KR20160079821A - C1-에스테라제 억제제를 사용한 장기 이식 환자에서의 항체-매개성 거부반응의 치료 방법 - Google Patents

Abstract

이식된 장기의 항체-매개성 거부반응 (AMR)을 치료하거나 예방하기 위한 방법 및 조성물이 제공된다.

Description

C1-에스테라제 억제제를 사용한 장기 이식 환자에서의 항체-매개성 거부반응의 치료 방법 {METHODS OF TREATING ANTIBODY-MEDIATED REJECTION IN ORGAN TRANSPLANT PATIENTS WITH C1-ESTERASE INHIBITOR}

관련 출원들에 대한 교차참조

본 출원은 2013년 11월 22일에 출원된 미국가출원 제61/907,550호, 및 2014년 7월 25일에 출원된 미국가출원 제62/029,086호의 이익을 주장하고, 이의 전문은 본원에 참조로 포함된다.

발명의 분야

본 발명은 환자에서의 장기 이식 거부반응을 치료하기 위한 방법, 화합물 및 조성물 및 보다 특별하게는 비배타적으로 C1-에스테라제 억제제를 사용하는 장기 이식 환자에게서의 항체-매개성 거부반응을 치료하거나 예방하기 위한 방법 및 약제학적 조성물에 관한 것이다.

매년 환자는 공여자의 세포 표면 인간 백혈구 항원 (HLA)에 대해 유도된 기존의 항체로 인해 가능한 생명-구호 장기 이식을 받는 것이 금지되고 있다. 이와 같은 환자는 이들의 공여자 장기에 "감작된(sensitized)" 것으로 고려되며, 이는 이전의 이식, 임신, 및/또는 혈액 수혈의 결과일 수 있다. 특정 공여자-특이적 항체 (DSA)의 존재는 공여자 일치(donor match)를 나타낼 수 있는 다른 인자와 무관하게 이식의 금지사항이다. DSA 존재는 공여자 장기 이식 후의 초급성 (즉각적인) 항체-매개성 거부반응 (AMR) 및 기증된 장기의 가능한 손실을 야기할 수 있다. DSA를 갖는 환자 (즉, 감작된 환자)는 따라서 허용가능한 공여자 장기에 대해 상당하게 더 긴 대기 시간을 소비한다. 따라서, 감작된 환자는 장기 기증에 대해 하나가 아닌 적어도 2개의 장애를 직면한다: (1) 혈액형 적합성, 및 (2) 감작(sensitization). 더욱이, 일부 환자는 이식 이후 이들의 공여자 장기에 대한 항체가 발달될 수 있고, 이와 같은 DSA는 "드노보(de novo)"로 명명된다. 만성적 거부반응으로 이의 이식이 상실된 대다수의 환자는 드노보 DSA의 결과로서 이와 같이 되는 것으로 현재 알려져 있다.

현재, 항체 매개성 거부반응을 갖는 감작된 환자에게 이용가능한 치료적 선택은 거의 없다. 이용가능한 치료는, 예를 들면, 정맥내 면역글로불린 (IVIg)을 사용하거나 사용하지 않는 리툭시맙, 및 혈장분리반출술(plasmapheresis)을 포함한다.

이용가능한 치료가 초기에 AMR을 치료하는데 가변적인 효과를 나타내지만, 이의 효과는 감소되고, 거의 절반의 환자에게서 지속되지 않는다. 따라서, 현재 이용가능한 치료의 장기간 효과는 좋지 않고, 교차반응 양성 장기 이식을 받는 환자에 대한 전체 이식 생존율을 개선하는 치료 및 조성물 및 AMR의 효험있는 치료에 대해 본 기술분야에서 미충족된 절실한 필요성이 존재한다.

발명의 요약

본 발명은 유리하게는 이식된 장기의 항체-매개성 거부반응 (AMR)을 겪고 있거나 이를 겪을 위험성이 있는 장기 이식 환자에게 C1-에스테라제 억제제 (C1-INH) 단백질을 투여하기 위한 방법 및 조성물을 제공함으로써 본 기술분야의 필요성을 충족시킨다.

일 양태에 있어서, 본 발명은 필요로 하는 환자에게 장기 동족이식편의 AMR을 치료하기 위한 방법을 제공한다. 치료적 유효량의 C1-INH이 사용된다. 본 방법은 치료적 유효량의 C1-INH의 초기 및/또는 단기간 지속 투여를 포함한다. 본 방법은 장기간 지속되는 치료 효과를 제공하기에 충분한 치료적 유효량의 C1-INH의 용도를 포함한다. 본 방법은 치료적 유효량의 C1-INH의 초기 및/또는 단기간 지속 투여를 포함하고, 여기서 치료적 유효량의 C1-INH은 장기간 지속되는 치료 효과를 제공하기에 충분하다. 필요로 하는 환자에게서의 장기 동족이식편의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 치료 방법에 사용하기 위한 C1 에스테라제 억제제 (C1-INH)가 또한 포함된다.

C1-INH는 인간 혈장 유도된 C1-INH, 예컨대 Cinryze®일 수 있다. 임의로, 본 발명의 방법은 DSA를 제거하기 위해 환자에게 혈장분리반출술을 시행하는 것을 포함할 수 있다. 초기에, 혈장분리반출술에 대한 보조물일 수 있는 C1-INH를 사용한 단기 치료는 혈장분리반출술 자체와 비교하여 만성적 장기 동족이식편 거부반응의 비율을 감소시킬 수 있다. 다른 구현예에서, 본 발명의 방법은 정맥내 면역글로불린 (IV Ig) 및/또는 신선 동결 혈장을 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 저장된 적혈구가 추가로 또는 대안적으로 투여될 수 있다. 추가 구현예에서, 본 발명의 방법은 항-림프구 제제, 리툭시맙, 에쿨리주맙, 보르테조밉, 또는 이들의 조합을 투여하는 단계를 포함할 수 있다. 본 발명의 방법의 특정 구현예에서, 환자는 초급성 및/또는 급성 AMR을 치료하기 위한 하나 이상의 다른 공지된 요법 (예를 들면 혈장분리반출술, IV Ig 치료, 하나 이상의 항-림프구 제제, 리툭시맙, 에쿨리주맙, 보르테조밉, 또는 이들의 조합을 사용한 치료, 및 바람직하게는 혈장분리반출술 및 IVIg 치료)으로 치료 중이거나 또는 치료받은 자이다.

또한, 필요로 하는 환자에게서의 장기 동족이식편의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 치료 방법에서의 동시 또는 순차적인 사용을 위한 조합된 제제로서 C1-INH, 및 항-림프구 제제, 리툭시맙, 보르테조밉, 에쿨리주맙 및 면역글로불린 (Ig) 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 추가의 생물학적 활성제를 포함한다. 바람직한 추가의 생물학적 활성제는 면역글로불린 예를 들면 정맥내 면역글로불린이다.

추가로, 본 발명의 방법에서, 치료되는 장기(즉, 환자에게 이식되어야 하거나 이식된 장기)는 고형 장기일 수 있다. 게다가, 고형 장기는 신장, 췌장, 창자, 심장, 폐, 및 간으로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다. 특정 구현예에서, 장기는 신장이다.

또 하나의 양태에서, 본 발명은 필요로 하는 환자에게서 장기 동족이식편의 AMR의 진행을 치료하거나 지연시키기 위한 약제학적 조성물을 제공한다. 약제학적 조성물은 C1-INH; 추가의 생물학적 활성제, 예컨대 항-림프구 제제, 리툭시맙, 에쿨리주맙, 면역글로불린 (Ig), 및 이들의 조합; 및 약제학적으로 허용가능한 담체 매질를 포함할 수 있다.

또한, (i) C1-INH; 및 (ii) 항-림프구 제제, 리툭시맙, 보르테조밉, 에쿨리주맙, 및 면역글로불린 (Ig) 또는 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 추가의 생물학적 활성제를 포함하는 키트가 포함되고, 여기서 성분 (i) 및 (ii)는 환자에게 동시 또는 순차적인 투여를 위해, 임의로 환자에게서 장기 동족이식편의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 치료 방법에 사용하기 위해 저장된다. 바람직한 추가의 생물학적 활성제는 면역글로불린 예를 들면 정맥내 면역글로불린이다.

본 기술분야에서 현재 이용가능한 치료에 대조적으로, 본 발명은 장기간 지속되는 치료 효과를 제공하는, 이식 수령체뿐 아니라 장기 이식을 대기하거나 진행중인 환자에게서의 AMR의 치료를 위한 초기 및/또는 단기간 지속 요법을 제공한다.

