KR20170004451A - 개똥쑥, 명월초 및 가시오가피를 이용한 항당뇨 조성물와 그를 이용한 식품 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 항당뇨 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 개똥쑥, 명월초 및 가시오가피(가시오갈피)의 추출물을 주성분으로 하여 시너지 효과를 극대화함으로써 종래 약품이나 생약재에 비해 항당뇨 효과가 현저히 우수하게 된 항당뇨 조성물에 관한 것이다.
상기와 같은 본 발명에 따른 항당뇨 조성물은 개똥숙, 명월초, 가시오가피의 열수추출물을 주성분으로 하는 것을 특징으로 한다.
상기와 같은 본 발명에 따른 항당뇨 조성물은 개똥숙, 명월초, 가시오가피의 열수추출물을 주성분으로 하는 것을 특징으로 한다.
Description
본 발명은 항당뇨 조성물 및 그를 이용한 식품에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 개똥쑥, 명월초 및 가시오가피(가시오갈피)의 추출물을 주성분으로 하여 시너지 효과를 극대화함으로써 종래 약품이나 생약재에 비해 항당뇨 효과가 현저히 우수하게 된 항당뇨 조성물 및 그를 이용한 식품에 관한 것이다.
본 발명의 발명자들은 수년 동안 항당뇨 기능성 식품에 대해 광범위한 기초 연구를 해온 결과 개똥쑥, 명월초 및 가시오가피의 추출물이 우수한 항당뇨 기능을 가진다는 사실을 밝혀냈다.
당뇨병은 서구의 식생활과 비슷해지면서 생긴 비만, 고혈압, 심장병, 동맥경화 같은 성인병 중 하나이다. 성인 인구의 10% 안팎을 차지할 만큼 심각한 문제로 대두되고 있고, 그 합병증 또한 심각하여 당뇨성 신경장애, 망막증, 동맥경화증 등을 유발하여 뇌졸중이나 심장병을 부르게 된다.
이러한 당뇨병의 치료를 위해 행해지는 것으로 식이요법이나 운동, 인슐린 분비를 위한 약물 복용이 있다. 그러나 시중에서 판매되고 있는 약물의 대부분은 그 효과가 충분하지 않을 뿐 아니라 특히 약물의 장기 투여로 말미암아 나타나는 부작용을 감수해야 한다는 문제점이 있다.
본 발명은 상기한 배경에서 안출된 것으로서, 본 발명의 목적은 기존의 재료나 추출물에 비해 항당뇨 효과가 우수한 조성물을 제공하는 것이다.
또한 자연물을 소재로 하여 장기 투여에 따른 부작용 등이 없는 항당뇨 조성물을 제공하는 것이다.
상기와 같은 목적을 갖는 본 발명에 따른 항당뇨 조성물은,
개똥쑥의 열수추출물을 주성분으로 하는 것을 특징으로 한다.
또한 본 발명에 따른 항당뇨 조성물은,
개똥숙, 명월초, 가시오가피의 열수추출물을 주성분으로 하는 것을 특징으로 한다.
이때 개똥쑥, 명월초, 가시오가피의 상기 열수추출물은 재료에 증류수를 첨가한 후 75~90℃에서 8~30시간 추출하는 것을 특징으로 한다.
또한 개똥쑥, 명월초, 가시오가피의 혼합비는 2 : 1 : 1 의 중량비인 것을 특징으로 한다.
본 발명은 또한, 가시오가피 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 명월초 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 개똥쑥 열수추출액의 농축액 1중량%, 홍삼농축액 1중량%, 홍삼분말 1중량%, 유당분말 30중량%, 꿀 3중량%, 말토덱스트린 54.5중량%, 구연산 3중량%, 스테아린산 마그네슘 1중량%, 카르복시메틸셀룰로오스칼슘 1중량%, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 1중량%, 비타민 C 1중량%, 결정셀룰로오스분말 1.5중량%로 이루어지는 항당뇨용 타정 제품인 것을 특징으로 한다.
