KR20150124411A - Method for producing Chunggukjang with increased quality and preference and Chunggukjang produced by the same method - Google Patents

Method for producing Chunggukjang with increased quality and preference and Chunggukjang produced by the same method Download PDF

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Abstract

The present invention relates to a method for preparing fermented soybeans, the fermented soybeans prepared by using the method, a processed food product using the fermented soybeans, and Bacillus subtilis SCKB1319 strains (KCCM 11684P) having biogenic amine decomposition activity and glutamic acid-producing ability. The method includes the following steps: (a) removing water from soaked soybeans (Glycine max), boiling the soybeans, and cooling the soybeans at 55-65°C; and (b) inoculating the Bacillus subtilis to the soybeans cooled in the step (a) and fermenting the soybeans at 35-45°C.

Description

품질 및 기호도가 증진된 청국장의 제조방법 및 상기 방법으로 제조된 청국장{Method for producing Chunggukjang with increased quality and preference and Chunggukjang produced by the same method}[0001] The present invention relates to a method of manufacturing a cheonggukjang having enhanced quality and preference, and a method of producing chunggukjang prepared by the above method,

본 발명은 (a) 수침한 대두의 물을 뺀 후, 증자하고 55~65℃로 냉각시키는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계의 냉각시킨 대두에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 접종한 후 35~45℃에서 발효시키는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 청국장의 제조방법, 상기 방법으로 제조된 청국장 및 상기 청국장을 가공한 가공식품과 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P)에 관한 것이다.The present invention relates to a process for producing soybean milk, comprising the steps of: (a) removing water from soaked soybeans, heating and cooling to 55 to 65 ° C; And (b) inoculating Bacillus subtilis to the cooled soybeans of step (a) and fermenting the fermented soybeans at 35 to 45 ° C. the soybean processed food and with biogenic amines processing the soybean prepared in (biogenic amine) decomposing activity, and Bacillus having the glutamic acid-producing ability subtilis (Bacillus subtilis strain SCKB1319 (KCCM 11684P).

우리나라 전통 대두 발효식품인 청국장은 콩 유래의 단백질, 탄수화물 및 지방질 등의 영양성분 이외에도 식이섬유, 인지질, 이소플라본(isoflavone), 페놀린산, 사포닌, 트립신 저해제, 피틴산 등을 포함하고, 비타민, 미네랄, 필수아미노산 등의 필수 영양소 및 약효성분이 다량 함유되어 있다. 지금까지 알려진 청국장의 효능으로는 혈중 콜레스테롤 저하, 고혈압 예방, 항암, 항산화, 혈전용해, 골다공증 예방, 간 기능 개선 등이다.Chongkukjang, a traditional soybean fermented food, contains dietary fiber, phospholipid, isoflavone, phenolinic acid, saponin, trypsin inhibitor and phytic acid as well as nutrients such as proteins, carbohydrates and fats derived from soybeans, and contains vitamins, minerals, Essential amino acids and other necessary nutrients and active ingredients. Chongkukjang's effects known so far include low blood cholesterol, prevention of hypertension, anticancer, antioxidant, thrombolysis, prevention of osteoporosis, and improvement of liver function.

한편, 청국장의 발효는 대두의 종류, 사용균주, 발효온도 및 습도 등에 의해 큰 영향을 받는다. 미생물을 이용하기 때문에 발효조건의 차이에 따른 특유의 풍미가 청국장의 품질에 큰 영향을 미치는 요인이 되고 있다.On the other hand, the fermentation of Chongkukjang is greatly influenced by the kind of soybean, strain used, fermentation temperature and humidity. Due to the use of microorganisms, the distinctive flavor due to differences in fermentation conditions has become a factor that greatly affects the quality of Chungkookjang.

종래의 청국장의 제조방법은 콩을 세척하여 뜨거운 물에 넣고 삶은 후, 납두균이나 고초균을 접종하여 밀폐용기에 밀봉해 발효하여 제조한다. 하지만 식생활의 변화와 주거문화의 서구화로 인하여 청국장의 소비는 점차 감소하고 있으며, 콩이 발효되는 과정에서 콩을 삶을 때 스며든 수분도 함께 발효됨으로 인해 역겨운 냄새가 발생하게 되고, 이로 인해 청국장 조리과정 중 발생하는 특유한 이취는 영양이 풍부하여 인체에 유익함에도 불구하고, 어린이나 젊은층에게는 기호도가 감소하여 대중화하는데 제한적이라는 문제점이 있어 왔다. 청국장의 기호성과 품질 개선을 위한 종래기술로는 약용식물이나 천연소재를 첨가한 생약초 청국장, 홍삼 청국장, 녹차 청국장, 키토산 청국장 등이 보고되고 있으나, 청국장 제조공정에 따른 품질 및 관능적 특성에 대한 연구는 미미하고, 우리나라 청국장 생산업체에서는 표준화된 제조공정으로 청국장을 생산하는 업체는 거의 없는 실정이다.Conventionally, the soybean is produced by washing soybeans, boiling them in hot water, boiling yeast germs and Bacillus subtilis, sealing them in a sealed container and fermenting them. However, due to changes in diet and westernization of residential culture, the consumption of Chungkookjang is gradually decreasing. In the course of fermentation of soybean, the unpleasant odor is generated due to the fermentation of the moisture permeated in the soybean life, Although the distinctive odor that occurs during the process is rich in nutrition and benefits the human body, there has been a problem that the degree of preference for children and young people is limited and is limited to popularization. As the conventional technology for improving the palatability and quality of Cheonggukjang, there have been reported herbaceous herbs such as herb medicine added with medicinal plants or natural materials, red ginseng chonggukjang, green tea chonggukjang, chitosan chonggukjang, but the study on the quality and sensual characteristics In Korea, there are few companies that produce Chongkukjang by standardized manufacturing process.

한편, 바이오제닉 아민(biogenic amine)은 아미노산의 탈탄산 작용, 아미노기 전이작용 등의 화학적 작용에 의해 주로 생성되는 질소화합물로서, 단백질 함유 식품 내에서 미생물 또는 생화학적 활성에 의해 발생된다. 바이오제닉 아민은 미생물의 아미노산 디카복실라제(amino acid decarboxylase) 작용에 의해 형성되며 세균에서는 아크로모나스(Acromonas), 바실러스(Bacillus), 시트로박터(Citrobacter), 클로스트리디움(Clostridium), 에스케리키아(Escherichia), 크렙시엘라(Klebsiela), 락토바실러스(Lactobacillus), 페디오코커스(Pediococcus), 프로테우스(Proteus) 및 슈도모나스(Pseudomonas) 속 등이 아미노산 디카복실라제를 가지는 것으로 알려져 있다.On the other hand, biogenic amines are nitrogen compounds which are produced mainly by chemical action such as decarboxylation action of an amino acid, amino group transfer action, etc., and are generated by microorganisms or biochemical activities in a protein-containing food. Biogenic amines in being formed by amino dicarboxylic decarboxylase (amino acid decarboxylase) action of microorganisms bacteria arc Pseudomonas (Acromonas), Bacillus (Bacillus), bakteo (Citrobacter), Clostridium (Clostridium) in a sheet, Escherichia (Escherichia), keurep when it is known as having a Ella (Klebsiela), Lactobacillus bacteria (Lactobacillus), Phedi O Rhodococcus (Pediococcus), Proteus (Proteus) and Pseudomonas (Pseudomonas) in such a dicarboxylic amino acid decarboxylase.

