KR20150141968A - 플루오르화된 피리미딘 유사체 및 그의 사용 방법 - Google Patents

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KR20150141968A
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administering
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드미트리 에스. 세르구에브
안나 스타니슬라프 갈
리처드 다이후쿠
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에피제네틱스 파마 엘엘씨
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Abstract

플루오르화된 피리미딘 유사체 화합물, 플루오르화된 피리미딘 유사체 화합물을 포함하는 조성물, 플루오르화된 피리미딘 유사체 화합물을 제조하는 방법, 플루오르화된 피리미딘 유사체 화합물을 투여함으로 DNA 트랜스퍼라제를 억제하고, 고형 종양을 치료하고, 다발성 골수종을 치료하는 방법이 제공된다.

Description

플루오르화된 피리미딘 유사체 및 그의 사용 방법{FLUORINATED PYRIMIDINE ANALOGS AND METHODS OF USE THEREOF}
이상 DNA 메틸화는 종양형성을 억제하는 유전자의 발현을 불활성화시킬 수 있는 후성유전학적(epigenetic) 기전이다. 관련 유전자로는 종양 억제 유전자; 세포사멸, 전이 및 혈관형성을 억제하는 유전자; DNA를 수복하는 유전자; 및 종양-관련 항원을 발현하는 유전자가 있다. 유전자 발현을 침묵시키는 분자 기전은 전사 인자의 작용을 차단하는 메틸화된 프로모터에 대한 5-메틸시토신 결합 단백질의 부착에 기인하는 듯하다(도 1 참조).
상기 후성유전학적 변화는 가역적이기 때문에, 상기 변화는 화학요법적 중재에 흥미로운 표적을 제공한다. 5-아자시티딘은 종양의 치료에 대해서 FDA에 의해 승인된 최초의 저메틸화제였으며, 데옥시-유사체인 5-아자데옥시시티딘 또는 데시타빈이 동일한 적응증에 대해서 보다 최근에 승인되었다(도 2 참조). 상기 두 약물은 모두 상기 치료된 골수이형성증후군(MDS) 환자의 절반 이상에서 완화 또는 임상적 개선을 생성시킨다. 반응의 특징은 수회 주기의 치료법의 요구, 느린 반응, 및 실제적인 클론 제거를 포함한다. 치료법의 최적화는 (1) 세포독성에 비해 저메틸화에 유리하게 용량을 감소시킴, (2) 투여 스케줄을 연장시킴, 및 (3) 세포독성에 도달하지 않으면서 용량 강도를 증가시킴을 포함한다. 분자에 의해, 저메틸화 및 유전자 재활성화가 나타났으며 이들은 반응에 필요한 것으로 보인다. MDS의 데이터는 후성유전자 요법의 원리 증명을 나타낸다. 상기 치료법은 유효하지만, 일부 환자에서 완전한 반응에 수개월에서 수년이 걸리고, 대부분의 환자에서 내성이 나타나는 것으로 보이며, 내성의 기전은 알려져 있지 않다.
상기 2개의 현재 승인된 약물로부터의 데이터는 골수암이 DNA 메틸화의 억제제에 가장 민감한 종양임을 암시한다. 그러나, 고형 종양이 또한 반응하지 않는 이유는 알려져 있지 않다. 최근에, DNA 메틸 트랜스퍼라제 억제제(DNMTI)에 대한 전임상 연구는 상기 억제제가 또한 효능 있는 혈관형성억제제이고, 시험관내 및 생체내에서 종양 내피세포 및 혈관형성을 억제함을 입증하였으며, 이러한 증거는 상기 작용제들에 의한 고형 종양의 치료 원리에 더해진다.
5-아자시티딘 및 데시타빈은 수중에서 불안정성이고, 이때 상기 시토신 고리의 6-번 위치에서 상기 염기가 절단됨이 공지되어 있다(도 3, IIIa 참조). 상기 두 뉴클레오시드는 모두 짧은 반감기가 문제가 되는 것으로 공지되어 있다. 피하 투여에 따른 5-아자시티딘의 반감기는 41분인 것으로 보고되며 데시타빈의 경우는 30분인 것으로 보고된다. 상기 두 약물은 모두 시티딘 데아미나제의 양호한 기질이며 상기 짧은 반감기는 주로 우라실을 불활성화시키는 상기 염기의 탈아민화에 기인한다.
젬시타빈은 2'-위치에서 이플루오르화된 당에 의해 시티딘과 상이하다. 도 4를 참조하시오.
젬시타빈의 세포독성 효과는 다이포스페이트 및 트라이포스페이트 뉴클레오시드의 두 작용의 조합에 기인하며, 이는 DNA 합성의 억제를 유도한다. 먼저, 젬시타빈 다이포스페이트는, DNA 합성을 위해 데옥시뉴클레오시드 트라이포스페이트를 생성시키는 반응들의 촉매화를 맡고 있는 리보뉴클레오티드 리덕타제를 억제한다. 상기 다이포스페이트 뉴클레오시드에 의한 상기 효소의 억제는 dCTP를 포함한 데옥시뉴클레오티드의 농도를 감소시킨다. 둘째로, 젬시타빈 트라이포스페이트는 DNA에의 통합에 대해서 dCTP와 경쟁한다. dCTP의 세포내 농도의 감소(상기 다이포스페이트의 작용에 의한)는 DNA내로의 젬시타빈 트라이포스페이트의 통합(자기-강화)을 증대시킨다. 상기 젬시타빈 뉴클레오티드가 DNA에 통합된 후에, 오직 하나의 추가적인 뉴클레오티드만이 성장하는 DNA 가닥에 부가된다. 상기 부가 후에, DNA 합성의 추가적인 억제가 존재한다. DNA 폴리머라제 입실론은 상기 젬시타빈 뉴클레오티드를 제거할 수 없고 상기 성장하는 DNA 가닥을 수복할 수 없다(차폐된 쇄 종결).
