KR20150018027A

KR20150018027A - 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품 및 그 제조방법

Info

Publication number: KR20150018027A
Application number: KR1020130094415A
Authority: KR
Inventors: 김영식
Original assignee: 천호식품 주식회사
Priority date: 2013-08-08
Filing date: 2013-08-08
Publication date: 2015-02-23

Abstract

본 발명은 다이어트 보조식품에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 복용시 포만감으로 식사량을 줄일 수 있으면서도 식사량 부족으로 인해 부족해 질 수 있는 영양소를 충분히 보충하고, 특히 포함하고 있는 효소에 의해 체내에서 소화와 흡수, 분해와 배출, 항염과 항균, 해독과 살균, 혈액정화 그리고 세포부활작용으로 인하여 비만, 노화, 암, 심혈관계 질환, 변비 등을 예방할 수 있는 기능성을 제공하는 다이어트 보조식품 및 그 제조방법을 제공코자 하는 것이다.
즉, 본 발명은 혼합곡물발효효소분말 70.7중량%와, 혼합유산균10중량%와, 레몬농축분말 6중량%와, 레몬농축액 5중량%와, 프락토올리고당 4.5중량%와, 화이바솔 2.3중량%와 자일로올리고당1.5중량%를 혼합하여 과립상태로 건조하여 제공한 것이다.

Description

곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품 및 그 제조방법{Grain fermentation enzyme powder with main ingredients Dite supplement food and its the manufacturing method}

본 발명은 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품 및 그 제조방법에 관한 것으로서, 보다 구체적으로는 복용시 포만감으로 식사량을 줄일 수 있으면서도 식사량 부족으로 인해 부족해 질 수 있는 영양소를 충분히 보충하고, 특히 포함하고 있는 효소에 의해 체내에서 소화와 흡수, 분해와 배출, 항염과 항균, 해독과 살균, 혈액정화 그리고 세포부활작용으로 인하여 비만, 노화, 암, 심혈관계 질환, 변비 등을 예방할 수 있는 기능성을 제공하는 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품 및 그 제조방법을 제공코자 하는 것이다.

비만은 대사증후군의 중요한 인자로서 여러 대사 장애를 유발하여 심혈관계 및 뇌혈관계 질환 발생을 일으키는 것으로 알려져 있다.

세계보건기구(WHO)는 2004년도 세계 성인인구의 약 16억 명이 과체중(BMI≥≥25 kg/m2)이며 그 중 4억 명 정도는 비만(BMI≥≥30 kg/m²)으로, 2015년에는 약 23억의 인구가 과체중이고 7억 명 이상이 비만일 것으로 예측하고 있다.

우리나라도 1998년 20세 이상 성인의26.3%(남 25.0%, 여 27.0%)가 비만(BMI≥≥25 kg/m²)이던 것이 2005년에는 31.7%(남 35.1%, 여 28.0%)에 이른 것으로 보고되고 있다.

이와 같이 전 세계적으로 비만 유병률이 증가함에 따라 내당능 장애 및 당뇨병 유병률도 급격히 증가하는 양상을 보이고 있으며 우리나라도 예외는 아니다.

1970년대에는 총 열량의7.3%에 불과하던 지방 섭취량이 1985년에는 13.7%, 1995년에는 18.8%로 급증하였고, 2005년에는25%에 이르렀으며, 지방섭취 종류별로 볼 때 식물성 지방의 섭취 비율은 감소된 반면 동물성 지방의 섭취비율은 현저하게 증가하고 있다.

우리나라의 경우에도 2008년도 국민건강영양조사에 따르면 지방급원 에너지 섭취율이 1969년(7.2%)에 비해 1998년(40.1%)에 크게 증가한 후 최근 10년간 유지되는 추세이다.

이에 포만감을 주는 동시에 칼로리가 낮은 식품을 섭취하려는 욕구가 높아져서 섬유소를 함유한 저칼로리 식품이나 건강기능식품 등에 많은 관심을 갖게 되었으며, 다양한 다이어트 보조식품이 제공되고 있는 실정이다.

김성미, 서권일, 박경욱, 정영기, 조영수, 김명수, 김은정, 이미경. 2009. 대두박 사포닌 보충이 식이성 유도 비만마우스의 체중과 내당능에 미치는 영향. Korean. Soc Food Sci Nutr. 38(1), 39-46. 양은주, 조영숙, 최명숙, 우명남, 김명주, 손미예, 이미경. 2009. 보리순이 고지방을 급여한 마우스의 지질함량과 간조직의 지질대사 관련 효소활성에 미치는 영향. Korean J. Nutr. 42(1), 14-22. 이지선, 체중조절용 식품의 이해, 대한비만학회 제 21회 연수강좌. 정운주, 이정순, 복성해, 최명숙. 2011. 감잎, 메밀잎 및 구기자잎 추출물의 식이보충이 흰쥐의 체지방 감량과 지질대사 조절에 미치는 효과. J. Korean Soc Food Sci Nutr. 40(9), 1215-1226. 정해랑, 강재헌, 2004. 체중 관련 기능성 시험. 건강기능식품가이드라인. 식품의약품안전청. 조영심, 김순임, 한영실. 2008. 함초 추출물의 장 기능 개선과 변비 해소 효과. Korean J. Food Sci. Technol. 40(3). 326-331. Avram AS, Avram MM, James WD.2005. Subcutaneous fat in normal and diseased states: 2. Anatomy and physiology of white and brown adipose tissue. J. am Acad Dermatol 53: 671-683. Campfied LA, Smith F, Guisez Y, Devos R, Burn P. 1995. Recombunabt mouse OB protein: evidence for a peripheral signal linking adiposity and central neural networks. Science 269: 546-549. Do-young Park, Young-Tae Ahn, Se-Hoon, Park, Chul-Sung Huh, Sae-Rom Yoo, Rina Yu, Mi-kyung Sung, Robin A. McGregor, Myung-Sook Choi. 2013. Supplementation of Lactobacillus curvatus HY7601 and Lactobacillus plantarum KY1032 in Diet-induced obese mice is associated with gut microbial changes and reduction in obesity. Probiotic alters the gut microbiota. 8(3), e59470. Juhi aggarwal, Gauray swami, Mayur kumar. 2013. Probiotics and their effects on metabolic diseases: an update. Journal of Clinical and Diagnostic research. 7(1), 173-177. Kang JO, Kim KS.1995. The effect of dry edible leaves feeding on serum lipids of hypercholesterolemic rats. J. Korean Soc Food Nutr. 24: 502-509. Kim SH, Lee JM, Kim HY, Kim MK. 1993. The composition of health status with age by fat intake pattern. KSF report. Lee, D. H, Lee, J. K., Lee, C., Hwang, Y. Y., Cha, S. H., Choi, Y., A study on the health implications associated with obese children, J Ped Assoc 34(4), 1992, pp.445-451. McKenny, J. M. Lovastatin, A new cholesterol lowering agent, Clin Pharm, 7, 1988, pp.21-36. Zhang Y, Proenca R, Maffei M, Barone M, Leopold L, Friedmnan JM. 1994. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue. Nature 372: 425-432.

이에 본 발명자는 상기한 종래 다이어트 보조식품들의 제반 문제점을 해결코자 본 발명을 연구 개발한 것으로서, 본 발명에서는 복용시 포만감으로 식사량을 줄일 수 있으면서도 식사량 부족으로 인해 부족해 질 수 있는 영양소를 충분히 보충하고, 특히 포함하고 있는 효소에 의해 체내에서 소화와 흡수, 분해와 배출, 항염과 항균, 해독과 살균, 혈액정화 그리고 세포부활작용으로 인하여 비만, 노화, 암, 심혈관계 질환, 변비 등을 예방할 수 있는 기능성을 제공하는 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품 및 그 제조방법을 제공함에 기술적 과제를 두고 본 발명을 완성한 것이다.

