDF15 는 건강한 대조군에 비해 RA-환자의 혈청에서 상승하는 것으로 이전에 나타났다 [9]. 그러나, Brown et al. 에 의해 관찰된, GDF15 농도와 질환 중증도 사이의 상관관계는 매우 특이적인 집단을 기반으로 하였다: GDF15 수준을 매우 심각한 RA 환자 (중증의 불응성 질환을 갖는, 조혈 줄기 세포 이식을 거치는 것으로 분류된 환자) 와 외래환자 RA-군 사이에서 비교하였다 [9]. Breitt et al., 2011[25] 은 류마티스 관절염에서의 GDF15 의 보호성 항염증 효과를 제시하고 있다. TGFβ 슈퍼패밀리의 성장 인자가 면역 과정의 조절에 포함되며 따라서 몇몇 류마티스 질환의 발병기전에 잠재적으로 관련된다는 것이 일반적으로 알려져 있다. 또한, GDF15 가 연골내 골화를 유도하며 [3] 따라서 골 형성과 연관된 관절염에 기인할 수 있다는 것이 이전에 나타났다. 추가로, GDF15 는 또한 파골 세포 대사에 영향을 준다. 그러나, GDF15 에 의한 파골 세포 유도 [21] 및 저해 [22] 모두가 보고되었다.
현재, SpA 및 RA 환자에서 상승한 GDF15 수준의 초기 촉발제인지는 명백하지 않다. 이는 SpA 환자와 비교하여 RA 에서 초기 기재된 변형 대식세포 활성화 패턴과 연관될 수 있다 [23]. 따라서, 대식세포 저해 사이토카인 (MIC-1) 으로도 알려져 있는 GDF15 는 대식세포 활성화와 이전에 관련되었다 [24]. 그러나, 대식세포 생물학에 있어서의 이러한 단백질의 진정한 생물학적 역할은 알려져 있지 않다. 최근, GDF15 는 CCR2 뿐 아니라 이의 리간드 MCP1 의 상향조절을 포함하는 CCR2 매개 주화성 반응을 민감화시키는 것으로 나타난 바 있다 [8].
임상적으로, 관절 염증은 관절 강직, 통증, 취약, 및 때때로 관절 피로와 연관된다. 균일하게, 관절은 연하고 부어오르며, 종종 홍반성이다. 관절 질환의 염증성 성질의 진단은 자주, 이러한 전형적 임상적 표상을 기반으로 할 뿐 아니라 방사선 검사 및 윤활 관절액의 흡인 및 검사를 기반으로 한다. 염증이 생긴 관절의 관절액의 검사는 일반적으로 염증의 다양한 마커, 예컨대 백혈구 (호중구 포함), 항체, 사이토카인, 세포 부착 분자 및 보체 활성화 생성물의 상승을 드러낸다. 병이 생긴 관절의 방사선 검사는 일반적으로 연조직 팽윤 및/또는 부식성 변화를 드러낸다.
류마티스 관절염 (RA) 은 관절, 관절 주변 조직 뿐 아니라 신체의 다른 기관의 만성 염증을 초래하는 자가면역 질환이다. 척추관절병 (SpA) 은 척추관절염 또는 척추염으로도 불리는 만성 또는 장기간 지속 질환의 군에 주어지는 명칭이다. 골관절염 (OA) (퇴행성 관절염, 비후성 관절염 또는 노년기 관절염으로도 알려져 있음) 은 윤활 관절의 복합 변성 질환이다. OA 는 관절 연골의 손실 및 부식, 연골하 세포벽 경화, 및 골 과성장 (골증식체) 을 특징으로 한다. 염증성 관절 질환은 모두, 중증, 만성 통증 및 불편감을 초래할 수 있는 염증성 관절 결함을 특징으로 한다.
염증성 관절 질환의 치료는 "생물학적 제제", 예를 들어 항-TNFα 치료의 도입에 의해 지난 10 년 동안 훨씬 더 효율적이 되었다. 그러나, 생물학적 제제 치료에 자격이 있는 환자의 중요 일부 (30-40%) 는 항-TNF 에 잘 반응하지 않거나 단기간 내에 불응성이 된다. 더욱이, 항-TNF (또는 다른 생물학적 제제) 로의 치료는 중요한 임상적 결과를 갖는 SpA 의 전형적 특성인 새로운 골 형성 예방을 위해서는 매우 효율적인 것으로 나타나지 않는다. 마지막으로, 면역억제는 항-TNF 치료의 중요한 부작용이다. 결론적으로, 현재 이용가능한 모든 생물학적 제제와 반대로 면역계에 직접적으로 작용하지 않는 염증성 관절 질환의 새로운 치료 계획에 대해 이러한 분야에는 명백한 미충족된 임상적 필요성이 존재한다.
본 발명에서, 관절 염증 및/또는 관절 재형성 (remodeling) 에서의 GDF15 의 치료적 역할에 대한 증거가 수득되었다. GDF15 의 발현 결핍은 실험 동물 모델에서의 관절염 중증도에서 명백한 감소를 나타내며 본 발명에서 최초로 입증된 새로운 치료적 관점의 지평을 연다.
발명의 요약
본 발명은 염증성 징후, 질환 중증도 및 관절 파괴를 감소시키기 위한 치료 표적으로서의 GDF15 단백질 또는 유전자를 제공한다.
제 1 구현예는, 대상에서의 관절 염증 및/또는 관절 재형성, 특히 관절 파괴의 치료에 사용하기 위한, 더욱 특히 염증성 관절 질환의 치료를 위한, 및 보다 더욱 특히 관절 염증, 관절 재형성 (예를 들어 연골 퇴행 또는 골극 (bony spur) 의 형성) 및/또는 관절 파괴와 관련이 있거나 또는 이를 특징으로 하는 질환의 치료를 위한, 성장 분화 인자 (Growth differentiation Factor) 15 (GDF15) 결합 모이어티, 또는 GDF15 의 양을 감소시키고/시키거나 GDF15 의 생물학적 활성을 감소시키는 화합물에 관한 것이다. 예시적인 질환에는, 비제한적으로, 류마티스 관절염, 척추관절염 (강직성 척추염 (AS), 건선과 관련된 SpA (건선 관절염) 및 염증성 장 질환 (IBD), 반응성 관절염 및 미분화 SpA), 및 골관절염 (OA) 이 포함된다.
특정 구현예에서, GDF15 결합 모이어티는 항-GDF15 항체 또는 이의 기능적 단편, 특히 단일클론 항체, 보다 더욱 특히 인간화 단일클론 항체이다.
추가의 구현예에서, 본 발명은 대상에서의 관절 염증 및/또는 관절 파괴를 치료하는데 사용하기 위한, GDF15 결합 모이어티, 또는 GDF15 의 양을 감소시키고/시키거나 GDF15 의 생물학적 활성을 감소시키는 화합물, 및 약학적으로 허용가능한 부형제, 희석제 및/또는 담체를 포함하는 약학 조성물에 관한 것이다. 더욱 특히, 대상은 관절염성 (염증성) 관절 질환, 특히 류마티스 관절염 (RA), 척추관절염 (SpA) 또는 건선 관절염, 또는 골관절염을 앓고 있다. 추가의 구현예에서, 약학 조성물은 항-GDF15 항체 또는 이의 기능적 단편, 특히 단일클론 항체를 포함한다.
나아가, 본 발명은 대상에서의 관절 염증 및/또는 관절 파괴/재형성의 치료 방법으로서, GDF15 결합 모이어티, 또는 GDF15 의 양을 감소시키고/시키거나 GDF15 의 생물학적 활성을 감소시키는 화합물의 약학적으로 허용가능한 양을, 상기 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 치료 방법에 관한 것이다. 특정 구현예에서, 대상은 (염증성) 관절 질환, 특히 비제한적으로, 류마티스 관절염, 척추관절염, 건선 관절염, 또는 골관절염으로 진단받거나 또는 이러한 질환을 앓고 있다.
발명의 상세한 설명
본 발명이 이제 추가로 기재될 것이다. 하기 구절에서, 본 발명의 상이한 양태가 보다 상세하게 정의된다. 명확하게 반대로 제시되지 않는 한, 이와 같이 정의된 각각의 양태는 임의의 다른 양태 또는 양태들과 조합될 수 있다. 명세서 및 첨부된 청구범위에 사용된 바, 단일 형태를 나타내는 표현에는, 문맥에서 명확하게 달리 지시하지 않는 한, 복수의 언급대상이 포함된다. 예로서, "화합물" 은, 하나의 화합물 또는 하나 이상의 화합물을 의미한다. 상기 기재된 용어 및 명세서에 사용된 다른 용어는, 당업자에게 잘 이해된다.
본 발명에서는, 결합 조직에 의해 분비되는 단백질인 GDF15 가, 관절 염증의 활성 매개체이고, 관절염성 관절 질환에서 염증성 및 재형성 특징에 기여한다는 것을 입증하였다. 본 발명의 목적은, 염증성 징후, 질환 중증도를 감소시키고, 비가역적 구조적 관절 퇴행 또는 골극 형성을 조절하기 위한 치료 표적으로서의 GDF15 를 제공하는 것이다.
본 발명의 제 1 양태는, 대상에서의 관절 염증 및/또는 관절 재형성, 특히 관절 파괴의 치료에 사용하기 위한, 더욱 특히 염증성 관절 질환의 치료에 사용하기 위한, 및 보다 더욱 특히 류마티스 관절염 (RA), 척추관절염 (SpA), 건선 관절염, 또는 골관절염의 치료에 사용하기 위한, 성장 분화 인자 15 (GDF15) 결합 모이어티에 관한 것이다.
"관절 염증" 은 통증, 부종, 발적, 강직 및/또는 관절의 운동성 감소를 특징으로 하며, 감염, 외상, 퇴행성 변화, 대사성 장애, 자가면역 반응, 또는 기타 원인에서 기인할 수 있다.
"관절의 재형성" 또는 "관절 재형성" 은, 염증성 및 퇴행성 관절 질환의 핵심 특징이다. 골 침식, 연골 퇴행 및 골증식체로 불리는 골극의 성장은, 관절염의 과정에서의 구조적 관절 병리의 핵심 특징으로, 이는 관절 기능의 손상을 유도한다. 특히 척추관절염 (SpA) 은, 관절유착증으로 발전하는, 착부염의 발달 및 새로운 골 형성 (골극, 종종 인대증식체 또는 부착부골증식체로 불림) 을 특징으로 한다.
"관절 파괴" 는 관절에서의 연골 및 골의 분해 및 재흡수에서 기인한다. 골 재흡수 및 부가는, 각각, 2 종의 별개의 세포 유형인, 파골세포와 조골세포에 의해 조절되는 균형이다. 이러한 세포는 세포 접촉, 사이토카인, 성장 인자 및 호르몬에 의해 폐쇄된 관계에 있다. 인터루킨 (IL)-6 및 NF-[카파]B 리간드의 활성화제 수용체 (RANK-L) 는, 조골세포/파골세포 통신에 관여하는 주요 사이토카인으로서 확인되었다. 연골 분해는 연골에서의 동화 과정과 이화 과정 간 불균형의 결과이다. 이러한 불균형은 사이토카인, 호르몬 및 성장 인자, 예컨대 IL1b, IL6, TNF알파에 의해 야기될 수 있다. 관절 파괴는 일반적으로 전통적인 조직학적 및 CT-기반 기술에 의해 측정된다. 이는 추가로, 임상적으로, 방사선사진술로, MRI 또는 초음파에 의해 검출될 수 있다. 연골 손상은 퇴행성 관절 장애, 주로 골관절염 (OA), 및 만성 염증성 관절 질환, 예컨대 류마티스 관절염 (RA) 의 핵심 특징이다. 골관절염은, 악관절의 관절을 포함하는 임의의 관절에서의 심한 통증 및 기능 장애를 야기할 수 있는 흔한 질환이다. 병리학은 윤활액 조직에서의 진행성 연골 분해, 연골하 골 재형성, 및 만성 염증을 특징으로 한다.
