KR102135164B1 - composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Walnut blight - Google Patents
composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Walnut blight Download PDFInfo
- Publication number
- KR102135164B1 KR102135164B1 KR1020190020436A KR20190020436A KR102135164B1 KR 102135164 B1 KR102135164 B1 KR 102135164B1 KR 1020190020436 A KR1020190020436 A KR 1020190020436A KR 20190020436 A KR20190020436 A KR 20190020436A KR 102135164 B1 KR102135164 B1 KR 102135164B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- tree
- silver
- walnut
- extract
- aspen
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
- A01N65/08—Magnoliopsida [dicotyledons]
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Dentistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Description
본 발명은 항균제 조성물 및 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 식물체에 침입하거나 영향을 미쳐 식물체의 대사기능이나 구조 변화가 생리적으로 정상이 아닌 상태를 유발하는 병원균, 특히 호두나무갈색썩음병균(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)에 대한 항균 효과가 우수한 항균제 조성물 및 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a method of manufacturing an antibacterial agent composition and a method for producing a silver-stained tree extract having an excellent effect of inhibiting the growth of walnut brown rot, and more specifically, the metabolic function or structural change of the plant is physiological by invading or affecting the plant As an antibacterial agent composition having excellent antimicrobial effect against pathogens that cause abnormal conditions, especially walnut tree rot ( Xanthomonas arboricola pv. juglandis ) It is about.
세계적인 인구증가로 인해 야기된 식량확보라는 문제를 해결하는데, 화학농약을 이용한 병충해 및 잡초 방제방법은 농업생산력 증대에 없어서는 안 될 중요한 요인으로 인식되어 왔다. 그러나, 화학농약의 남용은 농약중독, 지하수 오염, 토양오염, 농산물에의 잔류, 및 각종 병해충에 대한 저항성 개체 출현 등과 같은 부작용을 초래하였다. In order to solve the problem of food security caused by the global population increase, pest and weed control methods using chemical pesticides have been recognized as an important factor in increasing agricultural productivity. However, the abuse of chemical pesticides has caused side effects such as pesticide poisoning, groundwater contamination, soil contamination, residues on agricultural products, and the emergence of individuals resistant to various pests.
그리하여, UN 환경개발회의의 리오 선언 이후 지구환경 보호를 위한 노력이 진행되었고, 그린 라운드 협약이 본격적으로 진행되면서, 화학농약의 남용을 제한하고, 이를 대체하기 위하여 미생물 자체 또는 그 기능을 이용한 생물 농약이 주목받고 있다. 따라서 환경오염 문제를 최소화하면서 식물 병원균을 효과적으로 억제할 수 있는 길항 미생물을 선발하고, 이를 이용한 식물병 방제용 무공해 농약(biocide)의 개발은 시급한 과제이다. Thus, after the Rio Declaration of the United Nations Environment Development Conference, efforts were made to protect the global environment, and the Green Round Convention was in full swing, limiting the abuse of chemical pesticides, and using biological microorganisms or their functions to replace them. This is getting attention. Therefore, it is an urgent task to select antagonistic microorganisms capable of effectively suppressing plant pathogens while minimizing environmental pollution problems, and to develop pollution-free biocide for controlling plant diseases using the same.
일반적으로 식물 병원균에 의한 농작물의 병은 해충, 잡초와 더불어 농작물의 안정적 생산에 매우 큰 제한 요인으로 작용하고 있다. 이러한 병원균의 방제를 위한 방법으로서는 재배환경을 개선해 주는 물리적 방법, 살균제를 이용한 화학적 방법 및 미생물 등을 이용한 생물학적 방법 등이 있다. 그러나 물리적 방제만으로는 큰 효과를 기대할 수 없으며, 화학적 방제는 상기 언급한 바와 같이 화학농약에 의한 환경오염의 문제와 농약제제 저항성 병원균의 출현으로 방제효과가 크게 저하되었다. 따라서 이의 대체 방안으로서 길항 미생물에 의한 생물학적 방제에 관한 연구가 최근 활발하게 진행되어 오고 있다. In general, the disease of crops caused by plant pathogens acts as a very limiting factor in the stable production of crops, along with pests and weeds. As a method for controlling such pathogens, there are physical methods for improving the cultivation environment, chemical methods using fungicides, and biological methods using microorganisms. However, a large effect cannot be expected by physical control alone, and as described above, the control effect is greatly reduced due to the problem of environmental pollution caused by chemical pesticides and the emergence of pesticide-resistant pathogens. Therefore, research on biological control by antagonistic microorganisms has been actively conducted as an alternative method thereof.
길항 미생물에 의한 생물학적 방제의 원리는 이들이 생산하는 항생물질에 의한 항생작용, 세포벽 분해효소에 의한 기생 또는 포식작용, 그리고 영양물 경쟁이나 거점(niche) 경쟁 등을 통한 병원균의 밀도 감소 또는 발병능력 감소 및 비병원성 균주 또는 약병원성 균주를 이용하는 교차보호(cross protection)와 기주 저항성 유도 등에 주된 작용기작을 두고 있다. 예를 들어, 트리코데르마 속과 글리오클라디움 속이 분비하는 항생물질 또는 휘발성 물질, 독소, 특수한 저해물질에 의한 진균병의 억제작용이 공지되어 있다. 또한, 기생 또는 포식작용에 의한 길항작용에 대해서도 최근 들어 활발하게 연구되고 있는데 길항 세균들이 분비하는 진균의 세포벽 분해효소 등에 의한 병원균의 용해작용이 주된 작용기작으로 알려져 있다.Principles of biological control by antagonistic microorganisms include antibiotics produced by antibiotics produced by them, parasitic or phagocytosis by cell wall degrading enzymes, and reduced density or pathogenesis of pathogens through nutritional competition or niche competition. It has a main mechanism of action, such as cross protection using non-pathogenic strains or weak pathogenic strains, and inducing host resistance. For example, the inhibitory action of fungal diseases by antibiotics or volatile substances, toxins, and special inhibitors secreted by the genus Trichoderma and Glioclidium is known. In addition, antagonism by parasitic or phagocytosis has also been actively studied in recent years, and lytic activity of pathogens by cell wall degrading enzymes of fungi secreted by antagonistic bacteria is known as a main mechanism of action.