과제 해결수단으로 본 발명에서는 혼합곡물발효효소분말 70.7중량%와, 혼합유산균10중량%와, 레몬농축분말 6중량%와, 레몬농축액 5중량%와, 프락토올리고당 4.5중량%와, 화이바솔 2.3중량%와 자일로올리고당1.5중량%를 혼합하여 과립상태로 건조하여 제공함을 특징으로 한다.

또한 상기 혼합곡물발효효소분말은 현미발효효소30중량%, 율무발효효소 20중량%, 보리발효효소 20중량%, 찹쌀발효효소 20중량%, 대두발효효소 10중량%를 혼합한 것을 특징으로 한다.

또한 상기 혼합유산균은 락토바실러스 아시도필루스(lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 스트렙토코쿠스 더모피루스(Streptococcus thermophilus)를 혼합한 것을 특징으로 한다.

본 발명에서 제공하는 다이어트 보조식품을 먹을 경우 포만감으로 식사량을 줄일 수 있다.

또 식사량 부족으로 인해 부족해 질 수 있는 영양소를 충분히 보충할 수 있는 것이다.

그리고 본 발명을 장기적으로 먹을 경우 혼합곡물발효효소에 의해 체내에서 소화와 흡수, 분해와 배출, 항염과 항균, 해독과 살균, 혈액정화 그리고 세포부활작용을 하게 되는 바, 비만, 노화, 암, 심혈관계 질환, 변비 등을 예방하는 효과를 기대할 수 있다.

도 1은 본 발명에서 제공하는 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품 제조공정을 보인 블록도
도 2는 본 발명 실험례에서 본 발명의 시료 및 대조군의 정상 및 비만식이 섭취에 따른 래트(rat)의 몸무게 변화에 대한 그래프
도 3, 도 4는 본 발명의 시료 및 고지방식이를 급여한 실험용 쥐(SD-rat)의 체중 및 체중증가량을 보인 그래프
도 5는 본 발명 실험례에서 각군당 식이섭취량을 관찰한 결과를 보인 그래프
도 6은 본 발명 실험례에서 각군당 물 섭취량을 관찰한 결과를 보인 그래프
도 7은 본 발명 실험례에서 각군당 혈중 렙틴(Leptin) 농도를 관찰한 결과를 보인 그래프
도 8은 본 발명 실험례에서 각군별 크기를 보인 사진
도 9는 본 발명 실험례에서 해부 후 적출한 조직 사진

이하 본 발명에서 제공하는 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품 및 그 제조방법의 실시례를 첨부 도면에 의거하여 설명한다.

본 발명에서 제공하는 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품은 주성분으로 혼합곡물발효효소분말, 혼합유산균, 레몬농축분말, 레몬농축액, 프락토올리고당, 화이바솔, 자일로올리고당을 혼합 구성한 것이다.

바람직하기로는 혼합곡물발효효소분말 70.7중량%와, 혼합유산균 10중량%와, 레몬농축분말 6중량%와, 레몬농축액 5중량%와, 프락토올리고당 4.5중량%와, 화이바솔 2.3중량%와 자일로올리고당 1.5중량%를 혼합하여 과립상태로 건조하여 제공토록 한다.

상기 다양한 곡물을 혼합하여 제공할 수 있으며, 본 발명에서는 혼합곡물발효효소분말은 현미발효효소 30중량%, 율무발효효소 20중량%, 보리발효효소 20중량%, 찹쌀발효효소 20중량%, 대두발효효소 10중량%를 혼합한 것을 사용토록 한다.

1. 혼합곡물발효효소분말

한국인에게 친숙한 5가지 곡물인 현미, 율무, 보리, 찹쌀, 대두를 국산 농산물로만 발효시켜 만들었으며, 특히 현미와 찹쌀은 무농약 친환경 농산물을 이용하였다.

효소는 생명을 촉매하고 유지시키는 물질이다. 효소 없이는 영양분을 만들 수 없으며 뼈와 살, 피와 근육, 머리카락과 손톱을 만드는 것도 효소이다. 우리가 음식물을 삼키면 뱃속에서 절로 소화가 되어 우리의 피와 살을 만드는 것도 효소이다.

효소는 체내에서 일어나는 여러 가지 생화학 반응을 원활하게 수행하는 촉매작용을 지닌 '특수한 단백질'의 총칭이며 '생체촉매'라고도 부른다. 효소는 여러 종류 아미노산의 합성으로 구성된 단백질 구조체로서, 생물체 속에서 일어나는 각종 화학 반응을 촉매하는 살아있는 존재이다.

효소의 역할은 사람들이 방부제와 살충제, 항생제는 물론 조미료, 발색제, 착색제 등의 화학첨가물과 각종 중금속이 많이 함유된 음식을 많이 먹으면서 효소가 부족하게 되었다. 이 물질들을 분해해서 해독하고 배출하는 것이 효소의 임무이다.

육류를 많이 섭취하면 이것을 분해하기 위한 효소의 소모가 많아져 채소와 과일 등의 체외효소를 많이 섭취한다 해도 불로 조리한 음식과 가공식품, 정크식품, 육류 등을 많이 섭취하면서 우리 몸 속에 존재하는 효소(체내효소)는 더욱 고갈된다.

체내의 효소는 알맞은 체온과 pH(체액의 산도) 그리고 적당한 보효소(미네랄과 비타민)를 갖추어야 활발한 작용을 하게 된다. 이 조건이 갖추어지지 않으면 효소는 감소되거나 그 활성이 저하되어 각 체내 장기의 기능이 약화되므로 건강 상태가 무너지고 몸의 밸런스가 깨지는 상태로 된다. 따라서 가장 합리적인 방법은 체내의 효소와 똑같은 효소를 체외로부터 보충하여 깨어진 밸런스를 바로 잡는 것이다.

2. 혼합유산균

혼합유산균은 락토바실러스 아시도필루스(lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 스트렙토코쿠스 더모피루스(Streptococcus thermophilus)를 혼합하여 제조한 것으로, 본 발명에서는 이들이 혼합 구성된 5종혼합유산균(제품명, 원료명:프로바이오틱스) (주)메디오젠에서 생산 판매하고 있는 것을 구매하여 사용하였다.

-락토바실러스 아시도필루스(lactobacillus acidophilus)은 김치 발효 유산균으로 리스테이라 등 각종 유해세균을 억제하고 생식 발효에 사용된다. 프로바이오틱의 일종의 유산간균으로 내산성이며 정장 작용, 항암효과, 혈중 콜레스테롤 저하, 비타민 B군의 합성능력 등이 있다.

-락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)은 헬리코박터 파이로리균(H.Pylori) 및 유해세균 증식 억제와 항산화 작용 및 프리라디칼(free radical) 물질 생성억제, 알콜요인 간경변 개선, 질염치료, 인터페론 생성유도 등의 기능성이 있다. 락토바실러스속의 젖산균으로 김치의 발효 후기에 작용하는 균이다.

-비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum)는 비타민 B군, 염산, 바이오틴 생성, 간 기능 개선, 방사선 장애의 개선, 지방의 과산화 억제의 효과가 있다.

락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei)는 항암전이 효과, 면역 보조제 활성, 항아플라톡신 작용, 항당뇨, 급성 설사억제의 기능성이 있다. 락토바실러스(Lactobacillus)속의 혐기성 미생물로서 주로 치즈 생산에 이용된다.

