KR20150117469A - 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉독을 이용한 항산화, 피부 미백 및 콜라겐 생성 촉진용 조성물 - Google Patents

바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉독을 이용한 항산화, 피부 미백 및 콜라겐 생성 촉진용 조성물 Download PDF

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제주대학교 산학협력단
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Abstract

본 발명은 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복을 이용한 항산화, 피부 미백 및 콜라겐 생성 촉진용 조성물을 개시한다. 구체적으로 제주도에서 채수·탈수하여 얻은 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복의 혼합물을 이용하여 DPPH 법에 의해 항산화 활성을 측정함과 함께, 멜라노마사이트인 B16F10에 처리하여 멜라닌 생성 억제 활성과 인간 유래의 섬유아세포주(CCD-986SK 세포)를 이용해 콜라겐 생성 촉진 활성을 살펴 봤을 때, 이들 활성에 있어서 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복 각각의 활성에 비하여 더 뛰어난 활성을 갖는 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복의 혼합물을 이용한 항산화, 피부 미백 및 콜라겐 생성 촉진용 조성물을 개시한다.

Description

바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복을 이용한 항산화, 피부 미백 및 콜라겐 생성 촉진용 조성물{Antioxidant Composition, Skin Whitening Composition and Compositions for Promotion of Collagen synthesis Using Bee Venom and Mineral Composition Containing Vanadium}
본 발명은 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복을 이용한 항산화, 피부 미백 및 콜라겐 생성 촉진용 조성물에 관한 것이다.
피부는 시간이 지남에 따라 호르몬 분비가 감소하고 면역세포의 기능이 저하되어 생기는 내적 요인와 자외선, 산화적 스트레스 등의 외적 요인에 의해 탄력이 감소하고 기미, 주근께 등이 증가하게 된다.
멜라닌은 자외선을 차단하여 진피 이하의 피부 기관을 보호해주는 동시에, 피부 생체 내에 생겨난 자유라디칼 등에 의한 피부 내 단백질과 유전자들의 손상을 보호해 주는 유용한 역할을 하지만, 멜라닌이 필요 이상으로 많이 생기게 되면 기미나 주근깨 등과 같은 과색소침착증을 유발한다.
멜라닌은 티로신(tyrosine)이 산화되어 도파(DOPA, 3,4-dihydroxyphenylalanine)로, 이어 도파옥시다제(dopaoxidase)의 작용으로 도파가 다시 산화되어 도파퀴논(dopaquinone)으로 바뀐 후, 티로시나제 관련 단백질인 TRP-1(5,6-dihydroxy indole-2-carboxylic acid oxidase)과 TRP-2(dopachrome tautomerase)의 작용에 의하여 생성된다.
멜라닌 생합성에 관여하는 인자로는 tyrosinase, dopachrome conversion factor, prostaglandin(PG), interferon (IFN), melanocyte stimulating hormone(MSH), vitamin D3, histamine 등이 있다(Cancer Res, 42, 1994-2002, 1082)
피부는 크게 표피와 진피로 구성되어 있다. 표피는 주로 케라티노사이트(keratinocytes), 멜라닌 세포(melanocytes), 랑게르한스 세포(Langerhans cells)로 구성되는 얇은 보호층이고, 진피는 표피 아래에 있는 결합조직으로 대부분 세포외 간질(extracellular matrix)이라 불리는 거대 분자의 망상 구조로 구성되어 있다. 이 세포외 간질은 진피 내의 섬유아세포에서 만들어지며, 콜라겐, 엘라스틴 등의 섬유상 단백질과 히알루론산 등의 산성 뮤코다당체라 불리는 다당류로 이루어져 있다. 이러한 진피 조직의 약 70%를 차지하는 주요 구성요소가 콜라겐이며 피부 진피층에서 피부의 기계적 견고성, 조직의 결합력, 세포와의 부착 및 세포 분화 등에 관여한다(Journal of the American Academy of Dermatology, 2001, 17(4):610-613).
