KR20170035088A - 베트남 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 베트남 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물에 관한 것으로, 자세하게는 메조노사이드 R2(majonoside R2) 진세노사이드를 함유한 베트남 인삼 추출물 또는 메조노사이드 R2(majonoside R2) 진세노사이드를 주요 유효성분으로 포함하는 여드름 예방 또는 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다. 베트남 인삼은 한국 인삼에는 없는 사포닌인 메조노사이드 R2(majonoside R2)을 다량 함유하고 있는 특징이 있으며 피부에 부작용을 일으키지 않는 안정한 특징이 있고, 여드름 증상을 완화 및 개선하는 효과가 우수하여 여드름 개선용 화장품의 소재로 유용하게 사용할 수 있다.
Description
본 발명은 베트남 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.
인삼(Panax ginseng C.A. Meyer)은 오가피과 인삼 속에 속하는 식물로서 한국, 중국 및 일본 등지에서 2,000여년 전부터 사용되어 온 생약이며, 경험적으로 질병을 예방하고 수명을 연장시킬 목적으로 사용되어 왔다. 지금까지 알려진 인삼의 효능 및 효과는 중추신경계에 대한 작용, 항발암 작용, 항암활성, 면역기능 조절작용, 항당뇨 작용, 간기능 항진효능, 심혈관 장해개선, 항동맥경화 작용, 혈압조절 작용, 갱년기 장애 개선, 골다공증에 미치는 효과, 항스트레스 및 항피로 작용, 항산화 활성 및 노화억제 효능 등이 있다(최신고려인삼 “성분 및 효능편”, 한국인삼연초연구원, 56-112, 1996).
인삼의 대표적 생리활성 성분인 진세노사이드(Ginsenoside)는 인삼의 지상 및 지하부에 고르게 분포되어 있으며, 특히 인삼 근(뿌리), 인삼엽 및 인삼 열매 등 부위에 따라 진세노사이드 함량뿐만 아니라 조성도 다른 것으로 알려져 있다(Attele AS et al, Biochem Pharmacol, 58; 1685-1693, 1999). 특히 인삼 열매는 인삼 근(뿌리)과 다른 진세노사이드의 성분과 그 함량을 바탕으로 항당뇨 효능에 있어서 인삼근 보다 우수한 결과를 나타내는 것으로 보고되었다(Dey L. et al., Phytomedicine, 10; 600-605, 2003). 또한, 최근에는 인삼이 재배되는 지역에 따라서도 함유된 진세노사이드의 함량과 종류가 다르다고 보고되고 있다.
따라서 각기 다른 지역에서 재배되는 인삼 또는 인삼 부위별 생리활성을 연구하여 보다 유용한 생리활성 효과를 최대화 시킬 수 있도록 최적의 원료를 찾으려는 연구가 활발히 진행 중에 있다.
한편, 여드름은 호르몬의 작용, 과도한 피지 분비, 세균의 감염 등에 의한 모피지선, 모낭 및 주변 조직의 염증성 질환을 말한다.
여드름의 원인은 여러 가지로 나눌 수 있는데, 첫번째 원인은 피지의 과다 분비이다. 피지는 피지선에서 분비되는 물질로서 정상적인 양에서는 피부 외부의 유해 물질이 각질 세포 사이를 침투하는 것을 막아주는 기능을 한다. 그러나 사춘기, 월경 전후, 임신 초기나 피임약 복용, 스트레스 등의 환경 하에서 인체는 정상 상태와는 다른 호르몬 밸런스를 나타낸다. 이렇게 달라진 호르몬 밸런스는 피지선을 자극하게 되고 이것은 피지의 과다분비로 유도된다. 또한 유전적으로 피지분비가 많은 경유도 있으며 외부 기온의 변화 또는 잘못된 식습관에 따른 피부 온도의 증가에 의해서도 증가될 수 있다.