호두나무[Juglans regia L. (= J. sinensis Dode)]는 가래나무과(Juglandaceae)에 속하는 낙엽활엽교목으로 아시아, 유럽 및 아메리카 대륙에 약 15종이 분포하고 있으며, 그 중 8종이 재배되고 우리나라에는 4세기 말 중국으로부터 전래된 것으로 추정되고 있다. 호두나무는 목재가 단단하고 윤기가 있어 고급가구나 공예목, 내장재 등으로 이용되고 있으며, 우리나라에서는 주로 종실을 식용으로 애용하고 있다. 종실은 두뇌 발달에 도움이 되고 강장제나 변비를 없애는데 효험이 있으며, 기름은 피부병 치료에 효과가 좋다고 보고되는 등 쓰임새가 많은 나무이다. 재배는 연평균 12℃ 등온선을 중심으로 난대 중부에서 온대 중부에 걸쳐 이루어지며, 천안, 영동, 김천, 무주지역이 주요 산지이다. 재배면적은 약 1,200ha로 단위면적(ha) 당 수확량이 2.5톤에 달하며, 총생산량은 1,000여 톤/년으로 약 110억원에 달하는 것으로 알려져 있다. The walnut tree [Juglans regia L. (= J. sinensis Dode)] is a deciduous broad-leaved tree belonging to the family Juglandaceae, with about 15 species distributed in the continents of Asia, Europe and America, of which 8 are grown and 4 in Korea. It is believed to have been handed down from China at the end of the century. The walnut tree is used for high-quality furniture, crafts, interior materials, etc. because of its hard and shiny wood. In Korea, it is mainly used as edible. It is a tree with many uses, such as being useful for brain development, effective in removing tonics and constipation, and oil is reported to be effective in treating skin diseases. The cultivation takes place from the middle of the temperate zone to the middle of the temperate zone around the annual average 12℃ isotherm. The main regions are Cheonan, Yeongdong, Gimcheon, and Muju. The cultivation area is about 1,200ha, and the yield per unit area (ha) reaches 2.5 tons, and the total production is known to reach about 11 billion won at 1,000 tons/year.
호두나무에 발생하는 병해로는 탄저병, 흰가루병, 검은가지마름병, 갈색고약병, 갈색썩음병 등 병해가 우리나라에 보고되어 있으며 아직 이들 병해에 대한 피해상황 및 방제방법에 대한 자료가 부족한 현실이다. The diseases that occur in the walnut tree include anthrax, powdery mildew, black eggplant disease, brown plaster disease, and brown rot disease, etc., and there are still insufficient data on the damage situation and control methods for these diseases.
호두나무갈색썩음병은 Xanthomonas arboricola pv. juglandis 또는Xanthomonas campestris pv. juglandis (Pierce) Dye 라 명명되어지는 병원균에 의해 발생하며 19세기 말 그 병원성이 알려지기 시작하여 현재 미국 및 중국을 포함한 39개국에 분포하며 막대한 경제적 손실을 야기하고 있다. 산림청에 따르면 한국의 경우 2016년 6월 경북 안동에서 최초 발생하였으며 감염목이 전국 기초지자체 252곳 중 67곳(26.6%)에서 확인되어지고 있다(2018년 농림지 동시발생 병해충 추진계획). 이로 인해 호두 생산량이 70%까지 급감하는 등 피해가 커지고 있으나 개발 등록된 살세균제의 종류는 매우 제한적이며, 다른 일반 곰팡이병의 방제 약제들 보다 약효가 낮은 경향이 있다. 또한 비교적 최근 발병한 병으로써 2019년 1월 현재 호두나무 갈색썩음병 방제를 위하여 등록된 방제약제가 없는 실정이다. Walnut brown rot is Xanthomonas arboricola pv. juglandis or Xanthomonas campestris pv. It is caused by a pathogen called juglandis (Pierce) Dye and its pathogenicity began to be known at the end of the 19th century and is now distributed in 39 countries including the United States and China, causing enormous economic loss. According to the Korea Forest Service, Korea first occurred in Andong, Gyeongbuk Province in June 2016, and infected trees have been identified in 67 (26.6%) of the 252 basic local governments nationwide (in 2018, plans to promote pests simultaneously occurring in agricultural and forest land). Due to this, the amount of walnut production has dropped to 70%, and the damage is increasing. However, the types of fungicides registered and developed are very limited, and tend to have lower efficacy than other common fungal disease control agents. In addition, it is a relatively recent illness, and as of January 2019, there is no registered control agent for controlling brown rot in walnut trees.
최근 환경보호와 생태계보존에 관한 그린라운드협약이 국제적인 관심의 대상이 되면서 무공해 농약의 개발이 국제적으로 경쟁이 치열한 핵심 분야로 등장하고 있으며, 1992년 리우 세계환경회의에서는 농약사용량의 20%를 생물 농약 및 친환경농약으로 대체하도록 결의하였고, 우리나라도 관련 행동계획으로 2014년까지 현재 사용되고 있는 화학 농약의 30%를 줄이거나 대체하는 추진 계획인 2000년 농림부에서 발표하기도 하였다. As the Green Round Convention on Environmental Protection and Ecosystem Conservation has recently become a target of international interest, the development of pollution-free pesticides has emerged as an internationally competitive core field, and at the 1992 Rio World Environment Conference, 20% of the pesticide use amount was applied to biological pesticides. And it was decided to replace it with eco-friendly pesticides. Korea also announced in 2000 the Ministry of Agriculture and Forestry, a plan to reduce or replace 30% of chemical pesticides currently in use by 2014 as a related action plan.
따라서 호두나무갈색썩음병을 유발하는 Xanthomonas arboricola pv. juglandis 를 방제할 수 있는 친환경적인 방제제의 개발이 필요한 상황이다.Therefore, Xanthomonas arboricola pv, which causes walnut brown rot. There is a need for the development of environmentally friendly control agents that can control juglandis.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 본 발명이 해결하려는 과제는 식물체에 침입하거나 영향을 미쳐 식물체의 대사기능이나 구조 변화가 생리적으로 정상이 아닌 상태를 유발하는 병원균, 특히 호두나무갈색썩음병균(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)에 대한 항균 효과가 우수한 항균제 조성물 및 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법을 제공하는 것이다.The present invention has been devised to solve the above problems, and a problem to be solved by the present invention is a pathogen that invades or influences a plant and causes a metabolic function or structural change of the plant to cause a condition that is not physiologically normal, particularly walnut. It provides an antimicrobial composition having excellent antimicrobial effect against wood brown rot ( Xanthomonas arboricola pv. juglandis ) and a method of producing a silver aspen tree extract having excellent growth inhibition effect of walnut brown rot.
상술한 과제를 해결하기 위해, 본 발명의 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법은 은사시나무를 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하는 제1단계 및 상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획하여 클로로포름 분획물을 수득하는 제2단계를 포함한다.In order to solve the above-described problems, the method of manufacturing the silver aspen tree extract having excellent effect of inhibiting the growth of the walnut tree rot of the present invention is the first step of producing hot water extract of the silver aspen tree and the silver aspen tree hydrothermal extract A second step of fractionating the extract with an extraction solvent containing chloroform (Chloroform: CHCl 3 ) to obtain a chloroform fraction.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 본 발명의 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법은 상기 클로로포름 분획물을 물과 혼합하고, 형성된 물층을 회수하는 제3단계 및 상기 물층을 정제하여 수용성 분획물을 얻는 제4단계를 더 포함할 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, the method for producing the silver aspen tree extract having excellent growth inhibitory effect of the walnut tree rot of the present invention comprises the third step of mixing the chloroform fraction with water and recovering the formed water layer. A fourth step of obtaining a water-soluble fraction by purifying the water layer may be further included.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 호두나무갈색썩음병균은 잔토모나스 아보리콜라 패소바 저글란디스(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)을 포함할 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, the walnut brown rot germ can include Xanthomonas aboricola fasoba jurlandis ( Xanthomonas arboricola pv. juglandis ).