또한 가시오가피 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 명월초 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 개똥쑥 열수추출액의 농축액 1중량%, 홍삼농축액 1중량%, 홍삼분말 1중량%, 꿀 3중량%, 유당분말 30중량%, 결정포도당 55.5중량%, 구연산 3중량%, 스테아린산 마그네슘 1중량%, 카르복시메틸셀룰로오스칼슘 1중량%, 비타민 C 1중량%, 결정셀룰로오스분말 1.5중량%로 이루어지는 항당뇨용 환 제품인 것을 특징으로 한다.
또한 가시오가피 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 명월초 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 개똥쑥 열수추출액의 농축액 1중량%, 홍삼농축액 1중량%, 홍삼분말 1중량%, 꿀 3중량%, 결정포도당 86.5중량%, 구연산 3중량%, 스테아린산 마그네슘 1중량%, 비타민 C 1중량%, 아스파탐 1.5중량%로 이루어지는 항당뇨용 하드 캡슐 제품인 것을 특징으로 한다.
또한 가시오가피 열수추출액의 농축액 0.15중량%, 명월초 열수추출액의 농축액 0.15중량%, 개똥쑥 열수추출액의 농축액 0.3중량%, 홍삼농축액 0.15중량%, 꿀 3중량%, 아가베시럽 5중량%, 비타민 C 1중량%, 정제수 90.25중량%로 이루어지는 항당뇨용 음료 제품인 것을 특징으로 한다.
본 발명에 따른 항당뇨 조성물은 우수한 항당뇨 효과를 갖는다.
더욱이 자연물을 소재로 함으로써 장기 투여에 따른 부작용 등이 없는 장점을 갖는다.
본 발명에 따른 항당뇨 조성물은 개똥쑥, 명월초 및 가시오가피의 추출물을 주성분으로 하여 시너지 효과를 극대화함으로써 종래 약품이나 생약재에 비해 항당뇨 효과가 현저히 우수하게 된 것을 특징으로 한다.
본 발명자들이 주목한 소재에 대해 간단한 설명한다.
<명월초>
명월초(Gynura procumbens)는 국화과의 식물로 인도네시아와 태국, 말레이시아에서 제한적으로 재배되고 사용되던 중요한 약용식물이다. 비타민과 무기질이 풍부하며, 주성분으로 flavonoid, coumarin, saponin 등이 함유되어 있다. 전통적으로 암, 당뇨, 고혈압, 요로 감염증, 국소적 피부염증, 류머티즘 및 가벼운 바이러스성 질환을 치료하는 항염증 및 항알러지 효과가 있다고 알려져 있다
<개똥쑥>
지상부로 줄기는 원기둥모양이고 위쪽에서 분지되었으며 길이 30~80cm, 지름 0.2~0.6cm이다. 겉은 황록색~황갈색이고 세로 능선이 있다. 질은 단단하고 잘 절단되며 절단면의 가운데에는 수(髓)가 있다. 잎은 마주나고 진한 녹색~녹갈색이며 부서지기 쉽다. 온전한 것은 펴면 3회 우상으로 심열하고 열편 및 소열편은 원형 또는 긴 타원형이며 양면에는 단모가 덮여 있다. 특유한 향기가 있고 맛은 약간 쓰다. 해열제, 지혈제, 피부병 치료제로도 이용되며, 그 외에 항균, 항바이러스 및 항산화 작용등도 알려져 있고 최근에는 유방암 세포에 대한 항암효과가 입증되어 있다.
<가시오가피>
가시오가피는 낙엽성 활엽 관목으로 두릅나무과에 속한다. 어린 잎 생김새는 산삼과 비슷하며, 중국, 일본, 한국의 지리산 등에 분포하고, 주로 깊은 산지의 계곡에 서식하는데, 점차 재배가 일반화 되어가고 있다. 가시오가피 추출물은 한방에서 다양하게 사용되는 약재 중의 하나로, 육질이 백색이고, 최근 약리학적, 기능성 생리활성 소재로 의미 있는 연구들이 진행되어지고 있다. 가시오가피의 효능에 관한 연구는 다양하게 이루어져 있으며, 지금까지 보고된 약리효과는 혈당 강화 효과, 체내 지질대사 개선 효과, 항바이러스 활성, 심근경색 치료 효과(Afanaseva 등 1987), 항산화체계 강화기능 등이 알려져 있다. 가시오가피의 항피로 효과(Dowling 등 1996), 항산화 작용, 항알러지 효과에 관한 연구도 알려져 있다.
