KR20150030650A

KR20150030650A - Ｇｄ２ 양성암의 치료 방법

Info

Publication number: KR20150030650A
Application number: KR20147033790A
Authority: KR
Inventors: 한스 로이브너; 만프레드 슈스터; 에펠리네 얀체크-하블랏트; 수잔네 붸데르쿰; 베른하드 페발; 스테판 스트라너; 올리버 무췰레흐너; 프란츠 그로이스; 루트 라덴스타인; 홀거 로데
Original assignee: 아페이론 바이오로직스 아게
Priority date: 2012-06-18
Filing date: 2012-07-31
Publication date: 2015-03-20
Also published as: AU2012383254B2; SG10201610532QA; US20230340148A1; US20180134801A1; JP2015521607A; BR112014031806A2; IL235696A0; US20200055953A1; AU2012383254A1; WO2013189516A1; HK1203375A1; SG11201408487WA; CN104487088A; WO2013189554A1; JP6283665B2; KR101927118B1; EA201500019A1; US11447565B2; ZA201407961B; BR112014031806A8

Abstract

본 발명은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 환자에게 하루 24시간에 걸쳐서 연속 정맥 주입으로 투여함으로써 GD2 양성암을 치료하는 방법에 관한 것이다.

Description

ＧＤ２ 양성암의 치료 방법{METHOD FOR TREATING A GD2 POSITIVE CANCER}

본 발명은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 환자에게 하루 24시간에 걸쳐서 연속 정맥 주입으로 투여함으로써 GD2 양성암의 치료 방법에 관한 것이다.

신경모세포종은 뇌종양 후에 5세 미만의 어린이에게서 가장 흔한 고형암이다. 위험성이 높은 신경모세포종에 있어서, 표준 치료를 받은 환자 중 절반 이상은 재발되고, 궁극적으로는 질병으로 사망하게 된다. 대부분의 경우, 90%는 0세~6세 사이에 발생한다. 산업화된 국가에 있어서, 세계적인 발생빈도는 연간 2,000명 정도이다.

종양학에 있어서, 특정 항원에 대한 단클론 항체가 점차 이용되고 있다. 트라스투주맙, 세툭시맙, 베바시주맙, 리툭시맙 등의 종래예에 의해 나타내어지는 바와 같이 세포상해 치료와 비교해서 완전히 다른 활성 방식이 가치있는 자산이 되었다.

본 발명의 디시알로강글리오사이드(GD2)는 세포 표면에서 주로 발현되는 글리코스핑고리피드이다. 정상 세포에서 GD2가 발현되는 일은 거의 없고, 주로 중추신경계(CNS), 말초신경 및 멜라노사이트에 제한된다. 암세포에 있어서, GD2는 신경모세포종 및 대부분의 흑색종에서 균일하게 발현되고, 또한 뼈 및 연조직육종, 소세포폐암, 신세포암종 및 뇌종양에서 다양한 양으로 존재한다(Navid 등, Curr Cancer Drug Targets, 2010년). 세포 표면에서, 그 존재와 관련된 종양의 상대적인 선택적 발현 때문에 항체에 기초한 암 면역요법에 있어서 GD2는 중요한 대상을 나타낸다.

따라서, 복수의 항-GD2 항체에 대하여 신경모세포종, 흑색종 및 기타 GD2 관련 암에 있어서의 전임상 또는 임상 조사를 실시한다.

APN311은 시판되는 항체의 제조를 위해 표준 포유동물 세포주인 차이니즈 햄스터 난소(CHO) 세포에서 재조합에 의해 생성되는 키메라 단클론 항-GD2 항체(ch14.18)의 제제이다. 임상 연구 I상에 있어서, 재발성/불응성 신경모세포종 환자의 관해는 이 항체를 단일 물질로서 사용하여 달성되었다. APN311을 이용한 치료를 포함하는 시험 III상에 대해서는 International Society of Paediatric Oncology European Neuroblastoma(SIOPEN), 2006년에 개시되어 있고, 현재는 IL-2의 피하 주입 또는 IL-2의 피하 주입없이 이소트레티노인, 즉 cis-레티노산(cis-RA)과 함께 APN311을 이용하는 치료와 관련된 무합병증 및 전체 생존률에 미치는 영향을 조사하고 있다. 4종 약물의 치료 패키지, 즉 인터루킨-2(IL-2), 과립대식세포 콜로니-자극 인자(GM-CSF) 및 이소트레티노인의 정맥 투여와 함께 SP2/0 쥐류 히브리도마 세포에서 생성되는 관련 항체를 이용한 미국의 비교 연구에 있어서, 초기 치료요법 후 신경모세포종을 갖는 어린이에게서 질병의 징후가 없는 흥미로운 생존률 개선 및 완전 관해가 나타났다.

APN301은 융합 단백질로서 인간화 항-GD2 항체(hu14.18) 및 IL-2를 포함하는 면역사이토카인의 제제이다. 구체적으로는, 항체 부분은 신경모세포종 및 다수의 다른 암에서 강력하게 발현되는 GD2 항원과 결합한다. IL-2는 다중 면역 작용기 세포 타입을 채용하는 사이토카인이다. 신경모세포종 환자에 있어서, APN301은 항체 성분에 의해 GD2-양성 종양 세포를 편재화하도록 설계되어 있다. 이어서, 융합 IL-2는 NK 세포 및 T 세포 양쪽의 활성에 의해 암에 대한 환자의 면역계를 자극하지만, 상기 항체의 Fc 부분은 항체 의존적 세포독성(ADCC) 및 보체 의존적 세포독성(CDC)에 의해 종양 세포 살해를 촉발하도록 설계되어 있다. 상기 면역사이토카인은 재발성/불응성 신경모세포종을 갖는 어린이의 임상 연구 II상에서 활성을 나타내어 면역 활성을 나타내는 후기 악성 흑색종의 연구 II상에서 테스트되었다(Shusterman 등; JCO, 2010년).

기타 연구 또는 개발 중인 항-GD2 항체는, 예를 들면 단클론 항체 3F8(II상에 있어서의 쥐류 및 I상에 있어서의 인간형) 및 8B6(O-아세틸화 GD2에 특이적, 전임상)이다. 또한, 4B5, 1A7 및 A1G4 등의 항유전자형 항체는 잠재적인 종양 백신으로서 연구 중이지만, 그 개발은 중단될 것으로 보인다. 또한, WO2008/049643에는 GD2 에피토프와 유사한 항유전자형 항체, 즉 GD2 미모토프가 기재되어 있다.

상기 14.18 항-GD2 항체의 다른 버전은 WO2005/070967에 기재된 hu14.18K322A이고, CDC는 감소시키지만 ADCC는 유지시키기 위해, 예를 들면 YB2/0 등의 ADCC를 촉진하기에 적합한 세포주에서 발현됨으로써 Fc 영역에 점돌연변이를 갖는다. 상기 CDC에 있어서의 감소는 항체 치료와 연관이 있는 통증의 감소를 야기하는 것으로 사료된다.

통상, 항체의 항암 활성은 보체 의존적 세포독성(CDC 또는 보체 고정) 또는 항체 의존적 세포매개 세포독성(ADCC) 중 어느 하나에 의해 발생된다. 이들 두 가지 활성은 "작용기 기능"으로서 당업계에 공지되어 있고, 특히 IgG 클래스의 항체에 의해 매개된다. IgG4(IgG1, IgG2, IgG3)를 제외한 IgG 서브클래스는 모두 어느 정도 ADCC 및 보체 고정을 매개하고, 양쪽의 활성에 대해 IgG1 및 IgG3이 가장 잠재적이다. ADCC는 자연 살해(NK) 세포 및/또는 다른 Fc 수용체 베어링 면역 세포(작용기 세포)의 수용체가 세포 표면의 항원과 결합된 항체와 결합할 때에 발생되는 것으로 생각된다. Fc 수용체의 결합은 작용기 세포가 표적 세포를 살해시키도록 시그널을 보낸다. CDC는 복수의 매커니즘에 의해 발생되는 것으로 생각된다; 하나의 매커니즘은 항체가 세포 표면의 항원과 결합할 때에 개시된다. 상기 항원-항체 복합체가 형성되면, Clq 분자는 항원-항체 복합체와 결합하는 것으로 생각된다. 이어서, Clq는 그 자체로 절단되어 효소의 활성 캐스캐이드 및 다른 보체 단백질의 절단을 개시하고, 이어서 표적 세포의 표면에 결합하여, 예를 들면 세포용해 또는 마크로파지에 의한 섭식에 의해 세포사를 용이하게 한다.

그러나, CDC는 특히 항-GD2 항체에 있어서 통증의 부작용을 야기하는 것으로 생각된다. WO2005/070967에 기재된 바와 같이, 이 방법이 세포막에서의 채널의 생성을 포함하여 제어되지 않는 이온 플럭스를 허용하기 때문에, 뉴런은 특히 보체 고정에 대하여 민감할 수 있다. 통증 검출 뉴런에 있어서, 소량의 보체 고정이라도 활동 전위를 생성하는데 중요할 수 있다. 따라서, 뉴런에 결합하는 소량의 항-GD2 항체로부터 얻어지는 CDC가 통증을 야기할 수 있다.

따라서, 종래 기술은 보체 고정을 감소시키는 것이 환자에게서 부작용의 레벨을 감소시켜 유리하지만, 항-GD2 항체의 항암 활성은 주로 ADCC로부터 야기되고 실질적으로 보체 고정으로부터 야기되지 않는다는 것을 알려준다(WO2005/070967 참조).

한편, 본 발명의 중요한 형태는 CDC 어세이 또는 전혈 테스트(WBT)에 의해 결정되는 항-GD2 항체의 세포용해능이 항-GD2 항체의 항암 효과에 대해서 필수적이라는 것이다. 이러한 WBT 어세이는 CDC 또는 ADCC 어세이와 대조적으로 헤파린 처리된 전혈 샘플의 용해율을 측정한다. 따라서, 단지 단일 작용기 매커니즘에만 초점을 맞추지 않고, 생리학적 설정으로 ADCC 및 CDC의 조합(및 종양 세포에 대한 용해능과 관련될 수 있는 헤파린 처리된 전혈 샘플에 존재하는 기타 성분 및/또는 매커니즘)을 측정한다. 따라서, 본 발명의 방법에 의해 CDC 어세이 또는 WBT에 의해 결정되는 표적 세포용해에 요구되는 최소 용량까지 항체의 용량을 감소시키는 것이 가능해진다. 또한, 본 발명의 방법은 효과적인 항체 용량을 개별적으로 결정함으로써 환자의 항암 관해에 있어서의 각각의 차이를 고려한다. 본 발명의 또 다른 중요한 형태는 CDC 및/또는 전혈 세포독성 활성을 유도하기 위해 투여되는 항-GD2 항체의 임계 용량을 결정함으로써 통증의 부작용을 감소 및 관리하는 것이 가능하다는 것이다. 본 발명의 또 다른 중요한 발견은 소정의 전체 환자 용량이 투여될 때까지 연속 주입해서 항-GD2 항체를 투여함으로써 통증의 부작용이 실질적으로 감소될 수 있다는 것이다. 따라서, 본 발명에 따른 방법에 의해 항체 치료시에 실질적으로 진통제의 투여, 특히 모르핀 등의 강력한 진통제의 투여를 감소시킴으로써, 이러한 진통제 투여의 부작용을 실질적으로 감소시키는 것이 가능해진다.

하나의 실시형태에 있어서, 본 발명은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 환자에게 하루 24시간 연속 정맥 주입으로 투여함으로써 GD2 양성암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 미니 펌프를 사용하여 투여될 수 있고, 소정의 전체 환자 용량이 투여될 때까지 치료 기간 동안 투여될 수 있다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 환자에게 투여함으로써 GD2 양성암을 치료하는 방법에 관한 것이고, 상기 조제물은 종양 세포용해를 유도하기에 충분한 용량(세포용해 임계 용량)으로 투여되고, 상기 세포용해 임계 용량은 소정의 전체 환자 용량이 투여될 때까지 치료 기간 동안 투여된다.

본 발명과 관련된 실시형태에 있어서, 본 발명은 상기 치료에 이용되는 항-GD2 항체를 제공한다. 또 다른 관련 실시형태에 있어서, 본 발명은 상기 치료를 위한 의약품의 조제에 있어서의 항-GD2 항체의 용도를 제공한다. 본 발명은 청구범위에 의해 규정되어 있다. 본원에 더 기재되는 본 발명의 모든 바람직한 실시형태는 동등하게 본 발명의 모든 실시형태에 관한 것이다.

도 1은 APN311의 존재 하에서 2명의 건강한 공여체의 WBT(헤파린 처리된 전혈, ⁵¹Cr 표지의 표적 인간 신경모세포종 세포를 사용함) 및 CDC 어세이(헤파린 처리된 혈장, ⁵¹Cr 표지의 표적 인간 신경모세포종 세포를 사용함)의 결과를 나타내는 도면이다. 알 수 있는 바와 같이, 2명의 공여체 사이에 WBT 용해에 있어서의 실질적인 차이가 있다: 2 대 10ng/mL 전혈의 APN311 농도에서 50%의 용해에 도달한다. 그러나, CDC에 있어서는 차이가 없다: 1,000ng/mL 혈장의 APN311 농도에서 50%의 용해에 도달된다. 양쪽의 어세이(WBT 및 CDC 어세이)에 있어서 동일한 인큐베이션 시간(20시간)뿐만 아니라 동일한 보체의 최종 농도가 이용되었다.
도 2는 APN301 또는 APN311의 존재 하에서 1명의 건강한 공여체의 WBT(헤파린 처리된 전혈, ⁵¹Cr 표지의 표적 인간 신경모세포종 세포를 사용함) 및 CDC 어세이(헤파린 처리된 혈장, ⁵¹Cr 표지의 표적 인간 신경모세포종 세포를 사용함)의 결과를 나타내는 도면이다. 2종의 조제물 사이에 WBT 용해에 있어서의 실질적인 차이가 있었다: 21ng/mL 전혈의 APN311 농도와 234ng/mL 전혈의 APN301 농도에서 50%의 용해에 도달된다. 그러나, CDC에 있어서의 실질적인 차이는 거의 없었다: 470ng/mL 혈장의 APN311 농도와 619ng/mL 혈장의 APN301 농도에서 50%의 용해에 도달한다.
도 3은 APN311 5㎍/mL이 첨가된 건강한 공여체의 전혈 또는 혈장을 이용한 WBT 및 CDC 어세이의 결과를 APN311을 이용하여 치료받은 환자의 전혈 또는 혈장과 비교하여 나타내는 도면이다. 상기 환자의 샘플은 치료 사이클의 17일, 즉 APN311을 이용한 치료 주기의 종료시에 채취하였고, 이 경우에 있어서 치료 사이클은 8일~18일이다.
도 4는 도 3에 나타낸 WBT의 결과를 표적 세포용해를 억제하는 특이적 항유전자형(항-ID) 항체가 5배 초과하여 첨가된 동일한 샘플과 비교하여 나타내는 도면이다.
도 5는 도 3에 나타낸 CDC 어세이의 결과를 표적 세포용해를 억제하는 특이적 항-ID 항체가 5배 초과하여 첨가된 동일한 샘플과 비교하여 나타내는 도면이다.
도 6은 환자의 혈청에 있어서의 APN311의 약물동태를 나타내는 도면이다. 상기 평균 혈청 레벨의 수는 상기 평균에 포함되는 샘플 채취일의 환자의 수를 나타낸다. 상기 APN311의 치료 기간은 8일~18일이었고, IL-2의 2회의 치료 기간은 치료 사이클의 1일~5일 및 8일~12일이었다.
도 7은 칼세인 방출 CDC 어세이에 의해 측정되는 APN311을 이용하여 치료되는 37명의 환자의 치료 사이클의 1, 8 및 15일째의 CDC 어세이 결과를 나타내는 도면이다.
도 8 및 도 9는 다른 치료와 병행되는 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료에 대한 개략적인 치료 스케쥴의 예를 나타내는 도면이다.
도 10은 37명의 환자의 APN311 연속 주입시의 소정의 표준 주입 속도(30mcg/kg/h)의 모르핀 사용(%)(평균값)을 나타내는 도면이다. 항체 주입은 항상 8일째에 개시되었다.
도 10~도 16은 다른 단계의 치료 사이클의 환자의 혈액 샘플을 이용하여 얻어지는 세포용해 결과를 나타내는 도면이다. 상기 데이터는, 즉 미니 펌프에 의해 10일 연속 정맥 주입되는 100mg/㎡/사이클의 용량의 APN311, 6×10⁶IU/㎡/일의 용량으로 5일씩 2회, 1 사이클당 10일 피하 투여되는 60×10⁶IU/㎡/사이클의 용량의 알데스루킨(IL2), 및 14일 동안(1일 1회) 160mg/㎡/일의 용량으로 경구 투여되는 2,240mg/㎡/사이클의 용량의 13-cis 레티노이드산(이소트레티노인)을 투여하는 치료 스케쥴을 나타내는 표준 형식으로 나타낸다. 전체 치료 시간은 사이클당 35일을 포함하고, 36일은 제 2 치료 사이클의 제 1 일이다. APN311을 이용한 치료 기간의 시작(즉, 제 1 일에)에 채취하는 혈액 샘플은 APN311 치료의 시작 전에 채취하였다(도 8 참조).
도 17은 2종의 다른 스케쥴(SIOPEN 시험 I상용: 5일 연속 8시간 항체 주입; 연속 주입 시험 스케쥴용: 10일 연속 24시간 항체 주입)에 있어서의 항체 주입시에 투여되는 모르핀의 초기 주입 속도뿐만 아니라, 추가 모르핀 투여(단회 주입) 및 필요로 하는 모르핀 주입 속도 또는 모르핀 용량으로의 증가를 나타내는 도면이다.