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 열수 추출은 90 ~ 150℃의 온도에서 증류수로 추출할 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, the hot water extraction can be extracted with distilled water at a temperature of 90 ~ 150 ℃.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 열수 추출은 은사시나무 및 증류수를 1 : 1 ~ 5 중량비로 혼합하여 수행할 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, hot water extraction may be performed by mixing the silver aspen and distilled water in a weight ratio of 1: 1 to 5.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함하는 수피를 포함할 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, the aspen tree may include bark comprising the formation layer of the aspen tree.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 정제는 컬럼 크로마토그래피를 통해 수행할 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, purification may be performed through column chromatography.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 컬럼 크로마토그래피는 헥산(Hexane) : 디클로로메테인(Dicholoromethane) : 에틸아세테이트(ethyl acetate) = 6 ~ 8 : 4 ~ 6 : 1 ~ 3 부피비의 전개용매 조건에서 수행할 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, column chromatography is performed under the conditions of hexane (Hexane): dichloromethane (Dicholoromethane): ethyl acetate (ethyl acetate) = 6 ~ 8: 4 ~ 6: 1 ~ 3 volume ratio of the development solvent It can be done.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 제3단계의 혼합은 초음파 조사하는 조건에서 수행할 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, the mixing in the third step can be performed under conditions of ultrasonic irradiation.
한편, 본 발명의 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 항균제 조성물은 은사시나무 추출물을 유효성분으로 포함한다.On the other hand, the antimicrobial composition excellent in the growth inhibitory effect of the walnut tree brown rot of the present invention contains the silver aspen extract as an active ingredient.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물일 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, the silver aspen tree extract may be a silver aspen tree hydrothermal extract from which the silver aspen tree is hot water extracted.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 클로로포름 분획물일 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, the silver aspen tree extract may be a chloroform fraction obtained by fractionating the silver aspen tree hot water extract from hot water extract with an extraction solvent containing chloroform.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 클로로포름 분획물을 물과 혼합하여 형성된 물층을 정제한 수용성 분획물일 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, the silver aspen tree extract may be a water-soluble fraction obtained by mixing the chloroform fraction obtained by fractionating the silver aspen tree hot water extract with an extraction solvent containing chloroform with water, and purifying the water layer formed. .
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 본 발명의 항균제 조성물의 정제는 컬럼 크로마토그래피를 통해 수행할 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, purification of the antimicrobial composition of the present invention may be performed through column chromatography.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 본 발명의 항균제 조성물의 컬럼 크로마토그래피는 헥산(Hexane) : 디클로로메테인(Dicholoromethane) : 에틸아세테이트(ethyl acetate) = 6 ~ 8 : 4 ~ 6 : 1 ~ 3 부피비의 전개용매 조건에서 수행할 수 있다.In a preferred embodiment of the present invention, column chromatography of the antimicrobial composition of the present invention is hexane (Hexane): dichloromethane (Dicholoromethane): ethyl acetate (ethyl acetate) = 6 ~ 8: 4 ~ 6: 1 ~ 3 It can be carried out under the development solvent conditions of the volume ratio.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 본 발명의 항균제 조성물의 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함하는 수피를 포함할 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, the aspen tree of the antimicrobial agent composition of the present invention may include bark comprising a formation layer of the aspen tree.
본 발명의 바람직한 일실시예에 있어서, 본 발명의 항균제 조성물의 호두나무갈색썩음병균은 잔토모나스 아보리콜라 패소바 저글란디스(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)을 포함할 수 있다.In one preferred embodiment of the present invention, the walnut brown rot of the antimicrobial agent composition of the present invention may include Xanthomonas aboricola fasoba juglandis ( Xanthomonas arboricola pv. juglandis ).
한편, 본 발명의 천연 항균제는 앞서 언급한 항균제 조성물을 포함하고, 호두나무갈색썩음병균의 생장을 억제할 수 있다.On the other hand, the natural antibacterial agent of the present invention includes the antimicrobial agent composition mentioned above, and can suppress the growth of walnut brown rot.
한편, 은사시나무 추출물은 은사시나무를 이용하여 본 기술분야에서 속하는 통상의 지식을 가진 자에게 알려진 식물 추출방법을 적용하여 추출된 추출물을 포괄하는 개념으로, 본 발명의 은사시나무 추출물은 은사시나무 열수 추출물, 상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획한 클로로포름 분획물 또는 상기 클로로포름 분획물을 물과 혼합하여 형성된 물층을 정제한 수용성 분획물일 수 있다.On the other hand, the silver aspen tree extract is a concept that encompasses the extract extracted by applying a plant extraction method known to those of ordinary skill in the art using the silver aspen tree, and the silver aspen tree extract of the present invention is a silver aspen tree hydrothermal extract , It may be a water-soluble fraction obtained by purifying the water layer formed by mixing the chloroform fraction with water or the chloroform fraction fractionated with the extract solvent containing chloroform (ChCl 3 ).
본 발명의 항균제 조성물 및 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법은 식물체에 침입하거나 영향을 미쳐 식물체의 대사기능이나 구조 변화가 생리적으로 정상이 아닌 상태를 유발하는 병원균, 특히 호두나무갈색썩음병균(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)에 대한 항균 효과가 우수하다.The antimicrobial agent composition of the present invention and the method for producing the silver aspen tree extract having an excellent growth inhibitory effect of walnut brown rot is a pathogen that invades or affects a plant, causing metabolic or structural changes in the plant to be physiologically abnormal, In particular, it has an excellent antibacterial effect against walnut tree rot ( Xanthomonas arboricola pv. juglandis ).
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
상술한 바와 같이 식물 병원균에 의한 농작물의 병은 해충, 잡초와 더불어 농작물의 안정적 생산에 매우 큰 제한 요인으로 작용하고 있다. 이러한 병원균의 방제를 위한 방법으로서는 재배환경을 개선해 주는 물리적 방법, 살균제를 이용한 화학적 방법 및 미생물을 이용한 미생물학적 방법 등이 있다. 그러나 물리적 방제만으로는 큰 효과를 기대할 수 없으며, 화학적 방제는 상기 언급한 바와 같이 화학농약에 의한 환경오염의 문제와 농약제제 저항성 병원균의 출현으로 방제효과가 크게 저하되었다. 따라서 이의 대체 방안으로서 길항 미생물에 의한 생물학적 방제에 관한 연구가 최근 활발하게 진행되어 오고 있다.As described above, diseases of crops caused by plant pathogens, along with pests and weeds, act as a very large limiting factor in stable production of crops. As a method for controlling such pathogens, there are physical methods for improving the cultivation environment, chemical methods using fungicides, and microbiological methods using microorganisms. However, a large effect cannot be expected only by physical control, and as described above, the control effect is greatly reduced due to the problem of environmental contamination by chemical pesticides and the emergence of pesticide-resistant pathogens. Therefore, research on biological control by antagonistic microorganisms has been actively conducted as an alternative method thereof.
