KR20160011174A - Food composition comprising cynanchum wilfordii potentiating testosterone excretion as an active ingredient - Google Patents

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KR20160011174A
KR20160011174A KR1020150132380A KR20150132380A KR20160011174A KR 20160011174 A KR20160011174 A KR 20160011174A KR 1020150132380 A KR1020150132380 A KR 1020150132380A KR 20150132380 A KR20150132380 A KR 20150132380A KR 20160011174 A KR20160011174 A KR 20160011174A
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testosterone
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최철웅
김재용
김희숙
반상오
강후원
장욱진
이규옥
박성윤
설희진
이동욱
김선오
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재단법인 전남생물산업진흥원
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Abstract

The present invention relates to a food composition comprising a Cynanchum wilfordii Hemsley extract as an active ingredient for enhancing testosterone secretion. A Cynanchum wilfordii Hemsley extract of the present invention can be used in a food composition for preventing and treating diseases caused by a decrease in testosterone levels, since the Cynanchum wilfordii Hemsley extract increases Testosterone content in leydig testicular cells and in blood of rats.

Description

테스토스테론 분비 증강 효과를 갖는 백수오 추출물을 포함하는 건강식품 조성물 {FOOD COMPOSITION COMPRISING CYNANCHUM WILFORDII POTENTIATING TESTOSTERONE EXCRETION AS AN ACTIVE INGREDIENT}TECHNICAL FIELD [0001] The present invention relates to a health food composition comprising a white water extract having a testosterone secretion enhancing effect,

본 발명은 테스토스테론 분비 증강 효과를 갖는 백수오 추출물을 포함하는 건강식품 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로는 천연원료인 백수오(白首烏, Cynanchum wilfordii Hemsley)로 추출물을 이용하여 독성 및 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있는 갱년기 남성의 테스토스테론 감소로 인한 질환 예방 또는 개선을 위한 건강식품 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a health food composition comprising a white water extract having a testosterone secretagogue enhancing effect. More particularly, the present invention relates to a health food composition for preventing or ameliorating a disease caused by reduction of testosterone in a menopausal male who can be safely used without toxicity and side effects by using an extract as a natural raw material ( Cynanchum wilfordii Hemsley) .

하수오는 땅속으로 뻗는 뿌리는 둥근 덩이뿌리를 형성한다. 가늘게 뻗는 줄기는 전체에 털이 없고 잎이 어긋나게 달린다. 잎은 잎자루가 있고 예두, 심장저로 가장자리가 밋밋하다. 8~9월에 가지 끝에서 흰색의 꽃이 원추화서로 달리는데 꽃잎은 없으며 꽃받침은 5개로 갈라진다. 8개의 수술과 3개의 암술대가 있다. 수과인 열매는 날개가 있고 꽃받침에 싸여있다. 중국 원산으로 우리나라에 귀화한 덩굴성 다년생 초본이다. 흔히 우리나라 각지의 산야에 야생하고 내한성, 내충성, 내건성 등이 강해 전국 어디서나 재배가 가능하다.Sasao has roots that reach into the ground, forming round root roots. The narrow stem has no hairs in the whole, and the leaves are staggered. The leaves have petiole, the edge is flat, the edge is flat. From August to September, the white flower at the end of the branch runs on each other. There are no petals, and the calyx is divided into 5 pieces. There are eight stamens and three styles. The achene fruit has wings and is wrapped in calyx. It is a perennial herbaceous perennial native to China, native to China. It is possible to cultivate everywhere in the country because it is wild, cold tolerant, insecticidal, resistant to weather, etc.

하수오(何首烏)는 적색과 백색 두 종류가 있는데 백하수오(白何首烏)는 백색의 하수오를 일컫는 것으로 박주가리과(Asclepiadaceae) 큰조롱(Cynanchum wilfordii Hemsley) 이며, 생약명은 백수오이다. 조롱, 새박풀, 해숭애, 새조롱, 곱뿌리 등의 다른 이름으로 불리기도 하며 자양강장, 보혈(補血), 익정(益精), 소종(消腫)의 효능이 있어, 병후쇠약, 빈혈, 조기백발(早期白髮), 신경쇠약, 만성풍비(慢性風痺) 등에 사용한다.There are two kinds of red and white seaweeds. White cedar is white cedar ( Cynanchum wilfordii Hemsley), which is white cedar (Asclepiadaceae). They are also called other names such as mockery, dwarf grass, sunshine, new mockery, multipurpose roots and have the efficacy of nourishment, blood, blood, It is used for early white hair (early white hair), nervous breakdown, and chronic air bloom.

적하수오(赤何首烏; Polygonum multiflorum)는 보간(補肝), 익신(益腎), 양혈(養血), 거풍(祛風), 영심안신(寧心安神), 익정(益精), 견골(堅骨), 화기혈(和氣血), 화허담(化虛痰), 오수발(烏鬚髮), 열안색(悅顔色), 구복(久服): 익정수(益精髓), 장근골(長筋骨), 연년불로(延年不老)하는 효능이 있는 약재임Polygonum multiflorum has been used for the treatment of liver diseases such as interpolation, xyphosis, hemorrhage, giant wind, Ningxian God, (髓 精 髓), 정수 (((髓 鬚 痰), 정수 鬚 鬚, 悅 鬚), Long striae), a yearly fever

하수오(何首烏, Polygonummultiflorum Thunberg)는 마디풀과에 속하는 다년생 초본인 3-4년 된 하수오의 괴근을 채취하여 건조한 것이다. 여기서, 하수오는 적하수오(赤何首烏)를 의미하는 것으로서, 우리나라와 북한에서는 전통적으로 하수오류 약재를 적하수오 및 백하수오로 구분하여 규정하고 있다. 대한약전외한약규격집에서는 적하수오를 하수오로, 백하수오를 백수오(白首烏, Cynanchum wilfordii Hemsley)로 구분하여 규정하고 있고 식품의약품안전처에서도 백수오와 하수오를 구분하고 있다(표 1 참조). Polygonummultiflorum Thunberg is a dried perennial herbaceous perennial herbaceous plant belonging to the family Porphyra spp., 3-4 years old. In Korea and North Korea, it is traditionally defined that the phytochemicals of sewage are classified into the red sea water and the white sea water. In the Korean Pharmacopoeia, the Korean herbal medicine standard set the enemy seaweed to the seaweed, the white seaweed to the white seaweed (white warriors, Cynanchum wilfordii Hemsley), and the Korea Food and Drug Administration (KFDA) distinguishes Hwaseo and Hwaseo (see Table 1).

