KR20150060892A

KR20150060892A - 종양 축소를 위한 할로박테리아 추출물 조성물

Info

Publication number: KR20150060892A
Application number: KR1020157010616A
Authority: KR
Inventors: 노나 쿠차이나
Original assignee: 닥터 노나 인터내셔널 엘티디.
Priority date: 2012-09-24
Filing date: 2013-09-16
Publication date: 2015-06-03
Also published as: EP2900249A4; US20150202237A1; EA037463B1; AU2013319784B2; WO2014045279A1; AU2013319784A1; CA2885788A1; JP2015533808A; IL222128A; EP2900249A1; IN2015DN02571A; HK1213188A1; EA201590637A1

Abstract

본 발명은 포유동물 피검체에서 고형 종양을 치료하기 위한 조성물 및 방법을 제공한다. 조성물은 (a) 적어도 하나의 수용성 분획; 및 (b) 적어도 하나의 유용성 분획을 포함하는 항산화제를 함유하는 할로박테리아 추출물을 포함하고, 상기 할로박테리아 추출물은 고형 종양 축소의 치료적 처리에 적합하다. 추가로 할로박테리아 추출물을 포함하는 조성물은 시험관내 및 생체내 방사선 치료에서 고형 종양 축소를 촉진하는데 적합하다.

Description

종양 축소를 위한 할로박테리아 추출물 조성물{HALOBACTERIA EXTRACTS COMPOSITION FOR TUMOR REDUCTION}

본 발명은 할로박테리아 추출물을 이용하여 종양 세포를 치료하기 위한 조성물에 관한 것이다. 보다 구체적으로 본 발명은 방사선 치료 효과를 향상시키는 동시에 시험관내 및 생체내 종양 세포를 감소시키기 위한 할로박테리아 조성물에 관한 것이다.

할로박테리아는 호염성 미생물로서 알려져 있다. 이러한 유형의 아키온은 DNA 복제, 전사, 및 번역과 같은 진핵세포 생물학의 일부 양태에서 우수한 모델 역할을 할 수 있다. 호염 유전자를 다른 원핵생물의 유전자와 비교하는 것은 극한 조건에 대한 미생물 적응을 통찰할 것이다.

할로박테리아는 극한의 절대 박테리아이다. 이들은 그 성장을 위해 매우 높은 염 농도 (10 내지 30%)의 KCl, MgCl₂ 및 특히 NaCl을 필요로 한다. 이러한 유기체는 자연 배지로부터 분리된다. 배지에서 NaCl 농도와 평형을 이루어야 하는 이들의 내부 삼투압을 유지하기 위해, 할로박테리아는 3 내지 4M의 염을 KCl의 형태로 이들의 세포질에 축적한다. 2M의 NaCl 농도를 함유하는 배지에서 할로박테리아의 현탁액은 박테리아 외피의 강성의 완전한 손실을 일으키고 이어서 박테리아는 둥근 형상을 나타낸다. 염 농도를 1M 이하로 감소시키는 것은 박테리아 용해를 발 생시킨다.

할로박테리아의 콜로니는 적색이며, 이의 외피는 실제로 이들이 노출되는 강한 자외선에 대해 이들을 보호하는 컬러 안료 (박테리오-루베린스(bacterio-ruberins))를 함유한다. 할로박테리아는 광자에 반응하여 세포에서 클로라이드 이온을 펌핑하여, 전압 구배를 발생시키고 광으로부터 에너지 생산을 돕는 안료인 할로로돕신을 지닌다. 이러한 과정은 그러나 전자 수송을 수반하는 광합성의 다른 형태와 관련이 없고, 할로박테리아는 이산화탄소로부터 탄소를 고정시킬 수 없다.

염-풍부 배지 중의 할로박테리아의 통상적인 형상은 길이가 4 내지 10 [mu]m이고 직경이 0.7 [mu]m인 길쭉한 간균의 형상이다. 이러한 박테리아는 5 내지 8개의 속극모를 지닌다. 할로박테리움 할로비움(Halobacterium halobium)은 탄소 및 에너지원으로서 탄수화물을 이용할 수 없다.

다양한 할로박테리아 추출물은 유제, 크림, 로션, 세럼, 마스크 또는 젤과 같은 국소 조성물로서 특히 화상이나 다른 종류의 상처를 치료하기에 유리한 미용 특성을 지니는 것으로 알려져 있다.

따라서 증식성 질병의 치료를 촉진하기 위한 수단과 방법을 제공하고자 하는 오랜 기간 동안 충족되지 않은 염원이 남아 있다.

발명의 개요

본 발명의 한 목적은 포유동물 피검체에서 고형 종양을 치료하기 위한 조성물을 제공하는 것이고, 상기 조성물은 (a) 적어도 하나의 수용성 분획; 및 (b) 적어도 하나의 유용성 분획을 포함하는 항산화제를 함유하는 할로박테리아 추출물을 포함한다. 할로박테리아 추출물은 고형 종양 축소의 치료적 처리에 적합하고; 추가로 할로박테리아 추출물은 방사선 치료에서 고형 종양 축소를 촉진한다.

본 발명의 또 다른 목적은 두날리엘라(Dunaliella) 추출물을 추가로 포함하는, 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 한 목적은 방사선조사 및 다른 관련 질병을 치료하는데 유용한 경구 투여가능한 정제를 제공하는 것이고, 상기 정제는 할로박테리아 추출물 분획, 두날리엘라 추출물 분획, 적어도 하나의 비발포성 부형제 또는 희석제, 및 적어도 하나의 발포성 부형제를 포함한다.

본 발명의 한 목적은 할로박테리아를 포함하는 고형 종양 축소 조성물을 제공하는 것이고, 상기 조성물은 적어도 하나의 생물검정에 의해 측정되는 바와 같은 적어도 하나의 측정가능한 생물학적 활성을 특징으로 하고, 추가로 조성물은 표 1에 정의된 항-종양원성 활성 지문을 갖는다.

본 발명의 한 목적은 할로박테리아 추출물을 포함하는 고형 종양 축소 조성물을 제공하는 것이고, 상기 조성물은 항-혈관형성 인자로서 기능한다.

