KR20150023601A - Composition Containing Extracts of Saururus chinensis - Google Patents

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KR20150023601A
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김정환
박원석
고현주
신홍주
김도훈
박종희
이창근
김형준
서정아
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(주)아모레퍼시픽
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Abstract

Disclosed is a composition which contains an extract of Saururus chinensis as an active ingredient. The composition has an effect of controlling pigmentation and scar of acne, and is widely used in cosmetic, food or medical fields. The composition for skin external use is characterized by having 0.5-20 wt% of the extract of Saururus chinenesis for controlling inflammation of acne and controlling serum production of acne based on total weight of the composition.

Description

삼백초 추출물 함유 조성물{Composition Containing Extracts of Saururus chinensis}Composition Containing Extracts of Saururus chinensis < RTI ID = 0.0 >

유효성분으로 삼백초 추출물 함유하는 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition containing an extract of Saururus chinensis as an active ingredient.

일반적으로 여드름은 남성 호르몬 분비와 관련된 피지 과잉에 의해 발생하게 된다. 구체적으로는, 남성 호르몬에 의해 피지가 발생되고 모공의 과각질화 현상(hyperkeratinization)이 유발되면서, 모공 입구가 좁아지거나 심한 경우 막히게 된다. 모공 입구가 좁아지거나 막히게 되면, 모공 내의 피지가 외부로 배출되지 못하게 되면서 미세면포를 형성하게 되고, 모공 내에 서식하는 혐기성 박테리아인 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)가 증식하면서 염증이 유발될 수 있다.In general, acne is caused by sebum excess associated with male hormone secretion. Specifically, sebum is generated by the male hormone and hyperkeratinization of the pores is induced, so that the entrance of the pore narrows or becomes obstructed in severe cases. When the pore opening becomes narrow or clogged, the sebaceous pores in the pores are prevented from being discharged to the outside, and microfeatures are formed. Propionibacterium acnes, an anaerobic bacteria living in the pores, have.

유발된 염증 반응으로 인해 홍반, 따끔거림, 또는 팽윤현상 등이 나타나며, 심한 경우 과색소 침착(hyperpigmentation)이 나타날 수 있다. 또한, 여드름 부위를 짜거나 누르게 되면, 면포가 터지면서 염증이 악화되거나, 조직 손상을 일으키면서 여드름 흉터를 남길 위험이 커지게 된다.The inflammatory reaction causes erythema, tingling, or swelling, and in severe cases hyperpigmentation may occur. In addition, when the acne area is squeezed or pressed, the risk of acne scarring is increased as the cotton bum pops and the inflammation worsens or tissue damage occurs.

이러한 여드름성 염증은, 다양한 원인에 의해 유발될 수 있으며, 예를 들어, 화장품 내에 함유된 각종 첨가제들이 피부에 남게 되면서 여드름성 염증을 유발할 수 있다. 또한, 체내에서 배출되는 피지, 땀 또는 자외선 등에 의해서도 피부 염증이 유발될 수 있다.Such acne inflammation can be caused by various causes, for example, various additives contained in cosmetics may be left on the skin and cause acne inflammation. Skin inflammation may also be caused by sebum, sweat or ultraviolet rays emitted from the body.

다양한 원인에 의해 유발되는 여드름성 염증에 대하여, 염증 자체의 치료에 대해서만 연구 개발이 집중되고 있는 실정이다. 그러나, 염증이 치료되더라도, 그로 인한 피부 홍반 또는 흉터 등이 남게 되고, 미용상 좋지 않은 결과를 낳게 된다. 따라서, 본 발명에서는, 여드름성 염증으로 인한 색소침착과 흉터를 억제 내지 예방하기 위한 연구를 실시하였다.
In acne inflammation caused by various causes, research and development are concentrated on the treatment of inflammation itself. However, even if the inflammation is treated, the skin erythema or scar resulting therefrom remains, resulting in poor cosmetic results. Therefore, in the present invention, studies were conducted to inhibit or prevent pigmentation and scarring caused by acne inflammation.

본 발명의 일실시예의 목적은 여드름성 색소침착 억제용 조성물을 제공하는 것이다.An object of one embodiment of the present invention is to provide a composition for inhibiting acne pigmentation.

본 발명의 또 다른 일실시예의 목적은 여드름성 흉터 억제용 조성물을 제공하는 것이다.Another object of one embodiment of the present invention is to provide a composition for suppressing acne scars.

본 발명의 또 다른 일실시예의 목적은 여드름 후유증에 대한 애프터케어용 조성물을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a composition for aftercare for acne sequelae.

본 발명의 일실시예에 따른 조성물은, 삼백초 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.The composition according to one embodiment of the present invention is characterized by containing Saururus chinensis extract as an active ingredient.

본 발명의 일실시예에 따른 조성물은, 여드름성 색소침착 및/또는 흉터를 억제하는 효과가 있다. 이를 통해, 화장품, 식품 또는 의약 분야에서 다양하게 활용가능하다.The composition according to one embodiment of the present invention has an effect of inhibiting acne pigmentation and / or scarring. As a result, it can be used in various fields such as cosmetics, food or medicine.

도 1(GM-CSF), 도 2(IL-1 α), 도 3(IL-8), 및 도 4(TNF-α)는, 본 발명의 일실시예에 따른 삼백초 추출물의 염증성 사이토카인의 억제 효능을 나타낸 그래프이다;
도 5는 본 발명의 일실시예에 따른 삼백초 추출물의 피지생성 억제 효능을 나타낸 그래프이다;
도 6은 본 발명의 일실시예에 따른 삼백초 추출물의 여드름성 색소침착 억제 효능을 나타낸 그래프이다;
도 7 내지 9는 본 발명의 일실시예에 따른 삼백초 추출물의 여드름성 흉터 억제 효능을 나타낸 그래프이다.
(GM-CSF), Figure 2 (IL-1 alpha), Figure 3 (IL-8), and Figure 4 (TNF- [alpha]) show that inflammatory cytokines of Saururus chinensis extract according to one embodiment of the present invention Inhibitory effect;
5 is a graph showing inhibitory effect on sebum production of Saururus chinensis extract according to an embodiment of the present invention;
FIG. 6 is a graph showing an effect of inhibiting acne pigmentation of Saururus chinensis extract according to an embodiment of the present invention;
FIGS. 7 to 9 are graphs showing an effect of inhibiting acne scars of Saururus chinensis extract according to an embodiment of the present invention.

본 발명에 따른 조성물은 삼백초 추출물을 유효성분으로 함유한다. 삼백초 추출물을 함유하는 조성물은, 여드름성 색소침착 및/또는 여드름성 흉터를 방지 내지 억제하는 효능이 인정된다. 일실시예에서, 본 발명에 따른 조성물은 유효성분으로 삼백초 추출물을 함유하는 여드름성 색소침착 억제용 조성물이다. 또 다른 일실시예에서, 본 발명에 따른 조성물은 유효성분으로 삼백초 추출물을 함유하는 여드름성 흉터 억제용 조성물이다.The composition according to the present invention contains Saururus chinensis extract as an active ingredient. Compositions containing Saururus chinensis extract are effective in preventing or inhibiting acne pigmentation and / or acne scarring. In one embodiment, the composition according to the present invention is an acne pigmentation-inhibiting composition containing Saururus chinense extract as an active ingredient. In another embodiment, the composition according to the present invention is an acne scar inhibiting composition containing Saururus chinensis extract as an active ingredient.

삼백초(Saururus chinensis)는 쌍떡잎식물 후추목 삼백초과의 여러해살이 풀의 일종이다. 뿌리줄기는 흰색이고 진흙 속에서 옆으로 뻗는다. 줄기의 높이는 50~100 cm이고, 6~8 월에 흰색 꽃이 핀다. 주로 습지에서 자라며, 뿌리, 잎 및 꽃이 흰색이기 때문에 삼백초라고 한다. 각기, 황달, 간염 등에 효과가 있는 것으로 알려져 있으며, 한국, 일본, 중국 등지에 분포한다. Saururus chinensis ) is a kind of perennial plant of the dicotyledonous plant Peppercorn Saururus chinensis. The rootstock is white and extends sideways in the mud. The height of the stem is 50-100 cm, and white flowers bloom in June-August. It grows mainly in wetlands and is called Saururus chinensis because its roots, leaves and flowers are white. It is known to be effective against jaundice, hepatitis, etc., and is distributed in Korea, Japan, and China.