따라서 진피 조직의 콜라겐이 분해되거나 생성이 저하될 경우 피부 주름이 발생하게 되는데, 이러한 콜라겐의 손상과 생성 저하의 원인은 내인성과 외인성으로 구분된다. 내인성은 나이가 들면서 점차 나타나는 자연 노화에 따른 것이며, 외인성은 외부 환경 요인에 따른 것으로 특히 지속적인 자외선 노출을 들 수 있다. 자외선에 지속적으로 노출되게 되면 피부 주름뿐 아니라 피부 거칠어짐, 색소 침착 등도 발생한다.
본 발명은 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복을 혼합하여 사용할 경우 항산화 활성, 미백 활성, 콜라겐 생성 촉진 활성이 더 뛰어날 수 있음을 확인함으로써 완성된 것이다.
본 발명의 목적은 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복을 이용한 피부 미백용 조성물을 제공하는 데 있다.
본 발명의 기타의 목적이나 구체적인 목적은 이하에서 제공될 것이다.
본 발명자들은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 제주도에서 채수·탈수하여 얻은 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복의 혼합물을 이용하여 DPPH 법에 의해 항산화 활성을 측정함과 함께, 멜라노마사이트인 B16F10에 처리하여 멜라닌 생성 억제 활성과 인간 유래의 섬유아세포주(CCD-986SK 세포)를 이용해 콜라겐 생성 촉진 활성을 살펴 봤을 때, 이들 활성에 있어서 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복 각각의 활성에 비하여 이들 혼합물의 활성이 더 뛰어남을 확인하였다.
본 발명은 이러한 실험 결과에 기초하여 제공되는 것으로 일 측면에 있어서는 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물로 파악될 수 있고, 다른 측면에 있어서는 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물(약제학적 조성물로 이용될 경우는 과색소 침착증 치료 또는 예방용 조성물)로 파악할 수 있으며, 또 다른 측면에 있어서는 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 생성 촉진 조성물로 파악할 수 있다.
본 발명에서, 상기 바나듐 함유 미네랄 조성물은 아래의 [표 1]을 참조할 때, 바나듐을 함유하면서, 또한 나트륨 이온, 칼륨 이온, 마그네슘 이온 및 칼슘 이온을 함유하는 조성물을 의미한다.
구체적으로는 아래의 (1) 내지 (10)에서 확인되는 지하수 관정에서 채수하고 여과시켜 얻어진 지하수 또는 그것의 농축된 형태의 조성물을 의미한다.
(1) 제주특별자치도 서귀포시 안덕면 사계리 2175-1 번지 표고 5m 굴착 심도 60m;
(2) 제주특별자치도 제주시 한림읍 옹포리 396 번지 표고 5m, 굴착 심도 70m;
(3) 제주특별자치도 제주시 한림읍 옹포리 396 번지 표고 4m, 굴착 심도 70m;
(4) 제주특별자치도 제주시 애월읍 상귀리 344 번지 표고 37m, 굴착 심도 90m;
(5) 제주특별자치도 서귀포시 색달동 640-1 번지 표고 295m, 굴착 심도 301m;
(6) 제주특별자치도 서귀포시 색달동 산 52 번지 표고 416m, 굴착 심도 400m;
(7) 제주특별자치도 제주시 조천읍 와흘리 2863 번지 표고 275m, 굴착 심도 315m;
(8) 제주특별자치도 서귀포시 안덕면 사계리 2172-1 번지 표고 6.0m, 굴착 심도 67m;
(9) 제주특별자치도 제주시 한림읍 상명리 1257 번지 표고 143m, 굴착 심도 170m; 및
(10) 제주특별자치도 서귀포시 서홍동 2422-9 번지 표고 271m, 굴착 심도 296m
상기에서 "표고"는 해수면을 기준으로 한 지대의 높이를 의미하며 "굴착 심도"는 지표면을 기준으로 한 굴착 깊이를 의미한다.
또 본 발명에서, "유효성분"이란 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.