대표적인 바이오제닉 아민으로는 퓨트레신(putrescine), 히스타민(histamine), 티라민(tyramine), 카다베린(cadaverine), 스퍼미딘(spermidine) 및 세로토닌(serotonin) 등이 있다. 바이오제닉 아민은 체내에서 신경전달 물질로 직·간접적으로 작용하고 혈압조절 및 혈류 등의 심혈관계 질환에도 영향을 미치므로, 바이오제닉 아민 함유 식품의 섭취로 여러가지 약리적인 현상이 나타날 수 있다. 이들 중 인체의 분해 한도를 넘어서는 히스타민(histamine) 및 티라민(tyramine)을 식품에서 섭취하는 경우에는 발진, 국소적 피부염증, 알레르기, 구토, 오심, 설사 등의 증상을 유발한다. 또한, 바이오제닉 아민에 의해 혈관 수축 및 심박 활동이 증가되어 혈압 상승을 유발하고, 동공과 눈꺼풀 조직을 확장시켜 눈물의 분비를 촉진하고, 타액의 과다분비, 호흡 증가 및 혈당 상승을 가져오며 편두통을 유발하기도 하는 것으로 보고되었다.Representative biogenic amines include putrescine, histamine, tyramine, cadaverine, spermidine, and serotonin. Since biogenic amines act directly or indirectly as neurotransmitters in the body and also affect cardiovascular diseases such as blood pressure control and blood flow, various pharmacological phenomena may occur due to ingestion of biogenic amine-containing foods. Among these, ingestion of histamine and tyramine beyond the degradation limit of the human body causes symptoms such as rash, local skin inflammation, allergy, vomiting, nausea and diarrhea. In addition, blood vessel contraction and heart rate activity are increased by biorenic amines to cause elevation of blood pressure, dilation of pupil and eyelid tissue to promote secretion of tears, excessive salivation of saliva, increase of respiration and increase of blood sugar, And the like.

글루탐산은 생물체의 단백질을 구성하는 물질로서, 고유의 정미력과 감칠맛을 가지고 있어 가정용 및 가공식품 생산을 위한 조미료로 널리 이용되고 있다. 글루탐산은 코리네박테리움속 또는 브레비박테리움속 미생물을 배양하여 얻어진 배양액으로부터 회수하여 제조되고 있다. 글루탐산의 생산성을 높이기 위하여, 통상 배지 내 비오틴을 특정 범위로 제한하거나, 계면활성제를 첨가하여 배양을 수행하거나, 페니실린계 항생제를 첨가하여 배양을 수행하거나, 혹은 배양 온도를 조절하여 배양을 수행하는 방법 등이 알려져 있다.Glutamic acid is a substance that constitutes the protein of living organisms and has a unique taste and flavor, and is widely used as a seasoning for the production of household and processed foods. Glutamic acid is produced by recovering from a culture solution obtained by culturing a genus of genus Corynebacterium or Brevibacterium genus. In order to increase the productivity of glutamic acid, there is a method in which biotin in a medium is usually confined to a specific range, culture is carried out by adding a surfactant, culture is carried out by adding a penicillin antibiotic, or culture is carried out by adjusting the culture temperature Are known.

한국등록특허 제0856568호에는 뽕잎과 누에를 이용한 청국장의 제조방법이 개시되어 있고, 한국등록특허 제0324132호에는 작두콩을 이용한 청국장의 제조방법이 개시되어 있으나, 본 발명의 품질 및 기호도가 증진된 청국장의 제조방법과는 상이하다.Korean Patent No. 0856568 discloses a method for producing chungkukjang using mulberry leaves and silkworms and Korean Patent No. 0324132 discloses a method for producing chungkukjang using soybean koji. . ≪ / RTI >

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명의 목적은 바이오제닉 아민의 높은 분해 활성을 가지면서 글루탐산 생성능을 가지는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주와 상기 균주를 이용하여 청국장 고유의 맛을 유지하기 위해 다른 식품 첨가물은 일체 첨가하지 않으면서, 청국장의 품질 및 기호도가 증진될 수 있는 청국장을 제조하기 위해, 접종 조건 및 발효조건 등의 제조조건을 최적화하여 청국장 특유의 불쾌취는 제거되고 기호도가 증진될 뿐만 아니라, 바이오제닉 아민 함량이 낮고, 글루탐산 함량이 높은 청국장을 제공하는 데 있다.SUMMARY OF THE INVENTION The present invention has been made in view of the above-mentioned needs, and an object of the present invention is to provide a bacterium having Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis) subtilis ) SCKB1319 strain and the above strains to maintain the inherent flavor of Chungkukjang. In order to produce chungkukjang which can enhance the quality and preference of Chungkookjang without adding any other food additives, The present invention is to provide a cheonggukjang which is low in biogenic amine content and high in glutamic acid content as well as improving the preference degree of the cheonggukjang.

상기 과제를 해결하기 위해, 본 발명은 (a) 수침한 대두의 물을 뺀 후, 증자하고 55~65℃로 냉각시키는 단계; 및 (b) 상기 (a)단계의 냉각시킨 대두에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 접종한 후 35~45℃에서 발효시키는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 청국장의 제조방법을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention provides a process for producing soybean milk, comprising the steps of: (a) removing water of soaked soybeans, heating and cooling to 55 to 65 ° C; And (b) inoculating Bacillus subtilis to the cooled soybeans of step (a) and fermenting the fermented soybean oil at 35 to 45 ° C. .

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 청국장을 제공한다.The present invention also provides a cheonggukjang prepared by the above method.

또한, 본 발명은 상기 청국장을 가공한 가공식품을 제공한다.Further, the present invention provides a processed food prepared by processing the above-mentioned Chungkookjang.

또한, 본 발명은 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P)를 제공한다.In addition, the present invention relates to a method for producing a bacterium having Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis) subtilis ) SCKB1319 strain (KCCM 11684P).

본 발명의 방법으로 제조된 청국장은 다른 식품첨가물이나 양념을 따로 첨가하지 않고도 청국장이 가지고 있는 가장 큰 문제점인 불쾌치는 감소시키고 품질 및 기호도는 증진시킬 수 있고, 현대인의 입맛과 선호도에 맞게 개발되었기 때문에 고유의 전통식품을 계승함과 동시에 한 단계 발전시키는 계기가 될 것으로 판단된다.The cheonggukjang produced by the method of the present invention can be used to reduce unpleasantness, which is the biggest problem of chonggukjang, and to improve the quality and preference without adding any other food additives or seasonings, and has been developed in accordance with the taste and preference of modern people It will be an opportunity to inherit the traditional food and develop it one step further.

또한, 바이오제닉 아민의 높은 분해 활성을 가지면서 글루탐산 생성능을 가지는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주를 이용하여 청국장을 제조하기 때문에 안전하고 고품질의 청국장 생산 효과를 가져올 수 있다.In addition, Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis), which has high degrading activity of biogenic amines and has glutamic acid- subtilis ) SCKB1319 strain, it is possible to produce safe and high-quality production of Chongkukjang.

