KR20160107615A - composition for natural nematicidal and extraction method of hyun poplar showing nematicidal activity - Google Patents
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Abstract
Description
본 발명은 천연 살선충 조성물 및 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함한 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충을 방제하기 위한 천연 살선충 조성물 및 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법에 관한 것이다.
The present invention relates to a natural fungicide composition and a method for producing an Angelica keiskei L. extract having nematode activity. More particularly, the present invention relates to a method for controlling a nematode which is harmful to coniferous trees including various horticultural crops, edible crops and pine trees A natural fungicide composition and a method for producing an Angelica japonica extract having nematicidal activity.
현재 우리나라에는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 의해 발생하는 소나무재선충병에 의해 소나무와 잣나무가 심각한 피해를 입고 있다. '소나무에이즈'라고도 불리 우는 이 식물병은 한번 감염되면 치료가 되지 않고 거의 모든 소나무가 고사된다. 우리나라의 경우 남부지방에서는 주로 소나무가 피해를 입고 있고, 중부지방에서는 잣나무가 주로 피해를 입고 있다.At present, there are pine tree bruises ( Bursaphelenchus xylophilus ) caused by the pine tree and pine trees are seriously damaged. This plant disease, also known as "pine tree aids", is not treated once it is infected and almost all pine trees are killed. In Korea, pine trees are mainly damaged in the southern region, and pine trees are mainly damaged in the central region.
소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)은 분류학상으로 후생동물아계(Metazoa), 진정후생동물(Eumetazoa), 좌우대칭동물(Bilateria), 의체강동물(Pseudocoelomata), 선충문(Nematoda, Nemata)에 속하는 동물로서 실모양을 하고 있다. 길이는 1 mm도 안되지만 번식력은 놀라워 한 쌍이 20일 만에 20만 마리로 늘어날 정도이다. 재선충은 스스로 나무에 침입하거나 나무 사이를 이동할 수 없고 반드시 매개충을 통해야만 가능하다. 매개충인 솔수염하늘소(Monochamus alternatus) 또는 북방솔수염하늘소(M. saltuarius)는 주로 병든 소나무나 잣나무를 선택해 알을 낳는데, 바로 재선충에 감염된 나무에 낳은 매개충의 알이 봄에 번데기로 될 때 재선충이 주위에 모이게 되고, 매개충이 5월 중순 ~ 7월 하순 동안 우화(羽化)할 때 몸에 붙어 있는 재선충도 함께 이동한다. 목질부를 탈출한 매개충은 건전한 나무의 새로 자란 가지(1 ~ 2년생 가지)를 주로 갉아먹으며, 이 때 생긴 상처를 통하여 소나무재선충을 감염시킨다. 병든 소나무의 경우 잎 전체가 갈색으로 변하면서 보통 1년 안에 말라 죽고 만다.Pine reeves ( Bursaphelenchus xylophilus is a taxonomic animal that belongs to the family Metazoa, Eumetazoa, Bilateria, Pseudocoelomata, Nematoda, and Nemata. . The length is not less than 1 mm, but the breeding power is amazing, so the pair will increase to 200,000 in 20 days. A re-infestation can not enter a tree by itself or move between trees, and it is only possible through a mediator. Monochamus alternatus or M. saltuarius , which is an insect species , mainly produces diseased pine trees or pine trees and lays eggs. When the eggs of the parasites born in the trees infected with the re-infestation become pupa in the spring, When they are gathered around, and when the fowls emerge during the middle of May to the end of July, the rewinds attached to the body move together. The foliage that escapes from the woody part mainly feeds on newly grown branches (1-2 year old branches) of a healthy tree, and infects pine tree rehabilitate through the wound. In the case of diseased pine trees, the whole leaf turns brown and usually dies within one year.
1905년 일본에서 처음으로 발병한 소나무재선충병의 원인은 오랜 세월 규명이 되지 않다가 1970년에 이르러 비로소 원인이 밝혀졌다. 일본의 경우 이 병에 의해 역사적 가치가 높은 조경수를 제외하고는 대부분의 소나무 자생림이 사라졌다. 우리나라의 경우에는 1988년 부산 금정산에서 처음으로 발생하였는데, 초기에는 항공 살포에 의한 매개충 박멸, 감염목의 조기 발견 및 제거, 감염목 주변나무들의 적극적인 수간 주입 등으로 부산 일대에서만 발병할 뿐 잠잠했다. 하지만 살충제의 항공 살포에 의한 꿀벌 등의 유익충에 대한 피해, 환경오염 등의 이유로 인한 환경단체 중심의 항의 시위 및 국민들의 피해목 이동 등으로 효과적인 방제가 진행되지 못하였고, 결국에는 전국에 걸쳐서 소나무재선충병이 발병하게 되었다.The cause of pine wilt disease, which first occurred in Japan in 1905, has not been elucidated for a long time. In Japan, most of the pine native forests have disappeared, except for landscape plants with high historical value. In Korea, the first case occurred in 1988 in Geumjeongsan, Busan. In the early days, it was only eradicated in Busan area due to the eradication of airplanes, early detection and elimination of infected trees, and active injection of trees around the infected tree. However, due to damage to beneficial insects such as bees by air spraying of insecticides, protests by environmental groups due to environmental pollution, and movement of victims by the people, there was no effective control, and in the end, A re-infectious disease was caused.
소나무재선충은 소나무속(Pinus) 뿐만 아니라 전나무속(Abies), 가문비나무속(Picea), 잎갈나무속(Larix)의 일부 수종 등도 가해하는 것으로 알려져 있다. 우리나라의 경우 경상도, 전라도 및 강릉 지역은 주로 소나무에서 발병된 반면에 강원도 서부 지역과 경기도에서는 주로 잣나무에서 발병이 되었다. 남부지방과 중부지방의 수목 피해종의 이러한 차이는 소나무재선충을 매개하는 매개충의 차이에 의한 것으로 알려져 있다. 남부지방의 경우 솔수염하늘소의 밀도가 높고, 중부지방의 경우 북방솔수염하늘소의 밀도가 높은데, 이들 매개충이 선호하는 식물체가 서로 다르기 때문인 것으로 추정되고 있다.It is known that pine reeves do not only affect Pinus , but also some species of Abies , Picea and Larix . In Korea, Gyeongsang Province, Jeolla Province and Gangneung regions were predominantly in pine trees, while in the western part of Gangwon Province and in Gyeonggi Province, they were predominantly in pine trees. These differences in the tree-damaged species in the southern and central regions are known to be due to differences in the mediators that mediate pine tree re-growth. In the southern region, the densities of the dung beetles are high. In the central region, the densities of the northern dung beetles are high, which is presumed to be due to the fact that the preferred plants differ from each other.