예를 들면, CDC 어세이 또는 WBT 중 어느 하나에 의해 측정되는 세포용해능에 의해 결정되는 용량의 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료는, 특히 통증 등의 부작용에 대하여 암치료에 유리한 효과를 갖는 것이 놀랍게도 밝혀졌다. 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 CDC 및/또는 전혈 세포용해를 유도하기에 충분하지만 가능한 한 적은 용량으로 투여되며, 소정의 전체 환자 용량이 투여될 때까지 치료 기간 동안 상기 세포용해 임계 용량으로 투여되면 통증을 실질적으로 감소시켜 모르핀 또는 기타 진통제의 투여를 실질적으로 감소시키거나 중지시킬 수 있다.

하나의 실시형태에 있어서, 본 발명은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 환자에게 하루 24시간에 걸쳐서 연속 정맥 주입으로 투여함으로써 GD2 양성암을 치료하는 방법에 관한 것이다. 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 소정의 전체 환자 용량이 투여될 때까지 치료 기간 동안 투여될 수 있다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 환자에게 투여함으로써 GD2 양성암을 치료하는 방법에 관한 것이고, 상기 조제물은 종양 세포용해를 유도하기에 충분한 용량(세포용해 임계 용량)으로 투여되고, 또한 상기 세포용해 임계 용량은 소정의 전체 환자의 용량이 투여될 때까지 투여된다.

다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 환자에게 종양 세포용해를 유도하기에 충분한 용량(세포용해 임계 용량)으로 투여되고, 상기 조제물은 하루 24시간에 걸쳐서 연속 정맥 주입으로 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 환자에게 종양 세포용해를 유도하기에 충분한 용량(세포용해 임계 용량)으로 투여되고, 상기 조제물은 하루 24시간에 걸쳐서 연속 정맥 주입으로 투여되고, 또한 세포용해 임계 용량은 상기 소정의 전체 환자 용량이 투여될 때까지 투여된다.

특정 실시형태에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 치료학적 유효량이다. 상기 치료학적 유효량은 환자의 혈청 또는 혈장 또는 헤파린 처리된 전혈을 사용한 CDC 어세이 또는 WBT에 의해 결정될 수 있다. 다른 실시형태에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은, 예를 들면 CDC 어세이 또는 WBT에서 특정 레벨의 세포용해를 유도하도록 결정되는 최소 용량 등의 최소 세포용해 임계 용량이다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 특이적 CDC 어세이 또는 WBT 어세이에 있어서 각 어세이에서 가능한 최대 목표 세포용해율의 30%를 유도하도록 결정되는 용량이다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 각 어세이(특이적 CDC 어세이 또는 WBT 어세이)에서 가능한 최대 목표 세포용해율의 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95%, 100% 또는 이들 레벨 사이의 임의의 범위를 달성하는 용량이다. 예를 들면, 실시예 2 및 실시예 3에서 행해지고, 도 1, 도 2 및 도 7에 나타낸 바와 같이 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 여러 농도로 공여체의 혈액 또는 혈장에 첨가되거나, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용하여 치료된 환자의 혈액 또는 혈장에 이미 존재하거나 하여 CDC 또는 전혈 용해 곡선을 결정한다. 상기 측정되는 항-GD2 항체의 농도 사이의 곡선을 도시함으로써, 특정 임계 세포용해(예를 들면, 가능한 최대 목표 세포용해율의 50%)를 달성하는 항-GD2 항체의 용량 또는 농도를 결정할 수 있다. 도 1의 실시예에 있어서, 50%의 임계 세포용해율(예를 들면, 가능한 최대 목표 세포용해율의 50%)은 WBT에 있어서의 각 공여체의 2 또는 10ng/mL 전혈의 농도 또는 CDC 어세이에 있어서의 혈청 또는 1,000ng/mL 혈장의 농도에서 달성된다. 이 예에 있어서, 상기 임계 세포용해율은 50%이다.

본원에서 사용되는 용어 "임계 세포용해율" 및/또는 "세포용해의 레벨"이란 상기 CDC 어세이 또는 WBT에 있어서의 혈청, 혈장 또는 전혈에 있어서 세포용해 임계 용량을 결정하도록 특정된 특이적 CDC 어세이 또는 WBT에 있어서의 표적 세포용해의 레벨을 의미한다.

다른 실시형태에 있어서, 임계 세포용해율은 전체 치료 시간 내에 하나 이상의 시간 기간 동안에도 유지되고, 환자는, 즉 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 치료 기간 사이의 구간에는(즉, 환자가 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용하여 전체 치료 시간에 걸쳐서 연속적으로 치료받지 않는 경우에는) 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용하여 치료되지 않는다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 세포용해의 레벨은 전체 치료 사이클에 걸쳐서 유지된다. 다른 실시형태에 있어서, 상기 세포용해의 레벨은 전체 치료 시간에 걸쳐서 유지된다.

도 11, 도 13 및 도 15에서 알 수 있는 바와 같이, 30%와 50% 사이의 증가된 세포용해 레벨은 환자가 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용하여 치료되지 않는 구간에 걸쳐서도 유지되었다.

하나의 실시형태에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 각 환자에 대해 개별적으로 결정된다.

본원에서 사용되는 용어 "소정의 전체 환자 용량"은 이하에 더 명시되는 바와 같이 치료 사이클당 전체 환자 용량을 의미한다.

본원에서 사용되는 용어 "환자"는 암, 특히 GD2 양성암을 앓고 있는 동물 또는 인간 피험체를 의미한다.

본원에 범위가 제공되는 경우, 이러한 임의의 범위는 소정 범위(즉, 범위의 하한치 및 상한치) 사이의 임의의 범위를 포함한다. 예를 들면, 범위가 1~5일 등으로 제공되는 경우, 1, 2, 3, 4 및 5일을 포함할 수 있다. 다른 시간 기간(예를 들면, 시간 내의 주입 시간), 임의의 용량 범위(예를 들면, 체표면적(㎡)당, 체중(kg)당, 치료 사이클당 등), 주입 속도, 농도, 백분률, 배수, 비율 및 수를 포함하는 임의의 다른 범위에 대해서도 동일하게 적용되지만, 이것들에 한정되지 않는다.

상기 세포용해 임계 용량은 보체 의존적 세포용해(CDC) 어세이 또는 전혈 테스트(WBT)에 의해 결정된다. 상기 WBT는 표적 세포 또는 표적 성분(즉, 용해되는 세포, 리포솜 또는 다른 세포 유사 구획물)을 환자의 항응집 전혈과 적절하게 접촉시키는 어세이이다. 상기 CDC 어세이는, 예를 들면 당업계에 공지된 표준 CDC 어세이일 수 있다(예를 들면, Indusogie 등, J Immunol, 2000년, Zeng 등, Molecular Immunology, 2005년 또는 WO2005/070967에 기재됨). 상기 CDC 어세이 및/또는 WBT는 치료되는 GD2 양성암의 암세포주 등의 GD2 양성 표적 세포를 이용하여 행해질 수 있다. 예를 들면, 치료해야 하는 환자가 신경모세포종을 앓고 있는 경우, 세포주는 LAN-1 인간 신경모세포종 세포 등의 신경모세포종 세포주일 수 있다. 다른 예에 있어서, 치료해야 하는 환자가 흑색종을 앓고 있는 경우, 세포주는 M21 인간 흑색종 세포 등의 흑색종 세포주일 수 있다. 또 다른 실시형태에 있어서, 상기 CDC 어세이 및/또는 WBT의 표적 세포는 환자로부터 얻어지는 암세포, 즉 환자의 자가 조직 암세포이다. 다른 실시형태에 있어서, 상기 CDC 어세이 및/또는 WBT의 표적 성분은 표면에 GD2가 배치되는 리포솜이다. 상기 표적 세포 또는 표적 성분은 시그널링 성분, 예를 들면 ⁵¹Cr 등의 방사성 성분 또는 칼세인 등의 형광 성분으로 표지되어 있다. 상기 시그널링 성분은 표적 세포 또는 표적 성분에 의해 포함되고, 즉 표적 세포 또는 표적 성분(예를 들면, 시그널링 성분으로 충진되고, 표면에 GD2가 배치되는 리포솜)의 내부에 있어 표적 세포 또는 표적 성분의 용해시에 방출된다. 따라서, 시그널링 성분은 어세이 판독을 제공한다. 상기 시그널링 화합물이 충진된 표적 세포 또는 표적 성분은 특정 비율로 전혈, 혈청 또는 혈장과 접촉된다. 상기 CDC 또는 WBT를 위한 전혈, 혈장 또는 혈청은 샘플에 첨가하기 전에, 예를 들면 1:2 이상의 비율로, 예를 들면 1:4, 1:5 또는 1:10, 또는 이들 비율 사이의 임의의 범위로 희석되어도 좋다. 그러나, 희석되지 않은 샘플을 첨가하여도 좋다. 상기 CDC 또는 WBT 샘플에 있어서의 전혈, 혈장 또는 혈청의 최종 농도는 10~50%의 범위 내에 있을 수 있다. 표적 세포 또는 표적 성분의 용해는 신틸레이션 계수기 또는 분광 광도계에 의한 상기 시그널링 성분의 방출에 의해 측정될 수 있다. 예를 들면, 상기 표적 세포 또는 표적 성분의 용해는 신틸레이션 계수기에 의해 상등액으로 방출되는 ⁵¹Cr의 양을 결정함으로써 측정될 수 있다. 상기 용해의 백분률은 하기 식에 의해 결정될 수 있다: 100×(실험 방출-자발적 방출)/(최대 방출-자발적 방출).

상기 CDC 어세이를 위한 세포용해 성분(또는 작용기 성분)은 보체계 성분을 포함하는 환자 또는 공여체로부터 얻어지는 혈청 또는 적절하게 항응집되는 혈장에 의해 제공된다. 상기 WBT를 위한 세포용해 성분(또는 작용기 성분)은 보체계 성분뿐만 아니라 세포 성분을 포함하는 환자 또는 공여체로부터 얻어지는 적절하게 항응집되는 전혈, 또한 표적 세포용해와 관련될 수 있는 전혈에 포함되는 성분뿐만 아니라 모든 성분의 상호작용(예를 들면, 보체 활성은 과립구 등의 특정 작용기 세포를 활성화시키는 것이 알려져 있음)에 의해 제공된다. 상기 CDC 및/또는 WBT를 위한 혈청, 혈장 또는 전혈을 다른 희석률로 표적 세포 또는 표적 성분에 첨가할 수 있다.

또한, CDC 어세이 및 WBT의 하나 이상의 샘플에는, 예를 들면 표준 곡선의 생성을 위해 다른 희석률로 항-GD2 항체를 첨가할 수 있다.

다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체의 가변성 도메인을 인식하는 하나 이상의 항유전자형(항-id) 항-GD2 항체는, 예를 들면 음성 대조군으로서 항체에 의해 매개되는 표적 세포용해를 억제하거나, 어세이의 특이성을 입증하기 위해 샘플에 첨가될 수 있고, 항-id 항체없이 측정되는 표적 세포용해는 항체 매개 또는 항체 의존적이다.

상기 환자의 세포용해 임계 용량이 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료의 시작 전에 결정되는 경우, 항-GD2 항체 또는 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 CDC 어세이 및/또는 WBT의 샘플에 다른 희석률로 첨가(환자의 혈청, 혈장 또는 혈액에 첨가)되어 세포용해 임계 용량이 결정될 수 있다.

본원에 더 기재된 바와 같이, 상기 임계 용량의 결정을 위한 표적 세포는 동일한 표현형의 인간 암세포주(예를 들면, 섬유아세포종 환자의 경우에는 인간 섬유아세포종 세포), 또는 가능하다면 환자의 자가 조직 암세포이어도 좋다.

상기 환자의 세포용해 임계 용량이 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료시에 결정되는 경우, 환자의 혈청, 혈장 또는 전혈(항-GD2 항체를 포함함)은 CDC 어세이 및/또는 WBT의 샘플(별도로 항-GD 항체를 첨가지 않음)에 다른 희석률로 첨가되어 세포용해 임계 용량이 결정될 수 있다.

상기 CDC 및/또는 전혈 세포용해를 유도하기에 충분한 용량은 각 어세이(특이적 CDC 어세이 또는 WBT)에 있어서의 가능한 최대 목표 세포용해율의 적어도 20, 25, 30, 35, 40, 45 또는 50%, 또는 이들 레벨 사이의 임의의 범위에 도달하는 용량으로서 정의될 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 용량은 각 어세이(특이적 CDC 어세이 또는 WBT)에 있어서의 가능한 최대 세포용해의 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 100%, 또는 이들 레벨 사이의 임의의 범위에 도달하는 용량으로서 정의된다.

상기 특이적 CDC 어세이 또는 WBT에서 결정되는 세포용해 임계 용량은 항-GD2 항체의 혈청 레벨, 혈장 레벨 및/또는 혈액 레벨이다. 이어서, 이러한 혈액, 혈장 및/또는 혈청 항체 레벨을 달성하도록 환자에게 투여되는 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 용량은 상기 조제물의 약물동태 데이터에 따라서 결정된다. 도 1 및 도 2에 나타내는 바와 같이, 470~1,000ng/mL 혈청 또는 혈장의 낮은 항체 레벨은 CDC 어세이에 있어서 적어도 50%의 암세포용해를 유도하기에 충분하다(예를 들면, APN311 470ng/mL(도 2) 또는 1,000ng/mL(도 1) 및 APN301 619ng/mL(도 2)). 따라서, 본 발명의 하나의 실시형태에 있어서, 세포용해 임계 용량은 470~1,000ng/mL, 또는 470~10,000ng/mL 혈청 또는 혈장, 또는 이들 레벨 사이의 임의의 범위이다.

특정 세포용해 임계 용량이 CDC 어세이 또는 WBT, 특히 환자의 암세포 이외의 표적 세포가 사용되는 이러한 어세이에서 결정되면, 시험관내(in vitro)에서 결정되는 상기 세포용해 임계량(시험관내 세포용해 임계 용량)은 항체 용량이 생체내(in vivo)에서 환자의 암세포의 세포용해를 유도하기에 충분하도록 일정한 유의적 차이로 증가될 수 있다. 따라서, 시험관내 세포용해 임계 용량은 1~10배 또는 이들 배수 사이의 임의의 범위로 증가될 수 있다.

특정 실시형태에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 1,410~3,000ng/mL 또는 2,350~5,000ng/mL 혈청 또는 혈장, 또는 이들 레벨 사이의 임의의 범위이다.

상기 환자에게 투여되는 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 용량이 결정되면, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료의 초기 1~4일 내에(예를 들면, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간의 1일, 2일, 3일 또는 4일에) 상기 혈청 또는 혈장 레벨을 달성하는 용량으로 투여되고, 상기 혈청 또는 혈장 레벨은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 전체 치료 기간에 걸쳐서 유지된다. 도 1 및 도 2에 나타내는 바와 같이, 2~234ng/mL 전혈의 낮은 항체 레벨은 WBT에서 적어도 50%의 종양 세포용해를 유도하기에 충분하다(예를 들면, APN311 2ng/mL(도 1), 10ng/mL(도 1) 또는 21ng/mL(도 2) 및 APN301 234ng/mL(도 2)). 따라서, 본 발명의 하나의 실시형태에 있어서의 세포용해 임계 용량은 2~250ng/mL 전혈 또는 2~2,500ng/mL 전혈, 또는 이들 레벨 사이의 임의의 범위이다. 특정 실시형태에 있어서, 세포용해 임계 용량은 2~100ng/mL 전혈 또는 5~200ng/mL 전혈, 또는 이들 레벨 사이의 임의의 범위이다. 다른 실시형태에 있어서, 세포용해 임계 용량은 6~750, 6~7,500, 10~1,250, 10~12,500, 6~300, 10~500, 15~600 또는 25~1,000ng/mL 전혈이다.