"염증성 관절 질환" 은, 관절염 (관절염의 종류) 으로서 의학적으로 지칭되는 질환의 군이다. 용어 "관절염" 은, 관절의 질환을 일반적으로 기재하기 위하여 의학적으로 사용된다. 하지만, 상기 용어는 또한 관절 질환을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아닌, 다수의 상이한 병리학적 발현으로 이루어지는, 류마티스 관절염 (RA) 및 척추관절염 (SpA) (건선 관절염 포함) 이 주요 예가 되는, 특정 의학적 병태를 기재하는데 사용된다. 따라서, 관절염의 논의에는, 관절 장애가 이러한 질환과 관련된 다양한 병리 중 단지 한 면인, RA 및 SpA 와 같은 질환이 포함될 수 있다. 임상 목적을 위하여, 주된 임상적 발현과 관련된 2 가지 형태 - 주축 및 말초 SpA - 및 5 가지 하위군 - 강직성 척추염 (AS), 건선과 관련된 SpA 및 염증성 장 질환 (IBD), 반응성 관절염 및 미분화 SpA - 으로 구별된다. 척추관절염 (SpA) 의 가장 중요한 임상 특징은, 말초 및 주축 부위에서의 관절 염증, 침식 및 새로운 골 형성이다. 인대 및 힘줄의 골에의 부착 부위에서의 염증인 착부염은, 다른 염증성 류마티스성 장애와 이를 구별짓는 SpA 의 특징이다. 게다가, SpA 는 또한 이의 삽입 부위에서 유래된 것으로 보이는 부착부골증식체의 형성, 또는 관절유착증으로 발전하는, 새로운 골 형성을 특징으로 한다. 구조적 손상을 반영하는 질환의 방사선학적 진행은, 천장 및 척추 관절유착증을 유도하는 새로운 골 형성을 특징으로 한다. 염증 및 진행성 구조적 손상 둘 모두 질환의 부담에 기여한다.
하나의 구현예에서, 본 발명은 특히 이러한 질환의 관절 장애 양태에 관한 것이다. 하지만, 본 발명의 방법은 또한 비(非)-관절-관련 병리학에 유익한 영향을 줄 수 있다. 예를 들어, RA, 골관절염 (OA), 소아 발병 류마티스 관절염, 건선 관절염, 전신 경화증, 전신 홍반 루푸스 (SLE), 및 다른 장애와 관련된 확립된 관절 염증을 치료하기 위한 본 발명의 방법의 사용은, 또한 혈관 염증 및 신장염과 같은 이러한 다각적인 질환 상태의 다른 병리학적 발현 중 일부에 대하여 치료적 유익을 제공할 수 있다. 이러한 장애는 모두 혈청에서 또는 관절 (활액) 에서 국부적으로 GDF15 의 상승된 수준을 특징으로 한다 (도 1, 2 및 11 참조). 대부분의 류마티스성 질환이 GDF15 의 상승된 혈청 수준을 나타내지만 (도 1), SpA (건선 관절염 환자 포함) 및 골관절염 환자는 윤활액에서의 GDF15 의 상승된 수준을 나타내고 (도 2 및 11), 질환 활성 (표 1) 과 GDF15 의 윤활액 수준 간의 높은 연관성을 나타내는데, 이는 병리학에서의 GDF15 의 역할을 가리킨다.
본원에 사용된 바, "치료하는" 또는 "치료" 는, 유익한 또는 목적하는 임상 결과를 수득하기 위한 접근법이다. 본 발명의 목적을 위하여, 유익한 또는 목적하는 임상 결과에는, 비제한적으로, 하기 중 하나 이상이 포함된다: 중증도의 저하, 염증, 관절 부종, 관절 통증 및 감소된 운동성과 같은 증상 중 하나 이상의 경감.
"GDF15 결합 모이어티" 또는 리간드는 GDF15 에 특이적으로 결합한다. 본원에서 사용된 바, 용어 "특이적으로 결합한다" 는, GDF15 결합 모이어티가 GDF15, 및 더욱 특히 GDF15 의 분비된 단편과 우선적으로 상호작용하고, 다른 단백질 또는 다른 분자와는 유의하게 상호작용하지 않는다는 것을 나타내는 것으로 의도된다. 모이어티의 GDF15 에의 결합은, 표준 방법, 예를 들어 ELISA, 웨스턴 블로팅 (Western blotting), 비-표지 (Label-free) 표면 플라즈몬 공명 등에 의해 측정될 수 있다.
GDF15 결합 모이어티에는, GDF15 와 특이적으로 결합하는 분자를 포함하여, 각종 상이한 유형의 분자가 포함될 수 있다. 상기와 같은 GDF15 리간드에는, 소 분자, 폴리펩티드 또는 핵산 (압타머 (aptamer)), 항체 등이 포함된다.
하나의 구현예에서, GDF15 결합 모이어티는 항체이다. 용어 "항체" 는, 다중클론 항체, 단일클론 항체 (mAbs), 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 조작 항체, 인간 항체 뿐 아니라, 항원 결합 기능성을 갖는 항원 결합 항체 단편 및 분자를 나타낸다. 더욱 특히, 용어 "항체" 에는, 4 개의 폴리펩티드 사슬, 2 개의 중질 (H) 사슬 및 2 개의 경질 (L) 사슬이 디술파이드 결합에 의해 연결된, 온전한 면역글로불린이 포함된다. 용어 "항체" 에는, 또한 예시적으로 Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fd 단편, Fv 단편, scFv 단편, 도메인 항체 (dAb), 중쇄 항체 (hcAb), 미니바디 [30], 카멜리드 중쇄 항체의 가변 도메인 (VHH 또는 Nanobody®), 신규한 항원 수용체의 가변 도메인 (VNAR) 및 조작된 CH2 도메인 (나노항체; [27]) 과 같은 단편을 포함하지만, 이에 제한되지 않는, GDF15 결합 항체 단편이 포함된다. 이에는 추가로, 단쇄 역평행 코일형 단백질 (알파바디; WO2010066740) 과 같은 항체 유사 특성을 갖는 펩티드 및 스캐폴드가 포함된다. 활성 단편은 다수의 당업계-공지 기술에 의해 본 발명의 항체로부터 유도될 수 있다. 예를 들어, 정제된 단일클론 항체는 펩신과 같은 효소를 이용하여 절단되고, HPLC 겔 여과에 적용될 수 있다. 이어서, Fab 단편을 함유하는 적절한 분획이 막 여과 등에 의해 수집 및 농축될 수 있다. 항체의 활성 단편 단리를 위한 일반적인 기술의 추가 설명에 대해서는, 예를 들어, Khaw et al. 및 Rousseaux et al. 를 참조한다.
본 발명의 항-GDF15 항체 및/또는 GDF15 결합 항체 단편은 GDF15 에 특이적으로 결합할 수 있다. 항-GDF15 항체는, 예시적으로 면역화, 단리 및 정제, 온전한 면역글로불린의 효소적 절단, 파지 디스플레이 라이브러리의 스크리닝, 목적하는 GDF15 결합 펩티드 또는 단백질의 화학적 합성, 재조합 핵산 기술에 의한 제조를 포함하지만, 이에 제한되지 않는, 임의의 방법에 의해 제공될 수 있다.
그러한 방법의 조합이 또한 사용될 수 있다. 항-GDF15 항체는 상업적으로 입수가능하고 예를 들어 WO2001/81928 (참조로 포함됨) 에 기재되어 있다. 구체적 구현예에서, 본 발명은 Belgian Coordinated Collections of Micro-organisms (BCCM) - LMBP Plasmid Collection - Ghent University - Technologiepark 927 - 9052 Gent - Belgium 에, 2014 년 9 월 30 일자에 수탁되고, 수탁 번호 LMBP 10815CB 가 부여된 하이브리도마 세포주 52D4C1 에 의해 생산된, 단일클론 항체 (그의 항원 결합 단편을 포함함) 에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 항체의 용도, 특히 본원에 기재된 바와 같은 용도에 관한 것이다. 본 발명은 추가로 하이브리도마 52D4C1 에 의해 생산된 단일클론 항체와 GDF15 상의 동일한 에피토프에 특이적으로 결합하는 항체, 및 그의 임의의 용도, 뿐만 아니라 수탁 번호 LMBP 10815CB 를 갖는 하이브리도마 52D4C1 에 의해 생산된 단일클론 항체와 GDF15 에 대한 결합에 관해 경쟁하는 항체를 망라한다. 더욱 구체적 구현예에서, 상기 단일클론 항체는 인간화된 단일클론 항체이다. 추가의 구현예에서, 본 발명은 약학 조성물 또는 의약의 제조에 있어서, 본원에 기재된 단일클론 항체의 용도를 포함한다.
결합에 관한 경쟁은 임의의 쌍의 항체 (그의 단편을 포함함) 에 관해 평가될 수 있다. 예를 들어, 적당한 검출 시약을 사용하여, 임의의 출처로부터의 항체 또는 결합 단편의 결합 특이성이 본원에 공개된 단일클론 항체의 결합 특이성과 비교될 수 있다. 본 발명의 항체는 당업계에 공지된 임의의 방법에 의해 특이적 결합에 관해 어세이될 수 있다. 다수의 상이한 경쟁적 결합 어세이 포맷(들)이 사용될 수 있다. 사용될 수 있는 면역어세이는 웨스턴 블롯과 같은 기술을 사용하는 경쟁적 어세이 시스템, 방사면역어세이, ELISA, "샌드위치" 면역어세이, 및 면역침전 어세이를 포함하나, 이에 제한되지 않는다. 그러한 어세이는 일상적이고 당업계에 공지되어 있다 (참고, 예를 들어, Ausubel et al., eds, 1994 Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 1, John Wiley & sons, Inc., New York). 부가적으로, 일상적 교차-차단 어세이 예컨대 Antibodies, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory, Ed Harlow and David Lane, 1988 에 기재된 것이 수행될 수 있다.
항-GDF15 항체는 전장 GDF15 또는 GDF15 의 펩티드 단편, 특히 성숙 단백질을 항원으로서 사용하는 면역화에 의해 제조될 수 있다. "성장 분화 인자 15 (Growth differentiation factor 15)" (GDF15) 는 손상된 조직에서 및 질환 과정 동안 염증 및 세포자멸 경로를 조절하는 역할을 하는 형질전환 성장 인자 베타 슈퍼패밀리에 속하는 단백질이다. GDF15 는 또한 대식세포-저해 사이토카인 1 (MIC-1), 전립선 유래 인자 (PDF), 및 태반 골 형태형성 단백질 (PLAB) 로서 알려져 있다. 미숙 단백질은 신호 펩티드, 프로펩티드, 및 성숙 단백질을 함유하는 308 개의 아미노산으로 이루어진다. 성숙 단백질은 다이설파이드 결합에 의해 연결된 동종이합체로서 분비되고 아미노산 193 또는 196 에서 발견될 수 있는 보존된 RXXR 자리에서의 이합체성 전구체의 절단에 의해 발생한다 [1]. 성숙 단백질은 이러한 TGF-β 슈퍼패밀리의 구조적 특징, 시스테인 놋트 (knot) 에 필수적인 7 개의 보존된 시스테인에 더하여 2 개의 부가적 시스테인 잔기를 함유한다. 그러한 단백질 및 펩티드는 예를 들어 인간, 돼지, 양, 랫트, 마우스, 원숭이, 유인원, 또는 기타 GDF15 단백질 또는 펩티드일 수 있다. 본원에 포함되는 인간 GDF15 단백질 및 핵산 서열은 NCBI Accession 번호 NP_004855.2 GI:153792495 및 NC_000019.9 GI:224589810 에 의해 식별되는 상응하는 GDF15 서열 (본원에 참조로 포함됨) 과, 특히 상기 서열에서 식별되는 성숙 사슬과 상당히 동일한, 즉 적어도 75%, 80%, 85%, 87%, 89%, 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98%, 99% 또는 100% 동일한 임의의 상동체 (homolog) 또는 인공 서열이다. GDF-15 에 관한 아미노산 서열은 또한 [1] 및 WO99/06445 에 공개되어 있다. 본원에서 사용되는 GDF-15 는 또한 앞서 언급된 특이적 GDF-15 단백질의 자연적 변이체를 망라한다. 그러한 변이체는 적어도 특이적 GDF-15 단백질과 동일한 본질적 생물학적 및 면역학적 특성을 갖는다.
항원은 자연적 출처로부터의 분리, 재조합 생산 또는 화학적 합성 기술을 포함하는 임의의 다양한 방법에 의해 제조될 수 있다. GDF15 결합 항체의 제조에서 항원으로서 사용되는 GDF15 단백질 및 펩티드는 임의의 다양한 기술에 의해 유사하게 제조된다.
GDF15 의 펩티드 부분 또는 기타 항원은 요망되는 경우에 담체 분자 예컨대 소 혈청 알부민 또는 키홀 림펫 헤모시아닌에의 연결에 의해 더욱 면역원성으로 만들어질 수 있다. 그러한 연결은 예를 들어 융합 단백질의 컨쥬게이션 및 발현을 포함하나 그에 제한되지 않는 임의의 다양한 기술에 의해 달성될 수 있다.
