KR20170062222A - 피부 개선 조성물 - Google Patents

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KR20170062222A
KR20170062222A KR1020150167756A KR20150167756A KR20170062222A KR 20170062222 A KR20170062222 A KR 20170062222A KR 1020150167756 A KR1020150167756 A KR 1020150167756A KR 20150167756 A KR20150167756 A KR 20150167756A KR 20170062222 A KR20170062222 A KR 20170062222A
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Abstract

본 발명은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 유효 성분으로 포함하는 피부개선 조성물에 관한 것으로 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 피부 및 피부세포에 처리하였을 때 주름개선효과와 염증억제 및 피부보습기능 강화, 피부탄력 개선, 색소침착개선 등의 효과를 촉진한다. 따라서 본 발명에 의하면 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물이 피부개선과 피부질환 치료에 적용이 가능하고 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 새로운 기능을 제공할 수 있다.

Description

피부 개선 조성물{Composition for skin enhancement}
본 발명은 피부 개선 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 유효성분으로 하는 피부 개선 조성물에 관한 것이다.
피부는 신체가장 외측에 위치하는 조직으로 크게 표피층과 진피층으로 구성되어있다. 표피층은 대표적으로 각질형성세포와 멜라닌형성세포, 그리고 랑게르한섬세포로 구성이 되어 있으며 기저막(basal membrane)에 존재하는 각질형성세포가 지속적으로 생장(proliferation)과 분화과정(differentiation)을 균형 있게 반복하여 기저층, 유극층, 과립층, 각질층을 구성된 층상구조를 이룬다. 각질형성세포는 기저층에서 분리되어 유극층과 과립층을 지나면서 점차 세포소기관과 핵 내 핵질이 소멸되고 세포질이 케라틴으로 채워지는 각화현상을 거쳐 최종적으로 각질세포로 전환되어 세포간 지질을 통해 다른 각질세포와 결합하여 피부 각질층을 형성한다. 또한 표피에는 멜라닌형성세포가 존재하여서 멜라닌을 합성하고, 이를 각질형성세포로 전달하여 피부색을 검게 만들고 과도하게 진행될 경우 과색소 침착증을 유발시킨다.
진피에는 진피섬유아세포가 존재하여 피부의 탄력과 주름을 조절하는 역할을 한다. 진피층의 존재하는 진피섬유아세포는 섬유상 단백질인 collagen과 elastin의 발현시켜 피부의 탄력과 유연성을 가질수 있게 하여 피부주름에 가장 큰 영향을 미치는 요소이다. collagen은 14개의 type이 있으며 이중 피부에는 typeⅠcollagen이 주로 존재한다. Collagen은 두 개의 α1 사슬과 한 개의 α2 사슬이 3중 나선 형태로 꼬여서 생성되며 이 사슬들은 Col1A1, Col1A2 유전자로부터 발현된다. 세포에서 만들어진 collagen은 세포밖으로 분비되어 세포외 기질에서 서로 조합되어 collagen fiber를 이룬다. 이러한 collagen의 합성은 자외선과 같은 외부환경이나 피부 노화가 진행됨에 따라 저하되며 또한 진피섬유아세포가 발현하는 collagen 분해효소인 matrix-metalloproteases의 활성 증가로 collagen의 분해를 촉진하여 주름생성과 탄력과 유연성이 감소하게 된다.
그리고 표피와 진피에 존재하는 랑게르한섬세포와 큰대식세포 등의 면역세포에 의해서 외부에서 침입하는 물질에 대한 면역작용과 염증반응을 일으키는 것으로 알려져 있다.
피부는 위와 같은 세포들이 각각의 역할을 함으로서 피부의 기능을 유지할 수 있게 된다. 하지만 여러 가지 유해 환경에 의한 스트레스 증가 및 태양 광선에 의한 활성 산소 종의 증가와 같은 외적 요인에 의하여 표피와 진피의 기능을 상실하게되면 피부의 노화가 유발된다.
피부 노화는 크게 자연 노화(내인성 노화) 및 외적 노화로 구분되며, 자연 노화(내인성 노화)는 유전적인 요소에 영향을 받기 때문에 인위적인 조절이 어려운 반면 외적 노화는 환경적인 요소에 영향을 받기 때문에 인위적인 조절이 비교적 용이하다. 대표적인 외적 노화 인자로는 자외선을 들 수 있으며, 가장 두드러진 노화 현상이 바로 주름 생성, 과색소 침착, 피부장벽 약화 등이 있다. 때문에 표피와 진피를 동시에 조절하여 피부를 개선시킬 수 있고, 안전성 면에서도 문제가 없는 피부개선물질이 절실하게 요구되고 있다.
한국공개특허 2011-0019487
이에 본 발명에서는 여러 가지 문제들로 인한 피부 노화를 개선시킬 수 있는 안전적인 조성물을 제조하기 위하여 연구하던 중, 망고스틴이 염증치료 및 상처치료에 이용되는 점은 감안하여 이의 활용방안을 모색하고자, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염 화합물에 의해 피부의 진피층과 표피층에 피치는 영향을 확인하였다.
따라서 본 발명의 목적은 망고스틴을 이용하여 피부 개선 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 상기 목적을 달성하기 위한 피부 개선 조성물은 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 알파-망고스틴 나트륨염 화합물, 베타-망고스틴 염화합물, 또는 감마-망고스틴 염화합물 중에서 선택되는 어느 하나를 유효성분으로 포함하는 것을 그 특징으로 한다.
상기 망고스틴 추출물은 망고스틴 과육, 과피, 씨, 줄기, 나뭇잎, 수피를 멸균수, 에탄올, 및 상기 멸균수와 에탄올의 혼합용매에서 혼합시킨 원료를 60~80℃의 온도에서 24~48 시간 동안 추출시킨 것일 수 있다.
상기 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴은 각각 다음 화학식 1~3으로 표시되는 것일 수 있다.
화학식 1
Figure pat00001
화학식 2
Figure pat00002
화학식 3
Figure pat00003
또한, 상기 알파-망고스틴 나트륨염 화합물, 베타-망고스틴 나트륨염 화합물, 및 감마-망고스틴 나트륨염 화합물은 각각 다음 화학식 4~6으로 표시되는 것일 수 있다.
화학식 4
Figure pat00004
화학식 5
Figure pat00005
화학식 6
Figure pat00006
본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 피부 개선 조성물은 망고스틴 추출물 0.1~10중량%, 알파-망고스틴 0.01~0.5중량%, 베타-망고스틴 0.01~0.5중량%, 감마-망고스틴 0.01~0.5중량%, 알파-망고스틴 염 화합물 0.01~0.5중량%, 베타-망고스틴 염화합물 0.01~0.5중량%, 또는 감마-망고스틴 염화합물 0.01~0.5중량%을 유효성분으로 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 알파-망고스틴 염 화합물, 베타-망고스틴 염 화합물, 및 감마-망고스틴 염 화합물은 정제수에 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴을 혼합하여 20~30℃에서 1~4시간 교반시켜 용해시키는 단계, 상기 용해된 혼합액에 금속 염을 첨가하여 20시간 이상을 20~30℃에서 교반시키는 단계, 및 상기 교반액에 비용매를 첨가하여 침전시키는 단계를 거쳐 제조될 수 있다.
상기 금속 염은 염화 나트륨 또는 염화 칼륨이 바람직하다.
또한, 본 발명의 다른 일 실시예에 따르면, 상기 알파-망고스틴 염 화합물, 베타-망고스틴 염 화합물, 및 감마-망고스틴 염 화합물은 유기용매에 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴을 혼합하여 50~60℃에서 용해시키는 단계, 물에 금속 염을 용해시킨 금속염 수용액을 상기 혼합액에 첨가하는 단계, 및 상기 혼합액을 냉각시켜 침전물을 형성시키는 단계를 거쳐 제조되는 것일 수 있다.
상기 금속 염은 염화 나트륨 또는 염화 칼륨 중에서 선택되는 것으로, 상기 망고스틴 혼합물에 대하여 1.0~1.5 몰당량으로 첨가되는 것일 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 피부 개선 조성물은 항산화, 진피세포 성장촉진, 콜라겐 증가, 콜라겐분해효소 감소, 면역세포 성장촉진, 염증억제, 피부 유수분 조절, 피부주름개선, 진피친밀도 증가, 피부탄력 개선, 피부장벽 회복, 피부결 개선, 피부홍반 감소, 색소침착 감소로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 피부 개선에 이용되는 것일 수 있다.
또한, 본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 피부 개선 조성물은 화학선 각화증, 기저세포암, 편평상피암, 섬유성 조직구종, 융기성 피부섬유육종, 혈관종, 화염상모반, 황색종, 카포시 육종, 비만세포증, 균상식육종, 흑색점, 모반세포성 모반, 악성흑색점, 악성흑색종, 전이성 암종 및 건선으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 증식성 피부질환에 이용되는 것일 수 있다.
본 발명에 따르면, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염 화합물을 유효 성분으로 포함하는 조성물은 피부의 항산화, 진피세포 성장촉진, 콜라겐 증가, 콜라겐 분해효소 감소, 면역세포 성장촉진, 염증억제, 피부 유수분 조절, 피부주름 개선, 진피친밀도 증가, 피부탄력 개선, 피부장벽 회복, 피부결 개선, 피부홍반 감소, 색소침착 감소의 효과를 가짐을 확인하였다.
따라서, 이러한 피부 개선 조성물은 화학선 각화증, 기저세포암, 편평상피암, 섬유성 조직구종, 융기성 피부섬유육종, 혈관종, 화염상모반, 황색종, 카포시 육종, 비만세포증, 균상식육종, 흑색점, 모반세포성 모반, 악성흑색점, 악성흑색종, 전이성 암종 및 건선으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 증식성 피부질환에 이용될 수 있다.
도 1은 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 양성대조군인 α-tocopherol 및 BHA의 활성산소 분해 효과를 나타낸 그래프이고,
도 2는 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 양성대조군인 α-tocopherol 및 BHA의 활성산소 분해 효과를 나타낸 그래프이고,
도 3은 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 양성대조군인 α-tocopherol 및 BHA의 활성산소 분해 효과를 나타낸 그래프이고,
도 4는 감마-망고스틴 나트륨 염화합물, 양성대조군인 α-tocopherol 및 BHA의 활성산소 분해 효과를 나타낸 그래프이고,
도 5는 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴의 인간진피 섬유아세포의 생장 촉진 효과를 나타낸 그래프이고,
도 6은 알파-망고스틴 나트륨 염화합물의 인간진피 섬유아세포의 생장 촉진 효과를 나타낸 그래프이고,
도 7은 베타-망고스틴 나트륨 염화합물의 인간진피 섬유아세포의 생장 촉진 효과를 나타낸 그래프이고,
도 8는 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 인간진피 섬유아세포의 생장 촉진 효과를 나타낸 그래프이고,
도 9와 10은 각각 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴의 MMP1 mRNA 분석 결과와 Col1A1의 발현 분석 결과를 나타낸 그래프이고,
