KR20140117647A

KR20140117647A - 퀴놀릴피롤로피리미딜 축합환 화합물 또는 그의 염

Info

Publication number: KR20140117647A
Application number: KR1020147024020A
Authority: KR
Inventors: 다케시 사가라; 사토루 이토; 사치에 오츠키; 가츠마사 노노시타
Original assignee: 다이호야쿠힌고교 가부시키가이샤
Priority date: 2012-02-23
Filing date: 2013-02-22
Publication date: 2014-10-07
Also published as: SG11201402876UA; WO2013125709A1; CA2861980C; EP2722332A1; TWI496783B; JPWO2013125709A1; MX351863B; JP5557963B2; RU2581039C1; AU2013223052A1; EP2722332A4; US20140057899A1; CA2861980A1; EP2722332B1; TW201339160A; DK2722332T3; HUE029343T2; CN104136438A; KR101660145B1; ES2580530T3

Abstract

EGFR 저해 작용을 갖고, 또한 세포 증식 억제 효과를 갖는 신규한 화합물을 제공한다. 또한, EGFR 저해 작용에 기초하여, 암의 예방 및/또는 치료에 유용한 의약을 제공한다. 하기 화학식 (I)로 표시되는 화합물 또는 그의 염.

Description

퀴놀릴피롤로피리미딜 축합환 화합물 또는 그의 염{QUINOLYLPYRROLOPYRIMIDYL FUSED-RING COMPOUND OR SALT THEREOF}

[관련 출원의 상호 참조]

본 출원은, 2012년 2월 23일에 출원된, 일본 특허 출원 제2012-037565호 명세서(그 개시 전체가 참조에 의해 본 명세서 중에 원용됨)에 기초하는 우선권을 주장한다.

본 발명은 상피 성장 인자 수용체(Epidermal Growth Factor Receptor; EGFR) 저해 작용을 갖는 퀴놀릴피롤로피리미딜 축합환 화합물 및 이들을 유효 성분으로서 함유하는 의약 조성물에 관한 것이다.

EGFR은 수용체형 티로신 키나아제이며, 정상 조직에서는 리간드인 상피 성장 인자(Epidermal Growth Factor; EGF)와 결합하여 생리 기능을 발휘하고, 상피 조직에서 증식이나 아폽토시스(apoptosis) 저해 등에 기여하고 있다(비특허문헌 1).

또한, EGFR는 암 유전자의 하나이며, EGFR 유전자의 증폭이나 단백질의 고발현이나 변이가 다양한 암종, 예를 들어 두경부암, 유방암, 대장암, 식도암, 췌장암, 폐암, 난소암, 신장암, 방광암, 피부암, 뇌종양 등에서 알려져 있다(비특허문헌 2). 일본 및 구미 각국에서는, 인구 10만명당 약 170명에서 375명이 매년 암으로 사망하고 있어 사인의 상위를 차지하고 있다(비특허문헌 3). 그 중에서도 폐암에 의한 사망자수는 전 세계적으로는 연간 약 140만명이나 달하고 있고, 비소세포 폐암은 폐암의 80％ 이상을 차지하기 때문에, 유효한 치료법의 개발이 요망되고 있다(비특허문헌 4).

최근에 이러한 암의 원인 유전자가 특정되고 있으며, EGFR 유전자의 변이도 그 하나로 활성형 변이 EGFR 단백질을 초래한다. 활성형 변이 EGFR 단백질이란, 예를 들어 746-750번 아미노산이 결실된 것(EGFR(d746-750))이나 858번 아미노산이 류신에서 아르기닌으로 변이된 것(EGFR(L858R)) 등으로, 일본에서는, 예를 들어 비소세포 폐암의 20-40％이고, 또한, 구미에서도 비소세포 폐암의 10-15％로 이러한 변이가 보고되어 있다. 이 변이를 갖는 비소세포 폐암은 EGFR의 키나아제 활성을 저해하는 약제(EGFR 저해제)의 gefitinib(상품명 Iressa(등록 상표)) 및 erlotinib(상품명 Tarceva(등록 상표))에 대한 감수성이 높으므로, 이 약제가 일본이나 구미에서 치료약으로서 사용되고 있다. 그러나, 사용 개시부터 6-12개월 지나면 gefitinib 및 erlotinib에 대한 내성을 획득하여 치료 효과가 약해지기 때문에, 이 획득 내성이 고감수성 변이형 EGFR을 갖는 비소세포 폐암의 치료상에서 심각한 문제로 되어 있다. 이 획득 내성의 약 50％는, EGFR 유전자에 제2 변이가 발생한 결과 790번 아미노산이 트레오닌에서 메티오닌으로 변화한 내성형 변이 EGFR 단백질(EGFR(d746-750/T790M)나 EGFR(T790M/L858R))이 출현함으로 인한 것이 판명되어, 이 약제 내성 변이형 EGFR을 갖는 비소세포 폐암에도 유효한 치료약의 개발이 중요한 과제로 되어 있다(비특허문헌 5).

한편, 현재 임상에서 치료약으로서 사용되고 있는 EGFR 저해제의 gefitinib 및 erlotinib과 임상 시험 중인 EGFR 저해제의 BIBW2992 등에서 공통되는 부작용으로서, 피부의 이상과 소화관 장애가 보고되어 있다. 이 부작용은, EGFR 저해제가, 비소세포 폐암에서 발현하고 있는 변이형 EGFR뿐만 아니라, 피부 또는 소화관에서 발현하고 있는 야생형 EGFR(EGFR(WT))의 활성도 저해해버리는 것에 기인한다고 널리 생각되고 있으며(비특허문헌 1), 부작용 저감의 관점에서, 정상 조직의 EGFR(WT)에 대한 저해 활성이 약한 것이 바람직하다고 생각된다.

따라서, 790번 아미노산이 메티오닌으로 변이한 약제 내성 변이형 EGFR에 대한 저해 활성에 비해 야생형 EGFR에 대한 저해 활성이 약한 약제를 투여함으로써, 피부 또는 소화관에서의 부작용이 강하게 발현하지 않는 투여량에서 약제 내성 변이형 EGFR을 갖는 비소세포 폐암 세포의 증식을 억제 가능한 것이 기대되어, 암의 치료와 환자의 연명이나 QOL의 향상에 공헌할 것으로 예상된다. 또한, 약제 내성 변이형 EGFR뿐만 아니라 gefitinib 및 erlotinib에 대한 감수성이 높은 EGFR(d746-750)이나 EGFR(L858R) 등의 고감수성 변이형 EGFR에 대한 저해 활성도 강하여, 야생형 EGFR에 대한 저해 활성이 약한 약제라면, 피부 또는 소화관에서의 부작용이 강하게 발현하지 않는 투여량에서 고감수성 변이형 또는 약제 내성 변이형 EGFR을 발현하는 비소세포 폐암 세포의 증식을 억제 가능한 것이 기대되거나, 고감수성 변이형 EGFR을 발현하는 비소세포 폐암 세포암으로부터 획득 내성으로서 출현하는 약제 내성 변이형 EGFR의 빈도를 감소시킬 가능성이 기대되어, 암의 치료와 환자의 연명이나 QOL의 향상에 공헌할 것으로 예상된다. 또한 이것들은 치료 현장에서 고감수성 변이형 또는 약제 내성 변이형 EGFR의 발현을 층별화 지표로서 적용할 수 있기 때문에 환자의 선택이 가능하게 되어, 윤리면에서의 기여도 높다.

본 발명에 따른 화합물과 유사한 구조를 갖는 화합물로서, N-(3-(4-아미노-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-5-일)페닐)벤즈아미드 유도체가 알려져 있다(특허문헌 1). 당해 특허문헌 1에는, B-RAF 키나아제에 의해 특징지어지는 질환의 처치에 당해 아미드 화합물을 사용하는 것이 기재되어 있지만, 당해 문헌에는 키나아제 저해 활성을 뒷받침하는 구체적인 시험 및 그 결과에 대하여 개시되어 있지 않아, 그 활성은 확인되지 못했다.

국제 공개 WO2006/102079호 팸플릿

Nature Rev. Cancer, vol.6, pp803-811(2006) J. Clin. Oncol., vol.19, 32s-40s(2001) 총무성 통계국 홈페이지/통계데이터/세계의 통계 「세계의 통계 2011」 제14장 국민 생활·사회 보장 14-1 사인별 사망률 Lung Cancer, vol.69, pp1-12(2010) Nature Rev. Cancer, vol.10, pp760-774(2010)

상기와 같이, EGFR 저해제는, 암 치료에서의 효과가 기대되고 있지만, 임상상의 효과가 충분하지 않은 것이 현상이다.

따라서, 본 발명의 과제는, 강력하게 EGFR을 저해하는 신규 화합물 또는 그의 염을 제공하는 데 있다. 또한, EGFR(d746-750)이나 EGFR(L858R), 또한 EGFR(d746-750/T790M)이나 EGFR(T790M/L858R)을 저해하지만, EGFR(WT)을 저해하지 않는 신규 화합물 또는 그의 염을 제공하는 데 있다.

본 발명자들은, 상기 과제를 해결하고자 예의 검토를 거듭한 결과, 본 발명에 따른 퀴놀릴피롤로피리미딜 축합환 화합물 군이, EGFR에 대하여 우수한 저해 활성 및 암 세포 증식 억제 작용을 가져, 암을 치료하기 위한 의약으로서 유용한 것을 발견하고, 본 발명을 완성하기에 이르렀다.

즉, 본 발명은 이하의 항을 제공한다

항 1. 하기 화학식 (I)로 표시되는 화합물 또는 그의 염.

(화학식 중, m은, 1 내지 2이고;

n은, 1 내지 2이고;

R₁은, 수소 원자 또는 C₁-C₄ 알킬기이며; 또한

R₂, R₃ 및 R₄는, 동일 또는 상이하며, 수소 원자, 할로겐 원자, C₁-C₄ 알킬기, 또는 화학식 (a):

(화학식 중, R₅ 및 R₆은, 동일 또는 상이하며, 수소 원자 또는 C₁-C₄ 알킬기를 나타내거나, 또는 R₅ 및 R₆은, 이들이 결합하는 질소 원자와 함께 4 내지 6원환의 헤테로시클로알킬기를 형성해도 됨)

로 표시되는 기임)

항 2. m은, 1 내지 2이고;

n은, 1 내지 2이고;

R₁은, 수소 원자 또는 C₁-C₄ 알킬기이며; 또한

(화학식 중, R₅ 및 R₆은, 동일 또는 상이하고, C₁-C₄ 알킬기를 나타냄)

로 표시되는 기인, 항 1에 기재된 화합물 또는 그의 염.

항 3. m은, 1 내지 2이고;

n은, 1 내지 2이고;

R₁은, 수소 원자 또는 메틸기이고; 또한

R₂, R₃ 및 R₄는, 동일 또는 상이하며, 수소 원자, 염소 원자 또는 디메틸아미노메틸 기인, 항 1 또는 2에 기재된 화합물 또는 그의 염.

항 4. m과 n이, (m,n)=(1,1), (1,2) 또는 (2,1)인, 항 1 내지 3 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염.

항 5. 화합물이, 이하의 화합물 군에서 선택되는 것인 항 1 내지 4 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염.

(R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드

(S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드

N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)-N-메틸아크릴아미드

(E)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)-4-(디메틸아미노)-2-부텐아미드

(S,E)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)-3-클로로아크릴아미드

(S,Z)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)-3-클로로아크릴아미드

(S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-8-일)아크릴아미드

(S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-9-일)아크릴아미드

(R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-9-일)아크릴아미드.

항 6. 항 1 내지 5 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염을 유효 성분으로 하는 EGFR 저해제.

항 7. 항 1 내지 5 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염을 함유하는 의약 조성물.

항 8. 항 1 내지 5 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염을 유효 성분으로 하는 항종양제.

항 9. 포유 동물에 대하여 항 1 내지 5 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염의 암에 대한 예방 또는 치료 유효량을 투여하는 공정을 포함하는, 암의 예방 또는 치료 방법.

항 10. 항종양제를 제조하기 위한 항 1 내지 5 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염의 용도.

항 11. 암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 항 1 내지 5 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염.

또한, 본 발명은 이하의 항에 규정하는 본 발명 화합물의 합성 중간체의 제조 방법도 제공한다:

항 12. [I] 식 (VII)로 표시되는 화합물 또는 그의 염에, 유기 보란 시약을 작용시키는 공정 및

(화학식 중, P₁은 수산기의 보호기이고, n은 1 내지 2이고, m₁은 0 내지 1임)

[II] 알칼리 금속 수산화물의 존재 하, 0가 팔라듐 촉매를 사용하여, 상기 공정 [I]의 반응 생성물의 분자내 환화 반응을 시키는 공정

을 포함하는, 식 (VIII)으로 표시되는 화합물 또는 그의 염의 제조 방법.

(화학식 중, m은 1 내지 2이고, P₁ 및 n은 각각 상기한 바와 같음)

항 13. [I]식 (XIX)로 표시되는 화합물 또는 그의 염에, 유기 보란 시약을 작용시키는 공정 및

(화학식 중, R₁은, 수소 원자 또는 C₁-C₄ 알킬기이고, P₂는 아미노기의 보호기이고, n은 1 내지 2이고, m₁은 0 내지 1임)

을 포함하는, 식 (XX)로 표시되는 화합물 또는 그의 염의 제조 방법.

(화학식 중, m은 1 내지 2이고, R₁, P₂ 및 n은 각각 상기한 바와 같음)

본 발명에 따르면, EGFR 저해제로서 유용한 상기 화학식 (I)로 표시되는 신규 화합물 또는 그의 염이 제공된다.

본 발명 화합물 또는 그의 염은, 우수한 EGFR 저해 활성을 갖고, 또한 암 세포주에 대한 증식 억제 효과를 나타내는 것이 명확해졌다. 또한, EGFR에 대한 우수한 선택성으로부터 부작용이 적다는 이점을 갖는다. 따라서, 본 발명 화합물 또는 그의 염은 암의 예방 및/또는 치료제로서 유용하다.

본 발명의 상기 화학식 (I)로 표시되는 화합물은, 퀴놀린 구조와 α,β-불포화 아미드 구조를 갖는 퀴놀릴피롤로피리미딜 축합환 화합물이며, 상기한 어떤 선행기술문헌 등에도 기재되어 있지 않은 신규한 화합물이다.

구체적으로는, 특허문헌 1에 구체적인 개시가 되어 있는 화합물은, N-(3-(4-아미노-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-5-일)페닐)벤즈아미드 유도체인데, 본 발명 화합물이 퀴놀린 구조를 갖는 점, α,β-불포화 아미드 구조를 갖는 점에서 상이하다.

본원 명세서에서 「C₁-C₄ 알킬기」란, 탄소수 1 내지 4의 직쇄상 또는 분지상의 알킬기를 나타내고, 구체적으로는 메틸기, 에틸기, n-프로필기, 이소프로필기, n-부틸기, 이소부틸기, sec-부틸기, tert-부틸기 등을 들 수 있다.

본원 명세서에서 「할로겐 원자」란, 염소 원자, 브롬 원자, 불소 원자, 요오드 원자를 들 수 있다.