한편, 갱년기란 일반적으로 여성의 성숙기가 종말기(終末期)에 이르면 난소의 기능은 점차 위축하여 배란작용이 불규칙해지고, 황체 호르몬의 형성이 완전하지 못하여 생식기관이 쇠퇴하기에 이르는데, 이 시기를 갱년기라고 한다. 대개 여성들은 45세를 전후하여 갱년기에 이른다. 이 시기에는 심계항진(心悸亢進), 흥분, 불안, 초조 등의 증상이 나타나며, 더욱 진행하면 완전한 월경 폐지가 오는데, 그 기간은 1~3년에 걸친다. 요법으로는 여성 호르몬의 보충이 필요하다.On the other hand, menopausal period generally means that when the mature stage of the female reaches the terminal period, the function of the ovary gradually decreases and the ovulation function becomes irregular, the formation of the progesterone is not complete and the reproductive organs decline, Is called a menopause. Most women reach the menopause around the age of 45. During this period, symptoms such as heart palpitations, excitement, anxiety, and irritability develop, and further progression results in complete abolition of the menstrual cycle, which lasts for one to three years. It is necessary to supplement female hormone therapy.

여성호르몬은 난소에서 분비되는 난포호르몬인 에스트로겐(estrogen)과 황체호르몬인 프로게스테론(progesteron)을 의미하나, 일반적으로 여성 호르몬은 에스트로겐을 지칭하는 용어로 많이 사용된다. 에스트로겐은 생리, 임신, 그리고 폐경에 이르는 여성의 일생을 조절하는 여성 호르몬이다. 인체의 에스트로겐 농도는 뇌에서 간장, 뼈에 이르기까지 광범위한 조직과 기관에 영향을 미치며 특히 자궁, 비뇨기, 유방, 피부, 그리고 혈관들이 유연성과 정상상태를 유지하는데 에스트로겐이 필요하다.Female hormone is the estrogen and progesterone, which are follicular hormones secreted from the ovaries. Generally, female hormones are often used to refer to estrogen. Estrogen is a female hormone that regulates the lifespan of women through menstruation, pregnancy, and menopause. Estrogen levels in the body affect a wide range of tissues and organs, from the brain to the liver and bone, and estrogen is especially needed to maintain flexibility and steady state of the uterus, urinary, breast, skin, and blood vessels.

이와 같이 종래의 갱년기는 여성의 갱년기를 지칭하는 의미로 사용되어왔으나, 최근 식생활 변화등으로 인한 남성의 갱년기 문제가 대두됨에 따라 건강기능성 식품분류에서는 여성 갱년기와 남성갱년기를 구분하기에 이르렀다. 표 1에는 2013년도 건강기능성 식품분류의 기능성 내용별 원료 인정 현황을 나타낸다.Thus, conventional menopause has been used to refer to women's menopause, but recently men's menopause problems due to dietary changes have led to the classification of health functional foods to distinguish between female and menopausal menstrual periods. Table 1 shows the status of raw material approval by functional content of the 2013 health functional food classification.