이제 본 발명을 실시예와 함께 상세히 설명한다.
<실험방법>
1. 천연소재 추출방법 및 혼합비율
가시오가피, 명월초, 개똥쑥 각각의 시료 40g에 10.7배의 증류수를 넣은 후 80℃에서 24시간 shaking incubation 한 후 6,000 rpm에서 1시간 동안 원심분리하여 0.45㎛로 여과하였고 이를 실험에 사용하였다.
실험에 사용한 각각의 혼합비는 다음과 같다.
2. Glucose uptake 측정
천연소재 물추출물 처리에 따른 HepG2 세포의 glucose uptake 측정은 glucose uptake colorimetric assay kit (Biovision, Milpitas, CA, USA)을 이용하여 수행하였다. 즉, 세포를 96-well plates에 1 × 105 cells/mL로 분주한 뒤 24시간 동안 배양한 후 FBS가 포함되지 않은 배지로 교체하여 24시간 더 배양하였다. 배양된 세포는 2% BSA가 포함되어 있는 KRPH (Krebs ringer phosphate HEPES)로 교체하였다. 40분 후, 1 μM의 인슐린과 소재(0.25 mg/mL)를 처리하여 20 분간 동안 더 배양한 다음 10 mM 2-deoxyglucose를 20분간 처리하였다. 세포에 Assay buffer 8 μL와 enzyme mix A 2 μL를 처리한 후 37℃에서 1시간 동안 반응한 후 extraction buffer를 이용해 세포추출물을 회수하였다. 85℃에서 40분간 가열한 후 차갑게 식혔으며 neutralization buffer를 첨가하였다. 500 rpm에서 10초간 원심분리하고 상층액을 취하였으며, 각각의 well에 glutathione reductase 20 μL, DTNB [5-5'-dithiobis (2-nitrobenzoic acid)] 16 μL, recycling mix 2 μL를 첨가한 후 40분 동안 반응을 시켰으며 ELISA microplate reader (EL808, BioTek, Winooski, USA)를 사용하여 412 nm에서 흡광도를 측정하였다.
3. Glucokinase(GK) 활성도 측정
GK 활성은 hexokinase colorimetric assay kit (Abcam, Cambridge, MA, USA)를 이용하였다. GK 활성에 의해 생성된 glucose-6-phosphate (G6P)가 G6P dehydrogenase (G6PDH)와 반응할 때 nicotinamide adenine dinucleotide (NAD+)가 NADH로 환원되는 것을 이용하여 GK 활성도를 측정하였다. HepG2 세포에 소재 (1 mg/mL)을 24시간 배양한 후 단백질을 정량하여 각 well 당 40 μg/50 μL씩 처리한 후 각 well 당 assay buffer 34 μL, enzyme Mix 2 μL, developer 2 μL, coenzyme 2 μL, hexokinase 10 μL을 처리한 후 450 nm에서 3분 간격으로 흡광도를 측정하였다.
4. Pyruvate dehydrogenase(PDH) 활성도 측정
PDH 활성은 PDH activity assay kit (Novagen, EMD Millipore Corporation, Darmstadt, Germany)를 이용하였다. PDH 활성도는 PDH 활성에 의해 NAD+가 NADH로 환원되는 원리를 이용하여 측정하였다. 실험은 HepG2 세포에 소재(1 mg/mL)를 24시간 배양한 후 단백질을 정량하여 각 well 당 100 μg/0.2 mL씩 분주 한 후 실온에서 3시간 incubation 한 다음 suction하고 1X stabilizer로 2회 세척 후 20X reagent Mix 11 μL, 1X buffer 0.2 mL, 100X coupler 2.25 μL, 100X reagent Dye 2.25 μL을 처리한 후 450 nm에서 3분 간격으로 흡광도를 측정하였다.