한편, 호두나무에 발생하는 병해로는 탄저병, 흰가루병, 검은가지마름병, 갈색고약병, 갈색썩음병 등의 병해가 우리나라에 보고되어 있으며 아직 이들 병해에 대한 피해상황 및 방제방법에 대한 자료가 부족한 현실이다. Meanwhile, diseases such as anthrax, powdery mildew, black eggplant disease, brown plaster disease, and brown rot disease have been reported in Korea, and there is still insufficient data on the damage situation and control methods for these diseases. .
이에, 본 발명은 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법 및 항균제 조성물을 제공한다.Thus, the present invention provides a method for producing a silver-stained tree extract having excellent inhibitory effect on growth of walnut tree rot, and an antimicrobial composition.
상기 은사시나무 추출물은 식물체에 침입하거나 영향을 미쳐 식물체의 대사기능이나 구조 변화가 생리적으로 정상이 아닌 상태를 유발하는 병원균에 대한 항균 효과를 가지는 물질로서, 바람직하게는 호두나무갈색썩음병균의 생장을 억제할 수 있다.The silver aspen extract is a substance having an antimicrobial effect against pathogens that invade or influence plants and cause metabolic or structural changes in plants to cause physiologically abnormal conditions, preferably to grow walnut tree rot. Can be suppressed.
상기 호두나무갈색썩음병균은 호두나무갈색썩음병을 유발할 수 있는 모든 병원균을 포함할 수 있으며, 바람직하게는 잔토모나스 아보리콜라 패소바 저글란디스(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)을 포함할 수 있다.The walnut tree brown rot may include all pathogens capable of causing walnut brown rot, and preferably may include Xanthomonas arboricola pv. juglandis .
한편, 본 발명의 은사시나무(학명 : Populus tomentiglandulosa)는 사시나무(P. davidiana)와 은백양(P. alba) 사이에서 생긴 자연잡종이다. 생물학적 분류로 식물계(Plantae) 피자식물문(Angiospermae) 쌍떡잎식물강(Dicotyledoneae) 버드나무목(Salicales) 버드나뭇과(Salicaceae)에 속화는 식물체로서, 수피가 은색이며 군식하면 특히 낙엽이 진 후의 겨울철 수간이 아름다워 가로수 식재나 유도식재, 완충식재로 이용될 수 있다.On the other hand, the silver aspen tree of the present invention (scientific name: Populus tomentiglandulosa ) is a natural hybrid generated between the aspen tree ( P. davidiana ) and the silver white sheep ( P. alba ). As a biological classification, the plant (Plantae) pizza plant (Angiospermae), dicotyledonae, (Salicales), and the genus (Salicaceae) are plants that acclimate to the bark. Because it is beautiful, it can be used as a tree planting, induction planting, or buffering planting.
한편, 은사시나무는 다른 명칭으로 현사시나무로 불리기도 하는데, 구체적으로, 현사시나무는 사시나무(P. davidiana)와 은백양(P. alba) 사이에서 생긴 인공잡종으로서 은사시나무와 동일한 학명을 사용한다. 따라서, 본 발명의 은사시나무는 인공잡종인 현사시나무를 포함하는 개념일 수 있다.On the other hand, the silver aspen tree is also called as the current aspen tree, and specifically, the aspen tree is an artificial hybrid created between the aspen tree ( P. davidiana ) and the silver white sheep ( P. alba ), and uses the same scientific name as the aspen tree. Therefore, the present invention may be a concept that includes an artificial hybrid, a present-day tree.
나무의 구조를 살펴보면, 수간의 안쪽에서부터 바깥쪽으로 심재부와 변재부를 포함하는 목질부, 형성층 및 수피로 구성될 수 있다. Looking at the structure of the tree, it can be composed of a woody part, a forming layer, and a bark including a core part and a sapwood part from the inside to the outside of the tree.
달리 말하면, 나무의 형성층을 중심으로 형성층의 바깥쪽에는 수피가 형성될 수 있고, 형성층의 안쪽에는 목질부가 형성될 수 있으며, 본 발명에 사용되는 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함할 수 있으며, 바람직하게는 은사시나무의 형성층을 포함하고, 은사시나무의 수피 및 목질부 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.In other words, a bark may be formed on the outer side of the forming layer around the forming layer of the tree, and a woody portion may be formed on the inside of the forming layer, and the aspen tree used in the present invention may include the forming layer of the aspen tree, Preferably, it includes a formation layer of the aspen tree, and may further include at least one of a bark and a wood portion of the aspen tree.
한편, 본 발명의 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법은 하기와 같다.On the other hand, the method of producing a walnut tree brown rot of the present invention is excellent in the growth inhibitory effect of the silver aspen tree extract.
먼저, 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법의 제1단계는 은사시나무를 열수 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조할 수 있다.First, the first step of the method of manufacturing the silver aspen tree extract having an excellent growth inhibitory effect of brown rot on the walnut tree can be obtained by extracting the silver aspen tree hot water extract.
구체적으로, 용매로서 증류수를 사용하고 열을 가하는 열수 추출을 통해 은사시나무 열수 추출물을 제조할 수 있다.Specifically, distilled water may be used as a solvent and a hot water extract of a silver aspen tree may be prepared through hot water extraction to which heat is applied.
바람직하게는 상기 은사시나무는 90 ~ 150℃, 바람직하게는 110 ~ 130℃의 온도에서 증류수를 용매로 추출하여 은사시나무 열수 추출물을 제조할 수 있으며, 상기 범위를 만족할 때, 호두나무갈색썩음병균의 생장을 억제할 수 있는 추출물을 수득하기 우수할 수 있다.Preferably, the aspen tree can be produced by extracting distilled water with a solvent at a temperature of 90 to 150°C, preferably 110 to 130°C, to produce a hot water extract of the aspen tree, and when satisfying the above range, of the walnut tree rot It may be excellent to obtain an extract capable of inhibiting growth.
이와 같이, 은사시나무를 열수 추출을 통해 은사시나무의 추출물을 제조하는 이유는 호두나무갈색썩음병균의 생장을 억제할 수 있는 추출물을 수득하기 위한 것이며, 만일 열수 추출이 아닌 메탄올, 에탈올 등의 알코올 용매를 사용하여 은사시나무 열수 추출물을 수득한다면 호두나무갈색썩음병균의 생장을 억제할 수 있는 추출물이 수득되지 않을 수 있다.As described above, the reason for producing the extract of the silver aspen tree through hot water extraction is to obtain an extract capable of suppressing the growth of walnut brown rot, and if it is not hot water extraction, alcohol such as methanol and ethanol If a hot water extract of silver aspen is obtained using a solvent, an extract capable of suppressing the growth of walnut brown rot may not be obtained.