항체, 항원 결합 단편 및 그들의 생성 방법은 당업계에 공지되어 있고 그러한 항체, 항원 결합 단편 및 방법은, 예를 들어, Antibody Engineering, Kontermann, R. and Dubel, S. (Eds.), Springer, 2001; Harlow, E. and Lane, D., Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1988; Ausubel, F. et al., (Eds.) 에 더욱 상세히 기재되어 있다.
본 발명의 대안적 구현예로서, 대상에서 GDF15 의 양을 감소시키는 또는 대상에서 GDF15 의 생물학적 활성을 감소시키는 기타 화합물 또는 방법이 본 발명에서 사용될 수 있다. 따라서, 추가의 양태에서 본 발명은 대상에서 관절 염증 및/또는 관절 재형성, 특히 관절 파괴를 치료하는데 사용하기 위한, 더욱 특히 염증성 관절 질환을 치료하기 위한, 및 더더욱 특히 류마티스 관절염 (RA), 척추관절염 (SpA) (건선 관절염 (PsA) 을 포함함), 및 골관절염 (OA) 으로 이루어지는 군으로부터 선택되는 질환 중 하나 이상을 치료하기 위한 대상에서 GDF15 의 양을 감소시키는 및/또는 GDF15 의 생물학적 활성을 감소시키는 화합물에 관한 것이다. 상기 화합물의 예는 GDF15 유전자를 표적으로 삼는 촉매성 및 저해성 올리고뉴클레오티드 분자 (예를 들어, 리보자임, DNAzymes, 안티센스 RNA, 및 소형 저해성 RNA (siRNA)), 및 GDF15 전사 또는 번역의 저해인자를 포함한다. 대안적으로, GDF15 저해제는 대상에서 내인성 GDF15 의 활성을 저해할 수 있고, GDF15 수용체의 가용성 세포질외 수용체 도메인, GDF15 에 결합하는 기타 가용성 분자 또는 매트릭스-연관된 단백질 (예를 들어 헤파린, 헤파란 술페이트 및 페투인), 및, 예를 들어, 그것의 수용체에 결합하는 GDF15 의 펩티드, 펩티드 모사체, 또는 소형 유기 분자 저해인자로부터 선택될 수 있다. 부가적으로, 펩티드, 펩티드 모사체, 또는 소형 유기 분자 저해인자는 GDF15 수용체 인산화, 또는 GDF15 수용체로부터 세포 핵으로의 신호전달 정보의 전파, 또는 세포 게놈에 대한 관련 전사 인자(들)의 작용을 저해함으로써 내인성 GDF15 의 활성을 저해할 수 있다. 추가로, GDF15-저해제는 성숙 GDF15 단백질 도메인으로부터 프로펩티드를 절단하는 것을 책임지는 프로컨버타제 (proconvertase) 효소의 저해인자일 수 있다. 프로컨버타제 효소는, 예를 들어, (a) 알파-1-안티트립신 돌연변이체, 알파-1-안티트립신 Portland, (b) 폴리아르기닌 펩티드; 및 (c) 표적 단백질의 프로펩티드 서열 및 프로컨버타제 서열에 걸쳐 있는 프로컨버타제에 관한 표적 단백질의 서열에 기반하는 펩티드를 이용하는 세포의 트랜스펙션에 의해 저해될 수 있다.
본 발명의 방법은 관절 염증을 앓는 대상의 치료에 유용하다. 더욱 구체적으로, 대상은 염증성 관절 질환, 특히 류마티스 관절염 (RA) 또는 척추관절염 (SpA) 을 앓는다. 일부 양태에서, 본 발명은 대상에서 류마티스 관절염 (RA), 척추관절염 (SpA), 건선 관절염 또는 골관절염의 임상 징후를 치료 및/또는 완화하는 방법을 제공한다. 따라서, 하나의 양태에서, 본 발명은 유효량의 본원에 기재된 바와 같은 GDF15 결합 모이어티, 더욱 특히 본원에 제공된 바와 같은 항-GDF15 항체를 투여하는 것을 포함하는, 개인에서 류마티스 관절염, 척추관절염, 건선 관절염 또는 골관절염을 치료하는 방법을 제공한다.
또다른 양태에서, 본 발명은 개인에서의 (염증성) 관절 질환, 특히 관절 염증, 관절 재형성 (예를 들어 연골 변성 또는 골극의 형성) 및/또는 관절 파괴에 의해 특징지어지는 질환의 발생빈도의 감소, 중증도, 발달 또는 진행의 개선, 억제, 완화, 및/또는 지연 방법을 제공한다. 예시적 질환은 류마티스 관절염, 척추관절염 (강직성 척추염 (AS), 건선과 연관된 SpA (건선 관절염) 및 염증성 장 질환 (IBD), 반응성 관절염 및 미분화 SpA), 골관절염 (OA), 청소년 발병 류마티스 관절염, 전신 경화증, 및 전신 홍반 루푸스 (SLE) 를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
"개인 (individual)" 또는 "대상" 은 척추동물, 바람직하게는 포유동물, 더욱 바람직하게는 인간이다. 포유동물은 애완동물 (예컨대 고양이, 개 및 말), 영장류, 마우스 및 랫트를 포함하나, 이에 제한되지 않는다.
추가의 양태에서, 본 발명은 GDF15 결합 모이어티, 또는 GDF15 의 양을 감소시키는 및/또는 GDF15 의 생물학적 활성을 감소시키는 화합물, 및 적어도 하나의 약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제 및/또는 아주반트, 및 임의로 하나 이상 추가의 약학적 활성 화합물을 포함하는 약학 조성물을 포함한다. 약학적으로 허용가능한 부형제는 당업계에 공지되어 있고, 약리학적 유효 물질의 투여를 촉진시키는 비교적 불활성인 물질이다. 예를 들어, 부형제는 형태 또는 점조도 (consistency) 를 제공하거나, 또는 희석제로서 작용할 수 있다. 적합한 부형제는 안정화제, 습윤 및 유화제, 삼투성을 변화시키기 위한 염, 캡슐화제, 완충제, 및 피부 침투 향상제를 포함하나 이에 제한되지 않는다. 비경구 및 경구 약물 전달을 위한 부형제 뿐만 아니라 제형은 Remington, The Science and Practice of Pharmacy 20th Ed. Mack Publishing (2000) 에 제시되어 있다. 추가의 적합한 담체 및 희석제는 예를 들어 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 소르비톨, 만니톨, 전분, 검 아카시아, 칼슘 포스페이트, 알기네이트, 트라가칸트, 겔라틴, 칼슘 실리케이트, 미세결정질 셀룰로오스, 폴리비닐피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜, 셀룰로오스, (멸균) 물, 메틸셀룰로오스, 메틸- 및 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트, 식용유, 식물유 및 광유 또는 그의 적합한 혼합물이다. 게다가, 조-용매 예컨대 알코올은 화합물의 용해도 및/또는 안정성을 개선할 수 있다.
본원에 기재된 바와 같은, GDF15 결합 모이어티, 또는 GDF15 의 양을 감소시키는 및/또는 GDF15 의 생물학적 활성을 감소시키는 화합물은 단독으로, 또는 조합으로, 연속으로 또는 동시에 투여되든 아니든 치료 효과를 개선하는 기타 활성 성분과의 조합으로 투여될 수 있다. 예를 들어, 약학 조성물은 치료 유효량의 적어도 하나의 TNF-알파 저해인자, NSAID, 스테로이드, 또는 질환 변경 항-류마티즘 약물 (예를 들어 MTX) 을 추가로 포함할 수 있다.
GDF15 결합 모이어티는 개인에게 임의의 적합한 경로를 통해 투여될 수 있다. 따라서, 일부 구현예에서, GDF15 결합 모이어티는 개인에게 공지된 방법, 예컨대 정맥내 투여에 따라, 예를 들어, 볼루스 (bolus) 로서 또는 일정한 기간에 걸친 연속 주입에 의해, 근육내, 복강내, 뇌척수내, 피하, 관절내, 설하, 윤활액막내에, 통기 (insufflation), 척추강내, 경구, 흡입 또는 국소 경로를 통해 투여된다. 투여는 전신성, 예를 들어, 정맥내 투여, 또는 국부성일 수 있다. 적합한 용매는, 예를 들어, 물, 생리적 염류 용액 또는 알코올, 예를 들어 에탄올, 프로판올, 글리세롤, 게다가 또한 당 용액 예컨대 글루코오스 또는 만니톨 용액, 또는 대안적으로 언급된 다양한 용매의 혼합물이다. 주사가능한 용액 또는 현탁액은 공지된 기술에 따라, 적합한 비독성, 비경구적으로-허용가능한 희석제 또는 용매, 예컨대 만니톨, 1,3-부탄디올, 물, 링거액 또는 등장성 나트륨 클로라이드 용액, 또는 적합한 분산 또는 습윤 및 현탁제, 예컨대 멸균, 블랜드 (bland), 고정유, 예를 들어 합성 모노- 또는 디글리세리드, 및 지방산, 예를 들어 올레산을 사용하여 제형화될 수 있다.
제트 분무기 및 초음파 분무기를 포함하는, 액체 제형에 대한 시판 이용가능한 분무기가 투여에 유용하다. 액체 제형은 직접적으로 분무될 수 있고, 동결된 분말은 재구성 후 분무될 수 있다. 대안적으로는, GDF15 결합 모이어티는 플루오로카본 제형 및 계량 투여 흡입기를 사용하여 에어로졸화될 수 있거나, 또는 동결건조된 및 분쇄된 분말로서 흡입될 수 있다.
하나의 구현예에서, GDF15 결합 모이어티는 부위-특이적 또는 표적화된 국부 전달 기술을 통해 투여된다. 부위-특이적 또는 표적화된 국부 전달 기술의 예에는 GDF15 결합 모이어티의 다양한 이식가능한 저장소 공급원 또는 국부 전달 카테터, 예컨대 침출 카테터, 유치 (indwelling) 카테터, 또는 바늘 카테터, 합성 그래프트, 외막 랩, 분로 (shunt) 및 스텐트 또는 기타 이식가능한 장치, 부위 특이적 운반체, 직접 주입, 또는 직접 적용이 포함된다.
GDF15 결합 모이어티의 다양한 제형이 투여에 사용될 수 있다. 일부 구현예에서, GDF15 결합 모이어티는 단독 (neat) 투여될 수 있다. 일부 구현예에서, GDF15 결합 모이어티 및 약학적으로 허용가능한 부형제는 다양한 제형으로 있을 수 있다.
본 발명의 GDF15 결합 모이어티는 일반적으로 "유효량" 으로 투여될 것인데, 이것은 적합한 투여시, 이것을 투여하게 되는 개인에 있어서 원하는 치료 효과 예컨대 관절 염증, 파괴 및 관절 통증의 감소를 달성하기에 충분한 임의의 양을 의미한다.
통상, 예방 또는 치료하려는 상태 및 투여 경로에 따라, 이러한 유효량은 통상 1㎍ 내지 30mg/환자의 체중 kg/일, 더욱 종종 0.5mg 내지 10mg/환자의 체중 kg/일 일 것이며, 이것은 1 회 이상의 일일 투여량으로 나뉜, 또는 본질적으로는 연속적으로, 예를 들어, 점적 주입을 사용하는, 단일 일일 투여량으로서, 또는 매주 또는 매달 투여량으로서 투여될 수 있다. 투여하고자 하는 양, 투여 경로 및 추가의 치료 섭생은 환자의 연령, 성별 및 일반적인 상태 및 치료하고자 하는 질환/증상의 특성 및 중증도와 같은 인자에 따라, 치료 임상의에 의해 결정될 수 있다. 표준 지침서, 예컨대 최신판의 Remington's Pharmaceutical Sciences 를 참고한다. 유사하게 적합한 투여 형태 - 이것은 투여 방식에 따라 고체, 반고체 또는 액체일 수 있음 - 뿐 아니라 이의 제조에 사용하기 위한 방법 및 담체, 희석제 및 부형제는 당업자에게 명백할 것이다.
본 발명은 이제 하기 실시예에 의해 더욱 상세히 설명될 것이나, 이것은 어떠한 방식으로도 본 발명의 범주를 제한하지 않는다.