상기 환자에게 투여되는 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 용량이 결정되면, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료의 초기 1~4일 내에(예를 들면, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간의 1일, 2일, 3일 또는 4일에) 상기 전혈 레벨을 달성하는 용량으로 투여되고, 상기 혈청 또는 혈장 레벨은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 전체 치료 기간에 걸쳐서 유지된다. 도 6에서 알 수 있는 바와 같이, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 미니 펌프를 사용하여 연속 정맥 주입하여, 즉 하루 24시간 동안 10mg/㎡/일의 용량으로 투여하는 경우, 1,000ng/mL(또는 1㎍/mL)의 혈청 레벨은 항-GD2 항체 치료의 제 1 일 또는 제 2 일 내에 달성될 수 있다. 따라서, 하나의 실시형태에 있어서 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 연속 정맥 주입(24h/일)으로 5, 7, 10 또는 15mg/㎡/일, 또는 이들 용량 사이의 임의의 범위, 특히 10mg/㎡/일로 투여된다. 하나의 실시형태에 있어서, 세포용해 임계 용량은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료의 제 1 일, 제 2 일, 제 3 일 또는 제 4 일 내에 달성된다. 도 7은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을, 즉 미니 펌프를 사용하여 하루 24시간 동안 10mg/㎡/일의 용량으로 연속 정맥 주입으로 투여하는 경우, 50%의 세포용해가 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료의 제 3 일 또는 제 4 일 내에 달성될 수 있는 것을 나타낸다.

본 발명의 방법에 의해 CDC 어세이 또는 WBT에 의해 결정되는 종양 세포용해 및/또는 표적 세표 용해에 요구되는 최소 용량까지 항체 용량을 감소시키는 것이 가능하다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 CDC 어세이 및/또는 WBT에 의해 결정되는 항체의 세포용해 임계 용량은 50, 40, 30, 25, 20, 15, 10, 7, 5mg/㎡/일 또는 이들 용량 사이의 임의의 범위 미만이다. 또한, 본 발명의 방법은 CDC 어세이 및/또는 WBT에 의해 세포용해 임계 용량을 개별적으로 결정하여 환자의 종양 세포에 대한 용해능의 개별적인 차이를 고려한다. 따라서, 환자는 각각 잠재적인 부작용, 특히 통증을 최소화할 수 있을 만큼의 적은 양이지만 종양 세포용해에는 효과적인 각각의 최적의 항체 용량을 투여받을 수 있다.

상기 조제물은 그것을 필요로 하는 피험체에게 투여될 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 피험체는 GD2 양성암 환자이다. GD2 양성암은 GD2가 종양 세포에서 발현되고, 예를 들면, 신경모세포종, 교모세포종, 수모세포종, 성상세포종, 흑색종, 소세포폐암, 결합조직성 소원형 세포종양, 골육종, 횡문근육종 및 다른 연조직육종을 포함하는 암의 일종이다. 하나의 실시형태에 있어서, 환자는 주로 불응성 또는 재발성의 위험성이 높은 신경모세포종 또는 위험성이 높은 신경모세포종에 있어서의 최소한의 잔여 질병을 앓고 있다. 상기 환자는 사전 치료를 받거나, 예를 들면 수술, 화학요법, 방사선, 줄기세포 이식, 사이토카인 치료(예를 들면, IL-2 및/또는 GM-CSF) 및/또는 레티노이드 치료(예를 들면, 이소트레티노인) 등의 다른 요법과 동시에 치료될 수 있다.

상기 항체는 단일쇄 항체, 포유류 항체, 인간 또는 인간화 항체를 포함하는 재조합 항체 또는 인공 항체의 군에서 선택될 수 있다. 특히, Fc, Fc 유사, Fv, Fab, F(ab)2, Fab', F(ab')2, scFv, scfc, VHH에서 선택되는 항체의 불변부 및/또는 가변부에서 선택 또는 포함될 수 있다. 그러나, 이러한 항체 단편은 보체 결합에 반응성이 있어서 자연(또는 생체내) 작용기 기능을 매개할 수 있는 Fc 부분을 포함할 수 있다. 상기 항체는 항체의 경쇄 및 중쇄를 포함하는 것이 바람직하다. 상기 항체는 같은 항원 또는 다른 항원을 결합할 수 있는 1개 또는 2개의 항원 결합 영역, 예를 들면 특이적으로 결합할 수 있는 GD2를 포함할 수 있다. 본 발명의 항체는, 예를 들면 상기 정의된 바와 같은 항원에 대한 면역화에 의해 직접 생성될 수 있다. 상기 항-GD2 항체는 인간화 또는 키메라 GD2 항체, 예를 들면 인간화 또는 키메라 14.18, 3F8 또는 8B6 항체이거나, 자연 작용기 기능을 매개하는 항원 결합 단편일 수 있다. 상기 항-GD2 항체는, 예를 들면 변성 Fc 영역 등의 하나 이상의 아미노산 변성부를 갖는다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체는 hu14.18K322A이다. 또 다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체는 키메라 14.18 항체이다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체는 SEQ ID NO:1의 경쇄 뉴클레오티드 시퀀스(실시예 1 참조) 및 SEQ ID NO:2의 중쇄 뉴클레오티드 시퀀스(실시예 1 참조)를 갖는다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체는 SEQ ID NO:3의 경쇄 아미노산 시퀀스(실시예 1 참조) 및 SEQ ID NO:4의 중쇄 아미노산 시퀀스(실시예 1 참조)를 갖는다. 상기 2개의 경쇄 및 2개의 중쇄로 이루어지는 항체의 상대 분자 질량은 대략 150,000달톤일 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체는 APN311이다. 상기 항-GD2 항체는 CHO 세포, SP2/0 세포, 또는 HEK-293, MRC-5, Vero, PerC6 또는 NS0 등의 다른 적합한 세포주에서 발현될 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체는 SP2/0 세포에서 발현되는 키메라 14.18 항체이다. 또 다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체는 CHO 세포에서 발현되는 키메라 14.18 항체이다.

또한, 상기 항-GD2 항체는 항-GD2 항체(또는 자연 작용기 기능을 매개하는 항원 결합 단편)와 사이토카인의 융합 단백질을 포함하는 면역사이토카인일 수 있다. 상기 면역사이토카인의 항체 부분은 인간화 또는 키메라 GD2 항체, 예를 들면 인간화 또는 키메라 14.18, 3F8 또는 8B6 항체일 수 있다. 상기 면역사이토카인 단백질의 항체 부분은, 예를 들면 변성 Fc 영역 등의 하나 이상의 아미노산 변성부를 갖는다. 하나의 실시형태에 있어서, 면역사이토카인의 항체 부분은 hu14.18K322A이다. 또 다른 실시형태에 있어서, 상기 면역사이토카인의 항체 부분은 인간화 14.18 항체이다. 상기 항-GD2 항체-사이토카인 융합 단백질의 사이토카인 부분은, 예를 들면 IL-2 또는 인터루킨-12(IL-12), 또는 IL-15 또는 GM-CSF일 수 있다. 상기 항원 및 사이토카인은 함께 융합되어 링커 시퀀스를 포함할 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 면역사이토카인은 SEQ ID NO:5의 경쇄 뉴클레오티드(실시예 1 참조) 및 SEQ ID NO:6의 중쇄 뉴클레오티드(실시예 1 참조)를 갖는다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 면역사이토카인은 SEQ ID NO:7의 경쇄 아미노산 시퀀스(실시예 1 참조) 및 SEQ ID NO:8의 중쇄 아미노산 시퀀스(실시예 1 참조)를 갖는다. 하나의 실시형태에 있어서, 면역사이토카인은 APN301이다. 상기 면역사이토카인은 NS0 세포, 또는 CHO, HEK-293, MRC-5, Vero 또는 PerC6 등의 다른 적합한 세포주에서 발현될 수 있다.

특정 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체는 다른 부위와 융합되지 않는다. 특정 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체는 면역사이토카인이 아니다.

상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 염 및 WFI를 더 포함할 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 완충액, 예를 들면 상기 염 및 WFI를 포함하는 인산염 완충 식염수를 더 포함할 수 있다.

상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 안정제, 보존제 및 다른 캐리어 또는 부형제를 더 포함할 수 있다.

상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 동결건조되어도 좋다.

하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 항-GD2 항체-사이토카인 융합체(예를 들면, hu14.18-IL-2)를 포함하고, 수크로오스, L-아르기닌, 시트르산 모노하이드레이트, 폴리소르베이트 20 및 염산을 더 포함한다. 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 APN301이고, 상기 항-GD2 항체는 hu14.18-IL-2이고, 상기 조제물은 면역사이토카인 4mg/mL, 수크로오스 20mg/mL, L-아르기닌 13.9mg/mL, 폴리소르베이트 20 2mg/mL 및 시트르산 모노하이드레이트 2.1mg/mL을 포함한다. 실시형태에 있어서, 상기 면역사이토카인 및 기타 부형제를 포함하는 조제물은 동결건조되고, 0.9% 소듐 클로라이드 4mL로 재구성될 수 있으며, 또한 얻어진 용액은 pH5.5이다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 안정제, 보존제 및 기타 부형제를 포함하지 않는다. 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 주입백, 예를 들면 0.9% NaCl 100mL 및 20% 인간 알부민 5mL를 함유하는 주입백에 첨가될 수 있다.

상기 항-GD2 항체 또는 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 1일 1~30mg/㎡, 1~35mg/㎡, 1~50mg/㎡ 또는 1~60mg/㎡의 항체 용량, 예를 들면 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 12, 15, 20, 25, 30, 32, 35, 40, 45, 50 또는 60mg/㎡, 또는 이들 레벨 사이의 임의의 범위로 투여될 수 있다. 예를 들면, 1일 10mg/㎡의 용량이란 환자가 1일마다 체표면적(㎡)당 10mg의 항-GD2 항체를 투여받는 것을 의미한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용량(예를 들면, mg 또는 마이크로그램으로 표시)은 활성 성분의 용량, 즉 조제물 중의 활성 성분의 양을 말한다. 예를 들면, 표시된 용량은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물 중의 항-GD2 항체의 양, 또는 면역사이토카인을 포함하는 조제물 중의 면역사이토카인의 양 또는 사이토카인을 포함하는 조제물 중의 사이토카인의 양을 말한다. 상기 예에서 명시한 바와 같이, 1일 10mg/㎡의 용량은 환자가 1일마다 체표면적(㎡)당 10mg의 항-GD2 항체(항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 특정 체적으로 선택적으로 함유함)를 투여받는 것을 의미한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, ㎡당 제시된 용량은 환자의 체표면적(BSA)(㎡)당 용량을 의미한다. 본원에 사용되는 바와 같이, 표시된 kg당 용량은 환자의 체중(kg)당 용량을 의미한다.

다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 1일 1~15, 1~20, 1~25, 1~30 또는 1~35mg/㎡의 용량, 또는 이들 1일 용량 사이의 임의의 범위로 투여된다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 1일 50, 40, 30 또는 25mg/㎡ 미만의 용량으로 투여된다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 1일 최대 7, 10, 15 또는 20mg/㎡의 용량으로 투여된다. 상기 항-GD2 항체는 10, 20, 25, 50, 60, 75, 80, 100, 120, 150, 200, 210, 250 또는 300mg/㎡/사이클의 용량, 또는 이들 용량 사이의 임의의 범위로 투여될 수 있다. 상기 치료 사이클당 환자당 총용량은 소정의 전체 환자 용량으로서 정의될 수 있다.

다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 특정 치료학적 효과에 도달할 때까지 치료 기간 동안 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 상기 치료학적 효과는, 예를 들면 면역계 바이오마커(예를 들면, 림프구 카운트 및/또는 NK 세포수; 및/또는 사이토카인 등의 혈액 파라미터)의 증가에 의해 결정되는 암에 대한 면역 반응의 증가일 수 있다. 다른 실시형태에 있어서, 치료학적 효과는 암 마커(예를 들면, 카테콜아민)의 감소일 수 있다. 다른 실시형태에 있어서, 치료학적 효과는 메타요오드벤질구아니딘 신티그래피(mIBG), 자기 공명 화상법(MRI) 또는 X선 컴퓨터 단층촬영(CT) 및/또는 골수 조직 검사(아스피레이트 또는 트레핀 생검에 의한 평가) 등의 방법에 의해 결정될 수 있다.

특정 실시형태에 있어서, 상기 치료학적 효과는 안정 병변(즉, 병변부, 암조직 및/또는 크기의 증가가 더 증가하지 않음), 부분 관해(즉, 병변부, 암조직 및/또는 크기의 감소) 및/또는 완전 관해(즉, 모든 병변부 및 암조직의 완전 관해)로서 규정될 수 있다.

완전 관해(CR)는 다음과 같이 더 규정될 수 있다.

·모든 측정 및 평가 가능한 질병의 완전 소멸

·새로운 병변 없음

·질병 관련 증상 없음

·마커 및/또는 다른 비정상적인 실험값의 정상화 등을 포함하는 평가 가능한 질병의 징후가 없음

다른 실시형태에 있어서, 모든 측정 가능한 병변부 및 부위, 평가 가능한 병변부 및 부위, 및/또는 평가할 수 없는 병변부 및 부위는 베이스라인으로서 동일한 방법을 사용하여 평가되어야 한다.

부분 관해(PR)는 다음과 같이 더 규정될 수 있다.

·적어도 하나의 측정 가능한 병변부를 갖는 환자에게만 적용됨

·모든 측정 가능한 병변부의 수직 직경의 곱의 합계에 있어서의 기준치 이하로 50% 이상 감소됨

·평가 가능한 질병의 진행 없음

·새로운 병변 없음

다른 실시형태에 있어서, 모든 측정 가능한 병변부 및 부위 및 평가 가능한 병변부 및 부위는 기준치로서 동일한 방법을 사용하여 평가되어야 한다. 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 하루 24시간 동안 연속 정맥 주입으로 투여될 수 있다. 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 10, 14, 15 또는 21일 동안 또는 이들 기간 사이의 임의의 범위에 연속해서 투여될 수 있다. 또한, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21일 이상 동안 연속해서 투여될 수 있다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은, 예를 들면 35일 동안 전체 치료 사이클에 걸쳐서 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은, 예를 들면 각각 35일을 포함하는 5회의 치료 사이클, 즉 총 180일에 걸쳐서 전체 치료 시간 동안 연속 정맥 주입으로 투여된다. 따라서, 소정 환자 용량이 투여되도록 1일 항체 용량을 감소시킬 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 항체의 소정 환자 용량은 100mg/㎡/사이클이다. 하나의 실시형태에 있어서, 전체 치료 시간은 5 사이클을 포함한다. 따라서, 이 예에 있어서 전체 치료 시간당 항체 용량은 500mg/㎡이다. 실시형태에 있어서, 이 전체 치료 시간당 총 500mg/㎡의 항체 용량은 180일에 걸쳐서, 즉 2.77mg/㎡/일이 투여된다. 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 하루 24시간의 시간 주기에 걸쳐서 연속 정맥 주입으로 투여될 수 있다. 이러한 연속 주입을 위해 삼투 미니 펌프가 사용될 수 있다. 하나의 다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 10, 14, 15 또는 21일 동안, 또는 이들 기간 사이의 임의의 범위에 하루 24시간 동안 상기 명시된 1일 용량(예를 들면, 7, 10, 또는 15mg/㎡/일), 예를 들면 10일 동안 10mg/㎡/일, 10일 동안 15mg/㎡/일, 14일 동안 7mg/㎡/일, 14일 동안 15mg/㎡/일, 15일 동안 10mg/㎡/일, 21일 동안 7mg/㎡/일 또는 21일 동안 10mg/㎡/일, 또는 이들 용량 사이의 임의의 범위로 연속 정맥 주입으로 투여된다. 특정 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 40mg/㎡/일의 용량으로 5일 동안 연속 정맥 주입으로 투여되지 않는다. 특정 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 5일 동안 연속 정맥 주입, 즉 120시간 주입으로 투여되지 않는다. 다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 5일 이상 동안 연속 정맥 주입으로 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 6일 이상 동안 연속 정맥 주입으로 투여된다.

상기 면역사이토카인 또는 면역사이토카인을 포함하는 조제물은 0.8~50mg/㎡/일의 면역사이토카인 용량, 즉 0.8, 1.6, 2, 3.2, 4, 4.8, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 12, 14.4, 15, 20, 25, 30, 32, 40, 45 또는 50mg/㎡/일, 또는 이들 용량 사이의 임의의 범위로 투여될 수 있다. 예를 들면, 10mg/㎡/일의 용량은 환자가 하루에 체표면적(㎡)당 10mg의 면역사이토카인을 투여받는 것을 의미한다. 하나의 실시형태에 있어서, 융합 단백질 1mg은 hu14.18 항체 대략 0.8mg과 IL-2 대략 3×10⁶U을 함유한다. 상기 면역사이토카인을 포함하는 조제물은, 예를 들면 1일 1회 피하 주입 또는 정맥 주입으로 투여될 수 있다. 상기 면역사이토카인을 포함하는 조제물은 하루 24시간의 시간 기간에 걸쳐서 정맥 투여될 수 있다. 상기 면역사이토카인을 포함하는 조제물은 2, 3, 4, 5, 10, 14, 15 또는 21일, 또는 이들 기간 사이의 임의의 범위 동안에 연속해서 투여될 수 있다. 또 다른 실시형태에 있어서, 상기 면역사이토카인을 포함하는 조제물은 10, 14, 15 또는 21일 동안 연속으로 24시간 동안 연속 정맥 주입으로 투여된다. 이러한 연속 주입을 위해 삼투 미니 펌프가 사용될 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 면역사이토카인은 28일 사이클(최대 10 사이클 내)에서 3일 동안 12mg/㎡/일로 연속으로 투여된다.

