KR20160058597A

KR20160058597A - 규산염 광물질을 포함하는 가금류의 면역 증강용 조성물

Info

Publication number: KR20160058597A
Application number: KR1020140160290A
Authority: KR
Inventors: 김민지; 최희철; 강환구; 김지혁
Original assignee: 대한민국(농촌진흥청장)
Priority date: 2014-11-17
Filing date: 2014-11-17
Publication date: 2016-05-25

Abstract

본 발명은 가금류의 면역 증강용 조성물에 대한 것이다. 더욱 상세하게는 C.perfringens에 의해 유발되는 가금류의 괴사성 장염 등의 질병을 예방 및/또는 치료하는데 효과를 나타내는 면역 증강용 조성물에 대한 것이다.
본 발명의 면역 증강용 조성물은 가금류의 질병에 대한 면역력을 높여 C.perfringens 에 의해 유발되는 괴사성 장염 등 미네랄 부족으로 인한 가금류의 질병 발생 및 영양 결핍을 방지할 수 있으며 유해 물질의 배출을 촉진하는 효과가 있어 가금류의 건강 증진 및 질병 예방 효과가 뛰어나다. 상기 면역 증강용 조성물을 급이함으로써 항생제의 투여량이 저감되므로 항생제 잔류 수치가 낮은 가금 산물을 소비자에게 제공할 수 있는 장점이 있다.

Description

규산염 광물질을 포함하는 가금류의 면역 증강용 조성물{A composition comprising a silicate mineral for enhancing immunity of poultry}

본 발명은 가금류의 면역 증강용 조성물에 대한 것이다. 더욱 상세하게는 C.perfringens에 의해 유발되는 가금류의 괴사성 장염 등의 질병을 예방 및/또는 치료하는데 효과를 나타내는 면역 증강용 조성물에 대한 것이다.

축산업은 동물의 유전적인 개량, 우수한 사료 개발 등의 개선으로 생산 효율은 현저히 개선되었으나 동물즐의 각종 대사성 질병이 오히려 증가하고 있어 축산업 경쟁력에 큰 장애 요인이 되고 있다. 가축의 생산이 협소한 공간에서 대량 사육 생산 시스템으로 기업화됨으로써 동물들은 스트레스 증가 및 면역 결핍과 연관된 증가하고 있다. 또한, 합성 사료의 사용량이 증가하는 것도 동물의 면역 저하와 함께 다양한 질병을 발생시키는 원인으로 작용하고 있다. 이러한 질병을 예방하고 치료하기 위하여, 축산농가에서는 항생제 남용을 하게 되었고, 이에 따라 항생제 내성 균주의 출현 및 항생제 잔류 등의 문제가 사회적 이슈로 대두되고 있어서 항생제 등이 전혀 포함되지 않은 친환경적인 치료제나 사료 제품이 지속적으로 요구되고 있다.

본 발명은 항생제의 사용량을 줄이면서도 괴사성 질병 등 가금류의 질병에 대해 치료 및/예방 효과를 높이는데 도움을 줄 수 있는 면역 증강용 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 규산염 광물질을 포함하며, C. perfringens 에 의해 유발되는 가금류의 괴사성 장염의 치료 및/또는 예방 효과를 나타내는 면역 증강용 조성물에 대한 것이다.

상기 규산염 광물질은 네소규산염 광물질(nesosilicates), 오르소규산염 광물질(orthosilicates), 소로규산염 광물질(sorosilicates), 사이클로 규산염 광물질(cyclosilicates), 이노규산염 광물질(inosilicates), 필로규산염 광물질(phyllosilicates) 및 텍토 규산염 광물질(tectosilicates)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다.

또한, 상기 규산염 광물질은 황(S), 알루미늄(Al), 철(Fe), 칼슘(Ca), 마그네슘(Mg), 칼륨(K), 나트륨(Na), 망간(Mn), 인(P) 및 티타늄(Ti)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 금속; 또는 이들의 산화물과 결합한 형태일 수 있다.

여기에서, 상기 규산염 광물질은 수용성 규산염 광물질이거나 수용성 규산염 광물질을 포함할 수 있다.

본원 발명의 구체적인 일 실시양태에 있어서, 상기 조성물은 산야초 추출물을 더 포함할 수 있다.