본 발명의 한 목적은 할로박테리아 추출물을 포함하는 고형 종양 축소 조성물을 제공하는 것이고, 상기 조성물은 프로테아제 억제, 인테그린 신호전달 억제, VEGF의 결합 및 활성 억제, 내피 세포의 세포 증식에 영향, bFGF 억제, 세포 이동 억제, 내피 세포의 아폽토시스 유도, 내피 세포의 세포 부착 및 생존, 앤지오포이에틴 1의 길항제, 또는 VEGF-B 및 PIGF에 대한 디코이 수용체로 구성된 군으로부터 선택되는 과정을 촉진함에 의해 고형 종양의 혈관 형성의 과정을 방해하는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물이 약 2.5 중량%-10 중량%의 양으로 존재하는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물이 치료 용량의 할로박테리아 균질물(homogenate) DN-1(호염성 고세균 균질물)을 포함하는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 항산화제 조성물이 고형 종양의 축소에 관해 피검체에 상승적인 치료적 방사선민감성 효과를 제공하는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상승적인 효과가 시험관내 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키는 것에 관해 암 세포에 대한 방사선 치료에 적어도 50% 더 높은 방사선민감성으로 정의되는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상승적인 효과가 종양의 더욱 현저한 회귀에 관해 피검체에 대한 방사선 치료에 더 높은 방사선민감성으로 정의되는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상승적인 효과가 대조군에 비해 수명의 증가로서 정의되는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 조성물이 경구 투여되는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 경구 투여되는 조성물 형태가 정제, 캡슐, 당의정, 또는 임의의 적합한 경구 형태로 구성된 군으로부터 선택되는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물이 5 및 10 Gy의 감마 방사선조사시에 방사선민감성에 대한 변경 효과를 지니는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 7% NaCl 상에서 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1(I) - 균질물이 약 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 7% NaCl 상에서 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1 (I) - 균질물이 16 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 7% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1 (II) 균질물이 약 % 종양 세포의 회귀를 발생시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 7% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1 (II) 균질물이 10 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 3.5% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1 (III) 균질물이 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 3.5% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1(III) - 균질물이 10 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대한 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물의 효과가 종양 세포의 현저한 회귀를 발생시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대한 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물의 효과가 포유동물 수명의 증가를 발생시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 시험관내 및 생체내 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 종양 세포 증식을 감소시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 악성 세포 성장의 억제 효과를 발생시키는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 효과가 DN-1 농도 및 치료 지속기간에 비례하여 증가하는 상기 정의된 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 한 목적은 (a) 박테리아의 파열을 방지하는 배지에서 배양되는 호염성 박테리아를 제공하는 단계, (b) 담즙염을 포함하고, 박테리아를 용해시켜 할로박테리아 균질물 DN-1이 배지로 방출되도록 하기에 충분히 낮은 NaCl 농도를 갖는 배지에서 박테리아를 에워싸는 단계, 및 (c) 방출된 할로박테리아 균질물 DN-1을 분리시키는 단계를 포함하는, 할로박테리아 균질물 DN-1을 추출하는 방법을 제공하는 것이다. 할로박테리아 균질물 DN-1은 고형 종양 축소의 치료적 처리에 적합하고; 추가로 할로박테리아 균질물 DN-1은 방사선 치료에서 고형 종양 축소를 촉진한다.

본 발명의 또 다른 목적은 단계 (b)의 배지가 세척제를 추가로 포함하는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 단계 (b)의 배지가 양이온 착화제를 추가로 포함하는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 세척제가 음이온 세척제, 양이온 세척제, 비이온 세척제, 및 양쪽성 세척제로 구성된 군으로부터 선택되는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물이 약 2.5 중량%-10 중량%의 양으로 존재하는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물이 치료 용량의 할로박테리아 균질물 DN-1을 포함하는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 항산화제 조성물이 고형 종양의 축소에 관해 피검체에 상승적인 치료적 방사선민감성 효과를 제공하는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상승적인 효과가 시험관내 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키는 것에 관해 암 세포에 대한 방사선 치료에 적어도 50% 더 높은 방사선민감성인 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상승적인 효과가 종양의 더욱 현저한 회귀에 관해 피검체에 대한 방사선 치료에 더 높은 방사선민감성으로 정의되는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상승적인 효과가 대조군에 비해 수명의 증가로서 정의되는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 조성물이 경구 투여되는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 경구 투여되는 조성물이 정제, 캡슐, 당의정, 또는 임의의 적합한 경구 형태로 구성된 군으로부터 선택되는 형태인 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1 이 5 및 10 Gy의 감마 방사선조사시에 방사선민감성에 대한 변경 효과를 지니는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 7% NaCl 상에서 제조된 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1(I)이 약 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 7% NaCl 상에서 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1 (I) - 균질물이 16 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 7% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1 (II) 균질물이 약 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 7% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1 (II) 균질물이 10 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 3.5% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1 (III) - 균질물이 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 3.5% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 할로박테리아 추출물, DN-1(III) - 균질물이 10 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대한 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물의 효과가 종양 세포의 현저한 회귀를 발생시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대한 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물의 효과가 포유동물 수명의 증가를 발생시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 시험관내 및 생체내 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 종양 세포 증식을 감소시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 악성 세포 성장의 억제 효과를 발생시키는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 상기 효과가 DN-1 농도 및 치료 지속기간에 비례하여 증가하는 상기 정의된 방법을 제공하는 것이다.

