KR101793910B1 - composition for natural nematicidal and nematocide comprising the same - Google Patents
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Abstract
본 발명은 천연 살선충 조성물 및 이를 포함하는 천연 살선충제에 관한 것으로, 보다 상세하게는 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함하는 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충을 방제하기 위한 천연 살선충 조성물 및 이를 포함하는 천연 살선충제에 관한 것이다.The present invention relates to a natural nematicide composition and a natural nematocide containing the same, and more particularly, to a natural nematocide composition for controlling nematodes that cause serious damage to coniferous trees including horticultural crops, edible crops, Compositions and natural nematocides containing them.
Description
본 발명은 살선충 조성물 및 이를 포함하는 천연 살선충제에 관한 것으로, 보다 상세하게는 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함한 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충을 방제하기 위한 살선충 조성물 및 이를 포함하는 천연 살선충제에 관한 것이다.
More particularly, the present invention relates to a nematocidal composition for controlling nematodes, which are harmful to coniferous trees including horticultural crops, edible crops and pine trees, and the like, Or a pharmaceutically acceptable salt thereof.
현재 우리나라에는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 의해 발생하는 소나무재선충병에 의해 소나무와 잣나무가 심각한 피해를 입고 있다. '소나무에이즈'라고도 불리 우는 이 식물병은 한번 감염되면 치료가 되지 않고 거의 모든 소나무가 고사된다. 우리나라의 경우 남부지방에서는 주로 소나무가 피해를 입고 있고, 중부지방에서는 잣나무가 주로 피해를 입고 있다.At present, there are pine tree bruises ( Bursaphelenchus xylophilus ) caused by the pine tree and pine trees are seriously damaged. This plant disease, also known as "pine tree aids", is not treated once it is infected and almost all pine trees are killed. In Korea, pine trees are mainly damaged in the southern region, and pine trees are mainly damaged in the central region.
소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)은 분류학상으로 후생동물아계(Metazoa), 진정후생동물(Eumetazoa), 좌우대칭동물(Bilateria), 의체강동물(Pseudocoelomata), 선충문(Nematoda, Nemata)에 속하는 동물로서 실모양을 하고 있다. 길이는 1 mm도 안되지만 번식력은 놀라워 한 쌍이 20일 만에 20만 마리로 늘어날 정도이다. 재선충은 스스로 나무에 침입하거나 나무 사이를 이동할 수 없고 반드시 매개충을 통해야만 가능하다. 매개충인 솔수염하늘소(Monochamus alternatus) 또는 북방솔수염하늘소(M. saltuarius)는 주로 병든 소나무나 잣나무를 선택해 알을 낳는데, 바로 재선충에 감염된 나무에 낳은 매개충의 알이 봄에 번데기로 될 때 재선충이 주위에 모이게 되고, 매개충이 5월 중순 ~ 7월 하순 동안 우화(羽化)할 때 몸에 붙어 있는 재선충도 함께 이동한다. 목질부를 탈출한 매개충은 건전한 나무의 새로 자란 가지(1 ~ 2년생 가지)를 주로 갉아 먹으며, 이 때 생긴 상처를 통하여 소나무재선충을 감염시킨다. 병든 소나무의 경우 잎 전체가 갈색으로 변하면서 보통 1년 안에 말라 죽고 만다.Pine reeves ( Bursaphelenchus xylophilus is a taxonomic animal that belongs to the family Metazoa, Eumetazoa, Bilateria, Pseudocoelomata, Nematoda, and Nemata. . The length is not less than 1 mm, but the breeding power is amazing, so the pair will increase to 200,000 in 20 days. A re-infestation can not enter a tree by itself or move between trees, and it is only possible through a mediator. Monochamus alternatus or M. saltuarius , which is an insect species , mainly produces diseased pine trees or pine trees and lays eggs. When the eggs of the parasites born in the trees infected with the re-infestation become pupa in the spring, When they are gathered around, and when the fowls emerge during the middle of May to the end of July, the rewinds attached to the body move together. The foliage that escapes from the woody part mainly feeds on newly grown branches (1-2 year old branches) of a healthy tree, and infects pine tree rehabilitate through the wound. In the case of diseased pine trees, the whole leaf turns brown and usually dies within one year.
1905년 일본에서 처음으로 발병한 소나무재선충병의 원인은 오랜 세월 규명이 되지 않다가 1970년에 이르러 비로소 원인이 밝혀졌다. 일본의 경우 이 병에 의해 역사적 가치가 높은 조경수를 제외하고는 대부분의 소나무 자생림이 사라졌다. 우리나라의 경우에는 1988년 부산 금정산에서 처음으로 발생하였는데, 초기에는 항공 살포에 의한 매개충 박멸, 감염목의 조기 발견 및 제거, 감염목 주변나무들의 적극적인 수간 주입 등으로 부산 일대에서만 발병할 뿐 잠잠했다. 하지만 살충제의 항공 살포에 의한 꿀벌 등의 유익충에 대한 피해, 환경오염 등의 이유로 인한 환경단체 중심의 항의 시위 및 국민들의 피해목 이동 등으로 효과적인 방제가 진행되지 못하였고, 결국에는 전국에 걸쳐서 소나무재선충병이 발병하게 되었다.The cause of pine wilt disease, which first occurred in Japan in 1905, has not been elucidated for a long time. In Japan, most of the pine native forests have disappeared, except for landscape plants with high historical value. In Korea, the first case occurred in 1988 in Geumjeongsan, Busan. In the early days, it was only eradicated in Busan area due to the eradication of airplanes, early detection and elimination of infected trees, and active injection of trees around the infected tree. However, due to damage to beneficial insects such as bees by air spraying of insecticides, protests by environmental groups due to environmental pollution, and movement of victims by the people, there was no effective control, and in the end, A re-infectious disease was caused.