-스트렙토코쿠스 더모피루스(Streptococcus thermophilus)은 유산균(Streptococcus thermophilus)으로 탈지분유를 발효하여 여과한 것이다.

상기 5종혼합유산균(프로바이오틱스)은 섭취되어 장에 도달하였을 때에 장내 환경에 유익한 작용을 하는 균주를 말한다. 즉, 장에 도달하여 장 점막에서 생육할 수 있게 된 5종혼합유산균은 젖산을 생성하여 장내 환경을 산성으로 만든다. 산성 환경에서 견디지 못하는 유해균들은 그 수가 감소하게 되고 산성에서 생육이 잘 되는 유익균들은 더욱 증식하게 되어 장내 환경을 건강하게 만들어 주게 되는 것이다. 모유를 먹는 건강한 아기의 경우, 분변 균 중 90% 이상이 비피도박테리움(Bifidobacterium)으로 이루어져 있으나 나이가 들면서 점차 비피도박테리움은 감소하고 장내 유해균은 증가하게 된다. 이러한 정상적인 노화 과정에서 장내 균총의 분포를 건강한 상태로 유지하도록 도와주는 것이 프로바이오틱스의 기능이다.

3. 레몬농축분말 및 레몬농축액

레몬 과즙은 시트르산이 많아 산성을 띠고, 강한 신맛이 나며, pH가 2에서 3 정도이다.

육류와 생선류의 염기성인 비린내를 제거하고 맛을 살리기 위해 사용하는 경우가 많다. 1747년에 괴혈병으로 고통받는 어부에 대한 제임스린드의 실험을 통해, 어부들의 식단에 레몬 주스를 추가하여 비타민 C를 보충하게 되었다.

-레몬의 효능

① 해독작용 및 체중감량

레몬은 체내 노페물 배출을 촉진하며 신진대사와 지방 분해가 활성화된다.

② 피로회복 - 구연산과 비타민C가 풍부하다.

③ 피부미용 - 레몬은 비타민C의 함량이 높아 피부 미용에 탁월한 효과가 있다.

④ 레몬의 신맛을 내는 리모넨과 시트르산, 레몬산 등이 대장의 숙변을 녹여 배출하고 우리 몸의 중요한 장기의 혈관에 작용하여 혈전과 같은 노폐물을 녹여서 배출해주는 역할을 한다.

4. 프락토올리고당

프락토올리고당은 설탕을 원료로 효소 분해하여 만들어진 올리고당이다. 설탕은 분자가 2개인 이당류, 올리고당은 3~7개 분자가 뭉쳐진 다당류에 속한다. 입자가 작은 단당류일수록 소화와 섭취가 빠르다.

프락토올리고당은 칼로리가 낮다. 100g을 기준으로 할 때 프락토올리고당은 239kcal, 이소말토올리고당은 280kcal이다. 이소말토올리고당도 설탕과 비교했을 때 칼로리가 절반 정도에 지나지 않지만, 프락토올리고당이 그보다 낮다.

또한 식이섬유 함유량이 높아서 풍부한 식이섬유가 장 건강에 도움을 준다. 몸에 좋은 비피더스균 증식효과가 있어 장내 부패를 억제하여 장내환경을 청결하게 함으로써 설사, 변비, 대장암 등 각종질병 및 노화를 예방해주며 체내에서 수용성 식이섬유와 같은 작용을 하기 때문에 장 건강에 좋다.

5. 화이바솔

화이바솔은 옥수수전분을 가수분해 후 정제하여 분말화시킨 고순도의 난소화성말토덱스트린이다. 난소화성말토덱스트린은 수용성 식이섬유의 일종으로 소화되지 않는 물질인 식이섬유가 장내에 많아지면 배변량도 많아지고 수분을 많이 함유하게 되어 장이 부드러워져서 원활한 배변에 도움을 줄 수 있다.

또한 소화되지 않는 식이섬유는 소장에서 음식물의 통과시간 등을 빠르게 하고 소화관에서 포도당의 흡수를 지연시켜 에너지원으로 작용하지 않으면서 대장에 이르게 하여 식후혈당상승억제 효과가 있으며 콜레스테롤의 합성을 억제하거나 체지방축적 감소 등에도 효과적이다. 다이어트를 하는 여성들의 경우 음식물 섭취를 극도로 제한하므로 변비가 있는 경우가 흔하므로 식이섬유의 섭취는 필수적이다.

6. 자일로올리고당

천연 식물 섬유(옥수수심)를 효소분해하여 제조되며, 비피더스균에 활성을 갖는 올리고당이다. 장기간 보관하여도 잘 분해되지 않으며, 제조·살균 공정에서 잘 분해되지 않는다.

또한 자일로올리고당은 소량을 섭취하여도 설사 또는 변비 예방에 도움을 주는 올리고당이다. 자일로올리고당의 일일 0.7g 정도의 소량을 섭취하여도 배변활동에 도움을 줄 수 있는데, 타 올리고당의 일일 유효 섭취량(3-15g)과 비교 시 현저히 낮다.

자일로올리고당은 인체 효소에 의해 거의 소화되지 않는다. 체내에 자일로올리고당을 분해하는 효소가 없으므로 자일로올리고당은 흡수되지 않고 직접 대장으로 흘러들어가 비피더스균과 유익균만의 증식을 촉진하며, 특히 비피더스균 증식량이 가장 우수하다.

-자일로올리고당의 효능

① 배변 활동을 원활 하게한다.

비피더스균은 장의 유동을 자극하여 변의 유동성을 증가시킴으로 배변활동을 원활하게 한다.

② 독성이 있는 발효 부산물 및 유해 효소의 생성을 감소시킨다.

③ 칼슘 흡수율을 촉진시킨다.

자일로 올리고당은 칼슘과 동시에 섭취할 때, 칼슘 흡수 촉진 작용을 한다.

④ 비타민을 합성하는 유산균의 성장을 촉진한다.

자일로올리고당에 의해 활성화 된 비피더스균은 비타민 B1, B2, B6, B12, K, 니코틴산 등을 생성한다.

이하에서 본 발명의 제조방법을 설명한다.

본 발명은 1)원료정량, 2)원료혼합, 3)과립, 4)건조, 5)정립, 6)충진 및 포장의 순서에 의해 이루어진다.

1)원료정량

원료정량은 준비된 혼합곡물발효효소분말, 혼합유산균, 레몬농축분말, 레몬농축액, 프락토올리고당, 화이바솔, 자일로올리고당을 정량(定量)한다.

예로 혼합곡물발효효소분말 707g, 혼합유산균100g, 레몬농축분말 60g, 레몬농축액 50g, 프락토올리고당 45g, 화이바솔 23g, 자일로올리고당15g을 준비한다.

2)원료혼합

원료혼합은 혼합기에 의해 이루어지며, 혼합곡물발효효소분말, 혼합유산균, 프락토올리고당, 화이바솔, 자일로올리고당, 레몬농축분말 및 레몬농축액을 순차적으로 투입토록 하여 8~10분 믹싱한다.

상기 투입순서를 임의로 달라질 수 있다.

3)과립

상기와 같이 혼합기를 이용하여 혼합한 것을 과립기에 투입하여 과립한다. 이때 과립 정도는 1mm 지름으로 길이 10~20㎝가 되도록 한다.

4)건조

상기와 같이 과립한 것을 65℃에서 2시간이상 건조토록 한다.

5)정립

과립하여 건조한 것을 정립기에 투입하여 정립하여 다이어트 보조식품 반제품을 제조한다. 이때 정립된 입자는 0.4~1㎝의 길이로 구성된다.