개선된 효능, 안전성 및/또는 약동학적 프로파일을 갖는 신규의 암 치료법이 필요하다. 본 발명은 암 치료를 위한 신규의 플루오르화된 피리미딘 유사체 및 조성물을 제공한다.
하나의 태양에서, 본 발명은 플루오르화된 피리미딘 유사체를 제공한다.
하나의 실시태양에서, 본 발명은 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
또 다른 실시태양에서, 본 발명은 2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
추가의 실시태양에서, 본 발명은 2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 제공한다.
또 다른 태양에서, 본 발명은 플루오르화된 피리미딘 유사체를 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 상기 약학 조성물은 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체들 중 하나 이상, 약학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제, 및 임의로 하나 이상의 추가적인 치료제를 포함한다. 상기 약학 조성물은 암을 치료하기 위한 플루오르화된 피리미딘 유사체의 투여에 유용하다.
본 발명의 다른 태양에서, 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체를 사용하는 DNA 메틸트랜스퍼라제의 억제 방법 및 암 치료 방법을 제공한다.
하나의 태양에서, 본 발명은 대상체에서 DNA 메틸트랜스퍼라제를 억제하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 대상체에게 치료 유효량의 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함한다.
또 다른 태양에서, 본 발명은 DNA 메틸트랜스퍼라제를 억제함으로써 치료될 수 있는 암을 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 치료가 필요한 대상체에게 치료 유효량의 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함한다.
추가의 태양에서, 본 발명은 고형 종양 암종의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 암종의 치료가 필요한 대상체에게 치료 유효량의 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 고형 종양 암종은 유방, 비-소세포 폐, 결장, 신장, 난소, 및 결장직장 암종 중에서 선택된다.
또 다른 실시태양에서, 본 발명은 혈액암의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 치료가 필요한 대상체에게 치료 유효량의 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 혈액암은 백혈병이다. 몇몇 실시태양에서, 상기 백혈병은 데시타빈(5-아자데옥시시티딘)에 내성이다.
하나의 태양에서, 본 발명은 고형 종양 암종의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 치료가 필요한 대상체에게 치료 유효량의 2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 고형 종양 암종은 유방, 비-소세포 폐, 및 결장 암종 중에서 선택된다.
또 다른 실시태양에서, 본 발명은 혈액암의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 치료가 필요한 대상체에게 치료 유효량의 2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 혈액암은 백혈병이다.
추가의 태양에서, 본 발명은 고형 종양 암종의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 치료가 필요한 대상체에게 치료 유효량의 2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 고형 종양 암종은 유방, 비-소세포 폐, 결장, 및 결장직장 암종 중에서 선택된다.
또 다른 실시태양에서, 본 발명은 혈액암의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 치료가 필요한 대상체에게 치료 유효량의 2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린, 그의 아노머, 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 투여함을 포함한다. 몇몇 실시태양에서, 상기 혈액암은 백혈병이다.
상기 나타낸 방법들 중 임의의 방법에서, 상기 대상체는 인간 대상체일 수 있다.
다른 태양에서, 본 발명은 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체의 제조 방법을 제공한다.
도 1은 암세포에서 발생하는 바와 같은, DNA 메틸 트랜스퍼라제(DNMT)의 과발현의 도식적인 예시이며, 이는 종양 억제의 프로모터 및 성장 조절 유전자의 과메틸화 및 불활성화에 이를 수 있다.
도 2는 5-아자시티딘 및 데시타빈의 화학 구조를 예시한다.
도 3은 용액 중에서(a) 및 DNMT의 활성 부위에 공유 결합 후(b)의 DNA 중의 5-아자시토신 잔기의 개환 및 가수분해에 대한 반응 경로를 예시한다.
도 4는 젬시타빈 HCl의 화학 구조를 예시한다.
도 5는 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(NUC013)의 화학 구조를 예시한다.
도 6은 NUC013 및 5-아자시티딘의 결장암 세포(HCT116)에서의 DNMT 억제를 비교한다.
도 7은 THP-1 백혈병 세포주에 대한 NUC013 및 데시타빈(DAC)의 활성을 비교한다.
도 8은 카수미(Kasumi)-1 백혈병 세포주에 대한 NUC013 및 데시타빈(DAC)의 활성을 비교한다.
도 9는 THP-1 및 카수미-1 세포주에서 데시타빈 및 NUC013의 DNMT1에 대한 억제 활성을 비교하는 웨스턴 블럿을 예시한다.
도 10은 비히클 대조군에 대해, 데시타빈 또는 NUC013으로 처리된 THP-1 세포의 김사(Giemsa) 균주를 비교한다.
도 11은 비히클 대조군에 대해, 데시타빈 또는 NUC013으로 처리된 카수미-1 세포의 김사 균주를 비교한다.
도 12는 2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘(NUC014)의 화학 구조를 예시한다.
도 13은 2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(NUC019)의 화학 구조를 예시한다.
본 발명은 암 치료에 유용한 치료 약물 화합물을 제공한다. 본 발명의 치료 약물 화합물은 플루오르화된 피리미딘 유사체이다. 본 발명은 또한 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체를 포함하는 조성물, 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체의 제조 방법, 및 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체를 사용하여 암을 치료하는 방법을 제공한다.
상기 치료 약물 화합물은 천연 당 대신 젬시타빈으로부터의 당 부분을 사용하는 DNA 메틸 트랜스퍼라제 억제제(DNMTI)의 한 계열이다.
하나의 태양에서, 본 발명은 플루오르화된 피리미딘 유사체를 제공한다. 본 발명의 전형적인 플루오르화된 피리미딘 유사체는
2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(본 발명에서 "NUC013"이라 칭한다);
2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘(본 발명에서 "NUC014"라 칭한다); 및
2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(본 발명에서 "NUC019"라 칭한다)
을 포함한다.
하나의 실시태양에서, 본 발명은 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머(α 및 β), 및 그의 염을 제공한다.
또 다른 실시태양에서, 본 발명은 2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머(α 및 β), 및 그의 염을 제공한다.