또 본 발명에서 "지하수의 농축된 형태의 조성물"이란 상기 지하수 관정에서 얻어진 지하수를 여과시켜 불순물을 제거한 후 탈수·농축시켜 얻어지는 임의의 조성물을 의미한다. 완전히 탈수되었을 때는 분말 형태의 조성물이 얻어질 것이며, 일부 탈수되었을 때 농축된 액상의 조성물이 얻어질 것이다. 이들 조성물은 그것의 탈수 정도를 불문하고 아래의 [표 1]에서 확인되는 미네랄 성분들의 조성물이 될 것이다.
또 본 발명에서, "봉독"이란 신경통, 류머티즘, 요통 등에 효과가 좋아 민간요법으로 이용되는, 꿀벌의 산란관에서 나오는 독액(bee venom)을 의미한다. 이러한 봉독은 당해 기술분야에서 공지된 다양한 추출법을 통해 얻어지는 추출물 형태로 이용될 수도 있다. 여기서 추출물이란 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올 등의 탄소수 1 내지 4의 저급 알콜, 메틸렌클로라이드, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 조추출물과 그 조추출물을 상기 열거한 용매 중 하나 이상으로 분획하여 얻어진 분획물, 또한 이산화탄소, 펜탄 등의 초임계 유체를 사용하여 얻어진 추출물을 포함하는 의미다. 추출 방법으로서는 유효물질의 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방식을 적용될 수 있다. 분획된 추출물의 경우 상기 조추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 극성이 다른 용매와 혼합·정치시켜 얻은 분획물, 상기 조추출물을 상기 열거된 용매로 순차적으로 분획하여 얻어진 분획물을 포함한다. 또한 상기 추출물의 의미에는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등의 방식으로 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고형상의 추출물이 포함된다.
또 본 발명에서, "항산화"는 본 발명의 유효성분이 활성 산소와 반응함으로써 활성 산소에 의한 생체 손상의 억제를 의미한다.
또 본 발명에서, "피부 미백"은 멜라닌의 생성이 저해됨에 따른 결과로서 이해되는데, 구체적으로는 멜라닌의 생성이 저해됨에 따라 멜라닌의 증가에서 비롯되는 증상, 예컨대 기미, 주근깨 개선, 피부 노화 등의 개선으로서 이해될 수 있다.
또 본 발명에서, "콜라겐 생성 촉진용"의 의미는 전술한 바와 같이 콜라겐의 양이 피부 주름 및 피부 보습과 밀접한 상관성을 가지므로, "피부 주름 개선용" 및/또는 "피부 보습용"의 의미를 포함하는 의미이다.
한편, 본 발명의 조성물에 있어서, 그 유효성분은 항산화 활성, 피부 미백 활성, 콜라겐 생성 촉진 활성을 나타낼 수 있는 한 용도, 제형, 배합 목적 등에 따라 임의의 양(유효량)으로 포함할 수 있는데, 통상적인 유효량은 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.001 중량 % 내지 99.990 중량 % 범위 내에서 결정될 것이다. 여기서 "유효량"이란 피부 미백 효과, 항산화 효과, 콜라겐 생성 촉진 효과를 유도할 수 있는 유효성분의 양을 말한다. 이러한 유효량은 당업자의 통상의 능력 범위 내에서 실험적으로 결정될 수 있다.
본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 화장품 조성물로서 파악될 수 있다.
본 발명의 조성물이 화장품 조성물로서 파악될 경우, 그 화장품 조성물은 다양한 형태로 제조될 수 있는데, 예컨대, 에멀젼, 로션, 크림(수중유적형, 유중수적형, 다중상), 용액, 현탁액(무수 및 수계), 무수 생성물(오일 및 글리콜계), 젤, 마스크, 스프레이, 팩 또는 분말 등의 형태로 제조될 수 있다.
본 발명의 화장품 조성물은 그 유효성분 이외에 화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체를 포함할 수 있다.
여기서 "화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체"란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성, 불안정성 또는 자극성이 없는 것을 말한다.