본원 명세서에서 「4 내지 6원환의 헤테로시클로알킬기」란, 질소 원자를 1 내지 2개의 환 내에 포함하는 4 내지 6원환의 헤테로시클로알킬기를 나타내고, 구체적으로는 아제티디닐기, 피롤리딜기, 피페리딜기, 이미다졸리디닐기 등을 들 수 있다.

화학식 (I)에서의 m 및 n은, 바람직하게는 (m,n)=(1,1), (1,2) 또는 (2,1)이다.

화학식 (I)에서의 R₁은, 바람직하게는 수소 원자 또는 메틸기이다.

화학식 (I)에서의 R₂, R₃ 및 R₄는, 바람직하게는 동일 또는 상이하며, 수소 원자, 할로겐 원자, C₁-C₄ 알킬기, 또는 상기 화학식 (a)로 표시되는 기이다. 화학식 (I)에서, R₂, R₃ 및 R₄ 중 적어도 1개가 화학식 (a)로 표시되는 기를 나타내는 경우, R₅ 및 R₆은, 바람직하게는 C₁-C₄ 알킬기이며, 더욱 바람직하게는 모두 메틸기이다.

화학식 (I)에서의 R₂는, 더욱 바람직하게는 수소 원자이다.

화학식 (I)에서의 R₃은, 더욱 바람직하게는 수소 원자, 염소 원자 또는 디메틸아미노메틸기이다.

화학식 (I)에서의 R₄는, 더욱 바람직하게는 수소 원자 또는 염소 원자이다.

본 발명에서는, 화학식 (I)에서, m은, 1 내지 2이고; n은, 1 내지 2이고;

R₁은 수소 원자 또는 메틸기이고;

R₂, R₃ 및 R₄는 동일 또는 상이하며, 수소 원자, 염소 원자 또는 디메틸아미노메틸기인 화합물 또는 그의 염이 바람직하다.

m=1 또한 n=1인 경우에는,

R₁은 수소 원자 또는 메틸기이고;

R₂는 수소 원자이고;

R₃ 및 R₄ 중 하나는 수소 원자, 염소 원자 또는 디메틸아미노메틸기이고;

R₃ 및 R₄ 중 다른 하나는 수소 원자인 화합물 또는 그의 염이 바람직하다.

m=1 또한 n=2, 또는 m=2 또한 n=1인 경우에는,

R₁, R₂, R₃, 및 R₄는 모두 수소 원자인 화합물 또는 그의 염이 바람직하다.

구체적인 적합한 본 발명 화합물은 이하의 것을 예시할 수 있다:

(R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-9-일)아크릴아미드

또한, EGFR(T790M/L858R)에 대한 효소 저해 활성이 강한 것이 바람직하고, 2nM 이하인 것이 보다 바람직하다. 또한, EGFR(d746-750/T790M)에 대한 효소 저해 활성이 강한 것이 바람직하고, 2nM 이하인 것이 보다 바람직하다.

이어서, 본 발명에 따른 화합물의 제조법에 대하여 설명한다:

본 발명 화합물(I)은, 예를 들어 하기의 제조법 또는 실시예에 나타내는 방법 등에 의해 제조할 수 있다. 단, 본 발명 화합물(I)의 제조법은, 이들 반응 예에 한정되는 것은 아니다.

[식 중, P₁은 수산기의 보호기, L₁ 및 L₂는 탈리기를, m₁은 0-1을 나타내고; R₂, R₃, R₄, m 및 n은, 상기와 동의임]

(공정 a)

본 공정은, 화학식 (II)로 표시되는 화합물 및 (III)으로 표시되는 화합물을 사용하여, 염기 존재 하, 화학식 (IV)로 표시되는 화합물을 제조하는 공정이다.

화학식 (II)로 표시되는 화합물에 있어서, L₁로 표시되는 탈리기로서는, 브롬 원자 또는 요오드 원자를 들 수 있다. 당해 화학식 (II)로 표시되는 화합물은, 시판품이거나, 또는 공지된 방법에 준하여 제조할 수 있다. 화학식 (III)에서, P₁로 나타내는 수산기의 보호기로서는 tert-부틸디메틸실릴기, tert-부틸디페닐실릴기, 트리에틸실릴기 등을 들 수 있고, L₂로 나타내는 탈리기로서는, 예를 들어 브롬 원자, 요오드 원자, 메탄술폰산에스테르, p-톨루엔술폰산에스테르 등을 들 수 있다. 당해 화학식 (III)으로 표시되는 화합물은, 시판품이거나, 또는 공지된 방법에 준하여 제조할 수 있다. 화학식 (III)으로 표시되는 화합물은, 화학식 (II)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 10몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 5몰로 사용할 수 있다.

염기로서는, 탄산수소나트륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 수산화세슘, 수소화나트륨, 수소화칼륨 등의 무기 염기나 트리메틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, 피리딘, 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘, 루티딘, 콜리딘 등의 유기 아민류를 들 수 있고, 염기의 사용량으로서는, 화학식 (II)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 100몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 10몰이다.

용매로서는 N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 디메틸술폭시드, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, N-메틸피롤리딘-2-온, 아세토니트릴 등을 단일 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 반응 시간은 0.1 내지 100시간이며, 바람직하게는 0.5 내지 24시간이다. 반응 온도로서는 0℃ 내지 용매가 비등하는 온도이며, 바람직하게는 0 내지 100℃이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (IV)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 b)

본 공정은, 화학식 (IV)로 표시되는 화합물과, 암모니아 또는 그의 염을 반응시켜서, 화학식 (V)로 표시되는 화합물을 제조하는 방법이다.

본 공정에서 사용되는 암모니아 또는 그의 염의 양은, 화학식 (IV)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여, 통상 등몰 내지 과잉몰이다.

반응 용매는, 반응에 지장이 없는 것이면, 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 물, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, tert-부틸알코올, 테트라히드로푸란, 1,2-디메톡시에탄, 1,4-디옥산, N,N-디메틸포름아미드, N-메틸피롤리딘-2-온, 디메틸술폭시드 등 또는 그의 혼합 용매 등이 적합하다.

반응 온도는, 통상 0 내지 200℃, 바람직하게는 실온 내지 150℃이다. 반응 시간은, 통상 5분 내지 7일간, 바람직하게는 30분 내지 24시간이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (V)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 c)

본 공정은, 화학식 (V)로 표시되는 화합물을, 3-퀴놀린붕소산 또는 3-퀴놀린붕소산에스테르와 커플링 반응시킴으로써, 화학식 (VI)으로 표시되는 화합물을 제조하는 방법이다.

본 공정은, 통상 공지된 방법(예를 들어, Chemical Reviews, Vol.95, p.2457,1995)에 준하여 행할 수 있으며, 예를 들어 전이 금속 촉매 및 염기 존재 하, 반응에 악영향을 미치지 않는 용매 중에서 실시할 수 있다.

3-퀴놀린붕소산 또는 3-퀴놀린붕소산에스테르의 사용량은, 화학식 (V)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 10몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 3몰이다.

전이 금속 촉매로서는, 예를 들어 팔라듐 촉매(예, 아세트산팔라듐, 염화팔라듐, 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐, 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드, 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0) 등), 니켈 촉매(예, 염화니켈 등) 등이 사용되고, 필요에 따라, 리간드(예, 트리페닐포스핀, 트리-tert-부틸포스핀, 2-디시클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필비페닐 등)를 첨가하고, 금속 산화물(예, 산화구리, 산화은 등) 등을 공촉매로서 사용해도 된다. 전이 금속 촉매의 사용량은, 촉매의 종류에 따라 상이하지만, 화학식 (V)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여, 통상 0.0001 내지 1몰, 바람직하게는 0.01 내지 0.5몰, 리간드의 사용량은, 화학식 (V)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여, 통상 0.0001 내지 4몰, 바람직하게는 0.01 내지 2몰, 공촉매의 사용량은, 화학식 (V)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여, 통상 0.0001 내지 4몰, 바람직하게는 0.01 내지 2몰이다.

염기로서는, 예를 들어 유기 아민류(예, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, 1,8-디아자비시클로[5,4,0]운데카-7-엔, 피리딘, N,N-디메틸아닐린 등), 알칼리 금속염(예, 탄산수소나트륨, 탄산수소칼륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 인산나트륨, 인산칼륨, 수산화나트륨, 수산화칼륨 등), 금속 수소화물(예, 수소화칼륨, 수소화나트륨 등), 알칼리 금속 알콕시드(예, 나트륨메톡시드, 나트륨에톡시드, 나트륨tert-부톡시드, 칼륨tert-부톡시드 등), 알칼리 금속 디실라지드(예, 리튬디실라지드, 나트륨디실라지드, 칼륨디실라지드 등) 등을 들 수 있다. 그 중에서도, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 인산나트륨, 인산칼륨 등의 알칼리 금속염, 나트륨tert-부톡시드, 칼륨tert-부톡시드 등의 알칼리 금속 알콕시드, 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민 등의 유기 아민류 등이 적합하다. 염기의 사용량은, 화학식 (V)로 표시되는 화합물 1몰 대하여, 통상 0.1 내지 10몰, 바람직하게는 1 내지 5몰이다.

용매로서는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되며, 예를 들어 탄화수소류(예, 벤젠, 톨루엔, 크실렌 등), 할로겐화 탄화수소류(예, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류(예, 아세토니트릴 등), 에테르류(예, 1,2-디메톡시에탄, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산 등), 알코올류(예, 메탄올, 에탄올 등), 비프로톤성 극성 용매(예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포릴아미드 등), 물 또는 그것들의 혼합 용매 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 내지 100시간이며, 바람직하게는 0.5 내지 24시간이다. 반응 온도로서는 0℃ 내지 용매가 비등하는 온도이며, 바람직하게는 20 내지 150℃이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (VI)으로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 d)

본 공정은 화합물(VI)에, N-브로모숙신이미드를 작용시킴으로써 브로모화하여, 화합물(VII)을 얻는 방법이다.

할로겐화의 방법으로서는, 국제 공개 WO2006/102079호 팸플릿에 기재된 방법 또는 이들 방법에 준하는 방법에 의해 제조할 수 있다.

본 공정에서 사용되는 N-브로모숙신이미드의 양은, 화학식 (VI)으로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 0.5 내지 2.0몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 0.9 내지 1.2몰이다.

반응 용매는, 반응에 지장이 없는 것이면, 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, N,N-디메틸포름아미드, N-메틸피롤리딘-2-온 등 또는 그의 혼합 용매 등이 적합하다.

반응 온도는, 통상 -20 내지 50℃, 바람직하게는 0℃ 내지 실온이다. 반응 시간은, 통상 1분 내지 2일간, 바람직하게는 5분 내지 12시간이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (VII)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 e)

본 공정은, 화학식 (VII)로 표시되는 화합물에 유기 보란 시약을 작용시켜 계 내에서 알킬보란 중간체를 제조한 후, 전이 금속 촉매 및 염기 존재 하, 화학식 (VIII)로 표시되는 화합물을 제조하는 공정이다.

본 공정은, 통상 공지된 방법(예를 들어 국제 공개 WO2006/102079호)에 준하여 행할 수 있다.

유기 보란 시약으로서는 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난), 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난) 다이머, 디시아밀보란(비스(1,2-디메틸프로필)보란), 섹실보란((1,1,2-트리메틸프로필)보란) 등을 들 수 있다. 바람직하게는, 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난) 또는 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난) 다이머이며, 특히 바람직하게는 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난)이다. 당해 유기 보란 시약의 사용량은, 알킬보란 중간체가 생성되면 특별히 한정되지 않지만, 화학식 (VII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 20몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 반응의 진행 용이성의 관점에서 6 내지 10몰이다.

전이 금속 촉매로서는, 예를 들어 2가 팔라듐 촉매(예, 아세트산팔라듐, 염화팔라듐, 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 등)를 사용할 수 있고, 필요에 따라, 리간드(예, 트리페닐포스핀, 트리-tert-부틸포스핀 등)를 첨가할 수 있다. 전이 금속 촉매의 사용량은, 촉매의 종류에 따라 상이하지만, 화학식 (VII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여, 통상 0.0001 내지 1몰, 바람직하게는 0.01 내지 0.5몰, 리간드의 사용량은, 화학식 (VII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여, 통상 0.0001 내지 4몰, 바람직하게는 0.01 내지 2몰이다.

또한, 전이 금속 촉매로서는, 예를 들어 0가의 팔라듐 촉매를 사용할 수도 있다. 0가의 팔라듐 촉매로서는, 예를 들어 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(0), 트리(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0), 팔라듐탄소(0) 등을 사용할 수 있다. 바람직하게는, 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(0) 또는 트리(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)이며, 특히 바람직하게는 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(0)이다. 0가의 팔라듐 촉매의 사용량은, 분자내 환화 반응이 진행하면 특별히 한정되지 않고, 촉매의 종류에 따라서도 상이한데, 화학식 (VII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 0.0001 내지 1몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 0.01 내지 0.5몰이다.

0가의 팔라듐 촉매와 함께, 필요에 따라서 또한 배위자를 첨가할 수 있다. 배위자로서는, 예를 들어 트리페닐포스핀, 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센, 트리-tert-부틸포스핀, 트리시클로헥실포스핀, 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디메톡시비페닐, 2-디시클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필비페닐, 2-(디-tert-부틸포스피노)비페닐, 2-디시클로헥실포스피노-2'-(N,N-디메틸아미노)비페닐, 4,5'-비스(디페닐포스피노)-9,9'-디메틸크산텐 등을 들 수 있다. 0가의 팔라듐 촉매로서 트리(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)을 사용한 경우에는, 배위자로서 트리페닐포스핀을 첨가할 수 있다. 배위자의 사용량은, 분자내 환화 반응이 진행하면 특별히 한정되지 않지만, 화학식 (VII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 0.0001 내지 4몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 0.01 내지 2몰이다.

염기로서는, 탄산수소나트륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 알칼리 금속 수산화물 등의 무기 염기류를 들 수 있다. 바람직하게는 알칼리 금속 수산화물이다. 알칼리 금속 수산화물로서는, 수산화리튬, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화세슘 등을 들 수 있고, 바람직하게는 수산화리튬, 수산화나트륨, 수산화칼륨 또는 수산화세슘이며, 특히 바람직하게는 수산화리튬 또는 수산화나트륨이다. 염기의 사용량으로서는, 반응이 진행하면 특별히 한정되지 않지만, 화학식 (VII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 100몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 2 내지 20몰이다. 또한, 알칼리 금속 수산화물은, 알칼리 금속 수산화물 수용액으로서 사용할 수 있다.

유기 보란 시약, 알칼리 금속 수산화물, 0가의 팔라듐 촉매의 조합은, 바람직한 유기 보란 시약, 알칼리 금속 수산화물, 0가의 팔라듐 촉매를 조합한 것이 바람직하고, 특히 바람직한 유기 보란 시약, 알칼리 금속 수산화물, 0가의 팔라듐 촉매를 조합한 것이 특히 바람직하다.