삼백초 추출물은, 통상의 다양한 방법에 의해, 별도의 제한 없이 추출될 수 있다. 일실시예에서, 삼백초 추출물은 증류수, C1 내지 C5의 무수 또는 함수 저급 알코올과 같은 유기용매로 추출할 수 있다. 예를 들어, 삼백초 뿌리를 잘 씻어 말린 뒤 에탄올을 이용하여 상온에서 추출할 수 있다. 추출액은 분획, 여과 및 침전 등의 공정을 포함하는 정제공정을 추가로 거칠 수 있다. The Saururus chinensis extract can be extracted by various conventional methods without any limitation. In one embodiment, the Saururus chinensis extract may be extracted with an organic solvent such as distilled water, C 1 to C 5 anhydrous or hydrous lower alcohols. For example, it is possible to rinse the Saururus chinensis root and then extract it at room temperature using ethanol after drying. The extract may further be subjected to a purification process including fractionation, filtration and precipitation.

일실시예에서, 상기 삼백초 추출물은 젤라티나아제(gelatinase)를 억제하는 효능이 인정된다. 젤라티나아제는 다양한 종류의 곰팡이나 효모 등에서 발현되는 단백질 가수분해 효소의 일종으로, 젤라틴을 액화시키는 기능이 있다. 젤라티나아제의 종류는 특별히 제한되지 않으며, 인간에게서 발현되는 젤라티나아제 유전자로는 MMP-9(matrix metalloproteinase-9)과 MMP-2(matrix metalloproteinase-2) 등이 있다. 또 다른 일실시예에서, 상기 삼백초 추출물은 MMP-9 및/또는 MMP-2를 억제하는 효능이 인정된다. 본 발명에 따른 조성물은 젤라티나아제, 구체적으로는 MMP-9 및/또는 MMP-2를 억제함으로써, 여드름성 흉터를 방지 내지 억제하게 된다.
In one embodiment, the Saururus chinensis extract is effective in inhibiting gelatinase. Gelatinase is a type of protein hydrolyzing enzyme expressed in various kinds of fungi and yeast. It has a function of liquefaction of gelatin. There are no particular restrictions on the type of gelatinase, and examples of gelatinase genes expressed in humans include matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and matrix metalloproteinase-2 (MMP-2). In yet another embodiment, the Saururus chinensis extract is effective in inhibiting MMP-9 and / or MMP-2. The composition according to the present invention prevents or suppresses acne scars by inhibiting gelatinase, specifically MMP-9 and / or MMP-2.

본 발명에 따른 조성물은, 다양한 분야에서 특별한 제한 없이 활용될 수 있으며, 예를 들어, 피부 외용제로 제형화될 수 있고, 구체적으로 화장료 또는 약학 조성물의 형태로 제형화될 수 있다.
The composition according to the present invention can be utilized in various fields without particular limitation, for example, it can be formulated as an external preparation for skin, specifically, in the form of a cosmetic composition or a pharmaceutical composition.

본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은, 오일 또는 수성매질에서 용액, 현탁액 또는 유화액의 형태가 되거나, 사용하기 전에 무균, 발열 물질이 제거된 물로 녹여 사용하는 건조분말의 형태로 제형화될 수 있다. 유중수형 유화액은, 올리브유와 같은 식물성 기름 또는 액상 파라핀과 같은 광물성 오일을 유상으로 하고, 대두 레시틴 등의 자연산 인지질 및 소르비탄 모노올레이트와 같은 무수 헤시톨이나 지방산의 에스테르에서 유래된 것, 리옥시에틸렌소르비톨 모노올레이트와 같이 무수헥시톨과 지방산에서 유래한 부분 에스테르를 에틸렌옥사이드와 축합한 화합물들을 유화제로 하여 활성성분을 유화시킨 것이다.The composition for external application for skin according to the present invention may be in the form of a solution, suspension or emulsion in an oil or an aqueous medium, or may be formulated in the form of a dry powder which is dissolved in sterile, exothermic water before use. The water-in-oil type emulsion is prepared by emulsifying a mineral oil such as vegetable oil or liquid paraffin in an oil phase such as olive oil, natural acid phospholipids such as soybean lecithin and those derived from anhydride or fatty acid esters such as sorbitan monooleate, Such as ethylene sorbitol monooleate, are condensed with ethylene oxide as emulsifiers to emulsify the active ingredient.

일실시예에서, 본 발명에 따른 피부 외용제 조성물에 있어서, 삼백초 추출물의 함량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.5 내지 20 중량%일 수 있다. 추출물의 함량이 0.5 중량% 미만인 경우에는 피부상태의 관리 및 개선의 효과가 미미하고, 20 중량% 초과시에는 추출물 첨가로 인한 효율성이 떨어지고 제형 안정성 등의 문제가 유발될 수 있다.
In one embodiment, in the composition for external application for skin according to the present invention, the content of Saururus chinensis extract may be 0.5 to 20% by weight, based on the total weight of the composition. When the content of the extract is less than 0.5% by weight, the effect of the control and improvement of the skin condition is insignificant. When the content of the extract is more than 20% by weight, the efficiency due to the addition of the extract is decreased and the formulation stability and other problems may be caused.

상기 조성물이 화장료의 형태로 제형화되는 경우에는, 여드름성 색소침착을 방지하거나 개선시킬 목적으로 사용될 수 있다. 또한, 여드름성 흉터가 발생되는 것을 방지 또는 개선시킬 목적으로 사용될 수 있다. 상기 화장료 제형은, 특별히 한정되지 않으며, 예를 들어, 유연화장수, 영양화장수, 마사지 크림, 영양크림, 팩, 젤 또는 피부 점착타입 화장료의 제형을 갖는 화장료 조성물일 수 있으며, 또한 로션, 연고, 겔, 크림, 패취 또는 분무제와 같은 경피 투여형 제형 일 수 있다. 또한, 각각의 제형에 있어서, 다른 성분들은 기타 화장료 조성물의 종류 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.When the composition is formulated in the form of a cosmetic, it can be used for the purpose of preventing or improving acne pigmentation. It can also be used for the purpose of preventing or improving the occurrence of acne scars. The cosmetic formulation may be, for example, a cosmetic composition having a formulation of a softening agent, a nutritional lotion, a massage cream, a nutritional cream, a pack, a gel or a skin adhesive type cosmetic composition, , Creams, patches, or spray formulations. Further, in the respective formulations, other ingredients may be selected and mixed without difficulty by those skilled in the art depending on the kind of the other cosmetic composition or the purpose of use.

본 발명은 또한, 상기 조성물을 포함하는 약학 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 조성물을 포함하는 약학 조성물은, 여드름성 색소침착 및/또는 여드름성 흉터의 개선 내지 억제용 조성물일 수 있다.The present invention also provides a pharmaceutical composition comprising said composition. The pharmaceutical composition comprising the composition according to the present invention may be a composition for improving or inhibiting acne pigmentation and / or acne scars.

본 발명에 따른 조성물을 의약품에 적용할 경우에는, 상기 조성물을 유효성분으로 하여 상용되는 무기 또는 유기의 담체를 가하여 고체, 반고체 또는 액상의 형태로 경구 투여제 혹은 비경구 투여제로 제제화 할 수 있다.When the composition according to the present invention is applied to medicines, it may be formulated into an oral or parenteral dosage form in the form of solid, semi-solid or liquid by adding an inorganic or organic carrier to the composition as an active ingredient.

상기 경구 투여를 위한 제재로서는 정제 (錠劑), 환제 (丸劑), 과립제 (顆粒劑), 연·경 캡슐제, 산제, 세립제, 분제, 유탁제 (乳濁濟), 시럽제, 펠렛제 등을 들 수 있다. 또한, 상기 비경구 투여를 위한 제재로는 주사제, 점적제, 연고, 로션, 스프레이, 현탁제, 유제, 좌제 (坐劑) 등을 들 수 있다. 본 발명의 유효성분을 제제화하기 위해서는 상법에 따라서 실시하면 용이하게 제제화할 수 있으며 계면활성제, 부형제, 착색료, 향신료, 보존료, 안정제, 완충제, 현탁제, 기타 상용하는 보조제를 적당히 사용할 수 있다.Examples of the agent for oral administration include tablets, pills, granules, soft capsules, powders, granules, powders, emulsions, syrups and pellets. . Examples of the parenteral administration agent include injections, drops, ointments, lotions, sprays, suspensions, emulsions, suppositories, and the like. In order to formulate the active ingredient of the present invention, it can be easily formulated according to the conventional method. Surfactants, excipients, coloring agents, spices, preservatives, stabilizers, buffering agents, suspending agents and other adjuvants can be suitably used.