이 식물병을 방제하기 위한 방법으로는, 1) 건전한 나무에 살선충약제의 예방적인 수간 주입, 2) 매개충 방제를 위한 합성 살충제 또는 길항 미생물의 항공 살포, 3) 감염목으로부터 재선충과 매개충을 방제하기 위한 감염목의 파쇄, 연소 및 훈증 등의 방법이 있다. 하지만 수간 주입법과 감염목 방제 방법은 비용이 많이 들고 높은 산악지대에 있는 소나무림에 대한 방제의 어려움 등으로 인하여 효과적인 방법이 되지 못한다. 합성 살충제의 경우 매개충이 주로 활동하는 5월 내지 7월에 약제를 항공 살포할 경우 가장 효과적인 방법이기는 하나, 합성 살충제의 부작용으로 인하여 도시 및 인근 지역에 살포할 수 없다는 문제점이 있다. 길항 미생물의 살포에 의한 친환경적인 매개충 방제 방법도 있지만, 아직 합성살충제에 비하여 효과가 떨어져 그다지 효과적이지 못한 실정이다. 유기합성농약의 효과는 우수하지만 지속적인 사용과 남용으로 인한 유익충의 감소, 저항성 발달 및 인축에 대한 독성 등의 문제점이 발생하고 있다.Methods for controlling this plant disease include: 1) prophylactic injection of nematicide into a healthy tree, 2) aerial spraying of synthetic pesticides or antagonistic microorganisms for controlling the pest, 3) Such as disruption of the infected tree, combustion and fumigation. However, the injection method and infectious tree control method are not cost effective and can not be effectively applied due to the difficulty of controlling pine forest in high mountainous area. Synthetic insecticides are the most effective method for aerial spraying of medicines from May to July when medicines are mainly active, but they are not applicable to urban and nearby areas because of the side effects of synthetic insecticides. Although there are methods to control environmentally friendly mediators by the application of antagonistic microorganisms, it is not effective yet because it is less effective than synthetic pesticides. Although the effect of organic synthetic pesticides is excellent, there are problems such as reduction of benefit benefit due to continuous use and abuse, development of resistance and toxicity to make up.
이에 따라 새로우면서도 효과적인 친환경 방제방법의 개발이 필요한 상황이다.
Accordingly, it is necessary to develop a new and effective environmentally friendly control method.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 본 발명이 해결하려는 과제는 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함한 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충을 방제하기 위한 천연 살선충 조성물 및 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.Disclosure of Invention Technical Problem [8] Accordingly, the present invention has been made to solve the above-mentioned problems, and an object of the present invention is to provide a natural nematocide composition for controlling nematodes, which severely damage coniferous trees including horticultural crops, edible crops, And to provide a method for producing an extract of Angelica keiskanosa having a nematicidal activity.
특히, 소나무, 잣나무 등에 기생해 나무를 가해하는 선충인 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 갖는 천연 살선충 조성물 및 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.
In particular, it is an object of the present invention to provide a natural fungicide composition having a nematicidal activity against a pine reovirus, which is a nematode which is parasitic to a tree, such as pine and pine, and a method for producing an extract of a silkworm.
상술한 과제를 해결하기 위해 본 발명은, 은사시나무를 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법을 제공한다.In order to solve the above-described problems, the present invention provides a method for producing an Angelica japonica extract having a nematode activity, comprising the step of extracting hot water of an Angelica japonica by a hot water extraction method.
또한, 본 발명은 은사시나무를 알코올 용매로 추출하여 알코올 추출물을 수득하는 단계 및 상기 알코올 추출물을 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법을 제공한다.The present invention also relates to a method for producing an extract of Angelica keiskanosa having domesticated nematode activity comprising the steps of extracting an Alcoholic Extract with an alcohol solvent and extracting the Alcohol Extract with hot water to prepare a hot water extract of Hangusshi to provide.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 본 발명의 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법의 상기 은사시나무 추출물은 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.According to a preferred embodiment of the present invention, the method of the present invention for producing a medicinal plant extract having the nematocidal activity of the present invention may have a carnivorous activity against Bursaphelenchus xylophilus .
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법의 상기 은사시나무 추출물은 상기 은사시나무 추출물은 하기 수학식 1에 의거할 때, 처리 48시간 이후 80 ~ 100% 살선충율을 보일 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the method of the present invention for preparing a medicinal herb extract having the nematicide activity according to the present invention is characterized in that the medicinal extract of the present invention has the following characteristics: ~ 100% live nematode.
[수학식 1][Equation 1]
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법의 상기 열수추출은 90 ~ 130℃의 온도에서 증류수 용매로 추출할 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the hot-water extraction of the method of the present invention for extracting Rosaceae having the nematode activity can be carried out with a distilled water solvent at a temperature of 90 to 130 ° C.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법의 상기 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함하고, 은사시나무의 수피 및 목질부 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the method of the present invention for producing a medicinal herb extract having the nematicide activity further comprises at least one of a bark of wood can do.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법은 상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획하여 분획물을 제조하는 단계를 더 포함할 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the method of the present invention for producing an alfalfa extract having Salicornia spp. Activity is characterized in that the alfalfa extract is extracted with an extraction solvent containing chloroform (CHCl 3 ) The method comprising the steps of:
한편, 본 발명은 은사시나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 천연 살선충 조성물을 제공한다.Meanwhile, the present invention provides a natural fungicide composition comprising an extract of Arismaceae as an active ingredient.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물일 수 있다.According to a preferred embodiment of the present invention, the above-mentioned alfalfa extract of the natural fungicide composition of the present invention may be a hot spring water extract of Alfalfa sp.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 알코올 용매로 추출한 알코올 추출물을 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물일 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the natural spring nematode extract of the present invention may be a hot spring water extract of Alaska pollack obtained by hot extraction of an alcoholic extract obtained by extracting Alaska pollack with an alcohol solvent.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획한 분획물일 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the natural spring nymph composition of the present invention is obtained by fractionating the hot spring water extract of Angelica gigas Nakai, which is obtained by extracting hot spring water, with an extracting solvent containing chloroform (CHCl 3 ) Lt; / RTI >
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 알코올 용매로 추출한 알코올 추출물을 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획한 분획물일 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the natural spring nymph composition of the present invention comprises the extract of Angelica keiskei koidz. Obtained by hot extraction of an alcoholic extract obtained by extracting an alcoholic bean tree with an alcoholic solvent, in chloroform (CHCl 3 ) And the like.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함하고, 은사시나무의 수피 및 목질부 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the natural spring nymph composition of the present invention may further comprise at least one of the bark and the woody part of the Eclipse tree.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물은 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the natural nematicide composition of the present invention may have carnivorous activity against Bursaphelenchus xylophilus .
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물은 하기 수학식 1에 의거할 때, 처리 48시간 이후 80 ~ 100% 살선충율을 보일 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the natural nematicide composition of the present invention can show an 80-100% live nematode rate after 48 hours of treatment, based on the following formula (1).
[수학식 1][Equation 1]
나아가. 본 발명은 앞서 언급한 천연 살선충 조성물을 포함하는 천연 살선충제를 제공한다.Furthermore. The present invention provides natural nematocides comprising the aforementioned natural nematicide compositions.
이 때, 상기 천연 살선충제는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.
At this time, the naturally occurring nematode is a benthic pheasant ( Bursaphelenchus RTI ID = 0.0 > xylophilus . < / RTI >
한편, 은사시나무 추출물은 은사시나무를 이용하여 본 기술분야에서 속하는 통상의 지식을 가진 자에게 알려진 식물 추출방법을 적용하여 추출된 추출물을 포괄하는 개념으로, 본 발명의 은사시나무 추출물은 은사시나무 열수 추출물 또는 상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획한 분획물일 수 있다.