용매로서는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이라면 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 탄화수소류(예, 벤젠, 톨루엔, 크실렌 등), 에테르류(예, 1,2-디메톡시에탄, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산 등), 비프로톤성 극성 용매(예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포릴아미드 등), 물 또는 그들의 혼합물 등을 사용할 수 있다. 바람직하게는 1,2-디메톡시에탄 또는 테트라히드로푸란이며, 특히 바람직하게는 유기 보란 시약 및 생성된 알킬보란 중간체의 안정성 관점에서 테트라히드로푸란이다. 용매의 사용량은 반응이 진행되면 특별히 한정되지 않지만, 화학식 (VII)로 표시되는 화합물의 중량에 대하여 1 내지 300배 사용할 수 있고, 바람직하게는 10 내지 96배이다.

반응 시간으로서는 최종적으로 화학식 (VIII)로 표시되는 화합물이 얻어지면 특별히 한정되지 않지만, 0.1 내지 100시간 행할 수 있고, 바람직하게는 0.5 내지 24시간이다.

반응 온도로서는 최종적으로 화학식 (VIII)로 표시되는 화합물이 얻어지면 특별히 한정되지 않지만, -20℃ 내지 용매가 비등하는 온도에서 행할 수 있고, 바람직하게는 0℃ 내지 150℃이다. 알킬보란 중간체에 대한 0가 팔라듐 촉매와 알칼리 금속 수산화물 수용액을 사용한 분자내 환화 반응에서, 반응 온도가 낮으면 부반응이 발생하기 쉬워 수율 저하를 초래하는 경우가 있으므로, 61℃ 이상이 바람직하다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (VIII)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

또한 본 공정에서는, 계 내에서 알킬보란 중간체가 생성되어 있는 것을 확인할 수도 있다. 확인 방법으로서는, 예를 들어 LCMS 스펙트럼으로 확인할 수 있다.

(공정 f)

본 공정은, 화학식 (VIII)로 표시되는 화합물의 수산기의 보호를 탈보호하여 화학식 (IX)로 표시되는 화합물을 제조하는 공정이다.

탈보호의 방법으로서는, 통상 공지된 방법, 예를 들어 Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene, John Wiley & Sons(1981년)에 기재된 방법, 또는 그것에 준하는 방법에 의해 행할 수 있다.

보호기로서 tert-부틸디메틸실릴기를 사용한 경우, 탈보호 시약에는 테트라부틸암모늄플루오라이드를 들 수 있다. 시약의 사용량은, 화합물(VIII) 1몰에 대하여 바람직하게는 1 내지 10몰이다.

반응에 사용하는 용매로서는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되며, 예를 들어 에테르류(예를 들어, 1,2-디메톡시에탄, 테트라히드로푸란 등), 비프로톤성 극성 용매(예를 들어, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포릴아미드 등) 또는 그것들의 혼합 용매가 사용된다. 반응 시간은 0.1 내지 100시간이며, 바람직하게는 0.5 내지 24시간이다. 반응 온도로서는 0 내지 80℃이며, 바람직하게는 0 내지 50℃이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (IX)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 g)

본 공정은, 화학식 (IX)로 표시되는 화합물에 메탄술포닐클로라이드를 작용시켜 화학식 (X)으로 표시되는 화합물을 제조하는 공정이다.

메탄술포닐클로라이드의 사용량은, 화학식 (IX)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 5몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 2몰이다.

염기로서는, 트리메틸아민, 트리에틸아민, 트리프로필아민, 디이소프로필에틸아민, N-메틸모르폴린, 피리딘, 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘, 루티딘, 콜리딘 등의 유기 아민류를 들 수 있고, 염기의 사용량으로서는, 화학식 (IX)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 10몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 5몰이다.

용매로서는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되며, 예를 들어 탄화수소류(예, 벤젠, 톨루엔, 크실렌 등), 할로겐화 탄화수소류(예, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류(예, 아세토니트릴 등), 에테르류(예, 1,2-디메톡시에탄, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산 등), 알코올류(예, 메탄올, 에탄올 등), 비프로톤성 극성 용매(예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포릴아미드 등) 또는 그것들의 혼합 용매 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 내지 24시간이며, 바람직하게는 0.1 내지 12시간이다. 반응 온도로서는 -20℃ 내지 용매가 비등하는 온도이며, 바람직하게는 0℃ 내지 실온이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (X)으로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 h)

본 공정은, 화학식 (X)으로 표시되는 화합물에 아지화 나트륨을 작용시켜 화학식 (XI)로 표시되는 화합물을 제조하는 공정이다.

아지화 나트륨의 사용량은, 화학식 (X)으로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 10몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 5몰이다.

용매로서는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포릴아미드 등 또는 그것들의 혼합 용매 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 내지 24시간이며, 바람직하게는 0.5 내지 12시간이다. 반응 온도로서는 실온 내지 용매가 비등하는 온도이며, 바람직하게는 50℃ 내지 100℃이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (XI)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 i)

본 공정은, 화학식 (XI)로 표시되는 화합물에 트리페닐포스핀 존재 하, 함수 용매 중, 화학식 (XII)로 표시되는 화합물을 제조하는 공정이다.

트리페닐포스핀은 일반적으로 사용되는 시약 이외에, 고상 담지형 시약도 사용할 수 있다. 트리페닐포스핀의 사용량은, 화학식 (XI)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 10몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 5몰이다.

용매로서는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되고, 테트라히드로푸란/물, 1,4-디옥산/물 등을 들 수 있다. 반응 시간은 0.1 내지 24시간이며, 바람직하게는 0.5 내지 12시간이다. 반응 온도로서는 실온 내지 용매가 비등하는 온도이며, 바람직하게는 50℃ 내지 용매가 비등하는 온도이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (XII)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 j)

본 공정은, 화학식 (XII)로 표시되는 화합물과 α,β-불포화 카르복실산 또는 α,β-불포화산클로라이드 또는 브로마이드와의 아미드화 반응에 의해, 화학식 (I-a)로 표시되는 본 발명 화합물을 제조하는 공정이다.

아미드화 시약으로서 카르복실산을 사용하는 경우, 적당한 축합제의 존재 하, 화학식 (XII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 카르복실산을 0.5 내지 10몰, 바람직하게는 1 내지 3몰 사용하여 행하여진다. 또한, 당해 카르복실산은, 시판품, 또는 공지된 방법에 준하여 제조할 수 있다.

반응 용매는, 반응에 지장이 없는 것이면, 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 톨루엔, 벤젠, 염화메틸렌, 클로로포름, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸아세트아미드, N-메틸피롤리딘-2-온, 디메틸술폭시드 등 또는 그의 혼합 용매 등이 적합하다. 반응 온도는, 통상, -78 내지 200℃, 바람직하게는 0 내지 50℃이다. 반응 시간은, 통상 5분 내지 3일간, 바람직하게는 5분 내지 10시간이다.

축합제로서는, 예를 들어 디페닐인산아지드, N,N'-디시클로헥실카르보디이미드, 벤조트리아졸-1-일옥시-트리스디메틸아미노포스포늄염, 4-(4,6-디메톡시-1,3,5-트리아진-2-일)-4-메틸모르폴리늄클로라이드, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드, 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)카르보디이미드와 1-히드록시 벤조트리아졸의 조합, 2-클로로-1,3-디메틸이미다졸리늄클로라이드, O-(7-아자벤조트리아조-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸헥사우로늄헥사플루오로포스페이트 등을 들 수 있다.

또한, 상기 반응은 필요에 따라서 염기를 첨가할 수 있다. 염기로서는, 예를 들어 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 피리딘, 루티딘, 콜리딘, 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘, 칼륨tert-부티레이트, 나트륨tert-부티레이트, 나트륨메톡시드, 나트륨에톡시드, 리튬헥사메틸디시라지드, 나트륨헥사메틸디실라지드, 칼륨헥사메틸디실라지드, 부틸리튬 등의 유기 염기, 또는 탄산수소나트륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 수산화나트륨, 수소화나트륨 등의 무기 염기를 들 수 있다. 첨가량으로서는, 화학식 (XII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 100몰이며, 바람직하게는 1 내지 10몰이다.

아미드화 시약으로서 산 클로라이드 또는 산 브로마이드를 사용하는 경우, 화학식 (XII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 산 할라이드를 0.5 내지 5몰, 바람직하게는 0.9 내지 1.1몰 사용하여 행하여진다. 또한, 당해 산 할라이드는, 시판품, 또는 공지된 방법에 준하여 제조할 수 있다.

반응 용매는, 반응에 지장의 없는 것이면, 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 톨루엔, 벤젠, 염화메틸렌, 클로로포름, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸아세트아미드, N-메틸피롤리딘-2-온, 아세토니트릴, 물 등 또는 그의 혼합 용매 등이 적합하다. 반응 온도는, 통상 -78 내지 200℃, 바람직하게는 0 내지 50℃이다. 반응 시간은, 통상 5분 내지 3일간, 바람직하게는 5분 내지 10시간이다.

또한, 상기 반응은 필요에 따라서 염기를 첨가할 수 있다. 염기로서는, 예를 들어 트리에틸아민, 디이소프로필에틸아민, 피리딘, 루티딘, 콜리딘, 4-(N,N-디메틸아미노)피리딘, 칼륨tert-부티레이트, 나트륨tert-부티레이트, 나트륨메톡시드, 나트륨에톡시드, 리튬헥사메틸디실라지드, 나트륨헥사메틸디실라지드, 칼륨헥사메틸디실라지드, 부틸리튬 등의 유기 염기, 또는 탄산수소나트륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 수산화나트륨, 수소화 나트륨 등의 무기 염기를 들 수 있다. 첨가량으로서는, 화학식 (XII)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 100몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 20몰이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (I-a)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제할 수 있다.

[식 중, R₁, R₂, R₃, R₄, m 및 n은, 상기와 동의임]

(공정 k)

본 공정은, 화학식 (X)으로 표시되는 화합물에 알킬아민을 작용시켜 화학식 (XIV)로 표시되는 화합물을 제조하는 공정이다.

알킬아민의 사용량은, 화학식 (X)으로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 2 내지 과잉몰 사용할 수 있다.

용매로서는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되며, 예를 들어 탄화수소류(예, 벤젠, 톨루엔, 크실렌 등), 할로겐화 탄화수소류(예, 클로로포름, 1,2-디클로로에탄 등), 니트릴류(예, 아세토니트릴 등), 에테르류(예, 1,2-디메톡시에탄, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산 등), 비프로톤성 극성 용매(예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포릴아미드 등) 또는 그것들의 혼합 용매 등을 들 수 있다. 반응 시간은, 0.1 내지 100시간이며, 바람직하게는 1 내지 24시간이다. 반응 온도로서는 실온 내지 용매가 비등하는 온도이며, 바람직하게는 50℃ 내지 용매가 비등하는 온도이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (XIV)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 l)

본 공정은, 공정 j와 마찬가지의 방법에 의해 행할 수 있다.

[식 중, P₂는 아미노기의 보호기, L₁은 탈리기, m₁은 0-1을 나타내고; R₁, R₂, R₃, R₄, m 및 n은, 상기와 동의임]

(공정 m)

본 공정은, 화학식 (II)로 표시되는 화합물 및 화학식 (XV)로 표시되는 화합물을 사용하여, 미츠노부 반응에 의해 화학식 (XVI)으로 표시되는 화합물을 제조하는 방법이다.

화학식 (II)로 표시되는 화합물에 있어서, L₁로 표시되는 탈리기로서는, 브롬 원자 또는 요오드 원자를 들 수 있다. 당해 화학식 (II)로 표시되는 화합물은, 시판품이거나, 또는 공지된 방법에 준하여 제조할 수 있다. 화학식 (XV)에서, P₂로 나타내는 아미노기의 보호기로서는 tert-부톡시카르보닐기, 벤조일기 등을 들 수 있다. 당해 화학식 (XV)로 표시되는 화합물은, 시판품이거나, 또는 공지된 방법에 준하여 제조할 수 있다. 화학식 (XV)로 표시되는 화합물은, 화학식 (II)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 10몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 5몰 사용할 수 있다.

미츠노부 반응의 방법으로서는, 통상 공지된 방법(예를 들어, Synthesis, p.1, 1981)에 기재된 방법, 또는 그것에 준하는 방법에 의해 행할 수 있다.

아조디카르본산에스테르로서는, 아조디카르본산디에틸, 아조디카르본산디이소프로필 등이 사용되고, 아조디카르본산에스테르의 사용량으로서는, 화학식 (II)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 10몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 5몰 사용할 수 있다.

포스핀 화합물로서는, 트리페닐포스핀, 트리부틸포스핀 등이 사용되고, 포스핀 화합물의 사용량으로서는, 화학식 (II)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 10몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 1 내지 5몰 사용할 수 있다.

용매로서는, 테트라히드로푸란, 1,2-디메톡시에탄, 1,4-디옥산, 톨루엔, N,N-디메틸포름아미드, N,N-디메틸아세트아미드, 디메틸술폭시드, N-메틸피롤리딘-2-온 등을 단일 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 반응 시간은, 0.1 내지 100시간이며, 바람직하게는 0.1 내지 24시간이다. 반응 온도로서는, 0℃ 내지 용매가 비등하는 온도이며, 바람직하게는 0℃ 내지 100℃이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (XVI)으로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 n)

본 공정은, 화학식 (XVI)으로 표시되는 화합물과, 암모니아 또는 그의 염을 반응시켜서, 화학식 (XVII)로 표시되는 화합물을 제조하는 방법이다.

본 공정은, 공정 b와 마찬가지의 방법에 의해 행할 수 있다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (XVII)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 o)

본 공정은, 화학식 (XVII)로 표시되는 화합물을, 3-퀴놀린붕소산 또는 3-퀴놀린붕소산에스테르와 커플링 반응시킴으로써, 화학식 (XVIII)로 표시되는 화합물을 제조하는 방법이다.

본 공정은, 공정 c와 마찬가지의 방법에 의해 행할 수 있다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (XVIII)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 p)

본 공정은 화합물(XVIII)에, N-브로모숙신이미드를 반응시킴으로써 브로모화하여, 화합물(XIX)을 제조하는 방법이다.

본 공정은, 공정 d와 마찬가지의 방법에 의해 행할 수 있다. 이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (XIX)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 q)

본 공정은, 화학식 (XIX)로 표시되는 화합물에 유기 보란 시약을 작용시켜, 계 내에서 알킬 보란 중간체를 제조한 후, 전이 금속 촉매 및 염기 존재 하, 화학식 (XX)으로 표시되는 화합물을 제조하는 공정이다.

유기 보란 시약으로서는 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난), 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난) 다이머, 디시아밀보란(비스(1,2-디메틸프로필)보란), 섹실보란((1,1,2-트리메틸프로필)보란) 등을 들 수 있다. 바람직하게는, 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난) 또는 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난) 다이머이며, 특히 바람직하게는 9-BBN(9-보라비시클로[3.3.1]-노난)이다. 당해 유기 보란 시약의 사용량은, 알킬 보란 중간체가 생성되면 특별히 한정되지 않지만, 화학식 (XIX)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 20몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 반응의 진행 용이성의 관점에서 6 내지 10몰이다.