소나무재선충은 소나무속(Pinus) 뿐만 아니라 전나무속(Abies), 가문비나무속(Picea), 잎갈나무속(Larix)의 일부 수종 등도 가해하는 것으로 알려져 있다. 우리나라의 경우 경상도, 전라도 및 강릉 지역은 주로 소나무에서 발병된 반면에 강원도 서부 지역과 경기도에서는 주로 잣나무에서 발병이 되었다. 남부지방과 중부지방의 수목 피해종의 이러한 차이는 소나무재선충을 매개하는 매개충의 차이에 의한 것으로 알려져 있다. 남부지방의 경우 솔수염하늘소의 밀도가 높고, 중부지방의 경우 북방솔수염하늘소의 밀도가 높은데, 이들 매개충이 선호하는 식물체가 서로 다르기 때문인 것으로 추정되고 있다.It is known that pine reeves do not only affect Pinus , but also some species of Abies , Picea and Larix . In Korea, Gyeongsang Province, Jeolla Province and Gangneung regions were predominantly in pine trees, while in the western part of Gangwon Province and in Gyeonggi Province, they were predominantly in pine trees. These differences in the tree-damaged species in the southern and central regions are known to be due to differences in the mediators that mediate pine tree re-growth. In the southern region, the densities of the dung beetles are high. In the central region, the densities of the northern dung beetles are high, which is presumed to be due to the fact that the preferred plants differ from each other.
이 식물병을 방제하기 위한 방법으로는, 1) 건전한 나무에 살선충약제의 예방적인 수간 주입, 2) 매개충 방제를 위한 합성 살충제 또는 길항 미생물의 항공 살포, 3) 감염목으로부터 재선충과 매개충을 방제하기 위한 감염목의 파쇄, 연소 및 훈증 등의 방법이 있다. 하지만 수간 주입법과 감염목 방제 방법은 비용이 많이 들고 높은 산악지대에 있는 소나무림에 대한 방제의 어려움 등으로 인하여 효과적인 방법이 되지 못한다. 합성 살충제의 경우 매개충이 주로 활동하는 5월내지 7월에 약제를 항공 살포할 경우 가장 효과적인 방법이기는 하나, 합성 살충제의 부작용으로 인하여 도시 및 인근 지역에 살포할 수 없다는 문제점이 있다. 길항 미생물의 살포에 의한 친환경적인 매개충 방제 방법도 있지만, 아직 합성살충제에 비하여 효과가 떨어져 그다지 효과적이지 못한 실정이다. 유기합성농약의 효과는 우수하지만 지속적인 사용과 남용으로 인한 유익충의 감소, 저항성 발달 및 인축에 대한 독성 등의 문제점이 발생하고 있다.Methods for controlling this plant disease include: 1) prophylactic injection of nematicide into a healthy tree, 2) aerial spraying of synthetic pesticides or antagonistic microorganisms for controlling the pest, 3) Such as disruption of the infected tree, combustion and fumigation. However, the injection method and infectious tree control method are not cost effective and can not be effectively applied due to the difficulty of controlling pine forest in high mountainous area. Synthetic insecticides are the most effective method for aerial spraying of medicines from May to July when medicines are mainly active, but they are not applicable to urban and nearby areas because of the side effects of synthetic insecticides. Although there are methods to control environmentally friendly mediators by the application of antagonistic microorganisms, it is not effective yet because it is less effective than synthetic pesticides. Although the effect of organic synthetic pesticides is excellent, there are problems such as reduction of benefit benefit due to continuous use and abuse, development of resistance and toxicity to make up.
이에 따라 새로우면서도 효과적인 친환경 방제방법의 개발이 필요한 상황이다.
Accordingly, it is necessary to develop a new and effective environmentally friendly control method.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로, 본 발명이 해결하려는 과제는 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함한 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충을 방제하기 위한 천연 살선충 조성물 및 이를 포함하는 천연 살선충제를 제공하는 것이다.Disclosure of Invention Technical Problem [8] Accordingly, the present invention has been made to solve the above-mentioned problems, and an object of the present invention is to provide a natural nematocide composition for controlling nematodes, which severely damage coniferous trees including horticultural crops, edible crops, And to provide a natural nematicide containing the same.
특히, 소나무, 잣나무 등에 기생해 나무를 가해하는 선충인 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 갖는 천연 살선충 조성물 및 이를 포함하는 천연 살선충제를 제공하는 것이다.
In particular, it is intended to provide a nematicide composition having nematode activity against pine reeves, a nematode which is parasitic to trees such as pine trees and pine trees, and natural nematocides containing the same.