Meanwhile, the extract of the present invention contains the extract of the present invention, which is obtained by applying the plant extract method known to those who have ordinary knowledge in the art using the artificial tree, Or a fraction obtained by fractionating the hot spring water extract with an extracting solvent containing chloroform (CHCl 3 ).
본 발명의 천연 살선충 조성물 및 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법은 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함한 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충을 방제할 수 있다.The naturally occurring nematicidal composition of the present invention and the method for producing the extract of Angelica keiskanosa having the nematode activity can control nematodes that cause great damage to coniferous trees including various horticultural crops, edible crops, and pine trees.
특히, 소나무, 잣나무 등에 기생해 나무를 가해하는 선충인 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.
In particular, it can have a live nematode activity against a pine reovirus, which is a nematode that attaches a parasitic tree to pine trees and pine trees.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
상술한 바와 같이 현재 우리나라에는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 의해 발생하는 소나무재선충병에 의해 소나무와 잣나무가 심각한 피해를 입고 있다. '소나무에이즈'라고도 불리 우는 이 식물병은 한번 감염되면 치료가 되지 않고 거의 모든 소나무가 고사된다. 우리나라의 경우 남부지방에서는 주로 소나무가 피해를 입고 있고, 중부지방에서는 잣나무가 주로 피해를 입고 있다.As described above, pine and pine trees are seriously damaged by the pine wilt disease caused by Bursaphelenchus xylophilus in Korea. This plant disease, also known as "pine tree aids", is not treated once it is infected and almost all pine trees are killed. In Korea, pine trees are mainly damaged in the southern region, and pine trees are mainly damaged in the central region.
이 식물병을 방제하기 위한 방법으로는, 1) 건전한 나무에 살선충약제의 예방적인 수간 주입, 2) 매개충 방제를 위한 합성 살충제 또는 길항 미생물의 항공 살포, 3) 감염목으로부터 재선충과 매개충을 방제하기 위한 감염목의 파쇄, 연소 및 훈증 등의 방법이 있다. 하지만 수간 주입법과 감염목 방제 방법은 비용이 많이 들고 높은 산악지대에 있는 소나무림에 대한 방제의 어려움 등으로 인하여 효과적인 방법이 되지 못한다. 합성 살충제의 경우 매개충이 주로 활동하는 5월내지 7월에 약제를 항공 살포할 경우 가장 효과적인 방법이기는 하나, 합성 살충제의 부작용으로 인하여 도시 및 인근 지역에 살포할 수 없다는 문제점이 있다. 길항 미생물의 살포에 의한 친환경적인 매개충 방제 방법도 있지만, 아직 합성살충제에 비하여 효과가 떨어져 그다지 효과적이지 못한 실정이다. 유기합성농약의 효과는 우수하지만 지속적인 사용과 남용으로 인한 유익충의 감소, 저항성 발달 및 인축에 대한 독성 등의 문제점이 발생하고 있다.Methods for controlling this plant disease include: 1) prophylactic injection of nematicide into a healthy tree, 2) aerial spraying of synthetic pesticides or antagonistic microorganisms for controlling the pest, 3) Such as disruption of the infected tree, combustion and fumigation. However, the injection method and infectious tree control method are not cost effective and can not be effectively applied due to the difficulty of controlling pine forest in high mountainous area. Synthetic insecticides are the most effective method for aerial spraying of medicines from May to July when medicines are mainly active, but they are not applicable to urban and nearby areas because of the side effects of synthetic insecticides. Although there are methods to control environmentally friendly mediators by the application of antagonistic microorganisms, it is not effective yet because it is less effective than synthetic pesticides. Although the effect of organic synthetic pesticides is excellent, there are problems such as reduction of benefit benefit due to continuous use and abuse, development of resistance and toxicity to make up.
이에 따라 새로우면서도 효과적인 친환경 방제방법의 개발이 필요한 상황이다.
Accordingly, it is necessary to develop a new and effective environmentally friendly control method.
이에 본 발명은 은사시나무를 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하는 단계를 포함하는 은사시나무 추출물의 제조방법을 제공함으로써 상술한 문제의 해결을 모색하였으며, 이를 통해 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함한 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충을 방제할 수 있다.Accordingly, the present invention has been made to solve the above-mentioned problems by providing a method for producing an extract of a medicinal plant of the United States of America including the step of extracting hot spring water of an Aspinus edulis tree to produce a hot water extract of a Sugarcane tree. As a result, various horticultural crops, It is possible to control nematodes that cause great damage to coniferous trees including trees.
특히, 소나무, 잣나무 등에 기생해 나무를 가해하는 선충인 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.
In particular, it can have a live nematode activity against a pine reovirus, which is a nematode that attaches a parasitic tree to pine trees and pine trees.
본 발명은 은사시나무를 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하는 단계를 통해 은사시나무 추출물을 제조할 수 있다.The present invention can be used to produce an Angelica japonica extract by the step of extracting hot spring water of an Aspinus edulis tree to produce a hot water extract of Aspinus edulis.
상기 은사시나무 추출물은 통해 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함한 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충에 대한 살선충 활성을 가지는 물질로서, 바람직하게는 소나무, 잣나무 등에 기생해 나무를 가해하는 선충인 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.
The above-mentioned Esashi tree extract is useful as a nematode-activating substance for nematodes, which is harmful to coniferous trees including various horticultural crops, edible crops and pine trees. Preferably, it is a nematocide It may have a live nematode activity against Bursaphelenchus xylophilus .
한편, 본 발명의 은사시나무(학명 : Populus tomentiglandulosa)는 사시나무(P. davidiana)와 은백양(P. alba) 사이에서 생긴 자연잡종이다. 생물학적 분류로 식물계(Plantae) 피자식물문(Angiospermae) 쌍떡잎식물강(Dicotyledoneae) 버드나무목(Salicales) 버드나뭇과(Salicaceae)에 속화는 식물체로서, 수피가 은색이며 군식하면 특히 낙엽이 진 후의 겨울철 수간이 아름다워 가로수 식재나 유도식재, 완충식재로 이용될 수 있다.On the other hand, eunsasi tree of the present invention (the scientific name: Populus tomentiglandulosa ) is a natural hybrid between the strains of P. davidiana and P. alba . Biological Classification Plantae Angiospermae Dicotyledoneae Salicales Bird seeds (Salicaceae) are plants that have a bark of silver, and are particularly susceptible to winter when the plant is dead. It can be used as a street tree planting, an inductive planting material, a buffering planting material.
한편, 은사시나무는 다른 명칭으로 현사시나무로 불리기도 하는데, 구체적으로, 현사시나무는 사시나무(P. davidiana)와 은백양(P. alba) 사이에서 생긴 인공잡종으로서 은사시나무와 동일한 학명을 사용한다. 따라서, 본 발명의 은사시나무는 인공잡종인 현사시나무를 포함하는 개념일 수 있다.On the other hand, the silkworm tree is also called as a mossy shrub tree. In other words, the mongolian silkworm is the artificial hybrid between P. davidiana and P. alba . Therefore, the present invention can be applied to a concept including a mosquito tree, which is an artificial hybrid.