도 1은 균주 접종온도를 달리하여 72시간 동안 발효한 청국장 사진이다.
A: 40℃에서 접종, B: 50℃에서 접종, C: 60℃에서 접종
도 2는 균주 접종온도를 달리한 청국장의 발효기간에 따른 수분 함량 변화를 나타낸 그래프이다.
도 3은 균주 접종온도를 달리한 청국장의 발효기간에 따른 pH 변화를 나타낸 그래프이다.
도 4는 균주 접종온도를 달리한 청국장의 발효기간에 따른 적정 산도 변화를 나타낸 그래프이다.
도 5는 균주 접종온도를 달리한 청국장의 발효기간에 따른 아미노태 질소 함량 변화를 나타낸 그래프이다.
도 6은 발효 온도를 달리하여 72시간 동안 발효한 청국장 사진이다.
A: 30℃에서 발효, B: 40℃에서 발효, C: 50℃에서 발효
도 7은 발효 온도를 달리한 청국장의 발효기간에 따른 수분 함량 변화를 나타낸 그래프이다.
도 8은 발효 온도를 달리한 청국장의 발효기간에 따른 pH 변화를 나타낸 그래프이다.
도 9는 발효 온도를 달리한 청국장의 발효기간에 따른 적정 산도 변화를 나타낸 그래프이다.
도 10은 발효 온도를 달리한 청국장의 발효기간에 따른 프로테아제 활성 변화를 나타낸 그래프이다.
도 11은 발효 온도를 달리한 청국장의 발효기간에 따른 아미노태 질소 함량 변화를 나타낸 그래프이다.
FIG. 1 is a photograph of Chungkookjang fermented for 72 hours at different strain inoculation temperatures.
A: inoculated at 40 ° C, B: inoculated at 50 ° C, C: inoculated at 60 ° C
FIG. 2 is a graph showing changes in moisture content according to the fermentation period of Chungkookjang with different inoculation temperatures.
FIG. 3 is a graph showing changes in pH with fermentation period of Chungkookjang at different inoculation temperatures.
FIG. 4 is a graph showing the change in titratable acidity according to the fermentation period of Chungkukjang with different inoculation temperatures.
FIG. 5 is a graph showing the change in amino nitrogen content during fermentation period of Chungkukjang with different inoculation temperatures.
6 is a photograph of Chungkookjang fermented for 72 hours at different fermentation temperatures.
A: Fermentation at 30 ° C, B: Fermentation at 40 ° C, C: Fermentation at 50 ° C
FIG. 7 is a graph showing changes in moisture content according to the fermentation period of Chungkukjang with different fermentation temperatures.
FIG. 8 is a graph showing changes in pH with fermentation period of Chungkookjang fermentation temperature.
9 is a graph showing the change in titratable acidity according to the fermentation period of Chungkukjang with different fermentation temperatures.
10 is a graph showing the change of protease activity according to the fermentation period of Chungkukjang with different fermentation temperatures.
FIG. 11 is a graph showing changes in amino nitrogen content with fermentation period of chungkukjang with different fermentation temperatures.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은In order to achieve the object of the present invention,

(a) 수침한 대두의 물을 뺀 후, 증자하고 55~65℃로 냉각시키는 단계; 및(a) subtracting the water of the soaked soybeans, and increasing the temperature to 55 to 65 캜; And

(b) 상기 (a)단계의 냉각시킨 대두에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 접종한 후 35~45℃에서 발효시키는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 청국장의 제조방법을 제공한다.(b) inoculating Bacillus subtilis to the cooled soybeans in step (a), and fermenting the fermented soybeans at 35 to 45 ° C.

본 발명의 청국장의 제조방법에서, 상기 (a)단계는 바람직하게는 5~7시간 동안 수침한 대두의 물을 25~35분 동안 뺀 후, 110~130℃에서 15~25분 동안 증자하고 55~65℃로 냉각시킬 수 있으며, 더욱 바람직하게는 6시간 동안 수침한 대두의 물을 30분 동안 뺀 후, 121℃에서 20분 동안 증자하고 58~62℃로 냉각시킬 수 있다. 상기와 같이 수침한 대두는 증자에 적합한 상태로 대두를 불릴 수 있었으나, 상기 시간 미만으로 수침할 경우 대두가 충분히 불지 않아 증자가 잘 되지 않은 문제점이 있고, 상기 시간을 초과하여 수침할 경우 수침 과정에서 대두의 수용성 영양성분이 물로 빠져나가 손실되는 문제점이 있다. 또한 수침하여 불린 대두를 상기와 같이 고온에서 증자하는 과정을 통해 곰팡이나 기타 세균의 오염을 방지하고, 콩 비린내가 나지 않으면서 청국장 제조에 적합한 대두로 준비할 수 있었다. 또한, 상기와 같은 냉각온도에서 균을 접종하여 발효시키는 것이 아미노태 질소 함량이 높고 풍미가 우수하여 기호도가 향상될 뿐만 아니라, 청국장에 적합한 점도를 지니는 청국장으로 발효시킬 수 있었다.In step (a) of the present invention, the water of soybeans soaked for 5 to 7 hours is removed for 25 to 35 minutes, and then the mixture is heated at 110 to 130 ° C for 15 to 25 minutes, To 65 ° C. More preferably, the water of soybeans soaked for 6 hours is removed for 30 minutes, and then the mixture is heated at 121 ° C for 20 minutes and cooled to 58 to 62 ° C. Although the soybean soaked in water as described above can be called soybeans in a state suitable for growth, there is a problem in that the soybean is not sufficiently blown when the soybean is soaked in less than the time, There is a problem that the water-soluble nutrients of soybean are lost through water. In addition, soybean soaked by soaking was prevented from contamination of fungi and other bacteria through the process of elevating at high temperature as described above, and it was prepared as soybeans suitable for the production of chungkukjang without the bean smell. In addition, fermenting the microorganisms by inoculating them at the above-mentioned cooling temperature has high amino nitrogen content and excellent flavor, which not only improves the preference degree but also enables fermentation into chungkukjang having a viscosity suitable for chungkukjang.

또한, 본 발명의 청국장의 제조방법에서, 상기 (b)단계의 발효에 이용되는 바실러스 서브틸리스 균주는 바이오제닉 아민 분해 활성이 높고, 글루탐산 생성이 높은 균주일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 바이오제닉 아민은 체내에서 중추신경의 신경 전달물질 또는 직간접적 혈관계 조절에 관여하여 심혈관계질환에도 영향을 미치는 물질로 아미노산의 탈탄산 작용, 아미노기 전이작용 등의 화학적 작용에 의해 주로 생성되는 질소화합물이다. 특히 콩을 주원료로 하여 발효시키는 장류의 경우 바이오제닉 아민의 위험에 쉽게 노출될 수 있다. 하지만 현재 장류 내 바이오제닉 아민 함량을 제한하고 있지는 않으나 이를 최소한으로 제한할 필요는 있다. 이에 본 발명에서 사용한 균주는 바이오제닉 아민을 생성하지 않으면서 바이오제닉 아민을 95% 이상 분해하는 균주이다. 또한 균주의 글루탐산 생성률에 대해 정해진 범위는 없으나, 발효 과정에서 균이 단백질과 작용하여 생성되는 분해산물로 글루탐산이 많이 생성될수록 청국장의 감칠맛이 더해진다.Also, in the method for producing a cheonggukjang of the present invention, the Bacillus subtilis strain used for the fermentation in the step (b) may be a strain having a high biogenic amine-decomposing activity and a high production of glutamic acid, but is not limited thereto. Biogenic amines are substances that affect central nervous system neurotransmitters or direct and indirect vasculature control in the body and also affect cardiovascular diseases. It is a nitrogen compound mainly produced by chemical action such as decarboxylation of amino acid and transamination of amino acid . In particular, soybean fermented with soybean as main raw material can easily be exposed to the risk of biogenic amines. At present, however, it does not limit the content of biogenic amines in the genus, but it is necessary to limit it to the minimum. Therefore, the strain used in the present invention is a strain that does not produce biorenic amines but decomposes more than 95% of biorenic amines. In addition, there is no definite range for the production rate of glutamic acid in the strain. However, as the glutamic acid is produced as a decomposition product produced by the bacteria reacting with the protein during the fermentation process, the flavor of Chungkookjang is increased.

