KR20150022785A - 전기영동 시스템 및 분리 및 식별 방법 - Google Patents

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헨리크 외스틀린
올라 뢴
페테르 올리비우손
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지이 헬스케어 바이오-사이언시스 에이비
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Abstract

적어도 한 유형의 전기영동 겔 카드, 적어도 한 유형의 블로트 막 카드, 전기영동 겔 카드를 이용하여 전기영동 실험을 실시하는 전기영동 장치, 분리된 샘플을 전기영동 겔 카드로부터 블로트 막 카드로 전달하기 위한 블로트 전달 유닛, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드에서 분리된 샘플의 영상을 기록하기 위한 영상화 장치를 포함하고, 여기서 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드 각각이 전달 동안의 상호 정렬을 위한 및 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드에서 분리된 샘플의 기계적으로 정렬된 영상을 제공하기 위해 영상화 장치의 상보적 정렬 구조에 대한 정렬을 위한 위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는, 전기영동 시스템이 제공된다.

Description

전기영동 시스템 및 분리 및 식별 방법{AN ELECTROPHORESIS SYSTEM AND A SEPARATION AND IDENTIFICATION METHOD}
본 발명은 전기영동 실험을 위한 전기영동 시스템 및 더 구체적으로, 간이화된 취급 및 평가를 갖는 전기영동 시스템에 관한 것이다.
전기영동은 두 전극 사이에서 전기장 영향을 받는 분리 매질, 보통은 겔에서 하전된 분자 및 입자가 이동하는 흔히 이용되는 분석 방법이다. 단백질 분리는 등전점(pI), 분자량, 전하, 또는 이들 인자의 조합에 의해서 일어날 수 있다.
분리 겔은 보통 지지체 위에 놓이고, 겔의 반대쪽 두 말단이 용액 또는 강성 형태의 전극 완충제와 접촉한다. 전극은 전극 완충제를 함유하는 용기에 삽입될 수 있다. 전해 매질 및 이온 저장소 둘 모두로부터의 완충제 용액이 pH 및 다른 매개변수를 일정하게 유지하게 한다. 분리 후, 상이한 방식, 예를 들어 시각적으로 겔 염색에 의해 또는 광학 수단, 예컨대 레이저 스캐너 등에 의해 염색된 겔 또는 표지자 샘플의 스캐닝 또는 영상화에 의해 분자를 검출하고 식별한다.
요즘, 생체분자, 예컨대 단백질, 펩티드, 핵산 등을 분리하는 데 겔 전기영동이 일상적으로 이용된다. 상이한 유형의 선별, 식별(세포 신호전달, 발현 및 정제) 또는 임상 시험에서 샘플이 취급된다. 단백질 샘플은 예를 들어 사람, 포유동물 조직, 세포 용해물 또는 세균, 곤충 또는 효모 세포계로부터 유래될 수 있다. 상이한 유형의 분자의 전기영동 조건은 상이하여, 많은 경우에서 조정되어야 한다. 따라서, 종종, 각 유형의 샘플에 대해 겔 및 완충제 용액 둘 모두를 선택해야 한다.
전기영동 방법의 준비는 몇 가지 다소 힘든 단계를 포함한다. 적당한 겔을 선택해서 지지체 상에 놓거나 또는 몰딩한다. 겔을 완충제 용액과 접촉시킨다. 흔한 방법은 유리 또는 플라스틱 카셋트의 겔 슬라브를 완충제 탱크의 완충제 용액과 접촉하게 하는 것이다. 각 실시마다, 겔을 지지체 상에 놓아야 하거나 또는 카세트를 준비해야 한다. 그 다음, 완충제 탱크에 완충제 용액을 충전하고, 샘플을 겔 상에 적용한다. 완충제 탱크에서의 완충제 용액의 취급을 피하기 위해 제WO 87/04948호에서는 완충제 물질을 겔 물질에 포함시킴으로써 완충제를 완충제 스트립 형태로 얻는 것을 제안하였다. 추가로, 제US6368481호는 완충제 스트립이 카세트의 일체를 이루는 부분으로서 포함된 프리캐스트(precast) 전기영동 카셋트를 개시한다.
전기영동 분리 후 주어진 샘플에서 특정 단백질을 검출하기 위해 단백질을 막(대표적으로 니트로셀룰로오스 또는 PVDF)에 전달할 수 있고, 여기서는 웨스턴블로팅 또는 면역블로팅이라고 흔히 불리는 방법으로 표적 단백질에 특이적인 항체를 이용해서 단백질을 탐색(검출)한다. 단백질을 막에 전달하는 주된 방법은 전기블로팅이라고 불리고, 전류를 이용해서 겔로부터 막으로 단백질을 끌어당긴다. 단백질이 겔 내에서 가졌던 조직을 유지하면서 겔 내로부터 막으로 옮기고, 이렇게 함으로써 단백질이 검출을 위해 얇은 표면층에 노출된다. 단백질은 그의 비특이적 단백질 결합 성질(즉, 모든 단백질과 동등하게 잘 결합함) 때문에 막 표면에 결합한다. 탐색 항체의 비특이적 결합을 피하기 위해, 막 상에 남은 결합 부위를 차단할 수 있다.
탐색(검출) 방법 동안, 전달된 단백질을 갖는 막은 관심 단백질을 겨냥한 특이적 일차 항체 및 예를 들어 리포터 효소에 연결된 변형된 항체를 갖는 관심 단백질을 위한 이차 항체와 함께 인큐베이션되고; 적당한 기질에 노출될 때, 이 효소는 비색 반응을 추진하여, 적당한 영상화 기술로 검출될 수 있는 색 또는 형광 표지된 표적(염료)을 생성한다.
전기영동 및 뒤따르는 블로팅 단계는 전통적으로 겔 및 막 둘 모두, 뿐만 아니라 어느 범위의 액체, 예를 들어 완충제, 시약, 세척 용액 등의 많은 수작업 취급을 특징으로 한다. 과거에 작업 흐름을 간이화하고/간이화하거나 자동화하려는 몇몇 시도를 했지만 극소수였다.
제US5674006호는 유체를 작업물을 가로질러서 효율적으로 순환시키고 옮기는 장치의 한 예를 개시한다. 이 장치는 이용되는 유체의 자동화된 취급을 제공할 수 있고, 생물 검정, 예컨대 전기영동 겔의 염색 및 정착에 이용하기에 아주 적합하다.
본 발명의 목적은 종래 기술의 하나 이상의 결점을 극복한 신규 전기영동 시스템을 제공하는 것이다. 그것은 독립항에서 정의된 전기영동 시스템에 의해 달성된다. 전기영동 겔 카드, 블로트 막 카드, 영상화 장치, 전달 홀더 및 분리 및 식별 방법이 추가로 제공된다.
이 전기영동 시스템의 한가지 이점은 그것이 개선된 취급을 제공하고, 전기영동 및 면역블로팅 실험으로부터의 결과 평가를 간이화하는 것이다.
한 실시양태에 따르면,
적어도 한 유형의 전기영동 겔 카드,
적어도 한 유형의 블로트 막 카드,
전기영동 겔 카드를 이용하여 전기영동 실험을 실시하는 전기영동 장치,
분리된 샘플을 전기영동 겔 카드로부터 블로트 막 카드로 전달하기 위한 블로트 전달 유닛,
전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드에서 분리된 샘플의 영상을 기록하기 위한 영상화 장치
를 포함하고, 여기서 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드 각각은, 전달 동안의 상호 정렬을 위한 및 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드에서 분리된 샘플의 기계적으로 정렬된 영상을 제공하기 위해 영상화 장치의 상보적 정렬 구조에 대한 정렬을 위한 위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는, 전기영동 시스템이 제공된다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 시스템은 블로트 전달 유닛에서 상호 정렬되는 위치에 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드를 유지하기 위한 상보적 정렬 구조를 갖는 전달 홀더를 포함한다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드는, 겔 부재의 제1 면 및 제2 면 둘 모두를 노출시켜서 겔 부재가 강성 지지체에 부착된 동안에 분리된 샘플의 블로트 전달을 허용하는 제거가능한 부재를 갖는 하우징을 포함한다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드는, 전기영동 작업흐름에서 적어도 한 단계를 실시하기 위해서 제거되어야 하는 적어도 하나의 제거가능한 부재를 포함하고, 여기서 제거가능한 부재는 제거가능한 부재를 먼저 제거하지 않고서 상기 단계를 실시하는 것을 방지하기 위해 정렬 구조를 적어도 부분적으로 차단하도록 형성된다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조는 각 카드의 고유 배향을 형성하도록 형성된다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조는 적어도 하나의 정렬 홀을 포함하고, 상보적 정렬 구조는 상보적 정렬 핀을 포함한다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조는, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드가 함께 상호 잠금되어 전달 정렬을 간이화하도록 하는 스냅 잠금 유형이다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드는 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조와 함께 잠기는 상보적 스냅 잠금 유형 정렬 구조를 갖는 전달 카드를 포함한다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드는 식별 코드를 포함한다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 식별 코드는 전달을 위해 상호 정렬될 때 동시에 판독되어 상기 카드 사이의 고유 관련성을 확립하도록 배열되고, 이 시스템은 상기 관련성을 저장하도록 배열된다.
한 실시양태에 따르면, 식별 코드는 기계 판독가능하다.
한 실시양태에 따르면, 영상화 장치는 영상화를 위해 배열된 카드의 식별 코드를 판독하도록 배열된다.
한 실시양태에 따르면, 영상화 장치는 영상화를 위해 배열된 카드의 등록된 식별 코드에 기초하여 영상화 프로토콜을 선택하도록 배열된다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드는 블로트 전달에서 블로트 막 카드에 전달되도록 배열된 식별 코드를 포함한다.
한 실시양태에 따르면, 식별 코드는 전기영동 겔 카드로부터 블로트 막 카드로 전기화학적으로 전달되도록 배열된다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 장치 및 영상화 장치가 통합되고, 여기서는 전기영동 실험을 실시하는 동안에 전기영동 겔 카드가 영상화될 수 있다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드는 프리캐스트 겔을 포함한다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드는, 통합된 완충제 구획 및 임의로 전극을 포함한다.
한 실시양태에 따르면, 블로트 막 카드는 블로트 막의 주변으로 연장되는 프레임 형태의 강성 지지체에 부착된 블로트 막으로 이루어진다.
한 실시양태에 따르면, 블로트 막 카드의 강성 지지체는 플라스틱 필름으로 형성된다.
한 실시양태에 따르면, 블로트 막 카드의 강성 지지체는 둘 이상의 적층된 플라스틱 필름층으로 형성되고, 여기서는 블로트 막의 하나 이상의 구역이 플라스틱 필름층들 사이에 층간적층(interlamination)된다.
한 실시양태에 따르면, 플라스틱층들 중 하나 이상은 한 면에 적용된 접착제층을 갖는 강성 중합체 필름으로 이루어진다.
한 실시양태에 따르면, 강성 중합체 필름은 PET로 이루어지고, 접착제층은 EVA층이다.
한 실시양태에 따르면, 상기한 바에 따르는 전기영동 시스템과 함께 이용되도록 배열되는 전기영동 겔 카드가 제공된다.
한 실시양태에 따르면, 상기한 바에 따르는 전기영동 시스템과 함께 이용되도록 배열되는 블로트 막 카드가 제공된다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조에 상보적인 정렬 구조를 포함하는, 상기한 바에 따르는 전기영동 시스템의 영상화 장치가 제공된다.
한 실시양태에 따르면, 블로트 전달 방법 동안에 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드를 상호 정렬되는 위치에 유지하기 위해 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조에 상보적인 정렬 구조를 포함하는 상기한 바에 따르는 전기영동 시스템의 전달 홀더가 제공된다.
한 실시양태에 따르면,
위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는 전기영동 겔 카드에서 전기영동에 의해 샘플을 분리하는 단계,
상보적 정렬 구조를 갖는 영상화기를 이용해서 그리고 전기영동 겔 카드의 정렬 구조를 영상화기의 상보적 정렬 구조와 정렬되게 배열하여 전기영동 겔 카드에서 분리된 샘플의 영상을 획득하는 단계,
전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드를 정렬 구조에 의해 상호 정렬되게 배열하여 겔 카드로부터 위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는 블로트 막 카드로 샘플 구성성분을 전달하는 단계,
블로트 전달 카드의 정렬 구조를 영상화기의 상보적 정렬 구조와 정렬되게 배열하여 블로트 전달 카드 상의 전달된 샘플 구성성분의 영상을 획득하는 단계, 및
상호 정렬에 기초하여 영상을 상관시키는 단계를 포함하는 영상을 분석하는 단계
를 포함하는 분리 및 식별 방법이 제공된다.