추가의 실시태양에서, 본 발명은 2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린, 그의 아노머(α 및 β), 및 그의 염을 제공한다.
적합한 염은 약학적으로 허용 가능한 염을 포함한다. 전형적인 염은 아세테이트, 아디페이트, 아스파테이트, 벤조에이트, 벤젠 설포네이트(베실레이트), 바이설페이트, 부티레이트, 시트레이트, 캄포레이트, 캄포설포네이트, 사이클로펜탄 프로피오네이트, 다이글루코네이트, 도데실설페이트, 1,2-에탄 다이설포네이트(에디실레이트), 에탄 설포네이트(에실레이트), 포메이트, 퓨마레이트, 글루코헵타노에이트, 글리세로포스페이트, 글리콜레이트, 헤미설페이트, 헵타노에이트, 헥사노에이트, 하이드로클로라이드, 하이드로브로마이드, 하이드로요오다이드, 2-하이드록시에탄 설포네이트, 락테이트, 말리에이트, 메탄 설포네이트(메실레이트), 2-나프탈렌 설포네이트(나프실레이트), 니코티네이트, 나이트레이트, 옥살레이트, 팔모에이트, 펙티네이트, 퍼설페이트, 3-페닐프로피오네이트, 포스페이트, 피크레이트, 피발레이트, 프로피오네이트, 살리실레이트, 숙시네이트, 설페이트, 타르트레이트, 티오시아네이트, 토실레이트, 및 운데카노에이트 염을 포함한다.
또 다른 태양에서, 본 발명은 본 발명의 하나 이상의 플루오르화된 피리미딘 유사체를 단독으로 또는 다른 치료제 및/또는 항암제와, 인간 또는 동물 대상체에게 투여하기에 적합한 약학적으로 허용 가능한 담체 또는 희석제와 함께 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 본 발명의 플루오르화된 피리미딘 유사체를, 부형제 및 포유동물 대상체에게 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체의 투여를 촉진하는 다른 화합물을 포함한 적합한 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함하는 조성물로 제형화할 수 있다. 상기 약학 조성물은 암을 치료하기 위한 플루오르화된 피리미딘 유사체의 투여에 유용하다.
본 발명의 하나 이상의 플루오르화된 피리미딘 유사체를 포함하는 조성물을 치료 유효량의 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체를 전달하기 위해서 투여한다. 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체(들)의 치료 유효량은 일반적으로 최대로 허용되는 투여량 이하의 범위일 것이나, 그 농도는 중요하지 않으며 광범위하게 변할 수 있다. 주치의에 의해 사용되는 정확한 양은 물론 상기 화합물, 투여 경로, 대상체의 신체 조건 및 다른 인자들에 따라 변할 것이다. 1일 투여량을 단일 투여량으로서 투여하거나 또는 수회 투여 용량으로 분할할 수도 있다. 본 발명의 플루오르화된 피리미딘 유사체의 투여를 임의의 유효 경로, 예를 들어 비경구 또는 경구에 의해 수행한다.
실제로 투여되는 본 발명의 플루오르화된 피리미딘 유사체의 양은 치료 유효량일 것이며, 상기 용어는 본 발명에서 실질적으로 이로운 효과를 생성시키기에 필요한 양을 나타내는데 사용된다. 유효 용량을 시험관내 또는 동물 모델 시험 시스템으로부터 유도되는 용량-반응 곡선으로부터 외삽할 수 있다. 상기 동물 모델을 또한 전형적으로는 바람직한 투여량 범위 및 투여 경로를 결정하는데 사용한다. 이어서 상기와 같은 정보를 사용하여 인간 또는 다른 포유동물에서 투여에 유용한 용량 및 경로를 결정할 수 있다. 유효 용량의 결정은 충분히 당해 분야의 숙련가들의 능력안에 있다. 따라서, 실제로 투여되는 양은 치료가 적용되는 개인에 따라 다를 것이며, 바람직하게는 현저한 부작용 없이 목적하는 효과를 성취하도록 최적화된 양일 것이다.
본 발명의 또 다른 태양에서, 상기 플루오르화된 피리미딘 유사체의 제조 방법을 제공한다. 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(NUC013)의 제조를 실시예 1에 제공한다. 2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘(NUC014)의 제조를 실시예 2에 제공한다. 2',2'-다이플루오로제불라린(NUC019)의 제조를 실시예 3에 제공한다.
또 다른 태양에서, 본 발명은 본 발명의 플루오르화된 화합물을 사용하여 세포 증식성 질병, 예를 들어 암을 앓고 있는 인간 또는 동물 대상체를 치료하는 방법을 제공한다. 본 발명의 화합물에 의해 치료될 수 있는 전형적인 세포 증식성 질병은 혈액암, 예를 들어 백혈병, 림프종 및 골수종, 및 비혈액암, 예를 들어 고형 종양 암종(예를 들어 유방, 난소, 췌장, 결장, 결장직장, 비-소폐, 신장 및 방광), 육종 및 신경교종을 포함한다. 본 발명은 상기와 같은 치료가 필요한 인간 또는 동물 대상체의 치료 방법을 제공하며, 상기 방법은 상기 대상체에게 치료 유효량의 본 발명의 하나 이상의 플루오르화된 피리미딘 유사체를 단독으로 또는 하나 이상의 다른 치료제 및/또는 항암제와 함께 투여함을 포함한다.
전형적인 플루오르화된 피리미딘 화합물
상기 계열의 분자의 개발을 위한 주요 원리는, 상기와 같은 분자들이 다른 흥미로운 특성들을 제공할 수도 있지만, 젬시타빈으로 주목된 자기-강화의 기전을 기본으로 한다.
NUC013.
2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(NUC013)(도 5 참조)은 5-아자시티딘 및 데시타빈과 관련된 신규의 시티딘 유사체이며, 따라서 공지된 대사산물을 생성시킨다. 공지된 대사산물이 있음은 예측하지 못한 독성의 위험성을 감소시킴으로써 임상 개발을 촉진한다. 예를 들어, 대사산물 독성은 DNMTI로서 5-플루오로데옥시시티딘의 임상 개발을 복잡하게 하였다.