도 11과 12는 각각 알파-망고스틴 나트륨 염화합물의 Col1A1의 발현 결과와MMP1 mRNA 분석 결과를 나타낸 그래프이고,
도 13과 14는 각각 베타-망고스틴 나트륨 염화합물의 Col1A1의 발현 결과와MMP1 mRNA 분석 결과를 나타낸 그래프이고,
도 15와 16은 각각 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 Col1A1의 발현 결과와MMP1 mRNA 분석 결과를 나타낸 그래프이고,
도 17은 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴의 면역세포의 생장 억제 효과를 나타낸 그래프이고,
도 18은 알파-망고스틴 나트륨 염화합물의 면역세포의 생장 억제 효과를 나타낸 그래프이고,
도 19는 베타-망고스틴 나트륨 염화합물의 면역세포의 생장 억제 효과를 나타낸 그래프이고,
도 20은 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 면역세포의 생장 억제 효과를 나타낸 그래프이고,
도 21은 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴의 NF-kB 전사 억제 효과를 나타낸 그래프이고,
도 22는 알파-망고스틴 나트륨 염화합물의 NF-kB 전사 억제 효과를 나타낸 그래프이고,
도 23은 베타-망고스틴 나트륨 염화합물의 NF-kB 전사 억제 효과를 나타낸 그래프이고,
도 24는 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 NF-kB 전사 억제 효과를 나타낸 그래프이고,
도 25와 26은 각각 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴의 TNFα mRNA의 발현, 및 IL-1β mRNA의 발현에 미치는 효과를 나타낸 그래프이고,
도 27과 28은 각각 알파-망고스틴 나트륨 염화합물의 IL-1β mRNA의 발현 및 TNFα mRNA의 발현에 미치는 효과를 나타낸 그래프이고,
도 29와 30은 각각 베타-망고스틴 나트륨 염화합물의 IL-1β mRNA의 발현 및 TNFα mRNA의 발현에 미치는 효과를 나타낸 그래프이고,
도 31과 32는 각각 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 IL-1β mRNA의 발현 및 TNFα mRNA의 발현에 미치는 효과를 나타낸 그래프이고,
도 33과 34는 각각 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 수분량과 피부 유분량 변화를 측정한 그래프이고,
도 35와 36은 각각 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 수분량과 피부 유분량 변화를 측정한 그래프이고,
도 37과 38은 각각 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 수분량과 피부 유분량 변화를 측정한 그래프이고,
도 39와 40은 각각 감마-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 수분량과 피부 유분량 변화를 측정한 그래프이고,
도 41은 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 주름 변화를 나타낸 그래프이고,
도 42는 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 주름 변화를 나타낸 그래프이고,
도 43은 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 주름 변화를 나타낸 그래프이고,
도 44는 감마-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 주름 변화를 나타낸 그래프이고,
도 45는 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 두께 개선효과를 확인하기 위하여 측정된 시간에 따른 진피 치밀도 변화를 나타낸 그래프이고,
도 46은 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 두께 개선효과를 확인하기 위하여 측정된 시간에 따른 진피 치밀도 변화를 나타낸 그래프이고,
도 47은 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 두께 개선효과를 확인하기 위하여 측정된 시간에 따른 진피 치밀도 변화를 나타낸 그래프이고,
도 48은 감마-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 두께 개선효과를 확인하기 위하여 측정된 시간에 따른 진피 치밀도 변화를 나타낸 그래프이고,
도 49는 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 탄력 변화를 나타낸 그래프이고,
도 50은 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 탄력 변화를 나타낸 그래프이고,
도 51은 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 탄력 변화를 나타낸 그래프이고,
도 52는 감마-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 시간에 따른 피부 탄력 변화를 나타낸 그래프이고,
도 53은 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 장벽 개선효과를 확인하기 위하여 시간에 따른 경피 수분손실량 변화를 나타낸 그래프이고,
도 54는 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 장벽 개선효과를 확인하기 위하여 시간에 따른 경피 수분손실량 변화를 나타낸 그래프이고,
도 55는 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 장벽 개선효과를 확인하기 위하여 시간에 따른 경피 수분손실량 변화를 나타낸 그래프이고,
도 56은 감마-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 장벽 개선효과를 확인하기 위하여 시간에 따른 경피 수분손실량 변화를 나타낸 그래프이고,
도 57은 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부결 개선 효과를 나타낸 그래프이고,
도 58은 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부결 개선 효과를 나타낸 그래프이고,
도 59는 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부결 개선 효과를 나타낸 그래프이고,
도 60은 감마-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부결 개선 효과를 나타낸 그래프이고,
도 61은 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 홍반 변화를 나타낸 그래프이고,
도 62는 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 홍반 변화를 나타낸 그래프이고,
도 63은 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 홍반 변화를 나타낸 그래프이고,
도 64는 감마-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 피부 홍반 변화를 나타낸 그래프이고,
도 65는 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 색소침착 개선효과를 확인하기 위하여 시간에 따른 색소 침착 면적 변화를 나타낸 그래프이고,
도 66은 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 색소침착 개선효과를 확인하기 위하여 시간에 따른 색소 침착 면적 변화를 나타낸 그래프이고,
도 67은 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 색소침착 개선효과를 확인하기 위하여 시간에 따른 색소 침착 면적 변화를 나타낸 그래프이고,
도 68은 감마-망고스틴 나트륨 염화합물, 대조군(control, 무처리군), 및 양성대조군(Aloe)의 색소침착 개선효과를 확인하기 위하여 시간에 따른 색소 침착 면적 변화를 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다.
본 명세서에서 사용된 용어는 특정 실시예를 설명하기 위하여 사용되며, 본 발명을 제한하기 위한 것이 아니다. 본 명세서에서 사용된 바와 같이, 단수 형태는 문맥상 다른 경우를 분명히 지적하는 것이 아니라면, 복수의 형태를 포함할 수 있다. 또한, 본 명세서에서 사용되는 경우 "포함한다(comprise)" 및/또는 "포함하는(comprising)"은 언급한 형상들, 숫자, 단계, 동작, 부재, 요소 및/또는 이들 그룹의 존재를 특정하는 것이며, 하나 이상의 다른 형상, 숫자, 동작, 부재, 요소 및/또는 그룹들의 존재 또는 부가를 배제하는 것이 아니다.
본 발명은 망고스틴을 이용한 피부 개선 조성물에 관한 것이다.
망고스틴은‘Garcinia mangostana ’라는 학명을 가진 열대 과일로서 오래전부터 염증치료 및 상처치료에 이용해왔다. 망고스틴은 과피, 줄기, 씨, 수피에서 분리한 크잔톤(xanthones) 성분 중 하나이며 작용기에 따라 알파-, 베타-, 감마-망고스틴로 나눠진다.
본 발명의 상기 목적을 달성하기 위한 피부 개선 조성물은 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 알파-망고스틴 염 화합물, 베타-망고스틴 염화합물, 또는 감마-망고스틴 염화합물 중에서 선택되는 어느 하나를 유효성분으로 포함하는 것을 그 특징으로 한다.
본 발명에 따른 망고스틴 추출물은 초음파 추출법, 여과법 및 환류 추출법 등을 포함할 수 있으나, 이에 한정되지 않는다.
구체적으로는, 망고스틴 과육, 과피, 씨, 줄기, 나뭇잎, 수피를 물로 깨끗이 세척하고 건조한 후 분쇄한다. 그 다음, 멸균수 혹은 60% 에탄올, 및 상기 멸균수와 에탄올의 혼합용매에서 혼합시킨 원료를 60~80℃의 온도에서 24~48 시간 동안 침지하고 초음파 추출법(sonication)을 이용하여 추출시켜 사용하는 것이 바람직하다. 상기 사용되는 용매의 부피는 분쇄한 망고스틴 중량의 1~10배, 바람직하게는 2~5배로 한다.
또한, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴도 공지된 추출법에 따라 추출하거나, 시판되고 있는 제품을 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 상기 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴은 각각 다음 화학식 1~3으로 표시되는 것일 수 있다.
화학식 1
Figure pat00007
화학식 2
Figure pat00008
화학식 3
Figure pat00009
상기 알파-, 베타-, 감마-망고스틴은 항산화, 항암, 항염증, 항균, 항알레르기 및 항바이러스 효과에 대한 연구가 광범위하게 이루어지고 있고, 항암효과에서는 백혈병, 유방암, 구강암, 대장암 등의 다양한 암종에서 항암효과가 밝혀졌다.
본 발명의 피부 개선 조성물은 상기 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 각각의 염 화합물을 또한 유효 성분으로 포함할 수 있다.
상기 알파-망고스틴 염 화합물, 베타-망고스틴 염 화합물, 및 감마-망고스틴 염 화합물은 각각 다음 화학식 4~6으로 표시되는 것일 수 있으며, 상기 염 화합물은 나트륨염 화합물이 가장 바람직하다.
화학식 4
Figure pat00010
화학식 5
Figure pat00011
화학식 6
Figure pat00012
본 발명에 따르면 상기 화학식 4~6으로 표시되는 망고스틴의 염 화합물은 두 가지 상이한 방법으로 제조될 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 따른 상기 알파-망고스틴 염 화합물, 베타-망고스틴 염 화합물, 및 감마-망고스틴 염 화합물의 제조방법은 정제수에 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴을 혼합하여 20~30℃에서 1~4시간 교반시켜 용해시키는 단계, 상기 용해된 혼합액에 금속 염을 첨가하여 20시간 이상을 20~30℃에서 교반시키는 단계, 및 상기 교반액에 비용매를 첨가하여 침전시키는 단계를 거쳐 제조될 수 있다.