2013년도 건강기능성 식품분류의 기능성 내용별 기능성 원료 인정 현황Functionality of Health Functional Food Classification in 2013 번호number 기능성Functional 기능성 원료명 Functional ingredient name 건수Number 분류Classification 내용 Contents 1One 피로개선Fatigue improvement 피로 개선에 도움Help improve fatigue 홍경천 추출물Hong Kyung Chun Extract 1One 22 혈당조절Blood glucose control 식후 혈당상승 억제에 도움Helps to suppress postprandial increase in blood sugar 잔나비걸상버섯균사체Mushroom mycelium 1One 33 체지방감소Body fat reduction 체지방 감소에 도움Help reduce body fat 마테열수추출물,돌외잎주정추출분말(2),락토페린(우유정제단백질),키토산(2), 미역등 복합추출물(잔티젠) (2), lactoferrin (milk refining protein), chitosan (2), and sea mustard extract (Jansetgen) 77 44 간건강Liver health 간 건강에 도움Helps in liver health 도라지추출물, 발효울금Bellflower extract, fermented kelp 22 알콜성 손상으로부터 간을 보호하는 데 도움 Helps protect liver from alcoholic damage -- 00 55 혈행개선 Blood circulation improvement 헐행 개선에 도움Help improve the haul 나토균배양분말Cultured natto bacterium 1One 66 기억력개선Improve memory 기억력 개선에 도움Help improve memory -- 00 77 관절/뼈건강Joint / Bone Health 관절 건강에 도움Help with joint health 로즈힙분말(2),가시오갈피등복합추출물, 전칠삼추출물등복합물Compound extracts such as rosehip powder (2), complex extracts such as Gassiogalli 44 뼈 건강에 도움Helps in bone health 가시오가피숙지황복합추출물Mixed Extract 1One 88 혈중중성지방개선Blood triglyceride improvement 혈중중성지방 개선에 도움Helps improve blood triglyceride -- 00 99 운동수행능력/지구력 향상Improving exercise performance / endurance 운동능력 향상에 도움Helps to improve athletic ability -- 00 지구력 증진에 도움Helps to improve endurance -- 00 1010 장 건강Intestinal health 장내 유익균 증식 및 유해균 억제에 도움Helps in the proliferation of beneficial bacteria in the intestines and inhibition of harmful bacteria -- 00 면역을 조절하여 장 건강에 도움Controlling your immune system helps your intestinal health -- 00 배변활동 원활에 도움Help with bowel activity smoothly -- 00 1111 갱년기 여성 건강Menopausal Women's Health 갱년기 여성의 건강에 도움Help with the health of menopausal women -- 00 1212 눈 건강Eye Health 눈의 피로도 개선에 도움Helps improve eye fatigue -- 00 눈 건강에 도움Helps in eye health 들쭉열매추출물,루테인지아잔틴복합추출물Blueberry fruit extract, Lutein giacantine complex extract 22 1313 피부 건강Skin health 자외선에 의한 피부손상으로부터 피부 건강을 유지하는데 도움Helps maintain skin health from skin damage caused by ultraviolet rays 포스파티딜세린(2),저분자콜라겐펩타이드, 핑거루트추출분말(판두라틴), Phosphatidylserine (2), low molecular collagen peptide, finger root extract powder (panduratin), 44 피부 보습에 도움Helps skin moisturize 히알루론산, 히알루론산나트륨Hyaluronic acid, sodium hyaluronate 22 1414 배뇨기능Urination function 방광에 의한 배뇨기능개선에 도움Helps improve urination by bladder -- 00 1515 긴장 완화detente 스트레스로 인한 긴장 완화에 도움Helps relieve tension caused by stress 홍경천추출물Hong Kyung Chun Extract 1One 1616 요로 건강Urinary tract health 요로의 유해균 흡착 억제로 요로 건강에 도움Helps prevent urinary tract infection by inhibiting the absorption of harmful bacteria in the urinary tract -- 00 1717 칼슘흡수도움Calcium absorption help 칼슘 흡수에 도움Helps to absorb calcium -- 00 1818 항산화Anti-oxidant 항산화에 도움Helps in antioxidation 유비퀴놀Ubiquinol 1One 1919 소화 기능Digestive function 소화기능 개선에 도움Helps improve digestion -- 00 2020 혈압 조절Blood pressure control 높은 혈압 감소에 도움Helps reduce high blood pressure 포도씨효소분해추출분말 Grape seed enzyme decomposition extraction powder 1One 2121 전립선 건강Prostate Health 전립선 건강 유지에 도움Helps maintain prostate health -- 00 2222 인지능력Cognitive ability 인지능력 개선에 도움Help improve cognitive abilities L.helveticus발효물,도라지추출물(DRJ-AD)Fermented L.helveticus, Platycodon sp. Extract (DRJ-AD) 22 2323 면역 기능Immune function 면역력 증진에 도움 Helps boost immunity 효모베타글루칸,합성PLAG,동충하초주정추출물Yeast Beta Glucan, Synthetic PLAG, Cordyceps sinensis Extract 33 과민면역반응 완화에 도움Helps relieve irritable immune response -- 00 2424 충치감소Decay of cavities 충치발생위험감소에 도움 Helps reduce the risk of cavities -- 00 2525 콜레스테롤개선Cholesterol improvement 혈중 콜레스테롤 개선에 도움Helps improve blood cholesterol 녹차추출물Green tea extract 1One 2626 과민피부상태
개선
Irritable skin condition
Improving
면역과민반응에 의한 피부상태 개선에 도움을 줄 수 있음May help improve skin condition by immunosensitive response 과채유래유산균(L.plantarum CJLP133), L.sakei Probio65Lactobacillus (L. plantarum CJLP133), L.sakei Probio65 22
2727 갱년기 남성건강Menopause Men's Health 갱년기 남성의 건강에 도움을 줄 수 있음Can help the health of menopausal men MRMR -10 -10 민들레등복합추출물Compound extracts such as dandelion 1One 총 계 sum 3737

남성 갱년기와 관련 있는 남성호르몬으로는 테스토스테론을 들 수 있는데, 테스토스테론은 정소의 간질세포로서 하수체의 성선자극호르몬의 지배하에 콜레스테롤에서 생성되는 스테로이드 화합물이다. 남성의 2차 성징의 발현, 정자형성의 촉진, 정소상체, 전립선, 정낭 등의 발육작용을 가지며, 단백질의 동화작용도 가지기 때문에 체내에 질소를 저류시키는 효과를 나타낸다.Testosterone is an interstitial cell of testis, a steroid compound that is produced by cholesterol under the control of the gonadal hormone in the lower body. It has an effect of accumulating nitrogen in the body because it has the expression of secondary sex of male, promotion of spermatogenesis, development of testis, prostate, seminal vesicle and also assimilating protein.

따라서 본 발명에서는 우리나라의 전통적인 식물자원을 활용할 목적으로 천연원료인 백수오(白首烏, Cynanchum wilfordii Hemsley)로 추출물을 이용하여 독성 및 부작용 없이 안전하게 사용될 수 있는 갱년기 남성의 테스토스테론 감소로 인한 질환 예방 또는 개선을 위한 테스토스테론 분비 증강 효과를 갖는 건강 기능성식품 조성물을 제공한다.
Accordingly, the present invention provides a method for preventing or reducing diseases caused by reduction of testosterone in a menopausal male who can be safely used without toxicity and side effects by using an extract of Cynanchum wilfordii Hemsley, a natural raw material, A health functional food composition having a testosterone secretagogue enhancing effect for improvement.