도면 설명

본 발명을 이해하고 그것이 실제로 어떻게 구현될 수 있는지를 알기 위해, 이제 복수의 구체예가 첨부된 도면을 참조로 하여, 단지 비제한적인 예로서 설명된다:

도 1은 본 발명의 바람직한 구체예에 따라, 현탁액에서 시험관내 방사선조사된 B-16 흑색종 세포의 생존율 그래프를 제공한다;

도 2는 본 발명의 바람직한 구체예에 따라, 25 Gy 국소 감마-방사선조사 후에 B-16 마우스 흑색종 성장의 동적 그래프를 제공한다;

도 3-4는 본 발명의 바람직한 구체예에 따라, 25 Gy 국소 감마-방사선조사 후에 고형 ELD 암종 성장의 동적 그래프를 제공한다;

도 5는 본 발명의 바람직한 구체예에 따라, 국소 감마 방사선조사 후에 B-16 흑색종을 갖는 마우스의 생존율 그래프를 제공한다;

도 6은 본 발명의 바람직한 구체예에 따라, 국소 감마 방사선조사 후에 ELD 종양을 갖는 마우스의 생존율 그래프를 제공한다;

도 7은 본 발명의 바람직한 구체예에 따라, 현탁액에서 시험관내 방사선조사된 V-79 세포의 생존율 그래프를 제공한다.

상세한 설명

하기 설명은 당업자가 본 발명을 이용할 수 있도록 하기 위해 제공되며 본 발명자에 의해 구현된 본 발명을 수행하는 최적의 방법을 개시한다. 그러나, 본 발명의 일반적 원리가 특히 방사선 치료 효과를 향상시키는 동시에 시험관내 및 생체내 종양 세포를 감소시키는데 유용한 원시세균 DN-1 및 추출물을 제공하기 위해 정의되었으므로, 다양한 변형이 당업자에게 여전히 자명할 것이다.

본 발명은 오일 및 물에 용해되는 강력한 항산화제를 포함하는 원시세균 추출물 DN-1을 포함하는 생성물이다. 생성물은 피부의 재활에 광범위한 영향력을 추가로 갖는다. 원시세균 추출물 DN-1은 경구 전달된다.

본원에서 사용되는 용어 "할로박테리아", "원시세균", "호염성 고세균 할로박테리아"는 추가로 원시세균, 할로박테리움 할로비움으로도 이해될 것이다.

할로박테리아는 박테리아라기보다는 고세균으로 인지된다. 명칭 '할로박테리아'는 고세균 도메인의 존재가 실현되기 전에 이러한 그룹의 유기체에 할당되었고, 분류학적 규칙에 따라 유효한 것으로 남아 있다. 비-분류학적 상황에서, 호염성 고세균은 때로 이들을 호염성 박테리아로부터 구별하기 위해 할로고세균으로도 지칭된다.

할로박테리아는 이들이 엽록소 없이 광합성을 수행한다는 점에서 독특하다. 대신, 이들의 광합성 안료는 박테리오로돕신 및 할로로돕신이다. 이러한 안료는 시력을 위해 인간 및 다른 동물에 의해 이용되는 안료인 감각 로돕신과 유사하다. 박테리오로돕신 및 할로로돕신은 할로박테리아의 세포막에 임베딩되고 각각의 안료는 단백질에 결합된 비타민-A 유도체인 레티날로 구성된다. 이러한 안료의 방사선조사는 이들의 레티날에서의 구조적 변화를 초래한다. 이를 광이성질체화로서 언급한다.

레티날 광이성질체화는 ATP의 합성을 발생시킨다. 할로박테리아는 2개의 추가적인 로돕신인 감각 로돕신-I 및 감각 로돕신-II를 갖는다. 이러한 화합물은 광에 반응하는 지향성 운동인 주광성을 조절한다.

할로박테리아는 극한의 절대 박테리아이다. 이들은 실제로 그 성장을 위해 매우 높은 염 농도 (10 내지 30%)의 KCl, MgCl₂ 및 특히 NaCl을 필요로 한다. 이러한 유기체는 자연 배지 또는 인공 배지 (salterns)로부터 분리되었다. 배지에서 NaCl 농도와 평형을 이루어야 하는 이들의 내부 삼투압을 유지하기 위해, 할로박테리아는 3 내지 4M의 염을 KCl의 형태로 이들의 세포질에 축적한다. 2M의 NaCl 농도를 함유하는 배지에서 할로박테리아의 현탁액은 박테리아 외피의 강성의 완전한 손실을 일으키고 이어서 박테리아는 둥근 형상을 나타낸다. 염 농도를 1M 이하로 감소시키는 것은 박테리아 용해를 발생시킨다.

할로박테리아의 콜로니는 적색이며, 이의 외피는 실제로 이들이 노출되는 강한 자외선에 대해 이들을 보호하는 컬러 안료 (박테리오-루베린스)를 함유한다.

항산화제를 함유하는 생성물은 방사선 요법을 진행중인 환자에서 긍정적 효과를 갖고, 또한 방사선요법의 합병증의 병증에서 (점막염) 환자를 돕는다.

DN-1은 수용성 및 유용성인 두 그룹의 항산화제를 함유하므로, 이는 방사선, 상처, 화상, 압박 궤양 및 수술 후 흉터형성 이후에 신체 복구에 광범한 범위의 효과를 갖는 추출물을 함유하는 항산화제이다.

본 발명은 시험관내 및 생체내 고형 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키기 위한 할로박테리아 균질물 DN-1의 능력을 추가로 제공한다.

고형 종양은 양성 또는 악성일 수 있다. 고형 종양의 예는 육종, 암종, 및 림프종이다. 백혈병은 일반적으로 고형 종양을 구성하지 않는다.

육종은 골 또는 근육과 같은 신체의 결합 조직으로부터 형성되는 암이다. 이러한 유형의 고형 종양은 암의 세포 특징에 따라 저, 중 또는 고의 등급에 할당된다. 저-등급 육종은 일반적으로 수술로 치료된다. 중 및 고-등급 육종은 일반적으로 수술, 화학요법 및 방사선의 조합으로 치료된다.

암종은 신체의 샘 세포 및 상피 세포에서 생긴다. 이러한 세포는 신체의 공기 통로 및 위장관에 정렬된다. 부신피질 암종은 신체가 적절하게 작동하는 것을 돕는 호르몬을 만드는 부신 피질에서 발생한다. 갑상샘 암종은 심박수, 체온, 에너지 수준과 칼슘 수준에 영향을 주는 호르몬을 생성하는 갑상샘에서 발생한다. 그 밖의 암종은 상부 구협에 영향을 주는 비인두 암종, 및 피부 암종을 포함한다.