5. Western blot
HepG2세포를 6-well plates에 1 × 106 cells/mL로 분주한 뒤 24시간 동안 배양한 후 소재를 처리하여 24시간 더 배양한 다음 lysis buffer (10 mM Tris-HCl, pH 7.4, 0.1 M EDTA, 10 mM NaCl, 0.5% Triton X-100, protease inhibitor Cocktail)를 이용하여 4℃에서 용해시킨 후 원심분리 (14,000 rpm, 10 min, 4℃) 하여 얻은 단백질의 농도를 측정하였다. 동일한 양의 단백질 (30 μg)과 β-mercaptoethanol를 포함한 sample buffer를 1:1로 혼합한 후 100℃에서 3분간 가열하였다. 준비된 단백질 샘플은 Bio-Rad mini-gel system를 이용하여 SDS-PAGE 후 polyvinylidene fluoride membrane (0.45 ㎛, PVDF transfer membrane, Thermo, Rockford, IL, USA)으로 단백질을 전이하였다. Membrane은 0.1% Tween 20과 5% Skim milk를 함유한 Tris-buffered saline (TBS)에 1시간 동안 blocking 하였다. 그 후 1차 antibody(pACL)가 첨가된 buffer에서 1시간 동안 반응한 후 TBS-T (TBS containing 0.1% tween-20)로 5분간 3차례에 걸쳐 세척하였다. 그런 다음 membrane은 2차 anti-rabbit IgG conjugates horseradish peroxidase antibody (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA)가 첨가된 buffer를 넣고 상온에서 1시간 동안 반응한 후 5분 단위로 3차례에 걸쳐 세척하였다. 발색은 enhanced chemiluminescence method를 이용하여 x-ray 필름에 감광시켰다. 그 밴드의 강도는 imageJ (National institutes of health, Bethesda, MD, USA) 소프트웨어를 이용하여 분석 정량하였다. 내부표준단백질은 GAPDH (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA)를 사용하였다.
6. 통계
실험에서 얻어진 결과의 통계적 유의성은 SPSS(statistical package for social science, Version 10.0, Chicago, USA) program을 이용하여 실험군당 mean ± SD로 표시하였고, one-Way ANOVA test 후 p < 0.05 수준에서 각 실험군 간의 유의성을 검증하였다.
<실험결과>
1. Glucose uptake 실험결과
소재별 glucose uptake(Fig. 1A)는 대조군(1.0) 대비 가시오가피(2.96배), 명월초(3.43배), 개똥쑥(2.57배)으로 유의적인 증가를 나타냈다.
혼합비에 따른 glucose uptake(Fig. 1B)는 Mix1(5.75배), Mix2(5.19배), Mix3(4.49배)로 유의적인 증가를 나타냈다.
2. GK activity 실험결과
소재별 glucokinase의 활성(Fig. 2A)은 대조군(1.0) 대비 가시오가피(1.54배), 명월초(1.72배), 개똥쑥(1.95배)로 유의적인 활성 증가를 나타냈다.
혼합비에 따른 glucokinase의 활성(Fig. 2B)은 Mix1(2.53배), Mix2(2.73배), Mix3(3.71배)로 유의적인 활성 증가를 나타냈다.
3. PDH activity 실험결과
소재별 pyruvate dehydrogenase의 활성(Fig. 3A)은 대조군(1.0) 대비 가시오가피(2.01배), 명월초(2.43배), 개똥쑥(2.31배)로 유의적인 활성 증가를 나타냈다.
혼합비에 따른 pyruvate dehydrogenase의 활성(Fig. 3B)은 Mix1(2.60배), Mix2(2.33배), Mix3(1.87배)로 유의적인 활성 증가를 나타냈다.
4. pACL 단백질 발현 실험결과
소재별 pACL 단백질 발현 실험결과(Fig. 4A) 대조군(1.0) 대비 가시오가피 1.0mg/ml(2.64배), 명월초 1.0mg/ml(3.40배), 개똥쑥1.0mg/ml(3.12배)로 유의적인 활성 증가를 나타냈다.
혼합비에 따른 pACL 단백질 발현 실험결과(Fig. 2B)는 Mix1(1.83배), Mix2(2.04배), Mix3(3.42배)로 유의적인 활성 증가를 나타냈다.