두번째 원인은 모공의 감염이다. 과도하게 분비된 피지에는 지방산이 많이 포함되어 있어 피부 표면의 pH를 높이고, 피부의 지질을 용해시켜 피부자체의 방어력을 저하시킨다. pH가 높아진 피부 표면에서는 여드름의 원인균이 증식하기 용이한 상태가 되고 증식한 여드름균은 약해진 피부를 통해 화농성 염증을 유발하게 된다.
한편, 여드름은 증상에 따라 4단계로 나눌 수 있다. 1단계는 과다 분비된 피지가 피지선 주변의 모공에 쌓이면서 면포를 형성하게 되는 면포성 여드름이다. 1단계 면포성 여드름은 여드름 병변으로는 초기의 가벼운 단계이나 미용적으로는 좋지 않아 피부 고민이 된다. 이 단계에서는 잘 관리해주면 염증으로의 발전을 억제할 수도 있다. 2단계 구진성 여드름 단계에서는 여드름균이 번식되어 염증 반응이 생기면서 붉은 여드름이 나타나는데 이를 구진이라 하며 적절한 관리가 되지 않을 경우 흉터가 생길 수 있다. 3단계 화농성 여드름에서는 붉은색 여드름의 염증 반응이 더 심해지면서 내부에 고름 주머니가 생기는데 이를 농포라 하며 이 단계에서는 치료 후에도 흉터가 남게 될 수 있으므로 전문적인 치료가 필요하다. 마지막 4단계 결절성 여드름은 고름 주머니가 피부 안에서 터져 여드름 환부 주변에 더 많은 염증을 유발시키는 단계로 손가락만한 덩어리가 생기는데 이를 결절이라 하며 염증이 진피까지 파고 들어간 시기로 전문적인 치료를 요하며 치료 시기도 장기화 될 수 있다.
이러한 여드름을 치료 또는 개선하기 위한 방법으로 여드름의 치료는 국소 제제 도포 요법 및 경구 약물 복용 요법과 최근 시행되고 있는 레이저 시술, 박피술 등 수술 요법이 있으며, 경구 약물 복용 요법은 피지선의 기능 억제와 모낭벽 파괴 억제 목적으로 레티노이드, 부신피질 호르몬 등을 이용하고 있지만 이들 제제는 과량 복용시 피부 발진, 피부 건조증 등의 부작용이 있고 개인에 따라 알러지 현상이 유발될 수도 있으므로 사용에 주의가 요구된다.
따라서 여드름을 의약 범위내에서 치료하는 단계까지 이르기 이전에 화장품의 단계에서 이러한 의학적인 치료 효과를 볼 수 있는 물질에 대한 연구가 진행되고 있으나 그러한 물질은 많지 않은 상태이다.
특히 화장품은 치료약에 비해 장기적으로 사용할 수 있고 정상 피부의 손상이 적을 수 있어 피부에 안전하고 여드름 개선 효과가 우수한 화장료 원료를 천연물 소재로부터 개발할 필요가 있다.
본 발명의 목적은 피부에 안정성을 가지면서 여드름 개선 효과가 우수한 베트남 인삼 추출물의 용도를 제공하는 것이다.
따라서 본 발명의 목적은 베트남 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 메조노사이드 R2(majonoside R2) 진세노사이드를 주요 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위해서, 본 발명은 베트남 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 베트남 인삼 추출물은 건조된 인삼 뿌리 또는 배양 인삼세포체의 물 또는 유기용매 추출물일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, 헥산 및 시클로헥산으로 이루어진 군중에서 선택되는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 베트남 인삼 추출물에는 majonoside R2를 함유하고 있는 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 베트남 인삼은 1년산 내지 11년산 인삼일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 프레스파우더 및 루스파우더로 이루어진 군으로부터 선택된 1종으로 제형화 되는 것일 수 있다.
또한, 본 발명은 메조노사이드 R2(majonoside R2) 진세노사이드를 주요 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 메조노사이드 R2는 베트남 인삼으로부터 분리한 것일 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 메조노사이드 R2는 베트남 인삼의 뿌리 또는 배양 인삼세포체의 건조분말에 메탄올 또는 에타놀 등 용매를 첨가하여 수득한 용매 추출물로부터 분리한 것일 수 있다.