국내 등록특허공보 제10-1113593호는 발기부전 질환의 예방과 치료를 위한 약학 조성물에 관한 것으로서, 고지방식이로 유도한 고지혈증 백서에서 음경해면체 내부의 압력을 증가시켜 발기 기능을 개선시키는 홍삼, 천마 및 하수오 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 발기부전 질환의 예방과 치료를 위해 홍삼, 천마 및 하수오를 중량비 1:1:1로 혼합한 추출물을 유효성분으로 하는 약학 조성물이 개시되어있다.Korean Patent Publication No. 10-1113593 relates to a pharmaceutical composition for the prevention and treatment of erectile dysfunction. In a hyperlipidemic white paper derived from a high fat diet, red ginseng, which improves erectile function by increasing pressure inside the corpus cavernosum, And an extract obtained by mixing red ginseng, ginseng, and seaweed at a weight ratio of 1: 1: 1 for the prevention and treatment of an erectile dysfunction disease containing an extract of Sasa ginseng as an active ingredient. 국내 등록특허공보 제10-1295125호는 오미자(五味子, Schisandra chinensis Baill.), 인삼(人蔘, Panax ginseng C.A. Meyer), 하수오(何首烏, Polygonum multiflorum Thunberg) 및 복분자(覆盆子 Rubus chingii Hu)를 유효성분으로 함유하는 항산화 기능성 조성물이 개시되어있다.Korean Patent Publication No. 10-1295125 discloses a method for producing a ginseng extract comprising Schizandra chinensis Baill. Ginseng, Panax ginseng CA Meyer, Polygonum multiflorum Thunberg, and Rubus chingii Hu. As an antioxidant-functional ingredient. 그러나 상기 조성물에 사용되는 하수오(何首烏, Polygonum multiflorum Thunberg)는 적하수오를 의미하는 것으로 본원발명의 재료로 사용되는 백하수오와는 차이를 갖는다.However, Polygonum multiflorum Thunberg used in the above composition means an amount of sodium hypochlorite, which is different from white sewage used as a material of the present invention.

우리나라 천연자원인 백수오 추출물을 이용하여 독성 및 부작용없이 안전하게 사용될 수 있는 남성호르몬 테스토스테론 분비 증강 효과를 갖는 기능성 식품 조성물을 제공하고자 한다.
The present invention provides a functional food composition having a male hormone testosterone secretagogue enhancing effect which can be safely used without toxicity and side effects by using Baekgoo extract of natural Korean resource.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 백수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 테스토스테론 분비 증강 기능을 갖는 기능성 식품 조성물을 제공한다.In order to accomplish the above object, the present invention provides a functional food composition having a testosterone secretion enhancing function comprising an extract of Bacillus subtilis as an active ingredient.

테스토스테론 분비 증강 기능을 갖는 기능성 식품 조성물의 추출방법은 백수오를 증류수로 수세한 다음 증류수와 혼합하여 열수추출 또는 탄소수 1 내지 5의 알코올 또는 이들의 혼합용매로 이루어진 군 중에서 선택된 1종 이상을 추출용매로 사용하여 추출할 수 있다.The method of extracting a functional food composition having a testosterone secretagogue enhancing function is characterized by comprising washing water with distilled water and then mixing it with distilled water to extract at least one selected from the group consisting of hot water extraction or an alcohol having 1 to 5 carbon atoms or a mixed solvent thereof as an extraction solvent .

상기 물, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올 또는 이들의 혼합용매 중 어느 하나에서 가용한 추출물을 유효성분으로 포함하는 추출물은 0.01 내지 99.9 중량%의 양으로 포함하는 백수오 테스토스테론 분비 증강용 기능성 식품 조성물 및 기능성식품이 제공된다. The extract containing 0.01 to 99.9% by weight of the extract as an active ingredient, which is soluble in any one of water, methanol, ethanol, propanol, isopropanol, butanol or a mixed solvent thereof, Compositions and functional foods are provided.

상기 추출물을 조성물로하여 제조된 기능성 식품의 1일당 투여량은 체중 kg당 10 내지 2000 mg/kg의 양으로 포함하여 경구 투여하며, 본 발명의 테스토스테론 감소로 인한 질환으로는 테스토스테론 저하증, 발기부전, 정력 감소, 정자운동성 감소, 성욕감퇴, 체력 저하, 내장지방 증가로 이루어진 군에서 선택된 하나 이상의 남성 갱년기 질환 예방 또는 개선을 위한 기능성 식품 조성물 또는 약학적 조성물일 수 있다.The daily dose of the functional food prepared using the extract as a composition is orally administered in an amount of 10 to 2000 mg / kg per kg of body weight. The testosterone-lowering diseases of the present invention include testosterone hypoperfusion, erectile dysfunction, A functional food composition or a pharmaceutical composition for preventing or ameliorating at least one male menopausal disease selected from the group consisting of decreased urination, decreased sperm motility, decreased sexual desire, decreased physical strength, and increased visceral fat.

상기 기능성 식품 조성물은 정제 및 캡슐제, 연질 캡슐제, 과립제, 액제 또는 음료중에서 선택된 하나 이상의 형태로 제조될 수 있다.
The functional food composition may be prepared in one or more forms selected from tablets and capsules, soft capsules, granules, liquids or beverages.

본 발명의 테스토스테론 분비 증강 기능을 갖는 백수오 추출물은 레이디그(Leydig) TM3 고환세포 및 마우스 혈중의 테스토스테론 (Testosterone) 함량을 증가시킴으로써 테스토스테론 감소로 인한 질환의 예방 및 개선에 유용한 기능성 식품 조성물로 유용하게 이용될 수 있다.
The white water extract having the testosterone secretion enhancing function of the present invention is useful as a functional food composition useful for prevention and improvement of diseases due to reduction of testosterone by increasing testosterone content in Leydig TM3 testicular cells and mouse blood Can be used.