상기 담체는 본 발명의 화장품 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1 중량 % 내지 약 99.99 중량 %, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 5 중량% 내지 약 99 중량 %로 포함될 수 있다.
그러나 상기 비율은 본 발명의 화장품의 제조되는 전술한 바의 형태에 따라 또 그것의 구체적인 적용 부위(얼굴이나 손)나 그것의 바람직한 적용량 등에 따라 달라지는 것이기 때문에, 상기 비율은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 안 된다.
한편, 상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 차단제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다.
상기 담체로서 사용될 수 있는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 차단제, 발색제, 향료 로 사용될 수 있는 화합물/조성물 등은 이미 당업계에 공지되어 있기 때문에 당업자라면 적절한 해당 물질/조성물을 선택하여 사용할 수 있다.
한편, 본 발명의 조성물은 다른 구체적인 양태에 있어서 약제학적 조성물로 파악될 수 있다.
본 발명의 약제학적 조성물은 임상 투여 시에 경구적, 비경구적으로 투여될 수 있지만, 통상적으로 외용제 제형으로 피부에 국소적으로 직접 투여될 것이다.
또 본 발명의 약제학적 조성물은 제제화할 경우에는 통상적으로 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 제제화할 수 있다.
경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 본 발명의 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 탄산칼슘, 수크로스, 락토오스 및 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등을 들 수 있는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 국소형 제형 예컨대 크림, 로션, 연고(반고형의 외용약), 마이크로로에멀젼, 젤, 페이스트, 경피제제(TTS)(예컨대 패치제, 붕대 등) 등이 포함된다.
본 발명의 약제학적 조성물은 1일 투여량은 통상 0.001 ~ 150 mg/kg 체중 범위이고, 1회 또는 수회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 본 발명의 약제학적 조성물의 실제 투여량은 투여 경로, 환자의 연령, 성별, 체중, 및 환자의 중증도 등의 여러 관련 인자에 비추어 결정되어지는 것이므로 상기 투여량은 어떠한 측면으로든 본 발명의 범위를 제한하는 것으로 이해되어서는 아니 된다.
본 발명의 조성물은 또 다른 구체적인 양태에 있어 비누 조성물로서 파악될 수 있다.
본 발명의 조성물이 비누 조성물로서 파악될 경우에, 본 발명의 비누 조성물은 비누 기재에 그 유효성분을 포함하여 제조될 수 있으며, 첨가제로서 피부 보습제, 유화제, 경수연화제 등을 포함하여 제조될 수 있다.
상기 비누 기재로서는 야자유, 팜유, 대두유, 파마자유, 올리브유, 팜핵류 등의 식물유지 또는 우지, 돈지, 양지, 어유 등의 동물유지 등이 사용될 수 있고, 상기 피부 보습제로서는 글리세린, 에리트리톨, 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 펜틸렌글리콜, 헥실글리콜, 이소프로필미리스테이트, 실리콘 유도체, 알로에베라, 솔비톨 등이 사용될 수 있으며, 상기 유화제로서는 천연오일, 왁스 지방알콜, 탄화수소류, 천연식물 추출물 등이 사용될 수 있고, 상기 경수연화제로서는 테트라소듐 이디티에이 등이 사용될 수 수 있다.
본 발명의 비누 조성물은 또한 첨가제로서 항균제, 분산제, 거품억제제, 용매, 물때 방지제, 부식 방지제, 향료, 색소, 금속 이온봉쇄제, 산화방지제, 방부제 등을 추가적으로 포함할 수 있다.
본 발명의 비누 조성물에 있어서, 비누 기재나 첨가제는 당업계에 일반적으로 사용되고 있는 함량으로 포함될 수 있는데, 비누 기재는 일반적으로 비누 조성물의 전체의 함량을 기준으로 하였을 때 99.9 중량 % 내지 50 중량 %로 첨가될 수 있으며, 첨가제는 1 중량 % 내지 20 중량 %로 첨가될 수 있다.
본 발명의 조성물은 구체적인 양태에 있어서, 식품 조성물로서 파악할 수 있다.