또한, 본원 발명은 상기 면역 증강용 조성물을 이용하여 가금류의 C.perfringens 에 의해 유발되는 괴사성 장염에 대한 면역을 증강시키는 방법을 제공한다.

상기 방법은 상기 조성물을 건조 중량을 기준으로 급이수에 10ppm 내지 1000ppm의 농도로 희석하고 상기 조성물이 희석된 급이수를 이용할 수 있다.

또한, 본 발명의 방법은 상기 조성물을 사료용 조성물에 혼합하여 가금류에 급이하는 것일 수 있다.

본 발명의 면역 증강용 조성물은 가금류의 질병에 대한 면역력을 높여 C.perfringens 에 의해 유발되는 괴사성 장염 등 미네랄 부족으로 인한 가금류의 질병 발생 및 영양 결핍을 방지할 수 있으며 유해 물질의 배출을 촉진하는 효과가 있어 가금류의 건강 증진 및 질병 예방 효과가 뛰어나다. 상기 면역 증강용 조성물을 급이함으로써 항생제의 투여량이 저감되므로 항생제 잔류 수치가 낮은 가금 산물을 소비자에게 제공할 수 있는 장점이 있다.

도 1은 실험예 1의 3주령 육계의 비장 세포에 대한 세포 증식 결과이다.
도 2는 실험예 1의 5주령 육계의 비장 세포에 대한 세포 증식 결과를 확인하여 그래프로 도시한 것이다.
도 3은 실험예 3의 그룹별 폐사율을 그래프로 나타낸 것이다.
도 4는 실험예 3의 그룹별 병변지수를 그래프로 나타낸 것이다.
도 5는 실험예 3의 각 그룹에서 적출된 소장 및 이의 변병 관찰결과를 나타낸 것이다.
도 6은 실험예 3에서 각 그룹의 소장에 대한 조직학적 소견을 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다. 따라서, 본 명세서에 기재된 실시예에 기재된 구성은 가장 바람직한 일 실시예에 불과할 뿐 이고, 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.

닭이나 오리와 같은 가금류의 괴사성 장염은 세균성 질병으로 Clostridium perfringens(C. perfringens) 에 의해 발생되며 닭에서 높은 발생율을 보인다. 보통 가금류는 비교적좁은 공간에서 많은 개체수가 대량으로 사육되고 있어 일부 개체에서 상기 질병이 발생되는 경우 다른 개체로 질병이 확산될 가능성이 높아 이로 인해 가금류 생산 농가의 생산성 감소 및 폐사의 피해가 크다. 또한, 전술한 바와 같이 질병의 치료나 예방을 위해 다량의 항생제를 투여하는 경우 육계 내 항생제 잔류가 문제될 수 있다.

본 발명은 이러한 기술적 과제를 해결하기 위한 것으로서 가금류의 면역 증강용 조성물에 대한 것이다. 상기 면역 증강용 조성물은 특히 C.perfringens 에 의해 유발되는 가금류의 괴사성 장염의 치료나 예방에 높은 효과를 나타낸다. 상기 본원 발명에 따른 면역 증강용 조성물은 규산염 광물질을 포함한다.

본원 발명의 구체적인 일 실시양태에 있어서, 상기 규산염 광물질은 장내 부패균에 의해 생성되는 유해 물질을 흡착하여 체외 배설을 촉진하고 장내 부패균의 활동을 억제하여 가금류의 면역력을 높이는 효과가 있다. 또한, 규산염 광물질은 장 내에서 수분을 흡수하여 장 내용물의 부피를 증가시키고 장 내용물의 위장관 체류 시간을 연장시키는 효과가 있는데 이때 소화 효소가 작용할 수 있는 충분한 시간이 확보되므로 영양소의 분해 및 흡수가 극대화될 수 있다.

상기 규산염 광물질은 구체적으로 네소규산염 광물질(nesosilicates), 오르소 규산염 광물질(orthosilicates), 소로규산염 광물질(sorosilicates), 사이클로 규산염 광물질(cyclosilicates), 이노규산염 광물질(inosilicates), 필로규산염 광물질(phyllosilicates) 또는 텍토 규산염 광물질(tectosilicates)의 형태 중 하나 이상일 수 있으나 특별히 어느 상기 예 중 어느 한 종류에 한정되는 것은 아니다.