본 발명의 예시적인 구현예의 전술한 요약 및 하기 상세한 설명은 첨부된 도면과 결합하여 읽는 경우 더 잘 이해될 수 있다:
도 1은 응고, 접촉, 및 보체 시스템에 대한 C1-에스테라제 억제제 (C1-INH)의 효과를 도식적으로 예시한다. 이에서 하기가 언급됨: 칼리크레인 (KK); 고분자량 키니노겐 (HMWK); 만노스-결합 단백질 (MBP); MBP-관련된 세린 프로테아제 (MASP); 조직 플라스미노겐 활성제 (tPA); 및 피브린 분해 생성물 (FDP).
도 2는 C1-INH로서 Cinryze®을 사용하는 C1-INH 억제제 투여에 대한 예시적인 도안을 도식적으로 예시한다. 이에서 하기가 언급됨: (a) 이식후 12개월 이내의 생검-증명 AMR; (b) 생검 입증 후 72 시간 내의 Cinryze® 또는 위약의 제1 투여; (c) Cinryze® 또는 위약의 제1 투여 이후 20일 (±24 시간); 및 (d) Cinryze® 또는 위약의 제1 투여 이후 90일 (±24 시간).
도 3은 14명의 대상체, 7명이 위약으로 치료되고, 7명이 C1-INH으로 치료된 도 2에서의 과정에 따른 예시적인 연구에서의 대상체에게 제공되는 관리의 표준을 나타내는 표이다. 이에서 하기가 언급됨: 신선 동결 혈장 (FFP) 및 저장된 적혈구 수혈 (PRBC).
도 4a 및 4b는 Cinryze® 또는 위약의 주입 이후 치료되는 환자에서의 기능성 C1-INH 혈장 농도 수준 (집단 평균)을 예시하는 그래프이다. 도 4a는 예시적인 연구에서의 13일의 과정에 걸친 Cinryze® 또는 위약의 주입 이후 기능성 C1-INH의 평균 혈장 농도를 도식적으로 나타낸다. 도 4b는 예시적인 연구에서의 제13일에서의 Cinryze® 또는 위약의 주입 이후 기능성 C1-INH의 평균 혈장 농도를 도식적으로 나타낸다. 도 4a 및 4b는 기능성 C1-INH의 기준선 수준이 공제된 각각의 집단에 대한 정정된 평균이다.
도 5는 Cinryze® 또는 위약으로 치료된 환자에게서의 신장 기능 (즉, 크레아티닌 청소율)에서의 평균 변화를 나타낸다. 크레아티닌 청소율은 AMR 환자에게서 크게 감소된다. 위약과 비교되는 바와 같이, Cinryze®를 투여함으로써, 크레아티닌 청소율은 대략 7일 이후 안정화되고, 위약으로 치료된 환자의 것과 동일한 정도로 떨어지지 않았다. 그러나, 예시적인 연구에서의 환자들은 혈장분리반출술 (및/또는 IVIg) 및 Cinryze® 또는 위약으로 치료된다는 점에 주목한다.
도 6a 및 6b는 만성적 사구체병증 (CG)의 존재를 예시하고 대비하는 헤마톡실린 및 에오신 (H&E) 염색제로 염색된 신장 조직 슬라이스를 나타낸다. 도 6a는 CG를 나타내지 않는 Cinryze®로 치료된 환자(6/7 환자 중 한명)에게서의 이식 후 6개월에서의 정상 신장 조직 슬라이스를 나타낸다. 도 6b는 위약으로 치료한 환자(3/7 환자 중 한명)에게서의 CG를 나타내는 이식 후 6개월에서의 신장 조직 슬라이스를 나타낸다.
도 7a 및 7b는 모세혈관망 (PTC)의 전자 현미경검사 (EM) 이미지를 제공한다. 도 7a는 PTC의 예시적인 정상 EM 이미지를 나타낸다. 도 7b는 위약으로 치료된 환자 (3/7 환자 중 한명)에게서 사구체병증을 나타내는 이식 후 6개월 시점에서 수득된 PTC의 EM 이미지를 나타낸다. 도 7a에서, CL = 모세관 내강, E = 상피, 및 BS = 기저막이다.
도 8은 대상체가 관리의 표준 (혈장분리반출술 및/또는 IVIg) 이외 위약 또는 C1-INH으로 치료되는 예시적인 연구의 제13일에서의 대상체에서의 측정된 C1-INH 항원 및 기능성 C1-INH 수준의 표를 포함한다. 보고된 C1-INH 항원 수준은 0.067 U/ml = lmg/ldL의 변환 인자를 사용하여 U/mL로 전환되는 단백질 중량 농도의 측정값에 기초한다.
도 9a 내지 9h는 그것의 6개월 임상 결과와 관련하여 예시적인 연구(도 8)의 13일에서 환자에게서 측정된 C1-INH 항원 및 기능성 C1-INH의 수준을 도식적으로 상호관련시킨다. 이에서 하기가 언급됨: CG는 좋지 못한 결과를 가지는 환자들의 것을 나타냄 (예를 들면, 위약 집단에서의 3/7 환자, Cinryze® 집단에서의 1/7 환자); 항원 (AG); 및 기능성 (Fnct). 추가적으로, CG를 나타내는 Cinryze(R) 집단 중 한명의 환자는 항-응고제를 받음과 동시에 생검 이후 출혈성 쇼크의 이상 반응을 나타냈다. 도 9a 및 9b는 위약 (도 9a) 및 Cinryze(R) (도 9b)을 받는 환자에서의 CG에 대한 기준선 정정된 C1-INH 항원 수준을 도식적으로 상호관련시킨다. 도 9c 및 9d는 위약 (도 9c) 및 Cinryze(R) (도 9d)을 받는 환자에서의 CG에 대한 기준선 정정된 C1-INH 수준을 도식적으로 상호관련시킨다. 도 9e 및 9f는 위약 (도 9e) 및 Cinryze(R) (도 9f)을 받은 환자에서의 CG에 대한 미조정된 C1-INH 항원 수준을 도식적으로 상호관련시킨다. 도 9g 및 9h는 위약 (도 9g) 및 Cinryze(R) (도 9h)을 받는 환자에서의 CG에 대한 미조정된 기능성 C1-INH 수준을 도식적으로 상호관련시킨다. 보고된 C1-INH 항원 수준은 0.067 U/ml = lmg/ldL의 변환 인자를 사용하여 U/mL로 전환되는 단백질 중량 농도의 측정값에 기초한다.
도 10a 및 10b는 혈청 C1-INH 항원성 (도 10a) 및 기능성 (도 10b) 수준에 대한 혈장분리반출술의 효과를 예시한다. 도 10a 및 10b에 나타낸 바와 같이, 혈장분리반출술은 혈청 C1-INH 항원성 및 기능성 수준을 감소시켰다.

항체-매개성 거부반응 (AMR)은 환자에게서 예를 들면, 심장, 폐, 간, 췌장, 창자 및 신장 동족이식편의 이식을 저지하는 것과 관련된다. 항체-매개성 거부반응 (AMR)에 대한 실험이 거의 없고 승인된 요법이 없고, 이식의 결과가 의료처치 및 의료지원 센터(Centers for Medicare and Medicaid)(CMS)에 의해 엄격히 모니터링되기 때문에, DSA를 갖는 장기 이식을 기다리는 환자는 일반적으로 이들이 감작된 공여자 장기를 받는 것이 대부분의 이식 센터에 의해 금지된다. 예를 들면, 매년 수천명의 말기 신장 질환 (ESRD) 환자는 공여자의 세포 표면 인간 백혈구 항원 (HLA)에 대해 유도된 기존의 항체 (DSA)로 인해 가능한 생명-구호 신장 이식을 받는 것이 금지되고 있다.

사전-이식 교차 선별시험(pre-transplant cross-match screening)(보체-의존적 세포독성 검정 또는 유세포측정)을 통해 확인되는, 이들의 순환하는 DSA의 존재는 이식에 대한 금지사항이다. DSA는 보체-매개성 파괴 및 궁극적으로, 이식된 장기의 손실을 초래하는 즉각적인, 또는 "초급성" 항체-매개성 거부반응 (AMR)을 야기할 수 있다.

미국(US)에서의 신장 이식 대기 목록에서의 대략 개인들의 3분의 1은 집단 HLA의 10% 이상에 대해 유도된 순환 항체를 가진다. 이들 감작된 환자는 비감작된 환자와 비교하여 이들이 이식에 대해 감작되지 않은 (즉, "교차반응 음성") 허용가능한 신장에 대해 상당하게 더 긴 대기 시간을 소비한다. 미국에서는, 매년 6,000명 ESRD (대기 목록) 환자 및 추가의 3,500명 신규 대기 목록 등록자가 자발적인 간 공여자를 가지나 감작 또는 혈액형 비적합성으로 인해 이식받을 수 없는 것으로 추산된다. 자발적인 간 공여자로부터의 신장의 감작된 환자에게로의 이식 불능은 감소된 공여자 신장에 대한 수요를 증가시키고, 따라서 모든 목록에 열거된 환자들에 대한 대기 시간이 증가한다.

미국의 의료처치 및 의료지원 센터 (CMS)에 의한 신장 이식 프로그램의 신임은 주로 신장 이식에 대한 국가적 기준 (~95%의 1년 장기 생존율)을 충족하거나 초과하는 특정 센터의 결과에 기초한다. 프로그램의 사망 또는 장기 실패율이 예상된 비율의 150%를 초과하는 경우, 프로그램은 비일치를 원용하고 신장 이식을 실시하기 위한 CMS 인증을 잃을 수 있다 (42 CFR 파트 482, §482.80 및 §482.82 [2007] 참조). 따라서, 고도로 감작되거나 교차반응 양성 환자에게 신장 이식을 수행하는 것이 꺼려진다. 자발적인 간 공여자를 갖는 많은 이들 환자들은 감소된 공여자 대기 목록으로 과도하게 부담되고, 수많은 사람이 이식을 기다리다 죽을 수 있다. 그러나, 급성 AMR의 예방 또는 치료에 있어서의 탈감작된 환자에 대한 유용한 요법 및/또는 보조물인 제제는 가능한 생명-구호 이식을 가능하게 할 뿐만 아니라 잠재적인 생체 공여자를 가지지 않는 자들에 대한 대기 목록 경쟁을 감소시킴으로써 이식에 있어서의 패러다임을 변화시키는데 일조할 수 있다.

정맥내 면역글로불린 (IVIg) 또는 혈장분리반출술 및 IVIg의 조합을 사용하여, 교차반응 양성이거나 또는 감작된 환자에서의 DSA 적정 농도의 감소는 일부 환자에서의 성공적인 신장 이식을 위해 음성 교차반응으로의 전환 및 "탈감작"을 가능하게 한다.

그러나, 이와 같은 프로토콜에도 불구하고, 10% 초과의 환자들은 초급성 거부반응 또는 공격성 급성 AMR로 인해 이식 이후 즉시 또는 거의 초기에 이들의 장기를 잃을 것이다. 게다가, 30%-50%의 환자는 이식후 1 내지 3개월 내에 대부분 급성 AMR을 겪을 것이다. 사실상, 1-년 장기 생존율은 DSA가 없는 환자에서의 대략 95%와 비교하여 DSA 및 AMR를 갖는 환자에서 60%-70%이었다. 그럼에도 불구하고, 일부 환자에 대해, 투석과 관련된 이병율 및 사망률은 교차반응 양성 신장 이식의 위험율을 보장한다. 이들 고위험성의 (교차반응 양성) 이식 환자에 대한 전반적인 결과를 개선할 미충족된 필요성이 잔존한다.

급성 AMR은 일반적으로 추가의 IVIg 및 혈장분리반출술로 치료된다. 그러나, 초기 급성 AMR로 진단된 환자의 대략 절반은 비만성적 섬유증, 사구체경화증, 및 섬유성 내피비후와 대개 관련되는, 이식 사구체병증 (TG)에 의해 증명되는 바와 같은 신장 동종이식편에 대한 돌이킬 수 없는 손상으로 고통받고 있다. TG는 이식된 장기에서 특이적으로 발생되는 사구체병증과 관련되기 때문에 TG는 CG의 하위부류이다. 치료 예컨대 IVIg 및/또는 혈장분리반출술은 이와 같은 치료는 결국 그것의 유효성을 상실하기 때문에 장기 치료 효과와 반대되는 단수명 활성을 제공한다. 본원에서 사용된 바와 같이 용어 "단수명 활성(short-lived activity)"은 예를 들면 단지 개입 요법만을 받는 경우 효과가 유지되는 AMR에 대한 치료 유형의 활성과 관련된다. 그에 반해서, 용어 "장기간 지속되는 치료 효과"는 예를 들면 요법의 중단 이후 약 3 초과 내지 6개월 동안 (예를 들면, 요법의 중단 이후 약 3, 4, 5, 6 개월 초과 또는 요법의 중단 이후 약 6 개월 또는 약 1년) 효과가 유지되는 AMR에 대한 치료 유형의 활성과 관련된다.