림프종은 림프절, 비장 및 가슴샘을 포함하는 림프 기관에서 발생한다. 이러한 기관은 신체가 감염과 싸우는 것을 돕는 세포를 생성하고 저장하는 역할을 한다. 림프종은 개발도상국에서 혈액암의 가장 일반적인 형태이고 모든 미국암의 5.3 퍼센트를 차지한다.

고형 종양이 발생할 수 있는 기관이 광범하게 다양하므로 고형 종양에 대한 뚜렷한 증상은 없다. 사람이 느끼는 증상은 어떤 기관이 암의 표적이었는지, 그 기관의 어디에 고형 종양이 위치하는지, 암 세포의 성장률, 및 암이 다른 기관에 확산되었는지 (전이)에 의존적이다.

고형 종양의 치료는 암의 위치, 단계, 및 환자의 건강상태를 포함하는 다수의 인자에 의존적이다. 수술을 제외한 종양을 제거하기 위한 다른 옵션으로는 화학요법 및 방사선 요법이 있다.

본 발명의 할로박테리아 조성물의 투여 형태는 알약, 정제, 캡슐, 자연 형태 또는 임의의 적합한 경구 고체 형태를 포함한다. 그 중에 특히 , 약물 전달을 위한 투여 경로 (ROA)는 물질의 투여 형태에 의존적이다.

본 발명의 조성물은 두날리엘라 추출물을 추가로 포함할 수 있다.

두날리엘라 살리나( Dunaliella salina )는 특히 바다 염전에서 발견되는 호염성 녹색 미세-조류의 유형이다. 두날리엘라는 다량의 카로테네오이드(caroteneoid)를 생성하는 이의 능력으로 인해 항산화 활성에 대해 알려져 있다.

내염성 녹색 조류인 두날리엘라는 규정된 조건하에 성장시에 높은 농도의 β-카로텐을 축적시킨다. 두날리엘라는 규정된 조건하에 매우 다량의 β-카로텐 (조류 건조 중량의 10% 초과)을 축적하는 능력을 지닌다. β-카로텐의 축적 한도는 분열 주기 동안 조류가 노출되는 높은 NaCl 농도 및 필수량의 광의 직접 함수를 갖는 것으로 나타났다.

β-카로텐은 강력한 항암 특성을 지닌다. 달리 DNA를 손상시킬 수 있고, 추가로 주름과 같은 미용-관련 문제를 조장하며, 보다 심각한 측면에서, 암에 걸릴 위험성을 증가시킬 수 있는 신체에서 유해한 자유 라디칼의 양을 감소시킨다. 두날리엘라는 면역 세포에 직접적인 효과를 갖는 것으로 알려져 있다.

또 다른 구체예에서, 두날리엘라 속의 조류의 세포막은 조류가 약 3M 이상의 농도를 갖는 소듐 클로라이드의 용액과 접촉할 때 소수성이 되며, 이러한 거동은 조류로 하여금 소수성 표면을 갖는 물질 상에 흡착하도록 하여, 조류가 이들이 성장하는 염수 배지로부터 신속하고 경제적으로 분리되고 회수될 수 있게 하는 수단을 제공한다. 해수에서 발견되는 것과 같은 보다 낮은 농도의 소듐 클로라이드에서 세포막의 표면은 극성기에 의해 지배되어 소수성이 아니며, 이에 따라 조류는 소수성 표면 상에 흡착하지 않거나 흡착된 채로 유지되지 않을 것임이 발견되었다.

두날리엘라는 점진적인 시력 손실을 야기하는 쇠약 상태를 예방하고 치료하는데 도움이 되는 능력을 갖는 가치 있는 항산화제로서 제아잔틴(zeaxanthin)이라 불리는 카로테노이드를 추가로 함유한다.

두날리엘라와 할로박테리아의 조합물은 추가로 시험관내 및 생체내에서 방사선 치료 효과를 향상시키는 동시에 종양 세포를 축소시킨다.

항산화제 조성물이 고형 종양의 축소에 관해 피검체에 상승적인 치료적 방사선민감성 효과를 제공하는 본 발명의 조성물이 상기에 정의된다.

상승적인 효과가 시험관내 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키는 것에 관해 암 세포에 대한 방사선 치료에 적어도 50% 더 높은 방사선민감성으로 정의되는 본 발명의 조성물이 상기에 정의된다.

상승적인 효과가 종양의 더욱 현저한 회귀에 관해 피검체에 대한 방사선 치료에 더 높은 방사선민감성으로 정의되는 본 발명의 조성물이 상기에 정의된다.

상승적인 효과가 대조군에 비해 수명의 증가로서 정의되는 본 발명의 조성물이 상기에 정의된다.

조성물이 경구 투여되는 본 발명의 조성물이 상기에 정의된다.

경구 투여되는 조성물이 정제, 캡슐, 당의정, 또는 임의의 적합한 경구 형태로 구성된 군으로부터 선택되는 형태인 본 발명의 조성물이 상기에 정의된다.

할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물이 5 및 10 Gy의 감마 방사선조사시에 방사선민감성에 대한 변경 효과를 지니는 본 발명의 조성물이 상기에 정의된다.

실시예

도 1-7은 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대한 DN-1 할로박테리아 균질물의 효과를 제공한다.

B-16 마우스 흑색종 세포 및 V-79 차이니즈 햄스터를 생체내 및 시험관내에서 현탁액에서 감마-방사선조사하였다.

마우스를 상이한 그룹으로 나누었고 한 그룹에는 DN-1을 첨가하지 않거나 상이한 농도의 할로박테리아 세포 또는 상이한 농도의 NaCl 용액: 3.5% NaCl 농도 및 7% NaCl 농도로 제조된 DN-1의 10% 현탁액을 첨가한 지 15분 후에 검사하였다. 가시적인 콜로니를 형성하는 세포의 능력인 클론원성(clonogenicity)이 종말점이었고, 세포의 생존율로서 고려되었다.