나무의 구조를 살펴보면, 수간의 안쪽에서부터 바깥쪽으로 심재부와 변재부를 포함하는 목질부, 형성층 및 수피로 구성될 수 있다. As to the structure of the tree, it can be composed of woody parts including a core part and a decay part, a cambium layer and a sapwood from the inside to the outside of the water.
달리 말하면, 나무의 형성층을 중심으로 형성층의 바깥쪽에는 수피가 형성될 수 있고, 형성층의 안쪽에는 목질부가 형성될 수 있으며, 본 발명에 사용되는 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함할 수 있으며, 바람직하게는 은사시나무의 형성층을 포함하고, 은사시나무의 수피 및 목질부 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.
In other words, the bark may be formed on the outer side of the forming layer and the woody part may be formed on the inner side of the forming layer. The foaming agent used in the present invention may include a forming layer of the foaming agent, Preferably a camphor tree, and may further comprise at least one of a bark and woody part of an Eclipse tree.
상기 은사시나무는 일반적인 용매 추출법을 적용하여 추출할 수 있는데, 용매로서 증류수를 사용하고 열을 가하는 열수 추출을 통해 은사시나무 열수 추출물을 제조할 수 있다.The above-mentioned tree can be extracted by applying a general solvent extraction method, and the hot water extract of Saccharomyces cerevisiae can be prepared through the hot water extraction using distilled water as a solvent.
바람직하게는 상기 은사시나무는 90 ~ 130℃, 바람직하게는 100 ~ 125℃의 온도에서 증류수를 용매로 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조할 수 있으며, 상기 범위를 만족할 때, 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가지는 추출물을 수득하기 우수할 수 있다.Preferably, the suspension is extracted with distilled water at a temperature of 90 to 130 DEG C, preferably 100 to 125 DEG C to produce a hot spring water extract of A. falciparum. When the above range is satisfied, bursaphenlenchus xylophilus ) of the present invention can be obtained.
이와 같이, 은사시나무를 열수 추출을 통해 은사시나무의 추출물을 제조하는 이유는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가지는 추출물을 수득하기 위한 것이며, 만일 열수 추출이 아닌 메탄올, 에탈올 등의 알코올 용매를 사용하여 은사시나무 추출물을 수득한다면 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가지는 추출물이 수득되지 않을 수 있다.Thus, the reason for producing the extract of Esashi tree through hot water extraction is to obtain an extract having a nematicidal activity against Bursaphelenchus xylophilus . If the extract is not hydrothermal extraction, methanol, ethanol If an alcoholic beverage is used to obtain an Alabaster tree extract, an extract having nematicidal activity against Bursaphelenchus xylophilus may not be obtained.
한편, 상기 은사시나무를 열수 추출하는데 있어서, 추출시간은 추출시간은 10분 ~ 100분, 바람직하게는 10 ~ 40분, 추출 횟수는 1 ~ 4 번, 바람직하게는 2 ~ 3번일 수 있다.
On the other hand, in the hot water extraction, the extraction time may be 10 minutes to 100 minutes, preferably 10 to 40 minutes, and the extraction frequency may be 1 to 4 times, preferably 2 to 3 times.
한편, 본 발명은 은사시나무를 알코올 용매로 추출하여 알코올 추출물을 수득하는 단계 및 상기 알코올 추출물을 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하는 단계를 통해서 은사시나무 추출물을 제조할 수 있다.The present invention also provides a method of preparing an Alaska pollack extract by a method comprising extracting an Alaska pollack extract with an alcohol solvent and extracting the alcohol extract with hot water to prepare a hotspring extract of Leaf fruit.
구체적으로, 먼저 은사시나무를 알코올 용매로 추출하여 알코올 추출물을 수득한다. 상기 알코올은 C1 ~ C4 알코올로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 알코올을 사용할 수 있으나, 바람직하게 에탄올을 사용할 수 있다.Specifically, firstly, an alcoholic extract is obtained by extracting an Angelica japonica with an alcohol solvent. The alcohol may be any alcohol selected from the group consisting of C 1 -C 4 alcohols, but ethanol may be preferably used.
본 발명의 알코올 용매는 알코올을 포함하는 것을 의미하며 100% 알코올로 이루어져 있거나 다른 용매에 혼합된 형태일 수 있다. 이 경우 다른 용매로서 바람직하게 물, 에틸아세테이트, 클로로포름 및 헥산 등을 사용할 수 있으며, 알코올 용매에 물을 혼합 용매로 사용하는 경우 50 ~ 95 중량%, 바람직하게는 60 ~ 80 중량%의 농도를 갖는 알코올 수용액을 사용하는 것이 추출효율을 극대화하는데 매우 유리할 수 있다.The alcohol solvent of the present invention means alcohol, and may be 100% alcohol or mixed with other solvent. In this case, water, ethyl acetate, chloroform, hexane and the like can be preferably used as another solvent. When water is used as a solvent for the alcohol solvent, the concentration is 50 to 95% by weight, preferably 60 to 80% The use of an alcohol aqueous solution may be very advantageous for maximizing extraction efficiency.
은사시나무를 C1 ~ C4 알코올 용매로 추출하는데 있어서, 추출온도는 18 ~ 70℃, 바람직하게는 20 ~ 25℃ 추출시간은 20 ~ 72 시간, 바람직하게는 22 ~ 26시간, 추출 횟수는 1 ~ 4 번, 바람직하게는 2 ~ 3번일 수 있다. Cathal trees of C 1 -C 4 In extracting with an alcoholic solvent, the extraction temperature is 18 to 70 ° C, preferably 20 to 25 ° C. The extraction time is 20 to 72 hours, preferably 22 to 26 hours, the extraction frequency is 1 to 4 times, preferably 2 ~ 3 times.
다음으로, 상기 알코올 추출물을 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조한다. Next, the alcoholic extract is hydrolyzed to prepare a hot water extract of A. lucidus.
이 때, 상기 알코올 추출물은 감압 농축되고, 감압 농축된 알코올 추출물을 열수 추출하여 은사시나무 열수추출물을 제조할 수 있다.At this time, the alcoholic extract is concentrated under reduced pressure, and the alcoholic extract, which is concentrated under reduced pressure, can be extracted with hot water to prepare hot water extract of Saccharomyces cerevisiae.
이와 같이, 은사시나무를 알코올 용매로 추출하여 알코올 추출물을 수득하고, 수득된 알코올 추출물을 열수 추출하여 제조된 은사시나무 열수 추출물은 살선충 활성을 가질 수 있다.
As described above, the hot spring water extract of Angelica keiskei koidz. Prepared by extracting alcoholic bean wood with an alcohol solvent to obtain an alcoholic extract and hydrolyzing the obtained alcoholic extract may have a nematode activity.
나아가, 본 발명의 은사시나무 추출물의 제조방법은 상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획하여 분획물을 제조하는 단계를 더 포함할 수 있다.Further, the method of the present invention may further comprise a step of fractionating the hot spring water extract of the present invention with an extraction solvent containing chloroform (CHCl 3 ) to produce a fraction.
이는 은사시나무 추출물의 살선충 활성를 더 증대시기 위한 단계로서, 상기 분획물은 은사시나무 열수 추출물보다 더욱 증대된 살선충 활성을 가질 수 있다.This is a step for further increasing the live nematode activity of the Asahi tree extract, and the fraction may have more potent live nematode activity than the hot water extract of the Asahikawa tree.