또한 상기 규산염 광물질은 다양한 형태의 규산이 황(S), 알루미늄(Al), 철(Fe), 칼슘(Ca), 마그네슘(Mg), 칼륨(K), 나트륨(Na), 망간(Mn), 인(P),티타늄(Ti) 등의 금속 또는 이들의 산화물과 결합한 형태를 포함할 수 있다.

또한 본원 발명의 구체적인 일 실시양태에 따르면 상기 규산염 광물질은 체내 흡수를 촉진하기 위해 수용성 규산염 광물질인 것이 바람직하다.

규석이나 규사(Si)는 본래 물에 난용성이나 함께 고온에서 용해시킨 무수탄산나트륨에 의하여 규산알칼리로 되어 물에 녹으며 가수분해 되어 약알칼리성을 띠게된다. 본 발명의 구체적인 일 실시양태에 있어서 상기 수용성 규산염 광물질은 규석분과 같은 규소 원료를 무수탄산나트륨 등과 혼합하고 고온에서 가열/용융한 후 이를 냉각하고 분말화한 것을 사용할 수 있다.

본원 발명의 구체적인 일 실시양태에 따르면 상기 규산염 광물질은 하기와 같은 방법에 의해 준비될 수 있다. 순도 99.8% 이상의 규석분을 무수탄산나트륨, 피로인산나트륨, 인산액, 삼인산나트륨을 혼합하고 이를 1 내지 2시간 정도 상온에서 냉각한다. 그 후 상기 혼합물을 용광로에 넣어 약 1600℃ 또는 그 이상의 고온 조건에서 가열하여 용융물을 수득하고 이를 냉각하여 결정화한다. 상기 규산염 광물질은 상기 수득된 결정을 분쇄하여 분말의 형태로 준비될 수 있다. 또한, 상기 규석분은 전부 또는 일부가 맥반석분, 일라이트, 운모, 흑운모, 견운모 등의 다른 규소원으로 대체될 수 있다. 전술한 방법은 수용성 규산염 광물질을 수득하는 실시양태 중 하나이며, 수용성 규산염 광물질을 수득하는 방법은 전술한 방법으로 제한되는 것은 아니다.

또한 본 발명의 구체적인 일 실시양태에 있어서, 상기 면역 증강용 조성물은 산야초 유래 성분을 더 포함할 수 있다. 본 발명에 있어서, 상기 산야초 유래 성분은 산야초를 건조하고 분쇄하여 분말의 형태로 준비될 수 있다. 또는 상기 산야초 유래 성분은 산야초를 물이나 알코올 등 추출용매를 이용하여 추출한 추출액 형태로 준비될 수 있다.

본원 발명의 구체적인 일 실시양태에 따르면, 상기 산야초 추출액은 하기 방법에 의해 수득될 수 있다. 우선 준비된 산야초를 건조한다. 다음으로 상기 산야초의 건조 중량의 약 2배 내지 20배의 용출 용매를 준비한 후 여기에 상기 산야초 건조 분말을 투입하여 산야초 유효 성분을 용매로 용출시켜 산야초 추출액을 수득한다. 상기 용출 용매로는 물을 사용하거나, 메탄올, 에탄올 및 부탄올과 같이 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜의 극성 용매 또는 상기 알콜류와 물이 약 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖도록 혼합된 혼합 용매를 사용할 수 있다. 더욱 바람직하게는 상기 용출 용매는 80% 메탄올인 것이다. 본 발명에 있어서 추출 온도는 20℃ 내지 100℃, 바람직하게는 실온인 것이다. 추출시간은 약 12시간 내지 약 48시간의 범위일 수 있다. 추출 방법은 상기와 같이 열수 추출을 사용할 수 있으나 이에 특별히 한정되는 것은 아니며, 냉침 추출, 환류 냉각 또는 초음파 추출의 방법을 단독으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 더 나아가 상기 산야초 유래 성분은 추출액, 추출액의 희석액, 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 이들의 조정제물 또는 정제물일 수 있다.