상기 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴을 정제수에 충분히 교반시켜 완전히 용해시킨 다음, 교반이 끝난 후 0.1~1.0g/ml 농도의 염화나트륨 또는 염화마그네슘 2ml을 조금씩 가하고, 20시간 이상을 20~30℃에서 교반해 준다.
상기 금속 염은 나트륨 염이 가장 바람직하다.
이후 36~48시간 동안 0~10℃에서 유지시킨 후, 아세톤 등의 비용매를 첨가하여 침전을 유도시키고, 다시 혼합물을 진공하에 회전 증발기(45℃)로 증발 및 진공 건조시키면 백색 또는 베이지색 고체분말인 상기 화학식 4~6으로 표시되는 각 상기 알파-망고스틴 나트륨염 화합물, 베타-망고스틴 나트륨염 화합물, 및 감마-망고스틴 나트륨염 화합물을 얻을 수 있다.
또한, 본 발명의 다른 일 실시예에 따른 상기 알파-망고스틴 염 화합물, 베타-망고스틴 염 화합물, 및 감마-망고스틴 염 화합물의 제조방법은 유기용매에 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴을 혼합하여 50~60℃에서 용해시키는 단계, 물에 금속염을 용해시킨 금속염 수용액을 상기 혼합액에 첨가하는 단계, 및 상기 혼합액을 냉각시켜 침전물을 형성시키는 단계를 거쳐 제조되는 것일 수 있다.
상기 금속 염은 염화 나트륨 또는 염화 칼륨 중에서 선택되는 것으로, 상기 망고스틴 혼합물에 대하여 1.0~1.5 몰당량으로 첨가되는 것이 망고스틴 염 화합물의 순도 및 합성 수율 면에서 바람직하다.
상기 침전 고형물을 여과 분리하여 해당 유기 용매로 세척한 후, 50℃에서 중량이 일정해질 때까지 진공 건조시키면, 무색 또는 베이지색 분말로서 얻어진다.
즉, 상기 방법에서는 망고스틴 용액과 금속 염 수용액을 각각 제조하여 혼합하여 각 망고스틴 염 화합물을 제조할 수 있다.
이러한 본 발명의 피부 개선 조성물은 망고스틴 추출물 0.1~10중량%, 알파-망고스틴 0.01~0.5중량%, 베타-망고스틴 0.01~0.5중량%, 감마-망고스틴 0.01~0.5중량%, 알파-망고스틴 염 화합물 0.01~0.5중량%, 베타-망고스틴 염화합물 0.01~0.5중량%, 또는 감마-망고스틴 염 화합물 0.01~0.5중량% 중에서 선택되는 어느 하나를 유효성분으로 포함하는 것일 수 있다.
본 발명에 따른 피부 개선 조성물에서 상기 각 구성 성분의 함량비가 상기 범위를 벗어나는 경우, 세포 독성 등의 안전성을 입증할 수가 없기 때문에 상기 함량으로 포함되는 것이 바람직하다.
이러한, 본 발명에 따른 피부 개선 조성물은 상기 각 성분을 유효 성분으로 포함하되, 토너, 수분 크림, 크림, 에센스, 영양 크림 등과 같은 다양한 화장품 조성으로 제조될 수 있다. 이때, 상기 유효 성분을 제외한 다른 성분들은 상기 화장품 조성에 통상적으로 포함되는 함량으로 포함될 수 있음은 당업자들에게 자명하다.
본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 피부 개선 조성물은 항산화, 진피세포 성장촉진, 콜라겐 증가, 콜라겐분해효소 감소, 면역세포 성장촉진, 염증억제, 피부 유수분 조절, 피부주름개선, 진피친밀도 증가, 피부탄력 개선, 피부장벽 회복, 피부결 개선, 피부홍반 감소, 색소침착 감소로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 피부 개선에 이용되는 것일 수 있다.
또한, 본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 피부 개선 조성물은 화학선 각화증, 기저세포암, 편평상피암, 섬유성 조직구종, 융기성 피부섬유육종, 혈관종, 화염상모반, 황색종, 카포시 육종, 비만세포증, 균상식육종, 흑색점, 모반세포성 모반, 악성흑색점, 악성흑색종, 전이성 암종 및 건선으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 증식성 피부질환에 이용되는 것일 수 있다.
이와 같이 조성된 본 발명에 따른 피부 개선용 조성물에 대한 관련 시험예를 실시한 결과, 피부 안정성에서 이상이 없는 것으로 조사되었다.
이하에서 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하기로 한다. 이하의 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 또한, 이하의 실시예에서는 특정 화합물을 이용하여 예시하였으나, 이들의 균등물을 사용한 경우에 있어서도 동등 유사한 정도의 효과를 발휘할 수 있음은 당업자에게 자명하다.
실시예 1
1) 망고스틴 추출물 제조
먼저 파쇄한 망고스틴 과육, 과피, 씨, 줄기, 나뭇잎, 수피를 멸균수 혹은 60% 에탄올에 혼합하였다. 상기 혼합된 원료를 60℃의 온도에서 48 시간 교반하여 추출하였다.
상기 망고스틴 추출물을 250 메쉬와 0.5 ㎛ 필터페이퍼로 여과시켜 액상추출물을 수득하였다. 상기 여과된 액상추출물을 회전감압 농축기를 이용하여 감압 농축하여 망고스틴 농축 추출물을 획득하였다.
2) 망고스틴 염 화합물의 제조
10 ml의 정제수에 상기 1)에서 제조된 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 각각 1g씩 첨가하였다. 20℃에서 4시간 교반 통해 완전하게 녹여준다. 교반이 끝난 후 0.1g/ml의 염화나트륨, 염화마그네슘을 2 ml 조금씩 가하고, 20시간 이상을 20℃에서 교반해준다. 이후 36시간 동안 4℃에서 유지시킨 후 침전을 관찰한 결과 침전이 관찰되지 않았다. 이후 15 ml의 아세톤을 첨가하여 침전을 유도시키고, 다시 혼합물을 진공하에 회전 증발기(45℃)로 증발시켰다. 잔사, 백색 또는 베이지색 고체 기포는 스패튤라(spatula)로 잘게 부수고 높은 진공(2 mbar)하에 주위온도에서 건조시켜 백색 또는 베이지색 고체분말을 샘플링하였다.
실시예 2
상기 실시예 1과 동일한 과정으로 망고스틴 추출물을 제조하였다.
또한, 망고스틴 염화합물의 제조시 유기 용매와 물의 혼합물을 사용하였다. 즉, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 50 내지 60℃에서 유기 용매 중에 용해시킨다. 물에 용해시킨 염화나트륨, 염화 마그네슘 수용액 0.5 몰 당량을 상기 용액에 적가한 다음, 용액을 교반하면서 냉각시킨다.
침전 고형물을 여과 분리하여 해당 유기 용매로 세척한 후, 50℃에서 중량이 일정해질 때까지 진공 건조시킨다. 표제 화합물은 무색 또는 베이지색 분말로서 얻어진다.
실시예 3 : 스킨 토너의 제조
실험재료인 스킨 토너를 만들기 위한 성분의 구성은 아래의 표 1에 나타내었으며, 다음 과정을 거쳐 제조하였다. A상(수상)은 상온에서, B상(알코올상)은 히터를 이용하여 50℃로 가온하여 완전 용해시켰다. A상에 B상을 섞어 Disper로 1000rpm으로 10분간 가용화시켰다. 또한, A상과 B상을 혼합하되, 정제수를 100중량%가 될 때까지 혼합시켰다. 그 다음, 교반 혼합과정을 거쳐 냉각, 여과하고 pH 5.2 상태를 유지시켜 스킨토너를 완성하였다. 알로에(양성대조군)와 망고스틴 추출물은 5 중량％의 양을 첨가하고, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물은 각각 0.1 중량％의 양을 첨가하여 제조하였다.
상 원료 함량 (중량％)
대조군 양성
대조군		 실시예
1 2 3 4 5 6 7
A상 정제수 5 - - - - - - - -
알로에 - 5 - - - - - - -
망고스틴 추출물 - - 5 - - - - - -
알파-망고스틴 - - - 0.1 - - - - -
베타-망고스틴 - - - - 0.1 - - - -
감마-망고스틴 - - - - - 0.1 - - -
알파-망고스틴
나트륨염 화합물		 - - - - - - 0.1 - -
베타-망고스틴
나트륨염 화합물		 - - - - - - - 0.1 -
감마-망고스틴
나트륨염 화합물		 - - - - - - - - 0.1
디소디움 EDTA 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01
1,3-부틸렌글리콜 4 4 4 4 4 4 4 4 4
구연산 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04 0.04
구연산나트륨 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
B상 히아루론산 2 2 2 2 2 2 2 2 2
하이드로젠이티드 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
캐스터오일 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01
정제수 100까지 100까지 100까지 100까지 100까지 100까지 100까지 100까지 100까지
실시예 4 : 수분 크림의 제조
수분 크림을 만들기 위한 성분구성은 아래 표 2에 나타내었다. 제조과정은 A상을 80℃로 가온하여 교반하고, B상을 80℃로 가온하여 용해하고 나서 A상에 투입 2000 rpm, 10분 정도 유화하였다. C상을 고르게 섞은 뒤 80℃에서 A + B상에 투입 2000 rpm, 5분 정도 중화하였다. 그리고 서서히 교반하면서 30℃로 냉각 pH 6.15를 완성하였다. 알로에(양성대조군)와 망고스틴 추출물은 5 중량％의 양을 첨가하고, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물은 각각 0.1 중량％의 양을 첨가하여 제조하였다.
상 원료 함량 (중량％)
대조군 양성
대조군		 실험군
1 2 3 4 5 6 7
A상 정제수 5 - - - - - - - -
알로에 - 5 - - - - - - -
망고스틴 추출물 5 - - - - - -
알파-망고스틴 - 0.1 - - - - -
베타-망고스틴 - - 0.1 - - - -
감마-망고스틴 - - - 0.1 - - -
알파-망고스틴
나트륨염 화합물		 - - - - 0.1 - -
베타-망고스틴
나트륨염 화합물		 - - - - - 0.1 -
감마-망고스틴
나트륨염 화합물		 - - - - - - 0.1
디소디움 EDTA 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01
파라옥시안식향산에스텔 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
클로페네신 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
히아루론산 5 5 5 5 5 5 5 5 5
알로에겔 5 5 5 5 5 5 5 5 5
산탄검 1％ 수용액 5 5 5 5 5 5 5 5 5
카르복시비닐폴리머 15 15 15 15 15 15 15 15 15
B상 스쿠알랑 7 7 7 7 7 7 7 7 7
디메치콘 3 3 3 3 3 3 3 3 3
사이크로메치콘 3 3 3 3 3 3 3 3 3
폴리솔베이트 60 2 2 2 2 2 2 2 2 2
솔비탄올레이트 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
그리세릴스테아레이트 1 1 1 1 1 1 1 1 1
스테아린산 1 1 1 1 1 1 1 1 1
C상 트리에탄올민 1 1 1 1 1 1 1 1 1
정제수 100
까지		 100
까지		 100
까지		 100
까지		 100
까지		 100
까지		 100
까지		 100
까지		 100까지
실시예 5 : 크림의 제조
크림을 제조하기 위한 성분구성은 아래 표 3에 나타내었다. 크림의 제조는 A상을 80℃로 가온하여 교반하고 B상을 80℃로 가온하여 용해하고 나서 A상에 투입하여 2000 rpm, 10분 정도 유화하였다. C상을 고르게 섞은 뒤 80℃에서 A + B상에 투입 2000 rpm, 5분 정도 중화하였다. 이어서, 서서히 고르게 혼합 교반하면서 30℃로 냉각하여 pH 6.23을 완성하였다. 알로에(양성대조군)와 망고스틴 추출물은 5 중량％의 양을 첨가하고, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물은 각각 0.1 중량％의 양을 첨가하여 제조하였다.