도 1: 여러 환자 코호트에서의 GDF15 의 혈청 수준. GDF15 혈청 수준은 SpA 환자와 비교하여 여러 염증성 류마티스 질환에서 상당히 상승한다 (* p<0.05; ** p<0.01; *** p<0.001). p-값은 log-변형 농도에 대한 본페로니 (Bonferroni) 다중 비교 시험의 결과이다.
도 2: A: 여러 환자 코호트에서의 GDF15 의 혈청 수준. GDF15 혈청 수준은 SpA 환자 (* p<0.05, **, p<0.01) 및 건강한 대조군 (# p<0.05, ##, p<0.01) 과 비교하여 RA 및 SLE 환자에서 상당히 상승한다. P-값은 log-변형 농도에 대한 본페로니 다중 비교 시험의 결과이다. B: RA 및 비-건선 관절염 (비-PsA) SpA 및 건선 관절염 (PsA) 환자의 혈청 수준 (진회색) 및 윤활액 수준 (연회색). 윤활액 수준은 PsA 환자에서만 혈청 수준에 비해 상당히 더 높다 (동일 환자의 log 변형 혈청 및 윤활액 농도에 대한 대응 표본 t-검정). 혈청 수준과 유사한 윤활액 수준은 비-PsA SpA 환자에 비해 RA 환자에서 상당히 더 높다 (log-변형 농도에 대한 독립적 스튜던트 T-검정). 이탤릭체 P-값은 대응 표본 시험의 결과이고, 모든 다른 p-값은 독립적 표본 검정으로부터 유래하는 것이다. 막대는 평균 혈청 수준 ± SEM 을 나타낸다.
도 3: 야생형 (WT), 이형접합 (HZ) 및 GDF15 널 (null) 마우스 (KO) 에서의 콜라겐 유도 관절염 발생 동안의 임상 관절염 점수. GDF15 결핍 (KO 및 HZ) 은 감소 및 연기된 염증성 증상을 나타낸다.
도 4: GDF15 널 마우스 (KO) 및 야생형 한배새끼 대조군 (WT) 에서의 IL-6 (A) 및 MMP3 (B) 의 혈청 수준 (둘 모두 관절 염증 및 파괴의 매개체로서 알려져 있음). KO-마우스는 혈청에서 염증 마커 둘 모두의 감소된 수준을 나타내며 (p<0.05), GDF15 널 마우스에서 감소한 관절 염증 및 파괴를 추가로 확인시킨다.
도 5: KO 및 WT 마우스의 조직학적 섹션을 CIA-실험의 말에 준비하였다. 3 명의 독립적, 맹검 관찰자에 의해 윤활액 침윤 및 연골 파괴에 대하여 섹션을 점수 매겼다. KO 는 감소한 윤활액 침윤 (A) 뿐 아니라 연골 파괴 (B) 를 나타내며, GDF15 결핍 마우스에서의 억제된 염증을 추가로 확인시킨다.
도 6: 염증 조건 하 골 대사의 공지된 매개체인 Dkk1 의 혈청 수준을 고령의 암컷 (A) 및 수컷 (B) 마우스 (12 개월) 로부터의 혈청에서 분석하였다. GDF15 널 마우스와 비교하여 감소한 수준이 WT 마우스에서 검출되었으며, 관절 대사에서의 GDF15 의 포함을 추가로 확인시킨다.
도 7: IL6 발현을 GDF15 녹-아웃 (knock-out) 활막 섬유모세포 (KO) 와 비교하여 야생형 활막 섬유모세포 (WT) 에서 유도한다. 이러한 유도는 TNF알파 (10 ng/ml) (TNF) 에 의해 유도된 전-염증 조건 또는 DMOG 에 의해 유도된 저산소성 조건에서 보다 확연하다.
도 8: 대조군 (PBS) 및 처리된 (항-GDF15 항체) 콜라겐 항체 유도 관절염 (CAIA) 마우스에서의 발병률, 하나 이상의 발에서 임상 점수 ≥ 1 을 나타내는 임의의 동물로서 정의함. 대응 표본 T-검정 PBS 대 항-GDF15: 0.0001.
도 9: 대조군 (PBS) 및 처리된 (항-GDF15 항체) 콜라겐 항체 유도 관절염 (CAIA) 마우스에서의 발병률, 하나 이상의 발에서 임상 점수 ≥ 2 를 나타내는 임의의 동물로서 정의함. 대응 표본 T-검정 PBS 대 항-GDF15: 0.0001
도 10: PBS 처리 및 항-GDF15 항체 처리 마우스에서의 콜라겐 항체 유도 관절염 (CAIA) 의 발생 동안 평균 임상 점수 값. 대응 표본 T-검정 PBS 대 항-GDF15: 0.0007.
도 11: 연령에 대해 교정된 (환자 연령 > 55 세) RA (N23), SpA (19) 및 OA (6) 에서의 윤활액 수준.
도 12: 항-GDF15 처리는 콜라겐 항체 유도 관절염에서 연골 파괴를 저지한다. (A) 항-콜라겐 항체 칵테일로의 관절염 유도 후 제 16 일에 연골 파괴에 대한 마커로서, CTX-II 혈청 수준. 항체 처리 마우스 (n=10) 에서의 평균 CTX-II 수준을 대조군 마우스 (n=6) 군에서의 CTX-II 평균 수준과 비교하여 백분율로 나타낸다. 오류 막대는 평균값의 표준 오차를 나타낸다. 항체 처리 마우스에서의 CTX-II 의 낮은 수준의 유의도를 스튜던트 t-검정 (** 는 p<0.01 을 나타냄) 으로 시험하였다. (B) CAIA 의 유도 30 일 후 동형 (n=9) 및 항-GDF15 처리 마우스 (n=16) 로부터의 무릎의 조직학적 점수. 특히 연골에서의 프로테오글리칸 고갈 정도는 대조군 마우스와 비교하여 항체 처리 마우스에서 상이하였다 (만 휘트니 (Mann Whitney) U 시험 (* 는 p<0.05 를 나타냄) 사용).
도 13: 항-GDF15 처리는 콜라겐 항체 유도 관절염에 의해 초래된 골 재형성을 감소시킨다. (A) 경골의 마이크로 컴퓨터 단층촬영 (Micro Computed Tomography) 슬라이스는 제 14 일에서 중증 관절염을 갖는 대조군 마우스에서 높은 수준의 다공도 (골 흡수) 를 나타내며 골피질의 비후를 보충한다. Fiji 에 의해 3D 로 측정 및 가시화된 바와 같은 피질 다공도 및 피질 비후는, 항-콜라겐 항체 칵테일로의 중증 관절염의 유도 후 제 16 일에 (임상 점수 > 5) 골 파괴에 대한 마커로서 그의 뒷다리 (B) CTX-I 혈청 수준의 유사한 임상 점수를 갖는 항-GDF15 처리 마우스에서 덜 명백히 확연하였다. 항체 처리 마우스 (n=8) 에서의 평균 CTX-I 수준은 대조군 마우스 (n=9) 의 군에서 CTX-I 의 평균 수준과 비교한 바와 같이 백분율로 나타낸다. 오류 막대는 평균의 표준 오차를 나타낸다. 항체 처리 마우스에서의 CTX-I 의 낮은 수준의 유의도를 스튜던트 t-검정 (* 는 p<0.05 를 나타냄) 으로 시험하였다.
도 14: 항-GDF15 처리는 콜라겐 항체 유도 관절염 후 골의 새로운 형성 및 재형성을 감소시킨다. (A) 항-콜라겐 항체 칵테일로의 관절염 유도 후 제 16 일에 골의 새로운 형성에 대한 마커로서의 P1NP 혈청 수준. 제 13 일 (n=10) 로부터의 관절염 후 재형성 단계에서의 항-GDF15 처리를 갖는 마우스의 평균 P1NP 수준을 제 0-13 일 (n=10) 로부터의 관절염의 염증 단계 동안 처리한 마우스 군에서의 P1NP 의 평균 수준과 비교한 바와 같이 백분율로 나타낸다. 오류 막대는 평균의 표준 오차를 나타낸다. 재형성 동안 처리한 마우스에서의 P1NP 의 낮은 수준의 유의도를 스튜던트 t-검정 (* 는 p<0.05 를 나타냄) 으로 시험하였다. (B) 마우스 발의 마이크로 컴퓨터 단층촬영 슬라이스는 동형 처리 마우스에서의 관절염 유도 30 일 후 골의 새로운 형성을 나타낸다 (흰색 화살표로 표시). 항-GDF15 처리는 유사한 임상 염증 점수를 갖는 발에서의 동일 부위 (흰색 화살표) 에서의 골의 새로운 형성을 감소시킨다. 발 하나 당 3 개 슬라이스를 나타낸다.
도 2: A: 여러 환자 코호트에서의 GDF15 의 혈청 수준. GDF15 혈청 수준은 SpA 환자 (* p<0.05, **, p<0.01) 및 건강한 대조군 (# p<0.05, ##, p<0.01) 과 비교하여 RA 및 SLE 환자에서 상당히 상승한다. P-값은 log-변형 농도에 대한 본페로니 다중 비교 시험의 결과이다. B: RA 및 비-건선 관절염 (비-PsA) SpA 및 건선 관절염 (PsA) 환자의 혈청 수준 (진회색) 및 윤활액 수준 (연회색). 윤활액 수준은 PsA 환자에서만 혈청 수준에 비해 상당히 더 높다 (동일 환자의 log 변형 혈청 및 윤활액 농도에 대한 대응 표본 t-검정). 혈청 수준과 유사한 윤활액 수준은 비-PsA SpA 환자에 비해 RA 환자에서 상당히 더 높다 (log-변형 농도에 대한 독립적 스튜던트 T-검정). 이탤릭체 P-값은 대응 표본 시험의 결과이고, 모든 다른 p-값은 독립적 표본 검정으로부터 유래하는 것이다. 막대는 평균 혈청 수준 ± SEM 을 나타낸다.
도 3: 야생형 (WT), 이형접합 (HZ) 및 GDF15 널 (null) 마우스 (KO) 에서의 콜라겐 유도 관절염 발생 동안의 임상 관절염 점수. GDF15 결핍 (KO 및 HZ) 은 감소 및 연기된 염증성 증상을 나타낸다.
도 4: GDF15 널 마우스 (KO) 및 야생형 한배새끼 대조군 (WT) 에서의 IL-6 (A) 및 MMP3 (B) 의 혈청 수준 (둘 모두 관절 염증 및 파괴의 매개체로서 알려져 있음). KO-마우스는 혈청에서 염증 마커 둘 모두의 감소된 수준을 나타내며 (p<0.05), GDF15 널 마우스에서 감소한 관절 염증 및 파괴를 추가로 확인시킨다.
도 5: KO 및 WT 마우스의 조직학적 섹션을 CIA-실험의 말에 준비하였다. 3 명의 독립적, 맹검 관찰자에 의해 윤활액 침윤 및 연골 파괴에 대하여 섹션을 점수 매겼다. KO 는 감소한 윤활액 침윤 (A) 뿐 아니라 연골 파괴 (B) 를 나타내며, GDF15 결핍 마우스에서의 억제된 염증을 추가로 확인시킨다.
도 6: 염증 조건 하 골 대사의 공지된 매개체인 Dkk1 의 혈청 수준을 고령의 암컷 (A) 및 수컷 (B) 마우스 (12 개월) 로부터의 혈청에서 분석하였다. GDF15 널 마우스와 비교하여 감소한 수준이 WT 마우스에서 검출되었으며, 관절 대사에서의 GDF15 의 포함을 추가로 확인시킨다.
도 7: IL6 발현을 GDF15 녹-아웃 (knock-out) 활막 섬유모세포 (KO) 와 비교하여 야생형 활막 섬유모세포 (WT) 에서 유도한다. 이러한 유도는 TNF알파 (10 ng/ml) (TNF) 에 의해 유도된 전-염증 조건 또는 DMOG 에 의해 유도된 저산소성 조건에서 보다 확연하다.
도 8: 대조군 (PBS) 및 처리된 (항-GDF15 항체) 콜라겐 항체 유도 관절염 (CAIA) 마우스에서의 발병률, 하나 이상의 발에서 임상 점수 ≥ 1 을 나타내는 임의의 동물로서 정의함. 대응 표본 T-검정 PBS 대 항-GDF15: 0.0001.
도 9: 대조군 (PBS) 및 처리된 (항-GDF15 항체) 콜라겐 항체 유도 관절염 (CAIA) 마우스에서의 발병률, 하나 이상의 발에서 임상 점수 ≥ 2 를 나타내는 임의의 동물로서 정의함. 대응 표본 T-검정 PBS 대 항-GDF15: 0.0001
도 10: PBS 처리 및 항-GDF15 항체 처리 마우스에서의 콜라겐 항체 유도 관절염 (CAIA) 의 발생 동안 평균 임상 점수 값. 대응 표본 T-검정 PBS 대 항-GDF15: 0.0007.