본 발명에 따른 상기 약학 조성물은 경구, 비경구, 직장, 국소, 경피, 정맥 내, 근육 내, 복강 내, 피하 등으로 투여될 수 있다. The pharmaceutical composition according to the present invention may be administered orally, parenterally, rectally, topically, transdermally, intravenously, intramuscularly, intraperitoneally, subcutaneously and the like.

또한, 상기 활성성분의 투여량은 치료 받을 대상의 연령, 성별, 체중과, 치료할 특정 질환 또는 병리 상태, 질환 또는 병리 상태의 심각도, 투여경로 및 처방자의 판단에 따라 달라질 것이다. 이러한 인자에 기초한 투여량 결정은 당업자의 수준 내에 있다. 일반적인 투여량은 0.001 mg/kg/일 내지 2000 mg/kg/일, 보다 구체적으로는 0.5 mg/kg/일 내지 1500 mg/kg/일이다.
In addition, the dosage of the active ingredient will depend on the age, sex, body weight of the subject to be treated, the particular disease or condition to be treated, the severity of the disease or condition, the route of administration and the judgment of the prescriber. Dosage determinations based on these factors are within the level of those skilled in the art. Typical dosages are from 0.001 mg / kg / day to 2000 mg / kg / day, more specifically from 0.5 mg / kg / day to 1500 mg / kg / day.

일실시예에서, 본 발명은 삼백초 추출물을 함유하는 애프터케어(aftercare)용 조성물을 제공한다. 보다 구체적으로는, 여드름에 의한 피부 트러블로 인한 색소침착 및/또는 흉터 등의 후유증을 종합적으로 관리하고, 피부상태를 개선하기 위한 애프터케어용 조성물을 제공한다.In one embodiment, the present invention provides a composition for aftercare containing Saururus chinensis extract. More specifically, the present invention provides an aftercare composition for managing skin condition and / or aftereffects such as scarring caused by skin troubles caused by acne in a comprehensive manner and improving the skin condition.

일실시예에서, 본 발명에 따른 애프터케어용 조성물에 있어서, 삼백초 추출물의 함량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.5 내지 20 중량%일 수 있다. 추출물의 함량이 0.5 중량% 미만인 경우에는 피부상태의 관리 및 개선의 효과가 미미하고, 20 중량% 초과시에는 추출물 첨가로 인한 효율성이 떨어지고 제형 안정성 등의 문제가 유발될 수 있다. In one embodiment, in an aftercare composition according to the present invention, the content of Saururus chinensis extract may be 0.5 to 20% by weight, based on the total weight of the composition. When the content of the extract is less than 0.5% by weight, the effect of the control and improvement of the skin condition is insignificant. When the content of the extract is more than 20% by weight, the efficiency due to the addition of the extract is decreased and the formulation stability and other problems may be caused.

본 발명에서 '애프터케어(aftercare)'란, 피부상태를 관리 및 개선하기 위한 종합적인 사후관리를 의미한다. 예를 들어, 휴가철에 해변, 강 또는 계곡 등에서 물놀이를 즐기거나, 선탠 또는 태닝 등을 장시간 할 경우에는, 피부가 자외선에 과도하게 노출되면서 염증이 유발될 수 있다. 또한, 피부에 도포된 썬크림 또는 오일 등에 함유된 각종 첨가제들이 피부에 남게 되면서 여드름성 염증을 유발할 수도 있다. 이 외에도 일상생활 속에서 다양한 원인에 의해 여드름성 염증과 같은 피부 트러블이 유발될 수 있다. 애프터케어는, 이러한 여드름성 염증을 포함하는 피부 트러블에 대해서 피부 관리 및 피부 상태 개선을 위한 사후 관리를 총칭하는 의미이다. 또한, 애프터케어용 조성물은 애프터케어를 위해 피부에 점착, 침착 내지 도포시키는 조성물을 포괄하는 의미이다.
In the present invention, 'after care' means comprehensive after-care for managing and improving the skin condition. For example, if you enjoy swimming in beaches, rivers or valleys during the holiday season, or for a long time, such as tanning or tanning, your skin may become overexposed to ultraviolet light and cause inflammation. In addition, various additives such as sunscreen or oil applied to the skin may cause acne inflammation by remaining on the skin. In addition, skin troubles such as acne inflammation can be caused by various causes in daily life. After care is meant to collectively refer to the skin care and skin care management for improving the skin condition, including acne inflammation. In addition, the composition for aftercare is meant to encompass a composition for sticking, depositing or applying to the skin for aftercare.

일실시예에서, 본 발명은 상기 조성물을 포함하는 식품 첨가제, 기능성 식품 또는 건강식품 등을 제공한다. 구체적으로는, 상기 조성물은, 여드름성 색소침착 및/또는 흉터의 개선 내지 억제용 조성물일 수 있다. In one embodiment, the present invention provides a food additive, a functional food, a health food or the like containing the composition. Specifically, the composition may be a composition for improving or inhibiting acne pigmentation and / or scarring.

본 발명에 따른 조성물은 포함하는 다양한 형태의 식품 첨가제 또는 기능성 식품을 제공한다. 상기 조성물을 포함하는 발효유, 치즈, 요구르트, 주스, 생균제제 및 건강보조식품 등으로 가공될 수 있으며, 그 외 다양한 식품 첨가제의 형태로 사용될 수 있다. The composition according to the present invention provides various types of food additives or functional foods containing them. It can be processed into fermented milk, cheese, yogurt, juice, probiotic agent and health supplement food including the above composition, and it can be used in various other food additives.

일실시예에서 상기 조성물은, 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 주 효과에 상승 효과를 줄 수 있는 다른 성분 등을 함유할 수 있다. 예를 들어, 물성 개선을 위하여 향료, 색소, 살균제, 산화방지제, 방부제, 보습제, 점증제, 무기염류, 유화제 및 합성 고분자 물질 등의 첨가제를 더 포함할 수 있다. 그 외에도, 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당 및 해초 엑기스 등의 보조 성분을 더 포함할 수도 있다. 상기 성분들은 제형 또는 사용 목적에 따라서 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있으며, 그 첨가량은 본 발명의 목적 및 효과를 손상시키지 않는 범위 내에서 선택될 수 있다. In one embodiment, the composition may contain other ingredients or the like that can give synergistic effects to the main effect within a range that does not impair the intended main effect of the present invention. For example, additives such as perfume, coloring agent, bactericide, antioxidant, preservative, moisturizing agent, thickening agent, inorganic salt, emulsifier and synthetic polymer substance may be further added for improvement of physical properties. In addition, it may further contain auxiliary components such as water-soluble vitamins, oil-soluble vitamins, polymer peptides, polymeric polysaccharides and seaweed extract. The above components may be mixed and selected without difficulty by those skilled in the art depending on the purpose of formulation or use, and the amount thereof may be selected within a range that does not impair the objects and effects of the present invention.

본 발명에 따른 조성물의 제형은 용액, 유화물, 점성형 혼합물, 타블렛, 분말 등의 다양한 형태일 수 있으며, 이는 단순 음용, 주사 투여, 스프레이 방식 또는 스퀴즈 방식 등의 다양한 방법으로 투여될 수 있다.
The composition according to the present invention may be in various forms such as a solution, an emulsion, a viscous mixture, a tablet, a powder, etc., and may be administered by various methods such as simple drinking, injection administration, spraying or squeezing.

이하, 하기 실시예에 의하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다.  다만, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들만으로 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to the following examples. However, the following examples are for illustrative purposes only and are not intended to limit the scope of the present invention.

[[ 실시예Example 1] 삼백초 추출물 제조 1] Preparation of Saururus chinensis extract

삼백초 뿌리를 잘 씻어 말린 뒤 10 배의 에탄올에 상온에서 7 일 동안 추출하였다. 추출액은 250 메쉬 (3 ㎛)의 필터로 여과한 뒤 60℃에서 농축하였다. 농축액을 물에 녹인 후, 에틸아세테이트 (ethylacetate)를 첨가하여 에틸아세테이트층을 분리한 뒤, 다시 60℃의 온도에서 농축하였다. 농축물에 메틸렌 클로라이드(methylene chloride)를 첨가하였다. 그런 다음, 2 회 에틸아세테이트와 헥산의 혼합 용액에 침전시켜 불순물을 제거한 뒤 컬럼으로 분획하였다. 컬럼 분획물에 대하여, 60℃에서의 농축과 30℃에서의 감압 농축을 반복하여 잔류용매를 완전히 제거한 뒤, 부틸렌글리콜에 2% 용액이 되도록 녹였다. 만들어진 용액에 대하여 추가적인 여과와 침전을 거쳐 삼백초 추출물을 제조하였다.
Saururus chinensis root was washed well and then extracted with 10 times ethanol at room temperature for 7 days. The extract was filtered through a filter of 250 mesh (3 mu m) and then concentrated at 60 < 0 > C. The concentrate was dissolved in water, and ethyl acetate layer was separated by adding ethylacetate and then concentrated at a temperature of 60 ° C. To the concentrate was added methylene chloride. Then, the mixture was precipitated twice in a mixed solution of ethyl acetate and hexane to remove impurities, and then the fractions were separated into columns. The column fractions were repeatedly subjected to concentration at 60 ° C and concentration under reduced pressure at 30 ° C to completely remove the residual solvent, and then the solution was dissolved in butylene glycol to make a 2% solution. The resulting solution was subjected to additional filtration and precipitation to prepare Saururus chinensis extract.