상 원료 함량 (중량％)
대조군 양성
대조군		 실험군
1 2 3 4 5 6 7
A상 정제수 5 - - - - - - - -
알로에 - 5 - - - - - - -
망고스틴 추출물 5 - - - - - -
알파-망고스틴 - 0.1 - - - - -
베타-망고스틴 - - 0.1 - - - -
감마-망고스틴 - - - 0.1 - - -
알파-망고스틴
나트륨염 화합물		 - - - - 0.1 - -
베타-망고스틴
나트륨염 화합물		 - - - - - 0.1 -
감마-망고스틴
나트륨염 화합물		 - - - - - - 0.1
디소디움 EDTA 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01 0.01
파라옥시안식향산에스텔 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
클로페네신 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
히아루론산 5 5 5 5 5 5 5 5 5
알로에겔 5 5 5 5 5 5 5 5 5
산탄검 1％ 수용액 5 5 5 5 5 5 5 5 5
카르복시비닐폴리머 15 15 15 15 15 15 15 15 15
B상 스쿠알랑 7 7 7 7 7 7 7 7 7
디메치콘 3 3 3 3 3 3 3 3 3
사이크로메치콘 3 3 3 3 3 3 3 3 3
폴리솔베이트 60 2 2 2 2 2 2 2 2 2
솔비탄올레이트 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5
쉐어버터 5 5 5 1 1 1 1 1 1
그리세릴스테아레이트 1 1 1 1 1 1 1 1 1
세토스테아릴알코올 1 1 1 1 1 1 1 1 1
C상 스테아린산 1 1 1 1 1 1 1 1 1
정제수 100까지 100까지 100까지 100
까지		 100까지 100까지 100
까지		 100까지 100까지
실험예 1) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 활성산소 분해 효과
본 발명자들은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 피부 노화에 주요한 역할을 하는 활성산소종이 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의해 제거되는지 확인하였다.
Clinacathus nutans 추출물의 활성산소 분해 효과를 확인하기 위하여 자유라디칼인 DPPH(1, 1-diphenyl 2-picryl hydrazyl)를 이용한 자유라디칼 소거활성 측정방법을 이용하였다.
시험관에 4㎖ 메탄올을 넣고 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 농도별로 첨가한 다음 0.15mM DPPH 용액 1㎖를 첨가하여 실온에서 30분간 반응시킨 뒤 520 nm에서 흡광도를 측정하였다. 이때 기질과 DPPH가 없는 Initial(Ai)과 blank(Ab)를 측정하였고, RC50(mg/l)은 추출물을 첨가하지 않은 대조군의 값을 50% 감소시키는 추출물의 농도를 나타냈으며, 양성대조군은 α-tocopherol 및 BHA를 상호 비교하였다.
Extracts (*101 ?/ml) & Sample (?) 0 5 10 20 40
Mangostin extracts 100 105.24 109.24 112.24 121.24
α-mangostin 100 112.43 124.24 136.24 156.24
β-mangostin 100 109.24 115.24 129.24 138.45
γ-mangostin 100 102.34 108.24 114.48 121.24
a-tocopherol 100 101.24 116.24 127.58 142.43
BHA 100 105.24 112.24 126.64 130.24
분석결과인 다음 도 1과 표 4에서 나타낸 것과 같이, 양성대조군인 α-tocopherol 과 BHA보다 낮은 RC50을 나타냈다. 따라서 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴에 의해 활성산소의 분해가 촉진되는 것으로 피부미용 개선에 효과가 있음을 확인하였다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트튬 염화합물의 결과를 각각 다음 표 5~6과 도 2~4에 나타내었다.
Concentration (mg/L)
0 1 10 100
a-tocopherol 0 33.2 41.7 70.5
BHT 0 25.4 38.2 63.7
a-mangostin salt form 0 34.3 49.9 81.3
Concentration (mg/L)
0 1 10 100
a-tocopherol 0 32.4 40.9 70.9
BHT 0 26.8 39.1 64.9
-mangostin salt form 0 33.8 47.2 77.1
Concentration (mg/L)
0 1 10 100
a-tocopherol 0 33.1 42.8 70.5
BHT 0 26.7 38.5 64.2
γ-mangostin salt form 0 33.2 44.9 74.3
상기 표 5~6과 다음 도 2~4에서 나타낸 것과 같이, 양성대조군인 α-tocopherol 과 BHT보다 낮은 농도에서 높은 활성산소 분해능을 나타냈다. 따라서 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의해 활성산소의 분해가 촉진되는 것으로 피부미용 개선에 효과가 있음을 확인하였다.
실험예 2) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 인간진피 섬유아세포의 생장 촉진 효과 확인
망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 진피의 구성성분인 콜라겐을 합성하는 섬유아세포 생장이 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의해 촉진되는지 확인하였다.
인간진피 섬유아세포(normal Human Dermal Fibroblasts, nHDF)는 Lonza (Switzerland)에서 구매하여 사용하였다. 세포배양액은 Dulbeco's Modified Eagle's Medium (DMEM; Gibco, USA)에 10% fetal bovine serum (FBS; Gibco), 10% penicillin (100 unit/mL)과 streptomycin (100 g/mL)를 첨가하여 사용하였다. 배양조건은 37℃, 95% 습도, 5% CO2 incubator에서 배양하였으며, 3-10세대 사이의 세포를 실험에 사용하였다.
인간진피 섬유아세포인 nHDF 세포에 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리하였을 때, 세포독성이 어느 정도 발생되는지 확인하기 위하여 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 농도로 처리 후에 24시간 동안 세포를 배양하였고, 이 후 세포의 MTT을 이용하여 viability를 측정하였으며, 그 결과를 다음 표 7과 도 5에 나타내었다.
extracts (㎍/ml) 0 5 10 20 40
Mangostin extracts 100 102.01 98.23 119.21 125.31
α-mangostin 100 101.21 102.21 125.43 132.21
β-mangostin 100 99.01 103.08 131.41 136.33
γ-mangostin 100 99.33 100.21 105.22 109.27
분석 결과, 다음 도 5와 상기 표 7의 결과에 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 진피섬유아세포의 성장에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 농도의존적으로 세포의 성장이 대조군(무처리군, 도면에서 0으로 표시된 부분)에 비해서 증가한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트튬 염화합물의 결과를 각각 다음 표 8~10과 도 6~8에 나타내었다.
Time (hr) Concentration (mg/L)
0 1 10 100
0 100 100 100 100
24 101.58 101.41 106.41 108.15
48 102.15 105.51 110.65 111.41
72 103.63 108.65 112.61 117.54
Time (hr) Concentration (mg/L)
0 1 10 100
0 100 100 100 100
24 100.21 102.26 103.16 104.11
48 101.53 103.54 105.93 105.86
72 102.78 104.82 109.56 111.59
Time (hr) Concentration (mg/L)
0 1 10 100
0 100 100 100 100
24 100.68 101.31 102.38 103.51
48 102.26 102.12 105.68 105.39
72 102.94 103.22 107.33 108.94
분석 결과인 상기 표 8~10과 도 6~8에서 나타낸 것과 같이 처리시간에 따른 증가 폭의 차이를 보이지만 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 농도 의존적으로 세포의 성장이 대조군(무처리군)에 비해서 증가한 것을 확인할 수 있다.
실험예 3) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 Col1A1 의 발현 증가 및 MMP1 의 발현 감소
망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부미용 개선 효과를 알아보기 위해 인간진피섬유아세포가 발현하는 대표적인 콜라겐(collagen) 중 하나인 COL1A1 및 콜라겐 분해효소인 MMP1의 발현 변화를 측정하였다.
망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물 에 의한 collagen 발현 변화 정도를 확인하기 위하여 인간 진피섬유아세포에 미세조류 추출물을 농도로 처리한 후, 24시간 배양하였다. 이후, 유전자 발현 변화는 polymerase chain reaction (PCR) 과정중에 증폭되는 DNA 산물에 형광물질을 붙이고 형광물질을 지속적으로 검출하는 방식인 quantitative real time PCR (qRT-PCR)로 측정하였다(Higuchi et al., 1992). 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴에 의한 COL1A1 과 MMP1 유전자 발현 변화를 정량적으로 확인하기 위하여 PCR 산물이 발산하는 형광값을 통하여 결과값을 확인하는 방식으로 SYBR green Ⅰ(Invitrogen)을 사용하였다. PCR tube에 0.2μM primers, 50 mM KCl, 20 mM Tris/HCl pH 8.4, 0.8 mM dNTP, 0.5U Extaq DNA polymerase, 3 mM MgCl2, 1×SYBR green을 혼합 하여 반응액을 제조하였다. 반응액을 제조 후 Linegene K (BioER, China)를 이용하여 94℃에서 3분 동안 primary denaturation 한 후 denaturation, annealing, polymerization을 각각 94℃에서 30초, 58℃에서 30초, 72℃에서 30초로 총 40 cycle을 수행하였고, 매 cycle 이 끝난 후 형광강도를 측정하였다. PCR 결과는 각 결과별 melting curve로 검증하였다. 각 유전자의 threshold cycle (Ct)값을 β-actin의 Ct값으로 표준화한 후, Ct값의 변화량을 비교하여 분석하였다. Ct값은 PCR 산물에 의해 발생하는 형광의 양(증폭된 PCR 산물의 수)이 기본 값 이상의 일정한 기준 값에 도달했을 때의 cycle 수로서 Ct값을 통하여 유전자 발현량을 확인할 수 있다.
실험에 사용한 각 유전자의 아래의 표 11과 같으며, MMP1의 발현 결과는 표 12와 도 9에, Col1A1의 발현은 표 13과 도 10에 각각 나타내었다.
Gene Forward primer Reverse primer