본 절차는 할로박테리아의 추출에 이용될 수 있다. 이는 세포가 저농도의 염, 예를 들어 담수에 노출될 때 미생물의 세포 외피의 약화를 기초로 하며; 이러한 조건하에 호염성 박테리아의 세포가 용해되어 (파열), 모든 세포 구성요소를 배지로 방출시킨다.

하기 실시예는, 그러나, 제한적인 특성이 아닌 본 발명을 예시하기 위한 것이다:

시험관내

본 발명은 무손상 및 방사선조사된 악성 및 정상 세포의 증식에 대한 DN-1 제조물의 시험관내 효과를 기술한다. DN-1은 7.5% NaCl 상에서 제조된 균질물 할로박테리아이다.

성장 배지에서 세포 분열 속도에 대한 0.13% DN-1의 효과를 마우스 종양 세포 : B-16흑색종, Lewis 폐 암종, 및 EMT-6 유방 암종, 뿐만 아니라 HT-29 인간 결장 암종 및 인간 태아 결장의 상피 세포에 대해 연구하였다. 방사선민감성에 대한 DN-1의 변경 효과를 5 및 10 Gy의 감마 방사선조사를 이용한 실험에서 여러 세포주에 대해 측정하였다.

DN-1에 의한 악성 세포 성장의 억제를 나타낸 여러 저자의 이전 데이터를 2개의 세포주에서 확인하였다. 이러한 효과는 DN-1 농도와 치료 지속기간에 비례하여 증가한다. 그러나, EMT-6 세포는 예외이며, 이들의 분열 속도는 언급된 농도에서 DN-1에 의한 영향을 받지 않았다.

감마 방사선조사 기간 1h 전 및 감마 방사선조사 기간 동안에 배지에 3% DN-1을 첨가하는 것은 Lewis 폐 암종 세포, B-16 흑색종 및 HT-29 인간 결장 암종의 방사선 사멸을 증가시켰으나, 정상적인 인간 장의 상피 세포의 손상을 변경시키지 못했다. DN-1은 두 마우스 종양 세포인 B-16 및 Lewis 폐 암종의 시험관내 증식을 실질적으로 억제하지만, EMT-6 세포의 증식에는 영향을 주지 않았다. 방사선조사 1시간 전 및 방사선조사 동안 성장 배지로의 DN-1 투여는 유사한 기관의 정상적인 세포의 민감성을 변화시키지 않으며 인간 기원의 악성 세포 (HT-29)의 방사선 손상을 실질적으로 증가시킨다.

DN-1 할로박테리아 균질물의 효과를 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대해 추가로 제공하였다. B-16 마우스 흑색종 세포 및 V-79 차이니즈 햄스터를 DN-1을 첨가하지 않거나 상이한 농도의 할로박테리아 세포 또는 감소된 (7% NaCl 농도 대신 3.5%) NaCl 용액으로 제조된 DN-1의 10% 현탁액을 첨가한 지 15분 후에 현탁액에서 감마-방사선조사하였다. 가시적인 콜로니를 형성하는 세포의 능력 (클론원성)이 종말점이었고, 세포 "생존율"로서 고려된다.

방사선민감성은 이온화 방사선의 유해한 효과에 대한 세포, 조직, 기관 또는 유기체의 상대 감수성(susceptibility)이다. 세포는 세포 주기의 S 기일 때 가장 덜 민감하며, 이어서 G₁ 기, 이어서 G₂ 기이며, M 기일 때 가장 민감하다. 베르고니(Bergonie) 및 트리본도우(Tribondeau)의 규칙에 따르면 빠르게 분열하는 종양 세포는 일반적으로 대부분의 체세포보다 더욱 민감하다. 이것이 항상 맞는 것은 아니다. 종양 세포는 저산소 세포일 수 있으므로, 이온화 산소에 의해 생성된 자유 라디칼을 통해 그 효과의 대부분을 매개하는 X-선에 덜 민감하다. 이후 가장 민감한 세포는 미분화되고, 영양분이 잘 공급되며, 신속하게 분열하고, 대사적으로 고도로 활성인 것들임이 밝혀졌다. 체세포 중에서, 가장 민감한 것은 정조세포 및 적모세포, 표피 줄기 세포, 위장 줄기 세포이다. 가장 덜 민감한 것은 신경 세포 및 근섬유이다. 매우 민감한 세포는 또한, 비록 이들이 휴지 세포이고 상기 기재된 기준을 충족하지 않을지라도, 난모세포 및 림프구이다.

생체내

DN-1 할로박테리아 균질물의 효과는 종양 감마-방사선조사 후에 그리고 치료 후 마우스 생존의 지속기간에 마우스의 정강이 근육에 이식된 2개의 종양 - ELD 암종 및 B-16 흑색종 -의 동적 회귀에 대해 연구되었다.

방사선조사는 마우스의 몸에 대한 추가 스크린이 제공되는 임상 Co 기계 상에서 수행되었다. 방사선조사는 정강이의 직경이 약 4에서 8-9 mm로 증가하였을 때 종양 이식 6-7일 후에 수행되었다.

'실험' 마우스는 1 ml의 7% NaCl에서 보통 46 mg (변이체 I) 또는 두배인 96 mg (변이체 II) 양의 할로박테리아 세포 매스로 제조된 0.2 ml의 희석된 (1:10) DN-1 용액 뿐만 아니라 3.5% NaCl에서 제조된 후 동결건조된 DN-1로부터 재구성된 (변이체 III) 0.2 ml의 희석된 (1:10) DN-1 용액을 경구로 매일 수용하였다.

종양 부피는 치료 후에 일주일에 3회 측정되었다. 결과는 종양 회귀 및 재발에 대해 도 2-4에 제공되고 마우스 생존에 대해 도 1과 도 5-7에 제공된다.

DN-1을 이용한 동물의 '섭식'은 둘 모두의 종양 유형의 더욱 현저한 회귀 및 피검체 수명의 증가를 발생시킨다.