한편, 상기 은사시나무를 열수 추출하는데 있어서, 추출시간은 추출시간은 10분 ~ 100분, 바람직하게는 20 ~ 60분, 추출 횟수는 1 ~ 4 번, 바람직하게는 2 ~ 3번일 수 있다. On the other hand, in the hot water extraction, the extraction time may be 10 minutes to 100 minutes, preferably 20 to 60 minutes, and the number of extractions is 1 to 4 times, preferably 2 to 3 times.
또한, 열수 추출은 은사시나무 및 증류수를 1 : 1 ~ 5 중량비, 바람직하게는 1 : 2 ~ 4 중량비로 혼합하여 수행할 수 있다.In addition, hot water extraction may be performed by mixing the silver aspen and distilled water in a weight ratio of 1: 1 to 5, preferably 1: 2 to 4 weight.
한편, 본 발명의 은사시나무 추출물의 제조방법은 상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획하여 클로로포름 분획물을 수득하는 제2단계를 더 포함할 수 있다.On the other hand, the manufacturing method of the silver aspen tree extract of the present invention may further comprise a second step of obtaining the chloroform fraction by fractionating the silver aspen tree hot water extract with an extraction solvent containing chloroform (Chloroform: CHCl 3 ).
이는 은사시나무 추출물의 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과를 더 증대시키기 위한 단계로서, 상기 클로로포름 분획물은 은사시나무 열수 추출물보다 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 더욱 우수할 수 있다.This is a step for further increasing the growth inhibitory effect of the walnut tree brown rot of the aspen tree extract, and the chloroform fraction may have a better effect of inhibiting the growth of the walnut tree brown rot disease than the hot water extract of the aspen tree.
구체적으로, 본 발명은 은사시나무를 열수 추출하여 은사시나무 열수추출물을 제조하는 하는 제1단계 및 상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획하여 클로로포름 분획물을 수득하는 제2단계를 통해 은사시나무 추출물을 제조할 수 있다.Specifically, the present invention is a first step of producing a hot water extract of a silver aspen tree by extracting the hot water extract and fractionating the hot water extract of the aspen tree with an extraction solvent containing chloroform (Chloroform: CHCl 3 ) to obtain a chloroform fraction. Through the second step, it is possible to prepare an extract of silver aspen tree.
또한, 클로로포름 분획물은 농축하여 클로로포름 농축물을 제조할 수 있으며, 이와 같은 농축을 통해, 제조된 클로로포름 농축물은 더욱 우수한 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과를 보일 수 있다.In addition, the chloroform fraction can be concentrated to prepare a chloroform concentrate, and through such concentration, the prepared chloroform concentrate can show a better growth inhibitory effect of walnut brown rot.
한편, 본 발명의 은사시나무 추출물의 제조방법은 클로로포름 분획물 또는 농축물을 물과 혼합하고, 형성된 물층을 회수하는 제3단계 및 상기 물층을 정제하여 수용성 분획물을 얻는 제4단계를 더 포함할 수 있다.On the other hand, the manufacturing method of the silver aspen tree extract of the present invention may further include a third step of mixing a chloroform fraction or a concentrate with water and recovering the formed water layer and a fourth step of purifying the water layer to obtain a water-soluble fraction. .
이는 은사시나무 추출물의 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과를 더 증대시키기 위한 단계로서, 제4단계를 수행하여 제조된 수용성 분획물은 은사시나무 열수 추출물 및 클로로포름 분획물보다 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 더욱 우수할 수 있다.This is a step for further increasing the growth inhibitory effect of the walnut tree brown rot of the aspen tree extract, and the water-soluble fraction prepared by performing the fourth step has the effect of inhibiting the growth of the walnut tree brown rot disease than the hot water extract and the chloroform fraction. Can be even better.
나아가, 제3단계의 혼합은 초음파 조사하는 조건에서 수행하여 클로로포름 분획물 또는 농축물을 충분히 물에 녹여 물층을 형성할 수 있으며, 혼합 횟수는 1 ~ 4번, 바람직하게는 2 ~ 3번일 수 잇다. Furthermore, the mixing in the third step may be performed under ultrasonic irradiation conditions to sufficiently dissolve the chloroform fraction or concentrate in water to form a water layer, and the number of mixing may be 1 to 4 times, preferably 2 to 3 times.
또한, 제4단계의 정제는 컬럼 크로마토그래피를 통해 수행할 수 있다. 컬럼 크로마토그래피는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피, 역상 실리카겔 컬럼 크로마토그래피 및 세파텍스 LH-20 컬럼 크로마토그래피 중 적어도 하나의 컬럼 크로마토그래피를 수행할 수 있으며, 바람직하게는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 수행할 수 있고, 더욱 바람직하게는 실리카겔 컬럼 크로마토그래피는 헥산(Hexane) : 디클로로메테인(Dicholoromethane) : 에틸아세테이트(ethyl acetate) = 6 ~ 8 : 4 ~ 6 : 1 ~ 3 부피비, 바람직하게는 6.5 ~ 7.5 : 4.5 ~ 5.5 : 1.5 ~ 2.5 부피비의 전개용매 조건에서 수행할 수 있다.In addition, the fourth step of purification may be performed through column chromatography. The column chromatography may be performed by at least one column chromatography among silica gel column chromatography, reverse phase silica gel column chromatography and Sephatex LH-20 column chromatography, preferably silica gel column chromatography, and more Preferably, the silica gel column chromatography is hexane (Hexane): dichloromethane (Dicholoromethane): ethyl acetate (ethyl acetate) = 6 ~ 8: 4 ~ 6: 1: 1-3 volume ratio, preferably 6.5 ~ 7.5: 4.5 ~ 5.5 : Can be performed under the conditions of 1.5 to 2.5 volume ratio of developing solvent.
한편, 본 발명은 은사시나무 추출물을 유효성분으로 포함하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 항균제 조성물을 제공한다.On the other hand, the present invention provides an antimicrobial agent composition excellent in inhibiting the growth of walnut tree rot, which contains the silver aspen tree extract as an active ingredient.
이 때, 상기 은사시나무 추출물은 앞서 언급한 은사시나무 추출물의 제조방법으로 제조된 추출물일 수 있다.At this time, the silver aspen tree extract may be an extract prepared by the method for preparing the above-mentioned silver aspen tree extract.
구체적으로, 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물일 수 있다.Specifically, the silver aspen tree extract may be a silver aspen tree hot water extract obtained by hot water extraction of the silver aspen tree.
또한, 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 클로로포름 분획물일 수 있다.In addition, the silver aspen tree extract may be a chloroform fraction obtained by fractionating the silver aspen tree hot water extract from the hot water extract with an extraction solvent containing chloroform.