[[ 실험예Experimental Example 1] 세포( 1] cells ( CellCell ) 배양 조건) Culture conditions

5 주령의 수컷 골든 햄스터 귀의 피지선으로부터 햄스터 피지선 세포(sebocyte)를 적출하였다. 구체적인 적출방법은, 사토(Sato) 등의 논문(J Invest Dermatol 2001, 117:965-70)을 참고하였다. 적출된 피지선 세포를 배양 플라스크에서 배양하여, 2.35x104 개/cm2가 되도록 하였다. Hamster sebocytes were extracted from the sebaceous glands of five-week-old male golden hamster ears. For specific extraction methods, see Sato et al. (J Invest Dermatol 2001, 117: 965-70). The extracted sebaceous cells were cultured in a culture flask so as to be 2.35 x 10 4 / cm 2 .

배양 배지는, DMEM/함스 F12 배지(DMEM/Ham’s F12 medium; (1:1) (DMEM/F12) (Invitrogen, Carlsbad, CA))에 우태혈청(fetal bovine serum; JRH Bioscience, Tokyo, Japan)을 10% 첨가하고, 0.68 mM의 L-글루타민(L-glutamine; Invitrogen), 10 nM의 rhEGF(recombinant human epidermal growth factor; Progen Biotechnik GmbH, Heidelberg, Germany)를 첨가하여 제조하였다. The culture medium was prepared by adding fetal bovine serum (JRH Bioscience, Tokyo, Japan) to DMEM / Ham's F12 medium (DMEM / Ham's F12 medium; (DMEM / F12) (Invitrogen, Carlsbad, CA) (Invitrogen) and 10 nM of rhEGF (recombinant human epidermal growth factor; Progen Biotechnik GmbH, Heidelberg, Germany).

항생제로는 페니실린(penicillin) 100 mg/ml, 스트렙토마이신(streptomycin) 100 mg/ml (all from GIBCO, Milan, Italy)를 함께 사용하였다. 햄스터 피지선 세포는 배양 플라스크에 완전히 부착되는데 24 시간이 소요되었으며, 37℃, 5% CO2에서 배양하였다.Penicillin 100 mg / ml and streptomycin 100 mg / ml (all from GIBCO, Milan, Italy) were used as antibiotics. Hamster sebaceous cells were attached to the culture flask for 24 hours and cultured at 37 ° C and 5% CO 2 .

사람 유래의 각질 세포(keratinocyte) 셀라인인 HaCaT은, DMEM 배지(Invitrogen, Carlsbad, CA)에 우태혈청(fetal bovine serum; JRH Bioscience, Tokyo, Japan)을 10% 첨가하고, 페니실린 100 mg/ml, 스트렙토마이신 100 mg/ml(all from GIBCO, Milan, Italy)을 첨가한 배지를 사용하여, 37℃, 5% CO2 조건에서 배양하여 사용하였다. HaCaT, a human keratinocyte cell line, was prepared by adding 10% fetal bovine serum (JRH Bioscience, Tokyo, Japan) to DMEM medium (Invitrogen, Carlsbad, Calif.), Adding penicillin 100 mg / The cells were cultured in a medium supplemented with 100 mg / ml streptomycin (all from GIBCO, Milan, Italy) at 37 ° C and 5% CO 2.

C57BL/6J 마우스 유래의 멜라닌 형성 세포(melanocyte)인 멜란-a(melan-a)는, RPMI-1640(Invitrogen, Carlsbad, CA)에 우태혈청(fetal bovine serum; JRH Bioscience, Tokyo, Japan)을 10% 첨가하고, TPA(tetradecanoyl phorbol acetate) 200 nM, 페니실린 100 mg/ml, 및 스트렙토마이신 100 mg/ml(all from GIBCO, Milan, Italy)를 첨가한 배지를 사용하여, 37℃, 10% CO2 조건에서 배양하여 사용하였다.
Melan-a melanocyte melanocyte derived from C57BL / 6J mouse was cultured in RPMI-1640 (Invitrogen, Carlsbad, CA) with fetal bovine serum (JRH Bioscience, Tokyo, 10% CO 2 (100 μl) was added to the medium supplemented with 200 nM of TPA (tetradecanoyl phorbol acetate), 100 mg / ml of penicillin and 100 mg / ml of streptomycin (all from GIBCO, Milan, Italy) Lt; / RTI >

[[ 실험예Experimental Example 2]  2] 여드름성Acne castle 염증억제 효과  Inflammation inhibitory effect inin vitrovitro 평가 evaluation

삼백초 추출물의 여드름성 염증 억제효과를 효율적으로 평가하기 위해서 피지선 세포와 각질 세포를 함께 사용하여 사람의 여드름 병변과 유사한 환경의 in vitro 염증 모델을 사용하였다. 24 웰(well)의 배양 플레이트에 HaCaT 각질 세포와 골든 햄스터 피지선 세포를 각각 3.75x104 개와 6.0x104 개씩 접종하였다. 접종 후, 하루 동안 배양 플레이트의 바닥에 세포가 붙을 수 있도록 기다렸다. 이 때 배지는 DMEM/함스 F12 배지(DMEM/Ham’s F12 medium; (1:1) (DMEM/F12) (Invitrogen, Carlsbad, CA))에 우태혈청(fetal bovine serum; JRH Bioscience, Tokyo, Japan)을 10% 첨가하고, 페니실린(penicillin) 100 mg/ml, 스트렙토마이신(streptomycin) 100 mg/ml (all from GIBCO, Milan, Italy)를 첨가하여 사용하였다. In order to evaluate effectively the inhibitory effect of Saururus chinensis extract on acne inflammation, in vitro inflammation model of environment similar to human acne lesion was used by using sebaceous gland cells and keratinocytes together. HaCaT keratinocytes and golden hamster sebaceous cells were inoculated in a 24 well culture plate at 3.75x10 4 and 6.0x10 4 , respectively. After inoculation, the cells were allowed to adhere to the bottom of the culture plate for one day. At this time, the medium was incubated with fetal bovine serum (JRH Bioscience, Tokyo, Japan) supplemented with DMEM / Ham's F12 medium (DMEM / Ham's F12 medium; (DMEM / F12) (Invitrogen, Carlsbad, CA) (Penicillin 100 mg / ml) and streptomycin 100 mg / ml (all from GIBCO, Milan, Italy) were added to each well.

하루 지난 세포에 여드름성 염증을 일으키기 위한 자극원으로 리놀레산(linoleic acid) 50 μM, 아라키돈산(arachidonic acid) 50 μM, 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone) 10 nM, 여드름균(P. acnes) 0.5%를 처리하였다. 동시에 삼백초 추출물을 처리하여 자극원에 의한 여드름성 염증 억제효과를 관찰하였다. 음성 대조군으로는 DMSO를 사용했으며, 양성 대조군으로는 여드름 치료 전문의약품으로 널리 사용되고 있는 이소트레티노인(isotretinoin) 100 nM 사용하였다. 자극원과 추출물을 처리하고 하루가 경과한 후, 배양액에 녹아 나온 염증성 사이토카인(post-inflammatory cytokine)인 GM-CSF(granulocyte macrophage colony-stimulating factor), IL-1 α(interleukin-1 alpha), IL-8(interleukin-8), TNF-α(tumor necrosis factor-alpha)의 농도를 멀티플렉스 비드-기반 사이토카인 분석(Multiplex bead-based cytokine assay)을 통해 50 μl의 배지에서 측정하였다. Day of linoleic acid with irritants in the last cell for causing acne inflammation (linoleic acid) 50 μM, arachidonic acid (arachidonic acid) 50 μM, dihydrotestosterone (dihydrotestosterone) 10 nM, acne bacteria (P. acnes) treated with 0.5% Respectively. At the same time, Saururus chinensis extract was treated to observe the acne inflammation inhibitory effect by stimulus source. DMSO was used as a negative control and 100 nM isotretinoin, a widely used drug for acne treatment, was used as a positive control. (GM-CSF) (granulocyte macrophage colony-stimulating factor), IL-1α (interleukin-1alpha), and IL-1α, which are the inflammatory cytokines dissolved in the culture medium Concentrations of IL-8 (interleukin-8) and TNF-α (tumor necrosis factor-alpha) were measured in a 50 μl medium using a multiplex bead-based cytokine assay.