상술한 과제를 해결하기 위해 본 발명은, 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 살선충 조성물을 제공한다.The present invention to solve the above problems, the blossom mushrooms (Sparassis latifolia ) culture medium as an active ingredient.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물은 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.According to a preferred embodiment of the present invention, the natural nematicide composition of the present invention may have carnivorous activity against Bursaphelenchus xylophilus .
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 배양액은 꽃송이버섯 균주를 pH 4.0 ~ 7.0 및 15 ~ 30℃의 배지에서 50 ~ 70일 동안 배양한 것일 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the culture broth of the natural fungicide composition of the present invention may be cultured for 50 to 70 days in a culture medium of pH 4.0 to 7.0 and 15 to 30 ° C.
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 배지는 감자전분(Potato Starch), 덱스트로오스(dextrose), 효모추출물(Yeast Extract), 펩톤(Peptone) 및 증류수(Distilled water) 중 1종 이상을 포함할 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the culture medium of the naturally occurring nematicide composition of the present invention comprises potato starch, dextrose, yeast extract, peptone and distilled water And distilled water.
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 에틸아세테이트 분획물은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 유도체 중 1종 이상을 포함할 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the ethylacetate fraction of the natural fungicide composition of the present invention may comprise at least one compound represented by the following general formula (1) and derivatives thereof.
[화학식 1][Chemical Formula 1]
상기 화학식 1에 있어서, R1 및 R2는 각각 독립적으로, -H, -OH 또는 -OCH3이다.In Formula 1, R 1 and R 2 are each independently -H, -OH or -OCH 3 .
본 발명의 바람직한 또 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 에틸아세테이트 분획물은 하기 화학식 1-1로 표시되는 화합물, 하기 화학식 1-2로 표시되는 화합물 및 하기 화학식 1-3으로 표시되는 화합물 중 1종 이상을 포함할 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the ethylacetate fraction of the natural fungicide composition of the present invention comprises a compound represented by the following general formula (1-1), a compound represented by the following general formula (1-2) , And the like.
[화학식 1-1][Formula 1-1]
[화학식 1-2][Formula 1-2]
[화학식 1-3][Formula 1-3]
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충 조성물의 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액 유래일 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the compound represented by the general formula (1) of the natural fungicide composition of the present invention is a sparassis latifolia ) culture medium.
한편, 본 발명은 앞서 언급한 천연 살선충 조성물을 포함하는 천연 살선충제를 제공한다.On the other hand, the present invention provides a natural nematocide comprising the above-mentioned natural nematicide composition.
본 발명의 바람직한 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충제는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.According to a preferred embodiment of the present invention, the naturally occurring nematode of the present invention is selected from the group consisting of Bursaphelenchus RTI ID = 0.0 > xylophilus . < / RTI >
본 발명의 바람직한 다른 일실시예에 따르면, 본 발명의 천연 살선충제는 하기 수학식 1에 의거할 때, 처리 48시간 이후 80 ~ 100% 살선충율을 보일 수 있다.According to another preferred embodiment of the present invention, the naturally occurring nematode of the present invention can show an 80-100% live nematode rate after 48 hours of treatment, according to the following equation.
[수학식 1][Equation 1]
본 발명의 천연 살선충 조성물 및 이를 포함하는 천연 살선충제는 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함한 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충을 방제할 수 있다.The naturally occurring nematicide composition of the present invention and natural nematocide containing the same can prevent nematodes that cause great damage to coniferous trees including various horticultural crops, edible crops, and pine trees.
특히, 소나무, 잣나무 등에 기생해 나무를 가해하는 선충인 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.
In particular, it can have a live nematode activity against a pine reovirus, which is a nematode that attaches a parasitic tree to pine trees and pine trees.
이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail.
상술한 바와 같이 현재 우리나라에는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 의해 발생하는 소나무재선충병에 의해 소나무와 잣나무가 심각한 피해를 입고 있다. '소나무에이즈'라고도 불리 우는 이 식물병은 한번 감염되면 치료가 되지 않고 거의 모든 소나무가 고사된다. 우리나라의 경우 남부지방에서는 주로 소나무가 피해를 입고 있고, 중부지방에서는 잣나무가 주로 피해를 입고 있다.As described above, pine and pine trees are seriously damaged by the pine wilt disease caused by Bursaphelenchus xylophilus in Korea. This plant disease, also known as "pine tree aids", is not treated once it is infected and almost all pine trees are killed. In Korea, pine trees are mainly damaged in the southern region, and pine trees are mainly damaged in the central region.