또한, 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 클로로포름 분획물을 농축한 클로로포름 농축물일 수 있다.In addition, the silver aspen tree extract may be a chloroform concentrate obtained by concentrating the chloroform fraction fractionated with an extractant containing chloroform as the hot water extract from the silver aspen tree.
또한, 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 클로로포름 분획물을 물과 혼합하여 형성된 물층을 정제한 수용성 분획물일 수 있다.In addition, the silver aspen tree extract may be a water-soluble fraction obtained by mixing the chloroform fraction fractionated with an extraction solvent containing chloroform and the silver aspen tree hydrothermal extract obtained by hot water extraction of the silver aspen tree with water.
또한, 상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 클로로포름 분획물을 수득 및 농축하여 농축물을 제조하고, 제조한 농축물을 물과 혼합하여 형성된 물층을 정제한 수용성 분획물일 수 있다.In addition, the silver aspen tree extract is obtained by concentrating a chloroform fraction fractionated with an extractant containing chloroform as the hot water extract of the silver aspen tree with chloroform, to prepare a concentrate, and the water layer formed by mixing the prepared concentrate with water It may be a purified water-soluble fraction.
또한, 본 발명의 항균제 조성물의 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함할 수 있으며, 바람직하게는 은사시나무의 형성층을 포함하고, 은사시나무의 수피 및 목질부 중 적어도 하나를 더 포함할 수 있다.In addition, the aspen tree of the antimicrobial composition of the present invention may include a formation layer of the aspen tree, preferably include a formation layer of the aspen tree, and may further include at least one of a bark and a wood portion of the aspen tree.
또한, 본 발명의 항균제 조성물은 호두나무갈색썩음병균의 생장을 억제할 수 있으며, 상기 호두나무갈색썩음병균은 잔토모나스 아보리콜라 패소바 저글란디스(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)을 포함할 수 있다.In addition, the antimicrobial composition of the present invention can inhibit the growth of walnut tree rot, and the walnut tree rot may include Xanthomonas avoryola pear soba juglandis ( Xanthomonas arboricola pv. juglandis ).
나아가, 본 발명은 앞서 언급한 항균제 조성물을 포함하는 천연 항균제를 제공하며, 상기 천연 항균제는 호두나무갈색썩음병균의 생장을 억제할 수 있다.Furthermore, the present invention provides a natural antimicrobial agent comprising the aforementioned antimicrobial composition, and the natural antimicrobial agent can inhibit the growth of walnut tree rot.
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기로 하지만, 하기 실시예가 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니며, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로 해석되어야 할 것이다.The present invention will be described in more detail through the following examples, but the following examples are not intended to limit the scope of the present invention, which should be interpreted to help understand the present invention.
[실시예] [Example]
준비예 1 : 은사시나무의 형성층을 포함한 수피 제조Preparation Example 1: Preparation of bark including the formation layer of the silver aspen tree
수원 소재의 국립산림과학원 산림유전자원부의 은사시나무 수간을 채취한 후, 형성층을 포함한 수피를 분리하였다.After harvesting the silvery trees of the Forest Genetic Resources Division of the National Forest Science Institute in Suwon, the bark including the formation layer was separated.
실시예 1Example 1
1-1. 은사시나무 열수 추출물 제조1-1. Preparation of hot water extract
적당한 크기로 분쇄된 준비예 1의 은사시나무의 수간에서 분리된 형성층을 포함한 수피를 그늘에서 건조하고, 건조한 수피에 증류수를 1 : 3 중량비로 가한 후, 고압멸균기(autoclave)를 이용하여 120℃에서 40분씩 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하여 은사시나무 열수 추출물을 제조하였다.After drying the bark containing the formation layer separated from the water of the silver aspen tree of Preparation Example 1 crushed to a suitable size in the shade, distilled water was added to the dry bark in a weight ratio of 1: 3, and then at 120°C using an autoclave. The extract was repeated three times for 40 minutes, and filtered with filter paper to prepare a hot water extract of Aspen tree.
1-2. 은사시나무 열수 추출물의 클로로포름 분획물 제조 1-2. Preparation of chloroform fractions of hot water extract
제조된 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3) 유기용매로 용매분획하고, 이를 3회 반복 추출하였고, 여과지로 여과하여 클로로포름 분획물을 제조하고, 이를 농축하여 클로로포름 농축물을 수득하였다.Solvent fraction of the produced aspen tree was extracted with a chloroform (Chloroform: CHCl 3 ) organic solvent, and extracted repeatedly three times, and filtered with filter paper to prepare a chloroform fraction, which was concentrated to obtain a chloroform concentrate.
1-3. 클로로포름 농축물의 수용성 분획물 제조 1-3. Preparation of water-soluble fractions of chloroform concentrates
수득한 클로로포름 농축물을 초음파세척기를 사용하여 물과 2 ~ 3회 반복하여 혼합한 후, 물층을 회수하였다.The obtained chloroform concentrate was repeatedly mixed with water 2-3 times using an ultrasonic cleaner, and then the water layer was recovered.
회수한 물층을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피(SiO2 column chromatography, 헥산(Hexane) : 디클로로메테인(Dicholoromethane) : 에틸아세테이트(ethyl acetate) = 7 : 5 : 2 부피비의 전개용매 조건에서 수행)를 실시하여 정제하였고, 수용성 분획물 1 및 2을 얻었다. Purification of the recovered water layer by silica gel column chromatography (SiO 2 column chromatography, Hexane: Dichlorooromethane: ethyl acetate = 7: 5: 2 volume ratio of developing solvent) And water-soluble fractions 1 and 2 were obtained.
실험예 1Experimental Example 1
호두나무갈색썩음병의 병원균인 잔토모나스 아보리콜라 패소바 저글란디스(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)을 NB배지에 30℃, 120rpm, 암조건에서 48시간동안 진탕배양하였다. 그 후, 항균활성 검정을 위해서 상기 배양된 NB 배지의 균액을 Spectrophotometer를 이용하여 McFarland 0.5(1.5Х108 CFU/mL)로 맞춘뒤, NA배지에 접종하고, 접종된 NA배지 위에 페이퍼 디스크(Paper disc)를 올려 놓았다. 그 후, 실시예 1에서 얻은 수용성 분획물 1, 2 및 Negative control(증류수)를 각각 4㎍씩 분주하고, 30℃ 암조건에서 48시간 배양하여 억제대(Inhibition zone) 크기를 측정하여 하기 표 1에 그 결과를 나타내었다. Xanthomonas arboricola pv. juglandis , a pathogen of walnut brown rot, was shaken and cultured in NB medium for 30 hours at 30° C., 120 rpm, and dark conditions. After that, for the antibacterial activity assay, the cultured NB medium was adjusted to McFarland 0.5 (1.5 Х10 8 CFU/mL) using a spectrophotometer, inoculated into NA medium, and then inoculated onto the inoculated NA medium (Paper disc) ). Subsequently, 4 μg of water-soluble fractions 1, 2, and Negative control (distilled water) obtained in Example 1 were respectively dispensed, and cultured for 48 hours at 30° C. in dark conditions to measure the size of the inhibition zone. The results were shown.