5. 배합비 선정
위 실험결과를 모두 종합하여 최적의 혼합비로서 Mix 3을 선정하였다.
<제조예>
이하 본 발명에 따른 항당뇨 조성물을 활용한 식품의 제조예를 예시한다(하기 원재료에서 농축액은 전술한 열수추출 방법으로 추출한 후 55~65Brix로 농축한 것을 사용하였다).
1. 타정 제품
2. 환 제품
3. 하드캡슐 제품
4. 음료 제품
Claims (8)
- 개똥쑥의 열수추출물을 주성분으로 하는 항당뇨 조성물.
- 제1항에 있어서,
개똥숙, 명월초, 가시오가피의 열수추출물을 주성분으로 하는 항당뇨 조성물. - 제2항에 있어서,
개똥쑥, 명월초, 가시오가피의 열수추출물은 재료에 증류수를 첨가한 후 75~90℃에서 8~30시간 추출하는 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물. - 제2항 또는 제3항에 있어서,
개똥쑥, 명월초, 가시오가피의 혼합비는 2 : 1 : 1 의 중량비인 것을 특징으로 하는 항당뇨 조성물. - 가시오가피 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 명월초 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 개똥쑥 열수추출액의 농축액 1중량%, 홍삼농축액 1중량%, 홍삼분말 1중량%, 유당분말 30중량%, 꿀 3중량%, 말토덱스트린 54.5중량%, 구연산 3중량%, 스테아린산 마그네슘 1중량%, 카르복시메틸셀룰로오스칼슘 1중량%, 히드록시프로필메틸셀룰로오스 1중량%, 비타민 C 1중량%, 결정셀룰로오스분말 1.5중량%로 이루어지는 것을 특징으로 하여 제조되는, 항당뇨용 타정 제품.
- 가시오가피 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 명월초 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 개똥쑥 열수추출액의 농축액 1중량%, 홍삼농축액 1중량%, 홍삼분말 1중량%, 꿀 3중량%, 유당분말 30중량%, 결정포도당 55.5중량%, 구연산 3중량%, 스테아린산 마그네슘 1중량%, 카르복시메틸셀룰로오스칼슘 1중량%, 비타민 C 1중량%, 결정셀룰로오스분말 1.5중량%로 이루어지는 것을 특징으로 하여 제조되는, 항당뇨용 환 제품.
- 가시오가피 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 명월초 열수추출액의 농축액 0.5중량%, 개똥쑥 열수추출액의 농축액 1중량%, 홍삼농축액 1중량%, 홍삼분말 1중량%, 꿀 3중량%, 결정포도당 86.5중량%, 구연산 3중량%, 스테아린산 마그네슘 1중량%, 비타민 C 1중량%, 아스파탐 1.5중량%로 이루어지는 것을 특징으로 하여 제조되는, 항당뇨용 하드 캡슐 제품.
- 가시오가피 열수추출액의 농축액 0.15중량%, 명월초 열수추출액의 농축액 0.15중량%, 개똥쑥 열수추출액의 농축액 0.3중량%, 홍삼농축액 0.15중량%, 꿀 3중량%, 아가베시럽 5중량%, 비타민 C 1중량%, 정제수 90.25중량%로 이루어지는 것을 특징으로 하여 제조되는, 항당뇨용 음료 제품.
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|---|---|---|---|
| KR1020150094809A KR101824769B1 (ko) | 2015-07-02 | 2015-07-02 | 개똥쑥, 명월초 및 가시오가피를 이용한 항당뇨 조성물와 그를 이용한 식품 |
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Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200072980A (ko) * | 2018-12-13 | 2020-06-23 | 박서영 | 개똥쑥 추출물을 이용한 맛과 약효를 극대화한 건강보조식품제조방법 |
-
2015
- 2015-07-02 KR KR1020150094809A patent/KR101824769B1/ko active IP Right Grant
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200072980A (ko) * | 2018-12-13 | 2020-06-23 | 박서영 | 개똥쑥 추출물을 이용한 맛과 약효를 극대화한 건강보조식품제조방법 |
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