도 11: 연령에 대해 교정된 (환자 연령 > 55 세) RA (N23), SpA (19) 및 OA (6) 에서의 윤활액 수준.
도 12: 항-GDF15 처리는 콜라겐 항체 유도 관절염에서 연골 파괴를 저지한다. (A) 항-콜라겐 항체 칵테일로의 관절염 유도 후 제 16 일에 연골 파괴에 대한 마커로서, CTX-II 혈청 수준. 항체 처리 마우스 (n=10) 에서의 평균 CTX-II 수준을 대조군 마우스 (n=6) 군에서의 CTX-II 평균 수준과 비교하여 백분율로 나타낸다. 오류 막대는 평균값의 표준 오차를 나타낸다. 항체 처리 마우스에서의 CTX-II 의 낮은 수준의 유의도를 스튜던트 t-검정 (** 는 p<0.01 을 나타냄) 으로 시험하였다. (B) CAIA 의 유도 30 일 후 동형 (n=9) 및 항-GDF15 처리 마우스 (n=16) 로부터의 무릎의 조직학적 점수. 특히 연골에서의 프로테오글리칸 고갈 정도는 대조군 마우스와 비교하여 항체 처리 마우스에서 상이하였다 (만 휘트니 (Mann Whitney) U 시험 (* 는 p<0.05 를 나타냄) 사용).
도 13: 항-GDF15 처리는 콜라겐 항체 유도 관절염에 의해 초래된 골 재형성을 감소시킨다. (A) 경골의 마이크로 컴퓨터 단층촬영 (Micro Computed Tomography) 슬라이스는 제 14 일에서 중증 관절염을 갖는 대조군 마우스에서 높은 수준의 다공도 (골 흡수) 를 나타내며 골피질의 비후를 보충한다. Fiji 에 의해 3D 로 측정 및 가시화된 바와 같은 피질 다공도 및 피질 비후는, 항-콜라겐 항체 칵테일로의 중증 관절염의 유도 후 제 16 일에 (임상 점수 > 5) 골 파괴에 대한 마커로서 그의 뒷다리 (B) CTX-I 혈청 수준의 유사한 임상 점수를 갖는 항-GDF15 처리 마우스에서 덜 명백히 확연하였다. 항체 처리 마우스 (n=8) 에서의 평균 CTX-I 수준은 대조군 마우스 (n=9) 의 군에서 CTX-I 의 평균 수준과 비교한 바와 같이 백분율로 나타낸다. 오류 막대는 평균의 표준 오차를 나타낸다. 항체 처리 마우스에서의 CTX-I 의 낮은 수준의 유의도를 스튜던트 t-검정 (* 는 p<0.05 를 나타냄) 으로 시험하였다.
도 14: 항-GDF15 처리는 콜라겐 항체 유도 관절염 후 골의 새로운 형성 및 재형성을 감소시킨다. (A) 항-콜라겐 항체 칵테일로의 관절염 유도 후 제 16 일에 골의 새로운 형성에 대한 마커로서의 P1NP 혈청 수준. 제 13 일 (n=10) 로부터의 관절염 후 재형성 단계에서의 항-GDF15 처리를 갖는 마우스의 평균 P1NP 수준을 제 0-13 일 (n=10) 로부터의 관절염의 염증 단계 동안 처리한 마우스 군에서의 P1NP 의 평균 수준과 비교한 바와 같이 백분율로 나타낸다. 오류 막대는 평균의 표준 오차를 나타낸다. 재형성 동안 처리한 마우스에서의 P1NP 의 낮은 수준의 유의도를 스튜던트 t-검정 (* 는 p<0.05 를 나타냄) 으로 시험하였다. (B) 마우스 발의 마이크로 컴퓨터 단층촬영 슬라이스는 동형 처리 마우스에서의 관절염 유도 30 일 후 골의 새로운 형성을 나타낸다 (흰색 화살표로 표시). 항-GDF15 처리는 유사한 임상 염증 점수를 갖는 발에서의 동일 부위 (흰색 화살표) 에서의 골의 새로운 형성을 감소시킨다. 발 하나 당 3 개 슬라이스를 나타낸다.
실시예
1. 재료 및 방법
1.1
환자
연구된 샘플은 상이한 집단으로부터 유래되었다.
첫번째 코호트는 류마티즘 증상이 있는 1024 명의 환자로 이루어졌고, 이들로부터 혈청 샘플을 진단 조사의 맥락에서 ACPA 측정을 위해 본 실험실로 연속적으로 보냈다 [10]. 환자는 파일을 검토함으로써 임상의에 의해 진단을 받았다. 81 명의 환자는 후속조치 (follow up) 를 놓쳤다. 따라서 92 명의 개인이 RA 를 갖는 것으로 진단되었고, 상기 환자 중 모두는 RA 에 대한 ACR 범주를 충족하였다 [11]. 463 명의 환자에서, RA 의 진단이 배제되었다. 상기 비-RA 환자에서, 가장 흔한 질환은 퇴행성 관절 질환, 척추관절병, 전신 홍반 루프스, 혈관염, 류마티즘성 다발성근육통, 크리스탈린 (crystalin) 유도 관절병증, 쇼그렌 질환 및 섬유근육통이었다. 추가의 388 명의 환자는 미분화된 관절염이 있었고, 분석으로부터 추가로 철수되었다. 상기 코호트의 상세사항은 그 밖에도 기재되어 있다 [10]. 희귀 진단 (즉, 5 개의 경우 또는 그 미만) 은 분석에 포함되지 않았다.
다음으로 두번째 연구군에서 결과를 확인하고, 혈청 및 윤활액 샘플을 비교하는 것을 목적으로 하였다. 본 코호트는 진단 목적을 위한 관절경 절차에 대한 지표를 가진 연속 환자로부터의 샘플을 포함하였다. 상기 집단으로부터 잘-성립된 임상적 진단을 가진 환자를 선택하였다: ACR RA-범주를 충족하는 37 명의 환자 [11], ESSG SpA-범주를 충족하는 63 명의 환자 [12] 및 17 명의 OA 환자. 윤활액을 RA 및 SpA 환자로부터 수득하였다. 선택된 수의 환자에서, 활막 조직 샘플을 qPCR 에 대해 사용하였다.
상기 연구는 지역 윤리 위원회에서 승인을 받았고, 모든 환자는 사전에 동의하였다.
1.2
GDF15 수준의 분석
혈청 샘플 및 윤활액 샘플을 분취하고, 분석까지 -80℃ 에서 저장하였다. GDF15 의 수준을 제조사의 지침에 따라, GDF15 DuoSet ELISA (R&D systems, Abingdon, UK) 를 사용하여 분석하였다. 어세이-내 정밀도는 14.8 (%CV) 에서 측정하고, 12 회의 연속 어세이에서 사내 대조 샘플의 반복된 측정에 의해 평가하였다. 각 샘플을 이중으로 어세이하였다.
1.3
동물 실험
생체 내에서 관절염 질환 동안의 왜곡된 관절 항상성에서의 GDF15 의 역할을 분석하기 위해, 각각 그 자체의 특징을 가진 상이한 관절염 모델에 항-GDF15 항체를 적용한다. 항-GDF15 항체는 Lou/C 랫트를 정제된 (>95%) 재조합 마우스 GDF15 로 면역화함으로써 표준 절차를 사용하여 수득되었다. 재조합 마우스 GDF15 의 분비된 단편
(AHHHHHHPGGPGSDELDSAHAHPRDSCPLGPGRCCHLETVQATLEDLGWSDWVLSPRQLQLSMCVGECPHLYRSANTHAQIKARLHGLQPDKVPAPCCVPSSYTPVVLMHRTDSGVSLQTYDDLVARGCHCA; SEQ ID NO: 1) 을 HEK293T 세포에서 제조하였다. 선택된 클론을 골수종 세포주 P3-X63-Ag8 과 융합시켰다. 산출된 하이브리도마를 ELISA 에 의해 스크리닝하였다. 양성 클론을 팽창시키고 서브클로닝하였다. Ab 의 특이성을 ELISA 및 WB 에 의해 입증하였다. 생물학적 활성을 시험관 내 파골세포 어세이의 억제에 의해 입증하였다. 하이브리도마 세포주 52D4C1 에 의해 제조된 단일클론 항체를 Belgian Coordinated Collections of Micro-organisms (BCCM) - LMBP Plasmid Collection - 에, 2014 년 9 월 30 일에 수탁하였고, 수탁 번호 LMBP 10815CB 가 부여되었다. 이소형 대조군에 대한 하이브리도마를 ATCC, USA 에서 구입하였고, 랫트 항-mSn Ab 와 유사하게 처리하였다. 하이브리도마를 DMEM 10% IgG 결핍 FCS, 1% P/S 에서 컨플루언트하게 성장시키고 (grown to confluency), 배지를 6 회까지 수확하였다. Ab 를 배지로부터 단백질 G 컬럼 상에서 > 95% 의 순도까지 정제하였고, 단백질 함유 분획을 모집하였고, 내독소 수준 < 1EU/ml 의 PBS 에 투석하였다.
4 가지 상이한 질환 모델을 사용하여, GDF15 녹-아웃 (knock-out) 마우스 및/또는 항-GDF15 항체 처리를 사용하는 GDF15 결핍의 영향을 평가하였다. 첫째로, 항체를 TNF 과발현 모델에 제공한다. 상기 모델은 주로 관절 염증 및 파괴를 특징으로 하며, 재형성 (새로운 골 형성) 반응의 신호를 보이지 않는다. 둘째로, 항-GDF15 항체를 CIA-모델에 주입하고, 마우스를 초기 및 후기 병기에서 분석한다. 초기는 주로 염증 유도된 파괴를 특징으로 하고, 후기 병기는 새로운 골 형성의 명백한 신호를 나타낸다. 세번째로, 새로운 골 형성을 연구하는데 매우 적합한 모델로서 공지된 노화 DBA/1 마우스에, 항-GDF15 항체를 주입한다. 네번째로, CAIA 마우스 모델을 관절 파괴 및 새로운 골 형성에서의 GDF15 의 역할을 추가로 분석하는데 사용하였다.
GDF15 녹-아웃 마우스를 사용하는 콜라겐 유도 관절염 (CIA) 에서의 생체 내 평가.
GDF15 결핍 마우스는 Dr. Lee 로부터 John Hopkins University, Baltimore, USA 에서 친절하게 제공받았다 [15]. 마우스를 이형접합 부모로부터 사육하였다. 모든 동물 실험은 Ghent University 의 지역 윤리 위원회에서 승인받았다.
첫번째 실험에서, KO, HZ 및 WT 마우스를 3 및 12 개월 연령에 희생시켰다. 뒷발을 조직학을 위해 프로세싱하고, 혈청을 수집하였다. 마우스의 혈청을 제조사의 프로토콜에 따라, 마우스 Dkk1 에 특이적인 시판 샌드위치 ELISA 어세이 (R&D Systems) 를 사용하여, Dkk1 에 대해 분석하였다. 두번째 실험에서, 염증성 관절염을 이전에 기재된 바와 같이 [16], 3 가지 유전형으로의 닭 콜라겐에 의해 유도하였고, 면역화 및 부스트에서 마우스 당, 250 ㎍ 마이코박테리움 투베르쿨로시스 (Mycobacterium Tuberculosis) 를 사용하여 C57Bl/6 마우스에 대해 변형시켰다. 본 실험에서, 마우스를 임상적으로 관찰하였고, 팽윤된 발목 관절에 대해 점수를 매겼다. 희생 시, 뒷발을 조직학을 위해 프로세싱하고, 혈청을 수집하였다.
세번째 실험에서, 활막 조직을 GDF15 널 및 야생형 마우스의 뒷발로부터 단리하였다. 활막 섬유모세포를 조직으로부터 단리하고 배양하였다. 염증 조건을 모방하기 위해, 세포 (계대 2-3) 를 TNFα (10 ng/ml) 및 DMOG (염증에서 보이는 바와 같은 저산소 조건을 모방하기 위한 화합물) 로 자극하였다. 24 시간 후, 세포를 단리하고, IL-6 의 유전자 발현을 qPCR 에 의해 분석하였다.