본 발명에 대한 더 완전한 이해 뿐만 아니라 그의 추가의 특징 및 이점은 다음 상세한 설명 및 도면을 참고함으로써 얻어질 것이다.
도 1은 한 실시양태에 따르는 전기영동 카세트의 개략적 투시도.
도 2a 내지 2f는 도 1의 전기영동 카세트의 성분을 나타낸 도면.
도 3a 내지 3c는 도 1의 전기영동 카세트를 충전하는 방법을 개략적으로 나타낸 도면.
도 4는 한 실시양태에 따르는 카세트의 하부 말단의 확대된 구역을 나타낸 도면.
도 5는 지지 프레임의 윗면에 부착된 겔 부재를 갖는 전기영동 겔 유닛을 나타낸 도면.
도 6은 전기영동 카세트를 이용하여 전기영동 실험을 실시하기 위한 전기영동 카세트와 상용성있는 전기영동 트레이의 개략도.
도 7a 및 7b는 도 6의 전기영동 트레이와 함께 이용하기 위한 완충제 패드의 개략도.
도 8a 내지 8c는 전기영동 트레이, 완충제 패드 및 전기영동 카세트 사이의 상호작용을 개략적으로 나타낸 도면.
도 9 내지 도 11은 전기영동 카세트 및 상용성있는 전기영동 장치를 이용하여 전기영동 분리 실험을 수행하는 관련 단계들을 개략적으로 나타낸 도면.
도 12a 내지 12c는 카세트 하우징으로부터 지지 프레임에 부착된 겔 부재를 제거하는 단계를 개략적으로 나타낸 도면.
도 13은 전기영동 겔 유닛의 예를 나타낸 도면.
도 14는 면역블로팅을 위한 막 유닛을 나타낸 도면.
도 15는 면역블로팅을 위한 전달 샌드위치 형성에 이용되는 스폰지 부재를 나타낸 도면.
도 16은 전기블로팅을 위한 샌드위치 홀더의 한 예를 나타낸 도면.
도 17a 내지 17e는 전기블로팅을 위한 전달 샌드위치의 조립을 개략적으로 나타낸 도면.
도 18은 조합된 전기영동 및 영상화 장치의 트레이 상에 놓인 막 유닛을 개략적으로 나타낸 도면.
도 19a 및 19b는 분리된 전기영동 레인을 제공하는 카세트 하우징의 2 개의 개략적인 예를 나타낸 도면.
도 20a 내지 20h는 전기영동 카세트의 또 다른 개략적 실시양태를 나타낸 도면.
도 21a 내지 21h는 전기영동 카세트의 또 다른 개략적 실시양태를 나타낸 도면.
도 22는 투과성 또는 반투과성 배면을 갖는 강성 겔 지지 프레임을 개략적으로 나타낸 도면.
도 23a 내지 23g는 또 다른 개략적인 실시양태에 따르는 개략적인 단백질 분석 개념을 나타낸 도면.
본 개시물 전체에 걸쳐서, 전기영동 겔의 분리 대역은 완결된 전기영동 실시 후 샘플의 분리된 종들이 위치하는 겔의 부분으로 정의된다.
도 1은 한 개략적 실시양태에 따르는 전기영동 카세트 (10)의 투시도이다. 카세트 (10)는 카세트 하우징 (20), 탈착가능한 겔 지지 프레임 (30), 구역별로 제거가능한 배면 필름 (40) 및 제거가능한 샘플 웰 덮개 (50)를 포함한다. 도 1은 조립된 상태의 전기영동 카세트를 나타낸다. 겔 카세트 (10)는 전기영동 분리를 위해 편평한 겔 부재 (36)를 몰딩하기 위한 겔 구획을 그 안에 형성한다. 한 실시양태에 따르면, 전기영동 카세트 (10)는 프리캐스트 카세트이지만, 별법으로, 카세트 (10)는 비어있어서 예를 들어 최종 소비자에 의해 겔 구획에 맞춤 겔을 몰딩할 준비가 되어 있을 수 있다.
도 2a 및 2b는 카세트 (10)의 다른 성분들이 제거된 카세트 하우징 (20)을 나타낸다. 도 2a는 상면도이고, 반면, 도 2b는 아래에서 본 카세트 하우징 (20)을 나타낸다. 카세트 하우징 (20)은 일반적으로 윗면 (65) 및 아랫면 (66)을 갖는 얇은 상부 벽 (60), 및 아랫면 (80) 및 내벽 (75)을 가지고 상부 벽 주위를 둘러서 상부 벽 (60)으로부터 아랫쪽으로 돌출하는 테투리 (70)로 이루어진다. 상부 벽 (60)의 아랫면 (66) 및 테두리 (70)의 내벽 (75)이 겔 구획을 본질적으로 형성하고, 겔 구획은 도 1에 나타낸 바와 같이 지지 프레임 (30) 및 제거가능한 배면 필름 (40)을 테두리 (70)의 아랫면 (80)에 부착함으로써 아래에서 폐쇄될 수 있고, 이하에서 더 상세히 논의될 것이다. 개시된 실시양태에서, 카세트 (10) 안에 몰딩되는 겔 부재 (36)(도 4에 개략적으로 개시됨)의 두께는 테두리의 내벽 (75)의 높이와 본질적으로 동일할 것이다. 개시된 실시양태에서, 상부 벽 (60)은 균일한 두께를 가지고, 이렇게 함으로써, 만일 개시된 실시양태에서 지지 프레임 (30) 및 제거가능한 배면 필름 (40)이 편평하다면, 또한 겔 부재 (36)도 균일한 두께를 가질 것이다. 겔의 두께는 바람직하게는 특정 겔 유형 및 이용되는 완충제계, 뿐만 아니라 전기영동 단계에 관련된 요망되는 전류에 맞춰 조정된다. 게다가, 아래에서 더 상세히 개시하는 바와 같이, 다른 실시양태에서는 카세트 하우징의 상이한 구역에서 상이한 두께의 겔 부재 (36)를 제공하도록 카세트 하우징 (20)의 특징들이 형성될 수 있다.
카세트 하우징 (20)은 보관 및 사용 동안 카세트 (10)에 강성 구조를 제공해야 하기 때문에, 그것은 적당히 강성인 물질로 제조되어야 한다. 게다가, 아래에서 상세히 개시하는 바와 같이, 카세트 (10)는 전기영동 분리를 실시하기 위해 설계되고, 따라서 카세트 하우징 (20)은 전기절연성이어야 한다. 카세트 안에 몰딩되는 겔이 UV 방사선에 의해 중합되는 일부 실시양태에서는, 카세트 물질이 중합에 상응하는 선량의 UV 방사선에 의해 본질적으로 열화되지 않거나 또는 변색되지 않도록 선택되어야 한다. 게다가, 카세트 물질은 겔의 중합을 방해하지 않도록 선택될 수 있고, 이 물질은 카세트 (10)의 디자인에 의존해서 겔에 대한 적당한 접착성, 예를 들어 겔 부재 (36)가 카세트 하우징 (20)으로부터 제거되도록 배열되는 경우에는 낮은 접착성, 또는 겔 부재 (36)가 카세트 하우징 안에 보유되도록 배열되는 경우에는 높은 접착성을 나타내도록 선택될 수 있다. 한 실시양태에 따르면, 추가로, 아래에서 더 상세히 개시하는 바와 같이, 카세트 (10)는 겔 부재 (36)가 전기영동 단계 동안 또는 그 후에 카세트 안에 여전히 있는 동안에 영상화될 수 있는 조합된 전기영동 및 형광 영상화 장치에 이용되도록 설계된다. 따라서, 적어도 겔 부재 (36)의 분리 대역을 덮는 상부 벽 (60)의 구역은 관련 파장의 전자기 방사선에 충분히 투명해야 한다. 한 실시양태에 따르면, 전체 카세트 하우징 (20)이 동일한 물질로 사출성형된다. 게다가, 카세트 (10)의 모든 성분이 비형광 및/또는 저형광이도록 선택될 수 있다. 한 실시양태에 따르면, 카세트 하우징 (20)은 강성 중합체, 예컨대 시클로 올레핀 중합체(COP), 시클릭 올레핀 공중합체(COC), 폴리프로필렌(PP), 폴리에틸렌 테레프탈레이트(PET), 폴리카르보네이트, 폴리메틸 메타크릴레이트(PMMA), 그의 조합, 그의 변이형 등으로 제조된다.
개시된 실시양태에서는, 겔 구획을 전기영동 구획, 및 겔 부재 (36)를 몰딩하는 단계 동안 과량의 겔 용액을 받도록 배열된 과충전 챔버 (100)로 나누도록 배열된 횡단벽 (90)이 제공된다. 게다가, 과충전 챔버 (100)에 대한 전기영동 구획의 반대쪽 말단에 충전 포트 (120) 및 과충전 챔버 (100)에 배기구 (130)가 있다. 카세트 (20)에 겔을 몰딩하는 방법은 도 3a 내지 3c에 관하여 아래에서 더 상세히 개시할 것이다.
개시된 카세트 (10)에는 분리를 위해 겔 부재 (36) 상에 샘플 적재를 가능하게 하는 10 개의 샘플 웰 개구 (110)가 제공되고, 분리 동안 각 샘플 웰 개구 (110)는 하나의 전기영동 레인에 상응한다. 샘플 웰 개구 (110)의 수 및 모양은 전기영동 카세트의 실제 치수, 분리 유형 및 전기영동 겔 유형 등에 의존해서 달라질 수 있다. 샘플 웰 개구 (110)는 1 개 내지 예를 들어 100 개의 얼마든지 적당한 개수가 있을 수 있다. 한 실시양태에서는, 개개의 샘플 웰 개구 대신에, 겔 부재의 본질적으로 전체 폭을 가로질러서 연장되는 1 개의 넓은 샘플 적재 개구가 카세트에 제공된다. 이러한 실시양태에서는, 사용자가 예를 들어 웰 콤(well-comb) 등을 이용해서 겔에 직접 웰을 형성할 수 있거나, 또는 예를 들어 도 20e 및 20g에 개략적으로 개시되고 아래에서 더 상세히 개시하는 바와 같이, 융통성있는 개수의 분리 레인을 제공하기 위해 겔 부재 (36)와 접촉해서 카세트 (10)에 부착될 수 있는 하나 이상의 샘플 적재 컵이 제공될 수 있다.
도 1에서는, 샘플 웰 개구 (110)가 도 2c 및 2d에서 더 상세히 개시되는 제거가능한 샘플 웰 덮개 (50)로 덮인다. 샘플 웰 덮개 (50)는 웰 개구 (110) 위에 끼워지고 몰딩 방법 및 보관 동안에 웰 개구를 폐쇄되게 유지하도록 배열된다. 샘플을 샘플 웰 (110)에 적재하기 전에, 웰 덮개 (50)를 제거해서 샘플 웰 (110)을 개방한다. 개시된 실시양태에서는, 웰 덮개 (50)가 몰딩 동안에 겔 용액 누출 및 보관 동안에 카세트 안으로의 공기 누출을 피하도록 샘플 웰 개구 (110)와 밀봉 상호작용을 본질적으로 제공하는 짝맞춤 관계로 샘플 웰 개구 (110)에 끼워지도록 형성되는 웰 형성 돌기 (52)를 포함한다. 한 실시양태에 따르면, 웰 형성 돌기 (52)는 상부 벽 (60)의 아랫면 (66) 아래에서 겔 부재 (36) 안으로 연장되어서 제거될 때는 겔 부재 (36) 안으로 연장되는 샘플 웰을 형성하도록 설계된다. 또 다른 실시양태에서, 웰 형성 돌기 (52)는 그것이 상부 벽 (60)의 아랫면 (66)과 같은 높이가 되어 겔 부재 (36)의 본질적으로 편평한 표면을 제공하도록 설계되고, 여기서는 샘플 웰이 샘플 웰 개구 (110)에 의해 형성된다. 한 실시양태에서는, 샘플 웰 덮개 (50)가 상부 벽 (60)의 윗면 (65) 또는 그의 조합에 대해 밀봉하도록 배열된다. 충분히 효율적인 밀봉을 제공하면서 제거를 간이화하기 위해, 샘플 웰 덮개 (50)는 적당한 탄성 물질, 예컨대, 예를 들어 에틸렌 프로필렌 고무(EPM), 에틸렌 프로필렌 디엔 모노머 고무(EPDM), 폴리아크릴 고무, 플루오로엘라스토머 등 및 그의 변이형 및 상이한 변형물로 제조된다. 효율적인 제조 뿐만 아니라 요구되는 밀봉 효율을 달성하기 위해, 샘플 웰 덮개 (50)는 카세트 하우징 (20)과 함께 공성형될 수 있고, 따라서 카세트 하우징 (20)이 제1 단계에서 제1 강성 물질로 성형되고, 그 후에 샘플 웰 덮개 (50)가 제2 단계에서 제2 탄성 물질로 성형되며, 여기서는 카세트 하우징이 금형으로서 부분적으로 역할한다. 공몰딩된 샘플 웰 덮개(50)는 물질 특성 및 금형 디자인, 예를 들어 강성 물질과의 비영구 접착성의 적절한 선택에 의해 선택적으로 제거가능할 수 있다. 한 실시양태에서는, 적당한 접착 특성을 제공하는 중간 물질, 예를 들어 낮은 용융 온도 등을 갖는 열가소성 물질이 카세트 하우징 (20)과 샘플 웰 덮개 (50) 사이에 제공될 수 있다.