구체적으로, 본 발명은 은사시나무를 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하는 하는 단계 및 상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획하여 분획물을 제조하는 단계를 통해 은사시나무 추출물을 제조할 수 있다.Specifically, the present invention relates to a method for preparing an extract of hot spring water by extracting hot water of a silver chloride tree and a step of preparing a fraction by fractionating the hot water extract of the fruit tree with an extraction solvent containing chloroform (CHCl 3 ) Can be produced.
또한, 본 발명은 은사시나무를 알코올 용매로 추출하여 알코올 추출물을 수득하는 단계, 상기 알코올 추출물을 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하는 단계 및 상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획하여 분획물을 제조하는 단계를 통해 은사시나무 추출물을 제조할 수 있다.The present invention also relates to a method for producing an Alaska pollack seedling, comprising the steps of: extracting an Alaska pollack tree with an alcohol solvent to obtain an alcoholic extract; extracting the alcoholic extract with hot water to prepare a hot spring water extract of Angelica keiskei koidz .; and extracting the hot spring water with chloroform (CHCl 3 ) And then fractionating the extract with an extracting solvent to prepare a fraction.
이와 같이, 은사시나무 열수 추출물에 추출용매로 클로로포름을 사용하는 이유는 클로로포름 용매를 사용하여 은사시나무 열수 추출물을 추출해야 그 분획물에 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가지는 추출물이 수득될 수 있기 때문이다. 달리 말하면, 클로로포름 용매 외에 헥세인(hexane) 또는 에틸 아세테이트(ethyl acetate) 용매를 사용하여 은사시나무 열수 추출물을 추출한다면 그 분획물에 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가지는 추출물이 수득되지 않을 수 있다.
As described above, the reason why chloroform is used as an extraction solvent for the hot water extract of Arthropoda tree is that it is necessary to extract the hot water extract of Arthropoda japonica using a chloroform solvent to obtain an extract having a nematode activity against Bursaphelenchus xylophilus in the fraction It is because. In other words, when extracting the hot spring water extract of Artemisia princeps L. using hexane or ethyl acetate solvent in addition to the chloroform solvent, the pine reovirus ( Bursaphelenchus xylophilus ) may not be obtained.
한편, 앞서 언급했듯이 상기 은사시나무 추출물은 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있는데, 바람직하게는 하기 수학식 1에 의거할 때, 처리 48시간 이후 80 ~ 100% 살선충율을 가질 수 있다.On the other hand, as mentioned above, the above-mentioned Eustachian japonica extract may have a nematode activity against Bursaphelenchus xylophilus , preferably 80 to 100% live nematode after 48 hours of treatment, Lt; / RTI >
[수학식 1][Equation 1]
나아가, 본 발명은 은사시나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 천연 살선충 조성물을 제공한다.Further, the present invention provides a nematicide composition comprising an effective amount of an Aspartame extract as an active ingredient.
이 때, 상기 은사시나무 추출물은 앞서 언급한 은사시나무 추출물의 제조방법으로 제조된 추출물일 수 있다.At this time, the above-mentioned ESS-extract can be an extract prepared by the aforementioned method of manufacturing the ESS-extract.
구체적으로, 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물일 수 있고, 은사시나무를 알코올 용매로 추출한 알코올 추출물을 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물일 수 있다.Specifically, the above-mentioned < RTI ID = 0.0 > Esashi tree extract < / RTI > may be a hot spring water extract of a Sugarcane tree which is extracted with hot water, or a hot water extract of a Sugarcane tree which is obtained by extracting alcoholic extract of an Escherichia coli extract with an alcohol solvent.
상기 알코올은 C1 ~ C4 알코올로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 알코올을 사용할 수 있으나, 바람직하게 에탄올을 사용할 수 있다.The alcohol may be any alcohol selected from the group consisting of C 1 -C 4 alcohols, but ethanol may be preferably used.
또한, 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 알코올 용매로 추출한 알코올 추출물을 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 분획물일 수 있고, 은사시나무를 알코올에 침지시킨 후, 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 분획물일 수 있다. In addition, the above-mentioned Elisa tree extract may be a fraction obtained by fractionating the hot spring water extract of Alaska pollack obtained by extracting alcoholic extract of Alaska pollack with an alcohol solvent, and the extract fraction containing chloroform, And a fraction obtained by fractionating the hot water extract of wood with an extraction solvent containing chloroform.
상기 알코올은 C1 ~ C4 알코올로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 알코올을 사용할 수 있으나, 바람직하게 에탄올을 사용할 수 있다.
The alcohol may be any alcohol selected from the group consisting of C 1 -C 4 alcohols, but ethanol may be preferably used.
또한, 본 발명의 살선충 조성물의 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함할 수 있으며, 바람직하게는 은사시나무의 형성층을 포함하고, 은사시나무의 수피 및 목질부 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.The alfalfa seed of the present invention may further comprise at least one of the bark and woody part of the alfalfa tree.
또한, 본 발명의 천연 살선충 조성물은 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있으며, 바람직하게는 하기 수학식 1에 의거할 때, 처리 48시간 이후 80 ~ 100% 살선충율을 보일 수 있다.In addition, the natural nematicide composition of the present invention may have nematocidal activity against Bursaphelenchus xylophilus , and preferably has an 80-100% live nematode rate after 48 hours of treatment, Can be seen.
[수학식 1][Equation 1]
한편, 본 발명은 앞서 언급한 천연 살선충 조성물을 포함하는 천연 살선충제를 제공하며, 상기 천연 살선충제는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.
On the other hand, the present invention provides a natural nematocide comprising the aforementioned natural nematicide composition, wherein the natural nematocide is selected from the group consisting of Bursaphelenchus RTI ID = 0.0 > xylophilus . < / RTI >
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기로 하지만, 하기 실시예가 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니며, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로 해석되어야 할 것이다.
The present invention will now be described more specifically with reference to the following examples. However, the following examples should not be construed as limiting the scope of the present invention, and should be construed to facilitate understanding of the present invention.
실시예Example
준비예Preparation Example 1 : One : 은사시나무의Silver-eyed 수피, 형성층을 포함한 수피, 형성층을 포함한 목질부 및 목질부 제조 Bark, bark including cambium, woody part including cambium, and woody part
수원 소재의 국립산림과학원 산림유전자원부의 은사시나무 수간을 채취한 후, 수피, 형성층을 포함한 수피, 형성층을 포함한 목질부 및 목질부로 분리하였다.
After collecting the seeds of the Asahi trees in the forest genetic resources department of the National Forestry Academy in Suwon, they were separated into woody and woody parts including bark, camellia and cambium.
준비예Preparation Example 2 : 2 : 소나무재선충의Pine 분리 및 동정 Isolation and identification
소나무재선충 감염목의 목재를 버크만깔대기법을 이용하여 선충을 분리하였으며, 분리된 선충 중에서 소나무재선충의 형태 및 유전적 특성을 이용하여 소나무재선충을 순수 분리하였다.Nematodes were isolated from the wood of pine woodworm infected with Berkman funnel method. Pine woodworms were isolated purely from the isolated nematodes using the morphology and genetic characteristics of pine woodworms.