본 발명의 식품 조성물은 건강 보조식품, 특수 영양 보충용 식품, 기능성 음료 등으로 제조될 수 있다.
본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 감미제, 풍미제, 생리활성 성분, 미네랄 등이 포함될 수 있다.
감미제는 식품이 적당한 단맛을 나게 하는 양으로 사용될 수 있으며, 천연의 것이거나 합성된 것일 수 있다. 바람직하게는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다.
풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 바람직하게는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다.
생리 활성 물질로서는 카테킨, 에피카테킨, 갈로카테킨, 에피갈로카테킨 등의 카테킨류나, 레티놀, 아스코르브산, 토코페롤, 칼시페롤, 티아민, 리보플라빈 등의 비타민류 등이 사용될 수 있다.
미네랄로서는 칼슘, 마그네슘, 크롬, 코발트, 구리, 불소화물, 게르마늄, 요오드, 철, 리튬, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 인, 칼륨, 셀레늄, 규소, 나트륨, 황, 바나듐, 아연 등이 사용될 수 있다.
또한 본 발명의 식품 조성물은 상기 감미제 등 이외에도 필요에 따라 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등을 포함할 수 있다.
이러한 보존제, 유화제 등은 그것이 첨가되는 용도를 달성할 수 있는 한 극미량으로 첨가되어 사용되는 것이 바람직하다. 극미량이란 수치적으로 표현할 때 식품 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.0005중량% 내지 약 0.5중량% 범위를 의미한다.
사용될 수 있는 보존제로서는 소듐소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등을 들 수 있다.
사용될 수 있는 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있다.
사용될 수 있는 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등을 들 수 있다. 이러한 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다.
사용될 수 있는 점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등을 들 수 있다.
또한 본 발명의 식품 조성물은 향미나 기호성을 향상시키고 기능성을 향상시키기 위하여 천연물 유래의 분말 또는 추출물을 포함할 수 있는데, 선지 분말 또는 추출물, 콩나물 분말 또는 추출물, 조개 분말 또는 추출물, 굴 분말 또는 추출물, 산미나리 분말 또는 추출물, 무 즙 또는 추출물, 오이 즙 또는 추출물, 부추 즙 또는 추출물, 시금치 즙 또는 추출물, 연근 즙 또는 추출물, 칡 즙 또는 추출물, 솔잎 즙 또는 추출물, 인삼 즙 또는 추출물, 백화사설초 분말 또는 추출물, 감초 분말 또는 추출물, 갈화 분말 또는 추출물, 갈근 분말 또는 추출물, 사인 분말 또는 추출물, 박 분말 또는 추출물, 생강 분말 또는 추출물, 대추 분말 또는 추출물, 인진 분말 또는 추출물, 지구자 분말 또는 추출물, 수비계 분말 또는 추출물, 백출 분말 또는 추출물, 저령 분말 또는 추출물, 진피(진귤의 껍질) 분말 또는 추출물, 구기자 분말 또는 추출물, 녹차 분말 또는 추출물, 오미자 분말 또는 추출물, 헛개나무 분말 또는 추출물, 지치 분말 또는 추출물, 노근 분말 또는 추출물, 계피 분말 또는 추출물, 데커시놀 등이 예시될 수 있다. 이러한 추출물은 추출 대상을 혼합하여 얻어질 수도 있다.
전술한 바와 같이, 본 발명에 따르면 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복을 이용한 항산화용 조성물, 피부 미백용 조성물, 및 콜라겐 생성 촉진용 조성물을 제공할 수 있다.
본 발명의 항산화용 조성물, 피부 미백용 조성물, 및 콜라겐 생성 촉진용 조성물은 화장품, 식품 또는 약품으로 제품화될 수 있다.