개시된 실시양태에 따르면, 탈착가능한 겔 지지 프레임 (30)이 테두리 (70)의 아랫면 (80)에 탈착가능하게 부착되고, 또, 구역별로 제거가능한 배면 필름 (40)이 겔 지지 프레임 (30)의 아랫면에 차례로 부착/적층된다. 겔 지지 프레임 (30) 및 배면 필름 (40)은 몰딩 및 보관 동안 전기영동 구획 및 과충전 챔버 (100)를 폐쇄하는 하부 벽을 함께 제공한다. 도 2e에 나타낸 바와 같이, 겔 지지 프레임 (30)의 개시된 실시양태는 도 2f에 나타낸 배면 필름 (40)의 각 제거가능한 구역 (210a) - (210c)에 의해 아래에서 각각 덮이는 2 개의 완충제 슬릿 (150a) 및 (150b) 및 분리 대역 창 (160)을 포함한다. 적당한 물질 조합 및 접착제 기술을 선택함으로써, 배면 필름 (40)은 각 구역 (210a) - (210c)이 예를 들어 작업자가 각 박리 탭 (211a) - (211c)을 잡아 당김으로써 제거될 수 있도록 겔 지지 프레임 (30)의 아랫면에 적층될 수 있다. 아래에서 더 상세히 논의하는 바와 같이, 전기영동 실험을 실시하기 위해서는, 전기영동 장치에서 겔을 각각의 완충제 공급원, 예를 들어 완충제 패드와 접촉해서 놓기 위해 배면 필름 (40)의 구역 (210a) 및 (210b)을 제거한다. 전기영동 실시 후에 전달/블로팅 및 탐색을 위해 겔 부재 (36)의 분리 대역에의 접근을 제공하기 위해, 구역 (210b)을 제거하여 분리 대역 창 (160)을 통해 겔 부재 (36)의 아랫면을 드러낸다. 겔 부재 (36)에 손상을 주지 않고서 배면 필름 (40)의 구역 (210a) - (210c)의 제거를 허용하기 위해서는, 적어도 겔과 직접 접촉하는 배면 필름 (40)의 구역은 겔과 충분히 낮은 표면 접착성을 가져야 한다. 낮은 표면 접착성은 전체 필름에 대해 적당한 물질 및 표면 성질을 선택함으로써 및/또는 특정 상호작용 대역의 표면 성질 개질, 예를 들어 표면 거칠기, 표면 코팅, 상기 대역에 다른 물질 적층 등에 의해서 달성될 수 있다. 한 실시양태에 따르면, 겔 지지 프레임 (30)은 양면에 적용된 접착제를 갖는 강성 중합체 필름으로 이루어지고, 배면 필름 (40)은 접착제층에 의해 강성 중합체 필름에 결합되는 플레인(plain) 중합체 필름으로 이루어진다. 이 배열에 의해, 겔 지지 프레임 (30)의 하우징측 접착제층은 카세트 하우징 (20)에 제거가능하지만 본질적으로 기밀성 결합을 제공하도록 및 카세트 하우징 (20)의 겔 접착성 및 배면 필름 (40)의 중합체 필름의 겔 접착성에 비해 높은 겔 접착성을 제공하도록 배열될 수 있다. 한 실시양태에 따르면, 겔 지지 프레임 (30)의 강성 중합체 필름은 용융 접착제, 예컨대 에틸렌-비닐 아세테이트(EVA) 또는 박리가능한 결합을 위한 적당한 성질을 갖는 또 다른 접착제 형태로 양면에 적용된 접착제층을 갖는 폴리에틸렌 테레프탈레이트(PET) 필름일 수 있고, 배면 필름 (40)의 중합체 필름은 PET 필름일 수 있다. 이 실시양태에서, 접착제층을 갖는 지지 프레임 (30)은 아래에서 접근가능할 필요가 없는 겔 부재 (36)의 부분만 덮고, 따라서, 배면 필름 (40)의 각 제거가능한 구역에 상응하는 개구를 갖는다. 지지 프레임 (30)은 PET 호일 자체보다 낮은 온도에서 용융되는 물질, 예를 들어 EVA 또는 또 다른 박리가능 접착제의 얇은 접착제층을 가지고, 따라서 배면 필름 (40) 및 지지 프레임 (30)은 열 적층 방법을 이용해서 함께 적층될 수 있고, 최종적으로, 열 결합 방법 등에 의해 카세트 하우징 (20)에 탈리가능하게 부착될 수 있다. EVA층이 이 개념에서 필요한 겔 중합 또는 다른 특성을 방해하지 않으면서 시험되는 겔 조성물에 대한 높은 겔 접착성이라는 엄격한 성질을 충족시킨다는 것이 실험에 의해 확인되었다.
한 실시양태에 따르면, 호일의 스택은 약 100 - 115 ℃에서 적층되고, 이 절차는 편평하고 구김 또는 주름이 없는 호일을 생성해야 한다. 낮은 온도를 이용함으로써, 배면 필름 (40)의 제거가능한 구역 (210a) - (210c)이 더 쉽게 개방될 수 있다. 배면 필름 (40)은 안정감을 제공하기에 충분할 정도로 두꺼울 수 있고, 즉, 지나치게 탄성이 아닐 수 있거나 또는 조잡하지 않을 수 있지만, 또한 아래에서 더 상세히 개시하는 바와 같이 전기영동 동안 냉각을 허용하기에 충분할 정도로 얇을 수 있다. 한 실시양태에 따르면, 배면 필름 (40)은 필름의 물질에 의존해서 예를 들어 0.1 내지 0.4 ㎜의 두께일 수 있거나 또는 그 사이의 어느 값도 될 수 있다. 카세트와의 접착성은 누출을 방지하기에 충분할 정도로 강해야 하지만 또한 힘을 거의 들이지 않고 손으로 호일을 개방하는 것을 허용해야 한다.
전기영동 실시 후에 뒤따르는 단계들에서 겔 부재 (36)의 취급을 크게 개선하기 위해서, 겔 지지 프레임 (30)은 카세트 (10)로부터 제거 후 겔 부재 (36)에 부착된 채로 있도록 설계된다. 지지 프레임 (30)은 겔 부재에 의해 덮이지 않는 접근가능한 잡는 부분을 제공함으로써 겔 부재 (36)의 취급을 간이화하기 위해 및 겔 모양을 보존하기 위해 적당하게 강성인 물질로 형성된다. 배면 필름 (40)의 구역 (210c)을 제거한 후에, 겔 부재 (36)의 분리 대역의 아랫면이 분리 대역 창 (160)을 통해 접근가능하다. 지지 프레임 (30)에 대한 겔 부재 (36)의 적절한 부착을 달성하기 위해, 그것은 겔 부재에 대한 높은 표면 접착성을 갖도록 설계되어야 한다. 이것은 위에서 논의된 바와 같이 적당한 물질 성질을 선택함으로써 및/또는 표면 개질, 예를 들어 표면 거칠기, 표면 코팅 등에 의해 달성될 수 있다.
지지 프레임 (30)은 그것이 쉽게 탈착될 수 있지만 몰딩 및 보관 동안에는 겔 구획을 밀봉되게 유지하기 위해 테두리 (70) 둘레에 충분한 밀봉을 여전히 제공하도록 테두리 (70)의 아랫면 (80)에 부착된다. 이것은 예를 들어 적당한 물질 매개변수 선택 및 예를 들어 접착제 이용 또는 열 용접에 의해 달성될 수 있다. 한 실시양태에 따르면, 카세트 하우징 (20)은 강성 중합체로 제조되고, 지지 프레임 (30)은 양면에 적용된 접착제층을 갖는 강성 중합체 필름으로 제조된다. 지지 프레임 (30)에는 그것을 겔 부재와 함께 카세트 하우징 (20)으로부터 탈착시키기 위해서 지지 프레임 (30)을 당기기 위한 적어도 하나의 박리 탭 (170)이 제공된다. 한 실시양태에 따르면, 지지 프레임 (30)은 박리 탭 등 같은 노출된 구역에 하나 이상의 강화층(나타내지 않음)을 포함한다. 겔 부재 (36)가 카세트 하우징 (20)으로부터 탈리되는 것을 보장하기 위해, 카세트 하우징 (20)의 적어도 내벽은 겔과 낮은 표면 접착성을 가져야 한다. 낮은 표면 접착성은 위에서 논의된 바와 같이 전체 필름에 대해 적당한 물질 및 표면 성질을 선택함으로써 및/또는 표면 성질 개질, 예를 들어 낮은 표면 거칠기, 표면 코팅 등에 의해 달성될 수 있다.
게다가, 겔 구획에서 일부 특징의 모양은 겔 부재의 탈리를 더 간이화하기 위해 겔 구획에 대한 겔의 부착을 피하도록 설계될 수 있고, 예를 들어 둥근 귀퉁이, 비수직 벽 및 개구 등을 가질 수 있다.
지지 프레임 (30)은 지지 프레임 (30)의 정렬을 위한 위치 기준을 정하는 예정된 정렬 구조를 갖는 정렬 태그 (180)를 더 포함한다. 개시된 실시양태에서, 정렬 구조는 카세트 (10) 및/또는 지지 프레임 (30)이 전기영동 장치 등에서 예를 들어 2 개의 핀을 포함하는 상보적 정렬 구조에 대해서 적절히 정렬되는 것을 보장하도록 배열된 2 개의 정렬 홀 (190a) 및 (190b) 형태로 제공된다. 정렬 구조 (190a) - (190b)가 전기영동 실시 후에 및 뒤따르는 전달 단계에서도 겔 부재 (36)가 부착되는 지지 프레임 (30)의 일부로 제공된다고 할 때, 아래에서 더 상세히 개시하는 바와 같이 많은 상황에서 매우 중요할 수 있는 겔의 반복가능한 위치지정이 달성될 수 있다. 게다가, 정렬 구조는 그것이 기기 등의 상보적 정렬 구조에 하나의 고유 배향으로 끼워질 수 있는 방식으로 비대칭일 수 있고, 이렇게 함으로써 그것은 잘못된 방식으로, 거꾸로 등으로 삽입될 수 없다.
게다가, 지지 프레임 (30)에는 겔 부재 (36)가 카세트 (10)로부터 안전한 방식으로 제거된 후에도 겔 부재 (36)의 정체를 판독하는 것을 가능하게 하는 식별 코드 (200) 등이 제공된다. 식별 코드 (200)는 예를 들어 바코드, 매트릭스 코드 등처럼 기계 판독가능한 코드일 수 있고, 사용자 및/또는 기기에 관련 정보를 제공한다.
개시된 실시양태에서, 겔 지지 프레임 (30)은 전기절연 물질, 예를 들어 중합체 물질의 강성 필름으로 이루어진다. 이와 관련해서, 강성이라는 용어는 필름이 특히 평면에서 겔 윤곽의 왜곡을 피하기 위해 겔에 비해 훨씬 더 강직하다는 것을 의미한다. 필름은 상당히 유연성이고 다른 방향으로 굽힐 수 있고(이것은 필름의 흔한 특성임), 지지 프레임 (30)의 박리 탭 (170)을 당김으로써 카세트 하우징으로부터 겔 부재 (36)를 탈리시키는 것이 가능해야 하기 때문에 필름은 취약하지 않아야 한다. 사실상, 지지 프레임 (30)이 평면외 방향에서 유연성이라는 것은 현 디자인에 유익할 수 있으며, 그 이유는 그러면 그것이 주로 필름의 연장부를 따라서 탈리력을 적용하여 카세트 하우징 (20)으로부터 겔을 점차 탈리함으로써 겔 부재 (36)의 제거를 촉진할 것이기 때문이다. 다른 실시양태에서는, 아래에서 더 상세히 개략적으로 개시하는 바와 같이, 지지 프레임 (30)은 더 프레임 같은 강성 구조가 겔 구획의 실질적 부분을 형성하고 상부 벽 (60) 및 하부 벽 (40)이 프레임 같은 강성 구조의 테두리 (70)의 테두리로부터 제거가능한 것일 수 있다.