도 1은 백수오 추출물에 대한 Leyding TM3 세포에서 세포 독성을 확인한 결과를 나타낸다.
도 2는 백수오 추출물에 대한 Leyding TM3 세포에서 테스토스테론 증가 효과를 나타낸다.
도 3은 백수오와 산수유 추출물에 대한 Leyding TM3 세포에서 테스토스테론 증가 효과를 비교한 결과를 나타낸다.
도 4는 백수오 추출물에 대한 쥐에서의 테스토스테론 증가 효과를 나타낸다.
FIG. 1 shows the results of cytotoxicity of Leyding TM3 cells against Bacillus subtilis extract.
FIG. 2 shows the effect of increasing testosterone in Leyding TM3 cells on Bacillus subtilis extract.
FIG. 3 shows the results of comparing the effect of testosterone increase in Leyding TM3 cells on Bacillus subtilis and Saponin extract.
Fig. 4 shows the effect of increasing testosterone in rats against Bacillus subtilis extract.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 구체적인 실시예 및 비교예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 보다 상세히 설명하기로 한다.
Hereinafter, the structure and effects of the present invention will be described in more detail with reference to specific examples and comparative examples in order to facilitate understanding of the present invention.

1. One. 백수오Baewooo Oh 추출물 제조 Extract preparation

건조된 백수오 50g을 증류수로 수세한 다음 증류수, 에탄올로 각각 500 mL를 가하여, 환류 추출기 100℃, 60℃ 에서 3시간 동안 가열, 추출하였다. 여과지(와트만 41번)를 이용하여 여과 한 후, 여액을 감압 농축하여 동결건조기를 이용하여 -50℃에서 48시간 동안 동결 건조시켰다. 이상의 방법으로 상기 추출물은 추출용매에 따라, 백수오 열수 추출물 28.74g (57.5%), 백수오 에탄올 추출물 12.31g (24.6%)을 각각 수득하여 하기 실험예의 시료로 사용하였다.
50 g of dried white water was washed with distilled water, and 500 mL was added with distilled water and ethanol, respectively, and the mixture was heated at 100 ° C. and 60 ° C. for 3 hours for extraction. After filtration using a filter paper (Watts 41), the filtrate was concentrated under reduced pressure and freeze-dried at -50 ° C for 48 hours using a freeze dryer. According to the above-mentioned method, 28.74 g (57.5%) of Baekgoo hot water extract and 12.31 g (24.6%) of Baechuoethanol extract were obtained according to the extraction solvent and used as a sample of the following experimental example.

1.1. 1.1. 백수오의White 극성용매,  Polar solvent, 비극성용매Nonpolar solvent 가용  Available 분획물의Fraction 제조 Produce

증류수 1L에 완전히 용해시킨 후 분획 여두에 넣고 Hexane 1L를 첨가하여 water층과 hexane층을 분리하였고 이와 같은 공정을 3번 반복하였다. 동일한 과정을 통해 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethylacetate), 부탄올(butanol)을 순차적으로 가하여 각 분획물을 얻었고, 얻어진 각각의 분획물을 감압여과 장치로 여과하여 농축한 후 동결 건조하여 용매를 완전히 제거한 뒤 본 실험에 사용하였다.After completely dissolving in 1 L of distilled water, 1 liter of hexane was added to the separating funnel to separate the water layer and the hexane layer. This process was repeated three times. Chloroform, ethylacetate and butanol were sequentially added through the same procedure to obtain fractions. Each of the fractions thus obtained was filtered through a vacuum filtration apparatus and concentrated. After freeze-drying, the solvent was completely removed It was used in this experiment.

1.1.1. 헥산 가용성 분획 분리1.1.1. Hexane-soluble fraction separation

상기 백수오 열수추출물 28.74g을 lL의 증류수에 완전히 용해시킨 후에 분획여두에 넣고 헥산 1L를 첨가하여 헥산 불용성층(수층)과 헥산가용성층을 분리하였다. 다시 헥산 불용성층(수층)을 대상으로 동일한 공정을 3번 반복하여 헥산 불용성 분획물 및 가용성 분획물을 수집하였다.
After completely dissolving 28.74 g of the hydrothermal extract of Bacillus subtilis in 1 L of distilled water, the mixture was put into a separatory funnel and 1 L of hexane was added to separate the hexane insoluble layer (water layer) and the hexane soluble layer. The hexane insoluble fraction (water layer) was again subjected to the same process three times to collect hexane insoluble fraction and soluble fraction.

1.1.2. 클로로포름 가용성 분획분리1.1.2. Chloroform-soluble fractionation

헥산불용성 분획(수층)에 클로로포름 1L를 가하여 섞은 후에 클로로포름가용성 분획 및 불용성 분획을 분리하였고, 클로로포름 불용성층(수층)을 대상으로 동일한 공정을 3번 반복하여 클로로포름 불용성 분획물 및 가용성 분획물을 수집하였다.
The chloroform-insoluble fraction (water layer) was mixed with 1 L of chloroform, and then the chloroform-soluble fraction and the insoluble fraction were separated. The chloroform-insoluble fraction (water layer) was subjected to the same process three times to collect chloroform-insoluble fractions and soluble fractions.

1.1.3. 에틸아세테이트 가용성 분획분리1.1.3. Ethyl acetate soluble fraction separation

클로로포름 불용성 분획(수층)에 에틸아세테이트 1L를 가하여 섞은 후에 에틸아세테이트 가용성 분획 및 불용성 분획을 분리하였고, 에틸아세테이트 불용성층(수층)을 대상으로 동일한 공정을 3번 반복하여 에틸아세테이트 불용성 분획물 및 가용성 분획물을 수집하였다.
To the chloroform insoluble fraction (water layer), 1 L of ethyl acetate was added and mixed. Then, the ethyl acetate soluble fraction and the insoluble fraction were separated. The ethyl acetate insoluble layer (water layer) was subjected to the same process three times to obtain an ethyl acetate insoluble fraction and a soluble fraction Respectively.