TG의 전술한 특징을 갖는 환자는 생검시 TG의 증거가 없는 환자와 비교하여 크게 손상된 장기 생존율을 가진다. 중증 급성 AMR을 갖는 일부 환자는 최종 치료 선택으로서 비장절제술을 하거나 하지 않는 리툭시맙 (항-CD20 항체) 및/또는 보르테조밉 (프로테아솜 억제제)을 포괄하는 구제 요법이 요구될 수 있다. (비상책 예컨대 비장절제술에 대한 필요성을 감소시켜) 효과적으로 급성 AMR을 치료하고, 감작된 ESRD 환자가 양성 교차반응에 대한 탈감작화 이후 이식이 승인될 수 있도록 전반적인 장기 생존율을 개선하는 제제에 대한 미충족된 절실한 필요성이 존재한다.

본 기술분야의 결점, 현재 AMR 요법의 개선점을 극복할 수 있는 요법의 개발을 실행하는 것은 DSA-매개성 TG 및 동족이식편의 최종적인 손실을 야기하는 근원적인 호스트 면역 반응을 다룰 것이 요구된다. 혈장분리반출술 및 IVIg는 DSA 적정 농도를 감소시킬 수 있다. 그러나, 이것의 용도는 보체 활성화의 결과로서 발생되는 조직 파괴를 다루지 못할 수 있다. HLA-DSA 복합체는 궁극적으로 막 공격 복합체의 형성 및 염증성 사이토카인의 지속적 방출을 야기하는 보체 캐스케이드의 고전적 경로를 활성화시킨다. 장기 파괴시의 보체의 역할의 증거로서, 모세혈관망 (PTC)에 따른 4번째 보체 단백질 분해 생성물 (C4d)의 축적은 AMR을 예측하게 하고, 좋지 못한 동족이식 생존율과 관련된다. 통상적으로 장기이식 실패와 관련되는 위험 인자를 조정한 이후, 감소된 신장 기능에 대한 신장 동종이식 생검을 필요로 하고, 생검시 C4d 염색된 그의 혈청에서 DSA를 갖는 환자는 생검시 DSA 또는 C4d 염색이 없는 환자에서 보다 3배의 장기 손실의 위험을 가진다. 따라서, 보체 억제제는 AMR의 치료에서 유용한 요법 및/또는 보조물을 입증할 것이다.

혈관발달된 동종이식편의 이식은 수령체의 공여자 HLA에의 노출과 관련된다. 공여자 HLA의 가공 및 수여는 이식된 동종이식편에 대한 수령체의 면역 반응을 결정한다. 가용성 공여자 항원이 수여되고 수령체의 CD4 T-림프구에 의해 인식되는 경우, 사이토카인 방출 (예를 들면, IL-2)은 급성 세포 거부반응을 야기하는 세포독성 T-세포 반응을 전파할 것이다. 공여자 HLA의 B-림프구 인식은 기억 B-세포 반응의 전파 및 DSA의 생성을 야기한다. HLA-DSA 복합체는 항체-매개성 거부반응을 야기하는 보체 시스템의 고전적 경로를 자극한다 (도 1).

DSA는 활성화된 C1q/r/s 및 C4를 생성하여, 결국 막 공격 복합체 (C5b-9)의 형성 및 염증성 사이토카인 방출을 생성하는 고전적 보체 경로 (C1)의 제1 성분과 복합화될 수 있다. 이들 사이토카인 (예를 들면, IL-2, IL-6 등)은 중성구 및 다른 매개체 (예를 들면, 혈소판 유도된 성장 인자)를 소환하여, 장기 내에서의 모세관 및 보다 큰 혈관에서의 응고 및 혈전증을 야기하는 조직의 섬유증 (비가역적 흉터), 내피 반응, 및 손상을 초래할 수 있는 국소적 염증성 반응을 금지시킨다. 손상의 범위 및 속도는 DSA가 존재하고 있는지 여부 (및 어느 정도)인지에 좌우된다.

(고전적 보체 경로의 활성화로) 기존의 DSA에 의한 공여자 HLA 인식은 이식된 동종이식편의 즉각적인 (초급성) 또는 초기 (1-3 개월 이내-가속화됨)의 손실을 야기한다. 이와 같은 병리학은 DSA의 완화시 유도되는 사전-이식 탈감작 프로토콜 (예를 들면, 혈장분리반출술 및/또는 IVIg)에 의해 일시적으로 완화될 수 있으나, 이러한 환자의 대략 50% 내에서 단수명 활성만을 제공한다.

추가로, 임상 증거는 감소된 신장 기능에 대한 신장 동종이식편 생검을 요구하고, 신장 동종이식편 생검시 C4d 염색 (보체 활성화의 증거)을 갖는 그의 혈청에서 DSA를 갖는 환자가 생검시 DSA 또는 C4d 염색을 갖지 않는 환자보다 3배 높은 장기 손실의 위험성을 가지는 것을 나타낸다. 동물 모델로부터의 데이타는 또한 동종이식편 거부반응에서의 보체의 역할을 지지한다. 공지된 DSA를 갖는 동물 중에서 사이노몰구스 원숭이에서의 타가이식의 연구에서, C4d를 갖는 54%의 원숭이는 생검시 C4d의 증거를 갖지 않는 이식된 원숭이에서의 단지 4%의 TG 비율과 비교되는, TG 발달된 조직병리학을 나타낸다.

말단 보체 (C5b-9) 단백질 (항체 매개성 고전적 보체 경로 활성화의 생성물)은 내피 세포로부터의 혈소판-유도된 성장 인자 및 섬유아세포의 생성을 유도할 수 있고, 이는 내막 섬유증, 비가역적 신장 이식 거부반응의 특징을 야기한다. 감작된 신장 이식의 전임상 마우스 모델은 부가적인 면역억제제로서 C5 억제제를 받은 동물에서 향상된 장기 생존율을 나타내었다. 이식 후 항-C5 단클론성 항체 에쿨리주맙이 제공된 16명의 감작된 인간 신장 이식 수령체의 연구에서, 단지 1/16 (6%)만 과거 대조군의 ~40%와 비교하여 이식 후 첫번째 1개월 이내에 급성 AMR이 발달되었다. 그러나, 모두는 지속적 C4d 염색을 가졌고, 4/16 (25%)는 TG/내피 세포 활성화와 일치되는 유의미한 변화를 가졌다. 장기간 후속조치는 대략 50%의 이들 환자가 요법의 중단 이후 TG를 가지나 과거 대조군과 상이하지 않은 것을 나타내었다.

고전적 보체 캐스케이드의 보다 근위의 신호전달 성분은 동종면역에서의 더 많은 역할을 가질 수 있다. 예를 들면, 보체 단백질 C3 또는 C4가 결핍된 마우스는 주면역적합 복합체 별도의 피부 이식에 대한 손상된 T-세포 및 B-세포 동종면역 반응을 가지는 한편, C5-결핍 마우스는 손상된 동종면역 반응을 나타내지 않았다. 따라서, AMR의 예방 또는 치료에 대한 C5 억제제에 대해 C1-INH의 보다 큰 이론적 효능이 존재한다. 본 발명은 본 기술분야의 필요성을 충족시키는 장기간 지속 치료 효과를 제공하는 C1-INH 치료를 이용하는 이와 같은 요법을 제공한다.

본 발명은 치료적 유효량의 C1-에스테라제 억제제 (C1-INH)를 투여하는 단계를 포함하는, 필요로 하는 환자에게서의 장기 동종이식편의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 치료 방법, 및 이와 같은 방법에서 사용하기 위한 C1-에스테라제 억제제 (C1-INH)에 관한 것이다. 본원에서 기재된 방법에 의한 거부반응으로부터 보존되는 장기 동종이식편은 고형 장기를 포함한다. 고형 장기의 대표적인 예는 심장, 간, 폐, 췌장, 창자, 및 신장을 포함한다. 특정 구현예에서, 고형 장기는 신장일 수 있다. 본 발명의 방법에서, 장기 이식은 타가이식을 포함한다. 설명을 위해, 타가이식은 이종기관 이식과 실질적으로 상이하다. 동종이식은 동일한 종 (인간-대-인간 이식)으로부터의 장기의 이식과 관련된다. 그에 반해서, 이종기관 이식은 상이한 종 (예를 들면, 돼지-대-인간 장기 이식)으로부터의 장기의 이식과 관련된다. 본 기술분야에서의 숙련가는 C1-INH 요법의 중단은 이종기관의 이식에서의 즉각적인 AMR을 야기할 것이라는 것을 인식할 수 있을 것이다. 그러나, 이것은 교차 종 감작화가 존재하지 않기 때문에 인간 타가이식과 무관하다.

본원에서 사용된 바와 같이, 용어들 "치료", "치료함" 등은 예를 들면 원하는 약리학적 또는 생리적 효과를 얻기 위한 수단과 관련된다. 효과는 질병, 외관, 질환, 또는 증상을 완전하게 또는 부분적으로 예방하는 것과 관련하여 예방적인 것일 수 있고/있거나 질병 및/또는 질병 또는 질환에 기인할 수 있는 역효과의 부분적이거나 완전한 치료와 관련하여 치료적인 것일 수 있다. 기작의 임의의 하나의 이론에 구속됨 없이, 본 발명의 방법은 보체 시스템의 성분을 억제함으로써 장기 이식에서의 AMR을 예방하고/하거나 치료하는 것으로 여겨진다.

본원에 기재되고 정의된 바와 같은 다른 생물학적 활성 제제와 조합하여 또는 단독으로, 그리고 본원에 기재되고 정의된 바와 같은 추가의 치료 단계와 조합하여, 본원에 기재되고 정의된 바와 같은 C1-에스테라제 억제제 (C1-INH)를 투여함으로써, 장기 동종이식편의 AMR의 치료 및/또는 예방이 달성될 수 있는 것으로 전술한 것으로부터 이해될 수 있을 것이다. 하기 효과는 본 발명에 의해 달성될 수 있다.