전이 금속 촉매로서는, 예를 들어 2가 팔라듐 촉매(예, 아세트산팔라듐, 염화팔라듐, 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 등)를 사용할 수 있고, 필요에 따라, 리간드(예, 트리페닐포스핀, 트리-tert-부틸포스핀 등)를 첨가할 수 있다. 전이 금속 촉매의 사용량은, 촉매의 종류에 따라 상이하지만, 화학식 (XIX)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여, 통상 0.0001 내지 1몰, 바람직하게는 0.01 내지 0.5몰, 리간드의 사용량은, 화학식 (XIX)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여, 통상 0.0001 내지 4몰, 바람직하게는 0.01 내지 2몰이다.

또한, 전이 금속 촉매로서는, 예를 들어 0가의 팔라듐 촉매를 사용할 수도 있다. 0가의 팔라듐 촉매로서는, 예를 들어 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(0), 트리(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0), 팔라듐탄소(0) 등을 사용할 수 있다. 바람직하게는, 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(0) 또는 트리(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)이며, 특히 바람직하게는 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(0)이다. 0가의 팔라듐 촉매의 사용량은, 분자내 환화 반응이 진행되면 특별히 한정되지 않고, 촉매의 종류에 따라서도 상이하지만, 화학식 (XIX)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 0.0001 내지 1몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 0.01 내지 0.5몰이다.

0가의 팔라듐 촉매와 함께, 필요에 따라서 또한 배위자를 첨가할 수 있다. 배위자로서는, 예를 들어 트리페닐포스핀, 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센, 트리-tert-부틸포스핀, 트리시클로헥실포스핀, 2-디시클로헥실포스피노-2',6'-디메톡시비페닐, 2-디시클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필비페닐, 2-(디-tert-부틸포스피노)비페닐, 2-디시클로헥실포스피노-2'-(N,N-디메틸아미노)비페닐, 4,5'-비스(디페닐포스피노)-9,9'-디메틸크산텐 등을 들 수 있다. 0가의 팔라듐 촉매로서 트리(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)을 사용한 경우에는, 배위자로서 트리페닐포스핀을 첨가할 수 있다. 배위자의 사용량은, 분자내 환화 반응이 진행되면 특별히 한정되지 않지만, 화학식 (XIX)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 0.0001 내지 4몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 0.01 내지 2몰이다.

염기로서는, 탄산수소나트륨, 탄산나트륨, 탄산칼륨, 탄산세슘, 알칼리 금속 수산화물 등의 무기 염기류를 들 수 있다. 바람직하게는 알칼리 금속 수산화물이다. 알칼리 금속 수산화물로서는, 수산화리튬, 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화세슘 등을 들 수 있고, 바람직하게는 수산화리튬, 수산화나트륨, 수산화칼륨 또는 수산화세슘이며, 특히 바람직하게는 수산화리튬 또는 수산화나트륨이다. 염기의 사용량으로서는, 반응이 진행되면 특별히 한정되지 않지만, 화학식 (XIX)로 표시되는 화합물 1몰에 대하여 1 내지 100몰 사용할 수 있고, 바람직하게는 2 내지 20몰이다. 또한, 알칼리 금속 수산화물은, 알칼리 금속 수산화물 수용액으로서 사용할 수 있다.

용매로서는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 탄화수소류(예, 벤젠, 톨루엔, 크실렌 등), 에테르류(예, 1,2-디메톡시에탄, 테트라히드로푸란, 1,4-디옥산 등), 비프로톤성 극성 용매(예, N,N-디메틸포름아미드, 디메틸술폭시드, 헥사메틸포스포릴아미드 등), 물 또는 그들의 혼합물 등을 사용할 수 있다. 바람직하게는 1,2-디메톡시에탄 또는 테트라히드로푸란이며, 특히 바람직하게는 유기 보란 시약 및 생성된 알킬보란 중간체의 안정성 관점에서 테트라히드로푸란이다. 용매의 사용량은 반응이 진행되면 특별히 한정되지 않지만, 화학식 (XIX)로 표시되는 화합물의 중량에 대하여 1 내지 300배 사용할 수 있고, 바람직하게는 10 내지 96배이다.

반응 시간으로서는 최종적으로 화학식 (XX)으로 표시되는 화합물이 얻어지면 특별히 한정되지 않지만, 0.1 내지 100시간 행할 수 있고, 바람직하게는 0.5 내지 24시간이다.

반응 온도로서는 최종적으로 화학식 (XX)으로 표시되는 화합물이 얻어지면 특별히 한정되지 않지만, -20℃ 내지 용매가 비등하는 온도에서 행할 수 있고, 바람직하게는 0℃ 내지 150℃이다. 알킬보란 중간체에 대한 0가 팔라듐 촉매와 알칼리 금속 수산화물 수용액을 사용한 분자내 환화 반응에서, 반응 온도가 낮으면 부반응이 발생하기 쉬워 수율 저하를 초래하는 경우가 있으므로, 61℃ 이상이 바람직하다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (XX)으로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 r)

본 공정은, 화학식 (XX)으로 표시되는 화합물의 아미노기의 보호를 탈보호하여 화학식 (XXI)로 표시되는 화합물을 제조하는 공정이다.

보호기로서 tert-부톡시카르보닐기를 사용한 경우, 탈보호 시약에는 염산, 황산, 메탄술폰산, 트리플루오로아세트산 등을 들 수 있다. 시약의 사용량은, 화합물(XX) 1몰에 대하여 바람직하게는 1 내지 100몰이다.

반응에 사용하는 용매로서는, 반응에 악영향을 미치지 않는 것이면 되며, 예를 들어 물, 메탄올, 에탄올, 염화메틸렌, 클로로포름 등 또는 그것들의 혼합 용매가 사용된다. 반응 시간은 0.1 내지 100시간이며, 바람직하게는 0.5 내지 24시간이다. 반응 온도로서는 0℃ 내지 용매가 비등하는 온도이다.

이와 같이 하여 얻어지는 화학식 (XXI)로 표시되는 화합물은, 공지된 분리 정제 수단, 예를 들어 농축, 감압 농축, 결정화, 용매 추출, 재침전, 크로마토그래피 등에 의해 단리 정제하거나 또는 단리 정제하지 않고, 다음 공정에 사용할 수 있다.

(공정 s)

본 공정은, 공정 j와 마찬가지의 방법에 의해 행할 수 있다.

상기 제조법 1 내지 3에서, 아미노기, 이미노기, 수산기, 카르복실기, 카르보닐기 및 아미드기, 및 인돌과 같은 활성 프로톤을 갖는 관능기 등은, 각 제조법에서의 적절한 공정에서, 보호된 시약을 사용하거나, 통상법에 따라서, 당해 관능기에 보호기를 도입한 후, 당해 보호기를 제거할 수 있다.

「아미노기 또는 이미노기의 보호기」로서는, 그 기능을 갖는 것이라면 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 벤질기, p-메톡시벤질기, 3,4-디메톡시벤질기, o-니트로벤질기, p-니트로벤질기, 벤즈히드릴기, 트리틸기, 쿠밀기 등의 아르알킬기; 예를 들어 포르밀기, 아세틸기, 프로피오닐기, 부티릴기, 피발로일기, 트리플루오로아세틸기, 트리클로로아세틸기 등의 저급 알카노일기; 예를 들어 벤조일기; 예를 들어 페닐아세틸기, 페녹시아세틸기 등의 아릴알카노일기; 예를 들어 메톡시카르보닐기, 에톡시카르보닐기, 프로필옥시카르보닐기, tert-부톡시카르보닐기 등의 저급 알콕시카르보닐기; 예를 들어 p-니트로벤질옥시카르보닐기, 페네틸옥시카르보닐기 등의 아르알킬옥시카르보닐기; 예를 들어 트리메틸실릴기, tert-부틸디메틸실릴기 등의 저급 알킬실릴기; 예를 들어 테트라히드로피라닐기; 예를 들어 트리메틸실릴에톡시메틸기; 예를 들어 메틸술포닐기, 에틸술포닐기, tert-부틸술포닐기 등의 저급 알킬술포닐기 등; 예를 들어 tert-부틸술피닐기 등의 저급 알킬술피닐기 등; 예를 들어 벤젠술포닐기, 톨루엔술포닐기 등의 아릴술포닐기 등, 예를 들어 프탈이미드기 등의 이미드기를 들 수 있고, 특히 트리플루오로아세틸기, 아세틸기, tert-부톡시카르보닐기, 벤질옥시카르보닐기, 트리메틸실릴에톡시메틸기, 쿠밀기 등이 바람직하다.

「수산기의 보호기」로서는, 그 기능을 갖는 것이면 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, tert-부틸기 등의 저급 알킬기; 예를 들어 트리메틸실릴기, tert-부틸디메틸실릴기 등의 저급 알킬실릴기; 예를 들어 메톡시메틸기, 2-메톡시에톡시메틸기 등의 저급 알콕시메틸기; 예를 들어 테트라히드로피라닐기; 예를 들어 트리메틸실릴에톡시메틸기; 예를 들어 벤질기, p-메톡시벤질기, 2,3-디메톡시벤질기, o-니트로벤질기, p-니트로벤질기, 트리틸기 등의 아르알킬기; 예를 들어 포르밀기, 아세틸기, 트리플루오로아세틸기 등의 아실기 등을 들 수 있고, 특히 메틸기, 메톡시메틸기, 테트라히드로피라닐기, 트리메틸실릴에톡시메틸기, tert-부틸디메틸실릴기, 아세틸기 등이 바람직하다.

「카르복실기의 보호기」로서는, 그 기능을 갖는 것이면 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, tert-부틸기 등의 저급 알킬기; 예를 들어 2,2,2-트리클로로에틸기 등의 할로 저급 알킬기; 예를 들어 알릴기 등의 저급 알케닐기; 예를 들어 트리메틸실릴에톡시메틸기; 예를 들어 벤질기, p-메톡시벤질기, p-니트로벤질기, 벤즈히드릴기, 트리틸기 등의 아르알킬기 등을 들 수 있고, 특히 메틸기, 에틸기, tert-부틸기, 알릴기, 벤질기, p-메톡시벤질기, 트리메틸실릴에톡시메틸기; 등이 바람직하다.

「카르보닐기의 보호기」로서는, 그 기능을 갖는 것이면 특별히 한정되지 않지만, 예를 들어 에틸렌케탈, 트리메틸렌케탈, 디메틸케탈 등의 아세탈, 케탈 등을 들 수 있다.

보호기의 제거법은, 당해 보호기의 종류 및 목적 화합물(I)의 안정성 등에 따라 상이하지만, 예를 들어 문헌 기재된 방법[프로텍티브·그룹스·인·오가닉·신서시스(Protective Groups in Organic Synthesis), 제3판, T. W. 그린(T. W. Greene)저, John Wiley & Sons사(1999년) 참조] 또는 거기에 준하는 방법에 따라, 예를 들어 산 또는 염기를 사용하는 가용매 분해, 즉, 예를 들어 0.01몰 내지 대 과잉의 산, 바람직하게는 트리플루오로아세트산, 포름산, 염산 등, 또는 등몰 내지 대과잉의 염기, 바람직하게는 수산화칼륨, 수산화칼슘 등을 작용시키는 방법; 수소화 금속 착체 등을 사용하는 화학적 환원 또는 팔라듐-탄소 촉매, 레이니니켈 촉매 등을 사용하는 접촉 환원 등에 의해 행하여진다.

본 발명 화합물은, 통상의 분리 수단에 의해 용이하게 단리 정제할 수 있다. 관계되는 수단으로서는, 예를 들어 용매 추출, 재결정, 분취용 역상 고속 액체 크로마토그래피, 칼럼 크로마토그래피, 분취 박층 크로마토그래피 등을 예시할 수 있다.

본 발명 화합물이, 광학 이성체, 입체 이성체, 위치 이성체, 회전 이성체 등의 이성체를 갖는 경우에는, 특별히 명기하지 않는 한, 어떤 이성체나 혼합물이든 본 발명 화합물에 포함된다. 예를 들어, 본 발명 화합물에 광학 이성체가 존재하는 경우에는, 특별히 명기하지 않는 한, 라세미체로부터 분할된 광학 이성체도 본 발명 화합물에 포함된다. 이 이성체는, 자체 공지된 합성 방법, 분리 방법(농축, 용매 추출, 칼럼 크로마토그래피, 재결정 등)에 의해 각각을 단일 화합물로서 얻을 수 있다.

본 발명의 경우, 화학식 (1)에서 치환기 -NR₁-(C=O)-CR₂=C(R₃)R₄가 결합하는 탄소 원자는 비대칭 탄소가 되기 때문에 이성체를 갖게 된다. 상술한 바와 같이, 특별히 명기하지 않는 한, 본 발명 화합물에는, 각 에난티오머 및 이들의 혼합물 모두가 포함된다. 또한, 본 발명 화합물은, R체와 S체의 혼합물이며, R체가 90％ 이상의 것, 95％ 이상의 것, 99％ 이상의 것, S체가 90％ 이상의 것, 95％ 이상의 것, 99％ 이상의 것 등이어도 된다.

광학 분할의 방법으로서는, 예를 들어, 본 발명 화합물에 광학 분할제를 작용시켜서 염을 형성하고, 얻어진 염의 용해도 차 등을 이용하여 한쪽의 에난티오머를 분할하는 디아스테레오머법; 라세미체의 과포화 용액에, 결정의 종으로서 한쪽의 에난티오머를 첨가하는 우선 결정법; 키랄 컬럼을 사용한 HPLC 등의 칼럼 크로마토그래피 등을 들 수 있다. 디아스테레오머법에서 사용할 수 있는 광학 분할제로서는, 예를 들어 타르타르산, 말산, 락트산, 만델산, 10-캄포술폰산, 이들의 유도체 등의 산성 분할제; 브루신, 스트리크닌, 퀴닌 등의 알칼로이드 화합물, 아미노산 유도체, 신코니딘, α-메틸벤질아민 등의 염기성 분할제 중에서 적절히 선택할 수 있다. 또한, 본 발명 화합물을 각 에난티오머의 혼합물로서 얻은 후, 상기와 같이 광학 분할하는 방법뿐만 아니라, 본 발명 화합물의 합성 원료로서, 상기 방법 등에 의해 광학 분할한 에난티오머의 한쪽만을 사용함으로써도, 본 발명 화합물 중 에난티오머의 한쪽만을 얻을 수 있다. 또한, 상기 본 발명 화합물 또는 그 원료 화합물로서 에난티오머의 한쪽을 얻는 방법으로서는, 비대칭 탄소가 발생하는 반응 공정에서, 촉매 등의 반응 조건을 조정함으로써 에난티오머의 한쪽이 우선적으로 얻어지도록 하는 방법 등도 들 수 있다.

본 발명 화합물 또는 그의 염은, 결정이어도 되고, 결정형이 단일이거나 다형 혼합물이어도 본 발명 화합물 또는 그의 염에 포함된다. 결정은, 자체 공지된 결정화법을 적용하여, 결정화함으로써 제조할 수 있다. 본 발명 화합물 또는 그의 염은, 용매화물(예를 들어, 수화물 등)이거나 무용매화물이어도 되고, 모두 본 발명 화합물 또는 그의 염에 포함된다. 동위 원소(예를 들어, 3H, 14C, 35S, 125I 등) 등으로 표식된 화합물도, 본 발명 화합물 또는 그의 염에 포함된다.