순수 분리된 소나무재선충은 균핵이 형성되지 않은 잿빛곰팡이병균(Botrytis cineria)을 미리 순수 배양한 후에 그 배지에 계대배양하여 생육시켰다.
The purely isolated pine needles were cultivated by subculture in the medium after pre - culture of the gray mold disease ( Botrytis cineria ) without sclerotia.
실시예Example 1 One
적당한 크기로 분쇄된 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 60g에 증류수 500ml를 가하고, 121℃에서 20분씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.
500 ml of distilled water was added to 60 g of bark containing the cambium separated from the suspension of Preparation Example 1 in Preparation Example 1, and the mixture was repeatedly extracted three times at 121 캜 for 20 minutes. The mixture was filtered with a filter paper and concentrated under reduced pressure, The extract was prepared.
실시예Example 2 2
실시예 1과 동일한 방법으로 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.The hot spring water extract of A. falciparum was prepared in the same manner as in Example 1.
다만, 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 대신 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 목질부를 사용하였다.
However, instead of the bark containing the cambium separated from the head of the grape seed of Preparation Example 1, a woody portion including the cambium separated from the seed of the grape seed of Preparation Example 1 was used.
실시예Example 3 3
실시예 1과 동일한 방법으로 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.The hot spring water extract of A. falciparum was prepared in the same manner as in Example 1.
다만, 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 대신 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 수피 10g을 사용하였다.
However, instead of the bark containing the cambium separated from the suspension of the suspension tree of Preparation Example 1, 10 g of the bark separated from the suspension of the suspension tree of Preparation Example 1 was used.
실시예Example 4 4
실시예 1과 동일한 방법으로 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.The hot spring water extract of A. falciparum was prepared in the same manner as in Example 1.
다만, 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 대신 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 목질부 50g을 사용하였다.
However, instead of the bark including the cambium separated from the suspension of Preparation Example 1, 50 g of woody part separated from the suspension of Preparation Example 1 was used.
비교예Comparative Example 1 One
적당한 크기로 분쇄된 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 60g에 에탄올 500ml를 가하고, 상온인 20℃에서 48시간씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 에탄올 추출물을 제조하였다.
500 ml of ethanol was added to 60 g of bark containing a cambium-containing layer separated in Preparation Example 1 of Preparative Example 1, and the mixture was repeatedly extracted three times at 20 ° C for 48 hours. The mixture was filtered and concentrated under reduced pressure The ethanol extracts of the silkworms were prepared.
실험예Experimental Example 1 One
준비예 2의 소나무재선충을 멸균 증류수에 현탁하고, 상기 소나무재선충 약 100마리가 포함되어 있는 현탁액 0.5mL씩 멸균된 용기에 옮긴다.The pine reeves of Preparation Example 2 are suspended in sterilized distilled water and transferred to a sterile container in 0.5 mL of suspension containing about 100 pine reeves.
상기 용기에 각각 실시예 1 ~ 4 및 비교예에서 제조된 추출물 0.5mL을 첨가하여 살선충 활성 검정을 실시하였다.To each of the above containers, 0.5 mL of the extract prepared in Examples 1 to 4 and Comparative Example was added, and a carnivorous activity assay was carried out.
살선충 활성 검정은 상기 용기를 현미경으로 관찰하면서 죽은 소나무재선충 수를 확인하였으며, 핀셋을 이용하여 생사 여부를 확인하면서 24시간 마다 총 3회 측정하였다.The nematode activity assay was carried out by observing the above container with a microscope and confirming the number of dead pine tree reeduces.
살선충율(%)은 하기 수학식 1을 통해 측정하여, 그 결과를 표 1에 기재하였다.The percentage of live nematodes (%) was measured by the following formula (1), and the results are shown in Table 1.
[수학식 1][Equation 1]
eelworm
재선충
Pine tree
Rehabilitation
표 1과 같이 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피를 사용하여 은사시나무 열수 추출물을 제조한 실시예 1 및 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 목질부를 사용하여 은사시나무 열수 추출물을 제조한 실시예 2는 처리 48시간 후에는 90% 이상의 설선충율을 보이고, 처리 72시간 후에는 99% 이상의 살선충율을 보임을 확인할 수 있었다. As shown in Table 1, the bark containing the cambium separated from the head of the grape seedling of Preparation Example 1 was used, and the seedling containing the cambium separated from the seed of the grape seed of Example 1 and Preparation Example 1 In Example 2, which produced the hot water extract of Arthropoda japonica, 90% or more of the spermatozoa ratio was observed after 48 hours of treatment and 99% or more of the survival rate was observed after 72 hours of treatment.
또한, 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 수피를 사용하여 은사시나무 열수 추출물을 제조한 실시예 3, 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 목질부를 사용하여 은사시나무 열수 추출물을 제조한 실시예 4 및 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피를 에탄올로 추출한 비교예 1은 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 보이지 않음을 확인할 수 있었다.
In addition, the hot spring water extract of the present invention was prepared by using the woody part isolated from the seeds of the seeds of Example 3 and Preparation Example 1, which were prepared by using the bark extracted from the seeds of the seeds of Preparation Example 1, It was confirmed that Comparative Example 1 in which the bark including the cambium separated from the suspension of Example 4 and Preparation Example 1 was extracted with ethanol showed no nematicidal activity against the pine reovirus.
실시예Example 5 5
적당한 크기로 분쇄된 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 60g에 에탄올 500ml를 가하고, 상온인 20℃에서 48시간씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 에탄올 추출물을 제조하였다.500 ml of ethanol was added to 60 g of bark containing a cambium-containing layer separated in Preparation Example 1 of Preparative Example 1, and the mixture was repeatedly extracted three times at 20 ° C for 48 hours. The mixture was filtered and concentrated under reduced pressure The ethanol extracts of the silkworms were prepared.
상기 에탄올 추출물에 증류수 500ml를 가하고, 121℃에서 20분씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.
500 ml of distilled water was added to the ethanol extract, and the mixture was repeatedly extracted three times at 121 ° C for 20 minutes. The extract was filtered through a filter paper, and concentrated under reduced pressure to prepare a hot water extract of Saccharomyces cerevisiae.
실시예Example 6 6
실시예 5와 동일한 방법으로 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.The hot spring water extract of A. falciparum was prepared in the same manner as in Example 5.
다만, 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 대신 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 목질부를 사용하였다.
However, instead of the bark containing the cambium separated from the head of the grape seed of Preparation Example 1, a woody portion including the cambium separated from the seed of the grape seed of Preparation Example 1 was used.
실시예Example 7 7
실시예 5와 동일한 방법으로 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.The hot spring water extract of A. falciparum was prepared in the same manner as in Example 5.
다만, 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 대신 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 수피 10g을 사용하였다.
However, instead of the bark containing the cambium separated from the suspension of the suspension tree of Preparation Example 1, 10 g of the bark separated from the suspension of the suspension tree of Preparation Example 1 was used.
실시예Example 8 8
실시예 5와 동일한 방법으로 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.The hot spring water extract of A. falciparum was prepared in the same manner as in Example 5.
다만, 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 대신 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 목질부 50g을 사용하였다.
However, instead of the bark including the cambium separated from the suspension of Preparation Example 1, 50 g of woody part separated from the suspension of Preparation Example 1 was used.