또한, 상기 (b)단계의 접종은 바람직하게는 증자 전 대두 중량대비 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 0.05~0.15% 접종할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 증자 전 대두 중량대비 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 0.1% 접종할 수 있다. 상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)는 바이오제닉 아민 생성률이 낮고 글루탐산 생성이 높아 품질이 우수한 청국장으로 제조할 수 있었다. 또한, 상기와 같이 바실러스 서브틸리스를 적정량 접종하여 발효시킴으로써 콩의 단백질을 아미노산으로 분해시켜 청국장 특유의 구수한 맛과 향을 더욱 증진시킬 수 있었으나, 상기 범위를 초과하여 접종할 경우 과발효로 인해 청국장이 죽과 같은 형태로 변하는 문제점이 있으며, 상기 범위 미만으로 접종할 경우 발효가 잘 되지 않은 문제점이 있다. The inoculation of step (b) may be performed by inoculating 0.05-0.15% of Bacillus subtilis with respect to the weight of soybeans before the increase, more preferably, the amount of Bacillus subtilis Bacillus subtilis ) can be inoculated 0.1%. The Bacillus subtilis subtilis ) was able to produce chungkukjang with high quality because of low biogenic amine production rate and high glutamic acid production. In addition, by infecting the Bacillus subtilis in an appropriate amount and fermenting it, the protein of the soybean could be decomposed into amino acids to further enhance the original taste and flavor of Chungkukjang. However, in case of inoculation exceeding the above range, And there is a problem that fermentation is not performed well when inoculated under the above range.

또한, 본 발명의 청국장의 제조방법에서, 상기 (b)단계의 발효는 바람직하게는 35~45℃에서 68~76시간 동안 발효할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 38~42℃에서 72시간 동안 발효할 수 있다. 상기 조건으로 발효시켜 청국장으로 제조하는 것이 청국장의 생리활성물질, 영양성분 및 생균 등의 활성을 최대로 증진하면서, 발효과정에서 생성되는 불쾌취 발생 원인물질의 생성을 억제하여 기호도가 우수할 뿐만 아니라, 점질물이 많이 생성되고 저장 및 유통 과정 중 발생하는 갈변현상을 억제할 수 있었다. 그러나 상기 온도 및 시간 미만으로 발효시킬 경우, 청국장의 구수한 맛이 덜하는 문제점이 있고, 상기 온도 및 시간을 초과하여 발효시킬 경우 유해세균이 많이 번식하고 기호도가 떨어지는 문제점이 있다.Further, in the method of manufacturing a cheonggukjang of the present invention, the fermentation in the step (b) may preferably be performed at a temperature of 35 to 45 ° C for 68 to 76 hours, more preferably at 38 to 42 ° C for 72 hours can do. By fermenting under the above-mentioned conditions and producing chungkukjang, it is possible to maximize the activity of the physiologically active substance, nutritional component and live bacteria of Chungkukjang, while suppressing the generation of materials causing generation of unpleasant odors generated in the fermentation process, , And it was able to inhibit browning phenomenon during storage and distribution process. However, when the fermentation is carried out at less than the temperature and time, there is a problem in that the cheonggukjang tastes less salty, and when the fermentation exceeds the temperature and time, the harmful bacteria multiply and the preference is lowered.

본 발명의 청국장의 제조방법은, 보다 구체적으로는The method for producing a cheonggukjang of the present invention is more specifically

(a) 5~7시간 동안 수침한 대두의 물을 25~35분 동안 뺀 후, 110~130℃에서 15~25분 동안 증자하고 58~62℃로 냉각시키는 단계; 및(a) removing water from soybean soaked for 5 to 7 hours for 25 to 35 minutes, then heating at 110 to 130 ° C for 15 to 25 minutes and cooling to 58 to 62 ° C; And

(b) 상기 (a)단계의 냉각시킨 대두에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 접종한 후 38~42℃에서 68~76시간 동안 발효시키는 단계를 포함할 수 있으며,(b) inoculating Bacillus subtilis to the cooled soybeans in step (a), and then fermenting the mixture at 38 to 42 ° C for 68 to 76 hours,

더욱 구체적으로는More specifically,

(a) 6시간 동안 수침한 대두의 물을 30분 동안 뺀 후, 121℃에서 20분 동안 증자하고 60℃로 냉각시키는 단계; 및(a) subtracting the water of soybean soaked for 6 hours for 30 minutes, adding to 121 DEG C for 20 minutes and cooling to 60 DEG C; And

(b) 상기 (a)단계의 냉각시킨 대두에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 접종한 후 40℃에서 72시간 동안 발효시키는 단계를 포함할 수 있다.(b) inoculating Bacillus subtilis to the cooled soybeans of step (a), and then fermenting the mixture at 40 ° C for 72 hours.

본 발명은 또한, 상기 방법으로 제조된 청국장을 제공한다.The present invention also provides a cheonggukjang prepared by the above method.

본 발명은 또한, 상기 청국장을 가공한 가공식품을 제공한다. 상기 가공식품으로는 청국장환, 청국장찌개, 청국장분말 등을 예로 들 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The present invention also provides a processed food obtained by processing the above-mentioned chungkukjang. Examples of the processed food include, but are not limited to, Chungkukjang ring, Chungkukjang stew, and Chungkukjang powder.

본 발명은 또한, 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P)를 제공한다.The invention further biogenic amines (biogenic amine) Bacillus subtilis (Bacillus having a degrading activity and glutamic acid-producing ability subtilis ) SCKB1319 strain (KCCM 11684P).

상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P)는 전통 장류에서 분리하였으며, 바이오제닉 아민 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 균주이다. 상기 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주를 한국미생물보존센터(Korean Culture Center of Microorganisms, KCCM)에 2015년 04월 09일자로 기탁하였다(기탁번호: KCCM 11684P).The Bacillus subtilis subtilis ) SCKB1319 strain (KCCM 11684P) was isolated from a traditional soybean, and has a biogenic amine-degrading activity and glutamic acid producing ability. The Bacillus subtilis subtilis SCKB1319 strain was deposited at Korean Culture Center of Microorganisms (KCCM) on Apr. 09, 2015 (Accession No .: KCCM 11684P).

본 발명의 일 구현 예에 따른 균주에서, 상기 바이오제닉 아민은 티라민(tyramine), 퓨트레신(putrescine) 및 카다베린(cadaverine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the strain according to an embodiment of the present invention, the biogenic amine may be at least one selected from the group consisting of tyramine, putrescine and cadaverine, but is not limited thereto.

본 발명의 바이오제닉 아민(biogenic amine)은 미생물의 아미노산 디카복실라제 작용에 의해 아미노산으로부터 형성되며, 인체의 분해 한도를 넘어서는 바이오제닉 아민을 식품에서 섭취하는 경우에는 발진, 국소적 피부염증, 알레르기, 구토, 오심, 설사 등의 증상을 유발한다.
The biogenic amine of the present invention is formed from an amino acid by the action of an amino acid decarboxylase of a microorganism. When a biogenic amine is ingested from a food in excess of the decomposition limit of a human body, the biogenic amine may cause rash, local skin inflammation, Vomiting, nausea and diarrhea.

이하, 본 발명의 실시예를 들어 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail. However, the following examples are illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples.

1. 재료 및 제조방법1. Materials and manufacturing methods

1) 재료1) Materials

대두는 국내산(전북 순창군) 대두를 사용하였다. 균주는 (재)순창군발효미생물관리센터에서 분양받아서 사용하였다. 사용 균주는 전국에서 수거한 전통 장류에서 분리, 선별한 균주들 중에서 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해율이 높고, 글루탐산 생성이 높은 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis SCKB1319) 균주(기탁번호 KCCM 11684P)를 사용하였다.
Soybeans used domestic soybeans (Jeonbuk Sunchang Army). The strains were purchased from the Sungchang-gun fermented microorganism control center. Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis), which is high in biogenic amine degradation rate and high in glutamic acid production, subtilis SCKB1319) Strain (Accession No. KCCM 11684P) was used.