NUC013은 세포주에서의 활성에 대해 선별되었으며 5-아자시티딘 및 데시타빈과 비교되었다. 표 1을 참조하시오.
데시타빈 및 5-아자시티딘과 비교된 NUC013의 시험관내 세포독성
화합물
 유방
MDA-MB-231
(μM)		 NSCL
NCI-H460
(μM)		 결장
HCT-116
(μM)		 백혈병
L1210
(μM)		 신장
ACHN*
(μM)		 난소
OVCAR-8*
(μM)		 백혈병
P388*
(μM)
데시타빈 >62.5 13-44 >62.5 0.24 >1000 >1000 0.0004
아자시티딘 1.64 0.43 0.62 1.7-2.4 2.51 6.38 0.74
NUC013 >62.5 4.39 4.54 1.02 0.89 25.88 0.48
표 1로부터 알 수 있는 바와 같이, 다양한 종양 세포주들(고형이고 혈액성임)에 대한 NUC013의 세포독성은 독특한 프로파일을 갖는다. NUC013은 데시타빈에 내성인 세포주, 특히 고형 종양 세포주에 대해 활성이다.
NUC013을 또한 DNA 메틸 트랜스퍼라제 억제에 대해 시험하였다(도 6 참조). 결장암 세포에서, NUC013은 DNMTI로서 5-아자시티딘보다 대략 10배 더 효능이 있다. 그러나, 5-아자시티딘은 상기 세포주에서 NUC013보다 더 세포독성이므로(각각 0.62 μM 대 4.54 μM의 GI50), 5-아자시티딘에 비해 NUC013에 의해 덜 세포독성인 약물 농도에서 DNMT의 실질적인 억제가 성취될 수 있다.
도 7은 백혈병 세포주 THP-1 및 카수미 1에 대한 데시타빈의 활성과 NUC013의 활성을 비교한다. 도 8은 카수미-1 백혈병 세포주에 대한 NUC013 및 데시타빈(DAC)의 활성을 비교한다. NUC013은 데시타빈보다 THP-1 백혈병 세포 성장에 대해 더 강한 억제 효과를 나타내었지만, 동몰 농도에서는 카수미-1 세포에서 약간 더 약한 효과를 나타내었다. 도 9는 THP-1 및 카수미-1 세포주에서 데시타빈 및 NUC013의 DNMT1에 대한 억제 활성을 비교하는 웨스턴 블럿을 예시한다.
데시타빈과의 비교에서, NUC013에 의한 DNMT1의 고갈은 도 5 및 6에서 입증된 세포감소와 관련되는 것으로 보인다. 실제로, 도 7에서 시험된 2개의 농도에서, NUC013은 웨스턴 블럿에 의해 THP-1 세포에서 유사한 DNMT 억제를 나타내면서 동몰의 데시타빈에 비해 더 강한 세포감소를 나타내지만, 카수미-1에 대해서는 보다 약한 DNMT1 억제를 가지며, 이는 보다 약한 세포감소와 상관있다. 이들 데이터는 NUC013이 DNMT 억제제임을 추가로 입증한다.
도 10은 비히클 대조군에 대해, 데시타빈 또는 NUC013으로 처리된 THP-1 세포의 김사 염색을 비교한다. 도 11은 비히클 대조군에 대해, 데시타빈 또는 NUC013으로 처리된 카수미-1 세포의 김사 염색을 비교한다.
도 8 및 9에서 입증된 바와 같이, NUC013 또는 데시타빈에 의한 THP-1 또는 카수미-1의 처리는 세포 분화를 암시하는 형태적 변화를 생성시키며, 이때 THP-1 세포에서의 더 큰 DNMT1 억제와 양립하여, 카수미-1 세포보다 THP-1의 NUC013 처리에 대해서 더 큰 효과가 관찰된다.
2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(NUC013)의 제조를 실시예 1에 개시한다. NUC013의 시험관내 세포독성(비-소세포 폐, 결장직장, 백혈병 및 유방암)을 실시예 4에 개시한다. NUC013의 시험관내 DNA 메틸트랜스퍼라제 억제를 실시예 5에 개시한다.
NUC014.
NUC014는 NUC013의 5,6-다이하이드로 유도체이다. 도 12는 2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘(NUC014)의 화학 구조를 예시한다. 상기는 수성 환경에서 안정성인 것으로 밝혀졌으며 상기 시토신의 6번 위치에서 가수분해 절단을 겪지 않는다. NUC014의 전형적인 시험관내 세포독성을 표 2에 요약한다.
NUC014의 시험관내 세포독성
화합물
 유방
MDA-MB-231
(μM)		 NSCL
NCI-H460

(μM)		 결장
HCT-116

(μM)		 백혈병
L1210

(μM)
NUC014 >31.25 >31.25 >31.25 90.58
NUC014는 백혈병 세포주 L1210에 대해서 보통의 세포독성을 나타낸다. 데시타빈과 비교된, 5,6-다이하이드로-5-아자-2'-데옥시시티딘(DHADC)에 대해 보다 적은 세포독성을 나타내는 입수 가능한 데이터를 근거로, NUC014가 또한 NUC013보다 덜 세포독성임은 놀랍지 않다.
2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘(NUC014)의 제조를 실시예 2에 개시한다.
NUC019 및 NUC020.
NUC019는 제불라린의 유도체이다. 도 13은 2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(NUC019)의 화학 구조를 예시한다. 제불라린 및 제불라린 유도체 NUC019 및 그의 α-아노머 NUC020의 전형적인 시험관내 세포독성을 표 3에 요약한다.