이 식물병을 방제하기 위한 방법으로는, 1) 건전한 나무에 살선충약제의 예방적인 수간 주입, 2) 매개충 방제를 위한 합성 살충제 또는 길항 미생물의 항공 살포, 3) 감염목으로부터 재선충과 매개충을 방제하기 위한 감염목의 파쇄, 연소 및 훈증 등의 방법이 있다. 하지만 수간 주입법과 감염목 방제 방법은 비용이 많이 들고 높은 산악지대에 있는 소나무림에 대한 방제의 어려움 등으로 인하여 효과적인 방법이 되지 못한다. 합성 살충제의 경우 매개충이 주로 활동하는 5월내지 7월에 약제를 항공 살포할 경우 가장 효과적인 방법이기는 하나, 합성 살충제의 부작용으로 인하여 도시 및 인근 지역에 살포할 수 없다는 문제점이 있다. 길항 미생물의 살포에 의한 친환경적인 매개충 방제 방법도 있지만, 아직 합성살충제에 비하여 효과가 떨어져 그다지 효과적이지 못한 실정이다. 유기합성농약의 효과는 우수하지만 지속적인 사용과 남용으로 인한 유익충의 감소, 저항성 발달 및 인축에 대한 독성 등의 문제점이 발생하고 있다.Methods for controlling this plant disease include: 1) prophylactic injection of nematicide into a healthy tree, 2) aerial spraying of synthetic pesticides or antagonistic microorganisms for controlling the pest, 3) Such as disruption of the infected tree, combustion and fumigation. However, the injection method and infectious tree control method are not cost effective and can not be effectively applied due to the difficulty of controlling pine forest in high mountainous area. Synthetic insecticides are the most effective method for aerial spraying of medicines from May to July when medicines are mainly active, but they are not applicable to urban and nearby areas because of the side effects of synthetic insecticides. Although there are methods to control environmentally friendly mediators by the application of antagonistic microorganisms, it is not effective yet because it is less effective than synthetic pesticides. Although the effect of organic synthetic pesticides is excellent, there are problems such as reduction of benefit benefit due to continuous use and abuse, development of resistance and toxicity to make up.
이에 따라 새로우면서도 효과적인 친환경 방제방법의 개발이 필요한 상황이다.
Accordingly, it is necessary to develop a new and effective environmentally friendly control method.
이에 본 발명은 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액을 유효성분으로 포함하는 천연 살선충 조성물을 제공함으로써 상술한 문제의 해결을 모색하였으며, 이를 통해 각종시설 원예작물, 식용작물, 소나무류를 포함한 침엽수 등에 큰 피해를 입히는 선충을 방제할 수 있다.Accordingly, the present invention relates to a method for producing a sparassis mushroom The present invention has been made to solve the above-mentioned problems by providing a naturally occurring nematicide composition containing a cultivar of latifolia as an active ingredient, thereby controlling nematodes that cause great damage to coniferous trees including various horticultural crops, edible crops and pine trees .
특히, 소나무, 잣나무 등에 기생해 나무를 가해하는 선충인 소나무재선충에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.
In particular, it can have a live nematode activity against a pine reovirus, which is a nematode that attaches a parasitic tree to pine trees and pine trees.
본 발명의 천연 살선충 조성물은 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus )에 대한 살선충 활성을 가지는 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액을 유효성분으로 포함할 수 있다.The naturally occurring nematode composition of the present invention can be used for the treatment of brucellosis ( Bursaphelenchus xylophilus ) with the nematode activity ( Sparassis latifolia ) culture medium as an active ingredient.
꽃송이버섯은 민주름버섯목(Aphyllophorales), 꽃송이버섯과(Sparassidaceae), 꽃송이버섯속(Sparassis)에 속하는 식용버섯이다. 일어로는 하나비라타케, 영어로는 cauliflower mushroom이라고 부르는데 이는 자실체가 10 ~ 25㎝ 크기의 꽃양배추 모양을 하고 있으며 전체적으로 담황색 또는 흰색을 띄고 있기 때문이다(Shin HJ et al., J. Life Sci. 17, 1290-1293, 2007). 꽃송이버섯은 한국, 일본, 중국, 북미, 유럽 등에 주로 분포하며 우리나라의 숲에서는 5월 내지 9월에 침엽수의 뿌리 근처 줄기나 그루터기에 뭉쳐서 발생하며 주로 7월에 많이 발견되고 있다(Oh DS et al., Korean J. Mycol. 37, 33-40, 2009). Blossom mushroom is edible mushrooms belong to the Democratic name mushroom neck (Aphyllophorales), zinnia and mushrooms (Sparassidaceae), zinnia mushrooms in (Sparassis). In Japanese, it is called Hanabiratake, and in English it is called cauliflower mushroom because its fruiting body is 10 ~ 25㎝ in size and has a pale yellow or white as a whole (Shin HJ et al., J. Life Sci. 17, 1290-1293, 2007). The mushroom is mainly distributed in Korea, Japan, China, North America, Europe and Korea. It grows in stems and stumps near the root of conifer in May to September, and is found mainly in July (Oh DS et al , Korean J. Mycol. 37, 33-40, 2009).
꽃송이버섯은 DNA 검사결과에 따라 7종으로 분류되어 있다.The mushrooms are classified into seven species according to the DNA test results.
Sparassis spathulata 라는 학명을 가지는 꽃송이버섯은 주로 미국 동부지역에 광범위하게 돋고, 땅에 묻혀있고 가지를 치는 기부로부터 테 모양의 무늬를 가진 규칙적이고 납작한 부채꼴의 갓이 물결치듯 수직으로 많이 돋아나며, 균사의 세포와 세포 사이의 꺽쇠모양을 가진 연결부분(clamp connection)이 없는 특징이 있다. Sparassis spathulata Is broadly sprouted in the eastern United States. It grows vertically as a regular, flat fan-shaped gab with a tee-shaped pattern from the ground-buried and branching bases, There is no clamp connection between the cells.