2) 청국장 제조2) Chungkukjang manufacturing

선별한 대두를 5회 세척하여 물에 6시간 침지한 후 30분 동안 탈수를 하여 121℃에서 20분 동안 증자하였다. 접종온도별 청국장의 품질특성 및 관능적 특성을 알아보기 위한 청국장 제조는 증자된 대두는 별도의 성형과정 없이 40℃, 50℃, 60℃로 식힌 다음 바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319) 균주(OD값 1.0)를 증자 전 대두 무게의 0.1% 접종하여 40℃에서 72시간 동안 발효시켰다.The selected soybeans were washed five times, immersed in water for 6 hours, dehydrated for 30 minutes, and then heated at 121 ° C for 20 minutes. Soybean production to find out the quality characteristics and organoleptic properties of the specific temperature inoculated soybean is steamed soybean is cooled to a 40 ℃ without any molding process, 50 ℃, 60 ℃, and then Bacillus subtilis (B. subtilis SCKB1319) The strain (OD value: 1.0) was inoculated 0.1% of the soybeans before fermentation and fermented at 40 ° C for 72 hours.

또한, 발효온도별 청국장의 품질특성 및 관능적 특성을 알아보기 위한 청국장 제조는 증자한 대두를 60℃로 식힌 다음 바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319) 균주(OD값 1.0)를 증자 전 대두 무게의 0.1% 접종하여 30℃, 40℃, 50℃에서 각각 72시간 동안 발효시켰다.
In addition, the soybean production to find out the quality characteristics and organoleptic properties of the specific fermentation temperature soybean is cooled to increase the soybean to 60 ℃ and then Bacillus subtilis (B. subtilis SCKB1319) (OD value 1.0) was inoculated at 0.1% of the soybeans before fermentation and fermented at 30 ° C, 40 ° C and 50 ° C for 72 hours, respectively.

2. 실험방법2. Experimental Method

1) 균주 실험1) Strain experiment

(가) 바이오제닉 아민 분해 활성(A) Biogenic amine-decomposing activity

선발 균주의 바이오제닉 아민 분해 능력을 관찰하기 위해 HPLC를 수행하였다. 증기 멸균한 삶은 콩가루 0.3 g에 각 16 mg의 티라민(tyramine), 퓨트레신(putrescine), 카다베린(cadaverine)을 녹인 0.8 mL NB(nutrient broth) 배지를 첨가하고 선발된 균주의 배양액 0.2 mL를 접종하였다. 비교를 위해 균을 첨가하지 않은 대조군을 사용하였다. 37℃에서 48시간 배양 후 13,000 rpm에서 10분간 원심분리하여 얻은 배양 상등액 0.1 mL, 80 ㎕ 아세톤 용해 1% 댄실염화물, 50 ㎕ 포화 Na2CO3를 섞어 45℃에서 1시간 유도체화 시켰다. 유도체화한 시료 용액에 0.5 mL 에테르를 넣고 3분 후 분리된 상층액을 모아 50℃에서 배양하며 증발한 후 0.1 mL 아세토나이트릴에 녹였다. HPLC 분석으로 역상 칼럼은 C18(Capcellpak, 4.6 mm×150 mm, 5 ㎛), 이동상은 H2O에 녹인 0.1% 포름산(A)과 아세토나이트릴에 녹인 0.1% 포름산(B), 농도 경사는 0~10분, A:B=45:55; 11~15분, A:B=35:65; 16~25분, A:B=20:80; 26~30분, A:B=10:90, 30분 유속은 1 mL/min이었으며 10 ㎕ 시료를 주입하였다.
HPLC was performed to observe the ability of the selected strain to degrade the biogenic amine. Steam sterilized boiled rice flour was prepared by adding 0.8 mL of NB (nutrient broth) medium containing 16 mg of tyramine, putrescine and cadaverine to 0.3 g of soy flour, and 0.2 mL of the selected strain. Respectively. For comparison, a control group without addition of bacteria was used. In 37 ℃ 48 hours of incubation mix the culture supernatant 0.1 mL, 80 ㎕ acetone soluble 1% daensil chloride, 50 ㎕ saturated Na 2 CO 3 obtained by separating 10 minutes centrifugation at 13,000 rpm was screen 1 hours derivative in 45 ℃. To the derivatized sample solution, 0.5 mL of ether was added. After 3 minutes, the separated supernatant was collected, cultured at 50 ° C, evaporated, and dissolved in 0.1 mL of acetonitrile. In the HPLC analysis, 0.1% formic acid (A) dissolved in H 2 O and 0.1% formic acid (B) dissolved in acetonitrile were used as the reversed phase column and C18 (Capcellpak, 4.6 mm × 150 mm, ~ 10 minutes, A: B = 45: 55; 11-15 minutes, A: B = 35: 65; 16 to 25 minutes, A: B = 20: 80; 26 to 30 min, A: B = 10: 90, 30 min flow rate was 1 mL / min and 10 μl samples were injected.

(나) 글루탐산 생성능(B) Glutamic acid production ability

선별된 균주를 2% 콩가루 배지에서 47℃에서 48시간 배양 후 13,000 rpm에서 10분 동안 원심분리하여 균체를 제거하였다. 상등액 50 ㎕를 96 웰 플레이트에 분주한 뒤 글루탐산 분석 키트(Catalog #K629-100; 100 reactions; Store kit at -20℃)의 분석 버퍼 90 ㎕, 글루탐산 현상액 8 ㎕, 글루탐산 효소 믹스 2 ㎕를 상등액이 있는 웰에 분주하였다. 37℃에서 30분간 빛을 차단하며 배양한 뒤 450 nm 마이크로플레이트 리더로 흡광도 값을 측정하였다.
The selected strains were cultured in 2% soy flour medium at 47 ° C for 48 hours and then centrifuged at 13,000 rpm for 10 minutes to remove the cells. 50 μl of the supernatant was dispensed into a 96-well plate, and then 90 μl of an assay buffer of Glutamic Acid Assay Kit (Catalog # K629-100; 100 reactions; Store kit at -20 ° C), 8 μl of glutamic acid developer and 2 μl of glutamic acid enzyme mix, Lt; / RTI > wells. After incubation at 37 ° C for 30 min, the absorbance was measured with a 450 nm microplate reader.

2) 청국장 실험2) Chungkukjang experiment

(가) 수분측정(A) Moisture measurement

시료를 채취하여 믹서기로 마쇄한 후 적외선 수분측정기에서 수분을 측정하였다.
Samples were collected, blashed with a mixer, and water was measured by an infrared moisture meter.

(나) pH 및 적정 산도 측정 (B) Measurement of pH and titratable acidity

시료를 채취하여 믹서기로 마쇄한 후 무게 5 g을 취하고 증류수를 가하여 50 mL로 맞추고 이를 충분히 혼합한 후 pH 미터(Mettler Toledo Gmbh, Switzerland)를 이용하여 측정하였고, 적정 산도는 0.1N-NaOH를 가하여 pH 8.4가 될 때까지 적정하였다.The sample was taken out, ground with a blender, and weighed 5 g. Distilled water was added to make 50 mL. The mixture was thoroughly mixed and measured using a pH meter (Mettler Toledo Gmbh, Switzerland). The titratable acidity was determined by adding 0.1 N NaOH and titrated until the pH reached 8.4.