본 발명에 따른 메조노사이드 R2(majonoside R2) 진세노사이드를 함유한 베트남 인삼 추출물 또는 메조노사이드 R2(majonoside R2) 진세노사이드는 피부에 부작용을 일으키지 않는 안정한 특징이 있고, 여드름 증상을 완화 및 개선하는 효과가 우수하여 여드름 개선용 화장품의 소재로 유용하게 사용할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 베트남 인삼 뿌리의 건조물에 함유된 사포닌 종류와 함량을 비교 분석한 그래프이다.
도 2는 본 발명의 베트남 인삼 추출물의 여드름 개선 효과를 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 메조노사이드 R2(majonoside R2) 진세노사이드의 구조식을 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명의 베트남 인삼 추출물의 여드름 개선 효과를 분석한 결과를 나타낸 것이다.
도 3은 메조노사이드 R2(majonoside R2) 진세노사이드의 구조식을 나타낸 것이다.
본 발명은 피부에 안전하고 여드름 개선 효과가 우수한 화장품의 제조를 위해 유효성분으로 베트남 인삼 추출물을 사용할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
특히 본 발명자들은 각 지역마다 재배되는 인삼을 대상으로 성분 분석을 확인하였고, 특히 베트남 인삼에는 다른 지역에서 재배된 인삼과 달리 majonoside R2 진세노사이드가 다량 함유된 것을 확인하였다.
따라서 본 발명은 베트남 인삼 추출물 또는 majonoside R2 의 여드름 개선 활성 및 이를 여드름 개선을 위한 화장료 조성물의 용도로 사용할 수 있음을 실험을 통해 확인할 수 있었다.
구체적으로 본 발명의 일실시예에 따르면, 베트남 인삼으로부터 수득한 추출물을 대상으로 인삼에 함유된 성분을 컬럼크로마토그래피 및 질량분석기를 통해 분석한 결과, 한국 인삼과 베트남 인삼 성분 분석을 살펴보면 베트남 인삼의 경우 majonoside R2가 가장 많이 함유되어 있었고, 그 다음으로 Rb1이, 그 다음이 Rg1의 진세노이드 함량 순인 것으로 나타난 반면, 한국 인삼의 경우 majonoside R2는 아예 함유되지 않은 것으로 나타났고, Rc와 Rb1 진세노사이드가 주요 성분으로 함유되어 있는 것으로 나타났다(하기 표 참조). 하기 표에서 Panax vietnamensis는 베트남 인삼을 Panax ginseng은 한국 인삼을 나타낸 것이다.
따라서 이러한 결과를 토대로, 베트남 인삼은 한국 인삼과 비교하여 함유하고 있는 사포닌의 종류나 함량에 있어서 다른 차이가 있다는 것을 알 수 있었다.
나아가 본 발명자들은 베트남 인삼이 여드름 개선 효과가 매우 우수하다는 것을 확인할 수 있었다.
본 발명의 일실시예에 따르면, 베트남 인삼의 추출물을 대상으로 여드름이 유발된 피험자들의 피부에 상기 추출물을 도포하고 여드름의 개선 정도를 분석한 결과, 추출물을 처리하지 않은 군에 비해 매우 월등하게 여드름이 개선된 것으로 나타났고, 여드름의 증상인 농포 및 구진도 매우 억제된 것으로 나타났다.
그러므로 majonoside R2 사포닌을 주요성분으로 다량 함유하고 있는 베트남 인삼 추출물 또는 majonoside R2는 여드름을 예방 및 개선하기 위한 화장료 조성물의 용도로 유용하게 사용할 수 있음을 확인하였다.
따라서 본 발명은 베트남 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물을 제공함에 그 특징이 있으며, 상기 베트남 인삼 추출물은 베트남 인삼 전체를 사용할 수 있으며, 바람직하게는 인삼 뿌리 또는 세포배양 방법에 의해 생산된 인삼세포체를 사용할 수 있다.