교차반응 양성 장기 이식 (환자가 사전-이식 교차반응 스크리닝 (보체-의존적 세포독성 검정 또는 유세포측정)을 통해 확인될 수 있는 순환 DSA을 가지는 장기)을 받은 환자에게서의 이식 생존율에서의 개선 또는 증가. 이는 본 발명에 따라 치료되지 않은 환자, 또는 본 발명에 따른 치료 이전의 동일한 환자와 비교될 수 있다.

본 발명의 방법은 따라서 교차반응 양성 장기 (예를 들면 신장) 이식을 받은 환자에게서의 이식 생존율을 개선하거나 증가시키는 방법으로서 기재될 수 있다.

공여자 장기 이식후의 AMR이 만성적 사구체병증 (CG) 및/또는 이식 사구체병증 (TG), 증여된 장기의 손실, 또는 감소된 장기 생존 (또는 감소된 1년 장기 생존율)을 야기할 수 있기 때문에, 본 발명의 방법은 따라서 선택적으로 만성적 사구체병증 (CG) 및/또는 이식 사구체병증 (TG)를 치료하거나 예방하기 위한 방법, 이식된 장기의 손실을 치료하거나 예방하기 위한 방법, 또는 예를 들면 동종이식편 환자에게서의 장기 생존을 개선하기 위한 (또는 1년 장기 생존율을 증가시키기 위한) 방법으로서 표현될 수 있다.

신장 이식의 맥락에서, 본 발명의 방법은 본 발명에 따라 치료되지 않은 환자, 또는 본 발명에 따른 치료 이전의 동일한 환자와 비교하는 경우, 이식된 신장의 증가된 및/또는 지속된 신장 기능을 야기할 수 있다. 이와 같이 본 발명의 방법은 환자에서의 이식된 신장의 신장 기능을 증가시키고/시키거나 지속하는 방법으로서 표현될 수 있다.

본 발명의 방법이 보체 시스템의 성분을 억제함으로써 장기 이식에서의 AMR을 예방하고/하거나 치료하는 것으로 여겨지기 때문에, 본 발명의 방법은 예를 들면 동종이식편 환자에게서 보체 활성화로부터 야기되는 조직 파괴 조직을 치료하거나 또는 예방하기 위한 방법으로서 기재될 수 있다.

이와 같이 AMR을 치료하거나 예방하기 위한 방법 또는 이러한 방법에서 사용하기 위한 C1-INH에 대한 임의의 참조는 하나 이상의 상기 방법, 또는 이와 같은 방법에서 사용하기 위한 C1-INH에 대한 참조인 것으로 이해될 수 있다.

추가적으로, 치료와 관련하여 사용되는 바와 같은 용어 "단기간 지속"은 약물 치료 활성의 지속시간 (예를 들면, 투여 기간)과 관련되고, 이는 유리하게는 약 1 내지 30 일 동안 일어날 수 있다. 특정 양태에서, 치료의 단기간 지속은 약 10 내지 20일일 수 있다. 바람직한 양태에 있어서, 치료의 단기간 지속은 약 13일 (예를 들면 약 11 내지 18, 12 내지 15일)일 수 있다.

치료와 관련되하여 본원에서 사용되는 용어 "초기"는 치료의 시기와 관련되고, 이는 유리하게는 (1) 장기 이식, (2) 관리의 표준으로의 치료 (혈장분리반출술 및/또는 IVIg), 및/또는 (3) AMR의 진단의 1 내지 90일 이내에 일어나거나 개시될 수 있다. 바람직한 양태에서, 치료는 약 5일 미만 내지 10일 내에 일어나거나 개시될 수 있다. 따라서 치료는 (1) 장기 이식, (2) 관리의 표준으로의 치료 (혈장분리반출술 및/또는 IVIg), 및/또는 (3) AMR의 진단의 약 5일 미만 내지 10일 내에 일어나거나 개시될 수 있고, 약 10 내지 30일 동안 지속될 수 있다.

"만성적 사구체병증" 또는 "CG"는 장기 이식 환자에서의 AMR의 임상 마커이고, 이는 본원에서 사용된 바와 같이 예를 들면 사구체경화증, 사구체 기저막 내피비후 및 적층, 및/또는 사구체의 진행 중인 염증을 포함하는 신장 조직에서 발견되는 유해한 징후와 관련된다. 세관 혈관염이 또한 나타날 수 있다. 본 발명의 방법은 본 발명에 따라 치료되지 않은 환자, 또는 본 발명에 따른 치료 이전의 동일한 환자와 비교하여, 치료된 환자에서의 CG의 줄어든 또는 감소된 발생을 야기할 수 있다. 이러한 효과는 예를 들면 실시예와 관련되는 바와 같이 조직학적 또는 EM 시험을 사용하여 적절한 샘플에서의 조직의 관찰에 의해 관측될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "이식 사구체병증" 또는 "TG"는 이식 설정에서 일어나는 만성적 사구체병증 (CG)와 관련된다. TG 및 CG는 본 발명을 기술하는데 상호교환적으로 사용될 수 있다.

환자는 일반적으로 장기 이식 환자 (예를 들면 신장 이식 또는 동종이식편 환자, 예를 들면 이식 또는 동종이식편을 받았거나 받아야 하는 자)인 것으로 이해될 수 있다. 환자는 AMR을 겪을 수 있고 또는 AMR의 위험이 있을 수 있다. AMR은 존재하는 공여자-특이적 항체 (DSA), 예를 들면 이식 또는 드노보 DSA 이전에 존재하는 공여자-특이적 항체의 결과로서 일어날 수 있다.

환자는 AMR에 대한 하나 이상의 다른 요법 (예를 들면 정맥내 면역글로불린 (IVIg), 또는 혈장분리반출술 및 IVIg의 조합, 또는 혈장분리반출술)으로 치료받고 있을 수 있고, 또는 AMR에 대한 하나 이상의 다른 요법으로 치료받았을 수 있다. 치료는 DSA 적정 농도를 감소시키는 것이 바람직하고, 이에서 항체는 이식되어야 하는 또는 이식되어진 장기의 HLA에 대해 유도된다.

따라서 AMR의 위험이 있는 환자는 특정 공여자-특이적 항체 (DSA)를 가진 환자를 포함한다. 이것은 일반적으로 공여자 일치를 나타낼 수 있는 다른 인자와 무관하게 이식에 대한 금지사유이다. 이들 환자는 또한 "감작됨"으로 기재될 수 있다.

환자는 말기 신장 질환 (ESRD) 환자일 수 있다. ESRD 환자는 공여자의 세포 표면 인간 백혈구 항원 (HLA) (예를 들면, 감작된 ESRD 환자)에 대해 유도된 기존의 항체 (DSA)를 가질 수 있다.

환자가 감작되는 경우, 이들은 임의로 대상체를 치료하여 이들을 탈감작시킬 수 있고, 또는 본 발명의 치료 (예를 들면, DSA 적정 농도를 감소시키기 위한 치료, 예를 들면 정맥내 면역글로불린 (IVIg), 또는 혈장분리반출술 및 IVIg의 조합, 또는 혈장분리반출술)의 시점에서 이와 같은 치료를 받을 수 있다. 따라서, 환자는 치료를 받았을 수 있고, 또는 DSA 적정 농도를 감소시키기 위한 이와 같은 치료를 받을 수 있다 (예를 들면, 정맥내 면역글로불린 (IVIg) 또는 혈장분리반출술의 조합, 또는 혈장분리반출술을 받을 수 있다). 탈감작 치료는 바람직하게는 DSA 적정 농도를 감소시키기 위한 탈감작 치료이고, 이에서 항체는 이식되거나 또는 이식되어진 장기의 HLA에 대해 유도된 것이다.

환자는 DSA 적정 농도를 감소시키기 위한 치료를 받는 경우, 예를 들면 정맥내 면역글로불린 (IVIg) 또는 혈장분리반출술의 조합, 또는 혈장분리반출술을 받는 경우, 이것은 본 발명의 치료를 개시하기에 앞선 전주, 2주, 4주, 1개월, 6주, 2개월, 또는 6 개월 이내에, 또는 전년도 이내인 것이 바람직하다.

C1 에스테라제 억제제 (C1-INH)는 세린 프로테아제 억제제 (SERPIN)의 종에서의 내인성 혈장 단백질이고, 보체, 접촉, 및 응고 경로에서의 광범위한 억제제 활성을 가진다. C1-INH는 C1r 및 C1s을 결합시킴으로써 보체 시스템의 고전적 경로를 억제하고, 렉틴 경로에서 만노스-결합된 렉틴-관련 세린 프로테아제를 억제한다. 본 발명의 C1-INH는 혈장 유도된 C1-INH일 수 있고, 또는 재조합으로 생산된 C1-INH일 수 있고, 두 경우에서 분리될 수 있다. 바람직하게는, 본 발명의 C1-INH는 혈장 유도된 C1-INH이다. 바람직하게는 본 발명의 C1-INH는 나노여과된 것이다.

본원에서 사용된 바와 같은 용어 "단위(unit)" 또는 "U"는 인간에서의 생리적 수준 (즉, 1 U/mL의 혈청은 생리적인 것임)으로 정규화된 단백질 (C1 INH) 물질의 측정값과 관련된다. 대안적으로, 일(1) 단위는 다르게 나타내지 않는 한 240 μg의 단백질 물질이다.

나노여과된 혈장 유도된 C1-INH (Cinryze®; Viropharma)는 선천성 맥관부종 (HAE), 내인성 C1에스테라제 억제제의 구성적 결핍 또는 기능이상으로 특정되는 질환을 갖는 청소년 및 성인 환자에서의 맥관부종 공격에 대한 일반적인 예방을 위해 FDA 승인된 것이다.