1.1.4. 부탄올 가용성 분획분리1.1.4. Butanol soluble fraction fractionation

상기 에틸아세테이트 불용성 분획(수층)에 부탄올 1L를 가하여 섞은 후에 부탄올 가용성 분획 및 불용성 분획을 분리하였고, 부탄올 불용성층을 대상으로 동일한 공정을 3번 반복하여 부탄올 불용성 분획물 및 가용성 분획물을 수집하였다.The ethanolic insoluble fraction (water layer) was mixed with 1 L of butanol, and the butanol-soluble fraction and the insoluble fraction were separated. The butanol-insoluble fraction was repeated three times to collect the butanol insoluble fraction and the soluble fraction.

상기 헥산 가용성 분획, 클로로포름 가용성 분획, 에틸아세테이트 가용성 분획 및 부탄올 가용성 분획을 감압 농축한 후에 동결 건조하여 분획물을 얻어 시료로 사용하였다.
The hexane-soluble fraction, the chloroform-soluble fraction, the ethyl acetate-soluble fraction and the butanol-soluble fraction were concentrated under reduced pressure and then lyophilized to obtain fractions.

2. 2. 백수오Baewooo Oh 추출물에 의한  By extract LeydigLeydig TM3TM3 cellcell 에서 세포 독성 영향 실험Cytotoxic effect experiments

Leyding TM3 cell을 37℃, 5% CO2 조건에서 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지로 배양하였다. Leyding TM3 세포를 1×105 cells/mL가 되도록 희석하여 24 well plate에 분주한 다음 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 배양하여 백수오 추출물을 0, 10, 50, 100 및 200 μg/mL의 농도로 첨가하고 48시간 동안 반응시킨 후 MTT 용액 300 uL를 첨가하여 2시간 배양한 후 상층액을 제거하여 DMSO를 well 당 100 uL 씩 첨가한 후 ELISA autoreader 570 nm에서 흡광도를 측정하였다.Leyding TM3 cells were cultured in DMEM medium supplemented with 10% FBS at 37 ° C and 5% CO 2 . One Leyding TM3 cells were diluted to 1 × 10 5 cells / mL and then dispensed in a 24 well plate 37 ℃, 5% CO 2 After incubation for 24 hours in an incubator, the extracts were added at concentrations of 0, 10, 50, 100 and 200 μg / mL for 48 hours. Then, 300 μL of MTT solution was added for 2 hours and then the supernatant was removed DMSO was added at 100 uL per well and absorbance was measured at 570 nm in an ELISA autoreader.

도 1은 백수오 추출물에 대한 Leyding TM3 세포에서 세포 독성을 확인한 결과를 나타낸다. 측정결과에 의하면 백수오 추출물은 실험에 사용된 농도 (10, 50, 100, 200 ug/mL)에서 Leyding TM3 세포에 독성을 나타내지 않음을 확인하였다.
FIG. 1 shows the results of cytotoxicity of Leyding TM3 cells against Bacillus subtilis extract. According to the measurement results, it was confirmed that Bacillus subtilis extract did not show toxicity to Leyding TM3 cells at the concentrations (10, 50, 100, 200 ug / mL) used in the experiment.

3. 3. 백수오Baewooo Oh 추출물에 의한  By extract LeydigLeydig TM3TM3 cellcell 에서 테스토스테론 증가 효과실험Testosterone increase effect test

Leyding TM3 cell을 37℃, 5% CO2 조건에서 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지로 배양하였다. Leyding TM3 세포를 1×105 cells/mL가 되도록 희석하여 24 well plate에 분주한 다음 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 배양하여 백수오 추출물을 0, 10, 50, 100 및 200 μg/mL의 농도로 첨가하고 48시간 동안 반응시킨 후 1200 rpm에서 5분간 원심 분리하여 상등액만 취한 후 Testosterone ELISA kit (ADI-901-093, 065, 174; Enzo Life Sciences, U.S.A.)을 이용하여 테스토스테론 함량을 측정하였다. Leyding TM3 cells were cultured in DMEM medium supplemented with 10% FBS at 37 ° C and 5% CO 2 . One Leyding TM3 cells were diluted to 1 × 10 5 cells / mL and then dispensed in a 24 well plate 37 ℃, 5% CO 2 The testosterone ELISA kit (ADI) was prepared by centrifugation at 1200 rpm for 5 min. The supernatant was collected by centrifugation at 1200 rpm for 24 hrs. The extracts were added at 0, 10, 50, 100 and 200 μg / Testosterone content was measured using Enzo Life Sciences, USA, at -901-093, 065, 174.

도 2는 백수오 추출물에 대한 Leyding TM3 세포에서 테스토스테론 증가 효과를 나타낸다. 도 2에 나타낸 바와 같이 백수오 추출물을 레이디그 (Leydig) TM3 세포에 10, 50, 100, 200 ug/ml 농도로 처리 시 각각 88.2 pg/ml, 125.3 pg/ml, 178.4 pg/ml, 236.2 pg/ml 테스토스테론 함량이 증가하였다.
FIG. 2 shows the effect of increasing testosterone in Leyding TM3 cells on Bacillus subtilis extract. As shown in FIG. 2, the extracts of Bacillus thuringiensis were treated at a concentration of 10, 50, 100 and 200 ug / ml in Leydig TM3 cells at 88.2 pg / ml, 125.3 pg / ml, 178.4 pg / ml, 236.2 pg / ml testosterone content increased.