6)충진 및 포장

정립된 반제품을 6g 단위로 파우치 충진하고, 이들을 모아 포장한다.

실험례

1. 연구재료 및 방법

본 발명에서 제공하는 다이어트 보조식품을 이용하여 비만관련 유효성평가를 위해 실험을 실시하였다.

실험은 정상군, 비만과 제품섭취가 동시에 이루어지는 군, 비만이 유도된 후 일반식이와 함께 본 발명 다이어트 보조식품의 제품섭취를 시키는 군으로 크게 3가지 형태로 이루어졌으며, 처리 및 기간은 아래 표 1과 같다.

No.	시험군	분류	처리	비고
1	Normal	Normal	AIN-76A diet (일반식이)	1주 순화, 6주 일반식이 섭취
2	Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)
3	Normal+(10.8x10⁸ cfu/ day)
4	Control-1	Control-1	40% Beef tallow +AIN 76A diet	1주 순화, 6주 비만식이 + 천호시료 6주 섭취 (함께)
5	Control-1+(5.4x10⁸ cfu/day)
6	Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)
7	Control-2	Control-2	40% Beef tallow +AIN 76A diet(6주간), AIN76A diet (일반식이 2주간)	1주 순화, 6주 비만식이+2주 일반식이 및 천호시료 2주 섭취
8	Control-2+(5.4x10⁸cfu/day)
9	Control-2+(10.8x10⁸cfu/ day)
3개 분류, 총 9군 실험

1) 시험물질 및 부형제

(1) 시험물질

①명 칭: 다이어트 시료

②입수일: 2013년 4월

③보관조건: 냉장보관

④공급처: 천호식품㈜

⑤투여시 상태: 환

(2)부형제

①명 칭: 주사용 멸균 증류수

②공급처: 중외제약㈜

2) 재료 및 방법

(1)종 및 계통: 특정병원체부재(SPF) 랫드, SD(Sprague-Dawley) rat

(2)공급원: 효창사이언스㈜

(3)시험계의 선택이유

독성시험에 적당한 실험동물로서 독성시험에 널리 사용되고 있으며, 본 계통의 랫드는 풍부한 시험기초 자료가 축척 되어 있어서 시험결과를 해석하는데 용이함.

(4)주령 및 체중범위

① 입수시 주령: 4주령

②입수시 체중: 90~110g

③투여 개시 시 주령: 1주 순화 후 약 5주령

(5)검역 및 순화

동물을 입수할 때에 외관을 육안적으로 검사한 후 7일간 동물실에서 순화시키면서 일반증상을 관찰하여 건강한 동물만을 시험에 사용하였다.

(6) AIN-76A 식이 및 비만(Beef tallow) 식이 조성(g/100g diet)

아래 표 2 및 본 실험의 식이를 사용한 미국 Dyets 의 비만식이 및 식이조성표를 나타내었으며, 도 2는 본 발명 및 대조군의 정상 및 비만식이 섭취에 따른 래트(rat)의 몸무게 변화에 대한 그래프를 도시한 것이다. 몸무게는 rat이 10주 전후로 비만식이와 일반식이 군의 차이가 극명하게 나타나는 것으로 보아, 본 실험의 스케쥴도 이에 따라 디자인 하였다.

	비만식이 ( 40% Beef tallow modified AIN-76A purified rodent diet)	일반식이 (AIN-76A rodent purified diet)
Casein, 80mesh	200	200
Corn starch	150	150
Beef tallow	400	-
Sucrose	95	500
Cholesetrol	50	-
Cellulose	50	50
¹Mineral mix	35	35
²Vitamin mix	10	10
Cholic acid	5	-
Corn oil	-	50
DL-methionine	3	3
Choline bitartrare	2	2

¹AIN-76 Mineral mix (g/kg): CaHPO₄ 500, NaCl 74, K citrate monohydrate 220, K₂SO₄ 52, MgO₃ Mn carbohydrate 3.5, Fe citrate 6.0, Zn carbonate 1.6, Cu carbonate 0.3, KIO₃ 0.01, Na₂SeO₄·H₂O 0.01, CrK(SO₄)·12H₂O 0.55, Sucrose 118.

² AIN-76 Vitamin mix(g/kg): thiamin·HCl 0.6, riboflavin 0.6, phydoxine·HCl 0.7, nicotinic acid 3, D-calcium pantothenate 1.6, folic acid 0.2, D-biotin 0.02, cyanocobalamin 0.001, retinyl palmitate 0.8, DL-a-tocopheryl acetate20 cholecalciferol 0.00025, menaquinone 0.005.

3) 사육환경

(1)환경조건

본 시험은 온도 23±3℃, 상대습도 50±10%, 조명12시간(08:00점등~20:00소등) 로 설정된 아이케이사이언스㈜ 동물사육실(식품의약품안전처 등록 412호)에서 실시하였다.

(2)사육환경 모니터링

시험기간 중 동물실의 온, 습도는 자동온습도 측정기에 의하여 매시간 마다 측정되었으며, 환기횟수 및 조도 등의 환경조건은 정기적으로 측정되었다. 동물실의 환경측정결과, 시험에 영향을 미칠 것으로 사료되는 변동사항은 없었다. 실험실 온도는23±1℃, 습도는 40~60%로 유지되었다.

(3)사육상자, 사육밀도 및 사육상자의 식별

사육상자는 스테인레스제 망사육 상자(280W x 500L x 200H mm)로 순화 검역기간에는 2마리, 투여 관찰기간 동안에도 2마리씩 수용하였으며, 시험기간 중 사육상자는 시험번호 및 동물번호를 기입한 케이지 카드를 붙여 식별하였다.

(4)사료 및 물

사료는 순화기간에는 실험동물용 고형사료(효창사이언스㈜))를 멸균하여 자유 섭취시켰으며, 실험기간에는 일반 식이(AIN-76A DIET) 및 비만식이(40% Beef tallow) 를 ㈜중앙실험동물에서 구매, 섭취시켰다. 물은 소독한 상수도수를 자유 섭취시켰다.

4)투여량 및 실험동물 군 구성

(1)투여기간: 7주, 9주(실험 별 투여기간이 상이함: 표 1 Experimental design 참조)

(2)투여량 설정

제품의 투여량을 ㈜한국분석기술연구원의 검사성적서(표 3)를 바탕으로 유산균 수 및 하루 섭취량을 근거로 하여 디자인하였다. 투여량은 표 1과 같이, 정상군 및 정상군에 제품을 투여한 군과 대조군의 종류를 비만을 유도시키며 제품을 투여하는 시험군(4,5,6)과 비만이 유도된 후 일반식이와 함께 제품을 2주간 투여하는 시험군(7,8,9)로 나누었다. 멸균증류수를 투여하는 대조군을 두어 시험을 실시하였다.

(3)실험동물 군 구성, 투여액량 및 투여량

실험동물의 군 구성 및 투여액량, 투여량은 본 발명에서 제공하는 다이어트 보조식품을 ㈜한국분석기술연구원의 검사성적서(표 3)를 참고로 하였다.

시험항목	기준규격	결과	영양소기준치(%)
열량(kcal/100g)	-	379.2	-
탄수화물(g/100g)	-	91.8	28
조단백질(g/100g)	-	1.2	2
조지방(g/100g)	-	0.8	2
나트륨(mg/100g)	-	15.6	1
유산균수	-	90,000,000 CFU/g	-

㈜한국분석기술연구원

5) 시험물질의 조제 및 투여

(1)투여액의 조제법, 함량 및 균질성 시험

시험물질을 시험물질 투여군의 투여량에 맞게 칭량하여 주사용 멸균 증류수에 용해하여 조제하였다.