도 3a 내지 3c는 겔 용액 (210)을 카세트 (10)에 충전하여 겔 부재를 몰딩하는 순서를 개략적으로 나타낸다. 도 3a 내지 3c에서는 예시 목적상 지지 프레임 (30) 및 제거가능한 배면 필름 (40)을 나타내지 않는다. 도면에 나타낸 바와 같이, 카세트 (10)는 위로 들어올린 위치에서 아래로부터 위로 겔 용액으로 충전되도록 설계된다. 한 실시양태에 따르면, 카세트 (10)는 겔의 균일한 두께를 보장하고 누출이 일어나지 않는 것을 보장하기 위해 겔 부재 (36)가 경화될 때까지 몰딩 방법 동안 겔 구획의 상대적으로 얇은 상부 벽 및 하부 벽을 지지하도록 배열되는 지지 구조물(나타내지 않음)에 배열된다. 위로 들어올린 위치에 놓일 때 카세트 (10)의 하부 말단의 충전 포트에 적당한 충전 노즐(나타내지 않음)을 연결하고, 겔 용액을 겔 구획에 밀어 넣어 겔 구획을 아래부터 충전하기 시작한다. 충전 포트로부터의 입구가 겔 구획의 본질적으로 가장 아래 위치에 배열되기 때문에, 겔 용액이 기포를 포획하지 않고서 충전될 수 있다. 도 3b에서는 겔 용액 앞부분이 과충전 챔버 (100)의 횡단벽 (90)에 막 도달하려고 한다. 도 2b에서 가장 잘 보이는 바와 같이, 횡단벽 (90)은 본질적으로 "W" 모양이고, 충전 방향에 대해 그의 가장 위쪽 위치에서 과충전 포트 (140)를 향해 테이퍼상이 되고, 하나 이상의 중간 이랑이 각 과충전 포트 (140)에 대해 분리된 테이퍼상 구역을 형성한다. 횡단벽 (90)의 모양에 의해, 겔 용액 앞부분이 과충전 포트 (140)에 도달하기 전에 공기가 전기영동 구획으로부터 과충전 포트 (140)를 통해서 효과적으로 배기된다. 기능면에서는, 카세트의 폭에 의존해서 겔 용액 앞부분을 둘 이상의 세그먼트로 나누고 각 세그먼트가 가장 위쪽 위치에 과류 포트를 가짐으로써 개선된 공기 배출이 달성된다. 게다가, 과충전 포트 (140)의 적당한 모양 및 단면적을 선택함으로써, 공기 배출과 비교해서 겔 용액에 대해 뚜렷이 다른 흐름 제한이 제공될 수 있고, 이렇게 함으로써, 겔 용액 앞부분이 하나의 과충전 포트 (140)에 도달할 때 한 세그먼트에서는 겔 용액 흐름 속도가 감소될 것이고 다른 세그먼트에서는 흐름 속도가 증가하여 세그먼트 사이의 흐름 앞부분 위치에서의 어떠한 불균형도 균등해질 것이다. 개시된 실시양태에 따르면, 과충전 포트 (140)는 횡단벽 (90)에 함몰부에 의해 형성되고, 이 함몰부는 지지 프레임 (30)에 의해 아래에서 둘러싸여 예정된 단면의 좁은 포트를 형성한다. 다른 실시양태에서는, 과충전 포트 (140)가 횡단벽 (90)에 성형된 관통 홀에 의해 형성될 수 있다. 예를 들어 전기영동 구획의 부피를 예정된 양만큼 초과하도록 선택된 일정 부피를 각 카세트 (10)에 충전함으로써, 또는 과충전 챔버에 대해 예정된 위치에서 흐름 앞부분을 검출하도록 배열된 하나 이상의 흐름 앞부분 검출기 등에 의해서 겔 용액이 과충전 포트 (140)를 통해 과충전 챔버 (100)에 도달할 때 충전 작업이 중단될 수 있다. 한 실시양태에 따르면, 충전 압력 검출기(나타내지 않음)가 겔 용액이 각 과충전 포트를 통해 과충전 챔버에 들어간 결과로 발생하는 증가된 충전 압력을 검출할 때 충전이 중단된다. 한 실시양태에 따르면, 횡단벽 (90)에 의해 형성되는 겔 구획의 원위 구역은 그의 전체 폭에 걸쳐서 과충전 포트 (140)(나타내지 않음) 쪽으로 테이퍼상이 된다. 다른 실시양태에서는, 예를 들어 다음 실시양태 중 일부에 나타낸 바와 같이, 횡단벽 (90)이 없고, 겔 충전 동안 공기 제거가 다른 수단에 의해 처리된다.
도 4는 한 실시양태에 따르는 카세트 (10)의 하부 말단의 확대된 구역을 나타내고, 여기서 충전 포트 (120)는 카세트 (10)에 겔 용액을 공급하기 위해 예를 들어 주사 바늘 등의 형태의 충전 노즐의 관입을 허용하도록 배열되지만 충전 노즐이 제거될 때 주입된 용액이 누출되는 것 및 공기가 겔 구획에 들어가는 것을 효과적으로 방지하는 막 구역 (122), 예를 들어 격막을 포함한다. 개시된 실시양태에서, 충전 포트 (120) 및 막 구역은 탄성 물질로 이루어진다. 한 실시양태에 따르면, 충전 포트 (120)는 샘플 웰 덮개 (50)와 동일한 단계에서 공성형될 수 있고, 주된 차이점은 충전 포트 (120)는 카세트 하우징 (20)에 영구적으로 부착되도록 설계되는 반면, 샘플 웰 덮개는 박리가능하다는 것이다. 두 구조가 동일한 물질로 제조되기 때문에, 충전 포트 (120)는 기계적 수단에 의해, 예컨대 개구의 밑을 잘라내어 그 안에 포트 (120)가 성형됨으로써 또는 별법으로, 접착성을 증가시키기 위해 카세트 하우징 (20)의 표면을 개질함으로써 카세트 하우징 (20)에 보유되도록 형성될 수 있다. 한 실시양태에서, 충전 포트 (120) 및 샘플 웰 덮개 (50)는 동일한 사출 포트를 이용해서 성형될 수 있고, 이 구조들은 수지 흐름 채널에 의해 연결되고 그 사이에 연결 부재 (121)를 남긴다. 연결 부재는 예를 들어 샘플 웰 덮개 (50) 제거시 파괴되도록 형성될 수 있거나, 또는 샘플 웰 덮개 (50) 제거 전에 절단될 수 있다.
도 5는 카세트 하우징 (20)으로부터 탈착된, 예를 들어 겔 부재 (36)가 윗면에 부착된 지지 프레임 (30)에 의해 형성된 전기영동 겔 유닛 (35)을 나타낸다. 이렇게 형성된 겔 부재 (36)는 윗면 및 아랫면 및 앞에서 정의된 샘플 분리 대역을 갖는 본질적으로 편평한 부재이다. 지지 프레임 (30)은 겔 부재 (36)의 모양을 보존하고 겔 부재 (36)의 취급을 간이화하도록 배열되고, 동시에, 분리 대역에 본질적으로 상응하는 겔 부재의 윗면 및 아랫면 둘 모두의 구역에의 접근을 허용하도록 형성된다. 아래에 나타내는 바와 같이, 양쪽 면에 있는 겔 부재 (36)의 접근가능한 구역은 분리 대역보다 클 수 있지만, 면역블로팅에 의해 겔 부재 (36)로부터 예를 들어 블로트 막으로 분리된 샘플의 적절한 전달을 허용하기 위해서는 양쪽 면에 있는 접근가능한 구역이 더 작지 않아야 한다.
도 6은 전기영동 카세트를 이용해서 전기영동 실험을 실시하기 위해 전기영동 카세트 (10)와 상용성있는 전기영동 트레이 (300)의 개략도를 나타낸다. 도 6에서는, 트레이 (300)가 독립된 특징으로서 개시되지만, 편리하게는 그것은 전기영동 장치의 일체를 이루는 부분일 수 있고, 그것은 수 개의 성분으로 이루어질 수 있고, 둘 이상의 전기영동 실험을 동시에 실시하기 위해 둘 이상의 카세트 위치를 포함할 수 있다. 트레이 (300)는 전기영동 동안에 적어도 전기영동 카세트 (10)의 분리 대역을 지지하기 위한 카세트 지지 표면 (310)을 포함한다. 카세트 지지 표면 (310)의 양옆에 1 쌍의 완충제 패드 홀더 (320a) 및 (320b)가 각각 있고, 각 홀더는 전기영동 카세트 (10)의 뒷면의 완충제 연결 구역에 대해 짝맞춤 위치에 완충제 패드 (322)(예를 들어, 도 7a 및 7b에 나타냄)를 유지하도록 배열된다. 한 실시양태에 따르면, 트레이 (300)는 전기영동 카세트 (10)의 뒷 표면의 한 구역과 열 전달 접촉에 의해서 전기영동 동안에 전기영동 카세트 (10)의 온도를 조절하기 위해 카세트 지지 표면 (310)에 연결된 열 전달 유닛(나타내지 않음)을 포함한다. 개시된 실시양태에서, 트레이 (300)는 2 개의 독립된 함몰부로서 형성된 2 개의 완충제 패드 홀더 (320a) 및 (320b), 및 트레이 상에서 카세트 (10)의 적절한 배향을 보장하기 위해 지지 프레임 (30)의 정렬 태그 (180)에 상보적이도록 형성된 정렬 구조 (330)를 갖는 편평한 윗 표면을 포함한다. 개시된 실시양태에서, 정렬 구조 (330)는 기다란 핀 (340a), 원형 핀 (340b) 및 임의의 벽 부재 (345)로 이루어진다. 상이한 단면 모양의 핀 (340a) 및 (340b)을 제조함으로써 정렬 구조가 비대칭이 되고, 이렇게 해서 정렬 태그 (180) 및 카세트 (10)의 적절한 배향이 보장된다. 도 8a, 8b 및 8c에 개략적으로 나타낸 바와 같이, 카세트 (10)가 트레이 (300) 상에 적절히 위치할 때, 지지 프레임 (30)의 완충제 슬릿 (150a) 및 (150b)이 각각의 완충제 구획 (320a) 및 (320b)에 위치하여 완충제 슬릿 (150a) 및 (150b)을 통해 노출되는 겔(배면 필름 (40)의 각각의 제거가능한 구역 (210a) 및 (210b)이 제거됨)과 각각의 완충제 패드 홀더 (320a) 및 (320b)에 놓인 도 7a 및 7b에 개략적으로 나타낸 완충제 패드 (322) 사이의 짝맞춤 접촉을 보장한다.
한 실시양태에 따르면, 도 7a 및 7b에 개략적으로 개시된 완충제 패드 (322)는 완충제 스트립 (324) 및 전극 배열 (325)을 넣는 컵 (323)을 포함한다. 도 7b는 도 7a의 단면도를 나타낸다. 컵은 전극 배열 (325)을 전기영동 장치의 전원에 연결하기 위한 외부 전기 연결자 (326)를 더 포함한다. 따라서, 트레이 (300)에 상보적 전기 연결자(나타내지 않음)가 제공된다. 컵 (323)이 완충제 패드 홀더 (320a) 및 (320b)에 끼워지도록 형성되어서 완충제 스트립 (324)의 윗부분이 트레이 (300) 상에 놓인 카세트의 겔과 접촉해서 놓일 수 있다. 완충제 스트립 (324)은 겔 물질에 포함된 완충제 물질, 예를 들어 제WO87/04948호에 개시된 유형으로 이루어질 수 있다. 완충제 스트립 (324)을 컵 (323)에 놓음으로써, 예를 들어 완충제 함몰부에 직접 겔 스트립을 놓는 것과 비교해서, 전기영동 실시 사이에서 완충 매질을 바꾸는 것이 크게 간이화된다. 도 7b에 개시된 바와 같이, 겔 스트립 (324)은 카세트 (10)의 겔과의 접촉을 간이화하기 위해 융기된 구역을 갖도록 형성될 수 있다.