본 발명의 구체적인 일 실시양태에 따르면 상기 산야초는 편백잎, 어성초, 은행잎, 쑥, 박, 명아주, 메밀, 닭의장풀, 도라지, 둥글레, 냉이, 노루발풀, 구절초, 산부추, 섬말나리, 솔채꽃, 솜나물, 수세미오이, 쑥, 애기괭이밥, 속단, 수리취, 대황, 대마, 금낭화, 꿩의비름, 고삼 등에서 선택된 1종 이상일 수 있다.

산야초는 가금류 사육시 부족할 수 있는 효소나 미량 원소의 공급원이 될 수 있어 영양 결핍을 예방하는 효과가 있다. 전술한 바와 같이 본 발명의 면역 증강용 조성물은 규산염 광물질이 포함되어 영양분의 소화 흡수가 촉진되므로 다양한 산야초 유래 성분의 흡수가 효과적으로 이루어질 수 있다.

본 발명의 구체적인 일 실시양태에 있어서 상기 면역 증강용 조성물은 고형분을 기준으로 본원 발명에 따른 상기 규산염 광물질과 상기 산야초 유래 성분(추출액 건조물)을 포함하며 이들이 각각 50:50 내지 90:10의 중량비로 혼합된 것이다. 또한, 본 발명의 구체적인 일 실시양태에 있어서 본 발명에 따른 상기 면역 증강용 조성물은 규산염 광물질과 상기 산야초 유래 성분의 혼합물의 수용액일 수 있으며 상기 수용액의 농도는 0.1% 내지 10%, 또는 1% 내지 10%의 범위인 것이다.

본원 발명에 있어서, 상기 조성물은 급이수에 첨가하여 급이할 수 있다. 구체적인 일 실시양태에 따르면 상기 조성물 건조 중량으로 기준으로 급이수에 10ppm 내지 1000ppm 또는 10 ppm 내지 100ppm의 농도로 희석하여 대상 가금류에 급이할 수 있다.

또한, 본원 발명의 구체적인 일 실시양태에 있어서, 본 발명에 따른 상기 면역 증강용 조성물은 사료 첨가제로 사용될 수 있는바, 본 발명은 상기 면역 증강용 조성물을 포함하는 사료 첨가제 또는 상기 사료 첨가제를 포함하는 사료용 조성물을 제공한다.

본 발명에서 용어, "사료 첨가제"란 영양소 보충 및 체중감소 예방, 사료 내 섬유소의 소화 이용성 증진, 유질 개선, 번식장애 예방 및 수태율 향상, 하절기 고온 스트레스 예방 등 다양한 효과를 목적으로 사료에 첨가하는 물질을 말한다. 본 발명의 사료첨가제는 사료관리법상의 보조사료에 해당하며, 탄산수소나트륨(중조), 벤토나이트 (bentonite), 산화마그네슘, 복합광물질 등의 광물질제제, 아연, 구리, 코발트, 셀레늄 등의 미량 광물질인 미네랄제제, 케로틴, 비타민 E, 비타민 A, D, E, 니코틴산, 비타민 B 복합체 등의 비타민제, 메티오닌, 리이산 등의 보호아미노산제, 지방산 칼슘염 등의 보호지방산제, 생균제(유산균제), 효모배양물, 곰팡이 발효물 등의 생균, 효모제 등이 추가로 포함될 수 있다. 상기 칼슘염은 칼슘 포스페이트, 몬티트(monetite), 브러시트(brushite)(CaHPO₄), 칼슘 피로포스페이트, 칼슘 카보네이트 등이 포함될 수 있다.

본 발명에 따른 상기 면역 증강용 조성물을 포함하는 사료용 조성물은 당업계에 공지된 다양한 사료 제조방법에 따라 적절한 유효 농도 범위에서 상기 면역 증강용 조성물을 첨가하여 제조 가능하다.

본 발명에서 용어, "사료"는 동물이 먹고, 섭취하며, 소화시키기 위한 또는 이에 적당한 임의의 천연 또는 인공 규정식, 한끼식 등 또는 상기 한끼식의 성분을 의미한다.

구체적으로, 본 발명에 따른 상기 면역 증강용 조성물을 유효성분으로 포함하는 사료는 당업계의 공지된 다양한 형태의 사료로 제조 가능하며, 바람직하게는 농후사료, 조사료 및/또는 특수사료가 포함될 수 있다. 예를 들어 상기 사료용 조성물은 옥수수, 밀기울, 대두박, 옥수수글루텐박, 대두유 등을 상기 면역 증강용 조성물 및 상기 사료 첨가제와 혼합하여 제조될 수 있다.