β- actin 5-GGATTCCTATGTGGGCGACGA-3 5-CGCTCGGTGAGGATCTTCATG-3
COL1A1 5-AGGGCCAAGACGAAGACATC-3 5-AGATCACGTCATCGCACAACA-3
MMP1 5-TCTGACGTTGATCCCAGAGAGCAG-3 5-CAGGGTGACACCAGTGACTGCAC-3
0 1μM Retinoic acid 5 10 20 40
Mangostin extracts 0.923 0.824 0.753 0.532
a-mangostin 1 0.492 0.723 0.653 0.542 0.423
β-mangostin 0.923 0.802 0.653 0.593
γ-mangostin 0.992 0.985 0.725 0.702
MMP1 mRNA 분석 결과를 나타낸 상기 표 12와 도 9를 참조하면, 추출방법에 따라 MMP1 mRNA의 발현에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 농도의존적으로 MMP1 mRNA의 발현이 대조군에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다. 양성 대조군인 1μM Retinoic acid에 의해서 감소된 MMP1 mRNA의 발현과 비교하였을 때 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴은 유사한 효과를 보임을 확인하였다.
Viability 0 10ng/ml TGF-β 5 10 20 40
Mangostin extracts 0.99 25 85 11
a-mangostin 1 4.245 1.27 1.98 2.57 4.52
β-mangostin 1.21 1.87 2.32 3.74
γ-mangostin 1.01 1.1 1.6 2.38
또한 상기 표 13과 도 10에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 Col1A1 mRNA의 발현에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 농도의존적으로 Col1A1 mRNA의 발현이 대조군에 비해서 증가한 것을 확인할 수 있다. 양성 대조군인 10ng/ml TGF-β에 의해서 증가된 Col1A1 mRNA의 발현과 비교하였을 때 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴은 유사한 효과를 보임을 확인하였다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트튬 염화합물의 결과를 각각 다음 표 14~16과 도 11~16에 나타내었다.
Concentration (mg/L)
0 1 10 100
Col1A1 expression (%) 100 110.46 162.98 225.01
MMP1 expression (%) 100 98.85 81.63 62.48
Concentration (mg/L)
0 1 10 100
Col1A1 expression (%) 100 105.48 142.94 185.38
MMP1 expression (%) 100 99.64 85.33 70.12
Concentration (mg/L)
0 1 10 100
Col1A1 expression (%) 100 104.93 135.96 168.96
MMP1 expression (%) 100 99.69 87.96 74.96
상기 표 14~16 및 다음 도 11~16의 분석 결과에서와 같이, 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 농도의존적으로 MMP1 mRNA의 발현이 대조군에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.(도 12, 14, 16 참조) 또한 그림에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 농도의존적으로 Col1A1 mRNA의 발현이 대조군에 비해서 증가한 것을 확인할 수 있다.(도 11, 13, 156 참조)
실험예 4) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 면역세포의 생장 억제 효과
망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 피부의 염증과 홍반에 작용하는 마우스 면역세포(mouse macrophage, RAW 264.7) 생장이 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의해 억제되는지 확인하였다. 마우스 면역세포(mouse macrophage, RAW 264.7)는 한국세포주은행(KCTC, korea)에서 구매하여 사용하였다. 세포배양액은 Dulbeco's Modified Eagle's Medium (DMEM; Gibco, USA)에 10% fetal bovine serum (FBS; Gibco), 10% penicillin (100 unit/mL)과 streptomycin (100 g/mL)를 첨가하여 사용하였다. 배양조건은 37℃, 95% 습도, 5% CO2 incubator에서 배양하였으며, 3-10세대 사이의 세포를 실험에 사용하였다. 마우스 면역세포인 RAW 264.7 세포에 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리하였을 때, 세포독성이 어느 정도 발생되는지 확인하기 위하여 미세조류 추출물을 각각의 농도로 처리 후에 24시간 동안 세포를 배양하였고, 이 후 세포의 viability를 측정하였으며, 그 결과를 다음 표 17과 도 17에 나타내었다.
0 5 10 20 40
Mangostin extracts 100 101 101.26 107.24 110.24
a-mangostin 100 100.8 98.24 99.21 102.21
β-mangostin 100 98.01 102.24 105.24 108.24
γ-mangostin 100 95.02 95.6 105.24 115.37
상기 표 17과 도 17에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 면역세포인 Raw264.7의 성장에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 농도의존적으로 세포의 성장이 대조군(무처리군)에 비해서 증가한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트튬 염화합물의 결과를 각각 다음 표 18~20과 도 18~20에 나타내었다.
Time (hr) Concentration (mg/L)
0 1 10 100
0 100 100 100 100
24 100.26 99.88 98.28 96.48
48 99.13 96.51 95.89 93.64
72 99.26 94.71 91.84 88.16
Time (hr) Concentration (mg/L)
0 1 10 100
0 100 100 100 100
24 99.46 99.35 98.46 96.48
48 99.89 97.85 97.89 95.96
72 99.04 96.19 95.65 91.69
Time (hr) Concentration (mg/L)
0 1 10 100
0 100 100 100 100
24 100.04 99.65 99.09 98.48
48 99.76 98.49 98.65 97.98
72 99.28 97.09 97.49 95.48
분석 결과, 다음 도 18~20에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 농도의존적으로 세포의 성장이 대조군(무처리군)에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.
실험예 5) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴에 의한 NF - kB 전사 억제 효과
본 발명자들은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 면역반응에서 중요한 역할을 하는 사이토카인의 전사요인인 NF-kB의 전사능력이 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의해 억제되는지 확인하였다.
면역세포에 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리하였을 때 NF-kB 전사능력이 어느 정도 억제되는지 확인하기 위하여 NF-kB reporter assay를 진행하였다. NF-kB에 의하여 전사가 진행된다고 알려진 유전자의 promoter region을 luciferase 유전자가 포함된 벡터에 클로닝하여 면역세포에 삽입시켰다. 그 후에 NF-kB 전사를 유도하는 LPS를 처리하여 NF-kB 전사능력을 활성화시킨 뒤 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 각각의 농도로 처리 후에 luciferase 활성을 측정하였다. Luciferase 활성은 IgGκ chain 유전자의 NF-κB binding site인 IgGκ-NF-κB site(sequence 5-GGGGACTTTCC-3) oligonucleotide가 minimal IL-8 promoter(position 67 to +44)의 상류(upstream)에 위치하도록 구축된 luciferase reporter gene construct를 이용하였으며, lipofectamine plus (Gibco-BRL)를 이용하여 시약 매뉴얼에 따라 유전자를 면역세포에 삽입시켰다. 유전자가 삽입된 면역세포에 LPS를 처리하여 NF-kB의 전사능력을 활성화 시킨 뒤, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 0, 1, 10, 100 ㎎/ℓ의 농도로 처리한 후, 24시간 배양하였다. 배양된 면역세포는 harvest 시점에서 0.1 ml의 lysis buffer(0.1 M HEPES, pH 7.6, 1% Triton-X, 1 mM DTT and 2 mM EDTA)를 직접 첨가하여 cell lysate를 harvest한 후 섭씨 4도에서 10분간 14,000 rpm으로 원심분리하여 세포 단백을 얻었다. Bradford assay(Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA)를 이용하여 단백 농도를 측정한 후 20 μg의 단백질을 luciferase assay mix(25 mM glycylglycine, 15 mM MgSO4, 1 mg/ml bovine serum albumin(BSA), 5 mM ATP and 1 mM D-luciferin (Analytical Luminescence Laboratory, San Diego, CA))에 첨가한 후 Monolight 2010 (Analytical Luminescence Laboratory)을 이용하여 20초간 luminescence를 3회 반복 측정하여 평균값 을 얻어 결정하였으며, 그 결과를 다음 표 21과 도 21에 나타내었다.
RLU 0 10ng/ml LPS 10 ?/ml L-NG-Monomethylarginine, Acetate Salt (L-NMMA) 5 10 20 40
Mangostin extracts 6.324 6.753 5.346 5.234
a-mangostin 1 6.245 4.243 6.340 5.345 4.356 3.540
β-mangostin 6.245 4.234 3.254 2.251
γ-mangostin 6.532 6.354 5.942 5.201
분석 결과, 다음 도 21에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 LPS에 의해서 증가된 NF-κB의 transactivity (luciferase activity)에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 농도의존적으로 LPS에 의해서 증가된 NF-κB의 transactivity가 LPS처리군에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다. 양성 대조군인 10 μg/ml L-NMMA에 의해서 감소된 NF-κB의 transactivity와 비교하였을 때 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴은 유사한 효과를 보임을 확인하였다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트튬 염화합물의 결과를 각각 다음 표 22와 도 22~24에 나타내었다.