한 실시양태에 따르면, 완충제 패드 (322)는 잠재적으로 카세트 (10)와 함께 포장되는 일회용 유닛으로서 형성되지만, 또 다른 실시양태에서는, 전극 (325)을 포함하는 컵 (323)이 사용 후 교체되는 일회용 완충제 스트립 (324)과 함께 재사용되는 것이 의도된다. 한 실시양태에 따르면, 완충제 패드는 제US6368481호에서와 마찬가지로 전기영동 카세트와 통합되고, 이 문헌은 본원에 참고로 포함된다.
도 8b 및 8c는 트레이 (300), 및 완충제 패드 (322)가 안에 놓인 완충제 패드 홀더 (320a)의 개략적인 옆면도를 나타내고, 전기영동 카세트 (10)가 트레이 (300) 상에 도킹할 위치에서 트레이 (300)의 카세트 지지 표면 (310) 약간 위로 올려져 있다. 완충제 패드와 전기영동의 뒷면의 완충제 연결 구역 사이의 적절한 짝맞춤 접촉을 보장하기 위해, 완충제 패드와 완충제 연결 구역의 짝맞춤이 어느 정도 편향될 수 있다. 이것은 패드로부터 겔로 예를 들어 물의 물질 전달이 일어날 수 있어서 완충제 패드 (322)가 수축할 일부 겔/패드 조성물에 특히 중요할 수 있다. 완충제 패드 (322)를 겔에 대해서 편향시킴으로써, 이러한 상황이 달성될 수 있다. 완충제 패드 (322)의 겔 성분에 대해 적당한 물질 성질을 선택함으로써, 완충제 패드는 편향된 짝맞춤을 적어도 부분적으로 제공할 수 있는 적당한 탄력성 물질로 이루어질 수 있다. 한 실시양태에서, 편향된 짝맞춤은 모양 때문에 어느 정도의 압축을 허용하는 특정 모양의 완충제 스트립을 제공함으로써 달성될 수 있다. 도 8b 및 8c에 개시된 실시양태에서는, 완충제 스트립의 물질 특성 및 도 8c에 개시된 바와 같은 완충제 스트립의 모양과 함께, 편형된 짝맞춤을 제공하기 위해 완충제 패드 홀더 (320a)에 스프링 요소 (327)가 도입된다.
다른 실시양태에서는, 완충제 패드 (322)가 완충제 패드 홀더 (320a) 및 (320b)에 직접 넣는 완충제 스트립으로 대체될 수 있고, 여기서는 전극 배열 (325)이 패드 홀더에 별도로 배열된다. 나타내지 않은 또 다른 실시양태에서는, 완충제 패드 (322)가 예를 들어 겔 부재 (36)와의 접촉을 확립하기 위해 전극 배열 및 흡상 부재 등을 포함하는 액체 완충제가 충전된 용기에 의해 형성될 수 있다.
도 8 내지 11은 전기영동 카세트 (10) 및 상용성있는 전기영동 장치 (350)를 이용해서 전기영동 분리 실험을 수행하는 관련 단계들을 개략적으로 나타낸다. 일부 단계의 개개의 순서는 달라질 수 있다.
Figure pct00001
완충제 패드 (322)를 트레이 (300)의 완충제 패드 홀더 (320a) 및 (320b)에 놓는다. (도 8)
Figure pct00002
박리 탭 (211a) 및 (211b)를 각각 당김으로써 배면 필름 (40)의 제거가능한 구역 (210a) 및 (210b)을 카세트 (10)로부터 제거하고, 이렇게 함으로써 겔 부재 (36)가 지지 프레임 (30)의 완충제 슬릿 (150a) 및 (150b) 각각을 통해 노출된다. (도 9)
Figure pct00003
샘플 웰 덮개 (50)를 제거하여 샘플 웰 (110)을 노출시킨다. (도 9)
Figure pct00004
트레이 (300) 상에 카세트 (10)의 적절한 배향이 보장되도록 지지 프레임 (30)의 정렬 태그 (180)가 상보적 정렬 구조 (330)에 위치하게 해서 카세트 (10)를 트레이 (300) 상에 위치시킨다. (도 10)
Figure pct00005
샘플을 예를 들어 피펫 (360) 등에 의해 샘플 웰 (110)에 적재한다. (도 11)
Figure pct00006
전기영동 장치 (350)를 이용해서 전기영동 방법을 수행한다. (도 11)
도 11에서는, 개략적으로 개시된 전기영동 장치 (350)에 전기영동 트레이 (300)를 운반하는 트레이 적재 메카니즘 (370)이 제공된다. 한 실시양태에 따르면, 전기영동 장치 (350)는 장치에서 직접 분리 결과를 영상화하기 위해 형광 영상화 유닛(나타내지 않음)을 포함한다. 이 방법에서는, 분리 후 전기영동 카세트 (10)를 별도의 영상화 유닛으로 옮길 필요가 없다. 위에서 언급한 바와 같이, 개시된 카세트는 바람직하지 않은 광학 효과, 예컨대 카세트의 부품이 방출하는 형광, 영상 왜곡 등을 피하는 적절한 물질 선택 및 디자인에 의해 영상화를 위해 설계될 수 있다. 카세트 (10), 및 트레이에 함몰된 곳에 놓인 완충제 패드 (322)를 갖는 전기영동 트레이 (300)의 개시된 실시양태의 한 가지 이점은 결과적으로 얻는 전기영동 장비가 낮은 프로파일을 가짐으로써 영상화 유닛이 겔의 아주 가까운 근처에서 작동할 수 있어서 감도 및 해상도를 증가시키고 부정적인 광학 효과를 피한다는 것이다. 개시된 실시양태에서는, 전기영동 트레이 (300)를 본질적으로 수평 위치로 나타내고, 그 위에 겔 카세트 (10)가 배열된다. 그러나, 전기영동 트레이 (300) 뿐만 아니라 겔 카세트 (10)는 다른 배향으로, 예컨대 수직으로 또는 심지어 거꾸로 이용하도록 배열될 수 있다는 것을 주목해야 한다.
도 12a 내지 12c는 카세트 하우징 (20)으로부터 지지 프레임 (30)에 부착된 겔 부재 (36)를 제거하는 단계를 개략적으로 나타낸다.
Figure pct00007
박리 탭 (211c)을 당김으로써 카세트 (10)로부터 배면 필름 (40)의 제거가능한 구역 (210c)을 제거하고, 이렇게 해서 겔 부재 (36)의 분리 대역이 지지 프레임 (30)의 분리 대역 창 (160)을 통해 노출된다. (도 12a)
Figure pct00008
박리 탭 (170)을 당김으로써 지지 프레임 (30)을 부착된 겔 부재 (36)와 함께 탈착시킨다. (도 12b)
도 12c는 하우징 (20)으로부터 탈착된 후의 부착된 겔 부재 (36)와 함께 지지 프레임 (30)으로 이루어진 전기영동 겔 유닛 (35)을 나타낸다. 예를 들어 면역블로팅 등의 뒤따르는 방법 단계를 위한 장비 때문에 카세트 (10)의 물리적 포맷 및 포맷 요건에 의존해서, 도 12c에서 점선으로 나타낸 바와 같이, 뒤따르는 단계에서 이용되지 않는 지지 프레임 (30) 및 겔 부재 (36)의 구역들을 임의로 절단할 수 있고, 예를 들어 겔 부재 (36)의 분리 대역이 부착된 더 작은 크기의 지지 프레임 (30)을 남긴다. 지지 프레임의 이익을 보존하기 위해, 지지 프레임의 충분한 부분이 분리 대역 창 둘레에 남아 있어야 한다는 점을 주목해야 한다. 도 13은 도 14 내지 17e에 개략적으로 개시된 면역블로팅 포맷에 맞추기 위해 지지 프레임 (30) 및 겔 부재 (36)의 말단 구역이 제거된 전기영동 겔 유닛 (35)의 한 예를 나타낸다.
도 14는 강성 블로트 프레임 (420)에 부착된 막 (410)으로 이루어진 면역블로팅을 위한 막 유닛 (400)을 나타낸다. 겔 부재와 마찬가지로, 면역블로팅 방법의 단계에서 막 유닛 (400)의 취급을 크게 개선하기 위해 강성 블로트 프레임 (420)이 방법 단계 전체에 걸쳐서 막 (410)에 부착된 채로 있도록 설계된다. 강성 블로트 프레임 (420)은 전달 대역 밖에 접근가능한 잡는 부분을 제공함으로써 막 (410)의 취급을 간이화하고 막 (410)의 모양을 보존하기 위해 적당히 강성인 물질로 형성된다. 지지 프레임 (30)과 마찬가지로, 강성 블로트 프레임 (420)은 막 유닛 (400)이 전달 유닛, 스캐너 등의 예를 들어 2 개의 핀을 포함하는 상보적 정렬 구조에 대해서 적절하게 정렬되는 것을 보장하도록 배열된 2 개의 정렬 홀 (450a) 및 (450b) 형태의 예정된 정렬 구조를 갖는 정렬 태그 (440)를 포함한다. 개시된 실시양태에 따르면, 정렬 구조 (450a) 및 (450b)는 겔 지지 프레임의 정렬 구조 (190a) 및 (190b)와 상용성이거나 또는 본질적으로 동일하다. 적당한 정렬 수단에 의해서 전달 방법 동안에 겔 부재 (36) 및 막 유닛 (400)이 정렬되어 전기영동 겔의 밴드 및 전달된 밴드 사이에 공지된 기하학적 관계를 생성할 수 있다. 이어서, 공지된 기하학적 관계를 이용해서 각각의 겔 및 막 유닛 (400)의 영상 평가를 상관시켜서 예를 들어 막 유닛 (400)의 영상에서 전기영동 겔로부터의 레인을 식별할 수 있다. 게다가, 겔 지지 프레임 (30)과 마찬가지로, 막 유닛 (400)의 정렬 구조 (450a) - (450b)는 그것이 기기 등의 상보적 정렬 구조에 하나의 방식으로 끼워질 수 있는 방식으로 비대칭일 수 있고, 이렇게 해서 그것이 잘못된 방식으로, 거꾸로 등으로 삽입될 수 없다.
게다가, 적당하게는, 강성 블로트 프레임 (420)에 막 유닛 (400)의 정체를 판독하는 것을 가능하게 하는 식별 코드 (460) 등이 제공된다. 식별 코드 (460)는 예를 들어 바코드, 매트릭스 코드 등으로서 기계 판독가능한 코드일 수 있고, 사용자 및/또는 기기에 관련 정보를 제공한다. 한 실시양태에 따르면, 지지 프레임 (30) 및 강성 블로트 프레임 (420) 중 적어도 하나는 투명 물질로 제조되거나, 또는 정렬된 위치에서 다른 프레임 위에 놓일 때 다른 프레임의 식별 코드 (200) 또는 (460)를 노출시키도록 배열된 창이 제공되고, 이렇게 해서 동일 작업에서 두 식별 코드를 모두 판독할 수 있어서 특정 겔 부재 (36)와 막 유닛 (400) 사이의 고유 관련성을 생성할 수 있다.
개시된 실시양태에서, 강성 블로트 프레임 (420)은 예를 들어 중합체 물질의 강성 필름으로 이루어진다. 이와 관련해서, 강성이라는 용어는 막 윤곽의 왜곡을 피하기 위해 특히 평면 내에서 필름이 막에 비해 더 강직하다는 것을 의미한다. 막 (410)은 충분한 결합 특성을 제공하는 어떠한 적당한 방식으로도 강성 블로트 프레임 (420)에 부착될 수 있다. 한 실시양태에 따르면, 막 (410)은 둘 이상의 적층된 플라스틱 필름층으로 형성될 수 있고, 여기서 블로트 막의 하나 이상의 구역이 플라스틱 필름의 층들 사이에 층간적층된다. 플라스틱 층들 중 하나 이상은 한 면에 접착제층이 적용된 강성 중합체 필름으로 이루어질 수 있고, 강성 중합체 필름은 예를 들어 PET로 이루어질 수 있고, 접착제층은 예를 들어 EVA층일 수 있다.
도 14에 개략적으로 개시된 바와 같이, 막 (410)은 펜 등을 이용해서 수작업 기록을 하는 데 이용될 수 있는 강성 블로트 프레임 (420)의 더 작은 창 (470)을 덮도록 형성된 점선으로 나타낸 윤곽을 가질 수 있다. 아래에서 더 상세히 개시하는 바와 같이, 다른 실시양태에서는, 강성 블로트 프레임 (420)이 상보적 전기영동 겔 유닛 (35)의 겔 부재 (36)와 접촉해서 막 (410)을 위치시키는 것을 허용하도록 형성될 수 있는 더 프레임 같은 강성 구조일 수 있다.