상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간은 사이토카인을 이용한 하나 이상의 치료 기간에 선행 및/또는 동반될 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 사이토카인은 과립구 콜로니 자극 인자(G-CSF), GM-CSF, IL-2, IL-12 및/또는 IL-15이다. 상기 사이토카인은 피하(예를 들면, 1일 1회) 또는 정맥 주입으로 투여될 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 사이토카인은 IL-2이고, 예를 들면 치료 사이클의 1일, 2일 및 8~14일 또는 치료 사이클의 1~5일 및 8~12일에 1일 1회 6×10⁶IU/㎡/일의 용량으로 피하 투여된다. 하나의 실시형태에 있어서, IL-2의 전체 환자 용량은 60×10⁶IU/㎡/사이클이다. 또 다른 실시형태에 있어서, 상기 사이토카인은 GM-CSF이고, 예를 들면 치료 사이클의 1일 및 2일 및 8~14일에 1일 1회 250마이크로그램/㎡/일의 용량으로 정맥 투여된다.

상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간 후에는 레티노이드를 이용한 하나 이상의 치료 기간일 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 레티노이드는 레티노산(RA), 예를 들면 이소트레티노인이다.

이러한 치료 기간은 반복될 수 있다. 이러한 치료 기간 후에는 같은 약물 또는 치료제 및/또는 다른 약물 또는 치료제 중 어느 하나를 이용하여 치료하지 않는 구간일 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 구간은 치료하지 않는 구간일 수 있다. 또 다른 실시형태에 있어서, 상기 구간에는 같은 조제물 또는 치료제가 투여되지 않지만, 상기 구간에 다른 조제물 또는 치료제가 투여될 수 있다.

또한, 본 발명에 따른 방법은 비스테로이드성 항염증 약물(NSAIDs, 예를 들면 인도메타신) 등의 하나 이상의 진통제 및/또는 하나 이상의 오피오이드 및/또는 하나 이상의 다른 진통제, 또는 그것들의 조합을 이용한 치료에 선행 또는 동반될 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 상기 진통제는 오피오이드, 예를 들면 모르핀 및/또는 하이드로모르핀 등의 모르핀 유도체이다. 다른 오피오이드는, 예를 들면 트라마돌, 페치딘, 코데인, 피리트라마이드, 레보메타돈뿐만 아니라 펜타닐, 알펜타닐, 레미펜타닐 및 수펜타닐이다.

다른 실시형태에 있어서, 하나 이상의 진통제는 가바펜틴 등의 GABA 유사체에서 선택될 수 있다. 따라서, 환자는, 예를 들면 항체 치료 기간이 시작되기 3일 전에 가바펜틴을 이용하여 치료될 수 있다. 가바펜틴은 1일 1회, 2회 또는 3회 10 mg/kg/용량의 용량으로 경구 투여될 수 있다. 가바펜틴은 최대 300mg/kg/용량의 용량으로 제공될 수 있다. 가바펜틴은 가바펜틴 250mg/5mL을 함유하는 경구액 또는 캡슐(100mg, 300mg 및 400mg)로 투여될 수 있다. 상기 가바펜틴 치료는 모르핀 및/또는 다른 진통제를 이용한 치료 이외에 투여될 수 있다. 또한, 상기 환자는 파라세타몰(10~15mg/kg/용량, 1일 매 4시간마다 또는 4회 경구 또는 정맥 투여), 이부프로펜(5~10mg/kg/용량, 매 6~12시간마다 경구 투여), 메타미졸(10~15mg/kg/용량, 매 4시간마다 경구 투여), 디펜히드라민(0.5~1mg/kg/용량, 경구 또는 정맥 투여) 및/또는 인도메타신(예를 들면, 0.3~0.5mg/kg/용량, 또는 25 또는 50mg/용량, 6시간 마다 경구 또는 정맥 투여)을 이용하여 치료될 수 있다. 상기 파라세타몰, 이부프로펜, 메타미졸 및/또는 인도메타신을 이용한 치료는 모르핀 및/또는 가바펜틴, 및/또는 다른 진통제를 이용한 치료 이외에 투여될 수 있다.

하나 이상의 진통제가 하루 24시간 동안 정맥 주입, 특히 연속 정맥 주입으로 투여될 수 있다. 하나 이상의 진통제를 이용한 치료 기간은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간에 선행 및/또는 동반될 수 있다.

본 발명에 따른 방법은 용량을 감소시키는 것, 투여 방법을 변경하는 것(예를 들면, 정맥 주입에서 경구 주입으로 변경), 진통제 치료 기간의 지속 기간을 감소시키는 것 및/또는 하나 이상의 진통제의 조제물 종류를 변경하는 것을 가능하게 한다. 따라서, 본 발명은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료에 대하여 적어도 일부 치료 사이클 동안 환자의 외래환자 관리를 가능하게 한다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 하나 이상의 항체 치료일에 대하여 하나 이상의 진통제의 1일 용량은 비연속 정맥 주입으로 투여되거나 5일 동안 매일 40mg/㎡의 용량으로 연속 정맥 주입으로 투여되는 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료시에 투여되는 통상의 1일 용량 미만이다.

특정 실시형태에 있어서, 하나 이상의 진통제(예를 들면, 모르핀)의 용량(예를 들면, 1일 용량)은, 예를 들면 전체 치료 시간 내, 치료 사이클 내, 치료 사이클 내의 항체 치료 기간 동안, 치료 사이클 내의 하나의 항체 치료일로부터 다음 항체 치료일까지, 및/또는 하나의 치료 사이클로부터 다음 치료 사이클까지의 시간에 걸쳐서 감소된다. 이러한 모르핀 용량 감소의 예를 표 9에 나타낸다. 예를 들면, 상기 모르핀 용량은 제 3 치료 사이클의 9일에서부터 10일까지 10%씩, 즉 표준 주입 속도(이 예에 있어서 30mcg/kg/h임)의 28%에서부터 18%까지, 또는 8.1mg/kg/h에서부터 4.53mg/kg/h까지 또는 0.19mg/kg/일에서 0.11mg/kg/일까지 감소될 수 있다. 다른 실시형태에 있어서, 상기 모르핀 용량은 치료 사이클 내, 치료 사이클 내의 항체 치료 기간 동안 및/또는 치료 사이클 내의 하나의 항체 치료일로부터 다음 항체 치료일까지 지속적으로 감소된다.

예를 들면, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 비연속 주입(또는 단회 주입, 즉 하루 24시간 미만 동안 주입) 치료 기간의 전 및/또는 치료 기간 동안에 투여되는 통상의 모르핀 용량을 표 1에 나타낸다. 이 예에 있어서, 상기 ch14.18/CHO(APN311)은 5 사이클 동안 5일 연속해서 1일 8시간 주입으로 20mg/㎡/일, 및 이어서 100mg/㎡/사이클의 용량으로 제공되고, 모르핀 염산염은 각 항체 치료일에 APN311 주입의 시작 전에는 2시간 동안 0.05mg/kg/h의 용량으로 단회 투여로 제공되고, APN311 주입시에는 8시간 동안 0.03mg/kg/h의 주입 속도로 제공되고, 또한 가능하다면 APN311 치료의 제 1 일에는 14시간 동안 및 연속 치료일에는 4시간 동안 0.01mg/kg/h의 구간(모르핀을 치료하지 않는 10시간의 구간을 가짐) 주입 속도로 제공된다. 필요에 따라서, 상기 용량을 증가(예를 들면, 항체 주입시에 주입 속도가 증가됨) 및/또는 추가 단회분 용량을 투여하였다. 따라서, 소정의 모르핀 용량은 적어도 1일 0.38mg/kg, 적어도 치료 사이클당 2mg/kg(5일의 항체 치료일을 포함함) 및 적어도 전체 치료 시간당 10mg/kg(3 사이클을 포함함)이었다.

특정 실시형태에 있어서, 하나 이상의 1일 모르핀 용량 및/또는 하나 이상의 모르핀 주입 속도 및/또는 하나 이상의 표준 모르핀 용량의 백분률은 도 9에 명시된 바와 같다. 예를 들면, 하나의 실시형태에 있어서 제 1 치료 사이클의 제 12 일에 투여되는 표준 모르핀 용량의 백분률은 41%이고, 제 1 치료 사이클의 제 12 일의 모르핀 주입 속도는 12.26mg/kg/h이고, 또한 제 1 치료 사이클의 제 12 일의 1일 모르핀 용량은 0.29mg/kg이다.

(표 1)

표 1: 모르핀 주입 스케쥴

5% 글루코오스 40mL 중의 10mg 모르핀 조제(0.25mg=1mL)

또 다른 실시예에 있어서, APN311은 10, 20 및 30mg/㎡/일, 및 50, 100, 150mg/㎡/사이클의 용량으로 3 사이클 동안 5일 연속해서 1일 8시간 주입으로 제공되고, 모르핀 염산염은 각 항체 치료일에 0.5~1.0mg/kg/용량의 단회분 용량으로(항체의 주입 시작 직전), 또한 APN311 주입시에는 0.05mg/kg/시간의 연속 주입 속도로 제공된다. 필요에 따라서, 상기 용량을 증가(예를 들면, 항체 주입시의 주입 속도로 증가됨) 및/또는 추가 단회분 용량을 투여한다. 따라서, 소정의 모르핀 용량은 적어도 0.9mg/kg/일, 적어도 치료 사이클당 4.5mg/kg(5일의 항체 치료일을 포함함) 및 적어도 전체 치료 시간당 13.5mg/kg(3 사이클을 포함함)이다.

ch14.18의 비연속 주입(또는 단회 주입)의 다른 실시예에 있어서, 모르핀은 24시간에 걸쳐서 최대 1.2mg/kg/h의 주입 속도로 투여되었다.

또 다른 실시예에 있어서, ch14.18/Sp2/0은 4일 동안 연속해서 25mg/㎡/일의 용량으로 제공된다. 가능하다면, 나머지 용량에 대해 ch14.18/Sp2/0의 용량을 각각 1.25mg/㎡/h×0.5h으로 시작하고, 이어서 2.5mg/㎡/h×0.5h, 이어서 3.75mg/㎡/h×0.5h, 이어서 5mg/㎡/h으로 5.75시간에 걸쳐서 정맥 주입한다. 상기 실시예에 있어서, 각 치료 사이클은 0일째에 시작하고, 치료 사이클의 0일은 각 사이토카인을 이용한 치료의 제 1 일이다.

(표 2)

표 2: ch14 .18/ Sp2 /0, 사이토카인 및 이소트레티노인의 5 사이클의 투여에 대한 개요( 레티노산 또는 RA )

ch14.18/SP2/0 치료는 모두 5 사이클의 28일 동안에 25mg/㎡/일×4일; 14일 동안에 250마이크로그램/㎡/일의 GM-CSF; 제 1 주 동안에 3MIU/㎡/일, 제 2 주 동안에 4.5MIU/㎡/일의 알데스루킨(IL-2)을 투여한다.

(표 3)

표 3: GM - CSF 를 이용한 사이클 동안의 치료 개요

비고: 상기 치료 개요의 변동에 있어서, RA 치료는 제 1 사이클의 11일째에 시작되지만, 제 3 사이클 및 제 4 사이클의 10일째의 개요에 따른다. 따라서, 상기 치료 개요의 변동에 있어서, 제 1 치료 사이클의 24일은 제 1 사이클의 RA 치료의 마지막 날이기도 하다.

0~13일에 1일 2시간 주입해서 정맥 주입 또는 피하 주입(강력 권장)으로 250마이크로그램/㎡/일을 제공한다(항체 치료 전 3일 동안 및 항체 치료 후 7일 동안은 1일 ch14.18/SP2/0을 주입).

(표 4)

표 4: 알데스루킨(IL-2)을 이용한 사이클 동안의 치료 개요

상기 알데스루킨 사이클의 28일~31일에는 치료제가 투여되지 않는다. 32일째에는 다음 치료 사이클(GM-CSF)이 시작된다(32일=다음 사이클의 0일).

알데스루킨(인터루킨-2, IL-2)은 3MIU/㎡/일의 용량으로 각 사이클의 제 1 주 동안에 4일 동안(0~3일) 연속 주입(CADD^® 외래 주입 펌프 또는 유사 주입 펌프를 사용함)에 의해 제공된다. 각 사이클의 제 2 주 동안에 알데스루킨(IL-2)은 4일 동안 4.5MIU/㎡/일(7~10일, ch14.18/SP2/0의 주입)으로 제공된다. 5% 덱스트로스 수용액 중의 알데스루킨은 외래 주입 펌프에 의한 카테터를 통해 96시간에 걸쳐서 연속 정맥 주입되고, 총체적은 펌프에 따라 다르다.

6 치료 사이클은 비치료의 14일(제 6 사이클의 0일인 제 5 사이클의 24일째에 시작됨) 후에 이소트레티노인만 투여되는 14일이다.

상기 실시예에 있어서, 히드록시진(1mg/kg; 최대 용량 50mg) 또는 디펜히드라민(0.5~1.0mg/kg; 최대 용량 50mg)은 ch14.18/SP2/0 주입 전 20분에서부터 10분에 걸쳐서 정맥 투여로 제공되고; 아세트아미노펜(10mg/kg; 최대 용량 650mg)은 ch14.18/SP2/0 주입 20분 전에 경구 투여로 제공되고; 및/또는 50mcg/kg의 용량으로 주입되는 모르핀 술페이트는 ch14.18/SP2/0 투여 직전에 제공되고, 이어서 모르핀 술페이트를 20~50마이크로그램/kg/h의 주입 속도로 적하를 지속하여 ch14.18/SP2/0 주입의 완료 후 2시간 동안 지속한다. 또한, 히드로모르폰 또는 펜타닐 등의 다른 마약류를 사용할 수 있다. 또한, 리도카인 주입은 필요에 따라서 모르핀의 단회분의 정맥 투여시 함께 사용될 수 있다. 상기 리도카인 주입에 대한 투여 가이드라인을 이하에 나타낸다.

리도카인의 투여:

a. 일반 식염수(NS) 50cc 중의 리도카인 2mg/kg을 단회 투입으로 ch14.18/SP2/0 주입 시작 전 30분에 걸쳐서 정맥 투여로 제공함

b. ch14.18/SP2/0의 주입 시작시에 리도카인 1mg/kg/h의 정맥 주입을 시작하여 ch14.18/SP2/0 주입의 완료 후 2시간까지 지속함

c. 필요에 따라서 모르핀을 매 2시간마다 25~50마이크로그램/kg 단회 투입으로 정맥 투여로 제공하여도 좋음

상기 실시예에 있어서, 하나는 모르핀의 주입 용량으로 가바펜틴을 투여하고, 필요에 따라서 모르핀 주입/단회 투여를 제공하는 것이 고려될 수 있고; 임상 반응에 따라서 가바펜틴 10mg/kg/일 및 타이트레이트 최대 30~60mg/kg/일로 시작하여도 좋음

상기 실시예에 있어서, 히드록시진(또는 디펜히드라민) 및 아세트아미노펜의 용량은 필요에 따라서 매 6시간마다 정맥 투여 또는 경구 투여로 반복될 수 있다.