적정 산도(%) = (0.1N-NaOH 적정량 × 0.009(젖산) × F × 희석배수 × 100) / 시료량(g)
Titratable acidity (%) = (0.1 N-NaOH titration amount 占 0.009 (lactic acid) 占 F 占 dilution multiple 占 100) / sample amount (g)

(다) 프로테아제(protease) 활성 측정(C) Measurement of protease activity

시료 10 g을 취하고 증류수를 가하여 100 mL로 맞춘 후 30℃에서 150 rpm으로 1시간 동안 진탕 혼합하여 추출한 여과액을 조효소액으로 하여 효소액 0.5 mL, 맥바인(Mcllvaine) 완충액 1 mL, 2% 밀크 카제인(milk casein) 0.5 mL를 첨가한 후 항온수조에 38℃에서 1시간 중탕 반응시킨 후 0.4M TCA 3 mL를 첨가하여 38℃에서 20분간 중탕 반응시켰다. 이를 여과하여 얻은 여액 1 mL와 0.4M Na2CO3 5 mL, 페놀 시약(phenol reagent) 2배 희석한 액 1 mL를 반응시켜 38℃에서 30분간 반응시킨 후 660 nm에서 흡광도를 측정하였다.
Take 10 g of the sample, add 100 ml of distilled water, mix with shaking at 150 rpm for 1 hour at 30 ° C, and use the filtrate as the crude enzyme solution. Use 0.5 ml of the enzyme solution, 1 ml of Mcllvaine buffer, 2% (milk casein) was added, and the mixture was incubated at 38 ° C for 1 hour in a constant-temperature water bath. Then, 3 mL of 0.4M TCA was added thereto, followed by stirring at 38 ° C for 20 minutes. 1 mL of the resulting filtrate, 5 mL of 0.4 M Na 2 CO 3, and 1 mL of a 2-fold dilution of phenol reagent were reacted at 38 ° C for 30 minutes, and the absorbance was measured at 660 nm.

(라) 아미노태 질소(amino-type nitrogen) 측정(D) Amino-type nitrogen measurement

아미노태 질소는 Formol법으로 측정하였다. 시료 1 g을 비커에 취하고 증류수 50 mL를 가하고 240초 동안 진탕 혼합하여 충분히 용해한 다음 0.1N-NaOH 용액으로 적정하여 pH 8.4로 적정하였다. 여기에 중성 포르말린 20 mL를 가하고 20초 동안 진탕 혼합한 뒤 다시 0.1N-NaOH 용액으로 pH 8.4가 되도록 중화 적정하였다.Amino nitrogen was measured by the Formol method. 1 g of the sample was taken in a beaker, 50 mL of distilled water was added, and the mixture was thoroughly mixed by shaking for 240 seconds. The solution was then titrated with 0.1 N NaOH solution and titrated to pH 8.4. 20 mL of neutral formalin was added thereto, and the mixture was shaken for 20 seconds, and then neutralized with 0.1 N NaOH solution to pH 8.4.

아미노태 질소(㎎%) = (0.1N-NaOH 적정량 × 1.401 × F × 희석배수 × 100) / 시료량(g)
Amino nitrogen (mg%) = (0.1 N-NaOH titration amount 占 1.401 占 F 占 dilution multiple 占 100) / sample amount (g)

(마) 관능검사(E) Sensory evaluation

관능검사는 청국장을 마쇄하지 않은 상태에서 특성 평가하였고 10명의 패널에 의해 9점 척도법을 사용하여 평가하였다. 평가항목은 외관, 맛, 향, 점질물의 점도 등 4가지 특성에 대하여 평가하도록 하였다.
The sensory evaluation was carried out in the absence of chungkukjang and evaluated by a panel of nine using the 9 - point scale. The evaluation items were evaluated for four characteristics such as appearance, taste, aroma, and viscous viscosity.

실시예Example 1:  One: 바이오제닉Biogenic 아민 분석 결과 Amine analysis result

분리 균주의 바이오제닉 아민 분해율의 분석 결과를 표 1에 나타내었다. 본 실험에서는 티라민(tyramine), 퓨트레신(putrescine), 카다베린(cadaverine)의 총 3종의 바이오제닉 아민을 검사하였다. 그 결과, 바실러스 서브틸리스 SCKB1319 균주는 총 3종의 바이오제닉 아민 분해능을 지니고 있으며, 티라민, 퓨트레신 및 카다베린에 대해 각각 90% 이상의 분해능을 나타내어, 바이오제닉 아민을 효율적으로 제거할 수 있음을 확인할 수 있었다.The results of analysis of the biogenic amine degradation rate of the isolated strains are shown in Table 1. In this experiment, three types of biogenic amines were tested: tyramine, putrescine, and cadaverine. As a result, the Bacillus subtilis SCKB1319 strain has a total of three types of biogenic amine cleavage ability, and each cleavage ability is more than 90% for tyramine, putrescine and cadaverine, so that the biogenic amine can be efficiently removed .

바이오제닉 아민 분해율(%)Biogenic Amine Degradation Rate (%) 균주Strain 티라민Tyramine 퓨트레신Putrescine 카다베린Cadaverine 바실러스 서브틸리스 SCKB1319Bacillus subtilis SCKB1319 95%95% 91%91% 95%95%

실시예Example 2: 글루탐산  2: Glutamic acid 생성능Generation

분리 균주인 바실러스 서브틸리스 SCKB1319 균주의 글루탐산 생성능은 하기 표 2와 같다. 2%의 콩배지 1 mL 당 글루탐산의 함량을 환산한 결과 5.954 nmol로 측정되었다.The glutamic acid-producing ability of the isolate strain Bacillus subtilis SCKB1319 is shown in Table 2 below. The content of glutamic acid per 1 mL of 2% soybean medium was converted to 5.954 nmol.

글루탐산 생성능Glutamic acid production ability 균주Strain 글루탐산(nmol/2% 콩배지 1 mL)Glutamic acid (nmol / 2% soybean broth 1 mL) 바실러스 서브틸리스 SCKB1319Bacillus subtilis SCKB1319 5.9545.954

실시예Example 3: 접종온도별 청국장의 품질특성 3: Quality Characteristics of Cheonggukjang by Inoculation Temperature

청국장의 제조를 위해 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis SCKB1319) 균주의 접종온도를 달리하여 차이가 있는지 품질특성을 알아보았다. 기본적으로 청국장균 포자의 발아 최적온도는 40℃ 전후이며 50℃에서는 지연되고 55℃ 이상에서나 10℃ 이하에서는 24시간 내에 발아되지 못한다고 하나, 실지 작업에서는 청국장균은 증두를 솥에서 퍼낸 직후에 접종하게 되는데 그 이유는 청국장균은 포자는 내열성이 높고, 또한 포자에 단시간 고온 충격을 주면 발아촉진효과가 있기 때문이다. 따라서 바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319) 균주의 접종온도를 40℃, 50℃, 60℃로 변화를 주어 품질특성을 비교하였다(도 1).For the production of chungkukjang, Bacillus subtilis subtilis SCKB1319) strains were examined to determine whether there was any difference in quality characteristics. Basically, the optimum temperature for sprouting of CJC spores is around 40 ℃ and it is delayed at 50 ℃. However, it does not germinate within 24 hours at more than 55 ℃ or below 10 ℃. In actual work, however, CJK is inoculated immediately after spreading the flesh from the pot The reason for this is that the spore is highly heat-resistant, and if it is given a high-temperature impact for a short period of time, the sprouting effect is promoted. Thus, Bacillus subtilis (B. subtilis SCKB1319) The inoculation temperature of the strain was changed to 40 캜, 50 캜 and 60 캜 to compare the quality characteristics (Fig. 1).

수분함량 변화를 측정한 결과는 도 2와 같다. 발효 초기에는 비슷하게 유지되다가 발효 48시간 이후로 온도별로 차이가 나기 시작하여 발효 48시간에 유의적으로 감소하는 경향을 보였다. 이는 발효 중 수분 증발로 인한 건조가 이루어졌기 때문이라고 생각되며, 전반적으로 40℃, 50℃의 접종온도 조건에서 수분 감소량이 빠르게 진행되었다.The measurement results of moisture content changes are shown in Fig. At the early stage of fermentation, the temperature was kept similar, but after 48 hours of fermentation, the temperature of the fermentation decreased. It was thought that the drying was caused by evaporation of water during fermentation, and the decrease of moisture was rapidly progressed at the inoculation temperatures of 40 ° C and 50 ° C as a whole.