하기 표 1은 본 발명의 조성물이 제조되는 상이한 절차를 예시한다. 조성물은 세포 현탁액에 DN-1을 첨가함에 의해 감마-방사선조사에 대한 마우스 세포의 흑색종 B-16 및 V-79 차이니즈 햄스터의 민감화를 검사하는데 이용되었다.

표 1

DN-1 - 7% NaCl 상에서 제조된 할로박테리아의 균질물;

DN-1 (II) - 7% NaCl 상에서 제조된 두배 농도의 할로박테리아를 이용한 균질물;

DN-1 (III) - 3.5% NaCl 상에서 제조된 두배 농도의 할로박테리아를 이용한 균질물.

DMF 방사선조사 이후 대조군 (DN-1 없음)에서와 같은 세포 생존율의 감소를 발생시키는 상이한 제조물에서 DN-1의 존재로 인해 몇 배의 방사선조사 선량이 감소할 수 있는 지를 나타내는 선량 변경 인자.

도 1은 상이한 방식으로 제조된 10%의 DN-1이 첨가되거나 DN-1이 없는 현탁액에서 방사선조사된 B-16 흑색종 세포의 시험관내 생존율을 예시한다:

DN-1 - 7% NaCl 상에서 제조된 할로박테리아의 균질물;

도 2는 25 Gy 국소 감마-방사선조사 후에 B-16 마우스 흑색종 성장의 동적 그래프를 도시한다.

25 Gy 국소 감마-방사선조사 후에 B-16 마우스 흑색종 성장의 동역학

B-16 흑색종을 마우스의 종아리 근육에 이식하였다.

종아리 근육이 9mm의 평균 직경에 도달했을 때 이식한 지 9일 후에 종양에 방사선조사하였다.

마우스는 보통 식이를 유지하거나 3개의 상이한 절차들 중 하나로 제조된 0.2 ml의 DN-1 균질물을 매일 경구 수용하였다:

I - 7% NaCl 상에서 제조된 DN-1

II - 7% NaCl 상에서 제조된 두배 농도의 DN-1

III - 3.5% NaCl 상에서 두배 농도로 제조된 동결건조된 DN-1으로부터 제조된 재구성된 용액.

상기 절차는 DN-1 균질물을 수용하지 않은 마우스와 비교되었다.

Vt/Vo는 치료 후, 측정일에 평균 종양 부피인 Vt와 방사선조사일에 평균 종양 부피인 Vo 간의 비율을 나타낸다.

도 3-4는 25 Gy 국소 방사선조사에 노출 후에, 마우스 종아리 근육에 이식된 고형 ELD 암종 성장의 동적 그래프를 제공한다.

에를리히(Ehrlich) ELD 암종을 종아리 근육에 이식하였다.

종아리가 8mm의 평균 직경에 도달했을 때 이식한 지 8일 후에 종양에 방사선조사하였다.

마우스는 보통 식이를 유지하거나 3개의 상이한 절차들 중 하나로 3.5% NaCl 상에서 제조된 할로박테리아의 0.2 ml의 10% DN 균질물을 매일 경구 수용하였다.

그래프는 다음을 제공한다:

■ DN을 수용하지 않은 동물 그룹;

3.5% NaCl 상에서 제조된 DN-1을 공급받은 동물 그룹;

△ 두배 농도의 할로박테리아로 3.5% NaCl 상에서 제조된 DN을 공급받은 동물 그룹;

◇ 4x 농도의 할로박테리아로 3.5% NaCl 상에서 제조된 DN을 공급받은 동물 그룹;

도 5는 동물에게 두배 함량의 할로박테리아로 제조된 - 0.2 ml의 10% DN-1 또는 DN-1 (II) (III)을 매일 경구 투여하는 동안 국소 감마 방사선조사 (25 Gy) 후 B-16 흑색종을 지닌 마우스의 생존 백분율을 나타낸다.

도 6은 동물에게 두배 함량의 할로박테리아 매스로 제조된 - 0.2 ml의 10% DN-1 또는 DN-1 (II) (III)을 매일 경구 투여하는 동안 국소 감마 방사선조사 (25 Gy) 후 ELD 종양을 지닌 마우스의 생존율을 나타낸다.

도 7 DN-1을 지니지 않는 현탁액 및 상이한 방식으로 제조된 10%의 DN-1이 첨가된 현탁액에서 시험관내 방사선조사된 V-79 세포의 생존율:

DN-1 - 7% NaCl 상에서 제조된 할로박테리아의 균질물;

DN-1 (II) - 7% NaCl 상에서 제조된 두배 농도의 할로박테리아를 갖는 균질물;

DN-1 (III) - 3.5% NaCl 상에서 제조된 두배 농도의 할로박테리아를 갖는 균질물.

할로박테리아 균질물 DN -1의 추출

적색 할로박테리아-고세균 및 7.5% NaCl 및 pH =7에서 분리된 미세조류 두날리엘리아로부터의 균질물

염 원액을 제조하는, 할로박테리움 할로비움으로부터 수득된 할로박테리아 균질물 DN-1의 추출:

240L의 NaCl, 30L의 MgCL₂*6H₂O, 35L의 MgSO₄*7H₂O, 7L의 KCl을 플라스크에 첨가한다. 순수한 물을 동일한 플라스크의 요구되는 최종 부피에 가깝게 첨가한다. 그 후 자기 교반기를 이용하여 염을 용해시켰다.

CaCl₂*2H₂O를 첨가한다.

1M TrisCl 완충제를 이용하여 플라스크 용액의 pH를 7 이하로 조정한다.

상기 용액을 메스실린더로 옮기고 정확한 최종 부피까지 물을 가득 붓는다.

박테리아 매스의 양은 미리 분산되며 이는 하기 기재된 용액에 첨가되어 있다:

상기 염 원액으로부터의 767ml, 200ml의 순수한 물, 5g의 펩톤, 1g의 효모 추출물, 3g의 미세조류 분말, 두날리엘라 및 1g의 카세인을 첨가한다.

부피를 1000ml의 순수한 물로 조정한다.

오토클레이브를 이용하여 배양액을 살균한다.

배양액을 충분한 시간 동안 -37℃의 온도에서 인큐베이션시켜 산출한다.