Cinryze®는 무작위 시도뿐만 아니라 확장 시도에서의 연구되는 HAE를 가지는 환자에서의 경험을 통해 인간에게 잘 용인되는 것으로 공지되어 있다. HAE에 대해 사용되는 용량으로의 보고된 가장 빈번한 이상 반응은 두통 및 비인두염이었다. C1-INH는 단독 또는 예를 들면 고전적 보체 경로 (예를 들면, 항체-매개성 질환) 및 렉틴 경로 (예를 들면, 허혈 재관류 손상)를 나타내는 질환에 대한 병용 요법 또는 조성물의 일부로서의 이상적인 치료제이고, 이는 본 발명에 바람직하다. 또한, 코네스타트 알파; 인간 C1 에스테라제 억제제 (rhC1-INH) (이는 트랜스제닉 토끼의 젖에서 재조합 DNA 기술에 의해 생산된 것임)의 재조합 유사체가 언급된다. 본원에서 사용된 바와 같은 용어 "유효량"은 화합물 또는 조성물이 환자에게 투여되는 경우 유익한 임상 결과를 달성하는 화합물 또는 조성물의 양과 관련된다. 예를 들면, 본 발명의 조성물이 예를 들면, AMR을 갖는 환자에게 투여되는 경우, "유익한 임상 결과"는 증가된 및/또는 지속된 신장 기능 및/또는 환자의 동종이식편 (예를 들면, 이식된 신장)의 장수명에서의 증가를 포함한다. 본원에서 사용된 바와 같은 용어 "신장 기능"은 신체로부터 크레아티닌을 청소하는 환자의 신장의 능력과 관련하여 정의된다. 따라서, 예를 들면, 증가된 신장 기능을 나타내는 환자는 특정 크레아티닌 청소율 능력 (mL/min) (즉, 기준선)을 나타낼 것이고, 이와 같은 청소율 능력 또는 신장 기능은 치료 과정에서 그리고 치료 이후의 기준선으로부터의 크기를 증가시킬 것이다. 임의의 증가는 예를 들면 통계적으로 유의미하고, 적어도 10%, 20%, 50%, 100%의 증가를 포함할 수 있다. 본 발명에 따라 치료되지 않은 환자, 또는 본 발명에 따른 치료 이전의 동일한 환자와 임의의 비교가 이루어질 수 있다.

또한, 예를 들면 CG 및/또는 TG의 존재 또는 범위 (CG 및/또는 TG의 존재 또는 범위에서의 감소는 유익한 결과임)를 결정함으로써 유익한 결과가 평가될 수 있다. 이것이 정량화될 수 있는 한도에서, 임의의 이러한 감소는 예를 들면 통계적으로 유의미하고, 적어도 10%, 20%, 50%, 100%의 감소를 포함할 수 있다. 본 발명에 따라 치료받지 않은 환자, 또는 본 발명에 따른 치료 이전의 동일한 환자와 임의의 비교가 이루어질 수 있다.

유익한 임상 결과는 임의의 시점에서 달성되고 평가되거나 결정될 수 있다. 본 발명이 장기-지속 치료 효과를 제공하는 관측과 유사하게, 유익한 임상 결과는 요법의 중단 이후 약 3개월 초과 내지 6 개월 (예를 들면, 요법의 중단 이후 약 3, 4, 5, 6 개월 초과 또는 요법의 중단 이후 약 6 개월 또는 약 1년)에 달성되고 평가되거나 결정될 수 있다. 본 발명의 결과로서 신장은 요법의 중단 이후 약 3개월 초과 내지 6 개월 (예를 들면, 요법의 중단 이후 약 3, 4, 5, 6 개월 초과 또는 요법의 중단 이후 약 6 개월 또는 약 1년)에서 (i) 증가된 및/또는 지속된 기능, 및/또는 (ii) CG 및/또는 TG의 감소된 존재 및/또는 양을 나타낼 수 있다. 본 발명에 따라 치료받지 않은 환자, 또는 본 발명에 따른 치료 이전의 동일한 환자와 임의의 비교가 이루어질 수 있다.

물질을 기술하는데 있어 본원에서 사용된 바와 같은 용어 "단리된"은 예를 들면 이의 최초 환경 (예를 들면, 물질이 자연 발생되는 경우 자연 환경)으로부터 떼내어진 물질과 관련된다. 예를 들면, 생체 동물에 존재하는 자연 발생 폴리펩타이드 (즉, 단백질)은 단리된 것이 아니라, 자연계에서의 공존하는 모든 또는 일부의 물질로부터 분리된 동일한 폴리펩타이드가 단리된 것이다.

게다가, 본 발명을 실시하는데 사용되는 "폴리펩타이드" 또는 "단백질"은 천연 단백질, 합성 단백질일 수 있거나, 바람직하게는 재조합 단백질일 수 있다. 게다가, 본원에 기재된 단백질은 자연적으로 정제된 생성물, 또는 화학적으로 합성된 생성물, 또는 원핵 또는 진핵 숙주 (예를 들면, 박테리아, 효모, 고등 식물, 곤충, 또는 포유동물 세포)로부터의 재조합 생성물일 수 있다. 이와 같은 단백질은 사용되는 상이한 호스트에 따라 당화되거나 비당화될 수 있다.

본 발명을 실시하기 위해 사용되는 재조합 단백질이 되게 하기 위해, 재조합 C1-INH (rC1-INH) 단백질은 본 기술분야에 공지된 바와 같은 C1-INH에 특이적인 폴리뉴클레오타이드 서열을 사용하여, 종래의 재조합 DNA 기술에 의해 발현되거나 생성될 수 있다. 일반적으로, 그와 같은 재조합 절차는 하기 단계를 포함한다:

(1) 적절한 숙주세포에의 본 발명의 C1-INH 단백질이 엔코딩된 폴리뉴클레오타이드 또는 이의 변형체 또는 폴리뉴클레오타이드를 함유하는 벡터를 형질주입하거나 형질전환하는 단계;

(2) 적절한 배지에서 숙주세포를 배양하는 단계; 그리고

(3) 배지 또는 세포로부터의 단백질을 단리하거나 정제하는 단계.

실제로, 본 발명의 제제는 본 기술분야의 숙련가에게 익히 알려진 절차에 따라 별도의 투여량 단위로 투여되거나, 함께 투여하기 위해 제형화될 수 있다. 예를 들면, 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20^th ed., A. Genaro et al., Lippencot, Williams & Wilkins, Baltimore, MD (2000)]을 참조한다.

별개의 투여 제형이 사용되는 공동-투여에 의한 본 발명의 방법, 화합물, 조성물 및 키트를 적용하는 경우, C1-INH 및 생물학적 활성제는 동시에 또는 별도로 엇갈린 시점에, 즉 순차적으로 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물, 제제 및 키트는 동시 또는 순차적인 사용을 위해 본원에 기재된 바와 같은 C1-INH 및 또 하나의 생물학적 활성제를 포함할 수 있다.

동시 투여는 본 발명의 2개 이상의 제제, 본 발명의 조성물 또는 성분 (예를 들면, 본 발명의 조성물 및 키트의 성분)의 동시적인 및/또는 각각의 12시간 이내, 각각의 6시간 이내, 3시간 이내, 2시간 이내 또는 1시간 이내, 전형적으로 의료 센터에서의 동일 방문에서의 투여를 포함할 수 있다. 순차적인 투여는 2개 이상의 제제, 본 발명의 조성물 또는 성분 (예를 들면, 본 발명의 조성물 및 키트의 성분)의 각각의 1 개월 이내, 2주 이내 (예를 들면 14 + 2일 이내), 1주 이내, 3일 이내, 2일 이내, 24시간 이내에의 투여를 포함할 수 있다.

환자에 대한 본 발명의 조성물의 주입의 적합한 방법은 비제한적으로 진피내, 근육내, 복강내, 정맥내, 피하, 비강내, 안구내, 경막외, 및 경구 경로를 포함한다. 게다가, 본 발명의 조성물은 주입 또는 볼러스 주사에 의해, 상피성 또는 점막피부 라이닝 (예를 들면, 구강 점막, 직장, 및 장관 점막 등)을 통한 흡수에 의해 투여될 수 있다. 또한, 투여는 전신 또는 국소일 수 있다. 그리고 투여는 급성 또는 만성적 (예를 들면, 매일, 매주, 매달 등)일 수 있다. 정맥내 경로가 예시되며 바람직하다.

경구로 투여되는 투여량 단위는 정제, 타원형 당의정, 당의정, 알약, 반고체, 연질 또는 경질 젤라틴 캡슐, 수성 또는 오일성 용액, 에멀젼, 서스펜션 또는 시럽의 형태일 수 있다. 비경구 투여용 복용 형태의 대표적인 예는 주사가능 용액 또는 서스펜션, 좌약, 분말 제형, 예컨대 마이크로결정 또는 에어로졸 스프레이를 포함한다. 조성물은 또한 종래의 경피 전달 시스템으로 편입될 수 있다.

본 발명의 방법은 C1-INH을 포함하는 화합물을 투여하는 것과 관련된다. 이와 같은 화합물은 조성물, 예를 들면 약제학적 조성물에 존재할 수 있다.

본원에 개시된 방법에서, 본 발명의 조성물은 예를 들면 1일당, 또는 바람직하게는 격일의 치료일당 약 10 단위 (U)의 조성물 또는 화합물/체중 1kg (U/kg) 내지 약 250 U/kg의 범위의 용량으로 투여될 수 있다. 1일당, 또는 바람직하게는 격일의 치료일당 약 25 내지 150 U/kg, 바람직하게는 약 50 내지 125 U/kg의 용량은 원하는 결과를 생성하는데 효과적일 것이다. 예로써, IV 투여에 대한 적합한 용량은 1일에 약 100 U/kg, 그 다음 약 50 U/kg 예를 들면 3일째에 50 U/kg (그리고 임의로 약 50 U/kg 예를 들면 총 10 내지 30, 예를 들면 10 내지 20일 또는, 바람직하게는, 13일, (예를 들면 약 11 내지 18, 12 내지 15일)에 걸친 차후 치료에서 50 U/kg)의 초기 정맥내 주입을 포함할 것이다. 본 발명의 방법에서 사용되는 화합물은 전형적으로 상기 언급된 투여 요법이 전달될 수 있도록 1일당 또는 격일로 1-4회 투여될 수 있다.

추가적으로, 본 발명의 조성물의 투여량은 치료의 과정에 걸쳐 동등하게 또는 동등하지 않게 분할된 화합물 또는 조성물의 양으로서 표현될 수 있다. 예를 들면, 치료 과정은 약 1 내지 30 일 (예를 들면 10 내지 20 일 또는, 바람직하게는, 13일 (예를 들면 약 11 내지 18, 12 내지 15 일)) 동안 지속될 수 있고, 약 1,000 내지 25,000 단위 (U)의 조성물이 상기 치료 과정에 걸쳐 분할 용량으로 투여될 수 있다. 특정 양태에서, 약 5,000 내지 20,000 단위의 조성물이 10 내지 20일 또는, 바람직하게는, 13일에 걸쳐 IV에 의해 투여될 수 있고 (또는 예를 들면 10 내지 20 일 또는, 바람직하게는, 13일 (예를 들면 약 11 내지 18, 12 내지 15 일)에 걸쳐 약 6,000-25,000U, 8,000 내지 22,000U, 10,000-20,000U, 12,000-18000U, 14,000-16,000U 20,000U), 13일에 걸쳐 20,000U이 효과적인 것으로 나타났다.