이하 본 발명을 실시예 및 실험예를 참조하여 설명한다. 그러나 본 발명의 범위가 이러한 실시예 및 실험예에 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 > 바나듐 함유 지하수 채수 봉독의 수득
<실시예 1> 바나듐 함유 지하수의 채수
제주도내 지하수 관정은 염지하수를 포함하여 6,000여 개소가 개발 이용되고 있는 실정인데, 그 중 1,400 여개소를 대상으로 바나듐을 포함한 미네랄의 함량이 높고, 미네랄의 농도가 주변 환경의 변화에 민감하지 않으며, 수질 상태가 양호하고 상품적 가치가 다소 높을 것으로 판단되는 지하수 관정을 10개소로 압축 선정하였다. 이들 10개소의 위치, 및 수질 분석 결과를 각각 <표 1> 및 <표 2>에 나타내었다.
Figure pat00001
Figure pat00002
상기 <표 2>에서 pH의 측정은 pH meter(Mettler Toledo Sevenmulti, S40)를 사용하였으며, EC의 측정에는 Conductivity meter(Mettler Toledo Sevenmulti, S70)를 사용하였다. 음이온성분(F-, Cl-, NO3-N, SO4 -2)에 대해서 Ion chromatography (DIONEX 500)를 사용하였으며, HCO3 -은 Standard Methods(APHA-AWWA- WPCF. 1992)에 따라 지시약 bromocresol green을 사용하여 0.02N HCl으로 적정하여 정량하였다. 경도 및 NH4-N는 먹는물수질공정시험방법(환경부. 1997)에 따라 분석하였고, 양이온성분(Na+, K+, Ca2+, Mg2+)에 대해서는 원자흡광광도계(Varian SpectrAA-800), 기타 미량미네랄원소는 ICP-MS (PERKIN-ELMER사 ELAN DRCe)를 이용하여 분석하였다.
상기 채취한 음용수는 0.2㎛의 필터로 여과시켜 이물질을 제거한 후 탈수시켜 분말상의 미네랄 조성물 형태로 제조하여 아래의 실험에 사용하였다.
<실시예 2> 봉독의 수득
봉복은 농촌진흥청에 지원받아 사용하였다. 봉복은 증류수를 부어 이물질을 부유시켜 제거한 정제된 형태로 제조하여 아래의 실험에 사용하였다.
< 실험예 > 항산화 활성, 피부 미백 활성 및 피부 주름 개선 활성 실험
<실험예 1> 항산화 활성 실험
항산화 활성은 DPPH assay 법에 의해 측정하였다. 구체적으로 100 uM DPPH 에탄올 용액을 만든 후 DPPH 용액 190 ㎕와 농도별로 메탄올로 희석한 시료 10 ㎕를 넣어서 30분 동안 상온에서 반응시킨 후 520nm에서 흡광도를 측정하였다. 대조시료서는 아래의 식에 따라 대조군인 무처리군과 비교하여 각 처리 농도에 따른 시료의 DPPH 라디칼 소거 활성을 구하고 50%의 소거 활성에 해당하는 농도 IC50 값으로 환산하여 아래의 [표 3]에 나타내었다. 양성대조군으로 합성 항산화제인 Trolox를 사용하였다.
DPPH 라디칼 소거율(%) = (Control-sample) / Control X 100
시료 IC50(㎍/㎖)
바나듐 함유 미네랄 조성물(실시예 1) 41.76
봉독(실시예 2) 37.06
미네랄과 봉독의 동량의 혼합물 35.27
Trolox 47.04
상기 [표 3]의 결과를 참조하여 보면, 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉독의 동량의 혼합물의 경우 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉독 각각의 항산화 활성보다 높은 활성을 보임을 보여준다.
<실험예 2> 피부 미백 활성 실험
피부 미백 활성 실험예 사용할 B16F10 세포는 한국세포주은행(KCLB; Seoul, Korea)으로부터 분양받았으며, 1% penicillin-streptomycin, 10% FBS(fetal bovine serum)이 함유된 DMEM 배지(GIBCO, Gard Island, NY, USA)를 사용하여 37℃, 5% CO2 항온기에서 배양하였다.