상기 실시예에 있어서, 모르핀의 추가 용량은 신경병증 통증을 치료하기 위해 ch14.18/SP2/0의 주입시에 제공된 후에 모르핀 술페이트 주입 속도를 증가시킬 수 있지만, 환자를 밀접하게 모니터링해야 한다. 환자가 모르핀에 내성을 가질 수 없는 경우(예를 들면, 가려움증)에는 모르핀을 펜타닐 또는 히드로모르폰으로 대체할 수 있다. 또한, 리도카인 주입은 필요에 따라서 모르핀의 단회분 정맥 투여시에 함께 사용될 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "모르핀 용량"은 환자의 체중(kg)당 모르핀의 양을 말한다. 따라서, 1일 모르핀 용량이라고 하는 경우에는 1일 환자의 체중(kg)당 모르핀의 양(mg 또는 meg)이고, 또는 1시간당 모르핀 용량이라고 하는 경우에는 1시간당 환자의 체중(kg)당 모르핀의 양(mg 또는 meg)이고, 또는 치료 사이클당 모르핀 용량이라고 하는 경우에는 치료 사이클당 환자의 체중(kg)당 모르핀의 양(mg 또는 meg)이고, 또는 전체 치료 시간당 모르핀의 용량이라고 하는 경우에는 전체 치료 시간당 환자의 체중(kg)당 모르핀의 양(mg 또는 meg)이다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입의 1일 이상 동안 및/또는 전체 모르핀 치료일에 투여되는 1일 모르핀 용량은, 예를 들면 상술의 실시예 중 하나 이상에 있어서의 항체의 비연속 투여시의 1일 모르핀 용량 미만이다. 특정 실시형태에 있어서, 연속 항체 주입 스케쥴에서 투여되는 1일 모르핀 용량은 제 1 치료 사이클에 있어서의 비연속 항체 주입 스케쥴 동안 투여 또는 처방되는 모르핀 용량의 80% 미만이고, 제 2 치료 사이클에서는 58% 미만, 제 3 치료 사이클에서는 57% 미만, 제 4 치료 사이클에서는 42% 미만, 제 5 치료 사이클에서는 34% 미만이다. 하나의 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 항체 치료 스케쥴에서 투여되는 1일 모르핀 용량은 5일 동안 연속 정맥 항체 주입의 항체 치료 스케쥴에서 1일 40mg/㎡의 용량으로 투여되는 1일 모르핀 용량 미만이다. 다른 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입의 1일 이상 동안에 투여되는 1일 모르핀 용량 및/또는 전체 모르핀 치료일의 1일 모르핀 용량은 0.9, 0.72, 0.48, 0.38, 0.4375 및/또는 0.205mg/kg/일 미만이다.

특정 실시형태에 있어서, 제 1 치료 사이클에 있어서의 항체의 투여(본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 적용함)의 제 5 일, 제 6 일, 제 7 일, 제 8 일, 제 9 일 및/또는 제 10 일에 투여되는 1일 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 1일 모르핀 용량 미만이다(예를 들면, 78% 미만). 특정 실시형태에 있어서, 치료 사이클의 상기 일 및 임의의 다음 일에 투여되는 모르핀의 용량 및/또는 전체 치료 시간의 모르핀의 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 1일 모르핀 용량 미만이다. 특정 실시형태에 있어서, 제 2 치료 사이클에 있어서의 항체의 투여(본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 적용함)의 제 3 일, 제 4 일, 제 5 일, 제 6 일, 제 7 일, 제 8 일, 제 9 일 및/또는 제 10 일에 투여되는 1일 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 1일 모르핀 용량 미만이다(예를 들면, 60% 미만). 특정 실시형태에 있어서, 치료 사이클의 상기 일 및 임의의 다음 일에 투여되는 모르핀 용량 및/또는 전체 치료 시간의 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 1일 모르핀 용량 미만이다. 다른 실시형태에 있어서, 제 3 치료 사이클 및 임의의 다음 치료 사이클에 있어서의 항체의 투여(본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 적용함)의 제 1 일에 투여되는 1일 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 1일 모르핀 용량 미만이다(예를 들면, 57% 미만). 특정 실시형태에 있어서, 치료 사이클의 상기 일 및 임의의 다음 일에 투여되는 모르핀 용량 및/또는 전체 치료 시간의 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 1일 모르핀 용량 미만이다.

다른 실시형태에 있어서, 모르핀은, 예를 들면 연속 항체 주입의 초기 1, 2, 3, 4, 5, 6 또는 7일에만, 예를 들면 치료 사이클 2, 3, 4 및/또는 5에 항체가 투여되는 일부 날짜에만 투여되고 모든 날짜에 투여되는 것은 아니다. 다른 실시형태에 있어서, 연속 항체 주입의 사이클 6에서 모르핀은 투여되지 않는다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입의 하나 이상의 시간 또는 일 동안에 투여되는 모르핀 주입 속도, 즉 1시간당 환자의 체중(kg)당 모르핀의 양(또는 모르핀 용량) 및/또는 모르핀 치료의 전체 시간 또는 일의 모르핀 주입 속도는 상기 스케쥴에 있어서의 소정의 표준 모르핀 주입 속도 및/또는 상술의 실시예에 있어서의 항체의 비연속 투여시의 모르핀 주입 속도 미만이다(예를 들면, 제 1 치료 사이클에 있어서의 제 2 일에는 96% 이하, 제 3 일에는 84% 이하, 제 4 일에는 65% 이하, 제 5 일에는 41% 이하, 제 6 일에는 14% 이하, 제 7 일에는 5% 이하, 제 8 일에는 3% 이하, 제 9 일에는 2% 이하 및/또는 제 10 일에는 1% 이하, 제 2 치료 사이클에 있어서는 72% 이하, 제 3 치료 사이클에 있어서는 30% 이하, 제 4 치료 사이클에 있어서는 22% 이하, 제 5 치료 사이클에 있어서는 18% 이하임). 다른 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입의 하나 이상의 일에 투여되는 모르핀 주입 속도 및/또는 전체 모르핀 치료일의 모르핀 주입 속도는 50, 40, 30, 20, 10 및/또는 5mcg/kg/h 미만 및/또는 이들 주입 속도 사이의 임의의 범위 미만이다. 다른 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입의 하나 이상의 일 동안에 투여되는 모르핀 주입 속도 및/또는 전체 모르핀 치료일의 모르핀 주입 속도는 제 1 및 선택적으로 임의의 다음 치료 사이클에 있어서는 30mcg/kg/h 미만, 제 2 및 선택적으로 임의의 다음 치료 사이클에 있어서는 22mcg/kg/h 미만, 제 3 및 선택적으로 임의의 다음 치료 사이클에 있어서는 10mcg/kg/h 미만, 제 4 및 선택적으로 임의의 다음 치료 사이클에 있어서는 7mcg/kg/h 미만 및/또는 제 5 및 선택적으로 임의의 다음 치료 사이클에 있어서는 6mcg/kg/h 미만이다.

특정 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 포함하는 하나 이상의 치료 사이클 동안에 투여되는 치료 사이클당 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 치료 사이클당 모르핀 용량 미만이다(예를 들면, 제 1 치료 사이클에 있어서는 66% 이하; 제 2 치료 사이클에 있어서는 64% 이하 또는 28% 이하; 제 3 치료 사이클에 있어서는 29% 이하 또는 13% 이하; 제 4 치료 사이클에 있어서는 16% 이하 또는 7% 이하; 및/또는 제 5 치료 사이클에 있어서는 15% 이하 또는 6% 이하임). 특정 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 포함하는 하나 이상의 치료 사이클 동안에 투여되는 제 2 및 임의의 다음 치료 사이클의 치료 사이클당 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 치료 사이클당 모르핀 용량 미만이다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 치료 사이클 및 임의의 다음 치료 사이클의 모르핀 용량 및/또는 전체 치료 시간의 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 치료 사이클당 모르핀 용량 미만이다. 다른 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 포함하는 하나 이상의 치료 사이클 동안에 투여되는 치료 사이클당 모르핀 용량은 7.2, 4.8, 4.5, 2, 1.75 및/또는 0.82mg/kg/사이클, 또는 이들 용량 사이의 임의의 범위 미만이다.

다른 실시형태에 있어서, 전체 치료 시간의 모르핀 용량(본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 적용함)은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 전체 치료 시간의 모르핀 용량 미만이다. 하나의 실시형태에 있어서, 전체 치료 시간의 모르핀 용량(본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 적용함)은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 전체 치료 시간의 모르핀 용량의 55% 이하, 50% 이하, 45% 이하 또는 40% 이하이다. 다른 실시형태에 있어서, 전체 치료 시간의 모르핀 용량(본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 적용함)은 43.2, 28.8, 13.5, 10, 8.75 및/또는 4.1mg/kg/전체 치료 시간 미만, 및/또는 이들 용량 사이의 임의의 범위 미만이다.

다른 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 연속 주입 스케쥴에 있어서의 모르핀 용량과 비교하여 본원에 참조로 하는 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 참조 모르핀 용량은, 예를 들면 임상 연구 프로토콜에서 명시된 상기 스케쥴에 대한 표준 모르핀 또는 상기 스케쥴에 처방된 모르핀 용량을 말한다. 다른 실시형태에 있어서, 본원에서 참조로 하는 참조 모르핀 용량은 연속 및/또는 비연속 항체 주입 스케쥴을 갖는 치료 사이클에 있어서의 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료의 제 1 일에 투여되는 모르핀 용량을 말하고, "개시 모르핀 용량"이라고도 한다.

따라서, 본원에서 사용되는 용어 "참조 모르핀 용량"은 본 발명에 따른 것 이외의 치료 스케쥴의 모르핀 용량 및/또는 개시 모르핀 용량을 포함할 수 있고, 본 발명에 따른 연속 주입 스케쥴에 있어서의 다른 모르핀 용량과 비교하여 본원에 참조되는 이러한 모르핀 용량의 모든 실시예를 포함할 수 있다.

특정 실시형태에 있어서, 항체의 투여 기간 동안에 1시간 주입당 참조 모르핀 용량, 즉 참조 주입 속도는 50mcg/kg/h이다. 특정 실시형태에 있어서, 항체의 투여 기간 동안에 1시간 주입당 참조 모르핀 용량, 즉 참조 주입 속도는 30mcg/kg/h이다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 참조 모르핀 용량은 50, 40, 30 및/또는 20mcg/kg/h이다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 참조 모르핀 용량은 0.9, 0.72, 0.48, 0.38, 0.4375 및/또는 0.205mg/kg/일이다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 참조 모르핀 용량은 7.2, 4.8, 4.5, 2, 1.75 및/또는 0.82mg/kg/사이클이다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 참조 모르핀 용량은 43.2, 28.8, 13.5, 10, 8.75, 및/또는 4.1mg/kg/전체 시료 시간이다. 특정 실시형태에 있어서, 상기 참조 인도메타신 용량은 0.3~0.5mg/kg/용량 또는 25 또는 50mg/용량이고, 매 6시간마다 경구 투여 또는 정맥 투여된다. 다른 실시형태에 있어서, 본 발명에 따른 연속 주입 스케쥴에 있어서의 모르핀 용량과 비교하여 상기 참조로 하는 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 참조 모르핀 용량은 환자에게 실제로 투여되는 모르핀 용량(예를 들면, 임상 연구의 모든 치료 환자에게 투여되는 각 모르핀 용량의 평균)을 말한다.

상기 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 모르핀 용량과 비교하여 본원에서 참조로 하는 본 발명에 따른 연속 주입 스케쥴에 있어서의 모르핀 용량은 상기 스케쥴의 표준 모르핀 용량, 또는 상기 스케쥴에서 처방된 모르핀 용량(예를 들면, 임상 연구 프로토콜에 명시됨)을 말한다. 특정 실시형태에 있어서, 항체의 연속 투여의 1시간 이상 또는 1일 이상 동안의 1시간 주입당 모르핀 용량, 즉 주입 속도는 50mcg/kg/h 미만이다. 특정 실시형태에 있어서, 항체의 연속 투여의 1시간 이상 또는 1일 이상 동안의 1시간 주입당 모르핀 용량, 즉 주입 속도는 30mcg/kg/h 미만이다. 다른 실시형태에 있어서, 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 모르핀 용량과 비교하여 상기 참조된 바와 같은 본 발명에 따른 연속 주입 스케쥴에 있어서의 모르핀 용량은 환자에게 실제로 투여되는 모르핀 용량(예를 들면, 임상 연구의 모든 투여 환자에게 투여되는 모르핀 용량의 각각의 평균)을 말한다.

통상, 각 진통제 용량은 각 환자의 통증 내성에 따라서 변경될 수 있다. 용량은 최적의 진통작용을 얻도록 적용될 수 있다.

상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간은 하나 이상의 사이토카인을 이용한 치료 기간, 하나 이상의 레티노이드를 이용한 치료 기간 및/또는 하나 이상의 진통제를 이용한 치료 기간으로 조합될 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 이러한 하나 이상의 다른 치료 기간으로 조합되는 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간은 하나의 치료 사이클을 나타낸다.

또한, 하나의 실시형태에 있어서 본 발명에 따른 방법을 이용하여 치료되는 환자는 GM-CSF, IL-2 및/또는 이소트레티노인, 및 선택적으로 모르핀 및/또는 하나 이상의 모르핀 유도체, 및/또는 하나 이상의 다른 진통제를 이용하여 치료된다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간은 사이토카인을 이용한 치료 기간에 선행된다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간은 사이토카인을 이용한 치료 기간에 동반된다. 하나의 실시형태에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간은 사이토카인을 이용한 치료 기간에 선행되고, 사이토카인을 이용한 다른 치료 기간에 동반된다.

본원에서 사용되는 특정 조제물 또는 치료제를 이용한 "치료 기간"은 상기 특정 조제물 또는 치료제를 환자에게 투여하는 시간의 기간, 즉 연속 치료일의 시간 기간을 의미한다. 예를 들면, 사이토카인을 포함하는 조제물을 5일 동안 연속해서 투여한 후에 사이토카인을 포함하는 조제물의 1일 이상 투여하지 않으면, 사이토카인을 포함하는 조제물을 이용한 치료기간은 5일을 포함한다. 또 다른 실시예에 있어서, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 10일 연속해서 24시간에 걸쳐서 연속 주입한 후에 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 1일 이상 투여하지 않으면, 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료 기간은 10일을 포함한다. 또 다른 실시예에 있어서, 이소트레티노인을 14일 동안 1일 2회 투여한 후 이소트레티노인을 1일 이상 투여하지 않으면, 이소트레티노인을 이용한 치료 기간은 14일을 포함한다. 이러한 치료 기간은 반복 및/또는 중복될 수 있다. 예를 들면, 도 8 및 도 9에 나타낸 치료 스케쥴은 IL-2를 이용한 5일씩 2회의 치료 기간을 포함하고, 상기 5일씩 2회의 치료 기간 중 제 2 치료 기간은 ch14.18(APN311)을 이용한 10일(또는 14일, 15일 또는 21일)의 치료 기간과 중복된 후에 이소트레티노인을 이용한 14일의 치료 기간이다.

본원에서 치료 기간과 관련하여 사용되는 용어 "조합된" 또는 "조합"은 같은 약물 또는 치료제 및/또는 다른 약물 또는 치료제를 이용한 2회 이상의 치료 기간이 하나의 치료 사이클에 포함되는 것을 의미한다. 상기 다른 약물 또는 치료제를 이용한 2회 이상의 치료 기간은 부분 또는 전체적으로 중복되어도 좋고 중복되지 않아도 좋다. 이러한 치료 기간은 같은 약물 또는 치료제 및/또는 다른 약물 또는 치료제를 이용하여 치료되지 않는 구간에 의해 구분될 수 있다.

본원에서 사용되는 용어 "치료 사이클"은 그 사이에 휴식 기간을 갖는 일반적인 스케쥴에서 반복되는 하나 이상의 치료 과정 또는 치료 기간을 의미한다. 예를 들면, 1주 동안 제공되는 치료 후 3주의 휴식이 하나의 치료 사이클이다. 하나의 실시형태에 있어서, 하나의 치료 사이클은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 하나의 치료 기간을 포함한다. 상기 치료 사이클은 사이토카인을 이용한 하나 이상의 치료 기간, 레티노이드를 이용한 하나 이상의 치료 기간 및/또는 진통제를 이용한 하나 이상의 치료 기간을 선택적으로 더 포함할 수 있다.

하나의 실시형태에 있어서, 하나의 치료 사이클은 28~49일, 예를 들면 28, 35, 42 또는 49일, 또는 이들 기간 사이의 임의의 범위를 포함한다. 상기 치료 사이클은 상기 사이클(1일)에 포함되는 치료, 예를 들면 항-GD2 항체를 포함하는 조제물, 및/또는 사이토카인, 및/또는 다른 임의의 조제물 또는 치료제의 투여 중 임의의 하나를 환자가 처음으로 치료받는 날짜에 시작된다.

상기 항-GD2 항체 및/또는 사이토카인을 이용한 치료 기간 직후 또는 1일 이상의 비치료일, 예를 들면 1, 2, 3, 4 또는 5일의 비치료일의 구간 중 어느 하나에 레티노이드(예를 들면, 이소트레티노인)를 이용한 치료 기간일 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 이소트레티노인은 14일 동안, 예를 들면 치료 사이클의 19~32일에 160mg/㎡/일의 용량으로 1일 2회 경구 투여된다. 상기 이소트레티노인을 이용한 치료 기간 후에는 1일 이상의 비치료 구간, 예를 들면 1, 2, 3, 4 또는 5일의 비치료 구간일 수 있다.