조제 시점은 2주에 한번 시료를 5.4x10⁸ cfu/day, 10.8x10⁸ cfu/day로 조제하여 동물에 투여하였다.

(2)투여부위 및 투여방법

경구투여용 존데를 장착한 주사기를 이용하여 위 내에 강제 경구투여 하였다.

(3)투여경로 선택이유

사람에 대한 예상적용경로로 경구투여를 선택하였다.

(4)투여횟수 및 투여기간

각 개체 별로 각각 42일(6주), 56일(8주) 투여하였다(표 1 참조).

(5)투여액량 계산

투여당일 체중을 기준으로 하여 투여량에 맞게 투여액량을 계산하였다.

6) 관찰 및 검사항목

(1)일반증상 및 사망동물의 관찰

투여당일에는 투여 후 1시간부터 6시간까지 매 시간마다, 투여 익일부터 해부일까지 매일 1회씩 일반증상의 변화, 독성증상 및 사망동물의 유무를 관찰하였다.

(2)체중측정

시험에 사용된 모든 동물에 대하여 투여개시 직전(1일)과 투여 후 3일마다 측정하였다.

(3)부검소견

투여 후 70일째 모든 동물을 CO₂ 가스 마취 하에서 개복한 후에 복부대동맥과 복부대정맥을 절단하여 방혈 치사 시킨 후, 육안적으로 모든 내부 장기의 이상유무를 관찰하였다.

(4)Food consumption, Water intake, FER

식이섭취량은 하루에 한번 식이 잔량을 측정하여 식이 제공량으로부터 뺀 값을 기록하였으며, 물 양도 이와 같은 방법을 사용하였다.

식이효율(FER)은 아래의 식을 사용하여 도출하였다.

*FER=Body weight gain/Food consumption

(5)혈청 생화학적 분석

생화학혈청분석기(COBAS, Rochu)로 AST, ALT, Triglyceride, Total cholesterol, Total protein, BUN, HDL-cholesterol, LDL-cholesterol의 농도를 측정하였다.

Hemoglobin, Albumin 및 Leptin은 (재)네오딘의학연구소에 의뢰하여 농도를 측정한 값을 사용하였다.

(6) 분변 함량 체크

피딩 시작 후 3주 6주, 9주 째 되는 날 각 군별로 분변을 받아 분변 함량을 체크하였다.

(7) 통계학적 방법

통계적 검정은SPSS통계 프로그램을 이용하여 수행하였으며, p<0.05 이하일 경우 통계적으로 유의한 것으로 검정하였다. 각 항목에 대한 유의한 차이를 나타내는지의 비교분석은 student's t-test one-way ANOVA(Turkey's multiple comparison test)를 이용하여 통계적 유의성을 검증하였다.

7) 본 실험은 아이케이사이언스㈜ 동물실험윤리위원회 (Institutional Animal Care and Use Committee, IACUC)의 승인 하에 동 기관의 표준작업지침서(Standard Operation Procedures, SOP)에 따라 수행되었다.

8)아이케이사이언스㈜는 실험동물에 관한 법률 제 8조 1항 및 같은 법 시행규칙 제 4조에 따라 식품의약품안전처 제 412호 동물실험시설 지정업소이다.

2. 실험결과 및 고찰

1) 사망동물

사망동물은 시험기간 동안 모든 시험군에서 관찰되지 않았으며, 특별한 임상학적 소견은 관찰되지 않았다(표 4).

	Group	Final mortality	Clinical signs *^)**	No. of animals with abdominal gross findings
1	Normal	0/6	-	0/6
2	Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	0/6	-	0/6
3	Normal+(10.8x10⁸cfu/ day)	0/6	-	0/6
4	Control-1	0/6	-	0/6
5	Control-1+(5.4x10⁸ cfu/day)	0/6	-	0/6
6	Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	0/6	-	0/6
7	Control-2	0/6	-	0/6
8	Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	0/6	-	0/6
9	Control-2+(10.8x10⁸ cfu/ day)	0/6	-	0/6

^*) - : no clinical signs

2) 체중 변화

본 발명의 시료 및 고지방식이를 급여한 SD-rat의 체중 및 체중증가량에 미치는 영향을 각각 표 5 내지 7 및 도 3, 4에 나타내었다. 체중변화는 주 2회씩 측정하였다. 도 3,4에서 살펴볼 수 있듯 전체적으로 Control-1군 및 Control-2군의 체중은 정상식이를 섭취한 Normal군보다 체중이 빨리 증가하였으며, 본 발명 시료를 섭취한 군에서는 체중이 증가가 더디게 증가하는 경향을 보였다.

체중증가량(표 5내지 7)의 경우, Control-1군 및 Control-2의 Beef-tallow를 섭취한 고지방 대조군은 정상군의 체중에 비하여 약 1.24~1.27배 높은 체중증가를 보였다.

Normal 분류군은 6주간 10.8x10⁸cfu/day 섭취한 군에서 체중증가량이 정상군에 비해 14g정도 체중감소가 있었으며, Control-1 분류군의 경우 천호시료를 투여한 군에서는 약 40g 체중이 감소하는 것을 확인할 수 있었다.

Control-2 분류군의 경우, 6주간 비만식이투여로 인한 체중증가가 이루어지다 2주간의 일반식이 및 시료투여로 체중변화가 주춤한 것을 확인할 수 있었으며(도 3, 4), 체중증가량의 경우, Control-2군에 비하여 시료투여군에서 약 40~44g의 체중이 감소되는 것을 확인할 수 있었다(표 5 내지 7).

Normal분류군

Group	Initial body weight	Final body weight	Body weight gain
Group	(g)
Normal	155.19±6.10^ab	358.20±5.72^a	203.01
Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	157.32±8.41^a	358.63±11.54^ab	201.35
Normal+(10.8x10⁸ cfu/ day)	159.83±2.15^b	349.38±19.96^b	189.55

Control-1분류군

Group	Initial body weight	Final body weight	Body weight gain
Group	(g)
Control-1	155.19±5.07^c	406.80±19.26^c	251.61
Control-1+(5.4x10⁸ cfu/day)	157.32±5.36^c	372.50±5.70^b	215.18
Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	159.83±9.74^bc	373.20±28.40^bc	213.37

Control-2 분류군

Group	Initial body weight	Final body weight	Body weight gain
Group	(g)
Normal(2)*	155.19±6.10^b	370.95±28.15^a	215.76
Control-2	151.93±10.16^c	411.21±22.04^b	259.28
Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	152.42±3.49^a	370.82±17.22^c	218.40
Control-2+(10.8x10⁸ cfu/ day)	141.32±21.60^c	356.21±25.89^bc	214.89

Normal(2)*: 총 9주간 AIN-76A diet를 섭취한 정상군

Values sharing the same superscript letter are not significantly different each other(p<0.05) by Duncan's multiple range test.

3) 식이, 물 섭취량 및 식이효율

①식이효율 (FER)

각군당 식이섭취량을 관찰한 결과 표 8과 같다. 고지방식이 섭취군 및 일반식이 섭취군 모두 기간에 따른 체중이 증가하였다. 특히 식이효율에 있어서 고지방식이 섭취군이 일반식이군에 비해 유의적으로 높게 나타났다.