Sparassis radicata 라는 학명을 가지는 꽃송이버섯은 주로 미국 서부지역에서 돋고, 부채꼴 꽃잎(갓)이 불규칙하게 많이 곱슬곱슬하며, 균사의 세포와 세포 사이에 있는 꺽쇠모양의 연결부분이 존재하는 특징이 있다. Sparassis radicata Is characterized by the presence of a cramped connection between mycelial cells and cells. It is characterized by the fact that it grows in the western part of the United States, and the fan-shaped petals (gut) irregularly curl a lot.
Sparassis crispa 라는 학명을 가지는 꽃송이버섯은 주로, 유럽 및 미국 동부지역에서 돋고, 균사의 세포와 세포 사이에 있는 꺽쇠모양의 연결부분이 존재하며, 부채꼴 꽃잎이 반복하여 갈라진 짧은 분지로부터 돋아 자라는 특징이 있다. Sparassis crispa Is a species that grows mainly in Europe and the eastern United States and has a cusp-shaped connection between mycelial cells and cells. It is characterized by a fan-shaped petal that grows from repeatedly divided short branches.
Sparassis brevipes 라는 학명을 가지는 꽃송이버섯은 주로 북부 유럽에서 돋고 균사의 세포의 꺽쇠 연결부분이 없는 특징이 있으며, Sparassis miniensis 라는 학명을 가지는 꽃송이버섯은 주로 스페인 서북지역에서 돋고 균사의 세포의 꺽쇠 연결부분이 없는 특징이 있다. Sparassis brevipes , Which has a scientific name, is mainly grown in northern Europe and has features that do not have a crotch connection part of mycelial cells. Sparassis miniensis Which has a scientific name, is predominantly in the northwestern region of Spain and is characterized by the absence of the crotch connecting portion of mycelial cells.
Sparassis cystidiosa 라는 학명을 가지는 꽃송이버섯은 주로 태국에서 돋고 균사의 세포의 꺽쇠 연결부분이 있는 특징이 있으며, Sparassis latifolia 라는 학명을 가지는 꽃송이버섯은 주로 한국, 일본, 중국, 러시아 등 극동아시아 지역에 돋고, 균사의 세포의 꺽쇠 연결부분이 있는 특징이 있다. Sparassis cystidiosa Blossom mushroom with the scientific name of which is mainly characterized by the angle of the connecting portion of mycelial cells dotgo in Thailand, Sparassis latifolia Which has a scientific name, is mainly grown in Korea, Japan, China, Russia and Far East Asia region, and has a characteristic feature of the connecting part of mycelial cells.
본 발명에서 사용될 수 있는 꽃송이버섯은 앞서 설명한 7종의 꽃송이버섯이 모두 사용될 수 있으며, 바람직하게는 Sparassis latifolia 라는 학명을 가지는 꽃송이버섯이 사용될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 한국에서 서식하는 Sparassis latifolia 라는 학명을 가지는 꽃송이버섯이 사용될 수 있다.
In the present invention, all of the seven kinds of mushrooms described above can be used, and preferably, Sparassis latifolia May be used. More preferably, a Japanese mushroom having a scientific name of Sparassis latifolia which is inhabited in Korea can be used.
본 발명의 천연 살선충 조성물에 포함되는 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액은 꽃송이버섯 균주를 분리 및 동정받아 배양된 배양액으로서, 꽃송이버섯 균주를 pH 4.0 ~ 7.0, 바람직하게 pH 4.0 ~ 5.0, 15 ~ 30℃, 바람직하게는 20 ~ 25℃의 배지에서 50 ~ 70일, 바람직하게 55 ~ 65일동안 배양한 것일 수 있으나, 반드시 이에 제한되는 것은 아니다.The sparassis mushroom contained in the natural fungicide composition of the present invention latifolia ) is a culture medium obtained by isolating and identifying P. japonicus strain. The culture broth of P. japonicus is cultivated at a pH of 4.0 to 7.0, preferably pH 4.0 to 5.0, at a temperature of 15 to 30 캜, preferably 20 to 25 캜, To 70 days, preferably 55 to 65 days. However, the present invention is not limited thereto.
달리 말하면, 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액이 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 높게 유지시킬 수 있는 배양조건이라면 제한 없이 사용할 수 있다.In other words, Sparassis latifolia ) can be used without limitation as long as the cultivation conditions can maintain high nematode activity against Bursaphelenchus xylophilus .
하지만, 상기 배양은 15℃ 미만의 온도에서 배양할 경우, 균주생육이 아주 느려 장시간 배양해야 할 문제가 발생할 수 있으며, 30℃를 초과하는 온도에서 배양할 경우, 급격한 균주생육 억제와 장기간 배양시 균주 사멸의 문제가 발생할 수 있다.However, when the culture is carried out at a temperature lower than 15 ° C, the growth of the strain may be very slow, resulting in problems of long-term culture. When the culture is performed at a temperature exceeding 30 ° C, A problem of death may occur.