하나의 실시형태에 있어서, 상기 치료 사이클은, 예를 들면 치료 사이클의 1~5일 및 8~12일에 사이토카인을 이용한 5일씩 2회의 치료 기간, 예를 들면 치료 사이클의 8~17일에 항-GD2 항체를 이용한 10일의 1회의 치료 기간(예를 들면, 100 또는 150mg/㎡/사이클의 용량을 투여하도록 10 또는 15mg/㎡/일), 및 예를 들면 치료 사이클의 19~32일에 이소트레티노인을 이용한 14일의 1회의 치료 기간 후에 제 2 치료 사이클의 1일인 36일째에 다음 사이클이 시작되기 전에 3일의 비치료일을 포함한다.

하나의 실시형태에 있어서, 상기 치료 사이클은, 예를 들면 치료 사이클의 1~5일 및 8~12일에 사이토카인을 이용한 5일씩 2회의 치료 기간, 예를 들면 치료 사이클의 8~21일에 항-GD2 항체를 이용한 14일의 1회의 치료 기간(예를 들면, 100 또는 210mg/㎡/사이클의 용량을 투여하도록 7 또는 15mg/㎡/일), 및 예를 들면 치료 사이클의 26~39일에 이소트레티노인을 이용한 14일의 1회의 치료 기간 후에 제 2 치료 사이클의 1일인 43일째에 다음 사이클이 시작되기 전에 3일의 비치료일을 포함한다.

하나의 실시형태에 있어서, 상기 치료 사이클은, 예를 들면 치료 사이클의 1~5일 및 8~12일에 사이토카인을 이용한 5일씩 2회의 치료 기간(예를 들면, 150mg/㎡/사이클의 용량을 투여하도록 10mg/㎡/일), 치료 사이클의 8~22일에 항-GD2 항체를 이용한 15일의 1회의 치료 기간, 및 치료 사이클의 26~39일에 이소트레티노인을 이용한 14일의 1회의 치료 기간 후에 제 2 치료 사이클의 1일인 43일째에 다음 사이클이 시작되기 전에 3일의 비치료일을 포함한다.

하나의 실시형태에 있어서, 상기 치료 사이클은, 예를 들면 치료 사이클의 1~5일 및 8~12일에 사이토카인을 이용한 5일씩 2회의 치료 기간(예를 들면, 150 또는 210mg/㎡/사이클의 용량으로 투여되도록 7 또는 10mg/㎡/일), 치료 사이클의 8~22일에 항-GD2 항체를 이용한 21일의 1회의 치료 기간, 및 치료 사이클의 33~46일에 이소트레티노인을 이용한 14일의 1회의 치료 기간 후에 제 2 치료 사이클의 1일인 50일째에 다음 사이클이 시작되기 전에 3일의 비치료일을 포함한다.

하나의 실시형태에 있어서, 상기 치료 사이클은, 예를 들면 치료 사이클의 4~6일에 면역사이토카인(예를 들면, APN301)을 이용한 3일의 1회의 치료 기간, 예를 들면 치료 사이클의 1일 및 2일 및 8~14일에 사이토카인(예를 들면, GM-CSF)을 이용한 제 2 치료 기간, 및 예를 들면 치료 사이클의 11~24일에 이소트레티노인을 이용한 14일의 1회 치료 기간 후에 제 2 치료 사이클의 1일인 29일째에 다음 사이클이 시작되기 전에 4일의 비치료일을 포함한다.

하나의 실시형태에 있어서, 치료 사이클은, 예를 들면 5 사이클 동안(예를 들면, GM-CSF를 이용한 제 1 사이클, IL-2를 이용한 제 2 사이클, GM-CSF를 이용한 제 3 사이클, IL-2를 이용한 제 4 사이클 및 GM-CSF를 이용한 제 5 사이클) 0일에서 시작하는 24일의 치료 사이클(GM-CSF가 사이토카인으로서 사용되는 경우)의 3~6일 또는 0일에서 시작하는 32일 치료 사이클(IL-2가 사이토카인으로서 사용되는 경우)의 7~10일에 25mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 항-GD2 항체(예를 들면, ch14.18/SP2/0)를 포함하는 조제물을 이용한 4일의 1회 투여 기간; 0일에서 시작하는 치료 사이클의 0~13일에 사이토카인을 이용한 1회 또는 2회의 치료 기간(예를 들면, 14일 동안 250마이크로그램/㎡/일의 GM-CSF)을 이용한 1회 또는 2회의 치료 기간; 또는 0일에서 시작하는 치료 사이클의 0~3일에 3MIU/㎡/일 및 7~10일에 4.5MIU/㎡/일의 용량의 알데스루킨(IL-2)), 및 예를 들면 0일에서 시작하는 치료 사이클(GM-CSF를 사이토카인으로서 사용하는 경우)의 10~23일 또는 0일에서 시작하는 치료 사이클(IL-2를 사이토카인으로서 사용하는 경우)의 14~27일에 RA(예를 들면, 이소트레티노인)를 이용한 하나의 치료 기간을 포함한다. 실시형태에 있어서, 상기 치료 스케쥴은 도 2, 도 3 및/또는 도 4에 명시된 바와 같다.

상기 치료 사이클은 동일하게 반복되어도 좋고, 예를 들면 다른 용량 또는 스케쥴 또는 다른 추가 치료제(예를 들면, 하나 이상의 다른 사이토카인)를 이용하여 변경된 형태로 반복되어도 좋다. 따라서, 전체 치료 시간(즉, 모든 연속 치료 사이클 또는 전체 연속 치료 기간을 포함하는 시간 기간)은 적어도 1 또는 2 이상의 사이클, 또는 최대 10 사이클을 포함할 수 있다. 하나의 실시형태에 있어서, 전체 치료 시간은 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 또는 10 사이클을 포함한다. 상술한 바와 같이, 치료 사이클은 비치료의 시간 기간(환자에게 치료제, 즉 항체, 사이토카인, 다른 약물을 투여하지 않는 구간)을 포함할 수 있다. 따라서, 본원에서 사용되는 바와 같이 전체 치료 시간은 치료 사이클 내에 비치료의 구간을 더 포함할 수 있다.

하나의 실시형태에 있어서, 상기 명시된 바와 같은 35, 42 또는 49일 치료 사이클은 4~5회 반복되고, 전체 연속 치료 기간은 5 또는 6 치료 사이클을 포함한다.

본 발명은 다음과 같이 규정되는 것이 바람직하다.

규정 1: 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 환자에게 하루 24시간에 걸쳐서 연속 정맥 주입으로 투여하는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 2: 규정 1에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 종양 세포용해를 유도하기에 충분한 용량(세포용해 임계 용량)으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 3: 규정 2 에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 각각의 환자에 대해 개별적으로 결정되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 4: 규정 2 또는 규정 3에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 보체 의존적 세포용해 어세이에 의해 결정되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 5: 규정 2 또는 규정 3에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 전혈 테스트에 의해 결정되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 6: 규정 1 내지 규정 5 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 각각의 어세이에서 가능한 최대 목표 세포용해율의 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 100%를 유도하도록 특이적 CDC 어세이 또는 WBT로 결정되는 용량인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 7: 규정 1 내지 규정 6 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 각각의 어세이에서 가능한 최대 목표 세포용해율의 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%를 유도하도록 특이적 CDC 어세이 또는 WBT로 결정되는 용량인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 8: 규정 1 내지 규정 7 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 470~1,000, 470~10,000, 1,410~3,000 또는 2,350~5,000ng/mL 혈청 또는 혈장인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 9: 규정 1 내지 규정 8 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포용해 임계 용량은 2~250, 2~2,500, 2~100, 5~200, 6~750, 6~7,500, 10~1,250, 10~12,500, 6~300, 10~500, 15~600 또는 25~1,000ng/mL 전혈인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 10: 규정 1 내지 규정 9 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료의 1, 2, 3 또는 4일 내에 환자의 혈청, 혈장 또는 전혈 중의 세포용해 임계 용량을 달성하는 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 11: 규정 1 내지 규정 10 중 어느 하나에 있어서, 상기 임계 세포용해율은 환자가 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용하여 치료되지 않는 전체 치료 시간 내의 하나 이상의 시간 주기 동안에도 유지되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 12: 규정 1 내지 규정 11 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포용해 레벨은 전체 치료 사이클에 걸쳐서 유지되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 13: 규정 1 내지 규정 12 중 어느 하나에 있어서, 상기 세포용해 레벨은 전체 치료 시간에 걸쳐서 유지되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 14: 규정 1 내지 규정 13 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 1~30mg/㎡/일, 1~35mg/㎡/일, 1~50mg/㎡/일 또는 1~60mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 15: 규정 1 내지 규정 14 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 12, 15, 20, 25, 30, 32, 35, 40, 45, 50 또는 60mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 16: 규정 1 내지 규정 15 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 소정의 전체 환자 용량이 투여될 때까지 치료 기간 동안 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 17: 규정 1 내지 규정 16 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 유의적인 치료 효과에 도달할 때까지 치료 기간 동안 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 18: 규정 1 내지 규정 17 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 미니 펌프를 사용하여 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 19: 규정 1 내지 규정 18 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체는 키메라 항체 또는 인간화 항체인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 20: 규정 1 내지 규정 19 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체는 ch14.18/CHO 또는 ch14.18/SP2/0인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 21: 규정 1 내지 규정 20 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 APN311 또는 APN301인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 22: 규정 1 내지 규정 21 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 7, 10, 15 또는 25mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 23: 규정 1 내지 규정 22 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 4, 10, 14, 15 또는 21일 동안 연속해서 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 24: 규정 1 내지 규정 23 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 3, 4, 5 또는 6 치료 사이클 동안 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 25: 규정 1 내지 규정 24 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 APN311이고, 6 치료 사이클 동안 10일 동안에 연속해서 10mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 26: 규정 1 내지 규정 24 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체는 ch14.18/SP2/0이고, 5 치료 사이클 동안 4일 동안에 연속해서 25mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 27: 규정 1 내지 규정 26 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 투여는 IL-2 및/또는 GM-CSF 또는 다른 사이토카인의 투여에 선행 및/또는 동반되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 28: 규정 1 내지 규정 27 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 투여 기간 후에 이소트레티노인 또는 다른 레티노이드의 투여 기간일 수 있는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 29: 규정 1 내지 규정 28 중 어느 하나에 있어서, 상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 투여는 모르핀 및/또는 하나 이상의 다른 진통제의 투여에 동반되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 30: 규정 1 내지 규정 29 중 어느 하나에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 1일 이상의 연속 정맥 주입시 및/또는 전체 모르핀 치료일에 투여되는 1일 모르핀 용량은 항체의 비연속 투여시의 1일 모르핀 용량 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 31: 규정 1 내지 규정 30 중 어느 하나에 있어서, 상기 모르핀은 항체가 투여되는 전체 일이 아닌 일부 일에만 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 32: 규정 1 내지 규정 31 중 어느 하나에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 포함하는 하나 이상의 치료 사이클에 투여되는 치료 사이클당 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 치료 사이클당 모르핀 용량 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 33: 규정 1 내지 규정 32 중 어느 하나에 있어서, 상기 전체 치료 시간의 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 전체 치료 시간의 모르핀 용량 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 34: 규정 1 내지 규정 33 중 어느 하나에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 1시간 이상 또는 1일 이상의 연속 정맥 주입시 및/또는 전체 모르핀 치료 시간 또는 일에 투여되는 모르핀 용량은 50mcg/kg/h 미만 또는 30mcg/kg/h 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 35: 규정 1 내지 규정 34 중 어느 하나에 있어서, 본 발명에 따른 항체의 1일 이상의 연속 정맥 주입 및/또는 전체 모르핀 치료일에 투여되는 1일 모르핀 용량은 0.9, 0.72, 0.48, 0.38, 0.4375 및/또는 0.205mg/kg/일 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 36: 규정 1 내지 규정 35 중 어느 하나에 있어서, 상기 하나 이상의 진통제, 특히 모르핀의 용량은 전체 치료 시간 내, 치료 사이클 내, 치료 사이클 내의 항체 치료 기간 동안, 치료 사이클 내의 하나의 항체 치료일부터 다음 항체 치료일까지, 및/또는 하나의 치료 사이클에서부터 다음 치료 사이클까지 감소되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 37: 규정 1 내지 규정 36 중 어느 하나에 있어서, 상기 모르핀 용량은 치료 사이클 내, 치료 사이클 내의 항체 치료 기간 동안 및/또는 치료 사이클 내의 하나의 항체 치료일부터 다음 항체 치료일까지 연속적으로 감소되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.

규정 38: 규정 1 내지 규정 37 중 어느 하나에 기재된 GD2 양성암의 치료 방법에 이용되는 것을 특징으로 하는 항-GD2 항체.

규정 39: 규정 1 내지 규정 37 중 어느 하나에 기재된 GD2 양성암의 치료 방법을 위한 의약품의 제조에 있어서의 항-GD2 항체의 용도.

실시예

실시예 1: APN311 및 APN301 시퀀스 및 관련 데이터

APN311 시퀀스 데이터

(표 5)

표 5: 분자량 (MW ) 및 pI( 산출값 )

1) http://web.expasy.org/compute pi /를 통해 산출됨

2) 색소의 분자량으로 인해, 2D-DIGE는 예상되는 분자량보다 약간 시프트됨

뉴클레오티드 시퀀스 (( cDNA , incl . 리더)

"TAG"는 "스톱 코돈"으로서 작용하고, 따라서 펩티드 시퀀스로 번역되지 않는다.

경쇄 ( SEQ ID NO :1):

중쇄 ( SEQ ID NO :2):

뉴클레오티드 1~60(취소선 표시): 리더 시퀀스

마지막 뉴클레오티드(취소선 표시): 스톱 코돈

펩티드 시퀀스( incl . 시그널 펩티드)

시그널 펩티드는 후 번역 처리시 절단되어 더 이상 최종 재조합 단백질의 일부가 아니다.

경쇄 ( SEQ ID NO :3):

중쇄 ( SEQ ID NO :4):

아미노산 1~아미노산 20(취소선 표시): 리더 시퀀스

APN301 시퀀스 데이터

(표 6)

표 6: 분자량( MW ) 및 pI( 산출값 )

1) http://web.expasy.org/compute pi /를 통해 산출됨

3) IL-2는 링커에 의해 Fc 부분과 공유결합하기 때문에 환원 조건 하에서 면역사이토카인을 절단할 수 없고, 따라서 중쇄, 항체(1/2) 및 항체가 2D-DIGE 상에 존재할 수 없음

뉴클레오티드 시퀀스 ( cDNA , incl . 리더)

"TAG" 및 "TGA"는 "스톱 코돈"으로서 작용하고, 따라서 펩티드 시퀀스로 번역되지 않는다.

경쇄 ( SEQ ID NO :5):

중쇄 ( incl . IL -2; SEQ ID NO :6):

뉴클레오티드 1~57(취소선 표시): 리더 시퀀스

뉴클레오티드 1387~1385: IL-2 시퀀스

마지막 뉴클레오티드(취소선 표시): 스톱 코돈

펩티드 시퀀스 ( incl . 시그널 펩티드)

상기 시그널 펩티드는 후 번역 처리시에 절단되어 더 이상 최종 재조합 단백질의 일부가 아니다.

경쇄 ( SEQ ID NO :7):

중쇄 ( incl . IL -2; SEQ ID NO :8):

아미노산 1~19(취소선 표시): 리더 시퀀스

아미노산 463~595: IL-2 시퀀스

상기 ch14.18/CHO(APN311) 항체에 대한 2개의 GMP 준수 배치가 제조되었다. 이들 제조된 약물의 2개의 배치는 Lot T651204-A(4.3mL(4.6mg/mL) 항체를 함유함) 및 Lot T900310-A(4.5mL(4.5mg/mL) 항체를 함유함)이다. 상기 APN311 단클론 항체의 대량 조제물은 정맥 주입 조제물용 농축물로써 제작된다.

(표 7)

표 7: 최종 APN311 조제물의 조성

조제 가이드

항체는 멸균 조건 하에서 조제되어야 한다. 상기 ch14.18/CHO 항체(APN311)의 적절한 체적을 바이얼로부터 인출할 수 있다. 상기 항체 용액은 환자에게 주입하기 전에 주입시에 인라인 필터를 사용하거나(일부 센터에서 통상적으로 행하는 바와 같음), 파티클 필터(예를 들면, 필터 제품번호 MF1830, Impromediform, Germany)를 이용하여 용액을 여과함으로써 여과(0.2~1.2 □m)하는 것을 권장한다. 상기 체적의 항체는 0.9% NaCl 100mL 및 20% 인간 알부민 5mL를 함유하는 주입백에 첨가될 수 있다.

ch14.18/CHO(APN311)의 희석량의 산출

상기 ch14.18/CHO(APN311)의 투여량은 다음과 같이 산출된다: □Dosage: 10mg/㎡/일, 8~17일, 24h 주입.

예시 산출: 환자가 0.7의 체표면적(BSA)을 갖는 경우에는 1일 7mg(10×0.7) 또는 10일의 치료 동안(1 사이클) 70mg이 필요하다.