또한 상기 인삼은 1년산 내지 11년산 인삼을 사용할 수 있으며, 바람직하게는 5년산 내지 11년산을 사용하는 것이 좋다. 이는 1년산에서 4년산에 비해 5년산에서 11년산의 베트남 인삼에는 majonoside R2이 약 4배~5배 이상 함유되어 있기 때문이다. 또한 생물공학적 방법으로 majonoside R2의 함량을 높인 배양 인삼세포체 또는 인삼뿌리 가공품을 사용할 수 있다.
상기 추출물은 물 또는 유기용매를 이용하여 수득한 추출물일 수 있으며 상기 유기용매로는 이에 제한되지는 않으나, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol), 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다. 보다 바람직하게는 메탄올 또는 에탄올을 사용할 수 있다.
추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다. 본 발명의 추출물의 제조방법에는 제한이 없으며, 공지되어 있는 어떠한 방법도 이용될 수 있다.
상기 majonoside R2 사포닌은 도 3의 구조식을 가지는 진세노사이드로서 이 화합물은 P. japonicus의 뿌리줄기에서 처음 규명되었고, 24(S)-OT 사포게닌(sapogenin)의 글리코실화와 관련되어 있다고 알려져 있다(Morita T, Kasai R, Tanaka O, Zhou J, Yang TR, Shoji J. Saponins of Zu-Tziseng, rhizomes of Panax japonicus C.A. Meyer var. major (Burk.) C. Y.. Wu et K. M. Feng, collected in Yunnan, China. Chem. Pharm. Bull 1982. 30:4341~4346). 그러나 아직까지 majonoside R2에 대한 생리학적 활성에 대해서는 연구가 거의 되어있지 않다.
본 발명에서 상기 majonoside R2 사포닌은 인삼, 인삼 가공품, 또는 배양 인삼 세포체로부터 추출 및 정제하여 사용할 수 있는데, majonoside R2 사포닌을 함유한 인삼이라면 모두 사용가능하고 바람직하게는 상기 사포닌을 다량 함유하고 있는 베트남 인삼 또는 응용제품으로부터 정제한 것을 사용할 수 있다.
상기 majonoside R2의 분리 및 정제는 실리카겔(silica gel)이나 활성 알루미나(alumina)등의 각종 합성수지를 충진한 컬럼 크로마토그라피(column chromatography) 및 고속액체크로마토그라피(HPLC) 등을 단독으로 혹은 병행하여 사용할 수 있다. 그러나 유효성분의 추출 및 분리정제 방법은 반드시 상기한 방법에 한정되는 것은 아니다.
또한, 본 발명에 따른 베트남 인삼 추출물 또는 majonoside R2를 주요 유효성분으로 포함하는 조성물은 여드름 개선을 위한 화장품(화장료) 조성물로 제조될 수 있는데, 이 경우, 본 발명의 조성물은 상술한 유효성분 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 상술한 유효성분들 이외에, 상기 유효성분들과 반응하여 피부보호 효과를 손상시키지 않는 한도에서 종래부터 사용되어오던 유기 자외선 차단제를 혼합하여 사용할 수도 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 본 발명의 화장료 조성물은 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.
본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소 결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로 플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 계면활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 단독 또는 중복하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용횟수를 달리할 수 있다.
이하 본 발명을 실시예에 의하여 더욱 상세하게 설명한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
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실시예
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시약
비타민 C, 대장균 리포폴리사카라이드(LPS, natural, purify≥97%), 젤라틴 및 그리스시약은 Sigma-Aldrich Chemical Co.(St. Louis, MO, USA)로부터 구입하였다. 소듐 도데실 설페이트(SDS: Sodium dodecyl sulfate), 류펩틴(leupeptin), 페닐메타노설포닐 플로라이드(PMSF: phenylmethanosulfonyl fluoride), 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH), HEPES, 및 2,7-dichlorofluorescein diacetate (DCFH-DA)는 Sigma-Aldrich Chemical Co.(St. Louis, MI, USA)로부터 구입하였다. Dulbeccos modified Eagles medium (DMEM), fetal bovine serum (FBS) 및 penicillin-streptomycin은 Gibco-BRL (Gaithersburg, MD, USA)로부터 구입하였다. 또한, L-tyrosine, L-DOPA, mushroom tyrosinase, Hyaluronic acid, agarose, hyaluronidase, aqueous cetylpyridinium chloride 역시 Sigma-Aldrich Chemical Co.(St. Louis, MO, USA)로부터 구입한 것을 사용하였다. 모든 다른 화합물은 시약 등급 또는 기준 이상인 것을 사용하였으며, 모든 실험은 적어도 3번 반복 수행하였다.