일부 구현예에서, 조성물의 투여량은 예를 들면 투여후 1시간에 결정되는 적어도 100% 초과의 정상값인 화합물 또는 조성물의 양이 달성되기에 충분한 화합물 또는 조성물의 양으로서 정의된다. 일부 구현예에서, 적어도 100% 초과의 정상값의 수준이 치료 과정, 예를 들면 약 1 내지 30 일 (예를 들면, 10 내지 20일 또는, 바람직하게는, 13일 (예를 들면 약 11 내지 18, 12 내지 15 일))에 걸쳐 유지된다.

그러나, 본원에 기재된 화합물의 투여를 위한 정확한 요법은 필연적으로 개별적인 치료될 대상체, 투여되는 치료의 유형 및 참여된 의료 전문가의 판단의 필요성에 좌우될 것이다. 본원에서 사용되는 바와 같이 용어들 "대상체" 및 "환자"는 인간 및 동물 모두를 포함한다. 본 기술분야의 숙련가가 이해될 수 있는 바와 같이, 실제로 투여된 투여량은 치료되는 질병, 수령체의 나이, 건강 및 몸무게, 존재하는 경우, 동시 치료의 유형, 치료의 빈도에 좌우될 것이다. 게다가, 효과적인 투여량은 생물학적 검정에서 화합물(들)의 생물활성을 측정하기 위한 일상적인 경험적 활성 시험에 기초하여 본 기술분야의 숙련가에 의해 결정될 것이고, 따라서 투여되는 적절한 투여량을 확립할 것이다.

추가적으로, 본 발명의 방법에서, 조성물은 혈장분리반출술 요법 및/또는 IVIg에 대한 보조물로서 투여될 수 있다. 예를 들면, 본 발명의 예시적인 방법에서, C1-INH (예를 들면, Cinryze®)을 포함하는 조성물은 혈장분리반출술 및/또는 IVIg에 대한 보조물로서 10 내지 20일에 걸쳐 분할 용량으로 제공되는 20,000 단위 (각 용량은 약 100 U/kg을 초과하지 않음)으로서 환자에게 투여될 수 있다. 이와 같은 치료는 요법의 중단 후 3-6 개월에서 만성적 AMR의 비율을 감소시킬 수 있다.

특정 상황에서, 본 발명의 실시에 사용되는 화합물 (예를 들면, C1-INH)은 약제학적으로 허용가능한 담체 매질를 포함하는 약제학적 조성물로서 전달될 수 있다. 예를 들면, 본 발명은 필요로 하는 환자에게 장기 동종이식편의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 진행을 치료하거나 지연하기 위한 약제학적 조성물을 포함하고, 상기 조성물은 C1-에스테라제 억제제 (C1-INH); 추가의 생물학적 활성제, 예컨대 항-림프구 제제, 리툭시맙, 보르테조밉, 에쿨리주맙, 면역글로불린 (Ig), 또는 이들의 조합; 및 약제학적으로 허용가능한 담체 매질를 포함한다.

본원에서 사용된 바와 같이, 표현 "약제학적으로 허용가능한 담체 매질"는 원하는 특정한 복용 형태로서 적합한 바와 같은 임의의 및 모든 용매, 희석제, 또는 다른 액체 비히클, 분산 또는 서스펜션 보조제, 표면제, 등장제, 증점제 또는 유화제, 보존제, 고형 결합제, 윤활제, 충전제 등을 포함한다. 문헌 [Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th edition, A.R. Genaro et al., Part 5, Pharmaceutical Manufacturing, pp. 669-1015 (Lippincott Williams & Wilkins, Baltimore, MD/Philadelphia, PA) (2000))]은 약제학적 조성물을 제형화 및 이의 제제화를 위한 공지된 기술에 사용되는 다양한 담체를 개시하고 있다. 바람직하지 않은 생물학적 효과를 발생시키거나 또는 활성제(들)을 포함하는 제형의 임의의 다른 성분(들)과 유해한 방식으로 상호작용하는 것에 의해 임의의 종래의 약제학적 담체 매질가 본원에 기재된 조성물과 상용될 수 없는 경우를 제외하고, 이의 사용이 본 발명의 범위 내에서 고려된다.

더 구체적으로, 고형 복용 형태의 제조시, 본 약제학적 조성물은 약제학적으로 불활성, 무기 또는 유기 부형제, 예컨대 락토오스, 수크로오스, 글루코오스, 젤라틴, 맥아, 실리카겔, 전분 또는 그것의 유도체, 탈크, 스테아르산 또는 이의 염, 탈지분유, 식물성, 석유, 동물 또는 합성 오일, 왁스, 지방, 폴리올 등과 혼합될 수 있다. 하나의 액체 용액, 에멀젼 또는 서스펜션 또는 시럽이 부형제 예컨대 물, 알코올, 수성 염수, 수성 덱스트로오스, 폴리올, 글리세린, 지질, 인지질, 사이클로덱스트린, 식물성, 석유, 동물 또는 합성 오일을 사용할 수 있다. 좌약은 부형제, 예컨대 식물성, 석유, 동물 또는 합성 오일, 왁스, 지방 및 폴리올을 포함할 수 있다. 에어로졸 제형은 이러한 목적을 위해 적합한 압축 가스, 예컨대 산소, 질소 및 이산화탄소를 포함할 수 있다. 약제학적 조성물 또는 제형은 또한 비제한적으로, 보존제, 안정제, 예를 들면, UV 안정제, 유화제, 감미제, 삼투압을 조정하기 위한 염, 버퍼, 코팅 물질 및 항산화제를 포함하는 하나 이상의 첨가제를 함유할 수 있다.

본 발명은 추가로, 약제학적 조성물에 대한 조절-방출, 지속-방출, 또는 연장-방출 치료적 복용 형태를 제공하고, 이에서 본 조성물은 전달 시스템에 혼입된다. 복용 형태는 혈류에서의 활성제(들)의 효과적인 농도가 치료적 결과를 개선하고/하거나 부작용을 최소화하기 위해 비교적 일정하게 유지되는 혈액에서의 농도로 장시간에 걸쳐 유지될 수 있게 하는 이와 같은 방식으로 활성제(들)의 방출을 조정한다. 추가로, 조절-방출 시스템은 본 발명의 활성제의 혈당 수준에서의 최소 피크 내지 최소 변동(trough fluctuation)으로 제공될 수 있다.

추가적으로, 다양한 전달 시스템이 공지되어 있고, 예를 들면 C1-INH, 또는생물학적 활성제, 예컨대 면역글로불린 (Ig), 리툭시맙, 보르테조밉 및/또는 에쿨리주맙와 조합되는 C1-INH을 포함하는 조성물을 투여하기 위해 사용될 수 있다. 추가적으로, 이와 같은 조성물은 예를 들면 리포좀, 극미립자, 및 마이크로캡슐로 캡슐화될 수 있다.

본 발명의 방법은 보통 일반적으로 본원에 기재된 화합물(들) 및/또는 조성물(들)을 사용하여 치료되는 환자에서의 발생되는 치료 또는 예방 효과를 결정하기 위한 의료 후속조치를 포함할 것이다.

하기 실시예에 기재된 실험의 결과는 상업적으로 이용가능한 혈장-유도된 C1-INH가 AMR을 나타내는 환자에게서 장기 이식 거부반응을 치료하거나 예방할 수 있음을 실증한다. 본 실시예는 단지 설명을 위해 제공되고, 어떤 방식으로든 본 발명을 제한하기 위한 것으로 의도되지 않는다.

실시예

공여자-감작된 신장 이식의 수령체에서의 급성 항체-매개성 거부반응의 치료를 위해 Cinryze® (Ci에스테라제 억제제 [인간])의 안정성 및 효과를 평가하기 위해 무작위의, 이중맹검, 위약-조절된 탐색 연구(randomized, double-blind, placebo-controlled pilot study)을 사용하였다. 본 연구의 목적은 하기와 같다: (a) 급성 항체-매개성 거부반응 (AMR)을 갖는 신장 이식 환자에서의 Cinryze®의 안전성 및 내성의 평가; (b) 신장 이식 환자에서의 급성 AMR을 치료하기 위한 Cinryze®의 효과의 평가; 및 (c) 급성 AMR을 갖는 신장 이식 환자에서의 Cinryze®의 약동학 및 약력학의 조사.

본 연구에서, 치료의 불연속, 사망, 및 심각한 이상 반응과 관련된 연구 약물은 없었다.

Cinryze®을 500U (C1-INH)/바이알의 동결건조된 분말로서 공급하였다. Cinryze® 제품 및 상업적 배포가 승인된 주사용 멸균수를 주사(들)을 이용하였다. Cinryze®의 각각의 바이알을 주사(들)을 위한 멸균수로 재구성하였다. 위약은 주입용 0.9% 염화나트륨으로 구성되었다.

투여. 대상체는 2-주 기간에 걸쳐 연구 약물 (Cinryze® 또는 위약)의 총 7회 투여를 받았다 (도 2): 1일에서의 5000 U Cinryze® (100 U/kg을 초과하지 않음) 또는 위약의 초기 정맥내 (IV) 주입, 그 다음 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일에서의 2500 U의 Cinryze® (50 U/kg을 초과하지 않음) 또는 위약 IV. 혈장분리반출술 요법을 연구 약물 투여와 동일자에 실시하는 경우, 연구 약물을 혈장분리반출술 기간의 완료 이후 투여하였다.

연구 설계. 상기 연구는 HLA 공여자-감작된 신장 이식 수령체에서의 급성 AMR의 치료에서 Cinryze®의 안전성 및 효과를 평가하였다 (도 2). 가변성을 최소화하기 위해, 필요한 경우, DSA 양성의 탈감작화 및 급성 AMR의 치료를 위해 혈장분리반출술 및/또는 정맥내 면역글로불린 (IVIg)을 사용하는 체제에서만 연구를 실시하였다. 연구의 대상체는 적절한 이식후 기능이 달성되는 신장 이식 및 가장 최근의 신장 동족이식편의 이전 또는 이후에 확인된 동시발생된 DSA를 갖는 생검-증명된 AMR의 ("결정된") 제1 에피소드를 가졌다.