배양액을 2주 동안 현탁시킨다.

미세조류 두날리엘라의 용액을 10-일 할로박테리아 배양액의 용액에 첨가하고, 수득된 혼합물을 25℃의 온도에서 영구적인 조명하에 인큐베이션한다.

조류는 하기를 포함하는 성장 배지에서 배양된다:

배양은 pH=7로 조정된다.

2주된 배양액을 7500RPM, 4℃에 대해 원심분리시켜 침전물을 수득한다.

침전물을 분리하고, 2M NaCl + 0.15M MgCl₂의 용액 내에 재현탁시킨다.

용액을 7500RPM, 4℃에 대해 원심분리시켜 침전물을 수득한다.

침전물 층을 분리하고, 7.5% NaCl의 용액 내에 재현탁시킨다.

상기 용액을 각 회에 15초간 3회 초음파처리하고, 각 회의 사이에 색과 용액의 탁도 또는 투명도에서의 차이가 나타날 때까지 용액을 얼음조에서 냉각시킨다.

용액을 원심분리시켜 분리 분획을 생성한다 (원심분리 절차는 7500RPM 4℃에서 10분 동안 수행된다). 생성된 침전물을 분리하고 (-4)℃에서 유지한다.

경구 정제 제조 방법

하기 열거된 기본 성분을 Day 분말 믹서 또는 Pony 믹서에서 약 20분 동안 혼합시켰다. 추출물을 기본 혼합물에 첨가하고, 윤활제를 첨가하여 혼합물을 다시 약 30분 동안 혼합시켰다. 마지막으로 전체 혼합물이 24시간 보다 짧지 않은 시간 동안 실온에서 결합을 위해 섞이게 하였다. 정제를 스코어링된 캡슐형 경구 정제로 압착하였다.

혼합물 중 각 성분의 중량 분배는 소정의 용량에 따라 결정된다. 더 큰 균일성의 용량을 위해 미세 입자 크기를 크기조정한다 (크기 감소, 제분, 파쇄, 분쇄, 미분쇄).

입자 크기 감소 및 블렌딩 후 과립화, 제형은 과립화될 수 있고, 이는 블렌드에서 약물 분포의 균질성을 제공한다.

생성물의 열화를 방지하고 자유 유동성을 확보하기에 충분히 낮은 잔여 수분을 유지함에 의해 건조. (건조 과정은 유동층 - 베드 건조기, 진공 트레이 건조기, 마이크로파 건조기, 분무 건조기, 동결 건조기, 터보 - 트레이 건조기, 또는 팬 건조기를 이용하여 수행될 수 있다).

정제 압착은 과립 (습윤 과립화의 경우) 또는 크기조정된 슬러그 (건조 과립화의 경우)의 제조 후에 또는 성분들의 혼합 (직접 압착의 경우) 후에 수행되며, 이들은 최종 생성물을 얻도록 압착된다.

상기 설명에서, 바람직한 구체예를 포함하는 본 발명의 구체예는 예시 및 설명을 목적으로 제시되었다. 이들은 배타적이거나 개시된 정확한 형태로 본 발명을 한정하려는 것이 아니다. 명백한 수정 또는 변형이 상기 교시에 비추어 가능하다. 구체예는 본 발명의 원리 및 그 실질적 적용의 가장 좋은 실례를 제공하고, 당업자로 하여금 본 발명을 다양한 구체예와 고려되는 특정 용도에 적합한 다양한 변형으로 이용할 수 있도록 하기 위해 선택되고 기재되었다. 모든 그러한 변형 및 변경은 첨부된 청구범위가 공정하게, 법적으로, 그리고 정당하게 받을 수 있는 범위에 따라 해석할 때 그에 의해 결정되는 본 발명의 범위 내에 있다.