마우스 내 골 손상 중증도의 조직학적 평가
무릎을 4% 포름알데히드로 고정시키고, 칼슘을 제거하고, 파라핀 내에 포매하였다. 무릎의 연속 섹션을 헤마토자일린 및 에오신 (H&E) 으로 또는 사프라닌 (saffranin) O-패스트 그린 (O-fast green) 으로 염색하고, 대퇴경골 및 대퇴슬개 관절의 염증 및 관절 손상을 하기와 같이 5 개의 매개변수의 점수를 매겨 조사하였다: 염증을 활막 강 (삼출물) 및 활막 조직 (침윤물) 내 염증 세포의 수에 따라 0 (염증 없음) 내지 3 (심각한 염증이 있는 관절) 의 범위로 점수를 매겼다. 삼출물 및 염증 침윤물은 둘다 개인 점수로 할당하였다. 프로테오글리칸의 손실은 완전히 염색된 연골에서 탈색된 연골 또는 관절 연골의 완전한 손실에 이르는, 0 내지 3 의 범위로 점수를 매겼다. 연골 파괴는 죽은 연골세포의 출현 (빈 골소강) 에서 관절 연골의 완전한 손실에 이르는, 0 내지 3 의 범위로 점수를 매겼다. 골의 손실은 손상 없음에서 골 구조의 완전한 손실에 이르는, 0 내지 5 의 범위로 점수를 매겼다. 복합 점수는 개인 매개변수를 합함으로써 계산하였다. 점수화는 3 명의 조사자에 의해 맹검 실시되었고, 평균 값을 계산하였다.
항-GDF15 항체를 사용하는 콜라겐 항체 유도 관절염 (CAIA) 에서의 생체 내 평가
A. 콜라겐 항체 유도 관절염 (CAIA) 을 C57BL/6 마우스 (n=7) 내로, 제 0 일에 항-콜라겐 II 항체 (Harlan Laboratories) 의 수동 전달 (PBS 중의 정제된 mAb 의 120 ㎕ 총 부피) 에 의해 유도하였다. 제 3 일에, 마우스에 LPS 부스트 (25 ㎍/마우스 ip) 를 제공하였다. 마우스에 제 1 일부터 제 13 일까지 0.2 ㎍ 항-GDF15 mAb 또는 PBS 의 일일 투여를 수여하였고, 이후 이들을 희생시켰다.
B. 마우스에 C57Bl/6 마우스에 대한 2.4 mg ArthritoMabTM 항체 칵테일 (Mdbiosciences) 을 정맥내 주입하였다. 3 일 후 마우스를 LPS 로 복강내 접종하였다. 마우스를 항체 칵테일 투여일로부터 매일 처리하였다. 하나의 군의 마우스를 제 13 일로부터 염증 단계 후에 처리하였다. 처리는 PBS 중의 이소형 또는 항-GDF15 항체로의 복강 내 주사로 이루어졌다. 마우스를 관절염의 임상 징후에 대해 매일 모니터링하였다. 혈청 샘플을 제 16 일에 수집하였다. 마우스를 제 30 일에 희생시켰다. 임상 중증도를 하기와 같이 등급화하였다: 0 = 정상; 0.5 = 오직 하나의 발가락 내의 홍반 및 부종; 1 = 발바닥, 또는 발목 또는 2 내지 5 개의 발가락의 홍반 및 경미한 부종; 2 = 2 개의 관절 (발바닥, 발목, 2 내지 5 개의 발가락) 의 홍반 및 중간 부종; 3 = 전체 팔다리의 홍반 및 심각한 부종; 4 = 감소된 팽윤 및 무능력하게된 사지를 초래하는 기형. 개인 마우스 관절염 점수를 각 사지에 대해 기록된 점수를 합함으로써 수득하였다. 임상적 평가를 2 명의 조사자에 의해 마우스 신원을 모르는 채로 수행하였고, 두 점수의 평균을 계산하였다. 유형 I 콜라겐 (CTX-I) 의 골 분해 마커 C-말단 텔로펩티드 α1 사슬, 연골 분해 마커 CTX-II 및 골 신규 형성 마커 프로콜라겐 유형 1 N-말단 프로펩티드 P1NP 를 제조사의 지침 (Immunodiagnosticsystems) 에 따라 ELISA 에 의해 측정하였다.
희생 시, 관절 조직 (연골, 힘줄, 반월판, 활막 및 뼈) 에서의 구조적 변화에 대한 영향을 추정하기 위해 특이적 염색 (예를 들어, Safranin O, Hematoxylin/Eosin, TRAP) 을 사용하여, 관절을 조직학적으로 평가한다. 동시에, 영상화 기술 (예컨대 RX, μCT 및 MRI) 을 사용하여, 관절 구조에서의 초기 변화를 검출한다. 이들은 시간에 걸쳐 세로로 수행할 수 있다는 독특한 장점을 갖는다. 게다가, 연골 및 골 분해 및 전환율 (turnover) 에 대한 생화학적 매개변수 (COMP, CTXI, CTXII, MMP3, IL6) 를 평가한다.
마이크로 컴퓨터 단층촬영
최적의 스캐너 설정을, 샘플 크기 및 조성을 기반으로 선택하였다. 샘플은, 100kV, 1 mm 알루미늄 여과, 10 Watt 빔 출력으로 설정된 방향성 X-선 소스를 이용하여 HECTOR 상에서 스캔하였다. 검출기는 픽셀 피치가 200 ㎛ 인 40 x 40 cm 의 Perkin-Elmer 평면 패널이었다. 배율을 40 배로 설정하여 5㎛ 의 샘플 내부의 복셀 피치를 도모하였다. 각 1 초 노출 시간의 총 2000 회의 투사를 기록하였다. 이어서, 데이타를 콘-빔 CT 데이타의 재구축을 위한 표준 FDK-알고리즘의 맞춤 구현을 이용하는 UGCT 에 의해 본래 개발된 시판용 소프트웨어인 Octopus [34] 를 이용하여 재구축하였다. 상용 렌더링 소프트웨어 VGStudioMAX (Volume Graphics) 또는 Fiji 를 이용하여 3D 비쥬얼화 및 산출을 행하였다.
1.4 통계 분석
다수의 비교를, 원-웨이 아노바 (One-Way ANOVA) 및 본페로니 사후 분석 (Bonferroni's post hoc) 시험을 이용하여 행하였다. 2-군 비교는, 달리 명시하지 않는 한 스튜던트 검정을 이용하여 행하였다. 데이터를 정규화하기 위해, 매개변수 시험 (parametric test) 을, 로그 변환된 혈청 및 윤활액 농도를 이용하여 수행하였다. 해석의 명확성을 위해, 그 수치는 변환되지 않은 농도를 기록한다. 스페어맨 (Spearman) 의 Rho 상관 관계 시험을 이용함으로써 상관관계를 조사하였다.
2. 결과
2.1 기타 염증성 류마티스 질환과 반대되는 SpA 에서의 낮은 혈청 GDF15 수준.
처음에는, 정상 (steady) 상태 GDF15 혈청 수준을, 각종 류마티스 질환에서 측정하였다. 따라서, Ghent University Hospital 의 류마티스과 부서의 외래 진료소를 방문하는 555 명의 환자 코호트 (cohort) 를 스크리닝하였다. GDF15 의 평균 농도는 군들간 유의미한 차이가 있었다 (p<0.001). SpA 환자에서, GDF15 혈청 수준은 RA (p<0.001) 및 SLE (p=0.04) 환자와 비교할 때 현저히 낮았으며, 퇴행성 관절 질환을 앓고 있는 환자들은 GDF15 의 통계학적으로 유의미한 차이 (p=0.004) 의 수준임에도 불구하고, 중간 정도를 나타냈다 (도 1). SpA 의 하위진단간 (건선 관절염 대 비-PsA SpA) (데이타에는 표시되지 않음) 에는 유의미한 차이가 관찰되지 않았다. 흥미롭게도, 상승된 수준의 GDF15 가 또한 혈관염 병리학 (p<0.001), 결정 유도 관절증 (p<001), 및 류마티스 다발성 근육통 (p<0.001) 과 같은 기타 결합 조직 질환에서 검출되었다. RA, SpA 및 SLE 환자들 사이에서 관찰된 GDF15 혈청 수준 차이를 추가로 조사하였고, 제 2 의 독립 코호트에서 확인하였다 (도 2, 패널 A).
2.2 특히 PsA 환자에서 혈청 수준에 대한 상승된 GDF15 윤활액
본 출원인은 다음으로, 혈청 및 윤활액 수준을 RA 및 SpA 를 앓고 있는 환자에게서 비교하였고 (비-PsA SpA 및 PsA), 이를 임상 특성과 관련시켰다. 흥미롭게도, PsA 환자들은 혈청과 비교시 짝을 이루는 윤활액 샘플에서 GDF15 의 농도가 유의미하게 높았다. 이러한 차이는 RA 환자뿐 아니라 비-PsA SpA-환자에게서도 관찰되지 않았다. PsA 뿐 아니라 RA 환자에 대해서는, GDF15 혈청 농도와 윤활액 농도 사이에 유의미한 상관관계가 관찰된 반면 (PsA: R=0.395; RA: R=0.503), 비-PsA SpA 환자는 상관관계가 없었다 (표 1 참조). 중요하게도, 연령 보정 후 (> 55 세), 윤활액 수준은 혈청 수준보다 더 높은 것으로 발견되었고, RA, SpA 및 OA 에서는 필적할만하다 (도 11).
표 1: RA (n=37) 및 PsA (n=30) 및 비-PsA SpA (n=33) 환자에 있어서 GDF15 혈청 및 윤활액 농도와 일상 생화학 및 임상적 염증 매개변수 사이의 상관관계에 대한 스페어맨의 Rho 상관 관계 계수. RA 의 경우, 제 2 연구 (섹션 2.2) 및 제 3 연구의 기준선에서의 환자값을 나타낸다.
Correl Coeff= 스페어맨의 Rho 상관 관계 계수; Sign= 통계학적 유의미함을 지시함, p<0.05. 모든 변수는, "(SF)" (윤활액) 으로 표시되는 경우를 제외하고는 혈청에서 측정함.
GDF15 농도는 또한 통상의 생화학적 및 임상적 매개변수 (CRP, ESR, SJC, ACPA, MMP3 및 MMP1) 와 상관 관계가 있었다 (표 1 참조). 놀랍게도, SpA 환자는 GDF15 윤활액 수준 및 MMP3 및 MMP1 간의 양성 상관 관계를 보였다. MMP3-GDF15윤활액 상관 관계는 비-PsA SpA 환자에게서 가장 두드러지고 고도로 유의미하였다. 이들 환자에게서, GDF15 윤활액 수준은 또한 염증 매개변수 (CRP, ESR) 및 MMP1 수준과 관련이 있었다 (표 1 참조). 관절 퇴화 (degradation) 에서 MMP 의 관여를 고려하면, 관찰된 상관 관계로부터, SpA 환자에게서 윤활액 GDF15 수준과 질환 활성간의 관계가 추가로 확인된다.
2.3 GDF15 녹-아웃 (knock-out) 마우스는 콜라겐-유도 관절염 (CIA) 모델에서 감소된 염증을 보인다.
정상-상태 조건 하에서, 관절 대사 및 구조 측면에서 극적인 변화는 관찰되지 않았다. 통계학적으로 유의미하지는 않지만, KO 마우스에서 더 높은 COMP 수준에 대한 경향이 존재하였다. 흥미롭게도, DKK1 수준은 WT 한배새끼와 비교할 때 녹-아웃 마우스에서 상승하였다 (도 6).
동물 실험의 제 2 세트에서, 마우스를 콜라겐 유도 관절염 (Collagen Induced Arthritis; CIA) 모델을 이용하여 관절 염증을 발달시키도록 챌린지하였다. 이 모델은 일반적으로 관절 염증에 대한 최첨단 모델이었다. 모델의 초기 단계에서, 관절 염증은 관절 파괴와 연관 있고, 전형적인 RA 특성을 보인다 [26]. 후기 단계에서, 관절 강직을 유발하는 새로운 골 형성이 나타날 수 있다. 콜라겐-유도 관절염의 유도시, 야생형 마우스는 실험 말미에 동물의 주요 부분에서 염증성 증상과 함께 염증성 징후의 예상되는 발달을 보였다. 녹-아웃뿐 아니라 이형접합체는 더 느린 염증성 징후 발달을 보였고, 녹아웃뿐 아니라 이형접합 마우스 중 어떤 마우스도 완전히 진행된 질환이 발달되지 않았다 (도 4). 이는 CIA 에서 질환 활성과 관련있는 것으로 공지되어 있는 마커인 혈청 매트릭스 메탈로프로테이나아제 3 (Matrix Metalloproteinase 3; MMP3) 수준을 모니터링함으로써 확인되었다 [16]. MMP3 수준은, KO 마우스와 비교시 WT 에서 유의미하게 더 높았다. 더욱이, IL6 수준은 0.05 수준 (p=0.09) 에서 통계학적으로 유의미하지는 않지만 KO 마우스에서 더 낮은 경향을 보였다.