실시예 2: CDC 어세이 방법

CDC(보체 의존적 세포독성)의 원리

APN301 또는 APN311의 존재 하에서 정상 인간 혈청 또는 혈장, 또는 이들 항체 중 하나를 주입한 후의 환자의 혈청 또는 혈장의 종양 세포 세포독성의 유도는 GD2 항원 양성 LAN-1 신경모세포종 암세포주(표적 세포)에 대하여 ⁵¹Cr 방출 어세이로 측정되었다.

상기 표적 세포는 세포막을 투과하여 환원 Cr-III가의 형태로 세포질 단백질과 결합함으로써 원시 세포를 더 이상 누출하지 않는 Na₂ ⁵¹Cr(VI)O₄와 인큐베이션되었다. 이들 세포를 혈청 또는 혈장 및 항체, 또는 환자의 혈청 또는 혈장과 함께 인큐베이션한 후 용해시키는 경우, 방사능이 시험 샘플에 있어서의 용해능에 따라서 상등액으로 방출된다.

자발적 백그라운드 용해값 및 계면활성제에 의한 총용해값(달성 가능한 최대 세포용해 또는 가능한 최대 목표 세포용해)은 각각의 개별 실험에서 결정되었다. 자발적 용해값을 차감한 후 시험 샘플에 의해 유도되는 용해값을 총용해율(%)로서 산출하였다.

혈청 또는 혈장 샘플링:

정상 인간 공여체 또는 환자로부터 얻어진 전혈을 혈장용 헤파린 처리 진공채혈 바이얼 또는 혈청용 혈청 응고 바이얼을 사용하여 샘플링하였다. 바이얼을 2,000g에서 20분 동안 원심분리하였다. 상기 상등액 혈장 또는 혈청은 어세이에 즉시 사용되거나 -20℃에서 보관될 수 있다(해동하고 재동결하지 않음).

51 Cr 을 이용한 표적 세포의 표지:

LAN-1 세포는 불활성화 열처리된 10% FCS를 첨가한 RPMI 1640에서 배양하였다. 어세이 전일에 새로운 플라스크 및 배지로 옮겼다.

상기 어세이는 96웰의 평평한 바닥을 갖는 세포배양 플레이트에서 웰당 800nCi 활성의 ⁵¹Cr로 표지된 웰당 4×l0⁴개의 세포를 이용하여 행하였다.

필요한 세포의 양은 배양 플라스크로부터 회수하여 현탁액을 원심분리하고, 0.1% EDTA 및 1% FCS가 첨가된 PBS def. 1mL로 재현탁하였다. 상기 ⁵¹Cr 용액의 산출된 체적을 첨가하고, 튜브를 완만하게 회전시키면서 세포를 37℃ 및 5% CO₂에서 90분 동안 배양하였다.

이어서, 상기 세포 현탁액을 세포배양 배지로 2회 세정하여 세포 외부의 방사능을 제거하였다. 이 배지는 페니실린 G 100U/mL 및 스트렙토마이신 술페이트 100g/mL를 더 함유한다. 세정 처리 후의 표지된 세포의 펠릿을 mL당 4×l0⁵개 세포의 소망의 농도로 재현탁하였다.

어세이 방법:

항체의 세포용해능을 평가하기 위해, 다음과 같이 피펫팅하였다.

샘플 50㎕(항체 희석액)

1:4로 미리 희석시킨 정상 인간 혈청 또는 혈장 100㎕

⁵¹Cr 표지의 세포 현탁액(mL당 4×l0⁵개) 100㎕

상기 환자의 혈장 또는 혈청의 세포용해능을 평가하기 위해, 다음과 같이 피펫팅하였다.

배지 50㎕

1:4로 미리 희석시킨 환자의 혈장 또는 혈청 100㎕

⁵¹Cr 표지의 세포 현탁액(mL당 4×l0⁵개) 100㎕

CDC용 어세이 플레이트를 37℃, 5% C0₂의 CO₂ 인큐베이터에서 4시간 동안 또는 WBT와 직접 비교하는 경우에는 20시간 동안 인큐베이션하였다.

각각의 웰의 상등액을 흡착 카트리지 및 하비스트 프레스를 구비한 하비스트 프레임(SKATRON 제)를 이용하여 회수하였다. 이들 세포 상등액을 적신 카트리지를 감마 카운터의 카운팅 바이얼로 옮긴다. 표지된 표적 세포의 손상 후의 크롬의 방출에 비례하는 방사능을 모든 샘플로부터 측정하고, 분당 카운트(cpm)로 나타낸다. 결과는 모든 샘플의 용해값(cpm)으로부터 자발적 용해값(cpm)을 차감하고, 계면활성제를 이용하여 도달 가능한 최대 용해값(cpm)을 100%로 하여 용해율(%)로서 산출한다.

100×( 샘플값의 용해값 ( cpm )-자발적 용해값 ( cpm ))=샘플의 최대 용해값 ( cpm )-자발적 용해값( cpm )의 용해율(%)

도 1, 도 2, 도 3 및 도 5에 나타내는 바와 같은 결과를 위해 상술의 CDC 어세이법이 이용되었다.

도 7에 나타내는 바와 같은 결과를 위해 마찬가지의 CDC 어세이법이 이용되었지만, LAN-1 세포용 표지로서 크롬 대신에 칼세인이 사용되었다.

실시예 3: WBT 법

WBT(전혈 테스트)의 원리:

APN301 또는 APN311의 존재 하에서 정상 인간 전혈, 또는 이들 항체 중 하나의 주입 후의 환자의 전혈의 종양 세포 세포독성의 유도는 GD2 항원 양성 LAN-1 신경모세포종 암세포주(표적 세포)에 대하여 ⁵¹Cr 방출 어세이로 측정되었다.

상기 표적 세포는 세포막을 투과하여 환원 Cr-III가의 형태로 세포질 단백질과 결합함으로써 원시 세포를 더 이상 누출하지 않는 Na₂ ⁵¹Cr(VI)O₄와 함께 인큐베이션되었다. 이들 세포를 전혈 및 항체 또는 환자의 전혈과 함께 인큐베이션한 후 용해시키는 경우에는 방사능이 시험 샘플에 있어서의 용해능에 따라서 상등액으로 방출된다.

자발적 백그라운드 용해값 및 계면활성제에 의한 총용해값(달성 가능한 최대 세포용해 또는 가능한 최대 목표 세포용해)은 각각의 개별 실험에서 결정되었다. 자발적 용해값을 차감한 후, 시험 샘플에 의해 유도되는 용해값을 총용해의 (%)로서 산출하였다.

혈액 샘플링:

정상 인간 공여체 또는 환자로부터 얻어진 전혈을 헤라핀 처리 진공채혈 바이얼을 이용하여 샘플링하였다.

⁵¹ Cr 을 이용한 표적 세포의 표지:

상기 어세이는 96웰의 평평한 바닥을 갖는 세포배양 플레이트에서 웰당 800nCi의 활성의 ⁵¹Cr로 표지된 웰당 4×l0⁴개의 세포를 이용하여 행해졌다.

이어서, 상기 세포 현탁액을 세포배양 배지로 2회 세정하여 세포 외부의 방사능을 제거하였다. 이 배지는 페니실린 G 100U/mL 및 스트렙토마이신 술페이트 100g/mL를 더 함유한다. 세정 처리 후의 표지된 세포의 펠릿을 mL당 4×l0⁵개의 세포의 소망의 농도로 재현탁하였다.

어세이 방법:

샘플 50㎕(항체 희석액)

1:2로 미리 희석시킨 정상 인간 전혈 100㎕

⁵¹Cr 표지의 세포 현탁액(mL당 4×l0⁵개) 100㎕

상기 환자의 전혈의 세포용해능을 평가하기 위해, 다음과 같이 피펫팅하였다.

배지 50㎕

1:2로 미리 희석시킨 환자의 혈액 100㎕

⁵¹Cr 표지의 세포 현탁액(mL당 4×l0⁵개) 100㎕

어세이 플레이트를 37℃, 5% C0₂의 CO₂ 인큐베이터에서 20시간 동안 인큐베이션하였다.

이어서, 각각의 웰의 상등액을 흡착 카트리지 및 하비스트 프레스를 구비한 하비스트 프레임(SKATRON 제)를 이용하여 회수하였다. 이들 세포 상등액을 적신 카트리지를 감마 카운터의 카운팅 바이얼로 옮긴다. 표지된 표적 세포의 손상 후의 크롬의 방출에 비례하는 방사능을 모든 샘플로부터 측정하고, 분당 카운트(cpm)로 나타낸다. 결과는 모든 샘플의 용해값으로부터 자발적 용해값(cpm)을 차감하고, 계면활성제의 도달 가능한 최대 용해값(cpm)을 100%로 하여 용해율(%)로서 산출한다.

100×(샘플의 용해값 ( cpm )-자발적 용해값 ( cpm ))=샘플의 최대 용해값 ( cpm )-자발적 용해값( cpm 의)의 용해율(%)

도 1, 도 2, 도 3 및 도 4에 나타내는 바와 같은 결과를 위해, 상술의 WBT법이 이용되었다.

실시예 4: 항- GD2 항체를 포함하는 조제물의 연속 정맥 주입에 의한 환자의 치료

재발성 또는 불응성 신경모세포종을 앓고 있는 41명의 환자에 있어서의 ch14.18/CHO(APN311)를 이용한 치료의 예외적 사용 설정에 있어서, 항-GD2 항체 면역요법과 연관된 통증의 감소를 가능하게 하기 위하여 IL2 및 이소트레티노인의 피하 주입과 함께 연속 주입 양상을 이용하였다. 임상 반응은 메타요오드벤질구아니딘 신티그래피(mIBG), 자기 공명 화상법(MRI) 또는 X선 컴퓨터 단층촬영(CT), 골수 조직 검사(아스피레이트 또는 트레핀 생검에 의한 평가) 및 카테콜아민의 평가에 대하여 현지 의사에 의해 결정되었다.

mIBG: 41명의 환자 중 31명이 면역요법 전 mIBG로 검출되는 질병을 가졌다.

이들 31명의 환자 중 5명(16%)은 완전 관해(CR)를 나타내고, 7명(23%)은 부분 관해(PR)를 나타내고, 4명(13%)은 안정 병변(SD)을 나타내고, 또한 13명(42%)은 진행 병변(PD)을 나타냈다. 2명(6%)의 환자는 평가할 수 없었다. 그들 중 1명은 면역요법 후 mIBG 검사가 불가능하고, 다른 환자는 면역요법이 행해진 후 재평가 전에 수술에 의해 나머지 종양를 제거하였다.

전체적으로는, 면역요법 전에 mIBG로 검출 가능한 질병을 갖는 31명의 환자 중 12명(39%)에 있어서 관해(CR 또는 PR)가 면역요법 후에 검출되었다.

또한, 면역요법의 완료 후에 PD를 갖는 13명의 환자 중 3명(23%)에게서 제 3회 면역요법 사이클 후에 PR이 검출되었다.

MRI/CT: 41명의 환자 중 13명이 면역요법 전에 연조직에 있어서 MRI 또는 CT로 질병을 검출할 수 있었다.

기준점에서 양성 MRI를 갖는 1명의 추가 환자는 최종 재평가 전에 나머지 종양을 완전히 절제하였기 때문에 평가할 수 없었다. 3회의 면역요법 사이클 후, 이 환자는 SD를 나타냈다.

면역요법 전에 MRI 또는 CT로 검출 가능한 질병을 갖는 13명의 환자 중 5명(38%)은 PR이고, 4명(31%)이 SD이고, 3명(23%)이 PD이었다. 1명(8%)의 환자에 대한 평가는 보류중이다.

골수: 41명의 환자 중 19명은 면역요법 전에 골수에서 질병이 검출되었다. 이들 19명의 환자 중 4명(21%)은 각 테스트에서 면역요법 후에 관해를 나타냈다. 또한, 6명(32%)의 환자에 있어서, 3회의 면역요법 사이클 후에 관해가 검출되었다. 그러나, 3 사이클 후에 PD는 다른 검사에서 이들 환자 중 4명 및 면역요법의 말기에 이들 환자 중 2명에게서 발견되었다.

카테콜아민: 41명의 환자 중 18명이 면역요법 전에 카테콜아민 레벨(바닐릴 만델산(VMA) 및/또는 호모바닐린산(HVA))이 증가되었다. 이들 18명의 환자 중 7명(39%)에게서 정상 카테콜아민 레벨이 3회의 면역요법 사이클 후 및/또는 면역요법 완료 후에 검출되었다.

상기 연속 주입 양상에 의한 예외적 사용 설정 하에서 치료되는 재발성/불응성 환자에게서 관찰되는 이들 유효한 관해 속도 이외에, 이들 환자 모두에게서 통증 부작용의 뚜렷한 감소가 발견되어 모르핀을 이용한 치료를 실질적으로 감소시키거나 완전히 회피하게 되었다.

이 스케쥴의 정맥 투여용 모르핀의 표준 용량은 30g/kg/h이다. ch14.18/CHO(APN311) 연속 주입을 투여받은 환자는 ch14.18/CHO(APN311)를 단회 투여받은 환자와 비교하여 정맥 투여용 모르핀을 유의하게 거의 사용되지 않았다. 많은 환자에게 모르핀 정맥 투여를 완전히 중단하고, 가바펜틴만을 경구 투여하여 통증을 치료하는 것이 가능하게 되었다. 상기 ch14.18/CHO(APN311) 연속 주입시의 모르핀의 사용은 도 10 및 표 9에 나타낸다. 항체 주입은 항상 8일째에 개시되었다. 모두 비연속 항체 주입 스케쥴(1일째에 0.48mg/kg/일 및 연속 치료일에 0.38mg/kg/일, 사이클당 5일, 1일 8시간에 걸쳐서 주입, 5 사이클)을 이용하는 전임상 연구 I상의 13.5mg/kg의 소정 모르핀 용량 및 진행형 임상 연구 III상의 10mg/kg과 비교하여 전체 치료 시간(모두 6 치료 사이클을 포함함)당 실제 모르핀 용량(37명의 환자의 평균)은 5.4mg/kg이었다.

또한, 주로 불응성 또는 재발성 신경모세포종을 갖는 환자에게 알데스루킨(IL2)의 피하 투여와 함께 연속 주입에 의해 APN311을 투여하는 연구 I/II상은,

·IL2의 고정 용량을 피하 투여하면서 ch14.18/CHO mAb(APN311) 치료의 면역조절 효능을 유지하여 독성(통증) 프로파일을 감소

·최대 3개의 용량 레벨(총 용량: 100mg/㎡-150mg/㎡-200mg/㎡)로 10~21일에 걸쳐서 연속 주입 개요를 확립함으로써 독성(통증)을 감소

·환자 준수사항을 개선

·면역요법의 효과를 유지 또는 개선시키도록 설정된다.

이 연구 I/II상으로부터의 잠정적인 결과로서, GD2 특이적 항체를 이용한 치료시에 자주 발생되는 중대한 무력의 통증을 제어하기 위한 오피오이드, 특히 모르핀의 사용은 제 1 주입 사이클시의 이들 환자에게서 이미 유의하게 적어진다. 제 3 사이클 후에 환자가 개선된 적응 개요로 인한 약물에 대한 내성이 증가하여 이것들을 필요로 하지 않기 때문에 표준 모르핀 투여를 완전히 자제하는 것도 가능하게 된다.

상기 유의적으로 감소된 모르핀 용량은 역효과와 관련된 오피오이드 치료의 감소를 야기함으로써, 예를 들면 야외활동 및 학습참여 등의 어린이의 정상적인 생활을 따라갈 수 있는 소아 환자의 능력에 긍정적으로 영향을 미칠 수 있도록 외래 환자의 치료 설정도 가능하게 된다.

(표 8)

표 8: 도 11~도 16에 나타내는 WBT 를 이용하여 분석된 혈액 샘플

APN311을 이용한 치료 기간(치료 사이클의 8일에 대응함)의 시작(즉, 제 1 일)에 채취하는 혈액 샘플은 APN311 치료의 시작 전에 채취된다.