Claims

포유동물 피검체에서 고형 종양을 치료하기 위한 조성물로서, 상기 조성물이
(a) 적어도 하나의 수용성 분획; 및
(b) 적어도 하나의 유용성 분획을 포함하는 항산화제를 함유하는 할로박테리아 추출물을 포함하고,
상기 할로박테리아 추출물이 고형 종양 축소의 치료적 처리에 적합하고; 추가로 상기 할로박테리아 추출물이 방사선 치료에서 고형 종양 축소를 촉진하는, 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 조성물이 두날리엘라(Dunaliella) 추출물을 추가로 포함하는 조성물.
방사선조사 및 다른 관련 질병을 치료하는데 유용한 경구 투여가능한 정제로서, 상기 정제가 할로박테리아 추출물 분획, 두날리엘라 추출물 분획, 적어도 하나의 비발포성 부형제 또는 희석제, 및 적어도 하나의 발포성 부형제를 포함하는, 정제.
할로박테리아를 포함하는 고형 종양 축소 조성물로서, 상기 조성물이 적어도 하나의 생물검정에 의해 측정되는 바와 같은 적어도 하나의 측정가능한 생물학적 활성을 특징으로 하고, 추가로 상기 조성물이 표 1에 정의된 항-종양원성 활성 지문을 갖는, 고형 종양 축소 조성물.
할로박테리아 추출물을 포함하는 고형 종양 축소 조성물로서, 상기 조성물이 항-혈관형성 인자로서 기능하는, 고형 종양 축소 조성물.
할로박테리아 추출물을 포함하는 고형 종양 축소 조성물로서, 상기 조성물이 프로테아제 억제, 인테그린 신호전달 억제, VEGF의 결합 및 활성 억제, 내피 세포의 세포 증식에 영향, bFGF 억제, 세포 이동 억제, 내피 세포의 아폽토시스 유도, 내피 세포의 세포 부착 및 생존, 앤지오포이에틴 1의 길항제, 또는 VEGF-B 및 PIGF에 대한 디코이 수용체로 구성된 군으로부터 선택되는 과정을 촉진함에 의해 고형 종양의 혈관 형성의 과정을 방해하는 것을 특징으로 하는, 고형 종양 축소 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물이 약 2.5 중량%-10 중량%의 양으로 존재하는 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물이 치료 용량의 할로박테리아 균질물(homogenate) DN-1(호염성 고세균 균질물)을 포함하는 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 항산화제 조성물이 고형 종양의 축소에 관해 피검체에 상승적인 치료적 방사선민감성 효과를 제공하는 조성물.
제 6항에 있어서, 상기 상승적인 효과가 시험관내 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키는 것에 관해 암 세포에 대한 방사선 치료에 적어도 50% 더 높은 방사선민감성으로 정의되는 조성물.
제 5항에 있어서, 상기 상승적인 효과가 종양의 더욱 현저한 회귀에 관해 피검체에 대한 방사선 치료에 더 높은 방사선민감성으로 정의되는 조성물.
제 5항에 있어서, 상기 상승적인 효과가 대조군에 비해 수명의 증가로서 정의되는 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 조성물이 경구 투여되는 조성물.
제 12항에 있어서, 상기 경구 투여되는 조성물 형태가 정제, 캡슐, 당의정, 또는 임의의 적합한 경구 형태로 구성된 군으로부터 선택되는 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물이 5 및 10 Gy의 감마 방사선조사시에 방사선민감성에 대한 변경 효과를 지니는 조성물.
제 1항에 있어서, 7% NaCl 상에서 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1(I) - 균질물이 약 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 7% NaCl 상에서 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 (I) - 균질물이 16 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 7% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 (II) 균질물이 약 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 7% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 (II) 균질물이 10 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 3.5% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 (III) - 균질물이 약 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 3.5% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1(III) - 균질물이 10 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대한 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물의 효과가 종양 세포의 현저한 회귀를 발생시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대한 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물의 효과가 포유동물 수명의 증가를 발생시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 시험관내 및 생체내 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 종양 세포 증식을 감소시키는 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 악성 세포 성장의 억제 효과를 발생시키는 조성물.
제 25항에 있어서, 상기 효과가 DN-1 농도 및 치료 지속기간에 비례하여 증가하는 조성물.
(a) 박테리아의 파열을 방지하는 배지에서 배양되는 호염성 박테리아를 제공하는 단계,
(b) 담즙염을 포함하고, 박테리아를 용해시켜 할로박테리아 균질물 DN-1이 배지로 방출되도록 하기에 충분히 낮은 NaCl 농도를 갖는 배지에서 박테리아를 에워싸는 단계, 및
(c) 방출된 할로박테리아 균질물 DN-1을 분리시키는 단계를 포함하는, 할로박테리아 균질물 DN-1을 추출하는 방법으로서,
상기 할로박테리아 균질물 DN-1이 고형 종양 축소의 치료적 처리에 적합하고; 추가로 할로박테리아 균질물 DN-1이 방사선 치료에서 고형 종양 축소를 촉진하는, 방법.
제 28항에 있어서, 단계 (b)의 배지가 세척제를 추가로 포함하는 방법.
제 28항에 있어서, 단계 (b)의 배지가 양이온 착화제를 추가로 포함하는 방법.
제 28항에 있어서, 세척제가 음이온 세척제, 양이온 세척제, 비이온 세척제, 및 양쪽성 세척제로 구성된 군으로부터 선택되는 방법.
제 28항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물이 약 2.5 중량%-10 중량%의 양으로 존재하는 방법.
제 28항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물이 치료 용량의 할로박테리아 균질물 DN-1을 포함하는 방법.
제 28항에 있어서, 상기 항산화제 조성물이 고형 종양의 축소에 관해 피검체에 상승적인 치료적 방사선민감성 효과를 제공하는 방법.
제 34항에 있어서, 상기 상승적인 효과가 시험관내 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키는 것에 관해 암 세포에 대한 방사선 치료에 적어도 50% 더 높은 방사선민감성인 방법.
제 34항에 있어서, 상기 상승적인 효과가 종양의 더욱 현저한 회귀에 관해 피검체에 대한 방사선 치료에 더 높은 방사선민감성으로 정의되는 방법.
제 34항에 있어서, 상기 상승적인 효과가 대조군에 비해 수명의 증가로서 정의되는 방법.
제 28항에 있어서, 상기 조성물이 경구 투여되는 방법.
제 38항에 있어서, 상기 경구 투여되는 조성물이 정제, 캡슐, 당의정, 또는 임의의 적합한 경구 형태로 구성된 군으로부터 선택되는 형태인 방법.
제 28항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 5 및 10 Gy의 감마 방사선조사시에 방사선민감성에 대한 변경 효과를 지니는 방법.
제 28항에 있어서, 7% NaCl 상에서 제조된 상기 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1(I)이 약 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 방법.
제 28항에 있어서, 7% NaCl 상에서 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 (I) - 균질물이 16 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 방법.
제 28항에 있어서, 7% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 (II) 균질물이 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 방법.
제 28항에 있어서, 7% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 (II) 균질물이 10 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 방법.
제 28항에 있어서, 3.5% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 (III) - 균질물이 약 10% 종양 세포의 회귀를 발생시키는 방법.
제 28항에 있어서, 3.5% NaCl 상에서 두배 농도의 할로박테리아로 제조된 상기 할로박테리아 추출물, DN-1(III) - 균질물이 10 Gy 초과의 방사선조사 후에 10% 미만의 종양 세포 생존율을 발생시키는 방법.
제 28항에 있어서, 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대한 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물의 효과가 종양 세포의 현저한 회귀를 발생시키는 방법.
제 28항에 있어서, 현탁액에서 방사선조사된 종양 세포의 방사선민감성에 대한 상기 할로박테리아 추출물, DN-1 할로박테리아 균질물의 효과가 포유동물 수명의 증가를 발생시키는 방법.
제 28항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 시험관내 및 생체내 종양 세포의 방사선 손상을 증가시키는 방법.
제 28항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 종양 세포 증식을 감소시키는 방법.
제 28항에 있어서, 상기 할로박테리아 추출물, 할로박테리아 균질물 DN-1이 악성 세포 성장의 억제 효과를 발생시키는 방법.
제 51항에 있어서, 상기 효과가 DN-1 농도 및 치료 지속기간에 비례하여 증가하는 방법.