이와 같이 상기 면역 증강 조성물을 급이수 또는 사료와 혼합하여 지속적 또는 주기적으로 급이하는 경우 가금류의 면역력을 높여 질병을 예방할 수 있고 항생제의 남용이나 잔류 문제를 해소할 수 있다. 특히 하기 실시예를 참조하였을 때, 본 발명의 면역 증강 조성물은 C.perfringens 에 의해 유발되는 괴사성 장염에 대해 가금류의 면역력을 증대시키는 것으로 확인된다.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 실시예 등을 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 하기 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해 제공되는 것이다.

[실시예]

실시예 1 규산염 광물질 함유 치료용 조성물의 제조

규석(순도 99.8%, 120 메시분말) 50중량%, 일라이트(300 메시 분말)10중량%, 운모(300 메시분말) 10중량%, 무수탄산나트륨 5중량%, 피로인산나트륨 3중량% , 인산액 3중량%, 삼인산나트륨 5중량%의 비율로 혼합된 혼합물을 용광로에 투입하고 1650℃의 온도에서 12시간 가열하여 상기 혼합물의 용융물을 얻었다. 상기 용융물을 냉각시킨 후 분쇄하여 규산염 광물질 분말을 수득하였다.

다음으로, 건조된 편백잎 5중량%, 건조된 어성초 1중량%, 건조된 은행잎 2중량%, 건조된 쑥 2중량% 및 물 90중량%를 혼합하고 이를 약 100℃에서 10시간 가열한 후 약 8시간 상온에 방치하여 냉각하여 산야초 추출액을 수득하였으며 상기 추출액을 분무 건조하여 산야초 추출분말을 수득하였다.

다음으로 상기에서 수득된 규산염 광물질과 산야초 추출분말을 6:4의 중량비로 혼합하여 가금류 괴사성 장의 치료용/예방용 조성물을 준비하였다.

실험예 1 규산염 광물질 함유 사료 조성물의 생산성 확인

실험 방법 : 육계(브로일러) 300마리를 선발하여 하기 표 1과 같이 75마리씩 4개 군으로 나누었다. 대조군 1은 사육 전 기간동안 하기 표 1의 조성을 갖는 사료를 급이하였으며 항생제나 균산염 광물질 조성물을 투여하지 않았다. 대조군 2는 상기 사료를 급이함과 동시에 Avilamycin 0.001%가 포함된 사료를 급이하였다. 상기 대조군 1 및 2에 대해서는 일반 수돗물을 급이수로 제공하였다. 실험군 1 및 실험군 2에 대해서는 상기 실시예 1에서 수득된 조성물을 급이수에 20ppm(실험군 1) 및 50ppm(실험군 2)의 농도로 첨가하고 급여하였으며, 하기 표의 조성에 따른 사료를 급이하였다. 상기 사료 및 급이수는 사육 전기간 5주 동안 무제한 급이하였으며 매주 체중, 사료 섭취량, 증체량, FCR을 측정하였으며 시험 종료시점 5주령의 성적은 표 2와 같다.

Ingredient (%)	대조군 1	대조군 2	실험군 1	실험군 2
항생제	-	Avilamycin 0.001%	-	-
규산염 광물질 포함 조성물	-	-	0.2% (급이수)	0.5% (급이수)
옥수수 분말	63.2	63.2	63.2	63.2
밀기울	1.8	1.8	1.8	1.8
대두박	26.3	26.3	26.3	26.3
옥수수글루텐박	2.5	2.5	2.5	2.5
대두유	2.5	2.5	2.5	2.5
칼슘염(칼슘 카보네이트)	1.0	1.0	1.0	1.0
칼슘염(칼슘 포스페이트)	1.1	1.1	1.1	1.1
메티오닌	0.15	0.15	0.15	0.15
라이신	0.1	0.1	0.1	0.1
비타민 프리믹스	0.5	0.5	0.5	0.5
미량원소 프리믹스(미네랄)	0.5	0.5	0.5	0.5
소금	0.25	0.25	0.25	0.25
Binding agent	0.1	0.1	0.1	0.1