*FER=Body weight gain/Food consumption

	Group	Body weight gain	Food consumption	* FER
	Group	(g)	(g)	* FER
1	Normal	207.26±0.38^a	22.58±5.22^c	9.18
2	Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	201.35±3.13^ab	23.31±5.12^b	8.64
3	Normal+(10.8x10⁸ cfu/ day)	189.55±7.81^b	23.23±5.17^bc	8.16
4	Control-1	251.61±4.19^c	23.06±4.75^a	10.91
5	Control-1+(5.4x10⁸ cfu/day)	215.18±0.33^bc	21.92±3.93^c	9.82
6	Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	213.37±8.66^bc	23.05±5.04^bc	9.26
7	Control-2	259.28±3.27^c	23.40±4.95^ab	11.08
8	Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	218.40±7.32^ab	23.32±5.09^bc	9.37
9	Control-2+(10.8x10⁸ cfu/ day)	214.89±7.19^ab	23.45±5.19^c	9.16

②식이 및 물 섭취량

각군당 식이섭취량 및 물 섭취량을 관찰한 결과 도 5, 6과 같다.

식이섭취량의 경우 각 군별로 시간이 지남에 따라 증가하는 경향을 보였으며, 특히 40%beef tallow를 섭취한 대조군 Control-1, Control-2군에서 증가가 눈에 뛰었다.

물 섭취량도 식이와 마찬가지로 비만식이를 섭취한 군에서 전체적으로 섭취량이 많았으나, 군들간의 유의적인 차이는 크게 나타나지 않았다.

4) 분변 양의 변화

일일 총 분변 배설량은 표 9 내지 11과 같다. 분변 양은 3주, 6주, 9주에 측정하였으며, 하루동안의 분변량을 측정한 결과이다. 총 분변 배설량을 살펴 보면 Normal 분류군의 경우 3주 동안 약 0.4~0.59g 증가가 이루어 졌으며, 40% beef tallow를6주간 섭취한 Control-1 분류군은 -0.04~0.36g의 분변량을 보였다. 이에 비하여 Control-2 분류군의 경우 6주 분변 배설량은 3주 분변량과 큰 차이가 없다가 천호 시료투여군 크게 증가하는 경향을 보였다. 이는 모든 분류군 들 중 특히 시료 섭취군에서 분변량 증가가 두드러지게 나타났으며. 이는 시료첨가로 인하여 배변활동이 활발히 된 것으로 사료된다.

Normal분류군

	Group	3weeks	6weeks
1	Normal	2.55±1.46	2.99±1.71
2	Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	3.24±1.62	3.73±1.86
3	Normal+(10.8x10⁸ cfu/day)	6.47±1.23	7.06±2.03

Control-1분류군

	Group	3weeks	6weeks
1	Control-1	3.19±1.59	3.14±2.07
2	Control-1+(5.4x10⁸ cfu/day)	4.84±2.42	5.20±2.10
3	Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	5.34±2.69	5.67±2.17

Control-2 분류군

	Group	3weeks	6weeks	9weeks
1	Normal	2.55±1.46	2.69±1.71	2.83±0.24
2	Control-2	2.75±1.38	2.85±2.43	2.89±0.15
3	Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	3.50±1.75	3.80±0.52	4.77±1.39
4	Control-2+(10.8x10⁸ cfu/ day)	3.89±2.45	4.04±2.82	5.93±1.72

5) 장기무게 측정

①각 장기 무게에 미치는 영향

군별 각 장기 무게는 표 12에 나타내었다. 다른 장기의 경우 모든 군에서 유의적인 차이가 없었으나, Liver(간), Retroperitoneal(신장주위지방), Epididymal(고환주위지방)의 경우 비만식이를 투여한 Control-1군, Control-2군에서 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 이에 비하여 시료투여군 중 특히 10.8x10⁸ cfu/day을 섭취한 군의 경우 상당히 감소하는 경향을 보였다.

일반적으로 비만인에서 체지방 증가는 체중증가보다 비만 관련 합병증을 유도하는 주요 위험인자로 알려져 있다. 체지방은 형태나 작용에 따라 백색지방(white adipose tissue)과 갈색지방(brown adipose tissue)으로 구분된다. 백색지방은 주로 체내 잉여에너지를 지방으로 저장하며 피하와 장기주변에 분포하는 반면, 갈색지방은 열을 생산하는 기능을 하고 목 주위에 발달되어 있다.

Group	Liver	Kidney	Heart	Spleen	Testis	Retroperitoneal	Epididymal
Normal	10.76±0.89^b	3.01±0.46^c	1.64±0.57^a	1.05±0.30^a	5.28±0.20^ab	7.42±1.41^ab	6.31±1.75^b
Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	10.27±0.39^b	3.08±0.17^c	1.47±0.04^a	0.78±0.05^ab	5.10±0.32^ab	8.43±2.12^ab	7.05±1.41^ab
Normal+(10.8x10⁸ cfu/ day)	10.12±0.32^b	2.71±0.07^c	1.37±0.14^a	0.85±0.02^ab	5.41±0.42^ab	7.57±1.67^ab	6.20±0.94^b
Control-1	12.79±1.53^a	3.09±0.19^c	1.45±0.09^a	0.83±0.06^ab	5.03±0.71^ab	9.84±1.88^a	9.19±2.38^a
Control-1+(5.4x10⁸ cfu/day)	11.57±1.42^ab	2.68±0.17^c	1.30±0.05^a	0.76±0.04^b	4.79±0.61^b	10.08±2.46^a	7.19±0.89^ab
Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	10.53±0.71^b	2.77±0.05^b	1.41±0.11^a	0.79±0.08^ab	4.93±0.09^ab	7.83±1.06^ab	7.33±1.75^ab
Control-2	12.54±1.74^a	2.62±1.00^a	1.33±0.19^a	0.93±0.17^ab	5.61±0.50^a	10.04±0.69^a	8.03±1.23^ab
Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	10.23±0.60^b	2.57±0.13^b	1.41±0.24^a	0.83±0.18^ab	5.18±0.23^ab	9.33±2.43^a	7.75±1.92^ab
Control-2+(10.8x10⁸ cfu/day)	10.04±0.65^b	2.54±0.25^b	1.27±0.14^a	0.71±0.11^b	5.14±0.48^ab	6.09±0.87^b	6.10±0.87^b

②지방조직에 미치는 영향(상대중량)

지방조직에 미치는 본 발명에 대한 영향을 관찰한 성적이 표 13이다. 고지방식이 섭취군Control-1군(6주 섭취)은 Retroperitoneal(신장주위지방) 상대중량의 경우 정상식이군에 비하여 약 1.2배 늘었으며, Control-2군(8주 섭취)의 경우 1.37배 는 것을 확인할 수 있었으며, 고환주위 지방의 상대중량은 각각 1.30배 1.28배로 증가함을 확인할 수 있었으며, 천호시료를 투여함에 따라 복강, 고환주위 지방이 정량적으로 줄어드는 경향을 보였다.

	Group	Retroperitoneal	Epididymal
	Group	mg /g body weight
1	Normal	1.98±0.37^ab	1.69±0.39^b
2	Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	2.35±0.60^abc	1.96±0.40^ab
3	Normal+(10.8x10⁸ cfu/ day)	2.17±0.42^abc	1.77±0.26^b
4	Control-1	2.42±0.41^abc	2.26±0.49^a
5	Control-1+(5.4x10⁸ cfu/day)	2.86±0.70^a	2.04±0.25^ab
6	Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	2.14±0.46^abc	2.00±0.59^ab
7	Control-2	2.71±0.09^ab	2.17±0.33^ab
8	Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	2.42±0.50^abc	2.01±0.41^ab
9	Control-2+(10.8x10⁸ cfu/ day)	1.72±0.40^c	1.72±0.40^b

6) 혈청 생화학적 검사

다이어트 기능을 입증하기 위해서는 체지방의 감소와 신체에 대한 유해성 여부가 입증되어야 한다. 체중, 체질량 지수, 체지방을 필히 측정하여야 하며 이상반응의 빈도 및 발생률, 혈액생화학적 수치로 AST, ALT, BUN, Creatinine, Total protein, Albumin, Hemoglobin을 반드시 실시하여야 한다.