(표 9)

표 9: 모르핀 투여

SEQUENCE LISTING <110> Apeiron Biologics AG <120> Method for treating a GD2 positive cancer <130> r62431 <150> PCT/EP2012/061618 <151> 2012-06-18 <150> EP12172481 <151> 2012-06-18 <160> 8 <170> PatentIn version 3.3 <210> 1 <211> 723 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> artificial antibody chain <400> 1 atggaagccc cagcgcagct tctcttcctc ctgctactct ggctcccaga taccactgga 60 gaaatagtga tgacgcagtc tccagccacc ctgtctgtgt ctccagggga aagagccacc 120 ctctcctgca gatctagtca gagtcttgta caccgtaatg gaaacaccta tttacattgg 180 tacctgcaga agccaggcca gtctccaaag ctcctgattc acaaagtttc caaccgattt 240 tctggggtcc cagacaggtt cagtggcagt ggatcaggga cagatttcac actcaagatc 300 agcagagtgg aggctgagga tctgggagtt tatttctgtt ctcaaagtac acatgttcct 360 ccgctcacgt tcggtgctgg gaccaagctg gagctgaaac gaactgtggc tgcaccatct 420 gtcttcatct tcccgccatc tgatgagcag ttgaaatctg gaactgcctc tgttgtgtgc 480 ctgctgaata acttctatcc cagagaggcc aaagtacagt ggaaggtgga taacgccctc 540 caatcgggta actcccagga gagtgtcaca gagcaggaca gcaaggacag cacctacagc 600 ctcagcagca ccctgacgct gagcaaagca gactacgaga aacacaaagt ctacgcctgc 660 gaagtcaccc atcagggcct gagctcgccc gtcacaaaga gcttcaacag gggagagtgt 720 tag 723 <210> 2 <211> 1389 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> artificial antibody chain <400> 2 atgggatgga cctggatctt tattttaatc ctgtcggtaa ctacaggtgt ccactctgag 60 gtccaactgc tgcagtctgg acctgagctg gagaagcctg gcgcttcagt gatgatatcc 120 tgcaaggctt ctggttcctc attcactggc tacaacatga actgggtgag gcagaacatt 180 ggaaagagcc ttgaatggat tggagctatt gatccttact atggtggaac tagctacaac 240 cagaagttca agggcagggc cacattgact gtagacaaat cgtccagcac agcctacatg 300 cacctcaaga gcctgacatc tgaggactct gcagtctatt actgtgtaag cggaatggag 360 tactggggtc aaggaacctc agtcaccgtc tcctcagcct ccaccaaggg cccatcggtc 420 ttccccctgg caccctcctc caagagcacc tctgggggca cagcggccct gggctgcctg 480 gtcaaggact acttccccga accggtgacg gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc 540 ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg 600 gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag 660 cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca 720 tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca 780 aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac 840 gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat 900 aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc 960 ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac 1020 aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa 1080 ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg 1140 acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg 1200 cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc 1260 ctctatagca agctcaccgt ggacaagagc aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc 1320 tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacgcaga agagcctctc cctgtccccg 1380 ggtaaatga 1389 <210> 3 <211> 240 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial antibody chain <400> 3 Met Glu Ala Pro Ala Gln Leu Leu 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Val 370 375 380 Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly 385 390 395 400 Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp 405 410 415 Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp 420 425 430 Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His 435 440 445 Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 450 455 460 <210> 5 <211> 720 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> artificial antibody chain <400> 5 atgaagttgc ctgttaggct gttggtgctg atgttctgga ttcctgcttc cttaagcgac 60 gtggtgatga cccagacccc cctgtccctg cccgtgaccc ccggcgagcc cgcctccatc 120 tcctgcagat ctagtcagag tcttgtacac cgtaatggaa acacctattt acattggtac 180 ctgcagaagc caggccagtc tccaaagctc ctgattcaca aagtttccaa ccgattttct 240 ggggtcccag acaggttcag tggcagtgga tcagggacag atttcacact caagatcagc 300 agagtggagg ctgaggatct gggagtttat ttctgttctc aaagtacaca tgttcctccg 360 ctcacgttcg gtgctgggac caagctggag ctgaaacgaa ctgtggctgc accatctgtc 420 ttcatcttcc cgccatctga tgagcagttg aaatctggaa ctgcctctgt tgtgtgcctg 480 ctgaataact tctatcccag agaggccaaa gtacagtgga aggtggataa cgccctccaa 540 tcgggtaact cccaggagag tgtcacagag caggacagca aggacagcac ctacagcctc 600 agcagcaccc tgacgctgag caaagcagac tacgagaaac acaaagtcta cgcctgcgaa 660 gtcacccatc agggcctgag ctcgcccgtc acaaagagct tcaacagggg agagtgttag 720 <210> 6 <211> 1788 <212> DNA <213> Artificial <220> <223> artificial antibody chain <400> 6 atgaagttgc ctgttaggct gttggtgctg atgttctgga ttcctgcttc cttaagcgag 60 gtgcagctgg tgcagtccgg cgccgaggtg gagaagcccg gcgcctccgt gaagatctcc 120 tgcaaggcct ccggctcctc cttcaccggc tacaacatga actgggtgcg ccagaacatc 180 ggcaagtccc tggagtggat cggcgccatc gacccctact acggcggcac ctcctacaac 240 cagaagttca agggccgcgc caccctgacc gtggacaagt ccacctccac cgcctacatg 300 cacctgaagt ccctgcgctc cgaggacacc gccgtgtact actgcgtgtc cggcatggag 360 tactggggcc agggcacctc cgtgaccgtg tcctccgcct ccaccaaggg cccatcggtc 420 ttccccctgg caccctcctc caagagcacc tctgggggca cagcggccct gggctgcctg 480 gtcaaggact acttccccga accggtgacg gtgtcgtgga actcaggcgc cctgaccagc 540 ggcgtgcaca ccttcccggc tgtcctacag tcctcaggac tctactccct cagcagcgtg 600 gtgaccgtgc cctccagcag cttgggcacc cagacctaca tctgcaacgt gaatcacaag 660 cccagcaaca ccaaggtgga caagagagtt gagcccaaat cttgtgacaa aactcacaca 720 tgcccaccgt gcccagcacc tgaactcctg gggggaccgt cagtcttcct cttcccccca 780 aaacccaagg acaccctcat gatctcccgg acccctgagg tcacatgcgt ggtggtggac 840 gtgagccacg aagaccctga ggtcaagttc aactggtacg tggacggcgt ggaggtgcat 900 aatgccaaga caaagccgcg ggaggagcag tacaacagca cgtaccgtgt ggtcagcgtc 960 ctcaccgtcc tgcaccagga ctggctgaat ggcaaggagt acaagtgcaa ggtctccaac 1020 aaagccctcc cagcccccat cgagaaaacc atctccaaag ccaaagggca gccccgagaa 1080 ccacaggtgt acaccctgcc cccatcccgg gaggagatga ccaagaacca ggtcagcctg 1140 acctgcctgg tcaaaggctt ctatcccagc gacatcgccg tggagtggga gagcaatggg 1200 cagccggaga acaactacaa gaccacgcct cccgtgctgg actccgacgg ctccttcttc 1260 ctctatagca agctcaccgt ggacaagagc aggtggcagc aggggaacgt cttctcatgc 1320 tccgtgatgc atgaggctct gcacaaccac tacacgcaga agagcctctc cctgtccccg 1380 ggtaaagccc caacttcaag ttctacaaag aaaacacagc tgcaactgga gcatctcctg 1440 ctggatctcc agatgattct gaatggaatt aacaactaca agaatcccaa actcaccagg 1500 atgctcacat tcaagttcta catgcccaag aaggccacag agctcaaaca tctccagtgt 1560 ctagaggagg aactcaaacc tctggaggaa gtgctaaacc tcgctcagag caaaaacttc 1620 cacttaagac ctagggactt aatcagcaat atcaacgtaa tagttctgga actaaaggga 1680 tccgaaacaa cattcatgtg tgaatatgct gatgagacag caaccattgt agaatttctg 1740 aacagatgga ttaccttttg tcaaagcatc atctcaacac taacttga 1788 <210> 7 <211> 239 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial antibody chain <400> 7 Met Lys Leu Pro Val Arg Leu Leu Val Leu Met Phe Trp Ile Pro Ala 1 5 10 15 Ser Leu Ser Asp Val Val Met Thr Gln Thr Pro Leu Ser Leu Pro Val 20 25 30 Thr Pro Gly Glu Pro Ala Ser Ile Ser Cys Arg Ser Ser Gln Ser Leu 35 40 45 Val His Arg Asn Gly Asn Thr Tyr Leu His Trp Tyr Leu Gln Lys Pro 50 55 60 Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile His Lys Val Ser Asn Arg Phe Ser 65 70 75 80 Gly Val Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 85 90 95 Leu Lys Ile Ser Arg Val Glu Ala Glu Asp Leu Gly Val Tyr Phe Cys 100 105 110 Ser Gln Ser Thr His Val Pro Pro Leu Thr Phe Gly Ala Gly Thr Lys 115 120 125 Leu Glu Leu Lys Arg Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 130 135 140 Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu 145 150 155 160 Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp 165 170 175 Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp 180 185 190 Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys 195 200 205 Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His Gln 210 215 220 Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 225 230 235 <210> 8 <211> 595 <212> PRT <213> Artificial <220> <223> artificial antibody chain <400> 8 Met Lys Leu Pro Val Arg Leu Leu Val Leu Met Phe Trp Ile Pro Ala 1 5 10 15 Ser Leu Ser Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ala Glu Val Glu Lys 20 25 30 Pro Gly Ala Ser Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Ser Ser Phe 35 40 45 Thr Gly Tyr Asn Met Asn Trp Val Arg Gln Asn Ile Gly Lys Ser Leu 50 55 60 Glu Trp Ile Gly Ala Ile Asp Pro Tyr Tyr Gly Gly Thr Ser Tyr Asn 65 70 75 80 Gln Lys Phe Lys Gly Arg Ala Thr Leu Thr Val Asp Lys Ser Thr Ser 85 90 95 Thr Ala Tyr Met His Leu Lys Ser Leu Arg Ser Glu Asp Thr Ala Val 100 105 110 Tyr Tyr Cys Val Ser Gly Met Glu Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Ser Val 115 120 125 Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala 130 135 140 Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu 145 150 155 160 Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly 165 170 175 Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser 180 185 190 Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu 195 200 205 Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr 210 215 220 Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr 225 230 235 240 Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Glu 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Leu Ser Pro Gly Lys Ala Pro 450 455 460 Thr Ser Ser Ser Thr Lys Lys Thr Gln Leu Gln Leu Glu His Leu Leu 465 470 475 480 Leu Asp Leu Gln Met Ile Leu Asn Gly Ile Asn Asn Tyr Lys Asn Pro 485 490 495 Lys Leu Thr Arg Met Leu Thr Phe Lys Phe Tyr Met Pro Lys Lys Ala 500 505 510 Thr Glu Leu Lys His Leu Gln Cys Leu Glu Glu Glu Leu Lys Pro Leu 515 520 525 Glu Glu Val Leu Asn Leu Ala Gln Ser Lys Asn Phe His Leu Arg Pro 530 535 540 Arg Asp Leu Ile Ser Asn Ile Asn Val Ile Val Leu Glu Leu Lys Gly 545 550 555 560 Ser Glu Thr Thr Phe Met Cys Glu Tyr Ala Asp Glu Thr Ala Thr Ile 565 570 575 Val Glu Phe Leu Asn Arg Trp Ile Thr Phe Cys Gln Ser Ile Ile Ser 580 585 590 Thr Leu Thr 595

Claims

항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 환자에게 하루 24시간에 걸쳐서 연속 정맥 주입으로 투여하는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 종양 세포용해를 유도하기에 충분한 용량(세포용해 임계 용량)으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 2 항에 있어서,
상기 세포용해 임계 용량은 각각의 환자에 대해 개별적으로 결정되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 2 항 또는 제 3 항에 있어서,
상기 세포용해 임계 용량은 보체 의존적 세포용해 어세이에 의해 결정되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 2 항 또는 제 3 항에 있어서,
상기 세포용해 임계 용량은 전혈 테스트에 의해 결정되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 5 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 세포용해 임계 용량은 각각의 어세이에서 가능한 최대 목표 세포용해율의 적어도 20%, 적어도 25%, 적어도 30%, 적어도 35%, 적어도 40%, 적어도 45%, 적어도 50%, 적어도 55%, 적어도 60%, 적어도 65%, 적어도 70%, 적어도 75%, 적어도 80%, 적어도 85%, 적어도 90%, 적어도 95% 또는 100%를 유도하도록 특이적 CDC 어세이 또는 WBT에서 결정되는 용량인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 6 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 세포용해 임계 용량은 각각의 어세이에서 가능한 최대 목표 세포용해율의 30%, 35%, 40%, 45%, 50%, 55%, 60%, 65%, 70%, 75%, 80%, 85%, 90%, 95% 또는 100%를 유도하도록 특이적 CDC 어세이 또는 WBT로 결정되는 용량인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 세포용해 임계 용량은 470~1,000, 470~10,000, 1,410~3,000 또는 2,350~5,000ng/mL 혈청 또는 혈장인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 8 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 세포용해 임계 용량은 2~250, 2~2,500, 2~100, 5~200, 6~750, 6~7,500, 10~1,250, 10~12,500, 6~300, 10~500, 15~600 또는 25~1,000ng/mL 전혈인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 9 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용한 치료의 1, 2, 3 또는 4일 이내에 환자의 혈청, 혈장 또는 전혈 중의 세포용해 임계 용량을 달성하는 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 10 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 임계 세포용해율은 환자가 항-GD2 항체를 포함하는 조제물을 이용하여 치료되지 않는 전체 치료 시간 내의 하나 이상의 시간 주기 동안에도 유지되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 세포용해 레벨은 전체 치료 사이클에 걸쳐서 유지되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 12 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 세포용해 레벨은 전체 치료 시간에 걸쳐서 유지되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 13 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 1~30mg/㎡/일, 1~35mg/㎡/일, 1~50mg/㎡/일 또는 1~60mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 14 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 7.5, 8, 9, 10, 12, 15, 20, 25, 30, 32, 35, 40, 45, 50 또는 60mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 15 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 소정의 전체 환자 용량이 투여될 때까지 치료 기간 동안 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 16 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 유의적인 치료 효과에 도달할 때까지 치료 기간 동안 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 17 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 미니 펌프를 사용하여 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 18 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체는 키메라 항체 또는 인간화 항체인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 19 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체는 ch14.18/CHO 또는 ch14.18/SP2/0인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 20 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 APN311 또는 APN301인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 21 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 7, 10, 15 또는 25mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 22 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 4, 10, 14, 15 또는 21일 동안 연속해서 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 23 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 3, 4, 5 또는 6 치료 사이클 동안 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물은 APN311이고, 6 치료 사이클 동안 10일 동안에 연속해서 10mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 24 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체는 ch14.18/SP2/0이고, 5 치료 사이클 동안 4일 동안에 연속해서 25mg/㎡/일의 용량으로 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 26 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 투여는 IL-2 및/또는 GM-CSF 또는 다른 사이토카인의 투여에 선행 및/또는 동반되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 27 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 투여 기간 후에 이소트레티노인 또는 다른 레티노이드의 투여 기간일 수 있는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 28 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 항-GD2 항체를 포함하는 조제물의 투여는 모르핀 및/또는 하나 이상의 다른 진통제의 투여에 동반되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 29 항 중 어느 한 항에 있어서,
본 발명에 따른 항체의 1일 이상의 연속 정맥 주입시 및/또는 전체 모르핀 치료일에 투여되는 1일 모르핀 용량은 항체의 비연속 투여시의 1일 모르핀 용량 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 30 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 모르핀은 항체가 투여되는 전체 일이 아닌 일부 일에만 투여되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 31 항 중 어느 한 항에 있어서,
본 발명에 따른 항체의 연속 정맥 주입을 포함하는 하나 이상의 치료 사이클에 투여되는 치료 사이클당 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 치료 사이클당 모르핀 용량 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 32 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 전체 치료 시간의 모르핀 용량은 비연속 주입 스케쥴에 있어서의 전체 치료 시간의 모르핀 용량 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 33 항 중 어느 한 항에 있어서,
본 발명에 따른 항체의 1시간 이상 또는 1일 이상의 연속 정맥 주입시 및/또는 전체 모르핀 치료 시간 또는 일에 투여되는 모르핀 용량은 50mcg/kg/h 미만 또는 30mcg/kg/h 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 34 항 중 어느 한 항에 있어서,
본 발명에 따른 항체의 1일 이상의 연속 정맥 주입 및/또는 전체 모르핀 치료일에 투여되는 1일 모르핀 용량은 0.9, 0.72, 0.48, 0.38, 0.4375 및/또는 0.205mg/kg/일 미만인 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 35 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 하나 이상의 진통제, 특히 모르핀의 용량은 전체 치료 시간 내, 치료 사이클 내, 치료 사이클 내의 항체 치료 기간 동안, 치료 사이클 내의 하나의 항체 치료일부터 다음 항체 치료일까지, 및/또는 하나의 치료 사이클에서부터 다음 치료 사이클까지 감소되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 36 항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 모르핀 용량은 치료 사이클 내, 치료 사이클 내의 항체 치료 기간 동안 및/또는 치료 사이클 내의 하나의 항체 치료일부터 다음 항체 치료일까지 연속적으로 감소되는 것을 특징으로 하는 GD2 양성암의 치료 방법.
제 1 항 내지 제 37 항 중 어느 한 항에 기재된 GD2 양성암의 치료 방법에 이용되는 것을 특징으로 하는 항-GD2 항체.
제 1 항 내지 제 37 항 중 어느 한 항에 기재된 GD2 양성암의 치료 방법을 위한 의약품의 제조에 있어서의 항-GD2 항체의 용도.