Extracts concentration (mg/L) 0 0 1 10 100
알파-망고스틴 나트륨 염화합물 LPS - + + + +
Luciferase activity (Fold) 1 4.34 3.45 2.36 1.14
베타-망고스틴 나트륨 염화합물 LPS - + + + +
Luciferase activity (Fold) 1 4.24 3.55 2.55 1.56
감마-망고스틴 나트륨 염화합물 LPS - + + + +
Luciferase activity (Fold) 1 4.54 3.78 2.74 1.86
분석 결과, 다음 도 22~24에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 농도의존적으로 LPS에 의해서 증가된 NF-κB의 transactivity가 LPS 처리군에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.
실험예 6) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 염증성 사이토카인 합성 억제 효과
본 발명자들은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 면역반을을 유도하는 염증성 사이토카인의 합성이 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의해 억제되는지 확인하였다.
망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 염증성 사이토카인의 발현 변화 정도를 확인하기 위하여 LPS를 처리한 면역세포에 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 각각의 농도로 처리한 후, 24시간 배양하였다. 이후, 유전자 발현 변화는 polymerase chain reaction(PCR) 과정중에 증폭되는 DNA 산물에 형광물질을 붙이고 형광물질을 지속적으로 검출하는 방식인 quantitative real time PCR(qRT-PCR)로 측정하였다(Higuchi et al., 1992). 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 IL-1β 와 TNF-α 유전자 발현 변화를 정량적으로 확인하기 위하여 PCR 산물이 발산하는 형광값을 통하여 결과값을 확인하는 방식으로 SYBR green Ⅰ(Invitrogen)을 사용하였다. PCR tube에 0.2μM primers, 50 mM KCl, 20 mM Tris/HCl pH 8.4, 0.8 mM dNTP, 0.5U Extaq DNA polymerase, 3 mM MgCl2, 1×SYBR green을 혼합 하여 반응액을 제조하였다. 반응액을 제조 후 Linegene K (BioER, China)를 이용하여 94℃에서 3분 동안 primary denaturation 한 후 denaturation, annealing, polymerization을 각각 94℃에서 30초, 60℃에서 30초, 72℃에서 30초로 총 40 cycle을 수행하였고, 매 cycle 이 끝난 후 형광강도를 측정하였다. PCR 결과는 각 결과별 melting curve로 검증하였다. 각 유전자의 threshold cycle (Ct)값을 β-actin의 Ct값으로 표준화한 후, Ct값의 변화량을 비교하여 분석하였다. Ct값은 PCR 산물에 의해 발생하는 형광의 양(증폭된 PCR 산물의 수)이 기본 값 이상의 일정한 기준 값에 도달했을 때의 cycle 수로서 Ct값을 통하여 유전자 발현량을 확인할 수 있다. 실험에 사용한 각 유전자의 primer는 아래 표 23과 같다. 양성대조군은 L-NG-Monomethylarginine, Acetate Salt (L-NMMA)를 사용하였다.
Gene Forward primer Reverse primer
β- actin 5-CCAAGGCCAACCGCCGC-3 5-AGGGTACATGGTGCCGCC-3
IL -1β 5-CTCAATGGACAGAATATCAACCAACA-3 5-ACAGGACAGGTATAGATTCTTTCCTTTG-3
TNF -α 5-TGCCTATGTCTCAGCCTCTTC-3 5-GAGGCCATTTGGGAACTTCT-3
TNF 0 10ng/ml LPS 10㎍/ml L-NMMA 5 10 20 40
Mangostin extracts 6.324 6.753 5.346 5.234
a-mangostin 1 6.245 4.243 6.340 5.345 4.356 3.540
β-mangostin 6.245 4.234 3.254 2.251
γ-mangostin 6.532 6.354 5.942 5.201
분석 결과, 상기 표 24, 및 도 25에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 LPS에 의해서 증가된 TNFα mRNA의 발현에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 농도의존적으로 LPS에 의해서 증가된 TNFα mRNA의 발현이 LPS처리군에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다. 양성 대조군인 10 μg/ml L-NMMA에 의해서 감소된 TNFα mRNA의 발현과 비교하였을 때 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴은 유사한 효과를 보임을 확인하였다.
IL 0 10ng/ml LPS 10 ㎍/ml L-NMMA 5 10 20 40
Mangostin extracts 5.32 5.01 4.82 3.24
a-mangostin 1 6.245 3.245 5.245 3.982 2.82 2.10
β-mangostin 5.426 4.12 3.21 2.63
γ-mangostin 6.025 5.02 4.52 4.32
또한 상기 표 25 및 도 26에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 LPS에 의해서 증가된 IL-1β mRNA의 발현에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 농도의존적으로 LPS에 의해서 증가된 IL-1β mRNA의 발현이 LPS처리군에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다. 양성 대조군인 10 μg/ml L-NMMA에 의해서 감소된 IL-1β mRNA의 발현과 비교하였을 때 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴은 유사한 효과를 보임을 확인하였다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트튬 염화합물의 결과를 각각 다음 표 26~28와 도 27~32에 나타내었다.
Extracts concentration (mg/L) 0 0 1 10 100
a-mangostin LPS - + + + +
IL-1βmRNA expression(Fold) 1 4.06 3.14 2.04 1.24
LPS - + + + +
TNF-a mRNA expression(Fold) 1 3.76 2.94 2.01 1.14
Extracts concentration (mg/L) 0 0 1 10 100
β-mangostin LPS - + + + +
IL-1βmRNA expression(Fold) 1 3.95 3.24 2.44 1.61
LPS - + + + +
TNF-a mRNA expression(Fold) 1 4.50 3.76 2.66 1.56
Extracts concentration (mg/L) 0 0 1 10 100
γ-mangostin LPS - + + + +
IL-1βmRNA expression(Fold) 1 4.36 3.75 2.66 1.74
LPS - + + + +
TNF-a mRNA expression(Fold) 1 3.96 3.26 2.76 1.86
분석 결과, 상기 표 26~28 및 도 28, 30, 32에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 농도의존적으로 LPS에 의해서 증가된 TNFα mRNA의 발현이 LPS 처리군에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.
또한 도 27, 29, 및 31에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 농도의존적으로 LPS에 의해서 증가된 IL-1β mRNA의 발현이 LPS 처리군에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.
실험예 7) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 유수분 지수 변화
본 발명자들은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 corneometer와 sebumeter를 이용하여 피부 유수분을 분석하였다.
먼저, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴과 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염화합물이 피부 유수분 개선에 미치는 영향을 확인하기 위하여 30세 이상의 성인 여성 30명을 선별하여 상기 실시예 5와 3에서 각각 제조한 크림과 토너를 사용하도록 하였다. 사용하기 전(Before)과 각각 2주, 4주간 사용한 뒤 피부 수분지수를 corneometer (MPA5, Courage-Khazaka Electronic GmbH, Cologne, Germany)를 사용하여 기기 매뉴얼에 따라 측정하였다. Corneometer를 이용해 동일한 시험담당자가 피시험자의 측정부위인 우측 볼부위를 3회 연속하여 측정하였다. 피부 유분지수는 sebumeter (MPA5, Courage-Khazaka Electronic GmbH, Cologne, Germany)를 사용하여 기기 매뉴얼에 따라 측정하였다. Sebumeter를 이용해 동일한 시험담당자가 피시험자의 측정부위인 이마부위를 측정하였으며, 피부수분량 변화는 다음 표 29와 도 33에, 피부 유분량 변화는 다음 표 30과 도 34에 각각 나타내었다.
Before 2 weeks 4 weeks
Control 258 269 282
Aloe 264 322 333
Mangostin extracts 241 267 301
a-mangostin 234 324 455
β-mangostin 250 329 473
γ-mangostin 254 294 345
피부 수분량 변화를 나타낸 상기 표 29와 다음 도 33에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 피부의 수분에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 시간의존적으로 피부 수분이 대조군(무처리군)에 비해서 증가하였고, 또한 양성대조군인 Aloe보다 높게 증가한 것을 확인할 수 있다.
Before 2 weeks 4 weeks
Control 332.81 324.14 357.65
Aloe 321 347.43 365.11
Mangostin extracts 341 354.42 352.45
a-mangostin 340 352.24 386.45
β-mangostin 334 354.67 372.35
γ-mangostin 330.24 335.24 342.45
또한 유분의 경우도 상기 표 30과 도 34를 참조하면, 추출방법에 따라 피부의 유분에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 농도의존적으로 피부 수분이 대조군(무처리군)에 비해서 증가하였고, 또한 양성대조군인 Aloe보다 높게 증가한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물의 피부유수분량 변화는 다음 표 31과 도 35~36에 각각 나타내었다. 베타-망고스틴 나트륨 염화합물의 피부유수분량 변화는 다음 표 32와 도 37~38에 각각 나타내었다. 감마-망고스틴 나트튬 염화합물의 피부유수분량 변화는 다음 표 33과 도 39~40에 각각 나타내었다.
a-mangostin 실험전 2주 후 4주 후