도 15는 전기전달 동안 전기영동 겔 유닛 (35) 및 막 유닛 (400)의 전표면 에 균일한 압력을 달성하기 위해 전기블로팅을 위한 전달 샌드위치를 생성하는 데 이용되는 스폰지 부재 (480)를 나타낸다. 개시된 실시양태에서는, 스폰지 부재 (480)에 패널 (510a)의 정렬 구조와 협업하는 임의의 정렬 홀이 제공된다. 스폰지 부재 (480)는 적당한 물질 특성을 갖는 어떠한 적당한 물질로도 이루어질 수 있다.
언급한 바와 같이, 겔 지지 프레임 (30) 및 강성 블로트 프레임 (420) 상에 상응하는 정렬 구조의 제공은 공지된 기하학적 관계에 따라서 예를 들어 면역블로팅에 의해 겔 부재 (36)로부터 블로트 막 (410)으로 샘플 구성성분을 전달하는 것을 가능하게 한다. 도 16은 각각 제1 지지 패널 (510a) 및 제2 지지 패널 (510b)을 포함하는 전기블로팅을 위한 샌드위치 홀더 (500)의 한 예를 나타낸다. 두 패널 (510a) 및 (510b) 각각은 그리드 구역 (520a) 및 (520b) 각각을 포함하여 두 패널 (510a) 및 (510b) 사이에 형성된 전달 샌드위치와 본질적으로 비제한된 유체 및 전기 접촉을 허용한다. 위에서 논의한 바와 같이 전기영동 겔 유닛 (35)과 막 유닛 (400) 사이의 공지된 기하학적 관계를 확립하기 위해 지지 프레임 (30)의 정렬 태그 (180) 및 강성 블로트 프레임 (420)의 정렬 태그 (440)에 상보적이도록 형성된 정렬 구조 (530a) 및 (530b)가 제1 지지 패널에 제공된다. 개시된 실시양태에서, 정렬 구조는 도 6에 나타낸 전기영동 트레이 (300)의 정렬 구조 (330)에 상응하는 배열로 기다란 핀 (530a) 및 원형 핀 (530b)으로 이루어지고, 전기영동 겔 유닛 (35) 및 막 유닛 (400) 둘 모두가 상기 핀을 이용해서 상호 정렬되도록 형성된다. 이 방법에서는, 전기영동 겔 유닛 (35)의 전기영동 밴드의 샘플 구성성분이 정렬 구조에 대해서 막 유닛 (400)의 상응하는 기하학적 위치에 전딜한다. 따라서, 전기영동 겔 유닛 (35) 및 막 유닛 (400)이 상보적 정렬 구조를 포함하는 영상화기를 이용해서 영상화되는 경우, 영상들이 본질적으로 정렬될 것이다.
도 17a 내지 17e는 샌드위치 홀더 (500)를 이용하여 전기블로팅을 하기 위한 전달 샌드위치의 조립을 개략적으로 나타낸다.
1. 전기전달 동안 전기영동 겔 유닛 (35) 및 막 유닛 (400)의 전표면에 균일한 압력을 달성하기 위해 제1 패널 (510a) 상에 제1 스폰지 부재 (480)를 놓는다. 개시된 실시양태에서는, 스폰지 부재에 패널 (510a)의 정렬 구조와 협업하는 임의의 정렬 홀이 제공된다. (도 17a)
2. 스폰지 부재 (480) 위에 막 유닛 (400)을 놓는다. (도 17b)
3. 겔 부재 (36)가 막 (410)과 적절히 접촉해서 놓이도록 막 유닛 (400) 위에 전기영동 겔 유닛 (35)을 놓는다. (도 17c)
4. 전기영동 겔 유닛 (35) 상에 제2 스폰지 부재 (480)를 놓는다. (도 17d)
5. 전기블로팅 전달 방법 동안 달라붙어 있게 하기 위해 샌드위치 위에 제2 패널 (510b)을 놓는다. (도 17e)
임의로, 각 스폰지 부재 (480)와 막 유닛 (400) 및 전기영동 겔 유닛 (35) 각각의 사이에 한 장의 필터 종이 또는 유사한 미세다공성 물질이 제공될 수 있다.
개시된 실시양태에서는, 두 패널 (510a) 및 (510b)을 상호연결 특징 등이 없는 독립 패널 부재로 나타낸다. 그러나, 많은 응용에서는, 조립된 샌드위치를 단결시키는 클램핑 특징 등(나타내지 않음)을 갖는 것이 적당할 수 있다. 이러한 클램핑 특징은 패널 (510a) - (510b) 중 하나 또는 둘 모두의 통합된 특징일 수 있거나, 또는 그것은 하나 이상의 독립된 특징으로서 형성될 수 있다. 스폰지 부재 (480)를 위한 적당한 물질 성질 및 패널 (510a) - (510b) 사이의 적당한 예정된 거리를 선택함으로써, 전기전달 방법 동안 전기영동 겔 유닛 (35)과 막 유닛 (400) 사이에 잘 정의된 압축을 달성하는 것이 가능할 수 있다.
전기전달 방법 후, 막 유닛 (400)은 탐색 및 영상화 단계에 의해 더 처리되고, 여기서는 막을 잡는 핸들로 쓰이지만 또한 얇은 막의 접힘 및 꼬임을 방지하기도 하는 강성 블로트 프레임 (420)의 존재에 의해서 막의 취급이 크게 간이화된다. 블로트 프레임 (420)의 정렬 구조 (450a) - (450b) 및 정보 코드 필드 (460)는 막의 올바른 배향에 관한 고유 정보를 제공하고, 실수로 막이 거꾸로 등으로 처리되는 것 등을 본질적으로 방지한다. 탐색 방법 동안 막 유닛 (400)의 적절한 배향을 더 보장하기 위해, 위에서 개시된 상응하는 정렬 구조가 탐색 챔버에 제공될 수 있다. 게다가, 블로트 프레임 (420)은 탐색 방법의 단계들을 간이화할 수 있으며, 그 이유는 블로트 프레임이 막 (410)이 탐색 매질 등에 더 쉽게 잠길 수 있도록 막 (410)을 본질적으로 편평하게 유지할 것이기 때문이다. 블로트 프레임 (420)을 기계적으로 아래로 누름으로써 따라서 막과 접촉하지 않으면서 예를 들어 탐색 챔버의 바닥에 맞대어 막 유닛 (400)을 기계적으로 아래로 유지하는 것이 추가로 가능하다.
앞에서 언급한 바와 같이, 전기영동 겔 유닛 (35) 및 막 유닛 (400) 둘 모두에 정렬 구조를 제공하는 것을 이용해서 둘의 정렬된 영상화를 제공할 수 있고, 이렇게 해서 뒤따르는 영상 평가 단계들이 크게 간이화될 수 있다. 정렬 특징의 정확성 및 영상 평가 단계의 요건에 의존해서, 기계적 정렬이 평가에 직접 이용될 수 있거나, 또는 그것은 예를 들어 영상 분석 소프트웨어에 의해서 세밀한 전자적 정렬을 위한 매우 좋은 출발점으로 쓰일 수 있다. 도 18은 도 11과 관련해서 앞에서 논의된 조합된 전기영동 및 영상화 장치 (350)의 트레이 (300) 상에 놓인 막 유닛 (400)을 나타내고, 여기서는 트레이의 정렬 구조가 또한 막 유닛 (400)을 정렬하는 데도 이용된다.
한 실시양태에 따르면,
앞면 및 뒷면을 갖는 하우징에 겔 부재를 포함하는 전기영동 카세트를 제공하는 단계,
전기영동 실험을 실시하기 위해 전기영동 카세트를 지지하도록 배열된, 전기영동 동안 적어도 전기영동 카세트의 분리 대역을 지지하기 위한 카세트 지지 표면을 포함하고 카세트 지지 표면 양옆에 전기영동 카세트 뒷면의 완충제 연결 구역에 대해 짝맞춤 위치에 완충제 패드를 유지하도록 배열된 1 쌍의 완충제 패드 홀더가 각각 위치하는 전기영동 트레이를 제공하는 단계,
완충제 패드 홀더에 완충제 패드를 배열하는 단계,
전기영동 카세트를 트레이 상에 제위치에 놓는 단계,
전기영동 카세트의 하나 이상의 샘플 웰에 샘플을 적재하는 단계, 및
완충제 패드 사이에 전기장을 적용하는 단계
를 포함하는 전기영동 실험 실시 방법을 제공한다.
도 19a 및 19b는 각각 종방향 벽 부재 (91) 및 (92)의 제공에 의해서 분리된 전기영동 레인을 각각 제공하는 카세트 하우징 (21) 및 (22)의 2 개의 개략적인 예를 나타낸다. 도 19a의 실시양태에서는, 종방향 벽 (91)이 샘플 웰 (110)에서 끝나서 하우징 (21)의 말단에 공통 구획을 남긴다. 따라서, 하우징 (21)을 포함하는 카세트 (10)는 하나의 충전 포트 (120)를 통해서 충전될 수 있고, 모든 레인이 동일한 겔 조성물로 충전될 것이다. 도 19b의 실시양태에서는, 종방향 벽 (92)이 하우징 (22)의 테두리 (70)까지 쭉 연장됨으로써 각 레인에 대해 분리된 겔 구획을 생성하고, 각 레인이 그 자체의 충전 포트 (121)를 포함한다. 카세트 하우징 (21) 및 (22) 각각은 상기 실시양태 중 어느 것이든 그에 따르는 탈착가능한 겔 지지 프레임 (30), 구역별로 제거가능한 배면 필름 (40) 및 제거가능한 샘플 웰 덮개 (50)와 조합될 수 있다.
도 20a - 20h는 강성 겔 지지 프레임 (610), 샘플 적재 개구 (625)를 갖는 제거가능한 상부 필름 (620), 제거가능한 샘플 개구 덮개 (630) 및 구역별로 제거가능한 배면 필름 (640)을 포함하는 전기영동 카세트 (600)의 또 다른 개략적인 실시양태를 나타낸다. 도 20e 및 20g에 개시된 바와 같이, 카세트 (600)는 개구 덮개 (630)가 제거될 때 샘플 적재 개구 (625) 위에 배열되어 카세트에 몰딩된 겔의 표면과 접촉하도록 형성되어 카세트 (600)에 샘플을 적재하기 위한 하나 이상의 샘플 웰을 형성하는 샘플 웰 형성기 (650)를 더 포함한다. 웰 형성기 (650)는 적당한 개수의 웰을 가지고, 융통성 있는 용액을 제공하기 위해 상이한 개수의 웰을 갖는 샘플 웰 적재기가 제공될 수 있다.
겔 지지 프레임 (610)은 예정된 높이의 외부 프레임 (660)을 포함하고, 이것은 추가로 카세트 (610)에 몰딩되는 겔의 높이를 한정한다. 겔 지지 프레임 (610)의 윗면은 겔 지지 프레임 (610)의 관통 개구에 의해 형성되는 겔 구획 (680)을 둘러싸는 상부 테두리 (670)로 이루어진다. 겔 지지 프레임 (610)의 아랫면은 상응하는 하부 테두리 (690)를 포함한다. 상부 필름 (620)이 상부 테두리 (670)에 탈착가능하게 부착되고 구역별로 제거가능한 배면 필름 (640)이 하부 테두리 (690)에 탈착가능하게 부착됨으로써, 겔 구획 (680)을 윗면 및 아랫면 각각에서 둘러싸서 그 안에 전기영동 겔 부재 (700)의 몰딩을 허용한다. 겔 지지 프레임 (610)과 그 안에 몰딩된 겔 부재 (700) 사이에 강한 상호연결을 확립하기 위해, 외부 프레임 (660)으로부터 겔 구획으로 안쪽으로 연장되는 겔 부착 테두리 (710)가 겔 지지 프레임 (610)에 제공된다. 겔 부착 테두리 (710)는 한 면이 덮이기 위해 또는 겔 부재에 완전히 포함되기 위해 외부 프레임 (660) 및 따라서, 겔 부재 (700)에 비해 얇다. 개시된 실시양태에 따르면, 겔 부착 테두리 (710)는 부착 테두리 (710)와 겔의 기계적 상호연결을 증진시키는 상호연결 구조 (720)를 추가로 포함할 수 있다. 상호연결 구조 (720)는 예를 들어 부착 테두리 (710)의 관통 홀일 수 있거나, 또는 그것은 부착 테두리의 도려낸 부분, 또는 상호연결을 촉진하기 위해 몰딩 후 겔에 의해 충전되는 어느 범위의 다른 구조일 수 있다.