이와 같은, 항균활성 검정은 3회 반복하여 수행하였다.As such, the antibacterial activity assay was repeated three times.
(speices)Pathogen
(speices)
(glomerella cingulate)Glomerella Shingulate
(glomerella cingulate)
-
-
20.6 ± 0.29
20.6 ± 0.29
30.7 ± 0.93
30.7 ± 0.93
표 1과 같이 은사시나무에서 추출한 은사시나무 추출물은 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과를 보임을 확인할 수 있었다.As shown in Table 1, it was confirmed that the extract of the silver aspen tree, which was extracted from the silver aspen tree, has an inhibitory effect on the growth of walnut brown rot.
본 발명의 단순한 변형이나 변경은 이 분야의 통상의 지식을 가진 자에 의해서 용이하게 실시될 수 있으며, 이러한 변형이나 변경은 모두 본 발명의 영역에 포함되는 것으로 볼 수 있다.Simple modifications or changes of the present invention can be easily carried out by those skilled in the art, and all such modifications or changes can be considered to be included in the scope of the present invention.
Claims (19)
상기 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름(Chloroform : CHCl3)을 포함하는 추출용매로 분획하여 클로로포름 분획물을 수득하는 제2단계;
를 포함하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법.
A first step of producing a hot water extract of a silver aspen tree by hot water extraction of the silver aspen tree; And
A second step of obtaining the chloroform fraction by fractionating the silver aspen tree hot water extract with an extraction solvent containing chloroform (Chloroform: CHCl 3 );
A method for producing a silver-stained tree extract having an excellent growth inhibitory effect of walnut brown rot, characterized in that it comprises a.
상기 클로로포름 분획물을 물과 혼합하고, 형성된 물층을 회수하는 제3단계; 및
상기 물층을 정제하여 수용성 분획물을 얻는 제4단계;
를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법.
According to claim 1,
A third step of mixing the chloroform fraction with water and recovering the formed water layer; And
A fourth step of purifying the water layer to obtain a water-soluble fraction;
A method of producing a silver aspen tree extract having an excellent growth inhibitory effect of walnut brown rot, characterized in that it further comprises.
상기 호두나무갈색썩음병균은 잔토모나스 아보리콜라 패소바 저글란디스(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)을 포함하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법.
According to claim 1,
The walnut tree brown rot is a method of producing a walnut tree brown rot germ extract excellent in inhibiting the growth of walnut tree rot germ characterized in that it contains Xanthomonas aboriola fasoba julandis ( Xanthomonas arboricola pv. juglandis ).
상기 열수 추출은 90 ~ 150℃의 온도에서 증류수로 추출하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법.
According to claim 1,
The hot water extraction is a method of producing a silver aspen tree extract having excellent effect of inhibiting the growth of walnut tree rot, characterized in that the extraction with distilled water at a temperature of 90 ~ 150 ℃.
상기 열수 추출은 은사시나무 및 증류수를 1 : 1 ~ 5 중량비로 혼합하여 수행하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법.
According to claim 4,
The hot water extraction is a method of producing a silver aspen tree extract having an excellent effect of inhibiting the growth of walnut brown rot, characterized in that it is performed by mixing the silver aspen tree and distilled water in a weight ratio of 1:1.
상기 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함하는 수피를 포함하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법.
According to claim 1,
The method of producing a silver aspen tree is excellent in inhibiting the growth of walnut tree brown rot, characterized in that it comprises a bark comprising the formation layer of the silver aspen tree.
상기 정제는 컬럼 크로마토그래피를 통해 수행하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법.
According to claim 2,
The purification is a method for producing a silver aspen tree extract having an excellent growth inhibitory effect of walnut brown rot, characterized in that it is carried out through column chromatography.
상기 컬럼 크로마토그래피는 헥산(Hexane) : 디클로로메테인(Dicholoromethane) : 에틸아세테이트(ethyl acetate) = 6 ~ 8 : 4 ~ 6 : 1 ~ 3 부피비의 전개용매 조건에서 수행하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법.
The method of claim 7,
The column chromatography is hexane (Hexane): dichloromethane (Dicholoromethane): ethyl acetate (ethyl acetate) = 6 ~ 8: 4 ~ 6: 1 ~ 3 volume ratio of walnut wood, characterized in that performed under the development solvent conditions A method for producing a silver aspen tree extract having an excellent growth inhibitory effect of rot germs.
상기 제3단계의 혼합은 초음파 조사하는 조건에서 수행하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 은사시나무 추출물의 제조방법.
According to claim 2,
The mixing of the third step is a method for producing a silver aspen tree extract having excellent effect of inhibiting the growth of walnut tree rot, characterized in that it is carried out under ultrasonic irradiation conditions.
An antimicrobial composition excellent in inhibiting the growth of walnut tree rot, characterized in that it contains the extract of the silver aspen tree as an active ingredient.
상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물인 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 항균제 조성물.
The method of claim 10,
The silver aspen tree extract is an antibacterial agent composition having an excellent growth inhibitory effect of walnut tree rot, characterized in that the hot water extract of the silver aspen tree.
상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 클로로포름 분획물인 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 항균제 조성물.
The method of claim 10,
The silver aspen tree extract is an antimicrobial agent composition having excellent effect of inhibiting the growth of walnut tree brown rot, characterized in that it is a chloroform fraction obtained by fractionating the silver aspen tree hot water extract from hot water extract with an extraction solvent containing chloroform.
상기 은사시나무 추출물은 은사시나무를 열수 추출한 은사시나무 열수 추출물을 클로로포름을 포함하는 추출용매로 분획한 클로로포름 분획물을 물과 혼합하여 형성된 물층을 정제한 수용성 분획물인 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 항균제 조성물.
The method of claim 10,
The silver aspen tree extract is a water-soluble fraction obtained by mixing the chloroform fraction fractionated with an extractant containing chloroform and water as a water-soluble fraction obtained by purifying the water layer formed by mixing the silver aspen tree hot water extract with hot water. Antimicrobial composition with excellent inhibitory effect.
상기 정제는 컬럼 크로마토그래피를 통해 수행하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 항균제 조성물.
The method of claim 13,
The purification is an antimicrobial composition excellent in inhibiting the growth of walnut tree rot, characterized in that carried out through column chromatography.
상기 컬럼 크로마토그래피는 헥산(Hexane) : 디클로로메테인(Dicholoromethane) : 에틸아세테이트(ethyl acetate) = 6 ~ 8 : 4 ~ 6 : 1 ~ 3 부피비의 전개용매 조건에서 수행하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 항균제 조성물.
The method of claim 14,
The column chromatography is hexane (Hexane): dichloromethane (Dicholoromethane): ethyl acetate (ethyl acetate) = 6 ~ 8: 4 ~ 6: 1 ~ 3 volume ratio of walnut wood, characterized in that performed under the development solvent conditions Antimicrobial composition with excellent growth inhibitory effect of rot germs.