게다가, 상기 배양이 pH 4.0 미만의 pH에서 배양할 경우, 생육이 저조하여 배양시간이 길어지는 문제가 발생할 수 있으며, pH 7.0을 초과하는 pH에서 배양할 경우 생육이 급격하게 느려져 장시간 배양의 문제가 발생할 수 있다.
In addition, when the culture is cultured at a pH lower than 4.0, there is a problem that the growth is slow and the cultivation time is prolonged. When the culture is performed at pH exceeding 7.0, the growth is drastically slowed, Lt; / RTI >
상기 꽃송이버섯 균주를 배양하는 배지는 당업계에서 사용할 수 있는 다양한 배지가 사용될 수 있으며, 바람직하게는 감자전분(Potato Starch), 덱스트로오스(Dextrose), 효모추출물(Yeast Extract), Peptone 및 증류수(Distilled water) 중 1종 이상을 포함하는 배지가 사용될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 감자전분(Potato Starch), 덱스트로오스(dextrose) 및 증류수(Distilled water)를 포함하는 PDB(potato dextrose broth) 배지가 사용될 수 있다.
The culture medium for cultivating the mushroom strain may be selected from a variety of media available in the art, such as potato starch, dextrose, yeast extract, peptone and distilled water Distilled water may be used. More preferably, a PDB (potato dextrose broth) medium containing potato starch, dextrose, and distilled water is used. Can be used.
상기 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액을 더욱 상세히 설명하면, 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주를 감자전분(Potato Starch), 덱스트로오스(dextrose), 증류수(Distilled water) 및 한천(Agar)을 포함하는 PDA(potato dextrose agar) 배지를 사용하여 15 ~ 30℃, 바람직하게는 20 ~ 25℃의 배지에서 20 ~ 40일, 바람직하게 25 ~ 35일동안 배양한 후, 이를 감자전분(Potato Starch), 덱스트로오스(dextrose) 및 증류수(Distilled water)을 포함하는 pH 4.0 ~ 7.0의 PDB(potato dextrose broth) 배지에 분주하여, 100 ~ 150℃에서 10 ~ 30분간 멸균 후, 18 ~ 30℃의 배지에서 50 ~ 70일동안 배양한 것일 수 있다.
The above-mentioned mushroom ( Sparassis latifolia ) culture broth will be described in more detail. Sparassis latifolia ) strain is cultured in a potato dextrose agar (PDA) medium containing potato starch, dextrose, distilled water and agar at 15 to 30 ° C, preferably 20 And cultured for 20 to 40 days, preferably 25 to 35 days, in a medium at 25 ° C, and then cultured at a pH of 4.0 to 7.0 containing potato starch, dextrose and distilled water PDB (potato dextrose broth), sterilized at 100 to 150 ° C for 10 to 30 minutes, and cultured in a medium at 18 to 30 ° C for 50 to 70 days.
나아가, 본 발명의 천연 살선충 조성물은 꽃송이버섯 균주 배양액을 에칠아세테이트(ethyl acetate, CH3COOC2H5)을 포함하는 추출용매로 분획한 에칠아세테이트 분획물을 유효성분으로 포함할 수 있으며, 상기 에칠아세테이트 분획물은 상기 꽃송이버섯 균주 배양액보다 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus )에 대한 살선충 활성이 더욱 우수할 수 있다.
Furthermore, the naturally occurring nematicide composition of the present invention may contain an ethylacetate fraction obtained by fractionating the culture of P. japonicus strain with an extraction solvent containing ethyl acetate (CH 3 COOC 2 H 5 ) as an active ingredient, Acetate fractions were more effective than the cultivated strain of P. japonicus in the presence of Bursaphelenchus xylophilus ) may be more excellent.
상기 에틸아세테이트 분획물은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 유도체 중 1종 이상을 포함할 수 있다.The ethyl acetate fraction may include at least one compound represented by the following general formula (1) and derivatives thereof.
[화학식 1][Chemical Formula 1]
상기 화학식 1에 있어서, R1 및 R2는 각각 독립적으로, -H, -OH 또는 OCH3이다.In Formula 1, R 1 and R 2 are each independently -H, -OH or -OCH 3 .
또한, 상기 에틸아세테이트는 하기 화학식 1-1로 표시되는 화합물, 하기 화학식 1-2로 표시되는 화합물 및 하기 화학식1-3으로 표시되는 화합물 중 1종 이상을 포함할 수 있다.The ethyl acetate may include at least one compound represented by the following general formula (1-1), a compound represented by the following general formula (1-2), and a compound represented by the following general formula (1-3).
[화학식 1-1][Formula 1-1]
[화학식 1-2][Formula 1-2]
[화학식 1-3][Formula 1-3]
이 때, 상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액 유래일 수 있다.
At this time, the compound represented by Formula 1 may be derived from a culture medium of Sparassis latifolia .