본 발명 화합물 또는 그의 제조 중간체의 염이란, 유기 화학의 분야에서 사용되는 관용적인 것을 의미하며, 예를 들어 카르복실기를 갖는 경우의 당해 카르복실기에서의 염기 부가염 또는 아미노기 또는 염기성의 복소환 기를 갖는 경우의 당해 아미노기 또는 염기성 복소환 기에서의 산 부가염의 염류를 들 수 있다.

상기 염기 부가염으로서는, 예를 들어 나트륨염, 칼륨염 등의 알칼리 금속염; 예를 들어 칼슘염, 마그네슘염 등의 알칼리 토금속염; 예를 들어 암모늄염; 예를 들어 트리메틸아민염, 트리에틸아민염, 디시클로헥실아민염, 에탄올아민염, 디에탄올아민염, 트리에탄올아민염, 프로카인염, N,N'-디벤질에틸렌디아민염 등의 유기 아민염 등을 들 수 있다.

상기 산 부가염으로서는, 예를 들어 염산염, 황산염, 질산염, 인산염, 과염소산염 등의 무기산염; 예를 들어 아세트산염, 포름산염, 말레산염, 푸마르산염, 타르타르산염, 구연산염, 아스코르브산염, 트리플루오로아세트산염 등의 유기산염; 예를 들어 메탄술폰산염, 이세티온산염, 벤젠술폰산염, p-톨루엔술폰산염 등의 술폰산염 등을 들 수 있다.

본 발명 화합물 또는 그의 염은, 우수한 EGFR 저해 활성을 가져, 항종양제로서 유용하다. 또한, EGFR에 대한 우수한 선택성을 갖고 있으며, 다른 키나아제에 의한 부작용이 적다는 이점을 갖는다. 대상이 되는 암은 특별히 제한은 되지 않지만, 예를 들어 두경부암, 식도암, 위암, 결장암, 직장암, 간암, 담낭·담관암, 담도암, 췌장암, 폐암, 유방암, 난소암, 자궁경부암, 자궁체암, 신장암, 방광암, 전립선암, 정소 종양, 골·연부육종, 혈액암, 다발성 골수종, 피부암, 뇌종양, 중피종 등을 들 수 있고, 바람직하게는 두경부암, 위암, 결장암, 직장암, 간암, 췌장암, 폐암, 유방암, 난소암, 신장암, 전립선암이며, 특히 바람직하게는 폐암이다.

본 발명 화합물 또는 그의 염은 의약으로서 사용함에 있어서는, 필요에 따라 약학적 담체를 배합하여, 예방 또는 치료 목적에 따라 각종 투여 형태가 채용 가능하고, 상기 형태로서는, 예를 들어, 경구제, 주사제, 좌제, 연고제, 첩부제 등의 어느 것이든 좋으며, 바람직하게는 경구제가 채용된다. 이 투여 형태는, 각각 당업자에게 공지 관용의 제제 방법에 의해 제조할 수 있다.

약학적 담체로서는, 제제 소재로서 관용의 각종 유기 또는 무기 담체 물질이 사용되고, 고형 제재에서의 부형제, 결합제, 붕괴제, 활택제, 착색제, 액상 제재에서의 용제, 용해 보조제, 현탁화제, 등장화제, 완충제, 무통화제 등으로서 배합된다. 또한, 필요에 따라 방부제, 항산화제, 착색제, 감미제, 안정화제 등의 제제 첨가물을 사용할 수도 있다.

경구용 고형 제재를 제조하는 경우에는, 본 발명 화합물에 부형제, 필요에 따라 부형제, 결합제, 붕괴제, 활택제, 착색제, 교미·교취제 등을 첨가한 후, 통상법에 의해 정제, 피복 정제, 과립제, 산제, 캡슐제 등을 제조할 수 있다.

부형제로서는, 유당, 백당, D-만니톨, 포도당, 전분, 탄산칼슘, 카올린, 미결정 셀룰로오스, 무수 규산 등을 들 수 있다. 결합제로서는, 물, 에탄올, 1-프로판올, 2-프로판올, 심플 시럽, 포도당액, α-전분액, 젤라틴액, D-만니톨, 카르복시메틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 히드록시프로필스타치, 메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 셸락, 인산칼슘, 폴리비닐피롤리돈 등을 들 수 있다. 붕괴제로서는, 건조 전분, 알긴산나트륨, 한천 분말, 탄산수소나트륨, 탄산칼슘, 라우릴황산나트륨, 스테아르산모노글리세라이드, 유당 등을 들 수 있다. 활택제로서는, 정제 탈크, 스테아르산염 나트륨, 스테아르산마그네슘, 붕사, 폴리에틸렌글리콜 등을 들 수 있다. 착색제로서는, 산화티타늄, 산화철 등을 들 수 있다. 교미·교취제로서는 백당, 등피, 시트르산, 타르타르산 등을 들 수 있다.

경구용 액체 제제를 제조하는 경우에는, 본 발명 화합물에 교미제, 완충제, 안정화제, 교취제 등을 가하여 통상법에 의해 내복 액제, 시럽제, 엘릭시르제 등을 제조할 수 있다.

교미·교취제로서는, 상기에 예를 든 것이어도 좋고, 완충제로서는, 시트르산나트륨 등이, 안정제로서는, 트라간트, 아라비아 고무, 젤라틴 등을 들 수 있다. 필요에 따라, 장용성 코팅, 또는 효과의 지속을 목적으로, 경구 제제에 공지된 방법에 의해 코팅을 실시할 수도 있다. 이러한 코팅제에는 히드록시프로필메틸셀룰로오스, 에틸셀룰로오스, 히드록시메틸셀룰로오스, 히드록시프로필셀룰로오스, 폴리옥시에틸렌글리콜, Tween80(등록 상표) 등을 들 수 있다.

주사제를 제조하는 경우에는, 본 발명 화합물에 pH 조절제, 완충제, 안정화제, 등장화제, 국소 마취제 등을 첨가하여, 통상법에 의해 피하, 근육내 및 정맥내용 주사제를 제조할 수 있다.

pH 조절제 및 완충제로서는, 시트르산나트륨, 아세트산나트륨, 인산나트륨 등을 들 수 있다. 안정화제로서는, 피로아황산나트륨, EDTA, 티오글리콜산, 티오락트산 등을 들 수 있다. 국소 마취제로서는, 염산프로카인, 염산리도카인 등을 들 수 있다. 등장화제로서는, 염화나트륨, 포도당, D-만니톨, 글리세린 등을 들 수 있다.

좌제를 제조하는 경우에는, 본 발명 화합물에 당업계에서 공지된 제제용 담체, 예를 들어 폴리에틸렌글리콜, 라놀린, 카카오 버터, 지방산 트리글리세라이드 등을, 또한 필요에 따라 Tween80(등록 상표)과 같은 계면 활성제 등을 첨가한 후, 통상법에 의해 제조할 수 있다.

연고제를 제조하는 경우에는, 본 발명 화합물에 통상 사용되는 기제, 안정제, 습윤제, 보존제 등이 필요에 따라서 배합되어, 통상법에 의해 혼합, 제제화된다.

기제로서는, 유동 파라핀, 백색 바셀린, 표백 밀랍, 옥틸도데실 알코올, 파라핀 등을 들 수 있다.

보존제로서는, 파라옥시벤조산메틸, 파라옥시벤조산에틸, 파라옥시벤조산프로필 등을 들 수 있다.

첩부제를 제조하는 경우에는, 통상의 지지체에 상기 연고, 크림, 겔, 페이스트 등을 통상법에 의해 도포하면 된다.

지지체로서는, 면, 단섬유, 화학 섬유를 포함하는 직포, 부직포나 연질 염화비닐, 폴리에틸렌, 폴리우레탄 등의 필름 또는 발포체 시트가 적당하다.

상기의 각 투여 단위 형태 중에 배합되어야 할 본 발명 화합물의 양은, 이것을 적용할 환자의 증상에 따라, 또는 그의 제형 등에 따라 일정하지 않지만, 일반적으로 투여 단위 형태당, 경구제에서는 0.05 내지 1000mg, 주사제에서는 0.01 내지 500mg, 좌제에서는 1 내지 1000mg으로 하는 것이 바람직하다.

또한, 상기 투여 형태를 갖는 약제의 1일당의 투여량은, 환자의 증상, 체중, 연령, 성별 등에 따라 상이하여 일률적으로는 결정할 수 없지만, 본 발명 화합물로서 통상 성인(체중 50kg) 1일 0.05 내지 5000mg, 바람직하게는 0.1 내지 1000mg으로 하면 되고, 이것을 1일 1회 또는 2 내지 3회 정도로 나누어서 투여하는 것이 바람직하다.

본 발명 화합물이 투여되는 포유 동물로서는, 인간, 원숭이, 마우스, 래트, 토끼, 개, 고양이, 소, 말, 돼지, 양 등을 들 수 있다.

실시예

이하, 실시예를 들어서 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하는데, 본 발명은 이것들에 의해 전혀 한정되는 것이 아니다.

실시예에서 사용한 각종 시약은, 특별히 기재가 없는 한 시판품을 사용하였다. 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에는, 모리테크스사 제조(아키미쓰 사이언티픽사 제조) 푸리프팩(등록 상표) SI, 바이오티지사 제조 KP-Sil(등록 상표) Silica 프리팩트 칼럼 또는 바이오티지사 제조 HP-Sil(등록 상표) Silica 프리팩트 칼럼을 사용하였다. 염기성 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피에는 모리테크스사 제조(아키미쓰 사이언티픽사 제조) 푸리프팩(등록 상표) NH 또는 바이오티지사 제조 KP-NH(등록 상표) 프리팩트 칼럼을 사용하였다. 분취용 박층 크로마토그래피에는 머크사 제조 Kieselgel TM 60F 254, Art. 5744 또는 와코사 제조 NH₂ 실리카 겔 60F 254 플레이트를 사용하였다. NMR 스펙트럼은, AL400(400MHz; 닛본 덴시(JEOL)), Mercury400(400MHz; 아질렌트·테크놀로지)형 분광계, 또는 OMNMR 프로브(Protasis)를 장비한 Inova400(400MHz; 아질렌트·테크놀로지)형 분광계를 사용하고, 중용매 중에 테트라메틸실란을 포함하는 경우에는 내부 기준으로서 테트라메틸실란을 사용하고, 그 이외의 경우에는 내부 기준으로서 NMR 용매를 사용하여 측정하여, 전체 δ값을 ppm으로 나타냈다. 마이크로웨이브 반응은, CEM사 제조 Discover S 클래스 또는 Biotage사 제조 Initiator를 사용해서 행하였다.

또한, LCMS 스펙트럼은 Waters사 제조 ACQUITY SQD(사중극형)를 사용하여 하기 조건에서 측정하였다.

칼럼: YMC사 제조 YMC-Triart C18, 2.0x50mm, 1.9㎛

MS 검출: ESI positive

UV 검출: 254 및 210nm

칼럼 유속: 0.5mL/min

이동상: 물/아세토니트릴(0.1％ 포름산)

인젝션량: 1μL

구배 (표 1)

시간(min) 물 아세토니트릴

0 95 5

0.1 95 5

2.1 5 95

3.0 중지(STOP).

또한, 역상 분취 HPLC 정제는 WATERS사 제조 분취 시스템을 사용하여 하기 조건에서 실시하였다.

칼럼: YMC사 제조 YMC-Actus Triart C18, 20x50mm, 5㎛와 YMC사 제조 YMC-Actus Triart C18, 20x10mm, 5㎛를 연결한 것을 사용하였다.

UV 검출: 254nm

MS 검출: ESI positive

칼럼 유속: 25mL/min

이동상: 물/아세토니트릴(0.1％ 포름산)

인젝션량: 0.1-0.5mL.

약호의 의미를 이하에 나타내었다.

s: 싱글렛

d: 더블렛

t: 트리플렛

dd: 더블 더블렛

m: 멀티플렛

brs: 브로드 싱글렛

DMSO-d₆: 중디메틸술폭시드

CDCl₃: 중클로로포름

CD₃OD: 중메탄올

THF: 테트라히드로푸란

DMF: N,N-디메틸포름아미드

DME: 1,2-디메톡시에탄

HATU: O-(7-아자벤조트리아조-1-일)-N,N,N',N'-테트라메틸헥사우로늄헥사플루오로포스페이트.

실시예 1

(R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌 리진-8-일) 아크릴아미드 (화합물 I-1) 및 (S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테 트라히드로피리미도[5,4-b] 인돌리진-8-일) 아크릴아미드 (화합물 I-2)

(공정 1)

4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘의 합성

4-클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(7.52g)의 DMF(49ml) 용액에, N-요오도숙신이미드(11.6g)를 실온에서 첨가하고, 동 온도에서 1시간 교반한 후, 반응액에 물(150ml)을 첨가하였다. 얻어진 침전물을 여과 취출하고, 물로 세정한 후, 건조함으로써, 표제 화합물 13.57g을 담황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 280, 282(MH+).

(공정 2)

1-브로모-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부텐의 합성

1-브로모-3-부텐-2-올(4.5g)의 DMF(30ml) 용액에, 이미다졸(2.25g) 및 tert-부틸디메틸실릴클로라이드(4.75g)를 실온에서 첨가하고, 동 온도에서 16시간 교반한 후, 물을 첨가하고, 헥산으로 추출하였다. 유기층을 물로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거함으로써, 표제 화합물 7.0g을 담황색 유상물로서 얻었다.

(공정 3)

7-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐)-4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘의 합성

공정 1로 얻어진 4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(3.7g) 및 공정 2에서 얻어진 1-브로모-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부텐(3.5g)의 DMF(26ml) 용액에, 탄산칼륨(2.2g)을 실온에서 첨가하고, 80℃에서 5시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 물 및 아세트산에틸을 첨가하여, 생성된 불용물을 여과 분별하였다. 유기층을 분리하고, 물 및 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 2.25g을 담황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 464, 466(MH+).

(공정 4)

7-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐)-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성

공정 3에서 얻어진 7-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐)-4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(1.12g)의 THF(7ml) 용액에, 25％ 암모니아수(9ml)를 첨가하고, 마이크로웨이브 반응 장치에서 120℃에서 5시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 물로 희석하였다. 얻어진 침전물을 여과 취출하고, 물로 세정 후, 건조함으로써, 표제 화합물 1.06g을 백색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 445(MH+).

(공정 5)

7-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐)-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성

공정 4에서 얻어진 7-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐)-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(3.62g), 3-퀴놀린붕소산(1.47g), 탄산나트륨(1.72g), 2-디시클로헥실포스피노-2',4',6'-트리이소프로필비페닐(154mg), 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)(148mg), DME(40ml) 및 물(16ml)의 혼합물을 질소 분위기 하에서, 100℃에서 3시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 물에 주입하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 2.13g을 담황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 446(MH+).

(공정 6)

6-브로모-7-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐)-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성

공정 5에서 얻어진 7-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐)-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(2.13g)의 DMF(25ml) 용액에, N-브로모숙신이미드(894mg)를 실온에서 첨가하고, 동 온도에서 30분간 교반한 후, 포화 중조수에 주입하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 물 및 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 2.26g을 황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 524, 526(MH+).