보다 구체적으로는, 다음의 과정을 실행하였다: 미리 세척 버퍼를 사용해 적셔둔 96-웰 필터 플레이트 안의 용액을 진공 펌프를 이용해 모두 빨아 내었다. 다음으로, 셀(cell) 배양액을 30 분간 항체-콘쥬게이트된 비드(antibody-conjugated bead)와 반응시켰다. 반응이 종료되면 검출항체(detection antibody)를 첨가하여 30 분 더 반응시켰다. 그런 다음, 스트렙타비딘-피코에리트린(Streptavidin-PE; streptavidin-phycoerythrin)를 각 웰(well)에 넣고 30 분간 기다렸다. 세척 버퍼를 사용해서 붙지 않은 Streptavidin-PE를 제거한 뒤 사이토카인에 붙은 비드의 양을 바이오-플렉스 200(Bio-plex 200) 장치를 이용해 분석하였다. More specifically, the following procedure was carried out: The solution in the 96-well filter plate, which had previously been soaked with the wash buffer, was all sucked off using a vacuum pump. Next, the cell culture was reacted with an antibody-conjugated bead for 30 minutes. When the reaction was completed, a detection antibody was added and the reaction was further continued for 30 minutes. Then streptavidin-phycoerythrin (Streptavidin-PE) was added to each well and waited for 30 minutes. The unbound Streptavidin-PE was removed using wash buffer and the amount of beads attached to the cytokine was analyzed using a Bio-plex 200 device.

분석결과는 도 1(GM-CSF), 도 2(IL-1α), 도 3(IL-8), 및 도 4(TNF-α)에 차례대로 나타내었다. 도 1 내지 4를 참조하면, 본 발명에 따른 삼백초 추출물은 염증성 사이토카인을 농도의존적으로 억제시키는 것을 알 수 있다. 다만, 도 2(IL-1α)에서는 오히려 50 ppm 미만의 농도에서 효과가 우수한 것으로 나타났다.
The results of the analysis are shown in FIG. 1 (GM-CSF), FIG. 2 (IL-1α), FIG. 3 (IL-8), and FIG. 4 (TNF-α). Referring to FIGS. 1 to 4, it can be seen that the Saururus chinensis extract according to the present invention inhibits inflammatory cytokines in a concentration-dependent manner. However, in FIG. 2 (IL-1α), the effect was more excellent at a concentration of less than 50 ppm.

[[ 실험예Experimental Example 3]  3] 여드름성Acne castle 피지생성 억제 효과  Sebum production inhibitory effect inin vitrovitro 평가 evaluation

삼백초 추출물의 여드름성 피지생성 억제 효과를 효율적으로 평가하기 위해서, 피지선 세포와 각질 세포를 함께 사용하여, 사람의 여드름 병변과 유사한 환경의 in vitro 모델을 사용하였다. 24 웰(well)의 배양 플레이트에 HaCaT 각질 세포와 골든 햄스터 피지선 세포를 각각 3.75x104 개와 6.0x104 개씩 접종하였다. 접종 후, 배양 플레이트 바닥에 세포가 붙을 수 있도록 하루 동안 기다렸다. 이 때 배지는 DMEM/함스 F12 배지(DMEM/Ham’s F12 medium; (1:1) (DMEM/F12) (Invitrogen, Carlsbad, CA))에 우태혈청(fetal bovine serum; JRH Bioscience, Tokyo, Japan)을 10% 첨가하고, 페니실린(penicillin) 100 mg/ml, 스트렙토마이신(streptomycin) 100 mg/ml (all from GIBCO, Milan, Italy)를 첨가하여 사용하였다. In order to evaluate effectively the inhibitory effect of Saururus chinensis extract on the production of acne vulgaris, an in vitro model of an environment similar to human acne lesion was used using both sebaceous and keratinocytes. HaCaT keratinocytes and golden hamster sebaceous cells were inoculated in a 24 well culture plate at 3.75x10 4 and 6.0x10 4 , respectively. After inoculation, the cells were allowed to adhere to the bottom of the culture plate for one day. At this time, the medium was incubated with fetal bovine serum (JRH Bioscience, Tokyo, Japan) supplemented with DMEM / Ham's F12 medium (DMEM / Ham's F12 medium; (DMEM / F12) (Invitrogen, Carlsbad, CA) (Penicillin 100 mg / ml) and streptomycin 100 mg / ml (all from GIBCO, Milan, Italy) were added to each well.

하루 지난 세포에 여드름성 염증을 일으키기 위한 자극원으로 리놀레산(linoleic acid) 50 μM, 아라키돈산(arachidonic acid) 50 μM, 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone) 10 nM, 여드름균(P. acnes) 0.5%를 처리하였다. 동시에 삼백초 추출물을 처리하여 자극원에 의한 여드름성 염증 억제효과를 관찰하였다. 음성 대조군으로는 DMSO를 사용했으며, 양성 대조군으로는 여드름 치료 전문의약품으로 널리 사용되고 있는 이소트레티노인(isotretinoin) 100 nM 사용하였다. 자극원과 추출물을 처리하고 하루 경과한 후, 세포안에 생성된 중성 지방의 양을 오일 레드 오(Oil Red O) 염색법을 사용해 측정하였다.Day of linoleic acid with irritants in the last cell for causing acne inflammation (linoleic acid) 50 μM, arachidonic acid (arachidonic acid) 50 μM, dihydrotestosterone (dihydrotestosterone) 10 nM, acne bacteria (P. acnes) treated with 0.5% Respectively. At the same time, Saururus chinensis extract was treated to observe the acne inflammation inhibitory effect by stimulus source. DMSO was used as a negative control and 100 nM isotretinoin, a widely used drug for acne treatment, was used as a positive control. The amount of triglyceride produced in the cells was measured using Oil Red O staining method after treatment with stimulus source and extracts.

보다 구체적으로는 다음의 과정을 실행하였다: PBS로 세척한 세포를 30 분간 3.7% 포름알데히드(formaldehyde) 용액으로 고정하였다. 고정된 세포는 PBS로 3 회, 70% 에탄올로 1 회 세척하고 0.4% 오일 레드 오(Oil Red O) 용액으로 30 분간 염색하였다. 염색된 세포는 70% 에탄올로 1 회, PBS로 3 회 세척하였다. 그런 다음, 이소프로판올로 염색된 오일 레드 오(Oil Red O) 용액을 다시 녹여내어 분광광도계(spectrophotometer)를 사용하여 520 nm에서 흡광도를 측정하여 정량하였다.More specifically, the following procedure was carried out: Cells washed with PBS were fixed with 3.7% formaldehyde solution for 30 minutes. The fixed cells were washed 3 times with PBS, once with 70% ethanol, and stained with 0.4% Oil Red O solution for 30 minutes. The stained cells were washed once with 70% ethanol and three times with PBS. Then, isopropanol dyed Oil Red O solution was re-dissolved and absorbance was measured at 520 nm using a spectrophotometer.

정량한 결과는 도 5에 나타내었다. 도 5를 참조하면, 삼백초 추출물은 농도의존적으로 피지를 억제하며, 50 ppm 이상의 농도에서 유효한 피지 억제 효과를 발휘하였다.
The results of quantification are shown in Fig. Referring to FIG. 5, the Saururus chinensis extract inhibited sebum in a concentration-dependent manner, and showed an effective sebum inhibitory effect at a concentration of 50 ppm or more.