나아가, 본 발명은 앞서 언급한 천연 살선충 조성물을 포함하는 천연 살선충제를 제공하며, 상기 천연 살선충제는 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있다.Furthermore, the present invention provides a natural nematocide comprising the above-mentioned natural nematicide composition, wherein said natural nematocide is selected from the group consisting of Bursaphelenchus RTI ID = 0.0 > xylophilus . < / RTI >
또한, 본 발명의 천연 살선충제는 앞서 언급했듯이 소나무재선충(Bursaphelenchus xylophilus)에 대한 살선충 활성을 가질 수 있으며, 하기 수학식 1에 의거할 때, 처리 48시간 이후 80 ~ 100% 살선충율을 보일 수 있다.In addition, the naturally occurring nematode of the present invention may have nematocidal activity against Bursaphelenchus xylophilus, as mentioned above, and has a 80-100% live nematode rate after 48 hours of treatment, Can be seen.
[수학식 1][Equation 1]
하기의 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하기로 하지만, 하기 실시예가 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니며, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위한 것으로 해석되어야 할 것이다.
The present invention will now be described more specifically with reference to the following examples. However, the following examples should not be construed as limiting the scope of the present invention, and should be construed to facilitate understanding of the present invention.
실시예Example
준비예Preparation Example 1 : 꽃송이버섯 균주의 분리 및 동정 1: Isolation and Identification of Staphylococcus aureus
수원 소재의 국립산림과학원 화학미생물과 버섯연구실로부터 형태적 분류 및 ITS 분석을 통하여 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주를 동정받았다.
From the Forest Research Institute of Chemical Laboratory Microbiological and mushrooms neck Material morphological classification and blossoms mushrooms (Sparassis through ITS analysis latifolia ) were identified.
준비예Preparation Example 2 : 2 : 소나무재선충의Pine 분리 및 동정 Isolation and identification
소나무재선충 감염목의 목재를 버크만깔대기법을 이용하여 선충을 분리하였으며, 분리된 선충 중에서 소나무재선충의 형태 및 유전적 특성을 이용하여 소나무재선충을 순수 분리하였다.Nematodes were isolated from the wood of pine woodworm infected with Berkman funnel method. Pine woodworms were isolated purely from the isolated nematodes using the morphology and genetic characteristics of pine woodworms.
순수 분리된 소나무재선충은 균핵이 형성되지 않은 잿빛곰팡이병균(Botrytis cineria)을 미리 순수 배양한 후에 그 배지에 계대배양하여 생육시켰다.
The purely isolated pine needles were cultivated by subculture in the medium after pre - culture of the gray mold disease ( Botrytis cineria ) without sclerotia.
실시예Example 1 One
준비예 1에서 동정받은 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주를 감자전분(Potato Starch), 덱스트로오스(dextrose), 증류수(Distilled water) 및 한천(Agar)을 포함하는 PDA(potato dextrose agar) 배지를 사용하여 23℃에서 30일간 배양실에서 배양 후 접종원으로 사용하였고, 다시 감자전분(Potato Starch), 덱스트로오스(dextrose) 및 증류수(Distilled water)을 포함하는 PDB(potato dextrose broth) 배지에 접종하여 23℃에서 60일간 배양하여 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액을 제조하였다.
Sparassis mushrooms that have been identified in Preparation Example 1 latifolia ) was cultivated in a culture room at 23 占 폚 for 30 days using a potato dextrose agar (PDA) medium containing potato starch, dextrose, distilled water and agar The cells were inoculated into a PDB (potato dextrose broth) medium containing Potato Starch, dextrose and distilled water and cultured at 23 ° C for 60 days to obtain Sparassis latifolia ) Culture broth.
실시예Example 2 2
실시예 1에서 제조된 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액을 여과지(Watman, C5)로 여과한 후, 분획여두를 이용하여 여과액을 에칠아세테이트(ethyl acetate, CH3COOC2H5)로 분획하였으며, 에칠아세테이트 층을 증기감압농축기(evaporator)를 이용하여 농축하여, 에칠아세테이트 분획물을 제조하였다.
The sparassis mushroom prepared in Example 1 latifolia ) was filtered with a filter paper (Watman, C5), and the filtrate was fractionated with ethyl acetate (CH 3 COOC 2 H 5 ) using a separating funnel. The ethyl acetate layer was evaporated using a evaporator ) To prepare an ethylacetate fraction.
실험예Experimental Example 1 One
준비예 2의 소나무재선충을 멸균 증류수에 현탁하고, 상기 소나무재선충 약 100마리가 포함되어 있는 현탁액 0.5mL씩 멸균된 용기에 옮긴다.The pine reeves of Preparation Example 2 are suspended in sterilized distilled water and transferred to a sterile container in 0.5 mL of suspension containing about 100 pine reeves.
상기 용기에 각각 실시예1에서 제조된 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액 및 실시예 2에서 제조된 에칠아세테이트 분획물 0.5mL을 첨가하여 살선충 활성 검정을 실시하였다.The container was filled with the sparassis mushroom prepared in Example 1 latifolia ) and 0.5 mL of the ethylacetate fraction prepared in Example 2 were added to the test sample.
살선충 활성 검정은 상기 용기를 현미경으로 관찰하면서 죽은 소나무재선충 수를 확인하였으며, 핀셋을 이용하여 생사 여부를 확인하면서 24시간 마다 총 3회 측정하였다.The nematode activity assay was carried out by observing the above container with a microscope and confirming the number of dead pine tree reeduces.
살선충율(%)은 하기 수학식 1을 통해 측정하여, 그 결과를 표 1에 기재하였다.The percentage of live nematodes (%) was measured by the following formula (1), and the results are shown in Table 1.