제불라린 및 제불라린 유도체의 시험관내 세포독성
화합물
 유방
MDA-MB-231

(μM)		 NSCL
NCI-H460

(μM)		 결장
HCT-116

(μM)		 백혈병
L1210

(μM)
제불라린 143.92 99.08 47.88 108.27
NUC019 165.90 135.65 310.26 320.95
NUC020 212.92 135.94 278.69 346.21
2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(NUC019)의 제조를 실시예 3에 개시한다. NUC019의 시험관내 세포독성(비-소세포 폐, 결장직장, 백혈병, 및 유방암)을 실시예 4에 개시한다.
하기의 실시예들은 본 발명의 예시를 위해 제공되며, 제한은 아니다.
실시예 1
2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(NUC013)의 제조
반응식 I에 나타낸 2개의 대안적인 경로들을 사용하여 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 IV)(NUC013)을 제조하였다.
A. 1- 브로모 -2- 데옥시 -2,2- 다이플루오로 -D- 리보퓨라노실 -3,5- 다이벤조에이트(화합물 I)를 통한 3',5'- 다이벤조일 -2',2'- 다이플루오로 -5- 아자데옥시시티딘(화합물 III)의 제조
(1) 당해 분야에 공지된 출발 물질 2-데옥시-2,2-다이플루오로-D-리보퓨라노실-3,5-다이벤조에이트(문헌[Chou, et. al., Synthesis 1992, v.p.565-570])를 국제 특허 출원 WO 2006/070985에 개시된 방법과 유사한 방법에 의해 1-브로모 유사체로 전환시켰다. 상기 출발 리보스(3.9 g, 10.3 mmol)를 31 ㎖의 톨루엔에 용해시키고 무수 트라이에틸아민(1.43 ㎖, 10.3 mmol)을 가하였다. 상기 용액을 0 ℃로 냉각시키고 톨루엔 8 ㎖ 중의 다이페닐 포스포릴 클로라이드(2.64 ㎖, 12.3 mmol)를 15분 동안 가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 3.5시간 동안 배양하였다. 상기 반응물을 1M HCl(10.2 ㎖)의 첨가에 의해 급냉시키고, 톨루엔 층을 분리시키고 수성층을 10 ㎖ 에테르로 역 추출하였다. 유기층들을 합하고, 물, 포화된 NaHCO3 및 포화된 NaCl(각각 20 ㎖)로 연속해서 추출하고, MgSO4 상에서 건조시켰다. 용매를 제거하고 생성물을 헥산-에틸 아세테이트 구배로 실리카겔 상에서 플래시 크로마토그래피에 의해 단리하였다. 수율 4.6 g, 73%.
(2) 단계 (1)에 개시된 바와 같이 제조된 중간체 다이페닐포스페이트 유사체(4.6 g, 7.5 mmol)에, 아세트산 중의 HBr(30%, 16.2 ㎖, 81.3 mmol)을 가하고 반응 혼합물을 실온에서 6.5시간 동안 배양하였다. 상기 반응 혼합물을 80 ㎖의 염화 메틸렌으로 희석하고 빙수, 포화된 NaHCO3 및 포화된 NaCl(각각 100 ㎖)로 2회 추출하였다. 상기 유기층을 MgSO4로 건조시키고 여과하고 증발시켜 1-브로모-2-데옥시-2,2-다이플루오로-D-리보퓨라노실-3,5-다이벤조에이트(화합물 I, 3.1 g, 93%)(α 및 β 이성질체의 9:1 혼합물이다)를 제공하였다.
(3) 5-아자시토신(98%, 알드리치, 5.0 g, 44.8 mmol) 및 황산 암모늄(25 ㎎)을 헥사메틸다이실라잔(25 ㎖)에 현탁시키고 클로로트라이메틸실란(0.2 ㎖)을 가하였다. 상기 반응 혼합물을 17시간 동안 환류하에서 가열하였다. 등명한 용액을 냉각시키고, 증발시키고, 무수 자일렌으로 2회 공증발시키고, 진공 건조시켜 실릴화된 5-아자시토신(약 7 g)의 백색을 띤 고체(이는 전체로서 후속의 글리코실화 단계에 사용된다)를 제공하였다.
(4) 글리코실화 단계를 위해서 단계 (2)에 개시된 바와 같이 제조된 1-브로모-2-데옥시-2,2-다이플루오로-D-리보퓨라노실-3,5-다이벤조에이트(화합물 I)(0.78 g, 1.77 mmol)를 4 ㎖ 아니솔에 용해시키고 단계 (3)에서와 같이 제조된 실릴화된 5-아자시토신 고체로 옮겼다. 상기 현탁액을 150 ℃로 가열하고 2 ㎖의 아니솔을 가하여 모든 고체의 용해를 완료시켰다. 4시간 후에 상기 반응 혼합물을 냉각시키고 SnCl4(0.2 ㎖, 2 mmol)를 가하였다. 상기 반응 혼합물을 150 ℃로 6시간 동안 재가열하고, 실온으로 냉각시키고, 염화 메틸렌(30 ㎖), 메탄올(10 ㎖) 및 실리카젤(20 g)의 첨가에 의해 급냉시키고 건조시켜 3',5'-다이벤조일-2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 III)을 제공하였다. 상기 생성된 분말을 충전된 실리카젤 컬럼의 상단에 적용하고 생성물을 클로로포름-메탄올 구배로 플래시 크로마토그래피에 의해 단리하였다. β-이성질체가 먼저 용리된 다음 α-아노머가 용리되었다(오직 부분적인 분리만이 성취되었으며 β-이성질체의 수율은 12%이고, α-아노머는 5%이다). 완전한 이성질체 분리가 50 mM 트라이에틸암모늄 아세테이트(pH 7.5)-아세토나이트릴 구배로 제미니(Gemini) C18 5u(21.2 x 250 ㎜ 컬럼)상에서 RP HPLC에 의해 성취되었다.