미량원소 프리믹스(kg당): 철 71.6 mg; 구리 11.0 mg; 마그네슘

178.7 mg; 아연 178.7 mg; 요오드 3.0 mg; 셀레니움 0.4 mg;

비타민 프리믹스(kg당) : 비타민 A (retinyl acetate), 18,904.3 IU; 비타민 D3 (cholecalciferol), 9,480.0 IU; 비타민 E (dl-α-tocopheryl acetate), 63.0 IU; 비타민 K activity, 6.4 mg; 티아민 3.2 mg; 리보플라빈 9.4 mg; 판토펜산 34.7 mg; 니아신 126.0 mg; 피리독신 4.7 mg; 엽산 1.6 mg; 비오틴 0.5 mg; 비타민 B12, 35.4 g; 콜린 956.9 mg.

실험 결과: 하기 표 2는 처리구별 생산성을 비교하여 정리한 것이다. 실험군 1 및 실험군 2는 대조군 1에 비해 모두 체중 향상의 효과를 나타내었다. 또한, 사료 섭취량은 대조군 1에 비해 실험군 1 및 실험군 2에서 증가한 것을 확인할 수 있었다. 아울러 사료 요구율면에서 대조군 1에 비해 실험군 1 및 실험군 2에서 개선되는 효과를 확인하였다. 상기에서 살펴본 바와 같이 실험군 1 및 2는 대조군 1 및 2에 비해서 생산성 개선에 뚜렷한 효과가 있으며 대조군 2와 유사한 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있었다. FCR은 사료요구량으로 닭 체중 1kg을 증대시키는 데 필요한 사료 섭취량으로 대표적인 생산성 지표이다.

처리구별 생산성 비교

처리	체중(g/수)	증체량(g)	사료섭취량(g/주/수)	FCR
대조군 1	1895.2±44.57	649.0±29.80	1163.5±25.62	1.811±0.05
대조군 2	2127.5±5.43	824.5±7.29	1268.3±8.35	1.538±0.004
실험군 1	2033.8±24.96	708.7±4.52	1225.7±13.26	1.731±0.03
실험군 2	2048.5±8.41	762.6±12.34	1256.7±15.31	1.651±0.03

또한, 하기 표 3에서 확인할 수 있는 바와 같이, 실험군 2에서 적혈구 수치가 상승하였으며 처리구별 혈구 조성은 처리구 간의 차이를 보였으나 모든 수치가 정상범주에 속하는 것으로 확인되었다.

처리구별 혈구조성(5주령) 비교

처리	WBC(K/uL)	RBC(M/uL)	Hb(g/dL)	HCT(%)	PLT(k/Ul)
대조군 1	19.38±0.80	3.5±0.27	8.4±0.35	49.8±6.8	374.3±24.52
대조군 2	20.07±0.45	3.6±0.13	8.6±0.11	37.4±1.73	237.8±12.3
실험군 1	19.90±0.52	3.4±0.15	8.7±0.19	41.7±4.18	289.5±33.19
실험군 2	18.04±0.93	3.8±0.32	8.4±0.16	39.0±3.41	181.3±17.5

또한, 처리구별 혈액 생화학 조성은 표 4, 5와 같이 나타났으며 특히 신장 기능 관련 인자인 BUN과 CRE수치는 항생제 처리구에서 가장 높게 나타났다. 상기 결과에서 확인할 수 있는 바와 같이 본 발명에 따른 조성물은 혈액 조성 면에서 생리적 유해한 반응을 나타내지 않았다.

처리구별 혈액 생화학 조성 1

처리	BUN(mg/dl)	CRE(mg/dl)	GLU(mg/dl)	TG(mg/dl)
대조군 1	5.5±0.38	0.1±0.01	191.5±4.12	29.9±1.87
대조군 2	7.5±0.65	0.2±0.04	190.0±2.79	57.1±1.13
실험군 1	3.4±0.36	0.1±0.01	183.6±1.06	51.1±2.37
실험군 2	3.9±0.19	0.1±0.02	206.3±2.09	40.7±2.32