[[ 실험예Experimental Example 4]  4] 여드름성Acne castle 색소침착 억제 효과  Pigment inhibition effect inin vitrovitro 평가 evaluation

삼백초 추출물의 여드름성 색소침착 억제 효과를 효율적으로 평가하기 위해서, 멜라닌 형성 세포를 사용하여, 사람의 여드름성 염증에 의해 유도된 색소침착과 유사한 환경의 in vitro 모델을 사용하였다. 24 웰(well)의 배양 플레이트에 멜란-a(melan-a) 멜라닌 형성 세포를 5.0x104 개 접종하였다. 접종 후, 배양 플레이트 바닥에 세포가 붙을 수 있도록 하루 동안 기다렸다. 이 때 배지는 RPMI-1640(Invitrogen, Carlsbad, CA)에 우태혈청(fetal bovine serum; JRH Bioscience, Tokyo, Japan)을 10% 첨가하고, TPA(tetradecanoyl phorbol acetate) 200 nM, 페니실린(penicillin) 100 mg/ml, 스트렙토마이신(streptomycin) 100 mg/ml(all from GIBCO, Milan, Italy)를 첨가하여 사용하였다. In order to efficiently evaluate the inhibitory effect of Saururus chinensis extract against acne pigmentation, an in vitro model of environment similar to pigmentation induced by human acne inflammation was used, using melanin - forming cells. Melan-a melanin-forming cells were inoculated in a 24-well culture plate at 5.0 x 10 4 cells / well. After inoculation, the cells were allowed to adhere to the bottom of the culture plate for one day. At this time, 10% of fetal bovine serum (JRH Bioscience, Tokyo, Japan) was added to RPMI-1640 (Invitrogen, Carlsbad, Calif.) And 200 nM of tetradecanoyl phorbol acetate (TPA), 100 mg of penicillin / ml, streptomycin 100 mg / ml (all from GIBCO, Milan, Italy).

하루 지난 세포에 여드름성 색소침착을 일으키기 위한 자극원으로 리놀레산(linoleic acid) 50 μM, 아라키돈산(arachidonic acid) 50 μM, 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone) 10nM, 여드름균(P. acnes) 0.5%를 처리하고 5 일 동안 배양하였다. 그 후 삼백초 추출물을 처리하여 자극원들에 의한 여드름성 색소침착 억제효과를 관찰하였다. 음성 대조군으로는 DMSO를 사용했으며, 양성 대조군으로는 하이드로퀴논(hydroquinone; 1 μM)과 코지산(kojic acid; 200 ppm)을 각각 사용하였다. 하이드로퀴논은 멜라민 저해제로 사용되는 전문 의약품이다. 또한, 코지산은 미백 효능이 인정되며, 화장료 조성물의 원료물질 중 하나로 사용되기도 한다. 그러나, 코지산은 피부에 강한 자극을 줄 우려가 있으며, 최근에는 여러 가지 암을 유발할 가능성이 있다고 보고된 바 있다. 추출물을 처리하고 5 일 지난 뒤, 1 N NaOH를 처리하여 멜라닌(melanin)을 녹여낸 후 분광광도계(spectrophotometer)를 이용하여 405 nm에서 흡광도를 측정하였다. One day later, 50 μM of linoleic acid, 50 μM of arachidonic acid, 10 nM of dihydrotestosterone, and 0.5% of acne ( P. acnes ) were treated as stimulants to cause acne pigmentation And cultured for 5 days. After that, the extract of Saururus chinensis was treated to observe the effect of stimulants on the inhibition of acne pigmentation. DMSO was used as a negative control, and hydroquinone (1 μM) and kojic acid (200 ppm) were used as positive control groups, respectively. Hydroquinone is a specialty medicine used as a melamine inhibitor. In addition, kojic acid is recognized as a whitening effect and may be used as one of raw materials for a cosmetic composition. However, Kojisan may cause a strong irritation to the skin, and recently it has been reported that it may cause various cancers. After 5 days of treatment, the extract was treated with 1 N NaOH to dissolve the melanin, and the absorbance was measured at 405 nm using a spectrophotometer.

측정결과는 도 6에 나타내었다. 도 6을 참조하면, 본 발명에 따른 삼백초 추출물은 농도의존적으로 색소침착을 억제하는 효과가 있음을 확인하였다. 특히, 5 ppm 농도에서는 색소침착 억제 효과가 매우 뛰어나며, 자극원을 처리하지 않은 대조군보다 오히려 색소침착 정도가 낮은 것으로 나타났다. 이를 통해, 본 발명에 따른 삼백초 추출물은 색소침착 억제 효능이 우수하며, 나아가 미백효능도 있음을 확인하였다.
The measurement results are shown in Fig. Referring to FIG. 6, the Saururus chinensis extract according to the present invention has an effect of inhibiting pigment deposition in a concentration-dependent manner. Especially, at 5 ppm concentration, the inhibition effect of pigmentation was very good and the degree of pigmentation was lower than that of control group without stimulus source. As a result, it was confirmed that the Saururus chinensis extract according to the present invention has an excellent inhibitory effect on pigment deposition and a whitening effect.

[[ 실험예Experimental Example 5]  5] 여드름성Acne castle 흉터 억제 효과  Scar inhibitory effect inin vitrovitro 평가 evaluation

삼백초 추출물의 여드름성 흉터 억제효과를 효율적으로 평가하기 위해서 피지선 세포를 사용하여 사람의 여드름 병변과 유사한 환경의 in vitro 여드름 흉터 모델을 사용하였다. 24 웰(well)의 배양 플레이트에 골든 햄스터 피지선 세포를 6.0x104 개 접종하였다. 접종 후, 하루 동안 배양 플레이트 바닥에 세포가 붙을 수 있도록 기다렸다. 이 때 배지는 DMEM/함스 F12 배지(DMEM/Ham’s F12 medium; (1:1) (DMEM/F12) (Invitrogen, Carlsbad, CA))에 우태혈청(fetal bovine serum; JRH Bioscience, Tokyo, Japan)를 10% 첨가하고, 페니실린(penicillin) 100 mg/ml, 스트렙토마이신(streptomycin) 100 mg/ml(all from GIBCO, Milan, Italy)를 첨가하여 사용하였다. In order to evaluate effectively the acne scar inhibitory effect of Saururus chinensis extract, we used an in vitro acne scar model of environment similar to human acne lesion using sebaceous gland cells. 6.0x10 < 4 > of golden hamster ovary cells were inoculated on a 24 well culture plate. After inoculation, the cells were allowed to adhere to the bottom of the culture plate for one day. The culture medium was supplemented with fetal bovine serum (JRH Bioscience, Tokyo, Japan) supplemented with DMEM / Ham's F12 medium (DMEM / Ham's F12 medium (1: 1) (DMEM / F12) (Invitrogen, Carlsbad, CA) (Penicillin 100 mg / ml) and streptomycin 100 mg / ml (all from GIBCO, Milan, Italy) were added to each well.

하루 지난 세포에 여드름성 염증을 일으키기 위한 자극원으로 리놀레산(linoleic acid) 50 μM, 아라키돈산(arachidonic acid) 50 μM, 디하이드로테스토스테론(dihydrotestosterone) 10nM, 여드름균(P. acnes) 0.5%를 처리하였다. 동시에 삼백초 추출물을 처리하여 자극원들에 의한 여드름성 흉터 억제효과를 관찰하였다. 음성 대조군으로는 DMSO를 사용하였으며, 양성 대조군으로는 여드름 치료 전문 의약품으로 널리 사용되고 있는 이소트레티노인(isotretinoin)을 100 nM 사용하였다. 자극원과 추출물을 처리하고 하루 지난 뒤, 배양액에 녹아 나온 MMP(matrix metalloproteinase)의 젤라틴(gelatin) 분해 활성을 젤라틴 지모그래피(gelatin zymography)법을 사용하여 측정하였다. One day old cells were treated with 50 μM of linoleic acid, 50 μM arachidonic acid, 10 nM of dihydrotestosterone, and 0.5% of acne ( P. acnes ) as stimulants to cause acne inflammation . At the same time, Saururus chinensis extract was treated to observe the acne scar inhibitory effect by stimulants. DMSO was used as a negative control, and 100 nM of isotretinoin, a widely used drug for treating acne, was used as a positive control. Gelatin degradation activity of matrix metalloproteinase (MMP) dissolved in culture broth was measured by gelatin zymography method one day after treatment with stimulus source and extract.