구조적 손상은, 무릎 관절의 조직학적 절편 및 사프라닌O (SafraninO) 염색법으로써 평가하였다. 관절 염증 및 파괴를, 몇몇의 병리학적 특징들을 점수화함으로써 평가하였다. 윤활액 침윤 및 연골 파괴는 케이지-간 (inter-cage) 변동 보정 후 KO 마우스에서 유의미하게 감소되었다 (도 5). 이는 GDF15 널 (KO) 마우스에서 감소된 관절 염증 및 파괴를 분명히 나타낸다.
2.4 활막 섬유모세포의 시험관 내 자극 실험으로, 염증 매개체의 분비에서 GDF15 의 중요한 역할을 확인한다.
TNFα 는 관절 염증 및 파괴의 익히 공지된 매개체이다. 이는 관절 염증을 치료하기 위한 차단 항체 (항-TNF) 의 치료학적 용도에 의해 반영된다. 야생형 (WT) 및 GDF15 널 마우스 (KO) 로부터의 윤활액 섬유모세포를 TNFα 로 자극시켜 염증 병태를 모의 시험하였다. 예상한 대로, TNF 는 IL6 발현을 유도한다. 그러나, IL6 의 수준은 GDF15 널 마우스로부터 유래된 윤활액 섬유모세포에서 감소되는데, 이는 관절 염증에서의 감소된 GDF15 수준의 보호 역할을 추가로 확인시킨다 (도 7). 이 효과는 염증성 관절과 매우 관련 있는 DMOG 에 의해 유도된 저산소 상태 하에서 보다 더 두드러진다.
2.5 항-GDF15 항체의 첨가는, 마우스 CAIA 모델에서 개선된 임상 점수를 초래한다.
유형 II-콜라겐-특이적 항체에 의해 유도된 CAIA 모델은, 광범위한 관절 염증 및 윤활막염을 특징으로 한다. 단일클론 항-콜라겐 항체 칵테일로 면역화한 후 일찍이 7 일 후에, CAIA 마우스는 궁극적으로 파괴성 다발관절염으로 발전하는 착부염 (enthesitis) 을 보인다. 골증식체 형성은 염증 단계 해소 후에 발생한다. 상기 진정 단계에서, 새로운 골 형성은 발의 힘줄의 삽입 부위에서 발생하는 것으로 공지되어 있다 [32; 33]. CAIA 모델에서, 질환 활성은 발병된 관절에서 염증성 팽창 (발의 체적 또는 두께) 을 시간 경과에 따라 측정함으로써 평가된다. 임상 점수화는 예를 들어 문헌 [Seeuws S. et al., 2010] [31] 에 기재된 바와 같이 달성된다.
A. 항-GDF15 항체를 제공받은 동물은 3 일째에 최대 염증을 나타내었다. 치료된 동물은 최대 점수가 더 낮을 뿐 아니라 또한 최대 염증에서의 발병률이 더 낮고, 평균 임상 점수 뿐 아니라 발병률의 더 빠른 감소를 특징으로 하는데, 이는 치료적 효능을 입증한다 (도 8, 9 및 10). 경골의 마이크로 컴퓨터 단층 촬영 슬라이스는 중증 관절염 마우스에서 더 높은 피질 다공도을 나타낸다. 추가적으로, 경골은 새로운 골 덧붙이 (apposition) 에 의한 피질의 비후를 나타낸다. 두 특징 (피질 다공도 및 피질 비후) 은 항-GDF15 항체로 처리한 유사한 관절염 마우스에서 덜 두드러졌다 (도 13A).
B. 항-GDF15 항체 또는 동일 동형의 무관한 항체를, 매일 마우스에 제공하였다. 연골 퇴화의 마커인 유형 II 콜라겐의 C-말단 텔로펩티드는 항-GDF15 처리를 받은 마우스에서 현저히 낮았다 (도 12A). 이들 마우스의 무릎을 프로테오글리칸 손실 및 연골 퇴화에 대해 조직학적으로 점수화할 때, 일관된 결과를 수득하였다 (도 12B). 나아가, 또한 골 파괴는 유형 I 콜라겐의 C-말단 텔로펩티드 (CTX-I) 으로서 항-GDF15 처리에 의해 영향받으며, 골 재흡수의 마커는 항-GDF15 항체로 처리한 병든 마우스에서 현저히 낮았다 (도 13B).
SpA 의 특징인 새로운 골 형성은 염증 단계 후 상기 마우스 모델에서 발생한다. 항-GDF15 처리가 재형성 단계에서 새로운 골 형성에 영향을 미치는지 여부에 대해 시험하기 위해, 추가적인 마우스 군에게 13 일째부터 매일 주사하였다. 분명하게도, 이 단계에서 항체 처리는 제 0 일부터 제 13 일까지의 염증 단계에서의 항체 처리와 비교했을 때 혈청 내 새로운 골 형성 마커인 P1NP 에 대해 유의미한 감소 효과를 갖는다 (도 14A). 이들 결과는, microCT 에 의해, 동형 처리한 마우스의 발의 전형적인 착부염성 부위에서 정상적으로 발생하는 새로운 골 형성이 유사한 임상적 점수를 갖는 항-GDF15 항체 처리 마우스의 발에서 부재함에 따라 확인되었다 (도 14B).
항-GDF15 항체 처리가, SpA 에 대한 마우스 모델에서 골 및 연골 퇴화, 및 새로운 골 형성을 없앤다는 결론을 낼 수 있다.
결론
본 발명에서, 본 출원인은 염증성 류마티스 질환에서 GDF15 생물학과 관련하여 몇가지의 신규하고 예기치 않은 발견을 입증하였다. 본 출원인의 결과는 급성기 반응과 관계 없이 GDF15 의 정상 상태 수준이 각종 염증성 류마티스 질환에 따라 현저히 상이하다는 점을 지시한다. 특히, SpA 환자에서 GDF15 의 혈청 수준은 정상에 가깝지만, 다른 염증성 류마티스 질환, 예컨대 SLE 및 RA 에서의 수준은 대조군에 비해 높았다. 따라서, 본 출원인은 RA 및 기타 염증성 류마티스 장애와 비교되는 SpA 에서 차별적으로 발현되는 새로운 혈청 마커를 확인하였는데, 이는 급성기 반응과 직접적으로 연관되지 않는 것처럼 보이는 관찰이다.
SpA 환자에게서 윤활액 수준이 혈청과 비교했을 때 현저하게 상승된다는 관찰이 특히 흥미있다. 더욱이, SpA 환자에서, GDF15 윤활액 수준은 질환 활성 및 관절 파괴 매개변수와 매우 상관 관계가 있으므로, RA 뿐 아니라 건선 관절염 환자를 비롯한 SpA 환자에게서 관절 발병기전에서 GDF15 에 대한 역할을 가리킨다. 관절 항상성에 있어서 GDF15 의 명확한 역할은 현재 불투명하지만, TGFβ 패밀리의 다른 멤버가 SpA 와 RA 를 구별하는 프로세스인 골 형성뿐 아니라 면역계의 조절과 연결된다는 점에 주목해야 한다 [18,19]. GDF15 의 증가된 윤활액 수준은 전형적으로 SpA 연관 관절염과 연관된 재형성 특징과 관련이 있을 수 있다. 이러한 가설은 마우스에서 GDF15 의 유전자 결실로 상승된 Dickkopf 단백질 1 (Dkk1) 수준을 도모한다는 발견에 의해 추가로 확인된다. Dkk1 은 Wnt 신호화 저해에 의한 관절 재형성의 주된 조절제로, 이전에는 SpA 의 관절 강직 특징과 관련있었다 [20]. 윤활액에서, GDF15 수준은 또한 OA; 두드러진 관절 재형성을 특징으로 하는 질환에서 증가되었다.
콜라겐-유도 관절염에서 관찰된 상이한 질환의 표현형 및 염증 조건 하 GDF15 녹-아웃 활막 섬유모세포에 의한 IL6 의 감소된 발현을 고려하면, GDF15 가 관절 염증의 활성 조절제로서 역할하며, GDF15 수준을 감소시키는 것이 생체 내 관절 염증 표현형을 활성적으로 조절한다는 점이 분명하다.
CCR2/MCP1 축이 동물 모델에서 윤활성 염증에 기여한다고 공지된 바와 같이, 관절염성 관절에서 관찰되는 상향조절된 GDF15 농도는 바탕질 조직과 면역계 사이의 상호작용에서 중요한 기능적 결과를 가질 수 있다. 실제로, 본 출원인은 GDF15 가 적어도 부분적으로 관절에서, 보다 구체적으로는 윤활성 조직에서 생성된다는 것을 알아냈다. 전반적으로, 본 출원인은 결합 조직에 의해 분비되는 단백질인 GDF15 가 관절 염증의 활성 매개체이며, 관절염 관절 질환에서 염증 및 재형성 특징에 기여할 수 있다는 것을 밝혔다. 나아가, 항-GDF15 리간드의 임상적 효능이 본 발명에서 처음으로 입증되었다.
REFERENCES
1.
Bootcov MR, Bauskin AR, Valenzuela SM, Moore AG, Bansal M, He XY, Zhang HP, Donnellan M, Mahler S, Pryor K et al: MIC-1, a novel macrophage inhibitory cytokine, is a divergent member of the TGF-beta superfamily. Proc Natl Acad Sci U S A 1997, 94(21):11514-11519.
2.
Bottner M, Laaff M, Schechinger B, Rappold G, Unsicker K, Suter-Crazzolara C: Characterization of the rat, mouse, and human genes of growth/differentiation factor-15/macrophage inhibiting cytokine-1 (GDF-15/MIC-1). Gene 1999, 237(1):105-111.
3.
Paralkar VM, Vail AL, Grasser WA, Brown TA, Xu H, Vukicevic S, Ke HZ, Qi H, Owen TA, Thompson DD: Cloning and characterization of a novel member of the transforming growth factor-beta/bone morphogenetic protein family. J Biol Chem 1998, 273(22):13760-13767.
4.
Mimeault M, Batra SK: Divergent molecular mechanisms underlying the pleiotropic functions of macrophage inhibitory cytokine-1 in cancer. J Cell Physiol, 224(3):626-635.
5.
Wollert KC, Kempf T, Peter T, Olofsson S, James S, Johnston N, Lindahl B, Horn-Wichmann R, Brabant G, Simoons ML et al: Prognostic value of growth-differentiation factor-15 in patients with non-ST-elevation acute coronary syndrome. Circulation 2007, 115(8):962-971.
6.
Khan SQ, Ng K, Dhillon O, Kelly D, Quinn P, Squire IB, Davies JE, Ng LL: Growth differentiation factor-15 as a prognostic marker in patients with acute myocardial infarction. Eur Heart J 2009, 30(9):1057-1065.
7.
Taddei S, Virdis A: Growth differentiation factor-15 and cardiovascular dysfunction and disease: malefactor or innocent bystander? Eur Heart J, 31(10):1168-1171.
8.
de Jager SC, Bermudez B, Bot I, Koenen RR, Bot M, Kavelaars A, de Waard V, Heijnen CJ, Muriana FJ, Weber C et al: Growth differentiation factor 15 deficiency protects against atherosclerosis by attenuating CCR2-mediated macrophage chemotaxis. J Exp Med.
9.
Brown DA, Moore J, Johnen H, Smeets TJ, Bauskin AR, Kuffner T, Weedon H, Milliken ST, Tak PP, Smith MD et al: Serum macrophage inhibitory cytokine 1 in rheumatoid arthritis: a potential marker of erosive joint destruction. Arthritis Rheum 2007, 56(3):753-764.
10.
Vander Cruyssen B, Cantaert T, Nogueira L, Clavel C, De Rycke L, Dendoven A, Sebag M, Deforce D, Vincent C, Elewaut D et al: Diagnostic value of anti-human citrullinated fibrinogen ELISA and comparison with four other anti-citrullinated protein assays. Arthritis Res Ther 2006, 8(4):R122.
11.