실험은 먼저 6 well plate에 5×104 cell/mL로 세포를 분주하고 37℃, 5% CO2 조건하에서 24시간 배양 후 배지를 제거한 후 D-PBS(D-phosphate buffered saline)으로 세척하였다. 다음 1uM α-MSH를 포함하는 배지로 교환 후, 시료를 200㎍/mL의 농도로 첨가하여 3일간 배양하였다. 배양한 세포에서 배지를 제거한 후 세포를 10 mM, pH 7.4인 PBS로 세척한 다음 세포를 회수하였다. 회수된 세포를 10 mM PBS로 다시 세척하고, 4℃, 8,000rpm으로 10분간 원심분리하여 얻어진 cell pellet에 10% DMSO가 포함된 1N NaOH을 첨가한 후, 60℃에서 3시간 동안 배양하여 멜라닌을 용해시킨 후 475 nm에서 흡광도를 측정하였다.
결과는 무처리군 대비 멜라닌 생성 억제 정도를 백분율로 아래의 [표 4]에 나타내었다.
멜라닌 생성 억제율
시료 멜라닌 생성 억제율
바나듐 함유 미네랄 조성물(실시예 1) 64.63
봉독(실시예 2) 72.92
미네랄과 봉독의 동량의 혼합물 78.38
알부틴(Arbutin) 82.56
상기 [표 4]의 결과는 미네랄 조성물과 봉복을 함께 사용할 경우 미백 효과가 더 뛰어날 수 있음을 보여준다.
<실험예 3> 콜라겐 생합성 실험( Collagen synthesis assay )
인간 유래의 섬유아세포주(CCD-986SK 세포)를 10% FBS(fetal bovine serum)이 함유된 DMEM 배지(GIBCO, Gard Island, NY, USA)가 함유된 48웰 플레이트에 5×104개로 분주 후 하룻밤 동안 배양하였다. 이 후 무혈청 DMEM 배지에서 24시간 배양한 다음 시료를 100㎍/ml로 처리하였으며 24시간 동안 배양하고 세포 배양액을 취하였다. 세포에서 배양액으로 분비된 콜라겐의 양을 EIA 키트 (Procollagen type C-peptide EIA kit, #MK101, TAKARA)를 사용하여 측정하였다.
결과를 음성대조군(시료 무처리군) 대비 백분율로 아래의 [표 3]에 나타내었다.
콜라겐 생성 정도
구분 콜라겐 생합성량(ng/ml)
Control 100
바나듐 함유 미네랄 조성물 106
봉독 114
미네랄과 봉독의 동량의 혼합물 121
상기 [표 5]의 결과도 미네랄 조성물과 봉복을 함께 사용할 경우 콜라겐 생성 촉진 효과가 더 뛰어날 수 있음을 보여준다.

Claims (15)

  1. 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 항산화용 조성물.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 화장품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  3. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  4. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  5. 제1항에 있어서,
    상기 조성물은 화장품 조성물이고 그 화장품 조성물의 제형은 스프레이 제형인 것을 특징으로 하는 조성물.
  6. 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 피부 미백용 조성물.
  7. 제6에 있어서,
    상기 조성물은 화장품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  8. 제6항에 있어서,
    상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  9. 제6항에 있어서,
    상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  10. 제6항에 있어서,
    상기 조성물은 화장품 조성물이고 그 화장품 조성물의 제형은 스프레이 제형인 것을 특징으로 하는 조성물.
  11. 바나듐 함유 미네랄 조성물과 봉복의 혼합물을 유효성분으로 포함하는 콜라겐 생성 촉진용 조성물.
  12. 제11항에 있어서,
    상기 조성물은 화장품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  13. 제11항에 있어서,
    상기 조성물은 식품 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  14. 제11항에 있어서,
    상기 조성물은 약제학적 조성물인 것을 특징으로 하는 조성물.
  15. 제11항에 있어서,
    상기 조성물은 화장품 조성물이고 그 화장품 조성물의 제형은 스프레이 제형인 것을 특징으로 하는 조성물.




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