화합물 III β-이성질체에 대한 CDCl3 중에서의 1H NMR: 8.12 ppm (s, 1H, H6), 7.8-8.1 (m,　4H, 벤조일), 7.4-7.6 (m, 2H, 벤조일), 7.2-7.4 (m, 4H, 벤조일), 6.38 (br.t, J=8.0 Hz, 1H, H1'), 5.65 (m, 1H, H3'), 4.70 (m, 2H, H5'), 4.58 (m, 1H, H4'). ESI MS: 473.3 [M+H]+, 471.1 [M-H]-.
B. 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 IV)의 제조
단계 A에서와 같이 제조된 3',5'-다이벤조일-2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 III)(15 ㎎, α 및 β 이성질체의 3:1 혼합물)을 2 ㎖의 무수 MeOH 중에 용해시키고 MeOH 중의 1M NaOMe(0.1 ㎖)를 가하였다. 실온에서 1시간 후에, 상기 반응 혼합물을 증발시키고 탈보호된 이성질체를 50 mM 트라이에틸암모늄 아세테이트(pH 7.5)-아세토나이트릴 구배로 제미니 C18 5u(21.2 x 250 ㎜ 컬럼)상에서 RP HPLC에 의해 단리시켰다. 분리 직후에 β 이성질체에 상응하는 분획들을 모으고 10 ℃ 이하에서 증발시켜 0.4 ㎎(19%)의 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 IV)을 제공하였다.
화합물 IV β-이성질체에 대한 DMSO-d6 중에서의 1H NMR: 8.48 ppm (s, 1H, H6), 7.79 (br, 2H, NH2), 6.35 (br, 1H, 3'-OH), 6.07 t, J=8.0 Hz, 1H, H1'), 5.30 (br, 1H, 5'-OH), 4.90 (br, 1H, 5'-OH), 4.23 (br. m, 1H, H3'), 3.85 (m, 1H, H4'), 3.78 (m, 1H, H5'), 3.63 (m, 1H, H5'), 50 mM 트라이에틸암모늄 아세테이트(pH 7.5) 중의 UV 240 ㎚ (sh).
C. 1- 메틸설포닐 -2- 데옥시 -2,2- 다이플루오로 -D- 리보퓨라노실 -3,5- 다이벤조에이트(화합물 II)를 통한 3',5'- 다이벤조일 -2',2'- 다이플루오로 -5- 아자데옥시시티딘(화합물 III)의 제조
단계 A(3)에 개시된 바와 같이 제조된 실릴화된 5-아자시토신(2.3 g, 9 mmol)을 130 ℃에서 2 ㎖의 아니솔에 용해시켰다. 당해 분야에 개시된 바와 같이 제조된(문헌[Chou, et al., Synthesis, v.p.565-570, 1992]) 1-메틸설포닐-2-데옥시-2,2-다이플루오로-D-리보퓨라노실-3,5-다이벤조에이트(화합물 II)(0.4 g, 0.87 mmol)를 1 ㎖의 아니솔에 용해시키고 상기 실릴화된 5-아자시토신의 고온 용액에 가하였다. 상기 반응 혼합물을 150 ℃에서 7시간 동안 배양하고, 실온으로 냉각시키고, 15 ㎖의 염화 메틸렌, 15 g 실리카젤 및 5 ㎖ 메탄올을 가하여 급냉시키고 상기 현탁액을 진공하에서 건조시켰다. 생성 분말을 충전된 실리카젤 컬럼의 상단에 적용하고 생성물을 클로로포름-메탄올 구배로 플래시 크로마토그래피에 의해 단리하였다. 적합한 분획들을 모으고 증발시켜 α- 및 β-이성질체의 2:1 혼합물(100 ㎎, 25% 수율)로서 3',5'-다이벤조일-2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 III)을 제공하였다.
D. 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 IV)의 제조
단계 C에서와 같이 제조된 3',5'-다이벤조일-2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 III)(80 ㎎, α 및 β 이성질체의 2:1 혼합물)을 2 ㎖의 무수 MeOH 중에 용해시키고 MeOH 중의 1M NaOMe(0.1 ㎖)를 가하였다. 실온에서 1시간 후에, 상기 반응 혼합물을 증발시키고 탈보호된 이성질체를 50 mM 트라이에틸암모늄 아세테이트(pH 7.5)-아세토나이트릴 구배로 제미니 C18 5u(21.2 x 250 ㎜ 컬럼)상에서 RP HPLC에 의해 단리시켰다. 분리 직후에 β 이성질체에 상응하는 분획들을 모으고 10 ℃ 이하에서 증발시켜 2.1 ㎎(13%)의 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 IV)을 제공하였다.
화합물 IV에 대한 RP HPLC 체류 시간 및 스펙트럼 특성(즉 1H NMR 및 UV)은 단계 B에서와 같았다. ESI MS: 265.2[M+H]+.
Figure pct00001
[반응식 1]
3',5'-다이벤조일-2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 III) 및 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 IV)(NUC013)의 합성
실시예 2
2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘(NUC014)의 제조
2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘(화합물 VI)(NUC014)의 제조를 반응식 2에 도시한다.
A. 3',5'- 다이벤조일 -2',2'- 다이플루오로 -5- 아자데옥시시티딘(화합물 V)의 제조
실시예 1에서와 같이 제조된, 3',5'-다이벤조일-2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 III)의 순수한 β-이성질체(144 ㎎, 0.30 mmol)를 염화 메틸렌 3 ㎖에 용해시키고 트라이에틸아민(0.12 ㎖) 및 클로로트라이메티실란(0.1 ㎖)을 가하였다. 0.5시간 후에 상기 반응 혼합물을 5 ㎖ 아세트산으로 희석하고 붕수소화 나트륨(100 ㎎, 2.6 mmol)을 분말로서 가하였다. 실온에서 1시간 후에 상기 반응 혼합물을 증발시키고 50 mM 트라이에틸암모늄 아세테이트(pH 7.5)-아세토나이트릴 구배로 제미니 C18 5u(21.2 x 250 ㎜ 컬럼)상에서 RP HPLC에 의해 분리시켰다. 상기 생성물에 상응하는 분획들을 모으고 증발시켜 83 ㎎(57%)의 3',5'-다이벤조일-2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 V)을 제공하였다.