실험예Experimental Example 2 2
준비예 2의 소나무재선충을 멸균 증류수에 현탁하고, 상기 소나무재선충 약 100마리가 포함되어 있는 현탁액 0.5mL씩 멸균된 용기에 옮긴다.The pine reeves of Preparation Example 2 are suspended in sterilized distilled water and transferred to a sterile container in 0.5 mL of suspension containing about 100 pine reeves.
상기 용기에 각각 실시예 5 ~ 8에서 제조된 추출물 0.5mL을 첨가하여 살선충 활성 검정을 실시하였다.0.5 ng of each of the extracts prepared in Examples 5 to 8 was added to each of the above containers to perform a nematode activity assay.
살선충 활성 검정은 상기 용기를 현미경으로 관찰하면서 죽은 소나무재선충 수를 확인하였으며, 핀셋을 이용하여 생사 여부를 확인하면서 24시간 마다 총 3회 측정하였다.The nematode activity assay was carried out by observing the above container with a microscope and confirming the number of dead pine tree reeduces.
살선충율(%)은 하기 수학식 1을 통해 측정하여, 그 결과를 표 2에 기재하였다.(%) Was measured by the following formula (1), and the results are shown in Table 2.
[수학식 1][Equation 1]
eelworm
소나무재선충
Pine tree
표 2와 같이 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피를 에탄올 용매로 추출하고 다시 열수 추출하여 제조된 은사시나무 열수 추출물인 실시예 5 및 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 목질부를 에탄올 용매로 추출하고 다시 열수 추출하여 제조된 은사시나무 열수 추출물인 실시예 6은 처리 48시간 후에는 85% 이상의 설선충율을 보이고, 처리 72시간 후에는 98% 이상의 살선충율을 보임을 확인할 수 있었다.As shown in Table 2, the bark including the cambium separated from the suspension of Preparation Example 1 was extracted with an ethanol solvent and then separated from the suspension of Example 5 and Preparation Example 1, Example 6, which is a hot spring water extract of the Sugiura japonica prepared by extracting the woody part including the cambium-containing layer with ethanol solvent and hot water again, showed 85% or more pine seedling ratio after 48 hours and 98% , Respectively.
달리 말하면, 실시예 5 및 실시예 6에서 제조된 은사시나무 열수 추출물은 실시예 1 및 실시예 2에서 제조된 은사시나무 열수추출물과 유사한 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 보임을 확인할 수 있었다.
In other words, it was confirmed that the hot spring water extract of Hawthorn tree prepared in Example 5 and Example 6 exhibited the nematode activity against the pine tree worm, which is similar to that of the hot spring water extract of Examples 1 and 2.
실시예Example 9 9
9-1. 9-1. 은사시나무Silver leaf 열수Heat number 추출물 제조 Extract preparation
적당한 크기로 분쇄된 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 60g에 에탄올 500ml를 가하고, 상온인 20℃에서 48시간씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 에탄올 추출물을 제조하였다.500 ml of ethanol was added to 60 g of bark containing a cambium-containing layer separated in Preparation Example 1 of Preparative Example 1, and the mixture was repeatedly extracted three times at 20 ° C for 48 hours. The mixture was filtered and concentrated under reduced pressure The ethanol extracts of the silkworms were prepared.
상기 에탄올 추출물에 증류수 500ml를 가하고, 121℃에서 20분씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.
500 ml of distilled water was added to the ethanol extract, and the mixture was repeatedly extracted three times at 121 ° C for 20 minutes. The extract was filtered through a filter paper, and concentrated under reduced pressure to prepare a hot water extract of Saccharomyces cerevisiae.
9-2. 9-2. 은사시나무Silver leaf 열수Heat number 추출물의 Extract 분획물Fraction 제조 Produce
실시예 9-1에서 제조된 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름 유기용매로 용매분획하고, 이를 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 분획물을 제조하였다.
The hot spring water extract obtained in Example 9-1 was subjected to solvent fractionation with chloroform organic solvent, which was repeatedly extracted three times, filtered through a filter paper, and concentrated under reduced pressure to prepare an Asahi tree fraction.
실시예Example 10 10
실시예 9와 동일한 방법으로 은사시나무 분획물을 제조하였다.The same procedure as in Example 9 was carried out to produce a suspension of Fusarium obsidiana.
다만, 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 대신 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 목질부를 사용하였다.
However, instead of the bark containing the cambium separated from the head of the grape seed of Preparation Example 1, a woody portion including the cambium separated from the seed of the grape seed of Preparation Example 1 was used.
실시예Example 11 11
11-1. 11-1. 은사시나무Silver leaf 열수Heat number 추출물 제조 Extract preparation
적당한 크기로 분쇄된 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 60g에 에탄올 500ml를 가하고, 상온인 20℃에서 48시간씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 에탄올 추출물을 제조하였다.500 ml of ethanol was added to 60 g of bark containing a cambium-containing layer separated in Preparation Example 1 of Preparative Example 1, and the mixture was repeatedly extracted three times at 20 ° C for 48 hours. The mixture was filtered and concentrated under reduced pressure The ethanol extracts of the silkworms were prepared.
상기 에탄올 추출물에 증류수 500ml를 가하고, 121℃에서 20분씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.
500 ml of distilled water was added to the ethanol extract, and the mixture was repeatedly extracted three times at 121 ° C for 20 minutes. The extract was filtered through a filter paper, and concentrated under reduced pressure to prepare a hot water extract of Saccharomyces cerevisiae.
11-2. 11-2. 은사시나무Silver leaf 열수Heat number 추출물의 Extract 분획물Fraction 제조 Produce
실시예 11-1에서 제조된 은사시나무 열수 추출물을 헥세인(Hexane) 유기용매로 용매분획하고, 이를 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 분획물을 제조하였다.
The hot spring water extract obtained in Example 11-1 was subjected to solvent fractionation with a hexane organic solvent, which was repeatedly extracted three times, filtered through a filter paper, and concentrated under reduced pressure to prepare an Asahi tree fraction.
실시예Example 12 12
12-1. 12-1. 은사시나무Silver leaf 열수Heat number 추출물 제조 Extract preparation
적당한 크기로 분쇄된 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피 60g에 에탄올 500ml를 가하고, 상온인 20℃에서 48시간씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 에탄올 추출물을 제조하였다.500 ml of ethanol was added to 60 g of bark containing a cambium-containing layer separated in Preparation Example 1 of Preparative Example 1, and the mixture was repeatedly extracted three times at 20 ° C for 48 hours. The mixture was filtered and concentrated under reduced pressure The ethanol extracts of the silkworms were prepared.
상기 에탄올 추출물에 증류수 500ml를 가하고, 121℃에서 20분씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.
500 ml of distilled water was added to the ethanol extract, and the mixture was repeatedly extracted three times at 121 ° C for 20 minutes. The extract was filtered through a filter paper, and concentrated under reduced pressure to prepare a hot water extract of Saccharomyces cerevisiae.
12-2. 12-2. 은사시나무Silver leaf 열수Heat number 추출물의 Extract 분획물Fraction 제조 Produce
실시예 12-1에서 제조된 은사시나무 열수 추출물을 에틸 아세테이트(Ethyl acetate) 유기용매로 용매분획하고, 이를 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하였으며, 이를 감압 농축하여 은사시나무 분획물을 제조하였다.