처리구별 혈액 생화학 조성2

처리	AST(U/L)	ALT(U/L)	ALB(g/dl)	TP (g/dl)
대조군 1	138.1±3.29	26.1±2.30	1.4±0.06	2.8±0.01
대조군 2	147.2±4.61	22.3±0.78	1.3±0.05	2.5±0.17
실험군 1	118.5±3.99	27.5±3.04	1.4±0.02	3.1±0.02
실험군 2	156.0±4.02	27.6±0.72	1.4±0.02	2.9±0.06

실험예 2 규산염 광물질 함유 사료 조성물이 비장 면역세포 증식성에 미치는 영향

실험방법: 실험 예 1의 시험 종료시 처리구별로 5수씩 선발하여 면역기관인 비장을 채취하였다. 비장세포에 면역반응 유도제 conA를 처리하여 인위적인 면역반응을 시도하여 면역세포 증식을 확인하여 실험군의 면역기능 평가를 실시하였다.

실험 결과: 도 1은 3주령 육계의 비장 세포에 대한 세포 증식 결과이며, 도 2는 5주령 육계의 비장 세포에 대한 세포 증식 결과를 확인하여 그래프로 도시한 것이다. 3주령 육계의 비장 세포에 대한 실험에 있어서, 실험군 3(규산염 0.2%)의 세포 증식율은 대조군 3(무처리) 및 대조군 4(항생제 투어)와 유사한 결과를 보였으나 실험군 4(규산염 0.5%)의 경우에는 대조군 3 및 대조군 4에 비하여 높은 세포 증식율을 나타내었다. 또한, 5주령 육계의 비장 세포에 대한 실험에 있어서 실험군 3의 경우 대조군 3에 비해 우수한 세포 증식 결과를 나타내었으며 대조군 4와는 유사한 세포 증식율을 보였다.

실험예 3 괴사성 장염 유발 모델에 대한 효능 평가(폐사율 및 병변지수)

실험 방법: 육계(브로일러) 36마리를 선발하여 하기 표 6과 같이 12마리씩 3개 군으로 나누고 8, 9, 10일령에 CP-012를 2회 접종하여 장염을 유발하였다. 접종량은 1수당 1ml로 구강접종하였다. 접종 후 21일동안 투여물질의 효과를 확인하였다.

하기 표 6은 하기 실험방법을 정리하여 나타낸 것이다.

그룹	수수	투여물질	투여양 /방법	투여기간	공격접종	관찰 기간
G1	12	-	-	-		21일
G2	12	-	-	-	8, 9, 10일령/총3일 CP-012 2회 접종/1일 1ml/1수 구강접종 (5ㅧ10⁸CFU)
G4	12	규산염 광물질	0.5% 음수첨가	공격접종 1일전부터 5일간 (12시간/1일)	8, 9, 10일령/총3일 CP-012 2회 접종/1일 1ml/1수 구강접종 (5ㅧ10⁸CFU)

실험 결과: 하기 표 6은 괴사성 장염 유발 모델에서 물질 평가에 따른 폐사율 및 육안적 병변 지수를 정리하여 나타낸 것이다. 또한 도 3은 각 그룹별 폐사율을 그래프로 나타낸 것이다. 질병을 유발시키지 않은1그룹에서는 폐사된 개체가 발견되지 않았다. 2 그룹에서는 24마리 중 10마리가 급성 괴사성 장염으로 폐사하여 41.7%의 폐사율을 나타내었다. 3그룹의 경우에는 5마리가 폐사하여 20.8%의 폐사율을 나타내었다. 그룹 2 및 그룹 3의 t-test 결과에 따르면 P<0.0218로 유의한 차이가 있는 것으로 확인되었다. 상기 결과에서 확인한 바와 같이 항생제가 투여되지 않더라도 본 발명의 치료/예방 조성물의 투여에 의해 폐사율이 감소하는 것을 확인할 수 있었다.

또한, 각 실험 그룹에 대한 병변지수를 육안으로 관찰하였다. 그룹 2에서는 다른 그룹에 비해 가장 높은 병변 지수(2.00)이 관찰되었으며, 그룹 3에서도 그룹1에 비해 높은 병변 지수(1.50)이 관찰되었다. 그러나 그룹 3의 경우에는 규산염 광물질 함유 조성물 투여 결과 그룹 2에 비해 병변지수가 감소된 것을 확인하였다(표 7, 8 및 도 4참조).