Arnett FC, Edworthy SM, Bloch DA, McShane DJ, Fries JF, Cooper NS, Healey LA, Kaplan SR, Liang MH, Luthra HS et al: The American Rheumatism Association 1987 revised criteria for the classification of rheumatoid arthritis. Arthritis Rheum 1988, 31(3):315-324.
12.
Dougados M, van der Linden S, Juhlin R, Huitfeldt B, Amor B, Calin A, Cats A, Dijkmans B, Olivieri I, Pasero G et al: The European Spondylarthropathy Study Group preliminary criteria for the classification of spondylarthropathy. Arthritis Rheum 1991, 34(10):1218-1227.
13.
Vander Cruyssen B, Van Looy S, Wyns B, Westhovens R, Durez P, Van den Bosch F, Veys EM, Mielants H, De Clerck L, Peretz A et al: DAS28 best reflects the physician's clinical judgment of response to infliximab therapy in rheumatoid arthritis patients: validation of the DAS28 score in patients under infliximab treatment. Arthritis Res Ther 2005, 7(5):R1063-1071.
14.
Lambrecht S, Verbruggen G, Elewaut D, Deforce D: Differential expression of alphaB-crystallin and evidence of its role as a mediator of matrix gene expression in osteoarthritis. Arthritis Rheum 2009, 60(1):179-188.
15.
Hsiao EC, Koniaris LG, Zimmers-Koniaris T, Sebald SM, Huynh TV, Lee SJ: Characterization of growth-differentiation factor 15, a transforming growth factor beta superfamily member induced following liver injury. Mol Cell Biol 2000, 20(10):3742-3751.
16.
Seeuws S, Jacques P, Van Praet J, Drennan M, Coudenys J, Decruy T, Deschepper E, Lepescheux L, Pujuguet P, Oste L et al: A multiparameter approach to monitor disease activity in collagen-induced arthritis. Arthritis Res Ther, 12(4):R160.
17.
Moore AG, Brown DA, Fairlie WD, Bauskin AR, Brown PK, Munier ML, Russell PK, Salamonsen LA, Wallace EM, Breit SN: The transforming growth factor-ss superfamily cytokine macrophage inhibitory cytokine-1 is present in high concentrations in the serum of pregnant women. J Clin Endocrinol Metab 2000, 85(12):4781-4788.
18.
Singh R, Aggarwal A, Misra R: Th1/Th17 cytokine profiles in patients with reactive arthritis/undifferentiated spondyloarthropathy. J Rheumatol 2007, 34(11):2285-2290.
19.
Braun J, Bollow M, Neure L, Seipelt E, Seyrekbasan F, Herbst H, Eggens U, Distler A, Sieper J: Use of immunohistologic and in situ hybridization techniques in the examination of sacroiliac joint biopsy specimens from patients with ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum 1995, 38(4):499-505.
20.
Diarra D, Stolina M, Polzer K, Zwerina J, Ominsky MS, Dwyer D, Korb A, Smolen J, Hoffmann M, Scheinecker C et al: Dickkopf-1 is a master regulator of joint remodeling. Nature medicine 2007, 13(2):156-163.
21.
Wakchoure S, Swain TM, Hentunen TA, Bauskin AR, Brown DA, Breit SN, Vuopala KS, Harris KW, Selander KS: Expression of macrophage inhibitory cytokine-1 in prostate cancer bone metastases induces osteoclast activation and weight loss. Prostate 2009, 69(6):652-661.
22.
Vanhara P, Lincova E, Kozubik A, Jurdic P, Soucek K, Smarda J: Growth/differentiation factor-15 inhibits differentiation into osteoclasts--a novel factor involved in control of osteoclast differentiation. Differentiation 2009, 78(4):213-222.
23.
Vandooren B, Noordenbos T, Ambarus C, Krausz S, Cantaert T, Yeremenko N, Boumans M, Lutter R, Tak PP, Baeten D: Absence of a classically activated macrophage cytokine signature in peripheral spondylarthritis, including psoriatic arthritis. Arthritis Rheum 2009, 60(4):966-975.
24.
Fairlie WD, Moore AG, Bauskin AR, Russell PK, Zhang HP, Breit SN: MIC-1 is a novel TGF-beta superfamily cytokine associated with macrophage activation. J Leukoc Biol 1999, 65(1):2-5.
25.
Breit SN, Johnen H, Cook AD, Tsai VW, Mohammad MG, Kuffner T, Zhang HP, Marquis CP, Jiang L, Lockwood G, Lee-Ng M, Husaini Y, Wu L, Hamilton JA, Brown DA. The TGF-β superfamily cytokine, MIC-1/GDF15: a pleotrophic cytokine with roles in inflammation, cancer and metabolism. Growth Factors. 2011, Oct;29(5):187-95.
26.
Courtenay JS, Dallman MJ, Dayan AD, Martin A, Mosedale B: Immunisation against heterologous type II collagen induces arthritis in mice. Nature 1980, 283:666-668.
27.
Dimitrov, D.S. (2009) Engineered CH2 domains (nanoantibodies). MABS 1(1), 26-28.
28.
Khaw, B. A. et al. J. Nucl. Med. 23:1011-1019 (1982).
29.
Rousseaux et al. Methods Enzymology, 121:663-69, Academic Press, 1986.
30. Tramontano A, Bianchi E, Venturini S, Martin F, Pessi A, Sollazzo M. The making of the minibody: an engineered beta-protein for the display of conformationally constrained peptides. J Mol Recognit. 1994 Mar;7(1):9-24.
31.
A multiparameter approach to monitor disease activity in collagen-induced arthritis.
Seeuws S, Jacques P, Van Praet J, Drennan M, Coudenys J, Decruy T, Deschepper E, Lepescheux L, Pujuguet P, Oste L, Vandeghinste N, Brys R, Verbruggen G, Elewaut D. Arthritis Res Ther. 2010;12(4):R160.
32. Jacques, P., Lambrecht, S., Verheugen, E., Pauwels, E., Kollias, G., Armaka, M., Verhoye, M., Van der Linden, A., Achten, R., Lories, R.J., Elewaut, D. (2014). "Proof of concept: enthesitis and new bone formation in spondyloarhtritis are driven by mechanical strain and stromal cells." Ann Rheum Dis. 73(2): 437-45.
33.
Sherlock JP, Joyce-Shaikh B, Turner SP, Chao CC, Sathe M, Grein J, Gorman DM,
Bowman EP, McClanahan TK, Yearley JH, Eberl G, Buckley CD, Kastelein RA, Pierce
RH, Laface DM, Cua DJ. IL-23 induces spondyloarthropathy by acting on ROR-γt+CD3+CD4-CD8- entheseal resident T cells. Nat Med. 2012 Jul 1;18(7):1069-76.
34.
Vlassenbroeck J, Dierick M, Masschaele B, Cnudde V, Van Hoorebeke L, Jacobs P. 2007. Instruments and Methods in Physics Research Section A: Accelerators, Spectrometers, Detectors and Associated Equipment 580: 442-445. Software tools for quantification of X-ray microtomography at the UGCT; Nuclear
<110> Universiteit Gent
<120> A METHOD OF TREATING JOINT DISEASE
<130> P2014/017PCT
<160> 1
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 132
<212> PRT
<213> Mus Musculus
<400> 1
Ala His His His His His His Pro Gly Gly Pro Gly Ser Asp Glu Leu
1 5 10 15
Asp Ser Ala His Ala His Pro Arg Asp Ser Cys Pro Leu Gly Pro Gly
20 25 30
Arg Cys Cys His Leu Glu Thr Val Gln Ala Thr Leu Glu Asp Leu Gly
35 40 45
Trp Ser Asp Trp Val Leu Ser Pro Arg Gln Leu Gln Leu Ser Met Cys
50 55 60
Val Gly Glu Cys Pro His Leu Tyr Arg Ser Ala Asn Thr His Ala Gln
65 70 75 80
Ile Lys Ala Arg Leu His Gly Leu Gln Pro Asp Lys Val Pro Ala Pro
85 90 95
Cys Cys Val Pro Ser Ser Tyr Thr Pro Val Val Leu Met His Arg Thr
100 105 110
Asp Ser Gly Val Ser Leu Gln Thr Tyr Asp Asp Leu Val Ala Arg Gly
115 120 125
Cys His Cys Ala
130
Claims (15)
- 대상에서의 관절 염증 및/또는 관절 재형성 (remodeling) 치료에 사용하기 위한, 성장 분화 인자 15 (GDF15) 에 결합하는 항체 및 이의 단편.
- 제 1 항에 있어서, 대상이 염증성 관절 질환을 앓는, 사용을 위한 항체.
- 제 1 항에 있어서, 대상이 류마티스 관절염 (RA), 척추관절염 (SpA), 건선 관절염 또는 골관절염 (OA) 을 앓거나 이로 진단되는, 사용을 위한 항체.
- 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항체가 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 조작 항체, 인간 항체, 또는 단일 사슬 항체이거나; 항체 단편이 Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fd 단편, Fv 단편, scFv 단편, 도메인 항체 (dAb), 중쇄 항체 (hcAb), 미니바디, 카멜리드 중쇄 항체의 가변 도메인 (VHH), 신규한 항원 수용체의 가변 도메인 (VNAR) 및 조작된 CH2 도메인인, 사용을 위한 항체.
- 제 4 항에 있어서, 항체가 2014 년 9월 30 일에 BCCM 에 수탁되고 수탁 번호 LMBP 10815CB 가 부여된 하이브리도마 세포주에 의해 생산된 단일클론 항체, 또는 GDF15 에 대한 결합에 관해 경쟁하는 항체인, 사용을 위한 항체.
- 대상에서의 관절 염증 및/또는 관절 재형성을 치료하는데 사용하기 위한, GDF15 에 결합하는 항체 및 이의 단편, 및 약학적으로 허용가능한 부형제, 희석제 및/또는 담체를 포함하는 약학 조성물.
- 제 6 항에 있어서, 대상이 염증성 관절 질환을 앓고 있는, 사용을 위한 약학 조성물.
- 제 6 항에 있어서, 대상이 류마티스 관절염 (RA), 척추관절염 (SpA), 건선 관절염 또는 골관절염을 앓거나 이로 진단되는, 사용을 위한 약학 조성물.
- 제 6 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서, GDF15 결합 항체가 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 조작 항체, 인간 항체 또는 단일 사슬 항체이거나; 항체 단편이 Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fd 단편, Fv 단편, scFv 단편, 도메인 항체 (dAb), 중쇄 항체 (hcAb), 미니바디, 카멜리드 중쇄 항체의 가변 도메인 (VHH), 신규한 항원 수용체의 가변 도메인 (VNAR) 또는 조작된 CH2 도메인인, 사용을 위한 약학 조성물.
- 제 9 항에 있어서, 항체가 2014 년 9 월 30 일에 BCCM 에 수탁되고 수탁 번호 LMBP 10815CB 가 부여된 하이브리도마 세포주에 의해 생산된 단일클론 항체, 또는 GDF15 에 대한 결합에 관해 경쟁하는 항체인, 사용을 위한 약학 조성물.
- GDF15 에 결합하는 항체 및 이의 단편을 대상에게 투여하는 것을 포함하는, 상기 대상에서의 관절 염증 및/또는 관절 파괴를 치료하는 방법.
- 제 11 항에 있어서, 대상이 염증성 관절 질환, 특히 류마티스 관절염, 척추관절염, 건선 관절염 또는 골관절염을 앓고 있는 방법.
- 제 11 항에 있어서, GDF15 결합 항체가 키메라 항체, 인간화 항체, 인간 조작 항체, 인간 항체 또는 단일 사슬 항체이거나; 항체 단편이 Fab 단편, Fab' 단편, F(ab')2 단편, Fd 단편, Fv 단편, scFv 단편, 도메인 항체 (dAb), 중쇄 항체 (hcAb), 미니바디, 카멜리드 중쇄 항체의 가변 도메인 (VHH), 신규한 항원 수용체의 가변 도메인 (VNAR) 또는 조작된 CH2 도메인인 방법.
- 제 13 항에 있어서, 항체가 2014 년 9 월 30 일에 수탁되고 수탁 번호 LMBP 10815CB 가 부여된 하이브리도마 세포주에 의해 생산된 단일클론 항체, 또는 GDF15 에 대한 결합에 관해 경쟁하는 항체인 방법.
- 2014 년 9 월 30 일에 수탁되고 수탁 번호 LMBP 10815CB 가 부여된 하이브리도마 52D4C1 에 의해 생산된 단일클론 항체, 또는 이의 단편.
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