접종온도에 따른 pH의 변화를 관찰한 결과, 발효 24시간에는 중성 영역을 나타내다가 발효시간이 경과함에 따라 알칼리 영역으로 전환됨을 알 수 있었다(도 3). 청국장의 pH가 알칼리로 전환되는 것은 단백질 분해에 기인한 결과인 것으로 판단되며, 50℃로 접종한 경우 pH 6.5~7.7, 60℃로 접종한 경우 6.4~7.7의 범위를 나타내어 발효에 따른 큰 차이를 보이지 않았지만, 40℃로 접종한 경우 pH 6.3~7.5로 약간 낮은 결과를 나타내었다.As a result of observing the pH change according to the inoculation temperature, it was found that a neutral region appeared at 24 hours of fermentation, and was converted into an alkaline region as the fermentation time elapsed (FIG. 3). The conversion of the pH of the chungkukjang into alkaline was considered to be the result of protein degradation. The pH was in the range of 6.5 ~ 7.7 when inoculated at 50 ℃ and 6.4 ~ 7.7 when inoculated at 60 ℃. In the case of inoculation at 40 ° C, the pH was slightly lowered to 6.3 ~ 7.5.

또한, 적정 산도는 도 4와 같이 발효 24시간에 급격히 증가하다가 48시간에 감소하였고, 이후로 큰 변화는 없었다. 40℃로 접종한 경우 0.6~1.2%로 산도 함량이 가장 높았으며, 60℃로 접종한 경우 0.6~1.1%, 50℃로 접종한 경우 0.6~0.8%의 결과를 나타내었다.As shown in Fig. 4, the titratable acidity rapidly increased at 24 hours after fermentation and then decreased at 48 hours. Thereafter, no significant change occurred. In the case of inoculation at 40 ℃, the highest acidity was obtained at 0.6 ~ 1.2%, 0.6 ~ 1.1% at 60 ℃ and 0.6 ~ 0.8% at 50 ℃.

콩 발효식품의 감칠맛의 척도인 아미노태 질소는 콩 단백질이 분해되어 생성되는 물질로서, 장류 발효의 품질 지표로서 중요하다. 우리나라의 식품공전에 의하면 청국장의 아미노태 질소 함량은 280 mg% 이상으로 규정하고 있다. 모든 실험조건에서 아미노태 질소 함량은 발효시간 경과에 비례하여 증가하였다(도 5). 60℃로 접종한 경우 발효 48시간 만에 473.7 mg%을 나타내었고, 72시간에 582.4 mg%로 다른 접종온도에 비해 가장 큰 함량을 나타내었다.
Amino nitrogen, which is a measure of the richness of soybean fermented food, is a substance produced by degradation of soybean protein, and is important as a quality index of fermentation of soy sauce. According to the Food Code of Korea, the amino nitrogen content of chungkukjang is defined as 280 mg% or more. Amino nitrogen content in all experimental conditions increased in proportion to the fermentation time (Fig. 5). In the case of inoculation at 60 ℃, 473.7 mg% was shown at 48 hours after fermentation and 582.4 mg% at 72 hours.

실시예Example 4: 접종온도별 청국장의 관능검사 4: Sensory evaluation of Cheonggukjang by inoculation temperature

바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319) 균주를 접종온도별로 제조한 청국장의 관능검사 결과는 표 3과 같다. 접종온도 60℃에서 외관, 맛, 향, 점질물의 점도에서 유의적으로 높은 점수를 나타내었다.Bacillus subtilis (B. subtilis The results of the sensory evaluation of Chungkookjang prepared by the inoculation temperature of SCKB1319 strain are shown in Table 3. Taste, flavor, and viscosity of the viscous substance at the inoculation temperature of 60 ℃.

접종온도별 청국장의 관능검사Sensory evaluation of Cheonggukjang by inoculation temperature 접종온도(℃)Inoculation temperature (℃) 관능적 특성Sensual characteristic 외관Exterior flavor incense 점질물의 점도Viscosity of viscous substance 4040 5.25.2 4.34.3 5.15.1 5.15.1 5050 4.54.5 5.35.3 4.94.9 2.32.3 6060 6.36.3 6.96.9 5.25.2 6.86.8

실시예 3 및 4의 결과로부터 청국장의 품질과 가장 관련이 많은 아미노태 질소 함량, 관능검사 등을 고려해 볼 때 바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319) 접종 시 적정 접종온도는 60℃인 것으로 판단되었다.
Examples 3 and 4, when seen from the results in consideration of quality and the most relevant amino nitrogen of Soybean, sensory evaluation, such as Bacillus subtilis (B. subtilis SCKB1319) The optimal inoculation temperature was determined to be 60 ° C at the time of inoculation.

실시예Example 5: 발효온도별 청국장의 품질특성 5: Quality Characteristics of Cheonggukjang by Fermentation Temperature

바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319)를 이용한 청국장 제조 시 적정 발효온도를 설정하고자 증자한 대두에 바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319) 균주를 적정 접종온도인 60℃로 접종한 후 각 온도별(30℃, 40℃, 50℃)로 72시간 발효시킨 후 청국장의 품질특성을 측정하였다(도 6).In order to establish the optimum fermentation temperature for the production of chungkukjang using B. subtilis SCKB1319, B. subtilis SCKB1319) strain was inoculated at a suitable inoculation temperature of 60 ° C and then fermented for 72 hours at each temperature (30 ° C, 40 ° C, and 50 ° C), and then the quality characteristics of Chungkukjang were measured (FIG.

발효온도별 청국장의 수분함량 결과는 도 7과 같다. 발효기간이 경과함에 따라 감소하는 경향을 보였으며, 30℃로 발효한 경우 수분함량이 완만하게 감소하였으나 40℃와 50℃로 발효한 경우 발효 72시간에 약 33%로 급격히 감소하였다. 이는 청국장 표면이 건조됨에 따라 생기는 현상으로, 30℃에 비해 40℃와 50℃로 발효할 때 온도 상승으로 청국장 표면이 빠르게 건조되어 나타난 것으로 판단된다.The results of moisture content of Chungkukjang by fermentation temperature are shown in Fig. The fermentation at 30 ℃ showed a gradual decrease in water content but the fermentation at 40 ℃ and 50 ℃ rapidly decreased to about 33% at 72 hours of fermentation. This is due to the drying of the surface of Chongkukjang. It is considered that the surface of Chongkukjang is rapidly dried due to temperature rise when fermenting at 40 ℃ and 50 ℃ compared to 30 ℃.

바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319)를 이용하여 발효온도 별 제조한 청국장의 pH는 증가하는 경향을 보였다(도 8). 30℃에서 6.5~7.1 수준이었고, 40℃와 50℃로 발효한 경우 각각 pH 6.5~7.3, pH 6.5~7.6으로 50℃에서 더 높은 경향을 보였다.The pH of Chungkookjang prepared according to fermentation temperature tended to increase with Bacillus subtilis SCKB1319 (Fig. 8). The fermentation at 40 ℃ and 50 ℃ showed higher pH at 6.5 ℃ and pH 6.5 ~ 7.6 at 50 ℃, respectively.