화합물 V β-이성질체에 대한 DMSO-d6 중에서의 1H NMR: 7.93-8.07 (m, 4H, 벤조일), 7.64-7.77 (m, 2H, 벤조일), 7.47-7.62 (m, 4H, 벤조일), 6.08 (t, J=7.2 Hz, 1H, H1'), 5.63　(m, 1H, H3'), 4.55-4.70 (m, 3H, H4' 및 H5'), 4.48 (s, 2H, CH2). ESI MS: 475.4　[M+H]+.
B. 2',2'- 다이플루오로 -5,6- 다이하이드로 -5- 아자데옥시시티딘(화합물 VI)의 제조
단계 A에서와 같이 제조된 3',5'-다이벤조일-2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 V)(80 ㎎, 0.168 mmol)을 6 ㎖의 무수 MeOH 중에 용해시키고 MeOH 중의 1M NaOMe(0.3 ㎖)를 가하였다. 실온에서 1시간 후에, 상기 반응 혼합물을 아세트산(0.02 ㎖)의 첨가에 의해 급냉시키고, 증발시키고 탈보호된 생성물을 50 mM 트라이에틸암모늄 아세테이트(pH 7.5)-아세토나이트릴 구배로 제미니 C18 5u(21.2 x 250 ㎜ 컬럼)상에서 RP HPLC에 의해 단리시켰다. 적합한 분획들을 모으고 증발시켜 49 ㎎(95%)의 2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘(화합물 VI)을 제공하였다.
화합물 VI에 대한 DMSO-d6 중에서의 1H NMR: 5.87 (dd, J1=9.6 Hz, J2=10.8 Hz, 1H, H1'), 4.51 및 4.29 (AB, 2H, CH2), 3.98 (ddd, J1=8.4 Hz, J2=12.8 Hz, J3=12.8 Hz, 1H, H3'), 3.67 (m, 1H, H5'), 3.58 (m, 1H, H4'), 3.52 (m, 1H, H5'). ESI MS: 267.0 [M+H]+.
Figure pct00002
[반응식 2]
2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘(화합물 VI)(NUC014)의 합성
실시예 3
2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(NUC019)의 제조
2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(화합물 VIII)(NUC019)의 제조를 반응식 3에 도시한다.
(1) 출발 물질 1-브로모-2-데옥시-2,2-다이플루오로-D-리보퓨라노실-3,5-다이벤조에이트(화합물 I)를 실시예 1에 개시된 바와 같이 제조하였다.
(2) 2-하이드록시피리미딘 하이드로클로라이드(0.57 g, 4.3 mmol)를 헥사메틸다이실라잔(10 ㎖)에 현탁시켰다. 상기 반응 혼합물을 1.5시간 동안 환류하에서 가열하였다. 등명한 용액을 아르곤하에서 경사분리시키고, 증발시키고, 무수 자일렌으로 2회 공증발시키고 진공 건조시켰다.
(3) 글리코실화 단계를 위해서, 단계 (1)에서와 같이 제조된 1-브로모-2-데옥시-2,2-다이플루오로-D-리보퓨라노실-3,5-다이벤조에이트(화합물 I)(1.20 g, 2.7 mmol)를 20 ㎖의 다이클로로에탄에 용해시키고 상기 실릴화된 2-하이드록시피리미딘을 함유하는 플라스크로 옮겼다. 상기 반응 혼합물을 16시간 동안 아르곤하에서 환류시키고, 이어서 다이클로로에탄을 10 ㎖의 아니솔로 대체하고, 상기 온도를 150 ℃로 상승시켰다. 상기 반응 혼합물을 150 ℃에서 18시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각시키고, 생성물 1-β-(2'-데옥시-2',2'-다이플루오로-D-리보퓨라노실)-피리미딘-2-온(화합물 VII)을 메탄올/클로로포름(3:97) 중에서 실리카젤상의 플래시 크로마토그래피에 의해 β- 및 α-이성질체(1:6)의 혼합물로서 단리하였다. 수율: 0.09 g 또는 7%.
(4) 단계 (1) 내지 (3)에서와 같이 제조된 1-β-(2'-데옥시-2',2'-다이플루오로-D-리보퓨라노실)-피리미딘-2-온(화합물 VII)(85 ㎎, α 및 β 이성질체의 6:1 혼합물)을 2 ㎖의 무수 MeOH 중에 용해시키고 MeOH 중의 1M NaOMe(0.1 ㎖)를 가하였다. 4 ℃에서 1시간 후에, 상기 반응 혼합물을 증발시키고 탈보호된 이성질체를 50 mM 트라이에틸암모늄 아세테이트(pH 7.5)-아세토나이트릴 구배로 제미니 C18 5u(21.2 x 250 ㎜ 컬럼)상에서 RP HPLC에 의해 단리시켰다. 분리 직후에 β 이성질체에 상응하는 분획들을 모으고 증발시켜 3.4 ㎎(7.4%)의 2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(화합물 VIII)을 제공하였다.
화합물 VIII β-이성질체에 대한 DMSO-d6 중에서의 1H NMR: 8.66 ppm (dd, J1=4 Hz, J2=2.4　Hz, 1H), 8.57 (dd, J1=6.8 Hz, J2=2.4 Hz, 1H), 6.62 (dd, J1=6.8 Hz, J2=4 Hz, 1H), 6.07 (t, J=7.2 Hz, 1H), 4.42-4.29 (m, 1H), 4.05-3.97 (m, 2H), 3.88-3.82 (m, 1H). ESI MS: 249 [M+H]+.
Figure pct00003
[반응식 3]
2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(화합물 VIII)(NUC019)의 합성
실시예 4
피리미딘 유사체들의 시험관내 세포독성
본 실시예에서, GI50(생육 억제의 50%)에 의해 측정된 바와 같은, 하기의 피리미딘 유사체들의 시험관내 세포독성을 당해 분야에 공지된 분석들을 사용하여 측정하였다: 젬시타빈, 5-아자데옥시시티딘, 5-아자시티딘, 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(NUC013), 5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘, 및 2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(NUC019).