(공정 7)

8-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4-아민의 합성

공정 6에서 얻어진 6-브로모-7-(2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐)-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(2.26g)의 THF(30ml) 용액에, 빙냉 하, 9-보라비시클로[3.3.1]노난에 0.5M THF 용액(50ml)을 첨가하고, 실온에서 4시간 교반하였다. 반응액에 3N 수산화나트륨 수용액(19.5ml)을 실온에서 천천히 첨가한 후, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)디클로로메탄 착체(676mg)를 첨가하고, 질소 분위기 하에서, 70℃에서 4시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 물에 주입하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 778mg을 황색 유상물로서 얻었다.

ESI-MS m/z 446(MH+).

(공정 8)

4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-올의 합성

공정 7에서 얻어진 8-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4-아민(778mg)의 THF(20ml) 용액에 테트라부틸암모늄플루오라이드의 1M THF 용액(2.09ml)을 실온에서 첨가하고, 동 온도에서 1시간 교반한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 포화 염화암모늄 수용액으로 처리하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 클로로포름/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 580mg을 담황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 332(MH+).

(공정 9)

4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일 메탄술포네이트의 합성

공정 8에서 얻어진 4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-올(288mg)의 THF(5ml) 용액에, 빙냉 하, 트리에틸아민(0.157ml) 및 염화메탄술포닐(0.074ml)을 첨가하고, 동 온도에서 15분간 교반한 후, 포화 중조수에 주입하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거함으로써, 표제 화합물 615mg을 담갈색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 410(MH+).

(공정 10)

8-아지드-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4-아민의 합성

공정 9에서 얻어진 4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일메탄술포네이트(758mg)의 DMF(9ml) 용액에 아지화나트륨(361mg)을 실온에서 첨가하고, 80℃에서 4시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 물에 주입하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 물 및 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거함으로써, 표제 화합물 508mg을 황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 357(MH+).

(공정 11)

5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4,8-디아민의 합성

공정 10에서 얻어진 8-아지드-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4-아민(508mg)의 THF(10ml) 및 물(1ml) 용액에 트리페닐포스핀 중합체 담지(내지 3.0mmol/g, 1.42g)를 실온에서 첨가하고, 반응액을 1시간 가열 환류하였다. 반응액을 냉각한 후, 셀라이트로 여과하고, 에탄올로 세정한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 클로로포름/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 342mg을 황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 331(MH+).

(공정 12)

N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드의 합성

공정 11에서 얻어진 5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4,8-디아민(68mg)의 클로로포름(2.5ml) 용액에, 빙냉 하, N,N-디이소프로필에틸아민(0.033ml) 및 아크릴산클로라이드(0.0154ml)를 첨가하고, 동 온도에서 15분간 교반한 후, 포화 중조수에 주입하고, 클로로포름으로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 클로로포름/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 35.4mg을 황색 고체로서 얻었다.

(공정 13)

N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드 에난티오머 A 및 N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드 에난티오머 B의 분리

공정 12에서 얻어진 N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드(197mg)를 광학 분할용 칼럼(CHIRALPAK AD-H 20mmx250mm/다이셀 가가꾸 고교 제조), 이동상: 헥산/에탄올/트리에틸아민 50:50:0.1, 유속: 10ml/min)으로 광학 분할하여, 에난티오머 A(유지 시간: 15.4min, (R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드(화합물 I-1)) 72.4mg, 에난티오머 B(유지 시간: 32.5min, (S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드(화합물 I-2)) 78.3mg을 각각 담황색 고체로서 얻었다.

에난티오머 A

ESI-MS m/z 385(MH+).

에난티오머 B

ESI-MS m/z 385(MH+).

후술하는 실시예 2의 기재된 방법에 의해 얻어진 (R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드를 상기의 조건에서 칼럼 처리한 결과, 에난티오머 A와 동일한 유지 시간이었다. 따라서, 상기 에난티오머 A가 R체, 즉 화합물 I-1이며, 에난티오머 B가 S체, 즉 화합물 I-2인 것이 확인되었다.

실시예 2

(R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌 리진-8-일) 아크릴아미드 (화합물 I-1)

(공정 1)

(S)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐4-메틸벤젠술포네이트의 합성

1-브로모-3-부텐-2-올 대신에 (S)-3-부텐-1,2-디올-1-(p-톨루엔술포네이트)를 사용하여, 실시예 1의 공정 2와 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 2.74g을 무색 유상물로서 얻었다.

(공정 2)

(R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드의 합성

1-브로모-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부텐 대신에 공정 1에서 얻어진 (S)-2-(tert-부틸디메틸실릴옥시)-3-부테닐4-메틸벤젠술포네이트를 사용하여, 실시예 1의 공정 1 내지 12와 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 13.9mg을 황색 고체로서 얻었다.

실시예 3

N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진 -8-일)-N- 메틸아크릴아미드 (화합물 I-3)

(공정 1)

N⁸-메틸-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4,8-디아민의 합성

실시예 1의 공정 9에서 얻어진 4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일메탄술포네이트(30mg)를 메틸아민의 40％ 메탄올 용액(1ml)에 용해하고, 60℃에서 1시간, 80℃에서 22시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 감압 농축하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 8.1mg을 담황색 유상물로서 얻었다.

ESI-MS m/z 345(MH+).

(공정 2)

N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)-N-메틸아크릴아미드의 합성

실시예 1의 공정 12에서 사용한 5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4,8-디아민 대신에 공정 1에서 얻어진 N⁸-메틸-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4,8-디아민을 사용하여, 실시예 1의 공정 12와 마찬가지의 방법으로 합성하여, 표제 화합물 6.2mg을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 4

(E)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌 리진-8-일)-4-(디메틸아미노)-2- 부텐아미드 (화합물 I-4)

트랜스-4-디메틸아미노크로톤산염산염(4.5mg)의 DMF(0.5ml) 용액에, HATU(10.3mg) 및 실시예 1의 공정 11에서 얻어진 5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4,8-디아민(8.8mg)을 실온에서 첨가하고, 동 온도에서 1시간 교반한 후, 포화 중조수에 주입하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 분취용 박층 크로마토그래피(와코사 제조 NH₂ 실리카 겔 60F 254 플레이트, 전개 용매: 클로로포름/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 6.4mg을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 5

(S,E)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4-b]인 돌리진-8-일)-3- 클로로아크릴아미드 (화합물 I-5)

실시예 1의 공정 11에서 얻어진 5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4,8-디아민(498.0mg)의 DMF(8ml) 현탁액에, 트랜스-3-클로로아크릴산(399.5mg)을 실온에서 첨가하였다. 용해 후, 빙냉 하, 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드염산염(350.1mg)을 첨가하고, 동 온도에서 1시간 교반하였다. 반응액을 포화 중조수에 주입하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 261.2mg을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 6

(S,Z)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4-b]인 돌리진-8-일)-3- 클로로아크릴아미드 (화합물 I-6)

실시예 5에서 사용한 트랜스-3-클로로아크릴산 대신에 시스-3-클로로아크릴산을 사용하여, 실시예 5와 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 93mg을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 7

(S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10- 테트라히드로 -6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a] 아제핀 -8-일) 아크릴아미드 (화합물 I-7)

(공정 1) (R)-tert-부틸(1-히드록시-5-(메틸티오)펜탄-3-일)카르바메이트의 합성

(R)-3-((tert-부톡시카르보닐)아미노)-5-(메틸티오)펜탄산(7.92g)의 THF(79.2ml) 용액에, N-메틸모르폴린(3.63ml) 및 클로로포름산에틸(3.01ml)을 -10℃에서 첨가하고, -10℃에서 15분간 교반한 후, 생성된 불용물을 여과 분별하였다. 여과액에, 수소화붕소나트륨(1.55g)의 물(15ml) 용액을 -10℃에서 첨가하고, -10℃에서 1시간 교반하였다. 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 실온에서 30분간 교반하였다. 아세트산에틸을 첨가하고, 유기층을 분리하여, 0.5N 황산수소칼륨 수용액, 물, 0.5N 수산화나트륨 수용액 및 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 클로로포름/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 7.18g을 담황색 유상물로서 얻었다.

(공정 2) tert-부틸((3R)-1-히드록시-5-(메틸술피닐)펜탄-3-일)카르바메이트의 합성

공정 1에서 얻어진 (R)-tert-부틸(1-히드록시-5-(메틸티오)펜탄-3-일)카르바메이트(8.16g)의 메탄올(98ml) 용액에, 과요오드산나트륨(7.0g)의 물(32ml) 현탁액을 10℃ 이하에서 첨가하고, 실온에서 2시간 교반하였다. 생성된 불용물을 여과 분별하고, 여과액을 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 포화 식염수에 용해하고, 클로로포름으로 3회 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하여, 표제 화합물 9.38g을 담황색 고체로서 얻었다.

(공정 3) (R)-tert-부틸(5-히드록시펜타-1-엔-3-일)카르바메이트의 합성

공정 2에서 얻어진 tert-부틸((3R)-1-히드록시-5-(메틸술피닐)펜탄-3-일)카르바메이트(9.38g)의 1,2-디클로로벤젠(140ml) 용액에, 아세트산나트륨(13.45g)을 실온에서 첨가하고, 내온 166℃에서 18시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 불용물을 여과 분별하고, 1,2-디클로로벤젠을 감압 증류에 의해 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 아세트산에틸에 용해하고, 하이포아염소산나트륨 수용액, 물 및 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 2.50g을 담황색 유상물로서 얻었다.

(공정 4) (R)-tert-부틸(5-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트의 합성

공정 3에서 얻어진 (R)-tert-부틸(5-히드록시펜타-1-엔-3-일)카르바메이트(2.5g) 및 실시예 1의 공정 1에서 얻어진 4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(2.31g)의 DME(23ml) 용액에, 빙냉 하, 트리페닐포스핀(3.25g)을 첨가해서 용해한 후, 아조디카르본산디이소프로필(2.44ml)을 천천히 첨가하였다. 반응액을 빙냉 하에서 30분간, 실온에서 1시간 교반한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 아세트산에틸에 용해하고, 물로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 3.49g을 담황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 463, 465(MH+).

(공정 5) (R)-tert-부틸(5-(4-아미노-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트의 합성

공정 4에서 얻어진 (R)-tert-부틸(5-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트(3.49g)의 DME(17.5ml) 용액에 28％ 암모니아수(17.5ml)를 첨가하고, 오토클레이브 중, 내온 105℃에서 8시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 물(70ml)을 첨가하고, 실온에서 4시간 교반하였다. 얻어진 침전물을 여과 취출하고, 물로 세정한 후, 건조함으로써, 표제 화합물 3.20g을 담황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 444(MH+).

(공정 6) (R)-tert-부틸(5-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트의 합성

공정 5에서 얻어진 (R)-tert-부틸(5-(4-아미노-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트(3.2g), 3-퀴놀린붕소산(1.37g), 탄산나트륨(843mg), 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(250mg), DME(32ml) 및 물(32ml)의 혼합물을 질소 분위기 하에서, 100℃에서 6시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 포화 중조수 및 아세트산에틸을 첨가하고, 실온에서 30분간 교반하였다. 불용물을 여과 분리한 후, 유기층을 분리하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸, 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 3.21g을 옅은 주황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 445(MH+).

(공정 7) (R)-tert-부틸(5-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트의 합성

공정 6에서 얻어진 (R)-tert-부틸(5-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트(3.21g)의 THF(26ml) 용액에, 빙냉 하, N-브로모숙신이미드(1.35g)의 THF(23ml) 용액을 30분간에 걸쳐서 첨가한 후, 빙냉 하 30분간 교반하였다. 5％ 티오황산나트륨 수용액을 첨가한 후, 포화 중조수에 주입하고, 아세트산에틸로 추출하였다. 유기층을 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸, 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 3.15g을 담갈색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 523, 525(MH+).

(공정 8) (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-8-일)카르바메이트의 합성

9-보라비시클로[3.3.1]노난의 0.5M THF 용액(22.8ml)에 공정 7에서 얻어진 (R)-tert-부틸(5-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트(994mg)를 실온에서 첨가하고, 동 온도에서 1시간 교반하였다. 4N 수산화나트륨 수용액(5.7ml)을 주의해서 첨가한 후, 질소 치환하고, 내온 55℃로 가열하였다. 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(275mg)을 첨가하고, 내온 66℃에서 15시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 유기층을 분리하고, 톨루엔(7.7ml) 및 20％ 염화암모늄 수용액(5ml)을 첨가하였다. 유기층을 분리하고, 20％ 식염수로 세정한 후, SH 실리카 겔(후지 실리시아 제조, 1g)을 첨가하였다. 혼합물을 내온 68℃에서 1시간 교반한 후, SH 실리카 겔(후지 실리시아 제조, 1g)을 첨가하였다. 혼합물을 내온 68℃에서 1시간 교반하고, 냉각한 후, 실리카 겔을 여과 분별하고, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 439mg을 황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 445(MH+).

(공정 9) (S)-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-4,8-디아민의 합성

공정 8에서 얻어진 (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-8-일)카르바메이트(436mg)의 에탄올(4ml) 용액에, 실온에서 5N 염산(1ml)을 첨가하고, 60℃에서 3시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 5N 수산화나트륨 수용액으로 염기성으로 하고, 클로로포름으로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 클로로포름/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 320mg을 담황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 345(MH+).

(공정 10) (S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-8-일)아크릴아미드의 합성

공정 9에서 얻어진 (S)-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-4,8-디아민(317mg)의 아세토니트릴(1.6ml)-물(1.6ml) 용액에, 빙냉 하, N,N-디이소프로필에틸아민(0.192ml) 및 아크릴산클로라이드(83.3mg)의 아세토니트릴(0.83ml) 용액을 첨가하고, 동 온도에서 15분간 교반한 후, 포화 중조수에 주입하고, 클로로포름으로 추출하였다. 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 226mg을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 8

(S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10- 테트라히드로 -6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a] 아제핀 -9-일) 아크릴아미드

(공정 1) (S)-tert-부틸(1-히드록시펜타-4-엔-2-일)카르바메이트의 합성

(S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)펜타-4-엔산(25.0g)의 THF(250ml) 용액에, N-메틸모르폴린(15.25ml) 및 클로로포름산에틸(12.60ml)을 -15℃에서 첨가하고, -15℃에서 15분간 교반한 후, 생성된 불용물을 여과 분별하였다. 여과액에, 수소화붕소나트륨(3.23g)의 물(32ml) 용액을 -15℃에서 첨가하고, -15℃에서 1시간 교반하였다. 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하고, 실온에서 30분간 교반하였다. 아세트산에틸을 첨가하고, 유기층을 분리하여, 0.5N 황산수소칼륨 수용액, 물, 0.5N 수산화나트륨 수용액 및 포화 식염수로 세정하고, 무수 황산나트륨으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 11.93g을 담황색 유상물로서 얻었다.