청국장의 발효 중 적정 산도의 변화를 측정한 결과, 도 9와 같이 50℃로 발효한 청국장은 0.5~0.6%로 발효시간이 경과함에 따라 일정한 산도 함량을 나타내는 반면, 40℃로 발효한 경우 0.6~1.1%로 발효 24시간까지 급격히 증가하다가 이후 일정한 함량을 보였으며, 30℃는 24시간까지는 약간 감소하다가 발효 72시간에 1.3%로 급격히 증가하였다.As a result of measuring the change of titratable acidity during the fermentation of Chongkukjang, the Chongkukjang fermented at 50 ° C showed 0.5 to 0.6% as shown in FIG. 9, and showed a constant acidity as the fermentation time elapsed. When fermented at 40 ° C, The fermentation time of fermentation increased rapidly to 24 hours. The content of fermentation increased to 1.3% at 72 hours after fermentation.

프로테아제(protease)는 콩 단백질을 분해하여 감칠맛 성분인 아미노산과 폴리펩타이드(polypeptide) 등을 생성하므로 청국장의 맛을 결정짓는 중요한 인자 중의 하나이다. 발효온도에 따른 청국장의 프로테아제(protease) 활성 변화는 도 10과 같다. 발효시간이 지날수록 증가하는 경향을 보였으며, 40℃에서 배양했을 경우 72시간에 158.8 unit/g으로 가장 높은 활성을 나타내었고, 30℃에서는 136.9 unit/g, 50℃에서 배양했을 때는 95 unit/g의 활성을 나타내었다.Protease is one of the important factors determining the taste of Chungkukjang because it decomposes soy protein and produces amino acid and polypeptide which are rich in flavor. The change in protease activity of Chungkukjang according to the fermentation temperature is shown in Fig. When incubated at 40 ℃, the highest activity was 158.8 unit / g at 72 hours, 136.9 unit / g at 30 ℃, and 95 unit / g when cultured at 50 ℃. g. < / RTI >

콩 발효식품의 구수한 맛의 척도인 아미노태 질소는 청국장의 발효숙성 중 미생물이 생산하는 프로테아제 활성에 의해 생성된 아미노산에 기인한다. 아미노태 질소 함량의 측정 결과 발효온도가 40℃일 때 72시간에서 가장 높은 435 mg%였고, 30℃는 402 mg%로 약간 낮은 함량을 보였으며 50℃는 330 mg%로 40℃에 비해 약 20%의 낮은 함량을 보였다(도 11). 이러한 결과는 균의 증식의 부진으로 미생물이 분비하는 프로테아제 활성이 낮아서 원료 콩 단백질의 분해가 용이하게 일어나지 않아 나타난 현상으로 여겨진다.
The amino acid nitrogen, which is a measure of the taste of soybean fermented food, is caused by the amino acid produced by the protease activity produced by microorganisms during the fermentation of fermented soy sauce. The content of amino nitrogen was 435 mg% at the fermentation temperature of 40 ℃, and the content was slightly lower at 40 ℃ than the fermentation temperature of 30 ℃. % (FIG. 11). These results suggest that the protease activity secreted by the microorganism is low due to the insufficient growth of the microorganism and the decomposition of the soybean protein is not easily occurred.

실시예Example 6: 발효온도별 청국장의 품질특성  6: Quality Characteristics of Cheonggukjang by Fermentation Temperature

바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319) 균주를 이용하여 발효온도를 달리하여 제조한 청국장의 관능검사 결과는 표 4와 같다. 외관이나 점질물의 점도는 발효온도가 낮을수록 높은 점수를 보였고, 맛이나 향은 40℃에서 가장 높은 점수를 나타내었다.Bacillus subtilis (B. subtilis The results of the sensory evaluation of Chungkukjang prepared by using the SCKB1319 strain at different fermentation temperatures are shown in Table 4. Viscosity of viscous and viscous materials showed higher score with lower fermentation temperature, and taste and flavor showed the highest score at 40 ℃.

발효온도별 청국장의 관능검사Sensory Evaluation of Cheonggukjang by Fermentation Temperature 발효온도(℃)Fermentation temperature (℃) 관능적 특성Sensual characteristic 외관Exterior flavor incense 점질물의 점도Viscosity of viscous substance 3030 5.95.9 3.93.9 2.72.7 6.96.9 4040 5.15.1 6.56.5 3.93.9 5.85.8 5050 2.82.8 6.16.1 3.23.2 2.62.6

상기 실시예 5 및 6의 청국장의 품질 특성 및 관능검사 결과에 의하여 바실러스 서브틸리스(B. subtilis SCKB1319) 균주를 이용하여 60℃로 접종하여 청국장을 제조할 경우 40℃에서 발효하는 것이 적정한 것으로 사료된다.
According to the quality characteristics and sensory test results of the cheonggukjang in Examples 5 and 6, the content of B. subtilis SCKB1319) strain at 60 ° C, it is considered appropriate to ferment at 40 ° C.

한국미생물보존센터(국외)Korea Microorganism Conservation Center (overseas) KCCM11684PKCCM11684P 2015040920150409

Claims (7)

(a) 수침한 대두의 물을 뺀 후, 증자하고 55~65℃로 냉각시키는 단계; 및
(b) 상기 (a)단계의 냉각시킨 대두에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 접종한 후 35~45℃에서 발효시키는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 청국장의 제조방법.
(a) subtracting the water of the soaked soybeans, and increasing the temperature to 55 to 65 캜; And
(b) inoculating Bacillus subtilis to the cooled soybeans of step (a), and fermenting the fermented soybeans at 35 to 45 ° C.
제1항에 있어서,
(a) 5~7시간 동안 수침한 대두의 물을 25~35분 동안 뺀 후, 110~130℃에서 15~25분 동안 증자하고 58~62℃로 냉각시키는 단계; 및
(b) 상기 (a)단계의 냉각시킨 대두에 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis)를 접종한 후 38~42℃에서 68~76시간 동안 발효시키는 단계를 포함하여 제조하는 것을 특징으로 하는 청국장의 제조방법.
The method according to claim 1,
(a) removing water from soybean soaked for 5 to 7 hours for 25 to 35 minutes, then heating at 110 to 130 ° C for 15 to 25 minutes and cooling to 58 to 62 ° C; And
(b) inoculating Bacillus subtilis to the cooled soybeans in step (a), and fermenting the fermented soybeans at 38 to 42 ° C for 68 to 76 hours. Way.
제2항에 있어서, 상기 바실러스 서브틸리스는 바이오제닉 아민 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 균주(기탁번호 KCCM 11684P)인 것을 특징으로 하는 청국장의 제조방법.[Claim 3] The method according to claim 2, wherein the Bacillus subtilis is a strain having a biogenic amine-degrading activity and glutamic acid producing ability (Deposit No. KCCM 11684P). 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항의 방법으로 제조된 청국장.A cheonggukjang prepared by the method of any one of claims 1 to 3. 제4항의 청국장을 가공한 가공식품.Processed food processed in accordance with paragraph 4. 바이오제닉 아민(biogenic amine) 분해 활성 및 글루탐산 생산능을 갖는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주(KCCM 11684P).Biogenic amines (biogenic amine) having a degrading activity of Bacillus subtilis and glutamic acid-producing ability (Bacillus subtilis strain SCKB1319 (KCCM 11684P). 제6항에 있어서, 상기 바이오제닉 아민은 티라민(tyramine), 퓨트레신(putrescine) 및 카다베린(cadaverine)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상인 것을 특징으로 하는 바실러스 서브틸리스(Bacillus subtilis) SCKB1319 균주.The method according to claim 6, wherein the biogenic amine is at least one selected from the group consisting of tyramine, putrescine, and cadaverine. Bacillus subtilis ( Bacillus subtilis) subtilis ) SCKB1319 strain.
KR1020150059370A 2014-04-28 2015-04-28 Method for producing Chunggukjang with increased quality and preference and Chunggukjang produced by the same method KR101773335B1 (en)

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