겔 지지 프레임 (610)에는 카세트 (600) 및/또는 지지 프레임 (610)이 전기영동 장치 등의 예를 들어 3 개의 핀을 포함하는 상보적 정렬 구조에 대해서 적절하게 정렬되는 것을 보장하도록 배열된 정렬 홀 (191a) 내지 (191c) 형태의 예정된 정렬 구조가 제공된다. 도 20a - 20h에 개시된 바와 같이, 상부 필름 (620)에는 상응하는 정렬 홀 (191a) 내지 (191c)이 제공되지만, 구역별로 제거가능한 배면 필름 (640)의 완충제 구역 (641a) 및 (641b)에는 상응하는 홀이 제공되지 않는다. 이 방법에서는, 정렬 홀 (191a) 내지 (191c) 형태의 정렬 구조을 드러내기 위해 구역별로 제거가능한 배면 필름 (640)의 완충제 구역 (641a) 및 (641b)을 먼저 제거하지 않고서 사용자가 카세트 (600)를 예를 들어 전기영동 장치에 끼우는 것이 방지된다. 따라서, 겔 부재를 완충제 패드 등과의 전기화학적 접촉으로부터 방지하는 보호 완충제 구역 (641a) 및 (641b)이 있는 채로 전기영동 방법을 실시할 위험을 피한다.
카세트 (10)에서와 마찬가지로, 배면 필름 (640)은 구역별로 제거가능하고, 겔 부재를 각각의 완충제 패드 등(나타내지 않음)과 접촉해서 놓기 위해 겔 부재 (700)의 말단 구역을 노출시키도록 배열된 2 개의 완충제 구역 (641a) 및 (641b), 및 상기와 아주 유사하게, 전기영동 분리 후 분리 대역에의 접근을 제공하도록 배열된 중앙 구역 (641c)을 포함한다. 적당한 물질 조합 및 접착제 기술을 선택함으로써, 배면 필름 (640)은 예를 들어 작업자가 각각의 박리 탭 (642a) - (642c)을 잡아 당김으로써 각각의 구역 (641a) - (641c)이 제거될 수 있도록 하부 테두리 (690)에 부착될 수 있다.
도 20f는 개구 덮개 (630)가 제거된 가능 상태의 전기영동 카세트 (600)를 나타내고, 도 20g는 웰 형성기 (650)가 제위치에 있는 전기영동 카세트 (600)를 나타내고, 이렇게 해서 샘플을 적재하여 전기영동 분리를 수행할 수 있다. 게다가, 도 20f 및 20g 둘 모두에서는 2 개의 완충제 구역 (641a) 및 (641b) 둘 모두가 제거되고, 도 20g에서는 각각의 완충제 패드에의 연결을 화살표로 나타낸다. 분리가 완결된 후, 위 및 아래 둘 모두에서 분리 대역에의 접근을 제공하기 위해 상부 필름 (620) 및 중앙 구역 (641c)은 제거되는 반면에, 겔 부재는 겔 지지 프레임 (610)에 여전히 부착된다.
도 21a - 21h는 강성 겔 지지 프레임 (610), 구역별로 제거가능한 상부 필름 (740) 및 제거가능한 배면 필름 (750)을 포함하는, 도 20a - h의 실시양태와 유사한 전기영동 카세트 (730)의 또 다른 개략적 실시양태를 나타낸다. 도 20a 및20b에 개시된 바와 같이, 카세트 (730)는 구역별로 제거가능한 상부 필름 (740)의 제1 구역 (741a) 및 제2 구역 (741b)이 제거될 때 전기영동 카세트 (730) 위에 배열되어 카세트 (730)에 몰딩된 겔의 표면과 접촉하도록 형성되어 도 21g에 나타낸 바와 같이 겔 부재 (700) 위에 카세트 (730)에 샘플을 적재하기 위한 하나 이상의 샘플 웰 및 완충제 저장소를 형성하는 조합된 샘플 웰 형성기 및 완충제 구획 (760) 및 완충제 구획 (770)을 추가로 포함한다. 웰 형성기 (760)는 적당한 개수의 웰을 가질 수 있고, 융통성 있는 용액을 제공하기 위해 상이한 개수의 웰을 갖는 샘플 웰 적재기가 제공될 수 있다.
따라서, 도 21a - 21h의 실시양태에서, 전기영동 카세트 (730)는 겔 부재 (700) 위에 완충제를 갖도록 설계되고, 완충제는 겔 패드 형태로 또는 아마도, 액체 형태로 제공될 수 있다. 전기영동 분리 후, 도 21h에 나타낸 바와 같이, 구역별로 제거가능한 상부 필름 (740)의 구역 (741c) 및 배면 필름 (750)이 제거되고, 겔 부재 (700)는 지지 프레임 (610)에 의해 지지된 채로 있는다.
도 22a는 겔 부재와 강한 상호연결을 확립하고 사실상 겔 부재의 보강재로서 작용하도록 배열된 투과성 또는 반투과성 배면 (780)을 갖는 강성 겔 지지 프레임 (610)을 나타낸다. 투과성 배면 (780)은 예를 들어 양면에서 겔 부재와 충분한 전기화학적 접촉을 제공할 수 있는 적당한 전기절연 물질의 웹, 천공된 또는 다공성 시트 또는 필름일 수 있다. 개시된 실시양태에는, 투과성 배면 (780)이 지지 프레임 (610)에 부착된 것을 나타내지만, 그것은 본원에 개시된 어떠한 적당한 지지 구조에도 부착될 수 있다. 게다가, 투과성 배면 (780)은 지지 프레임에 추가하여 추가의 구조 지지체를 제공하도록 형성될 수 있다. 도 22b는 예를 들어 겔 부재와 충분한 전기화학적 접촉을 제공하기 위해 천공된 또는 다른 수단에 의해 변형된 구역 (151) 및 (161)을 제공함으로써 필름의 개구 위에 부착된 또는 필름의 일체를 이루는 부분으로서 형성된 투과성 배면 (780)을 갖는 필름 유형 지지 프레임 (31)을 개략적으로 나타낸다.
도 23a - 23g는 통합된 전기영동 및 면역블로트 기능을 갖는 "겔카드" (800), "블로트카드" (900) 및 "전달카드" (820)를 포함하는 개략적인 단백질 분석 개념을 나타낸다. 카드 (800), (810) 및 (820)는 상기 실시양태들과 공통인 많은 특징을 가지고, 마찬가지로, 어느 하나의 실시양태이든 그에 대해 나타낸 많은 특징이 다른 실시양태에서 구현될 수 있다. 도 23a는 겔카드 (800)의 상면도를 나타내고, 도 23b는 카드의 통합된 특징을 나타내도록 구성된 동일한 겔카드 (800)의 개략적 단면도를 나타낸다. 겔카드 (800)는 겔 부재 (850)를 안에 몰딩하기 위한 겔 구획을 형성하는 함몰부를 형성하는 뒷벽 (805)을 갖는 강성 지지 프레임 (830)을 포함한다. 겔 구획 (850)의 상부는 지지 프레임 (830)의 윗면에 제거가능하게 부착된 덮개 필름 (860)으로 폐쇄된다. 겔카드 (800)는 통합된 완충제 패드 (870a) 및 (870b) 및 예를 들어 겔카드 (800)의 뒷면의 연결자 표면에 의해 전기영동 방법을 추진하는 전원에 연결되도록 배열된 관련 전극 (871a) 및 (871b)을 더 포함한다. 완충제 패드 (870a) 및 (870b)는 예를 들어 전기영동 방법을 위해 겔카드 (800)를 준비하는 동안 완충제 용액으로 흠뻑 젖도록 배열된 스폰지 유형일 수 있거나, 별법으로, 완충제 패드는 예를 들어 겔 형태 등으로 완충제가 "미리 충전"될 수 있다. 개시된 실시양태에서, 겔 부재는 샘플 적재 및 완충제 상호작용 세그먼트와 비교해서 분리 대역에서 감소된 두께를 갖도록 설계된다. 샘플 적재 웰 (880)은 예를 들어 덮개 필름 (860) 등에 부착된 금형 구조를 제공함으로써 겔에 직접 형성된다.
겔카드 (800)의 지지 프레임 (830)은 겔 부재 (850)의 뒷면에의 접근을 제공하는 제거가능한 구역 (865)을 갖는 뒷벽 (805)을 추가로 포함한다. 상기 실시양태들과 마찬가지로, 겔카드 (800)는 가장자리 가까이에 3 개의 정렬 홀 (870a) - (870c) 형태의 정렬 구조를 포함하여 상호 정렬 구조에 의해 블로트카드 (810) 및 전달카드 (820)와 적절한 정렬을 허용한다. 겔카드 (800)를 포함하는 전기영동 시스템 사용자를 더 돕기 위해, 겔카드에 그의 하나 이상의 면에 인쇄된 작업 설명이 제공된다. 작업 설명에는 겔카드 (800)의 그 면에 관련 위치에 숫자 표시자가 추가로 보충된다. 겔카드 (800)를 사용하는 순서는 다음 단계를 포함한다:
1. 덮개 (860)를 제거하는 단계
2. 웰 (880)에 샘플을 첨가하는 단계
3. 완충제 패드 (870a) 및 (870b)에 완충제를 첨가하는 단계
4. 전기영동 분리를 위해 프로세서 장치에 삽입하는 단계.
도 23c는 블로트카드 (900)의 상면도를 나타내고, 도 23d는 카드의 통합된 특징을 나타내도록 구성된 동일한 블로트카드 (900)의 개략적 단면도를 나타낸다. 블로트카드 (900)는 겔카드 (800)에 상응하는 모양 및 구조의 강성 프레임 (910)을 포함한다. 블로트 막 (920)은 강성 프레임 (910)의 한 면에 부착되고, 한 면은 전달 단계 전에 제거되는 얇은 덮개 필름 (850)으로 덮이고 그의 뒷면은 완충제 패드 (930)로 덮인다.
도 23e는 전달카드 (960)의 상면도를 나타내고, 도 23f는 카드의 통합된 특징을 나타내도록 구성된 전달카드 (960)의 개략적 단면도를 나타낸다. 전달카드 (960)는 겔카드 (800) 및 블로트카드 (900)에 상응하는 모양 및 구조의 강성 프레임 (965)을 포함한다. 완충제 패드 (970)가 강성 프레임 (965)의 앞면에 배열되고, 얇은 덮개 필름 (980)으로 덮인다. 도 23g로부터 분명한 바와 같이, 겔카드 뒷벽 (805)의 제거가능한 구역 (865)을 통해 겔과 전기화학적 접촉을 하게 배열되기 위해 전달카드 (960)의 완충제 패드 (970)는 강성 프레임 (965)의 앞면으로부터 어느 거리를 연장하도록 배열된다.
겔카드 (800)와 마찬가지로, 블로트카드 (900) 및 전달카드 (960)는 상호 정렬 구조에 의해 겔카드 (800), 블로트카드 (900) 및 전달카드 (960) 사이에 적절한 정렬을 허용하기 위해 가장자리 가까이에 각각 3 개의 정렬 홀 (940a) - (940c) 및 (990a) - (990c) 형태의 정렬 구조를 포함한다. 겔카드 (800)와 마찬가지로, 블로트카드 (900)에는 그의 하나 이상의 면에 인쇄된 작업 설명이 제공된다. 블로트카드 (900)를 사용하는 순서는 다음 단계를 포함한다:
1. 덮개 (950)를 제거하는 단계
2. 정렬 구조를 이용하여 처리된 겔카드의 겔카드 (800) 앞면에 도킹하는 단계
3. 겔카드 뒷벽 (805)의 제거가능한 구역 (865)을 제거하여 겔 부재 (850)의 뒷면에의 접근을 제공하는 단계
4. 전달카드 (960) 덮개 (980)를 제거하는 단계
5. 정렬 구조를 이용하여 겔카드 (800)의 뒷면에 전달카드 (960)를 도킹하는 단계
6. 블로트 처리를 위해 블로터(나타내지 않음)에 삽입하는 단계
7. 도킹을 전부 해체하는 단계
8. 블로트카드의 완충제 패드 (930)를 제거하여 막을 자유롭게 하는 단계
9. 인큐베이터에 삽입하는 단계
10. 블로트 결과의 영상화를 위해 프로세서에 삽입하는 단계.
단계 5까지 제공된 카드의 스택을 도 25g에 개략적으로 개시한다. 이로부터, 상기 실시양태들과 마찬가지로, 카드의 스택이 분리 대역으로부터 블로트카드의 불로트 막 (920)으로 분리된 샘플의 정렬된 전달을 위한 전달 스택을 제공하지만, 차이점은 개시된 실시양태는 블로트카드 (900) 및 전달카드 (960)의 완충제 패드 (930) 및 (970) 각각이 전기전달 방법을 위한 요망되는 완충제 조건을 제공하는 반건조 전기전달을 위해 배열된다는 점이라는 것을 알 수 있다.