도 2에 실증된 바와 같이, 20일 및 90일에서 치료후 평가를 실시하였다. 연구의 종료는 마지막 대상체가 90일 평가가 완료되는 일자로 정의하였다. 보체 및 C1-INH 수준을 PK/PD 결정을 위한 최대 20일까지의 명시된 시점에서 평가하였다. 또한, 임의의 PK/PD 샘플링 시점은 25일 동안에 포함되어 있다. 추가적으로, 치료 후 6개월 시점에 임상 결과를 결정하기 위해 단일 이식 센터에서 유사하게 치료된 14명의 동등한 무작위 대상체 (n=7 위약; n=7 Cinryze)로부터 추가적인 평가가 제공되었다.

연구 약물 투여. 이용가능한 전임상 및 임상 데이타에 기초하여, 항원-항체 복합체에 의해 유발되는 보체 경로 억제를 위해 충분한 C1-INH의 생리적 수준은 적어도 100% 초과의 정상값이다.

건강한 대상체에게의 2000 U의 Cinryze®의 투여 이후, 기능적 C1-INH 활성에서의 기준선으로부터의 평균 변화는 대략 50-60%이었다. 1 U의 C1-INH 활성이 1 mL의 혈장에서 발견되는 경우, 급성 AMR을 갖는 환자에서의 적어도 100%까지의 C1-INH의 기능적 활성을 증가시키기 위해, 약 5000 U의 용량이 평균 성인에 필요할 수 있다. Cinryze®가 HAE 환자에게서 약 60시간의 반감기를 가지는 경우, 격일로 주어지는 2500 U의 차후의 용량은 투여 기간에 걸쳐 적절한 기능적 C1-INH 수준을 유지할 수 있다. 따라서, 본 연구에서 Cinryze® 그룹에 대해 무작위된 대상체는 총 7회 투여 동안 격일로 5000 U (100 U/kg을 초과하지 않음) 그 다음 2500 U (50 U/kg을 초과하지 않음)의 부하 용량을 받을 것이다. 이러한 요법은 항원-항체 복합체에 의해 유발된 보체 활성화를 억제하는 명백한 용량-의존성 특징의 균형을 유지하게 하고, 한편 용량≥200 U/kg에서의 다른 C1-INH 화합물을 사용하는 전임상 및 임상 연구에서 관찰된 응고의 잠재적 위험성을 최소화한다.

상기 기재된 바와 같이, 총 7회 투여의 Cinryze® 또는 위약 (주입용 0.9% 염화나트륨 용액)을 하기와 같이 투여하였다: (a) 1일에 단일 IV 주입으로서 5000 U의 Cinryze® (100 U/kg을 초과하지 않음) 또는 위약의 초기 용량; 및 이후 (b) 2주 (3, 5, 7, 9, 11, 및 13일) 동안 격일로의 2500 U의 Cinryze® (50 U/kg을 초과하지 않음) 또는 위약 IV. 연구 약물의 각각의 투여는 용인되는 바와 같이 1분당 대략 1 mL (100 U의 Cinryze®에 상응함)의 속도로 IV 투여하였다. 따라서, 1일에서의 5000 U (50 mL) 주입의 지속시간은 대략 50 분이었고, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13 일에서의 2500 U (25 mL) 주입의 지속시간은 대략 25분이었다. 각 연구 약물 주입의 '시작' 및 '정지' 시간 및 일자를 기록하였다.

혈장분리반출술 , 신선 동결 혈장, 및 IVIg. 혈장분리반출술 요법을 AMR의 결정된 에피소드에 대해 수행하였다. 혈장분리반출술 일정과 무관하게, 연구 약물을 1, 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일에 투여하였다. 게다가, 도 3에 실증된 바와 같이, 특정 환자들은, 필요에 따라, 혈장분리반출술이 포함된 관리의 표준으로, 신선 동결 혈장 (FFP), 혈액, 및/또는 IVIg (예를 들면, 시토갬(cytogam), 가무넥스(gamunex) 등)의 형태로의 혈장 대체물을 받았다.

약동학/ 약력학. 본 연구에서, Cinryze®의 약동학 및 약력학의 분석을 위약과 관련하여 착수하였다. 약력학적 분석과 관련하여, 개별적인 대상체에 대한 기능적 수준 및 C1-INH 항원을 결정하였다. 1차 PK 파라미터를 기준선-정정된 농도-대-최종 투여 (제13일) 이후 시간 데이터 및 비구획 기술을 적절하게 사용하여 계산하였다. C1-INH 기능성의 수준을 전체 치료 기간 과정에 걸쳐 C1-INH 또는 위약을 받는 환자에 대해 분석하였다 (도 4a). 예상한 바에 따라, 기준선 수준으로 정정된 C1-INH 기능성의 집단 평균 양이 3, 5, 7, 9, 11, 및 13일에서 C1-INH (Cinryze®)을 받는 환자에게서 더 많았다. 추가적으로, 농도가 단기간 과정에 걸쳐 측정되는 경우, C1-INH 기능성의 평균 기준선 정정된 혈장 농도에서의 차이는 13일에서 분명하였다 (도 4b). 따라서, 위약 (즉, 혈장분리반출술 단독 (및/또는 IVIg))과 비교하는 경우, Cinryze® 및 혈장분리반출술 (및/또는 IVIg)로 치료되는 환자에게서, 더 높은 농도의 C1-INH 기능성 (즉, 활성화 고전적 보체 경로 프로테아제 억제제)이 존재하였다.

약동학적 분석과 관련하여, 개별적인 대상체에 대한 보체 C1q, C4, 및 C4a 수준을 평가하였다. C1-INH 기능성 및 항원성 및 보체 성분 C1q, C4, 및 C4a의 혈장 농도의 결정을 위한 혈액 샘플을 수집하였다 (표 1). 혈장분리반출술이 투여일에 수행되는 경우, PK/PD 시험에 대한 혈액 샘플을 혈장분리반출술 이전 및 연구 약물 투여 이전(즉, 혈장분리반출술-이후)에 그리고 연구 약물 주입의 개시와 관련되는 시점에 수득하였다.

[표 1] 위약에 대한 Cinryze ®의 약력학적 및 약동학적 효과의 연구

표 1과 관련하여, Cinryze® 환자는 증가된 C1-INH 기능 및 고전적 보체 시스템 억제를 나타내었고, 이에서 각각의 집단에서의 연구 약물 요법의 전체 효과를 실증하는 평균의 산출을 위해 기준선 수준은 공제되었다. 위약과 비교하여, Cinryze® 환자는 혈장에서 C1-INH 항원성 및 기능성 모두 증가된 수준 (기준선 기본 수준(baseline entry level) 초과)을 보여주었고, 이는 환자가 이의 연구 투여를 시작하는 수준 이상으로 활성의 전체 C1-INH의 더 큰 농도를 나타내었다. 보고된 C1-INH 항원 수준은 (다르게 명시되지 않으면) 0.067 U/ml = lmg/ldL의 변환 인자를 사용하여 U/mL로 전환되는 단백질 중량 농도의 측정값에 기초한다. 사실상 C1-INH 기능성에 대해 미조정된 범위 (이에서는 기준선 수준이 공제되지 않음)는 Cinryze® 요법의 종료시 1.59-2.02 U/mL이었다. 그러나, 이는 위약 치료된 환자에 대한 미조정된 범위와 통계적으로 상이하지 않았다. 그럼에도 불구하고, 이의 기본 수준 초과의 C1-INH에 대해 조사되는 경우 현저한 집단 차이가 존재하였다.

Cinryze® 환자는 유체상에서 보체 시스템의 전신 억제의 증거를 나타내었다. Cinryze®로 치료된 환자는 고전적 보체 경로가 억제되지 않는 경우, 혈장에서 감소된 농도를 나타낼 것인 고정적 보체 경로 단백질인, C1q 및 C4의 증가된 혈장 농도 (기준선 기본 수준에 대해 정정됨)를 나타내었다. 그러나, C1q 및 C4의 농도가 증가되었기 때문에, 이는 일부 수준의 전신 억제를 나타내었다.

마지막으로, 고전적 보체 경로 억제는 위약과 비교하여 C4a의 감소된 혈장 농도에 의해 확인되었다. 대개, 보체 시스템 활성화 C4가 C4a로 전환되는 경우, 이에 의해 C4의 혈장 농도가 감소된다. 본 분석은 추가의 외인성 C1-INH (Cinryze®)로 치료된 환자에게서 전신 보체 시스템 억제를 분명하게 야기하는 C1-INH 기능성 단백질에 있어서의 증가를 나타내는 것을 보여준다.

C1-INH 치료의 생리적 효과를 조사함에 있어, 도 5는 13일 시간 경과에 걸쳐 혈장분리반출술 (및/또는 IVIg)과 조합하여 Cinryze® 또는 위약으로 치료된 환자 집단 사이에서의 평균 신장 기능 (즉, 크레아티닌 청소율)의 차이를 개시한다.

만성적 사구체병증 (CG)은 이식 환자에서의 AMR의 임상 마커이다. 도 6a는 6개월에서 정상 신장 조직을 나타낸다. 도 6b는 진행 중인 AMR의 결과로서의 CG를 실증한다. 위약으로 치료된 환자들 중, 7명 중 3명은 CG를 나타내었고, 반면, Cinryze®로 치료된 환자 중에서, 7명 중 1명만이 CG를 나타내었다. 이러한 조직 연구는 수득된 신장 조직의 전자 현미경검사 (EM)에 의해 확인되었다 (도 7). 도 7a는 신장 조직의 정상 EM 이미지를 나타내고, 반면에 도 7b는 CG를 갖는 신장 조직의 전자 현미경사진을 나타낸다. 이와 같은 전자 현미경사진을 조사하기 위해, 관리의 표준 (혈장분리반출술 및/또는 IVIg)에 대해 보조물로서 위약으로 치료된 환자들 중에서, 7명 중 3명이 CG와 일치되는 병리학을 나타내었고, 반면에, 표준 요법의 보조물로서 Cinryze®로 치료된 환자들 중에서, 7명 중 1명이 CG와 일치되는 병리학을 나타내었다.