시험군		폐사율	육안적 병변지수(n=24)
시험군		폐사율	1	2	3	4	5	6	7	8	9	10	11	12
G1	음성대조군	0/24 (0.0)	1	0	0	0	1	0	0	0	0	1	0	0
G2	양성대조군	10/24 (41.7)	3	4	4	1	3	4	3	0	4	0	3	4
G3	규산염광물질 (0.5%)	5/24 (20.8)	1	3	1	1	4	4	2	0	1	1	0	1

시험군		폐사율	육안적 병변지수(n=24)												평균 병변 지수
시험군		폐사율	13	14	15	16	17	18	19	20	21	22	23	24	평균 병변 지수
G1	음성대조군	0/24 (0.0)	0	1	0	0	0	1	0	1	0	0	0	0	2.00
G2	양성대조군	10/24 (41.7)	1	0	1	0	1	0	0	3	4	0	4	1	1.50
G3	규산염광물질 (0.5%)	5/24 (20.8)	2	1	4	0	1	0	3	2	0	1	1	2

도 5 는 상기 그룹 1 내지 3의 육계에서 적출한 소장과 이의 병변을 나타낸 것이다. 그룹 1에서는 약간의 충혈/출혈이 관찰되었었으며, 그룹 2에서는 점막의 비후, 광범위한 충출혈, 염증조직 등 괴사성 장염에 따른 중증의 괴사 병변이 관찰되었다. 그룹 3의 경우에는 그룹 1과 유사한 정도의 충출혈 및 출혈이 나타났으며, 그룹 2에 비해 점막의 충출혈, 염증, 괴사도가 감소된 것으로 확인되었다.

도 6은 그룹 1 내지 3의 조직학적 병변 소견을 확인한 것이다. 그룹 2의 경우에는 얇아진 소장벽에 의해 근육과 융모 조직의 염색상이 분명하게 나타나지 않고 전반적으로 융모가 탈락되고 출혈이 나타났다. 그러나 그룹 3의 경우에는 융모의 윗부분이 소실되었을 뿐 탈락이나 출혈을 관찰되지 않았다. 상기 조직학적 소견에서 확인할 수 있는 바와 같이 괴사성 장염에 대한 규산염 광물질 투여시 소장 융모의 탈락도가 감소되는 효과가 있다.

상기와 같이, 본 발명의 바람직한 실시 예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.

Claims

규산염 광물질을 포함하며, C.perfringens 에 의해 유발되는 가금류의 괴사성 장염의 치료 및/또는 예방 효과를 나타내는 면역 증강용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 규산염 광물질은 네소규산염 광물질(nesosilicates), 오르소규산염 광물질(orthosilicates), 소로규산염 광물질(sorosilicates), 사이클로 규산염 광물질(cyclosilicates), 이노규산염 광물질(inosilicates), 필로규산염 광물질(phyllosilicates) 및 텍토 규산염 광물질(tectosilicates)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 것인, 면역 증강용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 규산염 광물질은 황(S), 알루미늄(Al), 철(Fe), 칼슘(Ca), 마그네슘(Mg), 칼륨(K), 나트륨(Na), 망간(Mn), 인(P) 및 티타늄(Ti)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 금속; 또는 이들의 산화물과 결합한 형태인 것인, 면역 증강용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 규산염 광물질은 수용성 규산염 광물질인 것인, 면역 증강용 조성물.
제1항에 있어서,
상기 조성물은 산야초 추출물을 더 포함하는 것인, 면역 증강용 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 따른 조성물을 이용하여 가금류의 C.perfringens 에 의해 유발되는 괴사성 장염에 대한 면역을 증강시키는 방법.
제6항에 있어서,
상기 조성물을 건조 중량을 기준으로 급이수에 10ppm 내지 1000ppm의 농도로 희석하고 상기 조성물이 희석된 급이수를 이용하는 것인, 괴사성 장염에 대한 면역을 증강시키는 방법.
제6항에 있어서,
상기 조성물을 사료용 조성물에 혼합하여 가금류에 급이하는 것인, 괴사성 에 혼합하여 가금류에 급이하는 것인, 괴사성 장염에 대한 면역을 증강시키는 방법.