[수학식 1][Equation 1]
대조군으로 상기 용기에 실시예 1에서 제조된 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액 및 실시예 2에서 제조된 에칠아세테이트 분획물이 첨가하지 않고, 멸균 증류수 0.5mL를 첨가하여 살선충 활성 검정을 실시하였다.
As a control, the above-mentioned container was filled with the Sparassis mushroom prepared in Example 1 latifolia ) and the ethyl acetate fraction prepared in Example 2 were not added, and 0.5 mL of sterilized distilled water was added to perform the nematode activity assay.
eelworm
Pine tree
표 1과 같이 실시예 1에서 제조된 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액은 살선충 활성 검정 24시간 후 30%의 살선충율, 48시간 후 36%의 살선충율 및 72시간 후 49%의 살선충율을 보임을 확인할 수 있었으며, 실시예 2에서 제조된 에칠아세테이트 분획물은 24시간 후 67%의 살선충율, 48시간 후 91%의 살선충율 및 72시간 후 96%의 살선충율을 보임을 확인할 수 있었다.The blossoms prepared in Example 1 as shown in Table 1 Mushroom (Sparassis latifolia ) showed a 30% live nematode rate at 24 hours after sow nematode activation test, 36% live nematode rate after 48 hours and 49% live nematode rate after 72 hours. In Example 2 The ethyl acetate fraction showed a mortality rate of 67% at 24 hours, 91% at 48 hours and 96% at 72 hours after 24 hours.
또한, 실시예 1에서 제조된 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액와 실시예 2에서 제조된 에칠아세테이트 분획물을 비교하면, 살선충 활성 검성 48시간 후, 실시예 2에서 제조된 에칠아세테이트 분획물의 살선충율이 실시예 1에서 제조된 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액보다 우수함을 확인할 수 있었다.
In addition, the sparassis mushroom prepared in Example 1 latifolia ) and the ethyl acetate fraction prepared in Example 2, the flesh rate of the ethyl acetate fraction prepared in Example 2 after 48 hours from the examination of the nematode activity was higher than that of the Sparassis mushroom prepared in Example 1 latifolia ) culture broth.
Claims (11)
( Bursaphelenchus xylophilus) characterized by comprising an ethyl acetate fraction obtained by fractionating a culture of a sparassis latifolia strain with an extraction solvent containing ethyl acetate (CH 3 COOC 2 H 5 ) as an active ingredient ≪ / RTI >
상기 배양액은 꽃송이버섯 균주를 pH 4.0 ~7.0 및 15 ~ 20℃의 배지에서 50 ~ 70일 동안 배양한 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.
The method according to claim 1,
Wherein the culture broth is cultivated in a medium of pH 4.0 to 7.0 and 15 to 20 占 폚 for 50 to 70 days.
상기 배지는 감자전분(Potato Starch), 덱스트로오스(dextrose), 효모추출물(Yeast Extract), 펩톤(Peptone) 및 증류수(Distilled water) 중 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.
The method of claim 3,
Wherein the medium comprises at least one of potato starch, dextrose, yeast extract, peptone, and distilled water.
상기 에틸아세테이트 분획물은 하기 화학식 1로 표시되는 화합물 및 이의 유도체 중 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.
[화학식 1]
상기 화학식 1에 있어서, R1 및 R2는 각각 독립적으로, -H, -OH 또는 -OCH3이다.
The method according to claim 1,
Wherein the ethyl acetate fraction comprises at least one compound selected from the group consisting of compounds represented by the following formula (I) and derivatives thereof.
[Chemical Formula 1]
In Formula 1, R 1 and R 2 are each independently -H, -OH or -OCH 3 .
상기 에틸아세테이트 분획물은 하기 화학식 1-1로 표시되는 화합물, 하기 화학식 1-2로 표시되는 화합물 및 하기 화학식 1-3으로 표시되는 화합물 중 1종 이상을 포함하는 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.
[화학식 1-1]
[화학식 1-2]
[화학식 1-3]
The method according to claim 6,
Wherein the ethyl acetate fraction comprises at least one compound selected from the group consisting of a compound represented by the following formula (1-1), a compound represented by the following formula (1-2), and a compound represented by the following formula (1-3).
[Formula 1-1]
[Formula 1-2]
[Formula 1-3]
상기 화학식 1로 표시되는 화합물은 꽃송이버섯(Sparassis latifolia) 균주 배양액 유래인 것을 특징으로 하는 천연 살선충 조성물.
The method according to claim 6,
The compound represented by the above formula (1) Zinnia mushrooms (Sparassis latifolia ) culture broth.
9. A nematicide for Bursaphelenchus xylophilus comprising the natural nematode composition of any one of claims 1, 3, 4 and 6 to 8.
상기 천연 살선충제는 하기 수학식 1에 의거할 때, 처리 48시간 이후 80 ~ 100% 살선충율을 보이는 것을 특징으로 하는 천연 살선충제.
[수학식 1]
10. The method of claim 9,
Wherein said natural nematocide exhibits an 80-100% live nematode rate after 48 hours of treatment, according to the following formula (1).
[Equation 1]
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