The hot spring water extract obtained in Example 12-1 was solvent fractionated with ethyl acetate organic solvent and extracted three times repeatedly. The extract was filtered through a filter paper, and concentrated under reduced pressure to prepare a spray fraction.
실험예Experimental Example 3 3
준비예 2의 소나무재선충을 멸균 증류수에 현탁하고, 상기 소나무재선충 약 100마리가 포함되어 있는 현탁액 0.5mL씩 멸균된 용기에 옮긴다.The pine reeves of Preparation Example 2 are suspended in sterilized distilled water and transferred to a sterile container in 0.5 mL of suspension containing about 100 pine reeves.
상기 용기에 각각 실시예 9 ~ 12에서 제조된 추출물 0.5mL을 첨가하여 살선충 활성 검정을 실시하였다.0.5 ng of each of the extracts prepared in Examples 9 to 12 was added to the above-mentioned container to perform a nematode activity assay.
살선충 활성 검정은 상기 용기를 현미경으로 관찰하면서 죽은 소나무재선충 수를 확인하였으며, 핀셋을 이용하여 생사 여부를 확인하면서 24시간 마다 총 3회 측정하였다.The nematode activity assay was carried out by observing the above container with a microscope and confirming the number of dead pine tree reeduces.
살선충율(%)은 하기 수학식 1을 통해 측정하여, 그 결과를 표 3에 기재하였다.The percentage of live nematodes (%) was measured by the following formula (1), and the results are shown in Table 3.
[수학식 1][Equation 1]
eelworm
소나무재선충
Pine tree
표 3과 같이 클로로포름 분획물인 실시예 9 및 실시예 10은 처리 48시간 후에는 100% 의 살선충율을 보임을 확인할 수 있었으며, 이는 은사시나무 열수 추출물인 실시예 1, 2, 5, 6 보다 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성이 더 좋음을 확인할 수 있었다.As shown in Table 3, it was confirmed that the chloroform fraction, Example 9 and Example 10 showed 100% carnivorous ratio after 48 hours of treatment, which was higher than that of Example 1, 2, 5, Bursaphelenchus xylophilus ) was better than that of wild type .
또한, 헥세인(Hexane) 분획물인 실시예 11 및 에틸 아세테이트(Ethyl acetate) 분획물인 실시예 12는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 보이지 않음을 확인할 수 있었다.
In addition, Example 11, a Hexane fraction, and Example 12, an ethyl acetate fraction, were obtained from Bursaphelenchus xylophilus ) was not observed .
Claims (17)
를 포함하는 것을 특징으로 하는 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법.A step of extracting hot spring water of an Acacia var.
Wherein the method comprises the steps of:
상기 알코올 추출물을 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하는 단계;
를 포함하는 것을 특징으로 하는 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법.Extracting the silver foil with an alcohol solvent to obtain an alcoholic extract; And
Extracting the alcoholic extract with hot water to prepare an extract of hot spring water of Artichoke leaf;
Wherein the method comprises the steps of:
상기 은사시나무 추출물은 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법.3. The method according to claim 1 or 2,
The above-mentioned < RTI ID = 0.0 > xylophilus ) having a nematicidal activity. < RTI ID = 0.0 > 5. < / RTI >
상기 은사시나무 추출물은 하기 수학식 1에 의거할 때, 처리 48시간 이후 80 ~ 100% 살선충율을 보이는 것을 특징으로 하는 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법.
[수학식 1]
The method according to claim 1, wherein the shoot extract has a mortality of 80-100% after 48 hours of treatment.
[Equation 1]
상기 열수추출은 90 ~ 130℃의 온도에서 증류수 용매로 추출하는 것을 특징으로 하는 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법.3. The method according to claim 1 or 2,
Wherein the hot water extraction is performed with a distilled water solvent at a temperature of 90 to 130 캜.
상기 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함하고,
은사시나무의 수피 및 목질부 중 적어도 하나를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법.3. The method according to claim 1 or 2,
Wherein the silver foil includes a silver foil forming layer,
And further comprising at least one of a bark and woody part of an Echinochloa crus-galli.
상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획하여 분획물을 제조하는 단계;
를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 살선충 활성을 갖는 은사시나무 추출물의 제조방법.3. The method according to claim 1 or 2,
Preparing a fraction by fractionating the hot spring water extract with an extraction solvent containing chloroform (CHCl 3 );
Wherein the method further comprises the step of administering to the subject an effective amount of a compound of formula (I).
상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물인 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.9. The method of claim 8,
Wherein the above-mentioned < RTI ID = 0.0 > Esashi tree extract < / RTI >
상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 알코올 용매로 추출한 알코올 추출물을 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물인 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.9. The method of claim 8,
Wherein the extract of Angelica keiskei koidz. Is a hot spring water extract of Angelica keiskei koidz. Obtained by hot extraction of an alcoholic extract extracted from an alcoholic solution of an alfalfa tree.
상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획한 분획물인 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.9. The method of claim 8,
Wherein the above-mentioned Eustachian japonica extract is a fraction obtained by fractionating a hot spring water extract of Echinochloa crus-galli which is obtained by hot-water-extracting an Eustachian japonica tree with an extraction solvent containing chloroform (CHCl 3 ).
상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 알코올 용매로 추출한 알코올 추출물을 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획한 분획물인 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.9. The method of claim 8,
Wherein the above-mentioned Eustachian japonica extract is a fraction obtained by fractionating a hot spring water extract of Angelica keiskancholate obtained by extracting an alcoholic extract obtained by extracting an alcoholic bean tree with an alcohol solvent with an extraction solvent containing chloroform (CHCl 3 ).
상기 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함하고,
은사시나무의 수피 및 목질부 중 적어도 하나를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.13. The method according to any one of claims 8 to 12,
Wherein the silver foil includes a silver foil forming layer,
≪ / RTI > wherein the composition further comprises at least one of the bark and woody part of the silver foil tree.
상기 살선충 조성물은 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.9. The method of claim 8,
The carnivorous pest composition may be selected from the group consisting of Bursaphelenchus xylophilus < / RTI >).
상기 천연 살선충 조성물은 하기 수학식 1에 의거할 때, 처리 48시간 이후 80 ~ 100% 살선충율을 보이는 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.
[수학식 1]
Wherein said natural nematicide composition exhibits 80-100% live nematode after 48 hours of treatment, according to the following formula:
[Equation 1]
상기 천연 살선충제는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 갖는 것을 특징으로 하는 천연 살선충제.
17. The method of claim 16,
The naturally occurring nematode may be selected from the group consisting of Bursaphelenchus xylophilus < / RTI >).
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|---|---|---|---|---|
| KR102135166B1 (en) * | 2019-02-21 | 2020-07-17 | 대한민국 | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on walnut anthracnose |
| KR102135164B1 (en) * | 2019-02-21 | 2020-07-17 | 대한민국 | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Walnut blight |
Citations (1)
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|---|---|---|---|---|
| KR20090057503A (en) | 2007-12-03 | 2009-06-08 | 한국화학연구원 | Composition for control of pine wilt disease using nematocidal agents and crude extracts from the fruit rind of bombay mace and its controling process |
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