(공정 2) (S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-9-일)아크릴아미드의 합성

실시예 7의 공정 4에서의 (R)-tert-부틸(5-히드록시펜타-1-엔-3-일)카르바메이트 대신에 공정 1에서 얻어진 (S)-tert-부틸(1-히드록시펜타-4-엔-2-일)카르바메이트를 사용하여, 실시예 7의 공정 4 내지 10과 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물(400.0mg)을 유백색 고체로서 얻었다.

실시예 9

(R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10- 테트라히드로 -6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a] 아제핀 -9-일) 아크릴아미드 (화합물 I-9)

(공정 1) (R)-tert-부틸(1-히드록시펜타-4-엔-2-일)카르바메이트의 합성

실시예 8의 공정 1에서 사용한 (S)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)펜타-4-엔산 대신에 (R)-2-((tert-부톡시카르보닐)아미노)펜타-4-엔산을 사용하여, 실시예 8의 공정 1과 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물을 담황색 유상물로서 얻었다.

(공정 2) (R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-9-일)아크릴아미드의 합성

실시예 7의 공정 4에서의 (R)-tert-부틸(5-히드록시펜타-1-엔-3-일)카르바메이트 대신에 공정 1에서 얻어진 (R)-tert-부틸(1-히드록시펜타-4-엔-2-일)카르바메이트를 사용하여, 실시예 7의 공정 4 내지 10과 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물(115.5mg)을 유백색 고체로서 얻었다.

비교예 1

N-(3-(4-아미노-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진 -5-일) 페닐 ) 벤 즈아미드의 합성

국제 공개 WO2006/102079호 팸플릿에 기재된 방법에 준하여 합성하였다.

ESI-MS m/z 384(MH+).

이하에, 본 발명에 따른 화합물의 제조 중간체의 합성법을 설명한다. 본 합성법은, 이들에 전혀 한정되는 것이 아니다.

참고예 1

(S)- tert -부틸(1-(4-아미노-6- 브로모 -5-(퀴놀린-3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리 미딘-7-일) 부타 -3-엔-2-일) 카르바메이트

(공정 1)

(S)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트의 합성

트리페닐포스핀(13.1g)의 테트라히드로푸란(70ml) 용액에, 빙냉 하, 아조디카르본산디이소프로필(2.44ml)을 천천히 첨가하였다. 반응액을 빙냉 하에서 1시간 교반한 후, 비특허문헌 Org. Lett., 2005, vol.7, No.5, pp847-849에 기재된 방법에 준하여 합성한 (S)-tert-부틸(1-히드록시부타-3-엔-2-일)카르바메이트(7.0g) 및 4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(6.97g)의 테트라히드로푸란(35ml) 용액을 천천히 첨가하였다. 반응액을 실온에서 2시간 교반한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 20.84g을 담황색 유상 물질로서 얻었다.

ESI-MS m/z 448,450(MH+).

(공정 2)

(S)-tert-부틸(1-(4-아미노-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트의 합성

공정 1에서 얻어진 (S)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트(20.84g)에 8N 암모니아-메탄올 용액(89.4ml)을 첨가하여, 오토클레이브 중, 120℃에서 6시간 교반하였다. 반응액을 빙냉한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 소량의 메탄올로 희석한 후, 얻어진 침전물을 여과 취출하고, 냉 메탄올(11ml)로 세정한 후, 감압 건조함으로써, 표제 화합물 8.28g을 유백색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 430(MH+).

(공정 3)

(S)-tert-부틸(1-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트의 합성

공정 2에서 얻어진 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트(8.26g), 3-퀴놀린붕소산(4.99g), 탄산세슘(12.54g), 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드(785.6mg), DME(66ml) 및 물(33ml)의 혼합물을 질소 분위기 하에서, 100℃에서 2시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 물 및 아세트산에틸을 첨가하고, 유기층을 분리한 후, 수층을 아세트산에틸로 2회 추출하였다. 얻어진 유기층을 무수 황산마그네슘으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 헥산/아세트산에틸, 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 8.0g을 옅은 주황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 431(MH+).

(공정 4)

(S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트의 합성

공정 3에서 얻어진 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트(7.98g)의 DMF(64ml) 용액에, -15℃에서 N-브로모숙신이미드(3.63g)를 첨가한 후, -15℃에서 1시간 교반하였다. 반응액에 10％ 티오황산나트륨 수용액 및 아세트산에틸을 첨가한 후, 실온에서 10분간 교반하였다. 유기층을 분리한 후, 수층을 아세트산에틸로 2회 추출하였다. 얻어진 유기층을 포화 식염수로 2회 세정하고, 무수 황산마그네슘으로 건조한 후, 용매를 감압 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 6.30g을 담갈색 고체로서 얻었다.

참고예 2

(R)- tert -부틸(1-(4-아미노-6- 브로모 -5-(퀴놀린-3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리 미딘-7-일) 부타 -3-엔-2-일) 카르바메이트

(공정 1)

(R)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트의 합성

참고예 1의 공정 1에서의 (S)-tert-부틸(1-히드록시부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 (R)-tert-부틸(1-히드록시부타-3-엔-2-일)카르바메이트(8.74g)를 사용하여, 참고예 1의 공정 1과 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 11.05g을 백색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 448,450(MH+).

(공정 2)

(R)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트의 합성

참고예 1의 공정 2에서의 (S)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 공정 1에서 얻어진 (R)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트(7.88g)를 사용하여, 참고예 1의 공정 2 내지 4와 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 6.80g을 황색 고체로서 얻었다.

참고예 3

(S)- tert -부틸(1-(4-아미노-6- 브로모 -5-(퀴놀린-3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리 미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일) 카르바메이트

(공정 1)

(S)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일)카르바메이트의 합성

참고예 1의 공정 1에서의 (S)-tert-부틸(1-히드록시부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 (S)-tert-부틸(1-히드록시펜타-4-엔-2-일)카르바메이트(11.93g)를 사용하여, 참고예 1의 공정 1과 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 4.96g을 황갈색 유상 물질로서 얻었다.

(공정 2)

(S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일)카르바메이트의 합성

참고예 1의 공정 2에서의 (S)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 공정 1에서 얻어진 (S)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일)카르바메이트(4.90g)를 사용하여, 참고예 1의 공정 2 내지 4와 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 3.67g을 담황색 고체로서 얻었다.

참고예 4

(R)- tert -부틸(1-(4-아미노-6- 브로모 -5-(퀴놀린-3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리 미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일) 카르바메이트

(공정 1)

(R)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일)카르바메이트의 합성

참고예 1의 공정 1에서의 (S)-tert-부틸(1-히드록시부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 (R)-tert-부틸(1-히드록시펜타-4-엔-2-일)카르바메이트(856.4mg)를 사용하여, 참고예 1의 공정 1과 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 1.54g을 유백색 고체로서 얻었다.

(공정 2)

(R)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일)카르바메이트의 합성

참고예 1의 공정 2에서의 (S)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 공정 1에서 얻어진 (R)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일)카르바메이트(974.9mg)를 사용하여, 참고예 1의 공정 2 내지 4와 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 1.02g을 담갈색 고체로서 얻었다.

참고예 5

(R)- tert -부틸(5-(4-아미노-6- 브로모 -5-(퀴놀린-3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리 미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일) 카르바메이트

(공정 1)

(R)-tert-부틸(5-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트의 합성

참고예 1의 공정 1에서의 (S)-tert-부틸(1-히드록시부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 (S)-tert-부틸(5-히드록시펜타-1-엔-3-일)카르바메이트(2.5g)를 사용하여, 참고예 1의 공정 1과 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 3.49g을 담황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 463, 465(MH+).

(공정 2)

(R)-tert-부틸(5-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트의 합성

참고예 1의 공정 2에서의 (S)-tert-부틸(1-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 공정 1에서 얻어진 (R)-tert-부틸(5-(4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트(3.21g)를 사용하여, 참고예 1의 공정 2 내지 4와 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물 3.15g을 담갈색 고체로서 얻었다.

참고예 6

(R)-6- 브로모 -7-(2-(( tert - 부틸디메틸실릴 ) 옥시 ) 부타 -3-엔-1-일)-5-(퀴놀린-3-일)-7H- 피롤로[2,3-d]피리미딘 -4-아민

(공정 1)

4-클로로-5-요오도-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘의 합성

수소화 나트륨(3.4g)의 DMF(190ml) 용액에, 빙냉 하, 4-클로로-5-요오도-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(20.0g)의 DMF(50ml) 용액을 천천히 첨가한 후, 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸클로라이드(13.3ml)를 첨가하고, 동 온도에서 2시간 교반하였다. 반응액에 2-(트리메틸실릴)에톡시메틸클로라이드(1.3ml)를 더 가하고, 실온에서 1시간 교반하였다. 반응액을 물(600ml)에 주입하고, 실온에서 15분간 교반하였다. 얻어진 침전물을 여과 취출하고, 물 및 디이소프로필에테르로 세정한 후, 다시 아세트산에틸에 용해시킨 후, 여과에 의해 불용물을 여과 분별하였다. 여과액의 용매를 감압 증류 제거하여 얻어진 잔사에 헵탄을 가해서 침전물을 여과 취출하고, 헵탄으로 세정한 후, 감압 건조함으로써, 표제 화합물 21.2g을 백색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 409, 411(MH+).

(공정 2)

5-요오도-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성

공정 1에서 얻어진 4-클로로-5-요오도-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘(20.0g)에 8N 암모니아/메탄올 용액(120ml)을 첨가하고, 마이크로웨이브 반응 장치에서 120℃에서 1시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 메탄올(65ml) 및 물(185ml)로 희석하였다. 얻어진 침전물을 여과 취출하고, 물로 세정한 후, 감압 건조함으로써, 표제 화합물 15.2g을 백색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 391(MH+).

(공정 3)

5-(퀴놀린-3-일)-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성

공정 2에서 얻어진 5-요오도-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(15.0g), 3-퀴놀린붕소산(8.6g), 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(0)(2.2g)의 DME(270ml) 용액에, 2M 탄산나트륨 수용액(38ml)을 첨가하고, 질소 분위기 하에서, 90℃에서 6시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 물(300ml)을 주입하고, 얻어진 침전물을 여과 취출하여, 물 및 디이소프로필에테르로 세정한 후, 감압 건조하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 메탄올/클로로포름)로 정제하여, 표제 화합물 10.17g을 담황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 392(MH+).

(공정 4)

5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민염산염의 합성

공정 3에서 얻어진 5-(퀴놀린-3-일)-7-((2-(트리메틸실릴)에톡시)메틸)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(10.0g)의 에탄올(200ml) 용액에, 90℃에서 농염산(20ml)을 첨가하고, 동 온도에서 25분 교반한 후, 농염산(30ml)을 첨가하고, 동 온도에서 75분간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 에탄올(100ml)을 첨가하고, 95℃에서 90분간 교반하였다. 그 후, 에탄올(100ml), 농염산(25ml)을 첨가하고, 동 온도에서 4일간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 아세트산에틸을 첨가한 후, 얻어진 침전물을 여과 취출하고, 아세트산에틸로 세정한 후, 감압 건조함으로써, 표제 화합물 4.4g을 황색 고체로서 얻었다.

ESI-MS m/z 335(MH+).

(공정 5)

(R)-7-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)부타-3-엔-1-일)-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성

공정 4에서 얻어진 5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민염산염(1.22g)의 DMF(12.2ml) 용액에, 탄산칼륨(4.0g), (R)-2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)부타-3-엔-1-일4-메틸벤젠술포네이트(1.43g)를 실온에서 첨가한 후, 90℃에서 20시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 물(49ml)을 주입하고, 실온에서 3시간 교반하였다. 얻어진 침전물을 여과 취출하고, 물로 세정한 후, 감압 건조하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 메탄올/아세트산에틸)로 정제하여, 표제 화합물 1.31g을 담황색 고체로서 얻었다.

(공정 6)

(R)-6-브로모-7-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)부타-3-엔-1-일)-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민의 합성

참고예 1의 공정 4의 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 공정 5에서 얻어진 (R)-7-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)부타-3-엔-1-일)-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(1.30g)을 사용하여, 참고예 1의 공정 4와 마찬가지의 방법으로, 표제 화합물(1.44g)을 황색 고체로서 얻었다.

실시예 10

(S)- tert -부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4 -b]인 돌리 진-8-일) 카르바메이트

참고예 1에서 얻어진 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트(6.0g)의 테트라히드로푸란(42ml) 용액에, 질소 분위기 하에서, 실온 하에서 9-보로비시클로[3.3.1]노난의 0.5M 테트라히드로푸란 용액(141.3ml)을 첨가하고, 실온에서 2시간 교반하였다. 반응액에 2N 수산화나트륨 수용액(84.8ml)을 실온에서 천천히 첨가한 후, 감압 하에 탈기하고, 질소 분위기 하에서, (테트라키스트리페닐포스핀)팔라듐(0)(1.70g)을 첨가하고, 66℃에서 12시간 교반하였다. 반응액을 냉각한 후, 유기층을 분취하여, 20％ 염화암모늄 수용액(60ml)으로 세정하고, 유기층에 SH 실리카 겔(6.0g)을 첨가하여, 질소 분위기 하에서, 50℃에서 14시간 교반한 후, 여과하였다. 여과액에 다시 SH 실리카 겔(후지 실리시아사 제조, 6.0g)을 첨가하고, 질소 분위기 하에서, 50℃에서 14시간 교반한 후, 여과하였다. 여과액으로부터 용매를 감압 하에 증류 제거하였다. 얻어진 잔사를 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, 표제 화합물 4.46g(수율: 88％)을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 11

참고예 1에서 얻어진 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트(0.3g)의 테트라히드로푸란(4.5ml) 용액에, 질소 분위기 하에서, 실온에서 9-보로비시클로[3.3.1]노난 다이머(0.431g)를 첨가하고, 실온 하에서 2시간 교반하였다. 반응액에 4N 수산화나트륨 수용액(2.12ml)을 실온에서 천천히 첨가한 후, 감압 하에 탈기하고, 질소 분위기 하에서, (테트라키스트리페닐포스핀)팔라듐(0)(0.136g)을 첨가하고, 64℃에서 12시간 교반하였다. 반응액을 냉각하고, 아세트산에틸로 희석한 후, 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하였다. 이때, 발생한 불용물을 여과로 제거한 후, 유기층을 분취하였다. 얻어진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조, 여과한 후, 감압 하에서 농축함으로써 조 생성물을 얻었다. 이것을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)카르바메이트 203mg(수율: 80％)을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 12

참고예 1에서 얻어진 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트(300mg)의 1,2-디메톡시에탄(4.5ml) 용액에, 질소 분위기 하에서, 실온에서 9-보로비시클로[3.3.1]노난 다이머(431mg)를 첨가하여, 48℃에서 40분간 교반하였다. 실온으로 방냉한 후, 반응액에 4N 수산화나트륨 수용액(2.1ml)을 실온에서 천천히 첨가한 후, 감압 하에 탈기하고, 질소 분위기 하에서, (테트라키스트리페닐포스핀)팔라듐(0)(136mg)을 첨가하여, 79℃에서 5시간 교반하였다. 반응액을 냉각하고, 아세트산에틸로 희석한 후, 포화 염화암모늄 수용액을 첨가하였다. 이때, 발생한 불용물을 여과로 제거한 후, 유기층을 분취하였다. 얻어진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조, 여과한 후, 감압 하에서 농축함으로써 조 생성물을 얻었다. 이것을 실리카 겔 칼럼 크로마토그래피(전개 용매: 아세트산에틸/메탄올)로 정제하여, (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)카르바메이트 0.190g(수율: 75％)을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 13

실시예 10에서의 수산화나트륨 수용액 대신에 4N 수산화리튬 수용액(1.8ml)을 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)카르바메이트 224mg(수율: 88％)을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 14

실시예 10에서의 수산화나트륨 수용액 대신에 4N 수산화칼륨 수용액(1.8ml)을 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)카르바메이트 198mg(수율: 78％)을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 15

실시예 10에서의 수산화나트륨 수용액 대신에 4N 수산화세슘 수용액(1.8ml)을 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)카르바메이트 202mg(수율: 80％)을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 16

실시예 10에서의 (테트라키스트리페닐포스핀)팔라듐(0) 대신에 트리스(디벤질리덴아세톤)디팔라듐(0)(34mg), 트리페닐포스핀(39mg)을 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)카르바메이트 194mg(수율: 76％)을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 17

(R)- tert -부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진 -8-일) 카르바메이트

실시예 10에서의 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 참고예 2에서 얻어진 (R)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 6.70g을 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, (R)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)카르바메이트 4.76g(수율: 84％)을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 18

(S)- tert -부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10- 테트라히드로 -6H-피리미도[ 5',4':4,5]피롤로 [1,2-a] 아제핀 -9-일) 카르바메이트

실시예 10에서의 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 참고예 8에서 얻어진 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일)카르바메이트(2.0g)를 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, 표제 화합물 1.56g(수율: 92％)을 담황색 고체로서 얻었다.