상기 시험관내 세포독성을 하기의 세포주들에서 측정하였다: NCI-H460(ATCC #HTB-177)(비-소세포 폐), HCT-116(ATCC #CCL-247)(결장직장), HL-60(ATCC #CCL-240)(백혈병), 및 MDA-MB-231(ATCC #HTB-26)(유방).
계산된 GI50 값들을 표 4에 나타낸다.
선택된 세포주들에 대한 생육 억제(GI50) 값들(μM)
화합물 NCI-H460 MDA-MB-231 HCT-116 HL-60
젬시타빈 0.02 0.72 0.01 0.03
5-아자데옥시시티딘 13.04 >31.25 >31.25 0.27
5-아자시티딘 0.43 1.64 0.62 0.44
2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(NUC013) 4.39 >31.25 4.54 1.51
5,6-다이하이드로-5-아자시티딘 4.84 >31.25 21.40 0.03
2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린(NUC019) 135.65 165.90 310.26 --
실시예 5
시험관내 DNA 메틸트랜스퍼라제 억제
DNA 메틸트랜스퍼라제(DNMT)의 활성을 암세포주 HCT-116(ATCC #CCL-247)(결장직장)에서 측정하였으며 5-아자시티딘(5-아자-C) 또는 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(화합물 IV)(NUC013)에 의한 상기 세포의 처리로부터 생성되는 DNMT의 억제 퍼센트를 계산하였다. 상기 분석을 에피퀵(EpiQuick) DNA 메틸트랜스퍼라제 활성/억제 분석 키트(에피젠텍(Epigentek), 미국 뉴욕주 브룩클린 소재)를 사용하여 수행하였다. 상기 HT-116 세포를 24시간의 기간 동안 1 μM 및 10 μM 농도의 각 약물과 함께 배양하였다. DNMT의 억제 퍼센트를 표 5에 나타낸다.
DNMT의 억제 퍼센트
실험 5-아자-C
1 μM		 화합물 IV (NUC013)
1 μM		 5-아자-C
10 μM		 화합물 IV (NUC013)
10 μM
1 N/A N/A 30.41 28.20
2 36.76 61.73 59.90 N/A
3 9.94 35.77 41.26 46.51
4 10.96 62.63 74.22 70.75
표 5의 결과는 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘(NUC013)이 DNA 메틸트랜스퍼라제의 억제제임을 입증한다.
본 발명의 바람직한 실시태양을 예시하고 개시하였지만, 다양한 변화들을 본 발명의 진의 및 범위로부터 이탈됨 없이 상기 내에서 수행할 수 있음을 알 것이다.

Claims (24)

  1. 2',2'-다이플루오로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염.
  2. 제1항의 화합물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약학 조성물.
  3. 치료 유효량의 제1항의 화합물을 대상체에게 투여함을 포함하는, 상기 대상체에서 DNA 메틸트랜스퍼라제의 억제 방법.
  4. 치료 유효량의 제1항의 화합물을, DNA 메틸트랜스퍼라제의 억제에 의해 치료될 수 있는 암의 치료가 필요한 대상체에게 투여함을 포함하는, 상기 암의 치료 방법.
  5. 치료 유효량의 제1항의 화합물을 고형 종양 암종의 치료가 필요한 대상체에게 투여함을 포함하는, 상기 고형 종양 암종의 치료 방법.
  6. 제5항에 있어서,
    고형 종양 암종이 유방, 비-소세포 폐, 결장, 신장, 난소 및 결장직장 암종으로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는 방법.
  7. 치료 유효량의 제1항의 화합물을 혈액암의 치료가 필요한 대상체에게 투여함을 포함하는, 상기 혈액암의 치료 방법.
  8. 제7항에 있어서,
    혈액암이 백혈병인 방법.
  9. 제8항에 있어서,
    백혈병이 데시타빈(5-아자데옥시시티딘)에 내성인 방법.
  10. 제3항 내지 제9항 중 어느 한 항에 있어서,
    대상체가 인간인 방법.
  11. 2',2'-다이플루오로-5,6-다이하이드로-5-아자데옥시시티딘, 그의 아노머 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염.
  12. 제11항의 화합물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약학 조성물.
  13. 치료 유효량의 제11항의 화합물을 고형 종양 암종의 치료가 필요한 대상체에게 투여함을 포함하는, 상기 고형 종양 암종의 치료 방법.
  14. 제13항에 있어서,
    고형 종양 암종이 유방, 비-소세포 폐 및 결장 암종으로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는 방법.
  15. 치료 유효량의 제11항의 화합물을 혈액암의 치료가 필요한 대상체에게 투여함을 포함하는, 상기 혈액암의 치료 방법.
  16. 제15항에 있어서,
    혈액암이 백혈병인 방법.
  17. 제13항 내지 제16항 중 어느 한 항에 있어서,
    대상체가 인간인 방법.
  18. 2'-데옥시-2',2'-다이플루오로제불라린, 그의 아노머 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염.
  19. 제18항의 화합물 및 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 약학 조성물.
  20. 치료 유효량의 제18항의 화합물을 고형 종양 암종의 치료가 필요한 대상체에게 투여함을 포함하는, 상기 고형 종양 암종의 치료 방법.
  21. 제20항에 있어서,
    고형 종양 암종이 유방, 비-소세포 폐, 결장 및 결장직장 암종으로 이루어지는 그룹 중에서 선택되는 방법.
  22. 치료 유효량의 제18항의 화합물을 혈액암의 치료가 필요한 대상체에게 투여함을 포함하는, 상기 혈액암의 치료 방법.
  23. 제22항에 있어서,
    혈액암이 백혈병인 방법.
  24. 제20항 내지 제23항 중 어느 한 항에 있어서,
    대상체가 인간인 방법.
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