4. 4. 백수오와Baisho Owa 산수유 추출물의  Of corn oil extract LeydigLeydig TM3TM3 cellcell 에서 테스토스테론 증가 비교 Increased testosterone in comparison

Leyding TM3 cell을 37℃, 5% CO2 조건에서 10% FBS가 첨가된 DMEM 배지로 배양하였다. Leyding TM3 세포를 1×105 cells/mL가 되도록 희석하여 24 well plate에 분주한 다음 37℃, 5% CO2 incubator에서 24시간 배양하여 백수오 추출물 및 산수유 추출물을 100 및 200 μg/mL의 농도로 첨가하고 48시간 동안 반응시킨 후 1200 rpm에서 5분간 원심 분리하여 상등액만 취한 후 Testosterone ELISA kit (ADI-901-093, 065, 174; Enzo Life Sciences, U.S.A.)을 이용하여 테스토스테론 함량을 측정하였다.Leyding TM3 cells were cultured in DMEM medium supplemented with 10% FBS at 37 ° C and 5% CO 2 . One Leyding TM3 cells were diluted to 1 × 10 5 cells / mL and then dispensed in a 24 well plate 37 ℃, 5% CO 2 The testosterone ELISA kit (ADI-901-C) was prepared by centrifugation at 1200 rpm for 5 min. The supernatant was then centrifuged at 1200 rpm for 24 h. 093, 065, 174; Enzo Life Sciences, USA).

도 3은 백수오와 산수유 추출물에 대한 Leyding TM3 세포에서 테스토스테론 증가를 비교한 실험결과를 나타낸다. 도 3에 나타낸 바와 같이 백수오 추출물과 산수유 추출물을 레이디그 (Leydig) TM3 세포에 각각 100, 200 ug/ml 농도로 처리하여 테스토스테론 함량을 비교 한 결과, 백수오 추출물이 산수유 추출물 보다 테스토스테론 함량을 4배정도 증가시킨 것으로 나타났다.
FIG. 3 shows experimental results comparing the increase of testosterone in Leyding TM3 cells with the extracts of Leuconostoc sp. As shown in FIG. 3, the testosterone content of Leydig TM3 cells was 100 and 200 ug / ml, respectively. The testosterone content of Leydig TM3 was higher than that of the L. acidophilus extract But also increased the number of times.

5. 5. 백수오Baewooo Oh 추출물 섭취로 인한  Due to ingestion of extracts 쥐에서In rats 테스토스테론 증가 효과 실험 Testosterone increase effect experiment

생후 10 주령 수컷 mouse를 아무것도 섭취하지 않은 대조군, 백수오 추출물을 섭취한 실험군으로 나누어 각각 10 마리씩을 본 실험에 이용하였다. 사육기간 중에는 쥐 고형사료와 수돗물을 자유롭게 섭취하도록 하였고, 매일 오전 같은 시각에 증류수에 녹인 백수오 물추출물 및 백수오 에탄올 추출물을 200 mg/kg의 농도로, 대조군은 동일량의 생리식염수를 4주 동안 경구투여 하였다.Male 10-week-old male mice were divided into two groups, one was a control group and the other was a control group. During the breeding period, mice were given free access to solid feeds and tap water. At the same time of day, the water extracts of Bacillus officinalis and Bacillus oxyethans dissolved in distilled water were administered at a concentration of 200 mg / kg, and the control group was given the same amount of physiological saline for 4 weeks Lt; / RTI >

마지막 경구 투여 후 마우스 꼬리로부터 혈액을 채취 한 후, 10000 rpm에서 10분간 원심 분리하여 혈청을 분리하였다. 분리된 혈청을 Testosterone ELISA kit (ADI-901-093, 065, 174; Enzo Life Sciences, U.S.A.)을 이용하여 혈중 테스토스테론 함량을 측정하였다.After the last oral administration, blood was collected from the tail of the mouse, and the serum was separated by centrifugation at 10000 rpm for 10 minutes. Testosterone ELISA kit (ADI-901-093, 065, 174; Enzo Life Sciences, U.S.A.) was used to measure the serum testosterone content.

도 4는 백수오 추출물에 대한 쥐에서의 테스토스테론 증가 효과를 나타낸다. 마우스 혈액으로부터 테스토스테론 함량을 측정결과는 도 4에 나타낸 바와 같이 PBS를 섭취한 대조군의 테스토스테론 함량은 109.4 pg/ml 이었으며, 백수오 물 추출물 (200 mg/kg), 백수오 에탄올 추출물 (200 mg/kg) 섭취한 군에서는 테스토스테론 함량이 각각 1100 pg/ml, 1200 pg/ml로 나타났다.Fig. 4 shows the effect of increasing testosterone in rats against Bacillus subtilis extract. As shown in FIG. 4, the testosterone content of the control group fed with PBS was 109.4 pg / ml, and the amount of testosterone was 200 mg / kg, 200 mg / kg ), The testosterone contents were 1100 pg / ml and 1200 pg / ml, respectively.

이상의 결과로부터 백수오 물추출물 및 에탄올 추출물은 마우스 혈중 테스토스테론 함량을 대조군에 비하여 각각 10%, 10.9% 증가시킨 것으로 나타났다.
From the above results, it was shown that the white wool water extract and the ethanol extract increased the testosterone content in the mouse blood by 10% and 10.9%, respectively.

6. 6. 백수오Baewooo Oh 추출물을  Extract 조성물로하는As a composition 건강 기능성 식품제조  Health Functional Food Manufacturing

백수오 추출물을 유효성분으로 포함하는 테스토스테론 분비 증강 효과를 갖는 건강기능성 식품은 상기 조성물이 0.01 내지 99.9중량%로 포함되도록 정제 및 캡슐제, 연질 캡슐제, 과립제, 액제 형태로 제조될 수 있고 음료로 변형 제조가능하다. 상기 건강 기능성 식품에는 백수오 추출물이 1일, 체중kg당 10 내지 2000 mg/kg 함량으로 투여되는 양으로 제조할 수 있다.The health functional food having a testosterone secretagogue enhancing effect containing Baekgoo extract as an active ingredient may be prepared in the form of tablets and capsules, soft capsules, granules, and liquid preparations such that the composition is contained in an amount of 0.01 to 99.9% by weight, Modifications are possible. The health functional food may be produced in an amount such that the white water extract is administered in an amount of 10 to 2000 mg / kg per kg body weight per day.