(1)간독성 지표 분석 (AST, ALT관련 효소)

정상식이와 실험물질을 6주간 급여한 흰쥐, 고지방식이와 실험물질을 6주간 급여한 흰쥐 및 고지방식이를 6주 급여후 2주간 정상식이와 함께 실험물질을 2주간 급여한 흰쥐의 체지방량 및 관련 바이오마커를 측정하여 군들간의 유의성에 대하여 살펴보았다.

AST와 ALT는 간세포에 존재하는 효소로서 간조직이 손상되면 혈중으로 방출되는 특징알 가지고 있으므로 간기능 검사의 대표적인 지표로 많이 사용된다. 따라서 혈장에서 AST, ALT의 효소 역가가 높으면 간 손상이 크다는 것을 알 수 있다.

혈장 AST및 ALT의 수준이 고지방식이 섭취로 인해 정상식이 군에 비해 유의적으로 증가하며, 섭취 시료의 인체 유해성 여부를 평가하기 위하여는 꼭 혈액생화학 수치로 필요하다. 혈청생화학적 검사는 아래와 같았다. 우선AST, ALT 의 결과는 모두 정상범위에 들었으며 각 군간 큰 유의 차는 없었다(표 14).

	Group	AST	ALT
	Group	IU/L	IU/L
1	Normal	79.47±14.58^cd	29.95±3.43^a
2	Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	88.73±20.45^cd	30.10±2.41^a
3	Normal+(10.8x10⁸ cfu/ day)	77.90±11.72^cd	28.75±5.37^a
4	Control-1	79.25±8.42^bc	42.20±3.55^a
5	Control-1+(5.4x10⁸cfu/day)	93.70±25.58^a	58.10±7.37^a
6	Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	77.08±13.15^ab	47.08±7.77^a
7	Control-2	99.95±42.71^d	28.40±3.38^a
8	Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	92.53±33.21^cd	29.48±5.14^a
9	Control-2+(10.8x10⁸cfu/ day)	106.10±12.00^cd	32.99±0.87^a

(2)Hemoglobin 및 Albumin 관련 효소

정상식이와 실험물질을 6주간 급여한 흰쥐, 고지방식이와 실험물질을 6주간 급여한 흰쥐 및 고지방식이를 6주 급여후 2주간 정상식이와 함께 실험물질을 2주간 급여한 흰쥐의 체지방량 및 관련 바이오마커를 측정하여 군들간의 Hemoglobin 및 Albumin의 결과는 모두 정상범위에 들었으며 각 군간 큰 유의 차는 없었다(표 15).

다이어트로 인하여 영양이 충분치 않으면 헤모글로빈과 적혈구 생성에 관련 있는 철분과 엽산, 비타민 C가 부족해져서 빈혈이 생기게 된다. 철분의 경우 헤모글로빈이 산소와 결합하는 데 반드시 필요하며, 엽산은 적혈구를 생성하는 역할을 한다. 비타민 C는 철분의 흡수를 돕기 때문에 이 세가지가 부족하면 빈혈이 발생하게 된다. 이에 Hemoglobin수치 및 Albumin수치도 함께 측정하였다.

	Group	Hemoglobin	Albumin
	Group	g/dL	g/dL
1	Normal	17.20±0.61^bc	2.80±0.14^ab
2	Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	17.43±4.65^bc	2.95±0.76^a
3	Normal+(10.8x10⁸ cfu/ day)	17.05±5.57^c	2.85±0.93^ab
4	Control-1	16.60±4.52^c	2.83±0.76^ab
5	Control-1+(5.4x10⁸cfu/day)	16.60±0.38^c	2.83±0.05^ab
6	Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	18.03±5.35^abc	2.85±0.87^ab
7	Control-2	17.65±5.49^a	2.58±0.83^c
8	Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	18.58±4.83^ab	2.68±0.69b^c
9	Control-2+(10.8x10⁸cfu/ day)	19.08±5.19^bc	2.83±0.75^ab

(3)비만 관련 효소

표 16에서와 같이Normal군과 Control-1군의 TC, TG 함량의 차이는 크게 나타났으며, 2주 동안 일반식이를 섭취한 Control-2군의 경우 TC, TG, LDL-cholesterol값이 Control-1군보다 많이 감소하는 경향을 나타내었다. 특히 천호시료를 투여한 군에서 상대적으로 낮은 결과를 나타내었으며, 이는 정상 식이를 급여한 rat에 시료를 투여하였을 때의 전반적인 효과보다 비만사료를 투여한 Control-1분류군과 Control-2분류군에서 더 효과가 두드러졌다.

콜레스테롤은 뇌, 신경, 근육, 피부, 간, 장, 그리고 심장 등 신체내 모든 부위에 있는 세포의 세포막(cell menbrane)과 미엘린(myelin)의 주요성분이며 부신피질과 고환 및 난소에서 생성되는 스테로이드 호르몬과 햇빛에 의해 피부에서 생성되는 비타민D, 그리고 간에서 생성되는 담즙산의 전구체로서 동물성 식품을 통해서 섭취되거나 생체 내에서 아세틸-Co A로 부터 합성된다(McKenny J. M., Lovastatin, 1988).

LDL은 동맥경화를 촉진시키는 위험인자이며, 그 반면에 HDL은 혈관벽에서 콜레스테롤을 제거하는 인자로 인정되고 있다. 즉, LDL이 높으면 좋지 않지만, HDL이 높으면 건강에 좋다. 또한 혈중 중성지방이 높으면 환자에게서 HDL이 낮은 경우가 많다. 콜레스테롤이 여러 가지 원인에 의해 필요 이상 생체 내 존재하면 고지혈증에 의한 심장질환 및 심혈관계질환과 같은 성인병의 원인이 되기도 한다(Lee D. H. et al., 1991).

본 실험에서 비만식이로 투여한 beef tallow와 같은 포화지방산은 혈청의 지질농도를 상승시키는 것으로 알려져 있다.

	Group	Total cholesterol	Triglyceride	HDL-cholesterol	LDL-cholesterol
	Group	mg/L	mg/L	mg/L	mg/L
1	Normal	88.00±10.08^b	109.08±3.24^abc	15.55±1.31^a	12.50±3.60^b
2	Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	83.07±8.23^b	113.34±8.15^abc	14.99±0.37^ab	9.14±0.99^c
3	Normal+(10.8x10⁸ cfu/ day)	81.36±6.90^b	82.09±5.93^c	15.53±0.38^ab	11.57±1.11^c
4	Control-1	176.35±77.20^a	215.97±15.82^a	13.63±2.89^b	21.70±7.60^a
5	Control-1+(5.4x10⁸ cfu/day)	95.66±8.87^b	147.26±8.82^b	15.07±0.19^ab	16.63±1.54^ab
6	Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	86.19±10.23^b	98.19±6.44^bc	15.09±1.169^ab	15.99±0.72^b
7	Control-2	130.32±4.80^b	111.83±2.06^b	12.22±1.07^a	16.51±3.04^ab
8	Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	85.88±6.40^b	70.18±1.67^c	14.50±0.79^ab	13.65±1.96^bc
9	Control-2+(10.8x10⁸ cfu/ day)	83.41±2.01^b	64.69±18.60^c	13.99±0.73^b	12.31±1.26^bc

지방세포에서 생산되는 Leptin은 지방조직에 저장되어 있는 에너지 저장량에 대한 정보를 뇌에 전달하여 주는 대표적인 인자로서(11), 지방조직과 시상하부 만복 중추사이의 피드백 루프(feedback loop)의 연결고리 역할을 하는 것으로 알려져 있다(12,13). 혈중 Leptin의 수준은 체지방에 비례하여 증가하며, 에너지 대사의 조절중추인 시상하부에 작용하여 식욕을 저하시켜 식이섭취량을 감소시키고, 에너지 대사를 증가시킴으로써 체중을 줄이는 작용을 하는 중요한 요소로 알려져 있다.