한 실시양태에 따르면, 전기블로팅 방법 동안에 취급을 더 간이화하기 위해 카드의 스택에 스냅 잠금 유형의 통합된 상호 정렬 구조가 제공된다.
상기 실시양태와 마찬가지로, 본 발명의 전기영동 카세트 및 막 유닛을 각각 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드라고 부를 수 있다.
한 실시양태에 따르면,
적어도 한 유형의 전기영동 겔 카드,
적어도 한 유형의 블로트 막 카드,
전기영동 겔 카드를 이용하여 전기영동 실험을 실시하는 전기영동 장치,
전기영동 겔 카드로부터 블로트 막 카드로 분리된 샘플의 전달을 위한 블로트 전달 유닛,
전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드에서 분리된 샘플의 영상을 기록하기 위한 영상화 장치
를 포함하고,
여기서, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드 각각이 전달 동안 상호 정렬을 위한 및 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드에서 분리된 샘플의 기계적으로 정렬된 영상을 제공하기 위해 영상화 장치의 상보적 정렬 구조에 대한 정렬을 위한 위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는, 전기영동 시스템이 제공된다.
상호 정렬을 제공하기 위해, 전기영동 시스템은 블로트 전달 유닛에서 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드를 상호 정렬된 위치에 유지하기 위한 상보적 정렬 구조를 갖는 전달 홀더를 포함할 수 있다. 이러한 전달 홀더 (500)의 한 개략적인 예를 도 16 및 17에 나타낸다. 위에 개시된 바와 같이, 전기영동 겔 카드는 겔 부재의 제1 면 및 제2 면 둘 모두를 노출시켜서 겔 부재가 강성 지지체에 부착된 동안에 분리된 샘플의 블로트 전달을 허용하는 제거가능한 부재를 갖는 하우징을 포함할 수 있다. 전기영동 겔 카드는 전기영동 작업흐름에서 적어도 한 단계를 실시하기 위해 제거되어야 하는 적어도 하나의 제거가능한 부재를 더 포함할 수 있고, 여기서 제거가능한 부재는 제거가능한 부재를 먼저 제거하지 않고서 상기 단계를 실시하는 것을 방지하기 위해 정렬 구조를 적어도 부분적으로 차단하도록 형성된다. 이것은 예를 들어 도 20a - 20h의 실시양태에 개략적으로 나타낸다. 전기영동 겔 카드에는 프리캐스트 겔이 제공될 수 있거나, 또는 임의로, 겔 카드는 사용자 자신이 겔 카드에 겔을 몰딩할 수 있도록 제공된다. 한 실시양태에 따르면, 도 25b에 개략적으로 개시된 바와 같이, 전기영동 겔 카드는 통합된 완충제 구획 및 임의로, 전극을 포함할 수 있다.
고유 배향을 제공하고 부적절한 위치지정을 피하기 위해, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조는 각 카드의 고유 배향을 형성하도록 형성된다. 한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조는 적어도 하나의 정렬 홀을 포함하고, 상보적 정렬 구조는 상보적 정렬 핀을 포함한다.
고유 식별을 제공하기 위해, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드 각각이 식별 코드를 포함할 수 있고, 식별 코드는 전달을 위해 상호 정렬될 때 동시에 판독되어 상기 카드들 사이의 고유 관련성을 확립하도록 배열될 수 있고, 이 시스템은 상기 관련성을 저장하도록 배열될 수 있다. 식별 코드는 예를 들어 바코드, 매트릭스 코드 등처럼 기계 판독가능한 코드일 수 있고, 사용자 및/또는 기기에 관련 정보를 제공한다. 한 실시양태에 따르면, 영상화 장치는 영상화를 위해 배열된 카드의 식별 코드를 판독하도록 배열될 수 있고, 한 실시양태에서, 영상화 장치는 영상화를 위해 배열된 카드의 등록된 식별 코드에 기초하여 영상화 프로토콜을 선택하도록 배열될 수 있다.
한 실시양태에 따르면, 전기영동 겔 카드는 블로트 전달에서 블로트 막 카드에 전달되도록 배열되는 식별 코드를 포함할 수 있다. 이 식별 코드는 전기영동 겔 카드로부터 블로트 막 카드로 전기화학적으로 전달될 수 있다.
한 실시양태에 따르면,
위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는 전기영동 겔 카드에서 전기영동에 의해 샘플을 분리하는 단계,
전기영동 겔 카드의 정렬 구조를 영상화기의 상보적 정렬 구조와 정렬되게 배열하여 상보적 정렬 구조를 갖는 영상화기를 이용해서 전기영동 겔 카드에서 분리된 샘플의 영상을 획득하는 단계,
전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드를 정렬 구조에 의해 상호 정렬되게 배열하여 겔 카드로부터 위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는 블로트 막 카드로 샘플 구성성분을 전달하는 단계,
블로트 전달 카드의 정렬 구조를 영상화기의 상보적 정렬 구조와 정렬되게 배열하여 블로트 전달 카드 상의 전달된 샘플 구성성분의 영상을 획득하는 단계, 및
상호 정렬에 기초하여 영상을 상관시키는 단계를 포함하는 영상을 분석하는 단계
를 포함하는 분리 및 식별 방법이 제공된다.
따라서, 겔 부재 및/또는 블로트 막에 지지 프레임을 제공하는 개념은 전기영동 및 면역블로팅에 기초하는 단백질 분석 시스템에 전범위의 이익을 제공한다.

Claims (28)

  1. 적어도 한 유형의 전기영동 겔 카드,
    적어도 한 유형의 블로트 막 카드,
    전기영동 겔 카드를 이용하여 전기영동 실험을 실시하는 전기영동 장치,
    분리된 샘플을 전기영동 겔 카드로부터 블로트 막 카드로 전달하기 위한 블로트 전달 유닛,
    전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드에서 분리된 샘플의 영상을 기록하기 위한 영상화 장치
    를 포함하고,
    여기서, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드 각각은, 전달 동안의 상호 정렬을 위한 및 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드에서 분리된 샘플의 기계적으로 정렬된 영상을 제공하기 위해 영상화 장치의 상보적 정렬 구조에 대한 정렬을 위한 위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는, 전기영동 시스템.
  2. 제1항에 있어서, 블로트 전달 유닛에서 상호 정렬되는 위치에 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드를 유지하기 위한 상보적 정렬 구조를 갖는 전달 홀더를 포함하는 전기영동 시스템.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 전기영동 겔 카드가, 겔 부재의 제1 면 및 제2 면 둘 모두를 노출시켜서 겔 부재가 강성 지지체에 부착된 동안에 분리된 샘플의 블로트 전달을 허용하는 제거가능한 부재를 갖는 하우징을 포함하는 전기영동 시스템.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 전기영동 겔 카드가, 전기영동 작업흐름에서 적어도 한 단계를 실시하기 위해서 제거되어야 하는 적어도 하나의 제거가능한 부재를 포함하고, 여기서 제거가능한 부재는 이 제거가능한 부재를 먼저 제거하지 않고서 상기 단계를 실시하는 것을 방지하기 위해 정렬 구조를 적어도 부분적으로 차단하도록 형성되는 전기영동 시스템.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조가 각 카드의 고유 배향을 형성하도록 형성된 전기영동 시스템.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조가 적어도 하나의 정렬 홀을 포함하고, 상보적 정렬 구조가 상보적 정렬 핀을 포함하는 전기영동 시스템.
  7. 제1항 내지 제6항 중 어느 한 항에 있어서, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조가, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드가 함께 상호 잠금되어 전달 정렬을 간이화하도록 하는 스냅 잠금 유형인 전기영동 시스템.
  8. 제7항에 있어서, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조와 함께 잠기는 상보적 스냅 잠금 유형 정렬 구조를 갖는 전달 카드를 포함하는 전기영동 시스템.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 한 항에 있어서, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드가 식별 코드를 포함하는 전기영동 시스템.
  10. 제9항에 있어서, 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 식별 코드가 전달을 위해 상호 정렬될 때 동시에 판독되어 상기 카드 사이의 고유 관련성을 확립하도록 배열되고, 시스템이 상기 관련성을 저장하도록 배열되는 전기영동 시스템.
  11. 제9항 또는 제10항에 있어서, 식별 코드가 기계 판독가능한 전기영동 시스템.
  12. 제11항에 있어서, 영상화 장치가 영상화를 위해 배열된 카드의 식별 코드를 판독하도록 배열된 전기영동 시스템.
  13. 제12항에 있어서, 영상화 장치가 영상화를 위해 배열된 카드의 등록된 식별 코드에 기초하여 영상화 프로토콜을 선택하도록 배열되는 전기영동 시스템.
  14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항에 있어서, 전기영동 겔 카드가 블로트 전달에서 블로트 막 카드에 전달되도록 배열된 식별 코드를 포함하는 전기영동 시스템.
  15. 제14항에 있어서, 식별 코드가 전기영동 겔 카드로부터 블로트 막 카드로 전기화학적으로 전달되도록 배열된 전기영동 시스템.
  16. 제1항 내지 제15항 중 어느 한 항에 있어서, 전기영동 장치 및 영상화 장치가 통합되고, 전기영동 실험을 실시하는 동안에 전기영동 겔 카드가 영상화될 수 있는 전기영동 시스템.
  17. 프리캐스트 겔을 포함하는 제1항 내지 제16항 중 어느 한 항에 따르는 전기영동 겔 카드.
  18. 제1항 내지 제17항 중 어느 한 항에 있어서, 전기영동 겔 카드가, 통합된 완충제 구획 및 임의로 전극을 포함하는 전기영동 시스템.
  19. 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항에 있어서, 블로트 막 카드가 블로트 막의 주변으로 연장되는 프레임 형태의 강성 지지체에 부착된 블로트 막으로 이루어진 전기영동 시스템.
  20. 제1항 내지 제19항 중 어느 한 항에 있어서, 블로트 막 카드의 강성 지지체가 플라스틱 필름으로 형성되는 전기영동 시스템.
  21. 제20항에 있어서, 블로트 막 카드의 강성 지지체가 둘 이상의 적층된 플라스틱 필름층으로 형성되고, 블로트 막의 하나 이상의 구역이 플라스틱 필름층들 사이에 적층되는 전기영동 시스템.
  22. 제21항에 있어서, 플라스틱층들 중 하나 이상이 한 면에 적용된 접착제층을 갖는 강성 중합체 필름으로 이루어지는 전기영동 시스템.
  23. 제22항에 있어서, 강성 중합체 필름이 PET로 이루어지고, 접착제층이 EVA층인 전기영동 시스템.
  24. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 따르는 전기영동 시스템과 함께 이용되도록 배열되는 전기영동 겔 카드.
  25. 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 따르는 전기영동 시스템과 함께 이용되도록 배열되는 블로트 막 카드.
  26. 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조에 상보적인 정렬 구조를 포함하는, 제1항 내지 제21항 중 어느 한 항에 따르는 전기영동 시스템의 영상화 장치.
  27. 블로트 전달 방법 동안에 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드를 상호 정렬되는 위치에 유지하기 위해 전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드의 정렬 구조에 상보적인 정렬 구조를 포함하는 제1항 내지 제23항 중 어느 한 항에 따르는 전기영동 시스템의 전달 홀더.
  28. 위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는 전기영동 겔 카드에서 전기영동에 의해 샘플을 분리하는 단계,
    상보적 정렬 구조를 갖는 영상화기를 이용해서 그리고 전기영동 겔 카드의 정렬 구조를 영상화기의 상보적 정렬 구조와 정렬되게 배열하여 전기영동 겔 카드에서 분리된 샘플의 영상을 획득하는 단계,
    전기영동 겔 카드 및 블로트 막 카드를 정렬 구조에 의해 상호 정렬되게 배열하여 겔 카드로부터 위치 기준을 정하는 정렬 구조가 제공된 강성 지지체를 포함하는 블로트 막 카드로 샘플 구성성분을 전달하는 단계,
    블로트 전달 카드의 정렬 구조를 영상화기의 상보적 정렬 구조와 정렬되게 배열하여 블로트 전달 카드 상의 전달된 샘플 구성성분의 영상을 획득하는 단계, 및
    상호 정렬에 기초하여 영상을 상관시키는 단계를 포함하는 영상을 분석하는 단계
    를 포함하는 분리 및 식별 방법.
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