보다 구체적으로는, 다음의 과정을 실행하였다: 세포 배양액 5 μl와 트리스-글리신 샘플 버퍼(Tris-Glycine sample buffer; Invitrogen, Carlsbad, CA) 5 μl을 섞어 2 mg/ml의 젤라틴이 포함된 10% 아크릴아미드 겔에 150 V에서 2 시간 동안 전기영동을 하였다. 겔을 틀에서 분리하여 리네이쳐링 버퍼(renaturing buffer)에 30 분, 디벨로핑 버퍼(developing buffer)에 30 분 상온에서 반응시킨 뒤 다시 디벨로핑 버퍼(developing buffer)에 넣어 37℃에서 8 시간 동안 반응시켰다. 디벨로핑(developing buffer)를 제거하고 PBS로 3 회 세척한 뒤, 심플리블루(SimplyBlue; Invitrogen, Carlsbad, CA)로 1 시간 동안 염색하였다. 염색된 겔을 밴드(band)와 배경이 충분히 구분될 때까지 증류수로 세척하고 관찰하였다. More specifically, the following procedure was carried out: 5 μl of the cell culture and 5 μl of a Tris-Glycine sample buffer (Invitrogen, Carlsbad, Calif.) Were mixed to obtain a 10% The acrylamide gel was electrophoresed at 150 V for 2 hours. The gel was separated from the frame and allowed to react in a renaturing buffer for 30 minutes and a developing buffer for 30 minutes at room temperature. The gel was then added to a developing buffer and incubated at 37 ° C for 8 hours Lt; / RTI > The developing buffer was removed, washed three times with PBS, and stained with SimplyBlue (Invitrogen, Carlsbad, CA) for 1 hour. The stained gel was washed and observed with distilled water until the band and background were sufficiently distinguished.

실험 결과는 도 7 내지 9에 나타내었다. 도 7에는 전기영동을 통해 분리된 MMP-9 및 MMP-2를 확인할 수 있다. 도 8과 9에서는 본 발명에 따른 삼백초 추출물이 MMP-9 및 MMP-2 억제효과가 있음을 알 수 있다. 이러한 억제효과는, 여드름 치료 전문 의약품으로 널리 사용되고 있는 이소트레티오닌(isotretinoin)를 처리한 경우와 견줄만한 결과이다.
The experimental results are shown in Figs. 7, MMP-9 and MMP-2 isolated by electrophoresis can be confirmed. In FIGS. 8 and 9, it can be seen that the Saururus chinensis extract according to the present invention has MMP-9 and MMP-2 inhibitory effects. This inhibitory effect is comparable to the treatment of isotretinoin, which is widely used as an acne medication.

하기에 상기 조성물의 제형예를 설명하나, 본 발명을 한정하고자 함이 아니라 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
Hereinafter, formulation examples of the composition will be described, but the present invention is not intended to be limited thereto but is specifically described.

[제형예 1] 연질 캡슐의 제조[Formulation Example 1] Preparation of soft capsules

삼백초 추출물 80 mg, 비타민 E 9 mg, 비타민 C 9 mg, 팜유 2 mg, 식물성 경화유 8 mg, 황납 4 mg 및 레시틴 9 mg을 혼합하고, 통상의 방법에 따라 혼합하여 연질캡슐 충진액을 제조하였다.  1 캡슐당 400 ㎎씩 충진하여 연질캡슐을 제조하였다.  그리고, 상기와 별도로 젤라틴 66 중량부, 글리세린 24 중량부 및 솔비톨액 10 중량부의 비율로 연질캡슐시트를 제조하고 상기 충진액을 충진시켜, 본 발명에 따른 조성물 400 mg이 함유된 연질캡슐을 제조하였다.
A soft capsule filling liquid was prepared by mixing 80 mg of Saururus chinensis extract, 9 mg of vitamin E, 9 mg of vitamin C, 2 mg of palm oil, 8 mg of vegetable hardening oil, 4 mg of yellow bean and 9 mg of lecithin and mixing them according to a conventional method. 400 mg per capsule was filled to prepare a soft capsule. Separately from the above, a soft capsule sheet was prepared in a ratio of 66 parts by weight of gelatin, 24 parts by weight of glycerin and 10 parts by weight of sorbitol solution, and filled with the filling solution to prepare a soft capsule containing 400 mg of the composition of the present invention .

[제형예 2] 정제의 제조[Formulation Example 2] Preparation of tablet

삼백초 추출물 80 mg, 비타민 E 9 mg, 비타민 C 9 mg, 갈락토올리고당 200 mg, 유당 60mg 및 맥아당 140 mg을 혼합하고, 유동층 건조기를 이용하여 과립한 후, 당 에스테르(sugar ester) 6 mg을 첨가하였다.  이들 조성물 504 mg을 통상의 방법으로 타정하여 정제를 제조하였다.
After mixing with 80 mg of Saururus chinense extract, 9 mg of vitamin E, 9 mg of vitamin C, 200 mg of galactooligosaccharide, 60 mg of lactose and 140 mg of maltose and granulating with a fluid bed drier, 6 mg of sugar ester was added Respectively. 504 mg of these compositions were tabletted by a conventional method to prepare tablets.

[제형예 3] 드링크제의 제조[Formulation Example 3] Preparation of Drinking Agent

삼백초 추출물 80 mg, 비타민 E 9 mg, 비타민 C 9 mg, 포도당 10 g, 구연산 0.6 g, 및 액상 올리고당 25 g을 혼합한 후 정제수 300 ㎖를 가하여 각 병에 200 ㎖씩 되도록 충진하였다.  병에 충진한 후 130℃에서 4∼5 초간 살균하여 음료를 제조하였다.
After mixing 80 mg of Saururus chinense extract, 9 mg of vitamin E, 9 mg of vitamin C, 10 g of glucose, 0.6 g of citric acid and 25 g of liquid oligosaccharide, 300 ml of purified water was added to each bottle to make 200 ml each. And then sterilized at 130 DEG C for 4 to 5 seconds to prepare a beverage.

[제형예 4] 과립의 제조[Formulation Example 4] Preparation of granules

삼백초 추출물 80 mg, 비타민 E 9 mg, 비타민 C 9 mg, 무수결정 포도당 250 mg 및 전분 550 mg을 혼합하고, 유동층 과립기를 사용하여 과립으로 성형한 후 포에 충진하여 제조하였다.
The extracts were prepared by mixing 80 mg of Saururus chinensis extract, 9 mg of vitamin E, 9 mg of vitamin C, 250 mg of anhydrous crystalline glucose and 550 mg of starch, forming into granules using a fluidized bed granulator and filling the pellets.

[제형예 5] 유연화장수(스킨로션)의 제조[Formulation Example 5] Production of softening longevity (skin lotion)

정제수 255 mg, 삼백초 추출물 0.3 mg, 부틸렌글리콜 6.0 mg, 프로필렌글리콜 6.0 mg, 카르복시비닐폴리머 0.3 mg, 피이지-12 노닐페닐에테르 0.6 mg, 폴리솔베이트 80 1.2 mg, 에탄올 30.0 mg, 트리에탄올아민 0.3 mg, 및 방부제, 색소, 향료 각 소량에 대하여, 통상적인 유연화장수의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합한 후, 목적하는 유연화장수를 제조하였다.
A mixture of 255 mg of purified water, 0.3 mg of Saururus chinensis extract, 6.0 mg of butylene glycol, 6.0 mg of propylene glycol, 0.3 mg of carboxyvinyl polymer, 0.6 mg of phage-12 nonylphenyl ether, 1.2 mg of polysorbate 80, 30.0 mg of ethanol, mg, and antioxidants, coloring matters, and flavorings, the above components were added in the prescribed amounts according to a conventional method for preparing the softening agent, and uniformly mixed to prepare the desired softening agent.

[제형예 6] 영양화장수(밀크로션)의 제조[Formulation Example 6] Production of nutritional lotion (milk lotion)

정제수 234 mg, 삼백초 추출물 0.3 mg, 밀납 12.0 mg, 폴리솔베이트 60 4.5 mg, 솔비탄세스퀴올레이트 4.5 mg, 유동파라핀 1.5 mg, Montana 202 (제조사:Seppic) 15 mg, 글리세린 9.0 mg, 부틸렌글리콜 9.0 mg, 프로필렌글리콜 9.0 mg, 카르복시비닐폴리머 0.3 mg, 트리에탄올아민 0.6 mg, 및 방부제, 색소, 향료 각 소량에 대하여, 통상적인 영양화장수의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합한 후, 목적하는 영양화장수를 제조하였다.
(234 mg of purified water, 0.3 mg of Saururus chinensis extract, 12.0 mg of beeswax, 4.5 mg of polysorbate 60, 4.5 mg of sorbitan sesquioleate, 1.5 mg of liquid paraffin, 15 mg of Montana 202 (manufacturer: Seppic), 9.0 mg of glycerin, , 9.0 mg of propylene glycol, 0.3 mg of carboxyvinyl polymer, 0.3 mg of triethanolamine and 0.6 mg of each of antiseptic, colorant and fragrance were added in the prescribed amounts according to a conventional method of producing a nutritional lotion, After mixing, the desired nutritional lotion was prepared.