도 6과 같이 혈중 Leptin 농도는 Normal 및 본 발명 시료를 투여한 군에서 모두 4ng/mL미만으로 나타났으며, 본 발명 시료를 10.8x10⁸ Cfu/day섭취한 군들에서 Leptin함량이 정량적으로 감소하는 경향을 보였다.

앞선Total cholesterol및Triglyceride 수치의 경우 2주간 일반식이를 섭취한 Control-2군에서 그 농도가 다소 감소하는 경향을 보였으나, Leptin농도의 경우 이와는 달리 Control-1보다 비슷하거나 다소 높은 경향을 보여, 단시간의 다이어트로 Leptin양까지 감소시키기는 힘든 것으로 사료된다.

(4) 신장 관련 효소(BUN) 및 Total protein

신장은 체액, 전해질 및 산-염기 상태를 조절하는 장기로, 혈중 노폐물을 제거하는 중요한 역할도 담당하며 여러 질환들에서 합병증으로 신장기능이 떨어지거나, 혹은 신장 자체가 침범되어 신장 기능에 영향을 받는다. 신기능 손상 정도를 파악하고, 치료에 어느 정도 반응하는지, 또 신 대체요법이 필요할 것인지 등을 파악하고자 할 때, 몇 가지 생화학적 검사로 신기능을 평가할 수 있다(Choi et al., 2010).

혈중요소질소(BUN)의 변동은 단백섭취량, 요소의 합성 및 배설 등 3가지 인자로 좌우되며 주로 요소 질소가 체내에서 증가하는 경우는 ammonia 생성이 증가하여 요소합성이 증가하는 예로 주로 대수술, 체내출혈, 악성종양, 기아, 고열, 화상, 갑상선 기능항진증, 췌장 괴사, 중증 감염증 등에서 조직 단백의 이화항진이 일어나 증가되며 신장 기능 장애의 경우 현저히 증가되는 것으로 알려져 있다. 표 17에서와 같이 실험결과BUN수치는 군별 유의성이 크게 없었으며, 이는 total protein에서도 마찬가지로 정상범위 내에 다 드는 것을 확인할 수 있었다.

	Group	Total protein	BUN
	Group	g/dL	mg/dL
1	Normal	6.36±0.24^abc	13.83±1.95^ab
2	Normal+(5.4x10⁸ cfu/day)	6.65±0.25^a	11.36±1.59^bc
3	Normal+(10.8x10⁸ cfu/ day)	6.33±0.30^abc	11.38±1.01^bc
4	Control-1	6.58±0.26^a	14.43±1.47^a
5	Control-1+(5.4x10⁸ cfu/day)	6.53±0.12^a	13.31±0.46^abc
6	Control-1+(10.8x10⁸ cfu/ day)	6.48±0.10^ab	12.03±1.02^abc
7	Control-2	5.75±0.24^cd	12.82±2.19^abc
8	Control-2+(5.4x10⁸ cfu/day)	5.83±0.17^bcd	10.89±1.75^bc
9	Control-2+(10.8x10⁸ cfu/ day)	5.40±1.21^d	10.77±2.98^c

7) 해부 사진

(1) 군별 크기 비교

각 군별 해부사진은 아래와 같다 (도 7).

일반 AIN-76A Diet를 급여한 Normal군에 비하여 확연하게 Control군에서 덩치가 큰 것을 육안으로도 확인할 수 있었으며, 크기는 Contro-1및 Control-2에서 상대적으로 크다. 그러나 천호시료군을 처리한 군에서는 Normal군과 비슷한 크기를 보였으며, 앞선 Body weight 및 Tissue weight에서도 확인 할 수 있었다.

(2) 조직사진

도 8은 해부 후 적출한 조직사진으로 Retroperitoneal(신장주위지방) 및 Epididymal(고환주위지방)의 양이Beef tallow 함유 고지방식이를 투여한 군들의 경우, 늘어나는 것을 확인할 수 있었다.

3. 결론

이상의 결과로 미루어보아 본 발명 다이어트 보조식품 시료는 정상, 비만유도 중, 비만 유도 후 정상식이와 함께 급여한 3가지 분류군에 모두 체중감소 및 분변량, 장기무게, Total choelsterol, Triglyceride, Leptin함량에 긍정적인 영향을 주었으며, 혈청 생화학적 검사결과AST, ALT, BUN, Total protein, Hemoglobin, Albumin은 모든 군에서 정상범위에 들었으며, 군 간의 유의적인 차이는 크지 않는 것으로 미루어 보아 본 발명 다이어트 보조식품 시료로 인한 부작용도 본 실험에서는 발견되지 않았다.

본 발명의 상세한 설명에서는 구체적인 실시례에 관해 설명하고 있으나, 본 발명의 범주에서 벗어나지 않는 한도 내에서 다양한 변형이 가능함은 물론이다. 그러므로 본 발명의 보호 범위는 설명된 실시례에 국한되어 정해져서는 안 되며, 후술하는 청구범위 뿐만 아니라 균등한 것들에 의해 정해져야 한다.

Claims

혼합곡물발효효소분말 70.7중량%와, 혼합유산균10중량%와, 레몬농축분말 6중량%와, 레몬농축액 5중량%와, 프락토올리고당 4.5중량%와, 화이바솔 2.3중량%와 자일로올리고당1.5중량%를 혼합하여 과립상태로 건조한 것을 특징으로 하는 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품.
청구항 1에 있어서,
상기 혼합곡물발효효소분말은 현미발효효소30중량%, 율무발효효소 20중량%, 보리발효효소 20중량%, 찹쌀발효효소 20중량%, 대두발효효소 10중량%를 혼합한 것을 특징으로 하는 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품.
청구항 1에 있어서,
상기 혼합유산균은 락토바실러스 아시도필루스(lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum), 비피도박테리움 롱검(Bifidobacterium longum), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 스트렙토코쿠스 테르모필루스(Streptococcus thermophilus)를 혼합한 것을 특징으로 하는 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품.
혼합곡물발효효소분말 70.7중량%와, 혼합유산균10중량%와, 레몬농축분말 6중량%와, 레몬농축액 5중량%와, 프락토올리고당 4.5중량%와, 화이바솔 2.3중량%와 자일로올리고당1.5중량%를 정량(定量)하는 단계와;
혼합곡물발효효소분말, 혼합유산균, 프락토올리고당, 화이바솔, 자일로올리고당, 레몬농축분말 및 레몬농축액을 순차적으로 투입토록 하여 8~10분 믹싱하는 단계와;
혼합기를 이용하여 혼합한 것을 과립기에 투입하여 1mm 지름으로 길이 10~20㎝가 되도록 과립하는 단계와;
과립한 것을 65℃에서 2시간이상 건조하는 단계와;
과립하여 건조한 것을 정립기에 투입하여 0.4~1㎝의 길이 정립하는 단계와;
정립된 반제품을 파우치 충진하는 단계를 순차적으로 행하여 제조함을 특징으로 하는 곡물발효효소분말을 주재로 한 다이어트 보조식품의 제조방법.