상기 은사시나무는 은사시나무의 형성층을 포함하는 수피를 포함하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 항균제 조성물.
The method of claim 10,
The silver aspen tree is an antibacterial agent composition having an excellent growth inhibitory effect of walnut tree rot, characterized in that it comprises a bark comprising a formation layer of the silver aspen tree.
상기 호두나무갈색썩음병균은 잔토모나스 아보리콜라 패소바 저글란디스(Xanthomonas arboricola pv. juglandis)을 포함하는 것을 특징으로 하는 호두나무갈색썩음병균의 생장 억제 효과가 우수한 항균제 조성물.
The method of claim 10,
The walnut tree brown rot is excellent in the growth inhibitory effect of walnut tree brown rot disease, characterized in that it contains Xanthomonas aboriola Pasoba julandis ( Xanthomonas arboricola pv. juglandis ).
A natural antibacterial agent comprising the antimicrobial composition of claim 10.
상기 천연 항균제는 호두나무갈색썩음병균의 생장을 억제하는 것을 특징으로 하는 천연 항균제.
The method of claim 18,
The natural antibacterial agent is a natural antibacterial agent characterized by inhibiting the growth of walnut tree rot.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020190020436A KR102135164B1 (en) | 2019-02-21 | 2019-02-21 | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Walnut blight |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020190020436A KR102135164B1 (en) | 2019-02-21 | 2019-02-21 | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Walnut blight |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR102135164B1 true KR102135164B1 (en) | 2020-07-17 |
Family
ID=71832257
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020190020436A KR102135164B1 (en) | 2019-02-21 | 2019-02-21 | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Walnut blight |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR102135164B1 (en) |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20090021024A (en) * | 2007-08-24 | 2009-02-27 | 강원대학교산학협력단 | A novel salicin derivative isolated from populus albaglandulosa bark and isolation method thereof |
| KR20130010061A (en) * | 2011-07-15 | 2013-01-25 | 한림대학교 산학협력단 | The extract of the bark of populus timentiglandulosa t. lee with anti-inflammatory effect and composition thereof |
| KR20160107615A (en) * | 2015-03-04 | 2016-09-19 | 대한민국(산림청 국립산림과학원장) | composition for natural nematicidal and extraction method of hyun poplar showing nematicidal activity |
| KR20160107612A (en) * | 2015-03-04 | 2016-09-19 | 대한민국(산림청 국립산림과학원장) | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Rhizina root rot |
| KR20160107611A (en) * | 2015-03-04 | 2016-09-19 | 대한민국(산림청 국립산림과학원장) | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect |
-
2019
- 2019-02-21 KR KR1020190020436A patent/KR102135164B1/en active IP Right Grant
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20090021024A (en) * | 2007-08-24 | 2009-02-27 | 강원대학교산학협력단 | A novel salicin derivative isolated from populus albaglandulosa bark and isolation method thereof |
| KR20130010061A (en) * | 2011-07-15 | 2013-01-25 | 한림대학교 산학협력단 | The extract of the bark of populus timentiglandulosa t. lee with anti-inflammatory effect and composition thereof |
| KR20160107615A (en) * | 2015-03-04 | 2016-09-19 | 대한민국(산림청 국립산림과학원장) | composition for natural nematicidal and extraction method of hyun poplar showing nematicidal activity |
| KR20160107612A (en) * | 2015-03-04 | 2016-09-19 | 대한민국(산림청 국립산림과학원장) | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Rhizina root rot |
| KR20160107611A (en) * | 2015-03-04 | 2016-09-19 | 대한민국(산림청 국립산림과학원장) | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ajay Kumar | Colletotrichum gloeosporioides: biology, pathogenicity and management in India | |
| Babu Joseph et al. | Bioefficacy of plant extracts to control Fusarium solani f. sp. melongenae incitant of brinjal wilt | |
| Naz et al. | In vitro and in planta nematicidal activity of Fumaria parviflora (Fumariaceae) against the southern root‐knot nematode Meloidogyne incognita | |
| Salehan et al. | Antifungal activity of Cosmos caudatus extracts against seven economically important plant pathogens | |
| DE102007004500B4 (en) | Use of a formulation containing Sapindus extract for the treatment of a plant disease supported or caused by fungi and / or oomycetes | |
| Seema et al. | In vitro studies of some plant extracts against Rhizoctonia solani Kuhn infecting FCV tobacco in Karnataka Light Soil, Karnataka, India | |
| Naz et al. | Cis-and trans-protopinium, a novel nematicide, for the eco-friendly management of root-knot nematodes | |
| Syed et al. | Antifungal properties of extracts of sesame (Sesamum indicum). | |
| KR101837622B1 (en) | Composition for controlling plant diseases comprising an extract of Maesa japonica, and method for controlling plant diseases using the same | |
| Sahayaraj et al. | Antifungal activity of three fern extracts on causative agents of groundnut early leaf spot and rust diseases | |
| KR102135166B1 (en) | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on walnut anthracnose | |
| KR101590545B1 (en) | Composition for controlling plant disease and insect pest comprising plant extract as effective components and uses thereof | |
| KR101748147B1 (en) | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Rhizina root rot | |
| KR101748152B1 (en) | Anti-microbial agent composition for growth restraint of oak wilt pathogen and Natural anti-microbial agent | |
| KR102135164B1 (en) | composition for anti-microbial agent and extraction method of hyun poplar showing excellent anti-microbial effect on Walnut blight | |
| Ivanová et al. | Species diversity of microscopic fungi on Austrian pines growing in urban greenery of Nitra town | |
| Mekonnen et al. | Antifungal activities of some essential oils against Fusarium oxysporum of rosemary and sage plants | |
| KR20090057503A (en) | Composition for control of pine wilt disease using nematocidal agents and crude extracts from the fruit rind of bombay mace and its controling process | |
| Yu et al. | Sugi (Cryptomeria japonica D. Don) bark, a potential growth substrate for soilless culture with bioactivity against some soilborne diseases | |
| CN102485001A (en) | Use of ligusticum sinense extract in control of citrus diseases and insect pests | |
| Bamidele | Antifungal potency of Aframomum melegueta (alligator pepper) seed extracts on postharvest rot fungi of two citrus species | |
| Meena et al. | Antifungal Activity of Leaf Extracts of Polyalthia longifolia (Sonn.) Benth. and Hook. F. against Rhizoctonia solani | |
| Abiodun et al. | Bioefficacy of Petiveria alliacea and Annona squamosa against Podagrica species of Roselle (Hibiscus sabdariffa Linn) | |
| Xia et al. | Antibacterial activity of Amaranthus tricolor extracts against five phytopathogenic bacteria | |
| KR102336864B1 (en) | Composition for controling plant diseases comprising Hosta longissima extracts and fractions, and uses thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| GRNT | Written decision to grant |