통계처리
실험결과는 평균±표준편차로 표기하였고, 그 결과들의 통계 분석하기 위하여 unpaired Student's t-test를 수행하였다. p 값이 0.05 미만일 때 통계적으로 유의하다고 판단하였다. IC50 값은 dose/response linear regression plots으로 부터 계산되었다.
<
실시예
1>
베트남 인삼 추출물 및 추출물에 함유된
majonoside
R2
의 분리
<1-1> 베트남 인삼 추출물의 제조
베트남 인삼의 뿌리를 Ngoc Linh Mountain in Kontum Province로부터 입수하였고, 깨끗이 세척한 후, 얇게 절단하고 50℃의 오븐에서 건조시켰다. 건조된 인삼 뿌리를 분쇄하여 분말을 수득한 후, 200mg의 베트남 인삼 뿌리 분말에 80% 메탄올을 2ml 첨가하여 상온에서 5시간 동안 소니케이션하였다. 이후 0.2um의 필터를 사용하여 여과시키고 증발기를 이용하여 농축시킴으로써 베트남 인삼의 뿌리의 메탄올 추출분말을 수득하였다.
<1-2> 베트남 인삼 추출물로부터
진세노사이드의
정제
<1-1>의 방법으로 수득한 추출물을 대상으로 HPLC 컬럼 크로마토그래프를 수행하였다. HPLC는 CBM-20A; Shimadzu Co, Ltd., Kyoto, Japan제품의 것으로 2 gradient 펌프 시스템이 겸비된 장치를 이용하였다. 컬럼으로는 3.0 m Unison UK-C18 (100 x 2 mm, Im- takt, Japan)을 이용하였다. 추출용매로는 아세토니트릴에 0.1%의 포름산이 함유된 용매(A)와 증류수(B)를 이용하였고, 컬럼 작동 프로그램은 0-2 min: 0-5%, 2-7 min: 5-50%, 7-15 min: 50-80%, 15-17 min: 80-5%, 및 iso-cratic 5% (17-20 min) 조건으로 수행하였다. 컬럼 작동 수행은 35℃에서 진행되었고 0.3ml/min의 유속으로 수행하였으며, 컬럼 주입 부피는 시료 2ul가 되도록 하였다.
또한 이때 사포닌 시료에 대한 보정 곡선을 위한 시험값은 하기 표 1에 기재된 것을 사용하였고, 회수 실험은 하기 계산식을 통해 수득한 평균 값을 이용하였다.
Recovery(%) = (observed amount - original amount)=(spiked amount)x 100%, with RSD(%) = (SD/mean) 100%
성분 및 함량 분석을 위해 HPLC 컬럼크로마토그래피가 수행된 시료를 대상으로 질량분석기를 이용하여 성분 분석을 수행하였다.
질량분석 방법은 electrospray ionization (ESI) 프로브가 장착된 Triple Quadrupole Mass (ThermoFisher, USA) 기기를 이용하여 수행하였고, negative ion mode, spray voltage 3.5 kV, capillary voltage 10 V, capillary temperature 350 C 파라미터 조건하에서, High-purity nitrogen (N2)을 sheath gas로 이용하고 sheath pressure을 35 units으로 하는 조건 하에서 분석하였다. 또한 아르곤을 1.5 mTorr 압력으로 collision gas로 사용하였으며 m/z 50 내지 2000의 범위로 풀스캔하였다.
모든 통계처리는 각 실험군당 mean value standard deviation (SD)으로 표시하였고, Excel 2007 (Microsoft, Redmond, WA, USA)을 이용하여 계산하였다.