본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 상기 성분을 함유하는 외의 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.The health functional beverage composition of the present invention is not particularly limited to the components other than those containing the above components, and may contain various flavors or natural carbohydrates as additional components such as ordinary beverages.

상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 상술한 것 이외에 향미제로써 천연 향미제(타우마틴, 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.Examples of the above-mentioned natural carbohydrates are monosaccharides such as glucose, fructose; Disaccharides such as maltose, sucrose and the like and polysaccharides such as dextrins, cyclodextrins and the like, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol and erythritol. In addition to the above, natural flavoring agents (tau martin, stevia extracts (e.g., rebaudioside A, glycyrrhizin, etc.) and synthetic flavors (saccharin, aspartame, etc.) can be advantageously used as flavorings.

상기 외에 본 발명의 성분은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 추가로 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 성분은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.In addition to the above-mentioned components, the components of the present invention can be suitably used as flavorings such as various nutrients, vitamins, minerals (electrolytes), synthetic flavors and natural flavors, coloring agents and intermediates such as cheese and chocolate, pectic acid and its salts, A colloidal thickening agent, a pH adjusting agent, a stabilizer, a preservative, a glycerin, an alcohol, a carbonating agent used in a carbonated drink, and the like. In addition, the components of the present invention may contain flesh for the production of natural fruit juices and fruit juice drinks and vegetable drinks.

이상의 건강기능성 식품은 테스토스테론 저하증, 발기부전, 정자운동성 감소, 성욕감퇴, 정력감소, 체력저하, 내장지방 증가 등의 테스토스테론 감소로 인한 남성 갱년기 질환 예방 또는 개선에 효과가 있다.
These health functional foods are effective in preventing or ameliorating male menopausal symptoms due to decreased testosterone such as hypo-testosterone, erectile dysfunction, decreased sperm motility, loss of sexual desire, decreased tack, decreased physical strength, and increased visceral fat.

본 발명의 백수오 추출물을 이용한 백수오 추출물을 유효성분으로 함유하는 테스토스테론 증강용 식품 조성물에 관한 것으로서, 백수오 추출물은 레이디그 (Leydig) 고환세포 및 마우스 혈중의 테스토스테론 (Testosterone) 함량을 증가시켜, 테스토스테론 감소로 인한 질환의 예방 및 개선에 탁월한 효과를 가질 뿐만 아니라 천연물질 유래의 것으로 부작용이나 독성의 문제가 발생될 가능성이 적으므로, 본 발명은 남성갱년기 질환의 개선, 예방 및 치료에 효과가 있어 안전한 의약 조성물 또는 기능성 식품 조성물서 산업적 이용 가능성이 있다.The present invention relates to a food composition for enhancing testosterone which contains as an active ingredient an extract of Leuconostoc sp. Using an extract of Leptospirosis extract of the present invention. The extract of Leucocyte extract increases the testosterone content in Leydig testis cells and mouse blood, The present invention not only has an excellent effect for prevention and improvement of diseases due to reduction in testosterone but also has a low possibility of occurrence of side effects or toxicity due to natural substances and thus the present invention is effective for the improvement, There are industrial applicability in safe pharmaceutical compositions or functional food compositions.

Claims (6)

백수오(白首烏, Cynanchum wilfordii Hemsley) 추출물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 질환 예방 또는 개선을 위한 건강 기능성 식품 조성물
White Shuo (White Sheep, Cynanchum wilfordii Hemsley) extract as an active ingredient. The present invention relates to a health functional food composition for preventing or ameliorating menopausal diseases
제1항에 있어서, 백수오 추출물은 물 또는 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합 용매 중에서 선택되는 어느 하나로부터 가용한 추출물인 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 질환 예방 또는 개선을 위한 건강 기능성 식품 조성물
The health functional food composition for preventing or ameliorating menopausal symptoms according to claim 1, wherein the white water extract is an extract obtained from water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof.
제1항 또는 제2항의 건강 기능성 식품 조성물을 유효성분으로 포함하는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 질환 예방 또는 개선을 위한 건강 기능성 식품 조성물
A health functional food composition for preventing or ameliorating male menopausal disease characterized by containing the health functional food composition of claim 1 or 2 as an active ingredient
제3항에 있어서, 건강 기능성 식품은 백수오 추출물이 10 내지 2000 mg/kg체중/1일의 양으로 포함하여 제조되는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 질환 예방 또는 개선을 위한 건강 기능성 식품 조성물
4. The health functional food composition according to claim 3, wherein the health functional food is prepared by incorporating white water extract in an amount of 10 to 2000 mg / kg of body weight per day
제4항에 있어서 건강 기능성 식품은 정제 및 캡슐제, 연질 캡슐제, 과립제, 액제 형태로 제조되는 것을 특징으로 하는 남성 갱년기 질환 예방 또는 개선을 위한 건강 기능성 식품 조성물
The health functional food composition according to claim 4, wherein the health functional food is prepared in the form of tablets, capsules, soft capsules, granules, liquid form
제1항 또는 제2항의 추출물을 유효성분으로 포함하는 테스토스테론 저하증, 발기부전, 정자운동성 감소, 성욕감퇴, 정력감소, 체력저하, 내장지방 증가로 이루어진 군 중에서 선택된 하나 이상의 남성 갱년기 질환 예방 또는 개선을 위한 건강 기능성 식품 조성물Prevention or improvement of at least one male menopausal disease selected from the group consisting of hypothyroidism, erectile dysfunction, sperm motility reduction, loss of sexual desire, diminished vigor, decreased physical strength and visceral fat, which comprises the extract of claim 1 or 2 as an active ingredient Health functional food composition
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