추가적으로, 위약 또는 Cinryze(R)로 치료된 환자들 중에서 13일 C1-INH 항원 수준 및 기능적 C1-INH 수준은 환자의 6개월의 임상 결과와 상관되었다. 13일 기준선 조정된 (즉, 정정된), 및 미조정된 C1-INH 항원 및 기능적 수준을 우선 측정하였다 (도 8). 이들 측정값으로부터의 데이터를 이후 동일한 환자의 6개월 임상 결과와 도식적으로 상관시켰다 (도 9a 내지 9h). 도 9a 및 9b에 실증된 바와 같이, 위약 (도 9a)으로 치료된 것과 비교되는 바와 같이 Cinryze(R) (도 9b)로 치료된 환자들에게서 CG가 더 낮게 발생되었고, 이에서 Cinryze(R) 환자는 14% CG를 나타내었고, 위약을 받는 환자는 43% CG를 나타내었다.

치료 후 6개월에서, 13일에서 이의 기준선 기본 수준 초과인 낮은 C1-INH 항원성 수준을 나타내는 환자들이 또한 CG의 존재를 나타내는 것으로 결정되었다. 따라서, 기준선 정정된 C1-INH 항원 및 신장 조직에서의 CG의 존재 사이에 관찰된 상관관계가 존재하였다.

더욱이, 혈청 C1-INH 항원성 및 기능적 수준은 도 10a 및 10b에서 실증되는 바와 같이 혈장분리반출술에 의해 감소되었다. 예를 들면, 도 10에 나타난 바와 같이, 두 평균 C1-INH 항원성 및 기능적 수준을 각각 17.6% (도 10a) 및 43.3% (도 10b)까지 감소시켰다.

본 발명은 이식 환자에게서 AMR을 치료하고/하거나 예방하기 위한 요법 및/또는 표준 관리에 대한 부가적 요법 (즉, 혈장분리반출술 및 IVIg: 이 둘 모두는 공여자 특이적 항체를 다룸)으로서, C1-INH (예를 들면, Cinryze®)을 사용하는 방법을 포괄한다. 본 발명의 예상외의 양태는 이식 환자에게서 C1-INH을 사용한 초기 및/또는 단기간 지속 치료는 C1-INH 치료 투여가 중단된 이후에도 장기간의 이점을 야기한다는 것이다.

게다가, 투여 요법은 예기치 못한 이점을 제공한다. 신장 이식 환자가 전신으로 또는 이식 동종이식편 내에서 보체 활성화를 효과적으로 감소시키는데 충분한 C1-INH 기능적 단백질의 수준을 달성할 수 있을지는 현재 알려져 있지 않다. 사실상, 13일에 걸쳐 분할 용량으로 주어지는 20,000 단위의 투여량을 선택하였다. 이러한 용량은 임상적으로 만족스러울 뿐만 아니라 기준선 초과로의 혈청 C1-INH 기능적 수준의 증가에 있어서도 만족스러웠다.

따라서, 본 연구는 신장 이식 환자가 13일에 걸쳐 20,000 단위의 Cinryze®로 치료되는 경우에서 하기를 실증하였다: (a) 투여 요법이 신장 이식 환자에게 잘 용인되었고; (b) 이와 같은 환자는 Cinryze® 치료의 결과로서 초생리적 수준의 C1-INH를 유지하였고; (c) 이러한 환자는 신장 기능에서 초기 개선점을 나타내었고; 그리고 (d) 이러한 환자들은 위약과 관련하여 6개월 시점에서 더 적은 사구체병증이 실증되었다. 따라서, 시험되는 치료 방법은 본 기술분야에서 현재의 치료법과 비교되는 바와 같이 AMR에 대한 장기간 지속되는 치료 효과를 제공하였다.

본 발명의 특정 구현예는 상기에 기재되고/되거나 예시되어 있는 한편, 다양한 다른 구현예는 전술한 개시내용으로부터 본 기술분야의 숙련가에게 자명할 것이다. 따라서, 본 발명은 기재되고/되거나 예시되어 있는 특정 구현예에 제한되지 않고, 한편 첨부된 청구항들의 범위 및 사상을 벗어나지 않고 상당한 변화 및 변형이 이루어질 수 있다.

또한, 첨부된 청구항, 최초 형태 및 보정된 형태에서 사용되는 경우 전환 용어들 "포함함", "본질적으로 이루어짐" 및 "이루어짐"은 미인용된 추가적인 청구항 성분 또는 단계가, 존재하는 경우, 청구항(들)의 범위에서 배제되는지와 관련하여 청구항의 범위를 한정한다. 용어 "포함함"은 포괄형 또는 개방형으로 의도되고, 임의의 미인용된 성분, 방법, 단계 또는 물질을 배제하지 않는다. 용어 "이루어짐"은 청구항에서 명시된 것 이외의 임의의 성분, 단계 또는 물질 및 후자의 경우에서의 특정 물질(들)과 통상 관련되는 불순물이 배제된다. 용어 "본질적으로 이루어짐"은 특정 성분, 단계 또는 물질(들) 및 청구되는 본 발명의 기본적이고 신규한 특성(들)에 실질적인 영향을 주지 않는 것들로 청구항의 범위를 제한한다. 본 발명을 구현하는 본원에 기재된 모든 조성물 및 방법은, 대체적인 구현예에서, 전환 용어들 "포함함", "본질적으로 이루어짐" 및 "이루어짐" 중 어느 하나에 의해 보다 구체적으로 정의될 수 있다.

Claims (31)

1. 항체-매개성 거부반응의 치료를 필요로 하는 환자에서의 장기 동종이식편의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 치료 방법에 사용하기 위한, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
2. 제1항에 있어서, 상기 방법은 상기 억제제의 초기 및/또는 단기간 지속 투여를 포함하는, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 방법은 장기간 지속되는 치료 효과를 제공하기 위해 충분한 양으로의 상기 억제제의 투여를 포함하는, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자는 혈장분리반출술(plasmapheresis)을 받았거나 또는 현재 혈장분리반출술을 받고 있는, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 환자가 혈장분리반출술을 받게 하는 단계를 추가로 포함하는, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 신선 동결 혈장을 투여하는 단계를 추가로 포함하는, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 정맥내 면역글로불린을 투여하는 단계를 추가로 포함하는, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
8. 제1항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 항-림프구 제제, 리툭시맙, 보르테조밉, 에쿨리주맙, 또는 이들의 조합을 투여하는 단계를 추가로 포함하는, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 장기는 고형 장기인, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
10. 제9항에 있어서, 상기 고형 장기는 신장, 췌장, 창자, 심장, 폐, 간, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 장기는 신장인, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
12. 제11항에 있어서,
    상기 방법은 정맥내 면역글로불린을 투여하는 단계를 추가로 포함하고,
    상기 환자는 혈장분리반출술을 받았거나 또는 현재 혈장분리반출술을 받고 있는, C1 에스테라제 억제제 (C1-INH).
13. 장기 동종이식편의 항체-매개성 거부반응의 치료를 필요로 하는 환자에서의 장기 동종이식편의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 치료 방법에서의 동시 또는 순차적인 사용을 위한 조합된 제제로서, 항-림프구 제제, 리툭시맙, 보르테조밉, 에쿨리주맙, 면역글로불린 (Ig), 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는, C1-INH 및 추가의 생물학적 활성제.
14. 제13항에 있어서, 상기 추가의 생물학적 활성제가 면역글로불린, 바람직하게는 정맥내 면역글로불린인 것인, C1-INH 및 추가의 생물학적 활성제.
15. 제13항 또는 제14항에 있어서, 상기 장기는 제9항 내지 제11항 중 어느 한 항에서 정의된 바와 같고, 바람직하게는 신장인, C1-INH 및 추가의 생물학적 활성제.
16. 제13항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 환자는 혈장분리반출술을 받았거나 또는 현재 혈장분리반출술을 받고 있는, C1-INH 및 추가의 생물학적 활성제.
17. 제13항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 방법은 환자가 혈장분리반출술을 받게 하는 단계를 추가로 포함하는, C1-INH 및 추가의 생물학적 활성제.
18. 제13항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 장기는 신장이고, 상기 추가의 생물학적 활성제는 정맥내 면역글로불린이고, 상기 환자는 혈장분리반출술을 받았거나 또는 현재 혈장분리반출술을 받고 있는, C1-INH 및 추가의 생물학적 활성제.
19. (i) C1-INH; 및
    (ii) 항-림프구 제제, 리툭시맙, 보르테조밉, 에쿨리주맙, 면역글로불린 (Ig), 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는 추가의 생물학적 활성제,
    를 포함하는 키트로서,
    상기 성분 (i) 및 (ii)는 환자에게로의 동시 또는 순차적인 투여를 위해,
    임의로 상기 환자에서의 장기 동종이식편의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 치료 방법에서 사용하기 위해 포장되는, 키트.
20. 제19항에 있어서, 상기 방법은 상기 환자가 혈장분리반출술을 받게 하는 단계를 추가로 포함하는, 키트.
21. 장기 동종이식편의 항체-매개성 거부반응의 치료를 필요로 하는 환자에서의 장기 동종이식편의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 치료 방법으로서,
    상기 방법은 치료적 유효량의 C1 에스테라제 억제제 (C1-INH)의 초기 및/또는 단기간 지속 투여를 포함하고,
    상기 치료적 유효량의 C1-INH은 장기-지속되는 치료 효과를 제공하기에 충분한, 방법.
22. 제21항에 있어서, 상기 환자가 혈장분리반출술을 받게 하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
23. 제21항 또는 제22항에 있어서, 신선 동결 혈장을 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
24. 제21항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서, 정맥내 면역글로불린을 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
25. 제21항 내지 제24항 중 어느 한 항에 있어서, 항-림프구 제제, 리툭시맙, 보르테조밉, 에쿨리주맙, 또는 이들의 조합을 투여하는 단계를 추가로 포함하는, 방법.
26. 제21항 내지 제25항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 장기는 고형 장기인, 방법.
27. 제26항에 있어서, 상기 고형 장기는 신장, 췌장, 창자, 심장, 폐, 간, 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
28. 제21항 내지 제27항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 장기는 신장인, 방법.
29. C1-에스테라제 억제제 (C1-INH); 추가의 생물학적 활성제; 및 약제학적으로 허용가능한 담체 매질를 포함하는, 약제학적 조성물.
30. 제29항에 있어서, 상기 생물학적 활성제는 항-림프구 제제, 리툭시맙, 보르테조밉, 에쿨리주맙, 면역글로불린 (Ig), 및 이들의 조합으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 약제학적 조성물.
31. 신장 이식을 받거나 또는 받았던 환자에서의 항체-매개성 거부반응 (AMR)의 치료 방법으로서,
    혈장분리반출술을 받았거나 또는 현재 받고 있는 환자에게 충분한 치료량의 정맥내 면역글로불린 및 C1-INH 억제제를 투여하는 단계를 포함하는, 방법.

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