실시예 19

(R)- tert -부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10- 테트라히드로 -6H-피리미도[ 5',4':4,5]피롤로 [1,2-a] 아제핀 -9-일) 카르바메이트

실시예 10에서의 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 참고예 9에서 얻어진 (R)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-4-엔-2-일)카르바메이트(690mg)를 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, 표제 화합물 429mg(수율: 73％)을 황색 고체로서 얻었다.

실시예 20

(S)- tert -부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10- 테트라히드로 -6H-피리미도[ 5',4':4,5]피롤로 [1,2-a] 아제핀 -8-일) 카르바메이트

실시예 10에서의 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 참고예 10에서 얻어진 (R)-tert-부틸(5-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)펜타-1-엔-3-일)카르바메이트(994mg)를 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, 표제 화합물 439mg(수율: 52％)을 황색 고체로서 얻었다.

실시예 21

(R)-8-(( tert - 부틸디메틸실릴 ) 옥시 )-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9- 테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진 -4-아민

실시예 10에서의 (S)-tert-부틸(1-(4-아미노-6-브로모-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-7-일)부타-3-엔-2-일)카르바메이트 대신에 참고예 11에서 얻어진 (R)-6-브로모-7-(2-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)부타-3-엔-1-일)-5-(퀴놀린-3-일)-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민(1.0g)을 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, (R)-8-((tert-부틸디메틸실릴)옥시)-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-4-아민 546mg(수율: 64％)을 얻었다.

참고예 7

실시예 10에서의 (테트라키스트리페닐포스핀)팔라듐(0) 대신에 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드(32mg)를 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)커버메이트 21mg(수율: 25％)을 담황색 고체로서 얻었다.

참고예 8

실시예 10에서의 수산화나트륨 수용액 대신에 탄산세슘(2.3g), 물(1.8ml)을 사용하여, 실시예 10과 마찬가지로 처리하여, (S)-tert-부틸(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)카르바메이트 88mg(수율: 35％)을 담황색 고체로서 얻었다.

시험예

본 발명에 따른 화합물을, 이하의 시험법을 사용하여 평가했다:

시험예 1 각종 EGFR 키나아제 활성 저해 작용( in vitro )의 측정

1) EGFR(T790M/L858R) 키나아제 저해 활성 측정

화합물 I-1, I-2, I-3, I-4, I-5, I-6, I-7, I-8 및 I-9의 EGFR(T790M/L858R) 키나아제 활성에 대한 저해 활성을 측정하였다.

그 재료는, 기질 펩티드로서, 캘리퍼 라이프 사이엔스사의 LabChip(등록 상표) 시리즈 시약 FL-Peptide 22를 참고로 기재한 아미노산을 비오틴화한 것(biotin-EEPLYWSFPAKKK)을 합성하고, EGFR(T790M/L858R)로서, 카르나 바이오사이엔스사의 정제 리콤비넌트 인간 EGFR(T790M/L858R) 단백질을 구입하였다.

그 측정 방법은, 화합물 I-1, I-2, I-3, I-4, I-5, I-6, I-7, I-8 및 I-9를 각각 디메틸술폭시드(DMSO)로 단계 희석하였다. 이어서, 키나아제 반응용 완충액(카르나 바이오사이엔스 가부시끼가이샤) 중에, EGFR(T790M/L858R) 단백질, 기질 펩티드(최종 농도는 250nM), 염화마그네슘(최종 농도는 10mM), 염화망간(최종 농도는 10mM), ATP(최종 농도는 1μM)와 각각의 화합물의 DMSO 용액(DMSO의 최종 농도는 2.5％)을 첨가하고, 25℃에서 120분간 인큐베이션하여 키나아제 반응을 행하였다. 거기에, 최종 농도 24mM이 되도록 EDTA를 가함으로써 반응을 정지시켜, 유로퓸(Eu) 라벨화 항인산화 티로신 항체 PT66(PerkinElmer)과 SureLight APC-SA(PerkinElmer)를 포함하는 검출액을 첨가하여, 실온에서 2시간 이상 정치하였다. 마지막으로, PHERAstar FS(BMG LABTECH)로 파장 337nm의 여기광 조사 시에서의 형광량을 620nm와 665nm의 2 파장에서 측정하였다. 2 파장의 형광량비로부터 인산화 반응량을 구하여, 인산화 반응을 50％ 억제할 수 있는 화합물 농도인 IC50값(nM)을 얻었다.

2) EGFR(d746-750/T790M) 키나아제 저해 활성 측정

화합물 I-1, I-2, I-3, I-4, I-5, I-6, I-7, I-8 및 I-9의 EGFR(d746-750/T790M) 키나아제 활성에 대한 저해 활성을 측정하였다.

그 재료는, EGFR(d746-750/T790M)로서, 카르나 바이오사이엔스 가부시끼가이샤의 정제 리콤비넌트 인간 EGFR(d746-750/T790M) 단백질을 구입하였다. ATP의 최종 농도는 1.5μM로 하였다. 그 밖에는 EGFR(T790M/L858R) 키나아제 저해 활성 측정과 마찬가지의 재료, 측정 방법에 의해 IC50값(nM)을 얻었다.

3) EGFR(L858R) 키나아제 저해 활성 측정

화합물 I-1, I-2, I-3, I-4, I-5, I-6, I-7, I-8 및 I-9의 EGFR(L858R) 키나아제 활성에 대한 저해 활성을 측정하였다.

그 재료는, EGFR(L858R)로서, 카르나 바이오사이엔스 가부시끼가이샤의 정제 리콤비넌트 인간 EGFR(L858R) 단백질을 구입하였다. ATP의 최종 농도는 4μM로 하였다. 그 밖에는 EGFR(T790M/L858R) 키나아제 저해 활성 측정과 마찬가지의 재료, 측정 방법에 의해 IC50값(nM)을 얻었다.

4) EGFR(d746-750) 키나아제 저해 활성 측정

화합물 I-1, I-2, I-3, I-4, I-5, I-6, I-7, I-8 및 I-9의 EGFR(d746-750) 키나아제 활성에 대한 저해 활성을 측정하였다.

그 재료는, EGFR(d746-750)로서, 카르나 바이오사이엔스 가부시끼가이샤의 정제 리콤비넌트 인간 EGFR(d746-750) 단백질을 구입하였다. ATP의 최종 농도는 5μM로 하였다. 키나아제 반응의 인큐베이션은 90분간으로 하였다. 그 밖에는 EGFR(T790M/L858R) 키나아제 저해 활성 측정과 마찬가지의 재료, 측정 방법에 의해 IC50값(nM)을 얻었다.

5) EGFR(WT)

화합물 I-1, I-2, I-3, I-4, I-5, I-6, I-7, I-8 및 I-9의 EGFR(WT) 키나아제 활성에 대한 저해 활성을 측정하였다.

그 재료는, EGFR(WT)로서, N 말단에 FLAG 태그를 융합시킨 인간 EGFR(WT)의 세포질내 도메인을 바큘로 바이러스 발현계에 의해 곤충 세포 Sf9로 발현시키고, 항FLAG 항체 아가로오스(시그마·알드리치사)를 사용하여 정제한 것을 이용하였다. 기질 펩티드의 최종 농도는 500nM, ATP의 최종 농도는 4.7μM로 하였다. 그 밖에는 EGFR(T790M/L858R) 키나아제 저해 활성 측정과 마찬가지의 재료, 측정 방법에 의해 IC50값(nM)을 얻었다.

이 결과를 표 1에 나타내었다.

화합물 I-1, I-2, I-3, I-4, I-5, I-6, I-7, I-8 및 I-9는, EGFR(L858R), EGFR(d746-750)뿐만 아니라, EGFR(T790M/L858R), EGFR(d746-750/T790M)에 대해서도 강력한 저해 활성을 갖는 것으로 확인되었다. 또한, 이들과 비교하여, EGFR(WT)에 대해서는 저해 활성이 약한 것으로 확인되었다.

한편, 본 발명에 따른 화합물과 유사한 구조를 갖는 화합물인 N-(3-(4-아미노-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-5-일)페닐)벤즈아미드(특허문헌 1)는, 각종 EGFR 키나아제에 대한 저해 활성을 거의 갖고 있지 않은 것으로 확인되었다.

시험예 2 야생형 및 변이형 EGFR 발현 세포주에 대한 증식 억제 활성 측정 시험( in vitro )

1) EGFR(T790M/L858R)을 발현하고 있는 폐선암세포주인 NCI-H1975 세포, 2) EGFR(d746-750)을 발현하고 있는 폐선암세포주인 HCC827 세포, 3) EGFR(WT)을 발현하고 있는 인간류 상피암세포주인 A431 세포를, 각각 ATCC에 의해 권장되어 있는 배지 중에 현탁시켰다. 세포 현탁액을, 384웰 평저 마이크로 플레이트 또는 96웰 평저 플레이트의 각 웰에 파종하여, 5％ 탄산 가스 함유의 배양기 중 37℃에서 1일 배양하였다. 본 발명 화합물 및 비교 화합물을 DMSO에 용해하고, DMSO를 사용하여 피검 화합물을 최종 농도의 200배의 농도가 되도록 희석하였다. 피검 화합물의 DMSO 용액을 각 세포의 현탁에 사용한 배지에서 희석하고, 이것을 세포의 배양 플레이트의 각 웰에 DMSO의 최종 농도가 0.5％가 되도록 가하여, 5％ 탄산 가스 함유의 배양기 중 37℃에서 3일 배양하였다. 배양 개시 시 및 배양 후의 세포수의 계측은 셀타이터글로(프로메가사 제조)를 사용하여, 프로메가사가 권장하는 프로토콜에 기초해서 행하였다. 이하의 식으로부터 증식 저해율을 산출하고, 50％ 저해하는 피검 화합물의 농도(GI50(nM))를 구하였다.

증식 저해율(％)=(C-T)/(C-C0)×100

T: 피검 화합물을 첨가한 웰의 발광 강도

C: 피검 화합물을 첨가하지 않은 웰의 발광 강도

C0: 피검 화합물 첨가 전에 측정한 웰의 발광 강도

이 결과를 표 2에 나타내었다.

화합물 I-2 및 I-3은, EGFR(d746-750) 발현 세포뿐만 아니라, EGFR(T790M/L858R) 발현 세포에 대해서도, 강력한 증식 억제 효과를 갖는 것으로 확인되었다. 또한, 이들과 비교하여, EGFR(WT) 발현 세포에 대해서는, 증식 억제 효과가 약한 것으로 확인되었다.

Claims

하기 화학식 (I)로 표시되는 화합물 또는 그의 염.

(화학식 중, m은, 1 내지 2이고;
n은, 1 내지 2이고;
R₁은, 수소 원자 또는 C₁-C₄ 알킬기이며; 또한
R₂, R₃ 및 R₄는, 동일 또는 상이하며, 수소 원자, 할로겐 원자, C₁-C₄ 알킬기, 또는 화학식 (a):

(화학식 중, R₅ 및 R₆은, 동일 또는 상이하며, 수소 원자 또는 C₁-C₄ 알킬기를 나타내거나, 또는 R₅ 및 R₆은, 이들이 결합하는 질소 원자와 함께 4 내지 6원환의 헤테로시클로알킬기를 형성해도 됨)
로 표시되는 기임)
제1항에 있어서,
m은, 1 내지 2이고;
n은, 1 내지 2이고;
R₁은, 수소 원자 또는 C₁-C₄ 알킬기이며; 또한
R₂, R₃ 및 R₄는, 동일 또는 상이하며, 수소 원자, 할로겐 원자, C₁-C₄ 알킬기, 또는 화학식 (a):

(화학식 중, R₅ 및 R₆은, 동일 또는 상이하고, C₁-C₄ 알킬기를 나타냄)
로 표시되는 기인 화합물 또는 그의 염.
제1항 또는 제2항에 있어서,
m은, 1 내지 2이고;
n은, 1 내지 2이고;
R₁은, 수소 원자 또는 메틸기이고; 또한
R₂, R₃ 및 R₄는, 동일 또는 상이하며, 수소 원자, 염소 원자 또는 디메틸아미노메틸기인 화합물 또는 그의 염.
제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, m과 n이, (m,n)=(1,1), (1,2) 또는 (2,1)인 화합물 또는 그의 염.
제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서, 화합물이, 이하의 화합물 군에서 선택되는 것인 화합물 또는 그의 염.
(R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드
(S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)아크릴아미드
N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)-N-메틸아크릴아미드
(E)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)-4-(디메틸아미노)-2-부텐아미드
(S,E)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)-3-클로로아크릴아미드
(S,Z)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-6,7,8,9-테트라히드로피리미도[5,4-b]인돌리진-8-일)-3-클로로아크릴아미드
(S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-8-일)아크릴아미드
(S)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-9-일)아크릴아미드
(R)-N-(4-아미노-5-(퀴놀린-3-일)-7,8,9,10-테트라히드로-6H-피리미도[5',4':4,5]피롤로[1,2-a]아제핀-9-일)아크릴아미드.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염을 유효 성분으로 하는 EGFR 저해제.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염을 함유하는 의약 조성물.
제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염을 유효 성분으로 하는 항종양제.
포유 동물에 대하여 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염의 암에 대한 예방 또는 치료 유효량을 투여하는 공정을 포함하는, 암의 예방 또는 치료 방법.
항종양제를 제조하기 위한 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염의 용도.
암의 예방 또는 치료에 사용하기 위한 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 기재된 화합물 또는 그의 염.