피부수분량 변화		 대조군 255 257 262
양성대조군 248 259 267
실험군 247 289 320

피부유분량 변화		 대조군 325 328 330
양성대조군 327 343 352
실험군 330 349 362
β-mangostin 실험전 2주 후 4주 후

피부수분량 변화		 대조군 259 260 264
양성대조군 250 259 263
실험군 255 283 309

피부유분량 변화		 대조군 324 325 329
양성대조군 320 331 348
실험군 330 342 354
γ-mangostin 실험전 2주 후 4주 후

피부수분량 변화		 대조군 252 254 257
양성대조군 257 266 274
실험군 253 274 288

피부유분량 변화		 대조군 325 327 328
양성대조군 319 326 338
실험군 331 340 348
분석 결과, 도 35~40에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 시간의존적으로 피부 수분이 대조군(무처리군)에 비해서 증가한 것을 확인할 수 있다.(도 35, 37, 39 참조)
또한 유분의 경우도 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 농도의존적으로 피부 수분이 대조군(무처리군)에 비해서 증가한 것을 확인할 수 있다.(도 36, 38, 40 참조)
실험예 8) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 주름 개선효과
본 발명자들은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부주름 개선 효과를 확인하기 위하여 피부 분석기를 이용하여 피부주름을 분석하였다. 먼저, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴과 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염화합물이 피부주름 개선에 미치는 영향을 확인하기 위하여 30세 이상의 성인 여성 30명을 선별하여 실시예 5와 3에서 각각 제조한 크림과 토너를 사용하도록 하였다.
사용하기 전(Before)과 각각 2주, 4주간 사용한 뒤 안면 주름 정도를 PRIMOS Lite (field of view 18×13-simple, flexible 3D measuring, GFMesstechnik GmbH, Germany)을 사용하여 기기 매뉴얼에 따라 측정하였다. PRIMOS Lite를 이용해 동일한 시험담당자가 피시험자의 얼굴을 특수 제작된 PRIMOS 안면고정 장비세트에 얼굴을 고정하고, 측정의 재현성을 위해 측정 부위인 눈꼬리 끝부위가 PRIMOS Lite의 포커스 패턴과 맞도록 조정 후 측정하였으며, 그 결과를 다음 표 34와 도 41에 나타내었다
Before 2 weeks 4 weeks
Control 33.49 33.24 32.24
Aloe 32.24 30.45 29.54
Mangostin extracts 35.24 34.24 32.24
a-mangostin 34.11 32.45 30.21
β-mangostin 34.24 33.25 32.02
γ-mangostin 33.98 32.45 32.05
분석 결과, 다음 도 41에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 눈꼬리 주름에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 시간의존적으로 눈꼬리 주름이 대조군(무처리군)에 비해서 감소하였고, 또한 양성대조군인 Aloe보다 더 감소한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 피부 주름 개선 결과도 다음 표 35와 도 42~44에 각각 나타내었다.
시료 실험전 2주 후 4주 후
a-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 32.38 32.11 31.87
양성대조군 32.47 31.49 29.28
실험군 32.12 30.13 28.16
β-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 32.29 32.10 31.89
양성대조군 32.37 31.55 30.49
실험군 32.11 30.81 29.37
γ-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 32.25 32.17 31.88
양성대조군 32.19 31.75 31.02
실험군 32.44 31.05 30.17
분석 결과, 상기 표 35, 및 도 42~44에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 시간의존적으로 눈꼬리 주름이 대조군(무처리군)에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.
실험예 9) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 두께 개선효과
망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 진피섬유아세포의 증식 증가 및 콜라겐의 발현이 증가를 확인하였다. 본 발명자들은 이에 따라 생성된 콜라겐에 의해 진피층의 두께가 증가하는지를 분석하여 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 두께 개선효과를 확인하였다.
먼저, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴과 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염화합물이 피부 두께에 미치는 영향을 확인하기 위해 30세 이상의 성인 여성 30명을 선별하여 상기 실시예 5와 3에서 각각 제조한 크림과 토너를 사용하도록 하였다.
사용하기 전(Before)과 각각 2주, 4주간 사용한 뒤 DUB-Skin Scanner (tpm taberna pro medicum, Germany)를 사용하여 기기 매뉴얼에 따라 측정하였다. DUB-Skin Scanner에 초음파 검사용 젤을 바르고 Probe를 피부와 직각이 되도록 한 후 동일한 시험담당자가 피시험자의 안면 우측눈가에 동일한 압으로 눌러 측정하였으며, 그 결과를 다음 표 36과 도 45에 나타내었다.
Before 2 weeks 4 weeks
Control 56.43 56.41 56.38
Aloe 55.71 56.21 56.87
Mangostin extracts 55.12 56.03 56.7
a-mangostin 54.39 55.67 57.45
β-mangostin 54.24 55.01 56.98
γ-mangostin 55.12 55.73 56.7
분석 결과, 상기 표 36과 도 45에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 피부 두께에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 시간의존적으로 피부 두께가 대조군(무처리군)에 비해서 증가하였고, 또한 양성대조군인 Aloe보다 높게 증가한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 결과도 다음 표 37과 도 46~48에 각각 나타내었다.
시료 실험전 2주 후 4주 후
a-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 56.4 56.51 56.66
양성대조군 56.07 56.97 57.24
실험군 56.33 57.29 58.21
β-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 56.44 56.55 56.60
양성대조군 56.35 56.91 57.21
실험군 56.21 56.93 57.56
γ-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 56.38 56.46 56.59
양성대조군 56.28 56.88 57.12
실험군 56.41 56.76 57.42
분석 결과, 상기 표 37과 도 46~48에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 시간의존적으로 피부 두께가 대조군(무처리군)에 비해서 증가한 것을 확인할 수 있다.
실험예 10) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물 에 의한 피부 탄력 개선효과
본 발명자들은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 피부 탄력 개선효과를 확인하였다. 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴과 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염화합물이 피부 두께에 미치는 영향을 확인하기 위해 30세 이상의 성인 여성 30명을 선별하여 실시예 5와 3에서 각각 제조한 크림과 토너를 사용하도록 하였다.
사용하기 전(Before)과 각각 2주, 4주간 사용한 뒤 피부 탄력의 변화정도를 DermaLab USB elasticity probe(DermaLab USB elasticity probe)로 측정하였다. DermaLab USB elasticity probe는 측정 부위 흡입과 흡입시간 지속에 따른 피부 변화와 복원력을 수치로 나타내며, 동일한 시험담당자가 probe를 테이프로 왼쪽 볼부위에 고정 후 3회 반복하여 측정하였으며, 그 결과를 다음 표 38과 도 49에 나타내었다.
Before 2 weeks 4 weeks
Control 11.24 11.22 11.54
Aloe 12.03 12.76 13.21
Mangostin extracts 11.34 11.94 12.24
a-mangostin 11.59 12.43 13.72
β-mangostin 11.49 12.17 13.01
γ-mangostin 11.42 11.87 12.01
분석 결과, 상기 표 38과 도 49에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 피부의 탄력에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 시간의존적으로 피부의 탄력이 대조군(무처리군)에 비해서 증가하였고, 또한 양성대조군인 Aloe보다 높게 증가한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 피부 주름 개선 결과도 다음 표 39와 도 50~52에 각각 나타내었다.
시료 실험전 2주 후 4주 후
a-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 11.25 11.29 11.35
양성대조군 11.14 11.86 12.34
실험군 11.22 12.29 13.68
β-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 11.34 11.36 11.41
양성대조군 11.16 11.62 12.01
실험군 11.26 12.02 13.02
γ-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 11.23 11.29 11.32
양성대조군 11.19 11.38 11.79
실험군 11.28 11.86 12.59
분석 결과, 상기 표 39와 도 50~52에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 시간의존적으로 피부의 탄력이 대조군(무처리군)에 비해서 증가한 것을 확인할 수 있다.
실험예 11) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴에 의한 피부 장벽 개선효과
본 발명자들은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 피부 장벽 개선효과를 확인하였다. 먼저, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴과 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염화합물이 피부 장벽 개선에 미치는 영향을 확인하기 위하여 30세 이상의 성인 여성 30명을 선별하여 실시예 5와 3에서 각각 제조한 크림과 토너를 사용하도록 하였다.
사용하기 전(Before)과 각각 2주, 4주간 사용한 뒤 표피수분손실량(TEWL: TransEpidermal Water Loss)을 수분손실측정기인 DermaLab USB TEWL probe (Cortex Technology, Inc., Denmark)를 이용하여 기기의 매뉴얼에 따라 측정하였다.
Before 2 weeks 4 weeks
Control 32.49 32.53 31.24
Aloe 31.03 30.54 29.42
Mangostin extracts 32.45 31.22 30.12
a-mangostin 33.49 31.24 29.02
β-mangostin 33.18 32.42 31.24
γ-mangostin 32.15 31.24 30.21
분석 결과, 상기 표 40과 다음 도 53에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 경피수분 손실량에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 시간의존적으로 경피수분 손실량이 대조군(무처리군)에 비해서 감소하였고, 또한 양성대조군인 Aloe보다 높게 감소한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 피부 주름 개선 결과도 다음 표 41과 도 54~56에 각각 나타내었다.
시료 실험전 2주 후 4주 후
a-mangostin 염 화합물 대조군 32.45 31.95 31.81
양성대조군 32.18 31.02 30.28
실험군 32.07 29.24 26.53
β-mangostin
염 화합물		 대조군 32.19 31.93 31.68
양성대조군 32.48 31.84 30.67
실험군 32.33 30.27 28.02
γ-mangostin
염 화합물		 대조군 32.49 32.15 31.84
양성대조군 32.27 31.81 30.94
실험군 32.38 31.08 29.68
분석 결과, 상기 표 41과 다음 도 54~56에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 시간의존적으로 경피수분 손실량이 대조군(무처리군)에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.
실험예 12) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부결 개선효과
본 발명자들은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 피부결 개선효과를 확인하였다. 먼저, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴과 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염화합물이 피부결 개선에 미치는 영향을 확인하기 위하여 30세 이상의 성인 여성 30명을 선별하여 실시예 5와 3에서 각각 제조한 크림과 토너를 사용하도록 하였다.
사용하기 전(Before)과 각각 2주, 4주간 사용한 뒤 피부결 정도를 PRIMOS Lite (field of view 45×30-simple, flexible 3D measuring, GFMesstechnik GmbH, Germany)을 사용하여 기기 매뉴얼에 따라 측정하였다. PRIMOS Lite를 이용해 동일한 시험담당자가 피시험자의 이마부위를 3회 연속하여 측정하여 동일한 부위를 측정하였다.
Before 2 weeks 4 weeks
Control 15.43 15.53 15.98
Aloe 16.71 15.82 15.11
Mangostin extracts 16.24 15.99 15.45
a-mangostin 16.05 15.64 14.36
β-mangostin 15.98 15.72 14.97
γ-mangostin 15.42 15.88 15.24
분석 결과, 상기 표 42와 도 57에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 피부결에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 시간의존적으로 피부결 결정하는 피부에 생성된 주름의 깊이가 대조군(무처리군)에 비해서 감소하였고, 또한 양성대조군인 Aloe보다 더 감소한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 피부 주름 개선 결과도 다음 표 43과 도 58~60에 각각 나타내었다.
시료 실험전 2주 후 4주 후
a-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 15.43 15.32 15.04
양성대조군 15.59 15.01 14.21
실험군 15.38 14.21 13.01
β-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 15.31 15.22 15.10
양성대조군 15.55 15.29 14.68
실험군 15.44 14.96 13.81
γ-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 15.25 15.19 15.07
양성대조군 15.53 15.23 14.95
실험군 15.40 15.07 14.25
분석 결과, 상기 표 43과 도 58~60에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 시간의존적으로 피부결 결정하는 피부에 생성된 주름의 깊이가 대조군(무처리군)에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.
실험예 13) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 홍반 개선효과
상기 실험을 통해 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 면역세포의 증식억제 및 염증성 사이토카인의 발현 감소를 확인하였다.
본 발명자들은 이에 따라 감소된 사이토카인에 의해 홍반이 감소하는지를 분석하여 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴과 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염화합물의 홍반 개선효과를 확인하였다.
먼저, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴과 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염화합물이 홍반 개선에 미치는 영향을 확인하기 위하여 30세 이상의 성인 여성 30명을 선별하여 실시예 5와 3에서 각각 제조한 크림과 토너를 사용하도록 하였다.
사용하기 전(Before)과 각각 2주, 4주간 사용한 뒤 분광광도계(Spectrophotometer CR-2600D, Konica Minolta, Japan)을 사용하여 기기 매뉴얼에 따라 측정하였다. 동일한 시험담당자가 피시험자의 우측 볼부위를 3회 연속으로 측정하여 그에 대한 평균값을 계산하여 분석에 사용하였다. 분광광도계에서 측정되는 값은 L*, a*, b*이며 a*값이 홍반을 나타내는 값으로 증가할수록 붉은기가 많은 상태를 나타낸다.
Before 2 weeks 4 weeks
Control 12.65 12.45 12.05
Aloe 12.36 12.11 10.94
Mangostin extracts 12.72 12.34 11.42
a-mangostin 13.11 12.02 11.24
β-mangostin 12.76 11.28 10.12
γ-mangostin 12.34 12.01 11.78
분석 결과, 상기 표 44와 다음 도 61에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 홍반에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴을 처리 후 시간의존적으로 홍반이 대조군(무처리군)에 비해서 감소하였고, 또한 양성대조군인 Aloe보다 더 홍반이 감소한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 피부 주름 개선 결과도 다음 표 45와 도 62~64에 각각 나타내었다.
시료 실험전 2주 후 4주 후
a-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 12.45 12.24 12.09
양성대조군 12.29 11.57 10.99
실험군 12.48 11.24 10.10
β-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 12.51 12.35 12.18
양성대조군 12.39 11.98 11.34
실험군 12.41 11.59 10.69
γ-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 12.33 12.26 12.08
양성대조군 12.53 12.13 11.57
실험군 12.44 11.86 11.03
분석 결과, 상기 표 45와 도 62~64에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 시간의존적으로 홍반이 대조군(무처리군)에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.
실험예 14) 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마- 망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 색소침착 개선효과
본 발명자들은 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물에 의한 피부 미용 개선효과를 알아보기 위해 색소침착 개선효과를 확인하였다. 먼저, 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴과 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 염화합물이 색소침착 개선에 미치는 영향을 확인하기 위하여 30세 이상의 성인 여성 30명을 선별하여 실시예 5와 3에서 각각 제조한 크림과 토너를 사용하도록 하였다.
사용하기 전(Before)과 각각 2주, 4주간 사용한 뒤 ANTERA 3D (Miravex, Ireland)를 사용하여 기기 매뉴얼에 따라 측정하였다. 동일한 시험담당자가 왼쪽 볼부위를 3회 연속으로 동일부위를 측정하여 분석에 사용하였다.
Before 2 weeks 4 weeks
Control 220.78 218.44 216.39
Aloe 223.45 214.24 208.64
Mangostin extracts 222.15 212.24 203.24
a-mangostin 229.34 197.25 175.45
β-mangostin 232.24 199.55 183.24
γ-mangostin 222.54 212.01 200.78
분석 결과, 상기 표 46과 도 65에서 나타낸 것과 같이 추출방법에 따라 색소침착에 미치는 효과가 상의하였지만 모든 망고스틴 추출물, 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 및 알파-, 베타-, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 시간의존적으로 색소침작면적이 대조군(무처리군)에 비해서 감소하였고, 또한 양성대조군인 Aloe보다 더 색소침작 면적이 감소한 것을 확인할 수 있다.
또한, 알파-망고스틴 나트륨 염화합물, 베타-망고스틴 나트륨 염화합물, 및 감마-망고스틴 나트륨 염화합물의 피부 주름 개선 결과도 다음 표 47와 도 66~68에 각각 나타내었다.
시료 실험전 2주 후 4주 후
a-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 222.18 220.59 217.37
양성대조군 219.26 210.31 195.70
실험군 221.69 174.68 151.03
β-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 219.96 218.07 217.54
양성대조군 222.08 212.82 199.34
실험군 221.17 186.59 165.94
γ-mangostin
나트륨염 화합물		 대조군 220.14 219.08 218.22
양성대조군 223.01 216.93 203.18
실험군 217.29 195.66 179.34
분석 결과, 표 47와 도 66~68에서 나타낸 것과 같이 알파, 베타, 감마-망고스틴 나트륨 염화합물을 처리 후 시간의존적으로 색소침작 면적이 대조군(무처리군)에 비해서 감소한 것을 확인할 수 있다.