하기 표 1은 진세노사이드의 보정 곡선을 나타낸 것이고, 하기 표 2는 표준시료 첨가 방법에 의한 진세노사이드의 회수(recovery)를 나타낸 것이다.
<
실시예
2>
베트남 인삼 추출물에 함유된
진세노사이드
성분 및 함량분석
실시예 1에서 수행한 베트남 인삼 추출물에 대한 HPLC 컬럼 크로마토그래프 분석을 토대로 베트남 인삼 추출물에 함유된 진세노사이드들의 종류 및 함량을 분석하였다. 하기 표 3은 연령별 베트남 인삼 추출물에 함유된 진세노사이드의 종류 및 함량을 나타낸 것이다.
분석결과, 상기 표 3에 나타낸 바와 같이, 베트남 인삼 추출물에는 6종류의 진세노사이드, 즉 Re, Rg1, Rb1, Rc, Rd 및 Rg3 (20(S)-Rg3, 20(R)-Rg3) and majonoside R2가 함유되어 있는 것으로 나타났다.
또한, 베트남 인삼 연령에 따른 진세노사이드의 함량 변화 분석을 살펴본 결과, 인삼 연령이 클수록 Ginsenoside Rb1, Rg1, Re 및 majonoside R2의 함량이 증가되는 것으로 나타났고, Ginsenoside Rg1은 1년산에서 11년산까지 지속적으로 증가되는 것으로 나타났다. 11년산 인삼에는 Rg1의 함량이 1년산에 비해 2.4배 높은 것으로 나타났다. 특히 majonoside R2는 베트남 인삼에 가장 많이 함유된 주요성분으로 확인되었는데, 1년산에서 4년산까지는 24.8mg/g에서 30.0mg/g으로 천천히 양이 증가하였으나, 5년산에서는 80.08mg/g으로 급격하게 함량이 증가된 것으로 나타났다. 5년 이후부터는 다시 천천히 그 양이 증가하는 것으로 나타났다(표 3 및 도 1 참조).
이러한 결과는 한국산 인삼과는 다른 결과를 보이는 것으로, 한국산 인삼과 베트남 인삼은 함유된 진세노사이드의 종류 및 함량이 서로 다르다는 것을 알 수 있었다.
<
실시예
3>
베트남 인삼 추출물의 여드름 개선 효과 분석
본 발명자들은 상기 실시예에서 수득한 베트남 인삼의 추출물을 여드름 개선을 위한 용도로 사용할 수 있는지 확인하기 위해 여드름성 병변을 가지고 있는 사람들을 대상으로 베트남 인삼의 추출물을 함유하는 수딩크림을 피부 표면에 도포하였다. 구체적으로 피부과 전문의사가 진단한 여드름성 피부를 보이는 피험자 22명을 대상으로 베트남 인삼 추출물을 적용한 군과 적용하지 않은 군을 대상으로 면포 유발 정도를 분석하였다.
분석결과, 하기 표에 기재된 바와 같이, 본 발명의 베트남 인삼 추출물을 피부에 도포한 군의 경우 대조군에 비해 면포 유발 정도가 현저하게 감소된 것으로 나타났고 육안 검사 결과에서도 피부 염증성 병변 중에서 농포(pustule) 및 구진(papule)이 유의하게 감소하는 것으로 나타났다. 하기 표에서 DO는 인삼 추출물을 도포하지 않은 군을 D28은 인삼 추출물을 도포한 군을 말한다. 하기 표 4는 본 발명의 베트남 인삼 추출물에 대한 여드름 개선 효과를 나타낸 것이고, 하기 표 5는 본 발명의 베트남 인삼 추출물에 대한 농포 및 구진감소 효과를 나타낸 것이다.
이상과 같은 결과를 통해 본 발명자들은 베트남 인삼 추출물, 특히 majonoside R2을 다량 함유하고 있는 베트남 인삼 추출물을 여드름 개선을 위한 화장품의 제조에 활용될 수 있음을 알 수 있었다.