[제형예 7] 마사지크림의 제조[Formulation Example 7] Production of massage cream

정제수 70 mg, 삼백초 추출물 0.3 mg, 밀납 30.0 mg, 폴리솔베이트 60 4.5 mg, 피이지 60 경화피마자유 6.0 mg, 솔비탄세스퀴올레이트 2.4 mg, 유동파라핀 120.0 mg, 스쿠알란 15.0 mg, Montana 202 (제조사:Seppic) 12.0 mg, 글리세린 15.0 mg, 부틸렌글리콜 12.0 mg, 프로필렌글리콜 12.0 mg, 트리에탄올아민 0.6 mg, 및 방부제, 색소, 향료 각 소량에 대하여, 통상적인 마사지크림의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합한 후, 목적하는 마사지크림을 제조하였다.
Purified water 70 mg, Saururus chinensis extract 0.3 mg, wax 30.0 mg, polysorbate 60 4.5 mg, phage 60 hardened castor oil 6.0 mg, sorbitan sesquioleate 2.4 mg, liquid paraffin 120.0 mg, squalane 15.0 mg, Montana 202 : Seppic), 15.0 mg of glycerin, 12.0 mg of butylene glycol, 12.0 mg of propylene glycol, 0.6 mg of triethanolamine and a small amount of each of preservatives, coloring matters and perfumes according to a conventional method for producing a massage cream. The ingredients were added in the proportions presented and mixed uniformly, and the desired massage cream was prepared.

[제형예 8] 팩의 제조[Formulation Example 8] Preparation of pack

삼백초 추출물 0.5 mg, 베타-1,3-글루칸 1.0 mg, 폴리비닐알콜 13.0 mg, 소듐카르복시메틸셀룰로오스 0.2 mg, 글리세린 5.0 mg, 알란토인 0.1 mg, 에탄올 6.0 mg, 핑지-12 노닐페닐에테르 0.3 mg, 폴리솔베이트 60 0.3 mg, 및 방부제, 색소, 향료 각 소량에 대하여, 정제수를 첨가하고, 통상적인 마사지크림의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합한 후, 목적하는 팩을 제조하였다.
A solution of 0.5 mg of Saururus chinense extract, 1.0 mg of beta-1,3-glucan, 13.0 mg of polyvinyl alcohol, 0.2 mg of sodium carboxymethylcellulose, 5.0 mg of glycerin, 0.1 mg of allantoin, 6.0 mg of ethanol, 0.3 mg of fingi-12nonylphenyl ether, 0.3 mg of Solvate 60, and purified water were added to each small amount of the preservative, coloring matter and perfume, and the above components were added in the prescribed amounts according to a conventional method for producing a massage cream, uniformly mixed, .

[제형예 9] 젤의 제조[Formulation Example 9] Preparation of gel

삼백초 추출물 0.05 mg, 베타-1,3-글루칸 0.1 mg, 에틸렌디아민초산나트륨 0.05 mg, 글리세린 5.0 mg, 카르복시비닐폴리머 0.3 mg, 에탄올 5.0 mg, 피이지-60 경화피마자유0.5 mg, 트리에탄올아민0.3 mg, 및 방부제, 색소, 향료 각 소량에 대하여, 정제수를 첨가하고, 통상적인 팩의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합한 후, 목적하는 팩을 제조하였다.
0.1 mg of beta-1,3-glucan, 0.05 mg of sodium ethylenediaminetetraacetate, 5.0 mg of glycerin, 0.3 mg of carboxyvinyl polymer, 5.0 mg of ethanol, 0.5 mg of fat-60 hardened castor oil, 0.3 mg of triethanolamine , Purified water was added to each small amount of preservatives, coloring matters and flavorings, and the above components were added in the prescribed amounts according to a conventional method for preparing a pack, and uniformly mixed to prepare a desired pack.

[제형예 10] 피부외용제 중 연고[Formulation Example 10] Ointment in external preparation for skin

삼백초 추출물 2.0 mg, 베타-1,3-글루칸 10.0 mg, 밀납 10.0 mg, 폴리솔베이트 60 5.0 mg, 피이지 60 경화피마자유 2.0 mg, 솔비탄세스퀴올레이트 0.5 mg, 바셀린 5.0 mg, 유동파라핀 10.0 mg, 스쿠알란 5.0 mg, 쉐어버터 3.0 mg, 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드 5.0 mg, 글리세린 10 mg, 프로필렌글리콜 10.2 mg, 트리에탄올아민 0.2 mg, 및 방부제, 색소, 향료 각 소량에 대하여, 정제수를 첨가하고, 통상적인 연고제의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합한 후, 목적하는 연고제를 제조하였다.
2.0 mg of Saururus chinensis extract, 10.0 mg of beta-1,3-glucan, 10.0 mg of beeswax, 5.0 mg of polysorbate 60, 2.0 mg of hydrogenated castor oil, 2.0 mg of sorbitan sesquioleate, 5.0 mg of petroleum jelly, 5.0 mg of liquid paraffin Purified water was added to each small amount of each of small amounts of mg, squalane 5.0 mg, shea butter 3.0 mg, caprylic / capric triglyceride 5.0 mg, glycerin 10 mg, propylene glycol 10.2 mg, triethanolamine 0.2 mg and preservative, dye, , And the above components were added in the prescribed proportions according to the conventional ointment preparation method and uniformly mixed to prepare the desired ointment agent.

[제형예 11] 국소 투여용 약제(패취제)의 제조 [Formulation Example 11] Preparation of drug (patch) for topical administration

삼백초 추출물 1.0 mg, 베타-1,3- 글루칸 3.0 mg, 헥실렌글리콜 20.0 mg, 디에틸아민 0.7 mg, 폴리아크릴산(Carbopol 934P) 1.0 mg, 아황산나트륨 0.1 mg, 폴리옥시에틸렌라우릴에테르(E.O=9) 1.0 mg, 폴리히드록시에틸렌세틸스테아릴에테르 (Cetomacrogol 1000) 1.0 mg, 점성의 파라핀 오일 2.5 mg, 카프릴산에스테르/카프르산에스테르 (Cetiol LC) 2.5 mg, 폴리에틸렌글리콜 400 3.0 mg에 대하여, 정제수를 첨가하고, 통상적인 패취제의 제조 방법에 따라, 상기 성분들을 제시된 함량으로 첨가하여 균일하게 혼합한 후, 목적하는 패취제를 제조하였다.
1.0 mg of Saururus chinensis extract, 3.0 mg of beta-1,3-glucan, 20.0 mg of hexylene glycol, 0.7 mg of diethylamine, 1.0 mg of polyacrylic acid (Carbopol 934P), 0.1 mg of sodium sulfite, polyoxyethylene lauryl ether (EO = 9), 1.0 mg of polyhydroxyethylene cetyl stearyl ether (Cetomacrogol 1000), 2.5 mg of viscous paraffin oil, 2.5 mg of caprylic acid ester / caproic acid ester (Cetiol LC) and 3.0 mg of polyethylene glycol 400 , Purified water was added, and the above ingredients were added in the prescribed amounts in accordance with the conventional method for producing a patch, and then mixed uniformly to prepare a desired patch.

본 발명이 속한 분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 상기 내용을 바탕으로 본 발명의 범주 내에서 다양한 응용 및 변형을 행하는 것이 가능할 것이다.Those skilled in the art will appreciate that various modifications, additions and substitutions are possible, without departing from the scope and spirit of the invention as disclosed in the accompanying claims.

Claims (6)

유효성분으로 삼백초 추출물을 함유하는 여드름성 염증 억제용 조성물.A composition for suppressing acne inflammation containing an extract of Saururus chinensis as an active ingredient. 유효성분으로 삼백초 추출물을 함유하는 여드름성 피지생성 억제용 조성물.A composition for inhibiting the production of an acne-causing sebum containing an extract of Saururus chinensis as an active ingredient. 제 1 항 또는 제 2 항에 따른 조성물을 포함하는 피부 외용제 조성물.A composition for external application for skin comprising the composition according to claim 1 or 2. 제 3 항에 있어서,
삼백초 추출물의 함량은, 조성물 전체 중량을 기준으로, 0.5 내지 20 중량%인 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
The method of claim 3,
Wherein the content of Saururus chinensis extract is 0.5 to 20% by weight based on the total weight of the composition.
제 3 항에 있어서,
상기 조성물은 화장료 제형인 것을 특징으로 하는 피부 외용제 조성물.
The method of claim 3,
Wherein the composition is a cosmetic formulation.
제 1 항 또는 제 2 항에 따른 조성물을 포함하는 식품 첨가 또는 건강식품 조성물.A food additive or health food composition comprising the composition according to claims 1 or 2.
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