Claims (11)

  1. 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴, 알파-망고스틴 염 화합물, 베타-망고스틴 염 화합물, 또는 감마-망고스틴 염 화합물 중에서 선택되는 어느 하나를 유효성분으로 포함하는 피부 개선 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 망고스틴 추출물은 망고스틴 과육, 과피, 씨, 줄기, 나뭇잎, 수피를 멸균수, 에탄올, 및 상기 멸균수와 에탄올의 혼합용매에서 혼합시킨 원료를 60~80℃의 온도에서 24~48 시간 동안 추출시킨 것인 피부 개선 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴은 각각 다음 화학식 1~3으로 표시되는 것인 피부 개선 조성물.
    화학식 1
    Figure pat00013

    화학식 2
    Figure pat00014

    화학식 3
    Figure pat00015
  4. 제1항에 있어서,
    알파-망고스틴 염 화합물, 베타-망고스틴 염 화합물, 및 감마-망고스틴 염 화합물은 각각 다음 화학식 4~6으로 표시되는 것인 피부 개선 조성물.
    화학식 4
    Figure pat00016

    화학식 5
    Figure pat00017

    화학식 6
    Figure pat00018
  5. 제1항에 있어서,
    상기 피부 개선 조성물은 망고스틴 추출물 0.1~10중량%, 알파-망고스틴 0.01~0.5중량%, 베타-망고스틴 0.01~0.5중량%, 감마-망고스틴 0.01~0.5중량%, 알파-망고스틴 염 화합물 0.01~0.5중량%, 베타-망고스틴 염 화합물 0.01~0.5중량%, 또는 감마-망고스틴 염 화합물 0.01~0.5중량%를 유효성분으로 포함하는 것인 피부 개선 조성물.
  6. 제1항에 있어서,
    상기 알파-망고스틴 화합물, 베타-망고스틴 염 화합물, 및 감마-망고스틴 염 화합물은
    정제수에 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴을 혼합하여 20~30℃에서 1~4시간 교반시켜 용해시키는 단계,
    상기 용해된 혼합액에 금속 염을 첨가하여 20시간 이상을 20~30℃에서 교반시키는 단계, 및
    상기 교반액에 비용매를 첨가하여 침전시키는 단계를 거쳐 제조되는 것인 피부 개선 조성물.
  7. 제6항에 있어서,
    상기 금속 염은 염화 나트륨 또는 염화 칼륨인 것인 피부 개선 조성물.
  8. 제1항에 있어서,
    상기 알파-망고스틴 염 화합물, 베타-망고스틴 염 화합물, 및 감마-망고스틴 염 화합물은
    유기용매에 망고스틴 추출물, 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴을 혼합하여 50~60℃에서 용해시키는 단계,
    물에 금속염을 용해시킨 금속염 수용액을 상기 혼합액에 첨가하는 단계, 및
    상기 혼합액을 냉각시켜 침전물을 형성시키는 단계를 거쳐 제조되는 것인 피부 개선 조성물.
  9. 제8항에 있어서,
    상기 금속염은 염화나트륨, 또는 염화마그네슘으로 망고스틴 혼합물에 대하여 1.0~1.5 몰당량으로 첨가되는 것인 피부 개선 조성물.
  10. 제1항에 있어서,
    상기 피부 개선 조성물은 항산화, 진피세포 성장촉진, 콜라겐 증가, 콜라겐분해효소 감소, 면역세포 성장촉진, 염증억제, 피부 유수분 조절, 피부주름개선, 진피친밀도 증가, 피부탄력 개선, 피부장벽 회복, 피부결 개선, 피부홍반 감소, 색소침착 감소로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 피부 개선에 이용되는 것임을 특징으로 하는 피부 개선 조성물.
  11. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 화학선 각화증, 기저세포암, 편평상피암, 섬유성 조직구종, 융기성 피부섬유육종, 혈관종, 화염상모반, 황색종, 카포시 육종, 비만세포증, 균상식육종, 흑색점, 모반세포성 모반, 악성흑색점, 악성흑색종, 전이성 암종 및 건선으로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상의 증식성 피부질환에 이용되는 것임을 특징으로 하는 피부 개선 조성물.
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2017217695A1 (ko) * 2016-06-15 2017-12-21 한국 한의학 연구원 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴 또는 가르탄닌 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 조성물
WO2023077397A1 (en) * 2021-11-05 2023-05-11 Xantho Biotechnology Co., Ltd Use of mangosteen fruit shell extract in the preparation of a medicament for treating psoriasis

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WO2017217695A1 (ko) * 2016-06-15 2017-12-21 한국 한의학 연구원 알파-망고스틴, 베타-망고스틴, 감마-망고스틴 또는 가르탄닌 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 또는 피부 보습용 조성물
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