<
실시예
4>
베트남 인삼 추출물의 피부 안정성 분석
본 발명의 실시예에서 수득한 베트남 인삼 추출물이 화장료 조성물로서 사용함에 있어 피부에 독성을 유발하지 않으며 피부 안정성을 갖는지 확인하기 위한 분석을 수행하였다.
이를 위해 베트남 인삼 추출물을 총 21명의 피험자를 대상으로 농도를 각기 달리하여 피부에 도포한 후, 1일 지난 후 피부 상태를 확인하였다.
분석결과, 21명 중 19명이 모두 피부에 이상이 유발되지 않는 것으로 나타났고 2명에게서는 피부 당김 효과가 일어났으나 그 정도는 미미한 수준이었다.
따라서 이러한 결과를 토대로, 본 발명의 베트남 인삼 추출물 또는 majonoside R2를 피부에 안정성이 우수하여 안전하게 피부 화장료 조성물로 활용될 수 있음을 알 수 있었다.
이하, 본 발명의 화장품 제형예로서 본 발명의 유효성분인 베트남 인삼 추출물을 함유하는 화장수, 에센스 등을 예시하고자 한다. 그러나, 본 발명의 화장료의 제형이 반드시 상기 제형에 한정되는 것은 아니다.
[
제형예
1] 스킨로션
하기와 같은 성분 및 함량을 첨가하여 스킨로션을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
베트남 인삼 추출물 - 2.0 중량 %, 1,3-부틸렌글리콜 - 5.2 중량 %, 올레일알코올 - 1.5 중량 %, 에탄올 - 3.2 중량 %, 폴리솔베이트 20 - 3.2 중량 %, 벤조페논9 - 2.0 중량 %, 카르복실비닐폴리머 - 1.0 중량 %, 글리세린 - 3.5 중량 %, 향 - 미량, 방부제 - 미량, 정제수 - 잔량 %
[
제형예
2] 에센스
하기와 같은 성분 및 함량을 첨가하여 에센스를을 통상의 방법에 따라 제조하였다.
베트남 인삼 추출물 - 2.0 중량 %, 세토스테아릴 알코올 - 1.0 중량 %, 글리세릴모노스테아레이트 - 0.8 중량 %, 소르비탄모노스테아레이트 - 0.3 중량 %, 포로필파라벤 - 0.1 중량 %, 폴리솔베이트 60 - 1.0 중량 %, 미네랄오일 - 5.0 중량 %, 사이크로메치콘 - 3.0 중량 %, 디메치콘 - 0.5 중량 %, 알란토인 - 0.1 중량 %, 글리세린 - 5.0 중량 %, 알코올 - 2 중량 %, 프로필렌글리콜 - 3.0 중량 %, 향 - 미량, 방부제 - 미량, 정제수 - 잔량 %
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
Claims (9)
- 베트남 인삼 추출물을 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 베트남 인삼 추출물은 건조된 인삼 뿌리,배양 인삼 세포체 또는 인삼 가공품의 물 또는 유기용매 추출물인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 제2항에 있어서,
상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 에테르, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트, 메틸렌클로라이드, 헥산 및 시클로헥산으로 이루어진 군중에서 선택되는 것임을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 베트남 인삼 추출물에는 메조노사이드 R2를 주요 성분으로 함유하고 있는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 베트남 인삼은 1년산 내지 11년산 인삼인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 제1항에 있어서,
상기 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 영양에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 립스틱, 메이컵 베이스, 파운데이션, 프레스파우더 및 루스파우더로 이루어진 군으로부터 선택된 1종으로 제형화 되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 메조노사이드 R2(majonoside R2) 진세노사이드를 주요 유효성분으로 포함하는 여드름 개선용 화장료 조성물.
- 제7항에 있어서,
상기 메조노사이드 R2는 베트남 인삼으로부터 분리한 것을 특징으로 하는 화장료 조성물. - 제8항에 있어서,
상기 메조노사이드 R2는 베트남 인삼의 뿌리 분말에 메탄올을 첨가하여 수득한 메탄올 추출물로부터 분리한 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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